ES2985111T3 - Compuestos de quinolina y composiciones para inhibir ezh2 como tratamiento para enfermedades cancerosas - Google Patents

Abstract

La invención aquí divulgada se refiere a compuestos de aza-quinolina de Fórmula (I), composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos; y el uso de dichos compuestos para tratar una enfermedad o afección mediada por el potenciador del homólogo Zeste 2 (EZH2), el complejo represivo Polycomb 2 (PRC2) o una combinación de los mismos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos de quinolina y composiciones para inhibir ezh2 como tratamiento para enfermedades cancerosas

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a compuestos, a composiciones y a métodos para inhibir el potenciador del homólogo de zeste (Enhancer of Zeste Homolog, en inglés) (EZH2), el complejo represor Polycomb 2 (PRC2), o una combinación de los mismos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

La metilación de lisina específica del sitio en histonas es uno de los mecanismos epigenéticos importantes para controlar y mediar muchos procesos biológicos fundamentales. El complejo represor Polycomb 2 (PRC2) metila la lisina 27 de la histona H3 (H3K27) en la región genómica de los genes diana, y por lo tanto reprime la transcripción génica. PRC2 requiere como mínimo tres subunidades centrales, incluyendo SUZ12 (supresor de zeste 12), EED (desarrollo de ectodermo embrionario) y la subunidad catalítica EZH1 o EZH2 (potenciador del homólogo de zeste 1/2). EZH1 y EZH2 son proteínas homólogas, y ambas pueden integrarse en PRC2 respectivamente, aunque con diferente distribución tisular y temporal. En PRC2, EZH2 puede unirse directamente al cofactor S-adenosil metionina (SAM) y transferir el grupo metilo al sitio de la histona H3K27 para formar lisina mono-, di- y trimetilada (H3K27me1, H3K27me2 y H3K27me3), que reprime la transcripción génica. PRC2-EZH2 tiene mayor actividad que PRC2-EZH1, que cataliza predominantemente la formación de H3K27me1 y algo de H3K27me2. EED puede unirse a H3K27me2/3 y activar alostéricamente la actividad enzimática de PRC2 para promover la propagación de las marcas represoras.

EZH2 desempeña una función fundamental en el desarrollo y la homeostasis de los tejidos adultos, y está estrechamente asociada con muchas enfermedades. EZH2, SUZ12 y EED se sobreexpresan en muchos cánceres, incluyendo, pero sin limitarse a, cáncer de mama, cáncer de próstata y carcinoma hepatocelular. Se han identificado mutaciones activadoras de EZH2, que conducen a un aumento de H3K27me3, en pacientes con DLBCL (linfoma difuso de células B grandes), FL (linfoma folicular), melanoma, y adenocarcinoma de paratiroides. La inhibición de la actividad de la metiltransferasa PRC2 por compuestos que compiten con el cofactor<s>A<m>o que se unen directamente a EED en DLBCL revierte el estado alto de H3K27me3, reactiva la expresión de genes diana e inhibe el crecimiento/proliferación de tumores. Además, los inhibidores de EZH2 pueden liberar la represión de las quimiocinas Th1 en las células tumorales y mejorar la infiltración de células T en los cánceres de ovario y colorrectal.

Por lo tanto, EZH2 proporciona una diana farmacológica para DLBCL y otros cánceres. Además, EZH2 también desempeña un papel importante en enfermedades autoinmunes y otros trastornos. En conjunto, existe una gran necesidad de moléculas pequeñas que inhiban la actividad de EZH2. Varios inhibidores de EZH2 identificados mediante detección virtual basada en farmacóforos y mediante ensayos biológicos se describen en Wu, Y, et al.; Bioorg. Med. Chem. Lett., 2016, 26(15), 3813-3817.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

La presente invención proporciona compuestos que inhiben EZH2; composiciones que comprenden compuestos que inhiben EZH2; y los compuestos y composiciones para uso en métodos para tratar o prevenir una enfermedad o afección mediada por EZH2, PRC2, o una combinación de los mismos.

En un aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de Fórmula (I), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o sal farmacéuticamente aceptable del mismo:

Y es N o CRa;

Ra, R1, R3, R5, R6, R7, R8 y R9 son independientemente H, halógeno o -alquilo C<1>-C<4>;

R2 es CN, -alquilo C<1>-C<6>, -hidroxialquileno C<1>-C<4>, -cianoalquileno C<1>-C<4>o -alcoxi C<2>-C<4>sustituido con 1-2 hidroxilos;

-(CR13R14)nC(=O)NR11R12, -(CR13R14)nC(=O)NR11R15;

-(CR13R14)nC(=O)R15;

-(CR2)nNR11C(=O)R15, -(CR2)nNR11(CR2)2C(=O)R15;

-(CR2)nNR-C(=O)OR11,-(CR2)nNR-C(=O)O-(CR2)-R15;

-NR-C(=O)(CR2)2C(=O)R15, -NR-C(=O)R11;

-(CR2)nNR11R12, -(CR2)nNR11(CR2)nR15;

-(CR2)nOR15, -(CR2)nR15;

o un heteroarilo de 5 a 6 miembros que tiene 1 a 4 heteroátomos seleccionados independientemente de O, S y N;

R4a, R4b, R4c y R4d son independientemente H o -alquilo C<1>-C<4>;

R10 es H, halógeno, -alquilo C<1>-C<4>, -alcoxi C<1>-C<4>, -haloalcoxi C<1>-C<4>o -NH(alquilo C<1>-C<4>);

R11 es H, -alquilo C<1>-C<4>, -hidroxialquileno C<1>-C<4>, -cianoalquileno C<1>-C<4>o -alquilo C<1>-C<4>sustituido con -alcoxi C<1>-C<4>;

R12 es H o -alquilo C<1>-C<4>;

R13 es H, halógeno, -CN, -OH, -alquilo C<1>-C<4>o -hidroxialquileno C<1>-C<4>;

R14 es H, halógeno o -alquilo C<1>-C<4>;

R15 es

-cicloalquilo C<3>-C<6>, o un heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros que tiene 1-2 heteroátomos seleccionados independientemente de O, S, S(=O)<2>, y N; en el que dicho -cicloalquilo C<3>-C<6>o heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros de R15 no está sustituido o está sustituido con 1-2 sustituyentes seleccionados de -OH, -alquilo C<1>-C<4>, -hidroxialquileno C<1>-C<4>, -alcoxi C<1>-C<4>, -SO<2>(alquilo C<1>-C<4>) y -N(alquilo C1-C4)2;

R16, si está presente, es un sustituyente seleccionado entre halógeno, -CN, -OH, -alquilo C<1>-C<4>e -hidroxialquileno C1-C4;

cada R es independientemente H o -alquilo C<1>-C<4>;

m es 0, 1 o 2; y

cada n se selecciona independientemente de 0, 1 y 2.

En otro aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (I) o subfórmulas del mismo, o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables.

En aún otro aspecto, la invención proporciona una combinación, en particular una combinación farmacéutica, que comprende un compuesto de Fórmula (I) o subfórmulas del mismo, o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y uno o más agentes terapéuticamente activos.

Los compuestos de la invención, solos o en combinación con uno o más agentes terapéuticamente activos, se pueden usar para tratar o prevenir una enfermedad o afección mediada por EZH2, PRC2, o una combinación de los mismos, en el que dicha enfermedad o afección es linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), linfoma folicular, leucemia, mieloma múltiple, cáncer gástrico, tumor rabdoide maligno, carcinoma hepatocelular, cáncer de próstata, carcinoma de mama, cánceres de conductos biliares y de vesícula biliar, carcinoma de vejiga, neuroblastoma, schwannoma, glioma, glioblastoma y astrocitoma, cáncer de cuello uterino, cáncer de colon, melanoma, cáncer de endometrio, cáncer de esófago, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de pulmón, carcinoma nasofaríngeo, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, carcinoma de células renales, cáncer de recto, cánceres de tiroides, tumores de paratiroides, tumores uterinos, rabdomiosarcoma, sarcoma de Kaposi, sarcoma sinovial, osteosarcoma o sarcoma de Ewing.

Otros aspectos de la invención se exponen en las reivindicaciones dependientes adjuntas.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

Las referencias a métodos de tratamiento en los párrafos siguientes de esta descripción deben interpretarse como referencias a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la presente invención para uso en un método para el tratamiento del cuerpo humano (o animal) mediante terapia (o para diagnóstico).

La presente invención proporciona composiciones y métodos para tratar o prevenir una enfermedad o afección mediada por EZH2, PRC2, o una combinación de los mismos. Las referencias a métodos para tratar o prevenir una enfermedad o afección en esta descripción deben interpretarse como referencias a compuestos o composiciones farmacéuticas de la presente invención para uso en esos métodos.

Definiciones

A efectos de interpretación de esta memoria descriptiva, se aplicarán las siguientes definiciones y, cuando proceda, las expresiones y los términos usados en singular también incluirán el plural y viceversa.

Como se usa aquí, el término "-alquilo C<1->C<6>" o "-alquilo C<1-6>" se refiere a un radical de cadena hidrocarbonada lineal o ramificada que consiste únicamente en átomos de carbono e hidrógeno, que no contiene insaturación, que tiene de uno a seis átomos de carbono, y que está unido al resto de la molécula mediante un enlace sencillo. El término " alquilo C<1->C<4>" o "-alquilo C<1-4>" debe interpretarse en consecuencia. Los ejemplos de -alquilo C<1->C<6>incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, n-propilo, 1 -metiletilo (isopropilo), n-butilo, n-pentilo y 1, 1 -dimetiletilo (f-butilo).

Como se usa aquí, el término "-alcoxi C<1->C<4>" se refiere a un radical de fórmula -OR<a>en la que R<a>es un radical alquilo C<1-4>como se define generalmente más arriba. Los ejemplos de alcoxi C<1-6>incluyen, sin limitación, metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, isobutoxi, pentoxi y hexoxi.

El término "cicloalquilo", como se usa aquí, se refiere a un sistema anular saturado, monocíclico, bicíclico condensado, tricíclico condensado, o policíclico con puente. Los ejemplos no limitativos de sistemas anulares bicíclicos condensados o policíclicos con puentes incluyen biciclo[1.1.1]pentano, biciclo[2.1.1]hexano, biciclo[2.2.1]heptano, biciclo[3.1.1]heptano, biciclo[3.2.1]octano, biciclo[2.2.2]octano y adamantanilo. Como se usa aquí, el término "cicloalquilo C<3>-C<6>" se refiere a un grupo monocíclico saturado que tiene al menos 3, y como máximo 6, átomos de carbono. Ejemplos no limitativos de tales grupos "cicloalquilo C<3>-C<6>" incluyen grupos ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.

"Halo" o "halógeno" se refieren a bromo, cloro, fluoro o yodo.

Como se usa aquí, el término "-hidroxialquileno C<1-4>" se refiere a un radical -alquilo C<1-4>como se define anteriormente, en el que uno de los átomos de hidrógeno del radical alquilo C<1-4>está reemplazado por OH. Los ejemplos de hidroxialquilo C<1-4>incluyen, pero no se limitan a, etano-1-olilo, 2-metilpropan-1-olilo, hidroximetilo, 2-hidroxietilo, 2-hidroxi-propilo y 3-hidroxi-propilo.

Como se usa aquí, el término "-cianoalquileno C<1-4>" se refiere a un radical -alquilo C<1-4>como se define anteriormente, en el que uno de los átomos de hidrógeno del radical -alquilo C<1-4>está reemplazado por CN.

El término "haloalcoxi", como se usa aquí, se refiere a un haloalquilo unido a un oxígeno, que también puede representarse como -O-R', en el que R' representa el grupo haloalquilo. "Haloalcoxi C<1>-C<4>" pretende incluir grupos haloalcoxi C<1>, C<2>, C<3>y C<4>. Los ejemplos de grupos haloalcoxi incluyen, pero no se limitan a, fluorometoxi, difluorometoxi, trifluorometoxi, clorometoxi, diclorometoxi, triclorometoxi, pentafluoroetoxi, pentacloroetoxi, 2,2,2-trifluoroetoxi, heptafluoropropoxi, heptacloropropoxi, difluoroclorometoxi, diclorofluorometoxi, difluoroetoxi, trifluoroetoxi, difluoropropoxi, dicloroetoxi y dicloropropoxi.

Como se usa aquí, el término "heterociclilo" o "heterocíclico" se refiere a un radical anular monocíclico no aromático estable de 4-7 miembros que comprende 1,2 o 3 heteroátomos seleccionados individualmente de nitrógeno, oxígeno y azufre. El radical heterociclilo puede estar unido a través de un átomo de carbono o un heteroátomo. La expresión "heterociclilo de 5-6 miembros" debe interpretarse en consecuencia. Los ejemplos de heterociclilo incluyen, pero no se limitan a, azetidinilo, oxetanilo, pirrolinilo, pirrolidilo, tetrahidrofurilo, tetrahidrotienilo, piperidilo, piperazinilo, tetrahidropiranilo o morfolinilo o perhidroazepinilo.

Como se usa aquí, el término "heterociclilalquilo C<0-6>" se refiere a un anillo heterocíclico como se define anteriormente que está unido al resto de la molécula mediante un enlace sencillo o mediante un radical alquilo C<1-6>como se define anteriormente.

Como se usa aquí, el término "heteroarilo" se refiere a un radical de anillo condensado o monocíclico aromático de 5 9 miembros que comprende 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados individualmente de nitrógeno, oxígeno y azufre. El radical heteroarilo puede estar unido mediante un átomo de carbono o un heteroátomo. La expresión "heteroarilo de 5-6 miembros" debe interpretarse en consecuencia. Los ejemplos de heteroarilos monocíclicos de 5-6 miembros incluyen, pero no se limitan a, furilo, pirrolilo, tienilo, pirazolilo, imidazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, triazolilo, tetrazolilo, pirazinilo, piridazinilo, pirimidilo o piridilo. Los ejemplos de heteroarilos condensados incluyen, pero no se limitan a, heteroarilos de 9 miembros tales como benzofuranilo; 2,3-dihidrobenzofuranilo, 1,3-dihidroisobenzofuranilo; benzo[d][1,3]dioxol-5-ilo; imidazo[1,2-a]piridinilo; pirazolo[1,5-a]piridinilo; 1H-indazolilo y 1H-benzo[d]-imidazolilo.

"EZH2" se refiere al potenciador de homólogo de zeste 2.

"PRC2" se refiere al complejo represor Polycomb 2.

La expresión "enfermedad o afección mediada por PRC2" se refiere a una enfermedad o afección que está regulada directa o indirectamente por PRC2. Esto incluye, pero no se limita a, cualquier enfermedad o afección que esté directa o indirectamente regulada por EZH2.

La expresión "enfermedad o afección mediada por el potenciador del homólogo de zeste (EZH2), el complejo represor Polycomb 2 (PRC2), o una combinación del potenciador del homólogo de zeste 2 (EZH2) y el complejo represor Polycomb 2 (PRC2)", o la expresión "enfermedad o afección mediada por EZH2, PRC<2>o EZH2/PRC2", se refiere a una enfermedad o afección que está directa o indirectamente regulada por EZH2, PRC2, o EZH2 y PRC2.

Como se usa aquí, el término "sujeto" se refiere a mamíferos, primates (por ejemplo, seres humanos, machos o hembras), perros, conejos, cobayas, cerdos, ratas y ratones. En ciertas realizaciones, el sujeto es un primate. En otras realizaciones más, el sujeto es un ser humano.

Como se usa aquí, el término "inhibir", "inhibición" o "que inhibe" se refiere a la reducción o supresión de una determinada afección, síntoma, trastorno o enfermedad, o una disminución significativa en la actividad inicial de una actividad o proceso biológico.

Como se usa en el presente documento, el término "tratar", "que trata" o "tratamiento" de cualquier enfermedad o trastorno se refiere a aliviar o mejorar la enfermedad o trastorno (es decir, ralentizar o detener el desarrollo de la enfermedad o al menos uno de los síntomas clínicos de esta); o aliviar o mejorar al menos un parámetro físico o biomarcador asociado a la enfermedad o trastorno, incluidos los que pueden no ser perceptibles para el paciente.

Como se usa en el presente documento, el término "prevenir", "que previene" o "prevención" de cualquier enfermedad o trastorno se refiere al tratamiento profiláctico de la enfermedad o trastorno; o al retraso del inicio o la progresión de la enfermedad o trastorno

Como se usa aquí, un sujeto "necesita" un tratamiento si dicho sujeto se beneficiaría biológicamente, médicamente o en calidad de vida de dicho tratamiento.

Como se usa aquí, la expresión "una cantidad terapéuticamente eficaz" de un compuesto de la presente invención se refiere a una cantidad del compuesto de la presente invención que provocará la respuesta biológica o médica de un sujeto, por ejemplo reducción o inhibición de una actividad de una enzima o una proteína, o mejora los síntomas, alivia afecciones, retarda o retrasa la progresión de una enfermedad, o previene una enfermedad, etc.

Como se usa en el presente documento, la expresión "composición farmacéutica" se refiere a un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con al menos el vehículo farmacéuticamente aceptable, en una forma adecuada para la administración oral o parenteral.

Como se usa en el presente documento, la expresión "vehículo farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sustancia útil en la preparación o el uso de una composición farmacéutica e incluye, por ejemplo, diluyentes, disolventes, medios de dispersión, tensioactivos, antioxidantes, conservantes, agentes isotónicos, agentes tamponantes, emulsionantes, agentes que retrasan la absorción, sales, estabilizantes de fármacos, aglutinantes, excipientes, agentes de disgregación, lubricantes, agentes humectantes, agentes edulcorantes, agentes saporíferos, colorantes adecuados y combinaciones de los mismos, como sabrán los expertos en la materia (véase, por ejemplo, Remington,The Science and Practice of Pharmacy,22.a Ed. Pharmaceutical Press, 2013, págs. 1049-1070).

Como se usan en el presente documento, debe interpretarse que el término "un", "uno/a", "el/la" y términos similares usados en el contexto de la presente invención (especialmente en el contexto de las reivindicaciones) abarcan tanto el singular como el plural a menos que se indique otra cosa en el presente documento o el contexto lo contradiga claramente.

Descripción de las realizaciones preferidas

La presente invención proporciona compuestos que inhiben EZH2; y composiciones y métodos para tratar o prevenir una afección mediada por EZH2, PRC2 o una combinación de las mismas.

Se describen aquí diversas realizaciones enumeradas de la invención. Las características especificadas en cada realización pueden combinarse con otras características especificadas para proporcionar realizaciones adicionales de la presente invención.

Realización 1. Un compuesto de Fórmula (I), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; como se describió anteriormente.

Realización 2. Un compuesto según la Realización 1, en el que dicho compuesto es de Fórmula (I-1), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

5, R6, R7, R8, R9 y R10 son como se definen en la Fórmula (1). Realización 3. Un compuesto según la Realización 1, en el que dicho compuesto es de Fórmula (I-2), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

Realización 4. Un compuesto según la Realización 1, en el que dicho compuesto es de Fórmula (I-3), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

Realización 5. Un compuesto según la Realización 1, en el que dicho compuesto es de Fórmula (I-4), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

en la que Y y R2 son como se definen en la Fórmula (1).

Realización 6. Un compuesto según la Realización 1, en el que dicho compuesto es de Fórmula (I-5), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

Realización 7. Un compuesto según la Realización 1, en el que dicho compuesto es de Fórmula (I-6), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

Realización 8. Un compuesto según la Realización 1, en el que dicho compuesto es de Fórmula (I-7), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

Realización 9. Un compuesto según una cualquiera de las Realizaciones 1-8, o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en el que R2 es -CN, -NH<2>, -C(=O)NH<2>, triazolilo,

Realización 10. Un compuesto según una cualquiera de las Realizaciones 1-8, o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en el que R2 es -(CH<2>)<1>-<2>C(=O)NR11R15 o -(CR13R14)-C(=O)NR11R15.

Realización 11. Un compuesto según la Realización 10, o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en el que R15 es un heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros que tiene 1-2 heteroátomos seleccionados independientemente de O, S y N; en el que dicho heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros no está sustituido o está sustituido con 1-2 sustituyentes seleccionados de -OH, -alquilo C<1>-C<4>, -hidroxialquileno C<1>-C<4>, -alcoxi C<1>-C<4>, -SO<2>(alquilo C<1>-C<4>) y -N(alquilo C1-C4)2;

Realización 12. Un compuesto según la Realización 10 u 11, o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en el que R15 es

En una realización particular, R15 es

Realización 13. Un compuesto según la Realización 12, en el que m es 1; y R16 es -alquilo C<1>-C<4>.

Realización 14. Un compuesto según una cualquiera de las Realizaciones 1-13, o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en el que R2 es

Realización 15. Un compuesto según la Realización 1, en el que dicho compuesto es de Fórmula (II), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

en la que:

Y CH o N;

R1, R3, R4a, R4b, R4c, R4d y R11 son independientemente H, halógeno o alquilo C<1>-C<4>;

R5, R6, R7, R8, R9, y R10 son independientemente H, halógeno o alquilo C<1>-C<4>;

R13 es H, halógeno, -CN, -OH, -alquilo C<1>-C<4>o -hidroxialquileno C<1>-C<4>;

R14 es H, halógeno o -alquilo C<1>-C<4>;

R5 es un heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros que tiene 1-2 heteroátomos seleccionados independientemente de O, S y N; y en la que R15 no está sustituido o está sustituido con 1-2 sustituyentes seleccionados de -OH, -alquilo C<1>-C<4>, -hidroxialquileno C<1>-C<4>, -alcoxi C<1>-C<4>, -SO<2>(alquilo C<1>-C<4>) y -N(alquilo C1-C4)2.

Realización 16. Un compuesto según la Realización 15, en el que dicho compuesto es de Fórmula (II-1), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

Realización 17. Un compuesto según la Realización 15, en el que dicho compuesto es de Fórmula (!!-2), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

Realización 18. Un compuesto según la Realización 15, en el que dicho compuesto es de Fórmula (!!-3), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

Realización 19. Un compuesto según una cualquiera de las Realizaciones 15-18, o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en el que R15 es azetidinilo u ozetanilo, cada uno de los cuales no está sustituido o está sustituido con -OH, -alquilo C<1>-C<4>o -hidroxialquileno C<1>-C<4>.

Realización 20. Un compuesto según la Realización 19, o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en el que R15 es

En una realización particular, R15 es

Realización 21. Un compuesto según la Realización 20, en el que m es 1; y R16 es -alquilo C<1>-C<4>.

Realización 22. Un compuesto según la Realización 1, en el que dicho compuesto se selecciona de:

2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-metil-N-(oxetan-3-il)acetamida;

2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2,2-difluoro-N-(oxetan-3-il)acetamida;

2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-hidroxi-N-(oxetan-3-il)propanamida;

2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-ciano-N-(oxetan-3-il)acetamida;

2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-3-hidroxi-N-(oxetan-3-il)propanamida;

2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-hidroxi-N-(oxetan-3-il)acetamida;

2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida; y

2-(6-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)piridin-3-il)-N-(oxetan-3-il)acetamida; o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas.

Realización 23. Un compuesto según la Realización 1, en el que dicho compuesto se selecciona de:

2- (2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-metil-N-(oxetan-3- il)acetamida;

2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2,2-difluoro-N-(oxetan-3-il)acetamida;

2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-hidroxi-N-(oxetan-3-il)propanamida;

2- (2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-ciano-N-(oxetan-3- il)acetamida;

2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-3-hidroxi-N-(oxetan-3-il)propanamida;

(S)-2-(2-((((1 R,4S)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-3-hidroxi-N-(oxetan-3-il)propanamida;

(R) -2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-3-hidroxi-N-(oxetan-3-il)propanamida;

2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-hidroxi-N-(oxetan-3-il)acetamida;

(S) -2-(2-((((1 R,4S)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-hidroxi-N-(oxetan-3-il)acetamida;

(R) -2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-hidroxi-N-(oxetan-3-il)acetamida;

2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida; (S)

(S) -2-(2-((((1 R,4S)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida;

(R)-2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida; y

2-(6-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)piridin-3-il)-N-(oxetan-3-il)acetamida;

o una mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas.

Realización 24. Un compuesto según la Realización 1, en el que dicho compuesto es 2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)acetamida; o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 25. Un compuesto según la Realización 24, en el que dicho compuesto es 2-(2-(((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin- 5-il)-N-(oxetan-3-il)acetamida; o una mezcla enantiomérica o sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 26. Un compuesto según la Realización 1, en el que dicho compuesto es 2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida; o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 27. Un compuesto según la Realización 26, en el que dicho compuesto es (S)-2-(2-((((1 R,4S)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida o (R)-2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin- 2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida; o una mezcla enantiomérica o sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 28. Un compuesto según la Realización 1, en el que dicho compuesto es 2-(6-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)piridin-3-il)-N-(oxetan-3-il)acetamida; o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 29. Un compuesto según la Realización 25, en el que dicho compuesto es 2-(6-(((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)piridin-3-il)-N-(oxetan-3-il)acetamida; o una mezcla enantiomérica o sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Realización 30. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según una cualquiera de las Realizaciones 1-29 y uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables.

Realización 31. Una combinación que comprende un compuesto según una cualquiera de las Realizaciones 1-29 y uno o más agentes terapéuticamente activos adicionales.

Realización 32. La combinación según la Realización 31, en la que dicho uno o más agentes terapéuticamente activos adicionales es un agente contra el cáncer, un analgésico, un agente antiinflamatorio, un inmunomodulador, o una combinación de los mismos.

Realización 33. Un compuesto según una cualquiera de las Realizaciones 1 -29 y opcionalmente en combinación con un segundo agente terapéutico, para uso en el tratamiento de una enfermedad o afección mediada por EZH2, PRC2 o EZH2/PRC2.

Realización 34. El compuesto según la Realización 33, en el que dicho segundo agente terapéutico es un agente contra el cáncer, un analgésico, un agente antiinflamatorio, o una combinación de los mismos.

Realización 35. Uso de un compuesto según una cualquiera de las Realizaciones 1-29 y opcionalmente en combinación con un segundo agente terapéutico, en la fabricación de un medicamento para una enfermedad o afección mediada por EZH2, PRC2 o EZH2/PRC2.

Realización 36. Un método para tratar una enfermedad o afección mediada por EZH2, PRC2 o EZH2/PRC2, que comprende administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto según una cualquiera de las Realizaciones 1-29 y opcionalmente en combinación con un segundo agente terapéutico; tratando así dicha enfermedad o afección mediada por EZH2, PRC2 o EZH2/PRC2.

Realización 37. Un método para tratar una enfermedad o afección que se beneficia o es tratable mediante la inhibición de EZH2, PRC2 o EZH2/PRC2, que comprende administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto según una cualquiera de las Realizaciones 1-29 y opcionalmente en combinación con un segundo agente terapéutico; tratando así dicha enfermedad o afección que se beneficia o es tratable mediante la inhibición de EZH2, PRC2 o EZH2/PRC2.

Realización 38. El uso de un compuesto según la Realización 35, o el método según la Realización 36 o 37, en el que dicha enfermedad o afección mediada por EZH2, PRC2 o EZH2/PRC2, o dicha enfermedad o afección que se beneficia o es tratable mediante la inhibición de EZH2, PRC2 o EZH2/PRC2, es linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), linfoma folicular, leucemia, mieloma múltiple, cáncer gástrico, tumor rabdoide maligno, carcinoma hepatocelular, cáncer de próstata, carcinoma de mama, cánceres de conductos biliares y de vesícula biliar, carcinoma de vejiga, neuroblastoma, glioma, glioblastoma y astrocitoma, cáncer de cuello uterino, cáncer de colon, melanoma, cáncer de endometrio, cáncer de esófago, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de pulmón, carcinoma nasofaríngeo, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, carcinoma de células renales, cáncer de recto, cánceres de tiroides, tumores de paratiroides, tumores uterinos, rabdomiosarcoma, sarcoma de Kaposi, sarcoma sinovial, osteosarcoma y sarcoma de Ewing.

Realización 39. El uso de un compuesto según la Realización 35, o el método según la Realización 36 o 37, en el que dicha enfermedad o afección mediada por EZH2, PRC2 o EZH2/PRC2, o dicha enfermedad o afección que se beneficia o es tratable mediante la inhibición de EZH2, PRC2 o EZH2/PRC2, es linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), linfoma folicular, leucemia, mieloma múltiple, cáncer gástrico, tumor rabdoide maligno, y carcinoma hepatocelular.

Realización 40. Un método para inhibir EZH2, PRC2 o EHZ2/PRC2, que comprende administrar un compuesto según una cualquiera de las Realizaciones 1-29; inhibiendo así EZH2, PRC2 o EZH2/PRC2.

A menos que se especifique de otro modo, la expresión "compuestos de la presente invención" o "compuesto de la presente invención" se refiere a compuestos de Fórmula (I), subfórmulas de los mismos, y compuestos ejemplificados, y sales de los mismos, así como todos los estereoisómeros (incluyendo diastereoisómeros y enantiómeros), rotámeros, tautómeros y compuestos isotópicamente marcados (incluyendo las sustituciones de deuterio), así como restos formados inherentemente. Los "compuestos de la presente invención" incluyen además derivados de N-óxido de tales compuestos.

Dependiendo de la elección de los materiales de partida y los procedimientos, los compuestos pueden estar presentes en forma de uno de los posibles estereoisómeros o como mezclas de los mismos, por ejemplo, como isómeros ópticos puros, o como mezclas de estereoisómeros tales como racematos y mezclas de diastereisómeros, dependiendo del número de átomos de carbono asimétricos. La presente invención pretende incluir todos estos posibles estereoisómeros, incluidas mezclas racémicas, mezclas diastereoisoméricas y formas ópticamente puras. Se pueden preparar estereoisómeros (R) y (S) ópticamente activos usando sintones quirales o reactivos quirales, o se pueden resolver usando técnicas convencionales. Los sustituyentes en átomos con dobles enlaces insaturados pueden estar presentes, si es posible, en formacis(Z) otrans (E).Si el compuesto contiene un cicloalquilo disustituido, el sustituyente cicloalquilo puede tener una configuración cis o trans.

Cualquier átomo asimétrico (por ejemplo, carbono o similar) del compuesto o compuestos de la presente invención, puede estar presente en forma racémica o enantioméricamente enriquecida, por ejemplo, la configuración (R), (S) o(R,S).En determinadas realizaciones, cada átomo asimétrico tiene al menos un 50 % de exceso enantiomérico, al menos un 60 % de exceso enantiomérico, al menos un 70 % de exceso enantiomérico, al menos un 80 % de exceso enantiomérico, al menos un 90 % de exceso enantiomérico, al menos un 95 % de exceso enantiomérico o al menos un 99 % de exceso enantiomérico en la configuración (R) o (S).

En consecuencia, como se usa en el presente documento, un compuesto de la presente invención puede estar en forma de uno de los posibles estereoisómeros, rotámeros, atropisómeros, tautómeros o mezclas de los mismos, por ejemplo, como racematos, isómeros ópticos (enantiómeros), diastereómeros, estereoisómeros geométricos(cisotrans) sustancialmente puros o mezclas de los mismos.

Cualquier mezcla resultante de estereoisómeros se puede separar en función de las diferencias fisicoquímicas de los componentes en isómeros, diastereómeros y racematos puros o sustancialmente puros, por ejemplo, mediante cromatografía y/o cristalización fraccionada.

Cualquier racemato resultante de compuestos de la presente invención o de intermedios se puede resolver en las antípodas ópticas mediante métodos conocidos, por ejemplo mediante separación de las sales diastereoméricas de los mismos, obtenidas con un ácido o base ópticamente activo, y liberando el compuesto ácido o básico ópticamente activo. En particular, se puede emplear así un resto básico para resolver los compuestos de la presente invención en sus antípodas ópticas, por ejemplo mediante cristalización fraccionada de una sal formada con un ácido ópticamente activo, por ejemplo ácido tartárico, ácido dibenzoiltartárico, ácido diacetiltartárico, ácido di-0,0'-p-toluoiltartárico, ácido mandélico, ácido málico, o ácido canfo-10-sulfónico. Los compuestos racémicos de la presente invención o los intermedios racémicos también se pueden resolver mediante cromatografía quiral, por ejemplo cromatografía de líquidos de alta presión (HPLC) usando un adsorbente quiral.

Cualquier fórmula proporcionada aquí también pretende representar formas no marcadas así como formas marcadas isotópicamente de los compuestos. Los compuestos marcados isotópicamente tienen estructuras representadas por las fórmulas proporcionadas en el presente documento, excepto por que uno o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica o un número másico seleccionados. Los isótopos que se pueden incorporar en compuestos de la invención incluyen, por ejemplo, isótopos de hidrógeno.

Además, la incorporación de determinados isótopos, particularmente deuterio (es decir, 2H o D) puede proporcionar determinadas ventajas terapéuticas como resultado de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, una semividain vivoaumentada o requisitos de dosificación reducidos o una mejora en el índice terapéutico o la tolerabilidad. Se entiende que en este contexto el deuterio se considera un sustituyente de un compuesto de Fórmula (I) o subfórmulas del mismo. La concentración de deuterio puede ser definida por el factor de enriquecimiento isotópico. La expresión "factor de enriquecimiento isotópico", como se usa en el presente documento, se refiere a la relación entre la abundancia isotópica y la abundancia natural de un isótopo específico. Si se indica que un sustituyente en un compuesto de esta invención es deuterio, dicho compuesto tiene un factor de enriquecimiento isotópico para cada uno de los átomos de deuterio designados de al menos 3500 (52,5 % de incorporación de deuterio en cada átomo de deuterio designado), al menos 4000 (60 % de incorporación de deuterio), al menos 4500 (67,5 % de incorporación de deuterio), al menos 5000 (75 % de incorporación de deuterio), al menos 5500 (82,5 % de incorporación de deuterio), al menos 6000 (90 % de incorporación de deuterio), al menos 6333,3 (95 % de incorporación de deuterio), al menos 6466,7 (97 % de incorporación de deuterio), al menos 6600 (99 % de incorporación de deuterio) o al menos 6633,3

(99,5 % de incorporación de deuterio). Debe entenderse que la expresión "factor de enriquecimiento isotópico" se puede aplicar a cualquier isótopo de la misma manera que se describe para el deuterio.

Otros ejemplos de isótopos que se pueden incorporar a compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro tales como 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 18F 31P, 32P, 35S, 36Cl, 123I, respectivamente. En consecuencia, debe entenderse que la invención incluye compuestos que incorporan uno o más de cualquiera de los isótopos mencionados anteriormente, incluyendo, por ejemplo, isótopos radiactivos, tales como

3H y 14C, o aquellos en los que están presentes isótopos no radiactivos, tales como 2H y 13C. Dichos compuestos marcados isotópicamente son útiles en estudios metabólicos (con 14C), estudios de la cinética de la reacción (con, por ejemplo, 2H o 3H), técnicas de detección o de obtención de imágenes, tales como la tomografía por emisión de positrones (PET) o la tomografía computarizada de emisión monofotónica (SPECT), que incluyen ensayos de distribución tisular de fármacos o sustratos, o en el tratamiento radiactivo de pacientes. En particular, un compuesto marcado o 18F puede ser particularmente deseable para estudios de PET o SPECT. Los compuestos marcados isotópicamente de Fórmula (I) o subfórmulas de los mismos pueden prepararse generalmente mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica, o mediante procedimientos análogos a los descritos en los ejemplos adjuntos usando reactivos marcados isotópicamente apropiados en lugar del reactivo no marcado previamente empleado.

Los compuestos de la presente invención se obtienen en forma libre o como una de sus sales. Como se usan en el presente documento, los términos "sal" o "sales" se refieren a una sal de adición de ácido o de adición de base de un compuesto de la invención. Las "sales" incluyen en particular las "sales farmacéuticamente aceptables". La expresión

"sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a sales que conservan la eficacia biológica y las propiedades de los compuestos de esta invención y que normalmente no son indeseables desde un punto de vista biológico o de otro tipo.

En muchos casos, los compuestos de la presente invención son capaces de formar sales ácidas y/o básicas en virtud de la presencia de grupos amino y/o carboxilo o grupos similares a ellos.

Se pueden formar sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables con ácidos inorgánicos y ácidos orgánicos.

Los ácidos inorgánicos a partir de los cuales se pueden obtener sales incluyen, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares. Los ácidos orgánicos a partir de los cuales se pueden obtener sales incluyen, por ejemplo, ácido acético, ácido propiónico, ácido glicólico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido malónico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido toluenosulfónico, ácido sulfosalicílico y similares.

Se pueden formar sales de adición de bases farmacéuticamente aceptables con bases inorgánicas y orgánicas. Las bases inorgánicas de las que se pueden obtener sales incluyen, por ejemplo, sales de amonio y metales de las columnas I a XII de la Tabla Periódica. En determinadas realizaciones, las sales se obtienen de sodio, potasio, amonio, calcio, magnesio, hierro, plata, cinc y cobre; sales particularmente adecuadas incluyen sales de amonio, potasio, sodio, calcio y magnesio. Las bases orgánicas a partir de las cuales pueden obtenerse sales incluyen, por ejemplo, aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas que incluyen aminas sustituidas de origen natural, aminas cíclicas, resinas de intercambio iónico básicas y similares. Algunas aminas orgánicas incluyen isopropilamina, benzatina, colinato, dietanolamina, dietilamina, lisina, meglumina, piperazina y trometamina.

En otro aspecto, la presente invención proporciona compuestos de la presente invención en forma de sal de acetato, ascorbato, adipato, aspartato, benzoato, besilato, bromuro/bromhidrato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, canforsulfonato, caprato, cloruro/clorhidrato, clorteofilonato, citrato, etanodisulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, glicolato, hipurato, yodhidrato/yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, laurilsulfato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metilsulfato, mucato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogenofosfato/dihidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, sebacato, estearato, succinato, sulfosalicilato, sulfato, tartrato, tosilato trifenatato, trifluoroacetato o xinafoato.

Farmacología y utilidad

En un aspecto, la descripción proporciona compuestos de Fórmula (I) o subfórmulas de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, que son útiles para terapia; particularmente, para tratar o prevenir una enfermedad o afección mediada por EZH2, PRC2, o una combinación de las mismas.

En otro aspecto, la descripción proporciona el uso de un compuesto de Fórmula (I) o subfórmulas del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para tratar una enfermedad o afección que se beneficia o es tratable mediante la inhibición de EZH2, PRC2, o una combinación de las mismas; y para la fabricación de un medicamento para tratar una enfermedad o afección que se puede tratar mediante la inhibición de EZH2, PRC2, o una combinación de las mismas.

Ejemplos de enfermedades o afecciones mediadas por EZH2, PRC2 o EZH2/PRC2, o que se benefician o son tratables mediante la inhibición de EZH2, PRC2 o EZH2/PRC2, incluyen, pero no se limitan a, linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), linfoma folicular, leucemia, mieloma múltiple, cáncer gástrico, tumor rabdoide maligno, carcinoma hepatocelular, cáncer de próstata, carcinoma de mama, cánceres de conductos biliares y de vesícula biliar, carcinoma de vejiga, neuroblastoma, glioma, glioblastoma y astrocitoma, cáncer de cuello uterino, cáncer de colon, melanoma, cáncer de endometrio, cáncer de esófago, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de pulmón, carcinoma nasofaríngeo, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, carcinoma de células renales, cáncer de recto, cánceres de tiroides, tumores de paratiroides, tumores uterinos, rabdomiosarcoma, sarcoma de Kaposi, sarcoma sinovial, osteosarcoma y sarcoma de Ewing.

Composiciones farmacéuticas, dosificación y administración

En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un portador farmacéuticamente aceptable.

En una realización adicional, la composición comprende al menos dos vehículos farmacéuticamente aceptables, tales como los descritos aquí. La composición farmacéutica se puede formular para vías de administración particulares tales como administración oral, administración parenteral (por ejemplo, mediante inyección, infusión, administración transdérmica o tópica), y administración rectal. La administración tópica también puede referirse a la aplicación por inhalación o intranasal. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden preparar en forma sólida (que incluye, pero sin limitación, cápsulas, comprimidos, píldoras, gránulos, polvos o supositorios) o en forma líquida (que incluye, pero sin limitación, soluciones, suspensiones o emulsiones). Los comprimidos se pueden recubrir con películas o con un recubrimiento entérico de acuerdo con métodos conocidos en la técnica. Normalmente, las composiciones farmacéuticas son comprimidos o cápsulas de gelatina que comprenden el principio activo junto con uno o más de:

a) diluyentes,p. e j,lactosa, dextrosa, sacarosa, manitol, sorbitol, celulosa y/o glicina;

b) lubricantes,p. ej.,sílice, talco, ácido esteárico, su sal de magnesio o calcio y/o polietilenglicol; para comprimidos también

c) aglutinantes,p. ej.,silicato de magnesio y aluminio, pasta de almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio y/o polivinilpirrolidona; si se desea

d) desintegrantes,p. ej.,almidones, agar, ácido algínico o su sal de sodio, o mezclas efervescentes; y

e) absorbentes, colorantes, aromas y edulcorantes.

En otro aspecto, los compuestos de la presente invención se combinan con otros agentes terapéuticos, tales como otros agentes contra el cáncer, agentes antialérgicos, agentes antinauseas (o antieméticos), analgésicos, agentes citoprotectores, inmunomoduladores, y combinaciones de los mismos.

En una realización, el otro agente terapéutico es un agente contra el cáncer o agente quimioterapéutico. Los agentes quimioterápicos generales considerados para su uso en terapias combinadas incluyen anastrozol (Arimidex®), bicalutamida (Casodex®), sulfato de bleomicina (Blenoxane®), busulfán (Myleran®), busulfán para inyección (Busulfex®), capecitabina (Xeloda®), W4-pentoxicarbonil-5-desoxi-5-fluorocitidina, carboplatino (Paraplatin®), carmustina (BiCNU®), clorambucilo (Leukeran®), cisplatino (Platinol®), cladribina (Leustatin®), ciclofosfamida (Cytoxan® o Neosar®), citarabina, arabinósido de citosina (Cytosar-U®), citarabina en liposomas para inyección (DepoCyt®), dacarbazina (DTIC-Dome®), dactinomicina (Actinomicina D, Cosmegan), clorhidrato de daunorrubicina (Cerubidine®), citrato de daunorrubicina en liposomas para inyección (DaunoXome®), dexametasona, docetaxel (Taxotere®), clorhidrato de doxorrubicina (Adriamycin®, Rubex®), etopósido (Vepesid®), fosfato de fludarabina (Fludara®), 5-fluorouracilo (Adrucil®, Efudex®), flutamida (Eulexin®), tezacitibina, Gemcitabina (difluorodesoxicitidina), hidroxiurea (Hydrea®), Idarrubicina (Idamycin®), ifosfamida (IFEX®), irinotecán (Camptosar®), L-asparaginasa (ELSPAR®), leucovorina de calcio, melfalán (Alkeran®), 6-mercaptopurina (Purinethol®), metotrexato (Folex®), mitoxantrona (Novantrone®), milotarg, paclitaxel (Taxol®), nab-paclitaxel (Abraxane®), phoenix (Ytrio90/MX-DTPA), pentostatina, polifeprosán 20 con implante de carmustina (Gliadel®), citrato de tamoxifeno (Nolvadex®), tenipósido (Vumon®), 6-tioguanina, tiotepa, tirapazamina (Tirazone®), clorhidrato de topotecán para inyección (Hycamptin®), vinblastina (Velban®), vincristina (Oncovin®) y vinorelbina (Navelbine®).

Los agentes contra el cáncer de particular interés para combinaciones con los compuestos de la invención incluyen:

Inhibidores decinasas dependientes de ciclina (CDK):(Chen, S. et al., Nat Cell Biol., 12(11):1108-14 (2010); Zeng, X. et al., Cell Cicle, 10(4):579-83 (2011)) Aloisina A; Alvocidib (también conocido como flavopiridol o HMR-1275, 2-(2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-[(3S,4R)-3-hidroxi-1-metil-4-piperidinil]-4-cromenona, y descrita en la patente US núm.

5.621.002); Crizotinib (PF-02341066, CAS 877399-52-5); 2-(2-Clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-[(2R,3S)-2-(hidroximetil)-1-metil-3-pirrolidinil]-4H-1-benzopiran-4-ona, hidrocloruro (P276-00, CAS 920113-03-7); 1-Metil-5-[[2-[5-(trifluorometil)-1 H-imidazol-2-il]-4-piridinil]oxi]-W-[4-(trifluorometil)fenil]-1 H-bencimidazol-2-amina (RAF265, CAS 927880-90-8); Indisulam (E7070); Roscovitina (CYC202); 6-Acetil-8-ciclopentil-5-metil-2-(5-piperazin-1-il-piridin-2-ilamino)-8H-pirido[2,3-d]pirimidin-7-ona, hidrocloruro (PD0332991); Dinaciclib (SCH727965); N-[5-[[(5-terc-Butiloxazol-2-il)metil]tio]tiazol-2-il]piperidin-4-carboxamida (B 387032, CAS 345627-80-7); Ácido 4-[[9-cloro-7-(2,6-difluorofenil)-5H-pirimido[5,4-d][2]benzazepin-2-il]amino]-benzoico (MLN8054, CAS 869363-13-3); 5-[3-(4,6-Difluoro-1H-bencimidazol-2-il)-1H-indazol-5-il]-N-etil-4-metil-3-piridinmetanamina (AG-024322, CAS 837364-57-5); N-(Piperidin-4-il)amida del ácido 4-(2,6-diclorobenzoilamino)-1H-pirazol-3-carboxílico (AT7519, CAS 844442-38-2); 4-[2-Metil-1-(1-metiletil)-1H-imidazol-5-il]-W-[4-(metilsulfonil)fenil]-2-pirimidinamina (Az D5438,CAS 602306-29-6); Palbociclib (PD-0332991); y (2R,3R)-3-[[2-[[3-[[S(R)]-S-ciclopropilsulfonimidoil]-fenil]amino]-5-(trifluorometil)-4-pirimidinil]oxi]-2-butanol (BaY 10000394).

Inhibidores de cinasas del punto de control (CHK):(Wu, Z. et al., Cell Death Differ, 18(11 ):1771 -9 (2011)) 7-hidroxistaurosporina (UCN-01); 6-Bromo-3-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-5-(3R)-3-piperidinil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (SCH900776, CAS 891494-63-6); N-[(S)-Piperidin-3-il]amida del ácido 5-(3-fluorofenil)-3-ureidotiofen-2-carboxílico (AZD7762, CAS 860352-01-8); 4-[((3S)-1-Azabiciclo[2.2.2]oct-3-il)amino]-3-(1H-bencimidazol-2-il)-6-cloroquinolin-2(1H)-ona (CHIR 124, CAS 405168-58-3); 7-Aminodactinomicina (7-AAD), Isogranulatimida, desbromohimenialdisina; N-[5-Bromo-4-metil-2-[(2S)-2-morfolinilmetoxi]-fenil]-N'-(5-metil-2-pirazinil)urea (LY2603618, CAS 911222-45-2); Sulforafano (CAS 4478-93-7, Isotiocianato de 4-metilsulfinilbutilo); 9,10,11,12-Tetrahidro-9,12-epoxi-1H-diindolo[1,2,3-/g|:3',2',1'-k/]pirrolo[3,4-/][1,6]benzodiazocina-1,3(2H)-diona (SB-218078, CAS 135897-06-2); y TAT-S216A (YGRKKRRQRRRLYRSPAMPENL), y CBP501 ((d-Bpa)sws(d-Phe-F5)(d-Cha)rrrqrr); y (aR)-a-amino-N-[5,6-dihidro-2-(1 -metil-1 H-pirazol-4-il)-6-oxo-1 H-pirrolo[4,3,2-efJ[2,3]benzodiazepin-8-il]-ciclohexanoacetamida (PF-0477736).

Inhibidores de la proteína cinasa B(PKB)o de AKT:(Rojanasakul, Y., Cell Cycle, 12(2):202-3 (2013); Chen B. et al., Cell Cycle, 12(1 ):112-21 (2013)) 8-[4-(1-Aminociclobutil)fenil]-9-fenil-1,2,4-triazolo[3,4-í][1,6]naftiridin-3(2H)-ona (MK-2206, CAS 1032349-93-1); Perifosina (KRX0401); 4-Dodecil-W-1,3,4-tiadiazol-2-il-bencenosulfonamida (PHT-427, CAS 1191951 -57-1); 4-[2-(4-Amino-1,2,5-oxadiazol-3-il)-1 -etil-7-[(3S)-3-piperidinilmetoxi]-1 H-imidazo[4,5-c]piridin-4-il]-2-metil-3-butin-2-ol (GSK690693, CAS 937174-76-0); 8-(1-Hidroxietil)-2-metoxi-3-[(4-metoxifenil)metoxi]-6H-dibenzo[b,d]piran-6-ona (palomid 529, P529, o SG-00529); Tricirbina (6-Amino-4-metil-8-(p-D-ribofuranosil)-4H,8H-pirrolo[4,3,2-de]pirimido[4,5-c]piridazina); (aS)-a-[[[5-(3-Metil-1 H-indazol-5-il)-3-piridinil]oxi]metil]-bencenoetanamina (A674563, CAS 552325-73-2); 4-[(4-Clorofenil)metil]-1-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-4-piperidinamina (CCT128930, CAS 885499-61-6); 4-(4-Clorofenil)-4-[4-(1H pirazol-4-il)fenil]-piperidina (AT7867, CAS 857531-00-1); y Archexina (RX-0201, CAS 663232-27-7).

Inhibidores deC-RAF:(Chang, C. et al., Cancer Cell, 19(1 ):86-100 (2011)) Sorafenib (Nexavar®); 3-(Dimetilamino)-W-[3-[(4-hidroxibenzoil)amino]-4-metilfenil]-benzamida (ZM336372, CAS 208260-29-1); y 3-(1-ciano-1-metiletil)-A/-[3-[(3,4-dihidro-3-metil-4-oxo-6-quinazolinil)amino]-4-metilfenil]-benzamida (AZ628, CAS 1007871-84-2).

Inhibidores de la fosfoinositida 3-cinasa (PI3K):(Gonzalez, M. et al., Cancer Res., 71(6): 2360-2370 (2011)) 4-[2-(1 H-lndazol-4-il)-6-[[4-(metilsulfonil)piperazin-1-il]metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4-il]morfolina (también conocida como GDC 0941 y descrita en las Publicaciones PCT núms. WO 09/036082 y WO 09/055730); 2-Metil-2-[4-[3-metil-2-oxo-8-(quinolin-3-il)-2,3-dihidroimidazo[4,5-c]quinolin-1-il]fenil]propionitrilo (descrito en la Publicación PCT núm. WO 06/122806, y también conocido como dactolisib); 4-(trifluorometil)-5-(2,6-dimorfolinopirimidin-4-il)piridin-2-amina (descrita en la Publicación PCT núm. WO2007/084786, y también conocida como buparlisib); Tozasertib (VX680 o MK-0457, CAS 639089-54-6); (5Z)-5-[[4-(4-Piridinil)-6-quinolinil]metilen]-2,4-tiazolidindiona (GSK1059615, CAS 958852-01-2); (1E,4S,4aR,5R,6aS,9aR)-5-(Acetiloxi)-1-[(di-2-propenilamino)metilen]-4,4a,5,6,6a,8,9,9a-octahidro-11-hidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-ciclopenta[5,6]nafto[1,2-c]piran-2,7,10(1H)-triona (PX866, c AS 502632-66 -8); 8-Fenil-2-(morfolin-4-il)-cromen-4-ona (LY294002, CAS 154447-36-6); 2-Amino-8-etil-4-metil-6-(1H-pirazol-5-il)pirido[2,3-d]pirimidin-7(8H)-ona (Sa R 245409 o XL 765); 1,3-Dihidro-8-(6-metoxi-3-piridinil)-3-metil-1-[4-(1-piperazinil)-3-(trifluorometil)fenil]-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona, (2Z)-2-butenodioato (1:1) (BGT 226); 5-Fluoro-3-fenil-2-[(1S)-1-(9H-purin-6-ilamino)etil]-4(3H)-quinazolinona (CAL101); 2-Amino-N-[3-[N-[3-[(2-cloro-5-metoxifenil)amino]quinoxalin-2-il]sulfamoil]fenil]-2-metilpropanamida (SAR 245408 o XL 147); y 2-Amida 1-({4-metil-5-[2-(2,2,2-trifluoro-1,1-dimetil-etil)-piridin-4-il]-tiazol-2-il}-amida del ácido (S)-pirrolidin-1,2-dicarboxílico) (BYL719).

Inhibidores de BCL-2:(Béguelin, W. et al., Cáncer Cell, 23(5):677-92(2013)) 4-[4-[[2-(4-Clorofenil)-5,5-dimetil-1-ciclohexen-1 -il]metil]-1 -piperazinil]-N-[[4-[[(1 R)-3-(4-morfolinil)-1 -[(feniltio)metil]propil]amino]-3-[(trifluorometil)sulfonil]fenil]sulfonií]benzamida (también conocida como ABT-263 y descrita en la Publicación PCT núm. WO 09/155386); Tetrocarcina A; Antimicina; Gosipol ((-)BL-193); Obatoclax; 2-Amino-6-ciclopentil-4-(1-ciano-2-etoxi-2-oxoetil)-4Hcromona-3-carboxilato de etilo (HA14 - 1); Oblimersen (G3139, Genasense®); Péptido Bak BH3; Ácido (-)-gosipol acético (AT-101); 4-[4-[(4'-Cloro[1, 1 '-bifenil]-2-il)metil]-1 -piperazinil]-W-[[4-[[(1 R)-3-(dimetilamino)-1 -[(feniltio)metil]propil]amino]-3-nitrofenil]sulfonil]-benzamida (a Bt-737, c As 852808-04-9); y Navitoclax (ABT-263, CAS 923564-51-6).

Inhibidores de la proteína cinasa activada por mitógenos (MEK):(Chang, CJ et al., Cancer Cell, 19(1 ):86-100 (2011)) XL-518 (también conocido como GDC-0973, Cas No. 1029872-29-4, disponible en ACC Corp.); Selumetinib (5-[(4-bromo-2-clorofenil)amino]-4-fluoro-N-(2-hidroxietoxi)-1 -metil-1 H-bencimidazol-6-carboxamida, también conocido como AZD6244 o A<r>RY 142886, descrito en la Publicación PCT núm. WO2003077914); Benimetinib ((2-hidroxietiloxi)-amida del ácido 6-(4-bromo-2-fluorofenilamino)-7-fluoro-3-metil-3H-benzoimidazol-5-carboxílico, también conocido como MEK162, CAS 1073666-70-2, descrito en la Publicación PCT núm. WO2003077914); 2-[(2-cloro-4-yodofenil)amino]-N-(ciclopropilmetoxi)-3,4-difluoro-benzamida (también conocida como CI-1040 o PD184352, y descrita en la Publicación PCT núm. WO2000035436); N-[(2R)-2,3-Dihidroxipropoxi]-3,4-difluoro-2-[(2-fluoro-4-yodofenil)amino]-benzamida (también conocida como PD0325901 y descrita en la Publicación PCT núm. WO2002006213) ; 2,3-Bis[amino[(2-aminofenil)tio]metileno]-butanodinitrilo (también conocido como U0126 y descrito en la patente US núm. 2.779.780); N-[3,4-Difluoro-2-[(2-fluoro-4-yodofenil)amino]-6-metoxifenil]-1-[(2R)-2,3-dihidroxipropil]-ciclopropanosulfonamida (también conocida como RDEA119 o BAY869766 y descrita en la Publicación PCT núm. WO2007014011); (3S,4R,5Z,8S,9S,11E)-14-(Etilamino)-8,9,16-trihidroxi-3,4-dimetil-3,4,9,19-tetrahidro-1H-2-benzoxaciclotetradecin-1,7(8H)-diona] (también conocida como E6201 y descrita en la Publicación PCT núm. WO2003076424); 2'-Amino-3'-metoxiflavona (también conocida como PD98059 disponible en Biaffin GmbH & Co., KG, Alemania); Vemurafenib (PLX-4032, CAS 918504-65-1); (R)-3-(2,3-Dihidroxipropil)-6-fluoro-5-(2-fluoro-4-yodofenilamino)-8-metilpirido[2,3-d]pirimidina-4,7(3H,8H)-diona (Ta K-733, Ca s 1035555-63-5); Pimasertib (AS-703026, CAS 1204531-26-9); dimetilsulfóxido de trametinib (GSK-1120212, CAS 1204531-25-80); 2-(2-Fluoro-4-yodofenilamino)-N-(2-hidroxietoxi)-1,5-dimetil-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-carboxamida (AZD 8330); y 3,4-Difluoro-2-[(2-fluoro-4-yodofenil)amino]-N-(2-hidroxietoxi)-5-[(3-oxo-[1,2]oxazinan-2-il)metil]benzamida (CH 4987655 o Ro 4987655).

Inhibidores de la aromatasa:(Pathiraja, T. et al., Sci. Transl. Med., 6(229):229 ra41 (2014)) Exemestano (Aromasin®); Letrozol (Femara®); y Anastrozol (Arimidex®).

Inhibidores de la topoisomerasa II:(Bai, J. et al., Cell Prolif., 47(3):211-8 (2014)) Etopósido (VP-16 y Fosfato de etopósido, Toposar®, VePesid® y Etopophos®); Tenipósido (VM-26, Vumon®); y Taflupósido.

Inhibidores de SRC:(Hebbard, L., Oncogene, 30(3):301-12 (2011)) Dasatinib (Sprycel®); Saracatinib (AZD0530, CAS 379231 -04-6); Bosutinib (SKI-606, CAS 380843-75-4); 5-[4-[2-(4-Morfolinil)etoxi]fenil]-W-(fenilmetil)-2-piridinacetamida (KX2-391, CAS 897016-82-9); y 4-(2-Cloro-5-metoxianilino)-6-metoxi-7-(1-metilpiperidin-4-ilmetoxi)quinazolina (AZM475271, CAS 476159-98-5).

Inhibidores de la histona desacetilasa (HDAC):(Yamaguchi, J. et al., Cancer Sci., 101(2):355-62 (2010)) Voninostat (Zolinza®); Romidepsina (Istodax®); Treicostatina A (TSA); Oxamflatina; Vorinostat (Zolinza®, ácido suberoilanilidohidroxámico); Piroxamida (ácido suberoil-3-aminopiridinamida hidroxámico); Trapoxina A (RF-1023A); Trapoxina B (RF-10238); Ciclo[(aS,2S)-a-amino-q-oxo-2-oxiranoctanoil-0-metil-D-tirosil-L-isoleucil-L-prolilo] (Cyl-1); Ciclo[(aS,2S)-a-amino-q-oxo-2-oxiranoctanoil-0-metil-D-tirosil-L-isoleucil-(2S)-2-piperidincarbonilo] (Cyl-2); [L-alanil-D-alanil-(2S)-r|-oxo-L-a-aminooxiranoctanoil-D-prolilo] cíclico (toxina HC); Ciclo[(aS,2S)-a-amino-r|-oxo-2-oxiranoctanoil-D-fenilalanil-L-leucil-(2S)-2-piperidinacarbonilo] (WF-3161); Clamidocina ((S)-(2-metilalanil-L-fenilalanil-D-prolil-q-oxo-L-a-aminooxiranoctanoilo) cíclico; Apicidina (Ciclo(8-oxo-L-2-aminodecanoil-1 -metoxi-L-triptofil-L-isoleucil-D-2-piperidincarbonilo); Romidepsina (Istodax®, FR-901228); 4-Fenilbutirato; Espirucostatina A; Milproína (Ácido valproico); Entinostat (-275, N-(2-Aminofenil)-4-[N-(piridin-3-il-metoxicarbonil)-amino-metil]-benzamida); y Depudecina (4,5:8,9-dianhidro-1,2,6,7,11-pentadesoxi-D-treo-D-ido-Undeca-1,6-dienitol).

Antibióticos antitumorales:(Bai, J. et al., Cell Prolif., 47(3):211-8 (2014)) Doxorrubicina (Adriamycin® y Rubex®); Bleomicina (Ienoxane®); Daunorubicin (hidrocloruro de dauorrubicina, daunomicina, e hidrocloruro de rubidomicina, Cerubidine®); Daunorrubicina liposomal (liposoma de citrato de daunorrubicina, DaunoXome®); Mitoxantrona (DHAD, Novantrone®); Epirrubicina (Ellence™); Idarrubicina (Idamycin®, Idamycin PFS®); Mitomicina C (Mutamycin®); Geldanamicina; Herbimicina; Ravidomicina; y Desacetilravidomicina.

Agentes desmetilantes:(Musch, T. et al., PLoS One, (5):e10726 (2010)) 5-Azacitidina (Vidaza®); y Decitabina (Dacogen®).

Antiestrógenos:(Bhan, A. et al., J Mol Biol., S0022-2836(14)00373-8 (2014)) Tamoxifeno (Novaldex®); Toremifeno (Fareston®); y Fulvestrant (Faslodex®).

Los inmunomoduladores de particular interés para combinaciones con los compuestos de la invención incluyen uno o más de: un activador de una molécula coestimuladora o un inhibidor de una molécula de punto de control inmunológico (por ejemplo, uno o más inhibidores de PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3 o CTLA4), o cualquier combinación de los mismos.

En ciertas realizaciones, el inmunomodulador es un activador de una molécula coestimuladora. En una realización, el agonista de la molécula coestimuladora se elige de un agonista (p. ej., un anticuerpo agonista o un fragmento de unión a antígeno del mismo, o una fusión soluble) de ligando OX40,<c>D2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 o CD83.

En determinadas realizaciones, el inmunomodulador es un inhibidor de una molécula de punto de control inmunológico. En una realización, el inmunomodulador es un inhibidor de PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA4, TIM3, LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 y/o TGFR beta. En una realización, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunológico inhibe PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3 o CTLA4, o cualquier combinación de los mismos. El término "inhibición" o "inhibidor" incluye una reducción en un cierto parámetro, por ejemplo una actividad, de una molécula determinada, por ejemplo un inhibidor de punto de control inmunológico. Por ejemplo, en este término se incluye la inhibición de una actividad, por ejemplo una actividad de PD-1 o PD-L1, de al menos 5 %, 10 %, 20 %, 30 %, 40 % o más. Por lo tanto, no es necesario que la inhibición sea de un 100 %.

En otro aspecto, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden al menos un compuesto de la presente invención (por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) o una subfórmula del mismo) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable adecuado para administración a un sujeto humano o animal, ya sea solo o junto con otros agentes contra el cáncer.

En terapias combinadas, las composiciones se formularán juntas como una terapia de combinación, o como composiciones separadas. El compuesto de la invención y el otro agente terapéutico se pueden fabricar y/o formular por el mismo o diferentes fabricantes. La estructura de los agentes terapéuticos identificados por números de código, nombres genéricos o comerciales puede tomarse de la edición actual del compendio estándar "The Merck Index", o de bases de datos, por ejemplo Patents International (por ejemplo, IMS World Publications). Los otros agentes terapéuticos, que pueden usarse en combinación con un compuesto de la presente invención, pueden prepararse y administrarse como se describe en la técnica, tal como en los documentos citados anteriormente.

Opcionalmente, la composición farmacéutica puede comprender un vehículo farmacéuticamente aceptable, como se describe anteriormente. La composición o combinación farmacéutica de la presente invención puede estar, por ejemplo, en una dosis unitaria de alrededor de 0,5 mg a 1000 mg de ingrediente o ingredientes activos para un sujeto de alrededor de 50-70 kg.

En otro aspecto, la presente descripción proporciona métodos para tratar sujetos humanos o animales que padecen una enfermedad proliferativa celular, tal como cáncer, que comprenden administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, ya sea solo o en combinación con otros agentes contra el cáncer. En la terapia combinada, el compuesto de la presente invención y otro(s) agente(s) anticanceroso(s) se pueden administrar de manera simultánea, a la vez o de manera secuencial sin límites de tiempo específicos, donde una administración de este tipo proporciona niveles terapéuticamente eficaces de los dos compuestos en el cuerpo del paciente. Además, el compuesto de la invención y la otra sustancia terapéutica se pueden juntar en una terapia combinada: (i) antes del envío del producto combinado a los médicos (por ejemplo, en el caso de un kit que comprende el compuesto de la invención y el otro agente terapéutico); (ii) por el propio médico (o bajo la dirección del médico) poco antes de la administración; (Ni) por el propio paciente, por ejemplo durante la administración secuencial del compuesto de la invención y el otro agente terapéutico.

En una realización, el compuesto de la presente invención y el o los otros agentes contra el cáncer generalmente se administran secuencialmente en cualquier orden mediante infusión o por vía oral. El régimen de dosificación puede variar según la etapa de la enfermedad, la condición física del paciente, los perfiles de seguridad de los fármacos individuales, y la tolerancia de los fármacos individuales, así como otros criterios bien conocidos por el médico tratante y el profesional o profesionales médicos que administran la combinación. El compuesto de la presente invención y otro(s) agente(s) anticanceroso(s) se pueden administrar con una separación entre ellos de unos minutos, horas, días o incluso semanas dependiendo del ciclo particular que se esté utilizando para el tratamiento. Además, el ciclo podría incluir la administración de un fármaco más a menudo que el otro durante el ciclo de tratamiento y con dosis diferentes por administración del fármaco.

En aún otro aspecto, los compuestos de la presente invención se pueden combinar con otros agentes contra el cáncer, agentes antialérgicos, agentes antinauseas (o antieméticos), analgésicos, agentes citoprotectores, y combinaciones de los mismos.

En algunos casos, los pacientes pueden experimentar reacciones alérgicas a los compuestos de la presente invención y/u otro u otros agentes contra el cáncer durante o después de la administración. Por lo tanto, se pueden administrar agentes antialérgicos para minimizar el riesgo de una reacción alérgica. Los agentes antialérgicos adecuados incluyen corticosteroides, tales como dexametasona (por ejemplo, DECADRON®), beclometasona (por ejemplo, BECLOVENT®), hidrocortisona (también conocida como cortisona, succinato sódico de hidrocortisona, fosfato sódico de hidrocortisona; por ejemplo, ALA-CORT®, fosfato de hidrocortisona , Solu-CORTEFO, HYDROc Or T Acetate® y LANACORT®), prednisolona (por ejemplo, DELTA-Cortel®, ORAPRED®, PEDIAPRED® y PRELONE®), prednisona (por ejemplo, DE<l>TA<s>ONE®, LI<q>U<i>D REDO, METICORTEN® y ORASONE®), metilprednisolona (también conocida como 6-metilprednisolona, acetato de metilprednisolona, succinato sódico de metilprednisolona; por ejemplo, DURALONE®, MEDrAlONE®, MEDROL®, M-PRe Dn ISOLO y SOLU-MEDROL®); antihistamíinas, tales como difenhidramina (por ejemplo, BENADRYL®), hidroxizina, y ciproheptadina; y broncodilatadores, tales como los agonistas de los receptores beta-adrenérgicos, albuterol (por ejemplo, PROVENTlLO) y terbutalina (BRETHINE®).

En otros casos, los pacientes pueden experimentar náuseas durante y después de la administración del compuesto de la presente invención y/u otro u otros agentes contra el cáncer. Por lo tanto, se pueden administrar antieméticos para prevenir las náuseas (parte superior del estómago) y los vómitos. Los antieméticos adecuados incluyen aprepitant (EMEND®), ondansetrón (ZOf Ra N®), granisetrón HCl (KYTRIL®), lorazepam (ATIVAN®. dexametasona (DECADRON®), proclorperazina (COMpAz INE®), casopitant (r Ez ONIC® y Zunrisa®), y combinaciones de los mismos.

En otros casos, se prescriben medicamentos para aliviar el dolor experimentado durante el período de tratamiento, para que el paciente se sienta más cómodo. A menudo se usan analgésicos comunes de venta libre, como TYLENOL®. También son útiles fármacos analgésicos opioides tales como hidrocodona/paracetamol o hidrocodona/acetaminofeno (por ejemplo, VICODIN®), morfina (por ejemplo, ASTRAMORPH® o AVINZA®), oxicodona (por ejemplo, OXYCONTIN® o Pe Rc Oc ET®), hidrocloruro de oximorfona (OPANA®) y fentanilo (por ejemplo, Du Ra g Es iCo ), para el dolor moderado o intenso.

Además, se pueden usar agentes citoprotectores (tales como neuroprotectores, depuradores de radicales libres, cardioprotectores, neutralizadores de extravasación de antraciclina, nutrientes y similares) como terapia adjunta para proteger las células normales frente a la toxicidad del tratamiento y limitar la toxicidad a los órganos. Los agentes citoprotectores adecuados incluyen amifostina (ETHYOL®), glutamina, dimesna (TAVOCEPT®), mesna (MESNEX®), dexrazoxano (ZINECARD® o TOTECT®), xaliproden (XAPRILAO) y leucovorina (también conocida como leucovorina cálcica, factor citrovorum y ácido folínico).

En aún otro aspecto, un compuesto de la presente invención se puede usar en combinación con procesos terapéuticos conocidos, por ejemplo con la administración de hormonas o en radioterapia. En ciertos casos, un compuesto de la presente invención se puede usar como radiosensibilizador, especialmente para el tratamiento de tumores que presentan poca sensibilidad a la radioterapia.

En aún otro aspecto, la presente descripción proporciona kits que comprenden uno o más compuestos de la presente invención y otro agente terapéutico como se describe anteriormente. Los kits representativos incluyen (a) un compuesto de Fórmula (I) o subfórmulas del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y (b) al menos otro agente terapéutico, por ejemplo como se indicó anteriormente; por lo que tal kit puede comprender además un prospecto u otro etiquetado que incluya instrucciones de administración. Los kits de la descripción se pueden usar para administrar diferentes formas de dosificación, por ejemplo oral y parenteral; para administrar dos o más composiciones farmacéuticas separadas a diferentes intervalos de dosificación; o para valorar las composiciones separadas entre sí; en los que al menos una composición farmacéutica comprende un compuesto de Fórmula (I) o subfórmulas del mismo.

Procedimientos para obtener compuestos de la invención

Los compuestos de la invención se pueden preparar usando los métodos descritos a continuación, o mediante variaciones de los mismos, como apreciará un experto en la técnica de la síntesis orgánica. Los compuestos de Fórmula (I) que poseen un centro quiral se pueden obtener sustancialmente ópticamente puros usando material de partida sustancialmente ópticamente puro o mediante cromatografía de separación, recristalización u otras técnicas de separación bien conocidas en la técnica.

Como se representa en el Esquema 1, los compuestos de Fórmula (I) se pueden preparar a partir de reacciones de desplazamiento de la amina correspondiente (INT-1) con pirimidinas o piridinas 2-halosustituidas apropiadamente sustituidas.

Como se representa en el Esquema 2, la reacción de la amina INT-1 con los haluros de piridina o pirimidina apropiados da los correspondientes halointermedios INT-2. El acoplamiento posterior del halointermedio INT-2 con los bromuros apropiados da el intermedio de éster INT-3, que puede hidrolizarse en condiciones ácidas o básicas al intermedio ácido INT-4. Los compuestos de Fórmula (I) se pueden preparar acoplando el intermedio ácido INT-4 con aminas apropiadamente sustituidas.

Formula (II)

Esquema 3

Como se muestra en el Esquema 3, el acoplamiento de Negishi de 2-cloro-5-yodo pirimidina/piridinas con el bromoacetato correspondiente, y la alquilación posterior, dan el intermedio INT-5. La hidrólisis de INT-5 y el acoplamiento con la amina correspondiente dan el correspondiente intermedio de cloropirimidina o piridinamida INT-6. Los compuestos de Fórmula (II) se pueden preparar a partir de reacciones de desplazamiento de la amina correspondiente (INT-1) con el intermedio de cloropirimidina o piridinamida INT-6 apropiadamente sustituido.

EJEMPLOS

Las temperaturas se indican en grados centígrados. La estructura de los productos finales, intermedios y materiales de partida se confirma mediante métodos analíticos estándar, por ejemplo microanálisis y características espectroscópicas, por ejemplo MS, IR, RMN. Las abreviaturas usadas son las convencionales en la técnica.

Todos los materiales de partida, componentes básicos, reactivos, ácidos, bases, agentes deshidratantes, disolventes y catalizadores utilizados para sintetizar los compuestos de la presente invención están disponibles en el mercado o se pueden producir mediante métodos de síntesis orgánica conocidos por el experto en la técnica (Houben-Weyl 4.a Ed. 1952, Methods of Organic Synthesis, Thieme, Volumen 21). A menos que se especifique lo contrario, los materiales de partida generalmente están disponibles de fuentes comerciales.

Los Ejemplos del presente documento simplemente ilustran la invención y no limitan el alcance de la invención reivindicada de otro modo. Además, los compuestos de la presente invención se pueden producir mediante métodos de síntesis orgánica conocidos por un experto en la técnica como se muestra en los siguientes ejemplos. Cuando se desee, se usan grupos protectores convencionales para proteger grupos funcionales reactivos de acuerdo con la práctica convencional, por ejemplo, véase T.W. Greene y PG.M. Wuts en "Protecting Groups in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, 1991.

Abreviaturas

Las abreviaturas, como se usan aquí, se definen de la siguiente manera: "1x" para una vez, "2x" para dos veces, "3x" para tres veces, "°C" para grados centígrados, "ac." para acuoso, "FCC" para cromatografía en columna ultrarrápida, "equiv." para equivalente o equivalentes, "g" para gramo o gramos, "mg" para miligramo o miligramos, "l" para litro o litros, "ml" para mililitro o mililitros, "pl" para microlitro o microlitros, "N" para normal, "M" para molar, "nM" para nanomolar, "mol" para mol o moles, "mmol" para milimol o milimoles, "min" para minuto o minutos, "h" para hora u horas, "TA" para temperatura ambiente, "TN" para durante una noche, "atm" para atmósfera, "psi" para libras por pulgada al cuadrado, "conc." para concentrado, "sat." para saturado, "PM" para peso molecular, "mo" o "ponda" para microondas, "p.f." para punto de fusión, "p" para peso, "MS" o "Espec. de masas" para espectrometría de masas, "ESI" para espectroscopía de masas con ionización por electronebulización, "HR" para alta resolución, "HRMS" para espectrometría de masas de alta resolución, "LCMS" o "LC-MS" para cromatografía líquida-espectrometría de masas, "HPLC" para cromatografía líquida de alto rendimiento, "RP HPLC" para HPLC de fase inversa, "TLC" o "tlc" para cromatografía en capa fina, "RMN" para espectroscopía por resonancia magnética nuclear, "nOe" para espectroscopía con efecto Overhauser nuclear, "1H" para protón, "5 " para delta, "s" para singlete, "d" para doblete, "t" para triplete, "c" para cuadruplete, "m" para multiplete, "a" para ancho, "Hz" para hercio, "e.e." para "exceso enantiomérico" y "a", "P", "R", "r", "S", "s", "E" y "Z" son denominaciones esteroquímicas con las que está familiarizado el experto en la técnica.

Las siguientes abreviaturas utilizadas en el presente documento a continuación tienen los significados correspondientes:

El análisis de resonancia magnética nuclear (RMN) se realizó usando un RMN Bruker de 400 MHz. La referencia espectral fue TMS o el desplazamiento químico conocido del disolvente.

Intermedios

Intermedio 1._(((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)carbamato de terc-butilo

A una disolución de 2,8-dicloro-7-metilquinolina (CAS 1690692-63-7, 1,95 g, 9,22 mmol) y (((1R,4R)-4-aminociclohexil)metil)carbamato de terc-butilo (CAS 192323- 07-2, 2,07 g, 9,68 mmol) se añadió K<2>CO<3>(3,82 g, 27,7 mmol) en NMP (20 ml). La mezcla se agitó a 150°C durante 5 h, y se enfrió hasta temperatura ambiente. Se añadió agua (30 ml) a la mezcla, y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se filtraron, y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice eluyendo con éter de petróleo/EtOAc del 15 % al 25 % para proporcionar (((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)carbamato de terc-butilo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 0,97 - 1,09 (m, 2 H), 1,14 - 1,22 (m, 2 H), 1,39 (s, 9 H), 1,45 (br. s., 1 H), 1,75 (d, J=11,80 Hz, 2 H), 2,13 (d, J=11,04 Hz, 2 H), 2,46 (s, 3 H), 2,82 (t, J=6,02 Hz, 2 H), 3,83 - 3,96 (m, 1 H), 6,72 (d, J=8,78 Hz, 1 H), 6,87 (br. s., 1 H), 7,08 (d, J=8,03 Hz, 2 H), 7,46 (d, J=8,28 Hz, 1 H), 7,81 (d, J=8,78 Hz, 1 H). LCMS: 404,2

Intermedio 2. (1 R,4R)-N1 -|8-doro-7-metMqumolm-2-M)cidohexano-1,4-diamina

A una disolución de (((1R,4R)-4-((8-doro-7-metilquinolin-2-il)amino)cidohexil)metil)carbamato de terc-butilo (1,25 g, 3,22 mmol) en DCM (15 ml ) se añadió TFA (5 ml). La mezcla se agitó a 30°C durante 2 h. El disolvente se evaporó a presión reducida, y el residuo se disolvió en DcM/i-PrOH (3:1,50 ml), el pH se ajustó hasta 9 con NaHCO3 ac. La fase acuosa se extrajo con DCM/i-PrOH (3:1, 3 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se filtraron, y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice eluyendo con éter de petróleo/EtOAc del 35 % al 55 % para proporcionar (1R,4R)-N1-(8-cloro-7-metilquinolin-2-il)ciclohexano-1,4-diamina.

Intermedio 3. 8-doro-N-||1R,4R)-4-|||5-yodopirimidin-2-il)amino)metil)cidohexil)-7-metilquinolin-2-amina

A una disolución de (1R,4R)-N1-(8-cloro-7-metilquinolin-2-il)ciclohexano-1,4-diamina (805 mg, 2,78 mmol) en EtOH (10 ml) se añadió 2-cloro-5-yodopirimidina (CAS: 32779-38-7, 702 mg, 2,92 mmol) y DlPEA (1,08 g, 8,34 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 80°C durante la noche. El disolvente se evaporó, y el residuo se disolvió en DCM (50 ml) y agua (30 ml). La fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 30 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se filtraron, y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice eluyendo con éter de petróleo/EtOAc del 15 % al 25 % para proporcionar 8-cloro-N-((1R,4R)-4-(((5-yodopirimidin-2-il)amino)metil)ciclohexil)-7-metilquinolin-2-amina.

Intermedio 4. 2-|2-|||||1R,4R)-4-||8-doro-7-metMqumolm-2-M)ammo)cidohexM)metM)ammo)pirimidm-5-il)acetato de terc-butilo

Se añadió TMSCI (0,03 ml, 0,29 mmol) a una suspensión de polvo de zinc (11,3 g, 173 mmol) en THF seco (270 ml). Después de agitar a temperatura ambiente durante 20 min, se añadió una disolución de 2-bromoacetato de terc-butilo (CAS: 5292-43-3, 16,8 ml, 115 mmol). La mezcla se agitó a 60°C durante 1 h, y después se enfrió hasta temperatura ambiente. La suspensión se añadió a una mezcla de 8-cloro-N-((1R,4R)-4-(((5-yodopirimidin-2-il)amino)metil)ciclohexil)-7-metilquinolin-2-amina (2,93 g, 5,77 mmol), Pd<2>(dba<)3>(260 mg, 0,28 mmol) y X-Phos (266 mg, 0,56 mmol) a temperatura ambiente, y después se calentó a 60°C en atmósfera de N<2>durante la noche. La mezcla se inactivó con NH4Cl (100 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se filtraron, y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice eluyendo con éter de petróleo/EtOAc del 30 % al 80 % para proporcionar 2-(2-(((((1R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)acetato de terc-butilo.

Intermedio 5. 8-doro-N-||1R,4R)-4-|||5-yodopirimidin-2-il)amino)metil)cidohexil)-7-metilquinolin-2-amina

Una disolución de 2-(2-(((((1 R,4R)-4-((8-doro-7-metilquinolin-2-il)amino)cidohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)acetato de terc-butilo (4,20 g, 8,46 mmol) en DCM (20 ml) y TFA (20 ml) se dejó reposar a temperatura ambiente durante 1 h. El disolvente se evaporó a presión reducida, y el residuo se disolvió en DCM/iPrOH (3:1,50 ml) y se ajustó a un pH entre 5 y 6. La fase acuosa se extrajo con DCM/iPrOH (3:1, 3 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron, y se concentraron a presión reducida para proporcionar 8-cloro-N-((1R,4R)-4-(((5-yodopirimidin-2-il)amino)metil)ciclohexil)-7-metilquinolin-2-amina. RMN 1H (400 MHz, DMSO-CÍ6) 5 ppm 1,00 - 1,25 (m, 4 H), 1,50 - 1,65 (m, 1 H), 1,75-1,90 (m, 2 H), 2,10-2,20 (m, 2 H), 2,45 (s, 3 H), 3,10-3,20 (m, 2 H), 3,25-3,35 (m, 2 H), 3,9 (m, 1 H), 6,7 (d, 1 H), 7,05 (d, 2 H), 7,15 (m, 1 H), 7,45 (d, 1 H), 7,80 (d, 1 H), 8,15 (s, 2 H), 12,25.12,50 (br. S, 1H). MS: [M+H]+ = 440, 442

Ejemplos

Ejemplo 1. 2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metNqumolm-2-N)ammo)ciclohexM)metN)ammo)pmmidm-5-N)-N-(oxetan-3-il)acetamida

Una mezcla de 8-cloro-N-((1 R,4R)-4-(((5-yodopirimidin-2-il)amino)metil)ciclohexil)-7-metilquinolin-2-amina (Intermedio 5) (2,50 g, 5,68 mmol), oxetan-3-amina (CAS: 21635-88-1, 513 mg, 8,52 mmol), DMAP (693 mg, 5,68 mmol) y EDCI (2,17 g, 11,4 mmol) en DCM (40 ml) se agitó a 25°C durante 16 h. La mezcla se ajustó a pH 6. La fase acuosa se extrajo con DCM (3 veces 30 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaHCO3, se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se filtraron, y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo primero con éter de petróleo/EtOAc del 40 % al 100 % y después con disolvente A (NH<3>2 N en MeOH/MeOH/DCM 1:10:100) en DCM del 20 % al 40 % para proporcionar 2-(2-((((1R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)acetamida. RMN 1H (500 m Hz , DMSO-d6) 5 ppm 1,05 -1,25 (m, 4 H), 1,55 - 1,65 (m, 1 H), 1,80-1,85 (m, 2 H), 2,10-2,15 (m, 2 H), 2,45 (s, 3 H), 3,15 (t, 2 H), 3,25 (s, 2 H), 3,85-3,95 (br s, 1 H), 4,40 (t, 2 H), 4,70 (t, 2 H), 4,75,4,80 (m, 1 H), 6,75 (d, 1 H), 7,05 (d, 2 H), 7,15 (t, 1 H), 7,45 (d, 1H), 7,80 (d, 1H), 8,12 (s, 2 H), 8,72 (d, 1H), MS: [M+H]+ = 495, 497.

Los siguientes compuestos se pueden preparar siguiendo procedimientos análogos al Ejemplo 1, o mediante métodos descritos en los Esquemas 1-3, a partir de los intermedios correspondientes.

Ensayos

La utilidad de los compuestos de la invención se puede demostrar usando cualquiera de los siguientes procedimientos de prueba.

Ensayo de LC-MS de EZH2

Los compuestos representativos de la invención se diluyeron en serie y por separado 3 veces en DMSO para obtener doce concentraciones. A continuación, se transfirieron los compuestos de prueba en cada concentración (120 nL de cada uno) con Mosquito a placas ProxiPlate 384 plus de Perkin Elmer de 384 pocillos. Se añadieron disoluciones (6 pl) de complejo PRC2 de tipo salvaje (wtPRC2) 80 nM y SAM 60 pM en amortiguador de reacción (Tris 20 mM, pH 8,0, BSA al 0,1 %, Tritón al 0,01 %, DTT 0,5 mM) a los pocillos, que luego se incubaron entonces con el compuesto de prueba durante 20 min. Para iniciar cada reacción, se añadieron 6 pl de una disolución de 3 pM) del péptido sustrato H3K27me1 (histona H3[21 -44]-K27me1 -biotina) y 6 pM) de péptido regulador H3K27me3 (histona H3[21 -44]-K27me3) en amortiguador de reacción. Los componentes finales en la disolución de reacción incluyen complejo wtPRC240 nM, SAM 30 pM, péptidos H3K27me1 1,5 pM y H3K27me3 3 pM con concentraciones variables de los compuestos. Un control positivo consistió en la enzima a 40 nM, SAM 30 pM, H3K27me1 1,5 pM y H3K27me33 pM en ausencia del compuesto de prueba, y un control negativo consistió en SAM 30 pM, H3K27me1 1,5 pM y H3K27me3 3 pM únicamente. Cada reacción se incubó a temperatura ambiente durante 120 min, después se detuvo mediante adición de 3 pl por cada disolución de parada (TFA al 2,5 % con d4-SAH 320 nM). La mezcla de reacción se centrifugó (centrífuga 5810 de Eppendorf, Rotor A-4-62) durante 2 min a 2000 rpm y se leyó en un espectrómetro de masas con triple cuadrupolo API 4000 con nebulizador Turbulon (Applied Biosystem) acoplado con UFLC Prominence (Shimadzu). Los niveles de producción de SAH se normalizaron en función de los valores provenientes de los controles positivos y negativos para obtener el porcentaje de actividades enzimáticas. Los datos se ajustaron a una ecuación de respuesta a la dosis usando el programa Helios para obtener los valores de IC<50>del compuesto de prueba.

Ensayo ELISA (metilación de H3K27)

Los compuestos representativos de la invención se diluyeron en serie y por separado 3 veces en DO para obtener un total de ocho o doce concentraciones. A continuación, los compuestos se añadieron a células G401 cultivadas en una placa de 384 pocilios con una dilución 1:500 para obtener la concentración más elevada de 20 pM. Las células se cultivaron posteriormente durante 48 h antes del procedimiento ELISA.

Extracción de histonas: Las células, en una placa de 384 pocillos, se lavaron con PBS (tampón PBS 10 x (80 g de NaCl (Sigma, S3014), 2 g de KCl (Sigma, 60128), 14,4 g de Na<2>HPÜ<4>(Sigma, S5136), 2,4 g de KH<2>PO<4>(Sigma, P9791) hasta 1 L de agua, pH 7,4) y se sometieron a lisis con la adición de tampón de lisis (HCl 0,4 N; 45 D por pocillo). La placa se agitó suavemente a 4 °C durante 30 min. El lisado celular se neutralizó con tampón de neutralización (fosfato de sodio dibásico 0,5 M, pH 12,5, DTT 1 mM; 36 DL por pocilio). La placa se agitó para garantizar que los lisados se mezclaran bien antes del protocolo de ELISA.

Protocolo de ELISA: Los lisados celulares se transfirieron a los pocillos de una placa de 384 pocillos y el volumen final se ajustó a 50 pL por pocillo con PBS. La placa se selló, se centrifugó a 2000 rpm durante 2 min y se incubó a 4 °C durante aproximadamente 16 h. La placa se lavó con tampón TBST (TBS 1 x (TBS 10x: 24,2 g de Tris (Sigma, T6066), 80 g de NaCl (Sigma, S3014) hasta 1 L de agua y se ajusta el pH a 7,6 con HCl) con un 0,1 % de Tween-20). Se añadió tampón de bloqueo (TBST, 5 % de BSA; 50 DL por pocillo) y la placa se incubó durante 1 h a ta. El tampón de bloqueo se eliminó y se añadió el anticuerpo primario (30 pL por pocillo). Se realizaron las siguientes diluciones con tampón de bloqueo: para el anticuerpo anti-H3K27me3 (Cell Signaling Technology, n.° 9733), la dilución fue de 1:1000; para el anticuerpo anti-H3K27me2 (Cell Signaling Technology, n.° 9288), la dilución fue de 1:100; para el anticuerpo anti-H3 (Abcam, n.° de cat. 24834), la dilución fue de 1:1000. El anticuerpo primario se incubó en la placa a ta durante 1 h. Los pocillos se lavaron con TBST y se incubaron con un anticuerpo secundario durante 1 h a ta. Para los anticuerpos secundarios, se llevaron a cabo las siguientes diluciones con tampón de bloqueo: para el anticuerpo anti conejo (Jackson ImmunoResearch, n.° 111-035-003), la dilución fue de 1:2000; y para el anticuerpo anti-ratón (Cell signaling technology, n.° 7076), la dilución fue de 1:1000.

Después de 1 h de incubación a ta, los pocillos se lavaron con TBST. Se añadió sustrato ECL (Pierce, n.° 34080) en una cantidad de 30 pL por pocillo y las placas se centrifugaron a 2000 rpm durante 2 min. La señal se leyó utilizando un lector Envision de PerkinElmer. Las lecturas de metilación de H3K27 se normalizaron usando la señal de H3, y entonces se calculó el porcentaje de inhibición frente a las muestras tratadas con DO. Los datos se ajustaron a una curva de respuesta frente a la dosis usando el programa Helios para obtener los valores de IC<50>del compuesto de prueba.

Análisis de la proliferación celular

Se cultivaron células de linfoma de linfocitos B KARPAS422 utilizando condiciones de cultivo celular estándar en RPMI-1640 (Invitrogen, n.° de cat. 11875) complementado con un 15 % de FBS (Invitrogen, n.° de cat. 10099-141) en una incubadora humidificada a 37 °C, con un 5 % de CO<2>. Para evaluar el efecto de la inhibición de PRC2 sobre la proliferación celular, se sembraron células en crecimiento exponencial con una densidad de 1 x 10<5>células/mL en una placa de 12 pocillos (Corning, n.° de cat. CLS3513). Después de la siembra celular, se añadió un compuesto de la invención al medio celular (en concentraciones que oscilaban de 0 a 100 pM, series de dilución 3x). Se determinaron los números de células viables cada 3-4 días hasta 14 días utilizando Vi-CELL (Beckman Coulter). En los días de recuento de células, se repuso medio de crecimiento fresco y el compuesto y las células se dividieron para volver a una densidad de 1 x 10<5>células/mL. El número de células totales se expresa como células viables ajustadas según la división por mL. Las curvas de respuesta a la dosis y los valores de CI<50>se generaron utilizando Prism.

Los Ejemplos ilustrados que se describen a continuación se probaron en los ensayos de LC de EZH2 y/o de ELISA de EZH2 descritos anteriormente, y se encontró que tenían actividad inhibidora de EZH2.

La Tabla 3 a continuación enumera los valores de IC<50>en los ensayos de EZH2 (a) calificados por LC y/o (b) calificados por ELISA, medidos para los siguientes ejemplos.

Tabla 3

Claims (15)

1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto que tiene la estructura de Fórmula (I):

   o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en la que: Y es N o CRa; Ra, R1, R3, R5, R6, R7, R8 y R9 son independientemente H, halógeno o -alquilo C<1>-C<4>; R2 es CN, -alquilo C<1>-C<6>, -hidroxialquileno C<1>-C<4>, -cianoalquileno C<1>-C<4>o -alcoxi C<2>-C<4>sustituido con 1-2 hidroxilos; -(CR13R14)nC(=O)NR11R12, -(CR13R14)nC(=O)NR11R15; -(CR13R14)nC(=O)R15; -(CR2)nNR11C(=O)R15, -(CR2)nNR11(CR2)2C(=O)R15; -(CR2)nNR-C(=O)OR11,-(CR2)nNR-C(=O)O-(CR2)-R15; -NR-C(=O)(CR2)2C(=O)R15, -NR-C(=O)R11; -(CR2)nNR11R12, -(CR2)nNR11(CR2)nR15; -(CR2)nOR15, -(CR2)nR15;

   o un heteroarilo de 5 a 6 miembros que tiene 1 a 4 heteroátomos seleccionados independientemente de O, S y N; R4a, R4b, R4c y R4d son independientemente H o -alquilo C<1>-C<4>; R10 es H, halógeno, -alquilo C<1>-C<4>, -alcoxi C<1>-C<4>, -haloalcoxi C<1>-C<4>o -NH(alquilo C<1>-C<4>); R11 es H, -alquilo C<1>-C<4>, -hidroxialquileno C<1>-C<4>, -cianoalquileno C<1>-C<4>o -alquilo C<1>-C<4>sustituido con -alcoxi C<1>-C<4>; R12 es H o -alquilo C<1>-C<4>; R13 es H, halógeno, -CN, -OH, -alquilo C1-C4 o -hidroxialquileno C1-C4; R14 es H, halógeno o -alquilo C<1>-C<4>; R15 es

   -cicloalquilo C<3>-C<6>, o un heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros que tiene 1-2 heteroátomos seleccionados independientemente de O, S, S(=O)<2>, y N; en el que dicho -cicloalquilo C3-C6 o heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros de R15 no está sustituido o está sustituido con 1-2 sustituyentes seleccionados de -OH, -alquilo C<1>-C<4>, -hidroxialquileno C1-C4, -alcoxi C1-C4, -SO<2>(alquilo C1-C4) y -N(alquilo C1-C4)2; R16, si está presente, es un sustituyente seleccionado entre halógeno, -CN, -OH, -alquilo C<1>-C<4>e -hidroxialquileno C<1>-C4; cada R es independientemente H o -alquilo C<1>-C<4>; m es 0, 1 o 2; y cada n se selecciona independientemente de 0, 1 y 2.
2. 2. El compuesto de la reivindicación 1, o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en el que R2 es -(CH<2>)<1-2>C(=O)NR11R15 o -(CR13R14)-C(=O)NR11R15.
3. 3. El compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en el que R2 es
4. 4. El compuesto de la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es de Fórmula (II), o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

   en la que: Y es CH o N; R1, R3, R4a, R4b, R4c, R4d y R11 son independientemente H, halógeno o alquilo C<1>-C<4>; R5, R6, R7, R8, R9, y R10 son independientemente H, halógeno o alquilo C<1>-C<4>; R13 es H, halógeno, -CN, -OH, -alquilo C<1>-C<4>o -hidroxialquileno C<1>-C<4>; R14 es H, halógeno o alquilo C<1>-C<4>; y R5 es un heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros que tiene 1-2 heteroátomos seleccionados independientemente de O, S, y N; en el que R15 no está sustituido o está sustituido con 1-2 sustituyentes seleccionados de -OH, -alquilo C<1>-C<4>, -hidroxialquileno C<1>-C<4>, -alcoxi C<1>-C<4>, -SO<2>(alquilo C<1>-C<4>) y -N(alquilo C<1>-C<4>)<2>; opcionalmente en la que R15 es

   y opcionalmente m es 1 y R16 es -alquilo C<1>-C<4>.
5. 5. El compuesto de la reivindicación 1, en el que dicho compuesto se selecciona de: 2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-metil-N-(oxetan-3-il)acetamida; 2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2,2-difluoro-N-(oxetan-3-il)acetamida; 2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-hidroxi-N-(oxetan-3-il)propanamida; 2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-ciano-N-(oxetan-3-il)acetamida; 2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-3-hidroxi-N-(oxetan-3-il)propanamida; 2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-3-hidroxi-N-(oxetan-3-il)propanamida; 2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-hidroxi-N-(oxetan-3-il)acetamida; 2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida; y 2-(6-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)piridin-3-il)-N-(oxetan-3-il)acetamida; o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica de una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas.
6. 6. El compuesto de la reivindicación 1, en el que dicho compuesto se selecciona de: 2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-metil-N-(oxetan-3-il)acetamida; 2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2,2-difluoro-N-(oxetan-3-il)acetamida; 2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-hidroxi-N-(oxetan-3-il)propanamida; 2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-ciano-N-(oxetan-3-il)acetamida; 2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-3-hidroxi-N-(oxetan-3-il)propanamida; (S)-2-(2-((((1 R,4S)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-3-hidroxi-N-(oxetan-3-il)propanamida; (R) -2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-3-hidroxi-N-(oxetan-3-il)propanamida; 2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-hidroxi-N-(oxetan-3-il)acetamida; (S) -2-(2-((((1 R,4S)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-hidroxi-N-(oxetan-3-il)acetamida; (R) -2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-2-hidroxi-N-(oxetan-3-il)acetamida; 2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida; (S) -2-(2-((((1 R,4S)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida; (R)-2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida; y 2-(6-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)piridin-3-il)-N-(oxetan-3-il)acetamida; o una mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas.
7. 7. El compuesto de la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es 2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)acetamida; o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
8. 8. El compuesto de la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es 2-(2-(((((1R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin- 5-il)-N-(oxetan-3-il)acetamida; o una mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
9. 9. El compuesto de la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es 2-(2-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida; o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
10. 10. El compuesto de la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es (S)-2-(2-((((1R,4S)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida o (R)-2-(2-((((1 R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin- 2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)pirimidin-5-il)-N-(oxetan-3-il)propanamida; o una mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
11. 11. El compuesto de la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es 2-(6-(((4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)piridin-3-il)-N-(oxetan-3-il)acetamida; o un estereoisómero, enantiómero, mezcla enantiomérica o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
12. 12. El compuesto de la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es 2-(6-((((1R,4R)-4-((8-cloro-7-metilquinolin-2-il)amino)ciclohexil)metil)amino)piridin-3-il)-N-(oxetan-3-il)acetamida; o una mezcla enantiomérica de una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
13. 13. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
14. 14. Una combinación que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, y uno o más agentes terapéuticamente activos; opcionalmente, en el que dicho uno o más agentes terapéuticamente activos se seleccionan de un agente anticancerígeno, inmunomodulador, agente antialérgico, agente antinauseas, analgésico, y un agente citoprotector.
15. 15. El compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 para uso en un método para tratar una enfermedad o afección mediada por el potenciador del homólogo de zeste 2 (EZH2), el complejo represor Polycomb 2 (PRC2), o una combinación del potenciador del homólogo de zeste 2 (EZH2) y el complejo represor Polycomb 2 (PRC2), en el que dicha enfermedad o afección es linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), linfoma folicular, leucemia, mieloma múltiple, cáncer gástrico, tumor rabdoide maligno, carcinoma hepatocelular, cáncer de próstata, carcinoma de mama, cánceres de conductos biliares y de vesícula biliar, carcinoma de vejiga, neuroblastoma, schwannoma, glioma, glioblastoma y astrocitoma, cáncer de cuello uterino, cáncer de colon, melanoma, cáncer de endometrio, cáncer de esófago, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de pulmón, carcinoma nasofaríngeo, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, carcinoma de células renales, cáncer de recto, cánceres de tiroides, tumores de paratiroides, tumores uterinos, rabdomiosarcoma, sarcoma de Kaposi, sarcoma sinovial, osteosarcoma o sarcoma de Ewing; opcionalmente en el que el compuesto se administra en combinación con un segundo agente terapéutico.