FR2850870A1 - Utilisation therapeutique de glycerols acyles et de leurs analogues azotes et sulfures - Google Patents

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Abstract

La présente invention se rapporte à l'utilisation de glycérols acylés et de leurs analogues azotés et sulfurés dans le domaine thérapeutique, notamment en santé humaine. Les composés selon l'invention possèdent des propriétés pharmacologiques avantageuses et sont notamment utilisables pour prévenir ou traiter les maladies neurodégénératives.

Description

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UTILISATION THERAPEUTIQUE DE GLYCEROLS ACYLES ET DE LEURS
ANALOGUES AZOTES ET SULFURES
La présente invention a pour objet l'utilisation de glycérols acylés et de leurs analogues azotés et sulfurés dans le domaine thérapeutique, notamment pour la prévention et le traitement de maladies neurodégénératives. Elle a également pour objet des compositions pharmaceutiques.
Les maladies neurodégénératives constituent, avec les maladies vasculaires et les tumeurs cérébrales, les affections les plus fréquentes du système nerveux central. Elles affectent actuellement une population importante qui ne cesse de s'accroître. Les dommages qu'elles engendrent sont le plus souvent irréversibles et aboutissent progressivement à une dégénérescence de tout ou partie du système nerveux.
Une connaissance du fonctionnement et des dysfonctionnements du système nerveux central permet la mise au point de nouvelles stratégies thérapeutiques pour les maladies neurologiques. Malgré les efforts réalisés depuis plus de 10 ans dans ce domaine, le traitement des maladies neurodégénératives comme la sclérose en plaques, la maladie d'Alzheimer ou la maladie de Parkinson reste un défi majeur à relever et un véritable souci de santé publique.
L'épidémiologie des maladies neurodégénératives annonce aujourd'hui des chiffres alarmants. En effet, en France plus de 300 000 personnes souffrent de la maladie d'Alzheimer et ce nombre ne fera que grandir avec l'allongement de la durée de vie. Les maladies liées au vieillissement sont d'autant plus présentes que l'espérance de vie augmente, or celle-ci atteint aujourd'hui 83 ans pour les femmes et 74 ans pour les hommes. La maladie de Parkinson touche quant à elle environ 100 000 personnes en France et 4 millions dans le monde. 60 000 cas de sclérose en plaques sont déclarés en France.
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Les stratégies thérapeutiques actuelles se situent dans les domaines de la régénération tissulaire ou de la thérapie génique, ou concernent des méthodes médicamenteuses avec le développement de molécules capables de réguler l'expression de gènes impliqués dans le développement de la maladie.
La maladie d'Alzheimer (MA) est le plus fréquent des désordres neurodégénératifs. Les dépôts extracellulaires de peptide amyloïde ssA4 aboutissant à la formation de plaques séniles et l'accumulation de protéine Tau hyperphosphorylée formant les neurofibrilles intracellulaires sont les caractéristiques de cette pathologie. Les neurones cholinergiques de l'hippocampe sont particulièrement touchés mais d'autres aires cérébrales peuvent également être affectées par la mort neuronale. La disparition des cellules est associée à une perte en neurotransmetteurs, le plus important dans la MA étant l'acétylcholine. Les signes cliniques en résultant sont une perte progressive des fonctions cérébrales avec apparition d'une démence, une amnésie et une modification de l'attention et du langage.
La maladie de Parkinson (MP) est le deuxième désordre le plus fréquent après la MA. Elle se caractérise par la perte des neurones dopaminergiques de la substance noire, qui affecte, via des connections neuronales, des neurones du striatum. Les symptômes résultant de la destruction des voies nigrostriatales sont la rigidité, l'akinésie et la diskinésie, et la démence.
La sclérose en plaques (SEP) est le désordre affectant le plus les jeunes adultes. Elle peut être considérée comme une pathologie autoimmune (la cible étant les oligodendrocytes) et se caractérise par la formation de plaques de démyélinisation à l'origine des symptômes de la maladie (paralysie, cécité, modification de la cognition, douleurs). La réaction immune observée dans la SEP est caractérisée par des phases d'activation et de phases de rémission dont la fréquence et la période varient énormément d'un individu à l'autre.
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Même si les maladies neurodégénératives diffèrent entre elles en terme d'étiologie et de mécanisme physiopathologique, elles ont toutes un point commun : l'inflammation chronique qui se développe et qui contribue à la progression de la maladie et à la mort neuronale via la libération de molécules neurotoxiques. Même si les neurones sont capables de sécréter des molécules inflammatoires, les cellules gliales (astrocytes et surtout microglie) jouent un rôle particulièrement important dans ce processus. En conditions pathologiques, elles acquièrent un phénotype dit activé et libèrent des réactifs oxygénés, de l'oxyde nitrique (Nitric Oxid ou NO), des protéases, et des molécules proinflammatoires (cytokines, prostaglandines...).
Ainsi, l'activation de la microglie a été mise en évidence au niveau des plaques amyloïdes dans la MA, dans la substance noire de cerveaux de patients atteints de MP, et au niveau des plaques de démyélinisation dans la SEP. Les molécules proinflammatoires sécrétées par la glie activée, ou par les neurones en conditions pathologiques sont associées au développement et à la progression des maladies neurodégénératives. Les cytokines comme l'interleukine-1a (IL-1a), l'interleukine-6 (IL-6) et le tumor necrosis factor [alpha] (TNF-a) sont exprimées dans les plaques amyloïdes et les plaques séniles, ainsi que dans les cerveaux de patients atteints de la MP (Huell et al., 1995 ; Griffin et al., 1998 ; Boka et al., 1994 ; Mogi et al, 1994). Des niveaux élevés de molécules proinflammatoires ont également été mis en évidence lors de phases actives de la SEP (Hohlfeld, 1997) et l'expression de la cyclooxygénase 2 (COX-2) a été corrélée avec les dépôts amyloïdes suggérant un rôle des prostaglandines dans la MA (Ho et al., 1999).
Le stress oxydatif semble jouer également un rôle important dans l'apoptose neuronale observée en conditions pathologiques. Ainsi, des niveaux augmentés de lipoperoxydation et de l'activité Superoxyde Dismutase (SOD) ont été observés au niveau de la substance noire, lors des phases tardives de la MP (Dexter et al., 1989 ; Saggu et al.1989). L'importance du stress oxydatif et des réactions inflammatoires est également illustrée par la mise en évidence d'une
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augmentation du facteur de transcription NFkB dans les neurones dopaminergiques des patients MP (Hunot et al., 1997).
Même si les recherches se sont longtemps focalisées sur les cytokines et les réponses cellulaires gliales, neuronales ou lymphocytaires pour la SEP, des inhibiteurs de protéases, de la Nitric Oxid Synthase (NOS) inductible, de la COX- 2, et des antagonistes des leucotriènes ont également été proposés comme outils thérapeutiques, illustrant l'étendue de la réponse inflammatoire dans les pathologies neurodégénératives.
L'ensemble de ces observations a conduit à étudier l'efficacité d'antiinflammatoires dans des modèles in vitro, et chez l'homme dans la prévention ou le traitement de pathologies neurodégénératives.
Les anti-inflammatoires non stéroïdiens (AINS) comme l'ibuprofène, l'aspirine et l'acétaminophène protègent les neurones dopaminergiques et les neurones de l'hippocampe contre la toxicité du glutamate et du peptide ss-amyloïde (Casper et al., 2000 ; Bisaglia et al., 2002). L'acétaminophène est également capable de diminuer la libération de cytokines et de prostaglandines par les astrocytes préalablement stimulés par le peptide ss-amyloïde (Landolfi et al., 1998). Enfin, un traitement à l'ibuprofène réduit à la fois l'activation microgliale et les dépôts amyloïdes dans un modèle de souris transgénique (Lim et al., 2000).
Des études chez l'homme ont également mis en évidence un rôle neuroprotecteur des AINS. Ainsi le risque de développer une MA est considérablement réduit chez des patients traités par des AINS pendant de longues périodes (McGeer et al. 1996 ; Stewart et al., 1997). Les AINS sont aussi capables de réduire la perte des capacités cognitives et d'atténuer la progression de la maladie chez des patients atteints d'Alzheimer (Rogers et al., 1993; Rich et al., 1995). La cible principale de l'action des AINS dans le cerveau, bien qu'encore inconnue, semble être la microglie. En effet, le nombre de cellules microgliales associées aux plaques chez des patients âgés diminue de 65% suite à un traitement par les AINS (McKenzie & Munoz, 1998). L'effet des AINS s'avère donc positif dans le traitement et la prévention de pathologies
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neurodégénératives, mais le problème majeur réside dans les effets secondaires sérieux apparaissant lors d'une utilisation chronique.
Les cibles principales des AINS sont les cyclooxygénases (la COX-1 et la COX-2 récemment découverte). Ces enzymes convertissent l'acide arachidonique en métabolites proinflammatoires comme les prostaglandines.
Les doses thérapeutiques actives des AINS ont généralement été observées à des doses bien supérieures à celles requises pour leur action sur les COX, ce qui a conduit à penser que d'autres cibles pouvaient être modulées par des molécules telles que l'indométhacine ou l'ibuprofène. Récemment, des auteurs ont montré que les AINS étaient capables de réguler l'expression génique via une interaction directe avec des membres de la famille des récepteurs nucléaires tels les Peroxisome Proliferator-Activated Receptors ou PPARs (Lehmann et al., 1997).
Les PPARs sont des facteurs de transcription qui, une fois activés par leur ligand, se lient sur les promoteurs de gènes cibles au niveau de séquences spécifiques et en régulent la transcription. On distingue 3 isoformes de PPARs (a, ss/# et y). La découverte selon laquelle le leucotriène LTB4, agent chimiotactique puissant, active le récepteur PPARa a constitué la première évidence d'un rôle des PPARs dans l'inflammation (Devchland et al., 1996).
Depuis, il a été montré que les PPARs a et y pouvaient exercer une action antiinflammatoire en inhibant les facteurs AP-1 et NFKB (Delerive et al., 2001). Ainsi, des souris déficientes en PPARa exhibent une réponse exacerbée aux stimuli inflammatoires, renforçant le rôle de ce récepteur dans le contrôle des mécanismes inflammatoires (Devchland et al., 1996). Les agonistes des PPARa sont aussi capables d'inhiber l'expression de cytokines dans des macrophages en culture (Combs et al., 2001) et l'action des fibrates sur l'expression d'IL6 est abolie chez des souris déficientes en PPARa (Delerive et al, 1999). PPARa interviendrait également en inhibant l'activité COX-2 et donc en diminuant la synthèse de prostaglandines inflammatoires (Staels et al., 1998). Un autre intérêt thérapeutique des PPARs dans le traitement de pathologies à
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composante inflammatoire est leur potentiel anti-oxydant. Ainsi, l'activation des PPARa chez la souris âgée diminue la lipoperoxydation tissulaire (Poynter & Daynes, 1998). Ainsi, la capacité d'inhibition de réponses inflammatoires par les PPARs explique en partie l'effet thérapeutique bénéfique des AINS observé dans le traitement de pathologies inflammatoires.
Les facteurs NFKB et AP-1 contrôlent la plupart des gènes précoces impliqués dans les désordres inflammatoires et NFKB est également impliqué dans la réponse oxydative au stress. L'action de ces deux facteurs étant antagonisée par PPARa, il est logique de penser que les agonistes de ce récepteur peuvent réguler l'expression d'un bon nombre de protéines impliquées dans les réactions inflammatoires et le stress oxydatif dans les pathologies neurodégénératives.
L'expression des PPARs a surtout été étudiée au niveau des tissus périphériques. La distribution des ARNm de ces récepteurs a été étudiée dans le système nerveux central de rat, démontrant une expression de PPARa dans tous les types cellulaires du cerveau de rat. Les ARNm du PPARy sont présents dans la plupart des cellules mais à un niveau moindre (Cullingford et al., 1998).
La présence de PPARa dans les oligodendrocytes laisse sous-entendre un rôle de ce récepteur dans la myélinisation, et une implication dans des pathologies démyélinisantes telles la sclérose en plaques (Kainu et al., 1994). L'expression des PPARs a également été étudiée en conditions neuropathologiques. Ainsi, l'expression de PPARy est élevée dans les cerveaux pathologiques, laissant entrevoir un rôle possible dans les pathologies neurodégénératives (Kitamura et al., 1999).
Les agonistes des PPARs possèdent un potentiel anti-inflammatoire et antioxydant, et les PPARs sont exprimés par les cellules du système nerveux central. La structure des agonistes PPAR telle la pioglitazone facilite de plus leur passage au travers de la barrière hémato-encéphalique, permettant une action au niveau du cerveau (Maeshiba et al., 1997). Les molécules
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inflammatoires exprimées dans le cerveau étant néfastes pour les neurones, l'effet d'agonistes des PPARs a donc été étudié dans des modèles de neurodégénération. Ainsi, les agonistes de PPARa sont capables d'inhiber la production de cytokines proinflammatoires de façon dose-dépendante par des monocytes activés par le peptide ssamyloïde (Combs et al., 2001). Les mêmes auteurs ont également démontré que les agonistes de PPARy sont aussi capables d'inhiber la production de molécules inflammatoires et neurotoxiques par des cellules microgliales stimulées par le peptide amyloïde, positionnant ainsi les agonistes des PPARs comme des agents thérapeutiques potentiels dans le traitement de la MA (Combs et al., 2000). Les agonistes de PPARy sont aussi capables de diminuer l'expression de la NOS inductible et la mort neuronale (Heneka et al., 2000) et d'inhiber le développement de l'EAE (encéphalite allergique expérimentale), modèle expérimental de sclérose en plaques (Diab et al., 2002 ; Natajaran & Bright, 2002). Enfin, un agoniste PPARy administré oralement prévient la perte de neurones dopaminergiques au niveau de la substance noire dans un modèle expérimental de maladie de Parkinson (Breidert et al., 2002).
Le PPARa joue donc un rôle dans l'inhibition de molécules inflammatoires (diminution de l'expression des cytokines, diminution de l'expression de COX-2), et dans l'augmentation d'enzymes anti-oxydantes (catalase, superoxyde dismutase), diminuant ainsi à la fois le stress oxydatif et les réactions inflammatoires.
Les composés de l'invention possèdent des propriétés activatrices du récepteur nucléaire PPARa et des propriétés pharmacologiques anti-oxydantes et anti-inflammatoires avantageuses. Les inventeurs ont montré que les composés selon l'invention ont des propriétés avantageuses permettant de prévenir et de traiter la maladie de Parkinson.
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Les composés de l'invention répondent à la formule générale (1) :
Figure img00080001

(I) dans laquelle : # G1 représente un atome d'oxygène ou un groupe N-R, G2 et G3 représentent indépendamment un atome d'oxygène, un atome de soufre ou un groupe N-R4, G1, G2 et G3 ne pouvant représenter de façon simultanée un groupe N-R ou N-R4, # R et R4 représentent indépendamment un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comportant de 1 à 5 atomes de carbone, # R1, R2 et R3, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un groupe CO-R5 ou un groupe de formule CO-
Figure img00080002

(CH2)2"±X-R6, l'un au moins des groupes R1, R2 et R3 étant un groupe de formule CO-(CH2)2±X-R6, # R5 est un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comprenant éventuellement un groupement cyclique, dont la chaîne principale comporte de 1 à 25 atomes de carbone, # R6 est un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comprenant éventuellement un groupe cyclique, dont la chaîne principale comporte de 3 à 23 atomes de carbone, de préférence 10 à 23 atomes de carbone et éventuellement un ou plusieurs hétérogroupes, choisis parmi un atome d'oxygène, un atome de soufre, un atome de sélénium, un groupe SO et un groupe S02,
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# X est un atome de soufre, un atome de sélénium, un groupe SO ou un groupe S02, # n est un nombre entier compris entre 0 et 11.
Dans les composés de formule générale (I) selon l'invention, le ou les groupes R5, identiques ou différents, représentent préférentiellement un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, substitué ou non, dont la chaîne principale comporte de 1 à 20 atomes de carbone, encore plus préférentiellement de 7 à 17 atomes de carbone, encore plus préférentiellement 14 à 17. Dans les composés de formule générale (I) selon l'invention, le ou les groupes R5, identiques ou différents, peuvent aussi représenter un groupe alkyle inférieur comportant de 1 à 6 atomes de carbone, tel que notamment le radical méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, tertiobutyle, pentyle ou hexyle.
Dans les composés de formule générale (I) selon l'invention, le ou les groupes R6, identiques ou différents, représentent préférentiellement un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, substitué ou non, dont la chaîne principale comporte de 3 à 23 atomes de carbone, de préférence 13 à 20 atomes de carbone, encore plus préférentiellement de 14 à 17 atomes de carbone, et encore plus préférentiellement 14 atomes de carbone
Des exemples particuliers de groupes alkyle à chaîne longue saturée pour R5
Figure img00090001

ou R6 sont notamment les groupes C7H15, C,oH21, C11H23, C13H27, C14H29C15H31, C16H33, C17H35. Des exemples particuliers de groupes alkyle à chaîne longue insaturée pour R5 ou R6 sont notamment les groupes C14H27, C14H25, C15H29,
Figure img00090002

C17H29, C17H31, C17H33, C19H29, C19H31, C2lH31, C21 H35, C2lH37, C2lH39, C23H45 OU les chaînes alkyle des acides eicosapentaènoïque (EPA) C20 5(5, 8, 11, 14, 17) et docosahexaènoïque (DHA) C22:6(4, 7,10, 13,16, 19).
Des exemples de groupes alkyle à chaîne longue ramifiée sont notamment les groupes (CH2)n,-CH(CH3)C2H5, (CH=C(CH3)-(CH2)2)n"-CH=C(CH3)2 ou (CH2)2x+1-
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Figure img00100001

C(CH3)2-(CH2)-CH3 (x étant un nombre entier égal à ou compris entre 1 et 11, n' étant un nombre entier égal à ou compris entre 1 et 22, n" étant un nombre entier égal à ou compris entre 1 et 5, n'" étant un nombre entier égal à ou compris entre 0 et 22, et (2x+n"') étant inférieur ou égal à 22).
Comme indiqué ci-avant, les groupes alkyle R5 ou R6 peuvent éventuellement comprendre un groupe cyclique. Des exemples de groupes cycliques sont notamment le cyclopropyle, le cyclobutyle, le cyclopentyle et le cyclohexyle.
Comme indiqué ci-avant, les groupes alkyle R5 ou R6 peuvent être éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants, identiques ou différents. Les substituants sont choisis de préférence parmi un atome d'halogène (iode, chlore, fluor, brome) et un groupe-OH, =0, -N02, -NH2, -CN, -CH2~OH, -0-CH3, -CH20CH3, -CF3 et-COOZ (Z étant un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle, de préférence comportant de 1 à 5 atomes de carbone).
Cette invention concerne également les isomères optiques et géométriques de ces composés, leurs racémates, leurs sels, leurs hydrates et leurs mélanges.
Dans le cas où G2 et G3 représentent un groupe N-R4, les groupes R4 peuvent être identiques ou différents.
Des composés préférés au sens de l'invention sont des composés de formule générale (I) dans lesquels (i) G1 représente un groupe N-R et (ii) les groupes G2R2 et G3R3 ne sont pas simultanément des groupes hydroxyles.
Les composés de formule (IA) sont les composés de formule (I) selon l'invention dans laquelle G1 et G3 représentent des atomes d'oxygène.
Les composés de formule (IB) sont les composés de formule (1) selon l'invention dans laquelle G1 représente un groupe N-R tel que défini ci-avant.
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Les composés de formule (IAa et IBa) sont respectivement les composés de formule (I) selon l'invention dans laquelle un seul des groupes R1, R2 ou R3 représente un atome d'hydrogène.
Les composés de formule (IAb et IBb) sont respectivement les composés de formule (I) selon l'invention dans laquelle deux des groupes R1, R2 ou R3 représentent un atome d'hydrogène.
La présente invention inclut également les prodrogues des composés de formule (1), qui, après administration chez un sujet, vont se transformer en composés de formule (1) et/ou les métabolites des composés selon l'invention (I) qui présentent des activités thérapeutiques comparables aux composés de formule (1).
Figure img00110001
Par ailleurs, dans le groupe CO-(CH2)2n±X-R6, X représente tout préférentiellement un atome de soufre ou de sélénium et avantageusement un atome de soufre.
Figure img00110002

Par ailleurs, dans le groupe CO-(CH2)2±X-R6, n est de préférence compris entre 0 et 3, plus spécifiquement compris entre 0 et 2 et est en particulier égal à 0.
Dans les composés de formule générale (1), R6 peut comporter un ou plusieurs hétérogroupes, de préférence 0,1 ou 2, plus préférentiellement 0 ou 1, choisis parmi un atome d'oxygène, un atome de soufre, un atome de sélénium, un groupe SO et un groupe S02.
Figure img00110003
Un exemple spécifique de groupe CO-(CH2)2n+i-X-R6 selon l'invention est le groupe CO-CH2-S-C14H29.
Des composés préférés au sens de l'invention sont donc des composés de formule générale (I) ci-dessus dans laquelle au moins un des groupes R1, R2 et
Figure img00110004

R3 représente un groupe CO-(CH2)2n+i-X-R6 dans lequel X représente un atome
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de soufre ou de sélénium et de préférence un atome de soufre et/ou R6 est un groupe alkyle saturé et linéaire comprenant de préférence de 13 à 20 atomes de carbone, de préférence de 14 à 17, plus préférentiellement de 14 à 16, et encore plus préférentiellement 14 atomes de carbone.
D'autres composés particuliers selon l'invention sont ceux dans lesquels au
Figure img00120001

moins deux des groupes R1, R2 et R3 sont des groupes CO-(CH2)2±X-R6, identiques ou différents, dans lesquels X représente un atome de soufre ou de sélénium et de préférence un atome de soufre.
D'autres composés particuliers selon l'invention sont des composés de formule (IA) dans laquelle le groupe G2 représente avantageusement un atome d'oxygène ou un groupe N-R4, de préférence un atome d'oxygène. Dans ces
Figure img00120002

composés, R2 représente avantageusement un groupe CO-(CH2)2n±X-R6 tel que défini ci-avant. D'autre part, lorsque G2 est un groupe N-R4, R4 représente préférentiellement un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle.
D'autres composés particuliers selon l'invention sont des composés de formule (IB) dans laquelle G2 représente un atome d'oxygène ou de soufre, et de préférence un atome d'oxygène. Dans ces composés, R2 représente
Figure img00120003

avantageusement un groupe de formule CO-(CH2)2n+i-X-R6 tel que défini ci- avant.
Des composés particulièrement préférés sont les composés de formule générale (IA) ci-dessus dans laquelle : # G2 est un atome d'oxygène, et/ou # R2 représente un groupe CO-(CH2)2n+i-X-R6 tel que défini ci avant.
Des composés particulièrement préférés sont les composés de formule générale (IB) ci-dessus dans laquelle : # G3 est un groupe N-R4 dans lequel R4 est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, et G2 est un atome d'oxygène, et/ou
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# R2 représente un groupe CO-(CH2)2n+i-X-R6 tel que défini ci-avant.
D'autres composés préférés sont les composés de formule générale (I) cidessus dans laquelle R1, R2 et R3, identiques ou différents, de préférence
Figure img00130001

identiques, représentent (i) un groupe CO-(CH2)2"±X-R6 tel que défini ci-avant, dans lesquels X représente un atome de soufre ou de sélénium et de préférence un atome de soufre et/ou R6 est un groupe alkyle saturé et linéaire comprenant de 13 à 17 atomes de carbone, de préférence de 14 à 16 atomes de carbone, encore plus préférentiellement 14 atomes de carbone, dans lesquels n est de préférence compris entre 0 et 3, et en particulier égal à 0. De manière plus spécifique, d'autres composés préférés sont les composés de formule générale (I) dans laquelle R1, R2 et R3 représentent des groupes CO-CH2-S-C14H29.
Des exemples de composés préférés selon l'invention sont représentés sur les Figures 1 A, 1 B et 1 C.
Ainsi, la présente invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation de composés de formule (I) choisis parmi : - 1-tétradécylthioacétylglycérol ; - 2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1,2,3-tritétradécylthioacétylglycérol ; - 1,2,3-tri-(4-dodécylthio)butanoylglycérol ; - 1,2,3-tri-(6-décylthio)hexanoylglycérol ; - 1,2,3-tritétradécylsulfoxyacétylglycérol ; - 1,2,3-tri-(tétradécylsulfonyl)acétylglycérol ; - 1,2,3-tri-tétradécylsélénoacétylglycérol ;
Figure img00130002

- 1,3-dipalmitoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1,3-dilinoléyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1,3-distérayl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1,3-oléyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1,3-ditétradécanoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1-palmitoyl-2,3-ditétradécylthioacétylglycérol ;
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- 1-oléyl-3-palmitoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1,3-dipalmitoyl-2-docosylthioacétylglycérol ; - 2-tétradécylthioacétamidopropane-1,3-diol ; - 2-tétradécylthioacétamido-1 ,3-ditétradécylthioacétyloxypropane ; - 1,3-ditétradécylthioacétyl-2-palmitoylglycérol ; - 1,3-diacétyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1,3-dioctanoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1,3-diundécanoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ;
Figure img00140001

- 1 ,3-d itétrad écylth ioacétoxy-2 -( tétrad écylth iométhyl )carbonylthiopro pane.
- 3-{tétradécylthioacétylamino)propane-1,2-diol - 1-tétradécylthioacétylamino-2,3-(dipalmitoyloxy)propane ; - 3-tétradécylthioacétylamino-1,2-(ditétradécylthioacétyloxy)propane ; - 3-palmitoylamino-1 ,2-(ditétradécylthioacétyloxy)propane ; - 1,3-di(tétradécylthioacétylamino)propan-2-ol ; - 1,3-diamino-2-(tétradécylthioacétyloxy) propane ; - 1,3-ditétradécylthioacétylamino-2-(tétradécylthioacétyloxy)propane ; - 1,3-dioléoylamino-2-(tétradécylthioacétyloxy)propane ; - 1,3-ditétradécylthioacétylamino-2-(tétradécylthioacétylthio)propane ; et - 1-tétradécylthioacétylamino-2,3-di(tétradécylthioacétylthio)propane.
La présente invention concerne aussi l'utilisation d'un composé de formule (I) pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à traiter une pathologie neurogégénérative, telle que notamment la maladie de Parkinson ou la maladie d'Alzheimer.
Elle a également pour objet une composition pharmaceutique comprenant, dans un support acceptable sur le plan pharmaceutique, un composé de formule générale (1) tel que décrit ci-dessus, éventuellement en association avec un autre actif thérapeutique.
La présente invention concerne plus spécifiquement une composition pharmaceutique comprenant, dans un support acceptable sur le plan pharmaceutique, au moins un composé de formule (I) tel que décrit ci-dessus
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destinée au traitement ou à la prophylaxie des pathologies neurodégénératives et plus particulièrement de la maladie de Parkinson, de la maladie d'Alzheimer, ou de la sclérose en plaques. Il a en effet été trouvé de manière surprenante que les composés de formule (I) possèdent à la fois des propriétés d'activateurs PPAR, d'antioxydants et d'anti-inflammatoires et possèdent une activité neuroprotectrice prophylactique et curative.
L'invention concerne également l'utilisation d'un composé tel que défini ciavant pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à la mise en #uvre d'une méthode de traitement ou de prophylaxie de pathologies neurogénératives chez l'Homme ou chez l'animal, et plus particulièrement de la maladie de Parkinson, de la maladie d'Alzheimer ou de la sclérose en plaques
L'invention concerne également une méthode de traitement des pathologies neurodégénératives et plus particulièrement de la maladie de Parkinson, de la maladie d'Alzheimer ou de la sclérose en plaques, comprenant l'administration à un sujet, notamment animal ou en particulier humain, d'une dose efficace d'un composé de formule (1) ou d'une composition pharmaceutique tels que définis ciavant.
Avantageusement, les composés de formule (I) utilisés sont tels que définis cidessus.
Les compositions pharmaceutiques selon l'invention comprennent avantageusement un ou plusieurs excipients ou véhicules, acceptables sur le plan pharmaceutique. On peut citer par exemple des solutions salines, physiologiques, isotoniques, tamponnées, etc., compatibles avec un usage pharmaceutique et connues de l'homme du métier. Les compositions peuvent contenir un ou plusieurs agents ou véhicules choisis parmi les dispersants, solubilisants, stabilisants, surfactants, conservateurs, etc. Des agents ou véhicules utilisables dans des formulations (liquides et/ou injectables et/ou solides) sont notamment la méthylcellulose, l'hydroxyméthylcellulose, la
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carboxyméthylcellulose, le Castor oil polyoxyl hydrogenated (produit de réaction de 45 moles d'éthylène glycol avec 1 mole d'hydrogenated castor oil, qui est vendu et commercialisé par BASF sous la marque Crémophor RH40 ), le polyoxyl 35 Castor oil (produit de réaction de 35 moles d'éthylène glycol avec 1 mole de castor oil, qui est vendu et commercialisé par BASF sous la marque Cremophor# EL), le polyéthylène glycol 660 12-hydroxystéarate (vendu et commercialisé par BASF sous la marque Solutol HS15 ), le polysorbate 60 (vendu et commercialisé par Croda sous la marque Crillet 3, le polysorbate 80 (vendu et commercialisé notamment par Croda sous la marque Crillet 4), le mannitol, la gélatine, le lactose, des huiles végétales, l'acacia, etc. Les compositions peuvent être formulées sous forme de suspension injectable, de gels, huiles, comprimés, suppositoires, poudres, gélules, capsules, etc., éventuellement au moyen de formes galéniques ou de dispositifs assurant une libération prolongée et/ou retardée. Pour ce type de formulation, on utilise avantageusement un agent tel que la cellulose, des carbonates ou des amidons.
A ce titre, la présente concerne également une composition pharmaceutique comprenant, dans un support pharmaceutiquement acceptable, au moins un composé de formule (1) tel que défini ci-dessus en association avec au moins un composé choisi parmi : le Castor oil polyoxyl hydrogenated, le polyoxyl 35 Castor oil, le polyéthylène glycol 660 12-hydroxystéarate et le polysorbate 60.
Les composés ou compositions selon l'invention peuvent être administrés de différentes manières et sous différentes formes. Ainsi, ils peuvent être par exemple administrés de manière systémique, par voie orale, parentérale, par inhalation ou par injection, comme par exemple par voie intraveineuse, intramusculaire, sous-cutanée, trans-dermique, intra-artérielle, etc. Pour les injections, les composés sont généralement conditionnés sous forme de suspensions liquides, qui peuvent être injectées au moyen de seringues ou de perfusions, par exemple. A cet égard, les composés sont généralement dissous dans des solutions salines, physiologiques, isotoniques, tamponnées, etc., compatibles avec un usage pharmaceutique et connues de l'homme du métier.
Ainsi, les compositions peuvent contenir un ou plusieurs agents ou véhicules
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choisis parmi les dispersants, solubilisants, émulsifiants, stabilisants, surfactants, conservateurs, tampons, etc. Des agents ou véhicules utilisables dans des formulations liquides et/ou injectables sont notamment la méthylcellulose, l'hydroxyméthylcellulose, la carboxyméthylcellulose, le Crémophor RH40, le Cremophor EL, le Solutol HS15, le Crillet 3, le Crillet 4, le polysorbate 60, le polysorbate 80, le mannitol, la gélatine, le lactose, des huiles végétales, l'acacia, les liposomes, etc.
Les composés peuvent ainsi être administrés sous forme de gels, huiles, comprimés, suppositoires, poudres, gélules, capsules, aérosols, etc., éventuellement au moyen de formes galéniques ou de dispositifs assurant une libération prolongée et/ou retardée. Pour ce type de formulation, on utilise avantageusement un agent tel que la cellulose, des carbonates ou des amidons.
Les composés peuvent être administrés oralement auquel cas les agents ou véhicules utilisés sont choisis préférentiellement parmi l'eau, la gélatine, les gommes, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le talc, une huile, le polyalkylène glycol, etc.
Pour une administration parentérale, les composés sont préférentiellement administrés sous la forme de solutions, suspensions ou émulsions avec notamment de l'eau, de l'huile ou des polyalkylène glycols auxquels il est possible d'ajouter, outre des agents conservateurs, stabilisants, émulsifiant, etc., des sels permettant d'ajuster la pression osmotique, des tampons, etc.
Il est entendu que le débit et/ou la dose injectée peuvent être adaptés par l'homme du métier en fonction du patient, de la pathologie concernée, du mode d'administration, etc. Typiquement, les composés sont administrés à des doses pouvant varier entre 1 g et 2 g par administration, préférentiellement de 0,1 mg à 1 g par administration. Les administrations peuvent être quotidiennes ou répétées plusieurs fois par jour, le cas échéant. D'autre part, les compositions
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selon l'invention peuvent comprendre, en outre, d'autres agents ou principes actifs.
Les composés de l'invention peuvent être préparés à partir de produits du commerce, en mettant en oeuvre une combinaison de réactions chimiques connues de l'homme du métier.
Selon un premier procédé de l'invention, les composés de formule (IA) dans lesquels G2 est un atome d'oxygène ou de soufre, R1, R2 et R3 identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou un groupe CO-(CH2)2n+i-X-R6, sont obtenus à partir d'un composé de formule (IA) dans laquelle G2 est respectivement un atome d'oxygène ou de soufre, R2 est un atome d'hydrogène et R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-
Figure img00180001

(CH2}2n±X-R6, et d'un composé de formule A -CO-A dans laquelle A est un groupe réactif choisi par exemple parmi OH, CI, O-CO-A et OR", R" étant un
Figure img00180002

groupe alkyle, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2±X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
Les composés de formule (IA) selon l'invention dans laquelle G2 est un atome d'oxygène, R2 est un atome d'hydrogène et R1 et R3, identiques ou différents,
Figure img00180003

représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n±X-R6, peuvent être obtenus de différentes façons.
Selon un premier mode, on fait réagir une molécule de glycérol avec un composé de formule A -CO-A1 dans laquelle A1 est un groupe réactif choisi par exemple parmi OH, CI et OR", R" étant un groupe alkyle, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier. Cette réaction permet la synthèse de composés dits symétriques, dans lesquels R1 et R3 ont la même signification. Cette réaction peut être mise en #uvre en adaptant les protocoles décrits par
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exemple dans (Feuge, Gros et al. 1953), (Gangadhar, Subbarao et al. 1989), (Han, Cho et al. 1999) ou (Robinson 1960).
Les composés de formule (IA) selon l'invention dans laquelle G2 est un atome d'oxygène, R2 est un atome d'hydrogène et R1 et R3, identiques ou différents,
Figure img00190001

représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n±X-R6, peuvent également être obtenus à partir d'un composé de formule (IA) selon l'invention dans laquelle G2 est un atome d'oxygène, R2 et R3 représentent un atome d'hydrogène et R1 est
Figure img00190002

un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n±X-R6 (cette forme particulière de composés de formule (IA) étant nommée composés (IV)), et d'un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et
Figure img00190003

CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2±X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier. Cette réaction est avantageusement réalisée selon le protocole décrit par exemple dans (Daubert, Spiegl et al. 1943), (Feuge and Lovegren 1956), (Katoch, Trivedi et al. 1999) ou (Strawn, Martell et al. 1989).
Les composés (IV) décrits ci-dessus peuvent être préparés par un procédé comprenant (schéma 1 ) : a) réaction d'un composé de formule générale (II) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-
R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (III) dans laquelle R1 représente un groupe CO-R5 ou CO-
Figure img00190004

(Cf"12)Zn±X-R6 ; b) déprotection du composé (III) par un acide (acide acétique, acide trifluoroacétique, acide borique, acide sulfurique, etc. ) pour donner un composé de formule générale (IV) tel que défini ci-avant.
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Figure img00200001

a : estérification; b : déprotection schéma 1
Selon un autre procédé particulier de l'invention les composés de formule (IA) dans laquelle G2 est un atome d'oxygène, R3 est un atome d'hydrogène et R1 et R2, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou
Figure img00200002

CO-(CH2)2±X-R6, peuvent être obtenus à partir d'un composé de formule (IA) selon l'invention dans laquelle G2 est un atome d'oxygène, R2 et R3 représentent un atome d'hydrogène et R1 est un groupe CO-R5 ou
Figure img00200003

CO-(CH2)2n±X-R6 (composés IV), selon les étapes suivantes : a) réaction du composé (IV) avec un composé PxE dans lequel Px est un groupement protecteur et E est un groupe réactif choisi par exemple parmi
OH ou un halogène, pour donner un composé de formule générale (V)
Figure img00200004

dans laquelle R1 est un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n±X-R6. La réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant le protocole décrit par (Gaffney and Reese 1997) dans lequel PxE peut représenter le composé 9-phénylxanthène-9-ol ou le 9-chloro-9-phénylxanthène ; b) réaction du composé de formule (V) avec un composé de formule
A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre
OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (VI), dans laquelle R1 et R2, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5
Figure img00200005

ou CO-(CH2)2n±X-R6 et Px est un groupement protecteur ;
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c) déprotection du composé (VI), dans des conditions classiques connues de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (IA) dans laquelle G2 est un atome d'oxygène, R3 est un atome d'hydrogène et R1 et R2, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou
Figure img00210001

CO-(CH2)2n+i-X-R6.
Figure img00210002

a : protection ; b : estérification ; c : déprotection schéma 2
Selon un autre procédé particulier de l'invention, les composés de formule générale (IA) dans laquelle G2 est un atome d'oxygène, R1 et R3 représentent un atome d'hydrogène et R2 représente un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6, sont obtenus par un procédé comprenant (schéma 3) : a) la réaction d'un composé de formule (VII) avec un composé de formule
A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre
OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (VIII) dans laquelle R2 représente un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 ; b) déprotection du composé de formule (VIII) en milieu acide ou par hydrogénation catalytique pour donner un composé de formule générale (IA) dans laquelle G2 est un atome d'oxygène, R1 et R3 représentent un atome d'hydrogène et R2 représente un groupe CO-R5 ou
CO- (CH2)2n+1-X-R6.
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Figure img00220001

a : estérification ; b : déprotection schéma 3
Les étapes ci-dessus peuvent être réalisées avantageusement selon les protocoles décrits par (Bodai, Novak et al. 1999), (Paris, Garmaise et al. 1980), (Scriba 1993) ou (Seltzman, Fleming et al. 2000).
Les composés de formule (IA) selon l'invention dans laquelle G2 est un atome de soufre, R2 est un atome d'hydrogène et, R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6, peuvent être obtenus à partir du composé de formule (IX) par le procédé suivant :
Figure img00220002

a) réaction du composé (IX) et d'un premier composé de formule A -CO-A3 dans laquelle A3 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH,
Figure img00220003

O-CO-A et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2"±X-R6, puis d'un second composé de formule A -CO-A3 dans laquelle, indépendamment du premier composé, A3 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH, O-CO-A et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe
Figure img00220004

(CH2)2"±X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier ;
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b) déprotection du groupement thiol par l'acétate mercurique.
Ce procédé est avantageusement réalisé selon le protocole décrit dans (Aveta, Brandt et al. 1986).
Les composés de formule (IA) selon l'invention dans laquelle G2 est un atome de soufre, R2 et R3 sont des atomes d'hydrogène et, R1 représente un groupe
Figure img00230001

CO-R5 ou CO-(CH2)2n+rX-R6, peuvent être obtenus à partir du composé de formule (IX) par le procédé suivant : a) réaction du composé (IX) et d'un premier composé de formule A -CO-A3 dans laquelle A3 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH,
Figure img00230002

O-CO-A et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6 en quantité stoechiométrique, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier ; b) déprotection du groupement thiol par l'acétate mercurique.
Le composé de formule (IX) peut être préparé par un procédé comprenant : a) réaction d'un 2-halogénomalonate de diméthyle avec le tritylthiol pour donner le composé de formule (X) ;
Figure img00230003

(X) b) réduction des fonctions acétate par un agent réducteur connu de l'homme de métier.
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Les composés de formule (IA) selon l'invention dans laquelle G2 est un atome de soufre, et R1, R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe COR5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6, peuvent également être obtenus par le procédé suivant (schéma 4) : a) réaction d'un composé de formule (V) avec un composé de formule LG-E dans laquelle E représente un halogène et LG un groupe réactif choisi par exemple parmi mésyle, tosyle, etc., pour donner un composé de formule générale (XI) dans laquelle Px représente un groupement protecteur ; b) réaction d'un composé de formule (XI) avec un composé de formule Ac-S-
B+ dans laquelle Ac représente un groupe acyle court, préférentiellement le groupe acétyle, et B est un contre-ion choisi par exemple parmi le sodium ou le potassium, préférentiellement le potassium pour donner le composé de formule générale (XII). Cette réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant le protocole décrit par (Gronowitz, Herslôf et al. 1978) ; c) déprotection de l'atome de soufre d'un composé (XII) dans des conditions connues de l'homme de métier, pour donner un composé de formule générale (XIII) ; d) réaction d'un composé de formule générale (XIII) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe
Figure img00240001

(CH2)2"±X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule générale (XIV) dans laquelle R1 et R2, identiques ou différents,
Figure img00240002

représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n±X-R6 ;
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e) déprotection d'un composé de formule (XIV) dans des conditions classiques connues de l'homme de métier, pour obtenir un composé de formule (IA) selon l'invention dans laquelle (i) G2 est un atome de soufre, (ii) R3 est un atome d'hydrogène et (iii) R1 et R2, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 ; f) réaction d'un composé de formule (IA) selon l'invention dans laquelle (i)
G2 est un atome de soufre, (ii) R3 est un atome d'hydrogène et (iii) R1 et
R2 représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6, identiques ou différents, avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5
Figure img00250001

ou le groupe (CH2)2"±X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
Figure img00250002

a 'activation ; b : substitution ; c : déprotection sélective ; d : acylation ; e déprotection ; f : acylation schéma 4
Selon un autre mode, les composés de formule (IA) selon l'invention dans laquelle G2 est un atome de soufre, et R1, R2 et R3, identiques ou différents,
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Figure img00260001

représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2"±X-R6, peuvent également être obtenus par le procédé suivant : a) réaction d'un composé de formule générale (IA) selon l'invention dans laquelle (i) G2 est un atome d'oxygène (ii) R2 représente un atome d'hydrogène et (iii) R1 et R3, identiques ou différents, représentent un
Figure img00260002

groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2"±X-R6 tels que définis ci-avant, avec de l'iode en présence d'agents activateurs connus de l'homme de métier pour donner un composé de formule (XV) dans laquelle R1 et R3, identiques
Figure img00260003

ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2±X-R6 ;
Figure img00260004

b) réaction d'un composé de formule (XV) avec un acide thiocarboxylique en présence d'agents de couplage ou d'agents activateurs connus de l'homme de métier.
Les composés de formule (IA) dans lesquels G2 est un groupe N-R4 et dans laquelle R1, R2 et R3 identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou
Figure img00260005

un groupe CO-(CH2)2"±X-R6, sont obtenus à partir d'un composé de formule (IA) dans laquelle G2 est un groupe N-R4, R1 et R3 sont des atomes
Figure img00260006

d'hydrogène, R2 un groupe CO-R5 ou un groupe CO-(CH2)2"±X-R6 (composé (XVI)) selon le procédé suivant : réaction d'un composé (XVI) et d'un premier composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par
Figure img00260007

exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n±X-R6, puis d'un second composé de formule A -CO-A2 dans laquelle, indépendamment du premier composé, A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et
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Figure img00270001

A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2±X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
Ce procédé est avantageusement réalisé selon le protocole décrit dans (Terradas 1993).
Les composés de formule (IA) selon l'invention dans laquelle G2 est un groupe N-R4 et dans laquelle R1 et R2 représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6, et R3 est un atome d'hydrogène peuvent être obtenus par réaction d'un composé (XVI) et d'un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6 en quantité st#chiométrique, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
Les composés de formule (IA) selon l'invention dans lesquels G2 est un groupe NH, R1 et R3 sont des atomes d'hydrogène, R2 un groupe CO-R5 ou un
Figure img00270002

groupe CO-(CH2)2±X-R6 (composé XVIa) peuvent être obtenus de différentes façons.
Selon un premier procédé, on fait réagir une molécule de 2-aminopropane- 1,3-diol avec un composé de formule A -CO-A dans laquelle A est un groupe réactif choisi par exemple entre OH, O-CO-A , OR" et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6 en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
Cette réaction peut être mise en #uvre en adaptant les protocoles décrits par exemple dans (Shaban 1977), (Kurfürst, Roig et al. 1993), (Harada, Morie et al.
1996), (Khanolkar, Abadji et al. 1996), (Daniher and Bashkin 1998) ou (Putnam and Bashkin 2000).
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Les composés de formule (IA) selon l'invention dans lesquels G2 est un groupe NH, R1 et R3 sont des atomes d'hydrogène, R2 un groupe CO-R5 ou un
Figure img00280001

groupe CO-(CH2)2n±X-R6 (composé XVIa) peuvent également être obtenus selon le procédé suivant (schéma 5) : a) réaction du composé de formule (XVII) avec un composé de formule
A -CO-A dans laquelle A est un groupe réactif choisi par exemple entre
OH, O-CO-A , OR" et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-
R6 en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (XVIII) ; b) déprotection du composé XVIII.
Figure img00280002

a : amidification ; b : déprotecbon schéma 5
Ce procédé peut avantageusement être mis en #uvre selon le protocole décrit dans (Harada, Morie et al. 1996).
Les composés de formule (IA) selon l'invention dans lesquels G2 est un groupe N-R4 dans lequel R4 n'est pas un atome d'hydrogène, R1 et R3 sont des atomes d'hydrogène, R2 un groupe CO-R5 ou un groupe CO-(CH2)2n+i-X-R6 (composé XVIb) peuvent être obtenus selon le procédé suivant (schéma 6) : a) réaction d'un composé de formule (XVII) avec un composé de formule
A -CO-A dans laquelle A est un groupe réactif choisi par exemple entre
OH, O-CO-A , OR" et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6 en présence éventuellement d'agents de couplage ou
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d'activateurs connus de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (XVIII) ; b) réaction du composé (XVIII) soit avec un composé de type R4-A4 dans lequel A4 est un groupe réactif choisi par exemple entre CI ou Br, en milieu basique, soit avec un groupe R4CHO dans lequel CHO est la fonction aldéhyde en présence d'agents réducteurs connus de l'homme de métier, pour obtenir un composé (XIX) ; c) déprotection du composé (XIX).
Figure img00290001
Figure img00290002

a : acidification ; b : alkylabon ; c : déprotection schéma 6
Selon un autre procédé de l'invention, les composés de formule (IB) dans lesquels (i) G2 et G3 sont des atomes d'oxygène, de soufre ou un groupe N-R4, (ii) R et, le cas échéant R4, représentent de façon identique, un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comportant de 1 à 5 atomes de carbones et (iii) R1, R2 et R3, identiques ou différents, représentent
Figure img00290003

un groupe CO-R5 ou un groupe CO-(CH2)2"±X-R6, sont obtenus à partir d'un composé de formule (IB) dans laquelle (i) G2 ou G3 sont des atomes d'oxygène, de soufre ou un groupe NH, (ii) R est un atome d'hydrogène et (iii) R1, R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6, et d'un composé de formule A1-LG dans laquelle A1 représente le groupe R ou, le cas échéant, R4 et LG un groupe réactif choisi par exemple parmi CI, Br, mésyl, tosyl, etc., en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
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Selon un premier mode, les composés de formule (IB) dans lesquels (i) G2 et G3 sont des atomes d'oxygène, de soufre ou un groupe NH, (ii) R est un atome d'hydrogène et (iii) R1, R2 et R3, identiques, représentent un groupe CO-
Figure img00300001

(CH2)2±X-R6, sont obtenus à partir d'un composé de formule (IB) dans laquelle (i) G2 ou G3 sont des atomes d'oxygène, de soufre ou un groupe NH, (ii) R est un atome d'hydrogène et (iii) R1, R2 et R3 sont des atomes d'hydrogène et d'un composé de formule A -CO-A dans laquelle A est un groupe réactif choisi par exemple parmi OH, CI, O-CO-A et 0-R7, R7 étant un groupe alkyle, et A est le
Figure img00300002

groupe (CH2)2±X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
Les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes d'oxygène ou un groupe NH, (ii) R est un atome d'hydrogène et (iii) R1, R2 et R3 sont des atomes d'hydrogène ou représentent un groupe CO-R5
Figure img00300003

ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 peuvent être obtenus selon différentes méthodes qui permettent la synthèse de composés dans lesquels les groupes portés par un même hétéroatome (azote ou oxygène) ont même signification.
Selon un premier mode, on fait réagir une molécule de 1-aminoglycérol, de 1,3-diaminoglycérol ou de 1,2-diaminoglycérol (obtenu en adaptant le protocole décrit par (Morris, Atassi et al. 1997) avec un composé de formule A -CO-A1 dans laquelle A1 est un groupe réactif choisi par exemple parmi OH, CI et OR7, R7 étant un groupe alkyle, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6 en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier. Cette réaction permet l'obtention respective de formes particulières de composés de formule (IB), nommées composés (XXa-c), et peut être mise en oeuvre en adaptant des protocoles décrits par (Urakami and Kakeda 1953), (Shealy, Frye et al. 1984), (Marx, Piantadosi et al. 1988), (Rahman, Ziering et al. 1988) et (Nazih, Cordier et al. 1999). Dans les composés (XXb-c),
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les groupements portés par un même hétéroatome, respectivement, (R1 et R3) et (R1 et R2) ont même signification.
Figure img00310001
Les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes d'oxygène ou un groupe NH, (ii) R est un atome d'hydrogène et (iii) R1, R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO- (CH2)2n+i-X-R6, peuvent être obtenus à partir d'un composé de formule (XXa-c) et d'un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier. Cette réaction permet la synthèse de composés dans lesquels les groupements portés par un même hétéroatome (azote ou oxygène), respectivement (R1 et R2), ou (R1 et R3), ou (R2 et R3) ont même signification. Cette réaction est avantageusement réalisée selon le protocole décrit par exemple dans (Urakami and Kakeda 1953) et (Nazih, Cordier et al. 1999).
Selon un autre procédé particulier de l'invention , les composés de formule (IB) dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes d'oxygène ou un groupe NH, (ii) R est un atome d'hydrogène et (iii) R1, R2 et R3, identiques ou différents,
Figure img00310002

représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2±X-R6, peuvent être obtenus selon les étapes suivantes (schéma 7) : a) réaction du 1-aminoglycérol, du 1,3-diaminoglycérol ou du 1,2- diaminoglycérol avec un composé (PG)20 dans lequel PG est un groupement protecteur pour donner un composé de formule générale (XXIa-c). La réaction peut avantageusement être mise en oeuvre en
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adaptant les protocoles décrits par (Nazih, Cordier et al. 2000) et (Kotsovolou, Chiou et al. 2001) dans lesquels (PG)20 représente le dicarbonate de di-tert-butyle ; b) réaction du composé de formule (XXIa-c) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (XXlla-c), dans laquelle R2 et R3 représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 et PG est un groupement protecteur ; c) déprotection du composé (XXlla-c), selon des conditions classiques connues de l'homme de métier, pour donner un composé de formule générale (IB) dans laquelle (i) G2 et G3 représentent un atome d'oxygène ou un groupe NH, (ii) R et R1 sont des atomes d'hydrogène et (iii) R2 et R3 représentent un atome d'hydrogène ou un groupe CO-R5 ou CO-
Figure img00320001

(CH2)2n±X-R6 ; d) réaction d'un composé de formule générale (IB) dans laquelle (i) G2 et G3 représentent un atome d'oxygène ou un groupe NH, (ii) R et R1 sont des atomes d'hydrogène et (iii) R2 et R3 représentent un atome
Figure img00320002

d'hydrogène ou un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2"±X-R6 avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
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Figure img00330001

a. protection ; b. acylation ; c. déprotection ; d.amidification schéma 7
Les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes d'oxygène, (ii) R est un atome d'hydrogène et (iii) R1, R2 et R3,
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Figure img00340001

identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2"±X-R6, peuvent être obtenus de différentes façons.
Selon une première méthode, on fait réagir un composé de formule (IB) selon l'invention, dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes d'oxygène, (ii) R et R2 sont des atomes d'hydrogène et (iii) R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6, avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple
Figure img00340002

entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
Selon ce mode de préparation, les composés de formule (IB) dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes d'oxygène, (ii) R et R2 sont des atomes d'hydrogène et (iii) R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6, peuvent être obtenus à partir d'un composé de formule (XXa) tel que défini ci-avant avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le
Figure img00340003

groupe R5 ou le groupe (CH2)2±X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
Selon un autre procédé particulier de l'invention, les composés de formule (IB) dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes d'oxygène, (ii) R est un atome d'hydrogène et (iii) R1, R2 et R3, identiques ou différents, représentent un
Figure img00340004

groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2"±X-R6, peuvent être obtenus à partir d'un composé de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes d'oxygène, (ii) R, R2 et R3 représentent un atome d'hydrogène et (iii) R1 est un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 (composé de formule (XXa)) selon les étapes suivantes (schéma 8) : a) réaction du composé de formule (XXa) avec un composé PG-E dans lequel PG est un groupement protecteur et E est un groupe réactif
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choisi par exemple parmi OH ou un halogène, pour donner un composé de formule générale (XXIII) dans laquelle R1 est un groupe CO-R5 ou
Figure img00350001

CO-(CH2)2"±X-R6. La réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant les protocoles décrits par (Marx, Piantadosi et al. 1988) et (Gaffney and Reese 1997) dans lesquels PG-E peut représenter le chlorure de triphénylméthyle ou le 9-phénylxanthène-9-ol ou encore le 9-chloro-9-phénylxanthène ; b) réaction du composé de formule (XXIII) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (XXIV), dans laquelle R1 et R2, identiques ou différents,
Figure img00350002

représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 et PG est un groupement protecteur ; c) déprotection du composé (XXIV), dans des conditions connues de l'homme de métier, pour donner un composé de formule générale (IB) dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes d'oxygène, (ii) R et R3 sont des atomes d'hydrogène et (iii) R1 et R2, identiques ou différents,
Figure img00350003

représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2"±X-R6 ; d) réaction d'un composé de formule générale (IB) dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes d'oxygène, (ii) R et R3 sont des atomes d'hydrogène et (iii) R1 et R2, identiques ou différents, représentent un
Figure img00350004

groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
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Figure img00360001

a : protection ; b : estérification ; c : déprotection ; d : estérification schéma 8
Les étapes ci-dessus peuvent être réalisées avantageusement selon les protocoles décrits par (Marx, Piantadosi et al. 1988).
Selon un autre procédé de l'invention, les composés de formule (IB) dans lesquels (i) G2 ou G3 représentent un atome d'oxygène ou un groupe N-R4, (ii) au moins un des groupes G2 ou G3 représente un groupe N-R4, (iii) R et R4 représentent indépendamment des groupes alkyle linéaires ou ramifiés, saturés ou non, éventuellement substitués, comportant de 1 à 5 atomes de carbones et (iv) R1, R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou un
Figure img00360002

groupe CO-(CH2)2±X-R6, sont obtenus par réaction d'un composé de formule (IB) dans laquelle (i) l'un des groupes G2R2 ou G3R3 représente un groupe hydroxyle et l'autre groupe G2R2 ou G3R3 représente respectivement un groupe NR4R2 ou NR4R3 avec R2 ou R3 représentant un groupe CO-R5 ou un groupe
Figure img00360003

CO-(CH2)2±X-R6, (ii) R et R4 représentent indépendamment un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comportant de 1 à 5 atomes de carbones et (iii) R1 représente un groupe CO-R5 ou un groupe CO- (CH2)2n+1-X-R6, avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le
Figure img00360004

groupe (CH2)2"±X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
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Les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) l'un des groupes G2R2 ou G3R3 représente un groupe hydroxyle et l'autre groupe G2R2 ou G3R3 représente respectivement un groupe NR4R2 ou NR4R3 avec R2 ou R3 représentant un groupe CO-R5 ou un groupe CO-(CH2)2n+i-X-R6, (ii) R et R4 représentent indépendamment des groupes alkyle linéaires ou ramifiés, saturés ou non, éventuellement substitués, comportant de 1 à 5 atomes de carbones et
Figure img00370001

(iii) R1 représente un groupe CO-R5 ou un groupe CO-(CH2)2n+i-X-R6 sont obtenus à partir d'un composé de formule (IB) selon l'invention dans laquelle l'un des groupes G2R2 ou G3R3 représente un groupe hydroxyle et l'autre groupe G2R2 ou G3R3 représente respectivement un groupe NR4R2 ou NR4R3 avec
Figure img00370002

R2 ou R3 représentant un groupe CO-R5 ou un groupe CO-(CH2)2"±X-R6, (ii) R et R4 représentent indépendamment un groupe tel que défini ci-avant et (iii) R1 est un atome d'hydrogène avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe
Figure img00370003

R5 ou le groupe (CH2)2±X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
Dans un premier mode (schéma 9), les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 est un atome d'oxygène, (ii) G3 représente un groupe N-R4, (iii) R et R4 représentent indépendamment des groupes alkyle linéaires ou ramifiés différents, saturés ou non, éventuellement substitués, comportant de 1 à 5 atomes de carbones, (iv) R1 et R2 sont des atomes d'hydrogène et (v) R3 représente un groupe CO-R5 ou un groupe CO-(CH2)2n+i-X-R6 sont obtenus de la façon suivante : a) réaction du 1-aminoglycérol avec un composé de formule R-CHO dans laquelle R représente un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comportant de 1 à 5 atomes de carbones et CHO est la fonction aldéhyde en présence d'agents réducteurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule (XXV) dans laquelle R est un groupe tel que défini plus avant.
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Cette réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant les protocoles décrits par (Antoniadou-Vyzas, Foscolos et al. 1986) ; b) réaction d'un composé de formule (XXV) avec un composé (PG)20 dans lequel PG est un groupement protecteur pour donner un composé de formule générale (XXVI). La réaction peut avantageusement être mise en oeuvre en adaptant les protocoles décrits par (Nazih, Cordier et al. 2000) et; (Kotsovolou, Chiou et al.
2001) dans lesquels (PG)20 représente le dicarbonate de di-tertbutyle ; c) réaction d'un composé de formule (XXVI) avec un composé de formule LG-E dans laquelle E représente un halogène et LG un groupe réactif choisi par exemple parmi mésyle, tosyle, etc., pour donner un composé de formule générale (XXVII) en adaptant la procédure décrite par (Kitchin, Bethell et al. 1994) ; d) réaction d'un composé composé de formule (XXVII) avec un composé de formule R4-NH2 dans laquelle R4 représente un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comportant de 1 à 5 atomes de carbones et NH2 représente la fonction amine, selon la méthode décrite par (Ramalingan, Raju et al. 1995), pour obtenir un composé de formule (XXVIII) dans laquelle R et R4, éventuellement différents, sont tels que définis ci-avant ; e) réaction d'un composé de formule (XXVIII) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule (XXIX) dans laquelle R et R4 représentent des groupes alkyle linéaires ou ramifiés différents, saturés ou non, éventuellement substitués, comportant de 1 à 5 atomes de carbones, R3 représente le
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groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6 et PG est un groupement protecteur ; f) déprotection du composé (XXIX) selon des conditions connues de l'homme de métier.
Figure img00390001

a. amination réductnce ; b. protection ; c. activation; d. substitution ; e. amidification ; f. déprotection
Schéma 9
Selon un second mode , les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G3 est un atome d'oxygène, (ii) G2 représente un groupe N-R4, (iii) R et R4 représentent des groupes alkyle linéaires ou ramifiés différents, saturés ou non, éventuellement substitués, comportant de 1 à 5 atomes de carbones, (iv) R1 et R3 sont des atomes d'hydrogène et (v) R2 représente un groupe CO-R5
Figure img00390002

ou un groupe CO-(CH2)2±X-R6 sont obtenus de la façon suivante (schéma 10) :
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a) réaction d'un composé de formule (XXVI) avec un composé PG'-E dans lequel PG' est un groupement protecteur et E est un groupe réactif choisi par exemple parmi OH ou un halogène, pour donner un composé de formule générale (XXX) dans laquelle R représente un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comportant de 1 à 5 atomes de carbones et PG un autre groupement protecteur tel que défini plus avant. La réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant les protocoles décrits par (Marx, Piantadosi et al. 1988) et (Gaffney and Reese 1997) dans lesquels PG'-E peut représenter le chlorure de triphénylméthyle ou le 9-phénylxanthène-9-ol ou encore le 9-chloro-9-phénylxanthène ; b) réaction d'un composé de formule (XXX) tel que défini ci-avant avec un composé de formule LG-E dans laquelle E représente un halogène et LG un groupe réactif choisi par exemple parmi mésyle, tosyle, etc., pour donner un composé de formule générale (XXXI) dans laquelle R représente un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comportant de 1 à 5 atomes de carbones et PG et PG' sont des groupements protecteurs, en adaptant la procédure décrite par (Kitchin, Bethell et al. 1994) ; c) réaction d'un composé de formule (XXXI) tel que défini ci-avant avec un composé de formule R4-NH2 dans laquelle R4 représente un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comportant de 1 à 5 atomes de carbones et NH2 représente la fonction amine, selon la méthode décrite par (Ramalingan, Raju et al. 1995), pour obtenir un composé de formule (XXXII) dans laquelle R et R4 sont indépendamment tels que définis ci-avant ; d) réaction d'un composé de formule (XXXIII) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe
Figure img00400001

(CH2)2±X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou
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d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule (XXXIII) dans laquelle R et R4 représentent indépendamment des groupes alkyle linéaires ou ramifiés, saturés ou non, éventuellement substitués, comportant de 1 à 5 atomes de carbones, R2 représente un
Figure img00410001

groupe CO-R5 ou un groupe CO-(CH2)2±X-R6, PG et PG' sont des groupements protecteurs ; e) déprotection d'un composé de formule (XXXIII) dans des conditions classiques connues de l'homme du métier pour obtenir un composé de formule générale (IB) selon l'invention dans laquelle (i) R et R4 représentent indépendamment des groupes alkyle linéaires ou ramifiés, saturés ou non, éventuellement substitués, comportant de 1 à 5 atomes de carbones, (ii) R1 et R3 sont des atomes d'hydrogène et (iii) R2
Figure img00410002

représente un groupe CO-R5 ou un groupe CO-(CH2)2±X-R6.
Figure img00410003

a. protection ; b. activation ; c. substitution ; d. amidification ; e. déprotecbon
Schéma 10
Les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes de soufre ou un groupe NH, (ii) R est un atome d'hydrogène et (iii) R1, R2 et R3 sont des atomes d'hydrogène ou représentent un groupe CO-R5
Figure img00410004

ou CO-(CH2)2n±X-R6 peuvent être obtenus selon différents procédés.
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Selon un premier mode, les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes de soufre ou un groupe NH, (ii) R est un atome d'hydrogène et (iii) R1, R2 et R3 sont des atomes d'hydrogène ou
Figure img00420001

représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2"±X-R6, R1, R2 et R3 ayant même signification s'ils sont portés par un même hétéroatome (soufre ou azote), peuvent être obtenus de la façon suivante (schéma 11) : a) réaction d'un composé de formule (XXa-c) avec un composé de formule LG-E dans laquelle E représente un halogène et LG un groupe réactif choisi par exemple parmi mésyle, tosyle, etc., pour donner un composé de formule générale (XXXIVa-c) ; b) réaction d'un composé de formule (XXXIVa-c) avec un composé de formule Ac-S-B+ dans laquelle Ac représente un groupe acyle court, préférentiellement le groupe acétyle, et B est un contre-ion choisi par exemple parmi le sodium ou le potassium, préférentiellement le potassium pour donner le composé de formule générale (XXXVa-c). Cette réaction peut avantageusement être mise en oeuvre en adaptant le protocole décrit par (Gronowitz, Herslôf et al. 1978) ; c) déprotection d'un composé de formule (XXXVa-c), dans des conditions classiques connues de l'homme de métier, et par exemple en milieu basique, pour donner un composé de formule générale (IB) dans laquelle (i) G2 et G3 représentent un atome de soufre ou un groupe NH et (ii) R1, R2 et R3, identiques ou différents, représentent un atome
Figure img00420002

d'hydrogène ou un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2±X-R6 ; d) réaction d'un composé de formule générale (IB) dans laquelle (i) G2 et G3 représentent un atome de soufre ou un groupe NH et (ii) R1, R2 et R3, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6, avec un composé de formule
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A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
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Figure img00440001

a. activation ; b. substitution ; c. déprotection ; d. acylation schéma 11
Ce schéma réactionnel permet la synthèse de composés de formule générale (IB) dans laquelle les groupements portés par un même hétéroatome (azote ou
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soufre) respectivement (R2 et R3), (R1 et R3) et (R1 et R2) ont même signification.
Les étapes ci-dessus peuvent être réalisées avantageusement selon les protocoles décrits par (Adams, Doyle et al. 1960) et (Gronowitz, Herslôf et al.
1978).
Selon un autre procédé de l'invention , les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes de soufre ou un groupe NH, (ii) R est un atome d'hydrogène et (iii) R1, R2 et R3 sont des atomes d'hydrogène ou représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6 peuvent être préparés à partir des composés de formule (XXIa-c) par un procédé comprenant (schéma 12) : a) la réaction d'un composé de formule (XXIa-c) avec un composé de formule LG-E dans laquelle E représente un halogène et LG un groupe réactif choisi par exemple parmi mésyle, tosyle, etc., pour donner un composé de formule générale (XXXVIa-c) dans laquelle PG représente un groupement protecteur ; b) la réaction d'un composé de formule (XXXVIa-c) avec un composé de formule Ac-S-B+ dans laquelle Ac représente un groupe acyle court, préférentiellement le groupe acétyle, et B est un contre-ion choisi par exemple parmi le sodium ou le potassium, préférentiellement le potassium pour donner le composé de formule générale (XXXVIla-c). Cette réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant le protocole décrit par (Gronowitz, Herslöf et al. 1978) ; c) La déprotection de l'atome de soufre d'un composé (XXXVIla-c) dans des conditions connues de l'homme de métier, pour donner un composé de formule générale (XXXVIIIa-c) ; d) la réaction d'un composé de formule générale (XXXVIIIa-c) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif
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choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule générale (XXXIXa-c) dans laquelle R2 et R3 représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 ; e) la déprotection d'un composé de formule (XXXIXa-c) dans des conditions classiques connues de l'homme de métier, pour obtenir un composé de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes de soufre ou un groupe NH, (ii) R et R1 sont des atomes d'hydrogène et (iii) R2 et R3 représentent un atome d'hydrogène, un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 ; f) la réaction d'un composé de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 et G3 sont des atomes de soufre ou un groupe NH, (ii) R et
R1 sont des atomes d'hydrogène et (iii) R2 et R3 représentent un atome d'hydrogène, un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6 avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
Ce schéma réactionnel permet la synthèse de composés de formule générale (IB) dans laquelle les groupements portés par un même hétéroatome (azote ou soufre) respectivement (R2 et R3), (R1 et R3) et (R1 et R2) ont même signification.
Les étapes ci-dessus peuvent être réalisées avantageusement selon les protocoles décrits par (Adams, Doyle et al. 1960), (Gronowitz, Herslôf et al.
1978), (Bhatia and Hajdu 1987) et (Murata, Ikoma et al. 1991).
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Figure img00470001

a. activation ; b. substitution ; c. déprotection ; d. acylation ; e. déprotection ; f. amidification schéma 12
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Les composés de formule générale (IB) dans lesquels (i) G2 ou G3 représentent un atome de soufre ou un groupe N-R4, (ii) R et R4 représentent indépendamment un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comportant de 1 à 5 atomes de carbones, (iii) R1, R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou un groupe CO-(CH2)2n+1-X-R6, sont obtenus par réaction d'un composé de formule générale (IB) dans laquelle (i) les groupes G2 ou G3 représentent un atome de soufre ou un groupe N-R4, (ii) R et R4 représentent indépendamment des groupes tels que définis ci-avant, (iii) R1 est un atome d'hydrogène et (iv) R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou un groupe CO-(CH2)2n+1-X-R6 avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
Les composés de formule générale (IB) dans laquelle (i) les groupes G2 ou G3 représentent un atome de soufre ou un groupe N-R4, (ii) R et R4 représentent indépendamment des groupes tels que définis ci-avant, (iii) R1 est un atome d'hydrogène et (iv) R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou un groupe CO-(CH2)2n+1-X-R6, peuvent être obtenus selon les méthodes suivantes :
Dans un premier mode , les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) le groupe G2 est un atome de soufre, (ii) G3 représente un groupe NR4, (iii) R et R4 représentent indépendamment des groupes alkyle linéaires ou ramifiés différents, saturés ou non, éventuellement substitués, comportant de 1 à 5 atomes de carbones, (iv) R1 est un atome d'hydrogène et (v) R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou un groupe CO- (CH2)2n+1-X-R6 sont obtenus de la façon suivante (schéma 13) :
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a) réaction d'un composé de formule (XXIX) avec un composé de formule LG-E dans laquelle E représente un halogène et LG un groupe réactif choisi par exemple parmi mésyle, tosyle, etc., pour donner un composé de formule générale (XL) dans laquelle PG représente un groupement protecteur ; b) réaction d'un composé de formule (XL) avec un composé de formule Ac-S-B+ dans laquelle Ac représente un groupe acyle court, préférentiellement le groupe acétyle, et B est un contre-ion choisi par exemple parmi le sodium ou le potassium, préférentiellement le potassium pour donner le composé de formule générale (XLI). Cette réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant le protocole décrit par (Gronowitz, Herslôf et al. 1978) ; c) déprotection de l'atome de soufre d'un composé de formule (XLI) dans des conditions classiques connues de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (XLII) ; d) réaction d'un composé de formule générale (XLII) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule générale (XLIII) dans laquelle R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6; e) déprotection du composé de formule (XLIII) dans des conditions connues de l'homme de métier.
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Figure img00500001

a. activation ; b. substitution ; c. déprotection ; d.acylabon ; e. déprotection schéma 13
Selon une autre méthode, les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 représente un groupe N-R4, (ii) G3 est un atome de soufre, , (iii) R et R4 représentent indépendamment des groupes alkyle linéaires ou ramifiés différents, saturés ou non, éventuellement substitués, comportant de 1 à 5 atomes de carbones, (iv) R1 est un atome d'hydrogène et (v) R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou un groupe CO- (CH2)2n+1-X-R6 sont obtenus de la façon suivante (schéma 14) : a) réaction du composé de formule (XXVII) avec un composé de formule Ac-S-B+ dans laquelle Ac représente un groupe acyle court, préférentiellement le groupe acétyle, et B est un contre-ion choisi par exemple parmi le sodium ou le potassium, préférentiellement le potassium pour donner le composé de formule générale (XLIV). Cette réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant le protocole décrit par (Gronowitz, Herslöf et al. 1978) ; b) réaction d'un composé de formule (XLIV) avec un composé de formule LG-E dans laquelle E représente un halogène et LG un groupe réactif choisi par exemple parmi mésyle, tosyle, etc., pour donner un
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composé de formule générale (XLV) dans laquelle PG représente un groupement protecteur ; c) réaction du composé (XLV) avec un composé de formule R4-NH2 dans laquelle R4 représente un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comportant de 1 à 5 atomes de carbones et NH2 représente la fonction amine, selon la méthode décrite par (Ramalingan, Raju et al. 1995), pour obtenir un composé de formule (XLVI) dans laquelle R et R4, indépendants, représentent indépendamment des groupes alkyle linéaires ou ramifiés différents, saturés ou non, éventuellement substitués, comportant de 1 à 5 atomes de carbone ; d) réaction d'un composé de formule générale (XLVI) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule générale (XLVII) ; e) déprotection de l'atome de soufre d'un composé de formule (XLVII) dans des conditions classiques connues de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (XLVIII) ; f) réaction d'un composé de formule générale (XLVIII) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule générale (XLIX) dans laquelle R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6;
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g) déprotection d'un composé de formule (XLIX) dans des conditions classiques connues de l'homme de métier.
Figure img00520001

a. substitution ; b. acbvabon ; c. substitution ; d. amidification ; e. déprotection ; f. acylation ; g. déprotection schéma 14
Les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 est un atome de soufre, (ii) G3 est un atome d'oxygène, (iii) R est un atome d'hydrogène, (iv) R1 et R2 représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 et (v) R3 est un atome d'hydrogène ou représente un groupe CO-R5 ou CO- (CH2)2n+i-X-R6, peuvent être préparés à partir des composés de formule (XXIII) par le procédé suivant (schéma 15): a) réaction du composé (XXIII) avec un composé de formule LG-E dans laquelle E représente un halogène et LG un groupe réactif choisi par exemple parmi mésyle, tosyle, etc., pour donner un composé de formule générale (L) dans laquelle PG représente un groupement protecteur ;
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b) réaction d'un composé de formule (L) avec un composé de formule Ac-S-B+ dans laquelle Ac représente un groupe acyle court, préférentiellement le groupe acétyle, et B est un contre-ion choisi par exemple parmi le sodium ou le potassium, préférentiellement le potassium pour donner le composé de formule générale (LI). Cette réaction peut avantageusement être mise en oeuvre en adaptant le protocole décrit par (Gronowitz, Herslôf et al. 1978) ; c) déprotection de l'atome de soufre d'un composé (LI), dans des conditions classiques connues de l'homme de métier, pour donner un composé de formule générale (LII); d) réaction d'un composé de formule générale (LII) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-XR6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule générale (LUI) dans laquelle R1 et R2, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6; e) déprotection d'un composé (LUI) dans des conditions classiques connues de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (IB) dans laquelle G2 est un atome de soufre, G3 est un atome d'oxygène, R et R3 sont des atomes d'hydrogène et R1 et R2, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 ; f) réaction d'un composé de formule générale (IB) dans laquelle (i) G2 est un atome de soufre, (ii) G3 est un atome d'oxygène, (iii) R et R3 sont des atomes d'hydrogène et (iv) R1 et R2, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe
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(CH2)2n+1-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
Figure img00540001

a. activation ; b. substitution ; c. déprotecbon ; d. acylation ; e. déprotection ; f. acylation schéma 15
Les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 est un atome de soufre, (ii) G3 est un atome d'oxygène, (iii) R est un atome d'hydrogène, (iv) R1 et R3 représentent un atome d'hydrogène ou un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6, identiques ou différents, et (v) R2 représente un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6, peuvent être préparés à partir des composés de formule (XXIa) par le procédé suivant (schéma 16): a) réaction d'un composé de formule (XXIa) avec un composé PG'-E dans lequel PG' est un groupement protecteur et E est un groupe réactif choisi par exemple parmi OH ou un halogène, pour donner un composé de formule générale (LIV) dans laquelle PG est un autre groupe protecteur tel que défini plus avant. La réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant les protocoles décrits par (Marx, Piantadosi et al.
1988) et (Gaffney and Reese 1997) dans lesquels PG-E peut représenter
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le chlorure de triphénylméthyle ou le 9-phénylxanthène-9-ol ou encore le
9-chloro-9-phénylxanthène ; b) réaction du composé (LIV) avec un composé de formule LG-E dans laquelle E représente un halogène et LG un groupe réactif choisi par exemple parmi mésyle, tosyle, etc., pour donner un composé de formule générale (LV) dans laquelle PG et PG' représentent des groupements protecteurs judicieusement choisis tels que définis plus avant ; c) réaction d'un composé de formule (LV) avec un composé de formule
Ac-S-B+ dans laquelle Ac représente un groupe acyle court, préférentiellement le groupe acétyle, et B est un contre-ion choisi par exemple parmi le sodium ou le potassium, préférentiellement le potassium pour donner le composé de formule générale (LVI). Cette réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant le protocole décrit par (Gronowitz, Herslôf et al. 1978) ; d) déprotection de l'atome de soufre d'un composé (LVI), dans des conditions classiques connues de l'homme de métier, pour donner un composé de formule générale (LVII) ; e) réaction d'un composé de formule générale (LVII) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule générale (LVIII) dans laquelle R2 représente un groupe CO-R5 ou
CO- (CH2)2n+1-X-R6 f) déprotection d'un composé (LVIII) dans des conditions classiques connues de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (IB) dans laquelle G2 est un atome de soufre, G3 est un atome
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d'oxygène, R, R1 et R3 sont des atomes d'hydrogène et R2 représente un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6 (composé LIX) ; g) réaction d'un composé de formule (LIX) avec un composé (PG)20 dans lequel PG est un groupement protecteur pour donner un composé de formule générale (LX). La réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant les protocoles décrits par (Nazih, Cordier et al. 2000) et (Kotsovolou, Chiou et al. 2001) dans lesquels (PG)20 représente le dicarbonate de di-tert-butyle ; h) réaction d'un composé de formule générale (LX) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule (LXI) ; i) déprotection d'un composé (LXI) dans des conditions classiques connues de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (IB) dans laquelle G2 est un atome de soufre, G3 est un atome d'oxygène, R et R1 sont des atomes d'hydrogène et R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 ; j) réaction d'un composé de formule générale (IB) dans laquelle G2 est un atome de soufre, G3 est un atome d'oxygène, R et R1 sont des atomes d'hydrogène et R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe
CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6 avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier
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Figure img00570001

a. protection ; b. activation ; c. subsitution ; d. déprotecbon ; e. acylation ; f. déprotection ; g : protection ; h : acylation ; i : déprotection ; ] : amidificabon schéma 16
Les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 est un atome d'oxygène, (ii) G3 est un atome de soufre, (iii) R est un atome d'hydrogène, (iv) R2 est un atome d'hydrogène ou représentent un groupe COR5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6 et (v) R1 et R3 représentent un groupe CO-R5 ou CO- (CH2)2n+1-X-R6, peuvent être préparés à partir des composés de formule (XXa) selon le procédé suivant (schéma 17) : a) réaction d'un composé de formule (XXa) tel que défini ci-avant, avec un composé de formule LG-E (en quantité stoechiométrique) dans laquelle E représente un halogène et LG un groupe réactif choisi par exemple parmi mésyle, tosyle, etc., pour donner un composé de formule générale (LXII) ;
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b) réaction d'un composé de formule (LXII) avec un composé de formule Ac-S-B+ dans laquelle Ac représente un groupe acyle court, préférentiellement le groupe acétyle, et B est un contre-ion choisi par exemple parmi le sodium ou le potassium, préférentiellement le potassium pour donner le composé de formule générale (LXIII). Cette réaction peut avantageusement être mise en oeuvre en adaptant le protocole décrit par (Gronowitz, Herslôf et al. 1978) ; c) réaction d'un composé de formule (LXIII) avec un composé PG-E dans lequel PG est un groupement protecteur et E est un groupe réactif choisi par exemple parmi OH ou un halogène, pour donner un composé de formule générale (LXIV). La réaction peut avantageusement être mise en oeuvre en adaptant les protocoles décrits par (Marx, Piantadosi et al.
1988) et (Gaffney and Reese 1997) dans lesquels PG-E peut représenter le chlorure de triphénylméthyle ou le 9-phénylxanthène-9-ol ou encore le 9-chloro-9-phénylxanthène ; d) déprotection de l'atome de soufre d'un composé (LXIV), dans des conditions connues de l'homme de métier, pour donner un composé de formule générale (LXV) ; e) réaction d'un composé de formule générale (LXV) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule générale (LXVI) dans laquelle R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6; f) déprotection d'un composé de formule (LXVI), dans des conditions classiques connues de l'homme de métier, pour donner un composé de formule générale (IB) dans laquelle G2 est un atome d'oxygène, G3 est un
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atome de soufre, R et R2 sont des atomes d'hydrogène et R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO- (CH2)2n+1-X-R6; g) réaction d'un composé de formule générale (IB) dans laquelle G2 est un atome d'oxygène, G3 est un atome de soufre, R et R2 sont des atomes d'hydrogène et R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6 avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
Figure img00590001

a. activation ; b. substitution; c. protecbon; d. déprotection sélective ; e. acylation ; f. déprotection ; g. acylation schéma 17 Les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 est un atome d'oxygène, (ii) G3 est un atome de soufre, (iii) R et R3 sont des atomes d'hydrogène, (iv) R2 est un atome d'hydrogène ou représente un groupe CO-R5
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ou CO-(CH2)2n+i-X-R6 et (v) R1 représente un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+i-X- R6, peuvent être préparés à partir des composés de formule (LXV) par déprotection de l'oxygène selon des conditions classiques connues de l'homme de métier.
Les composés de formule (IB) selon l'invention dans laquelle (i) G2 est un atome d'oxygène, (ii) G3 est un atome de soufre, (iii) R est un atome d'hydrogène, (iv) R1 et R2 sont des atomes d'hydrogène ou représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6, identiques ou différents, et (v) R3 représente un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6, peuvent être préparés à partir des composés de formule (XXIa) selon le procédé suivant (schéma 18) : a) réaction d'un composé de formule (XXIa) tel que défini ci-avant, avec un composé de formule LG-E (en quantité stoechiométrique) dans laquelle E représente un halogène et LG un groupe réactif choisi par exemple parmi mésyle, tosyle, etc., pour donner un composé de formule générale (LXVII) ; b) réaction d'un composé de formule (LXVII) avec un composé de formule
Ac-S-B+ dans laquelle Ac représente un groupe acyle court, préférentiellement le groupe acétyle, et B est un contre-ion choisi par exemple parmi le sodium ou le potassium, préférentiellement le potassium pour donner le composé de formule générale (LXVIII). Cette réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant le protocole décrit par (Gronowitz, Herslöf et al. 1978) ; c) réaction d'un composé de formule (LXVIII) avec un composé PG'-E dans lequel PG' est un groupement protecteur et E est un groupe réactif choisi par exemple parmi OH ou un halogène, pour donner un composé de formule générale (LXIX). La réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant les protocoles décrits par (Marx, Piantadosi et al.
1988) et (Gaffney and Reese 1997) dans lesquels PG'-E peut représenter
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le chlorure de triphénylméthyle ou le 9-phénylxanthène-9-ol ou encore le
9-chloro-9-phénylxanthène ; d) déprotection de l'atome de soufre d'un composé (LXIX), dans des conditions connues de l'homme de métier, pour donner un composé de formule générale (LXX) ; e) réaction d'un composé de formule générale (LXX) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+i-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule générale (LXXI) dans laquelle R3 représente un groupe CO-R5 ou
CO- (CH2)2n+1-X-R6; f) déprotection d'un composé de formule (LXXI), dans des conditions classiques connues de l'homme de métier, pour donner un composé de formule générale (IB) dans laquelle G2 est un atome d'oxygène, G3 est un atome de soufre, R et R2 sont des atomes d'hydrogène et R3 représente un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6 (composé LXXII) ; g) réaction d'un composé de formule (LXXII) avec un composé (PG)20 dans lequel PG est un groupement protecteur pour donner un composé de formule générale (LXXIII). La réaction peut avantageusement être mise en #uvre en adaptant les protocoles décrits par (Nazih, Cordier et al. 2000) et (Kotsovolou, Chiou et al. 2001) dans lesquels (PG)20 représente le dicarbonate de di-tert-butyle ; h) réaction d'un composé de formule générale (LXXIII) avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou
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d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule (LXXIV) ; i) déprotection d'un composé (LXXIV) dans des conditions classiques connues de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (IB) dans laquelle G3 est un atome de soufre, G2 est un atome d'oxygène, R et R1 sont des atomes d'hydrogène et R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6; j) réaction d'un composé de formule générale (IB) dans laquelle G3 est un atome de soufre, G2 est un atome d'oxygène, R et R1 sont des atomes d'hydrogène et R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe
CO-R5 ou CO-(CH2)2n+1-X-R6 avec un composé de formule A -CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A est le groupe R5 ou le groupe (CH2)2n+1-X-R6, en présence éventuellement d'agents de couplage ou d'activateurs connus de l'homme de métier.
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Figure img00630001

a. activation ; b. substitution ; c. protection ; d. déprotection ; e.acylation ; f. déprotecbon ; g : protection h : acylation ; i : déprotection ; j : amidification schéma 18
La faisabilité, la réalisation et d'autres avantages de l'invention sont illustrés plus en détails dans les exemples qui suivent, qui doivent être considérés comme illustratifs et non limitatifs.
LEGENDES DES FIGURES : Figure 1A : Structure de glycérols acylés selon l'invention dont la préparation est décrite aux exemples 2a et 2c et 4a à 4r et notés sur la figure respectivement 1 A.2a, 1 A.2c, 1A.4a à 1A.4r.
Figure 1 B : Structure de composés particuliers selon l'invention dont la préparation est décrite aux exemples 5a et 5b, 6c, 7,9, 10,11, 13 et 17 à 21 et
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notés sur la figure respectivement 1B.5a, 1B.5b, 1B.6c, 1 B.7, 1 B.9, 1B.10,
Figure img00640001

1 B.11, 1 B.13, 1 B.17, 1 B.18, 1 B.19, 1 B.20 et 1 B.21.
Figure 2: Evaluation de l'activité des composés selon l'invention selon la formulation utilisée (carboxyméthylcellulose, Cremophor RH40 et Solutol HS15)
Figure 2A : dosage du cholestérol total plasmatique.
Figure 2B : des triglycérides plasmatiques.
Figure 3 : Evaluation des propriétés d'agonistes PPARa de composés selon l'invention avec le système de transactivation Gal4/PPARa.
Figure 4: Evaluation des propriétés antioxydantes de composés selon l'invention sur l'oxydation des LDL par le cuivre (Cu).
Figure 4A : formation de diènes conjugués en fonction du temps ou
Lag-Phase.
Figure 4B : de formation des diènes.
Figure 4C : maximum de diènes conjugués formés.
Figure 5 : Evaluation des propriétés neuroprotectrices du composé Ex 4a sur un modèle de maladie de Parkinson :
Figure 5A : nombre de rotations effectuées par les animaux après injection d'apomorphine.
Figure 5B : de neurones marqués par immunohistochimie anti-
Tyrosine Hydroxylase.
EXEMPLES : Pour faciliter la lecture du texte, les composés selon l'invention utilisés dans les exemples de mesure ou d'évaluation d'activité seront notés de manière abrégée telle que Ex 2 pour désigner le composé selon l'invention dont la préparation est décrite à l'exemple 2.
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Les chromatographies sur couche mince (CCM) ont été effectuées sur des plaques de gel de silice 60F254 MERCK d'épaisseur 0. 2 mm. On utilise l'abréviation Rf pour désigner le facteur de rétention (retention factor).
Les chromatographies sur colonne ont réalisées sur gel de silice 60 de granulométrie 40-63 m (référence 9385-5000 MERCK).
Les points de fusion (PF) ont été mesurés à l'aide d'un appareil BÜCHI B 540 par la méthode des capillaires.
Les spectres infra-rouge (IR) ont été réalisés sur un spectromètre à transformée de Fourier BRUKER (Vector 22).
Les spectres de résonance magnétique nucléaire (RMN) ont été enregistrés sur un spectromètre BRUKER AC 300 (300 MHz). Chaque signal est repéré par son déplacement chimique, son intensité, sa multiplicité (notée d pour doublet, dd pour doublet dédoublé, t pour triplet, td pour triplet dédoublé, quint pour quintuplet et m pour multiplet) et sa constante de couplage (J).
Les spectres de masse (SM) ont été réalisés sur un spectromètre PERKINELMER SCIEX API 1 (ESI-MS pour Electrospray lonization Mass Spectrometry) ou sur un spectromètre de type MALDI-TOF (Matrix-Assisted Laser Desorption/lonization - Time Of Flight).
EXEMPLE 1 : Préparation de dérivés d'acides gras
Figure img00650001

EXEMPLE 1a : Préparation de l'acide tétradécylthioacétiaue L'hydroxyde de potassium (34. 30 g, 0.611 mol), l'acide mercaptoacétique (20. 9 ml, 0. 294 mol) et le 1-bromotétradécane (50 ml, 0. 184 mol) sont ajoutés dans l'ordre au méthanol (400 ml). Ce mélange est placé sous agitation pendant une nuit à température ambiante. Au mélange réactionnel précédent est alors ajoutée une solution d'acide chlorhydrique concentré (60 ml) dissous dans l'eau (800 ml). L'acide tétradécylthioacétique précipite. Le mélange est laissé sous agitation une nuit à température ambiante. Le précipité est ensuite filtré, lavé cinq fois à l'eau puis séché au dessiccateur. Le produit est recristallisé dans le méthanol (rendement 94%).
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Rf (CH2CI2-MeOH 9-1) : 0. 60 PF : 67-68 C IR: vCO acide 1726 et 1684 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 84-0.95 (t, 3H, -CH3, J = 6.5 Hz) ; 1. 20-1.45 (massif, 22H, -CH2-) ; 1. 55-1.69 (quint, 2H, -CH2-CH2-S-, J=6. 5 Hz); 2. 63-2.72 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J = 7.3 Hz) ; 3. 27 (s, 2H, S-CH2-COOH).
SM (ESI-MS): M-1 = 287
Figure img00660001

EXEMPLE 1b: Préparation de l'acide 4-(dodécylthio)butandique Le dodécanethiol (2. 01 g ; 10 mmol) et le bromobutyrate d'éthyle (1.971 g; 10 mmol) sont placés sous agitation à température ambiante sous atmosphère inerte. L'hydroxyde de potassium (1.36 g ; 21 mmol) dissous dans 50 ml d'éthanol est ajouté lentement. Le mélange réactionnel est porté à reflux pendant 3 heures. L'éthanol est évaporé sous vide. Le résidu est repris par l'eau et acidifié. Le précipité formé est filtré, lavé à l'eau et séché (rendement 90%).
Rf (CH2CI2-MeOH 9-1) : 0. 46 IR: vCO acide 1689 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 86-0.91 (t, 3H, -CH3, J = 6. 2 Hz) ; (massif, 18H, -CH2-) ; 1. 53-1.63 (quint, 2H,-CH2-CH2-S-, J=6. 7 Hz); 1. 87-2.00 (quint, 2H, -CH2-S-CH2-CH2-CH2-COOH, J=7. 2 Hz) ; (m, 4H,-CH2-S-CH2-CH2- CH2-COOH) ; 2. 55-2.62 (t, 2H,-CH2-S-CH2-CH2-CH2-COOH).
SM (ESI-MS) : M-1 = 287
Figure img00660002

EXEMPLE 1c : Préparation de l'acide 6-(décylthio)hexanoïaue Le décanethiol (4. 57 g ; 25 mmol) et l'acide 4-bromobutyrique (5 g ; 25 mmol) sont placés sous agitation à température ambiante sous atmosphère inerte.
L'hydroxyde de potassium dissous dans 50 ml d'éthanol est ajouté lentement. Le mélange réactionnel est porté à reflux pendant 3 heures. L'éthanol est évaporé sous vide. Le résidu est repris par l'eau et acidifié. Le précipité formé est filtré, lavé à l'eau et séché (rendement 95%).
Rf (CH2CI2-MeOH 9-1) : 0. 37 IR: vCO acide 1690 cm-1
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RMN (1H, CDCI3) : 0. 86-0.91 (t, 3H, -CH3, J = 6. 5 Hz) ; (massif, 14H, -CH2-) ; 1. 42-1.50 (m, 2H, CH2-S-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 1. 53-1.75 (massif, 6H, -CH2-CH2-S-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 2. 35-2.42 (t, 2H, -CH2-S-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 2. 48-2.55 (massif, 4H,-CH2-S-CH2-).
SM (ESI-MS) : M-1 = 287 EXEMPLE 1 d : Préparation de l'acide tétradécylsélénoacétique Préparation du tétradécyldisélénure Sous atmosphère inerte, du sélénium (1. 19 g ; 15 mmol) est introduit dans un mélange THF (tétrahydrofuranne)/eau (1/1) (50 ml). Le mélange réactionnel est refroidi dans un bain de glace avant d'ajouter lentement le tétraborohydrure de sodium (1.325 g ; 35 mmol). Une seconde fraction de sélénium (1.19 ; 15 mmol) est ajoutée. Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 15 min puis chauffé à reflux pour dissoudre tous les réactifs.
Le bromotétradécane (9 ml ; 30 mmol) dissous dans 25 ml de THF est ajouté. Le mélange réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante pendant 3 heures. Le milieu réactionnel est alors extrait au dichlorométhane. Les phases organiques sont groupées, séchées sur du sulfate de magnésium, filtrées et portées à sec. Le produit est utilisé sans autre purification.
Rf (éther de pétrole) : 0. 77 PF :43 C IR: vCH 2960-2850 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 87-0.93 (t, 6H, -CH3, J = 6.5 Hz) ; 1. 20-1.48 (massif, 40H, -CH2-) ; 1. 62-1.80 (m, 4H, -CH2-CH2-Se-) ; 2. 88-2.96 (t, 4H,-CH2-CH2-Se-).
Figure img00670001
Préparation de l'acide tétradé cvisélénoacé tique Sous atmosphère inerte, le ditétradécyldisélénure (8. 5 g ; 17 mmol) est dissous dans un mélange THF/eau (150 ml/50 ml) et refroidi dans un bain de glace. Le tétraborohydrure de sodium (2.9 g ; 61 mmol) est ajouté lentement (la solution se décolore) puis est ajouté l'acide bromoacétique (8.5 g ;61 mmol) dissous dans un mélange THF/eau (25 ml / 25 ml). Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 6 heures. Le mélange réactionnel est
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extrait à l'éther puis la phase aqueuse est acidifiée. Le précipité obtenu est filtré, lavé plusieurs fois à l'eau et séché (rendement 29%).
Rf (CH2CI2-MeOH 9-1) : 0. 60 PF: 68 C IR: vCO acide 1719 et 1680 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 85-0.95 (t, 3H, -CH3, J = 6. 5 Hz) ; (massif, 22H, -CH2-) ; 1. 65-1.78 (quint, 2H, -CH2-CH2-Se-, J=6. 5 Hz) ; 2. 78-2.84 (t, 2H, CH2CH2-Se-, J = 7 Hz) ; 3. 18 (s, 2H, Se-CH2-COOH).
SM (ESI-MS) : M-1 = 335
Figure img00680001

EXEMPLE 1e : Préparation de l'acide tétradécylsulfoxyacétique L'acide tétradécylthioacétique (5 g ; 17. 4 mmol) (exemple 1a) est dissous dans un mélange méthanol/dichlorométhane (160 ml / 80 ml). Le mélange réactionnel est mis sous agitation et refroidi dans un bain de glace avant d'ajouter lentement l'oxone# (12.8 g ;21 mmol) dissous dans l'eau (160 ml). Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 3 heures. Les solvants sont évaporés sous vide. Le précipité formé dans la phase aqueuse résiduelle est essoré, lavé plusieurs fois à l'eau et séché (rendement 90%).
Rf (CH2CI2-MeOH 9-1) : 0. 27 IR: vCO acide 1723 et 1690 cm-1 RMN (1H, DMSO) : 0. 80-0.92 (t, 3H, -CH3, J = 6. 4 Hz) ; (massif, 22H, -CH2-) ; 1. 55-1.71 (quint, 2H, -CH2-CH2-SO-) ; 2. 70-2.89 (t, 2H,-CH2-CH2-SO- CH2-COOH, J=6. 7 Hz) ; (d, 1H, -CH2-SO-CH2-COOH, J=14.5 Hz) ; 3. 80-3.95 (d, 1 H, -CH2-SO-CH2-COOH, J=14.1 Hz).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 305 ; M+23 = 327 (M+Na+) ; M+39 = 343 (M+K+)
Figure img00680002

EXEMPLE 1f: Préparation de l'acide 6-(décvlsulfoxv)hexanoïque Le produit est préparé selon la procédure précédemment décrite (exemple 1e) à partir de l'acide 6-(décylthio)hexanoïque(exemple 1 c) rendement 94%.
Rf (CH2Cl2-MeOH 9-1) : 0. 18
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RMN (1H, CDCI3) : 0.86-0.91 (t, 3H, -CH3, J = 6. 8 Hz) ; 1.20-1.40 (massif, 14H, -CH2-) ; 1. 40-1.60 (m, 2H, CH2-SO-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH); 1.63-1.95 (massif, 6H, -CH2-CH2-SO-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 2. 35-2.42 (m, 3H, -CH2-SO-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH et -CH2-SO-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2COOH) ; 2. 60-2.71 (m, 1 H, -CH2-SO-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 2. 75-2.85 (m, 1 H, -CH2-SO-(CH2)5-COOH) ; 2. 80-3.01 (m, 1 H, -CH2-SO-(CH2)5-COOH).
Figure img00690001
EXEMPLE 1a : Préparation de l'acide tétradécylsulfonvlacétiaue L'acide tétradécylthioacétique (5 g ; 17.4mmol) (exemple la) est dissous dans un mélange méthanol/dichlorométhane (160 ml / 80 ml). Le mélange réactionnel est placé sous agitation et refroidi dans un bain de glace avant d'ajouter lentement l'oxone (21.8 g ; 35 mmol) dissous dans l'eau (160 ml). Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 3 heures. Les solvants sont évaporés sous vide. Le précipité formé dans la phase aqueuse résiduelle est essoré, lavé plusieurs fois à l'eau et séché (rendement 89%).
Rf (CH2CI2-MeOH 9-1): 0. 21 IR: vCO acide 1701 cm-1 RMN (1H, DMSO) : 0. 85-0.96 (t, 3H, -CH3, J = 6 Hz) ; (massif, 22H, -CH2-) ; 1. 40-1.55 (m, 2H, -CH2-CH2-CH2-S02-) ; 1. 80-1.96 (m, 2H, -CH2-CH2S02-) ; 3. 22-3.34 (t, 2H, -CH2-CH2-S02-CH2-COOH, J=8 Hz) ; 4. 01 (s, 2H,-CH2S02-CH2-COOH).
SM (ESI-MS) : M-1 = 319
Figure img00690002

EXEMPLE 1 h : Préparation de l'acide 6-(décvlsulfonyl)hexanoïque Le produit est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 1g) à partir de l'acide 6-(décylthio)hexanoïque (exemple 1 c). rendement 87%.
Rf (CH2CI2-MeOH 9-1): 0. 15 IR: vCO acide 1689 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 85-0.96 (t, 3H, -CH3, J = 6.5 Hz) ; 1. 22-1.40 (massif, 14H, -CH2-) ; 1. 40-1.61 (massif, 4H, -S02-CH2-CH2-CH2-) ; 1. 65-1.95 (massif, 6H, -CH2-CH2-S02-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 2. 35-2.46 (m, 2H,-CH2-COOH);
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2. 60-2.84 (m, 2H, -CH2-SO2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 2. 90-3.02 (m, 2H, -CH2-S02-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH).
EXEMPLE 1 i : Préparation de l'acide docosylthioacétique Le produit est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 1a) à partir de l'acide mercaptoacétique et du bromodocosane.
Rendement 90% Rf (CH2CI2-MeOH 9-1) : 0. 62 IR: vCO acide 1728 et 1685 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 83-0.94 (t, 3H, -CH3, J = 6.6 Hz) ; 1. 18-1.48 (massif, 38H, -CH2-) ; 1. 55-1.69 (quint, 2H,-CH2-CH2-S-, J = 6.7 Hz) ; 2. 63-2.72 (t, 2H, CH2CH2-S-, J = 7.3 Hz) ; 3. 26 (s, 2H, S-CH2-COOH) EXEMPLE 2 : Préparation de monoacylglycérols
Figure img00700001

EXEMPLE 2a : Préparation du 1-tétradécylthioacétylalycéroi Préparation du 1-tétradécvlthioacétate-2,3-isoDropvlidèneglvcérol Dans un ballon immergé dans un bain de glace, l'acide tétradécylthioacétique (4 g, 13.86 mmol) est dissous dans le tétrahydrofuranne (100 ml) avant d'ajouter l'EDCI (1-(3-diméthylaminopropyl)-3-éthylcarbodiimide chlorhydrate)(2.658 g, 13. 86 mmol), la diméthylaminopyridine (1. 694 g, 13.86 mmol) puis le solketal (1. 72 ml, 13. 86 mmol) dans cet ordre. Le mélange réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante pendant 4 jours. Le solvant est évaporé sous vide. Le résidu est repris par le dichlorométhane, lavé par une solution aqueuse d'HCI 1 N puis par une solution aqueuse de NaHC03 10% et enfin par une solution saturée en NaCI. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et évaporée sous vide. L'huile résiduelle obtenue est purifiée par chromatographie sur gel de silice (acétate d'éthyle-cyclohexane 1-9). Le produit est obtenu sous forme d'huile jaune (rendement 80%).
Rf (cyclohexane-acétate d'éthyle 8-2) : 0. 65
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IR: vCOester 1736 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 86 (t, 3H, -CH3, J = 7. 8 Hz) ; (massif, 20H, -CH2-) ; 1. 33 (s, 3H, CH3 isopropylidène) ; 1. 37 (s, 3H, CH3 isopropylidène) ; 1. 59 (m, 4H, OCO-CH2-S-CH2-CH2-CH2-) ; 2. 62 (t, 2H, -0-CO-CH2-S-CH2-, J = 7. 40 Hz) ; (s, 2H, -0-CO-CH2-S-CH2-); 3. 75 (m, 1 H, -CO-0-CH2-CH(0)-CH2(0) (isopropylidène)) ; 4. 08 (m, 2H, -CO-0-CH2-CH(0)-CH2(0)- (isopropylidène)) ; 4. 18 (m, 1 H, -CO-O-CH2-CH(O)-CH2(O)- (isopropylidène) ; 4. 35 (m, 1 H, -CO-O- CH2-CH(O)-CH2(O)- (isopropylidène) ).
Figure img00710001
Préparation du 9-tétradécylthioacétylglycérol Le 1-tétradécylthioacétate-2,3-isopropylidèneglycérol (4. 163 g, 10.356 mmol) est dissous dans l'acide acétique (60 ml) et laissé sous agitation à température ambiante. Après 1 semaine de réaction, le mélange réactionnel est dilué dans l'eau puis extrait par de l'acétate d'éthyle. La phase organique est lavée par une solution aqueuse saturée en NaCI puis séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et le solvant est évaporé. La poudre blanche obtenue est recristallisée dans l'heptane (rendement 90%).
*Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 5-5) : 0. 30 PF : 63-65 C IR: vCOester 1720 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 3H, -CH3, J = 6. 6 Hz) ; (massif, 20H, -CH2-) ; 1. 59 (massif, 4H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2. 64 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J = 7.23 Hz) ; 3. 26 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 3. 64 (m, 2H, -COO-CH2-CHOH-CH20H) ; 3. 97 (m, 1 H, -COO-CH2-CHOH-CH20H) ; 4. 27 (m, 2H, -COO-CH2-CHOH-CH20H).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 385 (M+Na+) (M+H non détectée) EXEMPLE 2b : Préparation du 1-palmitoylglycérol Ce composé est synthétisé selon la procédure précédemment décrite (exemple 2a) à partir du solketal et de l'acide palmitique.
Figure img00710002
9-Palmitoyl-(2,3-isooropylidènecl cy érol rendement 55%
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Rf (CH2CI2): 0. 35 PF : 32-33 C IR : vCOester 1733 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 3H, -CH3, J = 6.6 Hz) ; 1. 27 (massif, 24H, -CH2-) ; 1. 39 (s, 3H, CH3 isopropylidène) ; 1. 45 (s, 3H, CH3 isopropylidène) ; 1. 62 (m, 2H, OCO-CH2-CH2-CH2-) ; 2. 32 (t, 2H, -0-CO-CH2-CH2-CH2-, J = 7. 40 Hz) ; (dd, 1 H, CO-0-CH2-CH(0)-CH2(0) (isopropylidène), J=8. 3 Hz et J=2. 1 Hz) ; 4.10 (m, 2H, -CO-0-CH2-CH(0)-CH2(0)- (isopropylidène)); 4. 18 (dd, 1 H, -CO-0-CH2- CH(0)-CH2(0)- (isopropylidène), J=11.6 Hz et J=4.6 Hz) ;4.33 (m, 1 H, -CO-OCH2-CH(O)-CH2(O)- (isopropylidène)).
1-palmitoylglycérol rendement 84% Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 5-5) : 0. 30 PF : 72-74 C IR : vCOester 1730 cm-' RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 3H, -CH3, J = 6. 5 Hz) ; (massif, 24H, -CH2-) ; 1. 64 (m, 2H, OCO-CH2-CH2-CH2-) ; 2. 36 (t, 2H, -0-CO-CH2-CH2-CH2-, J = 7.40 Hz) ; 3. 60 (dd, 1 H, -CO-0-CH2-CHOH-CH20H, J=11.8Hz et J=6.1 Hz) ; 3. 71 (dd, 1 H, -CO-0-CH2-CHOH-CH20H, J=11.8Hz et J=3.9Hz) ;3.94 (m, 1 H, -CO-OCH2-CHOH-CH20H) ; 4. 19 (m, 2H, -CO-0-CH2-CHOH-CH20H).
Figure img00720001
EXEMPLE 2c : Préparation du 2-tétradécylthioacétylalycérol Préparation du T.3-benzylidènecl c Le glycérol (30 g ; 0.326mol), le benzaldéhyde (34. 5 g ; 0. 326 mol) et l'acide p- toluène sulfonique (50 mg) sont dissous dans 350 ml de toluène et placés à reflux dans un appareil de Dean-Stark pendant 18 heures. Le mélange réactionnel est porté à sec. Le produit résiduel est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant : cyclohexane/acétate d'éthyle 8/2 puis 7/3) puis recristallisé (rendement : 20%) Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 5-5) : 0. 34
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IR: vOH 3286 cm-1 RMN (1H, CDCb): 3. 19 (si, 1 H échangeable, -OH) ; 3. 64 (si, 1 H, -0-CH2-CHOHCH20-) ; 3. 99-4.16 (dd, 2H, -O-CHaHb-CHOH-CHaHbO-, J=1.1 Hz et J=10.4 Hz); 4. 17-4.23 (dd, 2H, -O-CHaHb-CHOH-CHaHbO-, J=1. 6 Hz et J=11.5 Hz) ; 5. 57 (s, 1 H, #-CH-); 7. 34-7.45 (m, 3H, H aromatiques) ; 7. 49-7.55 (m, 2H, H aromatiques).
Figure img00730001
Préparation du 2- tétradécvlthioacétvl-1.3-benzvlidènealvcérol Dans un ballon immergé dans un bain de glace, l'acide tétradécylthioacétique (0. 800 g, 2.774 mmol) est dissous dans le THF (75 ml) avant d'ajouter l'EDCI (0. 532 g, 2.774 mmol), la diméthylaminopyridine (0. 339 g, 2.774 mmol) puis le 1,3-benzylidèneglycérol (0. 5 g, 2.774 mmol) dans cet ordre. Le mélange est laissé sous agitation à température ambiante pendant 16 heures. Le solvant est évaporé. Le résidu obtenu est repris par le dichlorométhane, lavé par une solution d'acide chlorhydrique 1 N puis par une solution de carbonate de potassium à 10% et enfin par une solution aqueuse saturée en sel. La phase organique est séchée sur MgS04, filtrée et portée à sec. Le résidu est repris dans l'éther de pétrole. Le précipité formé est filtré puis purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant : acétate d'éthyle-cyclohexane 2-8) et permet d'obtenir le produit souhaité sous forme de poudre blanche (rendement 50%).
Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 2-8) : 0. 53 PF : 51-53 C IR: vCO ester 1723 cm-1 RMN (1H, CDCb) : 0. 85-0.96 (t, 3H, CH3, J=6. 8 Hz) ; 1. 19-1.44 (massif, 20H, -CH2) ; 1. 52-1.69 (massif, 4H,-CH2-CH2-CH2-S-) ; 2. 62-2.80 (t, 2H,-CH2-CH2CH2-S-, J=7.2 Hz) ; 3.34 (s, 2H,-CH2-S-CH2-COO-) ; 4. 12-4.29 (dd, 2H, -O-CHaHb-CHOH-CHaHbO-, J=1. 7 Hz et J=13.1 Hz) ; 4. 30-4.41 (dd, 2H, -O-CHaHb-CHOH-CHaHbO-, J=1. 3 Hz et J=13.1 Hz) ; 4. 75-4.79 (t, 1 H, -0-CH2CHOH-CH20-, J=1. 7 Hz) ; 5. 59 (s, 1 H, #-CH-) ; 7. 35-7.45 (m, 3H, H aromatiques) ; 7. 48-7.57 (m, 2H, H aromatiques).
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Figure img00740001

Préparation du 2-tétradécylthioacétvl~glycérol Le tétradécylthioacétate de (1,3-O-benzylidène)propyle (0. 576 g, 1.278 mmol) est dissous dans un mélange de dioxanne et de triéthylborate (50-50 v/v) avant d'ajouter l'acide borique (0. 317 g, 5.112 mmol). Le mélange réactionnel est chauffé à 100 C pendant 4 heures. Sont encore ajoutés 2 équivalents d'acide borique (0. 158 g, 2.556 mmol) puis 2 équivalents après 5. 5 heures et 7 heures de réaction. Après 24 heures de réaction, le triéthylborate est évaporé. Le résidu est repris par de l'acétate d'éthyle et lavé par l'eau. La phase aqueuse est neutralisée avec NaHC03 puis extraite avec le dichlorométhane. La phase organique est lavée avec de l'eau saturée en sel, séchée sur MgS04, filtrée et portée à sec. Le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant acétate d'éthyle-cyclohexane 5-5) (rendement 62%).
Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 7-3) : 0. 51 I R: vCO ester 1739 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 82-0.95 (t, 3H, -CH3, J = 6.9 Hz) ; 1.15-1.35 (massif, 22H, -CH2-) ; 1. 55-1.68 (m, 2H,-CH2-CH2-S-) ; 2. 23 (si, 2H, OH) ; (m, 2H, CH2- CH2-S-) ; 3. 26 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 3. 64-3.73 (m, 4H, HOCH2-CH(OCO-R)- CH20H) ; 3. 97 (m, 1H, HOCH2-CH(OCO-R)-CH20H).
EXEMPLE 3 : Préparation de 1.3-diacylalycérols
Figure img00740002

EXEMPLE 3a : Préparation du 1.3-dipaimitoylalycérol Le glycérol (10 g ; 0. 109 mol ; 1 eq), l'acide palmitique (55. 69 g ; 0. 217 mol ; 2 eq), la dicyclohexylcarbodiimide (44. 77 g ; 0. 217 mol ; 2eq) et la diméthylaminopyridine (26. 51 g ; 0. 217 mol ; 2eq) sont dissous dans le dichlorométhane. Le mélange réactionnel est placé sous agitation à température ambiante pendant 48 heures. La dicyclohexylurée formée est filtrée et lavée plusieurs fois au dichlorométhane. Le filtrat est porté à sec. Le produit résiduel est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant : dichlorométhane) (rendement : 45%).
Rf (CH2CI2) : 0. 30
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PF : 70-73 C IR: vCO ester 1735 et 1716 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 86-91 (t, 6H, -CH3, J = 6.5 Hz) ; 1. 27 (massif, 48H, -CH2-) ; 1. 60-1.65 (quint, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 4 Hz) ; 2. 32-2.38 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 6 Hz) ; 2. 51-2.52 (d, 1 H, OH (échangeable ; 4. 06-4.21 (massif, 5H, -CH2CH-CH2-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 591 (M+Na+) ; M+39 = 607 (M+K+) ; (M+H non détectée) EXEMPLE 3b : Préparation du 1.3-dilinoléovlqlvcérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide linoléique. Le produit est obtenu sous forme d'huile incolore (rendement 26%).
Rf (CH2CI2) : 0. 30 IR: vCO ester 1743 et 1719 cm-1 RMN (1H, CDC13) : 0. 83-0.93 (t, 6H, -CH3, J = 6. 5 Hz) ; 1.15-1.44 (massif, 28H, -CH2-) ; 1. 55-1.70 (quint, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 4 Hz) ; 1. 90-2.15 (massif, 8H, -CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-) ; 2. 30-2.41 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 6 Hz) ; 2. 48-2.52 (d, 1 H, OH (échangeable)) ; 2. 70-2.83 (t, 4H, -CH2-CH=CH-CH2CH=CH-CH2-) ; 4. 05-4.25 (massif, 5H,-CHaHb-CH-CHaHb-) ; 5. 25-5.46 (m, 8H, -CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-).
SM : M+23 = 639 (M+Na+) ; M+39 = 655 (M+K+) ; (M+H non détectée)
Figure img00750001

EXEMPLE 3c : Préparation du 1,3-distéaroylalycérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide stéarique. Le produit est obtenu sous forme d'une poudre blanche (rendement 21 %).
Rf (CH2CI2): 0. 30 IR: vCO ester 1735 et 1716 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 83-0.91 (t, 6H, -CH3, J = 6.5 Hz) ;1.27 (massif, 56H,-CH2-); 1. 59-1.66 (quint, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 4 Hz) ; 2. 33-2.38 (t, 4H, OCOCH2-CH2-,
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J=7. 5 Hz) ; 2. 45-2.47 (d, 1 H, OH (échangeable), J=4. 3 Hz) ; 4. 08-4.23 (massif, 5H,-CHaHb-CH-CHaHb-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 647 (M+Na+) ; (M+H non détectée) EXEMPLE 3d : du 1,3-dioléoylglycérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide oléique. Le produit est obtenu sous forme d'huile incolore (rendement 15%).
Rf (CH2Cl2): 0. 23 IR: vCO ester 1743 et 1720 cm-1 RMN (1H, CDC13) : 0. 89 (t, 6H, -CH3, J = 7. 2 Hz) ; (massif, 40H, -CH2-) ; 1. 64 (quint, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 4 Hz) ; 2. 02 (massif, 8H, -CH2-CH=CH-CH2-); 2. 36 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.2 Hz) ; 2. 45 (d, 1 H, OH (échangeable), J=4. 2 Hz); 4. 18 (massif, 5H, -CHaHb-CH-CHaHb-) ; 5. 35 (m, 4H, -CH2-CH=CH-CH2-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 643 (M+Na+) ; (M+H non détectée) EXEMPLE 3e : Préparation du 1.3-ditétradécanovlqlvcérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide tétradécanoïque. Le produit est obtenu sous forme d'une poudre blanche (rendement 30%).
Rf (CH2CI2) : 0. 30 IR: vCO ester 1733 et 1707 cm-1 RMN (1H, CDCb) : 089 (t, 6H, -CH3, J = 6.5 Hz) ; 1. 26 (massif, 40H,-CH2-) ; 1.62 (quint, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 4 Hz) ; 2. 36 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 5 Hz) ; 2. 45 (d, 1 H, OH (échangeable), J=4. 3 Hz) ; 4. 15 (massif, 5H,-CHaHb-CH-CHaHb-).
Figure img00760001

EXEMPLE 3f : Préparation de 1.3-ditétradécylthioacétvlqlvcérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide tétradécylthioacétique (exemple 1 a). Le produit est obtenu sous forme d'une poudre blanche (rendement 37%).
Rf (CH2CI2) : 0. 27 PF:71-73 C
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IR: vCO ester 1704 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 089 (t, 6H, -CH3, J = 6. 3 Hz) ; (massif, 44H, -CH2-) ; 1. 58-1.63 (m, 4H, -OCO-CH2-S-CH2-CH2-); 2. 64 (t, 4H, -OCO-CH2-S-CH2-CH2-, J=7. 4 Hz) ;3.26 (s, 4H, -OCO-CH2-S-CH2-) ; 4. 16-4.29 (massif, 5H,-CHaHb-CHCHaHb-).
Figure img00770001
EXEMPLE 3a : Préparation de 1-oléovl-3-paimitoylolycérol Le palmitate de glycérol (exemple 2b) ( 5.516 g ; 0. 017 mol) est dissous dans le dichlorométhane (500 ml) avant d'ajouter la dicyclohexylcarbodiimide (5. 165 g ; 0. 025 mol), la diméthylaminopyridine (3. 058 g ; 0. 025 mol) et l'acide oléique (4. 714 g ; 0. 017 mol). Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 24 heures. Le précipité de dicyclohexylurée est filtré, rincé au dichlorométhane et le filtrat est évaporé sous vide. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant CH2CI2) et permet d'obtenir le composé souhaité sous forme de solide blanc (rendement : 23%).
Rf (CH2CI2) : 0. 24 PF :30 C IR: vCO ester 1731 et 1710 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 087 (t, 6H, -CH3, J = 6. 5 Hz) ; (massif, 44H, -CH2-) ; 1. 62 (quint, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 4 Hz) ; 2. 01 (massif, 4H, -CH2-CH=CH-CH2-) ; 2. 36 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 3 Hz) ; 2. 465 (d, 1 H, OH (échangeable), J=4. 3 Hz) ; 4. 17 (massif, 5H,-CHaHb-CH-CHaHb-) ; 5. 34 (m, 4H, -CH2-CH=CHCH2-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 617 (M+Na+) ; (M+H non détectée) EXEMPLE 3h : Préparation du 1,3-diacétyl glycérol Le glycérol (30 g ; 0. 326 mol) est dissous dans le dichlorométhane (300 ml) avant d'ajouter la pyridine (79 ml ; 0. 977 mol) puis goutte à goutte l'anhydride acétique (61.5 ml ; 0. 651 mol). Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 48 heures. Le milieu est repris par le dichlorométhane. La phase organique est lavée avec HCI 1 N puis par une
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solution de K2C03 à 10% puis par l'eau saturée en sel, séchée sur MgS04, filtrée et portée à sec pour fournir une huile incolore qui est utilisée sans autre purification (rendement : 34%).
IR: vCO ester 1742 cm-1 EXEMPLE 3i : Préparation du 1.3-dioctanoyl glycérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide octanoïque. Le produit est obtenu sous forme d'une huile incolore (rendement 10%).
Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 3-7) : 0. 55 PF < 4 C IR: vCO ester 1742 et 1719 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 6H, -CH3, J = 6. 9 Hz) ; (massif, 16H, -CH2-) ; 1. 62 (massif, 4H, OCOCH2-CH2-) ; (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 4 Hz) ; 2.52(si, 1 H, OH (échangeable)) ; 4. 14 (massif, 5H, -CH2-CH-CH2-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 591 (M+Na+) ; M+39 = 607 (M+K+) ; (M+H non détectée) EXEMPLE 3i : Préparation du 1.3-diundécanovl- glvcérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide undécanoïque. Le produit est obtenu sous forme d'une poudre blanche (rendement 28%).
Rf (CH2CI2) : 0. 20 IR: vCO ester 1730 et 1705 cm-1 RMN (1H, CDC13) : 0. 89 (t, 6H, -CH3, J = 6.7 Hz) ; 1. 27 (massif, 24H, -CH2-) ;
1. 64 (m, 4H, OCOCH2-CH2-); 2. 36 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 4 Hz) ; (massif, 5H,-CH2-CH-CH2-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 451 (M+Na+) ; M+39 = 467 (M+K+) ; (M+H non détectée)
EXEMPLE 4 : Préparation de 1.2.3-triacvlqlvcérols
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Figure img00790001

EXEMPLE 4a : Préparation du 1.2.3-tritétradécvlthioacétvlqlvcérol Le glycérol (1 g, 10.86 mmol) est dissous dans le dichlorométhane (200 ml) avant d'ajouter la dicyclohexylcarbodiimide (7. 84 g, 38.01 mmol), la diméthylaminopyridine (4. 64 g, 38.01 mmol) et l'acide tétradécylthioacétique (9. 40 g, 32.58 mmol). Le mélange est laissé sous agitation à température ambiante. Après 48 heures de réaction, le précipité de dicyclohexylurée est filtré, lavé plusieurs fois au dichlorométhane et le filtrat est évaporé. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (CH2CI2-cyclohexane 4-6). Le 1,2,3-tritétradécylthioacétylglycérol est obtenu sous forme de poudre blanche (rendement 65%).
Rf (CH2CI2-Cyclohexane 7-3) : 0. 47 PF : 57 C IR: vCO ester 1738 et 1722 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 9H, -CH3, J = 6. 5 Hz) ; (massif, 66H, -CH2-) ; 1. 62 (m, 6H,-CH2-CH2-CH2-S-) ; 2. 63 (t, 6H, CH2-CH2-S-, J = 7. 3 Hz) ; (s, 6H, S-CH2-COO) ; (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et J=6 Hz) ; 4. 39 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et J=4.3 Hz) ; 5. 34 (m, 1 H, -CHaHb-CH- CHaHb-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 925 (M+Na+) ; M+39 = 941 (M+K+) ; 903 (M+H non détectée)
Figure img00790002

EXEMPLE 4b : Préparation du 1.2.3-tri-(4-dodécvlthio)butanovlglvcérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4a) à partir de l'acide 4-(dodécylthio)butanoïque (exemple 1 b) et du glycérol.
Rf (CH2Cl2-Cyclohexane 7-3) : 0. 43 IR: vCO ester 1738 et 1727 cm-1 RMN (1H, CDC13) : 0. 84-0.92 (t, 9H, -CH3, J = 6.3 Hz) ;1.22-1.44 (massif, 54H, -CH2-) ; 1. 50-1.64 (massif, 6H, -CH2-CH2-S-CH2-CH2-CH2-COO); 1. 83-1.97 (massif, 6H, -CH2-S-CH2-CH2-CH2-COO) ; 2. 42-2.59 (massif, 18H,-CH2-CH2CH2-S-CH2-CH2-CH2-COO ; 4. 11-4.20 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et J=5. 9 Hz) ; 4. 29-4.36 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et J=4.5 Hz) ; 5. 22- 5. 32 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-).
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SM (MALDI-TOF) : M+23 = 925 (M+Na+) ; M+39 = 941 (M+K+) ; 903 (M+H non détectée)
Figure img00800001

EXEMPLE 4c : Préparation du 1.2,3-tri-(6-décylthio)hexanovialycérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4a) à partir de l'acide 6-(décylthio)hexanoïque (exemple 1 c) et du glycérol.
Rf (CH2CI2-Cyclohexane 7-3) : 0. 43 IR: vCO ester 1730 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 85-0.92 (t, 9H, -CH3, J = 6. 5 Hz) ; (massif, 48H, -CH2-) ; 1. 51-1.72 (massif, 18H, -CH2-CH2-S-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH ; 2. 28-2.40 (massif, 6H, -CH2-S-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COO) ; 2. 45-2.57 (massif, 12H,-CH2-S-CH2-) ; 4. 10-4.20 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et J=6 Hz) ; 4. 25-4.38 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et J=4.3 Hz) ; 5. 22-5.32 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 925 (M+Na+) ; M+39 = 941 (M+K+) ; 903 (M+H non détectée)
Figure img00800002

EXEMPLE 4d : Préparation du 1.2.3-tritétradécvlsulfoxvacétvlglvcérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4a) à partir de l'acide tétradécylsulfoxyacétique (exemple 1 e) et du glycérol.
Rf (CH2CI2-Cyclohexane 7-3) : 0. 33 IR: vCO ester 1730 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 84-0.92 (t, 9H, -CH3, J = 6. 7 Hz) ; (massif, 66H, -CH2-) ; 1. 40-1.54 (massif, 6H,-CH2-CH2-SO-) ; 2. 82-2.89 (massif, 6H,-CH2CH2-SO-CH2-COO-) ; 3. 68 (s, 6H,-CH2-SO-CH2-COO) ; 4. 20-4.30 (massif, 5H, -CH2-CH-CH2-).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 951 ; = 974 (M+Na+) ; M+39 = 990 (M+K+)
Figure img00800003

EXEMPLE 4e : Préparation du 1.2.3-tri-(tétradécylsulfonyl)acétylglycérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4a) à partir de l'acide tétradécylsulfonylacétique (exemple 1g) et du glycérol.
Rf (CH2Cl2-Cyclohexane 7-3) : 0. 50
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IR: vCO ester 1741 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 84-0.92 (t, 9H, -CH3, J = 6.7 Hz) ; 1. 22-1.38 (massif, 60H, -CH2-) ; 1. 39-1.48 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S02-) ; 1. 81-1.94 (massif, 6H, -CH2-CH2-S02-) ; 3. 21-3.30 (t, 6H, -CH2-CH2-S02-CH2-COO, J=8 Hz) ; (s, 6H, -CH2-S02-CH2-COO) ; 4. 23-4.33 (massif, 5H,-CH2-CH-CH2-).
Figure img00810001
EXEMPLE 4f : Préparation du 1.2,3-tri-tétradécvlsélénoacétylglvcérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4a) à partir de l'acide tétradécylsélénoacétique (exemple 1d) et du glycérol.
Rf (CH2CI2-Cyclohexane 7-3) : 0. 74 IR: vCO ester 1737 et 1721 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 85-0.92 (t, 9H, -CH3, J = 6. 2 Hz) ; 1.23-1.46(massif, 66H, -CH2-) ; 1. 62-1.76 (massif, 6H,-CH2-CH2-CH2-Se-) ; 2. 72-2.79 (t, 6H, CH2-CH2- Se-, J=7. 4 Hz) ; (s, 6H, Se-CH2-COO) ; 4. 13-4.23 (massif, 5H,-CH2-CH- CH2-).
Figure img00810002
EXEMPLE 4g : Préparation du 1,3-dipalmitoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol Le 1,3-dipalmitoylglycérol (5. 64 g ; 9. 9 mmol ; 1eq), l'acide tétradécylthioacétique (5. 74 g ; 19. 8 mmol ; 2eq), la dicyclohexylcarbodiimide (4. 1 g ; 19. 8 mmol ; 2eq) et la diméthylaminopyridine (2. 42 g ; 19.8 mmol ; 2eq) sont mis en solution dans le dichlorométhane. Le mélange réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante pendant 3 jours. La dicyclohexylurée formée est filtrée et lavée plusieurs fois au dichlorométhane. Le filtrat est porté à sec. Le produit résiduel est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant : dichlorométhane/cyclohexane 4/6) (rendement : 80%).
Rf (CH2CI2-Cyclohexane 7-3) : 0. 32 PF : 60-62 C IR: vCO ester 1744 et 1730 cm-1 RMN (1H, CDC13) : 0. 86-0.91 (t, 9H, -CH3, J = 6. 6 Hz) ; (massif, 70H, -CH2-) ; 1. 57-1.64 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 4 Hz) ; (t, 2H, CH2-CH2-S-, J = 7. 4 Hz) ; (s, 2H, S-CH2-COO) ; (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et
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J=5. 8 Hz) ;4.30-4.36 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et J=4 Hz) ; 5. 26- 5. 33 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 861 (M+Na+) ; M+39 = 877 (M+K+) ; (M+H non détectée)
Figure img00820001

EXEMPLE 4h : Préparation du 1,3-dilinoléoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4g) à partir du 1,3-dilinoléoylglycérol (exemple 3b) et de l'acide tétradécylthioacétique (exemple 1a). Le produit est obtenu sous forme d'huile visqueuse incolore (rendement : 56%).
Rf (CH2CI2-Cyclohexane 7-3) : 0. 32 IR: vCO ester 1745cm-1 RMN (1H, CDC13) : 0. 82-0.93 (t, 9H, -CH3, J = 6. 6 Hz) ; (massif, 50H, -CH2-) ; 1. 52-1.70 (massif, 6H,-CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2); 1. 93-2.14 (massif, 8H, -CH2-CH=CH-CH2-) ; 2. 28-2.37 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 5 Hz) ; 2. 59-2.67 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J = 7. 4 Hz) ; 2.70-2.83(t, 4H,-CH2-CH=CH-CH2CH=CH-CH2-) ; 3. 22 (s, 2H, S-CH2-COO) ; (dd, 2H,-CHaHb-CH- CHaHb-, J=12 Hz et J=6.2 Hz); 4. 28-4.37 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et J=4 Hz) ; 5. 24-5.45 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 909 (M+Na+) ; M+39 = 925 (M+K+) ; (M+H non détectée)
Figure img00820002

EXEMPLE 4i : Préparation du 1.3-distéaroyl-2-tétradécylthioacétylalycérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4g) à partir du 1,3-distéaroylglycérol (composé 3c) et de l'acide tétradécylthioacétique (composé 1 a). rendement 41 % Rf (CH2CI2): 0. 32 IR: vCO ester 1744 et 1731 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 86-0.91 (t, 9H, -CH3, J = 6. 6 Hz) ; (massif, 78H, -CH2-) ; 1. 57-1.64 (massif, 6H,-CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 4 Hz) ; 2.60-2.66(t, 2H, CH2-CH2-S-, J = 7. 4 Hz) ; (s, 2H, S-CH2-COOH) ; (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et
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J=5. 8 Hz) ; 4. 30-4.36 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et J=4 Hz) ; 5. 26- 5. 32 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-).
Figure img00830001

EXEMPLE 4i : Préparation du 1.3-oléoyl-2-tétradécylthioacétylalycérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4g) à partir du 1,3-dioléoylglycérol (composé 3d) et de l'acide tétradécylthioacétique (composé 1 a).
Le produit est obtenu sous forme d'huile visqueuse incolore (rendement : 32%) Rf (CH2CI2-Cyclohexane 7-3) : 0. 50 IR: vCO ester 1746cm-1 RMN (1H, CDC13) : 0. 89 (t, 9H, -CH3, J = 6.4 Hz) ;1.31 (massif, 62H, -CH2-) ; 1. 60 (massif, 6H,-CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; (massif, 8H,-CH2- CH=CH-CH2-) ; 2. 33 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 3 Hz) ; 2.63 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J=7. 7 Hz) ; 3. 23 (s, 2H, S-CH2-COO) ; (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12. 4 Hz et J=6.4 Hz); 4. 33 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12. 4 Hz et J=4. 5 Hz) ; 5. 33 (massif, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb- et-CH2-CH=CH-CH2-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 913 (M+Na+) ; M+39 = 929 (M+K+) ; (M+H non détectée) EXEMPLE 4k : Préparation du 1.3-ditétradécanovl-2-tétradécvlthioacétvl- glycérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4g) à partir du 1,3-ditétradécanoylglycérol (composé 3e) et de l'acide tétradécylthioacétique (composé 1 a). (rendement : 28%).
Rf (CH2CI2-Cyclohexane 7-3) : 0. 30 PF : 60-62 C IR: vCO ester 1744 et 1730 cm-1 RMN (1H, CDC13) : 0. 87 (t, 9H, -CH3, J = 7. 2 Hz) ; 1.27(massif, 62H, -CH2-) ; 1.60 (massif, 6H,-CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; (t, 4H, OCOCH2CH2-, J=7.7 Hz) ; 2.63 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J = 7. 2 Hz) ; (s, 2H, S-CH2- COO); 4. 18 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et J=5.8 Hz) ; 4. 33 (dd, 2H,
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-CHaHb-CH-CHaHb-, J=11. 5 Hz et J=5.8 Hz); 5. 30 (m, 1 H, -CHaHb-CHCHaHb-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 805 (M+Na+) ; (M+H non détectée)
Figure img00840001

EXEMPLE 41 : Préparation du 1-palmitoyl-2.3-ditétradécylthioacétylglycérol Le 1-palmitate de glycérol (4. 804 g ; 0. 014 mol) est dissous dans le dichlorométhane (300 ml) avant d'ajouter la dicyclohexylcarbodiimide (7. 498 g ; 0. 036 mol), la diméthylaminopyridine (4. 439 g ; 0. 036 mol) et l'acide tétradécylthioacétique (8. 386 g ; 0. 029 mol). Le mélange réactionnel est placé sous agitation à température ambiante pendant 48 heures. Le précipité de dicyclohexylurée est filtré, lavé au dichlorométhane. Le filtrat est porté à sec. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane-cyclohexane 4-6) et donne le composé souhaité sous forme de poudre blanche (rendement 42%).
Rf (CH2CI2-Cyclohexane 7-3) : 0. 31 PF : 57-59 C IR: vCO ester 1736 et 1722 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 9H, -CH3, J = 6. 6 Hz) ; (massif, 68H, -CH2-) ; 1. 60 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 2. 33 (t, 2H, OCOCH2- CH2-, J=7 Hz) ; (t, 4H, CH2-CH2-S-, J = 8. 9 Hz) ; (s, 4H, S-CH2-COO) ; 4. 23 (m, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-) ; 4. 37 (m, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb) ; 5.31 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-) SM (MALDI-TOF) : M+23 = 893 (M+Na+) ; M+39 = 909 (M+K+) ; (M+H non détectée) EXEMPLE 4m : Préparation du 1-oléovl-3-palmitovl-2-
Figure img00840002

tétradécylthioacétvlqlycérol Le 3-oléoyl-1-palmitoylglycérol (2 g ; 0. 003 mol) est dissous dans le dichlorométhane (150 ml) avant d'ajouter la dicyclohexylcarbodiimide (1. 040 g ; 0. 005 mol), la diméthylaminopyridine (0. 616 g ; 0. 005 mol) et l'acide tétradécylthioacétique (1. 455 g ; 0. 005 mol). Le mélange est laissé sous agitation à température ambiante pendant 24 heures, Le précipité de dicyclohexylurée est filtré, rincé au dichlorométhane et le filtrat est concentré. Le
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résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant CH2CI2- cyclohexane 4-6) et permet d'obtenir le composé souhaité sous forme d'huile (rendement 49%).
Rf (CH2CI2-Cyclohexane 7-3) : 0. 45 PF < 4 C IR: vCO ester 1742cm-1 RMN (1H, CDCl3): 0. 89 (t, 9H, -CH3, J = 6. 5 Hz) ; (massif, 66H, -CH2-) ; 1. 60 (massif, 6H,-CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2); 2. 03 (massif, 4H,-CH2- CH=CH-CH2-) ; 2. 33 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 4 Hz) ; (t, 2H, CH2-CH2-S-, J = 7. 4 Hz) ; (s, 2H, S-CH2-COO) ; 4. 18 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12. 2 Hz et J=6.1 Hz); 4. 33 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12. 2 Hz et J=4. 4 Hz) ; 5. 32 (massif, 3H,-CHaHb-CH-CHaHb- et-CH2-CH=CH-CH2-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 887 (M+Na+) ; M+39 = 903 (M+K+) ; (M+H non détectée)
Figure img00850001

EXEMPLE 4n : Préparation du 1.3-dipalmitovl-2-docosvlthioacétvlglvcérol Le produit est préparé selon la procédure décrite (exemple 4g) à partir du 1,3-dipalmitoylglycérol (exemple 3a) et de l'acide docosylthioacétique (exemple 1 i).
Rendement : 77% Rf (CH2CI2-Cyclohexane 7-3) : 0. 32 IR: vCO ester 1745 et 1730 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 86-0.91 (t, 9H, -CH3, J = 6. 6 Hz) ; 1.10-1.45 (massif, 86H, -CH2-) ; 1. 57-1.64 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 2.29-2.34(t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7. 5 Hz) ; 2. 60-2.66 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J = 7. 4 Hz) ; (s, 2H, S-CH2-COO-) ; (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et J=5. 8 Hz) ; 4. 30-4.36 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et J=4 Hz) ; 5. 27- 5. 34 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-).
Figure img00850002
EXEMPLE 4o : Préparation du 1,3-ditétradécylthioacétyl-2-palmitoylalycérol Le produit est préparé selon la procédure décrite (exemple 4g) à partir du 1,3-ditétradécylthioacétylglycérol (exemple 3f) et de l'acide palmitique.
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Rendement : 36% PF : 59-61 C Rf (CH2CI2-Cyclohexane 7-3) : 0. 35 IR: vCO ester 1740 cm-1 RMN (1H, CDC13) : 0.89 (t, 9H, -CH3, J = 6. 56 Hz) ; (massif, 68H, -CH2-) ; 1. 55-1.65 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et -OCOCH2-CH2); 2. 34 (td, 2H, OCOCH2-CH2-, J = 7. 7 Hz et J = 1. 9 Hz) ; (td, 4H, CH2-CH2-S-, J = 7. 3 Hz et J = 1. 9 Hz) ; (s, 4H, S-CH2-COO-) ; (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J = 10. 4Hz et J = 4.6Hz) ; 4. 36 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J = 11. 9 Hz et J = 4.2 Hz) ; 5. 31 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 893 (M+Na+) ; M+39 = 909 (M+K+) ; (M+H non détectée)
Figure img00860001

EXEMPLE 4p : Préparation du 1,3-diacétvl-2-tétradécylthioacétvlalvcérol Le produit est préparé selon la procédure décrite (exemple 4g) à partir du 1,3-diacétylglycérol (exemple 3h) et de l'acide tétradécylthioacétique (exemple 1 a).
Rendement: 10% Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 3-7) : 0. 47 PF < 4 C IR: vCO ester 1748 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 9H, -CH3, J = 6. 9 Hz) ; (massif, 20H, -CH2-) ; 1. 60 (massif, 4H, -CH2-CH2-CH2-S-); 2. 09 (s, 6H, -OCOCH3) ; 2. 64 (t, 2H, CH2- CH2-S-, J = 7. 4 Hz) ; (s, 2H, S-CH2-COO) ; (dd, 2H,-CHaHb-CH- CHaHb-, J=12 Hz et J=5.8 Hz) ; 4. 34 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J=12 Hz et J=4 Hz) ; 5. 28 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 469 (M+Na+) ; M+39 = 485 (M+K+) ; (M+H non détectée)
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Figure img00870001

EXEMPLE 4a : Préparation du 1.3-dioctanovl-2-tétradécvlthioacétylalycérol Le produit est préparé selon la procédure décrite (exemple 4g) à partir du 1,3-dioctanoylglycérol (exemple 3i) et de l'acide tétradécylthioacétique (exemple 1 a).
Rendement : 88% Rf (CH2CI2 10) : 0.52 PF < 4 C IR: vCO ester 1745 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 9H, -CH3, J = 7. 0 Hz) ; (massif, 38H, -CH2-) ; 1. 60 (massif, 6H,-CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 2. 32 (t, 4H, OCOCH2- CH2-, J=7. 3 Hz) ; 2.63(t, 2H, CH2-CH2-S-, J = 7. 3 Hz) ; (s, 2H, S-CH2- COO); 4. 17 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J = 11. 9 Hz et J = 5.8 Hz) ; 4. 33 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J = 11. 9 Hz et J = 4.3 Hz) ; 5. 30 (m, 1 H, -CHaHb-CHCHaHb-).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 637 (M+Na+) ; M+39 = 653 (M+K+) ; (M+H non détectée) EXEMPLE 4r : Préparation du 1,3-diundécanoyl-2-
Figure img00870002

tétradécvlthioacétylglvcérol Le produit est préparé selon la procédure décrite (exemple 4g) à partir du 1,3-diundécanoylglycérol (exemple 3j) et de l'acide tétradécylthioacétique (exemple 1 a).
Rendement : 28% Rf (CH2CI2-cyclohexane 7-3) : 0. 16 IR: vCO ester 1738 et 1725 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 9H, -CH3, J = 6. 9 Hz) ; (massif, 50H, -CH2-) ; 1. 62 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2); 2. 33 (t, 4H, OCOCH2- CH2-, J=7.7 Hz) ; 2. 63 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J = 7. 3 Hz) ; (s, 2H, S-CH2- COO); 4. 20 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12. 1 Hz et J = 6.1 Hz) ; 4. 35 (dd, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12. 1 Hz et J = 4.5 Hz) ; 5. 29 (m, 1 H, -CHaHb-CHCHaHb-).
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SM (MALDI-TOF) : M+23 = 722 (M+Na+) ; M+39 = 738 (M+K+) ; (M+H non détectée) EXEMPLE 5 : Préparation des dérivés 2-aminoglycérol
Figure img00880001

EXEMPLE 5a : Préaaration du 1,3-hydroxy-2- tétradécvlthioacétamidopropane L'acide tétradécylthioacétique (2. 878 g ; 0.010 mol) et le 2-amino- 1,3-propanediol (1 g ; 0.011mol) sont placés dans un ballon et chauffés 190 C pendant 1 heure. Après refroidissement à température ambiante, le milieu est repris par du chloroforme et lavé à l'eau. La phase organique est séchée sur MgS04, filtrée puis évaporée pour fournir un résidu solide ocre. Ce résidu est placé sous agitation dans l'éther diéthylique pendant 12 heures. Le produit est isolé par filtration et fournit une poudre blanche (rendement : 6%).
Rf (CH2CI2-méthanol 9-1): 0. 60 PF : 95-97 C IR: vCO amide 1640 cm-1 RMN (1H, CDC13) : 0. 84-0.93 (t, 3H, -CH3, J = 6. 4 Hz) ; (massif, 22H, -CH2-) ; 1. 54-1.72 (m, 2H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2. 52-2.59 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J = 7.1 Hz) ; 2. 63 (si, 2H, OH) ; 3. 27 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 3. 77-3.96 (massif, 4H, -CH2-CH-CH2-) ; 3. 97-4.04 (m, 1H, - CH2-CH-CH2-) ; 7. 55 (d, 1H, -CONH-, J=6. 7 Hz).
SM (MALDI-TOF) : M+1=362 ; M+23 = 384 (M+Na+) ; M+39 = 400 (M+K+)
Figure img00880002

EXEMPLE 5b : Préparation du 1,3-ditétradécylthioacétyloxy-2m tétradécylthioacétamido-propane Le 2-tétradécylthioacétamidopropan-1,3-diol (1 g ; 2. 77 mmol) (exemple 5a) est dissous dans le dichlorométhane (180 ml) puis la dicyclohexycarbodiimide (1. 427 g ; 6. 91 mmol), la diméthylaminopyridine (0. 845 g ; 6. 91 mmol) et l'acide tétradécylthioacétique (1. 995 g ; 6. 91 mmol) (exemple 1a) sont ajoutés dans cet ordre. Le mélange réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante pendant 48 heures. Le précipité de dicyclohexylurée est filtré et lavé par du
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dichlorométhane et le filtrat est concentré. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane-cyclohexane 7-3). Le composé souhaité est obtenu sous forme de poudre blanche (rendement : 66%).
Rf (CH2Cl2) : 0.18 PF : 82-84 C IR: vCO ester 1715 et 1730 cm-1; vCO amide 1648 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 84-0.95 (t, 9H, -CH3, J = 6. 6 Hz) ; (massif, 66H, -CH2-) ; 1. 54-1.69 (massif, 6H,-CH2-CH2-CH2-S-) ; 2. 48-2.55 (t, 2H, CH2-CH2-SCH2-CONH-, J = 7.5 Hz) ; 2. 59-2.70 (t, 4H, CH2-CH2-S-CH2-COO-, J = 7. 2 Hz) ; 3. 24 (s, 6H, S-CH2-CO-) ; (massif, 4H, -CH2-CH-CH2-) ; 4. 47-4.60 (m, 1 H, - CH2-CH-CH2-) ; 7. 23 (d, 1 H, -CONH-, J=8.5Hz).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 924 (M+Na+) ; (M+1 non détectée) EXEMPLE 6 : Préparation des dérivés 2-thioglycérol
Figure img00890001

EXEMPLE 6a : Préparation de l'acide 2-(tétradécylthio)thiolacétique Préparation du 2-(tétradécylthio)fhioacétate de S-tiphényiméthyle Le triphénylméthylthiol (9. 58 g ; 35 mmol) est dissous dans le dichlorométhane avant d'ajouter la dicyclohexylcarbodiimide (7.15 g; 35 mmol), la diméthylaminopyridine (4. 24 g ; 35 mmol) et l'acide tétradécylthioacétique (10 g ; 35 mmol). Le mélange réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante pendant 24 heures. La dicyclohexylcarbodiimide est filtrée et rincée au dichlorométhane. Le filtrat est porté à sec. Le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane/cyclohexane 1/9).
Rendement : 30% Rf (CH2CI2-cyclohexane 2-8) : 0. 43 PF : 45-50 C IR: vCO ester 1689 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 3H, -CH3, J = 6. 4 Hz) ; (massif, 22H, -CH2-) ; 1. 51-1.54 (m, 2H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2. 47 (t, 2H, CH2-CH2-S-CH2-COS-, J = 7.1 Hz) ; 3. 30 (s, 2H, S-CH2-COS-) ; 7. 23 (massif, 15H, H aromatiques).
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Figure img00900001

Préparation de l'acide 2-(Letradé cytthio)thiolacé tlque Le 2-(tétradécylthio)thioacétate de S-triphénylméthyle (4.715 g ; 0. 009 mol) est ajouté à froid à une suspension d'acétate mercurique (5. 495 g ; 0.017mol) dans du dichlorométhane (150 ml). Le mélange réactionnel est laissé sous agitation pendant 18 heures. Le milieu est filtré sur célite et rincé par du dichlorométhane chaud. Le filtrat est évaporé et fournit un résidu poudreux qui est repris par de l'éthanol absolu et filtré. La concentration du filtrat conduit à une huile jaune qui est utilisée sans autre purification.
Figure img00900002
Rf (CH2CI2-méthanol 9-1 ) : 0.58 EXEMPLE 6b : Préparation du 1.3-ditétradécvlthioacétoxv2-iodo-propane Le 1,3-ditétradécylthioacétate de glycérol (2 g ; 3 mmol) est dissous dans le toluène (180 ml) avant d'ajouter l'imidazole (0. 538 g ; 8 mmol), la triphénylphosphine (2. 072 g ; 8 mmol) et l'iode (1. 604 g ; 6 mmol). Le mélange réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante. Après 20 heures de réaction, une solution saturée en Na2SO3 est ajoutée jusqu'à décoloration totale du milieu. Le milieu est décanté et la phase aqueuse extraite par du toluène. Les phases organiques sont groupées et lavées par une solution aqueuse saturée en NaCI. La phase organique est séchée sur MgS04, filtrée et le solvant est évaporé. Le résidu obtenu (4. 4 g) est purifié par chromatographie sur colonne Puriflash, (éluant dichlorométhane-cyclohexane 1-9 puis 3-7).
Rendement : 95% Rf (CH2CI2-cyclohexane 6-4) : 0. 62 PF:51-53 C RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 6H, -CH3, J = 6. 6 Hz) ; (massif, 44H, -CH2-) ; 1. 63 (massif, 4H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2. 66 (t, 4H, CH2-CH2-S-CH2-COO-, J = 7.4 Hz) ; 3. 26 (s, 4H, S-CH2-CO-) ; (massif, 5H- CH2-CH-CH2-)).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 765 (M+Na+) ; 781 (M+K+) (M+1 non détectée)
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EXEMPLE 6c : Préparation du 1,3-ditétradécylthioacétoxy-2-
Figure img00910001

(tétradécvlthiométhyl)carbonvlthiopropane Le 1,3-ditétradécylthioacétoxy-2-iodo-propane (200 mg ; 0. 27 mmol) (exemple 6b) et l'acide 2-(tétradécylthio)thiolacétique (82 mg ; 0.27mmol) (exemple 6a) sont dissous dans du THF distillé (30 ml). Le mélange réactionnel est refroidi dans un bain de glace avant d'ajouter l'hydrure de sodium (22 mg ; 0.54mmol).
Le milieu est laissé sous agitation à température ambiante. Après 48 heures, le NaH est hydrolysé et le THF évaporé. Le milieu est extrait par de l'acétate d'éthyle ; la phase organique est lavée par de l'eau, séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et évaporée. Le résidu huileux jaune obtenu (164 mg) est purifié par chromatographie courte sur gel de silice (éluant dichlorométhanecyclohexane 5-5) et permet d'obtenir le composé souhaité sous forme d'huile jaune.
Rf (CH2CI2-cyclohexane 5-5) : 0. 20 IR: vCO ester 1737 cm-1 RMN (1H, CDCl3): 0. 87 (t, 9H, -CH3, J = 6. 7 Hz) ; 1.26(massif, 66H, -CH2-) ; 1. 56-1.63 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2. 19 (s, 2H, S-CH2-COS-) ; 2. 65 (t, 4H, CH2-CH2-S-CH2-COO-, J = 7.5 Hz) ; 2. 87 (t, 2H, CH2-CH2-S-CH2-COS-, J = 4.6 Hz) ; 3. 22-3.26 (m, 1 H, - CH2-CH-CH2-) ; 3. 27 (s, 4H, S-CH2-COO-) ; 3. 97-4.02 (m, 2H,-CHaHb-CH-CHaHb-) ; 4. 46-4.51 (m, 2H,-CHaHb-CHCHaHb-).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 919 (M+H+)
Figure img00910002

EXEMPLE 7 : Préparation du 3-(tétradécylthioacétylamino)aropane-1,2-diol L'acide tétradécylthioacétique (exemple 1a) (14. 393 g ; 50 mmol) et le 3-amino- propane-1,2-diol (5 g ; 55mmol) sont placés dans un ballon et chauffés à 190 C pendant 1 heure. Le mélange réactionnel est ramené à température ambiante puis repris par du chloroforme et lavé une fois à l'eau. La phase organique est séchée sur MgS04 filtrée et portée à sec. Le résidu est placé sous agitation dans l'éther. Le produit est isolé par filtration.
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Rendement : 22%.
Rf (CH2CI2-MeOH 9-1): 0. 60 PF : 89-92 C IR: vNH et OH 3282 cm-1; vCOamide 1640 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 3H, -CH3, J = 6. 5 Hz) ; (massif, 22H, -CH2-) ; 1. 57 (m, 2H, -CH2-CH2-CONH-) ; 2. 54 (t, 2H, -CH2-CH2-CONH-, J = 7.6 Hz) ; 3. 27 (s, 2H, S-CH2-CONH-) ; (m, 2H, -CONH-CH2-CHOH-CH20H) ; 3. 58 (m, 1 H, -CONH-CH2-CHOH-CH20H) ;3.81 (m, 2H, -CONH-CH2-CHOH-CH20H) ; 7. 33 (si, 1 H, -CONH-).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 362 (M+H) ; M+23 = 385 (M+Na+) ; M+39 = 400 (M+K+)
Figure img00920001

EXEMPLE 8 : 3-(Palnlitoylamino)propane-1,2-diol Ce composé est synthétisé selon la procédure précédemment décrite (exemple 7) à partir du 3-amino-propane-1,2-diol et de l'acide palmitique.
Rendement : 86% Rf (CH2CI2-MeOH 9-1) : 0.50 IR: vNH et OH 3312 cm-1; vCOamide 1633 cm-1 PF: 104-108 C RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 3H, -CH3, J = 6. 5 Hz) ; (massif, 24H, -CH2-) ; 1.64 (m, 2H, -CH2-CH2-S-) ; 2. 24 (m, 2H, -CH2-CH2-CONH-) ; 3. 43 (m, 2H, -CONH-CH2-CHOH-CH20H) ; 3. 55 (m, 2H, -CONH-CH2-CHOH-CH20H) ; 3. 78 (m, 1 H, -CONH-CH2-CHOH-CH20H) ; 5. 82 (si, 1 H, -CONH-).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 330 (M+H) EXEMPLE 9: Préparation du 1-tétradécvlthioacétvlamino-2,3- (dipalmitovloxv)propane Le 3-(tétradécylthioacétylamino)propane-1,2-diol (1 g ; 2. 77 mmol) (exemple 7) est dissous dans le dichlorométhane (200 ml) puis la d icyclohexylcarbod iim ide (1. 426 g ; 6. 91 mmol), la diméthylaminopyridine (0. 845 g ; 6. 91 mmol) et l'acide
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palmitique (1. 773 g ; 6. 91 mmol) sont ajoutés. Le mélange est laissé sous agitation à température ambiante pendant 48 heures. Le précipité de dicyclohexylurée est filtré et lavé au dichlorométhane. Le filtrat est évaporé sous vide. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane-cyclohexane 6-4) (rendement : 28%).
Rf (CH2CI2-cyclohexane 7-3) : 0. 28 PF : 73-75 C IR: vNH 3295 cm-1; COester 1730 cm-1; vCOamide 1663 cm-1 RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 9H, -CH3, J = 6. 5 Hz) ; (massif, 70H, -CH2-) ; 1. 57 (massif, 6H,-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 2. 33 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J = 7. 3 Hz) ; (t, 2H, CH2-CH2-S-, J = 7. 3 Hz) ; (s, 2H, S-CH2-CONH-) ; 3. 47 (m, 1 H, -CONH-CHaHb-CH-CHcHd-) ;3.62 (m, 1 H, -CONH-CHaHb-CHCHcHd-) ; 4. 12 (dd, 1 H, -CHaHb-CH-CHcHd-, J=12.1 Hz et J=5.7 Hz) ; 4. 36 (dd, 1 H, -CHaHb-CH-CHcHd-, J = 12. 1 Hz et J = 4.4 Hz) ; 5. 15 (m, 1 H, -CHaHb-CHCHaHb-) ; 7. 20 (m, 1 H, -NHCO-).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 838 (M+H) ; M+23 = 860 (M+Na+) ; M+39 = 876 (M+K+)
Figure img00930001

EXEMPLE 10: Préparation du 3-tétradécvlthioacétvlamino-1.2- (ditétradécylthioacétyloxy)propane Ce composé est synthétisé selon la procédure précédemment décrite (exemple 9) à partir du 3-(tétradécylthioacétylamino)propane-1,2-diol (exemple 7) et de l'acide tétradécylthioacétique (exemple 1 a).
Rendement: 41 % Rf (CH2CI2) : 0. 23 IR: vNH 3308 cm-1; COester 1722 et 1730 cm-1; vCOamide 1672 cm-1 PF : 65-67 C RMN (1H, CDC13) : 0. 89 (t, 9H, -CH3, J = 6. 4 Hz) ; (massif, 66H, -CH2-) ; 1. 59 (massif, 6H, -CH2-CH2-S-); 2. 53 (t, 2H,-CH2-CH2-S-CH2-CONH-, J = 7. 3 Hz) ; (t, 4H, CH2-CH2- S-CH2-COO-, J = 7. 3 Hz) ; (s, 4H, S-CH2-COO-) ; 3. 24 (s, 2H, S-CH2-CONH-) ; (m, 1 H, -CONH-CHaHb-CH-
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CHcHd-); 3. 67 (m, 1 H, -CONH-CHaHb-CH-CHcHd-) ; 4. 22 (dd, 1 H, -CHaHbCH-CHcHd-, J=12. 2 Hz et J=5.4 Hz); 4. 36 (dd, 1 H, -CHaHb-CH-CHcHd-, J = 12. 2 Hz et J = 3.9 Hz) ; 5. 19 (m, 1H, -CHaHb-CH-CHaHb-) ; 7. 18 (m, 1H, -NHCO-).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 902 (M+H) ; M+23 = 924 (M+Na+) ; M+39 = 940 (M+K+) EXEMPLE 11: Préparation du 3-palmitovlamino-1.2-
Figure img00940001

(ditétradécylthioacétvloxy)aroaane Ce composé est synthétisé selon la procédure précédemment décrite (exemple 9) à partir du 3-(palmitoylamino)propane-1,2-diol (exemple 8) et de l'acide tétradécylthioacétique (exemple 1 a).
Rendement : 8% Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 2-8) : 0. 33 IR: vNH 3319 cm-1; COester 1735 cm-1; vCOamide 1649 cm-1 PF : 82-83 C RMN (1H, CDC13) : 0. 89 (t, 9H, -CH3, J = 6.4 Hz) ; 1. 26 (massif, 68H, -CH2-) ; 1. 60 (massif, 6H, -CH2-CH2-S- et -CH2-CH2-CONH-) ; 2. 18 (t, 2H,-CH2-CH2CONH-, J=6.8 Hz) ; 2. 64 (massif, 4H, CH2-CH2- S-CH2-COO-) ; 3. 22 (s, 2H,-SCH2-COO-); 3. 24 (s, 2H, -S-CH2-COO-); 3. 47 (m, 1H, -CONH-CHaHb-CHCHcHd-); 3. 62 (m, 1H, -CONH-CHaHb-CH-CHcHd-) ; 4. 23 (dd, 1H, -CHaHbCH-CHcHd-, J=11.9 Hz et J=5.6 Hz); 4. 36 (dd, 1 H, -CHaHb-CH-CHcHd-, J= 12.2 Hz et J=4 Hz); 5. 15 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-) ; 5. 85 (m, 1 H, -NHCO-).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 870 (M+H)
Figure img00940002

EXEMPLE 12 : Préparation du 1,3-di(oléoviamino)propan-2-ol L'acide oléique (5. 698 g ; 0. 020 mol) et le 1,3-diaminopropan-2-ol (1 g ; 0. 011 mol) sont placés dans un ballon et chauffés à 190 C pendant 2 heures. Le milieu réactionnel est ramené à température ambiante puis repris par du chloroforme et
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lavé par de l'eau. La phase aqueuse est extraite par du chloroforme et les phases organiques sont groupées, séchées sur sulfate de magnésium puis filtrées et évaporées à sec pour fournir un résidu huileux noir (6. 64 g) qui est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane-méthanol 99-1 ). Le produit obtenu est ensuite lavé par de l'éther et filtré.
Rendement : 23% Rf (CH2Cl2-MeOH 95-5) : 0. 43 IR: vNH 3306 cm-1; vCOamide 1646 et 1630 cm-1 PF : 88-92 C RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 6H, -CH3, J = 6. 2 Hz) ; (massif, 68H, -CH2-) ; 1. 61-1.66 (massif, 4H,-CH2-CH2-CONH-) ; 1. 98-2.02 (massif, 8H,-CH2-CH=CH- CH2-) ; 2. 23 (t, 4H, -CH2-CH2-CONH-, J = 7. 0 Hz) ; (massif, 4H, -CONH-CH2-CH-CH2-) ; 3. 73-3.80 (m, 1H, -CONH-CH2-CH-CH2-) ; 5. 30-5.41 (massif, 4H, -CH2-CH=CH-CH2-) ; 6. 36 (massif, 2H,-NHCO-).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 619 (M+H+) ; M+23 = 641 (M+Na+) ; M+39 = 657 (M+K+)
Figure img00950001

EXEMPLE 13 : Préparation du 1.3-dUtétradécvlthioacétvlamino)propan-2-ol Ce composé est synthétisé selon la procédure précédemment décrite (exemple 12) à partir du 1,3-diaminopropan-2-ol et de l'acide tétradécylthioacétique (exemple 1 a).
Rendement : 94% Rf (CH2CI2-MeOH 95-5) : 0. 44 IR: vNH 3275 cm-1; vCOamide 1660 et 1633 cm-1 PF : 101-104 C RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 6H, -CH3, J = 6. 3 Hz) ; (massif, 44H, -CH2-) ; 1. 57-1.62 (massif, 4H,-CH2-CH2-S-CH2-CONH-) ; 2. 55 (t, 4H,-CH2-CH2-S-CH2- CONH-, J = 7. 2 Hz) ; (s, 4H,-S-CH2-CONH-) , 3. 32-3.36 (massif, 2H, -CONH-CHaHb-CH-CHaHb-NHCO-) ; 3. 43-3.49 (massif, 2H,-CONH-CHaHb-CHCHaHb-NHCO-) ; 3. 82-3.84 (m, 1H, -CONH-CH2-CH-CH2-NHCO-) ; 7. 44 (si, 2H, -NHCO-).
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SM (MALDI-TOF) : M+23 = 653 (M+Na+) ; M+39 = 669 (M+K+) EXEMPLE 14 : Préparation du 1,3-di(stéaroylamino)propan-2-ol Ce composé est synthétisé selon la procédure précédemment décrite (exemple 12) à partir du 1,3-diaminopropan-2-ol et de l'acide stéarique.
Rendement : 73% Rf (CH2CI2-MeOH 95-5) : 0. 28 IR: vNH 3306 cm-1; vCOamide 1647 et 1630 cm-1 PF: 123-130 C SM (MALDI-TOF) : M+23 = 645 (M+Na+)
Figure img00960001

EXEMPLE 15 : Préparation du 1.3-di(tert-butvloxvcarbonylamino)propan-2- ol Le 1,3-diaminopropan-2-ol (3 g ; 0. 033 mol) est dissous dans du méthanol (300 ml) avant d'ajouter la triéthylamine (33 ml et goutte à goutte) et le dicarbonate de di-tert-butyle [(BOC)20] où BOC correspond à tertbutyloxycarbonyle (21. 793 g ; 0. 100 mol). Le milieu réactionnel est chauffé à 40-50 C pendant 20 min puis laissé sous agitation à température ambiante pendant une heure. Après évaporation du solvant, l'huile incolore résiduelle est purifiée par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane-méthanol 95-5). Le produit est obtenu sous forme d'huile incolore qui cristallise lentement.
Rendement : quantitatif Rf (CH2CI2-MeOH 95-5) : 0. 70 IR: vNH 3368 cm-1; vCOcarbamate 1690 cm-1 PF : 98-100 C RMN (1H, CDC13) : 1. 45 (massif, 18H, -CH3- (BOC)) ; 3. 02 (si, 1H, OH) ; 3. 15- 3. 29 (massif, 4H, BOCNH-CH2-CH-CH2-NHBOC) ; 3. 75 (m, 1 H, BOCNH-CH2CH-CH2-NHBOC) ; 5. 16 (massif, 2H,-NHBOC).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 291 (M+H+) ; M+23 = 313 (M+Na+) ; M+39 = 329 (M+K+)
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Figure img00970001

EXEMPLE 16: Préparation du 1,3-di(tert-butyloxycarbonviaminol-2- (tétradécvlthioacétvloxv)propane Le 1,3-(di-fert butoxycarbonylamino)-propan-2-ol (exemple 15) (1 g ; 3.45 mmol), l'acide tétradécylthioacétique (exemple la) (0. 991 g ; 3. 45 mmol) et la diméthylaminopyridine (0. 042 g ; 0. 34 mmol) sont dissous dans le dichlorométhane (40 ml) à 0 C puis la dicyclohexylcarbodiimide (0. 709 g ; 3. 45 mmol), diluée dans le dichlorométhane, est ajoutée goutte à goutte. Le milieu réactionnel est laissé sous agitation à 0 C pendant 30 min puis est ramené à température ambiante. Après 20 heures de réaction, le précipité de dicyclohexylurée est filtré. Le filtrat est porté à sec. Le résidu huileux est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane-cyclohexane 5-5 puis dichlorométhane-acétate déthyle 98-2).
Rendement : 52% Rf (CH2CI2-acétate d'éthyle 95-5) : 0. 43 IR: vNH 3369 cm-1; vCOcarbamate 1690 cm-1; vCOester 1719 cm-1 PF : huile incolore RMN (1H, CDCI3) : 0. 89 (t, 3H, CH3, J=6. 3 Hz) ; 1. 26 (massif, 22 H,-CH2-) ; 1. 45 (massif, 18H, -CH3- (BOC)) ; 1. 56-1.66 (m, 2H, -CH2-CH2-S-CH2-CO) ; 2. 64 (t, 2H,-CH2-CH2-S-CH2-CO, J=7. 5 Hz); 3. 20 (s, 2H, CH2-S-CH2-CO ); 3. 35 (massif, 4H, BOCNH-CH2-CH-CH2-NHBOC) ; (m, 1 H, BOCNH-CH2-CH- CH2-NHBOC) ; 5. 04 (massif, 2H,-NHBOC).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 583 (M+Na+) ; M+39 = 599 (M+K+)
Figure img00970002

EXEMPLE 17: Préparation du 1,3-diamino-2-(tétradécvlthioacétvloxv) propane Le 1,3-(ditert-butoxycarbonylamino)-2-tétradécylthioacétyloxypropane (exemple 16) (0. 800 g ; 1.43mmol) est dissous dans de l'éther diéthylique (50 ml) saturé en HCI g. Le milieu réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante
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pendant 20 heures . Le précipité formé est ensuite filtré et lavé par de l'éther. Le produit est obtenu sous forme de dichlorhydrate.
Rendement : 88% Rf (CH2CI2-MeOH 7-3) : 0. 37 IR: vNH2 3049 et 3099cm-1; vCOester 1724 cm-1 PF : 224 C (décomposition) RMN (1H, CDC13) : 0. 86 (t, 3H, CH3, J = 6.3 Hz) ; 1. 24 (massif, 22 H, -CH2-) ; 1. 48-1.55 (m, 2H, -CH2-CH2-S-CH2-CO) ; 2. 57 (t, 2H, -CH2-CH2-S-CH2-CO, J = 7.2Hz) ; 3. 16 (massif, 4H, BOCNH-CH2-CH-CH2-NH) ; (s, 2H, CH2-S- CH2-CO) ; 5. 16 (m, 1H, BOCNH-CH2-CH-CH2-NH) ; 8. 43 (massif, 6H, -NH2.HCI).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 361 (M+H+) ; M+23 = 383 (M+Na+) ; M+39 = 399 (M+K+)
Figure img00980001

EXEMPLE 18: Préparation du 1,3-ditétradéevithioacétylamino-2m (tétradécvlthioacétvloxv)propane Le dichlorhydrate de 1,3-diamino-2-tétradécylthioacétyloxypropane (exemple 17) (0. 400 g ; 0. 92 mmol) et l'acide tétradécylthioacétique (exemple 1a) (0. 532 g ; 1.84 mmol) sont dissous dans le dichlorométhane (50 ml) à 0 C avant d'ajouter la triéthylamine (0. 3 ml), la dicyclohexylcarbodiimide (0. 571 g ; 2. 77 mmol) et l'hydroxybenzotriazole (HOBT) (0. 249 g ; 1.84 mmol). Le milieu réactionnel est laissé sous agitation à 0 C pendant 1 heure puis ramené à température ambiante pendant 48 heures. Le précipité de dicyclohexylurée est filtré et rincé par du dichlorométhane. Le filtrat est évaporé sous vide. Le résidu obtenu (1.40 g) est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane 10 puis dichlorométhane-acétate d'éthyle 9-1).
Rendement : 74% Rf (CH2CI2-acétate d'éthyle 8-2) : 0. 25 IR: vNH 3279 et 3325-1; vCOester 1731 cm-1; vCOamide 1647 et 1624 cm-1 PF : 87-89 C RMN (1H, CDC13) : 089 (t, 9H, CH3, J = 6.6 Hz) ; 1. 26 (massif, 66H, -CH2-) ; 1.55- 1. 60 (massif, 6H, -CH2-CH2-S-CH2-CO) ; 2. 55 (t, 4H,-CH2-CH2-S-CH2-CONH-,
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J=7. 2 Hz) ; 2. 65 (t, 2H,-CH2-CH2-S-CH2-COO-, J = 7. 2 Hz) ; (s, 2H, -CH2- S-CH2-COO-) ; 3. 25 (s, 4H, -CH2-S-CH2-CONH-) ; 3. 40-3.49 (m, 2H,-CONHCHaHb-CH-CHaHb-NHCO-) ; 3. 52-3.61 (m, 2H, -CONH-CHaHb-CH-CHaHbNHCO-); 4. 96 (m, 1 H, -CONH-CH2-CH-CH2-NHCO-); 7. 42 (massif, 2H, -NHCO-).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 901 (M+H+) ; M+23 = 923 (M+Na+) ; M+39 = 939 (M+K+) EXEMPLE 19: Préparation du 1,3-dioléoylamino-2-
Figure img00990001

(tétradécylthioacétyloxy)propane Le produit est obtenu selon la procédure décrite (exemple 18) à partir du dichlorhydrate de 1,3-diamino-2-tétradécylthioacétyloxypropane (exemple 17) et de l'acide oléique.
Rendement : 15% Rf (CH2CI2-acétate d'éthyle 8-2) : 0. 38 IR: vNH 3325-1; vCOester 1729 cm-1; vCOamide 1640 et 1624 cm-1 PF : 57-59 C RMN (1H, CDCb) : 0. 89 (t, 9H, CH3, J = 6.6 Hz) ; 1. 26 (massif, 62H, -CH2-) ; 1. 59-1.74 (massif, 6H, -CH2-CH2-S-CH2-CO) ; 1. 92-2.03 (massif, 8H, -CH2- CH=CH-CH2-) ; 2. 22 (t, 4H,-CH2-CH2-S-CH2-CONH-, J = 7.2 Hz) ; 2. 65 (t, 2H, -CH2-CH2-S-CH2-COO-, J=7.4 Hz) ;3.19 (s, 2H, -CH2-S-CH2-COO-) ; 3. 25-3.34 (m, 2H, -CONH-CHaHb-CH-CHaHb-NHCO-) ; 3. 56-3.65 (m, 2H,-CONH-CHaHbCH-CHaHb-NHCO-) ; 4. 87 (m, 1 H, -CONH-CH2-CH-CH2-NHCO-) ; 5. 34 (massif, 4H, -CH2-CH=CH-CH2-) ; 6. 27 (massif, 2H,-NHCO-).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 889 (M+H+) ; M+23 = 912 (M+Na+) EXEMPLE 20: Préparation du 1.3-ditétradécvlthioacétvlamino-2-
Figure img00990002

(tétradécylthioacétylthio)propane
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Figure img01000001

Préparation du 1, 3-di(tert -butyloxycarbon ylamino)- 2-(p-toluènesulfonyloxy) propane (exemple 20a) Le 1,3-di(tert-butyloxycarbonylamino)propan-2-ol (exemple 15) (2.89 g ; 10 mmol) et la triéthylamine (2. 22 ml ; 16 mmol) sont dissous dans du dichlorométhane anhydre (100 ml). Le mélange réactionnel est refroidi dans un bain de glace avant d'ajouter goutte à goutte le chlorure de tosyle (2. 272 g ; 12 mmol) dissous dans du dichlorométhane (30 ml). Après addition, le milieu réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante pendant 72 heures.
1 équivalent de chlorure et 1.6 de triéthylamine (TEA) sont ajoutés au bout de 48 heures. De l'eau est ajoutée pour stopper la réaction et le milieu est décanté. Le phase organique est lavée plusieurs fois à l'eau. Les phases aqueuses sont groupées et reextraites par du dichlorométhane. La phase organique est séchée sur MgS04 , filtrée et le solvant évaporé. Le résidu obtenu (6. 44 g) est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane 10 puis dichlrométhane-méthanol 99-1) et permet d'obtenir le composé souhaité sous forme de solide blanc.
Rendement : 48% Rf (CH2CI2-MeOH 98-2) : 0. 70 IR: vNH 3400 cm-1; vCOester 1716 cm-1; vCOcarbamate 1689 cm-1 PF : 104-111 C RMN (1H, CDC13) : 1. 42 (s, 18H, CH3 (BOC)) ; 2. 46 (s, 3H, CH3 ) ; 3. 22 et 3.41 (massif, 4H, BOCNH-CH2-CH-CH2-NHBOC) ; (m, 1 H, BOCNH-CH2-CH- CH2-NHBOC) ; 5. 04-5.11 (massif, 2H, -NHBOC) ; 7. 36 (d, 2H, aromatiques, J = 8.5 Hz) ; 7. 36 (d, 2H, aromatiques, J = 8. 5 Hz).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 467 (M+Na+) ; M+39 = 483 (M+K+) Préparation du 1,3-di(tert-butyloxycarbonylamino)-2-acétylthiopropane (exemple 20b)
Figure img01000002

Le 1,3-(ditert-butoxycarbonylamino)-2-(p-toluènesulfonyloxy)propane (exemple 20a) (0. 500 g ; 1.12mmol) et le thioacétate de potassium (0. 161 g ; 1.41mmol)
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sont dissous dans l'acétone et le milieu est porté à reflux pendant 48 heures. Un équivalent de thioacétate de potassium est ajouté après 24 heures de reflux. La réaction est ramenée à température ambiante puis le solvant est évaporé. Le résidu est repris par de l'éther diéthylique et filtré sur célite. Le filtrat est évaporé.
Le produit obtenu (0. 48 g) est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane-acétate d'éthyle 98-2) et permet d'obtenir le produit souhaité sous forme de solide ocre.
Rendement : 84% Rf (CH2CI2-MeOH 98-2) : 0. 45 IR: vNH 3350 cm-1; vCOester 1719 cm-1; vCOcarbamate 1691 cm-1 PF : 93-96 C RMN (1H, CDCI3) : 1. 45 (s, 18H, CH3 (BOC)) ; 2. 34 (s, 3H, CH3 ) ; 3. 23-3.32 (m, 2H, BOCNH-CHaHb-CH-CHaHb-NHBOC) ; (m, 2H, BOCNH-CHaHb-CH- CHaHb-NHBOC) ; 3. 58-3.66 (m, 1 H, BOCNH-CH2-CH-CH2-NHBOC) ; 5. 22 (massif, 2H,-NHBOC).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 371 (M+Na+).
Préparation du 1,3-di(tert-butyloxycarbonylamino)-2-mercaptopropane (exemple 20c) A une solution de KOH 20% dans le méthanol (2. 14 ml ; 12. 4 mmol), désoxygénée par un courant d'azote, est ajouté le 1,3-di(tertbutoxycarbonylamino)-2-(acétylthio)propane (exemple 20b) (0. 380 g ; 1.2 mmol) dilué dans du méthanol (10 ml). Le mélange réactionnel est maintenu sous azote et sous agitation à température ambiante pendant 20 heures. Le milieu est alors acidifié (pH=6) par de l'acide acétique puis les solvants sont évaporés sous vide.
Le résidu est repris par de l'eau et extrait par du chloroforme. Les phases organiques sont groupées, séchées sur MgS04 puis filtrées et évaporées pour donner le produit souhaité sous forme de solide blanc qui est rapidement remis en réaction.
Rendement : 90% Rf (CH2Cl2-MeOH 98-2) : 0. 56
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IR: vNH 3370 cm-1; vCOcarbamate 1680 cm-1 RMN (1H, CDC13) : 1. 46 (s, 18H, CH3 (BOC)) ; 2. 98-3.12 (massif, 3H, BOCNHCHaHb-CH-CHaHb-NHBOC et BOCNH-CH2-CH-CH2-NHBOC) ; 3. 46-3.50 (m, 2H, BOCNH-CHaHb-CH-CHaHb-NHBOC) ; 5. 27 (massif, 2H,-NHBOC).
Figure img01020001
Préparation du 1, 3-di(tert-butyloxycarbonylamino)- 2-(tétradécylthioacétylthio) propane (exemple 20d) Le 1,3-[di(tert-butoxycarbonylamino)]-2-mercaptopropane (exemple 20c) (0. 295 g ; 0. 963 mmol) est dissous dans le dichlorométhane (40 ml) avant d'ajouter la dicyclohexylcarbodiimide (0. 199 g ; 0. 963 mmol), la diméthylaminopyridine (0. 118 g ; 0. 963 mmol) et l'acide tétradécylthioacétique (exemple 1a) (0. 278 g; 0.963mmol). Le mélange réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante. Après 20 heures de réaction, le précipité de dicyclohexylurée est filtré, rincé au dichlorométhane et le filtrat est évaporé. Le résidu obtenu (0. 73 g) est purifié par colonne puriflash : Si 40/63U avec l'éluant dichlorométhane 10 et permet d'obtenir le composé souhaité sous forme de poudre blanche.
Rendement : 72% Rf (CH2CI2-acétate d'éthyle 95/5) : 0. 29 IR: vNH 3328 cm-11; vCO thioester 1717 cm-1; vCO carbamate 1687 cm-1 PF : 47-51 C RMN (1H, CDCI3) : 0. 88 (t, 9H, CH3, J = 6.1 Hz) ; 1. 26 (massif, 22H,-CH2-) ; 1. 44 (s, 18H, CH3 (BOC)); 1. 53-1.65 (m, 2H, -CH2-CH2-S-CH2-CO) ; 2. 59 (t, 2H, -CH2-CH2-S-CH2-COS-, J = 7.8 Hz); 3. 21-3.30 (m, 2H, BOCNH-CHaHb-CH- CHaHb-NHBOC) ; 3. 40 (s, 2H, CH2-S-CH2-COS-) ; (m, 2H, BOCNH- CHaHb-CH-CHaHb-NHBOC) ; 3. 62-3.65 (m, 1H, BOCNH-CH2-CH-CH2-NHBOC) ; 5. 24 (massif, 2H,-NHBOC).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 599 (M+Na+) ; M+39 = 615 (M+K+)
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Préparation du 1,3-diamino-2-(tétradécylthioacétylthio)propane (exemple 20e)
Figure img01030001

Le 1,3-[di(tert-butoxycarbonylamino)]-2-tétradécylthioacétylthiopropane (exemple 20d) (0. 300 g ; 0.52mmol) est dissous dans l'éther saturé en HCI gaz (55 ml). Le mélange est laissé sous agitation à température ambiante. Après 96 heures de réaction, le précipité formé est filtré, rincé plusieurs fois à l'éther diéthylique et séché pour donner le composé souhaité sous forme de dichlorhydrate (poudre blanche).
Rendement : 59% Rf (CH2CI2-MeOH 9-1): 0. 11 IR: vNH.HCI 2700-3250 cm-1; vCO thioester 1701 cm-1 PF : 181 C (décomposition) RMN (1H, CDCI3) : 0.86 (t, 9H, CH3, J = 6 Hz) ; (massif, 22H, -CH2-) ; 1. 49- 1. 54 (m, 2H, -CH2-CH2-S-CH2-CO) ; 2. 59 (m, 2H, -CH2-CH2-S-CH2-COS-); 2. 80-2.84 (m, 1 H, BOCNH-CHaHb-CH-CHaHb-NHBOC) ; 3. 03-3.09 (m, 1 H, BOCNH-CHaHb-CH-CHaHb-NHBOC) ; 3. 14 (s, 2H, CH2-S-CH2-COS-) ; 3. 27-3.38 (m, 2H, BOCNH-CHaHb-CH-CHaHb-NHBOC); 3. 86-3.90 (m, 1 H, BOCNH-CH2CH-CH2-NHBOC) ; 8. 21 et 8. 52 (2m, 2H+4H, NH.HCI).
Figure img01030002
Préparation du 1, 3-ditétradécylthioacétylamino-2 -(té tra dé cylthioa cétylthio ) propane (exemple 20) Le dichlorhydrate de 1,3-diamino-2-tétradécylthioacétylthiopropane (exemple 20e) (100 mg ; 0. 225 mmol) et l'acide tétradécylthioacétique (exemple 1a) (130 mg ; 0. 450 mmol) sont dissous dans le dichlorométhane (30 ml) à 0 C avant d'ajouter la triéthylamine (68 l), la dicyclohexylcarbodiimide (139 mg ; 0. 675 mmol) et hydroxybenzotriazole (61 mg ; 0. 450 mmol). Le milieu réactionnel est laissé sous agitation à 0 C pendant 1 heure puis à température ambiante pendant 48 heures. Le précipité de dicyclohexylurée est filtré et rincé par du dichlorométhane et le filtrat est évaporé. Le résidu obtenu (430 mg) est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane-acétate d'éthyle 95-5) et permet d'obtenir le composé souhaité sous forme de poudre blanche.
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Rendement : 82% Rf (CH2CI2-MeOH 98-2) : 0. 54 IR: vCO thioester 1660 cm-1; vCO amide 1651 cm-1 PF : 83-85 C RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 9H, CH3, J = 6.6 Hz); 1.26 (massif, 66H, -CH2-) ; 1. 56-1.62 (massif, 62H, -CH2-CH2-S-CH2-CO) ; 2. 56 (t, 4H,-CH2-CH2-S-CH2CONH-, J = 7.5 Hz) ;2.61 (t, 2H,-CH2-CH2-S-CH2-COS-, J = 7 Hz) ; 3. 26 (s, 4H, CH2-S-CH2-CONH-) ; 3. 42 (s, 2H, CH2-S-CH2-COS-) ; (m, 2H, -CONH-CHaHb-CH-CHaHb-NH-CO); 3. 55-3.61 (m, 2H, -CONH-CHaHb-CHCHaHb-NHCO-); 3. 70-3.71 (m, 1 H, BOCNH-CH2-CH-CH2-NHBOC) ; 7. 58-7.62 (m, 2H, NHCO).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 917 (M+H+) ; M+23 = 939 (M+Na+) EXEMPLE 21: Préparation du 1-tétradécvlthioacétvlamino-2.3-
Figure img01040001

di(tétradécylthioacétylthio)propane Préparation du 1-(tert-butyloxycarbonylamino)-propane-2.3-diol (exemple 21a) Le 1,3-diaminopropan-2-ol (5 g ; 55mmol) est dissous dans le méthanol (200 ml) avant d'ajouter goutte à goutte la triéthylamine (0. 5 ml par mmol d'amine) et l'anhydride de boc (17.97 g; 82 mmol). Le milieu réactionnel est chauffé à 40-50 C pendant 20 min puis laissé sous agitation à température ambiante pendant une heure. Après évaporation du solvant, l'huile incolore résiduelle est purifiée par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane-méthanol 95-5) et permet d'obtenir le composé souhaité sous forme d'huile incolore qui cristallise lentement.
Rendement : 99% Rf (CH2CI2-MeOH 9-1) : 0. 39 IR: vNH 3350 cm-1; vCOester 1746 cm-1; vCOamide 1682 cm-1 PF < 15 C
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RMN (1H, CDC13) : 1. 44 (s, 9H, CH3 (BOC)) ; 3. 16-3.31 (m, 2H, BOCNH-CH2- CH-CH2-OH) ; 3. 44 (massif, 2H, OH) ; (m, 2H, BOCNH-CH2-CH-CH2- OH) ; 3. 71-3.78 (m, 1 H, BOCNH-CH2-CH-CH2-OH) ; 5. 24 (m, 1 H, -NHBOC).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 214 (M+Na+)
Figure img01050001

Préparation du 1-(terf-butyloxycarbonylamino)-2,3-di(p-toluènesulfonyloxy) propane (exemple 21 b) Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 20a) à partir du 1-(tert-butyloxycarbonylamino)-propane-2,3-diol (composé 21a) et du chlorure de p-toluènesulfonyle. Le produit est obtenu sous forme d'une poudre blanche.
Rendement : 45% Rf (CH2CI2-MeOH 98-2) : 0. 49 IR : vNH 3430 cm-1; vCO ester et carbamate 1709 cm-1 PF: 112-116 C RMN (1H, CDCI3) : 1. 40 (s, 9H, CH3 (BOC)) ; 2. 46 (s, 6H, CH3) ; 3. 26-3.45 (m, 2H, BOCNH-CH2-CH-CH2-OTs) ; 4. 04-4.14 (m, 2H, BOCNH-CH2-CH-CH2-OTs); 4. 68 (m, 1 H, BOCNH-CH2-CH-CH2-OTs) ; 4. 71 (s, 1 H, -NHBOC) ; 7. 34 (d, 4H, aromatiques, J = 8.5 Hz) ; 7. 69 (d, 2H, aromatiques, J = 8.1 Hz) ; 7. 76 (d, 2H, aromatiques, J = 8.1 Hz).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 522 (M+Na+); M+39 = 538 (M+K+) Préparation du 1-(tert-butyloxycarbonylamino)-2,3-di(acétylthio)propane (exemple 21c) Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 20b) à partir du 1-(tert-butyloxycarbonylamino)-2,3-di(p-toluènesulfonyloxy)propane (composé 21 b) et du thioacétate de potassium. Le produit est obtenu sous forme d'un solide blanc.
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Rendement : 59% Rf (CH2CI2-acétate d'éthyle 95-5) : 0. 55 IR : vNH 3430 cm-1; vCO thioester 1718 cm-1; vCO carbamate 1690 cm-1 PF : 62-63 C RMN (1H, CDCI3) : 1. 45 (s, 9H, CH3 (BOC)) ; 2. 35 (s, 3H, CH3) ; 2. 37 (s, 3H, CH3) ; 3. 12-3.38 (massif, 4H, BOCNH-CH2-CH-CH2-SCO-) ; (m, 1 H, BOCNH-CH2-CH-CH2-SCO-) ; 5. 02 (s, 1 H, -NHBOC).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 330 (M+Na+) Préparation du 1-(tert-butyloxycarbonylamino)-2,3-dimercaptopropane (exemple 21 d) Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 20c) par saponification du 1-(tert-butyloxycarbonylamino)-2,3di(acétylthio)propane (composé 21 c). Le produit est obtenu sous forme d'un solide blanc qui est rapidement remis en réaction.
Rendement : 95% Rf (CH2CI2-acétate d'éthyle 95-5) : 0. 45 IR : vNH 3368 cm-1; vCO carbamate 1688 cm-1 PF : 62-63 C RMN (1H, CDCI3) : 1. 46 (s, 9H, CH3 (BOC)); 3. 04-3.11 (m, 1 H, BOCNH-CH2- CHSH-CH2-SH) ; 3. 26-3.35 (m, 2H, BOCNH-CH2-CHSH-CH2-SH) ; (m, 2H, BOCNH-CH2-CH-CH2-SH) ; (m, 2H, SH) ; (s, 1 H, -NHBOC).
Figure img01060001

Préparation du 1-(tert-butyloxycarbonylamino)-2,3~di(tétradécylthioacétylthio) propane (exemple 21e) Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 20d) à partir du 1-(tert-butyloxycarbonylamino)-2,3-dimercaptopropane
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(composé 21d) et de l'acide tétradécylthioacétique (exemple 1a). Le produit est obtenu sous forme d'un solide blanc.
Rendement : 50% Rf (CH2CI2) : 0. 38 IR : vNH 3421 cm-1; vCO thioester 1721 cm-1; vCO carbamate 1683 cm-1 PF : 60-62 C RMN (1H, CDC13) : 0. 87 (t, 6H, CH3, J = 6.3 Hz) ; 1. 26 (massif, 44H, -CH2-) ; 1. 45 (s, 9H, CH3 (BOC)); 1. 57-1.62 (m, 4H, -CH2-CH2-S-CH2-COS-) ; 2. 60 (t, 4H, -CH2-CH2-S-CH2-COS-, J = 6.9 Hz) ; 3. 17-3.29 (m, 2H, BOCNH-CHaHb-CHCHaHb-NHBOC) ; 3. 29-3.38 (m, 2H, BOCNH-CHaHb-CH-CHaHb-NHBOC) ; 3. 41 (s, 2H, CH2-S-CH2-COS-) ; 3. 43 (s, 2H, CH2-S-CH2-COS-) ;3.76-3.80 (m, 1 H, BOCNH-CH2-CH-CH2-NHBOC) ; 5. 03 (s, 1H, -NHBOC).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 786 (M+Na+) Préparation du 1-amino-2,3-di(tétradécylthioacétylthio)propane (exemple 21f) Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple
Figure img01070001

20e) à partir du 1-(tert-butyloxycarbonylamino )-2,3-ditétradécylthioacétyl- thiopropane (composé 21e). Le produit est obtenu sous forme de chlorhydrate (solide blanc).
Rendement : 43% Rf (CH2Cl2): 0.19 IR : vNH.HCI 2700-3250 cm-1; vCO thioester 1701 et 1676 cm-1 PF:117-128 C RMN (1H, CDCI3) : 0. 86 (t, 6H, CH3, J = 6 Hz) ; 1. 24 (massif, 44H,-CH2) ; 1.51 (m, 4H, -CH2-CH2-S-CH2-COS-) ; 2. 61 (m, 4H, -CH2-CH2-S-CH2-COS-) ; 2. 93- 3. 04 (m, 2H, BOCNH-CHaHb-CH-CHaHb-NHBOC); 3. 11-3.20 (m, 2H, BOCNHCHaHb-CH-CHaHb-NHBOC) ; 3. 59-3.63 (massif, 4H, CH2-S-CH2-COS-) ; 3. 72- 3. 84 (m, 1 H, BOCNH-CH2-CH-CH2-NHBOC) ; 8. 12 (m, 3H, NH2.HCI).
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Figure img01080001

Préparation du 1-tétradécylthioacétylamino-2,3-di(tétradécylthioacétylthio) propane (exemple 21) Le chlorhydrate de 1-amino-2,3-ditétradécylthioacétylthiopropane (exemple 21f) (100 mg ; 0. 140 mmol) et l'acide tétradécylthioacétique (exemple 1a) (62 mg ; 0. 210 mmol) sont dissous dans le dichlorométhane (40 ml) à 0 C avant d'ajouter la triéthylamine (43ml), la dicyclohexylcarbodiimide (59 mg ; 0. 28 mmol) et l'HOBT (29 mg ; 0.210 mmol). Le milieu réactionnel est laissé sous agitation à 0 C pendant 1 heure puis à température ambiante pendant 24 heures. Le milieu est ensuite chauffé à reflux léger pendant 48 heures puis porté à sec. Le résidu obtenu (310 mg) est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane-cyclohexane 8-2) et permet d'obtenir le composé souhaité sous forme de poudre blanche.
Rendement : 96% Rf (CH2CI2): 0. 20 IR : vNH amide 3306 cm-1; vCO thioester 1674 cm-1; vCO amide 1648 cm-1 PF : 78-80 C RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 9H, CH3, J = 6.6 Hz) ; 1. 26 (massif, 66H, -CH2) ; 1.58- 1. 62 (massif, 6H, -CH2-CH2-S-CH2-COS-) ; 2. 56 (t, 4H,-CH2-CH2-S-CH2-COS-, J = 7.5 Hz) ; 2. 61 (t, 2H,-CH2-CH2-S-CH2-CONH-, J = 7 Hz) ; 3.26 (s, 4H, CH2S-CH2-COS-) ; 3. 42 (s, 2H, CH2-S-CH2-CONH-); 3. 44-3.49 (m, 2H, BOCNHCHaHb-CH-CHaHb-NHBOC) ; 3. 55-3.61 (m, 2H, BOCNH-CHaHb-CH-CHaHbNHBOC) ; 3. 70-3.71 (m, 1 H, BOCNH-CH2-CH-CH2-NHBOC) ; 7. 58-7.62 (m, 1H, NHCO).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 934 (M+H+) ; M+23 = 956 (M+Na+) ; M+39 = 972 (M+K+ ) Exemple 22: Méthodes de préparation des composés selon l'invention pour les études in vivo et recherche de la préparation la plus efficace.
A / Préparation des composés avec la carboxyméthylcellulose
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La carboxyméthylcellulose (CMC) utilisée est un sel de sodium de carboxyméthylcellulose de viscosité moyenne (Ref. C4888, Sigma-aldrich, France). Le Tween utilisé est le Polyoxyethylenesorbitan Monooleate (Tween 80, Ref. P8074, Sigma-aldrich, France) Une solution de CMC 0,5% (w/v) est préparée dans de l'eau et mélangée avec du Tween 80 à 0,1% (v/v) puis placée sous agitation toute une nuit. Les composés selon l'invention sont alors dissous par agitation et grâce aux ultrasons pendant 30 minutes à 60 C.
B / Préparation des composés dans différents surfactants (Cremophor RH40 et Solutol# HS15) L'émulsion comprenant un composé selon l'invention et un surfactant, le Cremophor RH40 (Polyoxyl 40 Hydrogenated Castor Oil) ou le Solutol HS15 (polyethylene glycol 660 12-hydroxystearate) est préparée selon le protocole suivant : le composé selon l'invention est dissous dans une solution de Cremophor RH40 ou le Solutol HS15 préalablement chauffée au bain-marie à 60 C selon un rapport par exemple de 6/1 (w/w). Le mélange est placé dans un bain-marie à 60 C jusqu'à l'obtention d'un mélange homogène. La mixture est alors dispersée par ultra-sons pendant 20 minutes à 60 C. la solution devient alors translucide. Tout en agitant, la solution est complétée par de l'eau (MilliQ) préalablement chauffée à 60 C selon la concentration en composé désirée. La solution est alors mélangée au Vortex@ puis remise au bain-marie (60 C) et éventuellement dispersée aux ultra-sons pendant 30 minutes.
Le Crémophor@ RH40 et le Solutol HS15 sont fournis par BASF (Ludwigshasen, Allemagne).
C/ Recherche de la préparation la plus efficace Les inventeurs ont montré que l'efficacité des composés selon l'invention est meilleure lorsque ceux-ci sont administrés en solution avec un surfactant.
Pour cela, les composés ont été administrés quotidiennement à des rats Sprague Dawley pendant une période de 15 jours par gavage. Les lipides
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plasmatiques (cholestérol total et triglycérides) ont été dosés après un prélèvement sanguin réalisé 4 jours avant l'administration du composé selon l'invention Ex 4a (J-4), 8 jours après (J+8) et 15 jours après (J+15) en utilisant respectivement les kits de dosage colorimétriques Cholestérol RTU et Triglycérides enzymatiques PAP1000 selon les indications du fournisseur (Bio-Mérieux, Marcy l'Etoile, France).
Les résultats obtenus montrent que le composé selon l'invention Ex 4a induit une diminution plus importante de la concentration plasmatique en cholestérol total (figure 2A) et en triglycérides (figure 2B) lorsqu'il est administré avec du Cremophor RH40.
Pour conduire les expériences in vivo décrites dans les exemples suivants (sauf indication contraire), les composés selon l'invention ont donc été préparés sous forme d'une émulsion préparée avec du Cremophor RH40 telle que décrite ciavant.
EXEMPLE 23: Méthode de préparation des composés selon l'invention pour les études in vitro.
Pour conduire les expériences in vitro décrites dans les exemples suivants, les composés selon l'invention ont été préparés sous forme d'une émulsion telle que décrite ci-après.
L'émulsion comprenant un composé selon l'invention et de la phosphatidylcholine (PC) est préparée selon le protocole de Spooner et al. (Spooner, Clark et al. 1988). Le composé selon l'invention est mélangé à la PC selon un rapport 4:1 (w/w) dans du chloroforme, la mixture est séchée sous azote, puis évaporée toute la nuit sous vide, la poudre qui en résulte est reprise par 0,16 M de KCI contenant 0,01 M d'EDTA puis les particules lipidiques sont dispersées par ultra-sons pendant 30 minutes à 37 C. Les liposomes formés sont ensuite séparés par ultracentrifugation (ultracentrifugeuse XL 80, Beckman Coulter, Villepinte, France) à 25000 tr/m pendant 45 minutes pour récupérer les liposomes dont la taille est supérieure à 100 nm et se rapproche de celle des
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chylomicrons. Des liposomes constitués uniquement de PC sont préparés en parallèle pour servir de témoin négatif.
La composition des liposomes en composé selon l'invention est estimée en utilisant le kit de dosage enzymocolorimétrique des triglycérides. Le dosage est effectué contre une gamme standard, préparée grâce au calibrateur des lipides CFAS Réf. N 759350 (Boehringer Mannheim GmbH, Allemagne). La gamme standard a été construite de 16 à 500 g/ml. 100 l de chaque dilution d'échantillon ou de gamme étalon sont déposés par puits d'une plaque de titration (96 puits). Ensuite 200 l de réactifs triglycérides Réf. 701912 (Boehringer Mannheim GmbH, Allemagne) sont rajoutés dans chaque puits, et l'ensemble de la plaque est incubée pendant 30 min. à 37 C. La lecture des Densités Optiques (DO) est effectuée à 492 nm sur le spectrophotomètre. Les concentrations en triglycérides de chaque échantillon sont calculées après construction de la courbe étalon selon une fonction linéaire y=ax+b, où y représente les DO et x les concentrations en triglycérides.
Les liposomes contenant les composés selon l'invention, ainsi préparés sont utilisés dans les expériences in vitro décrites dans les exemples suivants.
Exemple 24 : Evaluation de l'activation des PPARs in vitro par les composés selon l'invention Les récepteurs nucléaires membres de la sous-famille des PPARs qui sont activés par deux classes majeures de composés pharmaceutiques, les fibrates et les glitazones, abondamment utilisées en clinique humaine pour le traitement des dyslipidémies et du diabète, jouent un rôle important dans l'homéostasie lipidique et glucidique. Les données expérimentales suivantes montrent que les composés selon l'invention activent PPARa in vitro.
L'activation des PPARs est évaluée in vitro dans des lignées de type fibroblastique RK13 ou dans une lignée hépatocytaire HepG2, par la mesure de l'activité transcriptionnelle de chimères constituées du domaine de liaison à l'ADN du facteur de transcription Gal4 de levure et du domaine de liaison du
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ligand des différents PPARs. L'exemple présenté ci-dessous est donné pour les cellules HepG2.
A-/Protocoles de culture Les cellules HepG2 proviennent de l'ECACC (Porton Down, UK) et sont cultivées dans du milieu DMEM supplémenté de 10% (v/v) sérum de veau foetal, 100 U/ml pénicilline (Gibco, Paisley, UK) et 2 mM L-Glutamine (Gibco, Paisley, UK). Le milieu de culture est changé tous les deux jours. Les cellules sont conservées à 37 C dans une atmosphère humide contenant 5% de C02 et 95% d'air.
B-/Description des plasmides utilisés en transfection Les plasmides pG5TkpGL3, pRL-CMV, pGal4-hPPARa, pGal4-hPPARy et pGal4-f ont été décrits par (Raspe, Madsen et al. 1999). Les constructions pGal4-mPPARa et pGal4-hPPARss ont été obtenues par clonage dans le vecteur pGal4-f de fragments d'ADN amplifiés par PCR correspondants aux domaines DEF des récepteurs nucléaires PPARa de souris et PPARss humain respectivement.
C-/Transfection Les cellules HepG2 sont ensemencées dans des boîtes de culture de 24 puits à raison de 5x104 cellules/puit et sont transfectées pendant 2 heures avec le plasmide rapporteur pG5TkpGL3 (50 ng/puit), les vecteurs d'expression pGal4-f ou pGal4-mPPARa ou pGal4-hPPARa ou pGal4-hPPARy ou pGal4-hPPARss (100 ng/puit) et le vecteur de contrôle de l'efficacité de transfection pRL-CMV (1 ng/puit) suivant le protocole décrit précédemment (Raspe, Madsen et al. 1999) et incubées pendant 36 heures avec les composés testés. A l'issue de l'expérience, les cellules sont lysées (Gibco, Paisley, UK) et les activités luciférase sont déterminées à l'aide du kit de dosage Dual-LuciferaseTM Reporter Assay System (Promega, Madison, Wl, USA) selon la notice du fournisseur. Le contenu en protéines des extraits cellulaires est ensuite évalué à l'aide du kit de
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dosage Bio-Rad Protein Assay (Bio-Rad, München, Allemagne) selon la notice du fournisseur.
Les inventeurs mettent en évidence une augmentation de l'activité luciférase dans les cellules traitées avec les composés selon l'invention et transfectées avec le plasmide pGal4-hPPARa. Cette induction de l'activité luciférase indique que les composés selon l'invention, sont des activateurs de PPARa. Un exemple de résultats obtenus avec des composés selon l'invention est présenté dans la figure 3.
Figure 3: les cellules HepG2, transfectées avec les plasmides du système Gal4/PPARa, sont incubées avec différentes concentrations (5,15, 50 et 100 M) des composés selon l'invention (Ex 2a, Ex 4a, Ex 4p, Ex 5a Ex 7 et Ex 11) pendant 24h ainsi qu'avec différentes concentrations de véhicule (PC) notées 1, 2,3, 4 à titre de contrôles respectivement pour les concentrations 5, 15,50 et 100 M des composés selon l'invention (suivant le rapport 4 :1 w/w décrit dans l'exemple 2 (Méthode de préparation des composés selon l'invention pour les études in vitro . Les résultats sont représentés par le facteur d'induction (signal luminescent des cellules traitées divisé par le signal luminescent des cellules non traitées) en fonction des différents traitements. Plus le facteur d'induction est élevé, meilleure est la propriété d'agoniste pour PPARa. Les résultats montrent que le composé selon l'invention Ex 2a favorise l'induction du signal luminescent d'un facteur maximal de 62 à 100 M, de 41 à 50 M, de 31 à 15 M et de 17 à 5 M. Le composé selon l'invention Ex 4a induit également une augmentation du facteur d'induction avec un effet dose de 33 à 100 M, 15 à 50 M, 23 à 15 M et 6 à 5 M. Le composé selon l'invention Ex 4p induit aussi une augmentation du signal luminescent, révélateur d'une activité sur le récepteur nucléaire PPARa. Les facteurs d'induction pour le composé Ex 4p sont de 35 à 100 M, 44 à 50 M, 36 à 15 M et 24 à 5 M. Enfin, le composé selon l'invention Ex 7 induit une augmentation du signal luminescent d'un facteur de 19 à 100 M, de 19 à 50 M, de 7 à 15 M et de 1,5 à 5 M. En revanche lorsque les cellules sont incubées avec le véhicule (liposome de PC) aucune induction significative n'est observée.
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Ces résultats montrent que les composés selon l'invention testés possèdent, de manière significative, la propriété de ligand vis à vis de PPARa et permettent aussi son activation au niveau transcriptionnel.
Exemple 25 : Evaluation des propriétés anti-inflammatoires des composés selon l'invention La réponse inflammatoire apparaît dans de nombreux désordres neurologiques, comme les ischémies cérébrales, de plus l'inflammation est l'un des facteurs importants de la neurodégénérescence. Lors d'accidents cérébraux, une des premières réactions des cellules de la glie est de libérer des cytokines et des radicaux libres. La conséquence de cette libération de cytokines et de radicaux libres est une réponse inflammatoire au niveau cérébral et qui peut mener à la mort des neurones (Rothwell 1997).
Les lignées cellulaires et les cellules primaires sont cultivées comme décrit précédemment.
Le lipopolysaccharide (LPS), endotoxine bactérienne (Escherichia coli 0111 :B4) (Sigma, France) est reconstitué dans de l'eau distillée et conservé à 4 C. Les cellules sont traitées avec une concentration de LPS de 1 g/ml pendant 24 heures. Pour éviter toutes interférences avec d'autres facteurs, le milieu de culture des cellules est totalement changé.
Le TNF-a est un facteur important de la réponse inflammatoire à un stress (oxydant par exemple). Pour évaluer la sécrétion de TNF-a en réponse à une stimulation par des doses croissantes de LPS, le milieu de culture des cellules stimulées est prélevé et la quantité de TNF-a est évaluée avec un kit ELISATNF-a (Immunotech, France). Les échantillons sont dilués 50 fois afin d'être en adéquation avec la gamme étalon (Chang, Hudson et al. 2000).
La propriété anti-inflammatoire des composés est caractérisée de la manière suivante : le milieu de culture des cellules est totalement changé et les cellules sont incubées avec les composés à tester pendant 2 heures. Après cette incubation, du LPS est rajouté au milieu de culture à une concentration finale de
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1 g/ml. Après 24 heures d'incubation, le surnageant de cellules est récupéré et stocké à -80 C lorsqu'il n'est pas traité directement. Les cellules sont lysées et la quantité de protéines est mesurée, à l'aide du kit de dosage Bio-Rad Protein Assay (Bio-Rad, München, Allemagne) selon la notice du fournisseur.
La mesure de la diminution de sécrétion de TNF-a favorisée par le traitement avec les composés testés est exprimée en pg/ml/ g de protéine et rapportée en pourcentage par rapport au témoin. Ceci montre que les composés selon l'invention possèdent des propriétés anti-inflammatoires.
Exemple 26 : Evaluation des propriétés antioxydantes des composés selon l'invention A-/Protection de l'oxydation des LDL par le cuivre : L'oxydation des LDL est une modification importante et joue un rôle prépondérant dans la mise en place et le développement de l'athérosclérose (Jurgens, Hoff et al. 1987). Le protocole suivant permet la mise en évidence des propriétés antioxydantes des composés. Sauf mention différente, les réactifs proviennent de chez Sigma (St Quentin, France).
Les LDL sont préparés suivant la méthode décrite par Lebeau et al. (Lebeau, Furman et al. 2000).
Les solutions de composés à tester sont préparées à 10-2 M dans de l'éthanol et diluées dans du PBS pour avoir des concentrations finales allant de 0,1 à 100 M pour une concentration totale d'éthanol de 1 % (v/v).
Avant l'oxydation, l'EDTA est retiré de la préparation de LDL par dialyse.
L'oxydation a ensuite lieu à 30 C en ajoutant 100 l d'une solution à 16,6 M de CuS04 à 800 L de LDL (125 g de protéines/ml) et 100 l d'une solution du composé à tester. La formation de diènes, l'espèce à observer, se mesure par densité optique à 234 nm dans les échantillons traités avec les composés en présence ou en absence de cuivre . La mesure de la densité optique à 234 nm est réalisée toutes les 10 minutes pendant 8 heures à l'aide d'un spectrophotomètre thermostaté (Kontron Uvikon 930). Les analyses sont
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réalisées en triplicata. Nous considérons que les composés ont une activité antioxydante lorsqu'ils induisent un décalage de phase par rapport à l'échantillon témoin. Les inventeurs mettent en évidence que les composés selon l'invention retardent l'oxydation des LDL (induite par le cuivre), ceci indiquant que les composés selon l'invention possèdent un caractère antioxydant intrinsèque. Un exemple de résultats obtenus avec des composés selon l'invention est présenté dans la figure 4.
Sur la figure 4A, on peut observer que l'incubation des LDL avec les composés selon l'invention, retarde la formation de diènes conjugués. La Lag-Phase est de 104 minutes pour le cuivre seul alors que le délais d'apparition des diènes conjugués atteint 282 minutes lorsque les LDL sont incubés avec le composé selon l'invention Ex 4g (composé selon l'invention décrit à l'exemple 4g cidessus) à 10-4 M. Le composé selon l'invention Ex 4a décale également la LagPhase à 270 minutes. Les composés Ex 4h, 4o, 2a et 9 permettent un décalage de la lag-phase, correspondant respectivement à 43,37, 67 et 33% d'augmentation. Le retard de formation de diènes conjugués est caractéristique de produits antioxydants.
La figure 4B montre que l'incubation des composés selon l'invention avec les LDL en présence de cuivre ralentit la vitesse de formation des diènes conjugués.
La vitesse de formation des diènes conjugués est de 3 nmol/min/mg de LDL avec le cuivre seul, cette vitesse est réduite à 1 nmol/min/mg de LDL avec le composé Ex 4a à 10-4 M, ceci correspond alors à une diminution de 66% de la vitesse d'oxydation. Les composés selon l'invention Ex 4g et 4h ralentissent également la vitesse d'oxydation des LDL qui est alors respectivement de 1,8 et de 2,5 nmol/min/mg de LDL. L'incubation des LDL avec les composés selon l'invention Ex 4o, 2a et 9 ne modifie pas de manière significative la vitesse d'oxydation des LDL.
La figure 4C montre que l'incubation des LDL avec le cuivre entraîne la formation de 496 nmol/mg de LDL de diènes conjugués. L'incubation avec le composé Ex 4a (10-4 M) entraîne une diminution de 60% de la quantité maximale de diènes conjugués formés. Les composés Ex 4g et 4h (10-4 M) limitent également la formation de diènes conjugués. L'incubation des LDL avec ces
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composés diminue de respectivement de 31 et de 24 % la quantité maximum de diènes formés.
B-/Evaluation de la protection conférée par les composés selon l'invention vis-à-vis de la peroxydation lipidique : Le composé selon l'invention, testé est le composé dont la préparation est décrite dans les exemples décrits ci-dessus.
La mesure de l'oxydation des LDL est réalisée par la méthode des TBARS (Thiobarbituric Acid Reactive Substances).
Selon le même principe que celui décrit précédemment, les LDL sont oxydés avec du CuS04 et la peroxydation lipidique est déterminée de la manière suivante : Les TBARS sont mesurés à l'aide d'une méthode spectrophotométrique, l'hydroperoxydation lipidique est mesurée en utilisant l'oxydation peroxyde-lipide dépendante de l'iodide en iodine. Les résultats sont exprimés en nmol de malondialdehyde (MDA) ou en nmol d'hydroperoxyde/mg de protéines.
Les résultats obtenus en mesurant l'inhibition de la formation de diènés conjugés, sont confirmés par les expériences de mesure de peroxydation lipidique des LDL. Les composés selon l'invention, protègent donc également de manière efficace les LDL contre la peroxydation lipidique induite par le cuivre (agent oxydant).
Exemple 27 : Mesure des propriétés antioxydantes des composés selon l'invention sur des cultures de cellules A-/Protocole de culture : Les lignées cellulaires utilisées pour ce type d'expériences sont de type neuronales, neuroblastomes (humains) et cellules PC12 (rat). Les cellules PC12 ont été préparées à partir d'un pheochromocytome de rat et sont caractérisées par Greene et Tischler (Greene and Tischler 1976). Ces cellules sont couramment utilisées pour des études de différenciation neuronale, transduction
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du signal et mort neuronale. Les cellules PC12 sont cultivées comme précédemment décrit (Farinelli, Park et al. 1996), dans du milieu complet RPMI (Invitrogen) complémenté avec 10% de sérum de cheval et 5% de sérum de veau foetal.
Des cultures (primaires) de cellules endothéliales et muscles lisses sont également utilisées. Les cellules sont commandées chez Promocell (Promocell GmBH, Heidelberg) et sont cultivées selon les indications du fournisseur.
Les cellules sont traitées avec différentes doses de composés de 5 à 100 M pendant 24 heures. Les cellules sont alors récupérées et l'augmentation de l'expression des gènes d'intérêt est évaluée par PCR semi-quantitative.
B-/Mesure des ARMm : Les ARNm sont extraits des cellules en culture traitées ou non avec les composés selon l'invention. L'extraction est réalisée à l'aide des réactifs du kit Absolutely RNA RT-PCR miniprep Kit (Stratagene, France) selon les indications du fournisseur. Les ARNm sont ensuite dosés par spectrométrie et quantifiés par RT-PCR semi-quantitative sur un appareil GeneAmp PCR System 9700(Applied Biosystems, USA). Des paires d'amorces spécifiques des gènes de la Super Oxyde Dismutase (SOD), de la Catalase et de la Glutathion Peroxydase (GPx), enzymes anti-oxydantes, sont utilisées comme sondes. Des paires d'amorces spécifiques des gènes p-actine et cyclophiline sont utilisées comme sondes témoin (voir tableau 1).
L'augmentation de l'expression des ARNm, mesurée par RT-PCR semiquantitative, des gènes des enzymes antioxydantes est mise en évidence dans les différents types cellulaires utilisés, lorsque les cellules sont traitées avec les composés selon l'invention.
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Tableau 1 :
Figure img01190001

C-/Contrôle du stress oxydatif : Mesure des espèces oxydantes dans les cellules en culture : Les propriétés antioxydantes des composés sont également évaluées à l'aide d'un indicateur fluorescent dont l'oxydation est suivie par l'apparition d'un signal fluorescent. La diminution d'intensité du signal fluorescent émis est mesurée dans les cellules traitées avec les composés de la manière suivante : les cellules PC12 cultivées comme précédemment décrit (plaque noire 96 puits fonds transparent, Falcon) sont incubées avec des doses croissantes de H202 (0,25 mM - 1 mM) dans du milieu sans sérum pendant 2 et 24 heures. Après l'incubation le milieu est enlevé et les cellules sont incubées avec une solution de dichlorodihydrofluorescéine diacetate (DCFDA, Molecular Probes, Eugene, USA) 10 M dans du PBS pendant 30 min à 37 C et dans une atmosphère contenant 5% de C02. Les cellules sont ensuite rincées avec du PBS. La détection de la fluorescence émise par l'indicateur de l'oxydation est mesurée à
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l'aide d'un fluorimètre (Tecan Ultra 384) à une longueur d'onde d'excitation de 495 nm et une longueur d'onde d'émission de 535 nm. Les résultats sont exprimés en pourcentage de protection par rapport au témoin oxydé.
L'intensité de fluorescence est plus faible dans les cellules incubées avec les composés selon l'invention que dans les cellules non traitées. Ces résultats indiquent que les composés selon l'invention favorisent l'inhibition de la production d'espèces oxydantes dans des cellules soumises à un stress oxydatif. Les propriétés antioxydantes décrites précédemment sont également efficaces pour induire une protection antiradicalaire dans des cellules en culture.
D-/Mesure de la peroxydation lipidique : Les différentes lignées cellulaires (modèles cellulaires cités précédemment) ainsi que les cellules en culture primaire sont traitées comme précédemment. Le surnageant des cellules est récupéré après le traitement et les cellules sont lysées et récupérées pour la détermination de la concentration protéique. La détection de la peroxydation lipidique est déterminée de la manière suivante : la peroxydation lipidique est mesurée à l'aide d'acide thiobarbiturique (TBA) qui réagit avec la lipoperoxydation des aldéhydes tel que le malondialdéhyde (MDA).
Après les traitements, le surnageant des cellules est collecté (900 NI) et 90 l d'hydroxytoluène butylé y sont ajoutés (Morliere, Moysan et al. 1991). 1 ml d'une solution de TBA à 0,375% dans 0,25M HCL contenant 15% d'acide trichloroacétique est également ajouté aux milieux réactionnels. Le mélange est chauffé à 80 C pendant 15 min, refroidi sur glace et la phase organique est extraite avec du butanol. L'analyse de la phase organique se fait par spectrofluorométrie (lexc=515 nm et lem=550 nm) à l'aide du spectrofluorimètre Shimazu 1501 (Shimadzu Corporation, Kyoto, Japon). Les TBARS sont exprimés en équivalents MDA en utilisant comme standard le tetra- éthoxypropane. Les résultats sont normalisés par rapport au contenu en protéines.
La diminution de la peroxydation lipidique observée dans les cellules traitées avec les composés selon l'invention confirme les résultats obtenus précédemment.
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Les composés selon l'invention présentent avantageusement des propriétés antioxydantes intrinsèques qui permettent de ralentir et/ou d'inhiber les effets d'un stress oxydatif. Les inventeurs montrent également que les composés selon l'invention sont capables d'induirent l'expression des gènes d'enzymes antioxydantes. Ces caractéristiques particulières des composés selon l'invention permettent aux cellules de lutter plus efficacement contre le stress oxydatif et donc d'être protégées vis à vis des dommages induits par les radicaux libres.
Exemple 28 : Evaluation des effets des composés selon l'invention dans un modèle de Parkinson développé chez le rat A-/ Traitement des animaux 1-/ Animaux et administration des composés Les rats Wistar mâles adultes (280-300g) sont maintenus sous un cycle de lumière-obscurité de 12h à une température constante de 20 +/- 3 C. L'accès à la nourriture et à l'eau est libre et les prises de poids sont enregistrées.
Les animaux reçoivent une alimentation normale ou enrichie avec les composés selon l'invention (300mg/kg et par jour) pendant 7 jours avant l'induction de la lésion dopaminergique et pendant 15 jours après l'induction de la lésion dopaminergique.
2-/ Modèle animal de maladie de Parkinson par lésion sélective des neurones dopaminergiques La 6-hydroxydopamine (6-OHDA) est une neurotoxine captée par les neurones dopaminergiques via un transporteur de la dopamine. Son injection dans les projections striatonigrales induit une destruction sélective des neurones dopaminergiques, et permet de créer de nombreux modèles de maladie de Parkinson (Bordet et al., 2000).
Sept jours après le début du traitement avec les composés selon l'invention, les rats reçoivent une injection stéréotaxique dans la partie gauche du faisceau médian du télencéphale de 6-OHDA (4 g pendant 8 min) ou de tampon (rats sham) afin d'induire une dénervation de la voie nigrostriatale
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B-/ Mesure de l'effet des composés selon l'invention sur la lésion dopaminergique 1 /Sensibilisation comportementale à l'apomorphine 1-1-/ Test de sensibilisation L'apomorphine est un agoniste dopaminergique qui stimule les récepteurs D1 et D2. L'intensité du comportement de rotation est un indice qui permet de mesurer l'intensité de la lésion nigrostriatale. A la fin du traitement, les rats reçoivent une injection intrapéritonéale d'apomorphine afin de mesurer le comportement de rotation 15 minutes après la sensibilisation et pendant 10 minutes.
1-2-/ Résultats Suite à une lésion provoquée par la 6-OHDA la fréquence des rotations est augmentée. L'activité neuroprotectrice d'un composé se traduit donc par une diminution du nombre de rotations. Les composés de l'invention permettent de diminuer le nombre de rotations effectuées par l'animal après injection d'apomorphine. En effet, moins l'animal tourne, moins la lésion est importante. Ces résultats montrent donc que le composé Ex 4a a des propriétés prophylactiques et curatives dans le modèle de maladie de Parkinson (voir figure 5).
Figure img01220001
2 / lmmunohistochimie à l'aide d'un anticorps anti-TH La tyrosine hydroxylase (TH) est une enzyme qui catalyse la transformation de la tyrosine en dopamine. Elle est utilisée comme marqueur des neurones dopaminergiques. Après le test de sensibilisation à l'apomorphine, les animaux sont sacrifiés et les cerveaux sont prélevés. Les coupes sont incubées en présence de l'anticorps anti-TH (SCBT, Santa Cruz, Californie) puis sont traitées par un anticorps secondaire biotinylé. La révélation est réalisée à l'aide du kit ABC staining system (Tebu) suivant les instructions du fournisseur.
Les cellules viables marquées par l'anticorps anti-TH (cellules TH+) sont comptées.
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L'injection de 6-OHDA induit une perte neuronale sélective dans la région de l'aire tegmentale ventrale (ATV) et de la substance noire (comparaison du nombre de neurones TH+ entre la zone ipsilatérale et controlatérale chez les rats ayant reçu l'injection de 6-OHDA et entre les zones ipsilatérales des rats sham et des rats ayant reçu l'injection de 6-OHDA (voir figure 5B)).
Les rats traités par le composé selon l'invention Ex 4a ont un nombre de neurones plus important que les rats recevant une alimentation normale.
L'efficacité des composés selon l'invention sur la survie des neurones dopaminergiques est démontrée.
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Claims (24)

  1. dans laquelle : # G1 représente un atome d'oxygène ou un groupe N-R, G2 et G3 représentent indépendamment un atome d'oxygène, un atome de soufre ou un groupe N-R4, G1, G2 et G3 ne pouvant représenter de façon simultanée un groupe N-R ou N-R4, # R et R4 représentent indépendamment un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comportant de 1 à 5 atomes de carbone, # R1, R2 et R3, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un groupe CO-R5 ou un groupe de formule CO- (CH2)2n+1-X-R6, l'un au moins des groupes R1, R2 et R3 étant un groupe de formule CO-(CH2)2n+1-X-R6, # R5 est un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comprenant éventuellement un groupement cyclique, dont la chaîne principale comporte de 1 à 25 atomes de carbone,
    Figure img01290001
    276-278.REVENDICATIONS 1. Utilisation, pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée au traitement ou à la prophylaxie d'une pathologie neurodégénérative, d'au moins un composé répondant à la formule générale (I):
    <Desc/Clms Page number 130>
    SO2, # X est un atome de soufre, un atome de sélénium, un groupe SO ou un groupe SO2, # n est un nombre entier compris entre 0 et 11, ainsi que ses isomères optiques et géométriques, ses racémates, ses sels, ses hydrates et leurs mélanges.
    # R6 est un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comprenant éventuellement un groupe cyclique, dont la chaîne principale comporte de 3 à 23 atomes de carbone, de préférence 10 à 23 atomes de carbone et éventuellement un ou plusieurs hétérogroupes, choisis parmi un atome d'oxygène, un atome de soufre, un atome de sélénium, un groupe SO et un groupe
  2. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que G1 représente un groupe N-R.
  3. 3. Utilisation selon la revendication précédente, caractérisée en ce que G2R2 et G3R3 ne sont pas simultanément des groupes hydroxyles.
  4. 4. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que G1 et G3 représentent des atomes d'oxygène.
  5. 5. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'un seul des groupes R1, R2 ou R3 représente un atome d'hydrogène.
  6. 6. Utilisation selon l'une des revendications précédentes 1 à 4, caractérisée en ce que deux des groupes R1, R2 ou R3 représentent un atome d'hydrogène.
  7. 7. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que, dans le groupe CO-(CH2)2n+i-X-R6, X représente tout préférentiellement un atome de soufre ou de sélénium et avantageusement un atome de soufre.
    <Desc/Clms Page number 131>
  8. 8. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que, dans le groupe CO-(CH2)2n+1-X-R6, n est de préférence compris entre 0 et 3, plus spécifiquement compris entre 0 et 2 et est en particulier égal à 0.
  9. 9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que R6 comporte un ou plusieurs hétérogroupes, de préférence 0,1 ou 2, plus préférentiellement 0 ou 1, choisis parmi un atome d'oxygène, un atome de soufre, un atome de sélénium, un groupe SO et un groupe S02.
  10. 10. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le groupe CO-(CH2)2n+1-X-R6 est le groupe CO-CH2-S- C14H29.
  11. 11. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'au moins un des groupes R1, R2 et R3 représente un groupe CO-(CH2)2n+1-X-R6 dans lequel X représente un atome de soufre ou de sélénium et de préférence un atome de soufre et/ou R6 est un groupe alkyle saturé et linéaire comprenant de préférence de 13 à 20 atomes de carbone, de préférence de 14 à 17, plus préférentiellement de 14 à 16, et encore plus préférentiellement 14 atomes de carbone.
  12. 12. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes 1 à 5 et 7 à 11, caractérisée en ce qu'au moins deux des groupes R1, R2 et R3 sont des groupes CO-(CH2)2n+1-X-R6, identiques ou différents, dans lesquels X représente un atome de soufre ou de sélénium et de préférence un atome de soufre.
  13. 13. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 4 à 12, caractérisée en ce que le groupe G2 représente un atome d'oxygène ou un groupe N-R4, de préférence un atome d'oxygène.
    <Desc/Clms Page number 132>
  14. 14. Utilisation selon la revendication précédente, caractérisée en ce que R2 représente un groupe CO-(CH2)2n+1-X-R6.
  15. 15. Utilisation selon la revendication 13 ou 14, caractérisée en ce que, lorsque G2 est un groupe N-R4, R4 représente un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle.
  16. 16. Utilisation selon l'une des revendications 2,3, 5 à 15, caractérisée en ce que G2 représente un atome d'oxygène ou de soufre, et de préférence un atome d'oxygène, avec R2 représentant avantageusement un groupe de formule CO- (CH2)2n+1-X-R6.
  17. 17. Utilisation selon la revendication 4, caractérisée en ce que G2 est un atome d'oxygène et/ou R2 représente un groupe CO-(CH2)2n+1-X-R6.
  18. 18. Utilisation selon la revendication 2, caractérisée en ce que G3 est un groupe N-R4 dans lequel R4 est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, G2 est un atome d'oxygène, et/ou R2 représente un groupe CO-(CH2)2n+1-X-R6.
  19. 19. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que R1, R2 et R3, identiques ou différents, de préférence identiques, représentent (i) un groupe CO-(CH2)2n+i-X-R6, dans lesquels X représente un atome de soufre ou de sélénium et de préférence un atome de soufre et/ou R6 est un groupe alkyle saturé et linéaire comprenant de 13 à 17 atomes de carbone, de préférence de 14 à 16 atomes de carbone, encore plus préférentiellement 14 atomes de carbone, dans lesquels n est de préférence compris entre 0 et 3, et en particulier égal à 0.
  20. 20. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que les composés de formule (I) sont choisis parmi : - 1-tétradécylthioacétylglycérol ; - 2-tétradécylthioacétylglycérol ;
    <Desc/Clms Page number 133>
    - 1,3-diundécanoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1 ,3-d itétradécylthioacétoxy-2-( tétradécylth io méthyl)ca rbo nylthiopropane.
    Figure img01330004
    - 1,3-oiéyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1,3-ditétradécanoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1-palmitoyl-2,3-ditétradécylthioacétylglycérol ; - 1-oléyl-3-palmitoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1,3-dipalmitoyl-2-docosylthioacétylglycérol ; - 2-tétradécylthioacétamidopropane-1,3-diol ; - 2-tétradécylthioacétamido-1,3-ditétradécylthioacétyloxypropane ; - 1,3-ditétradécylthioacétyl-2-palmitoylglycérol ; - 1,3-diacétyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1,3-dioctanoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ;
    Figure img01330003
    - 1,3-dipalmitoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1,3-dilinoléyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1,3-distérayl-2-tétradécylthioacétylglycérol ;
    Figure img01330002
    - 1,2,3-tri-(6-décylthio)hexanoylglycérol ; - 1,2,3-tritétradécylsulfoxyacétylglycérol ; - 1,2,3-tri-(tétradécylsulfonyl)acétylglycérol ; - 1,2,3-tri-tétradécylsélénoacétylglycérol ;
    Figure img01330001
    - 1,2,3-tritétradécylthioacétylglycérol ; - 1,2,3-tri-(4-dodécylthio)butanoylglycérol ;
    - 1,3-di(tétradécylthioacétylamino)propan-2-ol ; - 1,3-diamino-2-(tétradécylthioacétyloxy) propane ; - 1,3-ditétradécylthioacétylamino-2-(tétradécylthioacétyloxy)propane ; - 1 ,3-dioléoylamino-2-(tétradécylthioacétyloxy)propane ; - 1,3-ditétradécylthioacétylamino-2-(tétradécylthioacétylthio)propane ; et - 1-tétradécylthioacétylamino-2,3-di(tétradécylthioacétylthio)propane.
    Figure img01330005
    - 3-(tétradécylthioacétylamino)propane-1,2-diol - 1-tétradécylthioacétylamino-2,3-(dipalmitoyloxy)propane ; - 3-tétradécylthioacétylamino-1,2-(ditétradécylthioacétyloxy)propane ; - 3-palmitoylamino-1 ,2-(ditétradécylthioacétyloxy)propane ;
    <Desc/Clms Page number 134>
  21. 21. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la pathologie neurodégénérative est la maladie de Parkinson, la maladie d'Alzheimer ou la sclérose en plaques.
  22. 22. Composition pharmaceutique comprenant, dans un support pharmaceutiquement acceptable, au moins un composé de formule (1) tel que défini dans l'une des revendications 1 à 20 en association avec au moins un composé choisi parmi : le Castor oil polyoxyl hydrogenated, le polyoxyl 35 Castor oil, le polyéthylène glycol 660 12-hydroxystéarate et le polysorbate 60 .
  23. 23. Composition pharmaceutique selon la revendication précédente, caractérisée en ce elle est destinée à traiter une pathologie neurodégénérative.
  24. 24. Composition pharmaceutique selon la revendication précédente, caractérisée en ce que la pathologie neurodégénérative est la maladie de Parkinson, la maladie d'Alzheimer ou la sclérose en plaques.
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