FI116829B - Parenteraalisesti annosteltava koostumus, menetelmä sen valmistamiseksi sekä sen käyttö - Google Patents

Description

PARENTERAALISESTI ANNOSTELTAVA KOOSTUMUS. ΜΕΝΕ VALMISTAMISEKSI SEKA SEN KÄYTTÖ

Esillä oleva keksintö liittyy farmaseuttisiin valmisteisiin. Erityisesti tämä 1 5 vasta-aineiden lääkemuotoja, joita voidaan annostella parenteraalisesti. Ke myös menetelmää, jolla tuotetaan tällaisia, parenteraalisesti annosteltavia 1 sekä näiden käyttöä.

Immunoglobuliinit, joita kutsutaan myös vasta-aineiksi, ovat humoraaliser 10 vasteen päävaikuttajamolekyylejä. Niillä on neljästä peptidistä koostuva p< muodostuen kahdesta samanlaisesta raskaasta ketjusta ja kahdesta samanla ketjusta, joita ketjujen väliset disulfidisillat yhdistävät. Yleisin immunoglo IgG-luokka, joka kattaa noin 75 % terveiden yksilöiden plasman kaikista i: globuliineista. IgG jaetaan edelleen alaluokkiin: IgGl, IgG2, IgG3 ja IgG4 15 toisistaan raskaan ketjun isotyypeiltään. Muita immunoglobuliiniluokkia ( IgDjalgE.

Vasta-aineiden biologinen aktiivisuus liittyy niiden kykyyn inaktivoida ja ] aiheuttavia tekijöitä ja näiden tuotteita, kuten bakteereja, viruksia ja toksiir : ·*· * *; ’ 20 Vaikuttaessaan vasta-aineet käyttävät kahta pääasiallista toimintamuotoa: 1 * · * **·: aktivointia ja opsonisointia, eli fagosytoosin indusoimista. Immunoglobulii muotoinen rakenne, johon sisältyy kaksi antigeeniä sitovaa Fab-osaa ja yks : : * *; vaikuttajatoimintoja välittävä Fc-osa, joka indusoituu Fab-osan sitoutuessa " ΓI Monoklonaalisella vasta-aineella on yksittäinen antigeeniä sitova Fab-osa, * t 25 polyklonaaliset vasta-aineet koostuvat useista, erilaisista immunoglobuliini β β·β joilla on monenlaisia Fab-osia.

**» ··· * · 2 infektiotekijöistä elimistön omiin komponentteihin, ja nämä kattavat moni sairauksia.

Vasta-aineita voidaan eristää verenluovuttajien (ihmisten) verestä Ja niitä hybridoomateknologianjarekombinantti-DNA-teknologian avulla. Vasta-5 arvokkaita terapeuttisia aineita, koska niillä on laaja-alaista biologista akti: Lääkkeellistä käyttöä varten vasta-aineista valmistetaan pääasiallisesti pan annettavia lääkemuotoja, erityisesti suonensisäisesti annettavia. Ihmisen n< plasmasta puhdistettua immunoglobuliinia annetaan yleensä laskimoteitse 10 suonensisäinen immunoglobuliini” tai ’’Ihmisperäinen suonensisäisesti anr immunoglobuliini”). Tällaista ’’suonensisäistä immunoglobuliinia” (IVIG) nestemäisiksi koostumuksiksi Jotka ovat immunoglobuliinikomponentin c puhtaita ja joissa on vähän, tai käytännössä ei lainkaan, polymeerejä ja agg 15 Yleisesti ottaen vasta-aineiden, kuten IVIG:n nestemäisen lääkemuodon, p formuloitu seuraavien tavoitteiden mukaisesti: 1. Osmolariteetin pitäisi olla lähellä fysiologista osmolariteettia, jotta voidaan tarvittaessa infusoida suuriakin määriä.

2. Polymeerisen IgG:n muodostuminen pitäisi estää säilytyksen aikan :.;V 20 3. Stabiilisuudenja osmolariteetin säätämisen vuoksi lisättävän aineei yhteen IgG:n kanssa: Proteiinin kanssa ei saa tapahtua kemiallisia r • · * · • * **..· Useimmiten vasta-ainekoostumukset, jotka formuloidaan suonensisäistä ar ··» ja muut parenteraaliset koostumukset Jotka sisältävät terapeuttisesti käyttö * · *···* 25 aineita, ovat nestemäisiä formulaatioita, joissa aktiivinen komponentti sekc apuaineiden ja adjuvanttien kanssa, mukaan lukien stabilisoivat aineet, osn j · · säätelevät aineet ja farmaseuttiset kantaja-aineet. Tavallisia stabilisoivia ai • · * « 3

Toinen stabilisaattoreiden ryhmä koostuu aminohapoista, sellaisista kuten aktiivisia aineita, kuten polysorbaattia, saatetaan myös käyttää. Niinpä US patenttiselostuksessa No.5 945 098 perehdytään suonensisäisiin immunog valmisteisiin, jotka ovat immunoglobuliinia lukuun ottamatta, olennaisilta 5 proteiinittomia ja jotka käsittävät immunoglobuliinin vesiliuoksia, noin 0, glysiinin, polysorbaattia noin 0,0005 - 0,01 % ja PEG:tä vähemmän kuin (

Fysiologisen osmolariteetin säätämiseen tarvittavat suuret aminohappopitc kuitenkin aiheuttaa sivuvaikutuksia suonensisäisen immunoglobuliinin kä: 10 Lisäksi aminohapot eivät sovi yhteen pelkistävien sokereiden kanssa, vaan

Schiff in emästen muodostumiseen.

Näin ollen, kuten yllä olevasta tiivistelmästä ilmenee, vasta-aineille tarvita kauemmin säilyviä parenteraalisia lääkemuotoja, ja näitä tarvitaan myös sv 15 immunoglobuliineille ja muille terapeuttisesti käyttökelpoisille immunoglc

Esillä olevan keksinnön tavoite on saada aikaan vasta-aineille uusia nesten koostumuksia eli valmisteita, jotka on formuloitu parenteraalisesti annetta) : 20 Keksinnön toinen tavoite on saada aikaan uusi menetelmä, jolla tuotetaan i *: · ainekoostumuksia.

• •a f * • * • ** S...S Keksinnön kolmas tavoite on saada aikaan uusi käyttö trehaloosille.

> • «« * + » '...· 25 Näihin ja muihin tavoitteisiin päästään esillä olevalla keksinnöllä, jolla my tavoitteisiin liittyviä etuja. Keksintö kuvataan seuraavassa ja siitä esitetään I I « *•5 ·* vaatimukset.

• ·· • * Λ Λ 4

Keksintö perustuu, ei-pelkistävän disakkaridin, nimittäin trehaloosin, käytt stabilisoivana aineena pitoisuutena, joka tehokkaasti estää vasta-aineiden p noitumista ja aggregoitumista, nestemäisissä parenteraalisissa kompositiois pelkistävänä sokerina trehaloosi ei reagoi Maillard’in ruskistumisreaktiosst 5 happojen tai proteiinien kanssa.

Esillä olevan keksinnön yhteydessä on havaittu, että vasta-aineita, kuten Ig säilytettäessä nestemäisissä lääkemuodoissa ei muodostu polymeerejä edes lämpötiloissa silloin, kun trehaloosia on läsnä. Sitä vastoin aikaisempien st; 10 kanssa polymeerejä muodostuu havaittavissa määrin. Trehaloosi kykenee s proteiineja pakaste-ja spraykuivatuksen aikana. Esillä oleva keksintö perus havaintoon siitä, että trehaloosi kykenee estämään proteiinien polymeerin n kun proteiineja säilytetään liuoksessa nestemäisinä. Vasta-aineiden kliinine helpottuu ja tulee luotettavammaksi, kun vasta-aineita voidaan säilyttää stal 15 muodossa, koska kuivaj auheita ei tarvita.

Esillä olevan keksinnön mukaisessa menetelmässä, jota käytetään terapeutt käyttökelpoisten koostumusten valmistamiseen, vasta-aineet sekoitetaan ve yhdessä trehaloosin ja valinnaisesti sinänsä tunnettujen apuaineiden kanssa ί. ·, : 20 saadaan parenteraalisesti annosteltava nestekoostumus, jonka pitoisuus on i * 0,5 M. Tällaisia koostumuksia voidaan annostella esim. suonensisäisesti.

* * φ **» \ Esillä olevaan keksintöön kuuluu myös trehaloosin käyttö vasta-aineiden n< * ·· J lääkemuotojen osana sellaisissa pitoisuuksissa, jotka tehokkaasti estävät va: 4«· • · * · · · * 25 polymerisoitumista.

« * · t

Edellä mainittujen ominaisuuksiensa ansiosta esillä oleva keksintö saa myö * · • * ^ *!* menetelmän, jolla nisäkkäille voidaan antaa passiivista immunisaatiota infe 5 Täsmällisemmin sanottuna keksinnön mukaiselle nestemäiselle valmisteen tunnusomaista se, mikä on esitetty patenttivaatimuksen 1 tunnusmerkkiosa

Keksinnön mukaiselle menetelmälle nestemäisten koostumusten valmistan 5 tunnusomaista se, mikä on esitetty patenttivaatimuksen 9 tunnusmerkkiosa käytölle se, mikä on esitetty patenttivaatimuksessa 11.

Esillä olevalla keksinnöllä saadaan yllättäen parenteraalisille koostumuksil edullinen, stabilisoiva vaikutus. Trehaloosi ei ole pelkästään polymerisaati< 10 vasta-aineiden ei-toivottuja reaktioita tehokkaasti estävä aine, vaan se toim koostumuksissa myös osmolariteetin säätelijänä ja poistaa osmolariteettia s apuaineiden tarpeen osittain tai kokonaan.

Esillä olevan keksinnön lisäominaisuudet ja -edut ilmenevät seuraavasta, k« 15 yksityiskohtaisesta kuvauksesta ja siihen liittyvästä sovellutusesimerkistä s liitetyistä piirustuksista.

Kuvio 1 esittää graafisesti säilytysajan funktiona erilaisten sokerien ja glysi stabilisoivaa vaikutusta polymeerinmuodostusta vastaan vasta-aineiden nes „ 20 lääkemuodoilla (pH 4,0).

* » * * » 1 * » » «

Kuvio 2 on samankaltainen graafinen esitys, joka kuvaa erilaisten stabilisoi * i reaktiotuotteiden muodostumista säilytysajan funktiona vasta-aineiden nest i * **·. lääkemuodoilla (pH 4,0).

• 4 «· 25 # *

Vastaavasti kuvio 3 esittää trehaloosin ja glysiinin stabilisoivaa vaikutusta ] : muodostumista vastaan säilytysajan funktiona vasta-aineiden nestemäisillä ««« 4

*** friU

6 säilytyksen aikaista polymerisoitumista tehokkaasti. Immunoglobuliinia si koostumukset säilyvät jääkaapissa, siis lämpötiloissa +2...+8 °C, yleensä . Esillä olevan keksinnön mukaisia nestemäisiä koostumuksia voidaan vuon huoneenlämmössä (noin 25 °C:ssa) pidempiä aikoja, mikä helpottaa säilyt; 5 käsittelyn riskittömämmäksi erityisesti silloin, kun niitä käyttävät avohoitc uusi nestemäinen koostumus stabilisoi immunogiobuliinin myös huoneeni; korkeammissa lämpötiloissa, joille immunoglobuliini saattaa altistua kuljei potilaiden matkustaessa. Tämä uusi koostumus mahdollistaa sellaisen suor immunogiobuliinin valmistuksen, jossa ei tapahdu vasta-aineiden polymer 10 silloin, kun immunoglobuliinia säilytetään 2-6 kuukautta 37 °C:n lämpöt: ’’immunogiobuliinin polymerointia ei tapahdu” tarkoitetaan sitä, että pölyn immunoglobuliini lajien pitoisuus on 0,1 mooli-% tai pienempi ja että geeli kromatografialla ei havaita polymeroitujen lajien määrän lisääntymistä (sai aikana).

15 Tällaisen tavoitteen saavuttamiseksi trehaloosin pitoisuus on tyypillisesti o M, ja esitetyn koostumuksen kohdalla erityisesti 0,01 - 0,4 M.

On korostettava, että erilaiset valmistusprosessit tuottavat lopputuotteita, jc 20 vaihtelevia määriä aggregoitunutta IgG.tä. Niinpä uudella prosessilla, joka rinnakkaisessa patenttihakemuksessamme, jonka nimitys on ’’Menetelmä v | 4 ^ :·:«* immunogiobuliinin valmistamiseksi”, voidaan valmistaa oleellisilta osin pc 4* * proteiineista vapaata tuotetta, kun taas tunnettujen prosessien tuotteet, kute: ‘ ‘ 5 886 154 esitetyn menetelmän tuote, saattavat enimmillään sisältää 0,5 % • · *···* 25 proteiineja. Trehaloosin käyttö stabilisoivana aineena estää proteiinipolyme

• M

·*·· lisääntymisen säilytyksen aikana.

: : m

m _ M 1Λ(β*Λ Α· ·* Ui J

7

Vasta-aineet voivat kuitenkin olla myös kimeerisiä vasta-aineita, kuten hui hiiri vasta-aineet. Tämän lisäksi termeillä ’’vasta-aine” tai ’’vasta-aineet” tai muunneltuja (modifioituja) vasta-aineita, kuten kahden-ja yhdenarvoisia v fragmentteja, sekä yksiketjuisia vasta-aineita ja yhden domainin vasta-aine 5 vasta-aineet tai muunnellut vasta-aineet voivat olla myös konjugoituneita ti molekyyleillä, kuten farmaseuttisesti aktiivisilla efektoriyksiköillä (esimerl radionuklideilla, lääkkeillä ja toksiineilla) muodostaen näin terapeuttisesti 1 konjugaatteja. Parenteraalisesti annosteltavia, konjugoituneita vasta-aineita käyttää diagnostiikassa, kuten kuvantamisessa käytetään radionuklidileima 10 aineita.

Termillä ’’immunoglobuliini” tarkoitetaan IgG-, IgM-ja IgA-luokkien mon polyklonaalisia immunoglobuliineja.

15 Seuraavassa osiossa keksintöä kuvataan yksityiskohtaisemmin, käyttämällä ihmisperäistä, polyklonaalista IgG:tä ja ihmisperäisen, polyklonaalisen IgG fragmentteja. Keksintö soveltuu kuitenkin myös muille polyklonaalisille ja monoklonaalisille vasta-aineille, joita voidaan tarvittaessa muunnella ottam immunoglobuliinin alkuperä ja sen terapeuttinen käyttö.

20

Polyklonaalista immunoglobuliinia saadaan prosessoimalla verenluovuttajil i t * plasmaa. Useimmat menetelmät perustuvat kylmään etanolisaostusprosessii •••\ prosessiin”), mutta myös muihin saostusaineisiin, kuten kapryylihappoon j£ perustuvia menetelmiä ja kromatografisia menetelmiä on kehitetty. Polyme * * 25 aggregaatit voidaan poistaa immunoglobuliinista pepsiinikasittelyllä, PEG-! * kromatografisesti. Sopivia suonensisäisen immunoglobuliinin valmistusmei kuvataan esimerkiksi US-patenteissa 5 945 098 ja 6 281 336 ja rinnakkaisei • · akemuksessamme, lonka nimitvs on ’’Menetelmä virusturvallisen immunop 8

Monoklonaalisia vasta-aineita voidaan tuottaa hybridoma-ja rekombinantt MonoklonaaJisille vasta-aineille voidaan soveltaa samankaltaisia puhdistui kuin polyklonaalisille immunoglobuliinivalmisteille, käyttäen kapryylihapj saostusta ja kromatografiaa. Sopivia monoklonaalisten vasta-aineiden 5 valmistusmenetelmiä kuvataan US-patenteissa 5 807 734 ja 6 600 022.

Nestemäisessä muodossa immunoglobuliini otetaan yleensä talteen pitoisui g/1, vaikka polyklonaalisen immunoglobuliinin sopiva pitoisuus tavanomai käytön kannalta on noin 50 - 200 g/1.

10

Immunoglobuliini voidaan myös ottaa talteen ja puhdistaa, ja erillisen paks vaiheen jälkeen se voidaan varastoida. Tässä tapauksessa proteiini täytyy li vesiliuokseen, joka sisältää trehaloosia tai johon lisätään trehaloosia, kun p dispergoitu liuokseen.

15

Esillä olevan keksinnön mukaisia parenteraalisia valmisteita voidaan helpo saaduista immunoglobuliinia sisältävistä nestekoostumuksista siten, että Ig( lisätään trehaloosia joko sellaisenaan tai seoksena toisen, tavanomaisen stal kanssa. Liuoksen pH:ta voidaan tarvittaessa säätää. Tämän jälkeen liuos ste 20 ja pakataan aseptisesti lopullisiin säilytysastioihin, esimerkiksi ampulleihin « ♦ · ·

Stabilisoivana sokerina käytettävä trehaloosi on ainutlaatuinen, luonnossa e ** · disakkaridi, jossa kaksi glukoosimolekyyliä on sitoutuneina toisiinsa α,α-1, välityksellä. Tällainen rakenne johtaa kemiallisesti stabiilin, ei-pelkistävän » « *···' 25 muodostumiseen, jolla on monia tärkeitä funktionaalisia ominaisuuksia. Tn

IM

···’ tavataan luonnossa sadoilla kasveilla ja eläimillä. Se on tärkeä energian lal· • · • · **" osoitettu olevan ensisijainen organismien stabilisoija pakkaskausien ja kuiv . * aikana. Trehaloosia käytetään osana normaalia ruokavaliota. Näin ollen sen 9 pitoisuutena, joka sellaisenaan riittää tuottamaan koostumukselle fysiologi osmolariteetin (eli osmoiariteetin, joka on noin 200 mOsmol/kg tai suuren: Koostumuksen pH on 3 >8 - 7,4. Keksinnön mukaisia koostumuksia voidaa täydentää käyttäen tavallisia apuaineita ja farmaseuttisia kantaja-aineita, ki 5 stabilisoijaa ja/tai osmolariteettia edelleen säätelevää komponenttia* Tavan stabilisoija voi olla jokin sopiva sokeri tai aminohappo, esimerkiksi maltoc sakkaroosi tai glysiini, ja se voi olla polyoli, kuten sokerialkoholi. Koostur lisätä muita alalla tunnettuja, tavanomaisia farmaseuttisia apuaineita ja lisä merkkejä (mutta ei rajoittavia) näistä ovat kantajat, kuten albumiini ja lipo: 10 kuten fosfaatti, asetaatti, sukkinaatti ja malaatti, elektrolyytit, glyseroli, hyi selluloosa, propyleeniglykoli, polyetyleeniglykoli, polyoksietyleenisorbitai aktiiviset aineet, kasviöljyt, tavanomaiset antibakteriaaliset tai antifungaali parabeenit, klooributanoli, fenoli, sorbiinihappo, timerosaali ja muut vastat Antioksidatiivisia aineita on myös mahdollista lisätä, esimerkiksi metallike 15 happiradikaalin sieppaajia. Esillä olevan keksinnön näkökulmasta farmase hyväksyttävän kantaja-aineen pitää täyttää teollisuuden standardivaatimukf stabiilisuuden ja ei-pyrogeenisyyden suhteen.

Yleensä molaarisuussuhde trehaloosin ja muiden stabilisoijien (kuten sokei 20 epäorgaanisen suolan ja/tai aminohapon) välillä on suurempi kuin 0,05 (eli M;i’ vähintään 5 mooli-% laskettuna koostumuksen stabilisoivien komponenttie *"*! määrästä). Alan ammattilaiselle on selvää, että käytettäessä trehaloosia aim \: päästabilisoi vana komponenttina saavutetaan jonkin verran hyötyä tästä ko kertaisuuden myötä. Suonensisäisten immunoglobuliinivalmisteiden kohda • ·· *··.· 25 annetaan potilaille tavallisesti suurina pitoisuuksina, on mahdollista rajoitta uuden stabilisoijan käyttö pienemmäksi kuin noin 50 mooli-%, ja käyttää si tunnettujen stabilisoijien kuten sokerien tai aminohappojen kanssa niin, etti * * 10 passiivista immunisaatiota varten infektiotauteja vastaan. Niinpä sopiva fai koostumus vaihtelee 50-160 g/I immunoglobuliini G:tä, missä trehaloosin vesiliuoksessa on 0,1 - 0,4 M ja osmolariteetti >240 mOsmol/kg. Monokloi aineiden pitoisuus on yleensä pienempi kuin 10 g/1.

5

Esillä olevan keksinnön puitteissa potilaille annetaan parenteraalisesti farmi koostumuksia passiivista immunisaatiota varten infektiotauteja vastaan, imi modulaatiota varten hoidettaessa erilaisia kliinisiä tautitiloja ja muita vasta-käyttötarkoituksia varten, kuten monoklonaalisilla vasta-aineilla suoritettavi 10 kohdistettuun hoitoon. Vasta-aineiden annostus on noin 0,001 mg - 10 g ru kiloa kohden, suonensisäiselle immunoglobuliinille erityisesti noin 0,1-1,( kohden ja monospesifisille polyklonaalisille vasta-aineille, kuten anti-D-imi globuliinille, ja monoklonaalisille vasta-aineille noin 0,001 - 10 mg painok 15 Parenteraalisia annostelutapoja ovat intravenoosinen, intramuskulaarinen, si rektaalinen, intraokulaarinen, intrasynoviaalinen ja transepiteliaalinen annoi transepiteliaalinen annostelu sisältää transdermaalisen, oftalmisen, sublingu bukkaalisen annostelun.

:: 20 Seuraavat, ei-raj oittavat esimerkit havainnollistavat keksintöä.

*

Esimerkeissä käytettiin seuraavia analyyttisiä menetelmiä; IgG määritettiin '...· turbidometrisesti, ThermoClinicalLabsystems’in kittiä käyttämällä. Polyme< • * · ί * määritettiin geelisuodatuskromatografialla, kuten Ph. Eur. 3rd Ed. 1997:033 ««· • · *··* 25 Kemiallisen reaktion lopputuotteiden muodostuminen havainnoitiin absorbs 340 nm:n aallonpituutta käyttämällä.

ta# • · »

»M

* »

Esimerkki 1 π sisälsivät yhtä seuraavista stabilointiaineista: 0,3 M trehaloosi, 0,3 M main sakkaroosi, 0,3 M glukoosi ja 0,2 M glysiini. Liuokset stenilisuodatettiin j aseptisesti lasiampulleihin. Ampulleja säilytettiin 25 °C:ssa ja 37 "C:ssa, j polymeerien ja kemiallisten reaktiotuotteiden osalta 1, 2, 3 ja 6 kuukauden 5 jälkeen. Polymeerit lisääntyivät selvästi 37 cC:ssa yhden kuukauden säilyt; muilla stabiliointiaineilla paitsi trehaloosi 11a, ja selvää polymeerien lisäänt; havaittu trehaloosilla edes 6 kuukauden säilytyksen aikana (kuvio 1). Vasu kemiallisten reaktiotuotteiden muodostuminen oli selvästi nopeampaa mun kohdalla kuin trehaloosilla (kuvio 2).

10

Esimerkki 2

Ihmisen plasmasta, Cohnin Π+ΠΙ fraktioista puhdistettiin polyklonaalista Ij käyttämällä kapryylihapposaostusta, PEG-saostusta, anioninvaihtokromato 15 ultrasuodatusta, kuten kuvataan yhteishaetussa patenttihakemuksessamme, "Virusturvallisen immunoglobuliinin valmistusprosessi”. Puhdas IgG form liuoksiksi, joiden vasta-ainepitoisuus oli 100 g IgG:tä litraa kohden, pH 5,3 trehaloosistabilisaattorin pitoisuus 0,2 M ja glysiinistabilisaattorin pitoisuu: Liuokset stenilisuodatettiin ja jaettiin aseptisesti lasiampulleihin. Ampulle 20 25 °C:ssa ja 37 °C:ssa, ja niistä analysoitiin polymeerit ja kemialliset reakti

Glysiinin läsnä ollessa polymeerit lisääntyivät selvästi yhden kuukauden sä : jälkeen 37 °C:ssa, kun taas trehaloosin läsnä ollessa polymeerien lisääntym 2 kuukauden säilytyksen aikana (kuvio 3). Vastaavasti kemiallisten reaktioi muodostuminen oli nopeampaa glysiinin läsnä ollessa kuin trehaloosilla.

·»· 25 * »M* : : «« ·

Claims (9)

1. Nestemäinen, polyklonaalisia vasta-aineita käsittävä, parenteraalisesti ai koostumus, jossa on luokkiin IgG, IgA tai IgM sisältyviä vasta-aineita, jotl 5 vesiliuokseen yhdessä stabiloivan aineen ja valinnaisesti sinänsä tunnettuje kanssa sellaisen koostumuksen valmistamiseksi, joka sisältää noin 50 - 201 polyklonaalisia vasta-aineita ja joka on säilytettävissä huoneenlämpötilassa u n n e 11 u siitä, että - se sisältää stabiloivana aineena trehaloosia pitoisuutena, joka tehok] 10 vasta-aineiden polymerisoitumisen 2-6 kuukauden säilytyksen aik joka pitoisuus on riittävä antamaan koostumukselle fysiologisen osi joka on noin 200 mOsmol/kg tai enemmän, ja - koostumuksen pH on 3,8 - 7,4.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen nestemäinen koostumus, tunnettu : trehaloosipitoisuus on 0,01 - 0,4 M.

3. Patenttivaatimusten 1 ja 2 mukainen nestemäinen koostumus, t u n n e 11 vasta-aineet käsittävät eläin- tai ihmisperäisiä polyklonaalisia vasta-aineita, . 20 vasta-aineita, muunneltuja vasta-aineita, kuten kahden- tai yhdenarvoisia v; * * * * \ I e fragmentteja, yksiketjuisia vasta-aineita, yhden domainin vasta-aineita, ja \ konjugaatteja. • · ··· • · • · ·· « .:. 4. Jonkin edellisen patenttivaatimuksen mukainen nestemäinen koostumus, ···♦ . · · · · 25 siitä, että koostumuksen osmolarisuus on > 240 mOsmol/kg. ·· # : 5. Jonkin edellisen patenttivaatimuksen mukainen nestemäinen koostumus, A * — -- 1 * J * — 1 WM*U**M Ani IhI I **** Am »in A 1 maa]· O/ sokeri, polyoli, epäorgaaninen suola tai aminohappo.

7. Jonkin edellisen patenttivaatimuksen mukainen nestemäinen koostumus, siitä, että immunoglobuliini G:n pitoisuus on 50 - 200 g/1 ja koostumus sis 5. trehaloosin vesiliuoksessa, jonka osmolariteetti on >240 mOsmol/kg.

8. Jonkin edellisen patenttivaatimuksen mukainen nestemäinen koostumus, tunnettu siitä, että se on formuloitu annosteltavaksi suonensisäisesti, il lihakseen. 10

9. Menetelmä sellaisen parenteraalisesti annosteltavien, polyklonaalisia vai sisältävän nestemäisen koostumuksen valmistamiseksi, joka sisältää luokk IgM sisältyviä vasta-aineita, jotka on sekoitettu vesiliuokseen yhdessä stabi valinnaisesti sinänsä tunnettujen apuaineiden kanssa, jolloin saadaan koosti 15 sisältää noin 50 - 200 g/1 polyklonaalisia vasta-aineita ja joka on säilytettä\ huoneenlämpötilassa pitkiä aikoja, tunnettu siitä, että - lisätään stabiloivana aineena trehaloosia sellaisena pitoisuutena, j ok estää vasta-aineiden polymerisoitumisen 2-6 kuukauden säilytyksi °C:ssa ja joka pitoisuus on riittävä antamaan koostumukselle fysiok 5e: 20 osmolarisuuden, joka on noin 200 mOsmol/kg tai enemmän, ,„*;" - asetetaan pH arvoon 3,8 - 7,4, mikäli tarpeellista, m ***** - liuos steriilisuodatetaanja ··· ♦ · * · ·. * - täytetään aseptisesti lopullisiin säilytysastioihin. * »ti 9 «·!· J · ** 25 10. Patenttivaatimuksen 11 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että k , 0,4 M trehaloosia. : : : ·*· ··· *!* 11 Trehalonsin kävttö stabiloivana aineena nolvklnnaalisten vasta-aineider noin 200 mOsmol/kg tai enemmän, jolloin saadaan koostumus, joka on sail huoneenlämpötilassa pitkiä aikoja.

12. Patenttivaatimuksen 11 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että nestel 5 formuloidaan suonensisäistä annostelua varten.

13. Patenttivaatimuksen 12 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että nestel formuloidaan annosteltavaksi ihon alle tai lihakseen. • · ♦ • t · *·· • 1 2 3 ··· « · * · ··♦ » ··· «··· * · • M » • · · 2 ♦ 1 1 3 t IM • « • · «a1