FI67703C - Foerfarande foer framstaellning av farmakologiskt vaerdefulla (4-hydroxi-5-pyrimidinyl)-ureidobensylpenicilliner - Google Patents

Description

ΓΒ1 KUULUTUSJULKA.SU , Γ7Γ7Π 7 «gjft tBJ (11) UTLÄGGNINGSSKRIFT 6//U0 Γ ' ~ " 1 ' ? ' .·''» - ' ' ·. ' :j '5 IO -S5 (51) Kv.lk.4/lnt.CI.* C 07 D **99/68 SUOMI—FINLAND (21) Patenttihakemus — Patentansökning 800786 (22) Hakemispäivä — Ansökningsdag 13-03-80 (N) (23) Alkupäivä — Giltighetsdag 13.03 .80 (41) Tullut julkiseksi — Blivit offentlig gg Qq

Patentti- ja rekisterihallitus ^ Nähtäväksipanon ja kuul.julkaisun pvm.—

Patent- och registerstyrelsen ' 1 Ansökan utlagd och Utl.skrlften publicerad 31 - 01 .85 (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus — Begärd prioritet 15.03-79

Saksan Li i ttotasavalta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) P 2910190.** (71) Dr. Karl Thomae Gesel1schaft mit beschränkter Haftung, Biberach an der Riss, Saksan Liittotasavalta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) (72) Bernd Wetzel, Biberach, Eberhard Woitun, Biberach, Wolfgang Reuter, Laupertshausen, Roland Maier, Biberach, Uwe Lechner, Ummendorf,

Hanns Goeth, Biberach, Saksan Li1ttotasavalta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) (7**) Leitzinger Oy (5**) Menetelmä valmistaa farmakologisesti arvokkaita (**-hydroksi-5~pyr imi -dinyy1i)-ureidobentsyylipenίsi11iinejä - Förfarande för framställning av farmakolog i skt värdefulla (**-hydroxi -5-pyr imid iny 1) -urei dobensy 1 -pen ieί11iner

Keksinnön kohteena on menetelmä valmistaa farmakologisesti arvokkaita (4-hydroksi-5-pyrimidinyyli)-ureidobentsyylipenisilliinejä, joiden kaava (I) on

o CH

* S y ό A-CH-CONH —1-f NCCh NH I 3 I A- N -

O S

NH C00H

Λτ°·

R

2 67703 tai näiden tautomeerejä, joiden kaava (I1) on

* S

A-CH-CONH---S J

NH ' GH3 I /k· N - CO 's ''

NE ° C00H

N NH

Y

R

joissa A on fenyyli- tai 4-hydroksifenyyliryhmä, ja R on ryhmä, jonka kaava on

NH - Z - X

jossa Z on mahdollisesti yhdellä tai kahdella metyyliryhmällä substituoitu alkyleeniryhmä, jossa on yhteensä 1-4 hiiliatomia, tai hydroksiryhmä substituenttina X substituoitu sykloheksyyliryhmä, ja X on syano-ryhmä, hydroksiryhmä, merkaptoryhmä, aminokarbonyyli- tai aminosul-fonyyliryhmä tai ryhmä, jonka yleiskaava on /Rl -COR1, -COOR1, -N ,

Xr2 -NHCOR^, -OR1, -OCOR1, -SR-j^ -SOR^ tai -SC^R^, jolloin näissä kaavoissa R^ on 1-4 hiiliatominen suoraketjuinen tai haarautunut alkyyliryhmä ja R2 on vetyatomi tai 1-4 hiiliatominen alkyyliryhmä, jolloin ryhmässä, jonka kaava on /R1

“V

R2 tai -OR^, R^ voi myös tarkoittaa fenyyliryhmää ja niiden fysiolo- 3 67703 gisesti sopivia suoloja epäorgaanisten tai orgaanisten emästen kanssa.

Yleiskaavojen I tai 1' mukaiset yhdisteet voivat esiintyä kiraali-suuskeskuksen C+ suhteen molemmissa mahdollisissa R- ja s-konfigu-raatioissa, kuitenkin myös näiden molempien konfiguraatioiden seoksena. Erityisen suositeltuja ovat sellaiset yhdisteet, joilla on D=R-konfiguraatio.

Yleiskaavojen I tai 1' mukaisilla yhdisteillä on laaja vaikutuskirjo grampositiivisia ja gramnegatiivisia bakteereita vastaan samalla kun ihmiset sietävät niitä hyvin.

Yleiskaavojen I tai 1' mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa seuraavasti : 1) Yleiskaavan lii mukainen yhdiste * S > CH3 A-CH-CONH—,-S NCcH3

nh2 I

f N \ (III)

COOH

jossa A tarkoittaa samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan yleiskaavan IV mukaisen pyrimidiinijohdoksen kanssa

B

Ar°" I '1 (IV)

Ny N

R

jossa R tarkoittaa samaa kuin edellä ja B on ryhmä -NCO tai ryhmän -NHCOOH reaktiivinen johdos, kuten esimerkiksi ryhmä -NHCOC1, -NHCOBr tai -NH-COO-^~^-NC>2, 4 67703 jolloin erityisen hyvänä pidetään ryhmää NHCOC1. Voidaan käyttää myös yleiskaavan IV mukaisten sellaisten pyramidiinijohdosten seoksia, joissa B:llä on osaksi jokin edellä mainituista merkityksistä ja osaksi jokin toinen merkitys, esimerkiksi B tarkoittaa samanaikaisesti ryhmiä -NCO ja -NCOC1.

H

Yleiskaavan III mukaisia lähtötuotteita voidaan käyttää epäorgaanisina tai orgaanisina suoloina, esimerkiksi trietyvliammoniumsuolana tai natriumsuolana. Reaktio voidaan tällöin suorittaa mielivaltaisissa seoksissa, jotka sisältävät vettä ja sellaisia orgaanisia liuottimia, jotka sekoittuvat veden kanssa, kuten ketonit, esimerkiksi asetoni, sykliset eetterit, esimerkiksi tetrahydrofuraani tai dioksaani, nitriilit, esimerkiksi asetonitriili, formamidit, esimerkiksi di-metyyliformamidi, dimetyvlisulfoksidi tai alkoholit, esimerkiksi iso-propanoli, tai heksametanoli. Tällöin reaktioseoksen pH pidetään pH-alueella noin 2,0 - 9,0, parhaiten välillä pH 6,5 ja 8,0, lisäämällä emäksiä tai käyttämällä puskuriliuoksia. Kuitenkin on myös mahdollista suorittaa reaktio vedettömissä orgaanisissa liuottimissa, esimerkiksi halogenoiduissa hiilivedyissä, kuten kloroformissa tai metyleenikloridissa lisäämällä emäksiä, parhaiten trietvvliamiinia, dietyyliamiinia tai N-etyylipiperidiiniä. Reaktio voidaan lisäksi suorittaa seoksessa, joka sisältää vettä ja veden kanssa sekoittu-matonta liuotinta, kuten eetteriä, esimerkiksi dietyvlieetteriä, halogenoituja hiilivetyjä, esimerkiksi kloroformia tai metyleeniklo-ridia, rikkihiiltä, ketoneja, esimerkiksi isobutyylimetyyliketonia, estereitä, esimerkiksi etikkahappoetyyliesteriä, aromaattisia liuottimia, esimerkiksi bentseeniä, jolloin on tarkoituksenmukaista sekoittaa voimakkaasti ja pitää pH-arvo emästä lisäämällä tai käyttämällä puskuriliuoksia pH-alueella 2,0 - 9,0, parhaiten välillä 6,5 ja 8,0. Reaktio voidaan kuitenkin suorittaa myös pelkästään vedessä, kun mukana on orgaanista tai epäorgaanista emästä tai kun lisätään puskuri-aineita .

Jos keksinnön mukaisen menetelmän lähtötuotteena käytetään yleiskaavan III mukaisten yhdisteiden silyvlijohdoksia (esimerkiksi mono- tai di-trimetyylisilyylijohdoksia) ja ne saatetaan reagoimaan yleiskaavan IV mukaisten yhdisteiden kanssa, niin yleensä toimitaan tarkoituksenmukaisesti vedettömissä tai hydroksyyliryhmiä sisältämättömissä liuot- 5 67703 timissa, esimerkiksi halogenoiduissa hiilivedyissä, esimerkiksi mety-leenikloridissa tai kloroformissa, bentseenissä, tetrahydrofuraanissa, asetonissa tai dimetyyliformamidissa jne. Tällöin ei ole tarpeen lisätä emäksiä, mutta tämä voi kuitenkin yksittäisissä tapauksissa olla edullista tuotteiden saannon ja puhtauden parantamiseksi. Mahdollisesti lisättyinä emäksinä käytetään tarkoituksenmukaisesti tertiääri-siä alifaattisia tai aromaattisia amiineja, kuten pyridiiniä tai tri-etyyliamiinia tai steeristen esteiden vuoksi vaikeasti asyloituvia sekundäärisiä amiineja, kuten disykloheksyyliamiinia.

Silyyliestereiden asemesta voidaan käyttää myös kaikkia muita a-amino-bentsyylipenisilliinien karboksyylijohdoksia, jotka tunnetaan puolisynteettisten penisilliinien valmistusalalla. Tyypillisiä esimerkkejä ovat trietyyliesteri, p-nitrobentsyyliesteri tai fenasvyliesteri. Reaktioiden yhteydessä nämä johdokset voidaan tunnetuilla menetelmillä muuntaa keksinnön mukaisiksi penisilliineiksi. Käytettyjen emästen määrän määrää esimerkiksi se, että halutaan säilyttää tietty pH-arvo. Kun pH-mittausta ja säätöä ei tehdä tai kun se ei ole mahdollista tai mielekästä siksi, että laimennusaineessa ei ole riittävästi vettä, emästä käytetään parhaiten 1,0 - 2,0 mooliekvivalenttia, kun käytetään yleiskaavan I mukaisia silyloimattomia yhdisteitä. Siinä tapauksessa, että käytetään silyloituja yhdisteitä, käytetään parhaiten emästä 1 mooliekvivalenttiin asti.

Emäksinä voidaan periaatteessa käyttää kaikkia orgaanisessa kemiassa tavanomaisesti käytettyjä orgaanisia tai epäorgaanisia emäksiä, kuten alkalimetalli- ja maa-alkalimetallihydroksideja, maa-alkalimetälli-oksideja, alkalimetalli- ja maa-alkalimetallikarbonaatteja ja -vety-karbonaatteja, ammoniakkia, primäärisiä, sekundäärisiä ja tertiäärisiä alifaattisia ja aromaattisia amiineja sekä heterosyklisiä emäksiä. Esimerkkeinä mainittakoon natrium-, kalium- ja kalsiumhydroksidit, kalsiumoksidi, natrium- ja kaliumkarbonaatti, natrium- ja kaliumvety-karbonaatti, etyyliamiini, metyyli-etyyliamiini, trietyyliamiini, hydroksietyyliamiini, aniliini, pyridiini ja piperidiini. Silyloituja lähtöaineita käytettäessä on kuitenkin otettava huorhiöon edellä mainitut, emästen laatua koskevat rajoitukset.

Puskurisysteemeinä voidaan käyttää kaikkia tavallisia puskuriseoksia, esimerkiksi fosfaattipuskuria, sitraattipuskuria ja tris(hydroksi-metyyli)amino-metaani-puskuria.

67703

Reaktiolämpötilat voivat vaihdella suurella alueella. Yleensä toimitaan välillä noin -10 ja noin +25°C, parhaiten välillä O ja +20°C. Yleiskaavojen II ja III mukaiset reaktiokomoonentit voidaan saattaa edeltäkäsin reagoimaan keskenään yhtä suurina moolimäärinä. Yksittäisissä tapauksissa voi kuitenkin olla tarkoituksenmukaista käyttää jompaa kumpaa reaktiokomponenttia ylimäärä lopputuotteen puhdistamisen helpottamiseksi tai saannon nostamiseksi.

2) Yleiskaavan V mukaiset ureidokarboksvylihapot

A-^H-COOH

NH

i

CO

NH

1 OH (V)

rV

N N R

jossa A ja R tarkoittavat samaa kuin edellä/ niiden suolat tai reaktiiviset johdokset saatetaan reagoimaan kaavan VI mukaisen 6-aminopeni-sillaanihapon EH ~ h2n-^_/S-< __ (VI)

/ N h‘l COOH

tai sen epäorgaanisten tai orgaanisten suolojen tai johdosten kanssa, jotka voidaan helposti muuntaa 6-aminopenisillaanihapoksi. Tämän jälkeen muodostunut reaktiotuote mahdollisesti hydrolysoidaan tai kata-lyyttisesti hydrogenolysoidaan yleiskaavan I tai 1' mukaiseksi penisilliiniksi .

Yleiskaavan V mukaisten ureidokarboksyylihappojen reaktiivisina johdoksina tulevat kysymykseen esimerkiksi niiden happoanhydridit, kuten esimerkiksi happoanhydridit, jotka johtuvat kloorimuurahaishappoes-tereistä, esimerkiksi kloorimuurahaishappoetyyli- tai -isobutyylies- 67703 teri, tai niiden reaktiiviset esterit, kuten p-nitrofenyvliesteri tai N-hydrbksisukkinimidiesteri, tai niiden reaktiiviset amidit, kuten N-karbonyyli-imidatsoli, ja myös niiden happohalogenidit, kuten vastaava happokloridi, tai niiden happoatisit. Periaatteessa voidaan käyttää kuitenkin kaikkia liittämismenetelmiä, jotka tunnetaan β-laktaamikemiasta.

6-aminopenisillaanihappo käytetään edullisesti johdoksena. Johdoksena tulevat tällöin kysymykseen esimerkiksi: sen trimetyylisilyvliesteri, trityyliesteri, p-nitrobentsyyliesteri, fenasyyliesteri ja sen 0,N-bis-trimetyylisilyylijohdos. Nämä johdokset saatetaan reagoimaan parhaiten aproottisessa liuöttimessa, kuten metyleenikloridissa tai tetrahydrofuraanissa. 6-aminopenisillaanihappo voidaan kuitenkin käyttää myös suolana, esimerkiksi trietyyliammoniumsuolana; tällöin käytetään esimerkiksi metyleenikloridia tai proottista liuotinta tai vesipitoista mediumia tai vesipitoista orgaanista liuotinta, kuten esimerkiksi tetrahydrofuraanin ja veden seoksia.

Ureidokarboksyylihappo, sen suola tai sen reäktiiviset johdokset saatetaan reagoimaan 6-aminopenisillaanihapon tai sen johdosten kanssa liuöttimessa lämpötiloissa välillä -40°C ja +40°C, mahdollisesti emäksen läsnäollessa. Jos esimerkiksi ureidokarboksyylihapon anhydridi, esimerkiksi anhydridi etyvliklooriformiaatin kanssa, saatetaan reagoimaan 6-aminopenisillaahihapon johdoksen kanssa, niin reaktio suoritetaan jäähdyttämällä, esimerkiksi -10°C - +10°C:ssa tertiäärisen amiinin, kuten trietvyliamiinin tai N,N-dimetyylianilii-nin läsnäollessa, liuöttimessa, kuten asetonissa, tetrahydrofuraanissa, dimetyyliformamidissa, kloroformissa, dikloorimetaanissa, heksa-metapolissa tai näiden liuotinten seoksessa. Jos esimerkiksi ureido-karboksvylihapon N-hydroksisukkinimidiesteri saatetaan reagoimaan 6-aminopenisillaanihapon kanssa, niin reaktio suoritetaan parhaiten O - 20°C:ssa emäksen, kuten trietyyliamiinin läsnäollessa, liuottimes-sa, kuten dimetyyliformamidissa, dikloorimetaanissa, dioksaanissa tai tällaisten liuotinten seoksessa.

Itse yleiskaavan IV mukaisen ureidokarboksvylihapon tai sen suolojen reaktio 6-aminopenisillaanihapon tai sen '.suolojen kanssa tapahtuu edullisesti kondensointiaineen läsnäollessa, esimerkiksi kun mukana on N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä.

67703

Jos käytetään 6-aminopenisillaanihapon johdosta, esimerkiksi jotakin sen edellä mainittua esteriä, niin reaktio-olosuhteista riippuen saadaan mahdollisesti reaktiotuote, joka sisältää esimerkiksi vielä esterifunktion. Tällainen reaktiotuote voidaan kuitenkin helposti muuntaa yleiskaavan I mukaiseksi penisilliiniksi. Jos esimerkiksi 6-aminopenisillaanihapon karboksyyliryhmä on silyvliesterinä, niin se voi reaktion jälkeen olla myös silyyliesterinään yleiskaavan I mukaisessa saadussa penisilliinissä. Tässä tapauksessa tämä silyyli-esteriryhmä hydrolysoidaan pois varsinaisen reaktion jälkeen, jolloin syntyy yleiskaavan I tai 1' mukainen yhdiste. Muissa tapauksissa, esimerkiksi kun kyseessä on p-nitrobentsyyliesteri, tämä p-nitro-bentsyyliryhmä lohkaistaan hydrogenolyyttisesti varsinaisen reaktion jälkeen, jolloin saadaan yleiskaavan I tai 1' mukainen penisilliini.

Suoritetun reaktion jälkeen jatkokäsitellään kummallakin menetelmällä saatu reaktioseos β-laktaami-antibiootikoiden yhteydessä tavanomaisesti käytetyillä menetelmillä; sama koskee lopputuotteiden eristämistä ja puhdistamista, esimerkiksi hapon vapauttamista suoloistaan ja vapaiden happojen muuntamista muiksi suoloiksi epäorgaanisten tai orgaanisten emästen avulla. Kalium- tai natriumsuolojen valmistamiseen sopii erityisen hyvin näiden suolojen saostaminen vapaan hapon alkoholi-eetteripä toisesta liuoksesta lisäämällä kalium- tai natrium-2-etyyliheksanoaattia.

Lähtöaineina käytetyt yleiskaavan III mukaiset yhdisteet tunnetaan kirjallisuudesta, vrt. esimerkiksi E.H. Flynn, Cephalosporines and PeniciHines, Academic Press, New York and London (1972).

Yleiskaavan IV mukaiset lähtöaineet voidaan saada esimerkiksi saattamalla vastaava yleiskaavan VII mukainen 5-aminopvrimidiini nh2

Jv. OH

fV

N ^N (VII)

R

9 jossa R tarkoittaa samaa kuin edellä, reagoimaan fosgeenin kanssa. Reaktio tapahtuu parhaiten hydroksvyliryhmiä sisältämättömässäliuot-timessa, kuten tetrahydrofuraanissa, metyleenikloridissa, kloroformissa, dimetoksietaanissa tai heksametapolissa, lämpötiloissa välillä -40 ja +60°C, parhaiten välillä -10 ja +20°C. Tällöin on suositeltavaa sitoa syntyvä kloorivety yhtä suurella moolimäärällä inerttiä orgaanista emästä, kuten trietyyliamiinia tai pyridiiniä. Liuottimena voidaan käyttää myös pyridiinin ylimäärää. Jos kyseeseen tulevat yleiskaavan VII mukaiset aminopyrimidiinit ovat niukkaliukoisia johonkin mainittuun liuottimeen, fosgenointi voidaan suorittaa myös heterogeenisessä faasissa. Sitä paitsi voidaan yleiskaavan VII mukainen aminopyrimidiini muuntaa, käsittelemällä silylointiaineella, kuten heksametyylidisilatsaani11a, trimetyylikloorisilaani/trietyynamiini 11a tai trimetyylisilyylidietyyliamiinilla, yleisesti mainittuihin liuottimiin erittäin helposti liukenevaksi, kerran tai, mukana olevista vaihtuvista vetyatomeista riippuen, useampaan kertaan sily-loiduksi aminopyrimidiiniksi, joka sen jälkeen saatetaan reagoimaan fosgeenin kanssa yleiskaavan IV mukaiseksi vastaavaksi yhdisteeksi. Liuottimen laadusta, lämpötilan korkeudesta, käytetyn emäksen määrästä ja laadusta riippuen syntyy joko ensisijassa vastaavaa isosyanaattia tai karbamiinihappohalogenidia tai näiden kummankin yhdisteen seosta. Reaktio-olosuhteista riippuen voi yleiskaavan IV mukainen yhdiste esiintyä vähäisessä määrin tai osittain myös yleiskaavan IVa mukaisena, isosyanaatin kanssa isomeerisenä tetrahydro-oksatsolo-pyrimidiininä 0 HN—- flT° (IVa)

N N

R

Yleiskaavan IV mukaisöt, fosgenoimalla syntyneet lähtötuotteet tai niiden seokset liukenevat yleensä hyvin edellä mainittuihin liuottimiin ja ylimääräisen fosgeenin poistamisen jälkeen ne voidaan enempää puhdistamatta saattaa suoraan reagoimaan yleiskaavan III mukaisten vastaavien penisilliinijohdosten kanssa.

10 67703

Yleiskaavan VII mukaiset 5-amino-4-hydroksi-2-subst.pyrimidiinit voidaan valmistaa esimerkiksi seuraavalla menetelmällä:

Seuraavan kaavan VIII mukainen 2-metvylimerkapto-4-hydroksi-5-nitro-pyrimidiini (vrt. Vorbruggen ja Strehlke, Chem. Ber. 106, s. 3039 (1973)) saatetaan reagoimaan yleiskaavan IX mukaisten substituoijen alkyyliamiinien kanssa, joissa X ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä, minkä jälkeen saadun yleiskaavan X mukaisen yhdisteen nitroryhmä pelkistetään tunnetuilla menetelmillä seuraavan reaktiokaavion mukaisesti:

NH

N02 N02 2 I li + X - Z - NH--^ I il -> I "

N N N

sch3 NH-Z-X NH-Z-X

VIII IX X VII

Lähtötuotteiden karakterisoimiseksi mainitaan tässä yhteydessä muutamia käytettyjen yleiskaavan VII mukaisten pyrimidiinien edustajia: 5-amino-4-hydroksi-2-(2'-hydroksietyvliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-2-(3'-hydroksipropyyliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-2-(2'-hydroksipropyyliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-2-(2'-hydroksi-2'-metyyli-propyyliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-2-(21-metoksietyyliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-2-(2'-etoksietyyliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-2-(3'-metoksipropyyliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-2-(etoksikarbonyyli-metyyliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-(21-etoksikarbonyyli-etyvliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-(2'-etyylimerkapto-etyyliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-(2'-metyylimerkapto-etyyliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-(2'-syano-propyyliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-(4'-hydroksi-sykloheksyyliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-(2'-metyylikarbonyyli-etyyliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-(3'-aminokarbonyyli-propyyliamino)-pyrimidiini ti 11 67703 5-amino-4-hydroksi-(3'-aminosulfonyyli-propyyliamino)-pyrimidiini 5-amino-4-hydroksi-(2'-asetyyliamino-etyyliamino)-pyrimidiini yleiskaavan V mukaiset ureidokarboksyylihapot voidaan valmistaa saattamalla yleiskaavan IV mukaiset pyrimidiinijohdokset reagoimaan yleiskaavan XI mukaisten glysiinijohdosten kanssa * A-C-COOH (XI) nh2 jossa A tarkoittaa samaa kuin edellä. Reaktio tapahtuu lämpötilassa välillä -20 ja +40°C, parhaiten välillä 0 ja +20°C, liuottimessa. Liuottimena voidaan tällöin käyttää esimerkiksi veden ja orgaanisten liuottimien, jotka sekoittuvat veden kanssa, kuten esimerkiksi asetoni, tetrahydrofuraani , dioksaani, asetonitriili, dimetyyli-formamidi, etanoli, dimetyylisulfoksidi, seoksia. Mahdollisesti on käytettävä halogeenivetyä sitovaa ainetta. Tällaisiksi sopivat esimerkiksi trialkyyliamiinit, kuten trietyyliamiini tai epäorgaaniset emäkset, kuten laimennettu natriumhydroksidi.

Nyttemmin on havaittu, että yleiskaavan I tai 1' mukaisilla yhdisteillä on arvokkaita farmakologisia ominaisuuksia samalla kun niiden siedettävyys on hyvä. Keksinnön mukaisia tehoaineita voidaan sen vuoksi käyttää paikallisten ja systeemisten infektioiden profylaksiaan ja kemoterapiaan ihmis- ja eläinlääketieteessä. Sairauksina, jotka voidaan keksinnön mukaislla yhdisteillä estää tai parantaa, mainittakoon esimerkiksi hengitysteiden, nielutilan ja virtsateiden sairaudet; yhdisteet vaikuttavat erityisesti seuraavia vastaan: Pharyngitis, keuhkokuume, Peritonitis, Pyelonephritis, Otitis, Cystitis, Endocarditis, Bronchitis,

Arthritis ja yleiset systeemiset infektiot.

Tämä on mahdollista siksi, että yleiskaavan I tai 1' mukaiset yhdisteet vaikuttavat sekä in vitro että myös in vivo erittäin voimakkaasti vahingollisten mikro-organismien, erityisesti gram-positiivisten ja gramnegatiivisten bakteereiden vastaisesti.

12 67703 Tällöin niille on tunnusomaista erityisesti laaja vaikutuskirjo. Lisäksi yleiskaavan I tai 1' mukaisilla yhdisteillä on oraalisen tai parenteraalisen antamisen jälkeen korkea peili-arvo kudoksissa, seerumissa, elimissä ja virtsassa.

Erityisen hyvä antibakteerinen vaikutus on seuraavilla yleiskaavan I tai 1' mukaisilla yhdisteillä, joissa ryhmällä A ja ryhmällä R on taulukossa annettu merkitys:

Taulukko _A_R_

Fenyyli -NHCH2CH2OH

p-hydroksifenyyli -NHCH2CH2OH

p-hydroksifenyyli -NHCH2C(CH3)2OH

p-hydroksifenyyli -NH(CH2)3OH

Fenyyli -NHCH2CH(CH3)OH

p-hydroksifenyyli -NHCH2CH(CH3)OH

Fenyyli -NHCH2CH2OCH3 p-hydroksifenyyli -NHCH2CH2OCH3

Fenyyli -NHCH2CH2OC2H5 p-hydroksifenyyli -NHCH2CH2OC2H5

Fenyyli -NH(CH2)3OCH3 p-hydroksifenyyli NH(CH2)3OCH3 p-hydroksifenyyli NHCH2COOC2H3 p-hydroksifenyyli NHCH2CH2COOC2H5

Fenyyli NHCH2CH2SC2H3 p-hydroksifenyyli NHCH2CH2SC2H3 p-hydroksifenyyli NHCH2CH2SCH3

p-hydroksifenyyli NHCH2CH(CH3)-CN

p-hydroksifenyyli NHCH2CH2NHCOCH3 p-hydroksifenyyli NHCH2CH2CH2-CONH2 p-hydroksifenyyli NHCH2CH2CH2S02NH2

Fenyyli ΝΗ-^ΊΓ^-ΟΗ 13 67703

p-hydroksifenyyli NH- 0 -OH

p-hydroksifenyyli NHCH^H^OCH-j

Keksinnön mukaisten penisilliinien tehokkuus voidaan osoittaa esimerkiksi seuraavilla tutkimuksilla: 1. In vitro kokeet

Tutkimuksissa käytettiin sarjalaimennustesti-menetelmää mikrotiit-terisysteemissä. Yhdisteiden bakteriostaasi-vaikutus tutkittiin nestemäisessä mediumissa. Bakteriostaasi-vaikutus tutkittiin seuraavissa konsentraatioissa: 80; 40; 20; 10; 5; 2,5; 1,25; 0,6; 0,3; 0,08 ja 0,02 }ig/ml. Käytetyn ravintoalustan koostumus oli seuraava: 10 g peptonia, 8 g oksoidin lihauutetta, 3 g natriumkloridia, 2 g sek. natriumfosfaattia, täyttö tislatulla vedellä 1000 xnl:aan (pH 7,2 - 7,4). Vain streptokokkeja vastaan testattaessa lisättiin 1 % glukoosia. Primääriviljelmän ikä oli noin 20 tuntia. Organismisuspensio säädettiin fotometrillä ("Eppendorf") (reagenssilasin halkasiija 14 mm, suodatin 546 nm) bariumsulfaatti-vertailususpension samentuman avulla. Bariumsulfaat-ti-liete valmistettiin lisäämällä 3,0 ml 1-prosenttista bariumklori-diliuo&ta 97 ml:aan 1-prosenttisesta rikkihappoa. Säädön jälkeen Streptococcus Aronson laimennettiin keittosuolaliuoksella suhteessa 1:15 ja muut testiorganismit suhteessa 1:1500.

Kutakin ainetta punnittiin 16 mg 10 ml mittakolviin ja täytettiin liuottimena merkkiin asti. Muut laimennussarjat valmistettiin tislatulla vedellä tai kyseeseen tulevalla liuottimella.

Mikrotiitterilevyjen syvennyksiin laitettiin 0,2 ml ravintomediumia, 0,01 ml vastaavaa yhdisteen laimennusta ja pisara organismisuspensiota (0,01 ml) ja inkuboitiin 18 - 20 tuntia 37°C:ssa. Liuotinkontrolli kulki koko ajan mukana.

Tulokset luettiin makroskooppisesti ilmoittamalla kyseinen raja-konsentraatio (= alhaisin vielä bakteriostaattisesti vaikuttava konsentraatio).

14 67703

Testiorganismeina käytettiin:

Staphylococcus aureus SG 511, Escherichia coli ATCC 9637 ja 11 775, Pseudomonas aeruginosa Hamburgensis, ATCC 10 145 ja Pseudomonas aeruginosa Walter, Serratia marcescens ATCC 13 880, Klebsiella pneumoniae ATCC 10 031 ja 272 ja Proteus mirabilis Hamgurgensis.

Seuraavassa taulukossa 1 on annettu saadut pienemmät ehkäisykon-sentraatiot (MIC) tyypillisille keksinnön mukaan valmistetuille yhdisteille.

Yleiskaavan I tai 1’ mukaisten yhdisteiden natriumsuola, kun A ja R merkitsevät: _A_R_Esim._

ρ-hydroksifenyyli NHCH2CH2OCH3 1 = A

p-hydroksifenyyli NH(CH2)3OH 13 = B

p-hydroksifenyyli NH-^ H ^-OH 26 - C

p-hydroksifenyyli NHCH2CH2COOC2H5 17 = D

p-hydroksif enyyli NHCH2CH2SC2H,j 24 * E

p-hydroksifenyyli NH(CH2)2OC^Hg 5 * F

p-hydroksifenyyli NH(CH2)3OCH(CH3)2 9 = G

fenyyli NH(CH2)2OC2H5 3 = H

p-hydroksifenyyli NH(CH2)2OCgH5 19 = I

fenyyli NH(CH2)2OH 12 = K

p-hydroksifenyyli NHCH2CHOH 14 = L

ch3 CH-,

i J

p-hydroksifenyyli NHCH2C-OH 10 = M

ch3

p-hydroksifenyyli NHCH2COOC2Hg 16 = N

p-hydroksifenyyli NH(CH)2NHCOCH3 20 =0 15 67703

Vertailuaineena käytettiin kaavan XII mukaista penisilliiniä (atslosilliini) = P

^3“ ot-conh—I-{ S CH3 I J- N-\ CO g ** I COONa CN (XII) V0 N'

H

sekä julkaisun DE-OS 24 50 668 esimerkissä 6 kuvattua yhdistettä (yhdiste Q), jonka kaava On /-V S v CH3 HO -/ O V- CHCONH -S —CH3

'-' NH I

\ J-N - C=0 o ^ NH C00Na ΛΓ 16 67703 ω

•H

f—I •H

• X

4-i ra · cc oo n co te ir> m

O h tr voroooovomrorooooromcNCN TO

kj-HX ---------------- 3

P( g K OOOOOOOOOOOOOOrHr—I D

At

M -H

• · O X

TO e X TO

X D TO :TO

<D <D cm tn x >

iH C Γ"· OOOOOCOO -OOOOOOO rH

Pj CM 'fHHHHHNNNNHNH'),'fOO CTO

Λ TOTO

Ό

• · -pj C

TOE »—I TOO

X 3 (J cl X

pH TO U O TOC

TOCE-lOOOOOOOOO OOOOOOO -H TO

fci tt<HMH(NHHHNf>lir!(NNM(NH,H,CC Ό TO

Λ XX

• >i TO

O TO

X TO C >

TOTO TO

i-i u mintnintnininm -i-iTO

ij u locMCMCMiccMCMincMiDCMmcMin θ·η

TO TO X TO

TO E OHHHOHHNHOHOHINIiU/1 XE

•H TO C -H

• · -H C

Ό O' in TOTO

DDu^mminm tn tn e O' TO uUrlNWNinNinin in id in io cm cm i-i TOTOEhO - -- -- -- ------ -o

PiTOCHHHHtNHNNinNONOHHinin C

TO C TO TO

• · x tj ·

T3 tjl Ή ·Η O

3 3 · m in in in m in TOO

TOv-inn pj n in in in in cm cm io cm cm > rH to to TO X ------ ----- to TO ·γί

Aj TO Ö3 HHCMCMCMCMinininHHOHHOO X TO

pH CM 14 Aj p- (0 ·Η

pH · · M X TO C

E Ό O' TO TO TO TO

\DDX in m in ΟΌ cp ο ii p| in in in cun n in in λ: TO -pi

D TO TO TO --- ----- D-hTO

— CiTOS inintNNNininininpHCHpHpHNoo pHTOX

pH CM D ·Η TO

X (0 > -H

0 -H X ·γΗ Ό

> pH in -H X

uoun-in in in in in in ro x D

TO DCjr- CNlOlClOlOCMCMlClOCMlOnCMCM X (C H

1 -------------- TO 01 ·ρ|

CJ W < H HOOOOHHOOHOOHHOin (0TOTO

M pH > C X

a to e u

•H pH TO TO

C pH O ll > TO out'- m in in in rj\

•h o U <n cMioiomiccMCMipioiovoroiocN :TO C

C · E-i lO — — — — — — — — — — —— — — rH :TO “pi pH-Η W < Οι HOOOOHHOOOOGOHOin H H 3

•Pi pH <u TO JC

OH Ό *H

4C H TO TO Η Χ λ; ·η x h Cu

Draw Che

H H »H TO Pj TO

DC Ό <fflUDBfe01SH|iJS20P-0 X >i H

TO TO X D Sh TO

Eh Oj Sh Ui X Dj 67703

Akuutti toksisuus määritettiin valkoisilla laboratoriohiirillä kasvavina annoksina antamalla taulukon 1 mukaisia yhdisteitä peroraalisti ja subkutaanisti.

LD^q on annos, jonka antamisen jälkeen eläimistä kuolee 50 % 8 päivän sisällä. Suun kautta annettaessa kaikilla aineilla LD^0 oli yli 4 g/kg, subkutaanisti annettaessa oli yli 3 g/kg, so. annoksella 3 g/kg eläimiä ei kuollut yhtään. Yhdisteet ovat siten käytännön kannalta toksittomia.

Jodkko keksinnön mukaisia yhdisteitä tutkittiin in vivo hiirillä kokeellisessa infektiossa. Patogeenisinä bakteereina käytettiin E.coli ATCC 11775 ja Pseudomonas aeruginosa Walter. Intraperitoneaalinen infektio käynnistettiin 0,2 ml:lla bakteerisuspensiota (5 % musiinia).

6 6 Tämä vastaa noin 1,4x10 E.coli-solua tai 1,3x10° Pseudomonas-solua/ hiiri. NMRI-kannan naarashiiret jaettiin 10 eläimen ryhmiin. Kaksi ryhmää jätettiin käsittelemättä ja muut ryhmät käsiteltiin subkutaanisti kyseisen keksinnön mukaisen penisilliinin eri annoksilla ED^^-arvon määrittämiseksi (annos, jossa eläimistä jää eloon 50 %).

E.coli-infektiossa hoito tapahtui ensimmäisenä päivänä kolme kertaa (1,4 ja 7 tuntia infektoinnin jälkeen) ja 2. päivänä 2 kertaa. Pseudomonas-infektiossa käsiteltiin ensimmäisenä päivänä 6x (1,3, 5,7,9,11 tuntia infektoinnin jälkeen) ja seuraavina kahtena päivänä kaksi kertaa päivässä.

Kummassakin tapauksessa tarkkailuaika oli 7 päivää. Tämän testin tulokset keksinnön mukaisten penisilliinien edustajilla on esitetty taulukossa 2.

18 67703

Taulukko 2

In vivo-aktiivisuus hiirillä (s.c. applikaatio) E.coli-infektio Pseudomonas

Yhdiste_ED5q (mg) kg)_ED5p (mg/kg_ A 2 1,5 B 0,8 1,2 C 0,7 1,7 D 4,2 E_1/7_2_j3_ P_35_110_

Yhdisteet A - E ovat myös tässä yhteydessä merkittävästi parempia kuin tunnettu yhdiste P.

SE-julkaisu 417 517 kuvaa penisilliinejä, joiden substi-tuentit kuitenkin ratkaisevasti eroavat hakemuksessamme esitetyistä. Julkaisussa ei kuvata ureidopenisilliinejä, jonka ureidoryhmä on substituoitu 4-hydroksi-5-pyrimidi-nyyliryhmällä. Tunnetulla yhdisteellä on lisäksi huomattavasti heikommat MlC-arvot kuin hakemuksessamme esitetyillä. Keksinnön mukaan valmistetut yhdisteet ovat esimerkiksi noin kymmenen kertaa tehokkaampia E.coli-kantoja vastaan ja ovat keskimäärin huomattavasti tehokkaampia Pseudomonas aeruginosa-kantoja vastaan, Serratia-kantoja vastaan keksinnön mukaan valmistetut yhdisteet ovat jopa 100 kertaa tehokkaampia, kuin SE-julkaisussa kuvatut penisilliiniyhdisteet.

Il 19 67703 DK-julkaisu 131 502 kuvaa substituoimattomia ureidobent-syylipenisilliinejä, jotka esitettyjen arvojen mukaan ovat jonkin verran tehokkaampia kuin ampisilliini. Edellä esitetyistä koetuloksista selviää, että kaavan I mukaiset yhdisteet ovat tehokkaampia kuin atsolsilliini, joka vuorostaan on tehokkaampi gramnegatiivisia bakteereita vastaan kuin ampisilliini.

DE-hakemusjulkaisussa 24 50 668 on esitetty yhdisteitä, jotka eniten muistuttavat kaavan I mukaisia yhdisteitä. Edellä esitetyssä vertailukokeessa on käytetty tästä julkaisusta tunnettua yhdistettä (esim. 6) CL-<*-(4-hydroksi-3-pyridyyli-3-ureido)-p-hydroksibentsyyli-penisilliiniä. Vertailukokeet osoittavat kuitenkin, että myöskin tämä tunnettu yhdiste on teholtaan heikompi kuin keksinnön mukaan valmistetut.

Oheisen keksinnön tavoitteena on edelleen tuoda esiin farmaseuttiset aineet, jotka ovat arvokkaita hoidettaessa infektiosairauksia sekä ihmisissä että eläimissä.

Suositeltuina farmaseuttisina valmisteina mainittakoon tabletit, lääkerakeet, kapselit, qranulaatit, lääkepuikot, liuokset, suspensiot, emulsiot, salvat, geelit, kermat, jauheet ja suihkeet. Ihmis- ja eläinlääketieteessä annetaan tehoainetta tai yleiskaavan I tai 1' eri tehoaineiden seosta edullisesti annostuksena välillä 5 ja 500, parhaiten 100 - 200 mg/painokilo 24 tuntina, mahdollisesti useampana yksittäisannoksena. Yksittäisannos sisältää keksinnön mukaista tehoainetta tai tehoaineita parhaiten 1 - noin 250, erityisesti 10 - 60 mg/painokilo. Kuitenkin voi olla tarpeen poiketa mainituista annostuksista, erityisesti riippuen hoidettavan kohteen laadusta ja painosta, sairauden laadusta ja vaikeudesta, valmisteen 20 67703 laadusta ja lääkeaineen antamistavasta sekä aikavälistä, jonka sisällä antaminen tapahtuu. Muutamissa tapauksissa voi siten riittää, että tehoainetta käytetään edellä mainittua määrää vähemmän, kun taas toisissa tapauksissa on ylitettävä annetut tehoainemäärät. Jokainen ammattimies voi ammattitietojensa perusteella helposti määrittää kulloinkin tarvitun tehoaineen optimaalisen annostuksen ja antamistavan.

Seuraavat esimerkit selventävät keksintöä lähemmin; "Apisilliinilla" tarkoitetaan sitä c<-aminobentsyyli-penisilliiniä ja "amoksisilliinilla" sitä cK-amino-p-hydroksi-bentsyylipenisilliiniä, jossa sivuketjussa on D=R-konfiguraatio.

I. Lähtötuotteiden valmistaminen

Esimerkki A

5-amino-4-hydroksi-2-(21-metoksietyyliamino)-pyrimidiini a) 5,02 g (0,025 moolia) 2-etyylimerkapto-4-hydroksi-5-nitro-pyrimidiiniä 100 mltssa etanolia ja 3,76 g (0,05 moolia) 2-metoksietyyliamiinia kuumennetaan 16 tuntia refluksoiden. Jäähdyttämisen jälkeen saostunut tuote erotetaan imulla, pestään pienellä määrällä etanolia ja kuivataan. Yhdiste sekoitetaan sen jälkeen veden kanssa ja tehdään happameksi 2 n suolahapolla. Sen jälkeen erotetaan imulla, pestään vedellä ja kuivataan.

Saanto; 3,9 g (73 %)

Sp. 222°C

21 67703

Analyysi: Laskettu: C 39,25 % H 4,71 % N 26,16 %

Saatti: C 38,76 % H 4,91 % N 26,10 % b) 3,9 g näin saatua nitroyhdistettä hydrataan 200 ml:ssa etanolia 3,9 g:lla Raney-nikkeliä 2 tunnin aikana 50°C:ssa. Etanoli tislataan pois, minkä jälkeen öljymäinen tuote suodatetaan nopeasti lyhyen silikageelipylvään läpi (eluointiaineena metvleenikloridi/metanoli 3:1) .

Saatu tuote (2,1 g = 63 %) hajoaa ilmassa öljymäiseksi aineeksi. Analyysi: Laskettu: C 45,64 H 6,57 N 30,42

Saatu: C 44,97 H 6,88 N 29,11 IR-spektri: 3260, 3050 (leveä), 2960, 2930, 2880, 1670, 1610, 1580, 1110 cm ^; NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 3,3 (s, 3H), 3,5 (m,4H), 7,05 (s,lH).

Analogisesti syntetisoitiin seuraavat yleiskaavan VII mukaiset amino-pyrimidiinit: _R_Saanto*_Analyysi_ NH(CH2)2°c2H5 47 % Lask.: C 48,47 H 7,12 N 28,27

Saatu: C 47,91 7,24 27,95 NH(CH2)2OC3H7 51 % Lask.: 50,93 7,60 26,40

Saatu: 51,01 8,27 25,95 NH(CH2)2OC4Hg 41 % Lask.: 53,07 8,02 24,76

Saatu: 52,81 8,17 24,01 NH(CH2)3OCH3 38 % Lask.: 48,47 7,12 28,27

Saatu: 48,07 6,99 27,75 NH(CH2)3OC2H5 52 % Lask.: 50,93 7,60 26,46

Saatu: 50,42 7,87 26,12 NH(CH2)3OC3H7 50 % Lask.: 53,07 8,02 24,76

Saatu: 53,01 8,12 24,04 22 67703 _R_Saanto*_Analyysi_ NH(CH^)„OC^H 28 % Lask.: C 58,52 H 5,73 N 22,75

2 2 o D

Saätu: 58,43 5,87 22,50 NH(CH2)2OH 40 % Lask.: 42,35 5,92 32,93

Saatu: 41,89 5,76 31,88 NH(CH2)3OH 37 % Lask.: 45,64 6,57 30,42

Saatu: 45,70 6,65 29,32 NHCH2CH0H 54 % Lask.: 45,64 6,57 30,42 ' Saatu: 45,07 6,70 30,40 ch3 NHCH2C(CH3)20H 58 % Lask.: 48,47 7,12 28,27

Saatu: 48,45 7,14 28,20 ΝΗ-^Η~^-0Η 54 % Lask.: 53,86 7,19 24,98

Saatu: 53,58 7,66 24,95 NHCH2CH2N(C2H5)2 38 % Lask.: 53,31 8,50 31,09

Saatu: 53,78 8,72 30,60 NHCH2C00C2H5 46 % Lask.: 45,28 5,70 26,40

Saatu: 45,37 5,96 25,35 NHCH2CH2COOC2H5 44,5 % Lask.: 47,78 6,24 24,77

Saatu: 46,90 6,17 23,80 NHCH2CH2SCH3 31 % Lask.: 42,00 6,00 28,01

Saatu: 41,.53 6,24 27,07 NHCH2CH2SC2H5 43 % Lask.: 44,84 6,59 26,15

Liimamainen Saatu: 44,75 6,71 25,75 aine NHCH2CHCN 56 % Lask.: 49,74 6,00 36,27 CH3 Saatu: 49,22 6,17 35,64 23 6 7 7 0 3 __R_Saanto*_Analyysi_ NHCH2CH2COCH3 54,5 % Lask.: C 48,98 H 6,12 N 28,57

Saatu: 49,64 6,21 27,89 NHCH2CH2NHC6H5 61,5 % Lask.: 58,78 6,12 28,57

Saatu: 58 ,21 6,27 27 ,44 NHCH2CH2NHCOCH3 51 % Lask.: 45,49 6,20 33,16

Saatu: 45,22 6,29 32,20 NH(CH2)3CONH2 31 % Lask.: 45,50 6,16 33,18

Saatu: 46.01 6,42 31,94 NH(CH2)3S02NH2 42,5 % Lask.: 34,01 4,86 28,34

Saatu: 34,44 5,04 27,80

Esimerkki B

5-amino-2-(2'-etyylisulfinyyli-etyyliamino)-4-hydroksi-pyrimidiini 3,2 g 5-amino-2-(2'-etyylimerkapto-etyyliamino)-4-hydroksi-pyrimi-diinä (0,015 moolia) liuotetaan seokseen, jossa on 60 ml absoluuttista metanolia ja 60 ml absoluuttista metyleenikloridia, ja liuokseen lisätään -15°C:ssa 2,89 g (0,015 moolia) m-klooriperbentsoe-happoa liuotettuna 50 ml:aan metyleenikloridia. Sekoitetaan 8 tuntia 0°C:ssa. Seos haihdutetaan tyhjiössä lähes kuiviin ja fraktioidaan silikageelipylväässä metyleenikloridi-metanoliseoksella, jonka suhde on aluksi 10:1, sen jälkeen 5:1. Saadaan 1,42 g (41,1 %) yhtenäistä tuotetta.

Analyysi: Laskettu: C 41,72 H 6,13 N 24,33 Saatu: 41,44 6,12 24,48 IR-spektri: 1650, 1610, 1530, 1010 cm"1 NMR-spektri (DMSO + CD3OD) signaalit, ppm: 1,5 (t,3H), 2,8 (m,4H), 3,4 (t,2H), 7,1 (s,lH);

Esimerkki C

°·^"·£3- (4-hydroksi-2- {2' -metoksietyyliamino}-5-pyrimidinyyli) -ureidoj-f enyyliglysiini_______ 1,84 g (0,01 moolia) 5-amino-4-hydroksi-2-(2'-metoksietyyliamino)- 24 67703 pyrimidiiniä liuotetaan absoluuttiseen tetrahydrofuraaniin, liuokseen lisätään 1,35 ml trietyyliamiinia ja jäissä jäähdyttäen tiputetaan seokseen, jossa on 1,05 g fosgeenia 30 mlissa tetrahydrofuraania. Sen jälkeen seos haihdutetaan tyhjiössä noin 50 ml:ksi ja tämän jälkeen se tiputetaan jäissä jäähdyttäen liuokseen, jossa on 1,51 g (0,01 moolia) D-fenyyliglysiiniä, joka on 10 mljlla 1 n natriumhydroksidia liuotettu tetrahydrofuraanin ja veden 1:1 seokseen. Lisäyksen jälkeen sekoitetaan 2 tuntia huoneen lämpötilassa, jolloin pH-arvo pidetään noin arvossa 9 c/(10 natriumhydroksidilla.

Sen jälkeen tetrahydrofuraani poistetaan tyhjiössä. Vesiliuos ravistellaan pH-arvossa 7 kaksi kertaa 100 ml:lla etikkahappoetyyliesteriä, sen jälkeen tehdään happameksi pH-arvoon 3,1 ja saostunut tuote erotetaan imulla. Kuivataan fosforipentoksidilla, jolloin saadaan 2,06 g (57 %) väritöntä kiinteää tuotetta.

IR-spektri 1720 (olka, 1680 (leveä), 1550, 1570 cm"1 NMR-sepktri (DMSO + CD3OD) signaalit, ppm: 3,3 (2H), 3,5 (3H), 3,6 (2H), 5,2 (1H), 7,3 (5H), 8,15 (1H)

Analyysi: Laskettu: C 53,18 H 9,90 N 19,39 Saatu: 54,02 10,11 18,78

Samoin valmistettiin: D-<*-£3- (2- (2' -etyylimerkapto-etyyliamino) - 4-hydroksi-5-pyrimidinyyli)-ureido)-p-fenyyliglysi ini II. Lopputuotteiden valmistaminen

Esimerkki 1 D-o(-£3- (4-hydroksi-2-{21 -metoksiee tyyli amino) -5-pyr imidinyyli) -ureidol-p-hydroksibentsyylipenisilliini-natrium_ 1 mg 5-amino-2-(21-metoksietyyliamino)-4-hydroksi-pyrimidiiniä (0,005 moolia) liuotetaan lämmittäen 250 ml:aan absoluuttista tetrahydrofuraania ja liuokseen lisätään 500 mg trietyyliamiinia. Tämä liuos tiputetaan 0°C:ssa liuokseen, jossa on 500 mg fosgeenia 30 ml:ssa absoluuttista tetrahydrofuraania. Sekoitetaan edelleen noin 30 minuuttia jäissä jäähdyttäen. Sen jälkeen liuoksen läpi johdetaan 25 67703 typpeä reagoimattoman fosgeenin poistamiseksi.

2,1 g amoksisilliini-trihydraattia (0,005 moolia) suspendoidaan 80 ml:aan vesipitoista 80-prosenttista tetrahydrofuraania ja jäähdytetään 0°C:een. Sen jälkeen lisätään niin paljon trietyyliamiinia, että muodostuu liuos. Liuokseen tiputetaan 5 minuutin kuluessa edellä valmistettu suspensio, jolloin pH pidetään arvossa 7,5 trietyyliamii-nin avulla. Lisätään vielä 30 ml vettä ja reaktioseosta pidetään 1 tunti 0 - 2°C:ssa. Jäähdytys poistetaan ja sekoitetaan vielä 1 tunti huoneen lämpötilassa.

Sen jälkeen lisätään 40 ml vettä ja tetrahydrofuraani poistetaan tyhjiössä. Jäljelle jäänyt vesifaasi pestään kaksi kertaa 50 ml :11a etikkahappoetyyliesteriä. Samalla sekoittaen lisätään tämän jälkeen vesiliuokseen hitaasti 2 n suolahappoa tipottain pH-arvoon 2,9 asti, jolloin lämpötila pidetään alle 5°C. Saostunut tuote erotetaan imulla ga·kuivataan eksikaattorissa. Kiinteään tuotteeseen lisätään liuos, jossa on 700 mg natriumheksanoaattia 25 ml:ssa metanolia, ja syntyneeseen liuokseen lisätään eetteriä. Saostunut natriumsuola erotetaan imulla ja kuivataan tyhjiössä.

Saanto: 2,14 g (71,2 %) IR-spektri: 1765, 1660, 1610, 1540 cm NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1.5 (d,6H), 3,3 (s,3H) , 3,5 (m,4H), 4,0 (s,lH), 5,4 (o,2H), 5.5 (s,1H), 6,8 (d,2H), 7,3 (d,2H), 8,15 (s,lH).

Esimerkki 2 D-a-/3-(2-{2'-etoksietyyliamino}-4-hydroksi-5-pvrimidinvyli)-ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineena käytettiin 1,68 g (0,004 moolia) amoksisilliini-trihydraattia ja tuotetta, joka oli saatu saattamalla reagoimaan 790 mg (0,004 moolia) 5-amino-2-(2'-etoksietyyliamino)-4-hydroksi-pyrimidiiniä, 400 mg fosgeenia ja 0,53 ml trietyyliamiinia.

Saanto: 1,58 g natriumsuolaa (64,2 %) ; IR-spektri: 1770, 1660, 1610, 1550, 1510 cm-1; NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,15 (t,3H), 1,55 (d,6H), 3,6 (m,6H), 4,05 (s,lH), 5,45 (m,3H), 6,8 (d,2H), 7,3 (d,2H), 8,15 (s,lH).

Esimerkki 3 26 67703 D-a-/3-(2-{2'-etoksietyyliamino}-4-hydroksi-5-pyrimidinyyli)-ureido/-bentsyylipeni silliini-natrium__________ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineena käytettiin 2,25 g (0,006 moolia) ampisilliini-natriumsuolaa ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 1,19 g (0,006 moolia) esimerkin 2 mukaista pyrimidiiniä, 600 mg fosgeenia ja 0,8 ml trietyyliamiinia.

Saanto: 2,11 g natriumsuolaa (59 %);

IR-spektri: 1765, 1650, 1610, 1545 cm "S

NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,15 (t,3H), 1,50 (d,6H), 3,65 (m,6H), 4,05 (s,lH), 5,45 (q,2H), 5,55 (s,lH), 7,4 (m,5H), 8,10 (s ,1H) .

Esimerkki 4 D-a-/3-(4-hyroksi-2-{2'-propoksietyvliamino}-5-pyrimidinyyli)-ureido/-p-hydroksi-bentsvvlipenisi1liini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineena käytettiin 2,1 g amoksisilliini-trihydraattia (0,005 moolia) ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 1,13 g 5-amino- 4-hydroksi-2-(21-propoksietyyliamino)-pyrimidiiniä, 500 mg fosgeenia ja 0,68 ml trietyyliamiinia.

Saanto: 1,8 g natriumsuolaa (57,5 %); IR-spektri: 1765, 1650, 1615, 1545 cm-1; NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,0 (t,3H), 1,45 (m,2H), 1,55 (d,6H), 3,55 (m,6H), 4,05 (s,lH), 5,45 (q,2H), 5,5 (s,lH), 6,8 (d,2H), 7,3 (d,2H), 8,15 (s,lH).

Esimerkki 5 D-CX-/3- (2— { 2 * -butoksietyyliamino}-4-hydroksi-5-pyrimid£nvyli) -ureido/-p-hydroksi-bentsyylipeni silli ini -natrium_____________ 27 67703 Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 840 mg amoksisilliini-trihydraattia (0,002 moolia) ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 450 mg (0,002 moolia) 5-amino-2-(2'-butoksietyyliamino)-4-hydroksi-pyrimidiiniä, 200 mg fosgeenia ja 0,27 ml trietyyliamiinia.

Saanto: 615 mg natriumsuolaa (48 %); IR-spektri 1770, 1650, 1615, 1550 cm NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 0,9 (t,3H), 1,4 (m,4H), 1,6 (d,6H), 3,5 (m,6H), 4,05 (s,lH), 5,45 (m,3H), 6,8 (d,2H), 7.35 (d,2H), 8,2 (s,lH).

Esimerkki 6 D-a-/3-(4-hydroksi-2-{3'-metoksipropyyliamino}-5-pyrimidinyyli)-ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineena käytettiin 2,1 g amoksisilliini-trihydraattia (0,005 moolia) ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 1,0 g (0,005 moolia) 5-amino-4-hydroksi-2-(3'-metoksipropyyliamino)-pyrimidiiniä, 0,5 g fosgeenia ja 0,68 ml trietyyliamiinia.

Saanto: 1,82 g natriumsuolaa (60 %); IR-spektri: 1765, 1650, 1600, 1500 cm NMR-spektri (DMSO + CD^LD) signaalit, ppm: 1,55 (d,6H), 1,8 (m,2H), 3,2-3,6 (m,7H), 4,05 (s,lH), 5,4 (q,2H), 5,5 (s,lH), 6,8 (d,2H), 7.35 (d,2H), 8,15 (s,lH).

Esimerkki 7 D-a-/3-(4-hydroksi-2-{3'-metoksipropyyliamino}-5-pyrimidinyyli)-ureido/-bentsyylipenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 4,5 g (0,012 moolia) ampisilliinin-natriumsuolaa ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 2,4 g (0,012 moolia) esimerkin 6 mukaista pyrimidiiniä, 1,25 fosgeenia ja 1,65 ml trietyyliamiinia.

Saanto: 4,6 g natriumsuolaa (66 %); IR-spektri: 1765, 1650, 1610, 1510 cm"1; 28 67703 NMR-spektri (DMSO + CD3OD) signaalit, ppm: 1,55 (d,6H), 1,8 (m,2H), 3,2-3,65 (m,7H), 4,0 (s,lH), 5,45 (q,2H), 5,6 (s,lH), 7,35 (m,5H), 8,10 (s,1H).

Esimerkki 8 D-a-/3-(2-{3'-etoksipropyyliamino}-4-hydroksi-5-pyrimidinyyli)-ureido/-p-hydroksi-bentsyy lipenislli ini-natrium______ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 1,89 g (0,0045 moolia) amoksisilliini-trihydraattia ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 950 mg (0,0045 moolia) 5-amino-2-(3'-etoksipropyyliamino)-4-hydroksipyrimidiiniä, 450 mg fosgeenia ja 450 g trietyyliamiinia.

Saanto: 1,9 g natriumsuolaa (68 %); IR-spektri: 1770, 1670, 1610, 1550, 1510 cm"1; NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,05 (t,3H), 1,55 (d,6H), 1,7 (m,2H), 3,4 (m,6H), 4,05 (s,lH), 5,45 (a+s,3H), 6,8 (d,2H), 7,35 (d,2H), 8,10 (s,lH).

Esimerkki 9 D-CX-/3- (4-hydroksi-2-{ 3 ' -isopropoksipropyyliamino}-5-pyrimidinyyli) -ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium___ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 4,2 g (0,01 moolia) amoksisilliini-trihydraattia ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 2,25 g (0,01 moolia) 5-amino-4-hydröksi-2-(3'-isopropoksipropyyliamino)-pyrimidiiniä, 1,0 g fosgeenia ja 1,35 ml trietyyliamiinia.

Saanto: 4,67 g natriumsuolaa (73 %)j IR-spektri: 1770, 1665, 1615, 1550 cm NMR-spektri (DMSO + CD30D) signaalit, ppm: 1,15 (d,6H), 1,55 (d,6H), 1,80 (m,2H), 3,2-3,8 (m,5H), 4,05 (s,lH), 5,5 (q+s,3H), 6,8 (d,2H), 7,3 (d,2H) , 8,15 (s,1H) .

Esimerkki 10 67703 29 D-a-/3-(4-hydroksi-2-{2'-hydroksi—2'—metyyli-propyyliamino}-5-pyri-midinyyli)-ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 1,26 g (0,003 moolia) amoksisilliini-trihydraattia ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 590 mg 5-amino-4-hydroksi-2-(2'-hydroksi-21-metyyli-propyyliamino)-pvrimidii-niä (0,003 moolia), 300 mg fosgeenia ja 0,41 ml trietyyliamiinia. Saanto: 720 mg natriumsuolaa (39,5 %)

IR-spektri: 1765, 1660, 1610, 1550 cm "S

NMR-spektri (DMSO + CD^OD) singaalit, ppm: 1,2 (6H), 1,55 (d,6H), 3.5 (2H), 4,05 (1H), 5,5 (q+s,3H), 6,85 (d,2H), 7,35 (d,2H), 8,15 (s , 1H) .

Esimerkki 11 D-a-/3-(4-hydroksi-2-{2'-hydroksietyvliamino}-5-pyrimidinyyli)-ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium_ 510 mg (0,003 moolia) 5-amino-4-hydroksi-2-(2'-hdyroksietyyliamino)-pyrimidiiniä ja 3 ml trimetyylisilyylidietyyliamiinia sekoitetaan 15 minuuttia 80°C:ssa. Syntynyt liuos haihdutetaan kuiviin vesipumpun tyhjiössä ja sen jälkeen suurtyhjiössä. Tämän jälkeen uutetaan 50 ml:aan absoluuttista tetrahydrofuraania. Tämä liuos tiputetaan jäissä jäähdyttäen liuokseen, jossa on 300 mg fosgeenia 20 ml:ssa absoluuttista tetrahydrofuraania.

Jatkoreaktio 1,26 g kanssa amoksisilliinia (0,003 moolia) tapahtuu edellisten esimerkkien mukaisesti.

Saanto: 495 mg natriumsuolaa (29 %); IR-tspektri: 1770, 1665, 1615, 1550 cm-1? NMR-spektri (DMSO + CD-jOD) signaalit, ppm: 1,55 (d,6H), 3,5 (ra,4H), 4.05 (s,1H) , 5,45 (q,2H), 5,50 (s,lH), 6,85 (d,2H), 7,35 (d,2H), 8,10 (s,1H).

Esimerkki 12 67 7 0 3 30 D-0C-/3- (4-hydroksi-2- {2 ' -hydroksietyyliaminö }-5-pyrimidinyy li) -ureido/-bentsyylipenislliini-natrium_ Tämä penisilliini syntetisoitiin esimerkin 11 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 1,8 g ampisilliini-natriumsuolaa (0,005 moolia) ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 500 mg esimerkin 11 mukaista amiinia ja 500 mg fosgeenia.

Saanto: 950 mg natriumsuolaa (34 %); IR-spektri (DMS0 + CD^OD) signaalit, ppm: 1,50 (d,6H), 3,2-37 ' (m,4H), 4,0 (s, lH) , 5,45 (q,2H), 5,60 (s,lH), 7,4 (m,5H), 8,10 (s,lH).

Esimerkki 13 D-a-/3-(4-hydroksi-2-{3'-hydroksipropyyliamino}-5-pyrimidinyyli)-ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 11 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 1,4 g amoksisilliini-trihydraattia (0,0035 moolia) ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 650 mg (0,0035 moolia) 5-amino-4-hvdroksi-2-(31-hydroksiproovyliamino)-pyrimidiiniä,ja 350 mg fosgeenia.

Saanto: 1,08 g natriumsuolaa (59,5 %); IR-spektri: 1770, 1655, 1610, 1540 cm NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,55 (d,6H), 1,8 (m,2H), 3,2-3,8 (m,4H), 4,0 (s,lH), 5,4 (q+s,3H), 6,8 (d,2H), 7,3 (d,2H), 8,05 (s,1H).

Esimerkki 14 D-a-/3-(4-hydroksi-2-{2'-hydroksipropyyliamino}-5-pyrimidinyyli)-ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 11 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 1,68 g (0,004 moolia) amoksisilliini-trihydraattia ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 740 mg (0,004 moolia) 5-amino-4-hydroksi-2-(2'-hydroksipropyyliamino)-pyrimidiiniä ja 400 mg fosgeenia (silyloinnin jälkeen).

ti 31 /πηΛ7

Saanto: 920 mg natriumsuolaa (3,8,5 %); O / U0 IR-spektri: 1770, 1660, 1610, 1550 cm'1; NMR-spektri (DMSO + CD30D) signaalit, ppm: 1,15 (d,3H), 1,55 (6H), 3,6 (m,2H), 3,9 (m,lH), 4,05 (s,lH), 5,4 (σ,2Η), 5,5 (s,lH), 6,8 (d,2H), 7,3 (d,2H), 8,15 (s,lH).

Esimerkki 15 D-a-/3-(4-hydroksi-2-{2'-hydroksipropyyliamino}-5-pyrimidinyyli)-ureido/-bentsyylipenisilliini-natrium___ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 11 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 800 mg ampisilliini-natriumsuolaa (0,002 moolia) ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 370 mg esimerkin 5 mukaista pyrmidiiniä (0,002 moolia) ja 200 mg fosgeenia.

Saanto: 520 mg natriumsuolaa (45 %); IR-spektri: 1765, 1650, 1610, 1550 cm 1; NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,2 (d,3H), 1,55 (d,6H), 3,55 (m,2H), 3,95 (m,lH), 4,05 (s,lH), 5,4 (q,2H), 5,55 (s,lH), 7.4 (5H) , 8,15 (s,1H) .

Esimerkki 16 D-a-/3-(2-{etoksikarbonyylimetyyliamino}-4-hydroksi-5-pyrimidinyyli)-ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium__ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 1,05 g (0,0025 moolia) amoksisilliini-trihydraattia ja tuotetta, jöka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 530 mg 5-amino-2-etoksikarbonyyli-metyyliamino-4-hydroksi-pyrimidiiniä (0,0025 moolia) 250 mg fosgeenia ja 0,34 ml trietyyliamiinia.

Saanto: 1,38 g natriumsuolaa (88 %); IR-spektri: 1770, 1750, 1670, 1620, 1545, 1540 cm"1; NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,2 (t,3H), 1,55 (d,6H), 3.5 (q,2H), 4,05 (s,lH), 4,15 (2H), 5,4 (q,2H), 5,45 (s,lH), 6,8 (2H), 7,3 (2H), 8,15 (1H).

32

Esimerkki 17 67703 D-a-/3-(2—{2'-etoksikarbonyylietyyliamino}-4-hydroksi-5-pyrimidinyy-li)-ureido/-p-hydroksi-bentsvylinenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 840 mg amoksisilliini-trihydraattia (0,002 moolia) ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamlla reagoimaan 500 mg (0,002 moolia) 5-amino-2-(2'-etoksikarbonyvlietyyliamino)-4-hydroksi-pvri-midiiniä, 200 mg fosgeenia ja 0,27 ml trietyvliamiinia.

Saanto: 1,02 g natriumsuolaa (80 %); IR-spektri (DMSO + ΟϋβΟϋ) signaalit, opm: 1,25 (t,3H), 1,55 (d,6H), 3,4 (m,4H), 4,05 (1H), 4,15 (2H), 5,45 (q,2H), 5,50 (s,lH), 6,8 (d,2H), 7,3 (d,2H), 8,15 (s,lH).

Esimerkki 18 D-a-/3-(2-{21-dietyyliaminoetyyliamino}-4-hydroksi-5-pvrimidinyyli) -ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 2,1 g (0,005 moolia) amoksisilliini-trihydraattia ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 1,16 g (0,005 moolia) 5-amino-2-(21-dietyyliaminoetyyliamino)-4-hydroksi-pyrimidiiniä, 500 mg fosgeenia ja 0,68 ml trietyyliamiinia. Jatkokäsittelyä muutettiin seuraavasti: Vesifaasi ravisteltiin pH-arvossa 3,4 kaksi kertaa 50 ml:n kanssa n-butanolia. Butanoli poistettiin suurtyhjiössä ja jäljelle jäänyt jäännös muunnettiin tunnetulla tavalla natriumsuolaksi. Saanto: 1,22 g natriumsuolaa (38 %); IR-spektri: 1770, 1660, 1610, 1550 cm-1; NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,2-1,7 (m,12H), 3,1-3,7 (m,8H), 4,05 (s,lH), 5,5 (m,3H), 6,85 (d,2H), 7,35 (d,2H), 8,20 (s,lH).

Esimerkki 19 D-a-/3-(4-hydroksi-2-{21-fenoksietyyliamino}-5-pyrimidinvyli)-ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 1,6 g amoksisilliini-trihydraattia (0,004 moolia) ja tuo- 33 67703 tetta, joka oli saatu saattamalla reagoimaan 985 mg 5-amino-4-hyd-roksi-1-(2'-fenoksietyyliamino)-pyrimidiiniä, 500 mg fosgeenia ja 0,67 ml trietyyliamiinia.

Saanto: 2,46 g natriumsuolaa (72,5 %);

IR-spektri: 1770, 1660, 1610, 1550 cm "S

NMR-spektri (DMS0 + CD-jOD) signaalit, ppm: 1,55 (d,6H), 3,7 (m,2H), 4,05 (s,1H) , 4,1 (m,-H), 5,45 (m,3H), 6,8-7,4 (m,9H) , 8,15 (s,lH).

Esimerkki 20 D-a-/3-(2-{2'-asetyyliaminoetyyliamino}-4-hydroksi-5-pyrimidinyvli) -ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium________ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 11 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 1,26 g (0,003 moolia) amoksisilliini-trihydraattia ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 630 mg (0,003 moolia) 2-(2'-asetyyliaminoetvyliamino)-5-amino-4-hvdroksi-pyrimi-diiniä ja 300 mg fosgeenia.

Saanto: 865 mg natriumsuolaa (46,5 %); IR-spektri: 1770, 1660, 1610, 1550 cm NMR-spektri (DMSO + CD30D) signaalit, ppm: 1,55 (d,6H), 1,93 (s,3H), 2,7 (m,2H), 3,5 (m,2H), 4,05 (s,lH), 5,45 (m,3H), 6,8 (d,2H), 7,3 (d,2H) , 8,05 (s,1H) .

Esimerkki 21 D-a-/3-(2-{2'-etyylisulfinyylietyyliamino}-4-hydroksi-5-pyrimidinyyli) -ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium__ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 11 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 420 mg (0,001 moolia) amoksisilliini-trihvdraattia ja 230 mg 5-amino-2-(2'-etyylisulfinvylietyyliamino)-4-hvdroksipvrimi-diiniä, joka silvloinnin jälkeen saatettiin reagoimaan 100 mg:n kanssa fosgeenia.

Saanto: 265 mg natriumsuolaa (41 %); IR-spektri: 1765, 1660, 1610, 1545 cm 34 67703 NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,3 (t,3H), 1,55 (d,6H), 3.1 (m,4H), 3,5 (m,2H), 4,05 (s,lH), 5,45 (q,2H), 5,50 (s,lH), 6.85 (2H), 7,35 (2H), 8,15 (1H).

Esimerkki 22 D-a-/3-(2-(21-asetyylietyyliamino}-4-hydroksi-5-pyrimidinyyli) -ureido/-p-hydroksi-bentsvylipenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 4,2 g amoksisilliini-trihydraattia (0,01 moolia) ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 1,96 g (0,01 moolia) 2-(2'-asetyylietyyliamino)-5-amino-4-hydroksi-pyrimidiiniä, 1.01 g fosgeenia ja 1,35 ml trietyvliamiinia.

Saanto: 3,17 g natriumsuolaa (52 %); IR-spektri: 1770, 1680, 1660, 1610, 1545 cm NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,55 (d,6H), 2,2 (s,3H), 2.7 (m,2H), 3,4 (m,2H), 4,05 (1H), 5,45 (q,2H), 5,50 (s,lH), 6,85 (2H), 7,35 (2H), 8,15 (1H).

Esimerkki 23 D-CX-/3- (4-hydroksi-2-{ 2 ' -metyy limerkapto*dtyyliamino}-5-pyrimidinyyli) -ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 2,1 g amoksisilliini-trihydraattia (0,005 moolia) ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 1,03 g 5-amino-4-hydroksi-2-(2'-metyylimerkapto-etyvliamino)-pyrimidiiniä (0,005 moolia) , 500 mg fosgeenia ja 0,67 ml trietyyliamiinia.

Saanto: 2,35 g natriumsuolaa (75 %); IR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,55 (d,6H), 2,3 (s,3H), 2.7 (m,2H), 3,4 (m,2H), 4,05 (s,lH), 5,45 (q,2H), 5,5 (s,lH), 6.85 (d,2H), 7,35 (d,2H), 8,15 (s,lH).

II

Esimerkki 24 6770 3 35 D-tx -/3- (2—{ 2 ' -etyylimerkapto-etyyliamino} -4-hydroksi-5-pyrimidinvyli) -ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 1,26 g (0,003 moolia) amoksisilliini-trihvdraattia ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 640 mg 5-amino-2- (2 ' -etyylimerkanto^etvyliamino) -4-hydroksi-pyrimidiiriiä (0,003 moolia) , 300 mg fosgeenia ja 0,41 ml trietyyliamiinia. Jatkokäsittelyssä uutetaan syntynyt penisilliini pH-arvossa 2,7 etikkahappoetyylieste-riin, minkä jälkeen kuivataan natriumsulfaatilla ja etikkahappoetyvli-esteri poistetaan tyhjiössä. Jäljelle jäänyt lopputuote muunetaan tavalliseen tapaan natriumsuolaksi.

Saanto: 1,31 g natriumsuolaa (69,5 %);

IR-spektri: 1770, 1660, 1610, 1540, 1515 cm "S

NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,25 (t,3H), 1,55 (6H), 2,65 (m,4H), 3,5 (m,2H), 4,05 (s,lH), 5,4 (q,2H), 5,5 (s,lH), 6.8 (2H), 7,3 (2H), 8,15 (1H).

Esimerkki 25 D-CI-/3- (2-{ 2 1 -syano-propyyliamino) -4-hydroksi-4-pyrimidinvyli) -ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 11 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 4,2 g amoksisilliini-trihydraattia (0,01 moolia) ja 1,93 g (0,01 moolia) 5-amino-2-(2’-syano-propyyliamino)-4-hydroksipyrimidii-niä, joka silyloinnin jälkeen saatettiin 1,01 g:n kanssa fosgeenia. Saanto: 3,6 g natriumsuolaa (59 %); IR-spektri: 1765, 1650, 1600, 1545 cm NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,2 (d,3H), 1,55 (d,6H), 2.8 (m,lH), 3,5 (m,2H), 5,4 (q,2H), 5,5 (s,lH), 6,8 (d,2H), 7,3 (d,2H) , 8,10 (s ,1H) .

Esimerkki 26 D-ct-/3- (4-hydroksi- 2- { 4 1 -hvdroksi-sykloheksyy liamino}-5-pvrimidinyyli ) -ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 11 mukaisesti. Lähtöaineina 36 67703 käytettiin 1,68 g (0,004 moolia) amoksisilliini-trihvdraattia ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 500 mg (0,04 moolia) 5-amino-4-hydroksi-2-(4'-hydroksi-sykloheksvyliamino)pyrimi-diiniä ja 400 mg fosgeenia.

Saanto: 1,63 g natriumsuolaa (64 %); IR-spektri: 1770, 1660, 1615, 1550 cm NMR-spektri (DMS0 + CD^OD) signaalit, ppm: 1,2-2,2 (m,14H), 3,65 (m,1H),. 3,95 (m,lH), 4,05 (s,lH), 5,45 (q,2H), 5,50 (s,1H) , 6,8 (d,2H), 7,3 (d,2H), 8,15 (s,lH).

Esimerkki 27 D-a-/3- (4-hydroksi-2- { 4 ' -hydroksi-sykloheksyyliamino}-5-]i>yrimidinyy li ) -ureido/-bentsyylipenis i1liini-natrium_ Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 11 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 3,75 g (0,01 moolia) ampisilliini-trihydraattia ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 2,24 g (0,0l moolia) esimerkin 26 mukaista pyrimidiiniä ja 1,01 g fosgeenia.

Saanto: 3,62 g natriumsuolaa (58 %); IR-spektri: 1765, 1655, 1615, 1545 cm-1; NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,15-2.1 (m,14H), 3,7-4,0 (m,1H+1H), 4,05 (s,lH), 5,40 (q,2H), 5,55 (s,lH), 7,4 (m,5H), 8,15 (1H) .

Esimerkki 28 D-'a-/3- (2— {2 ’-anilino-etyyliamino}-4-hydroksi-5-pyrimidinyyli) -ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenislliini-natrium__.

Tämä penisilliini valmistettiin esimerkin 1 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 2,1 g amoksisilliini-trihydraattia (0,005 moolia) ja tuotetta, joka oli valmistettu saattamalla reagoimaan 1,23 g 5-amino-2-(2'-anilino-etyyliamino)-4-hydroksi-pyrimidiiniä (0,005 moolia), 500 mg fosgeenia ja 0,68 ml trietyyliamiinia.

Saanto: 2,06 g natriumsuolaa (61 %); IR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,55 (d,6H), 3,2-3,8 (m,4H), 4,05 (1H), 5,45 (q,2H), 5,50 (s,lH), 6,8-7,45 (m,9H), 8,20 (s,lH).

il

Esimerkki 29 37 67703 D-a-/3-(2-{31-aminokarbonyylipropyyliamino}-4-hydroksi-5-pyrimidi-nyyli)-ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium_

Valmistus esimerkin 11 mukaisesti. Lähtöaineina käytettiin 1,1 g (0,0026 moolia) amoksisilliini-trihydraattia ja 550 mg (0,0025 moolia) 5-amino-2-(3'-aminokarbonyylipropyyliamino)-4-hydroksi-pyri-midiiniä, joka silyloinnin jälkeen saatettiin reagoimaan 260 mg:n kanssa fosgeenia tetrahydrofuraanissa.

Saanto: 740 mg natriumsuolaa (47 %);

IR-spektri: 1765, 1660, 1615, 1550 cm "S

NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,55 (d,6H), 1,9 (t,2H), 2.8 (m,2H), 3,45 (m,2H), 4,05 (s,lH), 5,45 (q,2H), 5,50 (s,lH), 6.8 (d,2H), 7,35 (d,2H), 8,15 (s,lH).

Esimerkki 30 D-a~/3-(2-{3’-aminosulfonyylipropyyliamino}-4-hydroksi-5-pyrimidinvy-li)-ureido/-p-hydroksi-bentsyylipenisilliini-natrium__

Valmistus esimerkin 11 mukaisesti. 2,1 g amoksisilliini-trihvdraattia (0,005 moolia) saatetaan reagoimaan tuotteen kanssa, joka on valmistettu saattamalla reagoimaan 1,5 g (0,005 moolia) 5-amino-2-(3'-aminosulfonyylipropyyliamino)-4-hydroksipyrimidiini, 5 ml trimetvy-1isilyylidietyvliamiinia ja 500 mg fosgeenia.

Saanto: 1,84 g (56,5 %); IR-spektri: 1770, 1660, 1610, 1560, 1300, 1160 cm-1; NMR-spektri (DMSO + CD^OD) signaalit, ppm: 1,55 (d,6H), 2,0 (m,2H), 2.85 (m,2H), 3,40 (m,2H), 4,05 (s,lH), 5,45 (q,2H), 5,50 (s,lH), 6.85 (d,2H), 7,35 (d,2H), 8,15 (s,lH).

Esimerkki 31 D-a-/3-(4-hydroksi-2-{2'-metoksietyyliamino}-5-pyrimidinyyli)-ureido/-bentsyyli-penisl liini-natrium _________

Suspensioon, jossa on 1,94 g (0,005 moolia) D-a-/3-(4-hydröksi-2-{2'-metoksietyyliamino}-5-pyrimidinyyli)-ureido/-fenvyliglysiini-natriumsuolaa 25 ml:ssa vedetöntä asetonia, lisätään 10 mg N-metyvli- 38 67703 morfoliinia. Jäähdytetään -20 - -15°C:een ja tässä lämpötilassa siihen tiputetaan liuos, joka sisältää 550 mg kloorimuurahaishappo-etyyliesteriä (0,005 moolia) 10 ml:ssa vedetöntä asetonia. Sekoitetaan yksi tunti -20 C:ssa. Sen jälkeen tässä lämpötilassa tiputetaan mukaan liuos, jossa on 1,6 g 6-aminopenisillaanihapon trietyyliammo-niumsuolaa 10 ml:ssa vedetöntä metyleenikloridia. Sekoitetaan 1 tunti -20°C:ssa, 1 tunti 0°C:ssa ja tunti huoneen lämpötilassa.

Sen jälkeen orgaaninen liuotin poistetaan tyhjiössä ja jäännös liuotetaan pH-arvossa 7,0 seokseen, jossa on 40 ml vettä ja 60 ml etikka-happoetyyliesteriä. Vesifaasi erotetaan ja jäissääjäähdyttäen pH säädetään arvoon 2,9 (laimealla suolahapolla). Saostunut kiinteä tuote erotetaan imulla ja kuivataan tyhjiössä. Natriumsuola valmistetaan natriumetyyliheksanoaatilla.

Saanto: 2,05 g (70 %); IR-spektri: 1770, 1660, 1610, 1545, 1515 cm-1; NMR-spektri (DMSO + CD30D) signaalit, ppm: 1,55 (d,6H), 3,3 (s,3H), 3.5 (m,4H), 4,1 (s,lH), 5,5 (q,2H), 5,55 (s,lH), 7,5 (m,5H), 8,1 (s,1H) .

Esimerkki 32 D-ct-/3- (2— { 2 ' -etyylimerkapto-etyyliamino}-4-hydroksi-5-pyrimidinyyli) -ureido/-bentsyylipenisilliini-natrium_ 2,16 g (0,01 moolia) vedetöntä 6-aminopenisillaanihappoa silyloidaan 2.5 ml:11a N,0-(bistrimetyylisilyyli)asetamidia huoneen lämpötilassa kuivassa dimetyvliformamidissa. Muodostunut liuos tiputetaan -10°C:ssa -20°C:ssa valmistettuun liuokseen (kts. myös esimerkki 31), jossa on 3,9 g (0,01 moolia) D-a-/3-{2'-etyylimerkapto-etyyliamino}-4-hydroksi- 5-pyrimidinyyli-ureido/-fenyyliglysiiniä, 1,1 g kloorimuurahaishappo-etyyliesteirä ja 1,05 g N-mdtyylimorfoliinia. Jatkoreaktion ja jatkokäsittelyn suhteen kts. esimerkki 31.

Saanto: 2,8 g natriumsuolaa (46 %); IR-spektri (DMSO + CD3OD) signaalit, ppm: 1,25 (t,3H), 1,55 (d,6H), 2,7 (m,4H), 3,45 (t,2H), 4,0 (s,lH), 5,4 (q,2H), 5,55 (s,lH), 7,4 (m,5H), 8,15 (s,lH).

Claims (3)

39 67703

1 CH3 NH 1 co ^-N -\ 1° o 'COOH NH rV‘ N^N R tai näiden tautomeerejä, joiden kaava (!') on A-CH-CONH -S >n~CH^ I 3 NH m I - N--V CO O COOH NH Λ(Ι') ° N^NH R joissa A on fenyyli- tai 4-hydroksifenyyliryhmä, ja R on ryhmä, jonka kaava on 67703 40 NH - Z - X jossa Z on mahdollisesti yhdellä tai kahdella metyyliryhmällä substituoitu alkyleeniryhmä, jossa on yhteensä 1-4 hiiliatomia, tai hydroksiryhmä substituenttina X substituoitu sykloheksyyliryhmä, ja X on syano-ryhmä, hydroksiryhmä, merkaptoryhmä, aminokarbonyyli tai aminosulfo-nyyliryhmä tai ryhmä, jonka yleiskaava on ^Rl -COR^, -COORj^, -N , Vr2 -NHCOR-l, -OR1, -OCOR^, -SRX, -SOR·^ tai -S02Rlf jolloin näissä kaavoissa R^ on 1-4 hiiliatominen suoraketjuinen tai haarautunut alkyyliryhmä ja R2 on vetyatomi tai 1-4 hiiliatominen alkyyliryhmä, jolloin ryhmässä, jonka kaava on /R1 -N , tai -OR^, R^ voi myös tarkoittaa fenyyliryhmää ja niiden Nr2 fysiologisesti sopivia suoloja epäorgaanisten tai orgaanisten emästen kanssa, tunnettu siitä, että a) yleiskaavan (III) mukainen yhdiste A-CH-CONH--S' S NH, ' CH3

1. Menetelmä valmistaa farmakologisesti arvokkaita (4-hydroksi-5-pyrimidinyyli)-ureidobentsyylipenisilliinejä, joiden kaava (I) on o CH, * S ✓ 3 A-CH-CONH -S

2. Patenttivaatimuksen la mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään patenttivaatimuksen la mukaista, yleiskaavan (IV) pyrimidiinijohdosta, jossa B on ryhmä -NCO tai jossa B on ryhmän -NHCOOH reaktiivinen johdos, tai jälkimmäisessä tapauksessa tällaisen pyrimidiinijohdoksen seosta muun yleiskaavan (IV) mukaisen pyrimidiinijohdoksen kanssa, jossa B on ryhmä -NCO, ja reaktio suoritetaan joko, kun mukana on yleiskaavann (III) mukaisen yhdisteen epäorgaanista tai orgaanista suolaa, veden ja veden kanssa sekoittuvien orgaanisten liuottimien seoksissa tai orgaanisissa liuottimissa tai veden ja veden kanssa sekoittumattomien orgaanisten liuottimien seoksissa pH-alueella välillä 2,0 ja 9,0, liuottimena toimivassa vedessä emäksen tai puskuriliuoksen läsnäollessa tai, kun mukana on yleiskaaavan (III) mukaisen yhdisteen silyylijohdosta tai karboksyylijohdosta, vettä ja hydroksyyliryhmiä sisältämättömissä liuottimissa, mahdollisesti emäksiä lisäämällä.

2 J- N -\ S. (III) O COOH jossa A tarkoittaa samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan liuotti-messa lämpötilassa välillä -10°C - huoneenlämpötila yleiskaavan (IV) mukaisen pyrimidiinijohdoksen kanssa 41 67703 B A. OH M (IV> N N Y R jossa R tarkoittaa samaa kuin edellä ja B on ryhmä -NCO tai ryhmän -NHCOOH reaktiivinen johdos, tai b) yleiskaavan (V) mukainen ureidokarboksyylihappo * A-CH-COOH NH i CO i NH (TV R jossa A ja R tarkoittavat samaa kuin edellä/ tai sen suola tai reaktiivinen johdos saatetaan reagoimaan kaavan (VI) mukaisen 6-aminopeni-sillaanihapon S /CH3 H2N ch3 J-n - COQH (VI) tai sen epäorgaanisten tai orgaanisten suolojen tai reaktiivisten 42 67703 johdosten kanssa ja mahdollisesti sen jälkeen hydrolysoidaan tai katalyyttisesti hydrogenolysoidaan näin saatu tuote yleiskaavan (I) tai (I1) mukaiseksi penisilliiniksi ja/tai sen jälkeen muunnetaan haluttaessa saatu yleiskaavan (I) tai (I') mukainen penisilliini suolakseen epäorgaanisten tai orgaanisten emästen avulla.

3. Patenttivaatimuksen Ib mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yleiskaavan (V) mukaisten ureidokarboksyylihappojen reaktiivisina johdoksina käytetään niiden happoanhydridejä, niiden reaktiivisia estereitä tai amideja, niiden happohalogenideja tai happoatsideja ja että kaavan (VI) mukainen 6-aminopenisillaanihappo saatetaan reagoimaan silyyliesterinä, trityyliesterinä, p-nitro-bentsyyliesterinä, fenasyyliesterinä ja 0,N-bis-trimetyylisilyyli-johdoksena aproottisessa liuottimessa, suolan muodossa kuitenkin proottisessa liuottimessa, metyleenikloridissä tai vesipitoisessa mediumissa tai vesiorgaanispitoisessa liuottimessa lämpötiloissa välillä -40 ja +40°C, mahdollisesti emäksen ja/tai kondensointi-aineen läsnäollessa ja, kun lopputuote on vielä esterinä, sen jälkeen esteriryhmä hydrolysoidaan tai hydrogenolysoidaan. li 43 67703