FR2954163A1 - Utilisation d'un tensioactif cationique, avantageu-sement amphotere, pour la preparation d'une composition antifongique applicable sur l'ongle - Google Patents

Abstract

La présente invention porte sur l'utilisation d'un tensioactif cationique, ou un tensioactif amphotère pour la préparation d'une composition comprenant un agent antifongique sous la forme d'un sel d'acide, destinée à être appliquée sur l'ongle.

Description

UTILISATION D'UN TENSIOACTIF CATIONIQUE, AVANTAGEUSEMENT AMPHOTERE, POUR LA PREPARATION D'UNE COMPOSITION ANTIFONGIQUE APPLICABLE SUR L'ONGLE DOMAINE TECHNIQUE

La présente invention porte sur l'identification d'une composition améliorant la pénétration à travers l'ongle d'un agent antifongique se présentant sous la forme d'un sel d'acide, tel que par exemple le chlorhydrate de terbinafine. Plus précisément, il est proposé de formuler l'agent antifongique en présence d'un tensioactif cationique, avantageusement amphotère tel que la cocobétaïne.

De telles compositions pharmaceutiques ou dermatologiques sont utiles en particulier pour le traitement, chez l'homme et l'animal, des onychomycoses notamment à 15 dermatophytes ou à Candida.

ETAT ANTERIEUR DE LA TECHNIQUE

Les ongles sont fréquemment le siège d'onychomycoses notamment à dermatophytes 20 ou à Candida.

Bien que le traitement de ces pathologies à l'aide d'agents antifongiques se fasse de manière privilégiée par voie transunguéale, la structure très rigide de l'ongle rend le traitement difficile, d'où l'intérêt d'optimiser la composition du produit de manière à 25 pouvoir imprégner l'ongle le plus profondément possible.

Pendant la formation de la tablette unguéale, les cellules basales de la matrice grossissent, les noyaux des cellules se fragmentent, les cytoplasmes se condensent pour former des cellules plus grosses et kératinisées bien individualisées constituant 30 la couche granuleuse.

La tablette de l'ongle est constituée de cellules mortes, kératinisées et adhérentes, sans noyau, mais avec des membranes épaisses. Elle contient essentiellement de la kératine a et est constituée de 3 couches : les couches dorsale et intermédiaire, issues 35 de la matrice, et la couche ventrale, issue du lit de l'ongle (Figure 1).

La partie dorsale est formée de quelques couches de cellules riches en kératine dure constituant la couche granuleuse. La partie intermédiaire est constituée de cellules riches en kératine plus souple avec disparition de la couche granuleuse, et constitue les trois quarts de l'épaisseur totale de l'ongle. La partie ventrale est formée d'une ou deux couches de cellules riches en kératine souple et hyponychiale; il n'existe toujours pas de couche granuleuse.

L'ongle est essentiellement composé de kératine, scléroprotéine riche en acides aminés soufrés. Du point de vue morphologique, les fibres de kératines sont pour la plupart orientées perpendiculairement à la pousse de l'ongle, dans un plan parallèle à la surface de l'ongle.

Les chaînes de kératine sont liées entre elles par des liaisons de différents types : liaison hydrogène, liaison peptide, liaison polaire et liaison disulfure (Figure 2). Ces liaisons peuvent être attaquées par diverses agressions : agents chimiques, alcalins, oxydants, thioglycolates pour les ponts disulfures ; par désagrégation par les bases ou acides forts pour les unions acido-basiques ; ou rupture des ponts hydrogène par les molécules d'eau.

La composition chimique de l'ongle est plus proche de celle des cheveux que de celle de la peau. Les composés lipophiles gras de l'ongle ne représente que 0.1 à 1% des constituants de l'ongle. C'est essentiellement du cholestérol, qui a un rôle de plastifiant.

L'eau est présente entre 15 et 18% et peut même atteindre 25%. La teneur en eau de l'ongle est surtout dépendante du degré d'hygrométrie. A saturation, elle peut atteindre un tiers du poids sec de l'ongle. Il est ainsi aisé de comprendre que les molécules hydrophiles pénètrent plus facilement la tablette unguéale que les molécules lipophiles.

Il existe aussi des éléments traces dans l'ongle : le zinc, le fer, le manganèse, le cuivre...

Le soufre entre pour 5% dans le poids de la tablette, particulièrement riche en acides aminés soufrés, principalement la cystine et l'arginine. Le traitement de l'onychomycose comprend différentes approches : la chirurgie, qui consiste à débrider la lésion jusqu'à l'ongle sain ; les traitements anti-fongiques topiques ; les traitements anti-fongiques systémiques.

La plupart des traitements oraux à action systémique sont longs et ne sont pas dénués d'effets secondaires importants.

L'option du traitement topique s'avère beaucoup moins toxique, mais pour être efficace, nécessite que l'agent antifongique puisse pénétrer au travers de la kératine dure de l'ongle et atteindre le lit de l'ongle à une concentration suffisante pour pouvoir détruire et éradiquer l'agent pathogène, le Trichophyton Rubrum.

La formulation des molécules antifongiques actuellement disponibles pose toutefois un certain nombre de problèmes : de manière générale, leur solubilité est très faible dans l'eau, et rend donc la 10 formulation difficile à des concentrations en actif efficaces ; la composition du véhicule n'est pas systématiquement adaptée à la composition chimique de l'ongle pour pouvoir atteindre le lit de l'ongle. la pénétration à travers l'ongle pour atteindre le lit de l'ongle est souvent difficile 15 Ainsi, les traitements topiques existant pour l'onychomycose se présentent sous forme de vernis filmogènes peu efficaces au niveau de la pénétration de l'actif au travers de la kératine de l'ongle.

20 Par ailleurs, la pénétration d'un actif au travers de l'ongle humain est un phénomène très peu décrit dans la littérature. Même s'il existe de nombreuses molécules connues comme promoteur de pénétration au travers de la peau, ces molécules sont peu adaptées à une application unguéale.

25 A titre d'exemple, l'agent antifongique terbinafine est disponible sous forme de chlorhydrate de terbinafine (terbinafine HCl) de formule : . HCI 30 De part sa nature cationique, cette molécule, outre sa faible solubilité dans l'eau, 35 présente une grande affinité pour la kératine. La terbinafine HC1 se fixe donc très facilement sur la kératine dès les couches supérieures de l'ongle et de ce fait, seule une faible proportion pénètre réellement jusqu'au lit de l'ongle.

Au regard de l'art antérieur (« Drug delivery to the nail following topical application », S Murdan, Int J Pharm 236 (2002) 1-26), de nombreuses solutions ont été investiguées pour améliorer le problème de la pénétration à travers l'ongle: - nature du véhicule et en particulier la présence d'eau, - importance de solvant organique comme le DMSO, - influence du pH et la charge ionique du véhicule sur l'ionisation du principe actif antifongique, - influence des promoteurs d'absorption avec différents modes d'action sur la matrice de l'ongle Il existe donc le besoin de trouver de nouvelles formulations pour les agents antifongiques permettant une meilleure pénétration à travers l'ongle d'une quantité efficace de principe actif.

EXPOSE DE L'INVENTION La présente invention repose sur la mise en évidence par le Demandeur que la présence d'un tensioactif cationique, avantageusement amphotère, permet d'augmenter la pénétration d'un agent antifongique se présentant sous forme d'un sel d'acide, tel que la terbinafine HC1. 20 En d'autres termes, l'invention consiste à diminuer les sites de fixations de l'agent antifongique sur la keratine en utilisant une molécule jouant le rôle de compétiteur de l'agent antifongique vis-à-vis de la kératine. 25 Ainsi, il a été montré dans le cadre de la présente demande que la présence d'un tel tensioactif : n'affectait en rien la solubilisation à haute concentration (par exemple 10%) de l'agent antifongique dans une solution aqueuse ; conférait à la composition des propriétés de compatibilité avec la composition 30 biologique de l'ongle ; permettait d'augmenter la pénétration et la diffusion de l'agent actif à travers l'ongle.

On entend par pénétration de l'agent actif, la capacité de cet agent à rentrer dans la 35 matrice de l'ongle.15 On entend par diffusion de l'agent actif, la capacité de cet agent à atteindre, à partir de la matrice, le lit de l'ongle sous la matrice.

Sans vouloir être lié à une quelconque théorie, il est présumé que le tensio-actif, de part sa nature amphotère et en particulier sous forme cationique, se fixe sur la kératine permettant ainsi à la Terbinafine HC1, au pH acide de la composition, (pH inférieur au pKa de la Terbinafine, 7.10 (Novartis Pharmaceuticals Canada Inc, Prescribing Information, PrLamisil (terbinafine hydrochloride), 2008, pag. 18) et de façon avantageuse, à un pH compris entre 3 et 6, et de façon préférentielle entre 3 et 5, de diffuser à travers la matrice de l'ongle et d'atteindre son site d'action, le lit de l'ongle.

Ainsi et selon un premier aspect, la présente invention décrit, et ce pour la première fois à la connaissance du Demandeur, l'utilisation d'un tensioactif cationique, avantageusement amphotère, pour la préparation d'une composition comprenant un agent antifongique sous la forme d'un sel d'acide, destinée à être appliquée sur l'ongle.

Selon un autre aspect, la présente invention vise une composition pharmaceutique 20 destinée à être appliquée sur l'ongle comprenant : un agent antifongique se présentant sous la forme d'un sel d'acide, avantageusement un chlorhydrate ; un système solvant ; un tensioactif cationique, avantageusement amphotère. Le premier composant de cette composition est donc un agent antifongique se présentant sous la forme d'un sel d'acide, avantageusement un chlorhydrate.

D'une façon générale, tout agent antifongique présent sous une forme cationique au 30 sein de la composition est utilisable dans les conditions de l'invention.

Les agents antifongiques d'intérêt plus particulièrement visés par la présente invention sont ceux de la classe des allylamines ou des morpholines, les allylamines étant préférées. En effet, les agents antifongiques de la classe des allylamines, en 35 particulier la terbinafine ou la naftitine, ainsi que ceux de la classe des morpholines, en particulier l'amorolfine, sont des composés prometteurs dans la lutte antifongique. Leur mode d'action supposé ou démontré passerait par une inhibition au niveau de 25 l'ergostérol, constituant spécifique de la paroi des cellules fongiques, en particulier via l'inhibition de la squalène époxydase.

Dans la classe des allylamines, on peut citer, en particulier, le chlorhydrate de 5 terbinafine et le chlorhydrate de naftifine, dont les formules respectives sont les suivantes : Chlorhydrate de terbinafine Chlorhydrate de naftifine Parmi les molécules de cette classe, la terbinafine est préférée. 15 Alternativement, l'agent anti-fongique peut appartenir à la classe des morpholines, notamment l'amorolfine, pour lesquelles des problèmes similaires se posent. En pratique, l'agent anti-fongique tel qu'il a été défini ci-dessus représente plus de 5%, voire au moins 8%, ou même au moins 10% (p/p) de la composition totale. On 20 peut ainsi envisager jusqu'à 15%, voire 20% de cet agent dans la composition. Bien évidemment, il est possible d'envisager un mélange d'agents antifongiques, éventuellement de classe différente pour augmenter l'efficacité.

Comme déjà dit, ces molécules présentent l'inconvénient d'être quasi-insolubles 25 dans l'eau et de diffuser très peu dans l'ongle, probablement en raison de leur interaction avec la kératine. 10 Le deuxième composant selon l'invention est le système solvant qui est avantageusement un système ternaire. De manière avantageuse, il est constitué des ingrédients suivants : - de l'eau ; - au moins un alcanol en C2-C8 à chaîne droite ou ramifiée, avantageusement de l'éthanol ; - au moins un glycol (présentant des fonctions hydroxy libres), avantageusement du propylène glycol.

De manière encore plus avantageuse, la quantité d'eau totale représente plus de 30% en poids de la composition, avantageusement plus de 33%, voire plus de 35% ou même plus de 40%. Cette forte quantité d'eau dans la formule confère au produit un caractère non négligeable d'hydrophilie. En effet, l'ongle étant une matrice hydrophile hygroscopique, il gonfle en présence d'eau ce qui facilite la diffusion des principes actifs.

Par eau totale, on entend la quantité d'eau introduite en tant que telle dans la composition, additionnée de la quantité d'eau provenant des différents solvants et/ou excipients de la composition lorsqu'ils en contiennent.

Cette forte teneur en eau est extrêmement avantageuse en raison de l'application transunguéale visée. En outre, il a été montré dans le cadre de l'invention que, malgré la faible solubilité dans l'eau des molécules antifongiques concernées, le système solvant proposé permet une solubilisation à haute concentration des molécules d'intérêt, y compris en présence du tensioactif cationique ou amphotère selon l'invention.

Outre la forte teneur en eau, le système ternaire de solvant contient avantageusement un alcool à chaîne courte, et plus précisément au moins un alcanol en C2-C8 à chaîne droite ou ramifiée, de préférence l'éthanol, l'isopropanol et le n-butanol. L'éthanol est particulièrement préféré. Un mélange de différents alcools peut également être envisagé.

Enfin, ce système solvant ternaire comprend au moins un glycol. On entend ici par glycol, un composé présentant au moins deux fonctions hydroxy. Sont plus précisément visés par l'invention les glycols dont les deux fonctions hydroxy sont libres, c'est-à-dire qu'elles ne sont pas engagées dans une liaison éther ou ester. On peut citer par exemple le propylène glycol, le butylène glycol, le pentylène glycol, l'hexylène glycol, l'éthylène glycol et les polyéthylènes glycols. Le propylène glycol est préféré. Un mélange de différents glycols peut également être envisagé. De manière avantageuse, le système solvant ternaire représente au moins 60%, voire 70%, 80% ou même 90% (p/p) de la composition totale.

En outre, et de manière avantageuse, la proportion en alcool est supérieure ou égale à 10 celle en glycol. De manière encore plus avantageuse, la proportion d'eau totale est supérieure à celle en glycol.

Le troisième composant de la composition selon l'invention est donc un tensioactif de nature cationique, voire amphotère, susceptible d'entrer en compétition avec 15 l'agent antifongique sous forme de sel d'acide pour la fixation sur la kératine, présente dans la structure des différentes couches de l'ongle sous forme de fibres et chargée négativement.

Selon l'invention, le tensioactif cationique ou amphotère est donc introduit pour ses 20 propriétés in situ sur la biodisponibilté de l'actif dans l'ongle, notamment de la terbinafine HC1 au travers de la tablette unguéale kératinisée de l'ongle, des annexes cutanées et de la peau. Par définition, un tensioactif cationique est un tensioactif dont la partie hydrophile 25 est chargée positivement. Il libère une charge positive (cation) en solution aqueuse. I1 possède des propriétés bactériostatiques et émulsionnantes et présente une affinité avec la kératine chargée négativement avec qui il va se combiner. Un tensioactif amphotère est un tensioactif dont la partie hydrophile comporte une charge positive et une charge négative, la charge globale étant nulle au point 30 isoélectrique. Suivant le pH du milieu où il se trouve, il libère un ion positif et un ion négatif. En pH alcalin, il se comporte comme un tensioactif anionique, et en pH acide, il se comporte comme un tensioactif cationique. Dans le contexte de l'invention, dans la mesure où l'agent antifongique est sous forme d'un sel d'acide, la composition se trouve donc à pH acide inférieur au pKa de 35 l'agent antifongique, de préférence à un pH compris entre 3 et 6, préférentiellement5 entre 3 et 5, et le tensioactif amphotère chargé positivement, joue alors le rôle d'un tensioactif cationique.

En tant que tensioactifs cationiques utilisables selon l'invention, on citera à titre non limitatif - les ammoniums quaternaires, dans lesquels le contre-ion peut être • chlorure, bromure, phosphate, hydroxyde, méthosulfate, sulfate ou un anion d'acide carboxylique, dans lesquels les substituants de l'azote peuvent être • des chaînes alkyles de 1 à 20 carbones, saturées ou insaturées, éventuellement hydroxylées, la fonction hydroxyle pouvant être estérifiée, ces chaînes pouvant être éventuellement substituées, pouvant provenir de composés définis, ou bien être des mélanges issus de produits naturels, • des groupements aromatiques éventuellement substitués, des cycles, en particulier des cycles aromatiques, par exemple la pyridine, 20 éventuellement substitués • des mélanges de ces diverses catégories • eux-mêmes substitués par une fonction amine quaternisée ou non - les amines, qui peuvent se protoner en fonction du pH et les sels d'amines dans lesquels l'azote porte les substituants précédemment cités et/ou de l'hydrogène, ces 25 produits étant utilisés dans des conditions où ils sont cationiques - les dérivés de bétaïne ou d'aminoacides, dans les conditions de pH qui les rendent cationiques, éventuellement substitués par les groupements précédemment cités Avantageusement, les tensioactifs amphotères utilisés ont une structure de dérivé de 30 bétaïne répondant à la formule générale (I) suivante : CH 1+3 RùN O

CH (I) dans laquelle R représente un radical alkyle ou un radical R'CO-NH(CH2)3-, R' représentant un radical alkyle. On entend par radical alkyle une chaine hydrocarbonée, saturée, linéaire ou ramifiée. 5 Parmi les radicaux alkyles, on préfèrera ceux comprenant de 1 à 20 atomes de carbones.

Parmi les dérivés de bétaine, on préfèrera plus particulièrement le tensioactif amphotère connu sous le nom commercial de Dehyton® AB30 ou encore Lauryl 10 Dimethylaminoacetic Acid Betaine répondant à la formule générale (I) dans laquelle R représente le radical lauryle. Cette molécule est communément appelée cocobetaine.

Cette molécule est par exemple vendue par la société Cognis en solution aqueuse à 15 30% sous le nom Dehyton® AB30.

A titre d'exemples supplémentaires, on peut citer d'autres bétaïnes comme la cétylbetaine ou encore la cocamidopropyl betaine.

20 Le tensioactif cationique ou amphotère représente au moins 0,1% en poids de la composition. Il peut représenter jusqu'à 10%, voire même 15% en poids de la composition sans perturber la solubilisation de l'agent antifongique à haute concentration.

25 Selon un mode de réalisation particulier, le tensioactif cationique et/ou amphotère est le seul tensioactif dans la composition selon l'invention. Ceci exclut la présence simultanée de tensioactifs non ioniques et également de tensioactifs anioniques.

Avantageusement, la composition selon l'invention comprend en outre un agent de 30 texture de la classe des celluloses, par exemple, les dérivés alkylcellulosiques, en particulier les méthylcelluloses, les éthylcelluloses, les propylcelluloses et les hydroxyalkylcelluloses, telles que celles commercialisées sous la dénomination "KLUCEL", avantageusement l'hydroxyéthyl cellulose (Natrosol HHX250) ou l'hydroxypropyl cellulose. Cet agent de texture modulant la viscosité de la 3 O composition en permet une application confortable notamment sur l'ongle. D'autre part, le contrôle de la viscosité permet d'éviter l'évaporation trop rapide des solvants et ainsi permet de contrôler la recristallisation du principe actif.

Par ailleurs, la composition selon l'invention peut également renfermer au moins un additif choisi dans le groupe formé par : - les agents conservateurs, tels que l'alcool phényléthylique, l'alcool benzylique, le phénoxyéthanol, les parabens et leurs dérivés ; - les antioxydants, tels que le butylhydroxyanisole (BHA), le 10 butylhydroxytoluène (BHT), l'ascorbate de palmityle, l'alpha -tocophérol et/ou ses esters ; - les colorants, charges ou pigments, tels que les micatitanes couramment utilisés dans le domaine cosmétique pour réaliser des vernis à ongles ; - les agents chélatants tels que le disodium EDETATE (EDTA) ; 15 - les émollients tels que le cyclométhicone ; - d'autres principes actifs tels qu'un antiseptique, notamment l'acide acétique.

Les quantités de chacun des ces additifs sont aisément déterminées par l'homme du métier. D'une manière générale, la composition selon l'invention peut être un gel, une crème, une émulsion, un spray, une solution ou une mousse.

Avantageusement, la composition selon l'invention est une composition aqueuse de 25 type solution. On entend par solution, une préparation liquide claire et homogène contenant une ou plusieurs substances dissoutes dans un solvant ou mélange de solvants miscibles entre eux. On entend par préparation liquide, un produit qui s'écoule à température ambiante et comportant un caractère newtonien ou un écoulement pseudoplastique. 30

Typiquement et à titre d'illustration, une composition selon l'invention comprend : 1% à 20% en poids de terbinafine HC1 sous forme solubilisée ; 0% à 10% en poids d'un agent de texture. 35 0.1% à 20% en poids d'un tensio actif amphotère ; 20% à 80% en poids de phase solvante contenant majoritairement de l'eau ; 20 - 0% à 1% d'un agent chélatant ; - 0% à 2% d'un agent antioxydant ; - 0% à 20% d'additifs.

Préférentiellement, la composition est constituée de : 1% à 15% en poids de terbinafine HC1 sous forme solubilisée ; 0% à 5% en poids d'un agent de texture ; 0.1% à 15% en poids d'un tensioactif amphotère ; 20% à 60% en poids de phase solvante contenant majoritairement de l'eau ; 0% à 0.5% d'un agent chélatant ; 0% à 1% d'un agent antioxydant ; 0% à 10% d'additifs.

Encore plus préférentiellement, la composition est constituée de: 1% à 10% en poids de terbinafine HC1 sous forme solubilisée ; 0% à 2% en poids d'un agent de texture ; 0.1 % à 10% en poids d'un tensioactif amphotère ; 20% à 55% en poids de phase solvante contenant majoritairement de l'eau ; 0% à 0.05% d'un agent chélatant ; 0% à 0.5% d'un agent antioxydant ; 0% à 5% d'additifs.

De façon préférée, la composition est constituée de: 1% à 10% en poids de terbinafine HC1 sous forme solubilisée ; (0% à 2% en poids d'un agent de texture ; 0.1 % à 10% en poids d'un tensioactif amphotère ; 20% à 55% en poids de phase solvante contenant majoritairement de l'eau ; 0% à 0.05% d'un agent chélatant ; 0% à 0.5% d'un agent antioxydant ; 0% à 5% d'additifs.

Ainsi, la présente invention porte sur une composition pharmaceutique ou dermatologique destinée au traitement des onychomycoses.

Comme déjà dit, une composition selon l'invention est particulièrement adaptée pour le traitement des onychomycoses par voie transunguéale. Ainsi, elle est destinée à être appliquée à la surface de l'ongle. EXEMPLES DE REALISATION

L'invention et les avantages qui en découlent ressortiront mieux des exemples de réalisation suivants, à l'appui des figures annexées. Ceux-ci ne sont cependant en aucun 10 cas limitatifs. Les exemples suivants se rapportent à des formulations conformes à l'invention, de type solution, qui permettent de solubiliser au moins 5% en p/p de terbinafine HC1, tout en assurant une application confortable pour le patient.

15 LEGENDE DES FIGURES

La figure 1 représente un schéma en coupe de la structure d'un ongle. La figure 2 est une représentation schématique des différentes liaisons existantes au niveau des chaînes de kératine dans l'ongle. 20 La figure 3 représente la variation de la teneur en terbinafine chlorhydrate (% terbinafine libre), en fonction du temps, dans la formule 2 (1,8% cocobétaïne) par rapport à la formule témoin 1 (0% cocobétaïne). La figure 4 représente le pourcentage (%) en extrait sec, en fonction du temps, de compositions contenant des quantités variables en agent de texture 25 (hydroxyéthylcellulose). La figure 5 illustre le taux d'évaporation de compositions contenant des quantités variables en agent de texture (hydroxyéthylcellulose). La figure 6 illustre la quantité de Terbinafine HC1 cumulée ayant diffusée à travers des ongles. 30 La figure 7 illustre la quantité de Terbinafine HC1 dans l'ongle après 5 jours de diffusion

Exemple 1 : Procéde de fabrication et étude de stabilité 35 1/ Procédé de fabrication : Ce procédé de fabrication se réalise simplement dans un bécher de fabrication en faisant gonfler l'agent de texture dans l'eau. On ajoute ensuite la phase active (voir préparation ci-dessous) contenant le chlorhydrate de terbinafine en solution. Puis on ajoute sous agitation modérée le tensioactif cationique ou amphotère. a- Préparation de la phase aqueuse : Dans un bécher, l'eau et l'agent de texture sont introduits et laissés sous agitation pour obtenir un mélange limpide, lisse et homogène.

10 b- Préparation de la phase active Dans un bécher annexe, le principe actif est solubilisé dans les solvants organiques, glycols et alcooliques.

c- Mélange final : 15 La phase active (b) est incorporée dans la phase aqueuse (a) et homogénéisée, puis le tensioactif cationique ou amphotère est ajouté et l'homogénéisation poursuivie.

Méthode de contrôle de la viscosité : Viscosimètre de type Brookfield LVDVII+ 20 Mobile SC4-18 +petit volume Vitesse 12 rpm Temps : 1 minute Température :25°C

25 2/ Mesure de la stabilité de la composition :

a- Stabilité physique : La stabilité physique des formulations est mesurée par une observation macroscopique de la formulation à température ambiante (TA), à 4°C et à 40°C, 30 après 1 mois, 2 mois et 3 mois afin de garantir l'intégrité physique des produits et vérifier l'absence de recristallisation de la terbinafine HC1 solubilisée.

L'analyse microscopique est réalisée à 4°C et à température ambiante (TA) afin de vérifier l'absence de recristallisation de la terbinafine HC1 solubilisée. b- Stabilité chimique : 35 510 La stabilité chimique est mesurée par dosage de l'actif en HPLC et les résultats sont exprimés en % de la teneur initiale.

Exemple 2 : Solution à 5% de Terbinafine HC1 Ingrédients INCI Name Teneur (% Teneur (% m/m) tenant compte de l'eau contenue dans chaque ingrédient) Eau purifiée Aqua 39.05 / Eau totale (eau purifiée + Aqua / 39.05+(6.0x0.7) eau contenus dans les = 43.25 ingrédients) Titriplex III EDTA disodique 0.01 0.01 Natrosol 250 HHX Hydroxyethylcellulose 0.50 0.50 Dehyton AB30 (solution Cocobétaïne 6.0 / aqueuse à 30%) Cocobétaïne matière Cocobétaïne / 6.0x0.3=1.8 active (sans eau) Propylène Glycol Propylène glycol 19.0 19.0 Ethanol Absolu Ethanol 30.4 30.4 Nipanox BHT Butyl hydroxytoluène 0.04 0.04 Terbinafine HC1 Terbinafine HC1 5.0 5.0 Le pH initial est de 4,75 Stabilité physique : Temps initial 1 mois 2 mois 3 mois Aspect Solution fluide 4°C Idem Idem Idem macroscopique limpide incolore temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial 40°C Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Aspect Absence de 4°C Idem Idem Idem microscopique cristaux temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Stabilité chimique : TO T 1 mois T 2 mois T 3 mois TA 101.6% 101.3% 102.2% 101.5% 40°C -- 101% 100.7% 101.1% La composition de l'exemple 2 est donc stable physiquement et chimiquement pendant 3 mois à 4°C, à température ambiante et à 40°C.

Exemple 3: Solution à 10% de Terbinafine HC1 Ingrédients INCI Name Teneur (% m/m) Teneur (% tenant compte de l'eau contenue dans chaque ingrédient) Eau purifiée Aqua 29.45 / Eau totale (eau purifiée + Aqua / 29.45+(6.0x0.7) eau contenus dans les =33.65 ingrédients) Titriplex III EDTA disodique 0.01 0.01 Klucel HF Hydroxypropylcellulose 0.5 0.5 DehytonAB30 (solution Cocobétaïne 6.0 / aqueuse à 30%) Cocobétaïne matière Cocobétaïne / 6.0xO.3=1.8 active (sans eau) Propylène Glycol Propylène glycol 20.25 20.25 Ethanol Absolu Ethanol 33.75 33.75 Nipanox BHT Butyl hydroxytoluène 0.04 0.04 Terbinafine HC1 Terbinafine HC1 10.0 10.0 Le pH initial est de 4,50. Stabilité physique : Temps initial 1 mois 2 mois 3 mois Aspect Solution fluide 4°C Idem Idem Idem macroscopique limpide incolore temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial 40°C Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Aspect Absence de 4°C Idem Idem Idem microscopique cristaux temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Stabilité chimique : TO T 1 mois T 2 mois T 3 mois TA 104% 103.8% 102.1% 103.5% 40°C -- 103.6% 103% 103.4% 10 La composition de l'exemple 3 est donc stable physiquement et chimiquement pendant 3 mois à 4°C, à température ambiante et à 40°C.

Exemple 4: Solution à 10% de Terbinafine5 Ingrédients INCI Name Teneur (% m/m) Teneur (% tenant compte de l'eau contenue dans chaque ingrédient) Eau purifiée Aqua 29.45 / Eau totale (eau purifiée + Aqua / 29.45+(6.0x0.7) eau contenus dans les =33.65 ingrédients) Titriplex III EDTA disodique 0.01 0.01 Natrosol 250 HHX Hydroxyéthylcellulose 0.5 0.5 Dehyton AB30 (solution Cocobétaïne 6.0 / aqueuse à 30%) Cocobétaïne matière Cocobétaïne / 6.0x0.3=1.8 active (sans eau) Propylène Glycol Propylène glycol 20.25 20.25 Ethanol Absolu Ethanol 33.75 33.75 Nipanox BHT Butyl hydroxytoluène 0.04 0.04 Terbinafine HC1 Terbinafine HC1 10.0 10.0 Le pH initial est de 4,53. Stabilité physique : Temps initial 1 mois 2 mois 3 mois Aspect Solution fluide 4°C Idem Idem Idem macroscopique limpide incolore temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial 40°C Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Aspect Absence de 4°C Idem Idem Idem microscopique cristaux temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem5 temps initial temps initial temps initial La composition de l'exemple 4 est donc stable physiquement pendant 3 mois à 4°C, à température ambiante et à 40°C. Exemple 5: Solution à 10% de Terbinafine Ingrédients INCI Name Teneur (% m/m) Teneur (% tenant compte de l'eau contenue dans chaque ingrédient) Eau purifiée Aqua 27.67 / Eau totale (eau purifiée + Aqua / 27.67+(6.0x0.7)+ eau contenus dans les 35.53x0.05) ingrédients) =33.65 Titriplex III EDTA disodique 0.01 0.01 Natrosol 250 HHX Hydroxyéthylcellulose 0.50 0.50 Dehyton AB30 (solution Cocobétaïne 6.0 / aqueuse à 30%) Cocobétaïne matière Cocobétaïne / 6.0x0.3=1.8 active (sans eau) Propylène Glycol Propylène glycol 20.25 20.25 Ethanol95-96% Ethanol 35.53 / Ethanol Absolu Ethanol / 35.53-(35.53x0.05) =33.75 Nipanox BHT Butyl hydroxytoluène 0.04 0.04 Terbinafine HC1 Terbinafine HC1 10.0 10.0 Le pH initial est 4,36. Stabilité physique : Temps initial 1 mois 2 mois 3 mois Aspect Solution fluide 4°C Idem Idem Idem macroscopique limpide incolore temps temps temps initial initial initial 10 TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial 40°C Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Aspect Absence de 4°C Idem Idem Idem microscopique cristaux temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Stabilité chimique : TO T 1 mois T 2 mois T 3 mois TA 100.9% 101.4% 100.3% 98.6% 40°C -- 101.2% 99.1% 99.2% La composition de l'exemple 5 est donc stable physiquement et chimiquement pendant 3 mois à 4°C, à température ambiante et à 40°C.

Exemple 6: Solution à 10% de Terbinafine 10 Ingrédients INCI Name Teneur (% m/m) Teneur (% tenant compte de l'eau contenue dans chaque ingrédient) Eau Purifiée Aqua 27.87 / Eau totale (eau purifiée + Aqua / 27.87+(6.0x0.7)+ eau contenus dans les (35.53x0.05)=33.85 ingrédients) Titriplex III EDTA disodique 0.01 0.01 Natrosol 250 HHX Hydroxyéthylcellulose 0.30 0.30 Dehyton AB30 Cocobétaïne 6.0 / (solution aqueuse à 30%) Cocobétaïne matière active Cocobétaïne / 6.0xO.3=1.8 (sans eau) Propylène Glycol Propylène glycol 20.25 20.25 Ethanol 95-96% Ethanol 35. 53 / Ethanol Absolu Ethanol / 35.53-(35.53x0.05) =33.75 Nipanox BHT Butyl hydroxytoluène 0.04 0.04 Terbinafine HC1 Terbinafine HC1 10.0 10.0 Le pH initial est 4,69. Stabilité physique : Temps initial 1 mois 2 mois 3 mois Aspect Solution fluide 4°C Idem Idem Idem macroscopique limpide incolore temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial 40°C Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Aspect Absence de 4°C Idem Idem Idem microscopique cristaux temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Stabilité chimique : TO T 1 mois T 2 mois T 3 mois TA 100.8% 102.2% 101.2% 99.3% 40°C -- 101.8% 101% 100.1%5 La composition de l'exemple 6 est donc stable physiquement et chimiquement pendant 3 mois à 4°C, à température ambiante et à 40°C.

Exemple 7: Solution à 10% de Terbinafine Ingrédients INCI Name Teneur (% m/m) Teneur (% tenant compte de l'eau contenue dans chaque ingrédient) Eau Purifiée Aqua 26.67 Eau totale (eau purifiée + Aqua / 26.67+(6.0x0.7)+ eau contenus dans les (35.53x0.05) ingrédients) =32.65 Titriplex III EDTA disodique 0.01 0.01 Natrosol 250 HHX Hydroxyéthylcellulose 0.50 0.50 Dehyton AB30 Cocobétaïne 6.0 / (solution aqueuse à 30%) Cocobétaïne matière Cocobétaïne / 6.0x0.3=1.8 active (sans eau) Propylène Glycol Propylène glycol 20.25 20.25 Ethanol95-96% Ethanol 35.53 / Ethanol Absolu Ethanol / 35.53-(35.53x0.05) =33.75 Nipanox BHT Butyl hydroxytoluène 0.04 0.04 Terbinafine HC1 Terbinafine HC1 10.0 10.0 Acide Acétique Acide acétique 1.0 1.0 Le pH initial est de 3,98. 10 Stabilité physique : Temps initial 1 mois 2 mois 3 mois Aspect Solution fluide 4°C Idem Idem Idem macroscopique limpide incolore temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial 40°C Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Aspect Absence de 4°C Idem Idem Idem microscopique cristaux temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Stabilité chimique : TO T 15 Jours TA 100.1% / 40°C -- 101.2% La composition de l'exemple 7 est donc stable physiquement et chimiquement 15 jours à 4°C, à température ambiante et à 40°C.

Exemple 8: Solution à 10% de Terbinafine 10 Ingrédients INCI Name Teneur (% m/m) Teneur (% tenant compte de l'eau contenue dans chaque ingrédient) Eau Purifiée Aqua 26.67 / Eau totale (eau purifiée + Aqua / 26.67+(6.0x0.7)+ eau contenus dans les (35.53x0.05) ingrédients) =32.65 Titriplex III EDTA disodique 0.01 0.01 Natrosol 250 HHX Hydroxyéthylcellulose 0.50 0.50 Dehyton AB30 Cocobétaïne 6.0 / (solution aqueuse à 30%) Cocobétaïne matière Cocobétaïne / 6.0x0.3=1.8 active (sans eau) Propylène Glycol Propylène glycol 16.25 16.25 Ethanol 95-96% Ethanol 35.53 / Ethanol Absolu Ethanol / 35.53-(35.53x0.05) =33.75 NIPANOX BHT Butyl hydroxytoluène 0.04 0.04 Terbinafine HC1 Terbinafine HC1 10.0 10.0 ST Cyclomethicone 5 Cyclomethicone 5.0 5.0 Stabilité physique : Temps initial 1 mois 2 mois 3 mois Aspect Solution fluide 4°C Idem Idem Idem macroscopique limpide incolore temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial 40°C Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Aspect Absence de 4°C Idem Idem Idem microscopique cristaux temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial La composition de l'exemple 8 est donc stable physiquement pendant 3 mois à 4°C, à température ambiante et à 40°C.

Exemple 9: Solution à 10% de Terbinafine 10 Ingrédients INCI Name Teneur (% m/m) Teneur (% tenant compte de l'eau contenue dans chaque ingrédient) Eau Purifiée Aqua 31.59 / Eau totale (eau purifiée + Aqua / 31.59+(6.0x0.7)+ eau contenus dans les (33.16x0.05) ingrédients) =37.45 Titriplex III Edta disodique 0.01 0.01 Natrosol 250 HHX Hydroxyéthylcellulose 0.3 0.3 Dehyton AB30 Cocobétaïne 6.0 / (solution aqueuse à 30%) Cocobétaïne matière Cocobétaïne / 6.0x0.3=1.8 active (sans eau) Propylène Glycol Propylène glycol 18.9 18.9 Ethanol 95% Ethanol 33.16 / Ethanol Absolu Ethanol Absolu / 33.16-(33.16x0.05) =31.50 Nipanox BHT Butyl hydroxytoluène 0.04 0.04 Terbinafine HC1 Terbinafine HC1 10.0 10.0 Le pH initial est de 4,52. Stabilité physique : Temps initial 1 mois 2 mois 3 mois Aspect Solution fluide 4°C Idem Idem Idem macroscopique limpide incolore temps temps temps initial initial initial TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial 40°C Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Aspect Absence de 4°C Idem Idem Idem microscopique cristaux temps temps temps initial initial initial5 TA Idem Idem Idem temps temps temps initial initial initial Stabilité chimique : TO T 1 mois T 2 mois T 3 mois TA 100.1% 99.9% 99% 100.8% 40°C -- 99.2% 99.5% 101.8% La composition de l'exemple 9 est donc stable physiquement et chimiquement pendant 3 mois à 4°C, à température ambiante et à 40°C.

Il apparaît que l'ensemble des formulations testées (exemples 2 à 9) est stable tant du point de vue physique que chimique, et cela malgré la variation de différents 10 paramètres : la concentration en principe actif, en l'occurrence la terbinafine HC1; l'ajout éventuel d' agent(s) antiseptique(s) comme l'acide acétique; la nature ou la concentration de l'agent de texture ; la composition du système solvant ternaire, notamment dans la proportion 15 des 3 constituants respectifs.

Exemple 10: Etude de la fixation à la kératine « Kératin-Binding »

L'objectif est de mettre en évidence l'effet de l'addition, dans une formulation à 10% 20 en chlorhydrate de terbinafine, d'un agent amphotère comme la cocobétaïne sur l'affinité du chlorhydrate de terbinafine pour la kératine de l'ongle.

Deux formulations sont comparées : - Formulation 1 : Formulation témoin ne contenant pas d'agent amphotère 25 - Formulation 2 : Formulation contenant 1,8% de cocobétaine, soit 6% d'une solution aqueuse à 30% de cocobétaïne correspondant à l'exemple 9

La concentration en terbinafine chlorhydrate est identique dans les deux formulations (10% m/m). Leur composition exacte est présentée ci-dessous : Ingrédients Formule 1 Formule 2 30 (témoin) (%m/m) (%m/m) Eau Purifiée 37.59 31.59 Titriplex III 0.01 0.01 Natrosol 250 HHX 0.30 0.30 Dehyton AB30 / 6.0 (solution aqueuse à 30%) Propylène Glycol 18.9 18.9 Ethanol95% 33.16 33.16 Nipanox BHT 0.04 0.04 Terbinafine HC1 10.0 10.0 Dans les préparations testées, du fait de la présence de 10 % de terbinafine chlorhydrate, le pH est acide. L'amphotère présent dans la solution se trouve alors majoritairement sous forme cationique. La kératine de l'ongle étant chargée négativement, il s'agit de vérifier que l'agent amphotère sous forme cationique se fixe préférentiellement sur la kératine, saturant les sites de fixation et permettant alors à la terbinafine chlorhydrate d' être libre et disponible pour atteindre son site d'action : le lit de l'ongle.

La cinétique d'adsorption de la terbinafine chlorhydrate sur de la kératine en poudre a été suivi au cours du temps afin de mettre en évidence la compétition de l'agent amphotère sous forme cationique et de la terbinafine chlorhydrate vis-à-vis de la kératine. Pour cela, un mode opératoire a été mis au point à partir des travaux de Tatsumi et al. (Therapeutic efficacy of topically applied KP-103 against experimental tinea unguium in guinea pigs in comparison with Amorolfine and terbinafine, Antimicrobial agents and chemotherapy, (2002), 46, 3797-3801) : la formulation est mise en contact avec de la poudre de kératine. Le mélange est ensuite centrifugé, puis la concentration de terbinafine chlorhydrate libre restant dans la formulation est mesurée à différents temps. 1/ Préparation des échantillons

Afin de ne pas être dans des conditions de saturation totale de la kératine par la terbinafine chlorhydrate, les préparations testées sont diluées au 1/100ème dans le placebo correspondant. Le pH est alors ajusté à 3.6 pour rester dans les conditions de pH natif de la préparation.

La kératine est ensuite ajoutée (10% p/p) et l'ensemble est mis sous agitation magnétique à 25°C. Au temps d'analyse, lml de préparation est prélevé et centrifugé l0min à 13000tr/min. Le surnageant est ensuite dosé par HPLC. 2/ Méthode de dosage HPLC

La terbinafine chlorhydrate est analysée à 283nm sur une colonne Sunfire C18 (150*4.6mm, particules 3.5 µm) en mode isocratique (1.5mL/min) avec un mélange Acétonitrile / Méthanol / Solution Tampon (700/200/100 v/v/v). Le tampon est préparé avec 1000 ml d'eau et 1 ml de triéthylamine et est ajusté à pH 7.5. Les témoins et échantillons sont préparés à 0.05 mg/ml en terbinafine chlorhydrate par dilution dans une phase Acétonitrile/Méthanol/Eau milliQ (700/200/100 v/v/v).

3/ Résultats

Les résultats de la cinétique d'adsorption sont reportés dans le tableau ci-dessous qui montre les variations de la teneur en terbinafine chlorhydrate par rapport à la teneur initiale (% Label Claim) en fonction du temps de la formule test (1.8% cocobétaïne, soit 6% d'une solution à 30% de cocobétaïne dans l'eau) et de la formule témoin (0% cocobétaïne) : Formule 1 (témoin) Formule 2 (exemple 9) Temps (min) %LC CV% %LC CV% 0 84,4 0,5 98,6 0,3 30 74,7 3,8 94,9 1,1 60 71,9 3,2 93,3 1,8 120 71,0 3,0 90,6 0,9 240 68,9 2,9 89,4 0,7 360 67,7 1,7 89,2 1,3 Le graphe correspondant est présenté à la figure 3. 25 En l'absence de cocobétaïne (Formule 1), on observe une fixation immédiate de la terbinafine chlorhydrate sur la kératine. Le phénomène se poursuit jusqu'à atteindre rapidement un palier correspondant à la saturation de la kératine et environ 30% de terbinafine chlorhydrate fixée sur la kératine.

30 En présence de 1,8% de cocobétaïne, soit 6% d'une solution à 30% de cocobétaïne dans l'eau (Formule 2), l'adsorption de la terbinafine chlorhydrate sur la kératine est 20 fortement minimisée. En effet, au temps initial, l'adsorption est négligeable pour la formulation 2 (98,6% de terbinafine libre). Au niveau du palier, la présence de cocobétaïne permet d'augmenter la biodisponibilité de la terbinafine chlorhydrate de plus de 20%. L'ajout de cocobétaïne dans la formulation 2 permet donc une compétition avec la terbinafine chlorhydrate vis-à-vis de l'adsorption sur la kératine. La concentration en terbinafine libre dans la formulation 2 est donc plus importante, rendant la terbinafine plus disponible. 10 En conclusion, l'addition d'un agent amphotère dans la formulation permet, dans les conditions de pH acide de la préparation, c'est-à-dire à des pH inférieurs au pKa de la Terbinafine chlorhydrate (7,10) et de façon préférentielle, à des pH compris entre 3 et 5, de rendre la terbinafine chlorhydrate plus disponible. En effet, la fixation de 15 cette dernière sur la kératine de l'ongle est diminuée grâce à un phénomène de compétition avec l'agent amphotère sous forme cationique. De cette manière, l'actif est alors plus disponible pour atteindre son site d'action qui est le lit de l'ongle.

Exemple 11: Influence de la teneur en agent de texture Cette étude consiste à suivre des cinétiques d'évaporation pour étudier l'effet de la teneur en agent de texture.

La cinétique d'évaporation de différentes compositions a été testée à 32°C qui 25 correspond à la température de la peau et de l'ongle.

1/ Conditions opératoires

Matériel : Analyseur d'humidité SARTORIUS Type MA100 30 Le rayonnement infra-rouge permet l'évaporation des matières volatiles contenues dans le produit.

Méthode : Paramètres Valeurs Programme de chauffage Dessiccation standard Démarrage de l'analyse Avec stabilité 20 5 15 20 Fin de l'analyse Durée = 20min Résolution valeur de pesée pour analyse 1 mg Résultats Extraits sec (%R) Intervalle impression des valeurs 2 min Les formulations testées correspondent à celles des exemples 5 et 6. La référence utilisée correspond à une formulation sans agent de texture et sans cocobétaïne telle que décrite ci-dessous : Ingrédients Référence (%m/m) Eau Purifiée 35.95 Titriplex III 0.01 Propylène 20.25 Glycol Ethanol Absolu 33.75 Nipanox BHT 0.04 Terbinafine HC1 10.0 2/ Résultats :

Les résultats correspondants sont présentés dans les figures 4 et 5.

La cinétique d'évaporation ainsi que le taux d'évaporation de la formule de l'exemple 6 (0.3% hydroxyéthylcellulose) sont équivalents à ceux de la formule de référence. Par contre, l'addition de 0.5% d'hydroéthylcellulose dans la composition (exemple 5) diminue la cinétique d'évaporation.

La teneur de 0.3% d'hydroxyéthylcellulose (exemple 6) est optimisée et permet d'obtenir une cinétique d'évaporation identique à celle d'une composition sans agent de texture.

Exemple 12: Etude de diffusion de la Terbinafine HCl à travers l'ongle en présence et en absence d'amphotère L'objectif de cette étude est de comparer in vitro la pénétration à travers des ongles de 2 formulations contenant 10% de Terbinafine chlorhydrate avec et sans cocobétaïne. La durée de traitement est de 5 jours avec une nouvelle application de chaque 5 formule chaque jour. La concentration de formulation déposée quotidiennement sur la surface de l'ongle est de 10 µl/cm2.

Les formulations testées correspondent à celles de: - l'exemple 6, formulation contenant de la cocobétaïne 10 - la référence décrite dans l'exemple 11, formulation ne contenant pas de cocobétaïne

1/ Conditions opératoires :

15 * Ongles : provenant de mains de cadavres humains (6 ongles pour chaque formulation testée). * Banc de diffusion : composé de cellules de diffusion de type Franz (diamètre : 7mm) et d'un bain thermostaté à 32°C *Liquide récepteur : 1/10 Tampon phosphate (pH 7.4 ± 0.1) contenant 0.1% de 20 Volpo (O1eth-20) (PBS dilué à 1:10 dans lequel est ajouté 0.1% de Volpo).

Les cellules de diffusion utilisées dans cette étude ont un diamètre de 7mm. Les ongles sont placés dans la cellule de diffusion côté ventral vers le compartiment récepteur. L'étanchéité est assurée par un joint dur en silicone. 25 Au cours de l'expérience, les cellules de diffusion sont placées dans un bain thermostaté afin d'obtenir une température de 32 ± 1°C à la surface de l'ongle. Cette température est contrôlée avant chaque prélèvement.

Le premier jour (JO), les cellules de diffusion sur lesquelles sont montés les ongles, 30 sont placées dans un bain thermostaté. Le compartiment récepteur est rempli du liquide récepteur et la surface de l'ongle laissée à l'air libre. Le jour suivant (Jl), la totalité du liquide récepteur est prélevée dans toutes les cellules de diffusion et est remplacée par une solution fraiche de liquide récepteur. Ensuite, 10 itl/cm2 de chaque formulation sont appliqués sur la surface des ongles. L'application est répétée toutes 35 les 24h pendant 5 jours en suivant la même procédure qu'au jour 1 (10 µl/cm2 de chaque formulation sont appliqués sur la surface des ongles). Avant chaque application, la totalité du liquide récepteur est prélevée dans toutes les cellules de diffusion et est remplacée par une solution fraiche de liquide récepteur. Avant le remplissage par la solution fraîche du liquide récepteur, la surface des ongles est nettoyée avec une solution de sodium lauryl sulphate (SLS) à 1% et de l'eau déminéralisée. Le dernier jour (J6), après le dernier prélèvement, les ongles sont retirés de la cellule de diffusion et la surface est nettoyée avec une solution de SLS à 1% puis rincée à l'eau déminéralisée. Les ongles sont ensuite hachés et mis dans l'acétone pendant 24 heures sous agitation. L'acétone est prélevée et évaporée à sec sous hotte. 10 Les échantillons, liquide récepteur et extrait d'ongle sont ensuite analysés par MS / MS.

2/ Resultats Quantité cumulée de Terbinafine HC1 dans le liquide récepteur (ng.mm 2) Temps Formulation Exemple 6 Movcnne Ecart (jours) type Echantillons Al BI Cl DI EI FI jours 13.88 ; 3.46 20.82 4.39 12.1 1 12.07 16.12 9.98 Formulation Référence Echantillons A2 B2 C2 D2 E2 F2 5 jours 8.78 5.30 5.19 0.00 8.78 8.60 6.11 3.44 Après 5 jours de diffusion, la quantité de terbinafine chlorhydrate ayant diffusée à 20 travers l'ongle à partir de la formulation contenant l'amphotère est 2,7 fois supérieures à celle n'en contenant pas. Terbinafine dans l'ongle (ng.mg-1) Formulation Exemple 6 Moyenne Ecart-type Al BI Cl Dl E1 FI 7--15.2 2 1 1 12.-I;~ 614. ;~ 20 36.01 9 6») 55 . '4 Formulation Référence A2 B2 C2 D2 E2 F2 2448.72 1910.61 1262.61 612.43 1536.14 1615.51 1564.34 616.87 5 15 25 5 Les quantités de terbinafine chlorhydrate dans l'ongle sont plus faibles pour la formule contenant l'amphotère. Ces résultats montrent que la terbinafine chlorhydrate en présence d'amphotère se fixe moins dans l'ongle et de ce fait est plus disponible pour diffuser à travers la matrice de l'ongle.

A contrario, la terbinafine chlorhydrate en l'absence d'amphotère se fixe en plus grande quantité dans l'ongle créant ainsi un effet réservoir limitant la diffusion de la terbinafine chlorhydrate vers le liquide récepteur. 10

Claims (2)

1. REVENDICATIONS1. Utilisation d'un tensioactif cationique ou d'un tensioactif amphotère pour la préparation d'une composition comprenant un agent antifongique sous la forme d'un sel d'acide, destinée à être appliquée sur l'ongle.
2. 2. Composition pharmaceutique comprenant : - un agent antifongique se présentant sous la forme d'un sel d'acide, avantageusement un chlorhydrate ; - un système solvant ; - un tensioactif cationique, avantageusement un tensioactif amphotère chargé positivement. 5. Composition selon la revendication 2 caractérisée en ce que le pH de la composition est compris entre 3 et 6, avantageusement entre 3 et 5. 6. Composition selon la revendication 2 ou 3 caractérisée en ce que le tensioactif amphotère est un dérivé de bétaïne, avantageusement la cocobetaïne. 5. Composition selon l'une des revendications 2 ou 4 caractérisée en ce que le tensioactif représente de 0,1% à 20% en poids de la composition, avantageusement de 0,1% à 15%, encore plus avantageusement de 0,1% à 10%. 6. Composition selon l'une des revendications 2 à 5 caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un agent de texture, avantageusement un alkyl cellulose. 7. Composition selon l'une des revendications 2 à 6 caractérisée en ce que l'agent antifongique est de la classe des allylamines ou des morpholines, avantageusement de la terbinafine. 8. Composition selon l'une des revendications 2 à 7 caractérisée en ce que l'agent antifongique représente au moins 5% , avantageusement au moins 8%, encore plus avantageusement au moins 10% de la composition en poids. 35 9. Composition selon l'une des revendications 2 à 8 caractérisée en ce que le système solvant est constitué de : - l'eau ;30- au moins un alcanol en C2-C8 à chaîne droite ou ramifiée, avantageusement de l' éthano l ; - au moins un glycol, avantageusement du propylène glycol. 10. Composition selon l'une des revendications 2 à 9 caractérisée en ce qu'elle comprend en outre au moins un composé choisi dans la liste suivante : agent chélatant, agent anti-oxydant, agent antiseptique, émollient. 11. Utilisation d'une composition selon l'une des revendications 2 à 10 pour la préparation d'un médicament destiné à être appliqué sur l'ongle pour le traitement des onychomycoses.