FR3076912A1

FR3076912A1 - MICROSCOPE LIGHTING DEVICE FOR PERFORMING THE IMAGE FOCUS OF AN OBJECT

Info

Publication number: FR3076912A1
Application number: FR1870036A
Authority: FR
Inventors: Francois Perraut
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2018-01-16
Filing date: 2018-01-16
Publication date: 2019-07-19

Abstract

Dispositif d'éclairage d'un objet observé au microscope permettant d'effectuer la mise au point qui comprend un système d'illumination d'un objet (100) placé sur un support (101), un objectif de microscope (102) apte à former une image réelle de l'objet et d'un dispositif d'observation (112) caractérisé en ce que le système d'illumination est composé de deux sources lumineuses discrètes (1051 et 1052) allumées simultanément, les deux sources lumineuses sont placées avant l'objet de telle manière que l'objectif forme deux images de l'objet quand la mise au point n'est pas assurée et que ces deux images coïncident pour n'en former qu'une seule lorsque la mise au point est assurée.A device for illuminating an object observed under a microscope for focusing which comprises an illumination system of an object (100) placed on a support (101), a microscope objective (102) suitable for forming a real image of the object and an observation device (112) characterized in that the illumination system is composed of two discrete light sources (1051 and 1052) lit simultaneously, the two light sources are placed before the object in such a way that the objective forms two images of the object when the focus is not assured and that these two images coincide to form only one when the focus is ensured.

Description

La présente invention concerne un dispositif d'éclairage permettant d'effectuer la mise au point visuelle d'une image fournie par un microscope par la mise en coïncidence de deux images de l'objet observé. A ce titre, le dispositif d'éclairage dédouble l'image de l'objet quand la mise au point n'est pas assurée et l'écart entre les images dédoublées est d'autant plus grand que le défaut de focus est important. La mise au point est réalisée quand les deux images de l'objet sont superposées.The present invention relates to a lighting device for effecting the visual focusing of an image supplied by a microscope by the coincidence of two images of the object observed. As such, the lighting device splits the image of the object when the focus is not assured and the difference between the split images is all the greater the greater the lack of focus. The focus is achieved when the two images of the object are superimposed.

DESCRIPTION DU PROBLEMEDESCRIPTION OF THE PROBLEM

La mise au point visuelle de l'image d'un objet fournie par un microscope est une opération délicate et très subjective qui est variable d'un opérateur à l'autre. L'imprécision et la non reproductibilité qui découlent du caractère subjectif de la notion de netteté affectent les résultats de l'exploitation des images, que cette exploitation soit faite visuellement ou après enregistrement d'images numériques.The visual development of the image of an object provided by a microscope is a delicate and very subjective operation which is variable from one operator to another. The imprecision and non-reproducibility that result from the subjective nature of the concept of sharpness affect the results of the processing of images, whether this processing is done visually or after recording digital images.

DEFINITIONSDEFINITIONS

Observation visuelle directe : l'observation au travers des oculaires du microscope par l'observateur.Direct visual observation: observation through the microscope eyepieces by the observer.

Observation visuelle indirecte : l'observation sur un écran de l'image fournie par une caméra après numérisation de l'image.Indirect visual observation: the observation on a screen of the image provided by a camera after scanning the image.

Focus : synonyme de « mise au point ». « Image au focus » : image nette. « Faire le focus » : faire la mise au point.Focus: synonymous with "development". "Focus image": sharp image. "Focus": focus.

Focalisation : action de mise au point, c'est-à-dire de modifier la position relative de l'objet par rapport au microscope afin d'obtenir une image nette.Focus: focusing action, that is to say, changing the relative position of the object relative to the microscope in order to obtain a clear image.

Défaut de focus : position relative de l'objet dans le repère du microscope conduisant à une image floue.Faulty focus: relative position of the object in the microscope frame leading to a blurred image.

Position de focus : position relative de l'objet par rapport au microscope pour laquelle on obtient une image nette.Focus position: relative position of the object with respect to the microscope for which a clear image is obtained.

ETAT DE LA TECHNIQUE ANTERIEURESTATE OF THE PRIOR ART

Des dispositifs de mesure d'un défaut de focus existent dans la technique antérieure et sont principalement utilisés pour réaliser la focalisation automatique des images pour l'enregistrement numérique. Ces dispositifs imposent l'utilisation de capteurs pour effectuer une mesure du défaut de focus. Généralement, une caméra enregistre une image et l'analyse de cette image permet de connaître le défaut de focus. Tous ces dispositifs permettent de fournir une image nette dans le plan focal du capteur mais ne permettent pas de fournir une image nette à l'opérateur en observation visuelle directe : premièrement, l'image pour le capteur est distincte de celle de l'observateur ; deuxièmement, l'observateur regarde l'image au travers d'un ou de deux oculaires qui possèdent un réglage de la netteté indépendant de celle du microscope ; troisièmement, l'observateur peut être affecté de défauts oculaires (myopie, presbytie, hypermétropie) qui par ailleurs varient d'un observateur à l'autre et quatrièmement, l'œil de l'observateur peut accommoder et donc modifier la mise au point.Devices for measuring a focus defect exist in the prior art and are mainly used to achieve automatic focusing of images for digital recording. These devices require the use of sensors to measure the focus defect. Generally, a camera records an image and the analysis of this image makes it possible to know the defect of focus. All these devices make it possible to provide a clear image in the focal plane of the sensor but do not make it possible to provide a clear image to the operator in direct visual observation: first, the image for the sensor is distinct from that of the observer; secondly, the observer looks at the image through one or two eyepieces which have an adjustment of sharpness independent of that of the microscope; thirdly, the observer can be affected by ocular defects (myopia, presbyopia, farsightedness) which moreover vary from one observer to another and fourthly, the eye of the observer can accommodate and therefore modify the focusing.

La mise au point par coïncidence est connue de l'art antérieur et permet d'obtenir une focalisation très précise sur un critère non basé sur la notion subjective de netteté. Cette technique a été longtemps utilisée en photographie et mise en œuvre avec le système du stigmomètre qui consiste à placer un système optique entre l'objet et l'image. On pourra consulter par exemple le brevet FR982966 intitulé « Perfectionnement aux appareils photographiques ».Coincidental focusing is known from the prior art and makes it possible to obtain a very precise focusing on a criterion not based on the subjective notion of sharpness. This technique has long been used in photography and implemented with the stigmometer system which consists of placing an optical system between the object and the image. We can consult for example the patent FR982966 entitled "Improvement to photographic cameras".

Une autre méthode connue de l'art antérieur repose sur la projection d'un motif à la surface de l'échantillon, comme décrit dans le document US4406526. Selon ce document, un motif de ligne est tout d'abord décomposé par un système optique afin d'obtenir la recomposition du motif quand la mise au point est effectuée. Ce dispositif ne fonctionne qu'en réflexion. Il impose une surface d'échantillon assez réfléchissante pour fournir une image en réflexion du motif projeté. De surcroît, cette méthode impose d'ajuster parfaitement la position de recomposition du motif et la position de mise au point de l'image de l'objet. Enfin, le dispositif optique permettant la projection du motif doit être retiré après la mise au point pour observer l'objet.Another known method of the prior art is based on the projection of a pattern on the surface of the sample, as described in the document US4406526. According to this document, a line pattern is firstly decomposed by an optical system in order to obtain the recomposition of the pattern when the focusing is carried out. This device works only in reflection. It imposes a sufficiently reflective sample surface to provide a reflective image of the projected pattern. In addition, this method requires perfect adjustment of the recomposition position of the pattern and the focus position of the image of the object. Finally, the optical device allowing the projection of the pattern must be removed after focusing to observe the object.

Un autre dispositif de mise au point par coïncidence d'images pour la microscopie est décrit dans le document Liao et al., Single-Frame Rapid Autofocusing for Brightfield and Fluorescence Whole Slide Imaging., Biomédical Optics Express 7, no. 11 (November 1, 2016): 4763. Dans le dispositif décrit, deux diodes électroluminescentes sont disposées dans la pupille du condenseur d'éclairage du microscope. La position de ces deux diodes électroluminescentes permet, lorsqu'elles sont éclairées, de fournir dans le plan image du microscope, deux images décalées et l'amplitude du décalage dépend de la valeur du défaut de focus. La mesure du défaut de focus découle de l'analyse de l'image numérique enregistrée par une caméra. Pour ce dispositif, il est nécessaire de modifier le condenseur d'éclairage et la présence des deux diodes électroluminescentes dans la pupille du condenseur d'éclairage obturent partiellement le faisceau d'illumination, créant des phénomènes modifiant l'image observée. Par ailleurs, ce dispositif est décrit pour effectuer la mise au point automatique pour une caméra numérique et non pour une mise au point visuelle.Another device for coincident focusing of images for microscopy is described in the document Liao et al., Single-Frame Rapid Autofocusing for Brightfield and Fluorescence Whole Slide Imaging., Biomedical Optics Express 7, no. 11 (November 1, 2016): 4763. In the device described, two light-emitting diodes are arranged in the pupil of the lighting condenser of the microscope. The position of these two light-emitting diodes makes it possible, when they are lit, to provide in the image plane of the microscope, two offset images and the amplitude of the offset depends on the value of the focus defect. The measurement of the focus defect results from the analysis of the digital image recorded by a camera. For this device, it is necessary to modify the lighting condenser and the presence of the two light-emitting diodes in the pupil of the lighting condenser partially blocks the illumination beam, creating phenomena modifying the image observed. Furthermore, this device is described for performing automatic focusing for a digital camera and not for visual focusing.

L'invention décrite dans le présent document permet de fournir un moyen de réaliser la mise au point visuelle par coïncidence de deux images. Cette invention ne nécessite pas de placer de composant optique entre l'objet et l'image ni de modifier l'optique du condenseur d'éclairage. Dans un mode avantageux, le procédé décrit est mis en œuvre dans un système d'éclairage sans composant optique.The invention described in this document makes it possible to provide a means of achieving visual focusing by coincidence of two images. This invention does not require placing an optical component between the object and the image or modifying the optics of the lighting condenser. In an advantageous mode, the method described is implemented in a lighting system without an optical component.

A cet effet, l'invention concerne un dispositif d'éclairage d'un objet qui permet de former deux images de l'objet observé quand la mise au point n'est pas assurée et une seule image de cet objet quand la mise au point est réalisée. Le dédoublement de l'image de l'objet est assuré par l'éclairage de l'objet au moyen de deux sources de lumière placées avant l'objet et l'éclairant simultanément.To this end, the invention relates to a device for lighting an object which makes it possible to form two images of the object observed when the focusing is not ensured and a single image of this object when the focusing is carried out. The image of the object is duplicated by lighting the object by means of two light sources placed before the object and simultaneously illuminating it.

EXPOSE DE L'INVENTIONSTATEMENT OF THE INVENTION

Dans différents modes de réalisation, la présente invention concerne également les caractéristiques suivantes qui devront être considérées isolément ou selon toutes leurs combinaisons techniquement possibles :In different embodiments, the present invention also relates to the following characteristics which should be considered in isolation or in all their technically possible combinations:

le dispositif d'éclairage sera constitué de plusieurs sources discrètes disposées selon une structure d'anneau, le dispositif d'éclairage sera constitué de plusieurs sources discrètes disposées selon une structure de plusieurs anneaux concentriques, le dispositif d'éclairage sera constitué de plusieurs sources discrètes disposées selon une grille ou une matrice, les sources du dispositif d'éclairage ne sont pas diamétralement opposée par rapport à l'axe optique du microscope, le dispositif d'éclairage sera fixé sur le dispositif d'illumination conventionnel du microscope.the lighting device will consist of several discrete sources arranged in a ring structure, the lighting device will consist of several discrete sources arranged in a structure of several concentric rings, the lighting device will consist of several discrete sources arranged in a grid or a matrix, the sources of the lighting device are not diametrically opposite with respect to the optical axis of the microscope, the lighting device will be fixed to the conventional illumination device of the microscope.

L'invention concerne également un microscope. Selon l'invention, ledit microscope comprend un dispositif d'éclairement tel que défini précédemment ainsi que :The invention also relates to a microscope. According to the invention, said microscope comprises an illumination device as defined above as well as:

des moyens mécaniques de positionner le dispositif d'éclairement dans les trois directions de l'espace, d'un moyen électronique de contrôler les sources discrètes du dispositif d'éclairement,mechanical means for positioning the lighting device in the three directions of space, electronic means for controlling the discrete sources of the lighting device,

Dans différents modes de réalisations possibles, l'invention sera décrite plus en détail en référence aux dessins annexés dans lesquels :In different possible embodiments, the invention will be described in more detail with reference to the accompanying drawings in which:

la figure 1 représente schématiquement le principe du dispositif d'éclairement, la figure 2A représente le dispositif d'éclairement dans un premier mode de réalisation de la présente invention, les figures 2B et 2C représentent deux configurations particulières de l'invention dans le premier mode de réalisation, la figure 3A représente le dispositif d'éclairement dans un deuxième mode de réalisation de la présente invention, les figures 3B et 3C représentent deux configurations particulières de l'invention dans le deuxième mode de réalisation, la figure 4A représente le dispositif d'éclairement dans un troisième mode de réalisation de la présente invention, la figure 4B représente une configuration particulière de l'invention dans le troisième mode de réalisation, la figure 5A représente des images expérimentales obtenues avec le premier ou le deuxième mode de réalisation, la figure 5B représente des images expérimentales obtenues avec le troisième mode de réalisation.FIG. 1 schematically represents the principle of the lighting device, FIG. 2A represents the lighting device in a first embodiment of the present invention, FIGS. 2B and 2C represent two particular configurations of the invention in the first mode of embodiment, FIG. 3A represents the lighting device in a second embodiment of the present invention, FIGS. 3B and 3C represent two particular configurations of the invention in the second embodiment, FIG. 4A represents the device of in a third embodiment of the present invention, FIG. 4B represents a particular configuration of the invention in the third embodiment, FIG. 5A represents experimental images obtained with the first or the second embodiment, the FIG. 5B represents experimental images obtained with the third mo of achievement.

La figure 1 donne une description de l'invention. Un objet 100 est placé sur un support transparent 101 comme par exemple une lame de microscope. Un objectif de microscope 102 permet de former une image réelle de l'objet, agrandie ou non et un système d'observation 112 permet d'observer cette image. Le système d'observation peut être composé d'un oculaire 103 qui permet de fournir une image pour l'œil 104 d'un observateur pour une observation visuelle directe, ou d'une caméra permettant de former l'image sur un écran pour une observation visuelle indirecte. Deux sources 105i et 1052 sont placées sous l'objet sur un support mécanique 106. Ces sources peuvent être choisies parmi les diodes électroluminescentes, les sources à filament de petites tailles, les diodes lasers, les diodes lasers à cavité verticale. Ces sources peuvent également être créées en plaçant un écran opaque percé placé devant une source étendue. L'axe 110 correspond à l'axe optique.Figure 1 gives a description of the invention. An object 100 is placed on a transparent support 101 such as for example a microscope slide. A microscope objective 102 makes it possible to form a real image of the object, enlarged or not and an observation system 112 makes it possible to observe this image. The observation system can be composed of an eyepiece 103 which makes it possible to provide an image for the eye 104 of an observer for direct visual observation, or of a camera making it possible to form the image on a screen for a indirect visual observation. Two sources 105i and 1052 are placed under the object on a mechanical support 106. These sources can be chosen from light-emitting diodes, small filament sources, laser diodes, laser diodes with vertical cavities. These sources can also be created by placing an opaque pierced screen placed in front of an extended source. The axis 110 corresponds to the optical axis.

Une première réalisation possible est décrite par la Fig. 2. Dans cet exemple, le support 106 comportant les sources 105i et 1052 est tel qu'il se place sur un diamètre externe du support 107 de l'optique du condenseur du microscope. La Fig. 2A représente une vue de côté avec le support 106 en coupe. La Fig. 2B représente la vue de dessus. Dans cette réalisation, le condenseur du microscope n'est pas modifié et le faisceau d'éclairement de l'objet sortant du condenseur n'est pas altéré par les sources 105i et 1052. Dans un premier mode avantageux selon ce premier mode de réalisation, les deux sources de lumière 105i et 1052 sont disposées sur le support 106 de telle sorte que les axes parralèles à un plan orthogonal à l'axe optique 110 et passant par le centre des sources et l'axe optique font un angle A différent de 180°, comme représenté en Fig. 2B. Préférentiellement, l'angle A sera choisi entre +90’ et +180’ en excluant 180’ et entre +180’ et +270’ en excluant +180°. Ce mode avantageux permet d'obtenir un dédoublement de l'image pour toutes les orientations des structures de l'objet. Dans un deuxième mode avantageux selon ce premier mode de réalisation, on place plusieurs sources sur le support 106 comme représenté en Fig. 2.C. Ce mode permet de choisir la direction de dédoublement de l'image en sélectionnant le couple de sources allumées.A first possible embodiment is described in FIG. 2. In this example, the support 106 comprising the sources 105i and 1052 is such that it is placed on an external diameter of the support 107 of the optics of the condenser of the microscope. Fig. 2A shows a side view with the support 106 in section. Fig. 2B shows the top view. In this embodiment, the condenser of the microscope is not modified and the beam of illumination of the object leaving the condenser is not altered by the sources 105i and 1052. In a first advantageous mode according to this first embodiment, the two light sources 105i and 1052 are arranged on the support 106 so that the axes parallel to a plane orthogonal to the optical axis 110 and passing through the center of the sources and the optical axis make an angle A different from 180 °, as shown in Fig. 2B. Preferably, the angle A will be chosen between +90 ’and +180’ excluding 180 ’and between +180’ and +270 ’excluding + 180 °. This advantageous mode makes it possible to obtain a duplication of the image for all the orientations of the structures of the object. In a second advantageous embodiment according to this first embodiment, several sources are placed on the support 106 as shown in FIG. 2.C. This mode allows you to choose the image splitting direction by selecting the pair of lit sources.

Dans un deuxième mode de réalisation représenté en Fig. 3, le support 106 se fixe en lieu et place du condenseur. Ce mode de réalisation peut être choisi quand aucun condenseur n'est utilisé, par exemple, quand une observation en épi-illumination est utilisée, comme l'épi-fluorescence. Dans la Fig. 3, on a représenté un support 106 muni, par exemple, d'une queue d'aronde mâle pouvant se fixer sur la queue d'aronde femelle, non représentée, présente sur les microscopes pour supporter l'optique du condenseur. La Fig. 3A représente une vue de côté avec le support 106 qui supporte les sources 105i et 1052 et la queue d'aronde mâle 108. La Fig. 3B représente la vue de dessus. Dans un premier mode avantageux selon ce deuxième mode de réalisation, les deux sources de lumière 105i et 1052 sont disposées sur le support 106 de telle sorte que les axes parallèles à un plan a taxe upc(_Mue il Ο et passant par le centre des sources et l'axe optique font un angle A différent deIn a second embodiment shown in FIG. 3, the support 106 is fixed in place of the condenser. This embodiment can be chosen when no condenser is used, for example, when observation in epi-illumination is used, such as epi-fluorescence. In Fig. 3, there is shown a support 106 provided, for example, with a male dovetail which can be fixed on the female dovetail, not shown, present on the microscopes to support the optics of the condenser. Fig. 3A shows a side view with the support 106 which supports the sources 105i and 1052 and the male dovetail 108. FIG. 3B shows the top view. In a first advantageous embodiment according to this second embodiment, the two light sources 105i and 1052 are arranged on the support 106 so that the axes parallel to a plane with a tax upc ( _M ue il Ο and passing through the center of the sources and the optical axis make an angle A different from

180°, comme représenté en Fig. 3B. Préférentiellement, l'angle A sera choisi entre +90° et +180° en excluant 180° et entre +180° et +270° en excluant +180°. Ce mode avantageux permet d'obtenir un dédoublement de l'image pour toutes les orientations des structures de l'objet. Dans un deuxième mode avantageux selon ce deuxième mode de réalisation, on place plusieurs sources sur le support 106 comme représenté en Fig. 3C. Ce mode permet de choisir la direction de dédoublement de l'image en sélectionnant le couple de sources allumées.180 °, as shown in Fig. 3B. Preferably, the angle A will be chosen between + 90 ° and + 180 ° excluding 180 ° and between + 180 ° and + 270 ° excluding + 180 °. This advantageous mode makes it possible to obtain a duplication of the image for all the orientations of the structures of the object. In a second advantageous embodiment according to this second embodiment, several sources are placed on the support 106 as shown in FIG. 3C. This mode allows you to choose the image splitting direction by selecting the pair of lit sources.

Dans un troisième mode de réalisation représenté en Fig. 4, on dispose sur le support 106 plusieurs sources selon plusieurs anneaux concentriques. En Fig. 4A, on a représenté trois anneaux 108i, IO82 et IO83 sur lesquels on dispose six sources, 105i et 1052 sur l'anneau IO81, 1053 et 1054 sur l'anneau IO82 et 105s et 105e sur l'anneau IO83. Pour dédoubler l'image, on choisira d'allumer les sources par paire, par exemple 105i et 1052,1053 et 1054 ou 1055 et 105β. On pourra aussi associer les sources de toutes les manières possibles, par exemple 105i et 1054, 105i et 1053. Le choix de la paire de sources allumées permet de régler la précision de mesure du défaut de mise au point en modifiant l'amplitude du dédoublement : pour un même défaut de focus, l'amplitude est plus grande pour les sources placées le plus loin du centre des anneaux. L'avantage de cette configuration est qu'elle permet d'augmenter le domaine de mise au point : pour un fort défaut de focus, on allume les sources de l'anneau ayant le plus petit diamètre. Pour un faible défaut de focus, on allume les sources de l'anneau ayant le plus grand diamètre. La précision de la mesure du défaut de mise au point peut être ajustée en modifiant la distance à l'objet 100 du support 106. Dans un premier mode avantageux selon ce troisième mode de réalisation, les sources de lumière 105 sont disposées sur le support 106 de telle sorte que les axes parralèles à un plan orthogonal à l'axe optique 110 et passant par le centre des sources et l'axe optique font un angle A différent de 180°, comme représenté en Fig. 4A. Préférentiellement, l'angle A sera choisi entre +90° et +180° en excluant 180° et entre +180° et +270° en excluant +180°. Ce mode avantageux permet d'obtenir un dédoublement de l'image pour toutes les orientations des structures de l'objet. Dans un deuxième mode avantageux selon le troisième mode de réalisation, on place plusieurs sources sur chaque anneau du support 106 comme représenté en Fig. 4B. Par soucis de clarté, seules les sources 105i et 1057 sont référencées. Ce mode permet de choisir la direction de dédoublement de l'image en sélectionnant le couple de sources allumées. Une source 111 peut être ajoutée au centre de la structure. Ce mode de réalisation constitue un dispositif complet d'illumination qui se substitue au condenseur d'illumination. Les sources 105 peuvent être réparties de manière circulaire comme représenté en Fig. 4B ou en matrice rectangulaire. Par extension, les sources 105 peuvent être choisies parmi les pixels d'un écran à cristaux liquides, d'un écran à diodes électroluminescentes et d'un écran à diodes électroluminescentes organiques.In a third embodiment shown in FIG. 4, there are on the support 106 several sources according to several concentric rings. In Fig. 4A, three rings 108i, IO82 and IO83 are shown on which there are six sources, 105i and 1052 on the ring IO81, 1053 and 1054 on the ring IO82 and 105s and 105e on the ring IO83. To split the image, you will choose to switch on the sources in pairs, for example 105i and 1052,1053 and 1054 or 1055 and 105β. We can also associate the sources in any possible way, for example 105i and 1054, 105i and 1053. The choice of the pair of lit sources makes it possible to adjust the measurement accuracy of the focusing defect by modifying the amplitude of the doubling : for the same defect of focus, the amplitude is greater for the sources placed farthest from the center of the rings. The advantage of this configuration is that it increases the focusing range: for a strong lack of focus, the sources of the ring with the smallest diameter are turned on. For a weak focus defect, the sources of the ring with the largest diameter are turned on. The precision of the measurement of the focusing defect can be adjusted by modifying the distance to the object 100 from the support 106. In a first advantageous mode according to this third embodiment, the light sources 105 are arranged on the support 106 so that the axes parallel to a plane orthogonal to the optical axis 110 and passing through the center of the sources and the optical axis form an angle A different from 180 °, as shown in FIG. 4A. Preferably, the angle A will be chosen between + 90 ° and + 180 ° excluding 180 ° and between + 180 ° and + 270 ° excluding + 180 °. This advantageous mode makes it possible to obtain a duplication of the image for all the orientations of the structures of the object. In a second advantageous embodiment according to the third embodiment, several sources are placed on each ring of the support 106 as shown in FIG. 4B. For the sake of clarity, only sources 105i and 1057 are referenced. This mode allows you to choose the image splitting direction by selecting the pair of lit sources. A source 111 can be added to the center of the structure. This embodiment constitutes a complete illumination device which replaces the illumination condenser. The sources 105 can be distributed in a circular manner as shown in FIG. 4B or in rectangular matrix. By extension, the sources 105 can be chosen from the pixels of a liquid crystal screen, a screen with light-emitting diodes and a screen with organic light-emitting diodes.

On a représenté en Fig.There is shown in FIG.

5A le dédoublement obtenu en utilisant un dispositif d'après l'invention. Un réticule gradué constitue l'objet 100 et est posé sur le support 101. Une caméra numérique est utilisée pour enregistrer les images représentées selon les repères 5.1 à 5.12. L'image 5.1 correspond au plus grand défaut de focus. L'image 5.12 correspond à l'image nette. Les autres images correspondent à des valeurs différentes de défaut de focus. Pour obtenir ces images, les deux sources allumées sont placées symétriquement par rapport à l'axe optique 110 (l'angle A est égal à 180°).5A the duplication obtained using a device according to the invention. A graduated reticle constitutes the object 100 and is placed on the support 101. A digital camera is used to record the images represented according to the marks 5.1 to 5.12. Image 5.1 corresponds to the greatest lack of focus. Image 5.12 corresponds to the sharp image. The other images correspond to different focus defect values. To obtain these images, the two lit sources are placed symmetrically with respect to the optical axis 110 (the angle A is equal to 180 °).

Claims

1. Device for illuminating an object observed under a microscope for focusing which comprises a system for illuminating an object (100) placed on a support (101), a microscope objective (102) able to form a real image of the object and of an observation device (112) characterized in that:

the illumination system is composed of two discrete light sources (105i and 1052) lit simultaneously, the two light sources are placed before the object in such a way that the lens forms two images of the object when the focus n is not guaranteed and that these two images coincide to form only one when the focusing is assured.

2. Lighting device according to claim 1 characterized in that the light sources are chosen from light-emitting diodes, organic light-emitting diodes, laser diodes, laser diodes with vertical cavity.

3. Lighting device according to claim 1 characterized in that:

the two light sources are not placed symmetrically with respect to the optical axis (110), the angle A between the axes parallel to the object plane passing through the center of the sources and the optical axis is different from 180 °.

4. Lighting device according to claim 1 characterized in that the two light sources are chosen from a plurality of sources.

5. Lighting device according to claims 1 and 4 characterized in that the sources are placed in a plane along one or more concentric rings.

6. Lighting device according to claims 1 and 4 characterized in that the sources are placed in a plane along a grid to form a rectangular matrix pattern.

7. Lighting device according to claims 1, 4 and 6 characterized in that the light sources are chosen from the pixels of a liquid crystal screen, a light emitting diode screen, a screen of organic light emitting diodes .