FR2690839A1 - Appts. for vaccinating rabbits against entero-oxaemia - comprises jet injection device connected to vaccine reservoir - Google Patents

Appts. for vaccinating rabbits against entero-oxaemia - comprises jet injection device connected to vaccine reservoir Download PDF

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Abstract

Assembly for parenteral vaccination of rabbit against enterotoxaemia (using a vaccine based on Clostridium spiroforme anatoxin) comprises an apparatus for jet admin., arranged for intradermal distribution, at one or more times, of individual doses of 0.2 ml vaccine. The appts. is connected to a feed system contg. the vaccine which (aa) includes an oily adjuvant and (b) provides a protective titre in the specified dose. Also new is a vaccine contg. the specified anatoxin in an oil adjuvant and having a protective titre in a 0.2ml dose. Pref. the appts. for admin. has a head with multiple ducts for simultaneous delivery of many jets which operate at a pressure of 90-100 bars. USE/ADVANTAGE - The method is used to deliver vaccine across the pinna of the ear. It makes possible effective adn economical vaccination of rabbits on a large scale (300 animals can be vaccinated per hr.) with a very high probability of imparting protection.

Description

Ensemble de vaccination contre l'entérotoxémie du lapin et vaccin conditionné pour être utilisé dans cet ensemble. Rabbit enterotoxemia vaccination kit and vaccine packaged for use in this kit.

La présente invention a trait à un ensemble pour la vaccination contre l'entérotoxémie du lapin. Elle a également trait à un vaccin contre ltentérotoxémie du lapin susceptible d'être mis en oeuvre dans cet ensemble, ainsi qu a un procédé de vaccination du lapin contre ltentérotoxémie du lapin. The present invention relates to a set for vaccination against rabbit enterotoxemia. It also relates to a rabbit enterotoxotoxin vaccine capable of being used in this set, as well as to a rabbit vaccination method against rabbit enterotoxotoxin.

L'entérite du lapin constitue encore une cause majeure de mortalité en engraissement. La brutalité de la mortalité, la présence inconstante de diarrhée, un caecum au contenu très liquide, très distendu par les gaz, on conduit à décrire une véritable entérotoxémie du lapin. On a pensé à une étiologie impliquant Clostridium perfringens type E et on a déjà proposé, dans le brevet FR-A-2.455.896, un vaccin constitué d'une anatoxine de cette bactérie, adjuvé à l'alun et administré par voie sous-cutanée. En fait R.J. Carman et al (Veterinary, Microbiology, 9 (1984) 497-502) ont démontré le rôle de Clostridium spiroforme dans l'étiologie de cette maladie. Rabbit enteritis is still a major cause of fattening mortality. The brutality of the mortality, the fickle presence of diarrhea, a caecum with a very liquid content, very distended by the gases, one leads to describe a true enterotoxemia of the rabbit. We have thought of an etiology involving Clostridium perfringens type E and we have already proposed, in patent FR-A-2,455,896, a vaccine consisting of a toxoid of this bacterium, adjuvanted with alum and administered by the sub-route. cutaneous. In fact R.J. Carman et al (Veterinary, Microbiology, 9 (1984) 497-502) have demonstrated the role of Clostridium spiroforme in the etiology of this disease.

F. Milward et B. Bancillon, dans une communication aux Sèmes Journées de la Recherche Cunicole, 12, 13 décembre 1990, PARIS, ont démontré la possibilité d'une prévention vaccinale à l'aide de vaccins à base d'anatoxine de Cl. F. Milward and B. Bancillon, in a communication to the Seminary Research Days on Cuniculture, December 12-13, 1990, PARIS, demonstrated the possibility of vaccine prevention using vaccines based on Cl tox toxin.

spiroforme administrés par injection sous-cutanée.spiroform administered by subcutaneous injection.

T.M. Ex lis et al (Veterinary Microbiology, 28, 1991, 93-102) ont également décrit un vaccin contre l'entérotoxémie du lapin constitué par une anatoxine de Cl. T.M. Ex lis et al (Veterinary Microbiology, 28, 1991, 93-102) have also described a rabbit enterotoxemia vaccine consisting of a C1 toxoid.

spiroforme cultivé en milieu Tryptone Soja, inactivé au formol et adjuvé à l'alun, à administration sous-cutanée sous dose de 1 ml.spiroform cultivated in Tryptone Soy medium, inactivated with formalin and added to alum, for subcutaneous administration in a dose of 1 ml.

La présente invention se propose de fournir un ensemble de vaccination permettant d'effectuer une vaccination de l'entérotoxémie du lapin, à l'échelle industrielle, de façon efficace et économique. The present invention proposes to provide a vaccination assembly allowing vaccination of rabbit enterotoxemia, on an industrial scale, to be carried out efficiently and economically.

Un autre objectif de l'invention est de réaliser une telle vaccination avec une probabilité extrêmement élevée de protection de chaque animal individuel. Another objective of the invention is to carry out such vaccination with an extremely high probability of protection for each individual animal.

L'invention a pour objet un ensemble de vaccination permettant la vaccination par voie parentérale contre l'entérotoxémie du lapin à l'aide d'un vaccin à base d'anatoxine de Clostridium spiroforme adjuvée, caractérisé en ce qu'il comporte un appareil d'administation par jet agencé pour la distribution par voie intradermique de doses individuelles d'un volume de l'ordre de 0,2 ml de vaccin1 associé à une source d'alimentation contenant un vaccin contre l'entérotoxémie en adjuvant huileux et conditionné pour présenter un titre protecteur dans ledit volume de dose. The subject of the invention is a vaccination assembly allowing parenteral vaccination against rabbit enterotoxemia using a vaccine based on adjuvant Clostridium spiroform toxoid, characterized in that it comprises an apparatus for jet administration arranged for the intradermal distribution of individual doses with a volume of the order of 0.2 ml of vaccine1 associated with a food source containing a vaccine against enterotoxemia in oily adjuvant and conditioned to present a protective titer in said dose volume.

L'ensemble de vaccination selon l'invention permet ainsi de vacciner le lapin par voie intradermique à l'intérieur du pavillon de l'oreille et ceci à une cadence industrielle. The vaccination assembly according to the invention thus makes it possible to vaccinate the rabbit intradermally inside the pavilion of the ear and this at an industrial rate.

Par appareil d'administration par jet, on entend un appareil permettant l'administration parentérale, sans aiguille, par formation d'un jet à haute pression. Selon une forme de réalisation extrêmement efficace de l'invention, on préfère utiliser un appareil ayant une tête à buses ou canaux multiples, permettant l'administration de la dose par plusieurs jets, le nombre de jets étant de préférence au moins égal à trois. By jet administration apparatus is meant an apparatus allowing parenteral administration, without needle, by formation of a high pressure jet. According to an extremely effective embodiment of the invention, it is preferred to use an apparatus having a nozzle head or multiple channels, allowing the administration of the dose by several jets, the number of jets preferably being at least equal to three.

Les appareils d'administration de vaccins ou de préparations médicamenteuses par jet sont en eux-mêmes connus et l'homme de l'art pourra facilement s'en procurer et les adapter pour la mise en oeuvre dans l'ensemble selon l'invention. Un appareil utile est par exemple celui vendu par la société Béarn Mécanique Aviation, Billère, France, sous la marque MESOFLASH ou la marque SANIJET. The apparatuses for administering vaccines or medicinal preparations by jet are in themselves known and those skilled in the art can easily obtain them and adapt them for the implementation as a whole according to the invention. A useful device is for example that sold by the company Béarn Mécanique Aviation, Billère, France, under the brand MESOFLASH or the brand SANIJET.

La pression des jets est de préférence de l'ordre de 90 à 110 bar. The pressure of the jets is preferably of the order of 90 to 110 bar.

Par volume de doses de l'ordre de 0,2 ml, on entend un volume qui est de préférence de 0,2 ml mais qui peut également être un peu différent et par exemple être compris entre 0,1 et 0,3 ml. La dose peut être administrée en une seule fois ou au contraire en plusieurs fois, par exemple deux injections multijets successives de 0,1 ml chacune. By dose volume of the order of 0.2 ml is meant a volume which is preferably 0.2 ml but which can also be a little different and for example be between 0.1 and 0.3 ml. The dose can be administered all at once or, on the contrary, several times, for example two successive multi-jet injections of 0.1 ml each.

L'invention a également pour objet un vaccin adjuvé à base d'anatoxine de C1. spiroforme adjuvé et conçu pour la mise en oeuvre de l'ensemble précité, caractérisé en ce qu'il comporte un titre protecteur sous un volume de l'ordre de 0,2 ml (défini comme précédemment) et contenant un adjuvant huileux. The subject of the invention is also an adjuvanted vaccine based on C1 toxoid. spiroform adjuvanted and designed for the implementation of the above-mentioned assembly, characterized in that it includes a protective title in a volume of the order of 0.2 ml (defined as above) and containing an oily adjuvant.

Par adjuvant huileux, on entend, de façon particulièrement préférée, un adjuvant comprenant, par ml de vaccin, 600 à 800 mg de paraffine liquide légère, 10 à 100 mg d'ester d'acide gras de polyol et de 1 à 33 mg d'ester-éther d'acide gras de polyol. By oily adjuvant is meant, in a particularly preferred manner, an adjuvant comprising, per ml of vaccine, 600 to 800 mg of light liquid paraffin, 10 to 100 mg of polyol fatty acid ester and from 1 to 33 mg of polyol fatty acid ester-ether.

Le vaccin est préparé de fason à présenter un titre de préférence de l'ordre de 50 à 500 TCP/ml. The vaccine is prepared in a way to present a titer preferably of the order of 50 to 500 TCP / ml.

L'invention a également pour objet un procédé de vaccination contre l'entérotoxémîe du lapin, caractérisé en ce que l'on administre en une ou plusieurs fois, par jet intradermique dans l'oreille du lapin, une dose vaccinale de l'ordre de 0,2 ml sans aiguille, et notamment par pluralité de jets, d'un vaccin à base d'anatoxine de Cl. spiroforme contenant un adjuvant huileux. A subject of the invention is also a method of vaccination against rabbit enterotoxemia, characterized in that one administered in one or more times, by intradermal jet in the ear of the rabbit, a vaccine dose of the order of 0.2 ml without needle, and in particular by plurality of jets, of a vaccine based on toxoid of Cl. Spiroform containing an oily adjuvant.

D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaitront à la lecture de raz la description suivante, faite à titre d'exemple non limitatif et se référant au dessin annexé dans lequel la figure unique représente une vue schématique d'un ensemble selon l'invention.  Other advantages and characteristics of the invention will appear on reading the following description, given by way of nonlimiting example and referring to the appended drawing in which the single figure represents a schematic view of an assembly according to the invention.

1. Préparation du vaccin. 1. Preparation of the vaccine.

Une souche de Clostridium spiroforme (par exemple référence 85202-15991 ou 11493 du laboratoire NTC) est cultivée pendant une durée de tordre 12-24 h en fermenteur dans un milieu peptone trypsique de caséine; peptone papaïnique de soja permettant une bonne expression de la toxine. En fin de phase de croissance, la culture est inactivée par ajout de formol jusqu'à une concentration de 1,6 mg/ml. Les corps bactériens sont séparés par centrifugation. Le surnageant est filtré, puis concentré. Il constitue l'anatoxine formant le principe actif du vaccin. A strain of Clostridium spiroforme (for example reference 85202-15991 or 11493 from the NTC laboratory) is cultivated for a duration of twisting 12-24 h in fermenter in a trypsin casein peptone medium; papain soy peptone allowing good expression of the toxin. At the end of the growth phase, the culture is inactivated by adding formalin to a concentration of 1.6 mg / ml. The bacterial bodies are separated by centrifugation. The supernatant is filtered and then concentrated. It constitutes the toxoid forming the active principle of the vaccine.

Ce surnageant est concentré et mélangé à une concentration suffisante dans un adjuvant huileux de façon à obtenir les proportions suivantes anatoxine de Cl. spiroforme 50 à 500 TCP
formaldéhyde libre (au maximum) 1,6img . mercurothiolate sodique (au maximum) 0,1 mg
adjuvant huileux
paraffine liquide légère 600 à 800 mg
esters d'acides gras de polyols 10 à 100 mg
esters-ethers d'acides gras de polyols 1 à 33 mg
2. Ensemble selon l'invention.This supernatant is concentrated and mixed to a sufficient concentration in an oily adjuvant so as to obtain the following proportions toxoid of Cl. Spiroform 50 to 500 TCP
free formaldehyde (maximum) 1.6img. mercurothiolate sodium (maximum) 0.1 mg
oily adjuvant
light liquid paraffin 600 to 800 mg
polyol fatty acid esters 10 to 100 mg
polyol fatty acid ethers 1 to 33 mg
2. Assembly according to the invention.

L'ensemble selon l'invention comporte d'une part un appareil d'administration par jet et d'autre part la source d'alimentation en vaccin de l'appareil. The assembly according to the invention comprises on the one hand a jet administration apparatus and on the other hand the vaccine supply source of the apparatus.

L'appareil, d'un type tout à fait classique, comporte une poignée 1 au-dessus de laquelle se trouve disposé un corps 2 à l'extrémité antérieure de laquelle se trouve disposée une chambre 3 d'un volume de 0,2 ml. Par l'intermédiaire d'un filtre 4, la chambre 3 se poursuit par une pluralité de buses d'éjection 5 extrêmement fines traversant la tête multi-injection 6 de l'appareil. Le mécanisme permettant d'éjecter la dose contenue dans la chambre en formant des jets à haute pression et qui comprend un piston 7 pénétrant dans la chambre peut être d'un type quelconque et de multiples mécanismes ont été décrits dans l'art antérieur. The apparatus, of a completely conventional type, comprises a handle 1 above which is disposed a body 2 at the anterior end of which is located a chamber 3 with a volume of 0.2 ml . Via a filter 4, the chamber 3 continues with a plurality of extremely fine ejection nozzles 5 passing through the multi-injection head 6 of the device. The mechanism for ejecting the dose contained in the chamber by forming high pressure jets and which comprises a piston 7 entering the chamber can be of any type and multiple mechanisms have been described in the prior art.

Les mécanismes de ce genre comportent généralement un ressort propulsant le piston 7 vers l'avant et un moyen moteur, électrique, pneumatique ou manuel, permettant de ramener le piston en arrière dans une position où il est bloqué pour être libéré lorsque l'on appuie sur une gâchette 8. Mechanisms of this kind generally include a spring propelling the piston 7 forwards and a motor, electric, pneumatic or manual means, making it possible to return the piston back to a position where it is blocked so as to be released when it is pressed. on a trigger 8.

L'alimentation de la chambre de l'appareil en vaccin s'effectue à l'aide d'un récipient multidoses 9, fixé à la partie supérieure de l'appareil et relié par un canal convenable à la chambre 3 de façon que, lors du mouvement d'expulsion du piston 7 vers l'avant, la communication avec cette source est fermée pendant que le contenu de la chambre de 0,2 ml est expulsé sous forme de jet, alors qu'au contraire le retour en arrière du piston après l'administration de la dose entraîne l'aspiration et le remplissage de la chambre par le vaccin provenant du récipient 9. La pression de chaque jet est de préférence de l'ordre de 100 bar. The vaccine chamber of the apparatus is supplied with a multidose container 9, fixed to the upper part of the apparatus and connected by a suitable channel to chamber 3 so that, when of the movement of expulsion of the piston 7 towards the front, the communication with this source is closed while the contents of the chamber of 0.2 ml are expelled in the form of a jet, while on the contrary the return back of the piston after administration of the dose results in the aspiration and filling of the chamber with the vaccine coming from the container 9. The pressure of each jet is preferably of the order of 100 bar.

3. Exemple de mise en oeuvre. 3. Example of implementation.

Pour procéder à la vaccination l'opérateur prend en main l'ensemble selon l'invention par la poignée et procède à la vaccination de chaque lapin dans le pavillon interne de l'oreille. La dose délivrée est de 0,2 ml. To carry out the vaccination, the operator takes the assembly according to the invention by the handle and proceeds to the vaccination of each rabbit in the internal pavilion of the ear. The dose delivered is 0.2 ml.

L'opérateur peut vacciner les lapins à la cadence de 300 lapins à l'heure
4. Etude comparative de différents ensembles et vaccins
On prépare deux formulations de vaccins. Le vaccin
I est préparé conformément à l'exemple 1. The operator can vaccinate rabbits at the rate of 300 rabbits per hour
4. Comparative study of different sets and vaccines
Two vaccine formulations are being prepared. The vaccine
I is prepared in accordance with Example 1.

Le vaccin II diffère du vaccin I par l'adjuvant. Vaccine II differs from vaccine I by the adjuvant.

Le vaccin I est administré soit à la seringue par voie intradermique, soit par l'ensemble selon l'exemple 2. Vaccine I is administered either by syringe intradermally, or by the assembly according to Example 2.

Le contrôle est fait par placebo.The control is done by placebo.

Le vaccin II est administré soit par voie intra-dermique à la seringue, soit à l'aide d'un appareil d'administration à un seul jet vendu dans le commerce sous la dénomination Dermojet. The vaccine II is administered either by the intra-dermal route with a syringe, or using a single-jet administration device sold commercially under the name Dermojet.

Les vaccins sont administrés à l'âge de 4 et 8 semaines et les lapins sont éprouvés 2 semaines plus tard. Vaccines are given at 4 and 8 weeks of age and rabbits are tested 2 weeks later.

La méthode d'épreuve consiste en l'administration d'un antibiotique (clindamycine) et d'une souche bactérienne Cl.The test method consists of the administration of an antibiotic (clindamycin) and a bacterial strain Cl.

spiriforme (selon R.J. Carman et al, Vet. Microbiol (1984) 9 : 497-502). spiriform (according to R.J. Carman et al, Vet. Microbiol (1984) 9: 497-502).

Les résultats sont les suivants
VACCIN ADMINISTRATION RESULTATS
(lapins protégés/
éprouvés)
I seringue 4/5
I Sanijet multicanaux 5/5
Placebo Sanijet multicanaux 0/5
II seringue 4/5
II Dermojet monocanal 2/5
Témoins Dermojet monocanal 2/5
Une vaccination présentant une certaine efficacité peut être obtenue par administration à la seringue.The results are as follows:
VACCINE ADMINISTRATION RESULTS
(protected rabbits /
proven)
I syringe 4/5
I Sanijet multichannel 5/5
Placebo Sanijet multichannel 0/5
II syringe 4/5
II Single channel dermojet 2/5
Dermojet single-channel witnesses 2/5
Vaccination with some efficacy can be obtained by syringe administration.

Cependant, ce procédé est inapplicable dans les conditions pratiques de l'élevage. L'ensemble selon l'invention résout le problème et assure une vaccination efficace et sûre avec un coût en main-d'oeuvre réduit. However, this process is inapplicable under the practical conditions of breeding. The assembly according to the invention solves the problem and ensures an effective and safe vaccination with a reduced labor cost.

Claims (6)

REVENDICATIONS 1. Ensemble de vaccination permettant la vaccination par voie parentérale contre l'entérotoxémie du lapin à l'aide d'un vaccin à base d'anatoxine de Clostridium spiroforme adjuvée, caractérisé en ce qu'il comporte un appareil d'administration par jet agencé pour la distribution intradermique, en une ou plusieurs fois, de doses individuelles d'un volume de l'ordre de 0,2 ml de vaccin, associé à une source d'alimentation contenant un vaccin contre l'entérotoxémie en adjuvant huileux et conditionné pour présenter un titre protecteur dans ledit volume de dose. 1. Vaccination assembly allowing parenteral vaccination against rabbit enterotoxemia using a vaccine based on Clostridium spiroform toxoid adjuvanted, characterized in that it comprises an apparatus for administration by jet arranged for the intradermal distribution, in one or more times, of individual doses with a volume of the order of 0.2 ml of vaccine, associated with a food source containing a vaccine against enterotoxemia in oily adjuvant and conditioned for present a protective titer in said dose volume. 2. Ensemble selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'appareil d'administration comportent une tête à buses multiples permettant l'administration simultanée d'une pluralité de jets. 2. Assembly according to claim 1, characterized in that the administration apparatus comprise a head with multiple nozzles allowing the simultaneous administration of a plurality of jets. 3. Ensemble selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que la pression des jets est de l'ordre de 90 à 100 bar. 3. Assembly according to one of claims 1 and 2, characterized in that the pressure of the jets is of the order of 90 to 100 bar. 4. Vaccin destiné à être utilisé dans l'ensemble selon l'une des revendications 1 à 37 caractérisé en ce qu il comporte une anatoxine de Clostridium spiroforme en adjuvant huileux et présentant un titre protecteur dans un volume de dose de 0,2 ml. 4. Vaccine intended to be used in the assembly according to one of claims 1 to 37 characterized in that it comprises a toxoid of Clostridium spiroforme in oily adjuvant and having a protective titre in a dose volume of 0.2 ml. 5. Vaccin selon la revendication 4, caractérisé en ce que le titre du vaccin est de 50 à 500 TCP/ml. 5. Vaccine according to claim 4, characterized in that the titer of the vaccine is from 50 to 500 TCP / ml. 6. Vaccin selon la revendication 5, caractérisé en ce que l'adjuvant huileux comporte, par ml de vaccin, 600 à 800 mg de paraffine liquide légère, 10 à 100 mg d'ester gras de polyol et de 1 à 33 mg d'ester-éther d'acide gras de polyol.  6. Vaccine according to claim 5, characterized in that the oily adjuvant comprises, per ml of vaccine, 600 to 800 mg of light liquid paraffin, 10 to 100 mg of polyol fatty ester and from 1 to 33 mg of polyol fatty acid ester-ether.
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