FR2685331A1

FR2685331A1 - PHOSPHOTRIESTERS OF DDU, THEIR PREPARATION AND THEIR THERAPEUTIC USE.

Info

Publication number: FR2685331A1
Application number: FR9115422A
Authority: FR
Inventors: Imbach Jean-Louis; Gosselin Gilles
Original assignee: Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Current assignee: Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Priority date: 1991-12-12
Filing date: 1991-12-12
Publication date: 1993-06-25
Also published as: WO1993012132A1

Abstract

2',3'-dideoxy-uridine (ddU) derivates having formula (I), wherein R', is 5'-ddU. 3'-dT or 5'-dT; R'2 is a cation, the methyl radical, the -CH2O-CO-C(CH3)3 radical, -CH2CH2OCH3, -CH2CH2CN, -CH2CH2S-CO-C(CH3)3, -CH2CH2S-SCH2CH2OH, (a), (b), where the formulae of units -O-ddU, -O-3'-dT and -O-5'-dT are respectively as follows: (c), (d), (e); and therapeutical uses thereof.

Description

La présente invention a pour objet des phosphotriesters de la ddU, leur préparation et leur application en thérapeutique.The subject of the present invention is phosphotriesters of ddU, their preparation and their therapeutic application.

La ddU est la 2',3'-didésoxy-uridine dont la formule est donnée en annexe 1.DdU is 2 ', 3'-dideoxy-uridine, the formula of which is given in Appendix 1.

Les composés de l'invention répondent à la formule (I) donnée en annexe 1 dans laquelle
R'1 est la 5'-ddU, la 3'-dT ou la 5'-dT,
R'2 est un cation, le radical méthyle, le radical -CH2O-CO- C(CH3)3, -CH2CH20CH3, -CH2CH2CN, -CH2CH2S-CO-C(CH3)3, -CH2CH2S - S CH2CH2OH,

The compounds of the invention correspond to formula (I) given in Annex 1 in which
R'1 is 5'-ddU, 3'-dT or 5'-dT,
R'2 is a cation, the methyl radical, the radical -CH2O-CO- C (CH3) 3, -CH2CH2OCH3, -CH2CH2CN, -CH2CH2S-CO-C (CH3) 3, -CH2CH2S-S CH2CH2OH,

La 2'-désoxythymidine (dT) se lie par la liaison 3'ou 5' les formules sont données en annexe 1.2'-Deoxythymidine (dT) binds via the 3'- or 5'-linkage. The formulas are given in Appendix 1.

La préparation des composés est indiquée ci-après et dans 1 ' annexe 2.The preparation of the compounds is shown below and in Annex 2.

Les chromatographies sur couche mince ont été réalisées sur plaques de silice Merck 60F 254 (art.5554). Les chromatographies sur colonne de gel de silice ont été effectuées avec de la silice Merck 60 H (art. 7736) ou avec de la silice silanisée RP2 Merck (art. 7719).The thin layer chromatographies were carried out on Merck 60F silica plates 254 (art.5554). Silica gel column chromatography was performed with Merck 60 H silica (Item 7736) or with Merck RP2 silanized silica (Item 7719).

Les analyses CLPH ont été effectuées sur colonne Waters
Radial-Pak (diam.: 8 mm, l : 100 mm) C18 de granulométrie sphérique de 10 pm. Cette colonne est protégée par une préco- lonne Guard-Pak. Le système CLHP est composé d'un injecteur
U6K, de deux pompes M-6000 A, d'un programmateur M-720 (Waters), d'un détecteur UV multicanal Pye Unicam PU 4021 et d'un centre de contrôle vidéo PU 4850 (Philipps). L'élution a été réalisée avec une solution d'acétonitrile dans un tampon d'acétate d'ammonium 0,1 M (pH 5,9) à un débit de 2 ml par minute (TR : temps de rétention).HPLC analyzes were performed on Waters column
Radial-Pak (diam .: 8 mm, l: 100 mm) C18 with spherical granulometry of 10 μm. This column is protected by a Guard-Pak precolumn. The HPLC system consists of an injector
U6K, two M-6000 A pumps, one M-720 (Waters) programmer, one Pye Unicam PU 4021 multichannel UV detector and one PU 4850 video control center (Philipps). Elution was performed with a solution of acetonitrile in 0.1 M ammonium acetate buffer (pH 5.9) at a rate of 2 ml per minute (TR: retention time).

Les purifications CLHP ont été effectuées sur colonne
SFCC Nucléosil (diam.: 19 mm, 1 : 150 mm) de granulométrie sphérique de 10 pm. Le système CLHP est composé d'un injecteur UsK, de deux pompes M-510 EF, d'un programmateur M-720, d'un détecteur UV M-481 et d'un enregistreur Data Module 746 (Waters). L'élution est réalisée avec une solution d'acétonitrile dans lveau à un débit de 6,25 ml par minute.HPLC purifications were performed on a column
SFCC Nucleosil (diam .: 19 mm, 1: 150 mm) with a spherical granulometry of 10 μm. The HPLC system consists of a UsK injector, two M-510 EF pumps, an M-720 programmer, an M-481 UV detector and a 746 Data Module (Waters) logger. Elution is performed with a solution of acetonitrile in water at a rate of 6.25 ml per minute.

Avant analyse, purification CLHP ou lyophilisation, les solutions ont été filtrées sur filtre Millex HV-4 (Millipore). Before analysis, HPLC purification or lyophilization, the solutions were filtered on a Millex HV-4 filter (Millipore).

Les spectres UV ont été enregistrés sur un spectrophotomètre UVIKON 810. The UV spectra were recorded on a UVIKON 810 spectrophotometer.

Les spectres de masse ont été pris sur un appareil JEOL
JMS DX 300 par la méthode d'ionisation FAB dans une matrice de glycérol (G), glycérol/thioglycérol (GT) ou d'alcool 3-nitrobenzylique (NBA).Mass spectra were taken on a JEOL device
JMS DX 300 by the FAB ionization method in a glycerol (G), glycerol / thioglycerol (GT) or 3-nitrobenzyl alcohol (NBA) matrix.

Les spectres RMN du proton ont été enregistrés sur un appareil Varian EM 360 ou sur appareil Brüker AC 250. The proton NMR spectra were recorded on a Varian EM 360 or Brüker AC 250.

Les déplacements chimiques sont exprimés en ppm par rapport au signal du tétraméthylsilane (TMS).The chemical shifts are expressed in ppm relative to the tetramethylsilane (TMS) signal.

La multiplicité et l'allure des signaux observés par RMN sont indiquées par une (ou plusieurs) lettre(s) : s (singulet), d (doublet), t (triplet), m (multiplet), 1 (large).The multiplicity and the pace of the signals observed by NMR are indicated by one (or several) letter (s): s (singlet), d (doublet), t (triplet), m (multiplet), 1 (wide).

Les spectres RMN du phosphore ont été enregistrés sur un appareil Brüker WP 200 SY avec découplage du proton. Phosphorus NMR spectra were recorded on a Brüker WP 200 SY apparatus with proton decoupling.

Les déplacements chimiques sont exprimés en ppm par rapport au signal de H3PO4 pris comme référence externe.The chemical shifts are expressed in ppm relative to the H3PO4 signal taken as external reference.

5'-O-Diméthylthexylsilyl 2' -didesoxythymidine 2. 5'-O-dimethyl-xylsilyl 2 '-didesoxythymidine 2.

La 2'-desoxythymidine 1 (1,09 g, 4,50 mmol.) en solution dans 32 ml de pyridine est mise en réaction avec 1,10 ml (5,50 mmol.) de chlorure de diméthylthexylsilyle durant 48 h.2'-Desoxythymidine 1 (1.09 g, 4.50 mmol) dissolved in 32 ml of pyridine is reacted with dimethyl-xylsilyl chloride (1.10 ml, 5.50 mmol) for 48 hours.

L'acide libéré est neutralisé par addition d'une solution de bicarbonate de triéthylammonium et le produit est extrait avec du dichlorométhane. La phase organique est concentrée sous pression réduite et chromatographiée sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-4%) dans CH2Cl2) pour donner 1,39 g (80%) de 2.The liberated acid is neutralized by the addition of a solution of triethylammonium bicarbonate and the product is extracted with dichloromethane. The organic phase is concentrated under reduced pressure and chromatographed on a column of silica gel (eluent: MeOH (0-4%) in CH 2 Cl 2) to give 1.39 g (80%) of 2.

2 UV (EtOH) : X max 266 nm (E 10600)
x min 233 nm (E 1700)
SM (FAB positif, GT) : 385 (2M+H)+, 127 (TH2)+,
RMN H (DMSO-d6) : 6 = 0,11 (s, 6H, (CH3)2Si) ; 0,82-0,87
(m, 12H, H(CH3)2C(CH3)2Si) ; 1,59 (quintuplet, 1H,
H(CH3)2)C(CH3)2Si, J = 6,8 Hz) ; 1,78 (s, 3H, CH3) ; 2,06
(m, 2H, H-2', 2'') ; 3,73 (m, 2H, H-5',5'') ; 3,79 (m,
1H, H-4') ; 4,18 (m, 1H, H3') ; 5,28 (d, 1H, OH, J = 3,3
Hz) ; 6,15 (t, 1H, H-i', J = 6,9 Hz) ; 7,43 (s, 1H,
H-6) ; 7,73 (sl, 1H, NHCO) ppm.2 UV (EtOH): max X 266 nm (E 10600)
x min 233 nm (E 1700)
MS (Positive FAB, GT): 385 (2M + H) +, 127 (TH2) +,
1 H NMR (DMSO-d 6): δ = 0.11 (s, 6H, (CH 3) 2 Si); 0.82 to 0.87
(m, 12H, H (CH 3) 2 C (CH 3) 2 Si); 1.59 (quintuplet, 1H,
H (CH 3) 2) C (CH 3) 2 Si, J = 6.8 Hz); 1.78 (s, 3H, CH 3); 2.06
(m, 2H, H-2 ', 2''); 3.73 (m, 2H, H-5 ', 5''); 3.79 (m,
1H, H-4 '); 4.18 (m, 1H, H3 '); 5.28 (d, 1H, OH, J = 3.3
Hz); 6.15 (t, 1H, H = 1, J = 6.9 Hz); 7.43 (s, 1H,
H-6); 7.73 (sl, 1H, NHCO) ppm.

3'-O-(4-Méthoxytrityl) 5'-O-diméthylthexysilyl 2'-desoxy- thymidine 3. 3'-O- (4-Methoxytrityl) 5'-O-dimethylhexysilyl 2'-deoxythymidine 3.

A une solution de 1,33 g (3,45 mmol.) de 2 dans 11 ml de pyridine sont ajoutés 2,14 g (6,93 mmol.) de chlorure de 4-méthoxytrityle. Après 40 heures, le mélange réactionnel est dilué avec du CH2Cl2 et lavé avec une solution aqueuse de
NaHCO3 puis avec de l'eau. La phase organique est séchée sur
Na2SO4, concentrée et purifiée par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-5%) dans CH2Cl2) pour conduire à 2,19 g (96%) de 3 suffisamment pur pour la suite de la synthèse.To a solution of 1.33 g (3.45 mmol) of 2 in 11 ml of pyridine is added 2.14 g (6.93 mmol) of 4-methoxytrityl chloride. After 40 hours, the reaction mixture is diluted with CH 2 Cl 2 and washed with an aqueous solution of
NaHCO3 then with water. The organic phase is dried on
Na2SO4, concentrated and purified by column chromatography on silica gel (eluent: MeOH (0-5%) in CH2Cl2) to yield 2.19 g (96%) of sufficiently pure 3 for further synthesis.

3 UV (EtOH) : À max 266 nm (E 13700)
À min 249 nm (E 10400)
À max 231 nm (E 19300)
À min 227 nm (E 19000)
SM(FAB positif, NBA) : 657 (M+H) , 273 (MTr)
RMN H (DMSO-d6) : 6 = -0,07 et -0,04 (s et s) ; 3H et 3H,
2CH3Si) ; 0,65-0,73 (m, 12H, H(CH3)2C(CH3)2CSi) ; 1,35-1,60
(m, 3H, H-2',2'' H(CH3)2C(CH3)2Si) ; 1,70 (s, 3H, CH3)
3,40 (H-5' partiellement masqué par l'eau) ; 3,55 (d, 1H,
H-5'', J = 13,5 Hz) ; 3,73 (s, 3H, CH3OTr) ; 3,97 (s, 1H,
H-4') ; 4,17 (d, 1H, H-3', J = 4 Hz) ; 6,14 (dd, 1H,
H-l', J = 6,1 et 8,4 Hz) ; 6,89-7,45 (m, 15H, Tr, H-6),
11,3 (sl, NHCO) ppm.3 UV (EtOH): At max 266 nm (E 13700)
At min 249 nm (E 10400)
At max 231 nm (E 19300)
At 227 nm (E 19000)
MS (FAB positive, NBA): 657 (M + H), 273 (MTr)
1 H NMR (DMSO-d6): δ = -0.07 and -0.04 (s and s); 3H and 3H,
2CH3Si); 0.65-0.73 (m, 12H, H (CH3) 2C (CH3) 2CSi); 1.35 to 1.60
(m, 3H, H-2 ', 2 "H (CH 3) 2 C (CH 3) 2 Si); 1.70 (s, 3H, CH3)
3.40 (H-5 'partially masked by water); 3.55 (d, 1H,
H-5 '', J = 13.5 Hz); 3.73 (s, 3H, CH 3 OTr); 3.97 (s, 1H,
H-4 '); 4.17 (d, 1H, H-3 ', J = 4 Hz); 6.14 (dd, 1H,
H-1 ', J = 6.1 and 8.4 Hz); 6.89-7.45 (m, 15H, Tr, H-6),
11.3 (sl, NHCO) ppm.

3'-0-( 4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidine 4
La désilylation de 2,06 g (3,14 mmol.) de 3 est réalisée à l'aide de 5,70 ml d'une solution 1,1 M de fluorure de tétrabutylammonium dans le THF en 6 h. Le solvant est évaporé et le brut obtenu purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-8%) dans CH2Cl2) pour conduire à 1,47 g (91%) de 4.3'-O- (4-Methoxytrityl) 2'-deoxythymidine 4
The desilylation of 2.06 g (3.14 mmol) of 3 is carried out using 5.70 ml of a 1.1 M solution of tetrabutylammonium fluoride in THF over 6 hours. The solvent is evaporated and the resulting crude purified by column chromatography on silica gel (eluent: MeOH (0-8%) in CH2Cl2) to yield 1.47 g (91%) of 4.

4 UV (EtOH) : À max 265 nm (E 12100)
À min 250 nm (E 10500)
À inflex 228 nm (E 18500)
SM (FAB positif, NBA) : 515 (M+H)+, 273 (MTr)
RMN H (DMSO-d6) : 6 = 1,50 (dd, 1H, H-2', J = 5,5 et 13,4
Hz) ; 1,62-1,79 (m, 1H, H-2") ; 1,70 (s, 3H, CH3) ; 3,15
(m, 1H, H5t) ; 3,36 (m, 1H, H-5") ; 3,74 (s, 3H,
CH3OTr) ; 3,76 (m, 1H, H-4') ; 4,25 (d, 1H, H-3', J = 5,3
Hz) ; 4,95 (t, 1H, OH, J = 5,0 Hz) ; 6,18 (dd, 1H, H-l',
J = 5,4 et 9,3 Hz) ; 6,90-7,44 (m, 14H, Tr) ; 7,60 (s,
1H, H-6) ; 11,3 (sl, 1H, NHCO) ppm.4 UV (EtOH): At max 265 nm (E 12100)
At min 250 nm (E 10500)
At inflex 228 nm (E 18500)
MS (FAB positive, NBA): 515 (M + H) +, 273 (MTr)
1 H NMR (DMSO-d6): δ = 1.50 (dd, 1H, H-2 ', J = 5.5 and 13.4)
Hz); 1.62-1.79 (m, 1H, H-2 "), 1.70 (s, 3H, CH 3);
(m, 1H, H5t); 3.36 (m, 1H, H-5 "); 3.74 (s, 3H,
CH3OTr); 3.76 (m, 1H, H-4 '); 4.25 (d, 1H, H-3 ', J = 5.3
Hz); 4.95 (t, 1H, OH, J = 5.0 Hz); 6.18 (dd, 1H, H-1 ',
J = 5.4 and 9.3 Hz); 6.90-7.44 (m, 14H, Tr); 7.60 (s,
1H, H-6); 11.3 (sl, 1H, NHCO) ppm.

0-(2',3' -didésoxyuridin-Ei '-yl) -hydrogénophosphonate 5. 0- (2 ', 3'-dideoxyuridin-E 1' -yl) -hydrogenphosphonate 5.

Une solution 2 M d'acide phosphoreux (70,5 ml, 141 mmol.) dans la pyridine anhydre est ajoutée à 3,00 g de 2',3'-didé- soxyuridine 6 (14,1 mmol.) et est traité avec 9,6 ml de chlorure de pivaloyle (77,9 mmol.). Après 3 heures de réaction, une solution aqueuse 1 M de bicarbonate de triéthylammonium est ajoutée jusqu'à neutralisation et le solvant est évaporé sous pression réduite. L'huile obtenue est chromatographiée sur colonne de gel de silice (éluent MeOH (0-35%) dans CH2Cl2) pour conduire à 5. Le produit est repris dans du méthanol et est filtré sur filtre Millipore. L'évaporation du solvant donne 4,17 g (78%) de 5 (forme triéthylammonium) suffisamment pur pour la suite de la synthèse. Un échantillon de plus grande pureté est obtenu après une purification supplémentaire par chromatographie sur couche mince de gel de silice utilisant un mélange d'isopropanol, ammoniaque, eau (8:1:1:) comme éluant. Le produit sous forme ammonium est extrait de la silice avec du méthanol, le solvant est chassé par évaporation et le résidu est repris à l'eau, filtré sur filtre Millipore et lyophilisé.A 2M solution of phosphorous acid (70.5 mL, 141 mmol) in anhydrous pyridine is added to 3.00 g of 2 ', 3'-diisoxuridine 6 (14.1 mmol) and is treated. with 9.6 ml of pivaloyl chloride (77.9 mmol). After 3 hours of reaction, a 1M aqueous solution of triethylammonium bicarbonate is added until neutralization and the solvent is evaporated under reduced pressure. The oil obtained is chromatographed on a column of silica gel (eluent MeOH (0-35%) in CH 2 Cl 2) to yield 5. The product is taken up in methanol and is filtered on a Millipore filter. Evaporation of the solvent gives 4.17 g (78%) of 5 (triethylammonium form) sufficiently pure for further synthesis. A higher purity sample is obtained after further purification by thin layer chromatography of silica gel using a mixture of isopropanol, ammonia, water (8: 1: 1) as eluent. The product in ammonium form is extracted from the silica with methanol, the solvent is removed by evaporation and the residue is taken up in water, filtered through a Millipore filter and freeze-dried.

5 CLHP: TR = 172s (99,9%) (3% CH3CN/AcONH4 0,1 M). HPLC: RT = 172s (99.9%) (3% CH3CN / 0.1M AcONH4).

UV (H2O) : X max 262 nm (E 9940)
À min 230 nm (E 2080)
SM (FAB négatif, GT) : 275 (M)
RMN H (DMSO-d6) :6 = 1,78-2,05 (m, 3H, H-2',3',3'') ;
2,18-2,45 (m, 1H, H-2") ; 3,65-3,95 (m, 2H, H-5',S'') ;
4,11 (m, 1H, H-4') ; 5,55 (d, 1H, H-5, J = 8,1 Hz) ; 5,95
(dd, 1H, H-1', J = 6,8 et 3,8 Hz), 6,63 (d, 1H, HP, J =
592 Hz) ; 7,87 (d, 1H, H-6, J = 8,1 Hz) ppm
RMN P (DMSO-d6) : 6 = 1,596 ppm.UV (H2O): max X 262 nm (E 9940)
At min 230 nm (E 2080)
MS (Negative FAB, GT): 275 (M)
1 H NMR (DMSO-d 6): δ = 1.78-2.05 (m, 3H, H-2 ', 3', 3 '');
2.18-2.45 (m, 1H, H-2 "); 3.65-3.95 (m, 2H, H-5 ', S'');
4.11 (m, 1H, H-4 '); 5.55 (d, 1H, H-5, J = 8.1 Hz); 5.95
(dd, 1H, H-1 ', J = 6.8 and 3.8 Hz), 6.63 (d, 1H, HP, J =
592 Hz); 7.87 (d, 1H, H-6, J = 8.1 Hz) ppm
P NMR (DMSO-d6): δ = 1.596 ppm.

O-(5'-0-(4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-3'yl) hydrogénophosphonate 7. O- (5'-O- (4-Methoxytrityl) 2'-deoxythymidin-3'yl) hydrogenophosphonate 7.

Une solution de 5,65 g (83,0 mmol.) d'imidazole dans 70 ml d'acétonitrile est traitée à 0 C par 2,22 ml (25,4 mmol.) de trichlorure de phosphore et 13,0 ml (92,2 mmol.) de triéthylamine durant 30'. Ce mélange est additionné à 4,36 g (8,47 mmol.) de 5'-0-(4-méthoxytrityl) 2'-désoxythymidine 8 dans 70 ml d'acétonitrile. La phosphorylation est laissée 3 h et 2 ml d'eau sont ajoutés. La solution est concentrée sous pression réduite, reprise avec une solution aqueuse de bicarbonate de triéthylammonium et extraite avec du CH2Cl2. La phase organique est séchee sur Na2SO4 et évaporée. L'huile obtenue est purifiée sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-20%) dans CH2Cl2) pour donner 4,2 g (86%) du nucléotide 7 sous forme acide.A solution of 5.65 g (83.0 mmol) of imidazole in 70 ml of acetonitrile is treated at 0 ° C. with 2.22 ml (25.4 mmol) of phosphorus trichloride and 13.0 ml ( 92.2 mmol) of triethylamine for 30 '. This mixture is added to 4.36 g (8.47 mmol) of 5'-O- (4-methoxytrityl) 2'-deoxythymidine 8 in 70 ml of acetonitrile. Phosphorylation is left for 3 h and 2 ml of water are added. The solution is concentrated under reduced pressure, taken up with an aqueous solution of triethylammonium bicarbonate and extracted with CH2Cl2. The organic phase is dried over Na 2 SO 4 and evaporated. The oil obtained is purified on a column of silica gel (eluent: MeOH (0-20%) in CH 2 Cl 2) to give 4.2 g (86%) of nucleotide 7 in acid form.

7 UV (EtOH 95) :R max 265 nm (E 12000)
À min 249 nm ( 9200)
À inflex 229 nm (E 19300)
SM (FAB négatif, GT) : 576 (M)
RMNH (DMSO-d6) : # = 1,38 (s, 3H, CH3), 2,33 (m, 1H,
H-2') ; 2,72 (m, 1H, H-2'') ; 3,16 (dd, 1H, H-5', J = 2,5
et 10,3 Hz) ; 3,27 (dd, 1H, H-5'', J = 3,8 et 10,2 Hz)
3,73 (s, 3H, CH3OTr) ; 4,07 (m, 1H, H-4') ; 4,76 (m, 1H,
H-3') ; 6,19 (t, 1H, H-1', J = 6,9 Hz) ; 6,60 (d, 1H, HP,
J = 590 Hz) ; 6,85-7,47 (m, 14H, Tr) ; 11,4 (sl, 1H,
NHCO) ppm
RMN37P (DMSO-d6) : 6 = -0,315 ppm. UV (EtOH 95): R max 265 nm (E 12000)
At min 249 nm (9200)
At inflex 229 nm (E 19300)
MS (Negative FAB, GT): 576 (M)
NMR (DMSO-d6): # = 1.38 (s, 3H, CH3), 2.33 (m, 1H,
H-2 '); 2.72 (m, 1H, H-2 ''); 3.16 (dd, 1H, H-5 ', J = 2.5
and 10.3 Hz); 3.27 (dd, 1H, H-5 '', J = 3.8 and 10.2 Hz)
3.73 (s, 3H, CH 3 OTr); 4.07 (m, 1H, H-4 '); 4.76 (m, 1H,
H-3 '); 6.19 (t, 1H, H-1 ', J = 6.9 Hz); 6.60 (d, 1H, HP,
J = 590 Hz); 6.85-7.47 (m, 14H, Tr); 11.4 (sl, 1H,
NHCO) ppm
NMR 37 P (DMSO-d 6): δ = -0.315 ppm.

o-(3'-o-(4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-5'-yl) hydrogénophosphonate 9. o- (3'-o- (4-Methoxytrityl) 2'-deoxythymidin-5'-yl) hydrogenophosphonate 9.

Ce composé a été préparé selon le mode opératoire décrit lors de la synthèse de 7. Ainsi, 1,40 g (2,72 mmol.) de 3'-O-(4-méthoxytrity1) 2-désoxythymidine 4 conduit à 1,28 g (69%) du nucléotide 9 sous forme de triéthylammonium apres évaporation en présence de triéthylamine.This compound was prepared according to the procedure described during the synthesis of 7. Thus, 1.40 g (2.72 mmol) of 3'-O- (4-methoxytrityl) 2-deoxythymidine 4 leads to 1.28 g. (69%) of nucleotide 9 as triethylammonium after evaporation in the presence of triethylamine.

9 UV (EtOH) : À max 264 nm (E 11700)
À min 250 nm (E 10700)
À inflex 228 nm (E 18300)
SM (FAB négatif, GT) : 576 (M)-, 125 (T)
RMN H (DMSO-d6) : 6 = 1,12 (t, 9H, (CH3CH2)3N, J = 7,3
Hz) ; 1,55 (dd, 1H, H-2', J = 5,2 et 13,1 Hz) ; 1,73 (s
et m, 4H, CH3 et H-2'') ; 2,92 (q, 6H, (CH3CH2)3N, J = 7,2
Hz) ; 3,36 (m, 1H, H-5') ; 3,59 (m, 1H, H-5'') ; 3,73 (s,
3H, CH30) ; 3,81 (m, 1H, H-4') ; 4,20 (d, 1H, H-3', J =
4,7 Hz) ; 6,23 (dd, 1H, H-l', J = 5,4 et 8,7 Hz) ; 6,55
(d, 1H, HP, J = 643 Hz) ; 6,90-7,60 (m, 14H, Tr) ; 8,22
(s, 1H, H-6) ; 11,2 (sl, 1H, NHCO) ppm
RMN37P (DMSO-d6) :6 = -0,812 ppm.9 UV (EtOH): At max 264 nm (E 11700)
At min 250 nm (E 10700)
At inflex 228 nm (E 18300)
MS (Negative FAB, GT): 576 (M) -, 125 (T)
1 H NMR (DMSO-d 6): 6 = 1.12 (t, 9H, (CH 3 CH 2) 3 N, J = 7.3
Hz); 1.55 (dd, 1H, H-2 ', J = 5.2 and 13.1 Hz); 1.73 (s
and m, 4H, CH3 and H-2 ''); 2.92 (q, 6H, (CH 3 CH 2) 3 N, J = 7.2
Hz); 3.36 (m, 1H, H-5 '); 3.59 (m, 1H, H-5 ''); 3.73 (s,
3H, CH3O); 3.81 (m, 1H, H-4 '); 4.20 (d, 1H, H-3 ', J =
4.7 Hz); 6.23 (dd, 1H, H-1 ', J = 5.4 and 8.7 Hz); 6.55
(d, 1H, HP, J = 643 Hz); 6.90-7.60 (m, 14H, Tr); 8.22
(s, 1H, H-6); 11.2 (sl, 1H, NHCO) ppm
NMR 37 P (DMSO-d 6): δ = -0.812 ppm.

O,O-bis(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) phosphate 10.(Composé I)
Une solution de 2,98 g d'hydrogénophosphonate 5 (7,90 mmol., forme triéthylammonium) et de 1,51 g (7,12 mmol.) 2',3'-didé- soxyuridine 6 dans 55 ml de pyridine est traitée par 2,4 ml (19,5 mmol.) de chlorure de pivaloyle pendant 2 h. Le dinucléoside hydrogénophosphonate intermédiaire est alors oxydé à l'aide de 45 ml d'une solution d'iode 2 M dans le mélange pyridine, eau, tétrahydrofuranne (8:40:2). Le solvant est partiellement évaporé avant que le milieu réactionnel ne soit dilué avec du dichlorométhane et extrait avec une solution aqueuse de bicarbonate de triéthylammonium. La phase aqueuse est évaporée et le résidu obtenu est chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant, MeOH (0-40%) dans CH2Cl2).O, O-bis (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) phosphate 10. (Compound I)
A solution of 2.98 g of hydrogenophosphonate (7.90 mmol, triethylammonium form) and 1.51 g (7.12 mmol) 2 ', 3'-diisoxydidine 6 in 55 ml of pyridine is treated with 2.4 ml (19.5 mmol) of pivaloyl chloride for 2 h. The intermediate hydrogen phosphonate dinucleoside is then oxidized using 45 ml of a 2 M solution of iodine in the pyridine, water, tetrahydrofuran (8: 40: 2) mixture. The solvent is partially evaporated before the reaction medium is diluted with dichloromethane and extracted with an aqueous solution of triethylammonium bicarbonate. The aqueous phase is evaporated and the residue obtained is chromatographed on a column of silica gel (eluent, MeOH (0-40%) in CH 2 Cl 2).

Les fractions appropriées sont évaporées, reprises avec du méthanol et filtrées sur filtre Millipore. Une dernière évaporation du solvant en présence de triethylamine donne 3,2 g (77%) du dinucléoside 10. Un échantillon analytique est obtenu après purification par CLHP semi-préparative (colonne nucléosil C181 éluant 2% CH3CN dans H20), filtration sur filtre
Millipore et lyophilisation dans l'eau.The appropriate fractions are evaporated, taken up with methanol and filtered through a Millipore filter. A final evaporation of the solvent in the presence of triethylamine gives 3.2 g (77%) of the dinucleoside 10. An analytical sample is obtained after purification by semi-preparative HPLC (C181 nucleosil column eluent 2% CH3CN in H20), filtration on filter
Millipore and lyophilization in water.

10 CLHP : TR 776 s (99,5%) (3% CH3CN/AcONH4 0,1 M)
UV (H2O) : À max 262 nm (E 17900)
À min 231 nm (E 1630)
SM (FAB négatif, GT) : 485 M, 373 (MH-B)
RMN H (DMSO-d6) :6 = 1,80-2,05 (m, 6H, H-2',3',3'') ;
2,17-2,32 (m, 2H, H-2'') ; 3,77 et 3,83 (m et m, 2H et
2H, H-5',5'') ; 4,11 (m, 2H, H-4') ; 5,53 (d, 2H, H-5, J
= 8,0 Hz) ; 5,95 (dd, 2H, H-1', J = 6,6 et 3,6 Hz) ; 7,95
(d, 2H, H-6, J = 8,0 Hz) ppm
RMN P (DMSO-d6, D2O) :6 = -0,732 ppm.HPLC: TR 776 s (99.5%) (3% CH3CN / 0.1 M AcONH4)
UV (H2O): At max 262 nm (E 17900)
At 231 nm (E 1630)
MS (negative FAB, GT): 485M, 373 (MH-B)
1 H NMR (DMSO-d 6): δ = 1.80-2.05 (m, 6H, H-2 ', 3', 3 '');
2.17-2.32 (m, 2H, H-2 ''); 3.77 and 3.83 (m and m, 2H and
2H, H-5 ', 5''); 4.11 (m, 2H, H-4 '); 5.53 (d, 2H, H-5, J
= 8.0 Hz); 5.95 (dd, 2H, H-1 ', J = 6.6 and 3.6 Hz); 7.95
(d, 2H, H-6, J = 8.0 Hz) ppm
P NMR (DMSO-d6, D2O): δ = -0.732 ppm.

0-(5'-0-( Q-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-3 '-yl) (2,3' -didésoxyuridin-5 '-yl) phosphate 11. 0- (5'-O- (4-methoxytrityl) 2'-deoxythymidin-3'-yl) (2,3'-dideoxyuridin-5'-yl) phosphate 11.

Une solution d'hydrogénophosphonate (2,06 g, 3,57 mmol.) 7 et de 2',3'-didésoxyuridine 6 (630 mg, 2,97 mmol.) dans 60 ml de pyridine anhydre est traitée avec 915 ul (7,43 mmol.) de chlorure de pivaloyle durant 3 h. Le milieu réactionnel est alors dilué avec du CH2Cl2, lavé avec une solution aqueuse de
NaHCO3 puis avec de l'eau. La phase organique est séchée sur
Na2SO4 et concentrée. Le résidu est repris avec 76 ml d'une solution d'iode à 2% dans le mélange pyridine, eau (98:2).A solution of hydrogenphosphonate (2.06 g, 3.57 mmol) 7 and 2 ', 3'-dideoxyuridine 6 (630 mg, 2.97 mmol) in 60 ml anhydrous pyridine is treated with 915 μl ( 7.43 mmol) of pivaloyl chloride for 3 h. The reaction medium is then diluted with CH 2 Cl 2, washed with an aqueous solution of
NaHCO3 then with water. The organic phase is dried on
Na2SO4 and concentrated. The residue is taken up with 76 ml of a solution of iodine at 2% in the pyridine mixture, water (98: 2).

Après 30', une solution aqueuse de bicarbonate de triéthylammonium est ajoutée et l'iode en excès est réduite par addition de thiosulfate de sodium. Le solvant est évaporé sous pression réduite et le brut chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-30%) dans CCl2). Les fractions appropriées sont rassemblées, évaporées, et le produit obtenu est dissous dans du MeOH pour être passé sur filtre Millipore. Le filtrat est évaporé pour conduire à 1,69 g (72%) de 11 suffisamment pur pour la suite de la synthèse.After 30 ', an aqueous solution of triethylammonium bicarbonate is added and excess iodine is reduced by addition of sodium thiosulfate. The solvent is evaporated under reduced pressure and the crude column chromatography on silica gel (eluent: MeOH (0-30%) in CCl2). The appropriate fractions are combined, evaporated, and the product obtained is dissolved in MeOH to be passed through a Millipore filter. The filtrate was evaporated to give 1.69 g (72%) of sufficiently pure 11 for the rest of the synthesis.

11 RMNH (DMSO-d6) : # = 1,34 (s, 3H, CH3 dT) ; 1,67-1,98 (m,
3H, H-2',3',3'' ddU) ; 2,11-2,55 (m, 3H, H-2'' ddU,
H-2',2'' dT) ; 3,12 (dl, 1H, H-5' dT, J = 8 Hz) ; 3,26
(dd, 1H, H-5" dT, J = 4 et 10 Hz) ; 3,60-3,90 (m, 2H,
H-5'5'' ddU) ; 3,73 (s, 3H, CH3OTr) ; 4,04 (m, 1H, H-4'
ddU) ; 4,11 (m, 1H, H-4' dT) ; 4,71 (m, 1H, H-3' dT)
5,48 (d, 1H, H-5 ddU, J = 8,1 Hz) ; 5,89 (dd, 1H, H-l'
ddU, J = 3,8 et 6,6 Hz) ; 6,22 (dd, 1H, H-i' dT, J = 6,0
et 8,2 Hz) ; 6,83-7,45 (m, 14H, MTr), 7,49 (s, 1H, H-6
dT) ; 7,88 (d, 1H, H-6 ddU, J = 8,1 Hz) ; 11,1 (sl,
2NHCO) ppm
RMN37P (DMSO-d6) : 6 = 1,836 ppm.NMR (DMSO-d6): # = 1.34 (s, 3H, CH3 dT); 1.67-1.98 (m,
3H, H-2 ', 3', 3 ''ddU); 2.11-2.55 (m, 3H, H-2 '' ddU,
H-2 ', 2 "dT); 3.12 (dl, 1H, H-5 'dT, J = 8 Hz); 3.26
(dd, 1H, H-5 "dT, J = 4 and 10 Hz), 3.60-3.90 (m, 2H,
H-5'5 ''ddU); 3.73 (s, 3H, CH 3 OTr); 4.04 (m, 1H, H-4 '
ddU); 4.11 (m, 1H, H-4 'dT); 4.71 (m, 1H, H-3 'dT)
5.48 (d, 1H, H-5 ddU, J = 8.1 Hz); 5.89 (dd, 1H, HCl)
ddU, J = 3.8 and 6.6 Hz); 6.22 (dd, 1H, Hi 'dT, J = 6.0
and 8.2 Hz); 6.83-7.45 (m, 14H, MTr), 7.49 (s, 1H, H-6)
dT); 7.88 (d, 1H, H-6 ddU, J = 8.1 Hz); 11.1 (sl,
2NHCO) ppm
NMR 37 P (DMSO-d 6): δ = 1.836 ppm.

0-(3'-0-( 4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-5'-yl) O-(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) phosphate 12. 0- (3'-O- (4-Methoxytrityl) 2'-deoxythymidin-5'-yl) O- (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) phosphate 12.

Ce composé a été obtenu selon le mode opératoire décrit lors de la synthèse de 11. Ainsi, 1,18 g (1,74 mmol.) d'hydrogénophosphonate 9 et 307 mg (1,45 mmol.) de 2',3'-didésoxyuridine 6 conduisent à 941 mg (73%) de diester 12 sous forme de triéthylammonium après évaporation en présence de triéthylamine.This compound was obtained according to the procedure described during the synthesis of 11. Thus, 1.18 g (1.74 mmol) of hydrogenophosphonate 9 and 307 mg (1.45 mmol) of 2 ', 3' 6-dideoxyuridine lead to 941 mg (73%) of diester 12 as triethylammonium after evaporation in the presence of triethylamine.

12 UV (EtOH) : À max 264 nm (E 18700)
À min 245 nm (E 13500)
À inflex 230 nm (E 17500)
SM (FAB négatif, GT) : 787 (M) , 111(U)
RMN H (DMSO-d6) : 6 = 1,08 (t, 9H, (CH3CH2)3N, J = 7,3
Hz) ; 1,39-1,54 (m, 1H, H-2' dT) ; 1,62-2,00 (m, 4H,
H-2'' dT, H-2',3',3'' ddU) ; 1,75 (s, 3H, CH3 dT)
2,11-2,30 (m, 1H, H-2' ddU) ; 2,82 (q, 6H, (CH3CH2)3N, J =
7,3 Hz) ; 3,40 (m, 1H, H-5'' dT), 3,45-3,82 (m, 3H, H-5''
dT, H-5',5'' ddU) ; 3,73 (s, 3H, CH3O) ; 3,84 (m, 1H, H-4'
dT) ; 3,97 (m, 1H, H-4' ddU) ; 4,22 (d, 1H, H-3' dT, J =
5,1 Hz) ; 5,50 (d, 1H, H-5 ddU, J = 8,1 Hz) ; 5,90 (dd,
1H, H-l' ddU, H = 4,1 et 6,6 Hz) ; 6,24 (dd, 1H, H-1' dT,
J = 5,4 et 9,4 Hz) ; 6,85-7,47 (m, 14H, Tr) ; 7,75 (s,
1H, H-6 dT) ; 7,84 (d, 1H, H-6 ddU, J = 8,0 Hz), 11,2
(sl, 2H, 2NHCO) ppm
RMNP (DMSO-d6) : ô = 0,810 ppm. 12 UV (EtOH): At max 264 nm (E 18700)
At min 245 nm (E 13500)
At inflex 230 nm (E 17500)
MS (Negative FAB, GT): 787 (M), 111 (U)
1 H NMR (DMSO-d 6): 6 = 1.08 (t, 9H, (CH 3 CH 2) 3 N, J = 7.3
Hz); 1.39-1.54 (m, 1H, H-2 'dT); 1.62-2.00 (m, 4H,
H-2 '' dT, H-2 ', 3', 3 ''ddU); 1.75 (s, 3H, CH3 dT)
2.11-2.30 (m, 1H, H-2 'ddU); 2.82 (q, 6H, (CH 3 CH 2) 3 N, J =
7.3 Hz); 3.40 (m, 1H, H-5 "dT), 3.45-3.82 (m, 3H, H-5")
dT, H-5 ', 5''ddU); 3.73 (s, 3H, CH 3 O); 3.84 (m, 1H, H-4 '
dT); 3.97 (m, 1H, H-4 'ddU); 4.22 (d, 1H, H-3 'dT, J =
5.1 Hz); 5.50 (d, 1H, H-5 ddU, J = 8.1 Hz); 5.90 (dd,
1H, H1 ddU, H = 4.1 and 6.6 Hz); 6.24 (dd, 1H, H-1 'dT,
J = 5.4 and 9.4 Hz); 6.85-7.47 (m, 14H, Tr); 7.75 (s,
1H, H-6 dT); 7.84 (d, 1H, H-6 ddU, J = 8.0 Hz), 11.2
(sl, 2H, 2NHCO) ppm
NMR (DMSO-d6): δ = 0.810 ppm.

O,O'-bis(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-méthyl phosphate 13. (Composé 2)
Le diester 10 (245 mg, 0,417 mmol.) en solution dans 12,5 ml de pyridine est traité avec 85 ul (2,09 mmol.) de MeOH et avec 309 mg (1,04 mmol.) de 1-(2-mésitylènesulfonyl) 3-nitro 1,2,4 triazole. Après 2 h de réaction, une solution aqueuse de bicarbonate de triéthylammonium est ajoutée et le solvant est évaporé sous pression réduite. La purification est réalisée par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-7%) dans CH2Cl2) puis par CLHP semi-préparative (colonne nucléosil Cul8, éluant : CH3CN (18%) dans l'eau) pour conduire à 28 mg (13%) de triester 13 après filtration sur filtre Millipore et lyophilisation dans l'eau.O, O'-bis (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) O-methyl phosphate 13. (Compound 2)
The diester (245 mg, 0.417 mmol) in solution in 12.5 ml pyridine is treated with 85 μl (2.09 mmol) MeOH and with 309 mg (1.04 mmol) 1- (2mg). mesitylenesulfonyl) 3-nitro 1,2,4 triazole. After 2 hours of reaction, an aqueous solution of triethylammonium bicarbonate is added and the solvent is evaporated off under reduced pressure. The purification is carried out by chromatography on a column of silica gel (eluent: MeOH (0-7%) in CH2Cl2) and then by semi-preparative HPLC (nucleosil column Cul8, eluent: CH3CN (18%) in water) to conduct at 28 mg (13%) of triester 13 after filtration on Millipore filter and lyophilization in water.

13 CLHP : TR = 308s (98,4%) (15% CH3CN/AcONH4 0,1 M)
UV (H2O) : À max 261 nm (E 18300)
À min 231 nm (E 4600)
SM (FAB positif, GT) : 501 (M+H)+, 389 (M-B)+, 113 (BH2)+ ;
(FAB négatif, GT), 499 (M-H)
RMN H (DMSO-d6) : ô = 1,65-2,12 (m, 6H, 2H-2',3',3'') ;
2,22-2,39 (m, 2H, 2H-2') ; 3,678 et 3,684 (d et d, 3H,
CH30P, J = 11,2 et 11,2 Hz) ; 3,95-4,25 (m, 6H,
2H-4',5',S'') ; 5,59 (d, 2H, 2H-5, J = 8,1 Hz) ; 6,00 (m,
2H, 2H-1') ; 7,648 et 7,655 (d et d, 1H et 1H, 2H-6, J =
8,1 et 8,1 Hz) ; 11,3 (sl, 2H, 2NHCO) ppm
RMN37P : 6 = 0,571 ppm.HPLC: RT = 308s (98.4%) (15% CH3CN / 0.1M AcONH4)
UV (H2O): At max 261 nm (E 18300)
At 231 nm (E 4600)
MS (FAB positive, GT): 501 (M + H) +, 389 (MB) +, 113 (BH2) +;
(Negative FAB, GT), 499 (MH)
1 H NMR (DMSO-d 6): δ = 1.65-2.12 (m, 6H, 2H-2 ', 3', 3 '');
2.22-2.39 (m, 2H, 2H-2 '); 3,678 and 3,684 (d and d, 3H,
CH3Op, J = 11.2 and 11.2 Hz); 3.95-4.25 (m, 6H,
2H-4 ', 5', S ''); 5.59 (d, 2H, 2H-5, J = 8.1 Hz); 6.00 (m,
2H, 2H-1 '); 7.648 and 7.655 (d and d, 1H and 1H, 2H-6, J =
8.1 and 8.1 Hz); 11.3 (sl, 2H, 2NHCO) ppm
NMR 37 P: 6 = 0.571 ppm.

O,O'-bis (2', 3 ' -didéseoxyuridin-5'-yl) O-(2-méthoxyéthyl) phosphate 14 (Composé 4)
Un mode opératoire identique à celui décrit pour la synthèse de 13 à été employé pour obtenir 14. La réaction de 10 (300 mg, 0,511 mmol.) avec 200 u1 (2,6 mmol.) de méthoxyéthanol donne 171 mg (62%) de 14 après lyophilisation dans l'eau. La purification a été réalisée par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : EtOH (0-10%) dans CH2Cl2) puis sur colonne de silice silanisée RP2 (éluant : EtOH (0-25%) dans l'eau. O, O'-bis (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) O- (2-methoxyethyl) phosphate (Compound 4)
A procedure identical to that described for the synthesis of 13 was used to obtain 14. The reaction of 10 (300 mg, 0.511 mmol) with 200 μl (2.6 mmol) of methoxyethanol gives 171 mg (62%). of 14 after lyophilization in water. The purification was carried out by chromatography on a column of silica gel (eluent: EtOH (0-10%) in CH 2 Cl 2) and then on a silanized silica column RP 2 (eluent: EtOH (0-25%) in water.

14 CLHP : TR = 600 s (100%) (15% CH3CN/AcONH4 0,1M)
UV (H2O) : X max 261 (E 18600)
À min 230 (E 4400)
SM (FAB negatif, GT) : 543 (M-H) , 485 (M-CH3OCH2CH2)
RMNH (DMSO-d6) : # = 1,71-1,87 (m, 2H, 2H-3'); 1,87-2,09
(m, 4H, 2H-2',3''); 1,99 (m, 2H, 2H-2''); 3,25 (s, 3H,
CH30); 3,50 (m, 2H, CH3OCH2); 4,02-4,25 (m, 8H, CH2CH2OP,
2H-4',5',5''); 5,58 (d, 2H, H-5, J = 8,1 Hz); 5,99 (dd,
2H, 2H-1', J = 4,1 et 7,0 Hz); 7,65 (d, 2H, 2H-6, J = 8,2
Hz); 11,26 (sl, 2H, 2NHCO)
RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -0,346 ppm.14 HPLC: TR = 600 s (100%) (15% CH3CN / AcONH4 0.1M)
UV (H2O): max X 261 (E, 18600)
At min 230 (E 4400)
MS (FAB negative, GT): 543 (MH), 485 (M-CH3OCH2CH2)
NMR (DMSO-d6): # = 1.71-1.87 (m, 2H, 2H-3 '); 1.87 to 2.09
(m, 4H, 2H-2 ', 3''); 1.99 (m, 2H, 2H-2 ''); 3.25 (s, 3H,
CH30); 3.50 (m, 2H, CH3OCH2); 4.02-4.25 (m, 8H, CH2CH2OP,
2H-4 ', 5', 5 ''); 5.58 (d, 2H, H-5, J = 8.1 Hz); 5.99 (dd,
2H, 2H-1 ', J = 4.1 and 7.0 Hz); 7.65 (d, 2H, 2H-6, J = 8.2
Hz); 11.26 (sl, 2H, 2NHCO)
31 P NMR (DMSO-d6): δ = -0.346 ppm.

O,O'-Bis (2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) 0-(2-cyanoéthyl) phosphate 15 (Composé 5)
Ce composé a été prépare selon le même mode opératoire que celui utilise lors de la synthèse de 13
La réaction de 234 mg (0,481 mmol.) de 10 avec 165 ul de 3-hydroxypropionitrile conduit à 140 mg (54%) de 15 après deux purifications sur colonne de gel de silice (éluant :
MeOH (0-10%) dans CH2Cl2) et lyophilisation dans l'eau.O, O'-Bis (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) O- (2-cyanoethyl) phosphate (Compound 5)
This compound was prepared according to the same procedure as that used during the synthesis of 13
Reaction of 234 mg (0.481 mmol) of 10 with 165 ul of 3-hydroxypropionitrile gives 140 mg (54%) of 15 after two purifications on a column of silica gel (eluent:
MeOH (0-10%) in CH2Cl2) and lyophilization in water.

15 CLHP : TR = 464 s (100%) (15 CH3CN/AcONH4 0.1M)
UV (H2O) : X max 261 nm (E 19300)
À min 230 nm (E 4400)
SM (FAB positif, GT) : 540 (M+H) +; (FAB négatif, GT) 538
(M-H) , 485 (M-CH2CH2CN)
RMN1H (DMSO-d6) : ô = 1,71-i,87(m, 2H, 2H-3'); 1,87-2,10
(m, 4H, 2H-2',3"); 2,28 (m, 2H, 2H-2"); 2,92 (t, 2H,
CH2CN, J = 5,9 Hz); 4,10-4,30 (m, 8H, CH2CH2CN,
H-4',5',5"); 5,60 (d, 2H, H-5, J = 8,1 Hz). 6,00 (m, 2H,
2H-1'); 7,63 (d, 2H, 2H-6, J = 8,0Hz); 11,30 (sl, 2H,
2NHCO) ppm
RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -0,875 ppm.HPLC: TR = 464 s (100%) (15 CH3CN / AcONH4 0.1M)
UV (H2O): max X 261 nm (E 19300)
At min 230 nm (E 4400)
MS (positive FAB, GT): 540 (M + H) +; (Negative FAB, GT) 538
(MH), 485 (M-CH 2 CH 2 CN)
1 H NMR (DMSO-d 6): δ = 1.71-1.87 (m, 2H, 2H-3 '); 1.87 to 2.10
(m, 4H, 2H-2 ', 3 "); 2.28 (m, 2H, 2H-2"); 2.92 (t, 2H,
CH 2 CN, J = 5.9 Hz); 4.10-4.30 (m, 8H, CH 2 CH 2 CN,
H-4 ', 5', 5 ") 5.60 (d, 2H, H-5, J = 8.1 Hz) 6.00 (m, 2H,
2H-1 '); 7.63 (d, 2H, 2H-6, J = 8.0 Hz); 11.30 (sl, 2H,
2NHCO) ppm
31 P NMR (DMSO-d6): δ = -0.875 ppm.

O,O'-bis(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-(S-pivaloyl-2-thio éthanol) phosphate 16 (Composé 6)
La réaction de 311 mg (0,529 mmol.) de 10 avec 430 mg (2,65 mmol.) de S-pivaloyl 2-thioéthanol en présence de 391 mg (1,32 mmol.) 1 -(2-mesitylènesulfonyl) 3-nitro 1,2,4-triazole dans la pyridine (10,6 ml) a été réalisée en 5h. Le mélange réactionnel a été dilué avec une solution aqueuse 1M de bicarbonate de triéthylammonium avant d'être extrait avec du
CH2Cl2. La phase organique a été lavée avec de l'eau, séchée sur sulfate de sodium, concentrée sous pression réduite puis purifiée sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-4%) dans le CH2Cl2) pour conduire à 254 mg (76%) de 16 après lyophilisation dans le mélange eau/dioxanne.O, O'-bis (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) O- (5-pivaloyl-2-thioethanol) phosphate 16 (Compound 6)
The reaction of 311 mg (0.529 mmol) of 10 with 430 mg (2.65 mmol) of S-pivaloyl 2-thioethanol in the presence of 391 mg (1.32 mmol) 1 - (2-mesitylenesulfonyl) 3 Nitro 1,2,4-triazole in pyridine (10.6 ml) was carried out in 5h. The reaction mixture was diluted with a 1M aqueous solution of triethylammonium bicarbonate before being extracted with
CH2Cl2. The organic phase was washed with water, dried over sodium sulfate, concentrated under reduced pressure and then purified on a silica gel column (eluent: 0-4% MeOH in CH 2 Cl 2) to yield 254 mg ( 76%) of 16 after lyophilization in the water / dioxane mixture.

16 CLHP : TR = 532 s (98,8%) (30% CH3CN/AcNH4 0,1M)
UV (H2O) : X max 261 nm (E 17500)
À min 230 nm (E 8000)
SM (FAB positif, GT, NBA) : 631 (M+H)+
RMNH (DMSO-d6) : # = 1,16 (s, 9H, (CH3)3C); 1,71-1,89 (m,
2H, 2H-3'); 1,89-2,09 (m, 4H, 2H-2',3"); 2,29 (m, 2H,
2H-2"); 3,10 (t, 2H, SCH2, J = 6,5 Hz); 4,03 (m, 2H,
CH2CH2OP); 4,06-4,27 (m, 6H, 2H-4',5',5"); 5,586 (d, 1H,
1H-5, J = 8,1 Hz); 5,741 (d, 1H, 1H-5, J = 8,0 Hz); 6,00
(m, 2H, 2H-1'); 7,638 ( d, 1H, 1H-6, J = 7,8 Hz); 7,641
(d, 1H, 1H-6, J = 8,0 Hz); 11,31 (sl, 2H, 2NHCO) ppm
RMN P (DMSO-d6) : ô = -0,866 ppm.HPLC: TR = 532 s (98.8%) (30% CH3CN / 0.1 M NH4)
UV (H2O): max X 261 nm (E 17500)
At min 230 nm (E 8000)
MS (Positive FAB, GT, NBA): 631 (M + H) +
NMR (DMSO-d6): # = 1.16 (s, 9H, (CH3) 3C); 1.71-1.89 (m,
2H, 2H-3 '); 1.89-2.09 (m, 4H, 2H-2 ', 3 "); 2.29 (m, 2H,
2H-2 "); 3.10 (t, 2H, SCH 2, J = 6.5 Hz); 4.03 (m, 2H,
CH2CH2OP); 4.06-4.27 (m, 6H, 2H-4 ', 5', 5 "), 5.586 (d, 1H,
1H-5, J = 8.1 Hz); 5.771 (d, 1H, 1H-5, J = 8.0 Hz); 6.00
(m, 2H, 2H-1 '); 7.638 (d, 1H, 1H-6, J = 7.8 Hz); 7.641
(d, 1H, 1H-6, J = 8.0 Hz); 11.31 (sl, 2H, 2NHCO) ppm
P NMR (DMSO-d6): δ = -0.866 ppm.

0,0'-bis (2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) o- (2- (4-nitrobenzamido) éthyl) phosphate 17 (Composé 8)
Ce composé a été obtenu en suivant un mode opératoire analogue à celui décrit pour la synthèse de 13.0,0'-bis (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) o- (2- (4-nitrobenzamido) ethyl) phosphate 17 (Compound 8)
This compound was obtained following a procedure analogous to that described for the synthesis of 13.

La réaction de 300 mg (0,511 mmol.) de 10 avec 537 mg (2,56 mmol.) de N-(2-hydroxyéthyl) 4-nitrobenzamide conduit à 205 mg (59%) du composé 17 après deux purifications sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-6%) dans CH2Cl2 et lyophilisation dans un mélange eau Idioxanne. Reaction of 300 mg (0.511 mmol) of 10 with 537 mg (2.56 mmol) of N- (2-hydroxyethyl) 4-nitrobenzamide gives 205 mg (59%) of compound 17 after two column purifications of silica gel (eluent: MeOH (0-6%) in CH2Cl2 and lyophilization in Idioxane water mixture.

17 CLHP : TR = 324 s (98,3%) (25% CH3CN/AcNH4 0,1M)
UV (H2O) : A max 261 nm (E 25200)
À min 230 nm (E 7500)
SM (FAB positif, NBA) : 679 (M+H)
RMN H (DMSO-d6) : # = 1,68-1,87 (m, 2H, 2H-3'); 1,87-2,05
(m, 4H, 2H-2',3"); 2,25 (m, 2H, 2H-2"); 3,55 (m, 2H,
NHCH2); 4,05-4,24(m, 8H, 2H-4',5',5",CH2CH2OP); 5,57 (d,
2H, 2H-5, J = 8,0 Hz); 5,96 (m, 2H, 2H-1'); 7,60 (d, 1H,
1H-6, J = 8,5 Hz); 7,62 (d, 1H, 1H-6, J = 8,3 Hz); 8,06
(d, 2H, 2H arom., J = 8,9 Hz); 8,31 (d, 2H, 2H arom., J =
8,7 Hz); 8,99 (t, 1H, -CH2, J = 5,5 Hz); 11,30 (sl, 2H,
NHCO) ppm
RMN31P (DMSO-d6) : # = -0,398 ppm.HPLC: RT = 324 s (98.3%) (25% CH3CN / 0.1 M NH4)
UV (H2O): A max 261 nm (E 25200)
At min 230 nm (E 7500)
MS (FAB positive, NBA): 679 (M + H)
1 H NMR (DMSO-d6): # = 1.68-1.87 (m, 2H, 2H-3 '); 1.87 to 2.05
(m, 4H, 2H-2 ', 3 "); 2.25 (m, 2H, 2H-2"); 3.55 (m, 2H,
NHCH2); 4.05-4.24 (m, 8H, 2H-4 ', 5', 5 ", CH 2 CH 2 OP); 5.57 (d,
2H, 2H-5, J = 8.0 Hz); 5.96 (m, 2H, 2H-1 '); 7.60 (d, 1H,
1H-6, J = 8.5 Hz); 7.62 (d, 1H, 1H-6, J = 8.3 Hz); 8.06
(d, 2H, 2H arom, J = 8.9 Hz); 8.31 (d, 2H, 2H arom, J =
8.7 Hz); 8.99 (t, 1H, -CH 2, J = 5.5 Hz); 11.30 (sl, 2H,
NHCO) ppm
31 P NMR (DMSO-d6): # = -0.398 ppm.

O,O'-bis (2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O- (benzyloxycarbonyl L-sérinyl éthylester) phosphate 18 (Composé 9)
La méthode de synthèse de ce composé est identique à celle décrite pour le triester 13
Ainsi, 300 mg (0,511 mmol.) du diester 10 et 824 mg (3,08 mmol.) d'éthylester de la N-benzyloxycarbonyl L-sérine conduisent à 130 mg (35%) de 18 après plusieurs purifications sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-8%) dans
CH2Cl2) ainsi que sur silice silanisée RP2 (éluant : EtOH (0-40%) dans l'eau) et lyophilisation dans un mélange eau/dioxanne.O, O'-bis (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) O- (benzyloxycarbonyl L-serinyl ethyl ester) phosphate 18 (Compound 9)
The method of synthesis of this compound is identical to that described for the triester 13
Thus, 300 mg (0.511 mmol) of the diester 10 and 824 mg (3.08 mmol) of N-benzyloxycarbonyl L-serine ethyl ester lead to 130 mg (35%) of 18 after several gel column purifications. silica (eluent: MeOH (0-8%) in
CH 2 Cl 2) as well as on silanized silica RP 2 (eluent: EtOH (0-40%) in water) and lyophilization in a water / dioxane mixture.

18 CLHP : TR = 564 s (100%) (30% CH3CN/AcNH4 0,1M)
UV (H2O) : X max 261 nm (E 19700)
À min 230 nm (E 5800)
SM (FAB positif, GT) : 736 (M+H)
RMN H (DMSO-d6) : # = 1,16 (t, 3H, CH3CH2, J = 7,1 Hz);
1,70-1,87 (m, 2H, 2H-3'); 1,87-2,09 (m, 4H, 2H-2',3");
2,27 (m, 2H, 2H-2"); 4,03-4;30 (m, 10H, 2H-4',5',5",
CH,-20, CHCH2OP); 4,43 (m, 1H, NHCHCH2); 5,06(s, 2H,
CH2Ph); 5,58 (d, 2H, 2H-5, J = 8,1 Hz); 5,99 (m, 2H,
2H-1'); 7,26-7,42 (m, 5H, Ph); 7,620 (d,1H, 1H-6, J = 8,0
Hz); 7,624 (d, 1H, 1H-6, J = 8,2); 7,93 (d, 1H, NHCHCH2, J
= 8,2 Hz); 11,30 (sl, 2H, 2NHCO) ppm
RMN31P (DMSO-d6) : ô = -0,855 ppm.HPLC: TR = 564 s (100%) (30% CH3CN / 0.1 M NH4)
UV (H2O): max X 261 nm (E 19700)
At min 230 nm (E 5800)
MS (positive FAB, GT): 736 (M + H)
1 H NMR (DMSO-d 6): # = 1.16 (t, 3H, CH 3 CH 2, J = 7.1 Hz);
1.70-1.87 (m, 2H, 2H-3 '); 1.87-2.09 (m, 4H, 2H-2 ', 3 ");
2.27 (m, 2H, 2H-2 ");4.03-4; 30 (m, 10H, 2H-4 ', 5', 5",
CH, -20, CHCH2OP); 4.43 (m, 1H, NHCHCH 2); 5.06 (s, 2H,
CH 2 Ph); 5.58 (d, 2H, 2H-5, J = 8.1 Hz); 5.99 (m, 2H,
2H-1 '); 7.26-7.42 (m, 5H, Ph); 7.620 (d, 1H, 1H-6, J = 8.0
Hz); 7.624 (d, 1H, 1H-6, J = 8.2); 7.93 (d, 1H, NHCHCH 2, J
= 8.2 Hz); 11.30 (sl, 2H, 2NHCO) ppm
31 P NMR (DMSO-d6): δ = -0.855 ppm.

O,O'-bis (2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-(S-(O-(4-méthoxytrityl) 2-oxyéthylsulfidyl) 2-thioéthyl) phosphate 19. O, O'-bis (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) O- (S- (O- (4-methoxytrityl) 2-oxyethylsulfidyl) -2-thioethyl) phosphate 19.

Le diester 10 (175 mg, 0,298 mmol.) et 636 mg (1,49 mmol.) de mono-O-(4-méthoxytrityl) dithiodiéthanol dans 10 ml de pyridine sont traités avec 221 mg (0,746 mmol.) de i-(2-mésitylè- nesulfonyl) 3-nitro 1,2,4 triazole. Après 2 h, le milieu réactionnel est dilué avec du CH2Cl2 et lavé avec une solution aqueuse de NaHCO3 puis avec de l'eau. La phase organique est séchée sur Na2SO4 et concentrée sous pression réduite. Le brut obtenu est chromatographié sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-4%) dans CH2Cl2) pour conduire à 168 mg (63%) de triester protégé 19.The diester (175 mg, 0.298 mmol) and 636 mg (1.49 mmol) of mono-O- (4-methoxytrityl) dithiodiethanol in 10 ml of pyridine are treated with 221 mg (0.746 mmol) of (2-mesitylenesulfonyl) 3-nitro 1,2,4 triazole. After 2 h, the reaction medium is diluted with CH 2 Cl 2 and washed with aqueous NaHCO 3 solution and then with water. The organic phase is dried over Na 2 SO 4 and concentrated under reduced pressure. The crude product obtained is chromatographed on a column of silica gel (eluent: MeOH (0-4%) in CH 2 Cl 2) to yield 168 mg (63%) of protected triester 19.

19 UV (EtOH) : À max 261 nm (E 20600), 232 nm (E 19700)
À min 244 nm (E 16200), 227 nm
SM (FAB, positif, GT) : 895 (M+H)+, 273 (MTr) +
RMN1H (DMSO-d6) : ô = 1,75-1,88 (m, 2H, 2H-3'), 1,91-2,08
(m, 4H, 2H-2',3'') ; 2,23-2,48 (m, 2H, 2H-2'') ; 2,88 (t,
2H, CH2CH20P, J = 6,3 Hz) ; 2,92 (t, 2H, CH2CH2OMTr, J =
6,4 Hz) ; 3,24 (t, 2H, CH2CH2OMTr, J = 6,0 Hz) ; 3,74 (s,
3H, CH30) ; 4,07-4,18 (m, 8H, 2H-4',5',5'', CH2CH2OP)
5,569 et 5,572 (d et d, 2H, 2H-5, J = 8,1 et 8,1 Hz)
5,99 (m, 2H, 2H-1') ; 6,88-7,45 (m, 14H, Tr) ; 7,62 (d,
2H, 2H-6, J = 8,1 Hz) ; 11,3 (sl, 2H, 2NHCO) ppm
RMN P (DMSO-d6) : ô = -0,601 ppm.UV (EtOH): At max 261 nm (E 20600), 232 nm (E 19700)
At min 244 nm (E 16200), 227 nm
MS (FAB, positive, GT): 895 (M + H) +, 273 (MTr) +
1 H NMR (DMSO-d 6): δ = 1.75-1.88 (m, 2H, 2H-3 '), 1.91-2.08
(m, 4H, 2H-2 ', 3''); 2.23-2.48 (m, 2H, 2H-2 ''); 2.88 (t,
2H, CH 2 CH 2 O, J = 6.3 Hz); 2.92 (t, 2H, CH2CH2OMTr, J =
6.4 Hz); 3.24 (t, 2H, CH 2 CH 2OMTr, J = 6.0 Hz); 3.74 (s,
3H, CH3O); 4.07-4.18 (m, 8H, 2H-4 ', 5', 5 '', CH 2 CH 2OP)
5.569 and 5.572 (d and d, 2H, 2H-5, J = 8.1 and 8.1 Hz)
5.99 (m, 2H, 2H-1 '); 6.88-7.45 (m, 14H, Tr); 7.62 (d,
2H, 2H-6, J = 8.1 Hz); 11.3 (sl, 2H, 2NHCO) ppm
P NMR (DMSO-d6): δ = -0.601 ppm.

0-(5 '-0-( 4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-3'-yl) 0-(2'.3' -didésoxyuridin-5 '-yl) O-(S-(O-(4-méthoxytrityl) 2-oxyéthylsulfidyl) 2-(thioéthyl) phosphate 20. 0- (5'-O- (4-Methoxytrityl) -2'-deoxythymidin-3'-yl) O- (2'3'-dideoxyuridin-5'-yl) O- (S- (O- (4- methoxytrityl) 2-oxyethylsulfidyl) 2- (thioethyl) phosphate 20.

Ce composé a été obtenu selon le même mode opératoire utilisé lors de la synthèse de 19.This compound was obtained according to the same procedure used during the synthesis of 19.

Ainsi 355 mg (0,450 mmol.) du diester 17 conduisent à 310 mg (58%) de triester 20.Thus 355 mg (0.450 mmol) of the diester 17 lead to 310 mg (58%) of triester 20.

20 SM (FAB positif, NBA) : 1197 (M+H)+, 273 (MTr)
RMN1H (DMSO-d6) : ô = 1,44 et 1,46 (s et s, 3H, CH3 dT)
1,65-1,74 (m, 1H, H-3' ddU) ; 1,75-2,05 (m, 2H, H-2',3"
ddU) ; 2,17-2,34 (m, 1H, H-2' ddU) ; 2,40-2,57 (m,
H-2',2" dT) ; 2,81 (m, 2H, SCH2CH2OP) ; 2,89 (m, 2H,
SCH2CH2OMTr) ; 3,15-3,42 (m, 4H, H-5',5'' dT,
SCH2CH2OMTr) ; 4,02-4,22 (m, 6H, H-4',5',5'' ddU, H-4' dT,
SCH2CH2OP) ; 5,03 (m, 1H, H-3' dT), 5,53 et 5,54 (d et d,
1H, H-5 ddU, J = 8,1 et 8,1 Hz) ; 5,93 (m, 1H, H-1'
ddU) ; 6,21 (t, 1H, H-1' dT, J = 7,0 Hz) ; 6,82-7,43 (m,
14H, Tr) ; 7,47 (s, 1H, H-6 dT) ; 7,58 et 7,59 (d et d,
1H, H-6 ddU, J = 8,1 et 8,1 Hz) ; 11,3 (sl, 2H, 2NHCO dT
ddU) ppm
RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -1,689 et -1,748 ppm.MS (FAB positive, NBA): 1197 (M + H) +, 273 (MTr)
1 H NMR (DMSO-d 6): δ = 1.44 and 1.46 (s and s, 3H, CH 3 dT)
1.65-1.74 (m, 1H, H-3 'ddU); 1.75-2.05 (m, 2H, H-2 ', 3 "
ddU); 2.17-2.34 (m, 1H, H-2 'ddU); 2.40-2.57 (m,
H-2 ', 2 "dT); 2.81 (m, 2H, SCH2CH2OP); 2.89 (m, 2H,
SCH2CH2OMTr); 3.15-3.42 (m, 4H, H-5 ', 5''dT,
SCH2CH2OMTr); 4.02-4.22 (m, 6H, H-4 ', 5', 5 '' ddU, H-4 'dT,
SCH2CH2OP); 5.03 (m, 1H, H-3 'dT), 5.53 and 5.54 (d and d,
1H, H-5 ddU, J = 8.1 and 8.1 Hz); 5.93 (m, 1H, H-1 '
ddU); 6.21 (t, 1H, H-1 'dT, J = 7.0 Hz); 6.82-7.43 (m,
14H, Tr); 7.47 (s, 1H, H-6 dT); 7.58 and 7.59 (d and d,
1H, H-6 ddU, J = 8.1 and 8.1 Hz); 11.3 (sl, 2H, 2NHCO dT
ddU) ppm
31 P NMR (DMSO-d6): δ = -1.689 and -1.748 ppm.

O- (5 '-O- ( 4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-3'-yl)
O-(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) (H(S-pivaloyl 2-thioéthyl) phosphate 21.O- (5'-O- (4-Methoxytrityl) 2'-deoxythymidin-3'-yl)
O- (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) (H (S-pivaloyl 2-thioethyl) phosphate 21.

La réaction de 266 mg (0,377 mmol.) du diester 17 avec 274 mg (1,69 mmol.) de S-pivaloyl 2-thioéthanol selon le mode opératoire décrit lors de la synthèse de 19 conduit à 124 mg (55%) du triester 21.The reaction of 266 mg (0.377 mmol) of diester 17 with 274 mg (1.69 mmol) of S-pivaloyl 2-thioethanol according to the procedure described in the synthesis of 19 leads to 124 mg (55%) of triester 21.

21 RMN H (DMSO-d6) : 6 = 1,13 et 1,14 (s et s, 9H, (CH3)3C)
1,46 et 1,44 (s et s, 3H, CH3 dT) ; 1,65-1,85 (m, 1H, H-3'
ddU) ; 1,85-2,08 (m, 2H, H-2',3'' ddU) ; 2,18-2,40 (m,
1H, H-2'' ddU) ; 2,42-2,60 (m, H-2',2'' dT) ; 3,05 (m,
2H, SCH2CH2) ; 3,17-3,45 (m, 2H, H-5',5'' dT), 3,73 (s,
3H, CH30 Tr) ; 3,92-4,25 (m, 6H, H-4' dT, H-4',5',5'' ddU,
SCH2CH2OP) ; 5,04 (m, 1H, H-3' dT) ; 5,54 et 5,55 (d et d,
1H, H-5 ddU, J = 8,1 Hz et 8,1 Hz) ; 5,94 (m, 1H, H-1'
ddU) ; 6,21 (t, 1H, H-1' dT, J = 7,0 Hz) ; 6,85-7,45 (m,
14H, Tr) ; 7,49 (s, 1H, H-6 dT) ; 7,598 et 7,602 (d et d,
1H, H-6 ddU, J = 8,1 et 8,1 Hz) ; 11,4 (sl, 2H, 2NHCO)
ppm
RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -1,749 et -1,854 ppm.21 H-NMR (DMSO-d6): 6 = 1.13 and 1.14 (s and s, 9H, (CH3) 3C)
1.46 and 1.44 (s and s, 3H, CH3 dT); 1.65-1.85 (m, 1H, H-3 '
ddU); 1.85-2.08 (m, 2H, H-2 ', 3''ddU); 2.18-2.40 (m,
1H, H-2 ''ddU); 2.42-2.60 (m, H-2 ', 2 "dT); 3.05 (m,
2H, SCH2CH2); 3.17-3.45 (m, 2H, H-5 ', 5''dT), 3.73 (s,
3H, CH3O Tr); 3.92-4.25 (m, 6H, H-4 'dT, H-4', 5 ', 5''ddU,
SCH2CH2OP); 5.04 (m, 1H, H-3 'dT); 5.54 and 5.55 (d and d,
1H, H-5 ddU, J = 8.1 Hz and 8.1 Hz); 5.94 (m, 1H, H-1 '
ddU); 6.21 (t, 1H, H-1 'dT, J = 7.0 Hz); 6.85-7.45 (m,
14H, Tr); 7.49 (s, 1H, H-6 dT); 7,598 and 7,602 (d and d,
1H, H-6 ddU, J = 8.1 and 8.1 Hz); 11.4 (sl, 2H, 2NHCO)
ppm
31 P NMR (DMSO-d6): δ = -1.749 and -1.854 ppm.

O-(3'-O-(4-Méthoxytrityl) 2'-désoxythymidin-5'-yl) 0-(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-(S-(O-(4 méthoxytrityl) 2-oxyéthylsulfidyl) 2-(thioéthyl) phosphate 22
Le même mode opératoire que celui décrit lors de la synthèse de 19 a été employé. Ainsi, 400 mg (0,449 mmol.) de diester 12 conduisent à 348 mg (65%) du triester 22. O- (3'-O- (4-Methoxytrityl) 2'-deoxythymidin-5'-yl) O- (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) O- (S- (O- (4-methoxytrityl) 2-oxyethylsulfidyl) 2- (thioethyl) phosphate 22
The same procedure as that described in the synthesis of 19 was used. Thus, 400 mg (0.449 mmol) of diester 12 lead to 348 mg (65%) of triester 22.

22 UV (EtOH) : A max 263 nm (E 22000)
À min 250 nm (E 19700)
À max 232 nm (E 34400)
À min 227 nm (E 33500) +
SM (FAB positif, NBA) : 1197 (M+H)+, 273 (MTr)
RMNH (DMSO-d6) : 6=1,55-2,07 (m, 5H, H-2',2" dT,
H-2',3',3" ddU) ; 1,69 (s, 3H, CH3 dT) ; 2,78 (t, 2H,
MTrOCH2CH2, J = 6,3 Hz) ; 2,88 (t, 2H, POCH2CH2, J = 5,8
Hz) ; 3,21 (t, 2H, MTrOCH2CH2, J = 5,7 Hz) ; 3,67-4,17 (m,
8H, H-4',5',5" dT, H-4',5',5'' ddU, POCH2CH2) ; 3,72 (s,
6H, 2CH30 Tr) ; 4,20 (m, 1H, H-3' dT) ; 5,53 (d, 1H, H-5
ddU, J = 8,1 Hz) ; 5,95 (dd, 1H, H-1' ddU, J = 3,8 et 6,7
Hz) ; 6,19 (dd, 1H, H-1' dT, J = 6,4 et 8,7 Hz) ;
6,85-6,43 (m, 28H, 2Tr) ; 6,44 (s, 1H, H-6 dT) ; 5,57 et
5,59 (d et d, 1H, H-6 ddU, J = 8,1 et 8,1 Hz) ; 11,3 (sl,
2H, 2NHCO) ppm
RMN P (DMSO-d6) : ô = -0,662 et - 0,722 ppm.UV (EtOH): A max 263 nm (E 22000)
At min 250 nm (E 19700)
At max 232 nm (E 34400)
At 227 nm (E 33500) +
MS (FAB positive, NBA): 1197 (M + H) +, 273 (MTr)
NMR (DMSO-d6): δ = 1.55-2.07 (m, 5H, H-2 ', 2 "dT,
H-2 ', 3', 3 "ddU); 1.69 (s, 3H, CH3 dT); 2.78 (t, 2H,
MTrOCH2CH2, J = 6.3 Hz); 2.88 (t, 2H, POCH 2 CH 2, J = 5.8
Hz); 3.21 (t, 2H, MTrOCH 2 CH 2, J = 5.7 Hz); 3.67-4.17 (m,
8H, H-4 ', 5', 5 "dT, H-4 ', 5', 5 '' ddU, POCH 2 CH 2); 3.72 (s,
6H, 2CH3O Tr); 4.20 (m, 1H, H-3 'dT); 5.53 (d, 1H, H-5
ddU, J = 8.1 Hz); 5.95 (dd, 1H, H-1, ddU, J = 3.8 and 6.7
Hz); 6.19 (dd, 1H, H-1 'dT, J = 6.4 and 8.7 Hz);
6.85-6.43 (m, 28H, 2Tr); 6.44 (s, 1H, H-6 dT); 5.57 and
5.59 (d and d, 1H, H-6 ddU, J = 8.1 and 8.1 Hz); 11.3 (sl,
2H, 2NHCO) ppm
P NMR (DMSO-d6): δ = -0.662 and -0.722 ppm.

O-(2'-désoxythymidin-3'-yl) 0-(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) phosphate 23 (Composé 10)
Le composé protégé 11 (200 mg ; 0,254 mmol.) est traité par 30 ml/mmol. d'un mélange acide acétique, eau (8:2) pendant 3 h. Le solvant est évaporé. Après coévaporation avec de l'eau, le brut obtenu est dissous dans l'eau, lavé avec du
CH2Cl2 et concentré sous pression réduite. La purification est réalisée par chromatographie semi-préparative sur couche mince de silice (éluant isopropanol, ammoniac, eau (8:1:1).O- (2'-deoxythymidin-3'-yl) O- (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) phosphate 23 (Compound 10)
The protected compound 11 (200 mg, 0.254 mmol) is treated with 30 ml / mmol. a mixture of acetic acid and water (8: 2) for 3 hours. The solvent is evaporated. After coevaporation with water, the crude obtained is dissolved in water, washed with
CH2Cl2 and concentrated under reduced pressure. The purification is carried out by silica semi-preparative thin layer chromatography (eluent isopropanol, ammonia, water (8: 1: 1).

Le produit est extrait de la silice avec du MeOH et la solution filtrée sur filtre Millipore. Une lyophilisation dans l'eau donne 47 mg (35%) de 23.The product is extracted from the silica with MeOH and the solution filtered through a Millipore filter. Freeze-drying in water gives 47 mg (35%) of 23.

23 CLHP : TR 412s (98,1%) (8% CH3CN/AcONH4 0,1 M)
UV (H2O) : A max 263 nm (E 18700)
À min 232 nm (E 4200)
SM (FAB négatif GT) : 515 M
RMNiH (DMSO-d6) : 6 = 1,72-2,04 (m, 3H, H-2',3',3'' ddU) ;
1,76 (s, 3H, CH3 dT) ; 2,04-2,18 (m, 1H, H-2', dT)
2,18-2,33 (m, 2H, H-2ll ddU, H-2ll dT) ; 3,56 (m, 2H,
H-5',5'' dT) ; 3,78 (m, 2H, H-5',5'' ddU) ; 3,92 (dl, 1H,
H-4' dT, J = 2,8 Hz) ; 4,11 (m, 1H, H-4' ddU) ; 4,58 (m,
1H, H-3' dT) ; 5,48 (sl, 1H, OH, dT) ; 5,55 (d, 1H, H-5
ddU, J = 8,1 Hz) ; 5,94 (dd, 1H, H-1' ddU, J = 7,0 et 3,8
Hz) ; 6,12 (dd, 1H, H-11 dT, J = 6,1 et 7,7 Hz) ; 7,66
(s, 1H, H-6 dT) ; 7,95 (d, 1H, H-6 ddU, J = 8,1 Hz) ; 9,4
(sl, 2NHCO, NH) ppm
RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -1,346 ppm.HPLC: TR 412s (98.1%) (8% CH3CN / 0.1M AcONH4)
UV (H2O): λ max 263 nm (E 18700)
At min 232 nm (E 4200)
SM (FAB negative GT): 515M
1 H NMR (DMSO-d 6): δ = 1.72-2.04 (m, 3H, H-2 ', 3', 3 ''ddU);
1.76 (s, 3H, CH3 dT); 2.04-2.18 (m, 1H, H-2 ', dT)
2.18-2.33 (m, 2H, H-211 ddU, H-211 dT); 3.56 (m, 2H,
H-5 ', 5''dT); 3.78 (m, 2H, H-5 ', 5''ddU); 3.92 (dl, 1H,
H-4 'dT, J = 2.8 Hz); 4.11 (m, 1H, H-4 'ddU); 4.58 (m,
1H, H-3 'dT); 5.48 (ss, 1H, OH, dT); 5.55 (d, 1H, H-5
ddU, J = 8.1 Hz); 5.94 (dd, 1H, H-1 'ddU, J = 7.0 and 3.8
Hz); 6.12 (dd, 1H, H-11dT, J = 6.1 and 7.7 Hz); 7.66
(s, 1H, H-6 dT); 7.95 (d, 1H, H-6 ddU, J = 8.1 Hz); 9.4
(sl, 2NHCO, NH) ppm
31 P NMR (DMSO-d6): δ = -1.346 ppm.

O,O'-bis(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-(S-(2-hydroxyéthylsulfidyl) 2-thioéthyl) phosphate 24 (Composé 7)
La déprotection de 150 mg (0,168 mmol.) de 19 par l'acide acétique a été réalisée de manière analogue à celle décrite lors de la synthèse de 23. Une chromatographie sur colonne de silice (éluant : MeOH (0-10%) dans CH2Cl2) suivie d'une purification par CLHP semi-préparative (colonne Nucléosil C78 éluant : 20% CH3CN/H2O) conduit à 45 mg (43%) de 24 après lyophilisation dans le mélange eau/dioxanne.O, O'-bis (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) O- (S- (2-hydroxyethylsulfidyl) 2-thioethyl) phosphate 24 (Compound 7)
Deprotection of 150 mg (0.168 mmol) of 19 with acetic acid was carried out analogously to that described in the synthesis of 23. Column chromatography on silica (eluent: MeOH (0-10%) in CH2Cl2) followed by purification by semi-preparative HPLC (Nucleosil C78 eluent column: 20% CH3CN / H2O) gives 45 mg (43%) of 24 after lyophilization in the water / dioxane mixture.

24 CLHP : TR = 372s (99,1%) (20% CH3CN/AcONH4 0,1 M)
UV (H2O) : X max 262 nm (E 18500)
À min 231 nm (E 4400)
SM (FAB positif, GT ou NBA) : 623 (M+H) +
RMNH (DMSO-d6) : # = 1,70-2,12 (m, 6H, 2H-2';7,3',3'')
2,18-2,40 (m, 2H, 2H-2ll) ; 2,79 (t, 2H, CHzCH2OH, J = 6,3
Hz), ; 2,98 (t, 2H, CH2CH20P, J = 6,3 Hz) ; 3,60 (m, 2H,
CH2CH2OH) ; 4,05-4,20 (m, 8H, 2H-4l,5',5'', CH2CH2OP) ;
4,91 (t, 1H, OH, J = 5,4 Hz) ; 5,59 (d, 2H, 2H-5, J = 8,0
Hz) ; 6,01 (m, 2H, H-1') ; 7,65 (d, 2H, 2H-6, J = 8,1
Hz), 11,3 (sl, 2H, 2NHCO) ppm.HPLC: TR = 372s (99.1%) (20% CH3CN / 0.1M AcONH4)
UV (H2O): max X 262 nm (E 18500)
At 231 nm (E 4400)
MS (Positive FAB, GT or NBA): 623 (M + H) +
NMR (DMSO-d6): # = 1.70-2.12 (m, 6H, 2H-2 ', 7.3', 3 '')
2.18-2.40 (m, 2H, 2H-2ll); 2.79 (t, 2H, CH 2 CH 2 OH, J = 6.3
Hz),; 2.98 (t, 2H, CH 2 CH 2 O, J = 6.3 Hz); 3.60 (m, 2H,
CH 2 CH 2 OH); 4.05-4.20 (m, 8H, 2H-41, 5 ', 5'',CH2CH2OP);
4.91 (t, 1H, OH, J = 5.4 Hz); 5.59 (d, 2H, 2H-5, J = 8.0
Hz); 6.01 (m, 2H, H-1 '); 7.65 (d, 2H, 2H-6, J = 8.1
Hz), 11.3 (sl, 2H, 2NHCO) ppm.

RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -0,582 ppm
O-(2'-désoxythymidin-3'-yl) O-(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) o-(s-(2-hydroxyéthylsulfidyl) 2-thioéthyl) phosphate 25 (Composé 73)
Le traitement de 290 mg (0,240 mmol.) de 20 par l'acide acétique selon le mode opératoire décrit précédemment lors de la synthèse de 23 conduit, après purification par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-10%) dans CH2Cl2) et lyophilisation dans le mélange eau/dioxanne, à 80 mg (51%) de 25.NMR31P (DMSO-d6): δ = -0.582 ppm
O- (2'-deoxythymidin-3'-yl) O- (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) o- (s- (2-hydroxyethylsulfidyl) 2-thioethyl) phosphate (Compound 73)
The treatment of 290 mg (0.240 mmol) of 20 with acetic acid according to the procedure described above during the synthesis of 23 ducts, after purification by column chromatography on silica gel (eluent: MeOH (0-10% in CH2Cl2) and lyophilization in water / dioxane at 80 mg (51%) of 25.

25 CtHP : TR = 584s (52,4%) et 640s (46,1%) (18%
CH3CN/AcONH4 0,1 M)
UV (H2O) : À max 263 nm (E 18300)
À min 232 nm (E 4300)
SM : (FAB positif, GT) : 653 (M+H)+, 577 (M-SCH2CH2O +
(FAB positif NBA) 653 (M+H) +
RMN H (DMSO-d6) : ô = 1,73-1,91 (m, 1H, H-3' ddU) ; 1,77
(s, 3H, CH3 dT) ; 1,91-2,12 (m, 2H, H-2',3'' ddU)
2,22-2,47 (m, 3H, H-2' ddU, H-2',2" dT) ; 2,801 et 2,807
(t et t, 2H, SCH2CH2OH, J = 6,38 et 6,37 Hz) ; 3,00 (t,
2H, SCH2CH2OP, J = 6,2 Hz) ; 3,55-3,70 (m, 4H, H-5',5"
dT, OCH2CH2OH) ; 4,07 (m, 1H, H-4' dT) ; 4,11-4,34 (m, 5H,
H-4';5';5'' ddU, SCH2COP) ; 4,88 (sl, 1H, OH) ; 4,96
(tl, 1H, H-3' dT, J = 5,8 Hz) ; 5,61 (d, 1H, H-5 ddU, J =
8,1 Hz) ; 6,01 (dd, 1H, H-1' ddU, J = 6,8 et 4,2 Hz)
6,19 (dd, 1H, H-1 dT, J = 6,3 et 8,0 Hz) ; 7,65 (d, 1H,
H-6 ddU, J = 8,1 Hz) ; 7,68 (s, 1H, H-6 dT) ; 11,3 (sl,
2H, 2HNCO) ppm
RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -1,658 et -1,687 ppm.25 CtHP: TR = 584s (52.4%) and 640s (46.1%) (18%
0.1M CH3CN / AcONH4)
UV (H2O): At max 263 nm (E 18300)
At min 232 nm (E 4300)
MS: (FAB positive, GT): 653 (M + H) +, 577 (M-SCH2CH2O +
(FAB positive NBA) 653 (M + H) +
1 H NMR (DMSO-d6): δ = 1.73-1.91 (m, 1H, H-3 'ddU); 1.77
(s, 3H, CH3 dT); 1.91-2.12 (m, 2H, H-2 ', 3''ddU)
2.22-2.47 (m, 3H, H-2 'ddU, H-2', 2 "dT), 2.801 and 2.807
(t and t, 2H, SCH 2 CH 2 OH, J = 6.38 and 6.37 Hz); 3.00 (t,
2H, SCH2CH2OP, J = 6.2 Hz); 3.55-3.70 (m, 4H, H-5 ', 5 "
dT, OCH2CH2OH); 4.07 (m, 1H, H-4 'dT); 4.11-4.34 (m, 5H,
H-4 ';5''ddU,SCH2COP); 4.88 (ss, 1H, OH); 4.96
(tl, 1H, H-3 'dT, J = 5.8 Hz); 5.61 (d, 1H, H-5 ddU, J =
8.1 Hz); 6.01 (dd, 1H, H-1, ddU, J = 6.8 and 4.2 Hz)
6.19 (dd, 1H, H-1dT, J = 6.3 and 8.0 Hz); 7.65 (d, 1H,
H-6 ddU, J = 8.1 Hz); 7.68 (s, 1H, H-6 dT); 11.3 (sl,
2H, 2HNCO) ppm
31 P NMR (DMSO-d6): δ = -1.658 and -1.687 ppm.

O- (2 '-désoxythymidin-3 '-yl) O-(2',3'-didesoxyuridin-5'-yl)
O-(S-pivaloyl 2-thioéthyl) phosphate 26 (Composé 12)
La déprotection de 21 (164 mg ; 0,176 mmol.) selon le mode opératoire décrit lors de la synthèse de 23 conduit à 50 mg (43%) de 26 après chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-6%) dans CH2Cl2) et lyophilisation dans le mélange eau/dioxanne.O- (2'-deoxythymidin-3'-yl) O- (2 ', 3'-didesoxyuridin-5'-yl)
O- (S-pivaloyl 2-thioethyl) phosphate 26 (Compound 12)
Deprotection of 21 (164 mg, 0.176 mmol) according to the procedure described during the synthesis of 23 leads to 50 mg (43%) of 26 after chromatography on a column of silica gel (eluent: MeOH (0-6% ) in CH2Cl2) and lyophilization in the water / dioxane mixture.

26 CtHP : TR = 520s (59,9%) et 612s (40,1%) (30% CH3CN/AcONH4
0,1 M)
UV (H2O) : A max 262 nm (E 18300)
À min 233 nm (E 7200)
SM (FAB positif, GT) : 661 (M+H) , 577 (M-(CH3)3CCO+H)
127 (TH2)+, 113 (UH2)+
RMN1H (DMSO-d6) : 1,18 (s, 9H, (CH3)3C) ; 1,72-1,93 (m, 1H,
H-3' ddU) ; 1,79 (s, 3H, CH3 dT) ; 1,93-2,15 (m, 2H,
H-2',3'' ddU) ; 2,22-2,48 (m, 3H, H-2'' ddU, H-2',2''
dT) ; 3,14 (t, 2H, CH2S, J = 6,3 Hz) ; 3,62 (m, 2H,
H-5',5'' dT) ; 4,03-4,18 (m, 3H, H-4' dT, SCH2CH2) ;
4,18-4,32 (m, 3H, H-4',5',5'' ddU) ; 4,97 (m, 1H, H-3'
dT) ; 5,26 (sl, 1H, OH dT) ; 5,62 (d, 1H, H-5 ddU, J =
8,1 Hz) ; 6,02 (dd, 1H, H-1' ddU, J = 6,8 et 6,1 Hz)
6,20 (dd, 1H, H-1' dT, H = 6,3 et 8,0 Hz) ; 7,67 (d, 1H,
H-6 ddU, J = 8,1 Hz) ; 7,70 (s, 1H, H-6 dT) ; 11,4 (sl,
2H, 2NHCO) ppm
RMN37P (DMSO-d6) : 6 = -1,817 et -1,764 ppm.26 CtHP: TR = 520s (59.9%) and 612s (40.1%) (30% CH3CN / AcONH4
0.1 M)
UV (H2O): A max 262 nm (E 18300)
At min 233 nm (E 7200)
MS (FAB positive, GT): 661 (M + H), 577 (M- (CH3) 3CCO + H)
127 (TH2) +, 113 (UH2) +
1 H NMR (DMSO-d 6): 1.18 (s, 9H, (CH 3) 3 C); 1.72-1.93 (m, 1H,
H-3 'ddU); 1.79 (s, 3H, CH3 dT); 1.93-2.15 (m, 2H,
H-2 ', 3''ddU); 2.22-2.48 (m, 3H, H-2 '' ddU, H-2 ', 2''
dT); 3.14 (t, 2H, CH 2 S, J = 6.3 Hz); 3.62 (m, 2H,
H-5 ', 5''dT); 4.03-4.18 (m, 3H, H-4 'dT, SCH2CH2);
4.18-4.32 (m, 3H, H-4 ', 5', 5 ''ddU); 4.97 (m, 1H, H-3 '
dT); 5.26 (sl, 1H, OH dT); 5.62 (d, 1H, H-5 ddU, J =
8.1 Hz); 6.02 (dd, 1H, H-1, ddU, J = 6.8 and 6.1 Hz)
6.20 (dd, 1H, H-1 'dT, H = 6.3 and 8.0 Hz); 7.67 (d, 1H,
H-6 ddU, J = 8.1 Hz); 7.70 (s, 1H, H-6 dT); 11.4 (sl,
2H, 2NHCO) ppm
NMR37P (DMSO-d6): δ = -1.817 and -1.764 ppm.

0-(2' -Désoxythymidin-Ei '-yl) 0-(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-(S-(2-hydroxyéthylsulfidyl) 2-thioéthyl) phosphate 27 (Composé 14)
La déprotection a été réalisée de façon analogue à celle utilisée lors de la synthèse de 23. Ainsi, 298 mg (0,249 mmol.) de 22 conduisent à 85 mg (53%) de 27 après purification par chromatographie sur colonne de silice (éluant : MeOH (0-10%) dans CH2Cl2).0- (2'-Deoxythymidin-E1-yl) O- (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) O- (S- (2-hydroxyethylsulfidyl) 2-thioethyl) phosphate 27 (Compound 14)
The deprotection was carried out in a manner analogous to that used during the synthesis of 23. Thus, 298 mg (0.249 mmol) of 22 give 85 mg (53%) of 27 after purification by chromatography on a silica column (eluent: MeOH (0-10%) in CH2Cl2).

27 CLHP : TR = 560s (99,7%) (18% CH3CN/AcONH4 0,1 M)
UV (H2O) : X max 262 nm (E 18300)
À min 232 nm (E 3700)
SM (FAB positif, GT) : 653 ((M+H)+, 577 (M-OCH2CH2S+H)
RMN H (DMSO-d6) : # = 1,70-2,22 (m, 5H, H-2',3',3" ddU,
H-2',2'' dT) ; 1,78 (s, 3H, CH3 dT) ; 2,22-2,43 (m, 1H,
H-2'' ddU) ; 2,79 (t, 2H, HOCH2CH,, J = 6,3 Hz) ; 2,98 (t,
2H, POCH2CH2, J = 6,2 Hz) ; 3,63 (m, 2H, HOCH2CH2) ; 3,92
(m, 1H, H-4' dT) ; 4,08-4,33 (m, 8H, H-3',5',5'' dT,
H-4',5',5'' ddU, POCH2CH2) ; 4,90 (t, 1H, HOCH2CH2, J = 5,4
Hz) ; 5,46 (d, 1H, OH dT, J = 4,1 Hz) ; 5,59 (d, 1H, H-5
ddU, J = 7,9 Hz) ; 5,99 (m, 1H, H-1' ddU) ; 6,21 (t, 1H,
H-1' dT, J = 6,9 Hz) ; 7,48 (s, 1H, H-6, dT) ; 7,64 (d,
1H, H-6 ddU, J = 8,1 Hz) ; 11,3 (sl, 2H, 2NHCO, ddU dT) ppm
RMN37P (DMSO-d6) : 6 = -0,543. HPLC: TR = 560s (99.7%) (18% CH3CN / 0.1M AcONH4)
UV (H2O): max X 262 nm (E 18300)
At min 232 nm (E 3700)
MS (FAB positive, GT): 653 ((M + H) +, 577 (M-OCH2CH2S + H)
1 H NMR (DMSO-d6): # = 1.70-2.22 (m, 5H, H-2 ', 3', 3 "ddU,
H-2 ', 2 "dT); 1.78 (s, 3H, CH3 dT); 2.22-2.43 (m, 1H,
H-2 ''ddU); 2.79 (t, 2H, HOCH 2 CH 2, J = 6.3 Hz); 2.98 (t,
2H, POCH2CH2, J = 6.2 Hz); 3.63 (m, 2H, HOCH 2 CH 2); 3.92
(m, 1H, H-4 'dT); 4.08-4.33 (m, 8H, H-3 ', 5', 5 '' dT,
H-4 ', 5', 5 '' ddU, POCH2CH2); 4.90 (t, 1H, HOCH2CH2, J = 5.4
Hz); 5.46 (d, 1H, OH dT, J = 4.1 Hz); 5.59 (d, 1H, H-5
ddU, J = 7.9 Hz); 5.99 (m, 1H, H-1 'ddU); 6.21 (t, 1H,
H-1 'dT, J = 6.9 Hz); 7.48 (s, 1H, H-6, dT); 7.64 (d,
1H, H-6 ddU, J = 8.1 Hz); 11.3 (sl, 2H, 2NHCO, ddU dT) ppm
NMR βP (DMSO-d6): δ = -0.543.

RMN31P (DMSO-d6) : 6 = -0,543. 31 P NMR (DMSO-d 6): δ = -0.543.

0,0'-bis(2',3'-didésoxyuridin-5'-yl) O-pivaloyloxyméthyl phosphate 28 (Composé 3)
Le dimère phosphodiester 10 est mis sous forme de sodium par échange sur une colonne DOWEX W50 Na et est ensuite lyophilisé. Une suspension de 200 mg (394 mol.) du produit pulvérulent obtenu dans 10 ml d'acétonitrile est mise en réaction avec 940 mg (3,88 mmol.) d'iodure de pivaloyloxyméthyle à reflux. Après 15', le reflux est arrêté et le milieu réactionnel est dilué avec une solution de bicarbonate de triéthylammonium.Le solvant est évaporé et le brut purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-5%) dans CH2Cl2) puis sur colonne de silice silanisée RP2 (éluant : EtOH (0-30%) dans l'eau) pour conduire 45 mg (19 ) du composé 28 après filtration sur filtre Millipore et lyophilisation dans le mélange eau/dioxanne.0,0'-bis (2 ', 3'-dideoxyuridin-5'-yl) O-pivaloyloxymethyl phosphate 28 (Compound 3)
The phosphodiester dimer is converted to sodium form by exchange on a DOWEX W50 Na column and is then lyophilized. A suspension of 200 mg (394 mol) of the pulverulent product obtained in 10 ml of acetonitrile is reacted with 940 mg (3.88 mmol) of pivaloyloxymethyl iodide under reflux. After 15 ', the reflux is stopped and the reaction medium is diluted with a solution of triethylammonium bicarbonate.The solvent is evaporated and the crude purified by column chromatography on silica gel (eluent: MeOH (0-5%) in CH2Cl2 ) and then on a column of silanized silica RP2 (eluent: EtOH (0-30%) in water) to give 45 mg (19) of compound 28 after filtering Millipore filter and lyophilization in the water / dioxane mixture.

28 CLHP : TR = 600s (98,5%) (25% CH3CN/AcONH4 0,1 M)
UV (H2O) : X max 261 nm (E 17900)
À min 231 nm (E 3800)
SM (FAB positif, GT) 601 (M+H)+, 113 (BH2)+
RMNH (DMSO-d6) : ô = 1,00 (s, 9H, (CH3)3C) ; 1,62-1,82 (m,
2H, 2H-3') ; 1,82-2,02 (m, 4H, 2H-2',-3'') ; 2,11-2,30
(m, 2H, 2H-2'') ; 4,01-4,20 (m,-6H, 2H-4',5',5'') ; 5,44
(d, 2H, 2H-5, J = 7,8 Hz), 5,45 (d, 2H, OCH2OP, J = 13,7
Hz) ; 5,85 (dd, 2H, 2H-1', J = 4,2 et 6,8 Hz) ; 7,49 (d,
2H, 2H-6, J = 8,1 Hz) ; 10,5 (sl, 2H, 2NHCO) ppm
RMN P (DMSO-d6) 6 = -1,822 ppm.HPLC: RT = 600s (98.5%) (25% CH3CN / AcONH4 0.1M)
UV (H2O): max X 261 nm (E 17900)
At 231 nm (E 3800)
MS (Positive FAB, GT) 601 (M + H) +, 113 (BH2) +
NMR (DMSO-d6): δ = 1.00 (s, 9H, (CH3) 3C); 1.62-1.82 (m,
2H, 2H-3 '); 1.82-2.02 (m, 4H, 2H-2 ', -3''); 2.11 to 2.30
(m, 2H, 2H-2 ''); 4.01-4.20 (m, -6H, 2H-4 ', 5', 5 ''); 5.44
(d, 2H, 2H-5, J = 7.8 Hz), 5.45 (d, 2H, OCH 2 OP, J = 13.7
Hz); 5.85 (dd, 2H, 2H-1 ', J = 4.2 and 6.8 Hz); 7.49 (d,
2H, 2H-6, J = 8.1 Hz); 10.5 (sl, 2H, 2NHCO) ppm
1H NMR (DMSO-d6) δ = -1.822 ppm.

0-(2' -désoxythymidin-3 '-yl) 0-(2',3' idésoyuridin- '-yl) O-pivaloyloxyméthyl phosphate 29 (Composé il)
Le diester 11 est mis sous forme sodium par passage sur une colonne DOWEX W50 Na et est lyophilisé dans l'eau. Le produit pulvérulent obtenu (308 mg, 0,380 mmol.) est mis en suspension dans 10 ml d'acétonitrile et est traité avec 946 mg (0,888 mmol.) d'iodure de pivaloyloxyméthyle. Après 2 h, la réaction est achevée (détritylation partielle du produit d'arrivé). Du MeOH (1 ml) est ajouté et après 15' (détritylation totale) le solvant est évaporé. Le brut est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice (éluant : MeOH (0-12%) dans CH2Cl2 puis sur colonne de silice silanisée RP2 (éluant : EtOH (0-40%) dans l'eau).Le composé 29 (87 mg, 36%) est isolé après filtration sur filtre Millipore et lyophilisation dans le mélange eau/dioxanne.0- (2'-deoxythymidin-3'-yl) O- (2 ', 3' idesoyuridin-1-yl) O-pivaloyloxymethyl phosphate 29 (Compound II)
The diester 11 is put in sodium form by passing through a DOWEX W50 Na column and is freeze-dried in water. The pulverulent product obtained (308 mg, 0.380 mmol) is suspended in 10 ml of acetonitrile and treated with 946 mg (0.888 mmol) of pivaloyloxymethyl iodide. After 2 hours, the reaction is complete (partial detrimentation of the product of arrival). MeOH (1 ml) is added and after 15 '(total detritylation) the solvent is evaporated. The crude is purified by chromatography on a column of silica gel (eluent: MeOH (0-12%) in CH 2 Cl 2 and then on a column of silanized silica RP 2 (eluent: EtOH (0-40%) in water). (87 mg, 36%) is isolated after filtration on Millipore filter and lyophilization in the water / dioxane mixture.

29 CLHP : TR = 428s (46,3%) et 484s (51,8%) (25% CH3CN/AcONH4
0,1 M)
UV (H2O) : X max 262 nm (E 18900)
À min 232 nm (E 5700) SM (FAB positif, GT) : 631 (M+H)+, 127 (TH2)+, 113 (UH2) +
RMN H (DMSO-d6) : 6=1,67(s, 9H, (CH3)3C), 1,74-1,90 (m,
1H, H-3' ddU) ; 1,77 (s, 3H, CH3 dT) ; 1,90-2,12 (m, 2H,
H-2',3' ddU) ; 2,23-2,45 (m, 3H, H-2' ddU, H-2',2'' dT)
3,60 (t, 2H, H-5',5'' dT, J = 4,3 Hz) ; 4,07 (m, 1H, H-4'
dT) ; 4,12-4,30 (m, 3H, H-4',5',S'' ddU) ; 4,97 (m, 1H,
H-3' dT) ; 5,25 (m, 1H, OH dT) ; 5,60 (d, 1H, H-5 ddU, J
= 7,9 Hz) ; 5,627 et 6,631 (d et d, 2H, OCH2OP, J = 12,7
et 12,2 Hz) ; 6,00 (m, 1H, H-1' ddU) ; 6,19 (m, 1H, H-1'
dT) ; 7,63 et 7,65 (d et d, 1H, H-6 ddU, J = 8,2 et 8,2
Hz) ; 7,68 (s, 1H, H-6 dT) ; 11,3 (sl, 2H, 2NHCO) ppm
RMN37P (DMSO-d6) : ô = -2,894 et -2,938. HPLC: TR = 428s (46.3%) and 484s (51.8%) (25% CH3CN / AcONH4)
0.1 M)
UV (H2O): max X 262 nm (E 18900)
At min 232 nm (E 5700) MS (FAB positive, GT): 631 (M + H) +, 127 (TH2) +, 113 (UH2) +
1 H NMR (DMSO-d 6): δ = 1.67 (s, 9H, (CH 3) 3 C), 1.74-1.90 (m,
1H, H-3 'ddU); 1.77 (s, 3H, CH3 dT); 1.90-2.12 (m, 2H,
H-2 ', 3'ddU); 2.23-2.45 (m, 3H, H-2 'ddU, H-2', 2 '' dT)
3.60 (t, 2H, H-5 ', 5''dT, J = 4.3 Hz); 4.07 (m, 1H, H-4 '
dT); 4.12-4.30 (m, 3H, H-4 ', 5', S ''ddU); 4.97 (m, 1H,
H-3 'dT); 5.25 (m, 1H, OH dT); 5.60 (d, 1H, H-5 ddU, J
= 7.9 Hz); 5.627 and 6.631 (d and d, 2H, OCH2OP, J = 12.7
and 12.2 Hz); 6.00 (m, 1H, H-1 'ddU); 6.19 (m, 1H, H-1)
dT); 7.63 and 7.65 (d and d, 1H, H-6 ddU, J = 8.2 and 8.2
Hz); 7.68 (s, 1H, H-6 dT); 11.3 (sl, 2H, 2NHCO) ppm
NMR 37 P (DMSO-d6): δ = -2.894 and -2.938.

Tableau

Board

<tb> Composé <SEP> R'1 <SEP> R'2
<tb> <SEP> 1 <SEP> ddU <SEP> cation
<tb> <SEP> 2 <SEP> ddU <SEP> -CH3
<tb> <SEP> 3 <SEP> ddU <SEP> -CH2O-CO-C(CH3)3
<tb> <SEP> 4 <SEP> ddu <SEP> -CH2CH2OCH3
<tb> <SEP> 5 <SEP> ddU <SEP> -CH2CH2CN
<tb> <SEP> 6 <SEP> ddU <SEP> -CH2CH2S-CO-C(CH3)3
<tb> <SEP> 7 <SEP> ddU <SEP> -CH2CH2S-SCH2CH2OH
<tb> <SEP> 8 <SEP> ddU <SEP> -cH2cH2-NH-c <SEP> < <SEP> No2
<tb> <SEP> sCOOEt
<tb> <SEP> 9 <SEP> ddU <SEP> NH-COOCH2 <SEP> O
<tb> <SEP> 10 <SEP> 3'-dT <SEP> cation
<tb> <SEP> 11 <SEP> 3'-dT <SEP> -cH2o-co-c(CH3)3
<tb> <SEP> 12 <SEP> 3'-dT <SEP> -CH2CH2S-CO-C(CH3)3
<tb> <SEP> 13 <SEP> 3'-dT <SEP> -CH2CH2S-SCH2CH2OH
<tb> <SEP> 14 <SEP> 5'-dT <SEP> -CH2CH2S-SCH2CH2OH
<tb>
Les composés de l'invention ont été soumis à des essais pharmacologiques montrant leur intérêt dans le traitement de maladies virales.<tb> Compound <SEP>R'1<SEP>R'2
<tb><SEP> 1 <SEP> ddU <SEP> cation
<tb><SEP> 2 <SEP> ddU <SEP> -CH3
<tb><SEP> 3 <SEP> ddU <SEP> -CH2O-CO-C (CH3) 3
<tb><SEP> 4 <SEP> ddu <SEP> -CH2CH2OCH3
<tb><SEP> 5 <SEP> ddU <SEP> -CH2CH2CN
<tb><SEP> 6 <SEP> ddU <SEP> -CH2CH2S-CO-C (CH3) 3
<tb><SEP> 7 <SEP> ddU <SEP> -CH2CH2S-SCH2CH2OH
<tb><SEP> 8 <SEP> ddU <SEP> -cH2cH2-NH-c <SEP><<SEP> No2
<tb><SEP> sCOOEt
<tb><SEP> 9 <SEP> ddU <SEP> NH-COOCH2 <SEP> O
<tb><SEP> 10 <SEP>3'-dT<SEP> cation
<tb><SEP> 11 <SEP>3'-dT<SEP> -cH2o-co-c (CH3) 3
<tb><SEP> 12 <SEP>3'-dT<SEP> -CH2CH2S-CO-C (CH3) 3
<tb><SEP> 13 <SEP>3'-dT<SEP> -CH2CH2S-SCH2CH2OH
<tb><SEP> 14 <SEP>5'-dT<SEP> -CH2CH2S-SCH2CH2OH
<Tb>
The compounds of the invention have been subjected to pharmacological tests showing their interest in the treatment of viral diseases.

- Evaluation de l'activité anti-VIH 1 sur les cellules CEM
VIH = virus de l'immunodéficience humaine
CEM = celiule lymphoblastoïde T humaine.- Evaluation of anti-HIV activity on EMC cells
HIV = human immunodeficiency virus
EMC = human lymphoblastoid T cell.

La réplication du VIH-1 (isolat LAI) dans les cellules CEM est mesurée par un dosage de la réverse transcriptase (RTase) dans le surnageant de culture après 5 jours d'infection.Replication of HIV-1 (LAI isolate) in CEM cells is measured by assay of reverse transcriptase (RTase) in the culture supernatant after 5 days of infection.

Cette activité traduit la présence de virus libéré par les cellules. Après l'adsorption du virus, les composés testés sont ajoutés à différentes concentrations dans le milieu de culture.This activity reflects the presence of virus released by the cells. After the adsorption of the virus, the compounds tested are added at different concentrations in the culture medium.

L'activité antivirale est exprimée par la concentration la plus faible de composé qui diminue la production de RTase d'au moins 50 % (ED50). The antiviral activity is expressed as the lowest concentration of compound that decreases RTase production by at least 50% (ED50).

L'effet toxique sur les CEM non infectées est apprécié par une réaction colorimétrique basée sur la capacité des cellules vivantes à réduire le bromure de 3-(4,5 diméthylthiazol-2-yl)-2,5 diphényltetrazolium en formazan après 5 jours d'incubation en présence de différentes concentrations des composés. Les résultats sont exprimés par la concentration la plus faible de composé qui provoque une inhibition d'au moins 50 % de la formation de formazan (CD50). The toxic effect on uninfected EMF is assessed by a colorimetric reaction based on the ability of living cells to reduce the bromide of 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium to formazan after 5 days. incubation in the presence of different concentrations of the compounds. The results are expressed as the lowest concentration of compound that causes at least 50% inhibition of formazan formation (CD50).

Les composés de l'invention ont une ED50 allant de 10 M à 10 M pour une CD50 de 10 M à 10 M. The compounds of the invention have an ED 50 ranging from 10 M to 10 M for a CD50 of 10 M to 10 M.

Annexe 1

Annex 1

Annexe 2

6 R : 5'-ddU 5 R : 5'-ddU 10 R1 : 5'-ddU 8 3'-dTMTr 7 3'dTMRTr 11 3'-dTMTr 4 5'-dTMTr 9 5'-dTMTr 12 5'-dTMTr

13 R : 5'-ddU R : CH3 14 5'-ddU CH2CH2OCH3 15 5'-ddU CH2CH2CN 16 5'-ddU CH2CH2SCOC(CH3)3 17 5'-ddU CH2CH2NHCOPhNO2 18 5'-ddU CH2CH(COOEt)NHCOOCH2Ph 19 5'ddU CH2CH2SSCH2Ch2OMTr 20 3'-dTMTr CH2CH2SSCH2CH2OMTr 21 3'-dTMTr CH2CH2SCOC(CH3)3 22 5'-dTMTr CH2CH2SSCH2CH2OMTr

Annex 2

6 R: 5'-ddU 5 R: 5'-ddU 10 R1: 5'-ddU 8 3'-dTMTr 7 3'dTMRTr 11 3'-dTMTr 4 5'-dTMTr 9 5'-dTMTr 12 5'-dTMTr

R: CH 3 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 CNO 5 '-ddU CH 2 CH 2 SCOC (CH 3) 3 17 5'-ddU CH 2 CH 2 NHHCOPhNO 2 18 5'-ddU CH 2 CH (COOEt) NHCOOCH 2 Ph 19 ## STR2 ##

Annexe 2 (suite)

19 20 21 22

24 R3 : 5'-ddU R2 : CH2CH2SSCH2CH2OH 25 3'-dT CH2CH2SSCH2CH2OH 26 3'-dT CH2CH2SCOC(CH2)3 27 5'-dT CH2CH2SSCH2CH2OH

Annex 2 (continued)

19 20 21 22

R3: 5'-ddU R2: CH2CH2SSCH2CH2OH 3'-dT CH2CH2SSCH2CH2OH 26'-dT CH2CH2SCOC (CH2) 3 5'-dT CH2CH2SSCH2CH2OH

Claims

the formulas of the units -O-ddU -0-3'-dT and -0-5'-dT being the following respectively

R'2 is a cation, the methyl radical, the radical -CH2O-CO C (CH3) 3, -CH2CH2OCH3, -CH2CH2CN, -CH2CH2S-CO-C C (CH3) 3 -CH2CH2S-S CH2CH2OH,

R'1 is 5'-ddU, 3'-dT or 5'-dT,

in which

Claims 1. Derivatives of the ddU answering the formula

2. Medicinal product characterized in that it contains a compound according to claim 1.

3. Pharmaceutical composition characterized in that it contains a compound according to claim 1 in combination with any suitable excipient.