FR2984317A1 - Composes chelateurs de metal presentant au moins une chaine polyaminee. - Google Patents

Abstract

L'invention concerne des composés chélateurs de métaux comprenant un ou plusieurs motif(s) 8-hydroxyquinoléique(s) substitué(s) en position 2 par un groupe azoté comportant une chaîne polyaminée, la chaîne polyaminée étant N-substituée sur ledit groupe azoté, la composition le contenant, leurs applications dans le domaine thérapeutique et notamment dans le traitement des maladies liées à une anomalie dans la régulation du métabolisme des métaux conduisant à une surcharge en métal dans les cellules humaines ou animales.

Description

Composés chélateurs de métal présentant au moins une chaîne polyaminée. La présente invention se rapporte à des molécules chimères associant un ou plusieurs groupes chélateurs de métal de type 8-hydroxyquinoléine à au moins une chaîne polyaminée. 5 Ces composés sont ci-après désignés par l'acronyme « Quilamine ». L'invention concerne également l'utilisation dans le domaine thérapeutique de tels Quilamines, notamment dans le traitement ou la prévention des maladies prolifératives et/ou liées à une surcharge en métal telles que des cancers et des maladies neurodégénératives chez l'homme ou l'animal. 10 De nombreux ions métalliques issus du fer, du cuivre, du manganèse, du zinc, interviennent dans plusieurs réactions biochimiques et métaboliques de l'organisme. Les besoins de l'organisme varient généralement selon le type d'ions métalliques et selon le lieu des réactions biochimiques et métaboliques mises en jeu. Afin d'assurer un bon fonctionnement de l'organisme, ces ions métalliques doivent être présents à des teneurs 15 déterminées pour éviter des surcharges ou carences par exemple. En particulier, les surcharges en ions métalliques comme le fer et le cuivre sont néfastes voire toxiques pour l'organisme car ils catalysent la formation d'espèces réactives de l'oxygène. Les surcharges en ions métalliques peuvent avoir diverses origines: génétiques, métaboliques, apports exogènes nutritionnels ou transfusions sanguines répétées. En particulier, elles peuvent être liées à des 20 maladies telles que des cancers ou tumeurs, des maladies neurodégénératives, dans lesquelles se produit un déséquilibre de l'homéostasie des ions métalliques. Dans le cas des cancers, les cellules tumorales prolifèrent de manière incontrôlée et requièrent des quantités anormalement élevées en ions métalliques comme le fer et le cuivre, pour leur croissance, comparativement à des cellules saines. 25 Les chélateurs initialement proposés pour le traitement des surcharges primaires en fer comme le DesféralfD, et ceux plus récemment développés pour le traitement des surcharges secondaires (Thalassémies), comme la défériprone® et le déférasirox®, inhibent la prolifération de cellules tumorales hépatiques de rat en culture (Richardson, D.R., Potential of iron chelators as effective antiprolifèrative agents. Can J Physiol Pharmacol, 1997. 75(10- 30 11): p. 1164-80). Il a été montré que l'activité antiproliférative de la Quilamine HQ1-44 est supérieure à celle du déférasirox® dans les cellules tumorales humaines d'origine hépatique et entérocytaire. Le Desféralll inhibe in vitro et in vivo, la croissance des cellules de mélanomes (Richardson, D., P. Ponka, and E. Baker, The effect of the iron(III) chelator, 1 on iron and transferrin uptake by the human malignant melanoma cell. Cancer Res, 1994. 54(3): p. 685-9) et d'hépatomes(Yamasaki, T., S. Terai and I. Sakaida, Deferoxamine for advanced hepatocellular carcinoma. The New England Journal of Medicine, 2011, 365(6): p. 576-77). Lors d'essais cliniques préliminaires, ce chélateur s'est avéré efficace dans le traitement de leucémies et de neuroblastomes. Par ailleurs, le mode d'action d'agents chimiothérapeutiques cytotoxiques, comme la doxorubicine et la Bléomycine, fait partiellement intervenir leur capacité chélatante du fer et du cuivre, tout comme le clioquinol, dérivé de la 8 hydroxyquinoléine (Ding, W.Q., et al., Anticancer activity of the antibiotic clioquinol. Cancer Res, 2005. 65(8): p. 3389-95).

A l'inverse, l'addition de fer exogène stimule la prolifération des cellules tumorales. La nécessité de fer lors du cycle cellulaire est illustrée par l'hyperexpression sur la membrane plasmique des cellules proliférantes du récepteur de la transferrine qui permet l'entrée du fer lié à la transferrine dans la cellule. La ferroportine, protéine d'exportation du fer jouant un rôle clé dans la régulation systémique de ce métal, est un marqueur diagnostique des cancers du sein. L'augmentation de l'expression des protéines d'importation du fer (DCYTB, DMT1 et TfR1) et la diminution de l'expression des protéines d'exportation du fer (HEPH et de FPN), qui conduisent à une augmentation du fer intracellulaire, ont été décrites lors de la progression du cancer colorectat De plus, l'implication du métabolisme des polyamines dans la réplication cellulaire et donc dans les processus prolifératifs font de ce métabolisme l'une des cibles privilégiées des drogues antiprolifératives, en même temps que la source de nouveaux signaux circulants susceptibles de révéler l'existence d'un processus néoplasique au sein d'un organisme. Les polyamines que l'on trouve non seulement à l'intérieur même des cellules mais également à l'état circulant dans les liquides biologiques de l'organisme, tels que le sang sont issues de trois sources principales : - la prolifération cellulaire physiologique (croissance et/ou renouvellement des cellules constitutives de l'organisme) et tumorale, - l'alimentation, - les bactéries intestinales. La biosynthèse et la captation de ces molécules ubiquitaire par le système de transport des polyamines (STP) est fortement activée dans les cellules tumorales. L'activité 2 antiproliférative de chélateurs du fer comme le déférasirox® et le 0-trensox est associée à la déplétion intracellulaire en fer qu'ils provoquent et à l'inhibition du métabolisme des polyamines (Gaboriau, F., et al., Modulation of cell proliferation and polyamine metabolism in rat liver cell cultures by the iron chelator 0-trensox. Biometals, 2006. 19(6): p. 623-32).

Les espèces réactives de l'oxygène produites en situation de surcharges en fer ou/et en cuivre au niveau cérébral provoquent des altérations des lipides membranaires, des protéines et de l'ADN des cellules nerveuses qui participent à l'étiologie de désordres neurodégénératifs comme les maladies d'Alzheimer et de Parkinson. Des concentrations élevées en fer sont observées au niveau du système nerveux central (SNC). Indépendamment de leur implication dans la catalyse des espèces réactives de l'oxygène, les métaux tels que le fer et le cuivre semblent également jouer un rôle important dans l'agrégation des protéines. Ils sont donc susceptibles de fournir un lien entre les deux processus pathologiques de l'agrégation des protéines et des dommages oxydatifs caractérisant les maladies neurodégénératives comme les maladies de Parkinson (PD) et d'Alzheimer (AD) et celles à prions. Parmi les chélateurs du fer testés pour leur efficacité d'inhiber la neurodégénérescence, le Clioquinol qui fait actuellement l'objet d'essai clinique, présente la meilleure efficacité de protection dans des modèles animaux de AD et PD . Le développement de chélateurs de ces ions métalliques, notamment du fer ou du cuivre, constitue une voie de recherche intéressante dans le traitement de maladies prolifératives et/ou liées à une surcharge métallique dans l'organisme, telles que des cancers ou certaines maladies neurodégénératives. On recherche des chélateurs capables d'induire une déplétion en métal dans la cellule suffisamment importante pour créer une carence métallique intracellulaire et réduire la prolifération cellulaire et la production locale d'espèces réactives de l'oxygène.

Toutefois, un des problèmes de ces chélateurs est qu'ils sont captés et complexent les ions métalliques indifféremment dans les cellules saines et malades. Même si les besoins en fer ou en cuivre des cellules tumorales sont plus élevés que ceux des cellules normales, il est préférable de vectoriser le chélateur vers les cellules tumorales, afin d'éviter une trop grande toxicité des traitements.

Des études se sont penchées sur le rôle des polyamines comme vecteurs intracellulaires de chélateurs du fer. Les polyamines naturelles, telles que la putrescine, la spermine, la spermidine, la norspermine et la norspermidine, tout comme le fer, le cuivre, le manganèse et le zinc sont indispensables pour la croissance cellulaire. La carence en polyamines provoquées par un traitement par un inhibiteur de la synthèse des polyamines, une 3 décontamination du tractus intestinal par un antibiotique et une alimentation appauvrie en polyamine, ralentit la croissance tumorale chez l'animal (Seiler N. Thirty years of polyaminerelated approaches to cancer therapy. Retrospect and prospect. Part 1. Selective enzyme inhibitors. Current drug targets. 2003, 4:p. 537-64).

Les cellules cancéreuses présentent un métabolisme (biosynthèse et captation) des polyamines particulièrement amplifié. Le Système de Transport des Polyamines (STP) qui assure le transport des polyamines, est particulièrement suractivé dans ces cellules. La reconnaissance et le transport des polyamines n'étant pas spécifique des polyamines naturelles, cela a permis de développer des analogues de polyamines naturelles pouvant être reconnus et transportés par le STP. Dans la demande de brevet EP 1 667 727, il est connu d'utiliser des chélateurs de type benzylmaltol (défériprone® ou CP20) ou poly(acide hydroxamique) couplés à une chaîne polyamine dans le traitement du cancer ou d'une tumeur, et dans le traitement d'un sujet souffrant d'un état de surcharge en métal.

Toutefois, ces chélateurs présentent une faible affinité pour le fer et ne donnent pas entière satisfaction pour le développement d'un traitement thérapeutique, par exemple dans le traitement des cancers. En particulier, l'action antiproliférative de ces chélateurs sur des cellules hépatiques en culture (lignée HuH7) est peu efficace. Le demandeur a maintenant découvert une nouvelle famille de composés associant chélateur(s) de métaux et polyamine(s), appelés Quilamines. Ces composés exercent de manière efficace et sélective une action antiproliférative sur les cellules malades et remédient aux inconvénients précités. Les Quilamines selon l'invention sont des composés comprenant au moins un motif 8-hydroxyquinoléine substitué en position 2, c'est-à-dire en position alpha de l'atome d'azote constitutif du cycle 8-hydroxyquinoléine, par au moins une chaîne polyaminée. Grâce à leur structure particulière, les Quilamines selon l'invention sont capables de traiter de manière ciblée, moins toxique, et plus efficace, des maladies prolifératives et/ou liées à une surcharge en métal dans les cellules humaines ou animales, telles que des cancers ou des maladies neurodégénératives par rapport aux chélateurs connus. En particulier, on a observé que sur un même type de lignée de cellules, une Quilamine selon l'invention présentait une forte activité antiproliférative pouvant même être supérieure à celle des chélateurs classiques du fer, pour une même concentration en chélateurs. Les Quilamines selon l'invention présentent une activité antiproliférative renforcée ou du moins inchangée en présence de fer exogène, comparativement aux 4 chélateurs classiques du fer. Elles sont donc particulièrement efficaces pour traiter des maladies liées à une surcharge sidérique dans les cellules humaines ou animales. De plus, les Quilamines selon l'invention présentent l'avantage d'être peu toxiques et conviennent pour différentes applications dans le domaine thérapeutique. Elles présentent une faible cytotoxicité pour les cellules saines, notamment grâce à leur forte sélectivité de reconnaissance par le système de transport des polyamines, leur permettant de cibler sélectivement les cellules tumorales. Un autre objet de la présente demande concerne les Quilamines selon l'invention comme agents de traitement thérapeutique. L'invention a également pour objet les Quilamines selon l'invention comme agents de traitement des maladies prolifératives et/ou des maladies neurodégénératives liées à une surcharge en métal, par exemple en fer et/ou en cuivre. Les Quilamines selon l'invention sont particulièrement utiles comme agents antiprolifératifs et/ou agents cytotoxiques des cellules cancéreuses ou tumorales. Les composés selon l'invention pourront être obtenus selon des procédés de préparation dans lesquels la ou les chaîne(s) polyaminée(s) est (ou sont) couplée(s) au(x) motif(s) 8-hydroxyquinoléiques par des étapes d' amination réductrice, substitution nucléophile ou addition de Mickaël pour donner une Quilamine selon l'invention. Ces procédés de préparation présentent l'avantage d'être simples à réaliser. En particulier, ils permettent de synthétiser les Quilamines selon l'invention en moins de quinze étapes, et de préférence en moins de douze étapes. D'autres objets, aspects ou caractéristiques de l'invention apparaîtront plus clairement au vu de la description et des exemples. L'invention concerne des composés comprenant au moins un motif 8- hydroxyquinoléine comportant en position 2, c'est-à-dire en position alpha de l'atome d'azote constitutif du cycle 8-hydroxyquinoléine, au moins une chaîne polyaminée. Plus précisément, les Quilamines selon l'invention répondent à la formule générale (I) suivante, ou à une de ses formes conjuguées, ses sels ou solvates : a (I) 5 dans laquelle : Ri, R2, R3, R4 et R5 sont choisis indépendamment les uns des autres parmi un atome d'hydrogène, un groupe hydrocarboné linéaire ou ramifié, saturé, insaturé, cyclique ou aromatique, comprenant de 1 à 10 atomes de carbone, un groupe hydrocarboné cyclique, aliphatique ou aromatique, comprenant de 4 à 12 atomes de carbone, un halogène, un thiol, un hydroxyle, une amine de préférence secondaire ou tertiaire, un éther, un thioéther ; R6 est un hydroxyle ; a est égal à 0 ou 1 avec : -lorsque a est égal à 0, M est un groupe répondant à la formule (I') suivante : [Li_M dans laquelle : b étant égal à 0 ou 1, L représentant un groupe alkyle ayant de un à quatre atomes de carbone, un groupe C=0 ou C=S, Al répondant à la formule générale (X) ou (Y): Al B1 -N R11 B2 -N R12 B3 N R14 R13 s h (X) dans laquelle : Rn, R12, R13 et R14 sont choisis indépendamment les uns des autres parmi des atomes d'hydrogène, des groupes hydrocarbonés linéaires ou ramifiés, saturés, insaturés, cycliques ou aromatiques comprenant de 1 à 12 atomes de carbone, et des groupes protecteurs de fonction amine, Bi, B2 et B3 sont choisis indépendamment les uns des autres parmi des groupes hydrocarbonés linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, comprenant de 2 à 6 atomes de carbone i et j, identiques ou différents, sont égaux à 0 ou à 1, h est un entier allant de 0 à 4; 6 J R15 lo B1 N 101 R17 Bi3 _ Ne_ RO 4 I13 h (Y) dans laquelle : R:12, R,13, R,14, R15, R16 et K-17 sont choisis indépendamment les uns des autres parmi des groupes hydrocarbonés linéaires ou ramifiés, saturés, insaturés, cycliques ou aromatiques comprenant de 1 à 12 atomes de carbone, et des groupes protecteurs de fonction amine. Bi et B2 sont choisis indépendamment les uns des autres parmi des groupes hydrocarbonés linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, comprenant de 2 à 6 atomes de carbone B'3 est choisi parmi des groupes hydrocarbonés linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, 10 comprenant de 2 à 6 atomes de carbone, pouvant être interrompus par une ou plusieurs fonctions amines secondaires -NH- et/ou une ou plusieurs fonctions amines tertiaires -NR11-, NR12_. i et j, identiques ou différents, sont égaux à 0 ou à 1, h est un entier allant de 0 à 4 ; 15 -et lorsque a est égal à 1, M est un groupe répondant à la formule (I") suivante : H H D1-N - D2 -N A2 (I'') dans laquelle : c et c', identiques ou différents, étant égaux à 0 ou à 1, L et L', identiques ou différents, représentant un groupe alkyle ayant de 1 à 4 20 atomes de carbone, un groupe C=0 ou C=S, D1 et D2, identiques ou différents, représentant un groupe hydrocarboné, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 5 atomes de carbone A2 étant identique ou différent de Al et répondant à la formule (X) ou (Y); R,4, R'5 -, K et R'6, sont choisis indépendamment les uns des autres parmi un 25 atome d'hydrogène, un groupe hydrocarboné linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, comprenant de 1 à 10 atomes de carbone, un groupe hydrocarboné cyclique, aliphatique 7 ou aromatique éventuellement substitué, comprenant de 4 à 12 atomes de carbone, un halogène, un thiol, un hydroxyle, une amine de préférence secondaire ou tertiaire, un éther, un thioéther. La Quilamine selon l'invention est un chélateur de métaux. Elle est capable de se lier avec un atome métallique ou ion métallique en formant plusieurs (au moins deux) liaisons de coordination chélateur-métal pour former un complexe métallique, notamment avec un atome métallique de la série 3d des métaux de transition, en particulier le fer, le cuivre, le manganèse et/ou le zinc. La Quilamine selon l'invention est notamment capable de chélater un ion du fer ayant un degré d'oxydation égal à deux (Fe(II) ou Fe2+) ou trois (Fe(III) ou Fe3+), un ion du cuivre ayant un degré d'oxydation égal à deux (Cu(II) ou Cu2+), un ion du manganèse ayant un degré d'oxydation égal à deux (Mn(II) ou Mn2+) ou un ion du zinc ayant un degré d'oxydation égal à deux (Zn(II) ou Zn2+). De préférence, la Quilamine est un chélateur du fer. L'affinité de complexation de la Quilamine avec l'ion métallique, dans l'organisme, traduit la capacité chélatante ou pouvoir chélatant de la Quilamine. Cette affinité peut être évaluée en mesurant la valeur de pW correspondant à -log de la concentration en ion métallique W libre, c'est-à-dire non complexé par la Quilamine, pour un rapport des concentrations respectives de Quilamine (10 micromoles par litre) et d'ion métallique (1 micromole par litre) égal à 10, à 25 °C et pH 7,4. Plus la valeur de pW est élevée, plus l'affinité de la Quilamine avec l'ion métallique est grande. L'affinité de la Quilamine avec le fer sous sa forme ferrique (Fe(III)) et sa forme ferreuse (Fe(II)) est mesurée respectivement par pFe3+ et pFe2+ à pH physiologique (pH = 7,4), à 25 °C. Dans ces conditions de mesure, la Quilamine selon l'invention présente à pH physiologique, une valeur pFe2+ et/ou pFe3+ strictement supérieure à celle mesurée dans des conditions identiques pour les ligands de faibles poids moléculaires habituellement présents dans les cellules humaines ou animales complexant le pool de fer labile (Labil Iron Pool ou LIP). Les ligands de faibles poids moléculaires habituellement présents dans les cellules peuvent être par exemple de l'albumine, du citrate (pFe3+/citrate = 19,3 à pH = 7,4), de l'ascorbate. En particulier, le pFe2+ ou pFe3+ du complexe Quilamine-fer est strictement supérieur à 20, et de préférence allant de 25 à 27 pH physiologique. A pH physiologique, la Quilamine forme un complexe Quilamine-Fe(III) présentant de préférence une stoechiométrie ligands/métal de 2/1, La stoechiométrie ligand/métal peut par exemple être déterminée par la méthode des variations continues en utilisant la transition 8 caractéristique dans le spectre d'absorption du complexe Quilamine-Fe(III) à 580nm, pour des concentrations en chélateur et en fer allant de 0 à 500 micromoles par litre. La ou les chaînes polyaminées de la Quilamine est ou sont reconnues par le système de transport des polyamines des cellules et permettent à la Quilamine d'être véhiculée vers les cellules. De préférence, la ou les chaînes polyaminées de la Quilamine selon l'invention est ou sont cationiques ou cationisables. Par cationique, on entend qui comporte une ou plusieurs fonctions amines quaternaires, telles que la charge ionique globale portée par la chaîne aminée est positive. En ce sens, la chaîne polyaminée peut être mono ou polycationique. Par cationisable, on entend qui comporte une ou plusieurs fonctions amines primaires et/ou secondaires, en particulier sous forme de sel, s'ionisant spontanément en cation(s) dans le milieu d'utilisation de la Quilamine, au pH physiologique. La ou les chaînes polyaminées peuvent comporter un motif putrescine, spermine, spermidine, ou un analogue non naturel de ces composés tel que homospermine, homospermidine, norspermine, Avantageusement, la ou les chaînes polyaminées comportent un motif analogue non naturel à la putrescine, spermine ou spermidine, tel que homospermine, homospermidine, norspermine, leur permettant d'être reconnues par le système de transport des polyamines, mais sans être dégradées par les enzymes de la voie de rétroconversion oxydative. Dans un premier mode de réalisation plus préféré, a est égal à zéro et b est égal à un. Dans un second mode de réalisation particulièrement préféré, a est égal à zéro, b est égal à un, et L représente un groupe CH2' Dans un troisième mode de réalisation particulièrement préféré, a est égal à zéro, b est égal à un, et L représente un groupe CH2-CH2' Dans un quatrième mode de réalisation particulièrement préféré, a est égal à zéro, b est égal à un, et L représente un groupe C=O' Dans un cinquième mode de réalisation particulièrement préféré, a est égal à zéro, b est égal à un, et L représente un groupe C=S' Dans un sixième mode de réalisation plus préféré, lorsque a est égal à un, c et c' sont identiques, L et L' sont identiques, Dl et D2 sont identiques, et/ou R1, R2, R3, R4, R5 et R6 sont , - identiques à R'1, R,4 R'5 et R'6 respectivement. De préférence, R'6 est un hydroxyle. Dans un septième mode de réalisation, la Quilamine selon l'invention répond à la 9 formule générale (I), ou à une de ses formes conjuguées, ses sels ou solvates, à l'exclusion du H N NH2 H composé suivant : OH De préférence, Bi, B2, B3 sont choisis parmi des groupes n-propyle et n-butyle et B'3 est choisi parmi les groupes n-propyle et n-butyle pouvant être interrompus par une ou plusieurs fonctions amines secondaires -NH- et/ou un ou plusieurs fonctions amines tertiaires -NR11-, NR12_. Dans un mode de réalisation particulier, le ou les groupes Al et A2 mentionnés plus haut peuvent être choisis parmi : a) ceux de formule (X) dans laquelle : 131 etB3 désignent des groupes n-butyle, i est égal à 1, j est égal à zéro, h est un entier, pair ou impair, allant de 1 à 4 , Rn et R14 sont des atomes d'hydrogène, étant tel que défini précédemment ; et b) ceux de formule (X) dans laquelle : 131 etB3 désignent des groupes n-propyle, i est égal à 1, j est égal à zéro, h est un entier, pair ou impair, allant de 1 à 4 , Rn et R14 sont des atomes d'hydrogène, étant tel que défini précédemment ; Dans un mode de réalisation préféré des formules (X) et (Y), B3 et B'3 ne désignent pas , , , - un groupe n-propyle et R13 R14 R,13 R,14 et K17 ne désignent pas simultanément un atome d'hydrogène. En d'autres termes, de préférence, la chaîne polyaminée ne se termine pas par un groupe n-propylamine primaire. De telles chaînes polyaminées sont susceptibles d'être dégradées par des enzymes amine oxidase présentes dans le sérum (Polyamine oxidase et semicarbazide sensitive amine oxidase) et générer un aldéhyde cytotoxique et du peroxyde d' hydrogène. Dans un autre mode de réalisation préféré, la Quilamine répond à la formule (I) dans laquelle a est nul, b est égal à un et L est un groupe CH2 et Al ou A2 répond à la formule (X) dans laquelle h = i = 1 et 131 est un groupe n-propyl. Ces Quilamines présentent un pouvoir chélatant particulièrement important. Parmi toutes les Quilamines utilisables selon l'invention, on préfère celles répondant à la formule (I) ou à l'une de leurs formes conjuguées, sels, ou solvates, dans laquelle : R1 à R5 sont choisis indépendamment les uns des autres parmi un atome d'hydrogène, un groupe hydrocarboné linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, comprenant de 1 à 10 atomes de carbone ; R6 est un hydroxyle ; a est égal à zéro ; b est égal à un ; L est un groupe alkyle en Cl-C2; et le groupe Al répond à la formule (X) dans laquelle Rn, R12 R13 et - K14 étant choisis , 10 indépendamment les uns des autres parmi des atomes d'hydrogène, et des groupes protecteurs de fonction amine ; BI, B2 et B3 identiques ou différents étant des groupes n-propyle et/ou n-butyle ; i et j identiques ou différents étant égaux à un ou à zéro ; h étant égal à un. En particulier, on préfère celles correspondant aux formules suivantes, ou à l'une de leurs formes conjuguées, sels, ou solvates : H I' NH2 N" H (HQ1-44) OH (2-[4-(4-aminobutyl)aminobutylJaminomethylquinoléin-8-ol) H (HQ1-444) N/NN 2 H OH (2-{4-14-(4-aminobutyl)aminobutyliaminobutyl}aminomethylquinoléin-8-ol) N N H H (HQ1-443) H2 H OH (2-{4-[4-(3-aminopropyl)aminobutyliaminobutyl}aminomethylquinoléin-8-01) OH (HQ1-43) H H (2-[4-(3 -aminopropyl)aminobutyl] aminomethylquinoléin-8-ol) 11 H H H OH (HQ1-434) (2- { 4- [3 -(4-aminobutyl)aminopropyl] aminobutyl } aminomethylquinoléin-8-ol) H N H , NH NN2 OH (HQ1-433) (2- {4- [3-(3-aminopropyl)aminopropyl]aminobutyl } aminomethylquinoléin-8-ol) H H N NH2 OH (HQ1-34) (243-(4-aminobutyl)aminopropyllaminomethylquinoléin-8-ol) H NNNN H2 H OH (HQ1-344) (2- {3- [4-(4-aminobutyl)aminobutyl]aminopropyl} aminomethylquinoléin-8-ol) H H H2 (HQ1-343) OH (2- {3- [4-(3-aminopropyl)aminobutyl]aminopropyll aminomethylquinoléin-8-ol) 12 H H H2 OH (HQ1-33) (2-[3-(3-aminopropyl)aminopropyl]aminomethylquinoléin-8-ol) H H H H2 (HQ1-334) (2-{3-[3-(4-aminobutyl)aminopropyl]aminopropyllaminomethylquinoléin-8-ol) H H H H2 OH (HQ1-333) (2- {3 -[3 -(3 -aminopropypaminopropyl]aminopropyll aminomethylquinoléin-8-ol) De manière plus préférée encore, on utilise les Quilamines HQ1-44, HQ1-444, HQ1- 10 443, HQ1-43, HQ1-434, HQ1-433, HQ1-33, HQ1-334, HQ1-333, ou l'une de leurs formes conjuguées, sels, ou solvates. La Quilamine préférée est HQ1-44 et ses formes conjuguées, sels ou solvates. L'acronyme HQ1-44 décrit le motif chélatant HQ hydroxyquinoléine, indexé 1 pour le nombre de groupe CH2 lié à la chaîne polyaminée. Le chiffre 44 (et respectivement 444, 443, 15 43, 434, 433, 33, 334, 333, 34, 344, 343) précise le nombre de carbone entre chaque atome d'azote de la chaîne polyaminée. Les sels des Quilamines peuvent être choisis parmi n'importe quel sel pharmaceutiquement acceptable. Par « sel pharmaceutiquement acceptable », on entend notamment un sel avec un acide inorganique pharmaceutiquement acceptable, comme les 20 acides chlorhydrique, sulfurique, phosphorique, nitrique, carbonique, borique, sulfamique, bromhydrique ; ou bien un sel avec un acide organique pharmaceutiquement acceptable, comme les acides acétique, propionique, butyrique, tartrique, maléique, hydroxymaléique, fumarique, citrique, lactique, mucique, gluconique, benzoïque, succinique, oxalique, OH 13 phénylacétique, méthanesulfonique, toluènesulfonique, benzènesulfonique, salicylique, sulfanilique, aspartique, glutamique, édétique, stéarique, palmitique, oléique, laurique, panthoténique, tannique, ascorbique et valérique. Lorsque la Quilamine comporte une fonction suffisamment acide à pH physiologique pour réagir avec une base organique ou minérale, la Quilamine peut former un sel avec ladite base. Le terme « traitement » ou « traiter » renvoie à la capacité des Quilamines à diminuer le pool d'ion métallique en excès (Fer et/ou cuivre) et/ou à réduire les taux de polyamines dans les cellules tumorales et conséquemment à diminuer et/ou inhiber le développement de ces cellules cancéreuses ou tumorales et/ou de leurs symptômes.

Les solvates des Quilamines sont constitués des complexes ou aggrégats formés par une ou plusieurs Quilamines ou un de ses sels tels que définis précédemment, avec une ou plusieurs molécules de solvant. Les solvants peuvent être par exemple de l'eau, du méthanol, de l' éthanol, de l'isopropanol, de l'acide acétique. Lorsque le solvant est de l'eau, le solvate est un hydrate. De préférence, les solvates des Quilamines sont des hydrates tels que des hémihydrates, monohydrates, dihydrates, trihydrates, tétrahydrates. Les formes conjuguées des Quilamines correspondent aux formes de résonances dues à la délocalisation d'un ou plusieurs doublets électroniques. La Quilamine selon l'invention peut être utilisée en tant qu'agent thérapeutique chez l'homme et chez l'animal, notamment en tant qu'agent de traitement des maladies prolifératives, neurodégénératives, et/ou liées à une surcharge en fer, cuivre, zinc et/ou manganèse, dans les cellules humaines ou animales. En particulier, la Quilamine peut être utilisée en tant qu'agent antitumoral, par exemple dans le traitement des hépatocarcinomes, des lymphomes, des mélanomes, des carcinomes rénaux, ovariens, ceux du sein, du colon, et/ou des carcinomes de la prostate, de la vessie, du pancréas, et des poumons chez l'homme ou l'animal. Elle peut aussi être utilisée pour traiter des maladies neurodégénératives, telles que les maladies de Parkinson et d'Alzheimer. La Quilamine selon l'invention peut être utilisée comme agent inhibiteur de la synthèse endogène des polyamines par l'organisme. Les polyamines sont issues de la dégradation de l'arginine, soit directement par l'arginine décarboxylase qui la convertie en agmatine, ou via le cycle de l'urée qui commence par la transformation de l'arginine en ornithine, catalysée par l'arginase. Les polyamines sont alors synthétisées de façon séquentielle à partir de l'ornithine qui est décarboxylée dans un premier temps par l'ornithine décarboxylase (ODC) pour former la putrescine. La spermidine est synthétisée par la spermidine synthase qui réalise l'addition 14 sur la putrescine d'un groupe aminopropyl apporté par la S-adénosyl méthionine, décarboxylée par la S-adénosyl méthionine décarboxylase (SAMDC). La spermine est formée de la même façon, à partir de la spermidine par addition d'un second groupe aminopropyl. Les principaux inhibiteurs de la synthèse des polyamines agissent au niveau de l'ODC (a- difluorométhyl ornithine ou DFMO), ou de la SAMDC (CGP 48664). Un autre objet de l'invention porte sur une composition comprenant au moins une Quilamine telle que définie précédemment. La composition selon l'invention peut comprendre en outre au moins un excipient. Le ou les excipients utilisables sont des substances auxiliaires chimiquement inertes et pharmacologiquement inactives, en particulier, ils n'influent pas sur les effets de la Quilamine et les éventuels principes actifs additionnels présents dans la composition. L'excipient sert à formuler la composition de l'invention sous la forme la plus adaptée pour la voie d'administration souhaitée et éventuellement, le cas échéant, de moduler la vitesse de libération de la ou des substances actives vers l'organisme. Comme exemple d'excipients on citera : l'eau et le saccharose sont les deux excipients constituant le sirop simple - ou encore, pour des formes sèches, le ou les amidons modifiés et la ou les celluloses modifiées sont des agents de délitement utilisés dans des formes sèches (comprimés, gélules, etc.) pour accélérer la désintégration (ou encore délitage) de celles-ci une fois arrivées dans l'estomac. Pour un mode d'administration parentéral, l'excipient peut être un solvant ou diluant aqueux, stérile, isotonique par rapport au sang, pharmaceutiquement acceptable, tel que des tampons phosphate ou acétate salins, de l'eau, une solution 5% dextrose. Ces formulations peuvent être préparées sous forme de doses définies contenues dans une fiole en verre stérile et scellée conformément aux méthodes éprouvées de la pharmacie. L'excipient est de préférence un tampon phosphate salin.

La composition selon l'invention peut être administrée par toute voie d'administration classiquement utilisée dans le domaine thérapeutique, appliquée à l'homme ou à l'animal. En particulier, elle peut être administrée par voie orale, par voie sublinguale, parentérale, sous-cutanée, intramusculaire, intraveineuse, transdermique, locale, rectale ou inhalation. De préférence, elle est administrée par voie orale dans une formulation en sirop, gélules ou tablettes. La composition selon l'invention comprend de préférence une teneur en Quilamine thérapeutiquement efficace, c'est-à-dire telle que la composition peut être utilisée comme agent thérapeutique, en particulier comme agent de traitement des maladies prolifératives et 15 neurodégénératives et/ou liées à une surcharge en fer, cuivre, zinc et/ou manganèse, notamment comme agent antitumoral, anti Parkinsonnien ou anti Alzheimer, chez l'homme ou l'animal. La composition selon l'invention peut comprendre en outre au moins un principe actif additionnel différents des Quilamines et disposant notamment d'une autorisation de mise sur le marché. A titre de principes actifs additionnels, différents des quilamines, on peut citer des agents chimiothérapeutiques comme les agents alkylants (Cis-Platine), les alcaloïdes végétaux (paclitaxel, épothilones), les inhibiteurs de topoisomérases (campthotécine, les taxanes, les alcaloïdes de la famille du Vinca (Vinblastine, Vincristine, ...)), les inhibiteurs des microtubules (Bleomycine) et les anti métabolites (5-Fluoro uracile) et des agents inhibiteurs du métabolisme des polyamines comme l'Eflornithine (a-Difluoromethylornithine) et le CGP 48664. La composition selon l'invention peut comprendre en outre au moins un additif choisi parmi les conservateurs tels que le méthylhydroxybenzoate de méthyle, le chlorocrésol, métacrésol, phénol et chlorure de benzalkonium. La composition peut être une composition prête à l'emploi ou une composition obtenue par mélange extemporané de la ou des Quilamines avec un ou plusieurs excipients et/ou un ou plusieurs principes actifs additionnels et/ou un ou plusieurs additifs tels que sus-mentionnés.

Lorsque la composition comprend au moins une Quilamine, et au moins un principe actif additionnel, la composition peut être un produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps, de ces différents principes actifs et Quilamines. Selon une variante intéressante, le principe actif additionnel est choisi parmi un agent inhibiteur de la synthèse des polyamines endogène et un agent chimiothérapeutique..

Selon une variante particulièrement intéressante, ledit agent inhibiteur de la synthèse des polyamines endogène est un inhibiteur de l'ornithine décarboxylase, de la Sadénosylméthionine décarboxylase, de la spermidine synthase ou de la spermine synthase. Par « agent inhibiteur de la synthèse des polyamines », on désigne une molécule capable de bloquer, totalement ou partiellement, directement ou indirectement, au moins l'une des enzymes intervenant dans la synthèse des polyamines dans l'organisme humain, ou animal. L'ornithine décarboxylase (EC 4.1.1.17) est une enzyme cible pour les composés inhibiteurs de la biosynthèse des polyamines. Le rôle de l'inhibiteur de la biosynthèse des polyamines est d'arrêter ou de réduire significativement la production endogène de polyamines dans 16 l'organisme traité avec le produit selon la présente invention. Le co-traitement par de tels inhibiteurs de la synthèse endogène des polyamines permet de renforcer l'activité antiproliférative des Quilamines selon la présente invention par une carence conjuguée en polyamines et en fer intracellulaire.

Par « agent chimiothérapeutique » ont entend une molécule chimique pour traiter des maladies telles que le cancer, les maladies neurodégénératives ou les maladies autoimmunes. La majorité des substances chimiothérapeutiques fonctionnent par arrêt de la mitose (division cellulaire), en ciblant efficacement les cellules se divisant trop rapidement ou la synthèse et la fonction de l'ADN. Certains nouveaux agents n'agissent pas directement sur l'ADN mais ciblent directement une anormalité moléculaire (leucémie, cancer du colon). La composition selon l'invention telle que définie précédemment peut être utilisée en tant qu'agent thérapeutique chez l'homme et chez l'animal, notamment en tant qu'agent de traitement des maladies prolifératives, neurodégénératives et/ou liées à une surcharge métallique dans les cellules humaines ou animales. En particulier, elle peut être utilisée en tant qu'agent de traitement des hépatocarcinomes, des lymphomes, des mélanomes, des carcinomes rénaux, ovariens, ceux du sein, du colon, et/ou des carcinomes de la prostate, de la vessie, du pancréas, et des poumons chez l'homme ou l'animal. Elle peut aussi être utilisée pour traiter des maladies neurodégénératives, telles que les maladies de Parkinson et d' Alzheimer.

Les composés selon l'invention peuvent être obtenus par un procédé dans lequel la ou les chaînes polyaminées est ou sont couplées(s) au(x) motif(s) 8-hydroxyquinoléique(s) par une étape d'amination réductrice, substitution nucléophie ou addition de Mickaël. En particulier, le procédé utilisé comprend: - soit une étape d'amination réductrice entre un réactif aldéhyde et un réactif amine, l'un des réactifs pouvant porter un précurseur du motif 8-hydroxyquinoléique et l'autre pouvant porter un précurseur de la chaîne polyaminée, - soit une étape de substitution nucléophile d'un réactif amine porteur d'un précurseur de la chaîne polyaminée, sur un réactif électrophile porteur d'un précurseur du motif 8- hy droxy quinol éi que, soit une étape d'addition de Mickaël entre un réactif alcène porteur d'un précurseur du motif 8-hydroxyquinoléique, et un réactif amine porteur d'un précurseur de la chaîne polyaminée. En particulier, lesdits précurseurs du motif 8-hydroxyquinoléine comportent en position 17 alpha de l'atome d'azote constitutif du cycle 8-hydroxyquinoléine un groupe fonctionnel approprié pour réagir avec le second réactif porteur du précurseur de la chaîne polyaminée. Pour la la préparation d'une Quilamine de formule (I) dans laquelle a est égal à zéro et b est égal à zéro (notée Quilamine HQ'0), le procédé de préparation comprend les étapes suivantes : (i) amination réductrice entre une amine primaire porteuse du motif 8-hydroxyquinoléique de formule (II) (H) dans laquelle Ri, R2, R3, R4, R5 et R6 sont tels que définis dans la formule (I), et dont les fonctions thiol, hydroxyle, amine primaire et secondaire, pouvant être présentes, sont éventuellement protégées par des groupements protecteurs appropriés et un carboxaldéhyde porteur d'une chaîne polyaminée, de formule (II') H dans laquelle A' 1 représente un groupe hydrocarbure aminé correspondant à Al telle que définie précédemment, et dont les fonctions amines primaire et secondaires sont protégées par des groupements protecteurs appropriés ; (ii) puis déprotection des fonctions protégées en une ou plusieurs étapes. Lors de l'étape (i), l'agent réducteur est choisi parmi l'hydrogène (H2) en présence d'un catalyseur (palladium sur charbon activé par exemple), un hydrure (NaBH4, NaBH3CN ou le triacétoxyborohydrure de sodium NaBH(OAc)3 par exemple), et un donneur d'hydrogène (acide formique, ou un de ses sels par exemple). De préférence, on utilise du triacétoxyborohydrure de sodium. Les fonctions thiol, hydroxyle, amine primaire et secondaire peuvent être protégées à l'aide de groupements protecteurs bien connus permettant de les rendre inactives vis-à-vis de la réaction d' amination réductrice. Les réactions de déprotection correspondant aux différentes fonctions protégées sont également connues en soi par l'homme du métier. A titre d'exemples de groupements protecteurs des fonctions hydroxyles, on peut citer 18 le groupe acétyle (Ac), les dérivés silylés ou le méthyle. Ces fonctions peuvent être déprotégées respectivement par un traitement acide, un anion fluorure ou du tribromure de bore. A titre d'exemples de groupements protecteurs des fonctions amines primaires et secondaires des chaînes polyaminées, on peut citer par exemple le tertiobutyloxycarbonyl (Boc), le benzyloxycarbonyle ou le groupement benzyle. Ces fonctions peuvent être déprotégées respectivement par un traitement acide avec de l'acide trifuoroacétique ou chlorhydrique, par hydrogénolyse en présence de dihydrogène et Palladium. Lorsque le motif 8-hydroxyquinoléique comporte des fonctions amines primaires ou secondaires, on peut les protéger et déprotéger de la même manière.

Le carboxaldéhyde porteur d'une chaîne polyaminée, de formule (II') peut être obtenu à partir d'un monomère hydrocarboné constitutif de la chaîne polyaminée (par exemple Bi, B2, B3 dans le cas de la formule (X)) comportant une fonction primaire hydroxyle terminale et une fonction primaire amine terminale, c'est-à-dire en bout de chaîne. La chaîne polyaminée peut être obtenue par une N-substitution sur l'amine primaire du premier monomère, d'un deuxième monomère constitutif de la chaîne polyaminée et porteur d'une fonction nitrile; réduction de la fonction nitrile en amine primaire ; protection des fonctions appropriées (amine secondaire notamment) ; puis répétition éventuelle de ces étapes jusqu'à obtention de la chaîne polyaminée souhaitée. Le carboxaldéhyde est finalement obtenu en oxydant la fonction hydroxyle primaire de l'intermédiaire hydroxypolyamine obtenu.

Le schéma ci-dessous illustre un tel procédé de préparation d'une Quilamine de type HQ'0 (HQO-44, 8"): 19 " X est un groupe partant tel que OTs, Ofels, halogene 1) Réduction Z et tedenhques ou différents sont des groupements protecteurs 2) Protection Pour la préparation d'une Quilamine de formule (I) dans laquelle a est égal à zéro, b est égal à un et L représente un groupe CH2 (notée HQ'1), le procédé de préparation comprend les étapes suivantes : (i) amination réductrice entre un réactif carboxaldéhyde porteur du motif 8- hydroxyquinoléique, de formule (III) R3 R4 (III) dans laquelle RI, R2, R3, R4, R5 et R6 sont tels que définis dans la formule (I), et dont les fonctions thiol, hydroxyle, amine primaire et secondaire, pouvant être présentes, sont éventuellement protégées par des groupements protecteurs appropriés; et une amine primaire porteuse d'une chaîne polyaminée, de formule (III') H H2N A'l dans laquelle AI est telle que définie dans la formule (II') ; 20 (ii) puis déprotection des fonctions protégées en une ou plusieurs étapes. L'agent réducteur peut être choisi parmi ceux utilisés dans le procédé de préparation décrit précédemment. De préférence, on utilise du triacétoxyborohydrure de sodium. Les fonctions thiol, hydroxyle, amine primaire et secondaire peuvent être protégées et déprotégées comme indiqué dans le procédé de préparation précédent. L'amine primaire porteuse d'une chaîne polyaminée, de formule (III') peut être obtenue par un procédé de préparation similaire au carboxaldéhyde de formule (II') décrit plus haut, à partir d'un monomère hydrocarboné constitutif de la chaîne polyaminée (par exemple Bi, B2, B3 dans le cas de la formule (X)) comportant deux fonctions amine primaire. L'une des fonctions amine est protégée par un groupement protecteur au préalable. Puis, la chaîne polyaminée peut être obtenue par une N-substitution sur l'amine primaire non protégée du premier monomère, d'un deuxième monomère constitutif de la chaîne polyaminée et porteur d'une fonction nitrile, réduction de la fonction nitrile en amine primaire ; puis protection des fonctions appropriées (amine secondaire notamment) avant répétition éventuelle de ces étapes jusqu'à obtention de la chaîne polyaminée souhaitée. Le schéma ci-dessous illustre un procédé de préparation d'une Quilamine de type HQ'l (HQ1-44, 8) selon ce mode de réalisation à partir de l'hydroxyquinoline carbaldéhyde commerciale 6 : 21 Protection ZHN X est un groupe partant tel qu CN OTs, Wols, halone Protection N Z et 2.* identiques sont des groupe protecteurs di 2 Réduction ZHN, 1 Protection 2) Oxydation t ninatior eductri 2) Deprotectio 8 Pour la préparation d'une Quilamine de formule (I) dans laquelle a est égal à zéro, b est égal à un et L représente un groupe CH2-CH2 (notée HQ'2) trois procédés de préparation peuvent être envisagés.

Selon une première variante, le procédé de préparation de la Quilamine HQ'2 comprend les étapes suivantes : (i) amination réductrice entre un acétaldéhyde porteur du motif 8-hydroxyquinoléique, de formule (IV) (IV) dans laquelle RI, R2, R3, R4, R5 et R6 sont tels que dans la formule (I), et dont les 22 fonctions thiol, hydroxyle, amine primaire et secondaire, pouvant être présentes sont éventuellement protégées par des groupements protecteurs appropriés; et une amine primaire porteuse d'une chaîne polyaminée, de formule (III') telle que définie précédemment ; (ii) puis déprotection des fonctions protégées en une ou plusieurs étapes. L'agent réducteur peut être choisi parmi ceux utilisés dans le procédé de préparation décrit précédemment. De préférence, on utilise du triacétoxyborohydrure de sodium. Les fonctions thiol, hydroxyle, amine primaire et secondaire peuvent être protégées et déprotégées comme indiqué dans le procédé de préparation précédent.

Selon une deuxième variante, le procédé de préparation de la Quilamine HQ'2 comprend les étapes suivantes : (i) addition de Mickaël entre un alcène porteur du motif 8-hydroxyquinoléique, de formule (V) (v) dans laquelle Ri, R2, R3, R4, R5 et R6 sont tels que définis dans la formule (I), et dont les fonctions thiol, hydroxyle, amine pouvant être présentes sont éventuellement protégées par des groupements protecteurs appropriés ; et une amine primaire porteuse d'une chaîne polyaminée, de formule (III') telle que définie précédemment; (ii) puis déprotection des fonctions protégées en une ou plusieurs étapes. L'agent réducteur peut être choisi parmi ceux utilisés dans le procédé de préparation décrit précédemment. De préférence, on utilise du triacétoxyborohydrure de sodium. Les fonctions thiol et amine primaire et secondaire peuvent être protégées et déprotégées comme indiqué dans le procédé de préparation précédent.

Selon une troisième variante, le procédé de préparation de la Quilamine HQ'2 comprend les étapes suivantes : (i) substitution nucléophile d'un réactif électrophile porteur du motif 8-hydroxyquinoléique, de formule (VI) 23 (vu dans laquelle Ri, R2, R3, R4, R5 et R6 sont tels que définis dans la formule (I), et dont les fonctions thiol, hydroxyle, amine primaire et secondaire pouvant être présentes sont éventuellement protégées par des groupements protecteurs appropriés, X représente un bon groupe partant, tel que tosylate (OTs) ou mésylate (OMs), ou un halogène ; par une amine primaire porteuse d'une chaîne polyaminée, de formule (III') telle que définie précédemment ; (ii) puis déprotection des fonctions protégées en une ou plusieurs étapes.

Le schéma ci-dessous illustre un procédé de préparation d'une Quilamine de type HQ'2 selon chacune des trois variantes de ce mode de réalisation à partir de l'hydroxyquinaldine commerciale 6 : 24 OH 15 L'hydroxyméthylation du composé 6 peut être obtenue en le faisant réagir avec du butyllithium puis du paraformaldéhyde. Pour la préparation d'une Quilamine de formule (I) dans laquelle a est égal à zéro, b est égal à un et L représente un groupe C=0 (notée HQ' (C0)) celle-ci peut être obtenue par n'importe quelle réaction classique d'obtention d'un amide à partir d'une amine primaire. A titre d'exemple, on peut citer les réactions de couplage peptidique telle que la réaction d'un acide carboxylique porteur du motif 8-hydroxyquinoléine, de formule (VII) X = bon groupe partant tel que OTs, OMs, halogène 6 OH Hydroxyméthylation H20 OAc 11 OH 1) Addition de Mickaël H2N-An 2) Déprotection 1) Substitution nucléophile 2) Déprotection 1) Amination réductrice HZN-X1- 2) Déprotection A N H OH 1) Protection 2) Oxydation de Swern OH *"........,.......'......t' Activation de l'alcool primaire 25 R3 R4 R6 OH (VII) dans laquelle Ri, R2, R3, R4, R5 et R6 sont tels que définis dans la formule (I), et dont les fonctions thiol, hydroxyle, amine primaire et secondaire pouvant être présentes sont éventuellement protégées par des groupements protecteurs appropriés. avec une amine primaire porteuse d'une chaîne polyaminée, de formule (III') telle que définie précédemment, en présence d'un agent de couplage après protection des autres amines pouvant être présentes sur la chaine polyaminée. Parmi les agents de couplage utilisables, on peut citer le 1-éthy1-3-(3- diméthylaminopropyl) carbodiimide (EDC ou EDCI) et le N,N'-dicyclohexylcarbodiimide 10 (DCC). On peut ajouter au milieu réactionnel du N-Hydroxybenzotriazole (HOBt) afin d'activer la réaction. Le schéma ci-dessous illustre un procédé de préparation d'une Quilamine HQ'(CO) selon ce mode de réalisation : 1) DCC/HOBt 2) Déprotection OH + H2N-Ad OH 15 Pour la préparation d'une Quilamine de formule (I) dans laquelle a est égal à zéro, b est égal à un et L représente un groupe C=S (notée HQ'(CS)), celle-ci peut être obtenue par (i) thionation, à l'aide du réactif de Lawesson ou du pentasulfure de diphosphore (P4Sio), d'une Quilamine HQ'(CO) dont les fonctions thiol, hydroxyle, amine primaire et secondaire pouvant être présentes sont éventuellement protégées par des groupements protecteurs 20 appropriés, puis (ii) déprotection des fonctions protégées. Les fonctions thiol, hydroxyle, amine primaire et secondaire sont de préférence protégées et déprotégées comme indiqué dans le procédé de préparation précédent. Le schéma ci-dessous illustre un procédé de préparation d'une Quilamine HQ'(CS) selon ce mode de réalisation : NH-A1 NH-A'1 1) Réactif de Lawesson NH-A1 2) Déprotection 25 26 Dans un sixième mode de réalisation, le procédé de l'invention porte sur la préparation d'une Quilamine de formule (I) dans laquelle a est égal à 1, c et c' sont identiques, L et L' - sont identiques, Dl et D2 sont identiques, et/ou R1, R2, R3, R4, R5 et R6 sont identiques à R'1, R'2, R'3, R'4, R'5 et R'6 respectivement.

Ladite Quilamine selon l'invention peut être obtenue par (i) amination réductrice de deux équivalents d'un carbaldéhyde porteur d'un motif 8-hydroxyquinoléique avec un équivalent d'une diamine primaire porteuse d'une chaîne polyaminée dont les fonctions amines primaires et secondaires ont été protégées, puis (ii) déprotection des fonctions protégées, ledit carbaldéhyde étant en position 2 du motif 8-hydroxyquinoléique. Les fonctions amines primaires et secondaires de la chaîne polyaminée peuvent être protégées et déprotégées comme enseigné précédemment. A titre de carbaldéhydes utilisables, on peut citer les composés correspondant à la formule (VIII) suivante, leur sels, solvates ou forme conjuguées : R3 R4 (VIII) dans laquelle : L, c, R2, R3, R4, R5 et R6 sont tels que définis dans la formule (I). Les teneurs en réactifs utilisés dans chacun des modes de réalisation ci-dessus peuvent être choisies et optimisées pour obtenir les meilleurs rendements. Les exemples ci-dessous servent à illustrer les différents aspects de l'invention.

EXEMPLES : Exemple 1: Préparation de la Quilamine 8' (2-I4-(4-aminobutvl)aminobutyll aminomethylquinolin-8-ol) 1) Préparation du réactif 5' (1V4Y-di-tert-butyloxycarbonylspermidine): Synthèse du (4-aminobutyl)carbamoate de tertiobutylc 2' 27 ,4 grammes de 1,4 diaminobutane (0,05mol) sont dissouts dans 110 ml d'une solution de triéthylamine et de méthanol (10% en volume de TEA dans du méthanol) sous argon et à 0°C. Une solution de di-terbutyl dicarbonate (3,63g, 0,017mol) et de méthanol (10m1) est ajoutée goutte-à-goutte dans le mélange sous vive agitation. Le mélange est agité à température ambiante pendant une nuit. Les solvants sont évaporés sous vide pour obtenir un résidu huileux qui est dissout dans du dichlorométhane (100m1) et lavé avec deux fois 100 ml d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium (10% en poids de NaOH dans l'eau) La phase organique est séchée et débarrassé de solvant sous vide, et le produit est purifié par chromatographie (1:10:89 NH4OH:MeOH:CHC13). Le produit 2' obtenu est une huile 10 translucide (rendement: 81%). Rf 0,4 (NH4OH/Me0H/CHC13) RMN 11I (300MHz, CDCL3) S 4.71 (s, 1H, NHCO) ,3.10 (dt, Ji=6Hz , 2H, CH2) ; 2.69 (t, Ji=6Hz, 2H, CH2) ; 1.57-1.44 (m, 4H, 2CH2) ; 1.42 (s, 9H, CH3).. R1VIN13C (75MHz, CDC13) S 156.2; 79.2; 41.9; 40.8; 30.8, 28.5; 27.6. 15 Synthèse du [4-(3-cyanopropylamino)-butyl]-carbamoate de tertiobutyl 4' A une solution d'amine protégée par tertio-butoxycarbonyle 2' (2.1g, 0.01mol) et d'acétronitrile anhydre (75m1), sont ajoutés 5,14 grammes de carbonate de potassium. La suspension est mélangée à température ambiante pendant 10 minutes. Le 4- bromobutyronitrile 3' (1.65g, 0.01mol) est ajoutée au mélange et le tout est agité à 50°C 20 pendant 24 heures. Le mélange est filtré pour retirer une majeure partie des sels inorganiques, et l'acétonitrile est évaporé sous vide. Le résidu huileux obtenu est purifié par chromatographie éclair (1:5:94 NH4OH:MeOH:CHC13). Le produit 4' obtenu est une huile translucide (rendement: 76%). Rf 0.5 (1:10:89 NH4OH:MeOH:CHC13). RMN 11I (300MHz, CDC13) S 4.77 (s, 1H, NHCO); 3.11 (q, Ji=6Hz, 2H, CH2); 2.73 (t, 25 J=6.9Hz; 2H, CH2); 2.61 (t, J=6.6Hz, 2H, CH2); 2.44 (t, J=7.2Hz, 2H, CH2); 1.80 (quintuplet, J=6.9Hz, 2H,CH2); 1,55-1.46 (m, 4H, 2CH2); 1.43 (s, 9H, 3CH3). RMN 13C (75MHz, CDC13) S 156.4; 119.8; 78.9; 76.4; 49.3; 48.0; 40.4; 28.42 (3C); 27.8; 27.4; 25.8; 14.9. 30 Synthèse du (4-aminobutyl-(4-tertiobutoxycarbonylaminobutyl)carbamoate de tertiobutyl 5 a) Protection de l'amine 4' L'aminonitrile 4' (1.74g, 6.8mmol) est dissout dans 40 ml d'une solution de méthanol et de triéthylamine (10% en volume de TEA dans du méthanol). Le di-tertio-butyldicarbonate 28 (3.63g, 0.017mo1) est ajoutée goutte-à-goutte dans le mélange sous agitation. Le mélange est agité à température ambiante pendant une nuit. Les solvants (MeOH et TEA) sont évaporés sous vide pour obtenir un résidu huileux qui est dissout dans du dichlorométhane (100m1) et lavé avec deux fois avec 30 ml d'une solution aqueuse d'hydrogénocarbonate (solution saturée dans l'eau) et deux fois avec 30 ml d'eau. La phase organique est séchée avec Na2SO4, filtrée, et purifié par chromatographie flash (80:20, dichlorométhane : acétate d'éthyle). Le produit intermédiaire obtenu est une huile translucide (95%) RMN 'H: (300MHz, CDC13) S 4.57 (s, 0.8H, NHCO); 3.29 (t, J=6.9 Hz, 2H, CH2); 3.03-3.23 (m, 4H, 2CH2); 2.34 (t, J=7.2Hz, 2H, CH2); 1.87 (t, J=6.9Hz,2H, CH2); 1.46-1.61 (m, 4H, 2xCH2); 1.45 (s, 9H, CH3); 1.43 (s, 9H, CH3). RMN 13C (75MHz, CDC13) S 156.1; 157.7, 119.4; 80.1; 79.3, 47.2, 45.8, 40.2, 28.5, 27.8, 27.5, 25.6, 24.6, 14.8. b)Réduction de la fonction nitrile et obtention du produit 5' Le nickel de Raney (50% en poids dans une solution aqueuse) est lavé dans de l'éthanol (et conservé en permanence à l'état humide dans du solvant car le composé est pyrophorique). Le produit intermédiaire obtenu à l'étape précédente (2.00g, 5.6mmo1) et NH4OH sont ajoutés. De l'argon est mis à buller pendant 20 minutes. La suspension est hydrogénée à 20 bars pendant 24 heures, le nickel de Raney est filtré sur célite (le nickel de Raney est conservé en permanence à l'état humide à l'aide d'éthanol). L' éthanol et NH4OH sont évaporés sous vide et le résidu huileux est dissous dans CH2C12 et lavé avec une solution aqueuse à 10% en poids de NaOH (3*50m1). La phase organique est séchée à l'aide de Na2SO4, filtré et le solvant est évaporé sous vide pour obtenir le produit 5' (98%).

RMN 'H: (300MHz, Me0D) S 3.21 (t, 4H, J=7.2Hz,); 3.04 (t, 2H, J=6.9Hz, 2CH2); 2.66 (t, 2H, J=7.05Hz,); 1.62-1.51 (m, 8H); 1.46 (s, 9H), 1.43 (s, 9H). R1VIN13C (75MHz, Me0D) S 158.5, 157.4, 80.8, 79.8, 42.2, 40.9, 30.8, 28.7, 28.3, 27.1, 26.6. 29 "41-1Boc ,CN Bode EtocHP, 2) Préparation du réactif 7 (8-hydroxyquinoline-2-carbaldehyde): Le réactif 7 est un réactif disponible dans le commerce. Il peut être obtenu à partir du produit 6 selon le schéma réactionnel suivant : OH OH 7 6 1) TBDMSC1 2) Se02 3) TBAF 64% 3) Préparation de la Quilamine 8' (244-(4-aminobutyl)aminobutyl]aminomethylquinolin-8- i) OH 8' 1) NaBH(OAc)3 2) HC1 6M 5' + 7 66% H "/\/ "" 2 N H 4. HC1 Un équivalent de 8-hydroxyquinoline-2-carbaldéhyde 7 est ajouté à une solution de polyamines 5' (1.2 éq) dans du 1,2-dichloroéthane (10m1) à température ambiante sous agitation sous argon. Après 15 minutes, 3 équivalents de triacétoxyborohydrure de sodium sont ajoutés et le 30 mélange est agité pendant 12 heures jusqu'à ce que l'aldéhyde soit consommé (suivi par chromatographie sur couche mince). La réaction est stoppée en ajoutant 10 mL d'une solution aqueuse de NaOH (1 mol/litre). Le mélange est agité pendant encore 20 minutes et le produit est extrait au dichlorométhane (3 fois), séché sur du sulfate de sodium et concentré sous pression réduite. Le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (chloroforme/méthanol/ammoniac: (94:5:1)). Une huile jaune pâle est obtenue (91%). IR (KBr): y = 3053, 2982, 2934, 1706, 1683, 1575, 1507, 1475, 1455, 1420, 1391, 1366, 1265, 1168, 1047 cm-1. 11I NMR (400 MHz, [D4]MeOD): ô = 1.35-1.69 (m, 26H, 8CH2 6CH3), 2.77 (bs, 2H, CH2), 3.03 (t, 2H, CH2, J = 6.8 Hz), 3.13-3.26 (m, 4H, 2CH2 ), 4.14 (s, 2H, CH2), 7.10 (dd, H, J = 7.5 Hz, J = 1.3 Hz), 7.34 (dd, H, J = 8.3 Hz, J = 1.3 Hz ), 7.41 (dd, H, J = 8.1 Hz, J = 7.6 Hz), 7.45 (d, H, J = 8.5 Hz), 8.20 (d, H, J = 8.5 Hz). 13C NMR (100 MHz, [D4] Me0D): ô = 26.5, 27.0, 27.2, 28.4, 28.7 (3C), 28.8 (3C), 40.9, 48.1, 49.9, 54.9, 79.8, 80.8, 112.2, 118.8, 122.1, 128.3, 129.4, 137.9, 139.2, 154.2, 157.4 (2C), 158.5. Spectométrie de Masse Haute Résolution (MALDI): calcd. for C28E144N405 [M+H]+ 517.3384; found 517.3386 Déprotection : Le composé diprotégé est mis en solution dans 5 mL d'éthanol puis 6 mL d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique (6mol/L) est ajoutée à 0°C. Le mélange est agité 24 heures et le solvant est évaporé. Le solide est repris dans un minimum d'éthanol et le précipité est filtré sous vide et séché 6h sous pompe (73%). Point de fusion supérieur à 250 °C. IR (KBr): v = 3384, 2957, 2798, 1642, 1606, 1551, 1513, 1461, 1420, 1398, 1344, 1302, 30 1252 - 1055, 841 cm-1. NMR (400 MHz, D20): ô = 1.76-2.04 (m, 8H, 4CH2), 3.06-3.22 (m, 6H, 3CH2), 3.38 (dd, 2H, J = 7.75 Hz, J = 7.45 Hz, CH2), 4.78 (s, 2H, CH2), 7.36 (dd, 1H, J = 7.45 Hz, J = 1.49 Hz, 25 31 H7.), 7.60 (dd, 1H, J = 8.30 Hz, J = 1.49 Hz, H5..), 7.65 (dd, 1H, J = 8.30 Hz, J = 7.45 Hz, H6.), 7.76 (d, 1H, J= 8.60 Hz, H3.), 8.64 (d, 1H, J= 8.60 Hz, H4.) ppm. 13C RMN (100 MHz, D20): ô = 22.7, 22.8 (2C), 24.0, 38.9, 46.9, 47.0, 47.3, 49.7, 114.1, 119.4, 121.1, 128.9, 129.3, 134.5, 141.8, 148.5, 149.5 ppm. Spectométrie de Masse Haute Résolution (MALDI): C18H29N40 [M+H-4HC1]+ : Calculé: 317.2336; Trouvé: 317.2348.

Analyse élémentaire: C18H32C14N40 1.2 H2O: Calculé: C, 44.68; H, 7.17; N, 11.58. Trouvé : C, 44.52; H, 6.97; N, 11.57 Exemple 2 : Préparation d'une Condamine de type HOE(CO) Synthèse du N-(4-((4-aminobutyl)amino)buty1)-8-hydroxyquinoline-2-carboxamide H N N N H2 OH 104mg de 2-acide 8-hydroxyquinoléique (0.552 mmol) sont dissouts dans du dichlorométhane anhydre sous argon. 80,8 mg d'hydroxybenzotriazole (HOBT) (0.607mmol) et 122 mg de dichlohexyle carbodiimide (DCC) (0.607mmol) sont ajoutés à 0°C. La solution est agitée une heure, et l'amine 4' est ajoutée (200mg, 0.552mmo1). Le mélange est agité pendant 24 heures. Les solvants sont évaporés sous vide et le résidu est dissout dans du dichlorométhane, lavé avec NaHCO3, séché sur Na2SO4 et filtré. Le solvant est retiré sous vide et le produit est purifié par chromatographie flash (dichlorométhane : méthanol, 97:3). Le produit protégé obtenu est un solide beige (rendement 99%).

RMN 11I (400MHz, Me0D) S 8.39 (d, J=8.5Hz, 1H); 8.18 (d, J=8.5Hz, 1H); 7.53 (dd, Jt=8.2Hz, Jd=7.6Hz , 1H); 7.42 (dd, J=8.2Hz, J=1.0Hz, 1H); 7.16 (dd, J=7.6Hz, J=1.0Hz 1H); 3.51 (t, J=6.3Hz, 2H); 3.19 (t, J=7.2Hz, 2H); 3.01 (t, 2H, J=6.7Hz,); 1.74-1.31 (m, 26H). H 32 R1VIN 13C (100MHz, Me0D) S 166.6, 158.5, 157.4, 155.0, 148.8, 138.8, 138.4, 131.4, 130.5, 119.9, 118.9, 112.7, 80.8, 79.8, 48.1, 40.9, 40.3, 28.8, 28.7, 28.3, 27.9, 27.0. Déprotection: Le produit protégé (100mg, 0.188mmol) est dissout dans 1 mL d'éthanol puis un excès d'une solution aqueuse d'acide chlorhydrique (6mol/L) est ajouté.. La solution est mélangé à température ambiante pendant 24 heures, les solvants sont évaporés sous vide. Le produit obtenu est un solide jaune (60mg, rendement 96%).

R1VIN111 (400MHz, D20) S 8.16 (d, J=8.7Hz, 1H); 7.74 (d, J=8.7Hz, 1H); 7.45 (dd, J=8.4Hz, J=7.7Hz, 1H); 7.29 (dd, J=1.1Hz, J=1.1Hz, 1H); 7.07 (dd, J=1.1Hz, J=7.7Hz, 1H); 3.48 (t, J=6.6Hz, 2H); 3.23-3.03(m, 6H); 1.91-1.73 (m, 8H).

R1VIN 13C (100MHz, Me0D) S 165.5, 150.9, 145.8, 138.4, 135.4, 129.5, 129.4, 118.9, 118.3, 112.2, 47.9, 46.8, 38.9, 38.8, 25.7, 23.9, 23.2, 22.7. Les propriétés physico-chimiques et biologiques de Quilamines selon la présente invention ont été étudiées et les résultats de ces études sont présentés ci-après en référence aux figures selon lesquelles : - la figure 1 présente la contribution de la chaîne polyaminée dans la chélation du fer par les Quilamines selon l'invention ; - la figure 2 présente la stoechiométrie de l'interaction de la Quilamine HQ1-44 avec le fer (L2 :Fei) ; - la figure 3 présente les effets de la Quilamine HQ1-44(0) et de chélateurs de référence, la 8-hydroxyquinoléine (HQ, ^) et le déférasiroxTM (ICL670, A) sur la viabilité de cellules ovariennes de hamster, la lignée sauvage (CHO, courbes en trait plein) et la lignée mutante déficiente pour le Système de Transport des Polyamines (CHOMG, courbes en pointillés) ; - la figure 4 présente l'influence du fer exogène 20 micromolaire (courbes en pointillés) sur la viabilité des cellules ovariennes de hamster (CHO), exposées à différentes concentrations en composés, à savoir la Quilamine HQ1-44 (0) et les chélateurs de 33 référence, la 8-hydroxyquinoléine (HQ, ^) et le déférasiroxTM (ICL670, A) ; - la figure 5 présente les effets des Quilamines et du chélateur de référence, la 8hydroxyquinoléine (8-HQ) sur la viabilité des cellules tumorales issues d'hépatocarcinomes humains (HepG2) ; - la figure 6 présente l'influence du STP sur la viabilité des cellules d'hépatocarcinomes humains (HepG2) traitées par la Quilamine HQ1-44 ; - la figure 7 présente les effets des Quilamines et des chélateurs de référence, la 8hydroxyquinoléine (8-HQ) et le déférasiroxTM (ICL670) sur la viabilité des cellules tumorales issues d'adénocarcinomes du colon humains (Caco-2) ; - la figure 8 présente l'effet de la Quilamine HQ1-44 et du chélateur de référence, le déférasiroxTM (ICL670) sur l'expression de gènes du métabolisme du fer des cellules d'adénocarcinome du colon humain (Caco-2) - la figure 9 présente l'effet de la Quilamine HQ1-44 et du chélateur de référence, le déférasiroxTM (ICL670) sur le métabolisme du fer des cellules d'adénocarcinome du colon humain (Caco-2) : - la figure 10 présente l'effet de la Quilamine HQ1-44 et du chélateur de référence, le déférasiroxTM (ICL670) sur l'expression de gènes du métabolisme des polyamines des cellules d'adénocarcinome du colon humain (Caco-2) ; - la figure 11 présente l'effet de la Quilamine HQ1-44 et du chélateur de référence, le déférasiroxTM (ICL670) sur le métabolisme des polyamines des cellules d'adénocarcinome du colon humain (Caco-2). I- Propriétés physico-chimiques des Quilamines 1. Capacité d'interaction avec le fer labile : test à la calcéine (figure]) Les Quilamines HQ1-34, HQ1-344, HQ1-343, HQ1-33, HQ1-333, HQ1-44, HQ1-43, HQ1-444, HQ1-443 selon l'invention ont été synthétisées et testées. On a mesuré pour chaque Quilamine, leur capacité à déplacer le fer(III) complexé à la calcéine. La calcéine est une molécule fluorescente qui présente une valeur pFe3+ de 20,3 à pH 7,4, proche de la valeur mesurée pour les ligands de faibles poids moléculaires présents dans les cellules humaines ou animales et complexant le pool de fer labile, comme le citrate qui présente un pFe3+ de 19,3 à pH = 7,4 (LIP). La fluorescence de la calcéine est détectée en microplaque, à la concentration 0,1 micromole par litre, en solution dans un tampon HEPES (acide 4-(2-hydroxyéthyl)-1- 34 pipérazine éthane sulfonique) à pH 7,4, dans un lecteur de fluorescence microplaque de type Fusion (Packard), sous excitation à 450 nanomètres et analyse de l'émission de fluorescence à 515 nanomètres. La fluorescence de la calcéine est éteinte en présence de fer(III) sous forme chlorhydrate (chlorure) à la concentration de 1 micromole par litre. L'addition de la Quilamine à différentes concentrations comprises entre 0,01 et 40 micromoles par litre provoque le déplacement du fer(III) complexé à la calcéine vers la Quilamine, se traduisant par une restauration de la fluorescence de la calcéine. Les courbes effet-doses traduisant le pourcentage de restauration de la fluorescence de la calcéine (par rapport à la fluorescence de la molécule libre en l'absence de fer), pour chaque concentration en Quilamine, permettent de déduire la concentration en Quilamine provoquant le déplacement de 50% du Fe(III) de la calcéine et de la restauration de sa fluorescence associée (CE50). Ces valeurs de concentrations CE50 sont inversement proportionnelles à la capacité chélatante des chélateurs et à leur aptitude à mobiliser le fer à partir du LIP de l'organisme. Comparativement, on a mesuré dans les mêmes conditions l'efficacité à déplacer le fer(III) complexé à la calcéine de deux chélateurs de l'art antérieur, la 8-hydroxyquinoléine et le 0-trensox, ce dernier étant actuellement considéré comme le chélateur de plus haute affinité pour le fer. En référence à la figure 1, les tests ont montré que les Quilamines selon l'invention présentent une meilleure capacité chélatante par rapport aux deux chélateurs testés pour des concentrations en chélateurs inférieures à 0,2 micromole par litre. La comparaison de l'efficacité chélatante des Quilamines par rapport à celle du motif chélatant de base, la 8- hydroxyquinoléine montre que la chaîne polyamine renforce la capacité d'interaction de ce chélateur avec Fe(III). En outre, on a observé que les Quilamines de type HQ1-3 (HQ1-34, HQ1-344, HQ1-343, HQ1-33, HQ1-333) présentent une meilleure capacité chélatante par rapport aux Quilamines de type HQ1-4 (HQ1-44, HQ1-43, HQ1-444, HQ1-443). 2. Etude de l'interaction de la Quilamine HQ1-44 avec le fer (figure2) L'interaction de la Quilamine HQ1-44 avec le fer (Fe3+) a été évaluée, grâce à la transition caractéristique à 580nm, observée dans le spectre d'absorption du complexe de la Quilamine HQ1-44 avec Fe(III). La méthode des variations continues consiste à mesurer la quantité de complexe formée entre la Quilamine et le Fe(III), déduite de la valeur de l'absorption a 580nm, en faisant varier le rapport des concentrations en Quilamine/Quilamine+Fe(III) pour une concentration totale Quilamine+Fe(III) constante et35 égale à 100 micromoles par litre (tampon Tris/HC1 100 millimoles par litre, pH 7,4). La méthode des variations continues a montré que la Quilamine HQ1-44 forme un complexe avec Fe(III) avec une stoechiométrie ligands/fer de 2/1 à pH physiologique. Les mesures de potentiométries ont été effectuées dans des cellules de titration thermostatées à 25 ± 0.1 °C, à l'aide d'un Metrohm 702 SM Titrino connecté à un Metrohm 6.0233.100. La solution de ligand est préparée à une concentration de -1.5x10-3 moles par litre, la solution de Fe3+ est effectuée à partir de FeC13 et titrée par complexation avec une solution standard d'EDTA (acide éthylènediaminetétracétique). L'échantillon pour la mesure contient approximativement 0.03 millimoles par litre de ligand dans un volume de 30 mL ou la force ionique est maintenue à 0.1 mole par litre en utilisant KNO3 comme électrolyte support. Lors des titrations Fe3+ est additionné à 0.45 ou 0.9 équivalents de ligand. Chaque titration consiste en 150-200 points d'équilibre à un pH variant de 2.0 à 11.5, et est répétée au moins deux fois. Les constantes thermodynamiques sont calculées avec le logiciel HYPERQUAD et le diagramme de spéciation des espèces est réalisé par le programme Hyss.

Tableau 1 - Constantes de stabilité (log K) du complexe de fer de HQ1-44 (=L) (25.0 °C, / = 0.1 M dans KNO3) espèces L FeL 25.92 FeLH 6.65 FeLH2 2.88 FeL(OH) 7.37 Fel-2 7.8 FeL2H 10.2 FeL2H2 8.0 FeL2H3 8.2 La comparaison du pFe3+ de HQ1-44 (27 à pH7,4) avec celui du o-Trensox qui forme un complexe de très haute affinité avec Fe(III), de stooechiometrie 1/1 (pFe3+= 29,5 mesuré dans les mêmes conditions de pH) confirme la forte capacité chélatante de la Quilamine HQ I- 44. Elle est également a comparée à celle du motif chélateur de base, la 8-hydroxyquinoléine (pFe3+= 20,6 mesuré dans les mêmes conditions de pH), ce qui confirme le renforcement de la capacité chélatante de ce chélateur par la chaîne polyamine de la Quilamine HQ1-44. II- Propriétés biologiques par rapport aux cellules ovariennes saines de hamster 36 . Implication du STP dans la captation des Quilamines L'efficacité in vitro de différentes Quilamines a été testée sur une lignée de cellules ovariennes de hamster (CHO) sauvage disposant du STP, et une lignée mutante CHO-MG dépourvue de STP. Les deux types cellulaires CHO et CHO-MG ont été traités 24h après leur ensemencement en microplaques 96 puits, par des concentrations des différentes Quilamines comprises entre 0,1 et 400 micromoles par litre. Les effets cytostatique (antiprolifératif) et cytotoxique des Quilamine après 72h de traitement des cellules ont été évalués respectivement par comptage des noyaux cellulaires après marquage de l'ADN par l'intercalant fluorescent Hoescht 33342 et par l'analyse des dommages membranaires, détectés par le dosage de l'activité lactate déshydrogénase (LDH) dans les surnageants). Les résultats obtenus avec la Quilamine HQ1-44 sont représentés à la figure 3, la figure 3 A concernant les résultats sur la viabilité cellulaire et la figure 3 B concernant les résultats sur la toxicité cellulaire. La concentration inhibitrice IC50, correspondant à la concentration en Quilamines permettant d'inhiber à 50% la prolifération cellulaire, a été déduite des courbes effet-dose de numération des noyaux des cellules vivantes sur les lignées CHO et CHO-MG. Ces courbes effets doses sont parfois biphasiques, comme dans le cas de la Quilamine HQ1-44 qui présente une composante antiproliférative (sans libération concomitante de LDH dans le surnageant) dans la gamme des concentrations comprises entre 0,4 et 3 micromoles par litre et 20 une seconde composante cytotoxique accompagnée d'une toxicité membranaire se traduisant par une libération de LDH, pour des concentrations supérieures à 2 micromoles par litre. Plus la valeur de IC50 est faible, plus l'effet antiprolifératif des chélateurs testés est efficace. En outre, on a calculé le rapport des concentrations inhibitrices IC50 trouvées pour la lignée CHO-MG et la lignée CHO (Ratio IC50 (CHO-MG/CHO)) pour plusieurs Quilamines 25 selon l'invention. Ce rapport permet d'estimer la sélectivité de reconnaissance des différentes chélateurs par le STP : Plus ce rapport est élevé, mieux le chélateur est reconnu par le STP. Lorsque ce rapport est proche de 1, le chélateur testé n'est pas ou peu reconnu par le STP. Les résultats ont été répertoriés dans le tableau 2 ci-dessous et ont été comparés à ceux obtenus dans les mêmes conditions pour deux chélateurs d'ions métalliques de l'art antérieur, 30 la 8-hydroxyquinoléine et l'ICL670 (DeferasiroxTM vendu par Novartis). 37 Chélateurs IC50 (micromole.par litre) Ratio IC50 (CHO-MG/CHO) CHO CHO-MG HQ1-44 1,4 344,5 249 HQ1-444 6,3 239,5 38 HQ1-33 5,7 117,9 21 HQ1-333 15,1 277,0 18 HQ1-443 20,2 257,5 13 8-hydroxyquinoléine 5,0 10,5 2 ICL670 9,2 8,0 1 Tableau 2 : Influence du Système de Transport des Polyamines sur la sélectivité de l'action antiproliférative des Quilamines comparée à celle des chélateurs de référence, la 8- hydroxyquinoléine (8-HQ) et le déférasiroxTM (ICL670).

Le composé HQ1-44 est caractérisé par une IC50 de 1,4 micromole par litre sur la lignée CHO et de 344 micromoles par litre sur la lignée CHO-MG. Ce composé présente l'effet antiprolifératif le plus efficace et est le mieux reconnu par le STP. En outre, les chaînes poly(n-butylamine) (HQ1-44 et HQ1-444) semblent plus sélectivement reconnues par le STP par rapport aux chaînes poly(n-propylamine) (HQ1-33). Par ailleurs, les Quilamines de l'invention testées présentent toutes une excellente reconnaissance par le STP par rapport aux chélateurs connus 8-hydroxyquinoléine et ICL670. 2. Efficacité des Quilamines On a comparé l'action cytostatique ou antiproliférative et l'action cytotoxique de 72h de traitement par la Quilamine HQ1-44 par rapport à la 8-hydroxyquinoléine et l'ICL670, sur les lignées CHO, en présence ou non de fer exogène, sous forme citrate de Fe(III) à la concentration de 20 micromoles par litre. Les résultats obtenus sont représentés à la figure 4, la figure 4 A concernant les résultats concernant la viabilité cellulaire et la figure 4 B concernant les résultats sur la toxicité cellulaire. En l'absence de fer exogène, on observe que la 8-hydroxyquinoléine provoque une diminution du nombre de cellules viables associée à une libération de LDH (effet cytotoxique). En particulier, la 8-hydroxyquinoléine exerce un effet cytotoxique dès une concentration en chélateur supérieure ou égale à 5 micromoles par litre. En présence de fer 38 exogène, on n'observe aucune modification de l'action cytotoxique de la 8- hydroxyquinoléine. Les courbes effet-doses pour l'ICL670 sont biphasiques, comme celle de la Quilamine HQ1-44. On observe en l'absence de fer exogène un effet cytostatique sans altération membranaire pour des concentrations en chélateur comprises entre 3 et 10 micromoles par litre et un effet cytotoxique pour des concentrations en chélateur supérieures à 10 micromoles par litre se traduisant par la libération de LDH. Après addition du fer exogène, on observe une inhibition des effets cytostatiques et cytotoxiques induites par ce chélateur. Pour la Quilamine HQ1-44, on observe en l'absence de fer exogène un effet cytostatique sans altération membranaire pour des concentrations en chélateur inférieures à 3 micromoles par litre (allant de 0,4 à 3 micromoles par litre) et un effet cytotoxique pour des concentrations en chélateur supérieures à 3 micromoles par litre se traduisant par la libération de LDH. Après addition du fer exogène, on observe une amélioration de l'effet antiprolifératif de la Quilamine (IC50 = 0,6 micromole par litre au lieu de 1,4 précédemment mesuré) et une inhibition partielle de la cytotoxicité de ce composé à des concentrations en chélateur supérieures à 3 micromoles par litre. La Quilamine HQ1-44 est donc moins toxique que la 8-hydroxyquinoléine et conserve une action antiproliférative même en cas de surcharge sidérique contrairement à l'ICL670, ce qui présente un certain intérêt pour traiter des maladies proliférative et/ou liées à une surcharge en fer dans les cellules. L'absence d'inhibition de l'effet antiprolifératif de la Quilamine en présence de fer exogène suggère que l'action antiproliférative de la Quilamine n'est pas associée uniquement à sa capacité de déplétion du fer dans les cellules. Elle pourrait-être également associée à la capacité d'inhibition de HQ1-44 du métabolisme des polyamines comme celle démontrée ci-dessous dans les cellules Caco-2 (§4) III- Propriétés biologiques par rapport aux cellules tumorales 1. Efficacité des Quilamines dans les cellules tumorales hépatocytaires de la ligne HepG2 L'efficacité des Quilamines a été analysée sur des cellules hépatocytaires de la lignée tumorale HepG2 issues d'un hépatocarcinome humain, et comparée à celle de l'ICL670, en présence ou non de fer exogène. Les cultures de cellules HepG2 proliférantes ont été traitées 24h après leur ensemencement en microplaques 96 puits, par des concentrations des différentes Quilamines comprises entre 0,1 et 400 micromoles par litre. Les effets cytostatique (antiprolifératif) et cytotoxique des Quilamine après 72h de traitement des 39 cellules ont été évalués respectivement par comptage des noyaux cellulaires après marquage de l'ADN par l'intercalant fluorescent Hoescht 33342 ou l'activité succinate déshydrogenase (SDH) mitochondriale et par l'analyse des dommages membranaires, détectés par le dosage de l'activité lactate déshydrogénase (LDH) dans les surnageants. Les résultats obtenus sur l'activité SDH sont donnés en figure 5. La majorité des Quilamines, comme l'ICL670, présentent en l'absence de fer exogène, des courbes effet-doses biphasiques avec une composante antiproliférative, pour des concentrations comprises entre 1 et 10 micromoles par litre et une composante cytotoxique associée à une libération de LDH, pour des concentrations supérieures à 10 micromoles par litre. Le pourcentage de cellules HepG2 concernées par l'effet antiprolifératif et les valeurs d'IC50 associées à cet effet cytostatique, en l'absence de fer exogène, ont été répertoriés dans le tableau 3 ci-dessous. °A IC54111\4) HQ1-44 30 2,75 HQ1-444 10 4,75 HQ1-443 17,5 2,25 HQ1-33 10 1,5 HQ1-333 12,5 1 HQ1-344 10 1,75 HQ1-343 12,5 2,15 HQ1-34 5 1,75 HQ1-43 10 1,75 ICL-670 72,5 3,85 Tableau 3 : Effet antiprolifératif des Quilamines comparé à celui du chélateur de référence, le déférasiroxTM (ICL670), dans les cellules d'hépatocarcinomes humains (HepG2). L'efficacité antiproliférative de HQ1-44 est la plus élevée après l'ICL670, suivie des composés HQ1-443, HQ1-333 et HQ1-343. En présence de fer exogène, on observe une inhibition des effets cytostatiques et cytotoxiques induites par l'ICL670, tandis que pour la Quilamine HQ1-44 seule l'effet cytotoxique est partiellement inhibé. Comme dans le cas des cellules de la lignée CHO, cette absence d'inhibition de l'effet antiprolifératif des Quilamines par addition de fer exogène semble confirmer que cet effet n'est pas associé uniquement à la capacité de déplétion du fer intracellulaire de la Quilamine. 2. Implication du STP dans l'action antiproliférative des Quilamines dans les cellules 40 tumorales hépatocytaires de la ligne HepG2 (figure 6) L'implication du STP dans l'action cytostatique et cytotoxique des Quilamines a été analysée dans des cellules tumorales hépatocytaires HepG2 proliférantes, après activation du STP ou inhibition compétitive du STP par la spermidine, une polyamine naturellement présente dans l'organisme et la plus efficacement captée par le STP. Les conditions de traitements par les Quilamines sont identiques à celles décrites au paragraphe III-1. En inhibant l'ornithine décarboxylase (ODC), l'enzyme clé de la biosynthèse des polyamines, on provoque une déplétion en polyamines intracellulaires et une activation compensatoire du STP qui permet de combler la carence. Cette activation du STP est faite à l'aide de l'inhibiteur de l' ODC, l'alpha-difluorométhyl ornithine (DFMO). L'inhibition compétitive du STP par la spermidine est provoquée par le co-traitement des cellules par les Quilamines, en présence de spermidine à la concentration de 50 micromoles par litre. Les résultats obtenus avec la Quilamine HQ1-44 sont donnés à la figure 6.

On observe que l'activation du STP par prétraitement au DFMO se traduit par une amplification de sa cytotoxicité aux concentrations supérieures à 50 micromoles par litre (50100 micromoles par litre). On observe que l'inhibition compétitive de la captation de la Quilamine par le STP se traduit en revanche par une inhibition des effets cytostatiques (gamme de concentration en Quilamine inférieure à 10 micromoles par litre) et cytotoxiques (gamme de concentration en Quilamine allant de 50 à 100 micromoles par litre). Ceci suggère l'implication du STP dans les effets de la Quilamine HQ1-44 sur les cellules hépatocytaires HepG2. 3. Efficacité des Quilamines dans les cellules tumorales entéroocytaires de la ligne Caco-2 (figure 7) L'action des Quilamines sur la viabilité cellulaire a été analysée sur les cellules entérocytaires de la lignée tumorale Caco-2, issues d'un carcinome du colon humain et comparée avec l'action de l'ICL670, en présence ou non de fer exogène, après activation (DFMO) ou inhibition compétitive par la spermidine, du STP. Les conditions opératoires utilisées sont identiques à celles utilisées pour les cellules CHO/CHO-MG et HepG2. Comme dans le cas des autres lignées cellulaires en phase proliférative, présentées ci- dessus, les courbes effet-doses de l'action des Quilamines sur le nombre des cellules viables (nombre de noyaux), sont biphasiques avec une composante cytostatique pour des 41 concentrations inférieures à 30 micromoles par litre et une composante cytotoxique avec libération de LDH pour des concentrations supérieures à 30 micromoles par litre. Seule cette seconde composante cytotoxique est observée lorsque les cellules de la lignée Caco-2 sont traitées après la confluence (arrêt de la prolifération).

Les résultats pour la mesure de l'effet antiprolifératif des Quilamines, et de l'ICL670 sur les cellules proliférantes (composante cytostatique), en l'absence de fer exogène, ont été répertoriés dans le tableau 4 ci-dessous. La 8-hydroxyquinoléine (8-HQ) ne présente qu'une seule composante cytotoxique avec une IC50 de 5 micromoles par litre. Composante 1 Composante 2 % LDH/contrôle (1-10 pM) (10-100 pM) Caco-2 J4 % cell IC50 (pM) % cell IC50 (pM) 10 pM 100 pM HQ1-44 70 1,3 30 20 118 287 HQ1-34 20 1 80 45 100 229 HQ1-43 7 1 93 30 93 240 HQ1-33 40 0,8 60 37 118 261 HQ1-444 60 2 40 75 99 118 HQ1-443 5 1 95 35 88 189 HQ1-344 22 3 78 75 95 120 HQ1-343 30 2 70 40 89 255 HQ1-333 20 3 80 60 112 169 8-HQ - - 100 5 281 353 ICL670 18 1,7 82 90 117 130 Tableau 4 : Effet antiprolifératif des Quilamines comparé à ceux des chélateurs de référence, la 8-hydroxyquinoléine (8-HQ) et le déférasiroxTM (ICL670), dans les cellules d'adénocarcinomes du colon humains (Caco-2). Après addition du fer exogène, on observe une inhibition des effets cytostatiques et cytotoxiques induites par l'ICL670, tandis que pour la Quilamine HQ1-44 seule l'effet cytotoxique est partiellement inhibé. Cette absence d'inhibition de l'effet antiprolifératif des Quilamines par addition de fer exogène semble confirmer que cet effet n'est pas associé uniquement à la capacité de déplétion du fer intracellulaire de la Quilamine. 3. Action antitumorale des Quilamines par déplétion du fer intracellulaire dans les cellules tumorales entérocytaires de la ligne Caco-2 Après traitement de 72h des cellules Caco-2, en phase proliférative par la Quilamine HQ1-44 et l'ICL670 à la concentration de 10 micromoles par litre, on procède à l'analyse par la technique de Real Time- Polymerase Chain Reaction (RT-qPCR) de l'expression des deux principaux gènes de régulation du métabolisme du fer intracellulaire, celui de la L-ferritine, 42 protéine de stockage du fer, ainsi qu'à celui du récepteur à la transferrine, protéine d'importation du fer de la membrane. Les résultats sont présentés à la figure 8. Les ADNc (Acide Désoxyribonucléique Complémentaire) synthétisés lors de la transcription inverse sont amplifiés par la qPCR (quantité de réaction de polymérisation en chaîne) pour quantifier l'expression des ARNm (Acide Ribonucléique Messager) des gènes impliqués dans le métabolisme du fer. Après traitement de 72h des cellules Caco-2, en phase proliférative par la Quilamine HQ1-44 et l'ICL670, on procède à l'analyse biochimique du fer intracellulaire (Fe2+ et Fe3+), des deux principales protéines de régulation du métabolisme du fer par le dosage des concentrations intracellulaire en L-ferritine, protéine de stockage du fer, ainsi qu'à l'analyse du récepteur soluble à la transferrine dans le surnageant cellulaire, marqueur de la concentration en récepteur à la transferrine, protéine d'importation du fer de la membrane. Les résultats sont présentés à la figure 9. Sur les cellules Caco-2 en phase proliférative, la Quilamine HQ1-44 et l'ICL670 à la concentration de 10 micromoles par litre, ne modifient pas de façon significative l'expression des gènes codant pour la protéine de stockage du fer, la L-ferritine(L-Fer), et pour la principale voie d'entrée du fer dans la cellule, le récepteur à la transferrine (RTrf). L'exposition des cellules à la transferrine saturée en fer (holotransferrine) ne modifie pas l'expression de la L-Ferritine et réduit l'expression du récepteur à la transferrine. La surcharge en fer induite par l'exposition pendant 72h à 20 micromoles par litre de Fer-citrate s'accompagne d'une faible augmentation de l'expression de la L-ferritine (non significative) et d'une inhibition de l'expresssion du récepteur à la transferrine, conformes à la régulation IRE/IRP de ces deux gènes. L'analyse biochimique des concentrations en L-ferritine et en fer montrent que la Quilamine HQ1-44 et l'ICL670 à la concentration de 10 micromoles par litre, provoquent une déplétion intracellulaire en fer. Le traitement par ces chélateurs est sans effet significatif sur le récepteur soluble à la transferrine. A l'inverse, l'exposition à l'holotransferrine (Trf saturée en fer) et au Fer-citrate, s'accompagne d'une augmentation marquée de la L-ferritine et du fer intracellulaire. 5. Action antitumorale des Quilamines par implication du métabolisme des polyamines dans les cellules tumorales entérocytaires de la ligne Caco-2 Après traitement de 72h des cellules Caco-2, en phase proliférative par la Quilamine 43 HQ1-44 et l'ICL670 à la concentration de 10 micromoles par litre, on procède à l'analyse par RT-qPCR de l'expression des principaux gènes de régulation du métabolisme des polyamines, comme l'ornithine décarboxylase (ODC), l'antizyme (0AZ1), la S-adénosyl méthionine décarboxylase (SAMDC) et la polyamine oxydase (PAO). Les résultats sont présentés à la figure10. Après traitement de 72h des cellules Caco-2, en phase proliférative par la Quilamine HQ1-44 et l'ICL670 à la concentration de 10 micromoles par litre, on procède à l'analyse biochimique par spectrométrie de masse en tandem couplée à la chromatographie liquide (LC/MSMS) des polyamines intracellulaires comme la putrescine, la spermidine et la spermine, après dansylation. Les résultats sont présentés à la figurel 1. Le traitement pendant 72h des cellules Caco-2 proliférantes, par les chélateurs HQ1-44 et ICL670 à la concentration de 10 micromoles par litre est sans effet sur l'expression des gènes impliqués dans la régulation du métabolisme des polyamines, comme celui de l'ODC de l'antizyme (OAZ1), de la S-adénosyl méthionine décarboxylase (SAMDC) et celui de la polyamine oxydase (PAO). Le citrate seul provoque la réduction de l'expression de gènes impliqués dans la voie de biosynthèse des polyamines (ODC et SAMDC). En revanche la surcharge en fer provoquée par l'holotransferrine ou le fer-citrate est sans effet sur l'expression des gènes du métabolisme des polyamines. La surcharge en fer ne modifie pas les concentrations en polyamines naturelles (Putrescine, spermidine et spermine). En revanche, les concentrations intracellulaires de putrescine (Put) et de spermidine (Spd) sont abaissées après traitement par la Quilamine HQ1- 44 (-73% Put, -55% Spd) et à un degré moindre par l'ICL670 (-34% Put, -15% Spd). Cette réduction de la Put, associée à une diminution plus restreinte de la Spd et à l'absence d'effet sur la Spm intracellulaire est comparable à l'effet de la DFMO, inhibiteur de l'ODC.

Cette réduction des polyamines intracellulaire, putrescine et spermidine, induite dans les cellules Caco-2 proliférantes par la Quilamine HQ1-44 et à un degré moindre avec l'ICL670 à la concentration de 10 micromoles par litre, contribue à l'effet antiprolifératif de ces chélateurs, conjointement à la déplétion en fer qu'ils provoquent. L'influence de l'inhibition des polyamines intracellulaire par HQ1-44 sur la prolifération cellulaire expliquerait l'absence d'inhibition de l'effet antiprolifératif des Quilamines par le fer exogène 44

Claims (8)

1. REVENDICATIONS1. Composé caractérisé en ce qu'il répond à la formule générale (I) suivante, ou à une de ses formes conjuguées, ses sels ou solvates : R3 R4 a (I) dans laquelle : RI, R2, R3, R4 et R5 sont choisis indépendamment les uns des autres parmi un atome d'hydrogène, un groupe hydrocarboné linéaire ou ramifié, saturé, insaturé, cyclique ou aromatique, comprenant de 1 à 10 atomes de carbone, un groupe hydrocarboné cyclique, aliphatique ou aromatique, comprenant de 4 à 12 atomes de carbone, un halogène, un thiol, un hydroxyle, une amine de préférence secondaire ou tertiaire, un éther, un thioéther ; R6 est un hydroxyle ; a est égal à 0 ou 1 avec : -lorsque a est égal à 0, M est un groupe répondant à la formule (I') suivante : [L1_M dans laquelle : b étant égal à 0 ou 1, L représentant un groupe alkyle ayant de un à quatre atomes de carbone, un groupe C=0 ou C=S, Al répondant à la formule générale (X) ou (Y): R'4 R'3 Al 45B1 N R11 B2 -N R12 B3 N R14 R13 J h (X) dans laquelle : Rn, R12, R13 et R14 sont choisis indépendamment les uns des autres parmi des atomes d'hydrogène, des groupes hydrocarbonés linéaires ou ramifiés, saturés, insaturés, cycliques ou aromatiques comprenant de 1 à 12 atomes de carbone, et des groupes protecteurs de fonction amine, Bi, B2 et B3 sont choisis indépendamment les uns des autres parmi des groupes hydrocarbonés linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, comprenant de 2 à 6 atomes de carbone i et j, identiques ou différents, sont égaux à 0 ou à 1, h est un entier allant de 0 à 4; R16 R17 1 I 0 B2 - C) B'3 - N RO 4 I I Ril R13 J dans laquelle : h (Y) R' K 12 K 13 K R15 R16 et Ri' 17 sont choisis indépendamment les uns des autres parmi des groupes hydrocarbonés linéaires ou ramifiés, saturés, insaturés, cycliques ou aromatiques comprenant de 1 à 12 atomes de carbone, et des groupes protecteurs de fonction amine. Bi et B2 sont choisis indépendamment les uns des autres parmi des groupes hydrocarbonés linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, comprenant de 2 à 6 atomes de carbone B'3 est choisi parmi des groupes hydrocarbonés linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, 20 comprenant de 2 à 6 atomes de carbone, pouvant être interrompus par une ou plusieurs fonctions amines secondaires -NH- et/ou une ou plusieurs fonctions amines tertiaires -NR11-, NR12_. i et j, identiques ou différents, sont égaux à 0 ou à 1, 46h est un entier allant de 0 à 4 ; -et lorsque a est égal à 1, M est un groupe répondant à la formule (I") suivante : [Li-H Dl-N-D2 H A2 dans laquelle : c et c', identiques ou différents, étant égaux à 0 ou à 1, L et L', identiques ou différents, représentant un groupe alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone, un groupe CO= ou C=S, D1 et D2, identiques ou différents, représentant un groupe hydrocarboné, linéaire ou ramifié, comprenant de 1 à 5 atomes de carbone A2 étant identique ou différent de Al et répondant à la formule (X) ou (Y); R, R.,2, R,3, R'4, K -,R'5 et R'6, sont choisis indépendamment les uns des autres parmi un atome d'hydrogène, un groupe hydrocarboné linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, comprenant de 1 à 10 atomes de carbone, un groupe hydrocarboné cyclique, aliphatique ou aromatique éventuellement substitué, comprenant de 4 à 12 atomes de carbone, un halogène, un thiol, un hydroxyle, une amine de préférence secondaire ou tertiaire, un éther, un thioéther.
2. 2. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il est un chélateur de métaux
3. 3. Composé selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'il est un chélateur du fer, du cuivre, du manganèse et/ou du zinc.
4. 4.Composé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la ou les chaînes polyaminées sont cationiques ou cationisables.
5. 5.Composé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que a est égal à 1, c et c' sont identiques, L et L' sont identiques, D1 et D2 sont identiques.
6. 6.Composé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que Ri, R2, R3, R4, R5 et R6 sont identiques à R'1,R'2,R,4, R'5et R'6 respectivement.
7. 7. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que R'6 est un hydroxyle.
8. 8.Composé selon la revendication précédente, caractérisé en ce que 131, B2, B3 sont choisis parmi des groupes n-propyle et n-butyle, et B'3 choisi parmi des groupes n-propyle et n-butyle 30 pouvant être interrompus par une ou plusieurs fonctions amines secondaires -NH- et/ou un ou plusieurs fonctions amines tertiaires -NR11-, - (I'') NR12_. 47.Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce qu'il répond à la formule (I) dans laquelle : Ri à R5 sont choisis indépendamment les uns des autres parmi un atome d'hydrogène, un groupe hydrocarboné linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, comprenant de 1 à 10 atomes de carbone ; R6 est un hydroxyle ; a est égal à zéro ; b est égal à un ; L est un groupe alkyle en Cl-C2; et le groupe Al répond à la formule (X) dans laquelle R12, R13 et R14 étant choisis indépendamment les uns des autres parmi des atomes d'hydrogène, et des groupes protecteurs de fonction amine ; 131, B2 et B3 identiques ou différents étant des groupes n-propyle et/ou n-butyle ; i et j identiques ou différents étant égaux à un ou à zéro ; h étant égal à un. 10. Composé selon l'une quelconque des revendications précédentes, en tant qu'agent thérapeutique chez l'homme et chez l'animal. 11. Composé selon la revendication 10, en tant qu'agent de traitement des maladies prolifératives, 12. Composé selon la revendication 10 en tant qu'agent de traitement des maladies 15 neurodégénératives. 13. Composé selon la revendication 10 en tant qu'agent de traitement des maladies liées à une surcharge en fer, cuivre, zinc et/ou manganèse, dans les cellules humaines ou animales. 14. Composé selon la revendication 10, comme agent inhibiteur de la synthèse des polyamines dans l'organisme. 20 15. Composition comprenant au moins un composé tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 14 et éventuellement au moins un principe actif additionnel, le(s)dit(s) composé(s) et éventuel(s) principe(s) actif(s) de la composition pouvant être utilisés simultanément, séparément ou de manière étalée dans le temps. 16. Composition selon la revendication 15, caractérisée en ce que le principe actif 25 additionnel est choisi parmi des agents inhibiteurs de la synthèse endogène des polyamines ou des agents chimiothérapeutiques. 30 48