FR2639957A1

FR2639957A1 - Culture dish.

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Publication number: FR2639957A1
Application number: FR8816053A
Authority: FR
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1988-12-07
Filing date: 1988-12-07
Publication date: 1990-06-08
Anticipated expiration: 2008-12-07
Also published as: FR2639957B1

Abstract

Culture dish comprising a receptacle 1 which is covered with a lid 2 and on whose base a layer of culture medium is deposited. Two orifices 3, 4, made in the sides of the receptacle 1 and the lid 2, facing each other, make it possible to place the inside of the receptacle in communication with the outside, when the receptacle 1 is covered with the lid 2. Medical analyses.

Description

Boites de culture.Culture dishes.

La présente invention concerne des boites de culture, notamment des boites de Petrir destinées a la culture des micro-organismes. The present invention relates to culture dishes, in particular Petrir dishes intended for the culture of microorganisms.

La gravité d'une septicémie est corrélée à la concentration bactérienne sanguine (Dietzmann D.E. The severity of sepsis is correlated with the bacterial concentration in the blood (Dietzmann D.E.

Fischer G W et Schoenknecht F.D. Neonatal Escherichia coli septicemia bacterial counts in blood J. Pediat, 1974 85.1 pages 128 a 130 ; Santosham M et Moxon ER
Detection and quantitation of bacteremia in childhood
J. Pediat 1977 91.5 pages 719a 721 ; Sullivan T.D.Fischer GW and Schoenknecht FD Neonatal Escherichia coli septicemia bacterial counts in blood J. Pediat, 1974 85.1 pages 128 to 130; Santosham M and Moxon ER
Detection and quantitation of bacteremia in childhood
J. Pediat 1977 91.5 pages 719a 721; Sullivan TD

Lascolea L J et Neter E Relationship between the magnitude of bacteremia in children and the clinical disease, Pediatrics 1982. 69.2 pages 69.6 à 702).Lascolea L J and Neter E Relationship between the magnitude of bacteremia in children and the clinical disease, Pediatrics 1982. 69.2 pages 69.6 to 702).

Les décès et les méningites surviennent surtout quand la concentration bactérienne sanguine dépasse un seuil donné. Les observations cliniques ont été confirmées par les modèles de septicémie expérimentale chez l'animal, qui ont montré que les concentrations bactériennes sanguines sont plus élevées chez les animaux inoculés avec des bactéries pathogènes que chez ceux inoculés avec des bactéries non pathogènes (Snipes R P,
Ghazikhanian G Y, Hirsh D C Fate of Pasteurella multocida in the bloom vascular system of turkeys following intravenous inoculation. Comparaison of an encapsulated virulent strain with its avirulent acapsular variant A-i diseases 1936 31. 9 pages 254 à 258. Deaths and meningitis occur mainly when the bacterial concentration in the blood exceeds a given threshold. Clinical observations have been confirmed by experimental animal sepsis models, which have shown that bacterial blood levels are higher in animals inoculated with pathogenic bacteria than in those inoculated with non-pathogenic bacteria (Snipes RP,
Ghazikhanian GY, Hirsh DC Fate of Pasteurella multocida in the bloom vascular system of turkeys following intravenous inoculation. Comparison of an encapsulated virulent strain with its avirulent acapsular variant Ai diseases 1936 31. 9 pages 254 to 258.

Cependant, pour les études cliniques chez l'enfant ou pour les études expérimentales chez le pigeon ou chez le poulet, la connaissance de la concentration bactérienne à un instant donné ne suffit pas pour prédire la gravité d'une bactérémie. Certains enfants, malgré une faible concentration bactérienne dans le sang, ont une méningite ou décèdent. I1 est souhaitable d'effectuer plusieurs prélèvements à des instants connus échelonnés dans le temps pour étudier la vitesse d'augmentation de la concentration bactérienne, de connaître précisément ces instants et d'avoir rapidement les résultats de la culture. However, for clinical studies in children or for experimental studies in pigeons or chickens, knowledge of the bacterial concentration at a given time is not enough to predict the severity of a bacteremia. Some children, despite a low bacterial concentration in the blood, have meningitis or die. It is desirable to take several samples at known times staggered in time to study the speed of increase in the bacterial concentration, to know precisely these times and to have the culture results quickly.

On pratique actuellement les hémocultures quantitatives de la manière suivante. On étale un volume donné de sang sur une couche de gélose et on met la boite de
Petri à l'étuve. Cn compte ensuite les colonies bactériennes. Ces opérations ne peuvent se faire que dans un laboratoire de bactériologie en atmosphère stérile (bec
Bunsen) pour respecter les règles d'asepsie.Effectuer ces opérations au lit du malade entrainerait des risques trop importants de contamination. I1 faut donc prélever du sang du malade, l'additionner d'un anticoagulant ou le transporter dans un tube d'hémolyse qui l'empêche de coaguler. I1 faut surtout l'étaler rapidement sur de la gélose parce que, si l'intervalle de temps, entre le pré lèvement et la culture,est trop long, certaines bactéries fragiles (méningocoque, streptocoque, pneumoniae, hemophylus influenzae) peuvent être détruites, alors que d'autres peuvent se multiplier in vitro (Escherichia coli) avec un temps de génération de 20 à 30 minutes.Quantitative blood cultures are currently used as follows. We spread a given volume of blood on a layer of agar and put the box of
Petri dish. Next, the bacterial colonies are counted. These operations can only be done in a bacteriology laboratory in a sterile atmosphere (beak
Bunsen) to comply with the rules of asepsis. Performing these operations at the patient's bed would entail too great a risk of contamination. It is therefore necessary to draw blood from the patient, add an anticoagulant or transport it in a hemolysis tube which prevents it from clotting. Above all, it must be spread quickly on agar because, if the time interval between sampling and culture is too long, certain fragile bacteria (meningococcus, streptococcus, pneumoniae, hemophylus influenzae) can be destroyed, while others can multiply in vitro (Escherichia coli) with a generation time of 20 to 30 minutes.

L'interprétation des résultats de ces hémocultures quantitatives devient difficile, d'autant que souvent l'intervalle de temps qui s'écoule entre le prélèvement et l'ensemencement est prolongé aléatoirement par les heures de fermeture du laboratoire.The interpretation of the results of these quantitative blood cultures becomes difficult, especially since often the time interval which elapses between the sample and the inoculation is lengthened randomly by the closing hours of the laboratory.

L'invention pallie ces inconvénients par une boite de culture permettant d'y introduire, au chevet du malade, le sang prélevé sans enfreindre les règles d'asepsie. The invention overcomes these drawbacks with a culture dish making it possible to introduce there, at the bedside of the patient, the blood taken without violating the rules of asepsis.

La boîte de culture comprend un réceptacle qui est recouvert d'un couvercle et sur le fond ducuel est déposée une couche d'un milieu de culture, notamment de gélose. Suivant l'invention, il est prévu des moyens de mise en communication de l'espace intérieur de la boîte compris entre la couche et le couvercle avec l'extérieur, alors que le réceptacle est recouvert du couvercle. On peut ainsi introduire le sang sur Ja couche de gélose en respectant les règles d'asepsie, puisque la boîte reste toujours coiffée du couvercle. The culture dish comprises a receptacle which is covered with a cover and on the ducal bottom is deposited a layer of a culture medium, in particular agar. According to the invention, means are provided for placing the interior of the box in communication between the layer and the cover with the outside, while the receptacle is covered with the cover. It is thus possible to introduce the blood onto the agar layer, respecting the rules of asepsis, since the box always remains covered with the lid.

Les moyens de mise en communication sont destinés à permettre une introduction d'inoculum et non à autoriser le prélèvement de ce qui se trouve déjà à l'intérieur de la boîte, la couche étant d'ailleurs souvent d'un seul tenant1 fixée au réceptacle et de dimension bien trop grande pour pouvoir sortir de la boîte par les moyens de mise en communication.The communication means are intended to allow an inoculum to be introduced and not to authorize the removal of what is already inside the box, the layer often being in one piece1 attached to the receptacle and of dimension far too large to be able to leave the box by the communication means.

Ceux-ci peuvent être constitués d'un hublot en caoutchouc butyle destiné à être perforé par l'aiguille d'une seringue d'injection du sang prélevé. Mais, de préférence et plus simplement, les moyens de communication comprennent deux orifices ménagés sur des faces en regard du réceptacle et du couvercle, celui-ci étant monté mobile sur le réceptacle, de manière à pouvoir passer d'un état de confinement, où les orifices ne sont pas alignés, à un état d'alignement, où ils le sont. These may consist of a butyl rubber porthole intended to be punctured by the needle of a syringe for injecting the withdrawn blood. However, preferably and more simply, the means of communication comprise two orifices provided on opposite faces of the receptacle and of the cover, the latter being movably mounted on the receptacle, so as to be able to pass from a state of confinement, where the holes are not aligned, in an alignment state, where they are.

L'infirmière introduit la seringue dans le canal formé par les orifices alignés, injecte le sang dans la boîte, retire la seringue et déplace immédiatement le couvercle par rapport au réceptacle, pour mettre fin à l'alignement des orifices. L'intérieur de la boîte ne communique plus avec l'extérieur. De préférence, les orifices viennent en coïncidence, par une rotation du couvercle sur le réceptacle, les orifices étant ménagés sur un rebord du couvercle, en regard de la face latérale du réceptacle.The nurse introduces the syringe into the channel formed by the aligned holes, injects the blood into the box, withdraws the syringe and immediately moves the cover relative to the receptacle, to end the alignment of the holes. The inside of the box no longer communicates with the outside. Preferably, the orifices come in coincidence, by a rotation of the cover on the receptacle, the orifices being formed on a rim of the cover, facing the lateral face of the receptacle.

Suivant un perfectionnement déterminant de l'invention, la boîte comprend des moyens d'étalement d'un inoculum sur la couche, alors que le réceptacle est recouvert du couvercle. Dès après l'introduction de l'inoculum, on peut, sans perte de temps, étaler le sang ou autre inoculum en sorte que la culture des bactéries commence immédiatement, sans qu'elles aient le temps de se multiplier ou d'être détruites, et cela quel que soit l'instant d'arrivée de la boîte au laboratoire ou les heures d'ouverture de celui-ci. According to a decisive improvement of the invention, the box comprises means for spreading an inoculum on the layer, while the receptacle is covered with the cover. Immediately after the introduction of the inoculum, it is possible, without wasting time, to spread the blood or other inoculum so that the culture of the bacteria begins immediately, without them having time to multiply or be destroyed, and that whatever the moment of arrival of the box at the laboratory or the opening hours of this one.

Suivant une variante préférée, parce que simple à fabriquer et ne nécessitant pas de râteau sous forme d'une pièce distincte pouvant se perdre et nécessitant des travaux de montage, les moyens d'étalement comprennent un râteau issu d'une face intérieure du couvercle, celui-ci étant monté mobile sur le réceptacle de manière à pouvoir passer d'une position de dépot où le rateau est à distance de la couche et laisse place ainsi à une seringue permettant de déposer l'inoculum, à une position de ratissage où le râteau touche la couche. Pour que le râteau ne s'enfonce pas trop dans la couche, il est prévu avantageusement une butée disposée de manière à empêcher le râteau d'aller au-delà de la position de ratissage. La fabrication de la boite est simplifiée quand la butée est constituée du bord supérieur du réceptacle qui vient buter sur la face inférieure de la partie supérieure du couvercle. According to a preferred variant, because it is simple to manufacture and does not require a rake in the form of a separate part which can be lost and requires assembly work, the spreading means comprise a rake coming from an inner face of the cover, the latter being mounted movably on the receptacle so as to be able to pass from a deposit position where the rake is at a distance from the diaper and thus gives way to a syringe allowing the inoculum to be deposited, to a raking position where the rake hits the layer. So that the rake does not sink too far into the layer, there is advantageously provided a stopper arranged so as to prevent the rake from going beyond the raking position. The manufacture of the box is simplified when the stop consists of the upper edge of the receptacle which abuts on the lower face of the upper part of the cover.

Pour empêcher que, par inadvertance, le couvercle soit remis après le ratissage en l'état d'alignement, le couvercle est monté mobile sur le réceptacle de maniere a pouvoir passer de la position de dépot, où le râteau est à distance de la couche et où le couvercle peut venir dans l'état d'alignement, à une position de retrait, où le râteau est encore à distance de la couche de manière à laisser libre champ à la croissance des bactéries, mais où le couvercle ne peut pas venir, ou du moins ne peut venir qu'imparfaitement dans l'état d'alignement. On empêche aussi de cette façon d'inoculer par erreur deux fois la même couche de gélose. To prevent the cover from being inadvertently returned to the alignment state after raking, the cover is movably mounted on the receptacle so that it can move from the deposit position, where the rake is spaced from the bed and where the cover can come in the alignment state, at a withdrawal position, where the rake is still at a distance from the layer so as to leave free field for the growth of bacteria, but where the cover cannot come , or at least can only come imperfectly in the alignment state. This also prevents the same layer of agar from being mistakenly inoculated twice.

Suivant un mode de réalisation préféré, le couvercle est monté tournant sur le réceptacle cylindrique et, par des nervures cédant élastiquement, mobile dans la direction de l'axe du réceptacle entre deux nervures du réceptacle qui cèdent élastiquement et qui définissent les positions de dépôt et de retrait. On passe des positions de dépôt aux positions de ratissage1 puis de retraitlen appuyant sur le couvercle de manière à franchir les nervures élastiques ou en sculevant le couvercle de manière à franchir ces nervures élastiques, mais sans cependant décoiffer le réceptacle. According to a preferred embodiment, the cover is mounted rotating on the cylindrical receptacle and, by ribs yielding elastically, movable in the direction of the axis of the receptacle between two ribs of the receptacle which yield elastically and which define the positions of deposit and withdrawal. We move from the deposit positions to the raking positions1 and then to the retraction positions by pressing on the cover so as to pass through the elastic ribs or by shaping the cover so as to pass through these elastic ribs, but without however disheveling the receptacle.

Suivant une variante, une butée est disposée de manière à limiter le déplacement relatif du râteau et de la couche pour que le râteau ne ratisse qu'une partie déterminée de la couche. On peut utiliser les autres parties pour y inoculer d'autres inoculum, soit ulté- rieurement, soit en prévoyant des moyens de mise en communication associés à chaque partie. De la même façon, on prévoit plusieurs râteaux, chacun d'entre eux étant affecté à une partie différente de la couche, de manière a ne pas contaminer mutuellement les parties de gélose. According to a variant, a stop is arranged so as to limit the relative displacement of the rake and the layer so that the rake only casts a determined part of the layer. The other parts can be used to inoculate other inoculum, either later, or by providing means of communication associated with each part. Similarly, several rakes are provided, each of them being assigned to a different part of the layer, so as not to mutually contaminate the agar parts.

Au dessin annexé, donné uniquement à titre d'exemple :
la figure 1 est une vue éclatée, en perspective, d'une boîte suivant l'invention
les figures 2, 3 et 4 sont des vues partielles en coupe illustrant, respectivement, les positions de dépôt, de ratissage et de retrait.In the attached drawing, given solely by way of example:
Figure 1 is an exploded perspective view of a box according to the invention
Figures 2, 3 and 4 are partial sectional views illustrating, respectively, the positions of deposition, raking and removal.

La boite de Petri représentée à la figure 1 comporte un réceptacle 1 et un couvercle 2 en matière plastique. Le couvercle 2 a des dimensions telles qu'il peut juste coiffer le réceptacle 1. Dans la face latérale du réceptacle 1, est prévu un trou 3. Dans le rebord vertical du couvercle 2 est prévu un trou 4. Sur la face latérale extérieure du réceptacle 1 sont prévues deux nervures 5, 6, périphériques,espacées l'une de l'autre. De la face latérale intérieure du réceptacle 1 est issue une butée 7. The Petri dish shown in Figure 1 has a receptacle 1 and a cover 2 made of plastic. The cover 2 has dimensions such that it can just cover the receptacle 1. In the lateral face of the receptacle 1, there is provided a hole 3. In the vertical rim of the cover 2 is provided a hole 4. On the external lateral face of the receptacle 1 are provided two ribs 5, 6, peripheral, spaced from one another. From the inner lateral face of the receptacle 1 comes a stop 7.

De la face inférieure de la partie supérieure du couvercle, sont issus quatre râteaux 8 sous la forme de deux bandes en matière plastiaue se croisant à angle droit dans l'axe de la boite. L'un des râteaux vient en contact avec la butée 7 lorsque l'on fait tourner le couvercle 2 sur le réceptacle 1. From the lower face of the upper part of the cover, four rakes 8 emanate in the form of two strips of plastic material crossing at right angles to the axis of the box. One of the rakes comes into contact with the stop 7 when the cover 2 is rotated on the receptacle 1.

Sur la face intérieure de la partie latérale du couvercle 2, sont ménagées deux nervures 9, 10 cédant élastiquement. On the inner face of the lateral part of the cover 2, two ribs 9, 10 are provided which yield elastically.

La figure 2 illustre position de déport. Les trous 3 et 4 sont alignés. Le râteau 8 est à distance d'une couche de gélose 11 déposée sur le fond du réceptacle et dont la face supérieure est à un niveau plus bas que le trou 3. La nervure 10 repose sur la nervure 5. La nervure 9 repose sur la nervure 6. Le dépit effectué, on fait tourner le couvercle 2 autour du réceptacle 1, de manière que les trous 3 et 4 ne soient plus alignés. Figure 2 illustrates the offset position. Holes 3 and 4 are aligned. The rake 8 is at a distance from an agar layer 11 deposited on the bottom of the receptacle and the upper face of which is at a level lower than the hole 3. The rib 10 rests on the rib 5. The rib 9 rests on the rib 6. Despite this, the cover 2 is rotated around the receptacle 1, so that the holes 3 and 4 are no longer aligned.

Puis, immédiatement, on enfonce le couvercle 2 à fond sur le réceptacle 1 (figure 3) en faisant passer les nervures 9 et 10 en-dessous de la nervure 6, la profondeur d'enfoncement étant limitée par la venue en butée du bord 12 de la face latérale du réceptacle, avec la face inférieure de la partie supérieure du couvercle 2. Dans cette position, le râteau 8 est juste en contact avec la couche 11. En faisant tourner le couvercle 2 sur la boîte 1, on ratisse la couche de gélose à l'aide du râteau 8 et on étale l'inoculum sur a couche de gélose
Dès que cette opération est effectuée, on soulève à nouveau le couvercle 2 du réceptacle 1, sans cependant que le couvercle cesse de coiffer le réceptacle 1. A cet effet, on fait passer élastiquement la nervure 10 entre les nervures 6 et 5, la nervure 10 étant soutenue par la nervure 6. En cette position de retrait (fig.3), le râteau est à nouveau à distance de la couche de gélose il et n e gêne pas la croissance des bactéries. Mais il est en une position différente de celle représentée à la figure 2, ce qui permet à l'opérateur de reconnaître que la boîte est déjà en utilisation. En outre, les trous 3 et 4 ne peuvent plus être mis en coïncidence ou ne peuvent plus y être mis que partiellement, en sorte que l'introduction d'une seringue dans l'espace compris entre le râteau 8 et la couche de gélose 11 est impossible.Then, immediately, the cover 2 is pushed in fully onto the receptacle 1 (FIG. 3) by passing the ribs 9 and 10 below the rib 6, the depth of penetration being limited by the abutment of the edge 12 from the side face of the receptacle, with the underside of the upper part of the cover 2. In this position, the rake 8 is just in contact with the layer 11. By rotating the cover 2 on the box 1, the layer is raked of agar using rake 8 and spread the inoculum on a layer of agar
As soon as this operation is carried out, the cover 2 is raised again from the receptacle 1, without however that the cover ceases to cover the receptacle 1. For this purpose, the rib 10 is passed elastically between the ribs 6 and 5, the rib 10 being supported by the rib 6. In this withdrawn position (FIG. 3), the rake is again at a distance from the agar layer II and does not hinder the growth of bacteria. But it is in a different position from that shown in Figure 2, which allows the operator to recognize that the box is already in use. In addition, the holes 3 and 4 can no longer be placed in coincidence or can no longer be placed therein only partially, so that the introduction of a syringe into the space between the rake 8 and the agar layer 11 is impossible.

A l'arrivée au laboratoire, on ôte en atmosphère aseptisée le couvercle 2 du réceptacle 1 et on procède aux opérations habituelles, notamment de numération. On arrival at the laboratory, the cover 2 of the receptacle 1 is removed in a sanitized atmosphere and the usual operations are carried out, in particular for counting.

Claims

1. Culture dish comprising a receptacle (1) which is covered with a cover (2) and on the bottom of which is arranged a layer (11) of a culture medium, characterized by means of communication (3 , 4) with the outside of the interior space of the box between the layer (11) and the cover (2), while the receptacle (1) is covered with the cover (2).

2. Culture dish according to claim 1, characterized in that the means of communication include two orifices (3, 4) formed on the opposite faces of the receptacle (1) and the cover (2), the latter being movably mounted on the receptacle so as to be able to pass from a confinement state, where the orifices (3, 4) are not aligned, to an alignment state, where they are.

3. Culture dish according to claim 1 or 2, characterized in that it comprises spreading means (8) of an inoculum on the layer (11), while the receptacle (1) is covered with the cover ( 2).

4. Box according to claim 3, characterized in that the spreading means comprise a rake (8) from an inner face of the cover, the latter being movably mounted on the receptacle (1) so as to be able to pass d 'a position of spite, where the rake (8) is at a distance from the layer (11) at a raking position where it touches it.

5. Box according to claim 3, characterized by a stop (12) arranged so as to prevent the rake (8) from going beyond the raking position.

6. Box according to claim 4, characterized in that the stop consists of the upper edge (12) of the receptacle (1) abutting on the lower face of the upper part of the cover (2).

7. Box according to one of claims 3 to 6, characterized in that the cover (2) is movably mounted on the receptacle (1), so as to be able to pass from the deposit position, where the rake (8) is away from the layer (11) and where the cover (2) can come in the alignment state, at a withdrawal position where the rake (8) is at a distance from the layer (11), but where the cover (2) cannot come, or at least come only imperfectly, in the state of alignment.

8. Box according to one of claims 3 to 7, characterized in that the cover (2) is rotatably mounted on the receptacle (1) cylindrical and, by ribs (9, 10) yielding elastically, movable in the direction of the axis of the receptacle (1) between ribs (5, 6) of the receptacle which yield elastically and which define the positions of deposition and withdrawal.

9. Box according to one of claims 3 to 8, characterized by a stop (7) which is arranged so as to limit the relative movement of the rake (8) and the layer (11) so that the rake (8) does not combs only a specific part of the layer (11).

10. Box according to claim 9, characterized by several rakes (8) each assigned to a different part of the layer.