FR2963208A1

FR2963208A1 - FOOD FOR AQUACULTURAL FOOD

Info

Publication number: FR2963208A1
Application number: FR1056313A
Authority: FR
Inventors: Alain Guyonvarch; Bernard Devresse
Original assignee: INVIVO NSA
Current assignee: INVIVO NSA
Priority date: 2010-07-30
Filing date: 2010-07-30
Publication date: 2012-02-03
Anticipated expiration: 2030-07-30
Also published as: EP2597965A1; MX2013001196A; BR112013002174A2; WO2012013753A1; ECSP13012464A; CN103096729A; FR2963208B1

Abstract

L'invention concerne un extrait de cystes d'Artémies et un aliment aquacole contenant ledit extrait.The invention relates to an extract of cysts of Artemia and an aquaculture feed containing said extract.

Description

L'invention concerne un extrait destiné à l'alimentation aquacole. De par leur ontogenèse, les larves de poisson et de crustacés doivent se nourrir activement bien avant que le développement de leur système digestif ne soit achevé. Pour la plupart des espèces marines, les aliments inertes proposés ne conviennent pas aux premières phases de la vie larvaire. Il est donc nécessaire d'alimenter ces larves avec des proies vivantes depuis la première prise de nourriture (larves de 0,2 à 0,4 mg selon les espèces) jusqu'à un stade post-larvaire (plus de 50 mg). Pendant cette courte période, la croissance est rapide. En élevage intensif, il a fallu créer une chaîne alimentaire artificielle avec production d'algues unicellulaires dont se nourrissent des animaux eux-mêmes destinés à servir de proies pour les larves de poisson. Cependant, les coûts de ces solutions demeurent élevés. Dans le milieu naturel, les larves se nourrissent de plancton. Une des solutions est donc de reconstituer un milieu favorisant le développement du phytoplancton et du zooplancton et d'y introduire les larves. Les espèces utilisées le plus souvent en tant que proies vivantes sont les Artémia et les rotifères. Les rotifères sont utilisés pour leur productivité exceptionnelle reposant sur une multiplication parthénogénétique. Les Artémies (Artémia spp.) sont adaptés aux milieux sursalés. Ils produisent des cystes en grande quantité dans les marais salants et autre étendues d'eaux sursalées. Faciles à récolter, ces cystes en état de dormance (« oeufs de durée ») sont conservés à l'état desséché sous vide. Leur emploi en écloserie est techniquement aisé : il suffit de les réactiver par réhydratation et oxygénation pour obtenir en 24h à 28°C l'éclosion des larves au stade nauplius. Les nauplius peuvent être utilisés directement comme proies. Un élevage de quelques jours permet d'obtenir des proies plus grosses. The invention relates to an extract for aquaculture feed. Because of their ontogeny, fish and shellfish larvae must actively feed before the development of their digestive system is complete. For most marine species, the proposed inert foods are not suitable for the early stages of larval life. It is therefore necessary to feed these larvae with live prey from the first intake of food (larvae 0.2 to 0.4 mg depending on the species) to a post-larval stage (more than 50 mg). During this short period, growth is fast. In intensive farming, it was necessary to create an artificial food chain with the production of unicellular algae, which feed on the animals themselves, intended to serve as prey for the fish larvae. However, the costs of these solutions remain high. In the wild, larvae feed on plankton. One of the solutions is therefore to reconstitute a medium that promotes the development of phytoplankton and zooplankton and to introduce the larvae. The species used most often as live prey are Artemia and rotifers. Rotifers are used for their exceptional productivity based on a parthenogenetic multiplication. The Artemia (Artemia spp.) Are adapted to the over-saturated environments. They produce cysts in large quantities in salt marshes and other expanses of overwashed water. Easy to harvest, these dormant cysts ("eggs of duration") are preserved in the dried state under vacuum. Their use in hatcheries is technically easy: it is enough to reactivate them by rehydration and oxygenation to obtain in 24 to 28 ° C the hatching of larvae at the nauplius stage. The nauplii can be used directly as prey. Breeding a few days allows to obtain larger prey.

Les Artémies sont aujourd'hui irremplaçables, essentiellement d'un point de vue physiologique. Cependant, cette proie vivante est très coûteuse à produire en écloserie et, comme toutes les proies vivantes, elle peut véhiculer des pathogènes et les transmettre aux larves. En outre, les qualités nutritionnelles des Artémias diminuent rapidement dans les bassins d'élevage car elles ne peuvent s'alimenter et doivent donc puiser dans leurs propres réserves pour survivre. Les Artémias vivantes doivent donc être renouvelées de manière fréquente (apport de nouvelles Artémias, élimination des Artémias plus âgées). Artemics are irreplaceable today, essentially from a physiological point of view. However, this live prey is very expensive to produce in hatcheries and, like all living prey, can carry pathogens and transmit them to the larvae. In addition, the nutritional qualities of Artemia are decreasing rapidly in breeding ponds because they can not feed themselves and must therefore draw on their own reserves to survive. Living Artemia must therefore be renewed frequently (new Artemia, elimination of older Artemia).

Il existe donc un besoin en un aliment pour l'alimentation aquacole, en particulier des larves de poissons et de crustacés, moins coûteux et plus facile d'utilisation que les Artémias mais tout aussi nutritif Il a donc été proposé de remplacer les Artémies par leurs cystes, c'est-à-dire leurs oeufs, disponibles en quantité indéfinie, ce qui éviterait le processus d'éclosion. Cependant, les inventeurs ont observé de manière surprenante que les cystes d'Artémies comprennent dans leur paroi une quantité de semi-carbazide (SEM) non conforme à la législation européenne en vigueur (Coppens et al., European regulations on nutraceuticals, dietary supplements and functional foods : A framework based on safety, Toxicology, 221 (2006) 59-74). Il a donc été proposé de remplacer les cystes d'Artémies par des cystes décapsulés, c'est-à-dire des cystes dont la paroi a été éliminée par décapsulation chimique. Des procédés de décapsulation de cystes sont décrits dans « Manual on the Production and Use of Live Food for Aquaculture », Food and Agriculture Organization of the United Nations, paragraphe 4.2.3 "Decapsulation", http://www.fao.org/DOCREP/003/W3732E/ w3732e0n.htm et "An improved technique for decapsulation and preservation of Artemia cysts (Brine shrimp eggs) developed at the Chacheongsao fisheries station, Anand Tunsutapanich). Ces procédés utilisent de l'hypochlorite et de la soude caustique. Cependant, les inventeurs ont là encore observé de manière surprenante que les cystes d'Artémies décapsulés par ces méthodes comprennent également une quantité de semicarbazide (SEM) non conforme à la législation européenne en vigueur car la réaction de décapsulation chimique produit des SEM par oxydation alcaline. Les inventeurs ont donc cherché à mettre au point un procédé particulier pour fournir un extrait de contenu des cystes d'Artémies dépourvu de SEM aussi nutritif que les Artémies en alimentation aquacole. Les nitrofuranes comprennent un groupe d'antibiotiques qui a été largement utilisé dans le passé dans les élevages intensifs de porcs, volailles et poissons. A la fin des années 80, il a été prouvé qu'ils sont métabolisés rapidement après leur administration et forment des résidus persistants. Les nitrofuranes et leurs métabolites ont donc été classés dans les composés génotoxiques. Le semi-carbazide (SEM) est le métabolite caractéristique d'un de ces nitrofuranes, la 5-nitrofurazone. Le SEM est un membre de la famille des hydrazines qui sont des agents cancérigènes. En 2003, le SEM a été détecté dans des aliments d'origine non- animale puis il a été détecté dans des produits marins pêchés non traités par des antibiotiques comme les langoustes (L. Saari et al., Nove/ source of semicarbazide : levels of semicarbazide in cookd crayfish samples determined by LC/MS/MS, Food Additives and Contaminants, Vol 21, No9, p 825-832). Il existe donc un besoin en un aliment pour l'alimentation aquacole à base d'Artémies dépourvu de SEM. There is therefore a need for a food for aquaculture, especially fish and shellfish larvae, cheaper and easier to use than Artemia but equally nutritious. It has therefore been proposed to replace Artemia with cysts, ie their eggs, available in an indefinite quantity, which would avoid the hatching process. However, the inventors have surprisingly observed that the cysts of Artemia contain in their wall a quantity of semi-carbazide (SEM) which is not in accordance with the European legislation in force (Coppens et al., European Regulations on Nutraceuticals, Dietary Supplements). functional foods: A framework based on safety, Toxicology, 221 (2006) 59-74). It has therefore been proposed to replace the Artemia cysts with decapsulated cysts, ie cysts whose wall has been removed by chemical decapsulation. Methods for decapsulation of cysts are described in "Manual on the Production and Use of Live Food for Aquaculture", Food and Agriculture Organization of the United Nations, section 4.2.3 "Decapsulation", http://www.fao.org/ DOCREP / 003 / W3732E / w3732e0n.htm and "An improved technique for decapsulation and preservation of brine shrimp eggs developed at the Chacheongsao Fisheries Station, Anand Tunsutapanich.) These processes use hypochlorite and caustic soda. However, the inventors have again surprisingly observed that Artemys cysts decapsulated by these methods also include a quantity of semicarbazide (SEM) which does not comply with the European legislation in force because the chemical decapsulation reaction produces SEM by alkaline oxidation. The inventors have therefore sought to develop a particular method for providing a content extract of cysts of Artemia without SEM also nutritious than Artemia in aquaculture. Nitrofurans include a group of antibiotics that has been used extensively in intensive pastures of pigs, poultry and fish. In the late 1980s, they were shown to be metabolized rapidly after administration and to form persistent residues. Nitrofurans and their metabolites have therefore been classified in genotoxic compounds. Semi-carbazide (SEM) is the characteristic metabolite of one of these nitrofurans, 5-nitrofurazone. SEM is a member of the family of hydrazines that are carcinogens. In 2003, SEM was detected in foods of non-animal origin and then detected in marine products caught untreated by antibiotics such as lobsters (L. Saari et al., Nove / source of semicarbazide: levels In this paper, the following is a discussion of the following: LC / MS / MS, Food Additives and Contaminants, Vol 21, No 9, pp. 825-832). There is therefore a need for a food for aquaculture feed based on Artemia without SEM.

La présente invention se propose de fournir un tel aliment. Les inventeurs ont mis au point un procédé de décapsulation des cystes d'Artémies qui permet d'obtenir un extrait de cystes d'Artémies dépourvu de SEM. C'est pourquoi l'objet de l'invention concerne un extrait de cystes d'Artémies dépourvu de semi-carbazide (SEM), préférentiellement en tant que complément nutritionnel 10 d'un aliment aquacole. Il a été ainsi montré que cet extrait est particulièrement avantageux lorsqu'il est utilisé dans des aliments des larves de poissons et crustacés puisque ces aliments sont susceptibles de remplacer l'apport en Artémias vivantes. Le concentré de l'invention est destiné à tous les domaines de l'alimentation aquacole, 15 en particulier l'alimentation des larves de poissons ou de crustacés. Il est particulièrement avantageux pour l'alimentation des larves de crevettes. Selon un mode de réalisation, l'extrait selon l'invention est un concentré de plaquettes vitellines intactes. Les cystes d'Artémies comprennent des plaquettes vitellines. 20 On entend par «plaquettes vitellines » les organites de stockage de l'oeuf délimités par une membrane issus de la vitellogenèse et présents dans le cytoplasme de l'ovocyte. Elles font partie du « vitellus ». On entend par « vitellus » l'ensemble des substances de réserve de l'oeuf. On entend par « plaquette vitelline intacte » une plaquette vitelline isolable dont le 25 contenu peut spontanément s'hydrolyser en moins de deux heures dans les conditions physiologiques suivantes : en eau de mer à pH 8.5-9.0 et 28.0-30.0°C. Si la plaquette n'est pas intacte, elle reste sous forme de granule avec sa membrane externe dans ces mêmes conditions. Un autre objet de l'invention concerne l'utilisation d'un extrait de l'invention pour 30 alimenter des larves de poissons ou de crustacés en aquaculture. Un autre objet de l'invention concerne un aliment aquacole comprenant un extrait de plaquettes vitellines intactes de l'invention. Un autre objet de l'invention concerne l'utilisation d'un extrait de l'invention pour préparer un aliment aquacole. The present invention proposes to provide such a food. The inventors have developed a decapsulation process for cysts of Artemia which makes it possible to obtain an extract of cysts of Artemia without SEM. Therefore, the subject of the invention relates to an extract of cysts of Artemia without semicarbazide (SEM), preferably as a nutritional supplement of an aquaculture feed. It has thus been shown that this extract is particularly advantageous when used in fish and crustacean larvae feed since these foods are likely to replace the supply of live Artemia. The concentrate of the invention is intended for all fields of aquaculture feeding, in particular the feeding of fish or crustacean larvae. It is particularly advantageous for feeding shrimp larvae. According to one embodiment, the extract according to the invention is an intact vitelline platelet concentrate. Artemia cysts include vitelline platelets. The term "vitelline platelets" is understood to mean the membrane-bound egg storage organelles derived from vitellogenesis and present in the cytoplasm of the oocyte. They are part of the "vitellus". The term "vitellus" is understood to mean all the reserve substances of the egg. The term "intact vitelline platelet" refers to an isolable vitelline platelet whose contents can spontaneously hydrolyze in less than two hours under the following physiological conditions: in seawater at pH 8.5-9.0 and 28.0-30.0 ° C. If the wafer is not intact, it remains in the form of a granule with its outer membrane under these same conditions. Another object of the invention relates to the use of an extract of the invention for feeding fish or crustacean larvae in aquaculture. Another object of the invention relates to an aquaculture feed comprising an intact vitelline platelet extract of the invention. Another object of the invention relates to the use of an extract of the invention for preparing an aquaculture feed.

Un autre objet de l'invention concerne un procédé visant à préparer un extrait de l'invention. Le procédé de l'invention est particulièrement avantageux puisqu'il ne nécessite pas de processus d'éclosion coûteux et parce que le produit de départ, les oeufs, est facilement accessible. Les cystes d'Artémies sont très abondantes dans les étendues salées alors que le nombre de cystes viables est parfois très faible. L'aliment de l'invention est donc particulièrement avantageux par rapport aux proies vivantes. La 1 ere étape de ce procédé (i) consiste à rompre et à éliminer la membrane du cyste. Another object of the invention relates to a process for preparing an extract of the invention. The method of the invention is particularly advantageous since it does not require expensive hatching processes and because the starting material, the eggs, is easily accessible. The cysts of Artemia are very abundant in salty areas whereas the number of viable cysts is sometimes very low. The food of the invention is therefore particularly advantageous compared to live prey. The first step of this process (i) consists of breaking up and eliminating the membrane of the cyst.

La rupture se fait mécaniquement après réhydratation. Préférentiellement, la rupture mécanique de la membrane du cyste est réalisée par une turbine munie de couteaux. On entend par « membrane du cyste » l'ensemble des couches cellulaires séparant l'embryon de l'extérieur, soit la couche alvéolaire, les membranes cuticulaires externe et interne et la cuticule embryonnaire (FAO, CYST BIOLOGY, Gilbert Van Stappen). The rupture is done mechanically after rehydration. Preferably, the mechanical rupture of the membrane of the cyst is performed by a turbine provided with knives. The term "cyst membrane" means the set of cell layers separating the embryo from the outside, namely the alveolar layer, the outer and inner cuticular membranes and the embryonic cuticle (FAO, CYST BIOLOGY, Gilbert Van Stappen).

Ceci exclut que la 1ère étape du procédé soit réalisée par un procédé classique de décapsulation chimique qui ne permet pas de rompre la cuticule embryonnaire et la membrane cuticulaire interne. La membrane du cyste peut être éliminée par séparation mécanique et/ou centrifugation (par exemple, centrifugeuse à décantation). This excludes that the first step of the process is carried out by a conventional method of chemical decapsulation which does not allow to break the embryonic cuticle and the inner cuticular membrane. The membrane of the cyst can be removed by mechanical separation and / or centrifugation (for example, centrifuge with decantation).

Par exemple, le mélange de contenus de cystes et de membranes de cystes rompues obtenu à l'étape précédente est décanté sur une série de tamis de moins de 300 µm puis de 150 µm, puis de 70 µm. De préférence, ces étapes du procédé de l'invention se déroulent à un pH compris entre 4 et 10, de préférence compris entre 5 et 8.5, de manière particulièrement préférée compris entre 6 et 7. De préférence, l'ensemble des étapes du procédé de l'invention se déroule à une température comprise entre 0 et 60°C, de préférence comprise entre 0 et 40°C, de manière particulièrement préférée comprise entre 0 et 20°C. Le procédé de l'invention comprend une 2ème étape éventuelle (ii) de séchage de l'extrait obtenu. Cette étape de séchage peut se faire par atomisation, l'air chaud entrant dans la tour d'atomisation devant être à une température inférieure à 200°C, de préférence entre 160 et 180°C; ou par lyophilisation vraie à une température inférieure à - 15°C Le procédé de l'invention comprend éventuellement l'ajout lors de l'étape (i) d'ingrédients et additifs classiquement utilisés par l'homme du métier en alimentation aquacole, tels que des vitamines, lipides, antioxydants. Un autre objet de l'invention concerne un extrait de cystes d'Artémies dépourvu de 5 SEM susceptible d'être obtenu selon le procédé de préparation de l'invention. Un autre objet de l'invention concerne un procédé de préparation de l'aliment selon l'invention comprenant une étape d'agglomération d'un extrait de l'invention. L'agglomération permet d'obtenir des particules de taille compatible avec celle des larves auxquelles elles sont destinées. L'équipement pour l'agglomération à échelle industrielle 10 consiste par exemple en un lit fluidisé, un lit fluidisé en continu, un mélangeur avec bras excentrique type « high shear ColetteTM», un disque ou tambour granulateur type « tumble growth, pin mixer ou pelletizing disc, etc... » For example, the mixture of contents of cysts and broken cyst membranes obtained in the previous step is decanted on a series of sieves of less than 300 microns then 150 microns, then 70 microns. Preferably, these steps of the process of the invention are carried out at a pH of between 4 and 10, preferably between 5 and 8.5, particularly preferably between 6 and 7. Preferably, all the steps of the process of the invention is carried out at a temperature between 0 and 60 ° C, preferably between 0 and 40 ° C, particularly preferably between 0 and 20 ° C. The process of the invention comprises an optional second stage (ii) of drying the extract obtained. This drying step can be done by atomization, the hot air entering the atomization tower to be at a temperature below 200 ° C, preferably between 160 and 180 ° C; or by true freeze-drying at a temperature below -15 ° C. The process of the invention optionally comprises the addition during step (i) of ingredients and additives conventionally used by those skilled in the aquaculture feed, such as as vitamins, lipids, antioxidants. Another subject of the invention relates to a SEM-free Artemia cyst extract that can be obtained according to the preparation process of the invention. Another subject of the invention relates to a process for preparing the food according to the invention comprising a step of agglomeration of an extract of the invention. Agglomeration makes it possible to obtain particles of a size compatible with that of the larvae for which they are intended. The equipment for agglomeration on an industrial scale 10 consists, for example, of a fluidized bed, a continuous fluidized bed, a mixer with eccentric arm of the "high shear ColetteTM" type, a granulator-type disk or drum, such as "tumble growth, pin mixer or pelletizing disc, etc ... »

Les exemples suivants illustrent l'invention sans en limiter la portée. The following examples illustrate the invention without limiting its scope.

Exemple 1 : Mesure de la quantité de SEM sur différentes préparations de cystes La quantité de SEM a été mesurée sur les préparations suivantes par chromatographie LC-MS/MS: Cystes ND YP (< 100 gin) Cystes Non Décapsulés. Ces cystes entiers sont coupés par une turbine munies de couteaux. Le contenu du cyste et sa membrane sont mis en suspension aqueuse. Fraction collectée par tamisage passant à travers la maille d' un tamis de 100 µm. Cystes Décapsulés. Ces cystes décapsulés sont coupés par une turbine munies de couteaux. Le contenu du cyste et sa membrane sont mises en suspension aqueuse. Fraction collectée par tamisage passant à travers la maille d' un tamis de 100 µm. Cystes décapsulés membranes (> 100 gin) Cystes Décapsulés. Ces cystes décapsulés sont coupés par une !turbine munies de couteaux. Les membranes sont collectées par sur un tamis de 100µm (refus du tamis). .......................................................................... .......................................................................... .......................................................................... ................ . Cystes Non Décapsulés. Ces cystes entiers sont coupés par une turbine munies de couteaux. Les membranes sont collectées sur un tamis de 100µm (refus du tamis). 15 20 "Cystes décapsulés" signifie cystes décapsulés par un procédé classique de décapsulation. Example 1: Measurement of the amount of SEM on different cyst preparations The amount of SEM was measured on the following preparations by LC-MS / MS: ND YP cysts (<100 g) non-decapsulated cysts. These whole cysts are cut by a turbine equipped with knives. The contents of the cyst and its membrane are suspended in water. Fraction collected by sieving passing through the mesh of a 100 μm sieve. Decapsulated cysts. These decapsulated cysts are cut by a turbine equipped with knives. The contents of the cyst and its membrane are suspended in water. Fraction collected by sieving passing through the mesh of a 100 μm sieve. Decapsulated cysts membranes (> 100 gin) Decapsulated cysts. These decapsulated cysts are cut by a turbine equipped with knives. The membranes are collected by a sieve of 100 .mu.m (sieve refusal). .................................................. ........................ .......................... ................................................ .. .................................................. ...................... ................. Non-decapsulated cysts. These whole cysts are cut by a turbine equipped with knives. The membranes are collected on a sieve of 100 .mu.m (sieve refusal). "Decapsulated cysts" means cysts decapsulated by a conventional decapsulation process.

Procédé classique de décapsulation des cystes d'Artémies utilisé : Les cystes sont réhydratés pendant 1 heure dans l'eau à 25°C. Ils sont ensuite collectés sur un tamis de 125 µm, rincés et transférés dans une solution d'hypochlorite à 15-20°C comprenant 0,5 g de produit hypochlorite actif par gramme de cystes, 0,15 g de soude (NaOH) par gramme de cystes et de l'eau de mer jusque 14 ml par gramme de cystes. Conventional process for decapsulation of Artemys cysts used: The cysts are rehydrated for 1 hour in water at 25 ° C. They are then collected on a 125 μm sieve, rinsed and transferred into a hypochlorite solution at 15-20 ° C comprising 0.5 g of active hypochlorite product per gram of cysts, 0.15 g of sodium hydroxide (NaOH) per gram of cysts and seawater up to 14 ml per gram of cysts.

Les cystes sont ôtés et rincés quand ils deviennent orange. Les résultats sont les suivants. Code Quantité de SEM Cystes ND YP (< 100 µm) conforme Cystes D YP (< 100 µm) Non conforme Cystes ND membrane (> 100 µm) Non conforme Cystes D membrane (> 100 µm) Non conforme Cystes ND Full Non conforme La contamination des cystes d'Artémies est d'environ 4 µg de SEM/kg (ppb). The cysts are removed and rinsed when they turn orange. The results are as follows. Code Quantity of SEM YY cysts YP (<100 μm) compliant D YP cysts (<100 μm) Not compliant ND membrane cysts (> 100 μm) Not compliant D-membrane cysts (> 100 μm) Not compliant ND cyst Not compliant Contamination cysts of Artemia is about 4 μg SEM / kg (ppb).

Exemple 2 : Procédé de préparation d'un extrait de contenu de cystes d'Artémia Example 2 Process for the Preparation of a Content Extract of Artemia Cysts

Dans une cuve de 5000 litres, il est mis en suspension 1000 kg de cystes d'Artémies avec 4000 litres d'eau douce courante à température ambiante, ne dépassant pas 20°C. Les cystes d'Artémies sont laissés en suspension avec agitation pendant une heure afin de permettre leur hydratation complète. Le pH est contrôlé et si nécessaire ajusté à 6.5. Les cystes hydratés sont ensuite pompés vers une turbine munie de couteaux qui coupera individuellement chacun de ces cystes. Les cystes ainsi ouverts sont passés sur un tamis vibrant de 300 µm, puis 150 µm et 25 enfin 70 µm. Les membranes sont refusées sur les trois tamis successifs et le contenu du cyste est recueilli libre de membranes. In a tank of 5000 liters, 1000 kg of Artemia cysts are suspended with 4000 liters of fresh water running at room temperature, not exceeding 20 ° C. Artemia cysts are left in suspension with agitation for one hour to allow complete hydration. The pH is controlled and if necessary adjusted to 6.5. The hydrated cysts are then pumped to a turbine with knives that will individually cut each of these cysts. The cysts thus opened are passed through a vibrating screen of 300 μm, then 150 μm and finally 70 μm. The membranes are rejected on the three successive screens and the contents of the cyst are collected free of membranes.

Ce contenu du cyste est ensuite passé dans une centrifugeuse à décantation afin de séparer les plaquettes vitellines du reste du contenu du sac vitellin. L'ensemble du procédé a lieu à température ambiante, ne dépassant pas 20°C et dans une gamme de pH optimale de 6.5 à 7.0. Le procédé est exécuté en moins de deux heures. Exemple 3 : Procédé de préparation d'un aliment aquacole à partir de l'extrait obtenu à l'Exemple 1 This cyst content is then passed through a decanting centrifuge to separate the vitelline platelets from the rest of the yolk sac contents. The entire process takes place at room temperature, not exceeding 20 ° C and in an optimum pH range of 6.5 to 7.0. The process is executed in less than two hours. Example 3 Method for Preparing an Aquaculture Feed from the Extract Obtained in Example 1

L'extrait obtenu à l'Exemple 2 est mélangé à d'autres ingrédients et additifs tels que 10 de l'huile de poisson (minimum 3%), des vitamines et minéraux traces, des antioxydants naturels, etc. Ce mélange constitue l'aliment aquacole et sa composition nutritionnelle finale est alors déterminée. Le mélange est séché par atomisation avec un air entrant de 160°C. Le contenu en eau 15 de la poudre obtenue sera de 4-6%, préférentiellement de 5.0 % La poudre atomisée est ensuite agglomérée dans un lit fluidisé. La poudre est agglomérée par pulvérisation d'une solution contenant un polymère organique tel que les alginates, les carraghénanes ou la gélatine. La solution est pulvérisée jusqu'à obtention d'une poudre granulée ayant une taille moyenne de 200 à 250 µm. 20 La poudre granulée est ultérieurement séchée dans le même lit fluidisé avec une température d'air entrant ne dépassant pas 60 °C. Le produit final est alors tamisé en trois fractions différentes (1) < 150 µm, (2) 150-400µm et (3) 400-600 µm. Ces trois fractions sont utilisées aux différents stades de développement de la larve de poisson ou de crevette. 25 Exemple 4 : mesures comparatives en écloserie (Vénézuela) The extract obtained in Example 2 is mixed with other ingredients and additives such as fish oil (minimum 3%), trace vitamins and minerals, natural antioxidants, and the like. This mixture constitutes the aquaculture feed and its final nutritional composition is then determined. The mixture is spray-dried with an incoming air of 160 ° C. The water content of the powder obtained will be 4-6%, preferably 5.0%. The atomized powder is then agglomerated in a fluidized bed. The powder is agglomerated by spraying a solution containing an organic polymer such as alginates, carrageenans or gelatin. The solution is sprayed until a granulated powder having an average size of 200 to 250 μm is obtained. The granulated powder is subsequently dried in the same fluidized bed with an incoming air temperature not exceeding 60 ° C. The final product is then sieved into three different fractions (1) <150 μm, (2) 150-400 μm and (3) 400-600 μm. These three fractions are used at different stages of larval development of fish or shrimp. Example 4: Comparative measurements in hatcheries (Venezuela)

On nourrit des larves de crevettes avec l'aliment obtenu à l'Exemple 3 vs. avec des Artémia vivantes. 30 On compare ensuite les résultats obtenus en termes de taux de survie, de test au stress, de poids, de nombre de post-larves récoltées. Le test au stress consiste à mettre une certaine quantité de post larves dans de l'eau fraîche faiblement saline pendant 20-30 minutes et de les remettre en conditions de salinité initiale.5 Le taux de survie est ensuite calculé. Les bacs font 15000 L. Les résultats sont présentés au Tableau 1. Shrimp larvae are fed with the feed obtained in Example 3 vs. with living Artemia. The results obtained are then compared in terms of survival rate, stress test, weight, number of post-larvae harvested. The stress test consists of putting a certain amount of post larvae in fresh, slightly saline water for 20-30 minutes and returning them to initial salinity conditions.5 The survival rate is then calculated. The bins are 15,000 L. The results are shown in Table 1.

Tableau 1. Alimentatio Alimentat Age au Nombre de Jours ion distribuée Densité contrôl Poids Survie Cycle Test au Traitement n distribuée par PL (Ml- (Nauplii/L) e du (mg) (%) (jours) Stress (Kg) Million of récoltées PL) Bacs larves poids (Kg) 18 Concentré 142 4,8 3,6 PL12 2,2 1.325.00066 21 4 100% 19 Artemia 142 1,75 3,8 PL12 3,3 460.000 23 21 5 100% 20 Artemia 142 2,85 2,5 PL12 2,2 1.125.00056 21 4 98% 8 Artemia 140 1,05 5,25 PL11 3,5 200.000 14 20 4 95% 9 Artemia 140 1,35 3,8 PL11 3,2 351.000 8 20 4 98% Concentré 140 2,5 7,1 PL11 3,2 349.000 14 20 4 100% Moye PL11- nne Concentré 141 3,7 5,4 PL12 2,7 662674,5 40,0 20,5 4,0 100,0% Moye PL11- nne Artemia 141 1,8 3,8 PL12 3,1 281502,8 25,3 20,5 4,3 97,8% S NS NS NS NS NS NS NS S : Significatif (P<0,05), NS : Non Significatif PL : post-larve Table 1. Food Supply Age to Days Distributed Density Controlled Density Weight Survival Cycle Treatment Test n distributed by PL (Ml- (Nauplii / L) e of (mg) (%) (days) Stress (Kg) Million of harvested PL) Larval containers weight (Kg) 18 Concentrate 142 4.8 3.6 PL12 2.2 1.325.00066 21 4 100% 19 Artemia 142 1.75 3.8 PL12 3.3 460.000 23 21 5 100% 20 Artemia 142 2.85 2.5 PL12 2.2 1.125.00056 21 4 98% 8 Artemia 140 1.05 5.25 PL11 3.5 200.000 14 20 4 95% 9 Artemia 140 1.35 3.8 PL11 3.2 351.000 8 20 4 98% Concentrate 140 2.5 7.1 PL11 3.2 349.000 14 20 4 100% Medium PL11- Concentrate 141 3.7 5.4 PL12 2.7 662674.5 40.0 20.5 4 0 100.0% Moye PL11- nne Artemia 141 1.8 3.8 PL12 3.1 281502.8 25.3 20.5 4.3 97.8% NS NS NS NS NS NS S: Significant (P <0.05), NS: Not Significant PL: Post-larvae

10 De cette étude, on peut déduire que la survie moyenne est supérieure avec le concentré de l'invention donnant plus de PL récoltées. From this study, it can be deduced that the average survival is greater with the concentrate of the invention giving more PL harvested.

Exemple 5 : mesures comparatives en écloserie (Ecuador) Les mêmes mesures que dans l'Exemple 4 sont réalisées dans une autre écloserie. Les résultats sont présentés au Tableau 2. Example 5 Comparative Measurements in Hatchery (Ecuador) The same measurements as in Example 4 are carried out in another hatchery. The results are shown in Table 2.

Tableau 2. Densité Alimentation Alimentat Age au Nombre de Jours ion distribuée contrôle Poids Survie Cycle Test au Traitement (Nauplii/ distribuée par PL (Ml- du (mg) (%) (jours) Stress L) (Kg) Million récoltées PL) Bacs de larves poids (Kg) 17 Concentré 132 3,54 2,56 PL19 2,22 1.325.00074,7 25 4 100% 18 Concentré 132 2,74 2,04 PL15 2,32 460.000 72,7 21 4 100% 29 Artemia 132 2,87 2,27 PL14 2,39 1.125.00068,4 20 4 100% 30 Artemia 132 2,45 1,96 PL11 2,39 200.000 67,6 20 4 95% Moye PL-15- nne Concentré 132 3,14 2,3 PL19 2,27 1362000 73,7 23 4 100% Moye PL11- nne Artemia 132 2,66 2,115 PL14 2,39 1257500 68 18,5 4 97,5% NS NS NS S S NS NS NS (P<0,13) De cette étude, on peut déduire que la survie moyenne est supérieure avec le concentré de l'invention donnant plus de PL récoltées. Table 2. Density Feeding Food Age to Days Distributed Ion Control Weight Survival Cycle Treatment Test (Nauplii / distributed by PL (Ml) (mg) (%) (days) Stress L) (Kg) Million harvested PL) Bins of larvae weight (Kg) 17 Concentrate 132 3.54 2.56 PL19 2.22 1.325.00074.7 25 4 100% 18 Concentrate 132 2.74 2.04 PL15 2.32 460.000 72.7 21 4 100% 29 Artemia 132 2.87 2.27 PL14 2.39 1.125.00068.4 20 4 100% 30 Artemia 132 2.45 1.96 PL11 2.39 200.000 67.6 20 4 95% Moye PL-15- ne Concentrate 132 3.14 2.3 PL19 2.27 1362000 73.7 23 4 100% Moye PL11- nne Artemia 132 2.66 2.115 PL14 2.39 1257500 68 18.5 4 97.5% NS NS NS NS NS NS NS ( P <0.13) From this study, it can be deduced that the average survival is greater with the concentrate of the invention giving more PL harvested.

Exemple 6 : mesures comparatives en écloserie (Mexico) Les mêmes mesures que dans l'Exemple 4 sont réalisées dans une autre écloserie. Les résultats sont présentés au Tableau 3. Les bacs font 20000 L. Example 6: Comparative measurements in hatcheries (Mexico) The same measurements as in Example 4 are carried out in another hatchery. The results are shown in Table 3. The bins are 20000 L.

Tableau 3. 915 Alimentation Age au Taille Nombre Jours Test Densité Poids (mm) de Survie Cycle Traitement distribuée àcontrôle (Ml- au (Nauplii/L) (mg) PL (%) (jours) PL 8 (Kg) du poids PL) Stress Bacs récoltées 1 Concentré 110 PL 16 3,18 8,19 99 2 Concentré 125 PL 16 3,96 9,22 96 3 Concentré 100 1,9 PL 16 3,69 8,42 57,4% 98 1 Artemia 120 PL 16 3,52 7,95 96 2 Artemia 120 PL 16 3,70 8,46 98 3 Artemia 110 2,3 PL 16 3,45 8,33 51,8% 100 Moyenne Concentré 112 PL 16 3,61 8,61 57,4 97,7 MoyenneArtemia 117 PL 16 3,56 8,25 51,8 98 NS NS NS De cette étude, on peut déduire que la survie moyenne et la croissance sont supérieures avec le concentré de l'invention donnant plus de PL récoltées. Table 3. 915 Feeding Age to Height Number Days Test Density Weight (mm) Survival Cycle Treatment distributed to control (Ml- au (Nauplii / L) (mg) PL (%) (days) PL 8 (kg) weight PL) Stress Bins harvested 1 Concentrate 110 PL 16 3.18 8.19 99 2 Concentrate 125 PL 16 3.96 9.22 96 3 Concentrate 100 1.9 PL 16 3.69 8.42 57.4% 98 1 Artemia 120 PL 16 3,52 7,95 96 2 Artemia 120 PL 16 3,70 8,46 98 3 Artemia 110 2,3 PL 16 3,45 8,33 51,8% 100 Medium Concentrate 112 PL 16 3,61 8,61 57.4 97.7 AverageArtemia 117 PL 16 3.56 8.25 51.8 98 NS NS NS From this study, it can be deduced that the average survival and growth are greater with the concentrate of the invention giving more PL harvested.

Exemple 7: résumé des exemples 4 à 6 Example 7: Summary of Examples 4 to 6

Le résumé des résultats obtenus dans les trois écloseries est présenté dans le tableau 4. Tableau 4. The summary of results from the three hatcheries is presented in Table 4. Table 4.

Arterria vivantes Aliment del' imention TABLEAU n° 4 Nombre Nbyenne Écart-type Nombre Moyenne Écart-type d'observations d'observations Quantité d'aliment distribué ( kg) 6 2.1 0.8 4 3.4 1.0 Quantité d'aliment distribué ( kg 6 3.3 1.0 4 3.8 2.3 million de laves initial)) Poids moyen des larves ( mg) 9 3.1 0.6 7 3.0 0.7 Nombre de post-larves à la récolte 6 92520 149563 4 419181 625721 Taux de survie (%) 9 43.6 22.7 7 57.1 20.4 Test de résistance au s1i e,s ( %) 9 97.8 2.0 7 99.0 1.5 Arterria vivantes Aliment de l'imention TABLE 4 Nbyenne number Standard deviation Mean number Standard deviation of observation observations Quantity of food distributed (kg) 6 2.1 0.8 4 3.4 1.0 Quantity of food distributed (kg 6 3.3 1.0 4 3.8 2.3 million initial lavas)) Average weight of larvae (mg) 9 3.1 0.6 7 3.0 0.7 Number of post-larvae at harvest 6 92520 149563 4 419181 625721 Survival rate (%) 9 43.6 22.7 7 57.1 20.4 resistance to s, e (s) 9 97.8 2.0 7 99.0 1.5

Claims

REVENDICATIONS1. Artemia cyst extract without semi-carbazide (SEM).

2. Extract according to claim 1 as a nutritional supplement of an aquaculture feed.

3. Extract according to claim 2, the aquaculture feed being intended for feeding larvae of fish or crustaceans, in particular shrimp larvae.

4. Extract according to any one of claims 1 to 3, characterized in that it is an intact vitelline platelet concentrate.

5. Use of an extract according to any one of claims 1 to 4 for feeding fish or crustacean larvae in aquaculture.

An aquaculture feed comprising an extract of any one of claims 1 to 4.

7. Use of an extract according to any one of claims 1 to 4 for preparing an aquaculture feed.

8. Process for the preparation of an extract according to any one of claims 1 to 4 comprising the following steps: (i) Mechanical rupture and removal of the membrane of cysts of rehydrated Artemia

9. Preparation process according to claim 8, the set of steps taking place at a pH between 4.0 and

10.0, preferably between 5 and 8.5, particularly preferably between 6 and 7. 10. Process according to claim 8 or 9, all the steps taking place at a temperature between 0 and 60 ° C, preferably between 0 and 40 ° C, particularly preferably between 0 and 20 ° C. 30

11. A method according to any of claims 8 to 10, comprising a subsequent step (ii) of drying, preferably at a temperature below 160 ° C.

12. Extract obtainable according to the process according to any one of claims 8 to 11.

13. Process for the preparation of an aquaculture feed comprising the agglomeration of an extract according to any one of claims 1 to 4 and 12.