FR3015280A1 - ACTIVE PRINCIPLE WITH SKIN APPLICATION OBTAINED FROM RESEDA LUTEOLA AND COSMETIC USE - Google Patents
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Abstract
L'objet de l'invention est un principe actif obtenu à partir de Reseda luteola comprenant des carbohydrates et à son utilisation cosmétique. L'invention se rapporte également aux compositions cosmétiques incluant ce principe actif.The subject of the invention is an active ingredient obtained from Reseda luteola comprising carbohydrates and its cosmetic use. The invention also relates to cosmetic compositions including this active ingredient.
Description
PRINCIPE ACTIF A APPLICATION CUTANEE OBTENU A PARTIR DE RESEDA LUTEOLA ET UTILISATION COSMETIQUE La présente invention se rapporte à un principe actif obtenu à partir de Reseda luteola, et à son utilisation cosmétique en particulier pour améliorer et/ou restaurer l'éclat du teint. L'invention concerne également les compositions cosmétiques incluant ce principe actif. Les conditions de vie actuelles font subir à l'organisme toutes sortes d'agressions permanentes auxquelles il est difficile de se soustraire de façon continue et efficace, tels que la pollution atmosphérique, les gaz d'échappement, l'air climatisé, le stress, l'alcool ou le tabac. Ces stress environnementaux agressent la peau qui perd peu à peu sa capacité de régénération cellulaire et de défense.The present invention relates to an active ingredient obtained from Reseda luteola, and to its cosmetic use, in particular for improving and / or restoring the radiance of the complexion. SUMMARY OF THE INVENTION The invention also relates to cosmetic compositions including this active ingredient. The current living conditions cause the organism all kinds of permanent aggressions that are difficult to escape continuously and effectively, such as air pollution, exhaust fumes, air conditioning, stress, alcohol or tobacco. These environmental stresses attack the skin, which gradually loses its capacity for cell regeneration and defense.
Le vieillissement environnemental en particulier met en jeu des radicaux libres de diverses sources qui peuvent être endogènes (activation du métabolisme de l'acide arachidonique, activation de la phagocytose ou accumulation de métabolites réduits) ou exogènes (radiations, rayons UV, pollution de l'air, fumée de cigarettes, pesticides, etc.). Ces radicaux ont une durée de vie très courte, mais sont très réactifs. En faibles quantités, les radicaux libres oxygénés (ROS) induisent une stimulation de la prolifération cellulaire et une surexpression d'enzymes antioxydantes capables de réagir face au stress. Produits en quantité excessive, les ROS s'attaquent à toute une série de substrats biologiques, et les systèmes de défense des cellules sont alors submergés. Les ROS provoquent alors des dégâts cellulaires souvent irréversibles, intenses et ciblés, en particulier l'oxydation des protéines, des cassures de l'ADN et la peroxydation des lipides. L'oxydation des acides aminés conduit à la formation de groupements hydroxyles sur les chaînes latérales des protéines qui peut aboutir à la fragmentation des chaines polypeptidiques ou à des réticulations intra- ou inter-moléculaires. Dans le cas d'oxydations plus franches, des dérivés carbonylés sont générés par oxydation catalysée de certains acides aminés par des métaux ou par clivage des protéines.Environmental aging in particular involves free radicals from various sources that may be endogenous (activation of arachidonic acid metabolism, activation of phagocytosis or accumulation of reduced metabolites) or exogenous (radiation, UV rays, pollution of the air, cigarette smoke, pesticides, etc.). These radicals have a very short life, but are very reactive. In small quantities, oxygen free radicals (ROS) induce stimulation of cell proliferation and overexpression of antioxidant enzymes capable of reacting to stress. Products in excessive amounts, ROSs attack a variety of biological substrates, and the cell defense systems are then submerged. The ROS then cause cellular damage that is often irreversible, intense and targeted, in particular protein oxidation, DNA breaks and lipid peroxidation. The oxidation of amino acids leads to the formation of hydroxyl groups on the side chains of proteins which can lead to the fragmentation of polypeptide chains or intra- or inter-molecular crosslinking. In the case of more pure oxidations, carbonyl derivatives are generated by catalyzed oxidation of certain amino acids by metals or by cleavage of proteins.
Ces molécules modifiées tendent à s'accumuler et à s'agréger dans l'épiderme, en particulier avec l'âge et les stress photo-induits. Or, la présence de protéines carbonylées au niveau de la couche cornée affecte les propriétés mécaniques de la peau et dégrade la fonction barrière. Des études récentes ont en outre démontré que la carbonylation des protéines participait à la modification de la structure fibreuse de la kératine et à l'altération des propriétés optiques du stratum corneum. Par ailleurs, lorsque les systèmes de détoxification cellulaire sont débordés sous l'effet de stress récurrents, les composés protéiques altérés non éliminés s'agglomèrent et s'amassent en agrégats puis s'associent avec des résidus de lipides peroxydés ou d'organelles altérées pour former la lipofuscine. Celle-ci, également appelée "âge" pigment, correspond à un matériel insoluble, non dégradable, de couleur jaune-brun, constitué essentiellement de protéines et de lipides. La lipofuscine est une conséquence du vieillissement, mais elle contribue également à son accélération par ses effets cytotoxiques. En effet, la lipofuscine catalyse et favorise sa propre formation en augmentant le taux de radicaux libres intracellulaire et en limitant la dégradation des protéines nouvellement oxydées. Elle entrave ainsi le bon fonctionnement de la cellule, réduit ses capacités de détoxification et conduit à de nouveaux dommages cellulaires. Elle se propage et encrasse progressivement l'espace intracellulaire pour entraîner la mort de la cellule. De plus, au niveau du tissu cutané, les dépôts de lipofuscine contribuent également à l'apparition des tâches de vieillissement. Ces différentes altérations se traduisent par des manifestations visibles au niveau de la peau notamment par un trouble de l'hydratation, une perte de la souplesse de la peau, l'apparition d'une rugosité de la peau et une altération de l'éclat du teint. La peau s'intoxique, devient terne, irrégulière et sèche.These modified molecules tend to accumulate and aggregate in the epidermis, particularly with age and photoinduced stress. However, the presence of carbonylated proteins in the stratum corneum affects the mechanical properties of the skin and degrades the barrier function. Recent studies have also shown that the carbonylation of proteins contributes to the modification of the fibrous structure of keratin and the alteration of the optical properties of the stratum corneum. In addition, when cellular detoxification systems are overloaded by recurrent stress, the altered protein compounds that are not eliminated agglomerate and accumulate into aggregates and then associate with residues of peroxidized lipids or altered organelles to form lipofuscin. This, also called "age" pigment, corresponds to an insoluble, non-degradable, yellow-brown material consisting essentially of proteins and lipids. Lipofuscin is a consequence of aging, but it also contributes to its acceleration by its cytotoxic effects. Indeed, lipofuscin catalyzes and promotes its own formation by increasing the level of intracellular free radicals and limiting the degradation of newly oxidized proteins. It thus hinders the proper functioning of the cell, reduces its detoxification capabilities and leads to new cell damage. It spreads and progressively fouls the intracellular space to cause the death of the cell. In addition, in the skin tissue, lipofuscin deposits also contribute to the appearance of aging tasks. These various alterations result in visible manifestations in the skin, in particular by a disturbance of hydration, a loss of the suppleness of the skin, the appearance of a roughness of the skin and an alteration of the radiance of the skin. complexion. The skin becomes intoxicated, becomes dull, irregular and dry.
L'objectif de la présente invention est de proposer un principe actif cosmétique qui soit capable d'améliorer l'état de la peau, en particulier l'éclat du teint, notamment : - en renforçant la protection naturelle de la peau en augmentant la viabilité cellulaire et en diminuant la production des ROS des cellules cutanées, - en limitant la production de protéines carbonylées dans les cellules cutanées, - en limitant l'accumulation des agrégats de lipofuscine induits dans les cellules cutanées.The objective of the present invention is to provide a cosmetic active ingredient that is capable of improving the state of the skin, in particular the radiance of the complexion, in particular by: - reinforcing the natural protection of the skin by increasing the viability cellular and by decreasing the production of skin cell ROS, by limiting the production of carbonyl proteins in cutaneous cells, by limiting the accumulation of lipofuscin aggregates induced in cutaneous cells.
Pour répondre à cet objectif, la présente invention vise l'utilisation d'un principe actif obtenu à partir de Reseda luteola, au sein d'une composition cosmétique à application cutanée destinée au traitement de la peau. Reseda luteola, également appelée le réséda des teinturiers, est une plante appartenant à la famille des Resedaceae. Il s'agit d'une plante bisannuelle, qui atteint 50cm à 1m de hauteur, à tige robuste et anguleuse, et à feuilles simples et oblongues-lancéolées. La floraison a lieu de mai à septembre. Les fleurs sont de couleur jaune verdâtre, et sont disposées en grappes spiciformes très longues, denses et raides. Ses graines sont noires et luisantes. La plante se développe sur les chemins, les berges des cours d'eau, les champs incultes, les murs et rochers. Elle est originaire du pourtour du bassin méditerranéen et d'Asie occidentale. Autrefois cultivée, elle est naturalisée dans certains pays. Aujourd'hui, le réséda est répandu en Europe centrale et méridionale, en Asie occidentale, en Afrique septentrionale, en Amérique du Nord et au Mexique. C'est une plante ornementale parfumée mais sa principale utilisation depuis le Moyen-âge est la production d'une teinture jaune d'or de grande qualité, à partir des tiges et des feuilles, cueillies avant floraison. Dans le domaine cosmétique et/ou dermo-pharmaceutique, cette plante a été utilisée pour ses capacités pigmentantes comme décrit dans la demande de brevet Japonais JP2003201208 Cette plante est aussi connue pour son action amincissante en combinaison avec d'autres plantes comme indiqué dans la demande de brevet français FR2786096. La publication Cassetti F, divulgue une efficacité anti-inflammatoire d'un extrait de Reseda luteola riche en lutéoline, qui est une molécule polyphénolique. - "Topical application of solubilized Reseda luteola reduces UVB-induced inflammation in vivo (2009) J Photochem Photobiol" - "A neutrophil multitarget functional bioassay to detect anti-inflammatory natural products (2002)J Nat Prod". De façon surprenante, selon l'invention, Reseda luteola présente des propriétés remarquables au niveau de la peau. En particulier, l'utilisation de Reseda luteola permet d'améliorer l'état de la peau, notamment de détoxifier la peau pour prévenir et/ou traiter une altération ou une perte de l'éclat du teint. Selon un avantage particulier, l'utilisation de Reseda luteola sur la peau, permet notamment de renforcer la protection naturelle de la peau en augmentant la viabilité cellulaire et diminuer la production des ROS des cellules cutanées, de limiter la production de protéines carbonylées dans les cellules cutanées, et de limiter l'accumulation des agrégats de lipofuscine induits dans les cellules cutanées. L'invention vise également les compositions cosmétiques comprenant un principe actif particulier obtenu à partir de Reseda luteola, ainsi qu'un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à prévenir et/ou traiter une altération ou une perte de l'éclat du teint, comprenant l'application topique d'une composition renfermant un principe actif obtenu à partir de Reseda luteola . La présente invention est maintenant décrite en détail.In order to meet this objective, the present invention aims at the use of an active ingredient obtained from Reseda luteola, in a cosmetic composition with cutaneous application intended for the treatment of the skin. Reseda luteola, also called the reseda of the dyers, is a plant belonging to the family Resedaceae. It is a biennial plant, which reaches 50cm to 1m in height, with a robust and angular stem, and single leaves and oblong-lanceolate. Flowering occurs from May to September. The flowers are greenish-yellow in color and are arranged in very long, dense and stiff spike-like clusters. Its seeds are black and shiny. The plant grows on the paths, banks of streams, uncultivated fields, walls and rocks. It originates around the Mediterranean basin and West Asia. Once cultivated, it is naturalized in some countries. Reseda is now widespread in central and southern Europe, western Asia, northern Africa, North America and Mexico. It is a fragrant ornamental plant but its main use since the Middle Ages is the production of a high quality golden yellow dye, from stems and leaves, picked before flowering. In the cosmetic and / or dermopharmaceutical field, this plant has been used for its pigmenting capacities as described in Japanese patent application JP2003201208. This plant is also known for its slimming action in combination with other plants as indicated in the application. French patent FR2786096. The publication Cassetti F discloses an anti-inflammatory efficacy of a Reseda luteola extract rich in luteolin, which is a polyphenolic molecule. - "Topical application of solubilized Reseda luteolone UVB-induced inflammation in vivo (2009) J Photochem Photobiol" - "A neutrophil multitarget functional bioassay to detect anti-inflammatory natural products (2002) J Nat Prod". Surprisingly, according to the invention, Reseda luteola has remarkable properties in the skin. In particular, the use of Reseda luteola improves the condition of the skin, including detoxifying the skin to prevent and / or treat an alteration or loss of radiance. According to one particular advantage, the use of Reseda luteola on the skin makes it possible, in particular, to enhance the natural protection of the skin by increasing the cell viability and to reduce the production of skin cell ROS, to limit the production of carbonyl proteins in the cells. skin, and to limit the accumulation of lipofuscin aggregates induced in cutaneous cells. The invention also relates to cosmetic compositions comprising a particular active ingredient obtained from Reseda luteola, as well as a cosmetic process for the care of human skin, intended to prevent and / or treat an alteration or loss of the radiance of the skin. complexion, comprising the topical application of a composition containing an active ingredient obtained from Reseda luteola. The present invention is now described in detail.
Selon un premier aspect, l'invention vise donc l'utilisation dans une composition cosmétique destinée à une application topique sur la peau, d'un principe actif obtenu à partir de Reseda luteola comme principe actif cosmétique pour améliorer l'état de la peau, en particulier : - pour détoxifier les cellules cutanées, et/ou - pour protéger les cellules cutanées des stress environnementaux, et/ou - pour améliorer et/ou restaurer l'éclat du teint de la peau. Appliqué sur la peau, un principe actif obtenu à partir de Reseda luteola agit notamment : -en renforçant la protection naturelle de la peau, - en augmentant la viabilité cellulaire, - en diminuant la production de ROS, - en limitant la production de protéines carbonylées, - en limitant la formation d'agrégats de lipofuscine. Avantageusement, il permet d'améliorer l'état de la peau, notamment d'améliorer et/ou restaurer l'éclat du teint de la peau rendue terne et irrégulier par les agressions de l'environnement. Son utilisation sur la peau confère un teint lumineux, un grain de peau affiné et des traits du visage lissés, l'éclat des peaux intoxiquées et fatiguées est ravivé. Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, l'invention vise l'utilisation cosmétique d'un principe actif obtenu à partir de Reseda luteola , tel que décrit en suivant. Le principe actif selon l'invention est un principe actif obtenu à partir de Reseda luteola, comprenant des carbohydrates.According to a first aspect, the invention therefore aims at the use in a cosmetic composition intended for a topical application on the skin, of an active ingredient obtained from Reseda luteola as a cosmetic active ingredient for improving the state of the skin, in particular: - to detoxify the cutaneous cells, and / or - to protect skin cells from environmental stresses, and / or - to improve and / or restore the radiance of the skin complexion. Applied to the skin, an active ingredient obtained from Reseda luteola acts in particular: - by reinforcing the natural protection of the skin, - by increasing the cell viability, - by reducing the production of ROS, - by limiting the production of carbonylated proteins by limiting the formation of aggregates of lipofuscin. Advantageously, it makes it possible to improve the state of the skin, in particular to improve and / or restore the radiance of the complexion of the skin rendered dull and irregular by the aggressions of the environment. Its use on the skin gives a luminous complexion, a refined skin texture and smoothed facial features, the radiance of intoxicated and tired skin is revived. According to a particularly suitable embodiment, the invention relates to the cosmetic use of an active ingredient obtained from Reseda luteola, as described below. The active ingredient according to the invention is an active ingredient obtained from Reseda luteola, comprising carbohydrates.
Le principe actif selon l'invention comprend préférentiellement une teneur en carbohydrates d'au moins 20% du poids total de matière sèche, en particulier une teneur en carbohydrates comprise entre 20% et 80% du poids total de matière sèche, plus particulièrement 22% du poids total de matière sèche. Selon un mode de réalisation particulier, le principe actif est un hydrolysat de Reseda luteola. Par "hydrolysat" on entend tout extrait obtenu à partir de Reseda luteola, comprenant au moins une étape d'hydrolyse de Reseda luteola. Préférentiellement, il s'agit d'un hydrolysat enzymatique de Reseda luteola. Par "hydrolysat enzymatique" on entend tout extrait obtenu à partir de Reseda luteola, comprenant au moins une étape d'hydrolyse enzymatique de Reseda luteola. Selon un mode de réalisation adapté, le principe actif selon l'invention est obtenu à partir des parties aériennes de Reseda luteola. Le principe actif présente préférentiellement une couleur jaune. Il peut se présenter sous forme liquide limpide et peut être défini par au moins une des caractéristiques exposées ci-après, préférentiellement toutes. Matières sèches : Le taux de matières sèches d'un principe actif selon l'invention (mesuré par passage à l'étuve à 105°C en présence de sable d'un échantillon de poids initial donné jusqu'à obtention d'un poids constant) peut être compris entre 10 et 60 g/I, préférentiellement entre 20 et 35 g/I. Mesure du pH : Le pH (mesuré par la méthode potentiométrique à température ambiante) peut être compris entre 3 et 5, préférentiellement entre 3 et 4. Détermination de la teneur en sucres totaux On utilise la méthode de DUBOIS. En présence d'acide sulfurique concentré et de phénol, les sucres réducteurs donnent un composé jaune orangé. A partir d'une gamme étalon, on peut déterminer le taux de carbohydrates d'un principe actif selon l'invention.The active ingredient according to the invention preferably comprises a carbohydrate content of at least 20% of the total weight of dry matter, in particular a carbohydrate content of between 20% and 80% of the total weight of dry matter, more particularly 22%. total weight of dry matter. According to a particular embodiment, the active ingredient is a hydrolyzate of Reseda luteola. By "hydrolyzate" is meant any extract obtained from Reseda luteola, comprising at least one hydrolysis step of Reseda luteola. Preferably, it is an enzymatic hydrolyzate of Reseda luteola. By "enzymatic hydrolyzate" is meant any extract obtained from Reseda luteola, comprising at least one enzymatic hydrolysis step of Reseda luteola. According to a suitable embodiment, the active ingredient according to the invention is obtained from the aerial parts of Reseda luteola. The active ingredient preferably has a yellow color. It may be in clear liquid form and may be defined by at least one of the features set out below, preferably all. Dry matter: The dry matter content of an active ingredient according to the invention (measured by passing in an oven at 105 ° C. in the presence of sand of a sample of initial weight given until a constant weight is obtained ) may be between 10 and 60 g / l, preferably between 20 and 35 g / l. PH measurement: The pH (measured by the potentiometric method at ambient temperature) can be between 3 and 5, preferably between 3 and 4. Determination of the total sugar content The DUBOIS method is used. In the presence of concentrated sulfuric acid and phenol, the reducing sugars give an orange-yellow compound. From a standard range, it is possible to determine the level of carbohydrates of an active ingredient according to the invention.
Le taux de carbohydrates d'un principe actif selon l'invention mesuré par la méthode de DUBOIS est compris entre 28 et 40 g/I, préférentiellement entre 8 et 16 g/I. L'actif contient au moins 20% en poids de carbohydrates par rapport au poids total de matières sèches. Préférentiellement la teneur est comprise entre 20 et 80%. Caractérisation des carbohydrates L'analyse par HPLC d'un principe actif selon l'invention permet de déterminer la répartition des poids moléculaires de la fraction glucidique.The level of carbohydrates of an active ingredient according to the invention measured by the DUBOIS method is between 28 and 40 g / l, preferably between 8 and 16 g / l. The active ingredient contains at least 20% by weight of carbohydrates relative to the total weight of solids. Preferably the content is between 20 and 80%. Carbohydrate Characterization The HPLC analysis of an active ingredient according to the invention makes it possible to determine the distribution of the molecular weights of the carbohydrate moiety.
Poids moléculaire (Da) Pourcentage de la fraction glucidique d'un principe actif selon l'invention (%) Monosaccharides <180 63% Oligosaccharides 180<M M<2670 33% La masse molaire moyenne de la fraction oligosaccharidique est inférieure à 2670 Da, soit un degré moyen de polymérisation (DP) entre 2 et 15. La caractérisation par chromatographie en phase gazeuse (CPG) de la fraction glucidique du principe actif selon l'invention donne les résultats suivants : Composition de la fraction glucidique d'un principe actif selon l'invention (pourcentage massique %) Glucose 37.1% Acide galacturonique 18.4% Arabinose 10.4% Galactose 10.3% Fructose 10.0% Rhamnose 4.1% Fucose 3.8% Xylose 3.1% Sucrose 2.9% Un actif issu de Reseda luteola selon l'invention se caractérise donc par une fraction carbohydrates composée majoritairement de monosaccharides et d'oligosaccharides de DP2 à DP15, ces oligosaccharides étant principalement composés de glucose (33% des sucres liés) et arabinose (20% des sucres liés). Protéines : La teneur en protéines d'un principe actif selon l'invention peut être déterminée par la méthode de KJELDHAL (référence : Official method of analysis of the A.O.C. 1975, 12th ed. W Horwitz, E.D., New York, p 15-60), et exprimée en pourcentage de poids par rapport au poids total de la matière sèche du principe actif. La teneur en protéines est préférentiellement comprise entre 10 et 35%.Molecular Weight (Da) Percentage of Carbohydrate Content of an Active Ingredient According to the Invention (%) Monosaccharides <180 63% Oligosaccharides 180 <MM <2670 33% The average molar mass of the oligosaccharide fraction is less than 2670 Da, ie an average degree of polymerization (DP) between 2 and 15. Characterization by gas chromatography (GC) of the glucidic moiety of the active ingredient according to the invention gives the following results: Composition of the glucidic fraction of an active ingredient according to the invention (percentage by weight%) Glucose 37.1% Galacturonic acid 18.4% Arabinose 10.4% Galactose 10.3% Fructose 10.0% Rhamnose 4.1% Fucose 3.8% Xylose 3.1% Sucrose 2.9% An active ingredient of Reseda luteola according to the invention is therefore characterized by a carbohydrate fraction predominantly composed of monosaccharides and oligosaccharides of DP2 to DP15, these oligosaccharides being mainly composed of glucose (33% of bound sugars) and arabinose (20% of related sugars). Proteins: The protein content of an active ingredient according to the invention may be determined by the method of KJELDHAL (reference: Official method of analysis of the AOC 1975, 12th ed W. Horwitz, ED, New York, p 15-60 ), and expressed as a percentage of weight relative to the total weight of the dry matter of the active ingredient. The protein content is preferably between 10 and 35%.
La majorité des protéines a une masse molaire inférieure à 2 kDa. Préférentiellement plus de 90% des protéines a une masse molaire à 2 kDa. La concentration en protéines de masse molaire supérieure à 5 kDa est inférieure à 1.5 g/L.The majority of proteins have a molar mass of less than 2 kDa. Preferably, more than 90% of the proteins have a molar mass at 2 kDa. The protein concentration of molar mass greater than 5 kDa is less than 1.5 g / L.
Teneur en cendres brutes : La teneur en cendres brutes est déterminée par la pesée des résidus issus de l'incinération à 550°C dans un four à moufle électrique (VULCAN®). La teneur en cendres brutes est déterminée en pourcentage de poids par rapport au poids total de la matière sèche du principe actif. Elle est comprise entre 10 et 35% en poids de matière sèche. Teneurs en Composés polyphénoliques Le dosage de composés polyphénoliques est réalisé par lecture de l'intensité de coloration en présence de ferricyanure de potassium, intensité détectable à 715 nm et comparée à une gamme étalon d'acide gallique. Le taux de polyphénols est inférieur à 1% de la matière sèche. Le principe actif selon l'invention ne contient qu'une très faible quantité de composés polyphénoliques, et donc très peu de flavonoïdes ou flavones. Le principe actif selon l'invention est obtenu par un procédé permettant de concentrer l'actif en termes de carbohydrates. Il est préférentiellement obtenu par un procédé comprenant une hydrolyse. Un procédé particulièrement adapté comprend au moins la succession des étapes suivantes : - solubilisation aqueuse de parties aériennes de Reseda luteola, - au moins une hydrolyse enzymatique, préférentiellement des carbohydrates en vue d'obtenir des oligosaccharides, - séparation des phases soluble et insoluble, - inactivation des activités enzymatiques par traitement thermique, - concentration de la phase soluble pour récupérer une fraction active comprenant des carbohydrates. Des étapes supplémentaires de filtration et filtration stérilisante peuvent être envisagées. Des étapes de désodorisation et de décoloration ou de concentration peuvent être ajoutées. Les paramètres des différentes étapes doivent être ajustés afin d'obtenir des principes actifs comprenant des oligosaccharides.Crude ash content: The raw ash content is determined by the weighing of residues from incineration at 550 ° C in an electric muffle furnace (VULCAN®). The raw ash content is determined as a percentage of weight relative to the total weight of the dry matter of the active ingredient. It is between 10 and 35% by weight of dry matter. Polyphenol Content The assay of polyphenolic compounds is performed by reading the staining intensity in the presence of potassium ferricyanide, detectable intensity at 715 nm and compared to a standard range of gallic acid. The polyphenol content is less than 1% of the dry matter. The active ingredient according to the invention contains only a very small amount of polyphenolic compounds, and therefore very few flavonoids or flavones. The active ingredient according to the invention is obtained by a process for concentrating the active ingredient in terms of carbohydrates. It is preferably obtained by a process comprising hydrolysis. A particularly suitable process comprises at least the following succession of steps: aqueous solubilization of aerial parts of Reseda luteola, at least one enzymatic hydrolysis, preferably carbohydrates with a view to obtaining oligosaccharides, separation of the soluble and insoluble phases, inactivation of enzymatic activities by heat treatment, - concentration of the soluble phase to recover an active fraction comprising carbohydrates. Additional steps of filtration and sterilizing filtration can be considered. Deodorization and bleaching or concentration steps can be added. The parameters of the different steps must be adjusted in order to obtain active principles comprising oligosaccharides.
Ces étapes sont usuelles dans le domaine des extractions d'actifs à partir de plantes, et l'homme du métier est à même d'en ajuster les paramètres réactionnels sur la base de ses connaissances générales. La présente invention couvre aussi les compositions cosmétiques incluant un principe actif obtenu à partir de Reseda luteola, dans différentes formes galéniques, adaptées à l'administration par voie topique cutanée. Ces compositions peuvent se présenter notamment sous forme d'émulsions huile-dans-eau, émulsions eau-dans-huile, émulsions multiples (Eau/Huile/Eau ou Huile/Eau/Huile) qui peuvent être éventuellement des microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme de solutions, suspensions, hydrodispersions, gels aqueux ou poudres. Elles peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse, ou sous forme solide. Il peut s'agir de compositions comprenant entre 0,1 et 3% de principe(s) actif(s) obtenu(s) à partir de Reseda luteola selon la présente invention.These steps are usual in the field of asset extractions from plants, and the skilled person is able to adjust the reaction parameters on the basis of his general knowledge. The present invention also covers cosmetic compositions including an active ingredient obtained from Reseda luteola, in different galenic forms, adapted for topical administration to the skin. These compositions may especially be in the form of oil-in-water emulsions, water-in-oil emulsions, multiple emulsions (Water / Oil / Water or Oil / Water / Oil) which may be optionally microemulsions or nanoemulsions, or in the form of solutions, suspensions, hydrodispersions, aqueous gels or powders. They can be more or less fluid and have the appearance of a cream, a lotion, a milk, a serum, an ointment, a gel, a paste or a foam, or in solid form. It may be compositions comprising between 0.1 and 3% of active principle (s) obtained (s) from Reseda luteola according to the present invention.
Ces compositions comprennent, outre l'actif, un milieu physiologiquement acceptable et de préférence cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne provoque pas de sensations d'inconfort inacceptables pour l'utilisateur telles que des rougeurs, tiraillements ou picotements. Les compositions selon l'invention peuvent contenir comme adjuvant au moins un composé choisi parmi : - les huiles, qui peuvent être choisies notamment parmi les huiles de silicone, linéaires ou cycliques, volatiles ou non volatiles ; - les cires, telles que l'ozokérite, la cire de polyéthylène, la cire d'abeille ou la cire de carnauba ; - les élastomères de silicone, - les tensioactifs, de préférence émulsionnants, qu'ils soient non ioniques, anioniques, cationiques ou amphotères ; - les co-tensioactifs, tels que les alcools gras linéaires ; - les épaississants et/ou gélifiants, - les humectants, tels que les polyols comme la glycérine ; - les filtres organiques, - les filtres inorganiques, - les colorants, les conservateurs, les charges, - les tenseurs, - les séquestrants, - les parfums, - et leurs mélanges, sans que cette liste soit limitative. Des exemples de tels adjuvants sont cités notamment dans le Dictionnaire CTFA (International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook publié par le Personal Care Product Council). Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir les éventuels composés complémentaires, actifs ou non-actifs, et leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses du mélange ne soient pas, ou sensiblement pas, altérées par l'adjonction envisagée. Ces compositions sont notamment destinées à favoriser à améliorer l'état de la peau, en particulier à prévenir et/ou traiter une altération et/ou une perte de l'éclat du teint.These compositions comprise, in addition to the active agent, a physiologically acceptable and preferably cosmetically acceptable medium, that is to say which does not cause unacceptable sensations of discomfort for the user such as redness, tightness or tingling. The compositions according to the invention may contain as adjuvant at least one compound chosen from: oils, which may be chosen in particular from silicone oils, linear or cyclic, volatile or non-volatile; waxes, such as ozokerite, polyethylene wax, beeswax or carnauba wax; silicone elastomers; surfactants, preferably emulsifiers, whether they are nonionic, anionic, cationic or amphoteric; co-surfactants, such as linear fatty alcohols; thickeners and / or gelling agents, humectants, such as polyols such as glycerine; organic filters, inorganic filters, dyes, preservatives, fillers, tensors, sequestering agents, perfumes, and mixtures thereof, without this list being limiting. Examples of such adjuvants are cited in particular in the CTFA Dictionary (International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook published by the Personal Care Product Council). Of course, those skilled in the art will take care to choose any additional compounds, active or non-active, and their amount, so that the advantageous properties of the mixture are not, or not substantially, impaired by the addition envisaged. These compositions are in particular intended to promote the improvement of the condition of the skin, in particular to prevent and / or treat an alteration and / or loss of radiance of the complexion.
L'invention est à présent illustrée par des exemples et des résultats d'essais. EXEMPLES Un exemple non limitatif de procédé d'obtention, de principe actif obtenu à partir de Reseda luteola, est présenté en suivant, ainsi que des exemples de composition incluant un tel principe actif.The invention is now illustrated by examples and test results. EXAMPLES A nonlimiting example of a process for obtaining an active ingredient obtained from Reseda luteola is presented following, as well as examples of compositions including such an active principle.
Exemple 1 : procédé d'obtention du principe actif selon l'invention Un exemple de procédé d'obtention d'un principe actif selon l'invention, comprend la mise en oeuvre des étapes suivantes : - solubilisation des parties aériennes de Reseda luteola dans l'eau en milieu basique à raison de 20g/I, - hydrolyse enzymatique des carbohydrates, à l'aide d'au moins une ca rbohyd rase, - séparation des phases soluble et insoluble, - inactivation des activités enzymatiques par traitement thermique, - concentration de la phase soluble pour récupérer une fraction active comprenant des carbohydrates. Le principe actif obtenu présente les caractéristiques suivantes : - aspect : solution aqueuse limpide - couleur : jaune - teneur en matières sèches : 26,7g/I - teneur en sucres totaux : 11,3g/I, soit 42% de sucres par rapport à la matière sèche, - teneur en protéines de 16%, - teneur en cendres de 28% - teneur en polyphénols de 0,2% Exemple 2 : utilisation d'un principe actif selon l'invention dans une crème de jour Phase A . Eau QSP 100% Glycérine 1% Phase B. DUB GMS AE (Stéarinerie DUBOIS) 1,3% DUB SEG (Stéarinerie DUBOIS) 1% Cetearyl alcool 1,3% DUB MCT 5545 (Stéarinerie DUBOIS) 6,2% Lanol 99 (Seppic) 4% Cetyl palmitate 0,8% Sophiderm MC30 (Sophim) 3,4% Huile de palme (Sictia) 1% Phase C. Principe actif selon l'invention (exemple 1 ) 3% Conservateur 0,7% Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Cette émulsion onctueuse, fondante, blanche présente un pH de 5,5. En application topique sur la peau, elle présente une pénétration rapide avec un fini doux. Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - mélanger A, chauffer au bain-marie à 80°C sous agitation magnétique, - mélanger B, chauffer au bain-marie à 80°C sous agitation magnétique, - émulsionner B dans A sous rotor/stator à 1600 tours/min, - A 30°C, ajouter C, dans l'ordre indiqué, sous rotor/stator à 1500 tours/minute, et - laisser refroidir sous rotor/stator jusqu'à complète homogénéisation de l'émulsion. 30 Exemple 3 : utilisation d'un principe actif selon l'invention dans une crème de nuit Phase A. Eau QSP 100 % Phase B. 11 5% DUB LAHE (Stéarinerie DUBOIS) DUB ZENOATE (Stéarinerie DUBOIS) 5% Montanov 202 (Seppic) 4% Montanov 14 (Seppic) 4% Montanov S (Seppic) 1% DUB 340 (Stéarinerie DUBOIS) 3% DUB Lilirose (Stéarinerie DUBOIS) 6% DUB PIS (Stéarinerie DUBOIS) 6% DUB PPH1 (Stéarinerie DUBOIS) 4% Phase C. Conservateur 0,7 % Principe actif selon l'invention (exemple 1) 3% Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Cette émulsion compacte blanche présente un pH de 5,5. En application topique, elle présente une application douce, avec un fini sec et un effet filmogène.EXAMPLE 1 Process for Obtaining the Active Ingredient According to the Invention An example of a process for obtaining an active principle according to the invention comprises the following steps: solubilization of the aerial parts of Reseda luteola in the water in a basic medium at a rate of 20 g / l, - enzymatic hydrolysis of the carbohydrates, using at least one hydrobromide, - separation of the soluble and insoluble phases, - inactivation of the enzymatic activities by heat treatment, - concentration of the soluble phase to recover an active fraction comprising carbohydrates. The active ingredient obtained has the following characteristics: - appearance: clear aqueous solution - color: yellow - dry matter content: 26.7 g / l - total sugar content: 11.3 g / I, ie 42% of sugars compared to the dry matter, - protein content of 16%, - ash content of 28% - polyphenol content of 0.2% Example 2: use of an active ingredient according to the invention in a day cream Phase A. Water QSP 100% Glycerin 1% Phase B. DUB GMS AE (Stéarinerie DUBOIS) 1.3% DUB SEG (Stéarinerie DUBOIS) 1% Cetearyl alcohol 1.3% DUB MCT 5545 (Stéarinerie DUBOIS) 6.2% Lanol 99 (Seppic ) 4% Cetyl palmitate 0.8% Sophiderm MC30 (Sophim) 3.4% Palm oil (Sictia) 1% Phase C. Active ingredient according to the invention (Example 1) 3% Preservative 0.7% The quantities indicated are data as a percentage of weight. This creamy, melting, white emulsion has a pH of 5.5. In topical application on the skin, it has a fast penetration with a soft finish. It can be obtained by carrying out the following steps: - mix A, heat in a water bath at 80 ° C. with magnetic stirring, - mix B, heat in a water bath at 80 ° C. with magnetic stirring, - emulsify B in A under rotor / stator at 1600 rpm, - at 30 ° C, add C, in the order indicated, under rotor / stator at 1500 rpm, and - allow to cool under rotor / stator until complete homogenization emulsion. Example 3: Use of an active ingredient according to the invention in a night cream Phase A. Water QSP 100% Phase B. 11 5% DUB LAHE (Stéarinerie DUBOIS) DUB ZENOATE (Stéarinerie DUBOIS) 5% Montanov 202 (Seppic ) 4% Montanov 14 (Seppic) 4% Montanov S (Seppic) 1% DUB 340 (Stéarinerie DUBOIS) 3% DUB Lilirose (Stéarinerie DUBOIS) 6% DUB PIS (Stéarinerie DUBOIS) 6% DUB PPH1 (Stéarinerie DUBOIS) 4% Phase C. Preservative 0.7% Active ingredient according to the invention (example 1) 3% The amounts indicated are given as a percentage of weight. This compact white emulsion has a pH of 5.5. In topical application, it has a gentle application, with a dry finish and a film-forming effect.
Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - chauffer A au bain-marie à 80°C sous agitation magnétique, - mélanger B, chauffer au bain-marie à 80°C sous agitation magnétique, - émulsionner B dans A sous rotor sator à 3200 tours/min, - A 40°C, ajouter C, dans l'ordre indiqué, sous rotor stator à 3000 tours/minute, - laisser refroidir sous agitation. Exemple 4 : utilisation d'un principe actif selon l'invention dans une mousse couvrante Phase A. Eau QSP 100% Carbopol ETD2050 (Noveon) 0,7% Phase B. AAB2 (Aiglon) 2% Stéarine TP micronisée (Stéarinerie Dubois) 2% DUB GMS AE (Stéarinerie Dubois) 2% DUB RG AE (Stéarinerie Dubois) 2,7% DUB IPM (Stéarinerie Dubois) 3% Phase C. Conservateur 0,7% Principe actif selon l'invention (exemple 1) 3% Phase D. Titanium dioxide 3,4% Kaolin 2% Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Ce gel émulsionné, mousseux, blanc présente un pH de 5,8. En application topique, il présente un étalement confortable avec un fini cotonneux légèrement filmogène. Il peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - mélanger A, chauffer au bain marie à 80°C, sous agitation mécanique en veillant à bien disperser le gel (environ 800 tours/minute), - mélanger B, chauffer au bain-marie à 80°C sous agitation magnétique, - émulsionner B dans A sous rotor stator à 2200 tours/min, - ajouter C, aussitôt dans l'ordre indiqué sous rotor stator à 2200 tours/min, - laisser refroidir sous agitation, - mélanger la phase pulvérulente D à l'aide d'un mortier, - à 30°C, ajouter D, petit à petit et sous agitation mécanique à 2000 tours/min, en veillant à sa complète dispersion, - laisser la mousse obtenue sous agitation mécanique jusqu'à sa complète homogénéisation. Exemple 5 : utilisation d'un principe actif selon l'invention dans un fluide régénérant Phase A. Eau QSP 100% Glycérine 4% Blanose 7M31CF (Hercules) 0,8% Phase B. DUB RG AE (Stéarinerie DUBOIS) 3% DUB PPH1 (Stéarinerie DUBOIS) 6,7% DUB MDIS (Stéarinerie DUBOIS) 6,7% DUB MCT5545 (Stéarinerie DUBOIS) 5,4% Phase C. Conservateur 0,7% Principe actif selon l'invention (exemple 1) 3% Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Ce gel émulsionné, fluide, blanc présente un pH de 7,5. Il présente un étalement confortable, un fini doux et un effet hydraté. Il peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - mélanger A, chauffer au bain marie à 80°C, sous agitation mécanique en veillant à bien disperser le gel (environ 1000 tours/minute), - mélanger B, chauffer au bain-marie à 80°C sous agitation magnétique, - émulsionner B dans A sous rotor stator à 2500 tours/min, - à 30°C, ajouter C dans l'ordre toujours sous rotor sator à 2200 tours/min, - laisser refroidir sous agitation jusqu'à complète homogénéisation. Exemple 6 : utilisation d'un principe actif selon l'invention dans une émulsion éclat du teint Phase A. Eau QSP 100% Phase B. Montanov 68 (Seppic) 2% Montanov 202 (Seppic) 3% Lanol 99 (Seppic) 5% Conservateur 0,7% Phase C. Principe actif selon l'invention (exemple 1) 3% Phase D. Sepigel 305 (Seppic) 0,3% Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Cette émulsion présente un pH de 6,8. Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - chauffer A au bain marie à 80°C, - mélanger B, dans une marmite et chauffer au bain-marie à 80°C, - émulsionner A dans B sous rotor-stator entre 2000 et 5000 tours/minute, - à 50°C, ajouter C, puis D, toujours sous rotor stator, - laisser agiter jusqu'à complet refroidissement.It can be obtained by carrying out the following steps: - heating A in a water bath at 80 ° C. with magnetic stirring, - mixing B, heating in a water bath at 80 ° C. with magnetic stirring, - emulsifying B in A under rotor sator at 3200 rpm, - At 40 ° C, add C, in the order indicated, under stator rotor at 3000 rpm, - allow to cool with stirring. EXAMPLE 4 Use of an Active Principle According to the Invention in a Covering Foam Phase A. Water QSP 100% Carbopol ETD2050 (Noveon) 0.7% Phase B. AAB2 (Aiglon) 2% Stearin TP Micronized (Stéarinerie Dubois) 2 % DUB GMS AE (Stéarinerie Dubois) 2% DUB RG AE (Stéarinerie Dubois) 2.7% DUB IPM (Stéarinerie Dubois) 3% Phase C. Preservative 0.7% Active ingredient according to the invention (example 1) 3% Phase D. Titanium dioxide 3.4% Kaolin 2% The amounts given are given as a percentage by weight. This emulsified, foamy, white gel has a pH of 5.8. In topical application, it presents a comfortable spreading with a slightly filmogenic cottony finish. It can be obtained by carrying out the following steps: - mix A, heat in a water bath at 80 ° C., with mechanical stirring, making sure to disperse the gel (about 800 rpm), - mix B, heat at room temperature bain-marie at 80 ° C. with magnetic stirring, - emulsify B in A under a stator rotor at 2200 rpm, - add C, immediately in the order indicated under a stator rotor at 2200 rpm, - let cool with stirring, - mix the powdery phase D with a mortar, - at 30 ° C., add D, little by little and with mechanical stirring at 2000 rpm, making sure that it is completely dispersed, - leave the foam obtained under mechanical agitation until complete homogenization. EXAMPLE 5 Use of an Active Principle According to the Invention in a Regenerating Fluid Phase A. Water QSP 100% Glycerin 4% Blanose 7M31CF (Hercules) 0.8% Phase B. DUB RG AE (Stéarinerie DUBOIS) 3% DUB PPH1 (Stéarinerie DUBOIS) 6.7% DUB MDIS (Stéarinerie DUBOIS) 6.7% DUB MCT5545 (Stéarinerie DUBOIS) 5.4% Phase C. Preservative 0.7% Active principle according to the invention (Example 1) 3% Quantities indicated are given as a percentage of weight. This emulsified, fluid, white gel has a pH of 7.5. It has a comfortable spread, a soft finish and a hydrated effect. It can be obtained by carrying out the following steps: - mix A, heat in a water bath at 80 ° C., with mechanical stirring, being careful to disperse the gel well (about 1000 rpm), - mix B, heat at water bath at 80 ° C with magnetic stirring, - emulsify B in A under rotor stator at 2500 rpm, - at 30 ° C, add C in order always under rotor sator at 2200 revolutions / min, - let cool with stirring until completely homogenized. EXAMPLE 6 Use of an Active Principle According to the Invention in an Emulsion Radiant Complexion Phase A. Water QSP 100% Phase B. Montanov 68 (Seppic) 2% Montanov 202 (Seppic) 3% Lanol 99 (Seppic) 5% Preservative 0.7% Phase C. Active principle according to the invention (example 1) 3% Phase D. Sepigel 305 (Seppic) 0.3% The amounts indicated are given as a percentage of weight. This emulsion has a pH of 6.8. It can be obtained by carrying out the following steps: - heating A in a water bath at 80 ° C, - mixing B, in a pot and heating in a water bath at 80 ° C, - emulsifying A in B under rotor- stator between 2000 and 5000 rpm, - at 50 ° C, add C, then D, still under a stator rotor, - let stir until completely cooled.
EVALUATION DE L'EFFICACITE COSMETIQUE D'UN PRINCIPE ACTIF SELON L'INVENTION A. Tests ex vivo A.I - Effet du principe actif issu de Reseda luteola sur l'activité anti-oxydante sur fibroblastes humains stressés. a. Effet sur la viabilité cellulaire suite à un stress chimique L'objectif de cette étude est de déterminer l'effet du principe actif selon l'invention sur la protection des fibroblastes exposés à un stress oxydatif H202. L'étude a été réalisée par la mesure de la viabilité cellulaire à l'aide d'une coloration au M.T.T. Le protocole opératoire de l'étude est le suivant : A JO, des fibroblastes humains sont ensemencés dans du milieu de culture adéquat.EVALUATION OF THE COSMETIC EFFECTIVENESS OF AN ACTIVE INGREDIENT ACCORDING TO THE INVENTION A. Ex vivo tests A.I - Effect of the active ingredient derived from Reseda luteola on the antioxidant activity on stressed human fibroblasts. at. Effect on cell viability following chemical stress The objective of this study is to determine the effect of the active ingredient according to the invention on the protection of fibroblasts exposed to oxidative stress H202. The study was performed by measuring cell viability using M.T.T. staining. The operating protocol of the study is as follows: At 0, human fibroblasts are seeded in suitable culture medium.
A J2, le milieu de culture est éliminé et remplacé par du milieu de culture contenant le principe actif de l'exemple 1 à 0.5% ou 1%.At D2, the culture medium is removed and replaced with culture medium containing the active principle of Example 1 at 0.5% or 1%.
A J3, les cellules sont traitées avec une solution H202 pendant 1h en présence ou non du principe actif de l'exemple 1. A J4, l'étude de la viabilité cellulaire est réalisée par la mesure de coloration au M.T.T. (DO à 540nm).At D3, the cells are treated with an H 2 O 2 solution for 1 h in the presence or absence of the active principle of Example 1. At D4, the study of cell viability is carried out by the measurement of staining with M.T.T. (OD at 540nm).
Le pourcentage de viabilité cellulaire est calculé selon la formule suivante : Fibroblastes stressés traités - Fibroblastes stressés témoins Pourcentage de viabilité cellulaire Fibroblastes normaux témoins- Fibroblastes stressés témoins Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 1 : Tableau 1 DO (UA) Viabilité cellulaire / fibroblastes stressés témoins (%) Fibroblastes non stressés Témoin 0.582 Principe actif de l'exemple 1 à 1% 0.529 Fibroblastes stressés Témoin 0.377 Principe actif de l'exemple 1 à 0.5% 0.478 +49% Principe actif de l'exemple 1 à 1% 0.511 +65% Après un stress H202, la viabilité cellulaire des fibroblastes humains est réduite. Dans les conditions de l'étude elle est réduite de 35%. De plus, on constate qu'un principe actif obtenu à partir de Reseda luteola permet de maintenir la viabilité cellulaire des cellules cutanées. En particulier, testé à 1% sur fibroblastes humains stressés, le principe actif de l'exemple 1 maintient significativement la viabilité cellulaire à 65%. b. Effet sur la production des ROS suite à un stress chimique L'objectif de cette étude est de déterminer l'effet du principe actif selon l'invention (exemple 1) sur la protection cellulaire face à un stress oxydatif H202. Cette étude a été réalisée par quantification des ROS par cytométrie en flux sur fibroblastes humains normaux soumis à une agression H202.The percentage of cell viability is calculated according to the following formula: Stressed stressed fibroblasts - Control stressed fibroblasts Percentage of cell viability Normal control fibroblasts - Controlled stress fibroblasts The results obtained are shown in Table 1: Table 1 OD (AU) Cell viability / fibroblasts control stress (%) Unstressed fibroblasts Control 0.582 Active principle of Example 1 at 1% 0.529 Stressed fibroblasts Control 0.377 Active principle of Example 1 at 0.5% 0.478 + 49% Active principle of Example 1 at 1% 0.511 + 65% After H202 stress, the cell viability of human fibroblasts is reduced. In the conditions of the study it is reduced by 35%. In addition, it is found that an active ingredient obtained from Reseda luteola makes it possible to maintain the cell viability of cutaneous cells. In particular, tested at 1% on stressed human fibroblasts, the active ingredient of Example 1 significantly maintains the cell viability at 65%. b. Effect on the production of ROS following a chemical stress The objective of this study is to determine the effect of the active ingredient according to the invention (Example 1) on cell protection against oxidative stress H202. This study was performed by quantitation of ROS by flow cytometry on normal human fibroblasts subjected to H202 aggression.
Le protocole opératoire est décrit en suivant. A J0, les fibroblastes humains sont ensemencés dans du milieu de culture adéquat. A J2, le milieu de culture est éliminé et remplacé par du milieu de culture contenant du principe actif de l'exemple là 0,5% et 1% (V/V).The operating protocol is described following. At day 0, human fibroblasts are seeded in suitable culture medium. At D2, the culture medium is removed and replaced with culture medium containing the active principle of the example there 0.5% and 1% (V / V).
A J3, les cellules sont traitées avec une solution H202 en présence ou non du principe actif de l'exemple 1 0,5% et 1% (V/V). Après une heure, les cellules sont trypsinées puis incubées avec une sonde H2DCFDA. Une analyse par cytométrie de flux est ensuite réalisée. Le pourcentage de production des ROS est calculé selon la formule suivante : Pourcentage de production de ROS = Fibroblastes stressés traités - Fibroblastes stressés témoins Fibroblastes stressés témoins Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 2.At D3, the cells are treated with an H202 solution in the presence or absence of the active principle of Example 1, 0.5% and 1% (V / V). After one hour, the cells are trypsinized and then incubated with an H2DCFDA probe. Flow cytometric analysis is then performed. The percentage of production of ROS is calculated according to the following formula: Percentage of ROS production = Stressed fibroblasts treated - Control stressed fibroblasts Control stressed fibroblasts The results obtained are presented in Table 2.
Tableau 2 Moyenne d'intensité Production des ROS / fluorescence (UA) Fibroblastes stressés témoins (%) Fibroblastes non stressés Témoins 1,55 Extrait de Reseda luteola 1% 1,10 Fibroblastes stressés Témoins 8,62 Extrait de Reseda luteola 0,5% 4,64 -46% Extrait de Reseda luteola 1% 3,39 -61% Après un stress H202, la production de ROS est augmentée. Dans les conditions de l'étude en particulier, elle est augmentée de 456%. On constate qu'un principe actif issu de Reseda luteola diminue la production de ROS. Testé à 1% sur fibroblastes humains stressés, le principe actif de l'exemple 1 diminue la production 15 de ROS de 61%. A.II - Effet du principe actif issu de Reseda luteola sur l'activité détoxifiante sur fibroblastes humains stressés. a. Effet sur l'accumulation d'agrégats de lipofuscine suite à un stress chimique L'objectif de cette étude est d'évaluer la capacité du principe actif selon l'invention (exemple 1) à limiter la formation d'agrégats de lipofuscine qui altèrent le fonctionnement cellulaire. La lipofuscine est un composé autofluorescent non dégradable qui s'accumule progressivement lors de stress répétés ou avec l'âge. Son accumulation est associée à une réduction de la longévité cellulaire. L'étude a été réalisée par microscopie confocale sur des fibroblastes humains normaux soumis à des traitements modérés et répétés avec d'H202. Le protocole est décrit en suivant. A J0, les fibroblastes humains normaux sont ensemencés dans du milieu adéquat.Table 2 Mean Intensity ROS / Fluorescence Production (AU) Control Stressed Fibroblasts (%) Unstressed Fibroblasts Controls 1.55 Reseda Luteola Extract 1% 1.10 Stressed Fibroblasts Controls 8.62 Reseda Luteola Extract 0.5% 4.64 -46% Reseda luteola extract 1% 3.39 -61% After H202 stress, the production of ROS is increased. In the conditions of the study in particular, it is increased by 456%. It is found that an active ingredient from Reseda luteola decreases the production of ROS. Tested at 1% on stressed human fibroblasts, the active ingredient of Example 1 reduces the ROS production by 61%. A.II - Effect of the active ingredient from Reseda luteola on the detoxifying activity on stressed human fibroblasts. at. Effect on the accumulation of lipofuscin aggregates following chemical stress The objective of this study is to evaluate the capacity of the active principle according to the invention (Example 1) to limit the formation of lipofuscin aggregates which alter the cellular functioning. Lipofuscin is a non-degradable autofluorescent compound that accumulates gradually during repeated stress or with age. Its accumulation is associated with a reduction in cellular longevity. The study was performed by confocal microscopy on normal human fibroblasts subjected to moderate and repeated treatments with H2O2. The protocol is described next. On day 0, normal human fibroblasts are inoculated in suitable medium.
A J3, J4, J5, J6, les cellules sont traitées : - Fibroblastes non stressés : Les fibroblastes humains sont cultivés dans du milieu adéquat en présence ou non du principe actif de l'exemple 1 à 1% (V/V) - Fibroblastes stressés - Témoins : Les fibroblastes humains sont cultivés dans du milieu adéquat puis traités avec une solution H202, 2 fois par jour. - Traités : Les fibroblastes humains sont cultivés dans du milieu adéquat en présence du principe actif de l'exemple 1 à 0,5% et 1% (V/V). Ils sont ensuite traités avec une solution H202 à 401.J.M pendant 2h, 2 fois par jour. A J11, la visualisation de la lipofuscine est réalisée sur microscope, couplé à un logiciel d'analyse d'images. La lipofuscine se matérialise par l'apparition de grains autofluorescents dans le cytoplasme des cellules. La quantité de lipofuscine est proportionnelle à l'intensité d'autofluorescence des cellules. Une analyse quantitative des images a été réalisée à l'aide du logiciel Matlab®. Les résultats sont exprimés en intensité de fluorescence / nombre de cellules (UA). Ils sont donnés dans le tableau 3 : Tableau 3 Formation de lipofuscine Efficacité / Fibroblastes (x103 UA) stressés témoins (%) Fibroblastes non stressés Témoin 391 Principe actif exemple 1 à 1% 323 Fibroblastes stressés Témoin 977 Principe actif exemple 1 à 0,5% 881 -10% Principe actif exemple 1 à 1% 725 -26% L'accumulation cytoplasmique des agrégats de lipofuscine est augmentée lorsque des fibroblastes humains normaux sont soumis à un stress H202 modéré et répété. Dans les conditions de l'étude elle est augmentée de 150%. On constate qu'un principe actif selon l'invention permet de réduire significativement l'accumulation de lipofuscine dans les cellules cutanées. En particulier, testé à 1% sur fibroblastes humains stressés, le principe actif de l'exemple 1 réduit l'accumulation de lipofuscine de 26%. b. Effet sur les protéines carbonylées Le but de cette étude est de quantifier ex vivo, sur des prélèvements réalisés sur volontaires, l'effet du principe actif de l'exemple 1 sur la formation de protéines oxydées sous l'action des UV artificiels. L'étude a été réalisée à partir de prélèvements de stratum corneum de volontaires sains, de sexe féminin présentant une peau normale au niveau des avant-bras. L'étude a été réalisée sur 6 volontaires sains de sexe féminin d'âge moyen de 31 ans. Les échantillons de stratum corneum ont été prélevés à l'aide d'adhésifs adaptés au niveau des avant-bras. Les prélèvements ont été mis en contact avec le principe actif de l'exemple 1 à 3% en solution aqueuse ou de l'eau distillée (véhicule) dans une boite de pétri pendant 24 H. Pour le principe actif de l'exemple 1 à tester, les prélèvements suivants ont été étudiés : - un prélèvement traité avec le principe actif, à 3% en solution aqueuse, soumis à une irradiation pendant 24H - un prélèvement traité avec le véhicule soumis à une irradiation pendant 24H - un prélèvement traité avec le principe actif, à 3% en solution aqueuse, et maintenu à l'abri de la lumière pendant 24H - un prélèvement traité avec le véhicule et maintenu à l'abri de la lumière pendant 24H.On D3, D4, D5, D6, the cells are treated: - Unstressed fibroblasts: Human fibroblasts are cultured in suitable medium in the presence or absence of the active ingredient of Example 1 at 1% (V / V) - Fibroblasts stressed - Controls: Human fibroblasts are cultured in suitable medium and then treated with H202 solution, twice daily. Treated: The human fibroblasts are cultured in suitable medium in the presence of the active principle of Example 1 at 0.5% and 1% (V / V). They are then treated with an H202 solution at 401.J.M for 2 hours, twice a day. At D11, the visualization of the lipofuscin is carried out on a microscope, coupled with an image analysis software. Lipofuscin is produced by the appearance of autofluorescent grains in the cytoplasm of cells. The amount of lipofuscin is proportional to the intensity of autofluorescence of the cells. Quantitative image analysis was performed using Matlab® software. The results are expressed in fluorescence intensity / number of cells (AU). They are given in Table 3: Table 3 Lipofuscin formation Efficacy / Fibroblasts (x103 AU) under control stress (%) Unstressed fibroblasts Control 391 Active ingredient Example 1 to 1% 323 Stressed fibroblasts Control 977 Active ingredient Example 1 to 0.5 % 881 -10% Active ingredient Example 1 to 1% 725 -26% Cytoplasmic accumulation of lipofuscin aggregates is increased when normal human fibroblasts are subjected to moderate and repeated H202 stress. In the conditions of the study it is increased by 150%. It is found that an active ingredient according to the invention can significantly reduce the accumulation of lipofuscin in cutaneous cells. In particular, tested at 1% on stressed human fibroblasts, the active ingredient of Example 1 reduces the accumulation of lipofuscin by 26%. b. Effect on carbonylated proteins The purpose of this study is to quantify ex vivo, on samples taken on volunteers, the effect of the active principle of Example 1 on the formation of oxidized proteins under the action of artificial UV. The study was based on stratum corneum samples from healthy, female volunteers with normal forearm skin. The study was conducted on 6 healthy female volunteers of 31 years of age. The stratum corneum samples were taken using suitable adhesives at the forearm level. The samples were brought into contact with the active ingredient of Example 1 at 3% in aqueous solution or distilled water (vehicle) in a petri dish for 24 h. For the active principle of Example 1 to to test, the following samples were studied: - a sample treated with the active principle, 3% in aqueous solution, subjected to irradiation for 24H - a sample treated with the vehicle subjected to irradiation for 24H - a sample treated with the active ingredient, 3% in aqueous solution, and kept away from light for 24 hours - a sample treated with the vehicle and kept out of light for 24 hours.
Chaque résultat est une moyenne de 6 prélèvements. Les échantillons ainsi préparés ont été soumis à une irradiation artificielle à l'aide d'un simulateur solaire permettant d'obtenir une quantité d'énergie supérieure à 500J/cm2. Les échantillons témoins, non irradiés, ont été maintenus à l'abri de la lumière. Les protéines oxydées ont été directement marquées à l'aide d'une solution de fluoresceine- 5-thiosemicarbazide (FTZ), marqueur spécifique des groupements carbonyles. Plus le taux de protéines oxydées de l'échantillon de stratum corneum est important et plus la fluorescence sera importante dans la longueur d'onde verte. La fluorescence de chaque échantillon est observée grâce à un microscope à fluorescence équipé d'une caméra CCD couplé à un logiciel d'analyse d'image.Each result is an average of 6 samples. The samples thus prepared were subjected to artificial irradiation using a solar simulator to obtain a quantity of energy greater than 500J / cm 2. The non-irradiated control samples were kept out of the light. The oxidized proteins were directly labeled with a solution of fluorescein-5-thiosemicarbazide (FTZ), a marker specific for carbonyl groups. The higher the level of oxidized proteins in the stratum corneum sample, the greater the fluorescence will be in the green wavelength. The fluorescence of each sample is observed by means of a fluorescence microscope equipped with a CCD camera coupled to an image analysis software.
Une technique d'imagerie permettant de séparer les cornéocytes du fond de la plaque a été développée spécifiquement pour ce type d'images. A l'aide de 2 images exposées différemment au moment de la prise de vue et de leur histogramme, on quantifie uniquement l'information des cornéocytes. En effet, les valeurs du fond, qui biaisent le résultat dans une analyse classique où l'image entière est examinée, ne sont ainsi pas prises en compte. La valeur d'intensité de fluorescence était observée pour chaque pixel détecté, et exprimée en niveau de gris. La moyenne de ces valeurs ramenée à la surface mise en évidence, donne le résultat, exprimé en niveau de gris par pixel. La variation de la quantité de protéines oxydées créées sous l'influence de l'irradiation est calculée de la manière suivante : (VMExp - VM non exp) Variation Exp / non exp (%) - VM non exp Avec : VMExp : valeur moyenne de niveau de gris sur l'échantillon exposé VM non exp : valeur moyenne de niveau de gris sur l'échantillon non exposé Le pourcentage de variation observé sous l'effet d'un actif par rapport à un véhicule est calculé de la manière suivante : (VM actif - VM véhicule) 4 (%) - VM véhicule Avec : VM actif : valeur moyenne de niveau de gris mesurée sur l'échantillon traité par l'actif, VM véhicule : valeur moyenne de niveau de gris mesurée sur l'échantillon traité par le véhicule. Les résultats sont présentés dans le tableau 4. Tableau 4 Variation traité / non traité Principe actif de l'exemple 1 -71% Ces résultats montrent bien qu'un principe actif issu de Reseda luteola permet de limiter la quantité de protéines carbonylées engendrée par une irradiation UV. B. Tests ex vivo : Evaluation du principe actif sur l'effet sur l'éclat du teint L'objectif de cette étude était de quantifier in vivo, sur volontaires, l'influence du principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion (exemple 6) sur des paramètres cutanés impliqués dans la notion d'éclat du teint en comparaison à un placebo. L'effet de cet actif a été étudié selon les méthodes suivantes : - Une étude de l'effet lissant sur le microrelief cutané de la patte d'oie par projection de franges - Une évaluation visuelle de l'éclat du teint par un panel d'experts - Une évaluation subjective par les volontaires Les différentes méthodes ont été réalisées avant et après 28 jours d'applications biquotidiennes de l'actif et du placebo en hémi-visage.An imaging technique to separate corneocytes from the bottom of the plate has been developed specifically for this type of images. Using 2 images exposed differently at the time of shooting and their histogram, we only quantify the information of corneocytes. Indeed, the values of the bottom, which bias the result in a conventional analysis where the whole image is examined, are thus not taken into account. The fluorescence intensity value was observed for each pixel detected, and expressed in gray level. The average of these values brought to the highlighted surface, gives the result, expressed in gray level per pixel. The variation of the quantity of oxidized proteins created under the influence of the irradiation is calculated in the following way: (VMExp - VM not exp) Variation Exp / non exp (%) - VM not exp With: VMExp: average value of gray level on exposed sample VM non exp: average value of gray level on the unexposed sample The percentage of variation observed under the effect of an asset with respect to a vehicle is calculated as follows: Active VM - VM Vehicle) 4 (%) - Vehicle VM With: Active VM: average value of gray level measured on the sample processed by the asset, VM vehicle: average value of gray level measured on the treated sample by the vehicle. The results are shown in Table 4. Table 4 Variation treated / untreated Active principle of Example 1 -71% These results show that an active ingredient from Reseda luteola can limit the amount of carbonyl proteins generated by a UV irradiation. B. Ex vivo tests: Evaluation of the active principle on the effect on the radiance of the complexion The objective of this study was to quantify in vivo, on volunteers, the influence of the active ingredient according to the invention formulated at 3% by emulsion (Example 6) on cutaneous parameters involved in the concept of radiance of the complexion in comparison with a placebo. The effect of this active was studied according to the following methods: - A study of the smoothing effect on the cutaneous microrelief of the crow's feet by projection of fringes - A visual evaluation of the brightness of the complexion by a panel of experts - A subjective evaluation by the volunteers The different methods were carried out before and after 28 days of twice-daily application of the active ingredient and placebo in the face.
L'étude a été réalisée sur 20 volontaires sains, de sexe féminin, d'âge moyen 47 ans présentant un teint terne.The study was conducted on 20 healthy volunteers, female, average age 47 years with a dull complexion.
Le protocole de l'étude est le suivant : Entre J-14 et JO, les volontaires appliquent deux fois par jour une crème placebo sur l'ensemble du visage. A JO : - on réalise des acquisitions de chaque patte d'oie par projection de franges et - on évalue l'éclat du teint. Entre JO et J27, on applique deux fois par jour la composition de l'exemple 6 et un placebo en hémi visage A J28 : - on réalise des acquisitions de chaque patte d'oie par projection de franges - on évalue l'éclat du teint, et - on récupère les questionnaires d'auto-évaluation. a. Evaluation de l'effet lissant sur le microrelief cutané de la patte d'oie Les acquisitions ont été réalisées à l'aide d'un appareil de projection de franges dédié à la mesure 3D du relief cutané. Ce système comprend un capteur de mesure associant un projecteur de franges lumineuses et une caméra CCD haute résolution reliée à un logiciel d'acquisition Optocat. Un système de repositionnement de la tête du volontaire selon les 3 axes de déplacement permet de retrouver la même zone de mesure aux différents temps de l'étude.The protocol of the study is as follows: Between D-14 and OJ, the volunteers apply twice a day a placebo cream on the whole face. At OJ: - we make acquisitions of each crow's feet by projection of fringes and - we assess the radiance of the complexion. Between OJ and J27, the composition of Example 6 is applied twice a day and a placebo in a half-face A J28: - acquisitions of each crow's foot are made by fringe projection - the brightness of the complexion is evaluated and - the self-assessment questionnaires are retrieved. at. Evaluation of the smoothing effect on the cutaneous microrelief of the crow's feet The acquisitions were made using a fringe projection device dedicated to the 3D measurement of the cutaneous relief. This system includes a measurement sensor combining a bright fringe projector and a high resolution CCD camera connected to an Optocat acquisition software. A system of repositioning the volunteer's head according to the 3 axes of displacement makes it possible to find the same measurement zone at the different times of the study.
L'effet du produit est mesuré sur une région d'intérêt découpée automatiquement sur l'acquisition originale. Le microrelief de la peau est étudié par deux paramètres de rugosité en 3D > Sa : moyenne arithmétique de rugosité de surface > Sq : moyenne quadratique de rugosité de surface Une diminution de ces différents paramètres est caractéristique d'un lissage du microrelief de la surface étudiée. Le pourcentage de variation observé sous l'effet du principe actif contre placebo est calculé de la manière suivante : (Pdt j28 - Pdt JO) - (PI J28 - Pl ,o) 4 (%) = X100 Pdt jo + (PI J28 - Pl Jo) Avec : Pdt,28: valeur moyenne du côté traité par l'actif, après 28 jours d'applications Pdt,0 : valeur moyenne du côté traité par l'actif à JO Pli28 : valeur moyenne du côté traité par le placebo, après 28 jours d'applications P1,0 : valeur moyenne du côté traité par le placebo à JO Un résumé des résultats correspondant à l'effet du principe actif selon l'invention testé comparé au placebo sur le microrelief cutané au niveau des pattes d'oie étudié par projection de franges, est présenté dans le tableau 5. Tableau 5 Variation / Placebo (%) Paramètre Sa -5.9% Paramètre Sq -5.7% Dans les conditions de cette étude, après 28 jours d'applications biquotidiennes et en comparaison au placebo, la formule contenant le principe actif obtenu à partir de Reseda luteola réduit la rugosité du relief cutané au niveau des pattes d'oie. La formule contenant le principe actif selon l'invention formulé à 3% en émulsion (exemple 6) diminue le paramètre Sa de 5,9% (p=0,0036) ainsi que le paramètre Sq de 5,7% 15 (p=0,0066). b. Evaluation de l'éclat du teint L'évaluation de l'éclat du teint a été réalisée en aveugle par deux experts préalablement entraînés à juger différents paramètres représentatifs de l'éclat du teint. L'évaluation de l'éclat du teint se fait à partir d'échelles de scores (de 1 à 10) pour les 20 paramètres suivants : - le grain de peau, l'irrégularité de la surface cutanée est corrélée à l'aspect terne de la peau, - la transparence de la peau, qui permet d'apercevoir les veinules à travers la peau : plus la peau est fine, plus elle laisse passer la lumière ce qui donne un effet bonne 25 mine, - le rayonnement de la peau, caractéristique d'un teint éclatant : plus l'intensité des accroches de lumière sur les zones saillantes du visage est importante, plus la peau est lumineuse, - la couleur rose claire, qui permet de caractériser un teint éclatant : plus le teint est rosé, plus il est perçu comme frais. L'évaluation ces paramètres se fait sur les zones suivantes : pommettes, front, menton et yeux. Le pourcentage de variation observé sous l'effet du principe actif contre placebo est calculé de la manière suivante : (Pdt j28 - Pdt JO) - (PI J28 - Pl ,o) 4 (%) - X100 Pdt jo + (Pl j28 - Pl ,o) Avec : Pdt,28: valeur moyenne du côté traité par l'actif, après 28 jours d'applications Pdt,0 : valeur moyenne du côté traité par l'actif à JO Pli28 : valeur moyenne du côté traité par le placebo, après 28 jours d'applications P1,0 : valeur moyenne du côté traité par le placebo à JO Un résumé des résultats correspondant à l'effet du principe actif selon l'invention comparé au placebo sur l'éclat du teint évalué visuellement par expert, est présenté dans le tableau 6.The effect of the product is measured on a region of interest cut off automatically on the original acquisition. The microrelief of the skin is studied by two roughness parameters in 3D> Sa: arithmetic average of surface roughness> Sq: quadratic average of surface roughness A decrease of these different parameters is characteristic of a smoothing of the microrelief of the studied surface . The percentage of variation observed under the effect of the active ingredient against placebo is calculated as follows: (Pdt j28 - Pdt OJ) - (PI J28 - Pl, o) 4 (%) = X100 Pdt jo + (PI J28 - Pl Jo) With: Pdt, 28: average value of the side treated by the asset, after 28 days of applications Pdt, 0: average value of the side treated by the asset at OJ Pli28: average value of the side treated with the placebo after 28 days of applications P1.0: average value of the side treated with the placebo at OJ A summary of the results corresponding to the effect of the active principle according to the tested invention compared to placebo on the cutaneous microrelief at the level of the legs of the geese studied by fringe projection, is presented in Table 5. Table 5 Variation / Placebo (%) Parameter Sa -5.9% Parameter Sq -5.7% Under the conditions of this study, after 28 days of twice-daily applications and in comparison with the placebo, the formula containing the active ingredient obtained from Reseda luteola r reduces the roughness of the cutaneous relief on the crow's feet. The formula containing the active ingredient according to the invention formulated at 3% emulsion (example 6) decreases the Sa parameter by 5.9% (p = 0.0036) and the Sq parameter by 5.7% (p = 0.0066). b. Evaluation of the radiance of the complexion The evaluation of the radiance of the complexion was carried out blind by two experts previously trained to judge various parameters representative of the radiance of the complexion. The evaluation of the radiance of the complexion is done from scales of scores (from 1 to 10) for the following 20 parameters: - the skin texture, the irregularity of the cutaneous surface is correlated with the dull aspect of the skin, - the transparency of the skin, which makes it possible to perceive the venules through the skin: the finer the skin, the more it allows the light to pass, which gives a good effect, - the radiance of the skin , characteristic of a radiant complexion: the greater the intensity of light catching on the prominent areas of the face, the more luminous the skin is, - the light pink color, which makes it possible to characterize a radiant complexion: the more the complexion is pink the more it is perceived as fresh. The evaluation of these parameters is done on the following areas: cheekbones, forehead, chin and eyes. The percentage of variation observed under the effect of the active ingredient against placebo is calculated as follows: (Pdt j28 - Pdt OJ) - (PI J28 - Pl, o) 4 (%) - X100 Pdt jo + (Pl j28 - Pl, o) With: Pdt, 28: average value of the side processed by the asset, after 28 days of applications Pdt, 0: average value of the side processed by the asset at OJ Pli28: average value of the side processed by the placebo, after 28 days of applications P1,0: average value of the side treated with placebo at OJ A summary of the results corresponding to the effect of the active ingredient according to the invention compared to placebo on the radiance of the complexion visually assessed by expert, is presented in Table 6.
Tableau 6 Variation / Placebo (%) Grain de peau +8,0% Transparence +10,4% Rayonnement +11,5% Couleur rose +10,2% Dans les conditions de cette étude, après 28 jours d'applications biquotidiennes et en comparaison au placebo, le principe actif selon l'invention favorise une amélioration des paramètres caractéristiques de l'éclat du teint.Table 6 Variation / Placebo (%) Skin Grain + 8.0% Transparency + 10.4% Radiation + 11.5% Color Pink + 10.2% Under the conditions of this study, after 28 days of twice-daily application and in comparison with placebo, the active ingredient according to the invention promotes an improvement in the characteristic parameters of the radiance of the complexion.
En effet : - le grain de peau est affiné (+8,0%), - la transparence de la peau est augmentée (+ 10,4%) ainsi que le rayonnement (+11,5%), donnant ainsi un effet bonne mine et une peau plus lumineuse, - le teint plus rosé et plus frais, mesuré par une augmentation du paramètre couleur rose (+10,2%). c. Evaluation subjective Les sensations ressenties par chacun des volontaires ayant utilisé le principe actif de l'exemple 1 formulé à 3% en émulsion (exemple 6) ainsi que la formule placebo pendant 28 jours d'applications biquotidiennes ont été évaluées à l'aide de questionnaires d'auto- évaluation. Le traitement des données de l'évaluation subjective est réalisé par cumul des réponses "plutôt d'accord" et "d'accord" est effectué. Les résultats des questions fermées correspondant à l'évaluation subjective du principe actif selon l'invention comparé au placebo après 28 jours d'applications biquotidiennes, sont présentés dans le tableau 7.In fact: - the skin texture is refined (+ 8.0%), - the transparency of the skin is increased (+ 10.4%) and the radiation (+ 11.5%), thus giving a good effect mine and a brighter skin, - the complexion more rosy and fresher, measured by an increase of the pink color parameter (+ 10.2%). vs. Subjective evaluation The sensations felt by each volunteer who used the active principle of Example 1 formulated with 3% emulsion (Example 6) and the placebo formula for 28 days of twice-daily application were evaluated using questionnaires. self-assessment. The processing of the subjective evaluation data is done by combining the "rather agree" and "agree" answers. The results of the closed questions corresponding to the subjective evaluation of the active principle according to the invention compared to placebo after 28 days of twice-daily applications, are presented in Table 7.
Tableau 7 Cumul des réponses "plutôt d'accord" et "d'accord" (%) Côté traité par Côté traité par Placebo le principe actif selon l'invention Avec cette émulsion, ma peau paraît plus lumineuse 75% 95% Avec cette émulsion, mon 75% 95% teint est plus éclatant Avec cette émulsion, mon 75% 95% grain de peau est affiné Avec cette émulsion, mes 60% 85% rides et ridules sont lissées Avec cette émulsion, mon 45% 75% teint paraît plus frais (effet rosé sur les pommettes) Ces résultats montrent que : - 95% des volontaires trouvent que la formule contenant le principe actif issu de Reseda luteola rend la peau plus lumineuse et le teint plus éclatant, contre 75% pour le placebo, - 95% des volontaires trouve que la formule contenant le principe actif issu de Reseda luteola affine le grain de peau, contre 75% pour le placebo, - 85% des volontaires trouvent que la formule contenant le principe actif issu de Reseda luteola lisse les rides et ridules, contre 60% pour le placebo, - 75% des volontaires trouvent que leur teint paraît plus frais avec la formule contenant le principe actif issu de Reseda luteola, contre 45% pour le placebo. Dans les conditions de cette étude, après 28 jours d'applications biquotidiennes, et en comparaison au placebo, le principe actif selon l'invention permet donc : - de lisser le microrelief cutané de la patte d'oie, et - d'améliorer de façon significative les paramètres importants entrant en jeu dans la perception de l'éclat du teint. De plus, d'une manière générale, l'évaluation subjective a permis de mettre en évidence une efficacité supérieure du principe actif selon l'invention par rapport à la formule placebo. L'utilisation d'un principe actif obtenu à partir de Reseda luteola favorise ainsi l'amélioration des paramètres importants intervenants dans l'appréciation de l'éclat du teint.Table 7 Cumulative responses of "somewhat agree" and "agree" (%) Side treated by Side treated with placebo the active ingredient according to the invention With this emulsion, my skin appears brighter 75% 95% With this emulsion , my 75% 95% complexion is more radiant With this emulsion, my 75% 95% skin texture is refined With this emulsion, my 60% 85% lines and wrinkles are smoothed With this emulsion, my 45% 75% complexion appears more fresh (pink effect on the cheekbones) These results show that: - 95% of volunteers find that the formula containing the active ingredient from Reseda luteola makes the skin brighter and the complexion more radiant, compared to 75% for the placebo, - 95 % of volunteers found that the formula containing the active ingredient from Reseda luteola refines skin texture, compared to 75% for placebo, - 85% of volunteers found that the formula containing the active ingredient from Reseda luteola smooths lines and wrinkles compared to 60% for placebo, - 7 5% of volunteers find that their complexion seems fresher with the formula containing the active ingredient from Reseda luteola, against 45% for placebo. Under the conditions of this study, after 28 days of twice-daily applications, and in comparison with placebo, the active ingredient according to the invention thus makes it possible: to smooth the cutaneous microrelief of the crow's feet, and to improve significantly the important parameters involved in the perception of the radiance of the complexion. In addition, in general, the subjective evaluation has made it possible to demonstrate a superior efficacy of the active ingredient according to the invention compared to the placebo formula. The use of an active ingredient obtained from Reseda luteola thus favors the improvement of the important parameters involved in the appreciation of the radiance of the complexion.
Ces différents essais montrent donc bien les effets cosmétiques d'un principe actif obtenu à partir de Reseda luteola et d'une composition cosmétique l'incluant, sur la protection des cellules face à un stress, la détoxification des cellules, et visuellement, sur l'état de surface de la peau.These different tests therefore clearly show the cosmetic effects of an active ingredient obtained from Reseda luteola and a cosmetic composition including it, on the protection of cells against stress, the detoxification of cells, and visually, on the skin. surface condition of the skin.
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