FR2651436A1 - Pharmaceutical compositions containing a soluble substituted dextran derivative - Google Patents
Pharmaceutical compositions containing a soluble substituted dextran derivative Download PDFInfo
- Publication number
- FR2651436A1 FR2651436A1 FR8911605A FR8911605A FR2651436A1 FR 2651436 A1 FR2651436 A1 FR 2651436A1 FR 8911605 A FR8911605 A FR 8911605A FR 8911605 A FR8911605 A FR 8911605A FR 2651436 A1 FR2651436 A1 FR 2651436A1
- Authority
- FR
- France
- Prior art keywords
- units
- sep
- approximately
- dextran
- soluble substituted
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
Abstract
Description
L'invention concerne des compositions pharmaceutiques contenant à titre de principe actif un dérivé substitué soluble de dextrane à activité inhibitrice de la prolifération des cellules musculaires lisses, utiles pour la prévention et le traitement des maladies impliquant la prolifération des cellules musculaires lisses. The invention relates to pharmaceutical compositions containing as an active principle a soluble substituted derivative of dextran with inhibitory activity on the proliferation of smooth muscle cells, useful for the prevention and treatment of diseases involving the proliferation of smooth muscle cells.
Le dextrane est un polyglucoside de poids moléculaire d'environ 5000 à plusieurs millions de daltons, formé d'unités glucosyle A, liées par des enchainements essentiellement 136, pouvant être représenté par la formule simplifiée ci-dessous
Pour les applications en thérapeutique, on utilise des- dextranes de poids moléculaire généralement inférieur à environ 100 000 daltons. For therapeutic applications, dextrans of molecular weight generally less than about 100,000 daltons are used.
Ce produit est utilisé, notamment, comme substitut du plasma sanguin ou du moins comme plasma expandeur, ou rétablisseur de volume. Ces utilisations peuvent entraîner cependant, dans certains cas, des chocs immunitaires. This product is used, in particular, as a blood plasma substitute or at least as an expander plasma, or volume restorer. These uses can, however, in some cases lead to immune shocks.
Des dérivés substitués solubles de dextrane sont décrits dans la demande EP 0146455. Ils sont constitués de motifs osidiques A, B, C, D diversement substitués par des groupements fonctionnels tels que dans la formule cidessous,
A B C D ce qui leur confère, en fonction des proportions respectives de ces différents motifs, des propriétés anticoagulantes et/ou anticomplémentaires permettant leur application en tant que substitut du plasma sanguin. A B C D which gives them, depending on the respective proportions of these different units, anticoagulant and / or anticomplementary properties allowing their application as a blood plasma substitute.
On a par ailleurs montré que certains polymères à caractère anionique tels que l'héparine possèdent des propriétés régulatrices dans de nombreux systèmes physiologiques. It has also been shown that certain polymers of anionic nature such as heparin have regulatory properties in numerous physiological systems.
En particulier l'héparine possède des propriétés fortement inhibitrices de la prolifération des cellules musculaires lisses vasculaires in vitro et in vivo (R.L. In particular heparin has strongly inhibiting properties of the proliferation of vascular smooth muscle cells in vitro and in vivo (R.L.
Hoover et al, 1980, Circ. Res., 47, 578-583 ; A. W. Clowes et al, 1985, Lab. Invest., 6, 611-616), ainsi que, par exemple, des propriétés inhibitrices de la prolifération des cellules mésangiales glomérulaires (J.J. Castellot et al, 1985, Am. J. Path., 120, 427-435). Hoover et al, 1980, Circ. Res., 47, 578-583; A. W. Clowes et al, 1985, Lab. Invest., 6, 611-616), as well as, for example, properties inhibiting the proliferation of glomerular mesangial cells (J.J. Castellot et al, 1985, Am. J. Path., 120, 427-435).
La prolifération des cellules musculaires lisses est une conséquence fréquente des lésions endothéliales et est impliquée dans des mécanismes pathologiques tels que l'athérosclérose, ainsi que dans les resténoses après des interventions de chirurgie vasculaire telles que les angioplasties, les pontages et greffes veineux et artériels, ou les transplantations d'organes, en particulier les transplantations cardiaques. The proliferation of smooth muscle cells is a frequent consequence of endothelial damage and is involved in pathological mechanisms such as atherosclerosis, as well as in restenosis after vascular surgery procedures such as angioplasties, venous and arterial bypass and grafts, or organ transplants, in particular heart transplants.
La prolifération des cellules mésangiales glomérulaires, cellules apparentées aux cellules musculaires lisses vasculaires, est impliquée dans des pathologies rénales telles que les glomérulonéphrites. The proliferation of glomerular mesangial cells, cells related to vascular smooth muscle cells, is implicated in renal pathologies such as glomerulonephritis.
Néanmoins, l'activité fortement anticoagulante de l'héparine limite son utilisation dans ces applications. However, the strong anticoagulant activity of heparin limits its use in these applications.
Cependant, les dérivés de l'héparine pratiquement dépourvus d'activité anticoagulante peuvent également posséder ces activités inhibitrices lorsqu'ils conservent un caractère fortement anionique et en particulier des groupements Nsulfate et O-sulfate (J.J. Castellot et al, 984, J. Cell.However, heparin derivatives practically devoid of anticoagulant activity can also possess these inhibitory activities when they retain a strongly anionic character and in particular Nsulfate and O-sulfate groups (J.J. Castellot et al, 984, J. Cell.
Physiol, 120, 315-320).Physiol, 120, 315-320).
I1 est donc de grand intérêt de posséder des produits possédant des activités inhibitrices du même ordre que celles de l'héparine tout en étant dépouvus d'activité anticoagulante. It is therefore of great interest to have products having inhibitory activities of the same order as those of heparin while being devoid of anticoagulant activity.
On a maintenant trouvé, de façon surprenante, que des dérivés substitués solubles de dextrane ne contenant que les motifs A, B et C ci-dessus, utilisés dans EP 146 455 comme intermédiaires de synthèse dans l'étape de sulfonation pour la formation du motif D, possèdent une forte activité inhibitrice de la prolifération des cellules musculaires lisses bien qu'ils ne contiennent pas de motifs osidiques substitués par des groupements sulfate ou sulfonate et qu'ils aient donc un caractère anionique moins prononcé que l'héparine ou ses dérivés à activité fortement inhibitrice. It has now been found, surprisingly, that soluble substituted derivatives of dextran containing only the units A, B and C above, used in EP 146 455 as synthetic intermediates in the sulfonation step for the formation of the unit D, have a strong inhibitory activity on the proliferation of smooth muscle cells although they do not contain osidic units substituted by sulphate or sulphonate groups and therefore have a less pronounced anionic character than heparin or its derivatives. strong inhibitory activity.
L'invention a donc pour but de fournir des compositions pharmaceutiques contenant, à titre de principe actif, un dérivé substitué soluble de dextrane ayant un poids moléculaire supérieur à environ 5000 daltons et possédant une activité inhibitrice de la prolifération des cellules musculaires lisses du même ordre que celle de l'héparine, tout en étant dépourvu d'activité anticoagulante. The aim of the invention is therefore to provide pharmaceutical compositions containing, as active principle, a soluble substituted derivative of dextran having a molecular weight greater than about 5000 daltons and having an inhibitory activity of the proliferation of smooth muscle cells of the same order. than that of heparin, while being devoid of anticoagulant activity.
Ces compositions pharmaceutiques sont notamment caractérisées en ce qu'elles contiennent, à titre de substance active, une quantité efficace d'un dérivé substitué soluble de dextrane ayant un poids moléculaire entre environ 5000 et environ 100 000 daltons et comprenant, de manière statistique: - au moins 20 -93 de motifs B constitués de motifs glucosidiques 1 -+ 6 éthérifiés par au moins un radical de structure -(CH2 )n-R-C00 dans laquelle
R représente une simple liaison ou un groupe -CO-NH-(CHz)m- n étant un nombre entier de l à 10, et m étant un nombre entier de 1 à 7.These pharmaceutical compositions are in particular characterized in that they contain, as active substance, an effective amount of a soluble substituted derivative of dextran having a molecular weight between approximately 5000 and approximately 100,000 daltons and comprising, in a statistical manner: - at least 20 -93 of units B consisting of glucosidic units 1 - + 6 etherified by at least one radical of structure - (CH2) nR-C00 in which
R represents a single bond or a group -CO-NH- (CHz) m- n being an integer from 1 to 10, and m being an integer from 1 to 7.
- au moins 5 % de motifs C constitués de motifs glucosidiques 1 -y 6 éthérifiés par au moins un radical de structure
dans laquelle R t représente une simple liaison ou un groupe -(CH2)p-, n ayant la signification donnée ci-dessus et p étant un nombre entier de 1 à 10 - le pourcentage de motifs C étant au moins égal à environ 50 % lorsque le pourcentage de motifs B est inférieur à environ 30 %, et étant au plus égal à environ 15 % lorsque le pourcentage de B est supérieur à 70 %, le pourcentage de motifs A non substitués pouvant etre égal à 0, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable
La fonctionnalisation du support dextrane à l'aide de chaînes de substitution définies ci-dessus confère de manière avantageuse à ce dernier une activité inhibitrice de la prolifération des cellules musculaires lisses, alors que son activité anticoagulante est pratiquement nulle. On observera que cet effet avantageux est obtenu par la présence simultanée d'une part de groupes carboxyle sur les motifs B, et d'autre part les groupes anilide ou benzylamide sur les motifs C, les proportions relatives de ces 2 types de motifs étant reliées entre elles : en effet, lorsque la proportion de motifs B décroit, notamment lorsqu'elle devient inférieure à environ 30 %, on obtient néanmoins l'effet avantageux en augmentant la proportion de motifs C, celle-ci étant au moins égale à environ 50 %.- at least 5% of C units consisting of 1 -y 6 glucosidic units etherified with at least one structural radical
in which R t represents a single bond or a group - (CH2) p-, n having the meaning given above and p being an integer from 1 to 10 - the percentage of units C being at least equal to approximately 50% when the percentage of units B is less than approximately 30%, and being at most equal to approximately 15% when the percentage of B is greater than 70%, the percentage of unsubstituted units A possibly being equal to 0, in combination with a pharmaceutically acceptable vehicle
The functionalization of the dextran support using substitution chains defined above advantageously confers on the latter an inhibitory activity on the proliferation of smooth muscle cells, while its anticoagulant activity is practically zero. It will be observed that this advantageous effect is obtained by the simultaneous presence on the one hand of carboxyl groups on the units B, and on the other hand the anilide or benzylamide groups on the units C, the relative proportions of these 2 types of units being linked. between them: in fact, when the proportion of units B decreases, in particular when it becomes less than approximately 30%, the advantageous effect is nevertheless obtained by increasing the proportion of units C, the latter being at least equal to approximately 50 %.
Inversement, lorsque le pourcentage de motifs B est supérieur à environ 70 %, on obtient l'effet antiprolifératif avec une proportion de motifs C au plus égale à environ 10 %. Conversely, when the percentage of units B is greater than approximately 70%, the antiproliferative effect is obtained with a proportion of units C at most equal to approximately 10%.
Des compositions pharmaceutiques préférées de l'invention sont celles dans lesquelles le dérivé substitué soluble de dextrane comprend des motifs B dans lequels la chaîne éthérifiante a la structure -(CH)n-C00~où n = 1, 2, 3, ou 4
D'autres compositions pharmaceutiques avantageuses sont caractérisées en ce que le dérivé substitué soluble de dextrane renferme des motifs C où la chaîne éthérifiante a la structure
Other advantageous pharmaceutical compositions are characterized in that the soluble substituted derivative of dextran contains C units where the etherifying chain has the structure
Le dérivé substitué soluble de dextrane constituant le principe actif des compositions de l'invention possède avantageusement un poids moléculaire supérieur à 5000 daltons, en particulier entre environ 40 000 et 100 000 daltons. The soluble substituted dextran derivative constituting the active principle of the compositions of the invention advantageously has a molecular weight greater than 5,000 daltons, in particular between approximately 40,000 and 100,000 daltons.
De manière avantageuse, les compositions pharmaceutiques de l'invention sont caractérisées en ce que le dérivé substitué soluble de dextrane comprend de 50 à 70% environ de motifs B et de 20 à 40 % environ de motifs C, et possède un poids moléculaire d'environ 40 000 daltons. Advantageously, the pharmaceutical compositions of the invention are characterized in that the soluble substituted derivative of dextran comprises from 50 to 70% approximately of units B and from 20 to 40% approximately of units C, and has a molecular weight of about 40,000 daltons.
D'autres compositions pharmaceutiques avantageuses sont celles dans lesquelles le dérivé substitué soluble de dextrane comprend de 20 à 30 % environ de motifs B et 40 à 60 % environ de motifs C, et possède un poids moléculaire d'environ 40 000 daltons. Other advantageous pharmaceutical compositions are those in which the soluble substituted derivative of dextran comprises about 20-30% B units and about 40-60% C units, and has a molecular weight of about 40,000 daltons.
Dans d'autres compositions préférées, le dérivé substitué soluble de dextrane comprend de 80 à 100 % environ de motifs B et de 5 à 15 % environ de motifs C, et possède un poids moléculaire d'environ 40 000 daltons
Dans les principes actifs préférés des compositions de la présente invention, les motifs B et C sont éthérifiés en position 2.In other preferred compositions, the soluble substituted derivative of dextran comprises from about 80 to 100% B units and from about 5 to 15% C units, and has a molecular weight of about 40,000 daltons.
In the preferred active ingredients of the compositions of the present invention, the units B and C are etherified in position 2.
Une catégorie particulièrement préférée de dérivés de dextrane constituant le principe actif des compositions pharmaceutiques de l'invention renferme les motifs A, B et
C suivants
C following
A B selon les proportions données ci-dessus. A B according to the proportions given above.
Pour préparer les dérivés substitués solubles de dextrane, on met en oeuvre une chaîne de dextrane formée de motifs A non substitués et on élabore successivement les motifs B et C, les motifs C étant préparés à partir des motifs B eux-mêmes préparés à partir des motifs A
L'élaboration de ces différents motifs sur la chaîne de dextrane est décrite dans le brevet EP 0146455 et comprend les étapes suivantes 1 - la réaction d'un dextrane avec un dérivé de formule X(CHz)n-R-COOH dans laquelle X représente un groupe réactif, tel qu'un halogénure, capable d'etablir une liaison d'éthérification avec un groupe -OH d'un motif glycosyle, ce qui conduit à la formation de motifs B.To prepare the soluble substituted dextran derivatives, a dextran chain formed of unsubstituted A units is used and the B and C units are produced successively, the C units being prepared from the B units themselves prepared from the units. patterns A
The development of these different units on the dextran chain is described in patent EP 0146455 and comprises the following steps 1 - the reaction of a dextran with a derivative of formula X (CHz) nR-COOH in which X represents a group reagent, such as a halide, capable of establishing an etherification bond with an -OH group of a glycosyl unit, which leads to the formation of B units.
2 - la réaction du dextrane renfermant les motifs A et B avec un dérivé de formule
dans laquelle Rt est tel que défini ci-dessus, afin d'obtenir la fixation par un pont amide du groupe phénylamino ou benzylamino au carboxyle du radical provenant des chaînes de substitution des motifs
B, ce qui permet la formation des motifs C.2 - the reaction of dextran containing the units A and B with a derivative of formula
in which Rt is as defined above, in order to obtain the attachment by an amide bridge of the phenylamino or benzylamino group to the carboxyl of the radical originating from the substitution chains of the units
B, which allows the formation of C patterns.
3 - le fractionnement éventuel des dérivés de dextrane afin d'éliminer les dérivés présentant un poids moléculaire inférieur à 5000.3 - the optional fractionation of dextran derivatives in order to eliminate the derivatives having a molecular weight of less than 5000.
La séparation des dextranes peut être effectuée en premier, suivie des étapes évoquées ci-dessus.The separation of the dextrans can be carried out first, followed by the steps mentioned above.
Les étapes 1 et 2 de formation des motifs B et C sont éventuellement répétées jusqu'à l'obtention du taux désiré de motifs sur la chaîne. Steps 1 and 2 for forming units B and C are optionally repeated until the desired level of units is obtained on the chain.
En répétant un certain nombre de fois une étape et en ajustant les conditions opératoires (durée, température), il est possible d'obtenir une substitution non seulement au niveau du carbone 2 des motifs A mais aussi au niveau du carbone 3, ce qui permet d'obtenir un taux de substitution supérieur à 100 %. By repeating a step a certain number of times and by adjusting the operating conditions (duration, temperature), it is possible to obtain a substitution not only at the level of carbon 2 of the A units but also at the level of carbon 3, which allows to obtain a substitution rate greater than 100%.
Dans l'étape 1, la réaction de glycosylation est effectuée en milieu basique dans des conditions permettant d'éviter la dégradation de la chaîne de dextrane sensible à l'hydrolyse. In step 1, the glycosylation reaction is carried out in a basic medium under conditions which make it possible to avoid degradation of the dextran chain sensitive to hydrolysis.
A cet égard, le mélange réactionnel basique renfermant le dextrane est porté à une température de l'ordre de OOC, ou inférieure, notamment de -40C à +50C. In this regard, the basic reaction mixture containing the dextran is brought to a temperature of the order of OOC, or lower, in particular from -40C to + 50C.
Après addition du dérivé réactif, le mélange est porté à une température supérieure à la température ambiante, pouvant atteindre 700C environ. After addition of the reactive derivative, the mixture is brought to a temperature above room temperature, which can reach approximately 700C.
De préférence, on procède selon un gradient de température, en faisant croître progressivement la température de l'ambiante à 550C environ. Le réglage de la température permet de faire varier le rendement de substitution pratiquement à volonté. I1 est ainsi possible d'obtenir aussi bien des taux d'unités B portant la fonction carboxylique de 40 à 60 % que des taux atteignant 80 % en une étape et pratiquement 100% en deux étapes et même les dépassant. Preferably, one proceeds according to a temperature gradient, gradually increasing the temperature from ambient to about 550C. By adjusting the temperature, the substitution efficiency can be varied practically at will. It is thus possible to obtain both levels of units B carrying the carboxylic function from 40 to 60% as well as levels reaching 80% in one step and practically 100% in two steps and even exceeding them.
Toute une gamme de produits répondant aux propriétés souhaitées est ainsi accessible. A whole range of products meeting the desired properties is thus accessible.
Cette modulation est de grand intérêt pour disposer de dérivés substitués solubles de dextrane dotés de propriétés inhibitrices de la prolifération des cellules musculaires lisses. This modulation is of great interest in order to have available substituted soluble dextran derivatives endowed with properties which inhibit the proliferation of smooth muscle cells.
Lorsque la chaîne R dans les motifs B représente un groupe -CO-NH-(CH2)m, on obtient avantageusement les produits à partir des motifs B substitués par une chaîne -O- (CH,) n-COO- par réaction avec les acides aminés correspondants. When the R chain in the B units represents a -CO-NH- (CH2) m group, the products are advantageously obtained from the B units substituted with an -O- (CH,) n-COO- chain by reaction with the corresponding amino acids.
L'étape d'élaboration des motifs C comprend le couplage des dérivés de formule NHz - R
avec la chaîne de substitution des motifs B. On utilise avantageusement un agent de couplage en milieu acide, à température ambiante.The step of preparing the C units comprises the coupling of the derivatives of formula NHz - R
with the substitution chain of the units B. Advantageously, a coupling agent is used in an acidic medium, at room temperature.
Il s'agit d'agents de couplage tels que ceux mentionnés dans l'ouvrage Réactifs IBF "Practical guide for use in affinity chromatography", 1979, p.34-37, notamment de la N-éthoxycarsonyl-2-éthoxy-1,2-dihydroquinoléine (EEDQ), les cabodiimides, notamment de dicyclohexylecarbodiimide (DDC), ou le N-isobutoxycarbonyl -2-isobutoxy- 1, 2-dihydroquinoléine (IIDQ). These are coupling agents such as those mentioned in the book Reagents IBF "Practical guide for use in affinity chromatography", 1979, p.34-37, in particular N-ethoxycarsonyl-2-ethoxy-1, 2-dihydroquinoline (EEDQ), cabodiimides, in particular dicyclohexylecarbodiimide (DDC), or N-isobutoxycarbonyl -2-isobutoxy- 1, 2-dihydroquinoline (IIDQ).
Après avoir repété les étapes de carboxyméthylation et d'amidation un nombre de fois permettant d'obtenir le taux de substitution désiré, le dérivé substitué soluble de dextrane ainsi obtenu est lavé, ultrafiltré et conservé sous forme lyophilisée. Le produit est analysé par aosage acidebase des fonctions méthylcarboxylique et par analyse élémentaire (teneur en azote, permettant de calculer le nombre de motifs substitués par la benzylamine). After repeating the steps of carboxymethylation and amidation a number of times making it possible to obtain the desired degree of substitution, the soluble substituted dextran derivative thus obtained is washed, ultrafiltered and stored in lyophilized form. The product is analyzed by acidbase assay of the methylcarboxylic functions and by elemental analysis (nitrogen content, making it possible to calculate the number of units substituted by benzylamine).
L'activité biologique des dérivés substitués solubles de dextrane définis ci-dessus a été testée dans un modèle in vitro de prolifération des cellules musculaires lisses. Les résultats montrent que l'activité de ces dérivés dépend du pourcentage de motifs B et de motifs C et semble résulter d'un effet coopératif entre les chaînes de substitution de B et de C. The biological activity of the soluble substituted dextran derivatives defined above was tested in an in vitro model of proliferation of smooth muscle cells. The results show that the activity of these derivatives depends on the percentage of B units and C units and seems to result from a cooperative effect between the substitution chains of B and C.
L'activité inhibitrice de principes actifs représentatifs selon la présente invention (produits des exemples 1 à 6 ci-dessous) a été testée in vitro en utilisant des cellules musculaires lisses d'aorte de rats
Sprague-Dawley dans le modèle suivant : des plaques de culture de 24 puits sont ensemencées au jour JO avec une suspension cellulaire (environ 12 000 cellules par puits) dans un milieu MEM (Milieu essentiel minimum de Eagle,
Gibco, Grande Bretagne) en présence de 10 % de sérum de veau nouveau-né. Après mise en carence des cellules adhérentes dans un milieu MEM à 0,5% de sérum de veau nouveau-né au jour J1, les cellules sont mises en présence de différentes concentrations du produit à tester au jour J2, en milieu MEM en présence de 10% de sérum de veau nouveau-né. Au jour J7, les cellules sont trypsinisées et comptées.Le pourcentage d'inhibition, I, est exprimé de la façon suivante: I% = (1- croissance nette en présence du produit à tester) x 100
croissance nette témoin la croissance nette étant la différence entre le nombre de cellules à J2 et à J7.The inhibitory activity of representative active ingredients according to the present invention (products of Examples 1 to 6 below) was tested in vitro using smooth muscle cells of aorta from rats.
Sprague-Dawley in the following model: 24-well culture plates are inoculated on day D0 with a cell suspension (approximately 12,000 cells per well) in MEM medium (Eagle's minimum essential medium,
Gibco, Great Britain) in the presence of 10% newborn calf serum. After making the adherent cells deficient in a MEM medium containing 0.5% newborn calf serum on day D1, the cells are placed in the presence of different concentrations of the product to be tested on day D2, in MEM medium in the presence of 10% newborn calf serum. On day D7, the cells are trypsinized and counted. The percentage inhibition, I, is expressed as follows: I% = (1 - net growth in the presence of the product to be tested) x 100
net growth control the net growth being the difference between the number of cells on D2 and D7.
Tous les produits testés ont montré un bon pourcentage d'inhibition (de l'ordre de 35 à 80%) à la concentration de 1000 pg/ml, alors que leur activité anticoagulante mesurée par l'allongement du temps de thrombine est nulle, ou pour certains d'entre reste négligeable (inférieure à 1 ui/mg), ce qui permet d'envisager l'administration de doses encore supérieures aux doses testées. All the products tested showed a good percentage of inhibition (of the order of 35 to 80%) at the concentration of 1000 pg / ml, while their anticoagulant activity measured by the prolongation of the thrombin time is zero, or for some of them remains negligible (less than 1 iu / mg), which makes it possible to consider the administration of doses even higher than the doses tested.
L'intérêt des principes actifs des compositions de la présente invention est encore accru en raison de leur bonne tolérance. The interest of the active principles of the compositions of the present invention is further increased because of their good tolerance.
Les tests de toxicité ont été effectués sur des souris d'environ 20 g par injection intraveineuse de 0,5 ml par souris, d'une solution de 40 mg/ml du dextrane modifié conforme à la présente invention dans du soluté NaCl isotonique. Ces tests ont démontré la totale inocuité des produits conformes à la présente invention : aucune réaction ni pendant l'injection, ni pendant 14 jours suivant l'injection, n'a été constatée. The toxicity tests were carried out on mice of approximately 20 g by intravenous injection of 0.5 ml per mouse, of a solution of 40 mg / ml of the modified dextran according to the present invention in isotonic NaCl solute. These tests demonstrated the total harmlessness of the products in accordance with the present invention: no reaction either during the injection or for 14 days following the injection was observed.
Compte-tenu de leurs propriétés, ces dérivés sont particulièrement appropriés pour l'utilisation en tant que principe actif des compositions pharmaceutiques selon l'invention. Taking into account their properties, these derivatives are particularly suitable for the use as active principle of the pharmaceutical compositions according to the invention.
Les compositions pharmaceutiques de l'invention constituent des médicaments pour la prévention et le traitement de maladies impliquant la prolifération des cellules musculaires lisses. En particulier, les compositions pharmaceutiques de l'invention peuvent être utilisées pour la prévention et le traitement de l'athérosclérose. Elles peuvent également être destinées à la prévention des resténoses, en particulier après pontage veineux ou artériel, greffe veineuse, angioplastie ou transplantations d'organes, notamment les transplantations cardiaques. Elles peuvent encore être utilisées dans le traitement des glomérulonéphrites. The pharmaceutical compositions of the invention constitute medicaments for the prevention and treatment of diseases involving the proliferation of smooth muscle cells. In particular, the pharmaceutical compositions of the invention can be used for the prevention and treatment of atherosclerosis. They can also be intended for the prevention of restenosis, in particular after venous or arterial bypass, venous grafting, angioplasty or organ transplants, in particular heart transplants. They can also be used in the treatment of glomerulonephritis.
Les compositions pharmaceutiques de l'invention sont notamment caractérisées en ce qu'elles renferment une quantité efficace de substance active en association avec un excipient ou véhicule pharmaceutiquement acceptable. The pharmaceutical compositions of the invention are in particular characterized in that they contain an effective amount of active substance in combination with a pharmaceutically acceptable excipient or vehicle.
Dans une réalisation avantageuse de l'invention, les compositions pharmaceutiques sont caractérisées en ce que l'excipient ou le véhicule pharmaceutique est approprié pour l'administration par voie orale, et qu'elles se présentent sous forme de gélules gastrorésistantes, de comprimés ou tablettes, de pilules, ou encore sous forme de solutions buvables, renfermant avantageusement de 50 mg à 5 g par unité de prise, de preférence de 100 à 1000 mg pour des gélules, tablettes ou pilules, et de 10 à 150 mg pour des solutés buvables. In an advantageous embodiment of the invention, the pharmaceutical compositions are characterized in that the excipient or the pharmaceutical vehicle is suitable for oral administration, and that they are in the form of gastro-resistant capsules, tablets or lozenges. , pills, or in the form of drinkable solutions, advantageously containing from 50 mg to 5 g per unit dose, preferably from 100 to 1000 mg for capsules, tablets or pills, and from 10 to 150 mg for drinkable solutions .
Les compositions se présentent sous forme de solution injectable, stérile ou stérilisable, pour l'administration par voie intraveineuse, intramusculaire ou sous-cutanée, ces solutions renfermant avantageusement de 50 à 200 mg/ml du dérivé de dextrane substitué soluble lorsqu'elles sont destinées à l'injection par voie souscutanée ou de 20 à 200 mg/ml de dextrane substitué soluble lorsqu'elles sont destinées à l'injection par voie intraveineuse ou par perfusion. The compositions are in the form of an injectable solution, sterile or sterilizable, for administration by the intravenous, intramuscular or subcutaneous route, these solutions advantageously containing from 50 to 200 mg / ml of the soluble substituted dextran derivative when they are intended. for subcutaneous injection or from 20 to 200 mg / ml of soluble substituted dextran when intended for intravenous injection or by infusion.
Ces intervalles de doses n'ont qu'une valeur indicative, les doses administrées devant, dans chaque cas, être évaluées par le clinicien, compte tenu de l'état du malade et de sa réactivité personnelle à l'égard des médicaments. These dose intervals are only indicative, the doses administered must, in each case, be evaluated by the clinician, taking into account the patient's condition and his personal responsiveness to the drugs.
L'invention sera mieux comprise à l'aide des exemples d'application qui suivent, et qui ne possèdent aucun caractère limitatif. The invention will be better understood with the aid of the application examples which follow, and which have no limiting nature.
EXEMPLE 1 : PREPARATION DE DERIVES SUBSTITUES SOLUBLES DE
DEXTRANE COMPORTANT LES MOTIFS A, B ET C SUIVANTS
DEXTRANE CONTAINING THE FOLLOWING A, B AND C PATTERNS
A B C Le produit final CMD5"B est obtenu à la suite de 4 étapes
de synthèse dont les 3 premières sont des
carboxyméthylations successives, et la dernière une benzylamination.ABC The final product CMD5 "B is obtained after 4 steps
synthesis, the first 3 of which are
successive carboxymethylations, and the last a benzylamination.
1/ CARBOXYMETHYLATION
* lère Carboxyméthylation
40 g de dextrane T40 (Pharmacia, Suède) sont dissous dans 330 ml d'une solution aqueuse de soude 6M à 50C. Cette température est maintenue pendant 20 minutes. 58,3 g de cristaux d'acide monochloroacétique sont ajoutés petit à petit et la température est portée à 500C. Après 1 heure de réaction, les réactifs consommés sont ajoutés soit 8 8 g de pastille de soude 10 g de cristaux d'acide monochloroacétique.1 / CARBOXYMETHYLATION
* 1st Carboxymethylation
40 g of T40 dextran (Pharmacia, Sweden) are dissolved in 330 ml of a 6M aqueous sodium hydroxide solution at 50C. This temperature is maintained for 20 minutes. 58.3 g of monochloroacetic acid crystals are added little by little and the temperature is brought to 500C. After reaction for 1 hour, the reagents consumed are added, ie 88 g of sodium hydroxide tablet 10 g of crystals of monochloroacetic acid.
Le réacteur est maintenu à 500C durant une nouvelle heure. The reactor is maintained at 500C for a further hour.
Après neutralisation par l'acide acétique, le produit est précipité dans le méthanol, filtré, rincé à l'éthanol et enfin séché sous vide. Le produit obtenu (environ 53 g), nommé CMDs, porte 68% d'unités portant la fonction carboxyméthylique. After neutralization with acetic acid, the product is precipitated in methanol, filtered, rinsed with ethanol and finally dried under vacuum. The product obtained (approximately 53 g), called CMDs, carries 68% of units carrying the carboxymethyl function.
* 2ème Carboxyméthylation
45 g de CMDs sont dissous dans 370 ml d'une solution de soude 6M à 50C. Cette température est maintenue pendant 20 minutes.* 2nd Carboxymethylation
45 g of CMDs are dissolved in 370 ml of a 6M sodium hydroxide solution at 50C. This temperature is maintained for 20 minutes.
65,7 g de cristaux d'acide monochloroacétique sont ajoutés. La température est portée à 500C pendant 1 heure. 65.7 g of monochloroacetic acid crystals are added. The temperature is brought to 500C for 1 hour.
Le produit ainsi obtenu est isolé de la même manière que précédemment. Ce produit, nommé CMD'5, porte 77,5% d'unités portant la fonction carboxyméthylique.The product thus obtained is isolated in the same way as above. This product, called CMD'5, carries 77.5% of units carrying the carboxymethyl function.
* 3ème Carboxyméthylation
20 g de CMD' sont dissous dans 164 ml d'une solution de soude 6M à 50C. Cette température est maintenue pendant 20 minutes.* 3rd Carboxymethylation
20 g of CMD 'are dissolved in 164 ml of a 6M sodium hydroxide solution at 50C. This temperature is maintained for 20 minutes.
21 g de cristaux d'acide monochloroacétique sont ajoutés, la température est portée à 500C pendant 1 heure Le - produit ainsi obtenu, nommé CMD"5, porte 114 % de fonctions carboxyméthyliques. 21 g of monochloroacetic acid crystals are added, the temperature is brought to 500C for 1 hour. The product thus obtained, called CMD "5, bears 114% of carboxymethyl functions.
2/ BENZYLAMIINATION
24,8 g de CMD" sont dissous dans 163 ml d'eau distillée, puis le pH est porté à 3,5 par ajout d'acide chlorhydrique 1M : solution 1.2 / BENZYLAMIINATION
24.8 g of CMD "are dissolved in 163 ml of distilled water, then the pH is brought to 3.5 by adding 1M hydrochloric acid: solution 1.
27,7 g d'EEDQ sont ensuite dissous dans 225 ml d'éthanol : solution 2. La solution 2 est ajoutée lentement à la solution 1 tout en maintenant le pH à 3,5. 27.7 g of EEDQ are then dissolved in 225 ml of ethanol: solution 2. Solution 2 is added slowly to solution 1 while maintaining the pH at 3.5.
On maintient le mélange réactionnel à température ambiante pendant 1/2 heure, puis on ajoute 12,2 ml de benzylamine. Le pH est porté à 9,2 à l'aide d'une solution aqueuse de NaOH 6M. The reaction mixture is maintained at room temperature for 1/2 hour, then 12.2 ml of benzylamine are added. The pH is brought to 9.2 using a 6M aqueous NaOH solution.
On laisse réagir une nuit à température ambiante. It is left to react overnight at room temperature.
Le mélange réactionnel est ensuite neutralisé et concentré avant de précipiter le produit dans le méthanol. The reaction mixture is then neutralized and concentrated before precipitating the product in methanol.
Après ultrafiltration et lyophilisation, le produit est analysé (dosage acido-basique, analyse élémentaire).After ultrafiltration and lyophilization, the product is analyzed (acid-base assay, elemental analysis).
Composition du CMD" B
A = 7% ; B = 82% ; C = 11%.Composition of CMD "B
A = 7%; B = 82%; C, 11%.
EXEMPLES 2 - 6 : PREPARATION DE DERIVES DE DEXTRANE
COMPORTANT LES MOTIFS A,B, C DECRITS PLUS HAUT DANS DES
PROPORTIONS VARIEES
En faisant varier le nombre de fois où l'on répéte les différentes étapes de carboxyméthylation et de benzylamination décrites dans l'exemple 1 et les durées de réaction, on obtient une gamme de dérivés possédant des proportions variées de motifs A, B et C.EXAMPLES 2 - 6: PREPARATION OF DEXTRANE DERIVATIVES
INCLUDING GROUNDS A, B, C DESCRIBED ABOVE IN
VARIOUS PROPORTIONS
By varying the number of times in which the different carboxymethylation and benzylamination steps described in Example 1 and the reaction times are repeated, a range of derivatives having varied proportions of units A, B and C.
Les composés suivants ont ainsi été préparés
<tb> Exemple <SEP> : <SEP> nombre <SEP> de <SEP> : <SEP> nombre <SEP> de <SEP> : <SEP> A <SEP> % <SEP> : <SEP> B <SEP> % <SEP> : <SEP> C <SEP> % <SEP>
<tb> <SEP> N <SEP> carboxymé- <SEP> benzylami
<tb> <SEP> thylations <SEP> nations
<tb> <SEP> 2 <SEP> 2 <SEP> 4 <SEP> 6 <SEP> 59 <SEP> 35
<tb> <SEP> 3 <SEP> : <SEP> 3 <SEP> : <SEP> 5 <SEP> : <SEP> 19 <SEP> : <SEP> 29 <SEP> : <SEP> 51
<tb> <SEP> 4 <SEP> : <SEP> 4 <SEP> : <SEP> 3 <SEP> : <SEP> 19 <SEP> : <SEP> 64 <SEP> : <SEP> 34
<tb> <SEP> 5 <SEP> : <SEP> 4 <SEP> : <SEP> 3 <SEP> : <SEP> 0 <SEP> : <SEP> 68 <SEP> : <SEP> 32
<tb> <SEP> 6 <SEP> : <SEP> 4 <SEP> : <SEP> 1 <SEP> .12 <SEP> :102 <SEP> : <SEP> 10
<tb> <tb> Example <SEP>: <SEP> number <SEP> of <SEP>: <SEP> number <SEP> of <SEP>: <SEP> A <SEP>% <SEP>: <SEP> B <SEP >% <SEP>: <SEP> C <SEP>% <SEP>
<tb><SEP> N <SEP> carboxym- <SEP> benzylami
<tb><SEP> thylations <SEP> nations
<tb><SEP> 2 <SEP> 2 <SEP> 4 <SEP> 6 <SEP> 59 <SEP> 35
<tb><SEP> 3 <SEP>: <SEP> 3 <SEP>: <SEP> 5 <SEP>: <SEP> 19 <SEP>: <SEP> 29 <SEP>: <SEP> 51
<tb><SEP> 4 <SEP>: <SEP> 4 <SEP>: <SEP> 3 <SEP>: <SEP> 19 <SEP>: <SEP> 64 <SEP>: <SEP> 34
<tb><SEP> 5 <SEP>: <SEP> 4 <SEP>: <SEP> 3 <SEP>: <SEP> 0 <SEP>: <SEP> 68 <SEP>: <SEP> 32
<tb><SEP> 6 <SEP>: <SEP> 4 <SEP>: <SEP> 1 <SEP> .12 <SEP>: 102 <SEP>: <SEP> 10
<tb>
Claims (8)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR8911605A FR2651436B1 (en) | 1989-09-05 | 1989-09-05 | PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING A SOLUBLE DEXTRAN SUBSTITUTED DERIVATIVE. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR8911605A FR2651436B1 (en) | 1989-09-05 | 1989-09-05 | PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING A SOLUBLE DEXTRAN SUBSTITUTED DERIVATIVE. |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FR2651436A1 true FR2651436A1 (en) | 1991-03-08 |
| FR2651436B1 FR2651436B1 (en) | 1994-09-09 |
Family
ID=9385153
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FR8911605A Expired - Fee Related FR2651436B1 (en) | 1989-09-05 | 1989-09-05 | PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING A SOLUBLE DEXTRAN SUBSTITUTED DERIVATIVE. |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| FR (1) | FR2651436B1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999029734A1 (en) * | 1997-12-11 | 1999-06-17 | Solutions | Dextran derivatives, preparation method and applications as medicine with specific biological action |
| WO2000076452A2 (en) * | 1999-06-16 | 2000-12-21 | Biodex | Pharmaceutical compositions with wound healing or anti-complementary activity comprising a dextran derivative |
| WO2002026240A2 (en) * | 2000-09-26 | 2002-04-04 | Sidney Kimmel Cancer Center | Inhibition of antigen presentation with poorly catabolized polymers |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0146455A2 (en) * | 1983-11-30 | 1985-06-26 | Jozefowicz, Marcel | Dextran derivatives having anticoagulant and anticomplementary properties, their preparation and their biological applications |
| EP0276370A2 (en) * | 1986-10-09 | 1988-08-03 | Knoll Ag | Use of lower molecular-weight dextran sulfates in the treatment of arteriosclerosis |
-
1989
- 1989-09-05 FR FR8911605A patent/FR2651436B1/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0146455A2 (en) * | 1983-11-30 | 1985-06-26 | Jozefowicz, Marcel | Dextran derivatives having anticoagulant and anticomplementary properties, their preparation and their biological applications |
| EP0276370A2 (en) * | 1986-10-09 | 1988-08-03 | Knoll Ag | Use of lower molecular-weight dextran sulfates in the treatment of arteriosclerosis |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999029734A1 (en) * | 1997-12-11 | 1999-06-17 | Solutions | Dextran derivatives, preparation method and applications as medicine with specific biological action |
| FR2772382A1 (en) * | 1997-12-11 | 1999-06-18 | Solutions | DEXTRANE DERIVATIVES, THEIR PREPARATION PROCESS AND THEIR APPLICATIONS AS MEDICINAL PRODUCTS WITH SPECIFIC BIOLOGICAL ACTION |
| WO2000076452A2 (en) * | 1999-06-16 | 2000-12-21 | Biodex | Pharmaceutical compositions with wound healing or anti-complementary activity comprising a dextran derivative |
| FR2794976A1 (en) * | 1999-06-16 | 2000-12-22 | Solutions | PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS WITH SCARING OR ANTI-COMPLEMENTARY ACTION COMPRISING A DEXTRANE DERIVATIVE |
| WO2000076452A3 (en) * | 1999-06-16 | 2001-08-09 | Iterfi | Pharmaceutical compositions with wound healing or anti-complementary activity comprising a dextran derivative |
| WO2002026240A2 (en) * | 2000-09-26 | 2002-04-04 | Sidney Kimmel Cancer Center | Inhibition of antigen presentation with poorly catabolized polymers |
| WO2002026240A3 (en) * | 2000-09-26 | 2002-06-06 | Sidney Kimmel Cancer Ct | Inhibition of antigen presentation with poorly catabolized polymers |
| US7538097B2 (en) | 2000-09-26 | 2009-05-26 | Halozyme, Inc. | Inhibition of antigen presentation with poorly catabolized polymers |
| US7786096B2 (en) | 2000-09-26 | 2010-08-31 | Halozyme, Inc. | Inhibition of antigen presentation with poorly catabolized polymers |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2651436B1 (en) | 1994-09-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0214879B1 (en) | Process for sulfating glycosaminoglycanes, glycosaminoglycanes obtained and their biological applications | |
| EP0428182B1 (en) | Dextran derivatives having anticoagulant and anticomplementary properties, their preparation and their biological applications | |
| EP0023854B1 (en) | Soluble polymers possessing anticoagulating properties, process for preparing them and their use as drugs with anticoagulating action | |
| EP0208623A2 (en) | Use of poly- and oligosaccharides for obtaining medicaments active in the pathologies of the connective tissue | |
| EP1755620B1 (en) | Sulphated depolymerised exopolysaccharide derivatives, their preparation and uses | |
| AU2012354226B2 (en) | Low anticoagulant heparins | |
| FR2614026A1 (en) | LOW MOLECULAR WEIGHT HEPARINS WITH REGULAR STRUCTURE, THEIR PREPARATION AND THEIR BIOLOGICAL APPLICATIONS | |
| OA12940A (en) | Heparin - derived polysaccharide mixtures, their preparation and pharmaceutical compositions containing them. | |
| EP0163582B1 (en) | Medicines which improve the free-flowing properties of blood, and their therapeutical use | |
| FR2651436A1 (en) | Pharmaceutical compositions containing a soluble substituted dextran derivative | |
| CA2678166A1 (en) | Heparins including at least one covalent bond with biotin or a biotin derivative, method for preparing same and use thereof | |
| EP0344068B1 (en) | N-polyosyl-polypeptides | |
| FR2622450A1 (en) | Heparin/dermatan sulphate combination | |
| JPH0859485A (en) | Maillard reaction inhibitor consisting mainly of 3-oxygermylpropionic acid compound | |
| CA1262600A (en) | Products comprising oligosaccharides, preparation process of said products and biological and biochemical applications of the same | |
| FR2782007A1 (en) | USE OF CALIX (N) ARENES FOR THE TREATMENT OF FIBROTIC DISEASES | |
| FR2838649A1 (en) | Composition containing polyanion and agent that induces exposure of the CD4i epitope, useful for treatment of acquired immune deficiency syndrome | |
| WO2005061550A1 (en) | Carboxy-reduced derivatives of hyaluronic acid, method of preparing said derivatives, application thereof as a medicament and pharmaceutical compositions containing same | |
| FR2572080A1 (en) | Process for the preparation of mucopolysaccharide compositions endowed with a high antithrombotic activity, the compositions obtained and their application as medications | |
| JP3062906B2 (en) | Sulfate of N-acetylneuraminic acid homopolymer | |
| FR2637804A1 (en) | Pharmaceutical compositions containing a partially N-desulphated heparin derivative having antithrombotic activity | |
| EP1289515A1 (en) | Pharmaceutical composition containing at least a polymer associated or conjugated with at least a phenylalkylcarboxylic acid salt, conjugate polymers and uses thereof | |
| JPH05117143A (en) | Antiviral agent | |
| JPH09286803A (en) | Medium-molecular heparin, amino acid derivative, and medicine composition | |
| WO2005061549A1 (en) | Carboxy-reduced derivatives of dermatan sulphate, method of preparing said derivatives, application thereof as a medicament and pharmaceutical compositions containing same |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TP | Transmission of property | ||
| ST | Notification of lapse |
Effective date: 20090529 |