FR3061016A1 - Utilisation cosmetique d'un extrait de mitracarpus scaber comme agent anti-age - Google Patents

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Abstract

L'invention concerne l'utilisation cosmétique d'un extrait de Mitracarpus scaber comme agent anti-âge et/ou comme agent améliorant la fermeté cutanée. L'invention concerne également l'utilisation cosmétique d'un extrait de Mitracarpus scaber dans une composition cosmétique anti-âge et/ou raffermissante.

Description

@ Titulaire(s) : LABORATOIRES CLARINS.
O Demande(s) d’extension :
® Mandataire(s) : JAMAIN LE BOT SOPHIE.
® UTILISATION COSMETIQUE D'UN EXTRAIT DE MITRACARPUS SCABER COMME AGENT ANTI-AGE.
(57) L'invention concerne l'utilisation cosmétique d'un ex trait de Mitracarpus scaber comme agent anti-âge et/ou comme agent améliorant la fermeté cutanée. L'invention concerne également l'utilisation cosmétique d'un extrait de Mitracarpus scaber dans une composition cosmétique antiâge et/ou raffermissante.
FR 3 061 016 - A1
Figure FR3061016A1_D0001
i
UTILISATION COSMETIQUE D'UN EXTRAIT DE
MITRACARPUS SCABER COMME AGENT ANTI-AGE
L'invention concerne l'utilisation cosmétique d'un extrait de Mitracarpus scaber comme agent anti-âge et plus particulièrement comme agent améliorant la fermeté cutanée.
La peau est l'organe de revêtement du corps humain. De fine épaisseur, elle est très étendue puisqu'elle recouvre toute la surface du corps et totalise chez l'adulte une surface d'environ 1,6 m2 . Elle a pour fonction de protéger les tissus profonds du milieu extérieur, tant au niveau de la pénétration physique de corps étrangers, que de l'immunité, de la régulation de la température ou de la déperdition de fluides. Enfin, les contraintes mécaniques auxquelles elle est soumise en permanence lui imposent, plus que tout autre organe, une structure solide et cohérente associée à une grande souplesse. Malgré quelques différences d'aspect suivant le site anatomique, elle présente toujours la même structure morphologique de base.
Elle est constituée à sa surface de l'épiderme, en profondeur du derme, et plus profondément encore de l'hypoderme.
Le derme, auquel l'épiderme est solidement amarré, est un tissu conjonctif, parcouru par de nombreux vaisseaux sanguins et lymphatiques ainsi que par des nerfs cérébro-spinaux de la vie de relation et de la vie végétative. Il constitue une zone d'implantation des annexes cutanées ainsi qu'un tissu de soutien et de nutrition pour l'épiderme qui n'est pas vascularisé.
Le derme est composé de deux étages, le derme superficiel ou derme papillaire qui correspond au tissu conjonctif des papilles dermiques ; et le derme réticulaire, tissu de soutien dermique, qui représente les quatre cinquièmes de l'épaisseur du derme.
Le derme papillaire tient son nom de sa surface en papilles qui forment des saillies alternant avec des prolongements épidermiques. Il a une structure fibreuse très fine, riche en cellules, en capillaires sanguins, en fibres nerveuses et corpuscules tactiles. Il contient entre autres :
• des fibres réticuliniques qui correspondent à une variété de collagène, • des fibres oxytalanes qui forment un réseau perpendiculaire qui paraît être ancré à la membrane basale ; elles jouent un rôle important dans la résistance mécanique de la peau, • de la fibronectine qui conditionne le vallonnement de la jonction dermo-épidermique et semble jouer un rôle dans l'adhérence des tissus à la jonction derme-épiderme et entre les cellules endothéliales du derme, • des fibroblastes qui sont des cellules responsables de la biosynthèse des macromolécules formant le tissu conjonctif du derme.
Entre les cellules et les fibres se trouve la lymphe interstitielle qui contient entre autres des protéoglycanes, de l'acide hyaluronique, et des mucopolysaccharides.
Le derme réticulaire est plus dense (du fait de la présence de fibres de collagènes) et élastique. Il est plus pauvre en cellules . Il est anastomosé à la partie profonde du derme papillaire et contient également de la fibronectine, des fibres réticuliniques, des fibroblastes, des histiocytes et du liquide intercellulaire.
Le derme réticulaire contient:
• des fibres d'élaunine, intermédiaire entre les fibres oxytalanes et élastiques, • de fines fibres de collagène ; le collagène se compose de 19 acides aminés présents en proportion variable (principalement glycine, arginine et hydroxyproline), • des fibres élastiques minces et sinueuses, constituées d'élastine, protéine fibreuse composée de divers acides aminés (surtout proline et glycine mais aussi cystine, histidine, hydroxyproline, desmosine et isodesmosine) qui leur confère leur élasticité. La synthèse de l'élastine est assurée par les fibroblastes.
Les fibres élastiques et les fibres de collagènes forment la charpente protidique fibreuse du derme.
Les fibres communément appelées « fibres de collagène » en microscopie optique, sont toujours formées d'un assemblage de fibrilles de diamètre régulier (90 nm) , à striation périodique (64 nm) très bien vues en microscopie électronique. Les fibres dites de réticuline en microscopie optique sont aussi constituées de fibrilles présentant une striation périodique à 64 nm mais de plus petit diamètre (< 60 nm). Ces fibrilles à striation périodique sont toujours hétérotypiques, constituées de collagène I, collagène III et collagène V qui globalement représentent respectivement 60 à 80%, 15 à 25% et 2 à 5% de l'ensemble des collagènes du derme; le collagène V contrôle le diamètre des fibrilles. Les collagènes fibrillaires sont associés aux collagènes FACITs, types XIV et XVI (« fibril-associated collagen with interrupted triple helixes »).
La fonction des « fibres de collagène » est de donner au derme son épaisseur et sa résistance aux forces de traction.
Les fibres élastiques de la peau sont composées d'élastine disposées en fibres et en lames discontinues. Il existe trois sortes de fibres élastiques : les fibres d'élaunine (immatures), les fibres élastiques proprement dites (matures selon les proportions d'élastine) et les fibres oxytalanes, associées à des glycoprotéines de structure. Les premières et les secondes apparaissent comme des plages amorphes entourées de microfibrilles alors que les troisièmes sont formées exclusivement de microfibrilles. Les fibres oxytalanes sont situées dans le derme papillaire. Elles forment de fines arborisations perpendiculaires à la jonction dermo-épidermique . Les fibres élastiques matures sont situées au niveau du derme réticulaire, des septa interlobulaires de l'hypoderme, des glandes sébacées et des glandes sudorales ; elles se présentent comme des faisceaux ondulés, parfois anastomosés, situés entre les fibres de collagène.
Les plages amorphes sont constituées d'élastine qui s'accroche sur les microfibrilles constituées entre autres de fibrilline 1 et LTBP-2 (protéine de liaison du TGFp latent) par l'intermédiaire de fibulines. La fonction principale des fibres élastiques est de donner à la peau son élasticité. Un autre rôle des microfibrilles est celui de réservoir de facteurs de croissance à l'état latent, notamment du TGFp.
Les glycoprotéines associées aux microfibrilles (MAGP) sont de petites protéines microfibrillaires. MAGP-1 intervient dans l'assemblage de la microfibrille et durant la formation du noyau d'élastine de la fibre élastique.
Une autre glycoprotéine, l'EMILIN-1 (« Elastin Microfibril Interface-Located proteIN-1 ») est distribuée à l'interface entre l'élastine amorphe et les microfibrilles. EMILIN-1 est associée à la fibrillogenèse des microfibrilles et facilite la coacervation de la tropoélastine.
Les collagènes et les fibres élastiques sont synthétisés dans la période périnatale et dans l'enfance. Au-delà de la phase de croissance, leurs synthèses sont très faibles et leurs vitesses de renouvellement très lentes. La synthèse de ces macromolécules peut être réactivée au niveau des sites de cicatrisation à la suite d'une blessure mécanique ou d'une agression protéolytique. La synthèse des différentes protéines constitutives des fibres élastiques, parfaitement coordonnée dans le temps et dans l'espace lors du développement, est cependant moins efficace lors de ces étapes de réparation tissulaire. La proportion des différents types de collagènes synthétisés peut également être modifiée.
Le derme s'atrophie avec l'âge. Des mesures histologiques ont mis en évidence une diminution de l'épaisseur dermique de 6% par décennie. Ce phénomène d'atrophie dermique est à mettre en relation d'une part avec la diminution de l'hydratation cutanée avec l'âge, et d'autre part avec les importantes modifications de biosynthèse et de catabolisme des macromolécules de la matrice extracellulaire (MEC) qui constituent le derme.
L'analyse histologique de la peau au cours du vieillissement met en évidence une diminution du nombre et de la taille des fibroblastes dermiques. L'analyse ultrastructurale met en évidence une diminution du réticulum endoplasmique intra-cellulaire. Tous ces événements ont pour conséquence une diminution du métabolisme fibroblastique, notamment en ce qui concerne la capacité de ces cellules à synthétiser la MEC. Dans des modèles de culture de fibroblastes, une perte de tension mécanique induit une entrée en apoptose de ces cellules. En conséquence, une diminution de leur nombre est observée au cours du vieillissement. Par ailleurs, les fibroblastes exercent des forces de contraction sur la matrice de collagène, une perte de cette tension induit en retour une diminution de synthèse de procollagène par ces mêmes cellules.
Dans la peau âgée, le fait majeur est la diminution de la synthèse des procollagènes de type I et III, résultant en un amincissement de la peau et en sa fragilité.
Le nombre de fibroblastes ainsi que leur capacité à synthétiser du procollagène de type I sont diminués. Parallèlement à une altération dans la synthèse du collagène, on observe une augmentation de l'activité des métalloprotéases. La quantité de collagène partiellement dégradée par les métalloprotéases est quatre fois plus importante dans la peau âgée que dans la peau jeune : il en résulte une accumulation du collagène fragmenté.
Au cours du vieillissement, d'autres phénomènes interviennent également : l'augmentation des liaisons interchaînes (« cross linking ») ainsi que la glycosylation du collagène qui confère à celui-ci une plus grande résistance à la digestion par les collagénases.
D'une façon générale, au cours du vieillissement, la structure des fibres élastiques est altérée par la présence de dépôts calciques, de lipides ainsi que par une augmentation de leur catabolisme par les élastases.
La synthèse de l'élastine diminue avec l'âge et l'élastine se trouve remplacée par du collagène inextensible. Le vieillissement cutané intrinsèque affecte aussi les microfibrilles.
Les travaux scientifiques publiés décrivant l'EMILIN-l ont surtout mis en évidence son rôle dans 1 ' élastogenèse du système vasculaire. L'EMILIN-l n'a pas fait l'objet d'études sur son niveau d'expression et sur sa localisation au niveau des fibres élastiques du derme.
La demanderesse s'est intéressée à l'expression de l'EMILIN-l au cours du vieillissement en visualisant la protéine sur différents prélèvements cutanés de classes d'âge différentes.
Les résultats de ces études ont permis, pour la première fois, de clairement identifier l'EMILIN-1 dans le réseau élastique du derme. Ils ont montré que le vieillissement, intrinsèque et actinique, a un effet sur le niveau d'expression de l'EMILIN-1. Cette glycoprotéine du réseau élastique subit autant les modifications liées à l'âge que les autres composants du réseau comme l'élastine et la fibrilline-1.
La demanderesse a mis en évidence l'effet d'un extrait de Mitracarpus scaber sur la synthèse de collagène I et d'EMILIN-1 qui permettent de renforcer l'architecture des fibres élastiques et la cohésion des fibres élastiques et du collagène, ce qui a pour conséquence d'améliorer la fermeté cutanée. La perte de fermeté cutanée est au même titre que l'apparition des rides, un des signes majeurs du vieillissement de la peau.
L'invention concerne donc l'utilisation cosmétique d'un extrait de Mitracarpus scaber comme agent anti-âge et plus particulièrement comme agent améliorant la fermeté cutanée.
L'extrait de Mitracarpus scaber peut également être avantageusement utilisé dans une composition cosmétique anti-âge et/ou raffermissante.
L'utilisation selon l'invention est particulièrement adaptée à une application à des peaux saines. Dans le cadre de la présente invention, on désigne par peau saine une peau qui ne présente pas de pathologie cutanée.
Mitracarpus scaber est une petite plante annuelle de la famille des rubiaceae pouvant atteindre 30 cm de hauteur dans des conditions favorables. Ses petites fleurs blanches sont regroupées en glomérules à chaque étage de feuilles et à l'extrémité de la tige. C'est une espèce adventice des cultures, abondante dans toute l'Afrique de l'Ouest. Elle est notamment présente au Sénégal, en
Mauritanie, Algérie (Sud), Mali (Sud), Burkina Faso, Niger,
Nigéria, Tchad, Soudan, Cameroun, Côte d'ivoire, Ghana,
Bénin, Gambie, Guinée.
La décoction des parties aériennes de cette plante est utilisée dans toute l'Afrique de l'Ouest pour le soin des maux de ventres et des diarrhées. Elle est aussi préconisée pour calmer les maux de tête.
Largement utilisée en médecine traditionnelle, c'est surtout pour le soin des plaies, des démangeaisons, des champignons de la peau que la plante est employée sous forme de bain, de compresse ou, le plus souvent, sous la forme de cataplasme de feuilles fraîches broyées, appliqué directement sur la peau.
La décoction des sommités fleuries est également utilisée en Afrique de l'Ouest pour les soins des dermatoses : plaies, brûlures, irritations... Ses propriétés antifongiques sont remarquables et permettent de lutter efficacement contre les mycoses dont candidose et teigne. On l'utilise directement sur les parties affectées en cataplasme ou en compresse.
L'utilisation cosmétique selon la présente invention met préférentiellement en œuvre un extrait de Mitracarpus scaber ou une composition cosmétique comprenant un tel extrait.
L'extrait selon l'invention est un extrait de Mitracarpus scaber, préférentiellement un extrait des parties aériennes. L'extrait de Mitracarpus scaber utilisé dans la présente invention peut être obtenu par séchage de façon appropriée ou broyage des parties aériennes (feuilles, tiges, sommités fleuries) de la plante, suivie par la mise en contact avec un solvant d'extraction. La mise en contact, afin d'optimiser les cinétiques d'extraction, les rendements ou la qualité de l'extrait, peut être effectuée par extraction unique ou multiple, pendant des durées plus ou moins longues, soit par macération statique ou agitée, à température ambiante, et peut être accélérée par chauffage, sous agitation ou chauffage à reflux, assistée par ultrasons, assistée par microondes ou par une combinaison ultrasons/microondes en fonction des besoins. L extrait alors obtenu peut être utilisé directement ou utilisé après un traitement tel que la filtration, la concentration, ou une décoloration sur support solide. En outre, il est possible d'utiliser l'extrait en éliminant le solvant d'extraction, suivie par la re-dissolution dans un solvant différent. Il est également possible d'utiliser l'extrait après une étape de purification sur du charbon actif, des résines macroporeuses ou sur colonne chromâtographique.
Le solvant d'extraction utilisé dans la présente invention peut être tout solvant couramment utilisé dans l'extraction, et par les solvants eutectiques.
Plus précisément, on peut utiliser, seul ou en mélange, un solvant choisi parmi un alcool tel que l'éthanol, le 1,3-butanediol, le propylène glycol, le butylène glycol et le pentylène glycol; un alcool aqueux; un solvant organique tel que l'acétone, l'acétate d'éthyle. Cependant, l'éthanol en mélange aqueux, le 1,3-butanediol, l'acétone, les solvants eutectiques sont préférables.
L'extrait selon l'invention peut préférentiellement être obtenu par deux procédés différents, d'une part une extraction hydro alcoolique donnant un extrait ci-après nommé extrait de Mitracarpus scaber hydro alcoolique. D'autre part une extraction au solvant naturel eutectique appelé en anglais NaDES pour 'NAtural Deep Eutectic Solvents', on obtient alors un extrait ci-après nommé extrait de Mitracarpus scaber NaDES.
ίο
De façon avantageuse, l'extrait de
Mitracarpus scaber hydro alcoolique est un extrait obtenu par extraction à reflux à l'aide d'un mélange hydro alcoolique, de 25-85% eau/ 75-25% EtOH, et de préférence à 60% H2O et 40% éthanol (EtOH).
Il est obtenu selon un procédé comprenant au moins les étapes suivantes :
- séchage et broyage des parties aériennes de la plante
- ajout du solvant hydro-alcoolique H2O/EtOH (60/40, volume/volume) avec un ratio plante sèche / solvant (masse/volume) de 1/7
- Extraction à reflux pendant 4 heures
- Séparation solide-liquide par Filtrations sous vide successives, clarification par filtration sur 2.5pm
- Elimination du solvant d'extraction avec re-dissolution dans la glycérine pour
Stabilisation
- Centrifugation pour clarification finale.
L ' extrait des parties aériennes de
Mitracarpus scaber hydro alcoolique ainsi obtenu est un liquide visqueux de couleur marron foncé. Il présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- Rendement massique (extrait sec/ matière première sèche, m/m)= 12%
- Rendement d'extraction (extrait/plante)= 120-160/30-50 (m/m).
De façon avantageuse, l'extrait de
Mitracarpus scaber NaDES est un extrait obtenu par extraction à l'aide d'un solvant NaDES constitué d'un mélange eutectique de sorbitol, bétaïne et eau. Le solvant est préalablement préparé dans un réacteur à double enveloppe équipé d'un agitateur à hélice, en mélangeant et en chauffant la bétaïne, le sorbitol et l'eau. On utilise en proportion eutectique la bétaïne de 45 à 49%, le sorbitol de 28 à 32% et l'eau de 21 à 25%. Préférentiellement, on utilise le ratio massique 47:30:23 pour la bétaïne-sorbitol-eau. Le liquide obtenu est limpide et incolore. Le ratio massique plante sèche : solvant NaDES est compris entre 5:100 et 20:100 , de préférence 7:93
Selon un mode particulier de l'invention l'extrait est obtenu selon un procédé comprenant au moins les étapes suivantes :
- séchage et broyage des parties aériennes de la plante
- extraction à chaud sous agitation continue à l'aide du solvant NaDES bétaïne-sorbitol-eau de ratio massique 47:30:23
- Séparation solide/liquide par essorage centrifuge
- Clarification par filtration
- Filtration stérilisante (0.22pm)
- Conditionnement (inertage à l'azote).
L'extrait des parties aériennes de
Mitracarpus scaber NaDES ainsi obtenu est un liquide très sombre noir, d'odeur caractéristique de la plante et d'intensité forte. Il présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- pH (dilution au 1/2 v/v dans l'eau) = 4,5
- 7,0
- Densité à 20°C = 1,240 - 1,270
- Indice réfraction +20°C = 1,450 - 1,480
- Teneur en rutine (mg/lOOg) = > 60,0 mg
- Solubilités à +20°C = Eau : très soluble ;
Huiles végétales et Huiles minérales : insoluble
La demanderesse a démontré que l'extrait de Mitracarpus scaber utilisé selon l'invention ainsi que la composition cosmétique le comprenant peuvent être utilisés par application sur la peau comme agent anti-âge et plus particulièrement comme agent améliorant la fermeté cutanée.
En conséquence l'extrait de Mitracarpus scaber ou la composition cosmétique le comprenant selon l'invention peuvent être utilisés pour prévenir, pour retarder, pour lutter contre, pour traiter ou réduire le vieillissement de la peau et/ou l'apparition des signes de vieillissement de la peau.
On entend par signes de vieillissement de la peau : le relâchement cutané, la perte de fermeté cutanée, la perte d'élasticité des fibres cutanées, une peau flétrie, et une peau amincie, et une peau terne et/ou sans éclat.
L'extrait de Mitracarpus scaber peut être utilisé pour réparer les manifestations cutanées du vieillissement et/ou corriger la perte de fermeté et/ou redensifier une peau flétrie ou amincie et/ou redensifier et/ou raffermir et/ou tonifier la peau du visage et/ou du corps.
On entend par utilisation cosmétique l'utilisation d'une composition cosmétique, c'est-à-dire une formulation convenant à une application cutanée, comprenant l'extrait de Mitracarpus scaber ainsi que des excipients cosmétiquement acceptables.
C'est ainsi que les compositions selon l'invention peuvent comprendre un ou plusieurs agents de formulation ou additifs d'usage connu et classique dans les compositions cosmétiques tels que, à titre d'exemples et de façon non limitative, des adoucissants, des colorants, des actifs filmogènes, des tensioactifs, des parfums, des conservateurs, des émulsionnants, des huiles, des glycols, des vitamines comme la vitamine E, des filtres UV, etc. Grâce à ses connaissances en matière de cosmétique, l'homme du métier saura quels agents de formulation ajouter aux compositions de l'invention et en quelles quantités en fonction des propriétés recherchées.
Les compositions selon l'invention peuvent se présenter sous toute forme connue de l'homme du métier dans le domaine de la cosmétologie sans autre restriction galénique que l'application sur le visage et sur le corps. De façon avantageuse, les compositions selon l'invention se présentent sous la forme d'un gel, d'une crème, d' une lotion, d'un masque, selon huile, d'un lait, d'un spray,
De préférence, la etc.
composition cosmétique ’ invention comprend de
0,01 extrait de
Mitracarpus scaber en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition.
Avantageusement, la composition comprend de 0,01 à 5% d'un extrait de Mitracarpus scaber en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition.
La présente invention se rapporte encore à un procédé pour améliorer la fermeté cutanée comprenant l'administration cutanée d'un extrait de Mitracarpus scaber ou d'une composition cosmétique comprenant ledit extrait.
Les exemples ci-après concernent, d'une part 1 'évaluation de l'effet d'un extrait de Mitracarpus scaber sur le collagène I et sure l'EMILIN-1 ; d'autre part les exemples ci-après concernent des compositions objets de la présente invention.
Les exemples font référence aux figures suivantes dans lesquelles :
- Les figures 1 et 2 représentent l'expression relative du Collagène I dans des fibroblastes en culture.
- Les figures 3 et 4 représentent l'expression relative de l'EMILIN-l dans des fibroblastes en culture.
I.EVALUATION DE L'ACTIVITE D'UN EXTRAIT DE MITRACARPUS SCABER LA SYNTHESE DE COLLAGENE ET D'EMILIN 1.
A.MATERIELS ET METHODES
1) culture cellulaire
Les fibroblastes sont ensemencés, sur lames, dans des chambres de culture 8 puits (Millipore Millicell EZ Slide) à raison de 15.000 cellules par puits dans du milieu MEM (« Minimum Essential Medium » - Thermo Fisher) supplémenté de 10% de Sérum de Veau Fœtal (SVF - Dominique Dutscher), de 2 mM de L-Glutamine (Thermo Fisher) et de 100 U/ml de Pénicilline-Streptomycine (P/S - Sigma).
Quatre-vingt-seize heures après, les cellules sont traitées ou non (Contrôle) par le produit à l'étude ou la référence ; en milieu Minimum Essential Medium supplémenté de 2 mM de L_Glutamine et 100 U/mL d'un mélange de pénicilline et streptomycine ; et incubées à l'étuve pendant 72 heures à 37°C, 5% CO2. Deux extraits sont testés en parallèle l'extrait de Mitracarpus scaber hydroalcoolique (60% H2O et 40% EtOH) est testé à 0,1% ;0,01% ; 0,05% ; 0, 005% et 0,001% et l'extrait de Mitracarpus scaber NaDES (bétaïne-sorbitol-eau avec le ratio massique 47:30:23) est testé à 0,1% ; 0,05% et 0,01% selon les conditions. Le témoin positif est traité par de la Vitamine C à 10 pg/mL et du TGF-β à 5 ng/mL.
Chaque tapis cellulaire est ensuite rincé au tampon phosphate (PBS - Sigma) , fixé au méthanol (-20°C) avant de procéder à la révélation du collagène de type I ou de l'EMILIN-l par immunofluorescence.
2) Immuno-localisation
Les cellules sont incubées avec l'anticorps (Ac) primaire dirigé contre la protéine d'intérêt (Ac anti-Collagène I - Sigma C2456 ou Ac anti-EMILIN-1 - Santa Cruz Biotechnology sc-50340) puis avec l'anticorps secondaire dirigé contre l'anticorps primaire couplé à un chromophore de type Alexa (Ac de chèvre anti-souris couplé à un Alexa 488 -Thermo Fisher ou Ac de chèvre anti-lapin couplé à un Alexa 488 - Thermo Fisher). Chaque anticorps est incubé 1 heure à température ambiante. Les noyaux cellulaires sont révélés par une contre-coloration au Di Aminido Phenyl lndol (DAPI -Sigma).
Les lames sont montées avec du milieu de montage (Dako) puis observées au microscope à fluorescence (Zeiss Axiolmager Z2). Vingt champs de la population cellulaire sont pris en photographie par condition. Les images de fluorescence indiquent les régions de localisation de la protéine d'intérêt. Les images de fluorescence DAPI indiquent les noyaux cellulaires et donc le nombre de cellules par champs. Les clichés photographiques sont analysés par le logiciel d'analyse d'image Visilog (FEI).
Les données sont extraites en expression relative (aire) de la protéine d'intérêt rapportée à l'aire des noyaux cellulaires (DAPI). L'étude statistique a été réalisée par le Test de Tuckey, à l'aide du logiciel JMP (SAS) .
A.RESULTATS
1)Collagène de type I
Control Vitamine C (pg/mL) + TGFp (ng/mL) Extrait de Mitracarpus scaber Hydro-Alcoolique
0,01% 0,005% 0,001%
Moyenne 1,26 5,40 2,15 1,64 1,60
Ecart-Type 0,08 0,62 0,19 0,05 0,15
Induction / Control - 330,4 71,4 30,3 27,7
Test statistique - O,uJ b 0,857 0,998
Control Vitamine C (pg/mL) + TGFp (ng/mL) EXTRAIT MITRACARPUS NADES
h 5 ||Î||^J|| Ι1ΙΙ··ΙΙ 0,001%
1,26 5, 40 5,91 6,16 2,97
0,08 0, 44 0,52 0, 44 0,33
0,0 330,4 371,2 390,4 136,5
-
Les résultats sont présentés en figures 1 et 2 .
Après traitement par l'extrait de
Mitracarpus scaber, on observe une augmentation significative de l'expression du collagène de type I, collagène dermique majoritaire dans les fibroblastes humains normaux en culture. Avec l'extrait de Mitracarpus scaber hydro alcoolique, on observe une augmentation de 71% pour une concentration optimale de 0,01 % ; tandis qu'avec l'extrait de Mitracarpus scaber NaDES on observe une augmentation de +390% pour une concentration optimale de 0,005%.
2) EMILIN-1
Control Vitamine C (pg/mL) Extrait de Mitracarpus scaber Hydro-Alcoolique
0,050% 0,010%
2, 02 11,56 3,34 4, 86 3,39
0, 15 1, 43 0, 41 0,55 0,24
0, 0 471,9 65, 4 140,3 67,9
-
Control Vitamine C (pg/mL) EXTRAIT MITRACARPUS NADES
IOBI ΙΙΒΙΙ·1ΙΙΒΙ
0,98 5,28 2,27 2, 14 1, 81
0, 11 0,24 0,24 0, 14 0,12
- 437,5 131,5 118,3 83,9
-
Les résultats sont présentés en figures 3 et 4 .
Après traitement par l'extrait de
Mitracarpus scaber on observe une augmentation significative de l'expression de l'EMILIN-1 dans les fibroblastes humains normaux en culture. Avec l'extrait de Mitracarpus scaber hydro alcoolique, on observe une augmentation de 140% à la concentration de 0, 05%, et de 68% à la concentration de 0, 01% ;
tandis qu'avec l'extrait de Mitracarpus scaber NaDES, on observe une augmentation de 118% à la concentration de 0, 005%, et de 132% à la concentration de 0,01%.
L'extrait de Mitracarpus scaber renforce la structure particulière du derme papillaire, première cible du vieillissement cutané intrinsèque, et restaure ses propriétés biomécaniques.
II.EXEMPLES DE COMPOSITIONS COSMETIQUES
CREME VISAGE ΑΝΤΙ AGE TOUTES PEAUX
O
CARBOMER 0,40
PHENOXYETHANOL 0,40
GLYCERIN 2,0 0
DISODIUM EDTA 0,10
ETHYLHEXYL GLYCERINE 0,20
GLYCERYL STEARATE & PEG-100 STEARATE 2,50
DICAPRYLYL CARBONATE 4,00
CETEARYL ALCOHOL & CETEARYL GLUCOSIDE 3,50
DIMETHICONE 3,0 0
ISONONYL ISONONANOATE 8,00
TOCOPHEROL 0,0 6
CAPRYLYL GLYCOL 0,30
BUTYROSPERMUM PARKII (SHEA) BUTTER 1,00
SODIUM HYDROXIDE 0,08
TAPIOCA STARCH 2,00
SODIUM HYALURONATE 0,10
TOCOPHERYL ACETATE 0,20
PARFUM 0,40
EXTRAIT DE MITRACARPUS SCABER 0,10
EAU DEMINERALISEE........................... Q.S.P100
SERUM VISAGE ANTI-AGE
O
CARBOMER 0,40
CELLULOSE 0,50
PENTYLENE GLYCOL 3,00
DISODIUM EDTA 0,05
GLYCERIN 2,0 0
PHENOXYETHANOL 0,6 0
ETHYLHEXYLGLYCERIN 0,20
SODIUM HYDROXIDE 0,09
PPG-5-CETETH-20 1,20
TOCOPHERYL ACETATE 0,20
METHYL TRIMETHICONE 1,00
SODIUM HYALURONATE 0,10
EXTRAIT DE MITRACARPUS SCABER 0,10
ALCOHOL 4,0 0
PARFUM 0,20
0 EAU DEMINERALISEE........................... Q.S.P100
BAUME CONTOUR YEUX ANTI-AGE o_ o
5 CARBOMER 0,3 0
DISODIUM EDTA 0,10
BUTYLENE GLYCOL 2,00
GLYCERIN 3,0 0
PHENOXYETHANOL 0,36
ETHYLHEXYLGLYCERIN 0,20
SODIUM HYDROXIDE 0,06
CETEARYL ALCOHOL & CETEARYL GLUCOSIDE 3,50
GLYCERYL STEARATE & PEG-100 STEARATE 2,00
STEARETH-21 0,50
HYDROGENATED COCO-GLYCERIDES 2,00
CAPRYLIC/CAPRIC TRIGLYCERIDE 3,00
BUTYROSPERMUM PARKII (SHEA) BUTTER 1,00
TOCOPHEROL & HELIANTHUS ANNUUS (SUNFLOWER)
SEED OIL 0,05
DIMETHICONE & DIMETHICONOL 0,50
SILICA 3,00
TOCOPHERYL ACETATE 0,20
SODIUM DEXTRAN SULFATE 0,10
EXTRAIT DE MITRACARPUS SCABER 0,10
PARFUM 0,10
EAU DEMINERALISEE........................... Q.S.P100

Claims (7)

  1. REVENDICATIONS
    D Utilisation cosmétique d'un extrait de Mitracarpus scaber comme agent anti-âge. 2) Utilisation cosmétique d'un extrait de Mitracarpus scaber comme agent améliorant la fermeté cutanée.
  2. 3) Utilisation cosmétique d'un extrait de de Mitracarpus scaber pour prévenir, pour retarder, pour lutter contre, pour traiter ou réduire le vieillissement de la peau et/ou l'apparition des signes de vieillissement de la peau.
  3. 4) Utilisation cosmétique selon la revendication 3, dans laquelle les signes de vieillissement de la peau sont sélectionnés parmi le relâchement cutané, la perte de fermeté cutanée, la perte d'élasticité des fibres cutanées, une peau flétrie, et une peau amincie, et une peau terne et/ou sans éclat.
  4. 5) Utilisation cosmétique selon les revendications 3 ou 4 pour réparer les manifestations cutanées du vieillissement et/ou corriger la perte de fermeté et/ou redensifier une peau flétrie ou amincie et/ou redensifier et/ou raffermir et/ou tonifier la peau du visage et/ou du corps.
    6) Utilisation cosmétique d'un extrait de Mitracarpus scaber dans une composition cosmétique anti-âge • 7) Utilisation cosmétique d'un extrait de Mi tracarpus scaber dans une composition cosmétique
    raffermissante.
    8) Utilisation cosmétique selon 1' une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle 1'extrait de Mitracarpus scaber est un extrait des parties aériennes. 9) Utilisation cosmétique selon 1' une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle
    l'extrait de Mitracarpus scaber est un extrait hydro alcoolique.
  5. 10) Utilisation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, dans laquelle l'extrait de Mitracarpus scaber est un extrait NaDES.
  6. 11) Utilisation cosmétique selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que ledit extrait est formulé dans une composition cosmétique qui comprend de 0,01 à 10% dudit extrait en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition, de préférence de 0,01 à 5% dudit extrait en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition.
  7. 12) Utilisation cosmétique selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ladite composition cosmétique comprend en outre un ou plusieurs agents de formulation ou additifs tels que des adoucissants, des colorants, des agents filmogènes, des tensio-actifs, des parfums, des conservateurs, des émulsionnants, des huiles, des glycols, filtres UV, et des vitamines.
    Control Vitamine C (pg/mL) + Extrait de Mitracarpus scaber Hydro-Alcoolique
    TGF3 (ng/mL)
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