FR2957800A1 - Utilisation d'un extrait d'algue pour diminuer un stress cellulaire et/ou organique - Google Patents
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Abstract
La présente invention est relative à l'utilisation d'un extrait d'algue du genre Chondrus pour moduler l'action de la protéine de stress p53 afin de limiter les effets d'un stress cellulaire et/ou organique, que ce soit chez les humains ou chez les animaux dits de rente ou de compagnie. L'invention est aussi relative à l'utilisation d'une composition pharmaceutique ou nutraceutique à base de cet extrait d'algue.
Description
B08/3212FR Déposants : LEBRETON Franck LAVIGNE Nathalie Utilisation d'un extrait d'algue pour diminuer un stress cellulaire et/ou organique Invention de : LEBRETON Frank LAVIGNE Nathalie Utilisation d'un extrait d'algue pour diminuer un stress cellulaire et/ou organique
La présente invention est relative à l'utilisation d'un extrait d'algue du genre Chondrus pour moduler l'action de la protéine de stress p53 afin de limiter les effets d'un stress cellulaire et/ou organique, que ce soit chez les humains comme par exemple chez les sportifs de haut niveau ou chez les animaux dits de rente ou de compagnie. L'invention est aussi relative à l'utilisation d'une composition pharmaceutique ou nutraceutique à base de cet extrait d'algue. Dans les pays occidentaux, les algues sont principalement utilisées comme source de phycolloïdes, pour l'obtention de carraghénanes ou d'agar. L'intérêt nutritionnel des algues est cependant bien établi avec une richesse en minéraux, fibres, protéines acides aminés essentiels et vitamines. Chondrus crispus est une algue alimentaire de la famille des gigartinales, algue rouge intertidale, c'est-à-dire vivant dans la zone de balancement des marées.
Lorsqu'un humain ou un animal est soumis à une activité intense ou une brutale variation de son environnement, il met en place des mécanismes d'adaptation, de préservation et de réparation. Ce n'est que lorsque l'adaptation est débordée que l'organisme est en situation de stress. Le corps humain en particulier dispose alors d'un arsenal de molécules appelées protéines de stress (ou HSPs - Heat Shock Proteins). Leur rôle général et essentiel est de protéger l'ensemble vital des protéines cellulaires. Les HSPs sont un des moyens de défense de l'organisme développé par la cellule même, pour faire face aux diverses agressions auxquelles elle pourrait être soumise. Les situations de stress peuvent être engendrées par de nombreuses variations d'environnement comme la température, l'oxygène, la pression, ou l'activité physique intense. L'organisme est bien souvent soumis à des dégradations résultant de telles agressions: que ce soit au niveau des protéines, ou même des structures essentielles telles que le noyau et son ADN, la membrane cellulaire, les mitochondries. Lors des différents types de stress, la majorité des HSPs synthétisées sont HSP27, HSP60, HSP70, HSP90, et HSC73 (Tanonaka K., et al., Protective effect of heat shock protein 72 on contractile function of perfused failing heart, Am J Physiol Heart Circ Physiol 281:215-22, 2001). La fonction collective des HSPs est de maintenir une bonne conformation protéique cellulaire durant un stress. Le rôle est donc le maintien de l'homéostasie protéique afin de préserver l'intégrité cellulaire face aux agents dénaturants (Craig E.A. The heat shock response Crit Rev Biochem. 1985; 18(3):239-80). Dans la globalité, les HSPs possèdent un grand nombre de propriétés bénéfiques, que l'on pourrait résumer sous cette forme: - Conformer les nouvelles protéines - Transporter les protéines (restructuration de la structure spatiale) - Protéger les protéines nucléaires et matricielles - Réparer les protéines altérées - Eliminer les structures endommagées.
Les HSPs sont classées en deux groupes : - les HSPs constitutives ou chaperonnes qui conforment les protéines nouvellement synthétisées et les transportent sur leur site d'implantation (exemple HSP27, HSP90). Les protéines chaperonnes sont des protéines qui par leur liaison avec d'autres protéines, permettent d'imposer à ces dernières une structure spécifique. Elles se lient à la sortie des ribosomes. De la même façon, elles évitent certaines liaisons protéines-protéines indésirables, et limitent ainsi les agglomérats de protéines. La synthèse des HSPs chaperonnes évolue avec l'âge et de manière générale, tend vers une diminution dans les tissus. - les HSPs inductibles qui réparent les protéines endommagées et éliminent les protéines trop endommagées (par exemple HSP72). Là encore, avec l'âge, on constate une augmentation du temps de réponse pour la synthèse des HSPs inductibles.
Les protéines jouent un rôle structural et de préservation dans l'os, le cartilage, le muscle, le tissu conjonctif (dans et autour des organes), dans la peau et dans la paroi des vaisseaux, mais aussi un rôle fonctionnel, associées dans d'autres structures à des lipides, lipoprotéines, au cholestérol, à des glucides, glycoprotéines, à des métaux, des métalloïdes, des enzymes, des hormones, des neuromédiateurs. Les protéines permettent l'activité musculaire, squelettique, cardiaque, mais subissent des dommages, qui conduisent à la fatigue du système, et occasionnent un vieillissement accéléré. Les sports à efforts violents en particulier semblent propices à la production de radicaux libres. L'exercice physique constitue en effet une source importante de stress. Pendant celui-ci, l'organisme subit de nombreux dommages, et particulièrement lors de l'hyperthermie induite (par l'activité mitochondriale), qui peut aller jusqu'à 45° dans les muscles. Ainsi, lors d'une hausse de température, les agencements protéiques sont perturbés, voire dégradés ou dénaturés. En cas d'élévation trop importante de la température, les protéines subissent donc des dommages, ce qui les rend non fonctionnelles. Si l'élévation de la température corporelle locale ou générale dépasse 5° à 10°, on parle alors de Heat Shock ; ou de choc thermique qui stimule la synthèse de HSPs. Lors d'exercices physiques, et pendant la récupération, le choc thermique stimule donc la synthèse de HSPs, et particulièrement la synthèse d'HSP70, qui va protéger la cellule. On trouve ainsi que le taux de HSP60 se maintient deux heures après le choc thermique dû à l'exercice, et le taux de HSP70 se maintient entre 24H et 48H après le choc thermique.
Cependant, les HSPs n'apparaissent dans l'organisme qu'après le débordement des capacités d'adaptation, et environ 120 minutes après le début d'une situation de stress. Les biologistes considèrent que les situations de stress induisent forcément des lésions puisque l'organisme ne commencera à réparer les dommages que deux heures après leur apparition. L'apoptose, qui est un phénomène naturel dès l'embryogenèse, pourrait être traduite par la mort cellulaire, et plus précisément le suicide cellulaire. Elle intervient dans la maturation du système immunitaire, le maintien dynamique du nombre de cellules fonctionnelles, et l'élimination des cellules anormales ou endommagées, mais aussi le vieillissement cellulaire. HSP70, joue un grand rôle dans la régulation de l'apoptose, donc de la régulation de la vie ou la mort cellulaire. HSP27 intervient également dans la modulation de l'apoptose. La protéine p53 suppresseur de tumeur est un facteur de transcription activé par le stress, qui conditionne l'expression des produits de gènes impliqués dans le contrôle de la croissance. L'activité biochimique de p53 en tant que facteur de transcription peut être régulée par des protéines partenaires dont font partie les HSPs. La protéine p53 est en effet une protéine tétramérique qui peut diriger la transcription par interaction avec des éléments ADN spécifiques dans les promoteurs de gènes induits durant l'arrêt de la croissance ou apoptose.
Les protéines HSPs chaperonnes sont capables de contrôler la conformation et l'inactivation de p53. En effet, en se fixant à la protéine monomère p53, ces HSPs empêchent un repliement correct de la protéine p53, nécessaire à son activation. En maintenant la protéine p53 sous sa forme inactive, les HSPs préviennent ainsi l'apoptose cellulaire.
I1 a été récemment montré que la protéine HSP27 interagit plus particulièrement avec la protéine p53. En fait, HSP27 est capable de réguler la toxicité cellulaire dépendante de p53. HSP27 est un régulateur important de la protéine p53 par l'intermédiaire de son activité de transcription, en particulier en ce qui concerne la protéine p21, protéine dite de sénescence. En effet, cette protéine codée par le gène p21 (ou sdil) est un inhibiteur de la kinase dépendante de cycline. Exprimée à des taux élevés, elle provoque l'arrêt du cycle cellulaire en phase G2/M ou G1 (Ventakrishnan C.D. et al., Am J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2008 294 (4)).
On a en effet montré que la fixation de HSP27 sur p53 est capable d'inhiber l'activation de la protéine p2l par la protéine p53, limitant ainsi la sénescence cellulaire (O'Callaghan-Sunol et al., Cancer Res 2007, 67: (24)).
La demanderesse a ainsi découvert de façon surprenante qu'un extrait de Chondrus selon l'invention présente des actions intéressantes sur la protéine d'apoptose p53, donc sur le stress cellulaire et/ou organique. Ainsi l'invention a pour objet l'utilisation d'un extrait d'algue Chondrus selon l'invention pour ses actions sur le stress cellulaire et/ou organique médié par la protéine p53. Cette propriété inattendue confère à ces extraits un intérêt remarquable pour la protection des cellules suite à un stress occasionné par le sport par exemple. Un autre objet est constitué par les applications de cet extrait d'algues pour la fabrication d'une composition pharmaceutique ou d'un complément alimentaire destiné à contrecarrer l'effet d'un stress cellulaire et/ou organique. D'autres objets apparaîtront à la lecture de la description et des exemples qui suivent.
L'extrait d'algue selon l'invention est produit à partir d'algues du genre chondrus cultivées selon un procédé intensif et contrôlé, décrit notamment dans la publication de J. P. Braud, colloques IFREMER, Vol 21, 1999. De préférence, l'algue est Chondrus crispus.
Brièvement, les algues sont cultivées dans des bassins de plein air de type "Raceway" contenant 80% d'eau supplémentée en source de carbone, d'azote et de phospore et 20% d'eau de mer des profondeurs, qui constituent le milieu de culture. Le pH est contrôlé et maintenu à une valeur comprise entre 8 et 9 Les variations éventuelles de pH observées lors des phases de photosynthèse de l'algue sont compensées par l'ajout d'un acide minéral. La supplémentation en carbone de l'eau est assurée par une injection de CO2. Les nutriments tels que le sulfate d'ammonium et l'acide phosphorique sont ajoutés par l'intermédiaire de pompes dosimétriques de façon à maintenir le milieu de culture de l'algue Chondrus à des niveaux de 3,5% en grammes par gramme de poids sec d'algue pour l'azote et de 0,4% en grammes par gramme de poids sec d'algue pour le phosphore. L'obtention de l'extrait d'algue selon l'invention est ainsi sécurisée par la maîtrise de la qualité de la matière première. En effet, une culture en bassins à terre permet de s'affranchir des aspects de variabilité du milieu marin naturel auxquels peut être confrontée la récolte de Chondrus sauvage, tout en disposant d'une algue ayant été soumise à des conditions de température et de salinité reproductibles.
De plus les conditions de culture à terre sont plus stressantes (en particulier au niveau de la salinité) que dans le milieu naturel du Chondrus. Son acclimatation induit donc probablement une activité antioxydante accrue ainsi qu'une mobilisation plus rapide de protéines chaperonnes de type HSP70.
Cet extrait d'algues comestible possédant les caractéristiques énoncées, obtenu selon le procédé précédemment décrit, est utilisable en tant que complément alimentaire ou médicament, à usage humain ou vétérinaire. Cet extrait d'algue est en particulier utilisable au niveau vétérinaire, pour les animaux vertébrés élevés au titre d'animaux de rente (producteur de denrées alimentaires pour l'homme, ex : bovins, ovins, caprins, équins, porcins, volailles, rongeurs, poissons...), de compagnie (ex : chiens, chats, rongeurs, oiseaux, reptiles...), de loisirs (ex : équidés, camélidés, canidés...) ou de travail.
L'invention a également pour objet l'utilisation d'une composition pharmaceutique ou nutraceutique comprenant, entre autres, un extrait d'algue précédemment décrit. Le stress ou syndrome général d'adaptation, est l'ensemble des facteurs environnementaux qui imposent des contraintes à un organisme.
Le stress désigne ainsi la réponse adaptative de l'organisme à certains agents agresseurs (stresseurs) psychologiques (traumatismes, anxiété, colère, contrariété, deuil, surmenage, dépression, etc...) ou physiologiques (hypoxie-hyperoxie, hypothermie-hyperthermie, hypobarie-hyperbarie, dessiccation, infections, pathologies, interventions chirurgicales, etc...). Comme les humains, les animaux, sont susceptibles de subir un stress. Des changements trop fréquents ou trop importants peuvent être la cause d'un excès de stress qui leur est préjudiciable, en particulier chez les animaux d'élevage ou les animaux de compagnie. Les causes en sont les suivantes : effort physique soutenu (comme par exemple les courses), perte de territoire, destruction d'habitat, séparation d'avec le groupe, luttes hiérarchiques, périodes de rut, capture, blessures ou agressions corporelles, etc. Le stress peut se mesurer au niveau systémique : on parlera alors de stress organique. I1 peut aussi se mesurer au niveau cellulaire : on parlera alors de stress cellulaire. L'extrait d'algue, en diminuant la quantité de protéine de stress p53, par un piégeage de la forme non tétramérisée de la p53 par les HSPs, a un rôle bénéfique, par une diminution de l'apoptose dépendante de p53, sur la diminution du stress cellulaire et/ou organique engendré lors d'un effort, comme lors de la pratique d'un sport par exemple, et peut donc être avantageusement utilisé dans des médicaments pour la récupération physique des mammifères sportifs. Pour les animaux, cet extrait d'algues peut être avantageux pour limiter le stress des animaux lors de leur transport, par exemple. La composition pharmaceutique selon l'invention comprend de 20% à 80 % en poids d'extrait sec d'algue Chondrus selon l'invention par rapport au poids total de la composition. De préférence, la composition contient de 30 à 70 % en poids d'extrait sec d'algue Chondrus selon l'invention par rapport au poids total de la composition. La composition peut comprendre en outre d'autres extraits de plantes, des vitamines, des minéraux et tout ingrédient ou excipient (agent de charge, antiagglomérant,...) nécessaire à sa formulation. La composition pharmaceutique selon l'invention peut se présenter sous les formes galéniques usuellement employées pour un usage alimentaire. En particulier, sous forme de poudre, l'extrait selon l'invention peut être incorporé à des formulations sèches et conditionné en gélules, capsules molles ou non ou sachets. Les compositions selon l'invention sont ainsi utiles dans l'élaboration d'un médicament destiné à contrecarrer les effets d'un stress cellulaire chez les humains et animaux. Ces compositions sont également utiles pour améliorer la récupération physique et la réparation cellulaire de sportifs pendant et après l'effort physique. Ces compositions sont par ailleurs utiles en tant que complément alimentaire. On considère que pour des applications comme complément alimentaire ou médicament, une quantité de 0,0001g à 0,04 gramme de matière sèche d'extrait d'algue selon l'invention par kilo de poids vif doit être apportée par jour chez un individu.
Les compositions pharmaceutiques ou nutraceutiques de la présente invention sont formulées classiquement selon l'application à laquelle elles sont destinées. Les exemples suivants illustrent l'invention sans la limiter aucunement.
Exemple 1 Procédé d'obtention de l'extrait d'algue selon l'invention L'algue Chondrus crispus est cultivée à partir de la souche S7 sélectionnée en 1978 à partir de thalles d'algues sauvages prélevées au nord de la Bretagne. La culture est réalisée dans des bassins de plein air de type "Raceway" situés sur la côte Atlantique française, contenant : - 80% d'eau de mer; - 20% d'eau de mer prélevée dans une nappe souterraine sur le site de culture; - une source de carbone, sous forme de CO2, injecté dans l'eau de mer entrante, à un débit constant de 180 L de CO2 par minute, grâce à un régulateur de gaz de type Hasting HFC 202; - une source d'azote, sous forme de sulfate d'ammonium, à une concentration maintenue à 3,5 g d'azote pour 100 g de poids sec d'algue par des pompes dosimétriques; - une source de phosphore, sous forme d'acide phosphorique, à une concentration maintenue à 0,4 g de phosphore pour 100 g de poids sec d'algue par des pompes dosimétriques; - Les concentrations en nutriments carbonés, azotés et phosphorés sont ajustées automatiquement en fonction des fluctuations de pH du milieu, mesurées par un pHmètre, elles-mêmes fonction de l'intensité de la photosynthèse dans le milieu de culture. L'algue ainsi produite est récoltée dans un milieu de salinité de l'ordre de 37,4 g/1 pour une température en journée oscillant entre 12,2°C et 22,0 °C dans la semaine précédent la récolte. L'algue ainsi produite présente une teneur en matière sèche de 0,94 % et une teneur en azote total mesuré par la méthode Kjeldahl de 3,53% ± 0,06 de la matière sèche. Pour les besoins de l'extraction, l'algue Chondrus est prélevée dans les bassins de culture, lavée et séchée à basse température (inférieure ou égale à 50°C). L'extrait de Chondrus crispus est obtenu à partir d'une extraction aqueuse de l'algue préalablement broyée, à une concentration de 5 % dans l'eau, sous agitation à 40°C. Après filtration, l'extrait est séché par lyophilisation pour obtenir une poudre
Exemple 2 : Caractérisation de l'extrait d'algue obtenu à l'exemple 1 L'extrait décrit à l'exemple 1 contient de 83 à 97 % de matière sèche, dont 1,5 à 3 g d'azote dans 100 g de matière sèche, les acides aminés libres représentant entre 3 et 4 % de la matière sèche.
Exemple 3 : Toxicité de l'extrait d'algue cultivée selon l'invention La cytotoxicité de l'extrait d'algue de l'exemple 2 a été comparée à la toxicité d'algues Chondrus récoltées dans la nature.
Des fibroblastes humains normaux provenant d'une plastie abdominale réalisée chez une femme de 47 ans ont été cultivés dans un milieu composé de 44,3 % de DMEM (Invitrogen 41965-039), 44,3% de HAM F12 (Invitrogen 31765-027), 10 % de Sérum de veau foetal inactivé (Invitrogen 10270-106), chaleur), 1% de Penicilline (invitrogen 15140-122) et 0,4% de Fungizone (Invitrogen 15290-026), jusqu'à obtention de monocouches confluentes. Les cellules à confluence ont ensuite été incubées pendant 24 heures en absence (contrôle) ou présence de concentrations croissantes soit d'extrait d'algues naturelles soit d'un extrait d'algues cultivées selon l'invention (extrait de l'exemple 2). Les extraits ont été préalablement solubilisés dans du milieu de culture contenant 7% d'éthanol. A la fin de la période d'incubation, la viabilité des cellules a été évaluée par une méthode spectrophotométrique de dosage de l'activité des phosphates intracellulaires ; Brièvement, le p-nitrophényl phosphate est transformé en p-nitrophénol par les phosphatases intracellulaires des cellules viables. L'absorbance du p-nitrophénol à 405 nm est directement proportionnelle au nombre de cellules viables présentes dans les puits de culture (Yang et al., 1996 Anal. Biochem. 24). Les résultats sont présentés sous la forme de pourcentages de cellules viables.
Tableau 1 : extrait d'algues selon l'invention en microgrammes /mL (poids sec) Contrôle Ethanol 0,6 1,2 3 6 Ethanol 0 0,7% 0,0070% 0,0175% 0,035% (v/v) % 94,3 101,5 100,9 99,8 88,3 88,5 viabilité 1,3 100,00 102,0 105,3 103,0 96,8 100,4 95,3 94,5 91,0 97,7 88,5 101,1 95,6 84,0 89,5 78,8 88,6 98,6 92,1 90,2 88,9 88,9 83,9 104,4 97,7 98,8 90,4 88,5 82,8 Moyenne 100,0 97,0 95,0 94,1 90,9 88,2 S.D. 3,4 3,4 7,0 6,8 8,4 4,9 Contrôle Ethanol 12 30 60 120 Ethanol 0 0,7% 0,07% 0,18% 0,35% 0,7% (v/v) 94,3 101,5 120,4 114,6 87,5 80,7 101,3 100,00 124,6 113,6 99,1 80,4 100,4 95,3 105,8 95,5 93,0 82,9 viabilité 101,1 95,6 84,2 98,5 106,3 95,6 98,6 92,1 93,0 107,2 111,4 98,4 104,4 97,7 98,0 129,7 114,6 95,4 Moyenne 100,0 97,0 104,3 109,8 102,0 88,9 S.D. 3,4 3,4 15,8 12,4 10,7 8,4 Tableau 2 : extrait d'algue non cultivées en microgrammes /mL 5 (poids sec) Contrôle Ethanol 0,6 1,2 3 6 Ethanol 0 0,7% 0,0032% 0,0070% 0,0175% 0,035% (v/v) 70,9 83,6 87,3 70,5 66,2 62,3 82,6 82,2 88,2 87,4 69,2 62,2 97,9 77,6 81,9 79,2 56,1 53,9 viabilité 117,8 98,3 80,7 79,9 60,9 62,1 116,1 112,5 102,8 94,0 89,9 85,1 114,7 118,7 109,3 100,6 98,5 89,9 Moyenne 100,0 95,5 91,7 85,3 73,4 69,2 S. D. 19,7 17,2 11,7 10,9 16,9 14,6 Contrôle Ethanol 12 30 60 120 Ethanol (v/v) 0 0,7% 0,07% 0,18% 0,35% 0,7% 70,9 83,6 58,9 56,4 57,0 52,0 82,6 82,2 65,7 64,5 52,3 52,5 97,9 77,6 55,0 49,9 48,7 54 ,7 viabilité 117,8 98,3 58,1 63,2 52,1 59,0 116,1 112,5 74,5 68,9 74,5 72,9 114,7 118,7 76,9 66,9 78,7 78,1 Moyenne 100,0 95,5 64,9 61,6 60,6 61,5 S.D. 19,7 17,2 9,1 7,2 12,8 11,2 Les résultats de ces deux tableaux montrent que l'extrait selon l'invention est moins toxique pour les cellules en culture que l'extrait d'algue sauvage pour des quantités semblables des différents produits.
Exemple 4 : Action de l'extrait d'algue cultivée selon l'invention sur la protéine p53 La protéine p53 est une protéine impliquée dans la réparation de l'ADN et/ou dans l'induction de l'apoptose après un stress cellulaire. Des explants de peau humaine normale ont été préparés à partir d'un prélèvement de peau (déchet opératoire) réalisé chez une femme âgée de 43 ans. Ces explants ont été maintenus en survie dans le même milieu de culture que précédemment pendant la durée de l'expérience soit 48 heures. Les explants ont été incubés pendant 24 heures à 37°C sous atmosphère humide et 5% de CO2 en absence ou présence de l'extrait cultivé de Chondrus crispus à tester.
Puis les explants ont été irradiés par des ultra violets B à la concentration de 1 joule/cm2 et ensuite incubés pendant 24 heures en absence (contrôle) ou présence de l'extrait de Chondrus à tester préalablement solubilisé dans du milieu de culture contenant 0,7 % d'éthanol. On a fixé les explants dans du paraformaldéhyde à la concentration de 10%. Après inclusion dans des blocs de paraffine, on a réalisé des coupes des explants par microtome. La présence de p53 est alors révélée par marquage immunohistochimique selon la méthode décrite par Brash D. E., et al., J. Investig. Dermatol. Symp. Proc, 1996. L'épitope est préalablement démasqué 20 min à 99°C en tampon citrate de sodium (pH 7,4). Après inhibition de l'activité des peroxidases endogènes pendant 5 min à l'aide du « Peroxide Blot » (kit de détection polymère, référence 37072, Menarini), les lames sont incubées 15 minutes en présence de l'anticorps anti P53 (NCL-p53-D07, Novocastra) dilué au 1:50. Les lames sont ensuite saturées 8 min avec le « post primary », puis incubées 8 min avec l'anticorps secondaire marqué HRP, puis 8 min avec le « mixed DAB », et contre colorées à l'aide d'hématoxyline (tous ces réactifs sont issus du kit de détection polymère, référence 37072, Menarini). Différents champs au hasard (12 champs microscopiques) sont comptés pour la coupe témoin et la coupe avec extrait d'algue selon l'invention. Les résultats sont présentés sous la forme d'un nombre de cellules positives c'est-à-dire exprimant la protéine p53 par champ microscopique analysé. Le pourcentage d'inhibition de l'induction des cellules p53 positives a été calculé selon la formule suivante :
(Contrôle irradié û contrôle non irradié) û(produit irradié û contrôle non irradié) x100 / (contrôle irradié û contrôle non irradié). La significativité statistique des différences observées a été évaluée par le test non paramétrique de Mann-Witney ou des tests de Student.
Ethanol 0,7% Ethanol 0,7% Extrait de l'exemple 2 (µg/ml) + UVB Sans UVB + UVB 1,2 12 120 1 6 33 12 8 8 2 2 35 13 11 25 3 8 10 12 19 26 Nombre de 4 5 22 18 8 26 cellules 5 5 24 10 22 8 positives par 6 5 18 8 12 8 champ 7 8 26 7 14 13 microscopique 8 3 32 13 12 21 analysé 9 2 28 12 12 11 10 1 19 4 10 14 11 2 22 9 5 6 12 3 16 5 8 7 Moyenne 4,2*** 23,8 10,3* 11,8* 13,3* S.D. 2,4 7,2 4,1 4,9 7,1 protection i 0 68,9 61,3 53,2 * : moyenne significativement différente de celle du groupe « Ethanol + 5 UVB » (p<0,05) * * * : moyenne significativement différente de celle du groupe « Ethanol + UVB » (p<0,001)
Le tableau 3 montre clairement que le nombre de cellules p53 10 positives présentes dans l'épiderme des explants après exposition aux UVB est significativement diminué en présence de l'extrait de Chondrus selon l'invention par rapport à un témoin comportant seulement 0,7% d'éthanol.
15 Exemple 5 : composition N°l de gélule contenant l'extrait de Chondrus selon l'invention - Chondrus crispus 300mg - Coenzyme Q10 (Ubiquinone) 30mg - gélatine marine 205 mg - cellulose microcristalline 15 mg - dioxyde de silicium 15 mg - stéarate de magnésium 10 mg La dose est exprimée par capsule Exemple 6 : composition N°2 de gélule contenant l'extrait de Chondrus selon l'invention - Chondrus crispus 233mg - Gluconate de magnésium 100mg - L-tryptophane 66,67 mg - Acide nicotinique 6 mg - Chlorhydrate de pyridoxine 0,67 mg - gélatine marine 205 mg - cellulose microcristalline 15 mg - dioxyde de silicium 15 mg La dose est exprimée par capsule
Claims (10)
- REVENDICATIONS1. Extrait d'algue du genre Chondrus pour diminuer le stress cellulaire et/ou organique.
- 2. Extrait selon la revendication 1 dans lequel l'algue est Chondrus crispus.
- 3. Composition pharmaceutique contenant l'extrait d'algue selon l'une des revendications 1 ou 2.
- 4. Composition selon la revendication 3 contenant de 20 à 80% d'extrait sec d'algue en poids par rapport au poids total de la composition.
- 5. Composition selon l'une des revendications 3 ou 4, dans laquelle le médicament est à usage humain.
- 6. Composition selon l'une des revendications 3 ou 4, dans laquelle le médicament est à usage vétérinaire
- 7. Composition selon l'une quelconque des revendications 3 à 6 pour contrecarrer les effets d'un stress cellulaire et/ou organique.
- 8. Composition selon l'une des revendications 3 à 7 pour améliorer la récupération physique et la réparation cellulaire des sportifs pendant et après l'effort.
- 9. Utilisation non thérapeutique d'un extrait d'algue selon l'une des revendications 1 ou 2 en tant que complément alimentaire.
- 10. Utilisation d'un extrait selon la revendication 9 pour diminuer le stress cellulaire et/ou organique chez l'humain ou l'animal.
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