FR2796839A1

FR2796839A1 - USE OF A PROTEIN FRACTION OF THE SEED OF THE VIGNA TRILOBATA PLANT IN A COSMETIC OR DERMOPHARMACEUTICAL COMPOSITION

Info

Publication number: FR2796839A1
Application number: FR9909766A
Authority: FR
Inventors: Gilles Pauly; Philippe Moser; Veronique Gillon
Original assignee: Laboratoires Serobiologiques SA
Current assignee: BASF Health and Care Products France SAS
Priority date: 1999-07-26
Filing date: 1999-07-26
Publication date: 2001-02-02
Anticipated expiration: 2019-07-26
Also published as: AU6276500A; FR2796839B1; WO2001007005A1

Abstract

The invention relates to the use of at least one soluble protein fraction extracted from the seed of the vigna trilobata plant as an active substance in a cosmetic or dermopharmaceutical composition for local application on the skin, epithelial appendages and/or mucous membranes.

Description

DESCRIPTION La présente invention concerne le domaine de la cosmétique et de la dermopharmacologie, et a pour objet l'utilisation d'au moins un extrait protéique de la graine de la plante Vigna trilobata, ainsi qu'un produit cosmétique comprenant un tel extrait. DESCRIPTION The present invention relates to the field of cosmetics and dermopharmacology, and relates to the use of at least one protein extract of the seed of the plant Vigna trilobata, and a cosmetic product comprising such an extract.

Dans les pays en voie de développement, la recherche de nouvelles sources alimentaires et notamment de protéines, bon marché et de qualité, constitue un des buts principaux des autorités responsables de l'alimentation et de la nutrition. In developing countries, the search for new sources of food, especially cheap, high-quality protein, is one of the main goals of food and nutrition authorities.

De ce fait, la recherche de nouvelles sources alimentaires dans les lignées de plantes légumières domestiquées ou dans les plantes sauvages retient depuis quelques années leur attention. As a result, the search for new food sources in domesticated vegetable plants or in wild plants has been attracting attention for some years now.

En Inde du sud, les graines matures de Vigna trilobata sont connues pour être grillées et consommées par la "secte tribale" kurumba elles sont également consommées par les habitants les plus pauvres de ces régions. In southern India, the mature seeds of Vigna trilobata are known to be roasted and eaten by the Kurumba "tribal sect" and are also consumed by the poorest inhabitants of these regions.

Cette plante est mentionnée dans différents articles anciens sous la dénomination Phaseolus trilobus Ait (voir notamment G.C. Toms J. Pharmacy & Pharmacol, vol. 30, 79 P, 1978) et sa composition chimique et son potentiel nutritif ont été décrits par P. Siddhuraju, K. Vijayakumari et K. Janardanan ("Nutritionnal and chemical évaluation of raw seeds of thé tribal pulse Vigna trilobata" (L.) Verdc. International journal of food sciences and nutrition (1992), 43, n 2, 97-103). This plant is mentioned in various ancient articles under the name Phaseolus trilobus Ait (see in particular GC Toms J. Pharmacy & Pharmacol, Vol 30, 79 P, 1978) and its chemical composition and its nutritive potential have been described by P. Siddhuraju, K. Vijayakumari and K. Janardanan (L.) Verdc, International Journal of Food Science and Nutrition (1992), 43, No. 2, 97-103).

La composition chimique (g/100 g de farine de graines) des graines de Vigna trilobata est d'après cet article la suivante - humidité : 5, 19 - protéines (N x 6,25) : 20,31 - fibres : 8,81 %, - lipides : 5,54 - cendres :2,71 avec une énergie de 1594 kJ/100 g matière sèche. The chemical composition (g / 100 g of seed meal) of the seeds of Vigna trilobata is according to this article the following - moisture: 5, 19 - proteins (N x 6.25): 20.31 - fibers: 8, 81%, - lipids: 5.54 - ash: 2.71 with an energy of 1594 kJ / 100 g dry matter.

La composition minérale de ces graines laisse apparaître une richesse en potassium (1397 mg/100 g de farine), en calcium (464 mg/100 g de farine), en magnésium (29l mg/100 g de farine). D'un point de vue nutritionnel, la composition en acides aminés indique que les acides aminés souffrés (cystine et méthionine), la thréonine et fisoleucine sont présents en quantités limitées, alors que les teneurs en valine, leucine, tyrosine, phénylalanine et lysine sont suffisantes. The mineral composition of these seeds reveals a high content of potassium (1397 mg / 100 g of flour), calcium (464 mg / 100 g of flour), magnesium (291 mg / 100 g of flour). From a nutritional point of view, the amino acid composition indicates that the amino acids suffering (cystine and methionine), threonine and fisoleucine are present in limited quantities, while the contents of valine, leucine, tyrosine, phenylalanine and lysine are sufficient.

La fraction globuline des protéines aurait une activité hémagglutinante vis à vis des groupes A, B, O. The globulin fraction of the proteins would have haemagglutinating activity with respect to the groups A, B, O.

Or, les inventeurs ont constaté, de manière inattendue et surprenante, qu'en dehors de leurs propriétés nutritives, les extraits protéiques des graines de Vigna trilobata présentent également, en application topique sur la peau, les phanères et les muqueuses, des effets biologiques particuliers et une très bonne tolérance et que l'utilisation, en tant qu'agent actif, unique ou associé à au moins un autre agent actif, d'au moins une fraction protéique soluble extraite de Vigna trilobata dans une composition ou un produit cosmétique ou dermopharmaceutique permet d'aboutir à des propriétés spécifiques identifiables et quantifiables en application topique sur la peau, les phanères et/ou les muqueuses. However, the inventors have found, unexpectedly and surprisingly, that apart from their nutritional properties, the protein extracts of the seeds of Vigna trilobata also have, in topical application to the skin, superficial body growths and mucous membranes, particular biological effects. and a very good tolerance and that the use, as an active agent, unique or associated with at least one other active agent, of at least one soluble protein fraction extracted from Vigna trilobata in a composition or a cosmetic or dermopharmaceutical product allows to obtain specific properties that are identifiable and quantifiable by topical application to the skin, superficial body growths and / or mucous membranes.

Ainsi, il a été notamemnt constaté des effets adoucissant, biofilmogène et tenseur confirmés par des mesures biophysiques, des effets conditionneur et réparateur, ainsi que des effets anti-irritant, apaisant et anti- peau sensible (traitement préventif et curatif des peaux sensibles). Thus, it has been noted, in particular, softening, biofilmogenic and tensor effects confirmed by biophysical measures, conditioning and repairing effects, as well as anti-irritant, soothing and anti-sensitive skin effects (preventive and curative treatment of sensitive skin).

Il a également été constaté que ces extraits facilitaient le coiffage des cheveux secs et mouillés et amélioraient la douceur et la souplesse des cheveux non endommagés. It has also been found that these extracts facilitate the styling of dry and wet hair and improve the softness and suppleness of undamaged hair.

Les tests effectués par les inventeurs ont d'autre part mis en évidence les propriétés supplémentaires suivantes - un fort pouvoir nutritif cellulaire, - des effets de stimulation de la croissance et du métabolisme cellulaire (activité énergisante, stimulante, anti-vieillissement), - une activation et stimulation de la contraction des lattices de collagène et de la sécrétion de glycosaminoglucanes (action cicatrisante, raffermissante, tonifiante, réduction de l'atrophie du derme), - une forte activité anti-apoptose, - une activité cytophotoprotectrice élevée vis à vis du stress oxydatif produit par les rayonnements UV-A, - une diminution de l'inflammation induite par les rayonnements UV-B, - une activité anti-protéase pouvant déboucher sur une activité anti-élastase. The tests carried out by the inventors have, on the other hand, demonstrated the following additional properties - a high cellular nutritional capacity, - stimulating effects of growth and cellular metabolism (energizing, stimulating, anti-aging activity). activation and stimulation of the contraction of collagen lattices and the secretion of glycosaminoglucans (healing, firming, toning action, reduction of dermal atrophy), high anti-apoptosis activity, high cytophotoprotective activity against oxidative stress produced by UV-A radiation, - a decrease in inflammation induced by UV-B radiation, - an anti-protease activity that may lead to anti-elastase activity.

Dans ce qui suit, on décrira différents exemples de procédés d'obtention des extraits précités, puis les tests mis en oeuvre pour la caractérisation et l'évaluation des propriétés desdits extraits découverts par les inventeurs. In what follows, various examples of processes for obtaining the above-mentioned extracts will be described, followed by the tests used for the characterization and evaluation of the properties of said extracts discovered by the inventors.

I) PREPARATION DES EXTRAITS PROTEIQUES DE GRAINES DE VIGNA TRILOBATA La préparation des protéines est réalisée par les techniques conventionnelles d'extraction des protéines végétales, de préparation des concentrés ou isolats protéiques, ou de purification (ultrafiltration, chromatographie d'échange d'ions, chromatographie d'affinité, précipitation, adsorption) connues de l'homme de l'art. I) PREPARATION OF PROTEIN EXTRACTS OF VIGNA TRILOBATA SEED Protein preparation is carried out by conventional techniques for extraction of plant proteins, preparation of protein concentrates or isolates, or purification (ultrafiltration, ion exchange chromatography, affinity chromatography, precipitation, adsorption) known to those skilled in the art.

Toutefois, de manière préférentielle, l'extraction se fera par l'eau ou une solution aqueuse à pH donné, éventuellement par l'intermédiaire d'un générateur à ultrasons. However, preferably, the extraction will be by water or an aqueous solution at a given pH, possibly via an ultrasonic generator.

A titres d'exemples illustratifs et non limitatifs, on décrira ci- après différents procédés d'obtention et de préparation d'extraits protéiques à partir de deux lots distincts de graines de Vigna trilobata d'origine indienne. As illustrative and nonlimiting examples, various processes for obtaining and preparing protein extracts from two distinct batches of Vigna trilobata seeds of Indian origin will be described below.

La teneur en protéines (N x 6,25) des deux lots de graines appelées respectivement A et B est respectivement de 20,75 % et 20,92 %. EXEMPLE I On ajoute dans1,25 litres d'eau distillée 125 g de farine obtenue par broyage de graines sèches de Vigna trilobata. The protein content (N x 6.25) of the two batches of seeds designated respectively A and B are respectively 20.75% and 20.92%. EXAMPLE I 125 ml of flour obtained by grinding dry seeds of Vigna trilobata is added to 1.25 liters of distilled water.

Après 15 minutes d'agitation, le pH de la solution est ajusté à pH 7,5 avec de la soude. After stirring for 15 minutes, the pH of the solution is adjusted to pH 7.5 with sodium hydroxide.

L'extraction est menée pendant 2 heures à température ambiante en maintenant le pH d'extraction à 7,5. The extraction is conducted for 2 hours at room temperature while maintaining the extraction pH at 7.5.

Après centrifugation pendant 10 minutes à 5000 g, le surnageant beige est recueilli, puis filtré sur 0,5 pm. After centrifugation for 10 minutes at 5000 g, the beige supernatant is collected and then filtered through 0.5 μm.

L'extrait peut être déshydraté par les techniques communes telles que l'atomisation, la lyophilisation ou analogue. The extract can be dehydrated by common techniques such as atomization, lyophilization or the like.

Après atomisation, le produit poudreux obtenu présente une teneur en protéines (N x 6,25) de 42,5 % (extrait la). Un deuxième extrait préparé dans les mêmes conditions sur un lot différent de graines permet d'obtenir un extrait qui présente une teneur en protéines (N x 6,25) de 46,4 % (extrait lb). After atomization, the powdery product obtained has a protein content (N x 6.25) of 42.5% (extract 1a). A second extract prepared under the same conditions on a different batch of seeds makes it possible to obtain an extract which has a protein content (N x 6.25) of 46.4% (extract lb).

EXEMPLE 2 On ajoute dans 2,5 litres d'eau distillée 250 g de farine obtenue par broyage de graines de Vigna trilobata, et on traite la solution comme dans l'exemple 1. <EXAMPLE 2 250 g of flour obtained by grinding seeds of Vigna trilobata are added to 2.5 liters of distilled water, and the solution is treated as in Example 1.

On obtient 2,15 litres d'une solution beige. 2.15 liters of a beige solution are obtained.

Le pH de la solution est ajusté à pH 4,5 avec de l'acide sulfurique et laissée sous agitation pendant 30 minutes. The pH of the solution is adjusted to pH 4.5 with sulfuric acid and left stirring for 30 minutes.

La solution est ensuite centrifugée pendant 15 minutes à 5 000 g : le précipité et le surnageant sont recueillis. The solution is then centrifuged for 15 minutes at 5000 g: the precipitate and the supernatant are collected.

Le précipité est mis en solution dans un volume d'eau correspondant à 20 % du volume avant précipitation. Le pH de la solution est ajusté avec NaOH jusqu'à ce qu'il se stabilise à 7,5. The precipitate is dissolved in a volume of water corresponding to 20% of the volume before precipitation. The pH of the solution is adjusted with NaOH until it stabilizes at 7.5.

La solution est de nouveau centrifugée pour éliminer l'insoluble. On obtient 600 ml d'une solution d'extrait sec de 3,5 % que l'on déshydrate par atomisation. The solution is again centrifuged to remove the insoluble material. 600 ml of a solution of dry extract of 3.5% is obtained which is dehydrated by atomization.

Après atomisation, le produit poudreux obtenu présente une teneur en protéines (N x 6,25) de 80,6 % (extrait 2a). After atomization, the powdery product obtained has a protein content (N × 6.25) of 80.6% (extract 2a).

Un deuxième extrait préparé dans les mêmes conditions sur un lot différent de graines permet d'obtenir un extrait qui présente une teneur en protéines (N x 6,25) de 80,7 % (extrait 2b). A second extract prepared under the same conditions on a different batch of seeds makes it possible to obtain an extract which has a protein content (N × 6.25) of 80.7% (extract 2b).

Des expériences de précipitation fractionnée à différents pH mènent aux résultats suivants

Fractional precipitation experiments at different pHs lead to the following results

Nature <SEP> de <SEP> la <SEP> fraction <SEP> Teneur <SEP> en <SEP> protéines <SEP> (%)
<tb> Précipité <SEP> H <SEP> 6,5 <SEP> 65,3
<tb> Précipité <SEP> H <SEP> 6,0 <SEP> 83,1
<tb> Précipité <SEP> H <SEP> 5,5 <SEP> 85,0
<tb> Précipité <SEP> H <SEP> 5,0 <SEP> 84,8 EXEMPLE 3 Les surnageants obtenus après précipitation des protéines à pH 4,5 selon l'exemple 2 sont filtrés sur 0,5 pm puis 0,22 l.im : les solutions claires obtenues sont déshydratées par atomisation. Nature <SEP> of <SEP><SEP> fraction <SEP> Content <SEP> in <SEP> proteins <SEP> (%)
<tb> Precipitation <SEP> H <SEP> 6.5 <SEP> 65.3
<tb> Precipitated <SEP> H <SEP> 6.0 <SEP> 83.1
<tb> Precipitation <SEP> H <SEP> 5.5 <SEP> 85.0
<tb> Precipitation <SE> H <SEP> 5.0 <SEP> 84.8 EXAMPLE 3 The supernatants obtained after precipitation of the proteins at pH 4.5 according to US Pat. Example 2 are filtered on 0.5 μm then 0.22 μm. The clear solutions obtained are dehydrated by spray drying.

La poudre obtenue présente une teneur en protéines de 15 % à 20 % et une activité inhibitrice de la trypsine déterminée selon la technique de Kakade de 8,4 TUI/mg à13,3 TUI/mg. The powder obtained has a protein content of 15% to 20% and a trypsin inhibitory activity determined according to the Kakade technique from 8.4 TUI / mg to 13.3% TUI / mg.

Ces fractions peuvent donc servir de base à la purification d'inhibiteurs de protéases (en vue de l'utilisation d'un extrait consistant en une fraction enrichie en inhibiteurs de protéases). These fractions can therefore serve as a basis for the purification of protease inhibitors (for the purpose of using an extract consisting of a protease inhibitor enriched fraction).

EXEMPLE 4 200 ml de l'extrait brut (pH 7,5) préparé selon l'exemple 1 sont transférés dans une cellule d'ultrafiltration du type Amicon 8200 munie d'une membrane d'ultrafiltration de100 000 Da (ré YM100, diamètre 6 cm). EXAMPLE 4 200 ml of the crude extract (pH 7.5) prepared according to Example 1 are transferred into an ultrafiltration cell of the Amicon 8200 type equipped with an ultrafiltration membrane of <3>. B> 100 000 Da (re YM100, diameter 6 cm).

La solution est concentrée jusqu'à 50 ml (pression d'air comprimé 3 bars). The solution is concentrated to 50 ml (3 bar compressed air pressure).

Le perméat P1 et le rétentat RI sont recueillis. The permeate P1 and the retentate R I are collected.

On ajoute au rétentat 150 ml d'eau distillée et on concentre de nouveau la solution jusqu'à 50 ml (rétentat R2). 150 ml of distilled water are added to the retentate and the solution is again concentrated to 50 ml (retentate R2).

Le rétentat R2 est déshydraté par lyophilisation : on obtient une fraction ayant une teneur de 80,7 % en protéines (N x 6,25). The retentate R2 is dehydrated by lyophilization: a fraction having a content of 80.7% of proteins (N x 6.25) is obtained.

EXEMPLE 5 Un concentré protéique est préparé selon l'exemple 2 à partir de 350 g de graines, l'extraction initiale se déroulant avec un rapport farine / solvant de 1I15. Le précipité est solubilisé à pH 7,5 dans 1,5 litres d'eau distillée. On obtient au final 500 ml de solution de concentré protéique à 57,53 g/1 de protéines (N x 6,25). EXAMPLE 5 A protein concentrate is prepared according to Example 2 from 350 g of seeds, the initial extraction taking place with a flour / solvent ratio of 1I15. The precipitate is solubilized at pH 7.5 in 1.5 liters of distilled water. Finally, 500 ml of protein concentrate solution containing 57.53 g / l of protein (N x 6.25) are obtained.

Les protéines sont hydrolysées à pH compris entre 7,5 et 8,5 à l'aide d'une protéase alcaline (2,5 % par rapport aux protéines de la solution). The proteins are hydrolysed at pH between 7.5 and 8.5 using an alkaline protease (2.5% with respect to the proteins of the solution).

L'hydrolyse est menée pendant 2 heures à la température et au pH optimums de l'enzyme utilisée et connus de l'homme du métier. L'enzyme est inactivée par chauffage à l00 C pendant au minimum 10 minutes. Après refroidissement à température ambiante, la solution est centrifugée puis filtrée jusqu'à 0,22 gym. The hydrolysis is conducted for 2 hours at the optimum temperature and pH of the enzyme used and known to those skilled in the art. The enzyme is inactivated by heating at 100 ° C. for at least 10 minutes. After cooling to room temperature, the solution is centrifuged and filtered to 0.22 g.

On obtient 460 ml de filtrat limpide foncé à 6,39 % d'extrait sec (protéines 45,2 g/1). 460 ml of dark clear filtrate with 6.39% solids (protein 45.2 g / l) are obtained.

Après atomisation, la poudre obtenue présente une teneur en protéines de 70,75 % (extrait 3a). After atomization, the powder obtained has a protein content of 70.75% (extract 3a).

L'analyse en perméation de gel sur colonne type Superose 12 HR des fractions extraites par ces différentes méthodes permet de caractériser au moins 10 fractions protéiques plus ou moins importantes selon les extraits et visibles, à titres d'exemples, sur la figure 1 (distribution des composés protéiques de l'extrait lb) et sur la figure 2 (distribution des composés protéiques de l'extrait obtenu dans l'exemple 4), à savoir - une fraction (notée FI) de très haut poids moléculaire (supérieure à 500 000 Da et proche de 1000 000 Da d'après l'étalonnage de la colonne), - une fraction F2 de poids moléculaire compris entre 250 000 Da et 300 000 Da (295 000 Da), - une fraction F3 de poids moléculaire compris entre 100 000 Da et 150 000 Da (138 000 Da), - quatre fractions notées F4, F5, F6 et F7 de poids moléculaires compris entre 5 000 Da et 70 000 Da, - trois fractions notées F8, F9 et F 10 de poids moléculaires compris entre 500 Da et 3 000 Da. The gel permeation analysis on a Superose 12 HR type column of the fractions extracted by these different methods makes it possible to characterize at least 10 more or less important protein fractions according to the extracts and visible, by way of example, in FIG. protein compounds of the extract lb) and in FIG. 2 (distribution of the protein compounds of the extract obtained in Example 4), namely - a fraction (denoted FI) of very high molecular weight (greater than 500 000 Da and close to 1000 000 Da according to the calibration of the column), - a fraction F2 of molecular weight between 250 000 Da and 300 000 Da (295 000 Da), - a fraction F3 of molecular weight between 100 000 Da and 1 50,000 Da (138,000 Da), - four fractions denoted F4, F5, F6 and F7 of molecular weight between 5,000 Da and 70,000 Da, - three fractions denoted F8, F9 and F10 of molecular weight between 500 Da and 3000 Da.

Les composants de l'hydrolysât réalisé selon l'exemple 5 précédent présentent un poids moléculaire moyen de 3 000 Da (voir figure 3 : courbe de même type que celles des figures 1 et 2). The components of the hydrolyzate produced according to the preceding example have an average molecular weight of 3000 Da (see FIG. 3: curve of the same type as those of FIGS. 1 and 2).

Les extraits obtenus au moyen des exemples de procédé décrits sont directement utilisables sous forme liquide, ou après séchage selon les techniques conventionnelles de déshydratation (atomisation, lyophilisation). The extracts obtained by means of the described process examples can be used directly in liquid form, or after drying according to conventional dehydration techniques (atomization, lyophilization).

Les fractions protéiques peuvent être utilisées soit sous leur forme native, sans modification des structures, soit sous la forme d'association(s) naturelle(s) d'au moins deux ou de toutes les fractions extraites de poids moléculaires apparents différents et correspondant aux différents pics de chromatogrammes représentés sur les dessins annexés et présentes naturellement dans les graines (extrait protéique total ou partiel) ou sous forme isolée. Les fractions protéiques peuvent être utilisées dans les compositions sous leur forme modifiée ou fonctionnalisée par l'un quelconque des traitements suivants - la polymérisation des protéines natives ; - l'hydrolyse chimique des protéines natives ; - l'hydrolyse enzymatique des protéines natives par des protéases d'origine animale, végétale, microbienne, ou fongique : pepsine, trypsine, chymotrypsine, papaïne, pronase, bromelaine, endoprotéinase, thermitase, protéases de Bacillus subtillis, d'Aspergillus niger ou d'Aspergillus aryzae (subtilisine, alcalase, neutrase) ; - transformation microbienne avec utilisation de protéines de Vigna trilobata en tant que substrat de fermentation par divers microorganismes comme les levures (Saccharomyces), moisissures (Aspergillus), bactéries (Bacillus et analogues) ; - fonctionnalisation chimique ou enzymatique par des procédés tels que la désamidation, succinilation ou phosphorylation ; - quaternisation ; - greffage de molécules saccharidiques ou lipidiques ou toute autre modification chimique par greffage. The protein fractions can be used either in their native form, without modification of the structures, or in the form of natural association (s) of at least two or all the fractions extracted with different apparent molecular weights and corresponding to the different chromatogram peaks shown in the accompanying drawings and naturally present in the seeds (total or partial protein extract) or in isolated form. The protein fractions can be used in the compositions in their modified or functionalized form by any of the following treatments - the polymerization of native proteins; chemical hydrolysis of native proteins; the enzymatic hydrolysis of the native proteins by proteases of animal, plant, microbial or fungal origin: pepsin, trypsin, chymotrypsin, papain, pronase, bromelain, endoproteinase, thermitase, proteases of Bacillus subtillis, Aspergillus niger or Aspergillus aryzae (subtilisin, alkalase, neutrase); microbial transformation using Vigna trilobata proteins as a fermentation substrate by various microorganisms such as yeast (Saccharomyces), mold (Aspergillus), bacteria (Bacillus and the like); chemical or enzymatic functionalization by processes such as deamidation, succinilation or phosphorylation; - quaternization; grafting of saccharide or lipid molecules or any other chemical modification by grafting.

Les extraits ou fractions protéiques solubles selon l'invention peuvent également être incorporés ou associés à tout autre vecteur cosmétique adéquat comme, par exemple, les agents filmogènes, les liposomes, les cyclodextrines, les micelles, les macro-, micro- et nanoparticules ainsi que les macro-, micro- et nanocapsules ou encore être absorbées ou greffées sur des polymères organiques ou des supports minéraux. II) MISE EN ÉVIDENCE DES PROPRIETES DES EXTRAITS PROTÉIQUES DE VIGNA TRILOBATA Les propriétés et activités biologiques des extraits protéiques de Vigna trilobata ont pu être déterminées et mesurées par des tests connus de l'homme de l'art dont les résultats sont présentés ci-après 1) EFFETS SUR LA CROISSANCE CELLULAIRE Des fibroblastes humains sont ensemencés dans un milieu optimum (avec SVF) et incubés 24 heures à 37 C. The soluble protein extracts or fractions according to the invention may also be incorporated or combined with any other suitable cosmetic vector, for example film-forming agents, liposomes, cyclodextrins, micelles, macro-, micro- and nanoparticles as well as macro-, micro- and nanocapsules or be absorbed or grafted onto organic polymers or mineral supports. II) HIGHLIGHTING THE PROPERTIES OF VIGNA TRILOBATA PROTEIN EXTRACTS The biological properties and activities of Vigna trilobata protein extracts could be determined and measured by tests known to those skilled in the art whose results are presented below. 1) EFFECTS ON CELL GROWTH Human fibroblasts are seeded in an optimum medium (with FCS) and incubated for 24 hours at 37 ° C.

Le milieu de croissance est remplacé ensuite par un milieu sub- optimum (sans SVF) contenant différentes concentrations d'extraits selon la description de l'invention. Après une incubation de 3 jours, la croissance a été évaluée par un dénombrement des cellules adhérentes par un compteur automatique de particules et par dosage du taux d'ATP intracellulaire. The growth medium is then replaced by a sub-optimum medium (without FCS) containing different concentrations of extracts according to the description of the invention. After a 3-day incubation, growth was assessed by counting the adherent cells by an automatic particle counter and by assaying the intracellular ATP level.

Les essais sont réalisés en triplicata et répétés deux ou trois fois. Les résultats sont calculés par rapport à une gamme étalon puis exprimés en pourcentage par rapport au témoin non traité et enfin présentés sous forme de moyenne avec SEM (erreur type de la moyenne). The tests are carried out in triplicate and repeated two or three times. The results are calculated with respect to a standard range and then expressed as a percentage with respect to the untreated control and finally presented as an average with SEM (standard error of the mean).

Les résultats de la figure 4 montrent que les extraits 1 a et 2a à des doses comprises entre 0,003 % et 0,03 % (p/v - poids/volume) augmentent nettement le nombre de cellules et le taux d'ATP dans les fibroblastes humains en croissance in vitro (les figures 4A et 4B représentent respectivement les cellules dénombrées à trois jours et le taux d'ATP à trois jours pour différentes concentrations en extraits la et 2a). The results of FIG. 4 show that extracts 1a and 2a at doses of between 0.003% and 0.03% (w / v - weight / volume) markedly increase the number of cells and the ATP level in fibroblasts. in vitro growth (FIGS. 4A and 4B show, respectively, the cells counted at three days and the ATP level at three days for different concentrations of extracts Ia and 2a).

2) EFFETS SUR LA SURVIE Le test est réalisé sur des fibroblastes selon le même protocole que la croissance, la durée d'incubation étant de 72 heures. 2) EFFECTS ON SURVIVAL The test is performed on fibroblasts according to the same protocol as growth, the incubation time being 72 hours.

La survie a été évaluée par dosage du taux - de protéines, - d'adénosine triphosphate (ATP), composé riche en énergie, produit principalement par les mitochondries et nécessaire à l'activité des nombreuses enzymes de la machinerie cellulaire, - du glutathion (GSH), peptide produit directement par la cellule pour lutter contre le stress oxydatif ou divers polluants comme les métaux lourds. Sa synthèse nécessite l'ATP comme source d'énergie. Survival was assessed by assaying the rate of protein, adenosine triphosphate (ATP), an energy-rich compound produced mainly by mitochondria and necessary for the activity of the many enzymes in the cellular machinery, glutathione ( GSH), peptide produced directly by the cell to fight against oxidative stress or various pollutants such as heavy metals. Its synthesis requires ATP as a source of energy.

Le mode d'expression des résultats est identique à celui du test de croissance. Les figures 5A et 5B représentent respectivement les taux de protéines et les taux de GSH mesurés à trois jours pour différentes concentrations en extraits 2a, 2b et 3. The expression mode of the results is identical to that of the growth test. FIGS. 5A and 5B show respectively the protein levels and the GSH levels measured at three days for different concentrations of extracts 2a, 2b and 3.

Les résultats des figures 5A et 5B (figure 5) indiquent que les extraits protéiques de Vigna trilobata selon l'exemple 2 à 0,05 % (p/v) augmentent nettement le taux de protéines et de glutathion dans les fibroblastes humains en survie in vitro. The results of FIGS. 5A and 5B (FIG. 5) indicate that the protein extracts of Vigna trilobata according to example 2 at 0.05% (w / v) markedly increase the level of proteins and glutathione in human fibroblasts in survival. vitro.

L'extrait selon l'exemple 3 à 0,01 % (p/v) augmente également légèrement le taux de protéines et de glutathion dans les fibroblastes humains en survie in vitro. The extract according to Example 3 at 0.01% (w / v) also slightly increases the level of proteins and glutathione in human fibroblasts in vitro survival.

Ces résultats indiquent que les extraits protéiques natifs ou hydrolysés de Vigna trilobata selon l'invention présentent de fortes capacités pour améliorer la croissance et le métabolisme (synthèse de l'ATP, des protéines et du glutathion) par les fibroblastes humains, ce qui indique nettement une activité énergisante, stimulante et "anti-vieillissement" de ces extraits. These results indicate that the native or hydrolyzed protein extracts of Vigna trilobata according to the invention have high capacity to improve growth and metabolism (synthesis of ATP, proteins and glutathione) by human fibroblasts, which clearly indicates an energizing, stimulating and "anti-aging" activity of these extracts.

3) MISE EN EVIDENCE DE L'ACTIVATION DE LA CONTRACTION DES LATTICES DE COLLAGENE a)Principe La contraction des lattices de collagène résulte d'un ensemble de fonctions biologiques mises en oeuvre par les fibroblastes qui permet in vivo la cicatrisation des plaies et aussi le maintien d'un derme de qualité. 3) EVIDENCE OF THE ACTIVATION OF THE CONTRACTION OF COLLAGEN LATTICE a) Principle The contraction of collagen lattices results from a set of biological functions implemented by fibroblasts which allows in vivo the healing of wounds and also the maintenance of a quality dermis.

Ainsi, la contraction des lattices de collagène in vitro constitue un bon modèle pour évaluer les capacités d'une substance à activer la cicatrisation ou à réduire l'atrophie du derme de la personne âgée. Thus, the contraction of collagen lattices in vitro is a good model for assessing the ability of a substance to activate healing or reduce atrophy of the elderly dermis.

b)Mode opératoire - mise en suspension des fibroblastes humains par trypsinisation, - mélange des fibroblastes humains avec un milieu de culture contenant des extraits selon l'invention et une solution de collagène type I, - incubation 14 jours à 37 C, C02 = 5 %, - mesure de deux diamètres orthogonaux tous les 2 à 3 jours et calcul de la surface en cm2, - coloration des GAG par le bleu alcian et quantification de l'intensité de coloration de l'auréole entourant les fibroblastes par un analyseur d'images. Les figures 6 et 7 des dessins annexés représentent respectivement les surfaces des lattices en cm2 et les taux de GAG sécrétés (en intensité de coloration péricellulaire) au 14ème jour d'incubation avec différentes concentrations d'extraits 2a et 2b. b) Procedure - suspending human fibroblasts by trypsinization, - mixing human fibroblasts with a culture medium containing extracts according to the invention and a collagen type I solution, - 14 days incubation at 37 ° C., C02 = 5%, - measurement of two orthogonal diameters every 2 to 3 days and calculation of the surface area in cm 2, - staining of GAG with alcian blue and quantification of the color intensity of the surrounding halo fibroblasts by an image analyzer. Figures 6 and 7 of the accompanying drawings respectively show the surfaces of lattices in cm2 and secreted GAG levels (in pericellular staining intensity) at the 14th day of incubation with different concentrations of extracts 2a and 2b.

En règle générale, dans un milieu de culture sans sérum de veau foetal (SVF), il n'y a pas de contraction des lattices de collagène. As a general rule, in a culture medium without fetal calf serum (FCS), there is no contraction of collagen lattices.

La vitesse et l'intensité de la contraction des lattices varient sensiblement d'un essai à l'autre, mais en comparant les résultats à l'intérieur d'un même essai, on peut noter que - le SVF a permis la contraction des lattices de collagène par les fibroblastes humains, - les extraits protéiques de Vigna trilobata selon l'exemple 2 assurent à eux seuls la contraction des lattices aussi bien ou mieux que le SVF et cet effet est retrouvé en présence de SVF à 2 %, - de plus, le taux de GAG sécrété par les fibroblastes est augmenté en présence de l'extrait 2b. The speed and intensity of the contraction of the lattices vary considerably from one test to the next, but comparing the results within the same test, it can be noted that - the SVF has allowed the contraction of the lattices. of collagen by human fibroblasts, - the protein extracts of Vigna trilobata according to Example 2 alone ensure the contraction of lattices as well or better than FCS and this effect is found in the presence of FCS at 2%, - more the level of GAG secreted by fibroblasts is increased in the presence of extract 2b.

Ces résultats indiquent une activité raffermissante et tonifiante des extraits selon l'invention ainsi qu'une capacité à réduire l'atrophie du derme chez la personne âgée. These results indicate a firming and toning activity of the extracts according to the invention as well as an ability to reduce the atrophy of the dermis in the elderly person.

4) MISE EN ÉVIDENCE D'UNE ACTIVITÉ ANTI- APOPTOSE a)Principe L'apoptose est un processus biologique actif utilisé par les organismes vivants pour éliminer certaines cellules de leurs tissus, par autolyse avec en particulier une destruction des protéines et de l'ADN nucléaire en petits fragments relargués dans le cytoplasme. 4) HIGHLIGHTING ANTI-APOPTOSIS ACTIVITY a) Principle Apoptosis is an active biological process used by living organisms to remove certain cells from their tissues, by autolysis with, in particular, destruction. proteins and nuclear DNA into small fragments released into the cytoplasm.

Ces petits fragments d'ADN sont pris comme paramètre d'évaluation du taux d'apoptose induite dans les kératinocytes en culture in vitro. These small DNA fragments are taken as a parameter for evaluating the rate of apoptosis induced in keratinocytes in vitro culture.

L'apoptose peut aussi être induite par un stress oxydatif (UV-R, inflammation), par une privation en facteurs de croissance ou par des substances toxiques (polluants, agents génotoxiques,...). Apoptosis can also be induced by oxidative stress (UV-R, inflammation), by deprivation in growth factors or by toxic substances (pollutants, genotoxic agents, ...).

Le principe du test est de mettre en évidence les capacités des extraits selon l'invention à réduire le taux d'apoptose induite dans une culture de cellules carencées en facteurs de croissance. The principle of the test is to highlight the ability of the extracts according to the invention to reduce the rate of apoptosis induced in a cell culture deficient in growth factors.

b)Préparation des cellules humaines Les kératinocytes humains sont ensemencés dans un milieu de culture complet (avec du sérum de veau foetal ou SVF) contenant un marqueur del'ADN: la Bromodésoxy-uridine ou BrdU. b) Preparation of Human Cells Human keratinocytes are inoculated in complete culture medium (with fetal calf serum or FCS) containing a DNA marker: Bromodeoxy-uridine or BrdU.

Les cellules reçoivent ensuite un milieu de culture sans sérum contenant les diverses concentrations des substances à tester et sont incubées durant 1 à 2 jours à 37 C. Après incubation, les cellules sont récupérées par trypsination puis analysées. The cells then receive a serum-free culture medium containing the various concentrations of the substances to be tested and are incubated for 1 to 2 days at 37 ° C. After incubation, the cells are recovered by trypsination and then analyzed.

c)Quantification du taux de cellules apoptotiques Dans cette méthode, les cellules sont lysées et le taux de cellules apoptotiques est quantifié par un test ELISA révélant le BrdU incorporé dans les fragments d'ADN cytoplasmiques. c) Quantification of the Apoptotic Cell Level In this method, the cells are lysed and the rate of apoptotic cells is quantified by an ELISA test revealing the BrdU incorporated in the cytoplasmic DNA fragments.

Les résultats sont exprimés en pourcentage par rapport au témoin (Henseleit U, Rosenbach T, Kolde G : "Induction of apoptosis in human HaCaT keratinocytes.", Archiv. Dermatol. Res., (288) 11, 676-683, 1996). d)Conclusions Les figures 8A à 8D représentent les numérations des cellules et les taux d'apoptose (taux de fragments d'ADN) pour les extraits la, lb, 2a et 2b pour différentes concentrations. The results are expressed as a percentage relative to the control (Henseleit U, Rosenbach T, Kolde G: "Induction of apoptosis in human HaCaT keratinocytes.", Archiv Dermatol Res., (288) 11, 676-683, 1996). d) Conclusions Figures 8A-8D represent cell counts and apoptosis rates (DNA fragment levels) for extracts 1a, 1b, 2a and 2b for different concentrations.

Les résultats de la figure 8 montrent que - dans les kératinocytes traités par les extraits 1 a et 1 b à 0,01 et 0,03 % (p/v), le taux d'apoptose chute fortement par rapport au lot témoin traité par un milieu sans SVF, - dans les kératinocytes traités par les extraits 2a et 2b à des doses comprises entre 0,01 % et 0,02 % (p/v), le taux d'apoptose chute fortement par rapport au lot témoin traité par un milieu sans SVF. The results of FIG. 8 show that in the keratinocytes treated with extracts 1a and 1b at 0.01 and 0.03% (w / v), the rate of apoptosis drops sharply compared to the control batch treated with a medium without FCS, - in the keratinocytes treated with extracts 2a and 2b at doses of between 0.01% and 0.02% (w / v), the rate of apoptosis drops sharply compared with the control batch treated with an environment without FCS.

Les extraits selon l'invention ont présenté des capacités significatives à réduire le taux d'apoptoses induites dans une culture de cellules humaines privées de facteurs de croissance ce qui indique de fortes capacités de ces extraits à lutter contre le vieillissement des tissus par un effet "growth-factor-like" (type facteur de croissance). The extracts according to the invention have shown significant capacity to reduce the rate of apoptosis induced in a culture of human cells deprived of growth factors, which indicates strong capacities of these extracts to fight against aging of the tissues by an effect " growth-factor-like "(growth factor type).

5) MISE EN EVIDENCE DES CAPACITES DE CYTOPROTECTION VIS A VIS D'UN STRESS OXYDATIF a)Principe Le but de ce test est d'évaluer les capacités anti-stress oxydatif des extraits protéiques de Vigna trilobata selon l'invention par un test sur fibroblastes humains en culture in vitro. 5) HIGHLIGHTING CYTOPROTECTION CAPACITIES WITH RESPECT TO OXIDATIVE STRESS a) Principle The purpose of this test is to evaluate the oxidative anti-stress properties of Vigna trilobata protein extracts according to invention by a test on human fibroblasts in vitro culture.

Ce test in vitro évalue les capacités de cytophotoprotection des fibroblastes humains vis à vis des UV-A. Les UV-A sont choisis comme modèle d'étude car ils pénètrent jusque dans le derme et ils induisent dans la peau un stress oxydatif révélé en particulier par une lipoperoxydation des membranes cytoplasmiques et par une chute de l'activité de nombreuses enzymes dont la catalase. Les lipoperoxydes formés se fragmentent en malonaldialdéhyde responsable de la réticulation de nombreuses molécules biologiques comme les protéines (inhibition d'enzymes) et les bases nucléiques (mutagenèse). This in vitro test evaluates the cytophotoprotection capabilities of human fibroblasts with respect to UV-A. UV-A are chosen as a study model because they penetrate into the dermis and they induce in the skin an oxidative stress revealed in particular by lipoperoxidation of cytoplasmic membranes and by a fall in the activity of many enzymes including catalase . The lipoperoxides formed fragment into malonaldialdehyde responsible for the crosslinking of many biological molecules such as proteins (enzyme inhibition) and nucleic bases (mutagenesis).

De plus, il a été démontré que l'inhibition de la catalase rendait les fibroblastes très sensibles au peroxyde d'hydrogène (H202) induit par les UV-B ou par les UV-A. In addition, catalase inhibition has been shown to make fibroblasts highly sensitive to UV-B or UV-A induced hydrogen peroxide (H2O2).

En effet, H202 doit être rapidement éliminé, car sinon il forme en présence du fer des radicaux hydroxyles (HO') très toxiques. b)Test de cytophotoprotection Les fibroblastes sont ensemencés dans un milieu de culture défini avec du sérum de veau foetal (SVF). Indeed, H2O2 must be quickly eliminated, because otherwise it forms in the presence of iron hydroxyl radicals (HO ') very toxic. b) Cytophotoprotection test The fibroblasts are inoculated in a defined culture medium with fetal calf serum (FCS).

Les extraits de Vigna trilobata selon l'invention ont été ajoutés 2 à 3 jours après l'ensemencement. The extracts of Vigna trilobata according to the invention were added 2 to 3 days after seeding.

Après une incubation de 1 à 2 jours à 37 C et C02 = 5 %, le milieu de culture est remplacé par une solution saline et les fibroblastes sont irradiés par une dose d'UV-A (3 à 15 J/cm2). After incubation for 1 to 2 days at 37 ° C and CO2 = 5%, the culture medium is replaced by saline and the fibroblasts are irradiated with a dose of UV-A (3 to 15 J / cm 2).

Dès la fin de l'irradiation, le taux de MDA (malonaldialdéhyde) est dosé dans la solution saline surnageante et les taux de protéines, de glutathion réduit (GSH) et de catalase active sont mesurés dans les fibroblastes. Le MDA est dosé par la réaction à l'acide thiobarbiturique et les protéines selon la méthode dite de Bradford tandis que le GSH est dosé par une sonde fluorescente. Le taux de catalase active est dosé selon une méthode spectrophotométrique et l'activité de la catalase est rapportée au taux de protéines mesuré dans les fibroblastes. At the end of the irradiation, the level of MDA (malonaldialdehyde) is measured in the supernatant saline solution and the levels of proteins, reduced glutathione (GSH) and active catalase are measured in the fibroblasts. MDA is determined by the reaction with thiobarbituric acid and proteins according to the Bradford method while GSH is measured by a fluorescent probe. The level of active catalase is determined according to a spectrophotometric method and the activity of catalase is related to the measured protein content in the fibroblasts.

c)Conclusion Les figures 9A et 9B représentent les taux mesurés de MDA, de protéines, de GSH et de catalase représentant l'activité cytophotoprotectrice relative (% par rapport aux témoins) des extraits l a et 2a. c) Conclusion Figures 9A and 9B show the measured levels of MDA, protein, GSH and catalase representing the relative cytophotoprotective activity (% relative to controls) of extracts 1a and 2a.

Les résultats de la figure 9 montrent que les extraits de Vigna trilobata selon l'invention ont présenté des capacités significatives à réduire les taux de lipoperoxydes induits et le taux de catalase inhibée par les UV-A appliqués sur une culture de fibroblastes humains en survie in vitro. The results of FIG. 9 show that the extracts of Vigna trilobata according to the invention have shown significant capacities to reduce the levels of lipoperoxides induced and the level of catalase inhibited by UV-A applied to a culture of human fibroblasts in survival. vitro.

Ils pourraient agir au moins en partie par une activation de la synthèse du glutathion dans les fibroblastes. They could act at least in part by an activation of glutathione synthesis in fibroblasts.

Ces résultats indiquent donc de fortes capacités des extraits de Vigna trilobata à réduire les effets nocifs d'un stress oxydatif sur la peau. These results therefore indicate strong capacities of Vigna trilobata extracts to reduce the harmful effects of oxidative stress on the skin.

6) MISES EN ÉVIDENCE DES PROPRIETES ANTI- INFLAMMATOIRES IN VITRO a)Principe Le but de ces tests est de mettre en évidence les capacités anti- inflammatoires des extraits de Vigna trilobata sur une culture de kératinocytes humains en survie in vitro. 6) IN VITRO ANTI-INFLAMMATORY PROCEEDINGS a) Principle The purpose of these tests is to highlight the anti-inflammatory capacities of Vigna trilobata extracts on a culture of human keratinocytes in survival. in vitro.

Les UV-B ont été choisis comme agent inducteur car ils déclenchent une inflammation cutanée (érythème, oedème) par activation d'enzymes telle que la phospholipase A2 (PLA2) qui libère l'acide arachidonique (acide gras insaturé) présent dans les membranes biologiques. Ceci entraine à la fois une dégradation des membranes et la synthèse de médiateurs de l'inflammation, car l'acide arachidonique est transformé sous l'action d'enzymes appelées "cyclo-oxygénases", en prostaglandines (PG) comme les PGE2. Les PGE2 sont relarguées hors de la cellule et vont induire par fixation sur des récepteurs spécifiques, un érythème et un oedème. De plus, les UV-B induisent des lésions de l'ADN dans les kératinocytes qui peuvent être directes comme les dimères de thymidine ou indirectes comme dans le cas de l'apoptose (induite par les UV) où l'ADN est fragmenté puis relargué dans le cytoplasme sous forme de petits fragments. UV-B has been chosen as inducing agent because it triggers skin inflammation (erythema, edema) by activation of enzymes such as phospholipase A2 (PLA2) which releases arachidonic acid (unsaturated fatty acid) present in biological membranes . This leads to both degradation of the membranes and the synthesis of mediators of inflammation, because the arachidonic acid is transformed under the action of enzymes called "cyclo-oxygenases" into prostaglandins (PG) such as PGE2. PGE2 are released from the cell and will induce erythema and edema by specific receptors. In addition, UV-B induces DNA damage in keratinocytes that may be direct, such as thymidine dimers or indirect as in the case of apoptosis (UV-induced) where DNA is fragmented and then released. in the cytoplasm as small fragments.

b)Mode opératoire L'ensemble des effets des UV-B a été évalué sur les cultures de kératinocytes in vitro. b) Procedure All the effects of UV-B were evaluated on keratinocyte cultures in vitro.

* Préparation des kératinocytes - ensemencement dans un milieu de culture complet contenant le cas échéant du BrdU (bromodésoxyuridine) pour le dosage de fragments d'ADN cytoplasmiques, - incubation pendant 3 jours à 37 C, - mise en place des actifs dans une solution saline glucosée, - irradiation par les UV-B avec une dose de 50 mJ/cm2, - incubation un jour à 37 C * Dosages Récupération du milieu surnageant pour - le dosage de la LDH active pour évaluer les effets délétères des UV-B sur les membranes, - le dosage du taux de PGE2 (test ELISA). * Preparation of keratinocytes - inoculation in a complete culture medium optionally containing BrdU (bromodeoxyuridine) for the assay of cytoplasmic DNA fragments, - incubation for 3 days at 37 ° C., - placement of the active agents in a saline solution glucose, - irradiation with UV-B at a dose of 50 mJ / cm 2, - incubation for one day at 37 ° C * Assays Recovery of the supernatant medium for - the determination of active LDH to evaluate the deleterious effects of UV-B on membranes, - the determination of the level of PGE2 (ELISA test).

Récupération des kératinocytes adhérents par trypsinisation pour - un dénombrement par un compteur automatique de particules, - le dosage du taux de fragments d'ADN cytoplasmiques (test ELISA) pour évaluer les effets délétères des UV-B sur l'ADN. Recovery of adherent keratinocytes by trypsinization for - counting by an automatic particle counter, - determination of the level of cytoplasmic DNA fragments (ELISA test) to evaluate the deleterious effects of UV-B on DNA.

Les résultats sont calculés par rapport à une gamme étalon puis rapportées au nombre de cellules et exprimés en % par rapport au témoin non traité et irradié. c)Conclusion Les figures 10A et 10B des dessins annexés représentent les activités relatives en termes de propriétés anti-inflammatoires des extraits la, 1 b, 2a et 2b. The results are calculated with respect to a standard range and then referred to the number of cells and expressed in% relative to the untreated and irradiated control. c) Conclusion Figs. 10A and 10B of the accompanying drawings show the relative activities in terms of anti-inflammatory properties of extracts 1 a, 1b, 2a and 2b.

Les résultats de la figure 10 indiquent que les différents extraits de Vigna trilobata selon l'invention (à 0,01 % ou 0,02 %) ont sensiblement réduit les effets des UV-B sur le nombre de kératinocytes, sur le taux de LDH et de PGE2 relarguées et sur le taux de fragments d'ADN cytoplasmiques. The results of FIG. 10 indicate that the various extracts of Vigna trilobata according to the invention (at 0.01% or 0.02%) have substantially reduced the effects of UV-B on the number of keratinocytes, on the level of LDH and released PGE2 and the level of cytoplasmic DNA fragments.

Ces extraits de Vigna trilobata selon l'invention présentent donc des capacités élevées à réduire les lésions induites par les UV-B sur les membranes biologiques et sur l'ADN et à réduire le processus inflammatoire induit par les UV-B sur les kératinocytes humains. These extracts of Vigna trilobata according to the invention therefore have high capacities to reduce the UV-B induced lesions on biological membranes and on DNA and to reduce the UV-B induced inflammatory process on human keratinocytes.

7) MISE EN EVIDENCE D'UNE ACTIVITE ANTI-PEAU SENSIBLE PAR UN TEST A LA CAPSAÏCINE a)Principe de l'essai L'essai consiste en une appréciation sensorielle des effets générés après une application standardisée de capsaïcine à 0,075 % in vivo chez l'homme : irritation, brûlure, douleur et érythème. L'essai est mené dans des conditions standardisées de température et d'humidité relative, sur un sujet très sensible à la capsaïcine au niveau du visage, par un manipulateur expert ; tous deux sont entraînés à la description sensorielle des effets observés au cours du test. 7) HIGHLIGHTING SENSITIVE ANTI-SKIN ACTIVITY BY CAPSAICIN TEST a) Principle of the test The test consists of a sensory assessment of the effects generated after a standardized application of capsaicin 0.075% in vivo in humans: irritation, burning, pain and erythema. The test is conducted under standardized conditions of temperature and relative humidity, on a subject very sensitive to capsaicin in the face, by an expert manipulator; both are trained in the sensory description of the effects observed during the test.

b)Mise en évidence de l'activité anti-peau sensible Sur une zone cutanée délimitée au niveau de la joue, l'extrait 2a incorporé à 1,5 % dans une émulsion H/E a été appliqué. 30 minutes après séchage, une crème dosée à 0,075 % de capsaïcine a été ensuite également appliquée. Pendant les 30 minutes suivantes, les effets générés par la capsaïcine sont évalués sur une échelle semi-quantitative à 4 points (de 0 = nul à 3 = sévère) - par le sujet : irritation, brûlure, douleur en fonction de son ressenti, - par le manipulateur expert : érythème. b) Demonstration of the activity anti-skin sensitive On a cutaneous zone delimited at the level of the cheek, the extract 2a incorporated at 1.5% in a O / W emulsion was applied. 30 minutes after drying, a cream dosed with 0.075% capsaicin was then also applied. During the next 30 minutes, the effects generated by capsaicin are evaluated on a semi-quantitative scale at 4 points (from 0 = zero to 3 = severe) - by the subject: irritation, burn, pain according to his feelings, - by the expert manipulator: erythema.

L'essai est réalisé contre placebo (émulsion H/E seule) et contre témoin (peau non traitée au préalable, recevant la crème à la capsaïcine seule). Dans ces conditions, l'extrait 2a améliore les paramètres de douleur et d'irritation de 83 % (25 % pour le placebo) et le paramètre érythème de 22 % (14 % pour le placebo), démontrant son effet apaisant, anti-irritant et anti-peau sensible. The test is performed against placebo (O / W emulsion alone) and against control (untreated skin, receiving the capsaicin cream alone). Under these conditions, extract 2a improves pain and irritation parameters by 83% (25% for placebo) and the erythema parameter by 22% (14% for placebo), demonstrating its soothing, anti-irritant effect. and anti-sensitive skin.

8) MISE EN EVIDENCE D'UN EFFET TENSEUR PAR UNE MESURE QUANTITATIVE IN VIVO CHEZ L'HOMME A L'AIDE D'UNE TECHNIQUE D'EXTENSIONMETRIE HORIZONTALE a)Principe de l'essai L'essai consiste à mesurer le déplacement de la peau en fonction d'une force sinusoïdale constante qui est appliquée parallèlement à sa surface. Les mesures sont réalisées au moyen d'un dispositif du type de celui objet de la demande de brevet français n 98 12125 au nom de la demanderesse. Le traitement des signaux de force et d'allongement par une ellipse d'hystérèse permet de calculer l'effort dynamique ou DSR (Dynamic Spring Rate). L'application d'un produit tenseur à la surface de la peau se traduit par une augmentation du DSR, conséquence à force constante d'une diminution de l'allongement de la peau lors de la contrainte. L'appareillage est entièrement piloté par ordinateur. Les essais sont menés dans des conditions standardisées de température et d'humidité relative. 8) HIGHLIGHTING A TENSE EFFECT BY A QUANTITATIVE MEASUREMENT IN VIVO IN HUMANS USING A HORIZONTAL EXTENSION TECHNOLOGY a) Principle of the test The test consists of measuring the displacement of the skin according to a constant sinusoidal force which is applied parallel to its surface. The measurements are made by means of a device of the type of the subject of the French patent application No. 98 12125 in the name of the applicant. The processing of the force and elongation signals by a hysteresis ellipse makes it possible to calculate the dynamic force or DSR (Dynamic Spring Rate). The application of a tensor product on the surface of the skin results in an increase in the DSR, a constant consequence of a decrease in the elongation of the skin during the stress. The equipment is fully computer controlled. The tests are conducted under standardized conditions of temperature and relative humidity.

b)Mise en évidence de l'activité Sur une zone cutanée située sur le dos de la main du volontaire, un pion est collé à l'aide de colle super glue. Cinq mesures d'extensiométrie horizontale sont alors réalisées sur la peau non traitée témoin. Puis le véhicule placebo est appliqué. Après 5 minutes de séchage, cinq mesures servent à contrôler l'effet du véhicule. b) Demonstration of activity On a cutaneous area located on the back of the volunteer's hand, a piece is glued with super glue glue. Five measurements of horizontal extensometry are then performed on the untreated control skin. Then the placebo vehicle is applied. After 5 minutes of drying, five measurements are used to control the effect of the vehicle.

Puis enfin la peau est à nouveau traitée avec le principe actif dont l'effet tenseur est mesuré par les cinq dernières mesures après 5 minutes d'attente. Lors de chaque étape, la moyenne des cinq mesures est effectuée. Les résultats finaux sont exprimés en % de variation du DSR entre, d'une part, l'effet produit par le véhicule placebo (eau) et, d'autre part, l'activité du principe actif. Finally, the skin is again treated with the active ingredient whose tensor effect is measured by the last five measurements after 5 minutes of waiting. At each step, the average of the five measurements is performed. The final results are expressed in% of variation of the DSR between, on the one hand, the effect produced by the placebo vehicle (water) and, on the other hand, the activity of the active ingredient.

Dans ces conditions, l'extrait 2a testé sur un sujet volontaire sain féminin, en solution aqueuse à la concentration de 1,5 % a augmenté le DSR de 76 %, démontrant son effet tenseur cutané. 9) MISE EN EVIDENCE D'UN EFFET ADOUCISSANT PAR UNE MESURE QUANTITATIVE IN VIVO CHEZ L'HOMME A L'AIDE D'UNE TECHNIQUE DE FRICTIOMETRIE a)Principe de l'essai L'essai consiste à appliquer sur la peau une force constante par l'intermédiaire d'un patin qui est mis en rotation à vitesse et pression contrôlées. Le couple de frottement est mesuré. Il permet de calculer le coefficient de friction du patin sur la peau. Le coefficient de friction dépend de l'état de surface de la peau, notamment de son hydratation et de sa douceur. Plus la peau est hydratée et douce au toucher, plus le coefficient de friction augmente. L'appareillage est entièrement piloté par ordinateur. Les essais sont menés dans des conditions standardisées de température et d'humidité relative. Under these conditions, the extract 2a tested on a female healthy volunteer subject, in aqueous solution at the concentration of 1.5% increased the DSR of 76%, demonstrating its skin tensor effect. 9) HIGHLIGHTING OF A SOFTENING EFFECT BY A QUANTITATIVE MEASUREMENT IN VIVO IN HUMANS USING A FRICTIOMETRY TECHNIQUE a) Principle of the test The test consists in applying on the skin a constant force via a pad which is rotated at controlled speed and pressure. The friction torque is measured. It calculates the coefficient of friction of the pad on the skin. The coefficient of friction depends on the surface condition of the skin, particularly its hydration and softness. The more the skin is hydrated and soft to the touch, the more the coefficient of friction increases. The equipment is fully computer controlled. The tests are conducted under standardized conditions of temperature and relative humidity.

b)Mise en évidence de l'activité Sur une zone cutanée de 9 cm2 sur la face antéro-interne de l'avant-bras du volontaire, une mesure de frictiométrie est réalisée sur la peau sans traitement (T0). Puis le principe actif est appliqué. Après 15 minutes de séchage, une mesure de frictiométrie sert à contrôler l'efficacité du principe actif (T15). Simultanément, une zone cutanée voisine témoin est mesurée dans les mêmes conditions. Le résultat est exprimé en différence de de variation entre TO et T l 5 de la zone traitée par rapport à la zone témoin. b) Demonstration of the activity On a cutaneous area of 9 cm2 on the antero-internal face of the forearm of the volunteer, a measure of frictiometry is performed on the skin without treatment ( T0). Then the active ingredient is applied. After 15 minutes of drying, a measurement of glucose control serves to control the effectiveness of the active ingredient (T15). Simultaneously, a neighboring skin area control is measured under the same conditions. The result is expressed as the difference in variation between TO and T 15 of the treated area relative to the control area.

Dans ces conditions, l'extrait 2a testé sur un sujet volontaire sain féminin, en solution aqueuse à la concentration de 1,5 % augmente le coefficient de friction de 20,9 % démontrant son efficacité d'amélioration de la douceur et de l'hydratation cutanées. Under these conditions, the extract 2a tested on a female healthy volunteer subject, in aqueous solution at the concentration of 1.5% increases the coefficient of friction of 20.9% demonstrating its effectiveness of improving the softness and the skin hydration.

La présente invention a également pour objet une composition cosmétique ou dermopharmaceutique à usage topique pour la peau, les phanères et/ou les muqueuses, comportant à titre d'agent actif, unique ou associé à au moins un autre agent actif, au moins une fraction protéique extraite de graines de Vigna trilobata. The subject of the present invention is also a cosmetic or dermopharmaceutical composition for topical use for the skin, superficial body growths and / or mucous membranes, comprising as active agent, alone or in combination with at least one other active agent, at least one fraction. protein extracted from Vigna trilobata seeds.

Cette composition cosmétique pourra comporter à titre d'agent actif unique ou associé à au moins un autre agent actif, au moins un extrait du type précité utilisé pour produire au moins l'un des effets biologiques particuliers décrits précédemment, voire plusieurs de ces effets en combinaison. La composition cosmétique ou dermopharmaceutique selon l'invention pourra avantageusement comporter entre0,001 % et 50 % en poids de fraction(s) protéique(s) extraites de graines de Vigna trilobata (extraits tels qu'obtenus par l'un des procédés précités), éventuellement intégrés dans des vecteurs cosmétiques adaptés, tels que les liposomes, les macro-, micro- et nanocapsules, les macro-, micro- et nanoparticules et autres formes analogues connues. This cosmetic composition may comprise, as single active agent or associated with at least one other active agent, at least one extract of the aforementioned type used to produce at least one of the particular biological effects described above, or even several of these effects. combination. The cosmetic or dermopharmaceutical composition according to the invention may advantageously have between 0.001% and 50% by weight of protein fraction (s) extracted from seeds of Vigna trilobata (extracts as obtained by one of the abovementioned methods), optionally integrated into suitable cosmetic vectors, such as liposomes, macro-, micro- and nanocapsules, macro-, micro- and nanoparticles and other similar known forms.

Les extraits précités peuvent être utilisés, non seulement pour des applications de soins et d'hygiène de la peau (produits pour le visage et le corps, produits de jour ou de nuit, produits solaires, produits revitalisants et régénérants, produits antirides, produits amincissants, produits anti- vieillissement) mais également dans le domaine des soins et de l'hygiène capillaires, sous différentes formes galéniques telles que lotion ou shampooing, crèmes, mousses, savons, bâtonnets, gels, hydrogels, produits à pulvériser, émulsions, produits protecteurs, réparateurs, adoucissants, filmogènes et photoprotecteurs ; produits pour permanente et produits de coloration. The above extracts can be used not only for skin care and hygiene applications (face and body products, day and night products, sun care products, revitalizing and regenerating products, anti-wrinkle products, slimming products). , anti-aging products) but also in the field of hair care and hygiene, in various galenical forms such as lotion or shampoo, creams, foams, soaps, sticks, gels, hydrogels, sprays, emulsions, protective products , repairers, softeners, film formers and photoprotective agents; permanent products and coloring products.

A titre d'exemples non limitatifs, on décrira ci-après différents exemples de réalisations pratiques de compositions cosmétiques selon l'invention, ainsi que les principales étapes de leurs procédés d'obtention. Exemple 1 Un produit cosmétique sous forme de crème nutritive, raffermissante, tonifiante et énergisante, qui est destinée à lutter notamment contre le vieillissement cutané, l'atrophie du derme et la perte d'élasticité de la peau, pourra être constitué des phases suivantes

By way of nonlimiting examples, various examples of practical embodiments of cosmetic compositions according to the invention, as well as the main steps of their production processes, will be described below. Example 1 A cosmetic product in the form of a nourishing cream, firming, toning and energizing, which is intended to fight in particular against cutaneous aging, the atrophy of the dermis and the loss of elasticity of the skin, may consist of the following phases

Phase <SEP> grasse
<tb> ceteareth <SEP> 25 <SEP> 2,00
<tb> ceteareth <SEP> 6 <SEP> et <SEP> alcool <SEP> stéarilyque <SEP> 1,00
<tb> alcool <SEP> cétylique <SEP> 4,00
<tb> stéarate <SEP> de <SEP> glycol <SEP> 4,00
<tb> pétrolatum <SEP> 5,00
<tb> triglycérides <SEP> capryliques <SEP> /capriques <SEP> 5,00
<tb> Phase <SEP> aqueuse
<tb> glycérine <SEP> 10,00
<tb> protéines <SEP> de <SEP> Vigna <SEP> selon <SEP> l'exemple <SEP> 1 <SEP> de <SEP> procédé <SEP> 5,00 -18- eau distillée 8,50 conservateur Elestab 4112 (Laboratoires Sérobiologiques) 0,40 parfum 0,30 eau distillée qsp 100,00 Le procédé de préparation de la crème précitée consiste essentiellement à porter la phase grasse à 80 C, à porter la phase aqueuse également à 80 C et à y dissoudre l'Elestab 4112, à préparer séparément la solution mère d'extrait de Vigna, à verser la phase grasse dans la phase aqueuse sous agitation turbine, puis, aux environs de 50 C, à y introduire la solution mère d'extrait de Vigna et enfin à poursuivre l'agitation jusqu'au refroidissement. Fat phase <SEP>
<tb> ceteareth <SEP> 25 <SEP> 2.00
<tb> ceteareth <SEP> 6 <SEP> and <SEP> alcohol <SEP> stéarilyque <SEP> 1.00
<tb> alcohol <SEP> Cetyl <SEP> 4.00
<tb> Stearate <SEP> of <SEP> Glycol <SEP> 4.00
<tb> petrolatum <SEP> 5.00
<tb> triglycerides <SEP> caprylic <SEP> / capriques <SEP> 5.00
<tb> Phase <SEP> aqueous
<tb> glycerin <SEP> 10.00
<tb> proteins <SEP> of <SEP> Vigna <SEP> according to <SEP> example <SEP> 1 <SEP> of <SEP> process <SEP> 5.00 -18- distilled water 8.50 preservative Elestab 4112 (Serobiological Laboratories) 0.40 perfume 0.30 distilled water qs 100.00 The process for the preparation of the above-mentioned cream consists essentially of bringing the fatty phase to 80 ° C., to bring the aqueous phase also to 80 ° C. and to dissolve therein. Elestab 4112, to separately prepare the Vigna extract stock solution, to pour the fatty phase in the aqueous phase with stirring turbine, then, at about 50 C, to introduce the stock solution of Vigna extract and finally to continue the agitation until cooling.

EXEMPLE 2 Un produit cosmétique sous forme de crème adoucissante, bïofilmogène, apaisante et cicatrisante, qui est destinée à lutter notamment contre les agressions solaires et liées à la pollution et à traiter les peaux sensibles (anti-irritante, diminuant l'inflammation) pourra être constitué des phases suivantes

EXAMPLE 2 A cosmetic product in the form of a softening, biofilmogenic, soothing and healing cream, which is intended to fight, in particular, against solar and pollution-related aggressions and to treat sensitive skin (anti-irritant, decreasing inflammation) may consist of the following phases

Phase <SEP> grasse
<tb> stéarate <SEP> de <SEP> glycol <SEP> 14,00
<tb> octyl <SEP> dodécanol <SEP> 6,00
<tb> adipate <SEP> dibutylique <SEP> 6,00
<tb> ceteareth <SEP> 12 <SEP> 1,50
<tb> ceteareth <SEP> 20 <SEP> 1,50

Fat phase <SEP>
<tb> stearate <SEP> of <SEP> glycol <SEP> 14.00
<tb> octyl <SEP> dodecanol <SEP> 6,00
<tb> adipate <SEP> dibutyl alcohol <SEP> 6,00
<tb> ceteareth <SEP> 12 <SEP> 1.50
<tb> ceteareth <SEP> 20 <SEP> 1.50

Phase <SEP> aqueuse
<tb> PVP <SEP> (polyvinylpyrrolidone) <SEP> 0,50
<tb> glycérine <SEP> 4,00
<tb> Elestab <SEP> 388 <SEP> (Laboratoires <SEP> Sérobiologiques) <SEP> 2,00
<tb> protéines <SEP> de <SEP> Vigna <SEP> selon <SEP> l'exemple <SEP> 2 <SEP> (extrait <SEP> 2a) <SEP> 5,00
<tb> eau <SEP> distillée <SEP> 9,00
<tb> parfum <SEP> 0,20
<tb> eau <SEP> distillée <SEP> qsp <SEP> 100,00 Le procédé de préparation de la crème précitée consiste essentiellement à porter la phase grasse à 80 C, à porter la phase aqueuse également à 80 C et à y dissoudre Elestab 388 et PVP, à verser la phase grasse dans la phase aqueuse sous agitation turbine à 80 C, puis, à refroidir progressivement sous agitation, à y introduire ensuite, aux environs de 50 C, la dispersion mère de l'extrait de Vigna et enfin à poursuivre l'agitation jusqu'au refroidissement. <SEP> aqueous phase
<tb> PVP <SEP> (polyvinylpyrrolidone) <SEP> 0.50
<tb> glycerine <SEP> 4.00
<tb> Elestab <SEP> 388 <SEP>(SEP> Serobiological Laboratories) <SEP> 2.00
<tb> proteins <SEP> of <SEP> Vigna <SEP> according to <SEP> example <SEP> 2 <SEP> (extract <SEP> 2a) <SEP> 5.00
<tb> water <SEP> distilled <SEP> 9,00
<tb> perfume <SEP> 0.20
<tb> water <SEP> distilled <SEP> qsp <SEP> 100,00 The process for the preparation of the above-mentioned cream consists essentially of bringing the fatty phase to 80 ° C., to bring the aqueous phase also to 80 ° C. and to dissolve therein Elestab 388 and PVP, to pour the fatty phase in the aqueous phase with stirring turbine at 80 C, then, to cool gradually with stirring, to introduce thereafter, at about 50 C, the mother dispersion of Vigna extract and finally to continue the agitation until cooling.

EXEMPLE 3 Un produit cosmétique sous forme de lotion capillaire conditionneuse, non rincée et biofilmogène, qui est destinée notamment à faciliter le coiffage des cheveux et à améliorer la douceur et la souplesse de ces derniers, pourra présenter la composition suivante Le procédé de préparation de la lotion non rincée consiste essentiellement à dissoudre Elestab 305 et hydroxyéthylcellulose dans l'eau chauffée aux environs de 50 C, à y disperser le parfum et cremophor RH 410, puis à ramener le mélange à température ambiante, à y dissoudre ensuite l'extrait de Vigna et enfin à réaliser un filtrage. EXAMPLE 3 A cosmetic product in the form of a conditioner conditioning, non-rinsed and biofilmogenic hair lotion, which is intended in particular to facilitate the styling of hair and improve the softness and flexibility of the latter, may present the composition The method for preparing the non-rinsed lotion consists essentially in dissolving Elestab 305 and hydroxyethylcellulose in water heated to around 50 ° C., dispersing the perfume and cremophor RH 410 therein, and then bringing the mixture to room temperature, thereto. dissolve the Vigna extract and finally filter.

Bien entendu, l'invention n'est pas limitée aux modes de réalisation décrits. Des modifications restent possibles, notamment du point de vue de la constitution des divers éléments ou par substitution d'équivalents techniques, sans sortir pour autant du domaine de protection de l'invention.

Of course, the invention is not limited to the embodiments described. Modifications are possible, particularly from the point of view of the constitution of the various elements or by substitution of technical equivalents, without departing from the scope of protection of the invention.

protéines <SEP> de <SEP> Vigna <SEP> selon <SEP> l'exemple <SEP> 1 <SEP> (extrait <SEP> la) <SEP> 2,00
<tb> eau <SEP> distillée <SEP> 9,50
<tb> hydroxyéthylcellulose <SEP> 0,50
<tb> Elestab <SEP> 305 <SEP> (Laboratoires <SEP> Sérobiologiques) <SEP> 0,50
<tb> parfum <SEP> 0,10
<tb> cremophor <SEP> RH <SEP> 410 <SEP> 0,30
<tb> eau <SEP> distillée <SEP> qsp <SEP> l00,00proteins <SEP> of <SEP> Vigna <SEP> according to <SEP> example <SEP> 1 <SEP> (extract <SEP> la) <SEP> 2.00
<tb> water <SEP> distilled <SEP> 9.50
<tb> hydroxyethylcellulose <SEP> 0.50
<tb> Elestab <SEP> 305 <SEP> (Laboratories <SEP> Serobiology) <SEP> 0,50
<tb> perfume <SEP> 0.10
<tb> cremophor <SEP> HR <SEP> 410 <SEP> 0.30
<tb> water <SEP> distilled <SEP> qsp <SEP> 100.00

Claims

1. Use as an active agent in a cosmetic or dermopharmaceutical composition for topical use for the skin, superficial body growths and / or mucous membranes of at least one soluble protein fraction extracted from the seed of the Vigna trilobata plant.

2. Use according to claim 1, characterized in that the Vigna trilobata seed extract is used as an active agent having cell growth and cell metabolism stimulation activities, stimulating the contraction of lattices. collagen, stimulating the secretion of glycosaminoglycans, anti-apoptosis activities, anti-inflammatory activities and / or cytophotoprotective activities.

3. Use according to any one of claims 1 and 2, characterized in that the protein fraction (s) (s) are extracted with water or a saline solution at a given pH.

4. Use according to any one of claims 1 to 3, characterized in that the protein fraction (s) (s) are extracted in aqueous solution by means of an ultrasonic generator.

5. Use according to any one of claims 3 and 4, characterized in that the fraction (s) protein (s) are purified by a procedure selected from the group consisting of precipitation, adsorption, chromatography ion exchange, affinity chromatography and ultrafiltration.

6. Use according to any one of claims 1 to 5, characterized in that the extracted fraction consists of a fraction enriched protease inhibitors.

7. Use according to any one of claims 1 to 6, characterized in that the protein fraction (s) forming active agent consist of a chemical or enzymatic hydrolysate prepared from native proteins.

8. Use according to any one of claims 1 to 6, characterized in that the final protein fraction (s) (s) are obtained by polymerization of native proteins.

9. Use according to any one of claims 1 to 6, characterized in that the protein fraction (s) extracted (s) is (are) chemically modified by grafting.

10. Use according to any one of claims 1 to 9, characterized in that the extracted active agent fractions comprise at least two protein fractions of different apparent molecular weight.

11. Use according to any one of claims 1 to 5, characterized in that the extract consists of a total extract consisting of all extractable protein fractions naturally present in the seeds.

12. Cosmetic or dermopharmaceutical composition for topical use for the skin, superficial body growths and / or mucous membranes, characterized in that it comprises, as active agent, alone or in combination with at least one other active agent, at least one fraction protein extracted from Vigna trilobata seeds.

13. Cosmetic or dermopharmaceutical composition according to claim 12, characterized in that it comprises as a growth stimulating agent and cell metabolism at least one soluble protein fraction extracted from seeds of Vigna trilobata.

14. Cosmetic or dermophannaceutical composition according to any one of claims 12 and 13, characterized in that it comprises as a stimulating agent the contraction of collagen lattices at least one soluble protein fraction extracted from seeds of Vigna trilobata.

15. Cosmetic or dermopharmaceutical composition according to any one of claims 12 to 14, characterized in that it comprises as a stimulating agent the secretion of glycosaminoglycans at least one soluble protein fraction extracted from seeds of Vigna trilobata.

16. Cosmetic or dermopharmaceutical composition according to any one of claims 12 to 15, characterized in that it comprises as an anti-apoptosis agent at least one soluble protein fraction extracted from seeds of Vigna trilobata.

17. Cosmetic or dermopharmaceutical composition according to any one of claims 12 to 16, characterized in that it comprises as a cytophotoprotective agent against the effects of UV-A at least one soluble protein fraction extracted from seeds of Vigna trilobata.

18. Cosmetic or dermopharmaceutical composition according to any one of claims 12 to 17, characterized in that it comprises as protective agent against UV-B-induced inflammation at least one soluble protein fraction extracted from seeds of Vigna trilobata.

19. Cosmetic or dermopharmaceutical composition according to any one of claims 12 to 18, characterized in that it comprises as agent for the preventive and curative treatment of sensitive skin at least one soluble protein fraction extracted from seeds of Vigna trilobata .

20. Cosmetic or dermopharmaceutical composition according to any one of claims 12 to 19, characterized in that it comprises as tensioning agent for the skin and / or mucous membranes at least one soluble protein fraction extracted from seeds of Vigna trilobata .

21. Cosmetic or dermopharmaceutical composition according to any one of claims 12 to 20, characterized in that it comprises as softening agent for the skin and / or mucous membranes at least one soluble protein fraction extracted from seeds of Vigna trilobata .

22. Cosmetic or dermopharmaceutical composition according to any one of claims 12 to 19, characterized in that it comprises as a capillary active agent facilitating the styling of dry and wet hair and improving the softness and flexibility of undamaged hair at least one soluble protein fraction extracted from Vigna trilobata seeds.

23. Cosmetic or dermopharmaceutical composition according to any one of claims 12 to 22, characterized in that it comprises between 0.001% and 50% by weight of protein fraction (s) extracted from seeds of Vigna trilobata, possibly integrated in adapted cosmetic vectors.