FI68235C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara 2-loradeninderivat - Google Patents

Description

68235

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 2-kloori-adeniinijohdannaisten valmistamiseksi.

5 Jakamalla erotettu patenttihakemuksesta 791 456

Keksintö koskee menetelmää uusien kaavan II mukaisten 2-klooriadeniinijohdannaisten ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi, 1 0 NH0 X.» 15 Lj „/>

Cl | R1 20 jossa kaavassa on 2-sykloheksenyyli tai sykloheksyyli.

Kaavan II mukaisilla yhdisteillä on edullinen keuhkoputkea laajentava vaikutus.

Teofylliini, jota normaalisti annetaan etyleenidi-amiinisuolana (aminofylliini) tai koliinisuolana, on te- 25 hokas ja käyttökelpoinen yleisesti keuhkoastman hoitoon määrätty ei-adrenaliinivaikutteinen keuhkoputkea laajentava aine. Hyvän liukoisuutensa vuoksi aminofylliiniä on vuosia pidetty tehokkaana suun kautta annettavana keuhkoputkea 2 68235 laajentavana aineena. Aminofvlliinillä tiedetään kuitenkin olevan tiettyjä haittoja. Se aiheuttaa esimerkiksi suolis-tohäiriöitä ja sydänverisuoniin ja keskushermostoon kohdistuvia sivuvaikutuksia, mikä on antanut aiheen etsiä 5 uusia ei-adrenaliinivaikutteisia keuhkoputkia laajentavia aineita, joilla olisi edullisempia ominaisuuksia, kuten voimakkaampi vaikutus ja/tai vähäisemmät sivuvaikutukset.

Patentti- ja tieteellisessä kirjallisuudessa on kuvattu suuri määrä erilaisia puriinijohdannaisia. Esimerkit) keinä mainittakoon seuraavat julkaisut: 1. J. Am. Chem. Soc., 81, 197-201 (1959), jossa kuvataan kaavan NH- ry>

k,V

20 mukaisten yhdisteiden synteesiä, jolloin R on sykloheksvy-li tai 2-sykloheksyyli. Nämä yhdisteet ovat potentiaalisia syöpälääkkeitä.

2. US-patentti 3 917 837, jossa kuvataan kaavan 25

Λ___OH

30 mukaisen yhdisteen käyttöä tulehdusta ehkäisevänä aineena.

3. US-patentti 3 930 005, jossa kuvataan yhdisteitä, joiden kaava on

II

68235 R2->n^R3

X N

rV \\ CH2 o jossa R2 ja voivat tarkoittaa mm. vetyä ja R^ voi tar- 10 koittaa mm. alempaa alkoksia. Yhdisteillä ilmoitetaan olevan tulehdusta ehkäisevä vaikutus.

4. BE-patentti 853 086 (Farmdoc 70719Y), jossa kuvataan yhdisteitä, joiden kaava on f L ) 20 jossa (a) X on C^_g-alkoksi tai -NHR, R on H tai alempi alkyyli, Y on C^_g-alkyyli, C3_^Q-sykloalkyyli tai -hydrok-sisykloalkyyli, fenyyli, halogeenifenyyli, trifluorimetyy-lifenyyli, enintään 12 hiiliatomia sisältävä bisykloalkyyli 25 tai hydroksi-bisykloalkyyli, tai -AR1, A on metyleeni tai etyleeni, R^ on fenyyli, halogeenifenyyli, trifluori-metyy-li-fenyyli, enintään 12 hiiliatomia sisältävä bisykloalkyyli tai hydroksi-bisykloalkyyli, Q on H, C^_g-alkyyli, C3_3q-sykloalkyyli- tai -hydroksisykloalkyyli, enintään 12 hiili- 30 atomia sisältävä bisykloalkyyli tai hydroksi-bisykloalkyyli, fenyyli, halogeenifenyyli, trifluorimetyylifenyyli tai AR·*-; tai (b) X on halogeeni tai alempi dialkyyliamino, Y on metyyli, etyyli, syklopentyyli, fenyyli, halogeenifenyyli, 35 trifluorimetyylifenyyli tai bentsyyli ja Q tarkoittaa samaa kuin edellä. Yhdisteiden ilmoitetaan olevan käyttökelpoisia 68235 psoriasiksen hoidossa.

5. DE-hakemusjulkaisu 2 610 985 (Farmdoc 70863Y), jossa kuvataan yhdisteitä, joiden kaava on nh2 ]T>

R

J COX 0 rH> i° ft jossa ja R2 tarkoittavat OH- tai 0N02-ryhmää, tai muodostavat yhdessä C2_^-alkylideenin, aralkylideenin tai CRgRg, R^ on H tai C^_^-alkyyli; Rg on ORg tai NR^Rg; Rg on C^_^-15 alkyyli, R^ ja Rg tarkoittavat mahdollisesti substituoitua C-^_^-alkyyliä tai Cg_-,-sykloalkyyliä, tai muodostavat yhdessä C2_g-alkyleeniryhmän, jossa yksi CH2~ryhmä voi olla korvattu heteroatomilla, Rg on C^_^-alkyyli tai -alkoksi, mahdollisesti substituoitu fenyyli tai H, X on ORg tai 20 nrioR11' R9 on ci-7-alkyy^-i' Cg_^-sykloalkyyli, mahdollisesti substituoitu fenyyli tai aralkyyli, R^q ja R^ tarkoittavat vetyä, mahdollisesti substituoitua C^^-alkyvliä, alkenyyliä, tai alkynyyliä, mahdollisesti substituoitua Cg^-sykloalkyyliä, substituoitua fenyyliä, bentsyyliaminoa, 25 2-metyylifuryyliä tai adamantyyliä, tai toinen voi olla H ja toinen ryhmä, jonka kaava on 3° | L / -,CH2ln-NH~OC O χ w R1 R2

K

5 68235 jossa n on 2-16, tai R^q ja muodostavat yhdessä C2_,--alkyleeniryhmän, jossa yksi C^-ryhmä voi olla korvattu heteroatomilla. Yhdisteiden ilmoitetaan vaikuttavan verenkiertoon, sydämeen ja aineenvaihduntaan.

5 6. Chem. Pharm. Bull., 23 (4), 759-774 (1975), jossa mm. kuvataan yhdisteitä, joiden kaava on NH~ I 2

N

N I \ 10 1 / 15

Oil OH

jossa R on alempi alkyyli. Yhdisteillä ilmoitetaan olevan 20 sepelvaltimoa laajentavaa vaikutusta.

7. JP-hakemusjulkaisu 52-71492 (Farmdoc 53190Y), jossa kuvataan yhdisteitä, joiden kaava on NH- I i T f > R3 30 jossa R^ on suora tai haarautunut C^_^Q-alkyyli, sykloalkyyli, C7-ll -aralkyyli tai piperatsinoetyyli, jonka kaava on -CH2~CH2-N_^ -R2 jossa R2 on C^_^^-aralkyyli, monosubstituoitu aralkyyli, 35 68235 sinnamyyli tai fluorenyyli, R^ on suoraketjuinen tai haarautunut C1_1Q-alkyyli, cg_^Q-sykloalkyyli, C^_11~aralkyyli tai yllä määritellyn mukainen piperatsinoetyyli, lukuun ottamatta niitä yhdisteitä, joissa ja R^ tarkoittavat 5 metyyliä, R^ on metyyli ja R^ on etyyli ja R^ on sykloalkyyli ja R3 on Cj^-alkyyli, C5_10~sykloalkyyli tai C7_^^-aralkyyli. Yhdisteillä ilmoitetaan olevan verihiutaleiden kasaantumista estävä vaikutus ja sepelvaltimoa laajentava vaikutus.

10 8. Chem. Pharm. Bull., 25(7), 1811-1821 (1977), jossa kuvataan 2-tioadenosiini-johdannaisten, kuten kaavan Γ2 15 —\ L il / 20 C_/ mukaisen yhdisteen valmistusta.

Yllä mainituilla yhdisteillä ilmoitetaan olevan jonkin verran verihiutaleiden kasaantumista estävää vaikutusta. On havaittu, että vastaava yhdiste, jossa on riboosi- 25 sokeriryhmä 9-asemassa, on huomattavasti tehokkaampi, mistä voidaan päätellä, että 2-tioadenosiinijohdannaisten ribosyyliryhmällä on oleellinen merkitys verihiutaleiden kasaantumisen tehokkaan estämisen kannalta eikä sitä voida korvata muilla substituenteilla.

30 Nyt on havaittu, että kaavan II mukaisilla 2-kloori- adeniinijohdannaisilla on edullinen keuhkoputkea laajentava vaikutus.

Kaavan II mukaisia 2-klooriadeniinijohdannaisia ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä happoadditiosuoloja li 7 68235 voidaan valmistaa siten, että 2,6-diklooripuriinijohdannainen, jonka kaava on

Cl 5 I J ) <v>

Ri jossa R^ tarkoittaa samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan 10 ammoniakin kanssa inertissä liuottimessa, ja haluttaessa saatu kaavan II mukainen yhdiste, jossa R^ on 2-syklo-heksenyyli, hydrogenoidaan kaavan II mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa R^ on sykloheksyyli, ja/tai saatu kaavan II mukainen yhdiste muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttä-15 vaksi happoadditiosuolaksi.

Edellä käytetty termi "farmaseuttisesti hyväksyttävät happoadditiosuolat" tarkoittaa mineraalihapoilla, kuten kloorivety-, bromivety-, jodivety-, typpi-, rikki- ja fos-forihapolla ja niiden kaltaisilla sekä myös orgaanisilla 20 hapoilla, kuten etikka-, sitruuna-, pivaali-, maito-, viini-, oksaali-, meripihka- ja maleiinihapolla sekä niiden kaltaisilla muodostettuja suoloja. Mikä tahansa myrkytön, kyseisten yhdisteiden kanssa suolan muodostava happo tulee kysymykseen.

25 Kaavan II mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi kaavan V mukaisen yhdisteen 6-kloori-substituentit korvataan 6-aminoryhmällä, mikä voidaan suorittaa sinänsä tunnetulla tavalla ^ks. esim. Chem. Pharm. Bull., 23, 759-774 <1975)_7· Edullisessa suoritusmuodossa kaavan V mukainen yhdiste 30 suspendoidaan inerttiin liuottimeen (esim. veteen, metano-liin, etanoliin), suspensio kyllästetään ammoniakki-kaasulla (edullisesti alennetussa lämpötilassa, kuten ^0°C:ssa) ja kyllästetty reaktioseos kuumennetaan hieman huoneen lämpötilaa korkeamman lämpötilan ja reaktioväliaineen kiehumis-35 pisteen väliseen lämpötilaan. Edullisin aminointimenetelmä käsittää ammoniakin metanoliliuokseen liuotetun välituotteen 68235 kuumentamisen suljetussa putkessa noin 100°C:seen.

Kaavan II mukainen yhdiste, jossa R^ on sykloheksyy-li, voidaan myös valmistaa hydrogenoimalla katalyyttisestä 5 kaavan II mukainen yhdiste, jossa on sykloheksenyyli,

Sopiva menettelytapa on esimerkiksi sellainen, jossa hydro-genoitava yhdiste liuotetaan sopivaan pelkistymättömään inerttiin liuottimeen (esim. metanoliin, etanoliin, veteen, vettä sisältävään metanoliin, vettä sisältävään etanoliin) 10 ja hydrogenoidaan sitten käyttäen tavanomaista hydrogenoin-tikatalysaattoria. Esimerkkejä sopivista katalysaattoreista ovat palladiumnoki, Pd-BaS04, Pd-C, PtC^, Ru-C, Rh-C, Raney-nikkeli, CuCrO, RhCl/ΐ5 (CgHj.) 373 ja RuCl^P (C^H^) 373 · Suositeltava katalysaattori on palladioitu hiili. Vaikkakaan 15 lämpötila ja paine eivät ole kriittisiä hydrogenointivai- heessa, edullisia tuloksia on saatu huoneen lämpötilassa ja vallitsevassa ilmanpaineessa.

Kaavan II mukaiset vapaan emäksen muodossa olevat yhdisteet voidaan muuttaa farmaseuttisesti hyväksyttäviksi 20 happoadditiosuoloiksi tavanomaisilla menetelmillä. Siten esimerkiksi vapaa emäs voidaan liuottaa inerttiin liuottimeen, saattaa se reagoimaan suunnilleen yhden painoekviva-lentin kanssa sopivaa orgaanista tai epäorgaanista happoa halutun suolan tuottamiseksi ja ottaa suola talteen saos-25 tamalla se liuottimesta tai lyofilisoimalla se.

Lähtöaineiden ja kaavan II mukaisten 2-klooriadeniini-johdannaisten valmistusta voidaan kuvata seuraavalla reak-tiokaaviolla.

II.

9 68235 ci M = "a, K, Tl, Ag N^M tai HgCl

’ O-1 / O

x >v X = Cl, Br, I

Cl \Ä ^ io JC ci I katalyyttinen

Cl hydrogenointi ^

Λ.. I

15 li v" i «, NH^ 20 NH~ 1

JT2 N^\^N

katalyyttinen I I /

I 11 ) ----> ci^N/^K

jk"" | hydrogenointi

“ O O

10 68235

Keksinnön mukaisia yhdisteitä tutkittiin verraten niitä aminofylliiniin niiden keuhkoputkia laajentavan vaikutuksen määrittämiseksi in vitro ja in vivo sekä verenpainetta alentavan vaikutuksen (sydänverisuoniin kohdis-5 tuvan sivuvaikutuksen mittaamiseksi) määrittämiseksi in vivo.

Marsuista valmistettiin henkitorviketjuja A. Akcasu'n julkaisussa Arch. Int. Pharmacodyn. Ther., 122, 201 (1959) kuvaamalla menetelmällä. Kunkin testattavan yhdisteen 10 aiheuttama vaikutus kirjattiin Magnus'in menetelmällä ja ilmaistiin prosentteina 0,1 ^ig: lla/ml isoproterenolia ennen kutakin koetta saadusta maksimireaktiosta. Aminofylliinin ja testattavien yhdisteiden keuhkoputkia laajentava vaikutus (in vitro) käy ilmi taulukosta 1 EC^g-arvona (mikro-15 grammoina/ml konsentraatio, joka aiheuttaa relaksaation, joka on 50 % 0,1 mikrogrammalla/ml isoproterenolia saadusta maksimireaktiosta).

Testattavien yhdisteiden keuhkoputkea laajentava vaikutus in vivo arvioitiin marsun henkitorven sisäisen 20 paineen (ITP) nousun perusteella käyttäen James'in julkaisussa J. Pharm. Pharmac., 21, 379 (1969) kuvaaman menetelmän muunnelmaa. Nukutetun marsun henkitorveen asetettiin kanyyli ja ITP kirjattiin polygrafilla marsun hengittäessä keinotekoisesti. Valtimoverenpaine (ABP; verenpainetta alentavan 25 vaikutuksen mittaamiseksi) mitattiin myös kokeen aikana. Tiedot kerättiin sekä suonen sisäisesti että pohjukaissuolen kautta annetuille yhdisteille. Taulukko 1 ilmaisee keuhkoputkia laajentavan vaikutuksen in vivo (ITP) kunkin yhdisteen ED^g-arvona (henkitorven sisäistä painetta 30 50-%:sesti alentava annos mg:na/kg) ja verenpainetta alentavan vaikutuksen (ABP) ED2Q-arvona (valtimoverenpainetta 20-%:sesti alentava annos mg:na/kg).

Halutun keuhkoputkia laajentavan vaikutuksen ja ei-toivotun kardiovaskulaarisen (verenpainetta alentavan) 35 vaikutuksen välisen eron määrittämiseksi laskettiin suhde verenpainetta alentava ED^g/keuhkoputkia laajentava ED^g ja li 68235 se käy ilmi taulukosta 1. Yhdisteillä, joilla ilmenivät suurimmat ABP/ITP-suhteet, kardiovaskulaarisen sivuvaikutuksen erotus keuhkoputkia laajentavasta vaikutuksesta on suurin.

5 Taulukko 1

Farmakologisten kokeiden tulokset

Yhdiste in vitro in vivo ITC, EDj-q suonensisäisesti

10 (yag/ml) ITP,ED5Q ABP,ED5Q ABP/ITP

__(mg/kg) (mg/kg)__

Kaava II 0,12 0,15 2,5 17 (R^ = 2-sykloheksenyyli)

Aminofylliini 16,6 0,58 1,18 2 15 __i ITC = Vaikutus eristetyssä henkitorviketjussa ABP = Valtimoverenpainetta alentava vaikutus ITP = Vaikutus henkitorven sisäisen paineen kokeessa.

20

Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä. Lähtöaineiden valmistus 25 rY> η-Ο^ΗγΟ .

30 ill 12 68235

Esimerkki I

2,6-diklooripuriinin HgCl-suola Λχ

Cl

Liuokseen, joka sisälsi 7,38 g (27,2 mmoolia) HgClj 10 100 ral:ssa 50-%:sta etanolia, lisättiin koko ajan sekoit taen 5,15 g (27,2 mmoolia) 2,6-diklooripuriinia. Liuokseen lisättiin viiden minuutin kuluttua 10 % NaOH (^10 ml), kunnes värireaktiota ei enää tapahtunut (HgO:n aiheuttama keltainen). Seosta sekoitettiin 30 minuuttia ja saostuma 15 suodatettiin, pestiin peräkkäin vedellä, etanolilla ja di-etyylieetterillä ja kuivattiin saaden 6,91 g (saanto 64 %) otsikon suolaa.

Esimerkki II

9-(2-sykloheksenyyli)-9H-2,6-diklooripuriini 20

Cl 1 1> 25

Cl 30 X^i

Seos, joka sisälsi 6,91 g (16,3 mmoolia) esimerkin I mukaista tuotetta ja 6,91 g "Celiittiä" (piimaata) bentsee-35 nissä, haihdutettiin atseotrooppisesti kosteuden poistamiseksi. Saatuun seokseen lisättiin 100 ml kuivaa ksyleeniä 11 15 68235 ja 4 ml (339 mmoolia) 3-bromisyklohekseeniä. Seosta keitettiin palauttaen 2,5 tuntia koko ajan sekoittaen, jäähdytettiin ja suodatettiin se. Suodatuspuristuskakku pestiin pienellä määrällä CHCl^. Suodos ja pesuneste haihdutettiin 5 kuiviin. Jäännös liuotettiin 50 ml:aan bentseeniä ja liuos pestiin 20-%:sella KI-liuoksella (3 kertaa) ja NaCl-vesi-liuoksella (kerran) ja kuivattiin Na2SC>4:llä. Suodos haihdutettiin ja jäännös puhdistettiin kromatografisesti silika-geelillä, jolloin saatiin 3,87 g (88 %) otsikon välituotet- 10 ta, sp. 133-135°C. IR(KBr): 2930, 1590, 1565, 1405, 1355, 1315, 1210, 875, 835 cm"1. UV:X Me0H 276 nm (£9500).

' ΓΠ3.Χ NMR (CDC13): 2,00 (6H, m), 5,60 (1H, m), 6,00 (2H, m), 8,11 (1H, s).

Analyysi chhioN4C12 : lie: 15 Laskettu: C 49,09 H 3,75 N 20,82 Cl 26,35

Saatu: C 48,54 H 3,48 N 20,34 Cl 25,54

Edellä kuvatulla tavalla korvaamalla 3-bromisyklo-hekseeni ekvivalenttisella painomäärällä sykloheksyyli-bromidia saatiin 9-sykloheksyyli-9H-2,6-diklooripuriini.

20 Kaavan II mukaisten yhdisteiden valmistus

Esimerkki 1 2-kloori-9-(2-sykloheksenyyli)-9H-adeniini NHg 25 w N Λ i i >

Cl 0

Ammoniakkikaasun annettiin kuplia seokseen, joka 35 sisälsi 2,8 g (10,3 mmoolia) 9-(2-sykloheksenyyli)-9H- 2,6-diklooripuriinia 50 ml:ssa CH^OH 0°C:ssa, kunnes kaasua 14 68235 ei enää absorboitunut. Seos kuumennettiin suljetussa putkessa 100°C:seen neljäksi tunniksi, jäähdytettiin sitten ja konsentroitiin kiteiden muodostamiseksi, kiteet suodatettiin saaden 2,39 g otsikkoyhdistettä. Toinen erä (112 mg) saa-5 tiin suodoksesta erottamalla kromatografisesti silikagee-lillä. Kokonaissaanto = 2,50 g (96 %), sp. 195-197°C.

IR (KBr): 3120, 1640, 1590, 1320, 1300, 1225, 1190, 920 cm-1. UV: Λ· Me0H 266 nm ( 6 14600). NMR (CDC1,,) : ζ 0,89

ItldX j (1H, m), 1,26 (1H, m), 2,00 (4H, m), 5,30 (1H, m), 6,00 10 (2H, m), 8,11 (1H, s).

Edellä kuvatulla tavalla korvaamalla 9-(2-syklohek-senyyli)-9H-2,6-diklooripuriini 9-sykloheksyyli-9H-2,6-diklooripuriinilla saatiin 2-kloori-9-sykloheksyyli-9H-adeniini.

15 Esimerkki 2 2-kloori-9-sykloheksyyli-9H-adeniini 2-kloori-9-(2-sykloheksenyyli)-9H-adeniinin (252 mg, 1,0 mmoolia) etanoliseosta hydrogenoitiin 10-%:sella palla-dium/hiilellä (93 mg) huoneen lämpötilassa ja vallitsevassa 20 ilmanpaineessa. Reaktioseos suodatettiin ja suodos haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin kromatografisesti silika-geelillä, jolloin saatiin 139 mg (55 %) otsikkoyhdistettä, sp. 206-209°C IR (KBr): 3360, 3150, 2905, 1645, 1595, 1570, 1540 cm-1. UV:XC2H5°H 267 nm (6 15300). NMR (CDC1,) : 25 / 1,80 (10H, m), 4,47 (1H, m), 6,23 (2H, s), 7,82 (1H, s).

Claims (1)

1. Patenttivaatimukset 68235 Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan II mukaisten 2-klooriadeniinijohdannaisten ja niiden farma-5 seuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmista miseksi, NH2 (II) 10 R1 jossa kaavassa R1 on 2-sykloheksenyyli tai sykloheksyyli, tunnettu siitä, että 2,6-diklooripuriinijohdannai- 15 nen, jonka kaava on J 20. il (V) R1 25 jossa tarkoittaa samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan ammoniakin kanssa inertissä liuottimessa, ja haluttaessa saatu kaavan II mukainen yhdiste jossa on 2-sykloheksenyyli, hydrogenoidaan kaavan II mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa R^ on sykloheksyyli, ja/tai saatu kaavan 30. ii mukainen yhdiste muutetaan farmaseuttiseksi hyväksyttä väksi happoadditiosuolaksi.