FR2595032A1 - Procede d'hybridation utilisant une combinaison de sterilite-male cytoplasmique et de tolerance aux herbicides attribuable uniquement aux genes nucleaires et semences de brassica napus pour la mise en oeuvre du procede - Google Patents

Abstract

PROCEDE D'HYBRIDATION UTILISANT UNE COMBINAISON DE STERILITE-MALE CYTOPLASMIQUE ET DE TOLERANCE AUX HERBICIDES ATTRIBUABLE UNIQUEMENT A DES GENES NUCLEAIRES; POUR OBTENIR DE FACON PRATIQUE UNE VARIETE HYBRIDE D'UNE PLANTE CULTIVEE SUSCEPTIBLE DE SUBIR UNE AUTOPOLLINISATION ET UNE POLLINISATION CROISEE, ON MULTIPLIE DES PLANTES MALE-STERILES CYTOPLASMIQUES PRESENTANT EGALEMENT UNE TOLERANCE AUX HERBICIDES ATTRIBUABLE UNIQUEMENT A DES GENES NUCLEAIRES ET ON EFFECTUE UNE POLLINISATION CROISEE AVEC UNE SOURCE DE POLLEN DEPOURVUE DE TOLERANCE AUX HERBICIDES, PUIS ON ELIMINE EFFICACEMENT LES PLANTES INDESIRABLES PAR EMPLOI D'UN HERBICIDE OU, DANS UN MODE DE REALISATION PREFERE, ON EMPLOIE DEUX HERBICIDES DIFFERENTS A DES MOMENTS APPROPRIES. APPLICATION A LA CULTURE DES PLANTES A GRAINES, DES PLANTES FOURRAGERES, DES PLANTES A FRUITS OU ORNEMENTALES PROPAGEES PAR SEMIS ET DES ESPECES INDUSTRIELLES NOTAMMENT A L'OBTENTION D'UNE VARIETE PREDETERMINEE DE BRASSICA NAPUS ET DE SEMENCES DE CETTE VARIETE.

Description

La présente invention concerne un procédé d'hybridation utilisant une

combinaison de stérilité-mâle cytoplasmique et de tolérance aux herbicides attribuable uniquement aux gènes nucléaires. Les spécialistes des sciences végétales savent depuis

de nombreuses années que l'hybridation de plantes très pro-

ches peut produire une descendance présentant une combinai-

son de caractères souhaitables que les plantes parentes possédaient auparavant séparément. Egalement, les hybrides de diverses plantes cultivées possèdent souvent une vigueur

ou hétérosis contribuant notablement au rendement des cul-

tures et ayant donc une importance économique considérable.

Comme les plantes choisies pour les études d'hybrida-

tion sont habituellement capables de présenter a la fois une autopollinisation et une pollinisation croisée, ie croisement désiré a souvent été difficile à réaliser de

façon fiable lorsqu'on opère à une échelle industrielle.

Par conséquent, il faut réaliser une pollinisation croisée

contrôlée essentiellement en l'absence d'autopollinisation.

Une technique couramment utilisée à ce jour pour atteindre

cet objectif est l'emploi de plantes mâle-stériles cytoplas-

miques comme parent porte-graine qu'on cultive sous forme d'une population essentiellement uniforme à côté d'une autre population essentiellement uniforme de plantes dont dérive le pollen. Cette technique a nécessité une surveillance précise des diagrammes de mise en culture, un transfert suffisant de pollen d'un bloc de plantes à un autre et la surveillance précise de la récolte des semences pour éviter

le mélange de deux semences produites différentes.

Le brevet US 3 842 538 décrit un procédé de production de semences hybrides de céréales dans lequel on propose la culture conjointe du parent mâle-stérile cytoplasmique et 2s9S032 du parent pollinisateur. Les semences capables de former des plantes hybrides sont ensuite séparées des semences non hybrides en fonction de la couleur. Cette technique de séparation des semences demeure cependant malaisée et il ne semble pas qu'elle ait été commercialisée. Voir également

les articles de D.E. Falk, K.J. Kasha et E. Reinbergs figu-

rant dans Proceedings of the Fourth International Barley Genetics Symposium, 22-29 juillet 1981 (Edinburg University

Press), pages 778 à 785 et de D.E. Falk et K.J. Kasha figu-

rant dans Crop Science, vol. 22, mars-avril 1982, page 450 o une relation étroite entre la stérilité-mâle génétique

et la rétraction de l'endosperme est exposée. Voir égale-

ment le brevet US 4 351 130 qui décrit un procédé pour la - production de céréales dans lequel des parents mâles de

grande taille et des parents femelles de petite taille peu-

vent être cultivés dans la même zone de culture et les

parents mâles sont détruits après la pollinisation.

Bien que dans le passé l'adoption de diverses techni-

ques bien connues d'hybridation ait eu un succès considéra-

_ 20 ble, il reste néanmoins nécessaire de trouver d'autres voies d'hybridation moins malaisées, plus efficaces ou améliorées d'autre façon. De plus pour de nombreuses plantes cultivées, malgré la poursuite des recherches par des spécialistes des sciences végétales travaillant dans le monde entier, on ne 25. dispose pas d'une technique d'hybridation applicable à

l'échelle industrielle.

Un exemple de plante cultivée pour laquelle on ne dis-

pose pas encore à l'échelle industrielle de semences permet-

tant d'obtenir des plantes hybrides est le colza (ou la

navette) (c'est-à-dire Brassica napus ou Brassica campes-

tris). Bien que le grand public l'ignore parfois, le colza

(et en particulier ses variétés de qualité supérieure tel-

les que le canola) est une plante cultivée dans de nombreu-

ses parties du monde, dont l'importance comme plante oléa-

gineuse est croissante et qui est à l'origine de la farine de colza. L'huile peut être utilisée comme huile végétale de qualité supérieure et la farine peut être utilisée

comme concentré protéinique nutritif pour le bétail.

L'importance du colza comme culture agronomique est exposée dans (1) Highlights of Agricultural Research in Ontario, Décembre r982, pages 1819 dans un article de W.D.Beversdorf et David J. Hume, intitulé "Canola: A New Oilseed Crop for Ontario" et dans (2) l'Ontario Ministry of Agriculture and Food Factsheet n 82-017, février 1982'intitulé "Spring

Canola in Ontario" par D.J. Hume, R.J. McLaughlin et W.D.

Beversdorf. -

Des publications caractéristiques des travaux de re-

cherches dans le domaine de la technologie du colza, ayant mis en évidence la stérilité-mâle cytoplasmique des plants de colza, figurent ci- dessous: Bannerot, H., Boulidard, I., Cauderon, Y., et Tempe, J., "Cytoplasmic Malie Sterility Transfer From Raphanus to Brassica," Proc. Eucarpia Meeting Cruciferae Vegetable

Crop, Sect. 25:52-54 (1974).

Bartkowiak-Broda, I., Rousselle, P., et Renard,M., "Inves-

tigation of Two Kinds of Cytoplasmic Male Sterility in Rape (Brassica napus L.), "Genet. Polon. 20:487-497

(1979).

Ohkawa, Y., Shiga, T., et Ishige, T., "Male Sterility-

Inducing-Cytoplasm in Brassica compestris var. rapifera, Annual Report, Division of Genetics, Dept. of Physiol. and Genetics,Nat. Inst. of Agric. Sciences, Kannondai,

Yatabe, Tsukuba, Japon, pp. 30-31 (1979).

Palmer, J.D., Shields, C.R., Cohen, D.B., et Orton, T.J., "An Unusual Mitochondrial DNA Plasmid in the Genus

Brassica," Nature 301:725-728 (1983).

Rousselle, P., et Renard, M., "Intérêt du Cultivar <"Bronowski>>pour l'obtention de plantes mT'le-stériles cytoplasmiques chez le colza (Brassica napus L.),

"Agronomie 2 (10):951-956 (1982).

Shiga, T., "Studies on Heterosis Breeding Using Cytoplasmic

Male Sterility in Rapeseed., Brassica napus L.", Bull.

Nat. Inst. Agric. Sci., Tokyo Series D. 27:75-85 (1976).

Shiga, T., "Cytoplasmic Male Sterility and Its Utilization for Heterosis Breeding in Rapeseed (Brassica napus L.)",

JARQ 10:177-182 (1976).

Shiga, T., "Male Sterility and Cytoplasmic Differentiation," Xhapter 12 in Brassica Crops and Wild Allies-Biology

and Breeding, Japan Sci. Soc. Press, Tokyo, pp. 205-

221 (1980).

Thompson, K.F., "Cytoplasmic Male-Sterility in Oil-Seed

Rape," Heredity 29(2):253-257 (L972).

Vedel, F., Mathieu, C., Lebacq, P., Ambard-Bretteville, F., et Remy, R., "Comparative Macromolecular Analysis of the Cytoplasms of Normal and Cytoplasmic Male Sterile

Brassica napus," Theor. Appl. Genet. 62:255-262 (1982).

On a également établi dans le passé que la lutte contre les mauvaises herbes est importante pour les cultivateurs de colza. Les mauvaises herbes, lorsqu'elles se développent

réduisent le rendement final et peuvent diminuer notable-

ment la qualité en raison de la contamination inevitable par diverses graines récoltées avec la plante cultivée désirée. Pour résoudre le problème des mauvaises herbes, diverses variétés de colza présentant une tolérance aux

herbicides ont été proposées, de façon à ce que les mauvai-

ses herbes indésirables puissent être éliminées efficace-

ment, même lorsqu'elles poussent à proximité des plants

de colza. Voir à cet égard "Transfer of Cytoplasmically-

Inherited Triazine Resistance From Bird's Rape to Cultiva-

ted Oilseed Rape (Brassica campestris and B. napus) par W.D. Beversdorf, J. Weiss-Lerman, L.R. Erickson et V. Souza Machado dans le Canadian Journal of Genetics and Cytology, volume XXII, n 2, juin 1980, pages 167172. Voir également "Uniparental Inheritance of Chloroplast Atrazine Tolerance in Brassica Compestris" par V. Souza Machado, J.D. Bandeen,

G.R. Stepheson et P. Lavigne, Can. J. Plant Sci., 58: 977-

981, 1978.

Dans notre brevet US 4 517 763 intitulé "Hybridization

Process Utilizing a Combination of Cytoplasmic Male Steri-

lity and Herbicide Tolerance", un procédé d'hybridation dans lequel la culture conjointe des parents est rendue

possible est décrit. Cette description a de plus été publiée

comme la demande de brevet GB 2 139 466A le 14 novembre 1984.

De plus, on a établi que les spécialistes des sciences végétales peuvent identifier des plantes présentant une tolérance aux herbicides attribuable uniquement aux gènes

nucléaires. Voir, par exemple, les publications caractéris-

tiques suivantes dans ce domaine: Rogers, S.G., Braud, L.A., Holder, S.B., Sharps, E.S. et Brackin, M.J., "Amplification of the AroA Gene from Escherichia Coli Results in Tolerance to Herbicide Glyphosate", Applied and Environmental Microbiology,

46 (1):37-43 (1983).

Chaleff, R.S. et Ray, T.B., "Herbicide-Resistant Mutants from Tobacco Cell Cultures", Science, 223:1147-1150

(1984).

Singer, S.R. et McDaniel, C.N., "Selection of Amitrole Tolerant Tobacco Calli and the Expression of this Tolerance in Regenerated Plants and Progeny",

Theor. Appl. Genet., 67:427-432 (1984).

Singer, S.R. et McDaniel, C.N., "Selection of Glyphosate-

Tolerant Tobacco Calli and the Expression of this Tolerance in Regenerated Plants", Plant Physiol.

78:411-416 (1985).

Comai, L., brevet US 4,535,060, "Inhibition Resistant 5-

Enolpyruvyl-3-Phosphoshickimate Synthetase, Production

and Use" (1985).

Voir également notre demande de brevet français dé-

posée cemême jour et portant le titre "Pro_édé d'hybrida-

tion utilisant une combinaison de stérilité-mâle cytoplas-

mique aux herbicides et une tolérance aux herbicides attri-

buable uniquement à des gènes nucléaires et semences de

Brassica napus pour la mise en oeuvre du procédé".

Un des buts de l'invention est de fournir un procédé amélioré d'hydridation pour former une variété hybride prédéterminée d'un végétal cultivé: - dans lequel le végétal cultivé est capable de subir à la fois une autopollinisation et une pollinisation croisée; - dans lequel le végétal cultivé est capable de subir à la fois une autopollinisation et une pollinisation croisée et le parent porte-graine est à stérilité-mâle cytoplasmique et le parent pollinisateur peut, de façon pratique, être cultivé conjointement avec le parent porte-graine pendant un stade du procé'dé sans qu'un diagramme de culture précis, avec les inconvénients qui lui sontassociés, soit nécessaire

pour l'emploi dans la formation d'une variété hybride pré-

déterminée d'une plante cultivée dans laquelle la féconda-

tion croisée des plantes mâle-stériles cytoplasmiques avec des plantes d'entretien peut facilement être effectuée; - dans lequel le végétal cultivé est capable de subir une autopollinisation et une pollinisation croisée afin que le produit désiré puisse être formé de façon fiable; dans lequel le végétal cultivé est capable de subir une autopollinisation et une pollinisation croisée et peut être utilisé de façon économique à une échelle industriellement intéressante; - dans lequel le végétal cultivé est capable de subir une autopollinisation et une pollinisation croisée et le produit désiré, dans un modedE réalisation préféré, présente de plus une tolérance aux herbicides permettant facilement

de détruire sélectivement les mauvaises herbes gênantes pous-

sant dans la zone de culture de l-hybride; et - qui convient particulièrement bien à la formation d'une variété hybride prédéterminée de colza (par exemple Brassica napus) et constitue donc une voie industrielle de formation

d'un colza hybride.

L'invention a également pour but de fournir de nou-

velles semences utiles de Brassica napus appropriées pour

la mise en oeuvre du procédé de l'invention.

L'invention a également pour but de fournir des semences de Brassica napus capables de former des plants hybrides F1 de colza présentant une tolérance pour au moins

un herbicide attribuable uniquement à des gènes nucléaires.

D'autres caractéristiques et avantages de l' invention

ressortiront de la description qui suit.

Selon l'invention, un procédé amélioré pour former

une population essentiellement homogène d'individus, ap-

partenant à une variété hybride prédéterminée d'une plante cultivée capable de subir une autopollinisation et une pol- linisation croisée, consiste à:

(a) cultiver dans une première zone de culture une popula-

tion pratiquement aléatoire de (1) des plantes mâle-sté-

riles cytoplasmiques qui présentent une tolérance pour au

moins un herbicide attribuable uniquement à des gènes nucléai-

res homozygotes dominants et (2) des plantes mâle-fertiles

capables de polliniser les plantes mâle-stériles cytoplas-

miques et qui sont dépourvues de la tolérance à l'herbicide par suite de la présence de gènes nucléaires homozygotes

récessifs pour ce caractère, si bien que les plantes mâle-

stériles cytoplasmiques (1) et les plantes mâle-fertiles (2)

sont pollinisées avec le pollen dérivé des plantes mâle-

fertiles, et des graines sont formées sur les plantes mâle-

stériles cytoplasmiques et sur les plantes mâle-fertiles, (b) récolter ensemble les graines formées sur les plantes de la première zone de culture, (c) cultiver au moins une portion des graines du stade (b) dans une seconde zone de culture en l'absence de ségrégation

entre les graines dérivées des plantes mâle-stériles cyto-

plasmiques présentant la tolérance aux herbicides attribua-

ble uniquement aux gènes nucléaires homozygotes dominants et des plantes mâle-fertiles dépourvues de la tolérance aux herbicides par suite de la présence de gènes nucléaires homozygotes récessifs pour ce caractère, et

(d) mettre en contact, avant la pollinisation, la quasi-

totalité des plantes présentes dans la seconde zone de culture avec un herbicide qui est efficace pour détruire les plantes provenant des graines formées sur les plantes mâle-fertiles de la première zone de culture afin de former une population pratiquement homogène d'une variété hybride prédéterminée provenant des graines formées sur les plantes

mâle-stériles de la première zone de culture.

On a trouvé qu'un procédé amélioré pour produire des

semences capables de former une variété hybride prédéter-

minée d'une plante cultivée capable de subir une autopolli-

nisation et une pollinisation croisée consiste à: (a) cultiver dans une zone de culture une population prati-

quement aléatoire de (1) des plantes mâle-stériles cyto-

plasmiques présentant une tolérance pour au moins un herbi-

cide attribuable uniquement aux gènes nucléaires et (2) des plantes mâlefertiles capables de polliniser les plantes mâle-stériles cytoplasmiques et qui sont dépourvues de la tolérance aux herbicides par suite de l'absence des gènes nucléaires requis pour ce caractère, si bien que les plantes mâle-stériles cytoplasmiques (1) sont pollinisées avec le pollen dérivé des plantes mâle-fertiles (2),

(b) mettre en contact, après la pollinisation, la quasi-

totalité des plantes présentes dans la zone de culture avec un herbicide qui est efficace pour détruire les plantes

mâle-fertiles et qui est inefficace pour détruire les plan-

tes mâle-stériles cytoplasmiques par suite de la tolérance aux herbicides attribuable uniquement aux gènes nucléaires, et

(c) récolter les graines des plantes mâle-stériles cyto-

plasmiques qui sont capables de former les plantes hybrides

pratiquement en l'absence des graines des plantes mâle-

fertiles qui ont été initialement cultivées dans la zone

de culture.

On a trouvé qu'un procédé amélioré pour produire une population pratiquement homogène de plantes d'une variété hybride prédéterminée d'une plante cultivée capable de subir une autopollinisation et une pollinisation croisée consiste à:

(a) cultiver dans une première zone de culture une popula-

tion pratiquement aléatoire de (1) des plantes mâle-stériles cytoplasmiques qui présentent une tolérance pour au moins un premier herbicide qui est attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes et qui présenteune tolérance pour au moins un second herbicide qui est attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes différents

et (2) des plantes mâle-fertiles qui sont des plantes d'en-

tretien homozygotes récessives pour les plantes mâle-stériles cytoplasmiques et qui sont dépourvues de la tolérance aux herbicides pour le ou les premiers herbicides par suite de l'absence des gènes nucléaires que nécessite ce caractère

- et qui présentent une tolérance pour le ou les seconds her-

bicides attribuable uniquement aux gènes nucléaires homo-

zygotes, si bien que les plantes mâle-stériles cytoplasmi-

ques (1) et les plantes d'entretien sont pollinisées avec le pollen provenant des plantes d'entretien, et des graines sont formées sur les plantes mâle-stériles cytoplasmiques et sur les plantes d'entretien, (b) récolter en vrac les graines formées sur les plantes de la première zone de culture, (c) cultiver dans une seconde zone de culture une population pratiquement aléatoire de plantes dérivées des graines

récoltées dans le stade (b) avec des plantes de rétablisse-

ment de la fertilité homozygotes dominantes pour les plantes mâlestériles cytoplasmiques qui présentent une tolérance

aux herbicides pour le ou les premiers herbicides attribua-

ble uniquement aux gènes nucléaires homozygotes et sont dépourvues de tolérance pour le ou les seconds herbicides par suite de l'absence des gènes que nécessite ce caractère,

(d) mettre en contact, avant la pollinisation, la quasi-

totalité des plantes présentes dans la seconde zone de culture avec le premier herbicide qui est efficace pour détruire les plantes résultant des graines formées sur les plantes d'entretien dans le stade (a), si bien que les

plantes mâle-stériles cytoplasmiques et les plantes de ré-

tablissement demeurent, (e) polliniser les plantes mâle-stériles cytoplasmiques et les plantes de rétablissement du stade (d) avec le pollen dérivé des plantes de rétablissement et former des graines sur les plantes mâle-stériles cytoplasmiques et sur les plantes de rétablissement, (f) récolter en vrac les graines formées sur les plantes demeurant dans la seconde zone de culture,

(g) cultiver dans une troisième zone de culture une popula-

tion pratiquement aléatoire de plantes dérivées des graines récoltées dans le stade (f) et

*5 (h) mettre en contact la quasi-totalité des plantes présen-

tes dans la troisième zone de culture avec le second herbi-

cide qui est efficace pour détruire les plantes résultant des graines formées sur les plantes de rétablissement du stade (e) pour former ainsi une population pratiquement homogène de plantes hybrides F1 male-fertiles d'une variété prédéterminée.

On a trouvé également qu'un procédé amélioré pour pro-

duire des semences capables de former une variété hybride prédéterminée d'une plante cultivée capable de subir une autopollinisation et une pollinisation croisée consiste à:

(a) cultiver dans une première zone de culture une popula-

tion pratiquement aléatoire de (1) des plantes mâle-stériles cytoplasmiques qui présentent une tolérance pour au moins un premier herbicide qui est attribuable uniquement à des

gènes nucléaires homozygotes et qui présentent une tolé-

rance pour au moins un second herbicide qui est attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes différents et

(2) des plantes mâle-fertiles qui sont des plantes d'entre-

tien homozygotes récessives pour les plantes mâle-stériles cytoplasmiques et qui sont dépourvues de la tolérance aux herbicides pour le ou les premiers herbicides par suite de l'absence des gènes nucléaires que nécessite ce caractère

et qui présentent une tolérance pour le ou les seconds her-

bicides qui est attribuable uniquement aux gènes nucléaires h o m o z y g o t e s, s i b i e n q u e - 1 e s plantes mâle-stériles c y t o p 1 a s m i q u e s (1) et les plantes d'entretien sont pollinisées avec du pollen dérivant des plantes d'entretien, et des graines sont formées sur les plantes mâle-stériles cytoplasmiques et sur les plantes d'entretien, (b) récolter en vrac les graines ainsi formées sur les plantes de la première zone de culture, (c) cultiver dans une seconde zone de culture une population pratiquement aléatoire de plantes dérivées des graines

recueillies dans le stade (b) avec des plantes de rétablisse-

ment de la fertilité homozygotes, dominantes pour les plan-

tes mâle-stériles cytoplasmiques, qui présentent une tolé- rance aux herbicides pour le ou les premiers herbicides attribuable uniquement aux gènes nucléaires homozygotes et qui sont dépourvues de tolérance pour le ou les seconds herbicides par suite de l'absence des gènes nucléaires que nécessite ce caractère,

(d) mettre en contact avant la pollinisation la quasi-

totalité des plantes présentes dans la seconde zone de cul-

ture avec le premier herbicide qui est efficace pour détruire les plantes résultant des graines formées sur les plantes

d'entretien dans le stade (a) pour que les plantes mâle-

stériles cytoplasmiques et les plantes de rétablissement demeurent, (e) polliniser lesdites plantes màle-stériles cytoplasmiques et les plantes de rétablissement du stade (d) avec le pollen dérivant des plantes de rétablissement, (f) mettre ensuite en contact la quasi-totalité des plantes restantes présentes dans la seconde zone de culture avec le second herbicide qui est efficace pour détruire les plantes de rétablissement et qui est inefficace pour détruire les

plantes mâle-stériles cytoplasmiques par suite de la tolé-

rance aux herbicides attribuable uniquement aux gènes nucléaires homozygotes, et

(g) récolter les graines des plantes mâle-stériles cytoplas-

miques capables de former des plantes hybrides F1 pratique-

ment en l'absence des graines des plantes d'entretien et de rétablissement qui ont initialement poussé dans la seconde

zone de culture.

On fournit des semences de Brassica napus constituées d'un ensemble pratiquement homogène de semences qui par culture fournissent des plants de colza présentant une combinaison de stérilité-mâle cytoplasmique et de tolérance à au moins un herbicide attribuable uniquement à des gênes

nucléaires dominants homozygotes.

On fournit des semences de Brassica napus constituées d'un mélange essentiellement homogène de semences qui, par culture, fournissent des plants de colza qui présentent une combinaison de stérilité-màle cytoplasmique et de tolérance à au moins un herbicide attribuable uniquement à des gènes

nucléaires homozygotes récessifs.

On fournit des semences de Brassica napus constituées d'un mélange binaire pratiquement homogène de semences qui, par culture, fournissent:

(1) un premier colza présentant une stérilité-mâle cytoplas-

mique et une tolérance pour au moins un herbicide qui est attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes dominants, et (2) un second colza, capable de polliniser le premier colza, qui est une plante d'entretien homozygote récessive de la stérilité-mâle cytoplasmique du premier colza et qui est dépourvu de la tolérance aux herbicides par suite de la présence de gènes nucléaires homozygotes récessifs pour ce

caractère.

On fournit des semences de Brassica napus constituées d'un mélange binaire pratiquement homogène de semences qui par culture fournissent:

(1) un premier colza présentant une stérilité-male cytoplas-

mique et une tolérance pour au moins un herbicide qui est attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes dominants, et (2) un second colza, capable de polliniser le premier colza, qui est une plante d'entretien homozygote récessive de la stérilité-mâle cytoplasmique du premier colza et qui est dépourvu de la tolérance aux herbicides par suite de la présence de gènes nucléaires homozygotes récessifs pour ce caractère. On fournit des semences de Brassica napus constituées d'un mélange binaire pratiquement homogène de semences qui par culture fournissent:

(1) un premier colza présentant une stérilité-maie cytoplas-

mique et une tolérance pour au moins un herbicide qui est attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes récessifs, et (2) un second colza, capable de polliniser le premier colza, qui est une plante homozygote dominante de rétablissement de la fertilité du premier colza et qui est dépourvu de la tolérance aux herbicides par suite de la présence de gènes

nucléaires homozygotes dominants pour ce caractère.

On fournit des semences de Brassica napus constituées d'un mélange binaire pratiquement homogène de semences qui par culture fournissent:

(1) un premier colza présentant une stérilité-mâle cytoplas-

mique et une tolérance pour au moins un herbicide qui est attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes récessifs, et (2) un second colza, capable de polliniser le premier colza, qui est une plante homozygote dominante de rétablissement de la fertilité du premier colza et qui est dépourvu de la tolérance aux herbicides par suite de la présence de gènes

nucléaires homozygotes dominants pour ce caractère.

On fournit des semences de Brassica napus constituées d'un ensemble pratiquement homogène de semences qui, par

culture, fournissent des plants de colza hybrides F1, male-

fertiles qui possèdent une tolérance pour au moins un her-

bicide attribuable uniquement à des gènes nucléaires.

Les modes de réalisation préférés de l'invention vont

maintenant être décrits.

Le principe d'hybridation de l'invention semble s'appliquer de façon générale à la formation d'une variété prédéterminée d'une plante cultivée quelconque capable de

subir une autopollinisation et une pollinisation croisée.

En ce qui concerne l'invention, on considère qu'une hybri-

dation se produit lorsque les deux plantes parentes subis=-.

sant la pollinisation croisée ne sont pas identiques du point de vue nucléaire et cytoplasmique. Par conséquent, on considère qu'une graine capable de former une plante hybride

résulte de la fécondation d'une plante mâle-stérile cyto-

plasmique par le pollen soit d'une plante d'entretien, soit

d'une plante de rétablissement capable de la polliniser.

On peut former selon le procédé de l'invention une variété hybride prédéterminée d'une plante à grains, d'une plante fourragère, d'une plante à fruits propagée par semis, d'une plante ornementale propagée par semis ou d'une espèce industrielle, etc. Selon l'invention, les plantes à grains sont celles qui sont cultivées principalement pour leurs graines et les plantes fourragères sont celles qui sont cultivées principalement pour la consommation des parties autres que les graines telles que les feuilles ou d'autres

structures végétatives.

Des exemples caractéristiques-des plantes à grains que l'on peut hybrider selon le procédé de l'invention compren-

nent les céréales (par exemple le blé, l'avoine, l'orge, le seigle, le mais, le triticale, le sorgIo, etc.), les légumineuses (par exemple les féveroles, les pois, les arachides, les lentilles) et les plantes oléagineuses (par exemple le lin, la moutarde, le carthame, le tournesol, le soja, le colza, etc.). Des exemples des plantes fourragères que l'on peut hybrider selon le procédé de l'invention comprennent la luzerne, les betteraves sucrières, les oignons, les poivrons, les pommes de terre propagées par semis, les navets, les choux, les brocolis, le brome, etc. Des exemples des plantes à fruits propagées par semis que

l'on peut hybrider selon le procédé de la présente inven-

tion comprennent les tomates, les poivrons, les pastèques, etc. Des exemples des plantes ornementales propagées par semis que l'on peut hybrider selon le procédé de la présente invention comprennent les pétunias, les soucis, etc. Des exemples caractéristiques des espèces industrielles que

l'on peut hybrider selon le procédé de l'invention compren-

nent les peupliers, les érables, le cotonnier, le lin textile, le tabac, le varech, etc.

Le procédé de la présente invention convient particu-

lièrement bien à la formation d'une variété hybride d'une plante cultivée de la famille des Brassicaceae qu'on appelle parfois famille des Cruciferae ou famille de la moutarde. Dans cette famille on peut choisir plus particulièrement une plante cultivée du genre Brassica (par exemple une variété hybride de colza ou navette appelée Brassica napus ou Brassica campestris). Chacune des espèces précitées existe en une variété de printemps et une variété d'hiver. Les formes de qualité supérieure du colza que l'on utilise principalement comme source d'huile végétale et de farine de colza (un

concentré protéinique pour le bétail) sont couramment ap-

pelées canola. Par exemple, le terme canola est souvent ap-

pliqué à un colza de qualité supérieure à faible teneur en acide érucique (moins de 5%) et en glucosinolates (moins de 3 mg/g de farine déshuilée). Sinon, on peut utiliser le colza pour produire des lubrifiants, des peintures, des vernis et

* des matières plastiques selon des techniques connues.

Dans la mise en oeuvre du procédé de l'invention, il

est nécessaire de choisir une plante parente femelle présen-

tant une combinaison de stérilité-mâle cytoplasmique et de tolérance aux herbicides attribuable uniquement à des gènes nucléaires. Selon l'invention, on considère qu'une plante est mâle-stérile lorsqu'elle est incapable de libérer du pollen fonctionnel (c'est-à-dire lorsqu'elle est incapable

in situ de féconder un ovule). Dans tous les cas, la stéri-

lité-mâle doit se manifester par suite de la présence du type spécifique de cytoplasme. Il est de plus généralement habituel, lorsqu'on forme des plantes à graines cultivées,

que les plantes mâle-stériles cytoplasmiques soient capa-

bles de former les graines qui fournissent des plantes hybrides entièrement fertiles après pollinisation par une source de pollen présentant des gènes de rétablissement de la fertilité homozygotes dominants qui sont capables d'interaction avec le cytoplasme. Les plantes mâle-stériles cytoplasmiques doivent être capables de former des graines produisant des plantes mâle-stériles cytoplasmiques après pollinisation avec une source de pollen dépourvue des gènes

dominants de rétablissement de la fertilité.

Selon l'invention, on considère qu'une plante pos-

sède une tolérance cytoplasmique aux herbicides lorsqu!elle est capable de résister à un herbicide donné en remplissant

ses fonctions végétales normales. Dans tous les cas, la tolé-

q rance aux herbicides utilisés dans la pratique de l'invention.

doit être attribuable uniquement à des gènes nucléaires. Par contre les plantes qui ne possèdent pas cette tolérance aux herbicides sont fortement altérées ou détruites dans les mêmes conditions. Cette absence de tolérance aux herbicides

peut également se manifester par l'inhibition de la germi-

nation des graines, si bien que la plante potentielle est détruite en un stade très précoce de son développement. Dans un mode de réalisation préféré, la tolérance aux herbicides est attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes dominants. Dans un autre mode de réalisation, dans lequel

les plantes parentes indésirables sont détruites immédiate-

ment, après la pollinisation et o il n'est pas essentiel

que la variété hybride obtenue présente également cette tolé-

rance aux herbicides, la tolérance aux herbicides est attri-

buable uniquement à des gènes nucléaires hétérozygotes do-

minants. Dans un autre mode de réalisation, la tolérance

aux herbicides est attribuable uniquement à des gènes nu-

cléaires recessifs homozygotes de ce caractère. Dans la plu-

part des cas, la tolérance aux herbicides est conférée par

une paire unique de gènes; cependant, la tolérance aux herbi-

cides attribuable uniquement à plus d'une paire de gènes

peut être utilisée.

Le mode d'action de l'herbicide particulier employé dans le procédé de l'invention peut varier beaucoup, tant que l'élimination requise des plantes indésirables peut être

effectuée sélectivement sans altération excessive des plan-

tes tolérantes aux herbicides dans le stade approprié du procédé. On doit employer un herbicide dont l'innocuité d'emploi en agriculture est établie. L'herbicide employé dans la mise en pratique du procédé de l'invention peut être choisi dans une grande diversité de catégories d'herbicides, dans la mesure o on l'utilise avec des plantes qui possèdent les gènes nucléaires nécessaires pour conférer la tolérance nécessaire aux herbicides. Des composés représentatifs parmi lesquels on peut choisir les herbicides sont les suivants: les composés carboxyliques aliphatiques (par exemple l'acide trichloroacétique, le dalapon, etc.), les amides et les amides acides (par exemple l'alachlor, le métolachlor, etc.),

les composés benzo!ques (par exemple le dicamba, le chloram-

ben, etc.), les bipyridyliums (par exemple le paraquat, le diquat, etc.), les carbamates (par exemple le barban, le desmedipham, etc.), les cyclohexanones (par exemple le sethoxydim, etc.), les dinitro-anilines (par exemple le trifluralin, l'oryzalin, etc.), les éthers diphényliques (par exemple l'acifluorfen, le nitrofen, etc.), les dérivés de

glycine (par exemple le glyphosate parfois appelé phospho-

nométhylglycine, etc.), les imidazolinones (par exemple l'imazaquine, etc. ), les nitriles (par exemple le bromoxynil, l'ioxynil, etc.), les phénols (par exemple le dinofeb, etc.), les composés phénoxycarboxyliques (par exemple le 2,4-D, le

MCPA, etc.), les composés de type phénoxy-phénoxy et appa-

rentés (par exemple le diclofop, le fluazifop), les pyridines

(par exemple le picloram, le clopyralid, etc.), les pyri-

midines (par exemple le bromicil, le terbicil, etc.), les sulfonylurées (par exemple le chlorsulfuron, le sulfometuron méthyle, etc.), les thiocarbamates (par exemple l'EPTC, le butylate, etc.), les triazines (par exemple l'atrazine, la simazine, le metribuzin, etc.) les urées (par exemple le

diuron, le linuron, etc.), l'amitrole et le bentazon.

Les herbicides préférés sont les sulfonylurées, les dérivés de la glycine et les imidazolinones. Dans un mode de réalisation particulièrement préféré l'herbicide choisi est le chlorsulfuron qui semble agir par inhibition du

métabolisme des amino-acides. Un tel herbicide est commercia-

lisé par DuPont Chemical Company sous le nom de marque GLEAN. Dans un autre mode de réalisation particulièrement

préféré, l'herbicide est le glyphos-ate (phosphonométhyl-

glycine). Cet herbicide est commercialisé par Monsanto Cor-

poration sous le nom de marque ROUNDUP. Egalement l'amitrole et le bentazon peuvent être utilisés avantageusement comme

herbicides dans le présent procédé.

L'herbicide peut être appliqué de façon classique avant

ou après la pollinisation. Avant la pollinisation, l'herbi-

cide peut être appliqué aux graines à l'état de pré-levée de façon à empêcher la germination ou aux jeunes pousses

dans le stade de post-levée qui suit la germination (c'est-

à-dire au stade précédant l'anthèse). Sinon, l'herbicide peut être appliqué à des plantes plus âgées. L'herbicide

peut être appliqué à la totalité de la plante ou à des par-

ties de la plante, telles que les racines par l'intermé-

diaire du sol, les feuilles et les tiges, etc. Dans la plupart des cas, il est recommandé d'appliquer l'herbicide par pulvérisation du feuillage à la dose indiquée par son fabricant. Cependant, la dose optimale d'application d'un herbicide donné peut être déterminée par des expériences simples.

Les plantes parentes femelles mâle-stériles cltoplas-

miques clés utiles dans le procédé de l'invention peuvent être obtenues selon l'une quelconque des nombreuses voies

dont disposent les spécialistes des sciences végétales.

Habituellement, on isole des plantes mâle-fertiles ayant la tolérance requise aux herbicides attribuable uniquement aux gènes nucléaires et on transfère ensuite cette tolérance aux herbicides à des plantes qui possèdent le cytoplasme requis pour conférer la stérilité-mâle. Par exemple, on peut - ' soumettre des populations importantes de plantes à l'action 0 d'un herbicide donné pour sélectionner les plantes qui, par

une variation génétique spontanée, possèdent les gènes nu-

cléaires nécessaires pour conférer une tolérance aux herbi-

cides. Sinon la tolérance requise aux herbicides peut être produite par une sélection in vitro à partir d'un milieu de culture tissulaire qui comprend l'herbicide dont l'emploi est envisagé dans le procédé. Cette sélection in vitro peut être effectuée selon des techniques connues au niveau du protoplaste, au niveau d'une culture en suspension, au niveau d'une culture de cal, au niveau d'une culture de micropores, etc. Des mutagènes peuvent être éventuellement employés pour favoriser la variation génétique des plantes évaluées. Sinon, dès que les gènes requis sont identifiés,

ils peuvent être transférés au parent femelle par applica-

tion des techniques de génie génétique. Voir par exemple "Cloning of Herbicide Resistance Into and Out of Plants" par B.J. Mazur, C.F. Chui, S. C. Falco, R.S. Chaleff et

C.J. Mauvais, Biotech '85 USA, Online Publications, pp 97-

108 (1985) qui est incorporé ici à titre de référence. Dans

tous les cas, la source nucléaire de la tolérance aux her-

bicides peut être confirmée par l'observation du mode de transmission de la tolérance aux générations suivantes. Le caractère agronomique des plantes tolérantes aux herbicides

est habituellement amélioré par l'hybridation et la sélec-

tion selon des techniques standard de culture.

Les plantes d'entretien qui sont capables de polliniser les plantes présentant la stérilité-male cytoplasmique

doivent nécessairement être des plantes d'entretien homozy-

gotes en ce qui concerne les gènes rétablissant la fertilité récessifs qui interagissent avec le cytoplasme requis. Elles doivent également être dépourvues de tolérance vis-à-vis de l'herbicide que peuvent tolérer les plantes mâle-stériles cytoplasmiques, cette tolérance étant attribuable uniquement aux gènes nucléaires. Les plantes d'entretien appropriées peuvent être cultivées simultanément à la recherche des

plantes mâle-stériles cytoplasmiques, car elles sont généra-

lement nécessaires pour confirmer facilement si le cyto-

plasme désiré est effectivement présent. Les plantes d'en-

tretien sélectionnées doivent posséder pratiquement le même

génotype nucléaire que les plantes mâle-stériles cytoplas-

miques, si ce n'est que les plantes d'entretien sont dépour-

vues des gènes nucléaires requis pour la tolérance aux herbicides lorsqu'on les cultive dans une zone de culture conjointe. L'introgression réglée de gènes récessifs de

rétablissement de la fertilité des plantes à stérilitê-

male partielle dans des cytoplasmes fertiles peut être effectuée. Ces mêle-stériles partiels sont hétérozygotes, car la moitié seulement des gamètes produits sont récessifs pour le gène de rétablissement de la fertilité. Les parents

mâles qui se sont révélés provoquer une stérilité-mâle cyto-

plasmique après une hybridation à grande échelle peuvent faire l'objet d'une recherche de la présence des gènes ré- cessifs de rétablissement de la fertilité. Egalement des populations naturellement récurrentes ont des cultivars

couramment cultivés peuvent être évaluées selon des techni-

ques connues de recherche de la présence de gènes récessifs

de rétablissement de la fertilité. Les propriétés agronomi-

ques des plantes clés peuvent être améliorées selon les

techniques bien connues de culture des plantes. La descen-

dance d'un croisement entre les plantes mâle-stériles cyto-

plasmiques et les plantes d'entretien présente toujours une stérilitémàle cytoplasmique et peut ou non présenter une tolérance aux herbicides selon que cette tolérance est attribuable à des gènes nucléaires dominants ou récessifs

d'un tel caractère. Dès qu'une plante d'entretien est loca-

lisée, il faut la multiplier par autopollinisation ou

éventuellement par propagation de clones. Comme il est évi-

dent pour le spécialiste de la culture des plantes, il existe plusieurs systèmes mâle-stériles cytoplasmiques différents disponibles dans Brassica napus, et un cultivar donné de colza peut être une plante d'entretien ou une plante de rétablissement selon le système choisi. On trouve des plantes d'entretien pour les systèmes cytoplasmiques POL et OGU dans pratiquement tous les cultivars de Brassica napus et, par conséquent, elles sont simples à identifier par des essais de croisement. Des plantes d'entretien pour

le système cgtoplasmique NAP ont été isolées dans les cul-

tivars Bronowski et Isuzunatane de Brassica napus. Des plantes d'entretien pour le système cytoplasmique CTR ont

été isolées dans le cultivar Bronowski de Brassica napus.

Les plantes de rétablissement sont capables de polli-

niser les plantes parentes femelles qui présentent une stérilité-mâle cytoplasmique et une tolérance aux herbicides attribuable uniquement à des gènes nucléaires. Il est facile

de se procurer les plantes de rétablissement et leur loca-

lisation nécessite peu de recherches. Ces plantes doivent

nécessairement être des plantes de rétablissement homozy-

gotes relativement aux gènes dominants de rétablissement de la fertilité qui interagissent avec le cytoplasme requis. Par suite du mode de transmission dominant, ces plantes sont souvent bien plus courantes que les plantes d'entretien dans

une population donnée de plantes. Ces plantes de rétablis-

sement lorsqu'on les cultive dans une zone de culture con-

jointe sont dépourvues de la tolérance aux herbicides qui est attribuable uniquement aux gènes nucléaires relativement

au même herbicide que pour les plantes mâle-stériles cyto-

plasmiques. Les plantes de rétablissement pour les systèmes cytoplasmiques POL et OGU peuvent être le cultivar Italy de Brassica napus et le cultivar Zem de Brassica juncea. Dans les systèmes cytoplasmiques NAP et CTR, la quasi-totalité des cultivars de Brassica napus sont-des plantes de rétablissement qui peuvent être facilement localisées par des essais de

croisement simple.

Le procédé de la présente invention présente l'avantage

d'un culture conjointe simple de (1) des plantes mâle-

stériles cytoplasmiques qui présentent une tolérance pour au moins un herbicide attribuable uniquement à des gènes

nucléaires et (2) des plantes mâle-fertiles qui sont capa-

bles de les polliniser et qui sont dépourvues de la tolé-

rance aux herbicides par suite de l'absence des gènes

nucléaires que nécessite ce caractère. Les plantes mâle-

fertiles peuvent être soit des plantes d'entretien soit des plantes de rétablissement comme précédemment exposé. Des techniques classiques de culture peuvent être utilisées pour former un mélange aléatoire des deux plantes. Il n'est pas nécessaire d'utiliser des quantités égales des deux types de semences. Par exemple, les semences capables de former les plantes mâle-stériles cytoplasmiques à tolérance aux

herbicides qui servent de parent porte graine peuvent habi-

tuellement être prépondérantes. Donc ces semences consti-

tuent habituellement 60 à 90 % ou plus de la quantité totale des graines mises en culture (c'est-à-dire des graines qui produisent les parents mâles et femelles). Par conséquent, une plante mâle-fertile peut couramment polliniser plus d'une plante parente femelle mâle-stérile. Comme il est apparent pour le spécialiste de la technologie de la production des

semences, les proportions relatives des deux types de plan-

tes parentes doivent être ajustées pour que l'on obtienne

le taux désiré de pollinisation de façon constante avec uti-

lisation de la quantité minimale des plantes parentes mâles

mâle-fertiles.

Dans la mise en pratique du procédé de l'invention, il faut choisir des plantes parentes respectives ayant des cycles de floraison qui se superposent. De plus, le procédé de l'invention repose sur les modes classiques de transfert de pollen (par exemple par les insectes pollinisateurs tels que les abeilles et/ou le vent). On peut également employer

les techniques classiques de récolte des plantes.

Dans un mode de réalisation préféré' du procédé, après

la mise en culture conjointe dans une première zone de cul-

ture de (1) des plantes mâle-stériles cytoplasmiques qui pré-

sentent une tolérance pour au moins un herbicide attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes dominants et

: 0 (2) des plantes mâle-fertiles qui sont capables de pollini-

ser lesdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques et qui sont dépourvues de tolérance aux herbicides par suite de la présence de gènes nucléaires homozygotes récessifs pour ce caractère, les plantes obtenues peuvent être amenées à maturité et les graines formées sur chacune des plantes constitutives peuvent être récoltées en vrac. Au moins une portion des graines ainsi produites peut ensuite être mise

en culture dans une seconde zone de culture sans ségréga-

tion pour former de nouvelles plantes auxquelles on applique

un herbicide avant la pollinisation pour obtenir une po-

pulation pratiquement uniforme d'une variété hybride pré-

déterminée qui résulte des graines formées sur les plantes mâle-stériles de la première zone de culture. Si les plantes mâle-fertiles présentes dans la première zone de culture

constituent des plantes de rétablissement, les graines for-

mées sur les plantes dans la seconde zone de culture peu-

vent être simplement récoltées et l'herbicide peut être ap-

pliqué classiquement par le cultivateur en association avec un programme de lutte contre les mauvaises herbes. Cependant, dans le mode de réalisation o la planté mâle de la première zone de culture est une plante d'entretien, on peut de façon

pratique cultiver, à une proximité permettant la pollinisa-

tion des plantes demeurant dans la seconde zone de culture

après l'application d'herbicide, une population essentielle-

ment homogène de plantes de rétablissement de la fertilité mâle. Les populations pratiquement homogènes respectives

peuvent de façon pratique être sous forme de rangs, de ban-

des ou de blocs alternés se prêtant à une récolte sélective.

Les semences capables de former une variété hybride F1 mâle-

fertile prédéterminée peuvent être recueillies sélectivement sur les plantes mâle-stériles cytoplasmiques de la seconde zone de culture. Les plantes de rétablissement, qui sont cultivées près de la seconde zone de culture, peuvent ou non

posséder une tolérance aux herbicides.

Dans un autre mode de réalisation préféré du procédé dans lequel l'herbicide est appliqué au stade suivant la

floraison à un mélange à deux composants de plantes culti-

vées de façon aléatoire, comprenant une plante d'entretien,

et les semences obtenues sont récoltées, les semences obte-

nues peuvent ensuite être mises en culture à une proximité permettant la pollinisation des plantes de rétablissement

qui pollinisent les plantes mâle-stériles cytoplasmiques.

Cette proximité permettant la pollinisation peut consister

en une culture conjointe de populations de plantes prati-

quement homogènes. Si l'on utilise une culture conjointe avec'des plantes de rétablissement, les plantes de rétablissement peuvent être

éliminées par l'herbicide après la pollinisationet la récolte sé-

lective à partir des plantes mâle-stériles cytoplasmiques restantes de semences capables de former les plantes

hybrides F1 est rendue possible.

Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, les plantes de maintien et les plantes de rétablissement

présentent toutes deux des tolérances à des herbicides dif-

férents, ces tolérances étant attribuables uniquement à des gènes nucléaires homozygotes différents (c'est-à-dire des gènes homozygotes dominants ou des gènes homozygotes réces- sifs) et les plantes mâlestériles cytoplasmiques sont tolérantes pour les deux herbicides. Après la pollinisation des plantes mâle-stériles cytoplasmiques avec le pollen provenant des plantes d'entretien, dans une première zone de culture aléatoire, les semences peuvent être recueillies et mises en culture dans une seconde zone de culture non ordonnée avec des semences capables de former les plantes de rétablissement. Après la pollinisation dans la seconde

zone de culture, les plantes résultant des semences prove-

nant des plantes d'entretien autopollinisées sont détruites

par application d'un herbicide. Ensuite, les plantes de ré-

tablissement sont détruites après la pollinisation ou lors de la génération suivante dans une troisième zone de culture par application d'un herbicide différent. Par exemple, les plantes d'entretien autopollinisées pourraient être détruites par application de chlorsulfuron ou de glyphosate et les plantes de rétablissement détruites par application de l'autre herbicide. L'hybride F1 obtenu est tolérant pour les mêmes herbicides sous réserve que les gènes que requiert

cette.tolérance y soient présents.

Dans encore un autre mode de réalisation particuliè-

rement préféré, les plantes mâle-stériles cytoplasmiques sont maintenues dans une zone de culture préliminaire o on cultive une population pratiquement uniforme des deux parents à une proximité permettant la pollinisation pendant une ou plusieurs générations, afin d'obtenir des semences formant les plantes mâle-stériles cytoplasmiques dans la première zone de culture. Dans ce mode de réalisation, les plantes d'entretien que l'on cultive dans la zone de

culture préliminaire possèdent la même tolérance aux herbi-

cides que les plantes mâle-stériles cytoplasmiques, cette tolérance étant attribuable uniquement aux mêmes gènes

nucléaires homozygotes. Par conséquent, on peut ainsi main-

tenir les plantes mâle-stériles cytoplasmiques pendant un certain nombre de générations sans ségrégation indésirable en ce qui concerne la tolérance herbicide requise dans un stade ultérieur du procédé. La présente invention fournit pour la première fois la possibilité de former des semences de Brassica napus constituées d'un ensemble pratiquement homogène de semences qui, par culture, fournissent des plants de colza présentant une combinaison de stérilité-mâle cytoplasmique et d'une tolérance aux herbicides attribuable uniquement à des gènes

nucléaires homozygotes (c'est-à-dire soit à des gènes homo-

zygotes dominants, soit à des gènes homozygotes récessifs).

Egalement des mélanges binaires de telles semences de Brassica napus avec des semences qui forment soit des plantes

d'entretien soit des plantes de rétablissement ayant la to-

lérance aux herbicides appropriés à la mise en pratique du procédé sont fournis. De plus, il est possible de former un ensemble pratiquement homogène de semences de Brassica napus qui, par culture, fournit des plants de colza hybrides F1

mâle-fertiles possédant une tolérance aux herbicides vis-à-

vis d'au moins un herbicide et attribuable uniquement à des facteurs nucléaires. Par conséquent, le cultivateur peut en pratique éliminer les mauvaises herbes avec un herbicide

approprié pendant la culture de la plante hybride.

Claims (70)

REVENDICATIONS

1. Procédé perfectionné pour former une population

pratiquement homogène de plantes d'une variété hydride pré-

déterminée d'une plante cultivée capable de subir une auto-

pollinisation et une pollinisation croisée, caractérisé en ce qu'il consiste à (a) cultiver dans une première zone de culture une population pratiquement aléatoire de (1) des plantes mâle-stériles cytoplasmiques qui présentent une tolérance pour au moins un herbicide attribuable uniquement à des gènes nucléaires

homozygotes dominants et (2) des plantes mâle-fertiles ca-

pables de polliniser les plantes mâle-stériles cytoplasmiques et qui sont dépourvues de la tolérance à l'herbicide par

suite de la présence de gène nucléaires homozygotes réces-

sifs pour ce caractère, si bien que les plantes mâle-stéri-

les cytoplasmiques (1) et les plantes mâle-fertiles (2)

sont pollinisées' avec le pollen dérivé des plantes mâle-

fertiles, et des graines sont formées sur les plantes. mâle-

stériles cytoplasmiques et sur les plantes mâle-fertiles.

(b) récolter ensemble les graines formées sur les plantes de la première zone de culture, (c) cultiver au moins une portion des graines du stade (b)

dans une seconde zone de culture en l'absence de ségréga-

tion entre les graines dérivées des plantes mâle-stériles

À 25 cytoplasmiques présentant la tolérance aux herbicides attri-

buable uniquement aux gènes nucléaires homozygotes domi-

nants et des plantes mâle-fertiles dépourvues de la tolé-

rance aux herbicides par suite de la présence de gènes nucléaires homozygotes récessifs pour ce caractère, et

(d) mettre en contact, avant la pollinisation, la quasi-

totalité des plantes présentes dans la seconde zone de culture avec un herbicide qui est efficace pour détruire les plantes provenant des graines formées sur les plantes mâle-fertiles de la première zone de culture, afin de

former une population pratiquement homogène d'une variété-

hybride prédéterminée provenant des graines formées sur

les plantes mâle-stériles de la première zone de culture.

2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ladite plante cultivée est choisie parmi les plantes cultivées à graines, les plantes fourragères, les plantes à fruits propagées par semis, les plantes ornementales

propagées par semis et les espèces industrielles.

3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la plante cultivée appartient à la famille des Brassicaceae.

4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé-en

ce que la plante cultivée appartient au genre Brassica.

5. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en

ce que la plante cultivée est Brassica napus.

6. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en

ce que la plante cultivée est Brassica campestris.

7. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que lesdites plantes mâle-fertiles (2) sont des plantes d'entretien homozygotes récessives pour lesdites plantes

mâle-stériles cytoplasmiques (1).

8. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que lesdites plantes mâle-fertiles (2) sont des plantes de rétablissement de la fertilité homozygotes dominantes

pour lesdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques (1).

9. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que lesdites plantes mâle-fertiles (2) sont des plantes de rétablissement de la fertilité homozygotes dominantes pour lesdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques (1) et lesdites plantes obtenues du stade (d) sont des plantes hybrides F1 mâle-fertiles et en ce qu'il comprend le stade additionnel consistant à: (e) cultiver les graines qui se forment sur lesdites plantes

hybrides F1 mâle-fertiles par suite de l'autopollinisation.

10. Procédé selon la revendication 1, caractérisé

en ce que lesdites plantes mâle-fertiles (2) sont des plan-

tes d'entretien homozygotes récessives pour lesdites plantes

mâle-stériles cytoplasmiques (1) et lesdites plantes obte-

nues du stade (d) sont des plantes mâle-stériles cytoplas-

miques et en ce qu'il comprend les stades additionnels consistant à (e) cultiver, à une proximité permettant-la pollinisation de la population pratiquement homogène de plantes du stade (d), une population pratiquement homogène de plantes de rétablis- sement de la fertilité homozygotes dominantes pour lesdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques, si bien que lesdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques du stade (d) sont pollinisées par le pollen desdites plantes de rétablissement *et des graines s'y forment, et

(f) récolter à partir des plantes mâle-stériles cytoplasmi-

ques à l'achèvement du stade (e) des graines capables de former une variété hybride F1 mâle-fertile prédéterminée, pratiquement en l'absence des graines de ladite population

de plantes de rétablissement.

11. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ladite pollinisation s'effectue à l'aide d'insectes pollinisateurs.

12. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en

ce que ledit herbicide est choisi dans le groupe des sul-

fonylurées, des dérivées de la glycine et des imidazolinones.

13. Procédé selon la revendication 1, caractérisé

en ce que ledit herbicide est le chlorsulfuron.

14. Procédé selon la revendication 1, caractérisé

en ce que ledit herbicide est le glyphosate.

15. Procédé selon la revendication 1, caractérisé

en ce que ledit herbicide est l'amitrole.

16. Procédé selon la revendication 1, caractérisé

en ce que ledit herbicide est le bentazon.

17. Procédé perfectionné pour produire des semences capables de former une variété hybride prédéterminée d'une plante cultivée capable de subir une autopollinisation et

une pollinisation croisée, caractérisé en ce qu'il con-

siste à: (a) cultiver dans une zone de culture une population pratiquement aléatoire de (1) des plantes mâle-stériles cytoplasmiques présentant une tolérance pour au moins un herbicide attribuable uniquement aux gènes nucléaires et (2) des plantes mâle-fertiles capables de polliniser les plantes mâle-stériles cytoplasmiques et qui sont dépourvues de la tolérance aux herbicides par suite de l'absence des gènes nucléaires requis pour ce caractère, si bien que les plantes mâle- stériles cytoplasmiques (1) sont pollinisées

avec le pollen dérivé des plantes mâle-fertiles (2).

(b) mettre en contact, après la pollinisation, la quasi-

totalité des plantes présentes dans la zone de culture avec un herbicide qui est efficace pour détruire les plantes

mâle-fertiles et qui est inefficace pour détruire les plan-

tes mâle-stériles cytoplasmiques par suite de la tolérance aux herbicides attribuable uniquement aux gènes nucléaires,et

(c) récolter les graines des plantes mâle-stériles cytoplas-

miques qui sont capables de former les plantes hybrides,

pratiquement en l'absence des graines des plantes mâle-

fertiles qui ont été initialement cultivées dans la zone

de culture.

18. Procédé selon la revendication 17,caractérisé en ce que ladite plante cultivée est choisie parmi les plantes cultivées à graines, les plantes fourragères, les plantes

à fruits propagées par semis, les espèces ornementales pro-

pagées par semis, et les espèces industrielles.

19. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en ce que la plante cultivée appartient à la famille des Brassicaceae.

20. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en

ce que la plante cultivée appartient au genre Brassica.

21. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en

ce que la plante cultivée est Brassica napus.

22. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en

ce que la plante cultivée est Brassica campestris.

23. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en ce que lesdites plantes mâle-fertiles (2) sont des plantes d'entretien homozygotes récessives pour lesdites plantes

mâle-stériles cytoplasmiques (1).

24. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en ce que lesdites plantes mâle-fertiles (2) sont des plantes de rétablissement de la fertilité homozygotes dominantes pour

lesdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques (1).

25. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en ce que lesdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques (1)

possèdent des gènes nucléaires homozygotes dominants- pour la-

ditetolérance auxherbicides et lesdites plantes mâle-fertiles (2) possèdent des gènes nucléaires homozygotes récessifs pour ladite tolérance aux herbicides et les graines récoltées

dans le stade (c) sont de plus capables de former des plan-

tes hybrides qui présentent ladite tolérance aux herbicides.

26. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en ce que lesdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques (1) possèdent des gènes nucléaires homozygotes récessifs pour

ladite tolérance aux herbicides et lesdites plantes mâle-

fertiles (2) possèdent des gènes nucléaires homozygotes

dominants pour ladite tolérance aux herbicides et les grai-

nes récoltées dans le stade (c) sont capables de former des

plantes hybrides dépourvues de ladite tolérance aux herbi-

cides.

27. -. aeion la revendication 17, caractérisé

en ce que lesdites plantes mâle-fertiles (2) sont des plan-

tes d'entretien homozygotes récessives pour lesdites plan-

tes mâle-stériles cytoplasmiques (1) et ledit procédé comprend les stades additionnels consistant à: (d) cultiver sous forme d'une population pratiquement uniforme au moins une portion desdites graines du stade (c)

capables de former des plantes qui sont des plantes mâle-

stériles cytoplasmiques à une proximité permettant la pol-

linisation d'une population pratiquement uniforme de plan-

tes qui sont des plantes de rétablissement de la fertilité homozygotes dominantes pour lesdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques, si bien que lesdites plantes mâle-stériles

cytoplasmiques sont pollinisées avec le pollen dérivé des-

dites plantes de rétablissement et des graines y sont formées et

(e) récolter à partir desdites plantes mâle-stériles cyto-

plasmiques, à l'achèvement du stade (d), des graines capa-

bles de former une variété hybride F1 mâle-fertile prédé-

terminée, pratiquement en l'absence des graines de ladite

population de plantes de rétablissement.

28. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en ce que les plantes mâle-stériles cytoplasmiques (1) du

stade (a) possèdent des gènes nucléaires homozygotes domi-

nants pour ladite tolérance aux herbicides et lesdites plan-

tes mâle-fertiles (2) du stade (a) sont des plantes d'en-

tretien homozygotes récessives pour lesdites plantes mâle-

stériles cytoplasmiques (1) et possèdent des gènes nucléai-

res homozygotes récessifs pour ladite tolérance aux herbi-

cides et en ce que ledit procédé comprend les stades ad-

ditionnels consistant à:

(d) cultiver dans une seconde zone de culture selon une popu-

lation pratiquement aléatoire au moins une portion des grai-

nes du stade (c) capables de former des plantes qui sont mâle-stériles cytoplasmiques et qui présentent une tolérance aux herbicides attribuables uniquement à des gènes nucléaires, et des plantes qui sont des pi&nes de rétablissement de la

fertilité homozygotes dominantes desdites plantes mâle-

stériles cytoplasmiques et qui sont dépourvues de tolérance aux herbicides par suite de la présence de gènes homozygotes récessifs pour ce caractère, si bien que lesdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques sont pollinisées avec le pollen provenant desdites plantes de rétablissement,

(e) mettre en contact, après ladite pollinisation, la quasi-

totalité des plantes présentes dans ladite seconde zone de culture avec un herbicide qui est efficace pour détruire lesdites plantes de rétablissement par suite de l'absence de ladite tolérance aux herbicides et qui est inefficace pour détruire lesdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques par suite de la présence de ladite tolérance aux herbicides, et (f) récolter les graines desdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques de ladite seconde zone de culture, qui sont capables de former lesdites plantes hybrides pratiquement en l'absence des graines desdites plantes de rétablissement qui ont initialement poussé dans ladite seconde zone de culture.

29. Procécé selon la revendication 17, caractérisé en ce que ladite pollinisation s'effectue à l'aide d'insectes pollinisateurs.

30. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en ce que l'herbicide est choisi parmi les sulfonylurées, les

dérivés de la glycine et les imidazolinones.

31. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en

ce que ledit herbicide est le chlorsulfuron.

32. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en

ce que ledit herbicide est le glyphosate.

33. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en

ce que ledit herbicide est l'amitrole.

34. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en

ce que ledit herbicide est le bentazon.

35. Procédé perfectionné pour produire une population pratiquement homogène de plantes d'une variété hybride prédéterminée d'une plante cultivée capable de subir-une

autopollinisation et une pollinisation croisée, caractéri-

sé en ce qu'il consiste à:

(a) cultiver dans une première zone de culture une popula-

tion pratiquement aléatoire de (1) des plantes mâle-stériles cytoplasmiques qui présentent une tolérance pour au moins un premier herbicide qui est attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes et qui présentent une tolérance

pour au moins un second herbicide qui est attribuable uni-

quement à des gènes nucléaires homozygotes différents et(2) des plantes mâle-fertiles qui sont des plantes d'entretien homozygotes récessives pour les plantes mâle-stériles cytoplasmiques et qui sont dépourvues de la tolérance aux herbicides pour le ou les premiers herbicides par suite de l'absence des gènes nucléaires que nécessite ce caractère et qui présentent une tolérance pour le ou les seconds herbicides attribuable uniquement aux gènes nucléaires

homozygotes, si bien que les plantes mâle-stériles cyto-

plasmiques (1) et les plantes d'entretien sont pollinisées avec le pollen provenant des plantes d'entretien, et des

graines sont formées sur les plantes mâle-stérile cyto-

plasmiques et sur les plantes d'entretien.

(b) récolter en vrac les graines formées sur les plan-

tes de la première zone de culture. (c) cultiver dans une seconde zone de culture une population pratiquement aléatoire de plantes dérivées des graines

récoltées dans le stade (b) avec des plantes de rétablisse-

ment de la fertilité homozygotes dominantes pour les plantes mâlestériles cytoplasmiques qui présentent une tolérance aux herbicides pour le ou les premiers herbicides attribuables

uniquement aux gènes nucléaires homozygotes et sont dépour-

vues de tolérance pour le ou les seconds herbicides par suite de l'absence des gènes nucléaires que nécessite ce caractère,

(d) mettre en contact, avant la pollinisation, la quasi-

totalité des plantes présentes dans la seconde zone de culture avec le premier herbicide qui est efficace pour détruire les plantes résultant des graines formées sur les

plantes d'entretien dans le stade (a), si bien que les plan-

tes mâle-stériles cytoplasmiques et les plantes de rétablis-

sement demeurent, (e) polliniser les plantes mâle-stériles cytoplasmiques et les plantes de rétablissement du stade (d) avec le pollen dérivé des plantes de rétablissement et former des graines sur les plantes mâlestériles cytoplasmiques et sur les plantes de rétablissement, (f) récolter en vrac les graines formées sur les plantes demeurant dans la seconde zone de culture,

(g) cultiver dans une troisième zone de culture une popula-

tion pratiquement aléatoire de plantes dérivées des graines récoltées dans le stade (f) et (h) mettre en contact la quasi-totalité des plantes présentes dans la troisième zone de culture avec le second

herbicide qui est efficace pour détruire les plantes résul-

tant des graines formées sur les plantes de rétablissement du stade (e) pour former ainsi une population pratiquement homogène de plantes hybrides F1 mâle-fertiles d'une variété prédéterminée.

36. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en ce que ladite plante cultivée est choisie parmi les plantes cultivées à graines, les plantes fourragères, les plantes à fruits propagées par semis, les plantes ornementales pro-

pagées par semis et les espèces industrielles.

37. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en ce que la plante cultivée appartient à la famille des Brassicaceae.

38. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en

ce que la plante cultivée appartient au genre Brassica.

39. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en

ce que la plante cultivée est Brassica napus.

40. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en

ce que la plante cultivée est Brassica campestris.

41. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en ce qu'avant le stade (a) on effectue les stades opératoires suivants additionnels consistant à: (i) cultiver dans une zone de culture préliminaire une

population pratiquement uniforme desdites plantes mâle-

stériles cytoplasmiques à une proximité permettant la pol-

linisation d'une population pratiquement uniforme de plantes d'entretien différentes présentant une tolérance pour le ou les premiers herbicides attribuable uniquement auxdits gènes nucléaires homozygotes et présentant une tolérance pour le ou lesdits seconds herbicides attribuable uniquement auxdits

gènes nucléaires homozygotes différents, si bien que les-

dites plantes mâle-stériles cytoplasmiques sont pollinisées

par le pollen provenant desdites plantes d'entretien dif-

férentes et des graines s'y forment et (ii) récolter les graines desdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques qui poussent ensuite dans ladite première

zone de culture du stade (a).

42. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en ce que tous lesdits gènes nucléaires homozygotes de

tolérance aux herbicides sont des gènes nucléaires homo-

zygotes dominants et lesdites plantes hybrides F1 demeurant dans le stade (h) possèdent une tolérance aux herbicides

vis-à-vis desdits premiers et desdits seconds herbicides.

43. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en ce qu'il comprend le stade additionnel consistant à: (i) récolter les graines qui se forment sur lesdites plan-

tes hybrides F1 mâle-fertiles par suite de l'autopollini-

sation.

44. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en ce que ladite pollinisation est effectuée à l'aide

d'insectes pollinisatéurs.

45. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en ce qu'au moins un desdits premier et second herbicides est choisi dans le groupe constitué par les sulfonylurées, les

dérivés de la glycine et les imidazolinones.

46. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en ce que soit le premier, soit le second herbicide est le chlorsulfuron.

47. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en ce que soit ledit premier, soit ledit second herbicide est

le glyphosate.

48. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en ce que soit ledit premier, soit ledit second herbicide

est l'amitrole.

49. Procédé selon la revendication 35, caractérisé en ce que soit ledit premier, soit ledit second herbicide

est le bentazon.

50. Procédé perfectionné pour produire des semences capables de former une variété hybride prédéterminée

d'une plante cultivée capable de subir une autopollinisa-

tion et une pollinisation croisée, caractérisé en ce qu'il consiste à:

(a) cultiver dans une zone de culture une population pra-

tiquement aléatoire de (1) des plantes mâle-stériles cytoplasmiques qui présentent une tolérance pour au moins un premier herbicide qui est attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes et qui présentent une tolérance pour au moins un second herbicide qui est attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes différents et

(2) des plantes mâle-fertiles qui sont des plantes d'entre-

tien homozygotes récessives pour les plantes mâle-stériles cytoplasmiques et qui sont dépourvues de la tolérance aux herbicides pour le ou les premiers herbicides par suite de l'absence des gènes nucléaires que nécessite ce caractère et qui présentent une tolérance pour le ou les seconds

herbicides qui est attribuable uriquement aux gènes nucléai-

res homozygotes, si bien que les plantes mâle-stériles

cytoplasmiques (1) et les plantes d'entretien sont polli-

nisées avec du pollen dérivant des plaïites d'entretien, et

des graines sont formées sur les plantes mâle-stériles cyto-

plasmiques et sur les plantes d'entretien.

(b) récolter en vrac les graines ainsi formées sur les plantes de la première zone de culture, (c) cultiver dans une seconde zone de culture une population pratiquement aléatoire de plantes dérivées des graines

recueillies dans le stade (b) avec des plantes de rétablis-

sement de la fertilité homozygotes, dominantes pour les plantes mâlestériles cytoplasmiques, qui présentent une tolérance aux herbicides pour le ou les premiers herbicides attribuable uniquement aux gènes nucléaires homozygotes et qui sont dépourvues de tolérance pour le ou les seconds herbicides par suite de l'absence des gènes nucléaires que nécessite ce caractère,

(d) mettre en contact, avant la pollinisation, la quasi-

totalité des plantes présentes dans la seconde zone de culture avec le premier herbicide qui est efficace pour détruire les plantes résultant des graines formées sur les plantes d'entretien dans le stade (a) pour que les plantes

mâle-stériles cytoplasmiques et les plantes de rétablis-

sement demeurent,

(e) polliniser lesdites plantes mâle-stériles cytoplasmi-

ques et les plantes de rétablissement du stade (d) avec le pollen dérivant des plantes de rétablissement, (f) mettre ensuite en contact la quasi-totalité des plantes restantes présentes dans la seconde zone de culture avec

le second herbicide qui est efficace pour détruire les plan-

tes de rétablissement et qui est inefficace pour détruire les plantes mâle-stériles cytoplasmiques par suite de la tolérance aux herbicides attribuable aux gènes nuécléaires homozygotes, et

(g) récolter les graines des plantes mâle-stériles cytoplas-

miques capables de former des plantes hybrides F1 pratique-

ment en l'absence des graines des plantes d'entretien et de rétablissement qui ont initialement poussé dans la seconde

zone de culture.

51. Procédé selon la revendication 50, caractérisé

en ce que ladite plante cultivée est choisie parmi les plan-

tes cultivées à graines, les plantes fourragères, les plantes

à fruits propagées par semis, les plantes ornementales propa-

gées par semis et les espèces industrielles.

52. Procédé selon la revendication 50, caractérisé en ce que la plante cultivée appartient à la famille des Brassicaceae.

53. Procédé selon la revendication 50, caractérisé

en ce que la plante cultivée appartient au genre Brassica.

54. Procédé selon la revendication 50, caractérisé

en ce que la plante cultivée est Brassica napus.

55. Procédé selon la revendication 50, caractérisé

en ce que la plante cultivée est Brassica campestris.

56. Procédé selon la revendication 50, caractérisé en ce qu'avant le stade (a) on effectue de plus les stades opératoires suivants qui consistent à:

(i) cultiver dans une zone de culture préliminaire une popu-

lation pratiquement uniforme desdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques à une proximité permettant la pollinisation d'une population pratiquement uniforme de plantes d'entretien différentes qui présentent une tolérance pour le ou les premiers herbicides attribuable uniquement auxdits gènes nucléaires homozygotes et qui présentent une tolérance pour

le ou lesdits seconds herbicides attribuable uniquement aux-

dits gènes nucléaires homozygotes différents, si bien que

lesdites plantes mâle-stériles cytoplasmiques sont pollini-

sées avec le pollen provenant desdites plantes d'entretien différentes et des graines s'y forment, et (ii) récolter les graines desdites plantes m le-stériles cytoplasmiques qui poussent dans ladite première zone de

culture du stade (a).

57. Procédé selon la revendication 50, caractérisé en ce que tous lesdits gênes nucléaires homozygotes de tolérance

aux herbicides sont des gènes nucléaires homozygotes domi-

nants et les graines qui-sont recueillies dans le stade (g>

* sont capables de former des plantes hybrides F1 qui possè-

dent une tolérance aux herbicides pour lesdits premiers et

lesdits seconds herbicides.

58. Procédé selon la revendication 50, caractérisé

en ce que ladite pollinisation est effectuée à l'aide d'in-

sectes pollinisateurs.

59. Procédé selon la revendication 50, caractérisé en ce qu'au moins un desdits premiers et desdits seconds herbicides est choisi parmi les sulfonylurées, les dérivés

de la glycine et les imidazolinones.

60. Procédé selon la revendication 50, caractérisé en ce que ledit premier et ledit second herbicide est le chlorsulfuron

61. Procédé selon la revendication 50, caractérisé en ce que ledit premier ou ledit second herbicide est le glyphosate.

62. Procédé selon la revendication 50, caractérisé en ce que ledit premier ou ledit second herbicide est l'amitrole.

63. Procédé selon la revendication 50, caractérisé en ce que ledit premier ou ledit second herbicide est le

bentazon.

64. Semences de Brassica napus constituées d'un

mélange essentiellement homogène de semences qui, par cultu-

re, fournissent des plants de colza présentant une combi-

naison de stérilité mâle cytoplasmique et de tolérance à au moins un herbicide attribuable uniquement à des gènes

nucléaires homozygotes dominants.

65. Semences de Brassica napus constituées d'un mélange essentiellement homogène de semences qui, par culture, fournissent des plants de colza présentant une combinaison de stérilité-mâle cytoplasmique et de tolérance à au moins un herbicide attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes récessifs.

66. Semences de Brassica napus constituées d'un mélange binaire pratiquement homogène de semences qui, par culture, fournissent:

(1) un premier colza présentant une stérilité-mâle cytoplas-

mique et une tolérance pour au moins un herbicide qui est attribuableuniquement à des gènes nucléaires homozygotes dominants, et (2) un second colza, capable de polliniser ledit premier colza, qui est une plante d'entretien homozygote récessive pour ladite stérilité-mâle cytoplasmique dudit premier colza et qui est dépourvu de ladite tolérance aux herbicides par

suite de la présence de gènes nucléaires homozygotes réces-

sifs de ce caractère.

67. Semences de Brassica napus constituées d'un mélange binaire pratiquement homogène de semences qui, par culture, fournissent:

(1) un premier colza présentant une stérilité-mâle cytoplas-

mique et une tolérance pour au moins un herbicide qui est attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes récessifs, et (2) un second colza, capable de polliniser ledit premier colza, qui est une plante d'entretien homozygote récessive pour ladite stérilité-mâle cytoplasmique dudit premier colza et qui est dépourvu de ladite tolérance aux herbicides par

suite de la présenoe de gènes nucléaires homozygotes domi-

nants de ce caractère.

68. Semences de Brassica napus constituées d'un mélange binaire pratiquement homogène de semences qui, par culture, fournissent:

(1) un premier colza présentant une stérilité-mâle cytoplas-

mique et une tolérance pour au moins un herbicide qui est

attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes.

dominants,et (2) un second colza, capable de polliniser ledit premier

colza, qui est une plante homozygote dominante de rétablis-

sement de la fertilité dudit premier colza et qui est dépourvu de ladite tolérance aux herbicides par suite de la présence de gènes nucléaires homozygotes récessifs de

ce caractère.

69. Semences de Brassica napus constituées d'un mé-

lange binaire pratiquement homogène de semences qui, par culture, fournissent:

(1) un premier colza présentant une stérilité-mâle cytoplas-

mique et une tolérance pour au moins un herbicide qui est attribuable uniquement à des gènes nucléaires homozygotes récessifs, et (2) un second colza, capable de polliniser ledit premier

colza, qui est une plante homozygote dominante de rétablis-

sement de la fertilité dudit premier colza et qui est dé-

pourvu- de ladite tolérance aux herbicides par suite de la présence de gènes nucléaires homozygotes dominants de ce

caractère.

70. Semences de Brassica napus constituées d'un ensemble pratiquement homogène de semences qui par culture fournissent des plants de colza hybrides F1 mâle-fertiles

possédant une tolérance pour au moins un herbicide attri-

buable uniquement à des gènes nucléaires.