ES2896882T3 - Beta-aminoácidos beta sustituidos y análogos como agentes quimioterapéuticos - Google Patents

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Abstract

El compuesto ácido 3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metilfenil]butanoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo: **(Ver fórmula)**

Description

DESCRIPCIÓN
Beta-aminoácidos beta sustituidos y análogos como agentes quimioterapéuticos
Campo
En el presente documento se describen p-aminoácidos p sustituidos, derivados de p-aminoácidos p sustituidos y análogos de p-aminoácidos p sustituidos y su uso como agentes terapéuticos. Los derivados de p-aminoácidos p sustituidos y los análogos de p-aminoácidos p sustituidos son sustratos selectivos para LAT1/4F2hc y exhiben una rápida captación y retención en tejidos tales como tumores que expresan el transportador LAT1/4F2hc. También se desvelan composiciones farmacéuticas que comprenden los derivados de p-aminoácidos p sustituidos y los análogos de p-aminoácidos p sustituidos y usos de los mismos.
Antecedentes
La capacidad de dirigirse selectivamente a la quimioterapia tiene un valor inmenso en la práctica clínica. El cáncer es una de las principales causas de muerte en el mundo desarrollado, desarrollando una de cada tres personas cáncer durante su vida. Existen muchas opciones de tratamiento para el cáncer incluyendo cirugía, quimioterapia, radioterapia, inmunoterapia y tratamiento con anticuerpos monoclonales. Desafortunadamente, para muchos pacientes, las opciones de tratamiento del cáncer son limitadas y las tasas de respuesta siguen siendo bajas.
La cirugía es la forma eficaz más antigua de terapia tumoral y, a menudo, puede resultar en una cura completa, dependiendo del tipo y la naturaleza del tumor. Muchos tumores, sin embargo, se producen en lugares y/o números que hacen que la cirugía sea imposible o impráctica. También, no se garantiza que la citorreducción quirúrgica retire todas las células anormales, particularmente en el caso de tumores localizados en el cerebro donde se desea la máxima preservación del tejido normal. Las células anormales residuales presentan un riesgo aumentado de que el tumor vuelva a crecer y/o metástasis.
La radioterapia se usa a menudo como complemento de la cirugía. Diversos tipos de radiación, tanto de fuentes externas como implantadas, se han usado con cierto éxito. Las fuentes de baja transferencia de energía lineal (LET), tales como partículas p y rayos y, requieren tratamientos repetidos durante períodos de tiempo prolongados para producir una reducción significativa de las células tumorales. Las fuentes de alta LET, tales como neutrones, protones o partículas a, no requieren oxígeno para mejorar su eficacia biológica. La terapia de haz externo ha estado disponible durante décadas, sin embargo, se produce un daño significativo por radiación en los tejidos normales, y los pacientes a menudo sucumben a una necrosis generalizada inducida por la radiación (Laramore, et al., Cancer, 1978, 42(1), 96­ 103).
La quimioterapia se usa en intentos de curar o paliar el cáncer. Los productos quimioterapéuticos de molécula pequeña se dirigen a las células que se dividen rápidamente, deteniendo la proliferación celular al interferir con la replicación del ADN, reordenamientos citoesqueléticos y/o rutas de señalización que promueven el crecimiento celular. La interrupción de la división celular ralentiza el crecimiento de células malignas y también puede matar las células tumorales al desencadenar la apoptosis. Los agentes alquilantes, tales como derivados de bis(2-cloroetil)amina, actúan por interacción covalente con heteroátomos nucleofílicos en ADN o proteínas. Se cree que estos agentes difuncionales son capaces de reticular una cadena de ADN dentro de una doble hélice en forma intracadena o intercadena, o de reticular entre ADN, proteínas u otras macromoléculas vitales. La reticulación da como resultado efectos inhibidores sobre la replicación y transcripción del ADN con la posterior muerte celular. Dado que estos medicamentos también matan indiscriminadamente poblaciones normales de células que proliferan rápidamente, tales como las que se encuentran en el sistema inmunológico y en el tracto gastrointestinal, son comunes los efectos secundarios que limitan las dosis toleradas.
Los graves efectos secundarios y el fracaso final de la mayoría de los regímenes de quimioterapia han motivado la investigación de alternativas, incluyendo los medicamentos que se dirigen específicamente a las células tumorales. Las células normales y las células tumorales difieren notablemente en el metabolismo de nutrientes y energía, un fenómeno conocido como efecto Warburg (Ganapathy, et al., Pharmacol Ther, 2009, 121(1), 29-40; y Vander Heiden, et al., Science, 2009, 324(5930), 1029-1033). La proliferación mejorada en las células tumorales aumenta la demanda de nutrientes para que sirvan como bloques de construcción para la biosíntesis de macromoléculas y como fuentes de energía. La acumulación de nutrientes selectiva por tumores es más evidente en los estudios de imagen de tumores humanos que usan tomografía por emisión de positrones (PET) y [18F]-fluorodesoxiglucosa (FDG). La FDG se acumula en niveles elevados en muchos tipos de tumores sólidos y se cree que los transportadores de azúcar la absorben en las células tumorales. Los aminoácidos son la principal fuente de nitrógeno celular, usados para la síntesis de nucleótidos, glutatión, amino azúcar y proteínas. Además, los tumores a menudo usan los esqueletos de carbono de los aminoácidos como fuente de combustible oxidativo para la generación de ATP además de glucosa y ácidos grasos (Baggetto, Biochimie, 1992, 74(11), 959-974; Mazurek y Figenbrodt, 2003, Anticancer Res, 2003, 23(2A), 1149-1154; y DeBerardinis, et al., Proc Natl Acad Sci USA, 2007, 104(49), 19345-19350). Por lo tanto, las células tumorales deben expresar transportadores específicos seleccionados para satisfacer los requisitos de mantenimiento y crecimiento de los aminoácidos nutricionales. Para competir con el tejido circundante por los nutrientes, las células tumorales regulan positivamente los niveles de determinados transportadores para permitir una extracción de nutrientes más eficiente que la del tejido del hospedador.
El transporte de aminoácidos a través de la membrana plasmática en células de mamíferos está mediado por diferentes "sistemas" de transporte tales como los sistemas dependientes de sodio A, ASC y N y el sistema independiente de sodio L (Christensen, Phys Rev, 1990, 70, 43-77). El sistema L es un sistema ubicuo de transporte de aminoácidos de la membrana plasmática que se caracteriza por la captación independiente de sodio de aminoácidos voluminosos, hidrófobos y su interacción de alta afinidad con el ácido 2-amino-biciclo [2,2,1] heptano-2-carboxílico (BCH). La actividad del sistema L se atribuye actualmente a cuatro transportadores independientes de sodio (LAT1-4). Sin embargo, la mayoría de los cánceres sobreexpresan solo un miembro, el transportador de aminoácidos grande 1 (LAT1/4F2hc). Este transportador es un heterodímero que consiste en una cadena ligera (LAT1) que constituye el transportador y un 4F2hc de cadena pesada (también conocido como CD98 o Antígeno Tumoral TA1) que se requiere para que la cadena ligera se dirija correctamente a la membrana plasmática. La expresión y actividad de LAT1/4F2hc se correlaciona con la proliferación celular y el crecimiento del cáncer; y se ha observado una regulación positiva de LAT1/4F2hc, por ejemplo, en cánceres de cerebro, colon, pulmón, hígado, páncreas y piel (Jager, et al., J Nucl Med, 1998, 39(10), 1736-1743; Ohkame, et al., J Surg Oncol, 2001,78(4), 265-267; Tamai, et al., Cancer Detect Prev, 2001, 25(5), 439-445; Kim, et al., Anticancer Res, 2004, 24(3a),1671-1675; Kobayashi, et al., Neurosurgery, 2008, 62(2), 493-503; Imai, et al., Histopathology, 2009, 54(7), 804-813; y Kaira, et al., 2009, Lung Cancer, 66(1), 120-126). Adicionalmente, la expresión de LAT1/4F2hc se ha usado como factor independiente para predecir malos pronósticos en pacientes con tumores cerebrales astrocíticos, cáncer de pulmón y cáncer de próstata (Nawashiro, et al., Int J Canc, 2006, 119(3), 484-492; Kaira, et al., Lung Cancer, 2009, 66(1), 120-126; Kaira, et al., Cancer Sci, 2008, 99(12), 2380-2386; y Sakata, et al., Pathol Int, 2009, 59(1), 7-18). La inhibición del transporte mediado por LAT1/4F2hc con aminoácidos no metabolizables tales como BCH puede reducir el crecimiento e inducir la apoptosis en las células cancerosas in vitro (Kim, et al., Biol Pharm Bull, 2008, 31(6), 1096-1100; Shennan y Thomson, Oncol Rep, 2008, 20(4), 885-889; y Kaji, et al., Int J Gynecol Cancer, 2010, 20(3), 329-336). Los estudios clínicos han demostrado que la especificidad y el valor predictivo positivo de L-[3-18F]-a-metiltirosina ([18F]-FAMT) PET es superior a [18F]-FDG PET. La captación de [18F)-FAMT en tumores se ha correlacionado estrechamente con la expresión de LAt 1 (Haase, et al., J Nucl Med, 2007,48(12), 2063-2071; Kaira, et al., Clin Cancer Res, 2007, 13(21), 6369-6378; y Urakami, et al., Nucl Med Biol, 2009, 36(3), 295-303).
En particular, el melfalán es un fármaco de quimioterapia eficaz que se usa en el tratamiento del mieloma múltiple, cáncer de ovario, retinoblastoma y otros tumores hematopoyéticos. Sin embargo, se informa que los sustratos como la gabapentina se transportan mucho más rápidamente que el melfalán (Uchino, et al., Mol Pharmacol 2002, 61(4), 729-737). Se cree ampliamente que la absorción de melfalán (Alkeran®, conocido de otra manera como mostaza de L-fenilalanina, o L-PAM) en las células está mediada por transportadores de aminoácidos. El melfalán es un agente alquilante ligado al aminoácido esencial fenilalanina. Debido a que las células normales y las células tumorales difieren notablemente en el metabolismo de nutrientes y energía (efecto Warburg) (Vander Heiden, et al., Science, 2009, 324(5930), 1029-1033), el melfalán se introdujo en la práctica clínica con la expectativa de que se acumulara preferencialmente en las células tumorales que se dividen rápidamente en comparación con las células normales, aumentando de esta manera su índice terapéutico global. Sorprendentemente, el melfalán provocó muchos de los mismos efectos secundarios que otros agentes de alquilación convencionales, incluyendo la mielosupresión. En una serie de publicaciones, Vistica et al. examinaron el transporte de melfalán en diferentes tipos de células e identificaron dos sistemas de transporte independientes para melfalán. Un sistema, se presume que es el Sistema L, se caracteriza por la absorción independiente de sodio de aminoácidos voluminosos, hidrófobos y su sensibilidad hacia la inhibición con ácido 2-amino-biciclo[2,2,1]heptano-2-carboxílico (BCH) (Vistica, Biochim Biophys Acta, 1979, 550(2), 309-317). Un segundo sistema de transporte es depende del sodio, exhibe su mayor afinidad por la leucina, pero es insensible tanto a BCH como al inhibidor específico del sistema A ácido a-amino-isobutírico (AlB) (Vistica, Biochim Biophys Acta, 1979, 550(2), 309-317). Aunque LAT1 se sobreexpresa en la superficie celular de casi todas las células tumorales independientemente del tejido de origen, las tasas de respuesta al melfalán son bajas para la mayoría de los tipos de cáncer y el fármaco solo está aprobado para el tratamiento del mieloma múltiple y el cáncer de ovario. El melfalán es un sustrato pobre para LAT1 en comparación con otros aminoácidos grandes como la fenilalanina o la leucina (Uchino, et al., Mol Pharmacol 2002, 61(4), 729-737; y Hosoya, et al., Biol Pharm Bull, 2008, 31(11), 2126-2130). Los derivados de la mostaza nitrogenada con mayor selectividad hacia el sistema LAT1/4F2hc podrían reducir los efectos secundarios asociados a la terapia con mostaza nitrogenada, permitir un aumento de la dosis y extender el uso a otras áreas del tratamiento del cáncer.
Aunque el potencial de las estrategias de transporte activo para aumentar la captación del fármaco en las células tumorales es conocido y generalmente aceptado, en general, los agentes quimioterapéuticos y de formación de imágenes de tumores no se han optimizado para transportadores que se sabe que se sobreexpresan en las células tumorales. Aunque se aprecia el concepto general de utilizar compuestos selectivos de LAT1/2Fhc para administrar agentes terapéuticos a los tumores, la técnica existente no da ninguna guía sobre cómo se prepara una composición que explota compuestos selectivos de LAT1/4F2hc. Por lo tanto, existe la necesidad de nuevos agentes terapéuticos que sean más selectivos hacia LAT1/4F2hc.
Se conocen varios fármacos relacionados con los aminoácidos que son sustratos del transportador LAT1/4F2hc incluyendo L-Dopa, 3-O-metildopa, droxidopa, carbidopa, 3,3 ', 5'-triyodotironina, tiroxina, gabapentina y melfalán (Uchino, et al., Mol Pharm 2002, 61(4), 729-737; y del Amo et al., Eur J Pharm Sci, 2008, 35(3), 161-174). La síntesis de derivados de p-bis-(2-doroetil)-amino]-fenilalanina o sustituidos y la prueba de su acción antitumoral se desvelan en Pan et al, Scientia Sinica, 1962, XI(4), 483-498.
Los problemas a resolver
La diferenciación del tejido canceroso maligno del tejido vecino no maligno puede lograrse aprovechando los cambios en los flujos bioquímicos que ocurren en respuesta a cambios metabólicos, genéticos y/o microestructurales en las células malignas. Los compuestos proporcionados por la presente divulgación mejoran sustancialmente la quimioterapia del tejido que expresa el transportador LAT1/4F2hc, incluyendo los tumores malignos. Los derivados de p-aminoácidos p sustituidos y los análogos de p-aminoácidos p sustituidos proporcionados por la presente divulgación proporcionan una mayor selectividad de captación para el tejido o células diana que expresan el transportador LAT1/4F2hc con baja captación inespecífica para tejidos o células no diana.
La presente divulgación proporciona por lo tanto novedosos derivados de p-aminoácidos p sustituidos y análogos de P-aminoácidos p sustituidos y métodos para el uso de tales derivados, por ejemplo, como agentes quimioterapéuticos. También se desvelan métodos para sintetizar derivados de p-aminoácidos p sustituidos y análogos de p-aminoácidos P sustituidos y composiciones farmacéuticas que comprenden dichos derivados. Los derivados de p-aminoácidos p sustituidos y los análogos de p-aminoácidos p sustituidos de la presente divulgación exhiben selectividad por LAT1/4F2hc y, por lo tanto, se acumulan en células cancerosas cuando se administran a un sujeto in vivo. Las ventajas proporcionadas por los compuestos de la presente divulgación reflejan las propiedades de los sustratos LAT1/4F2hc, a saber, permeabilidad de la barrera hematoencefálica (BBB), captación rápida y retención prolongada en tumores que expresan el transportador LAT1/4F2hc, y además sirven como agentes quimioterapéuticos.
Sumario de la invención
En un primer aspecto, la presente invención proporciona el compuesto ácido 3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (3) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:
Figure imgf000004_0001
En un segundo aspecto, la presente invención proporciona el compuesto ácido (3S)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (5) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:
Figure imgf000004_0002
En un tercer aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con cualquier aspecto precedente o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
En un cuarto aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de acuerdo con cualquiera del primer o el segundo aspectos para su uso en el tratamiento del cáncer, en donde el cáncer expresa el transportador LAT1/4F2hc. En una realización de este aspecto, el cáncer se selecciona de cáncer de próstata, glioblastoma, cáncer de mama triple negativo y mieloma múltiple.
En un quinto aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica de acuerdo con el tercer aspecto para su uso en el tratamiento del cáncer, en donde el cáncer expresa el transportador LAT1/4F2hc. En una realización de este aspecto, el cáncer se selecciona de cáncer de próstata, glioblastoma, cáncer de mama triple negativo y mieloma múltiple.
Sumario de enseñanzas técnicas que no forman parte de la invención.
De acuerdo con la presente divulgación, se proporciona compuestos de Fórmula (1):
Figure imgf000005_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en la que:
al menos uno de R1 y R5 se selecciona independientemente entre halógeno, -N(R10)2, -N+(-O-)(R10)2, -N(OR10)(R10), -NO2, -NO, -N(R10)(S(=O)R10), -N(R10)(S(=O)2R10), -N(R10)(C(O)R10), -N(R10)(C(O)OR10), -N(R10)(C(O)N(R10)2 , -CN, -COOR10, -CON(R10)2, -OH, -SH, alquilsulfanilo C1-4, alquilsulfinilo C1-4, alquilsulfonilo C1-4, -S(O)N(R10)2, -S(O)2N(R10)2, fluoroalquilo C1-4, fluoroalcoxi C1-4, alquilo C1-6, alquilo C1-6 sustituido, alcoxi C1-6, alcoxi C1-6 sustituido, cicloalquilo C3-6, cicloalquilo C3-6 sustituido, cicloalquiloxi C3-6, cicloalquiloxi C3-6 sustituido, cicloalquilalquilo C4-12, cicloalquilalquilo C4-12 sustituido, arilo C6-10, arilo C6-10 sustituido, arilaquilo C7-16, arilalquilo C7-16 sustituido, heteroalquilo C1-6, heteroalquilo C1-6 sustituido, heteroalcoxi C1-6, heteroalcoxi C1-6 sustituido, heterocicloalquilo C3-6, heterocicloalquilo C3-6 sustituido, heterocicloalquilalquilo C4-12, heterocicloalquilalquilo C4-12 sustituido, heteroarilo C5-10, heteroarilo C5-10 sustituido, heteroarilalquilo C6-16 y heteroarilalquilo C6-16 sustituido; uno de R1, R2, R3, R4, y R5 comprende un resto quimioterapéutico;
cada uno del otro de R1, R2, R3 , R4 y R5 se selecciona independientemente entre hidrógeno, deuterio, halógeno, -OH, -N(R10)2, -NO2, -NO, -CN, -COOR10, -CON(R10)2, alquilsulfanilo C1-4, alquilsulfinilo C1-4, alquilsulfonilo C1-4, alquilo C1-6, alquilo C1-6 sustituido, cicloalquilo C3-6, cicloalquilo C3-6 sustituido, heteroalquilo C1-6, heteroalquilo C1-6 sustituido, alcoxi C1-6, alcoxi C1-6 sustituido, heteroalcoxi C1-6, heteroalcoxi C1-6 sustituido, cicloalquilalquilo C4-8 y cicloalquilheteroalquilo C4-8;
R6 se selecciona entre un ácido carboxílico (-COOH), un análogo de ácido carboxílico y un (bio)isóstero de ácido carboxílico;
cada R7 se selecciona independientemente entre hidrógeno, deuterio, halógeno, hidroxilo, alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, bencilo y fenilo; o dos R7 junto con el carbono al que están unidos forman un anillo seleccionado entre un anillo cicloalquilo C3-6 y un anillo heterocicloalquilo C3-6;
R8 se selecciona entre hidrógeno, deuterio, halógeno, alquilo C1-6, alquilo C1-6 sustituido, heteroalquilo C1-6, heteroalquilo C1-6 sustituido, alcoxi C1-6, alcoxi C1-6 sustituido, heteroalcoxi C1-6, heteroalcoxi C1-6 sustituido, cicloalquilo C3-6, cicloalquilo C3-6 sustituido, cicloalquiloxi C3-6, cicloalquiloxi C3-6 sustituido, -OH, -COOR10, fluoroalquilo C1-4, fluoroalcoxi C1-4, cicloalquilo C3-6 y fenilo;
cada R10 se selecciona independientemente entre hidrógeno, deuterio, alquilo C1-4 y alcoxi C1-4, o dos R10 geminales junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico de 3 a 6 miembros; y L es -(X)a-, en el que,
cada X se selecciona independientemente entre un enlace ("-"), -C(R16)2-, en el que cada R16 se selecciona independientemente entre hidrógeno, deuterio, halógeno, hidroxilo, alquilo C1-4 y alcoxi C1-4, o dos R16 junto con el carbono al que están unidos forman un anillo cicloalquilo C3-6 o un anillo heterocicloalquilo C3-6, -O-, -S-, -SO-, -SO2-, -CO- y -N(R17)-, en el que donde R17 se selecciona entre hidrógeno y alquilo C1-4; y a se selecciona entre 0, 1,2, 3 y 4.
De acuerdo con la presente divulgación, se proporcionan restos quimioterapéuticos de Fórmula (2):
Figure imgf000006_0001
en el que,
A se selecciona entre un enlace ("-"), oxígeno (-O-), azufre (-S-), amino (-NR10-), metileno (-CH2-), metilenooxi (-CH2-O-), oxicarbonilo (-O-C(=O)-), tiocarbonilo (-S-C(=O)-), aminocarbonilo (-NR10-C(=O)-), oxitiocarbonilo (-O-C(=S)-), tiotiocarbonilo (-S-C(=S)-), aminotiocarbonilo (-NR10-C(=S)-), metilenooxicarbonilo (-CH2-O-C(=O)-), metilenotiocarbonilo (-CH2-S-C(=O)-), metilenoaminocarbonilo (-CH2-n R10-C(=O)-), metilenooxitiocarbonilo (-CH2-O-C(=S)-), metilenotiotiocarbonilo (-CH2-S-C(=S)-), metilenoaminotiocarbonilo (-CH2-N10-C(=S)-), carbonilo (-C(=O)-), metilencarbonilo (-CH2-C(=O)-), tiocarbonilo (-C(=S)-) y metilentiocarbonilo (-CH2-C(=S)-);
Z se selecciona entre un enlace ("-") y oxígeno (-O-);
Q se selecciona entre -O-(un átomo de oxígeno con carga negativa) que está unido a un átomo de nitrógeno con carga positiva) y un par de electrones libres (:), con la condición de que cuando Q es -O-(un átomo de oxígeno cargado negativamente que está unido a un átomo de nitrógeno cargado positivamente), A se selecciona entre un enlace ("-") y metileno (-CH2-), Z es un enlace ("-"), y el resto quimioterapéutico de Fórmula (2) es un N-óxido (-A-N+(-O)(-C(R11)2-C(R11)2-R9)2);
cada R11 se selecciona independientemente entre hidrógeno, deuterio y alquilo C1-3; y
cada R9 se selecciona independientemente entre flúor (-F), cloro (-Cl), bromo (-Br), yodo (-I), alquil sulfonato (-OSO2R40, en el que R40 se selecciona entre alquilo C1-4), (per)fluoroalquilsulfonato C1-4 (-OSO2R40, en el que R40 se selecciona entre (per)fluoroalquilo C1-4) y arilo sulfonato (sustituido) (-OSO2R40, en el que R40 se selecciona entre arilo C6-10).
Descripción detallada
La información técnica que se expone más adelante puede, en algunos aspectos, ir más allá de la divulgación de la invención, que se define de manera exclusiva por las reivindicaciones adjuntas. La información técnica adicional se proporciona para situar la invención real en un contexto técnico más amplio y para ilustrar posibles desarrollos técnicos relacionados. Dicha información técnica adicional que no se encuentre dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas, no forma parte de la presente invención.
Definiciones
Se usa un guion ("-") que no está entre dos letras o símbolos para indicar un punto de unión para un resto o sustituyente. Por ejemplo, -CONH2 está unido a través del átomo de carbono.
"Alquilo" se refiere a un radical hidrocarburo monovalente, saturado o insaturado, de cadena lineal o ramificada, obtenido a partir de la retirada de un átomo de hidrógeno de un solo átomo de carbono de un alcano, alqueno o alquino parental. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen metilo; etilo, como etanilo, etenilo y etinilo; propilos tales como propan-1-ilo, propan-2-ilo, prop-1-en-1-ilo, prop-1-en-2-ilo, prop-1-en-1-ilo (alilo), prop-1 -in-1 -ilo, prop-1 -in-1 -ilo, etc.; butilos tales como butan-1-ilo, butan-2-ilo, 2-metil-propan-1-ilo, 2-metil-propan-2-ilo, but-1-en-1 -ilo, but-1-en-2-ilo, 2-metil-prop-1-en-1-ilo, but-2-en-1-ilo, but-2-en-2-ilo, buta-1,3-dien-1-ilo, buta-1,3-dien-2-ilo, but-1-in-1-ilo, but-1-in-3-ilo, but-3-in-1 -ilo, etc.; y similares. El término "alquilo" está específicamente destinado a incluir grupos que tienen cualquier grado o nivel de saturación, es decir, grupos que tienen exclusivamente enlaces simples carbono-carbono, grupos que tienen uno o más dobles enlaces carbono-carbono, grupos que tienen uno o más triples enlaces carbono-carbono, y grupos que tienen combinaciones de enlaces carbono-carbono simples, dobles y triples. Cuando se pretende un nivel de saturación específico, se usan los términos alcanilo, alquenilo y alquinilo. Por ejemplo, un grupo alquilo puede ser alquilo Ci -6, alquilo Ci -5, alquilo C i -4, alquilo C i -3 o etilo o metilo.
"Alquilsulfanilo", también denominado "alquiltio", se refiere a un radical -SR en el que R es alquilo o cicloalquilo como se define en el presente documento. Ejemplos de grupos alquilsulfanilo incluyen metilsulfanilo, etilsulfanilo, propilsulfanilo, isopropilsulfanilo, butilsulfanilo y ciclohexilsulfanilo. Por ejemplo, un grupo alquilsulfanilo puede ser alquilsulfanilo C1-6, alquilsulfanilo C1-5, alquilsulfanilo C1-4, alquilsulfanilo C1-3, etilsulfanilo (etiltio) o metilsulfanilo (metiltio).
"Alquilsulfinilo" se refiere a un radical -S(O)R en el que R es alquilo o cicloalquilo como se define en el presente documento. Ejemplos de grupos alquilsulfinilo incluyen metilsulfinilo, etilsulfinilo, propilsulfinilo, isopropilsulfinilo, butilsulfinilo y ciclohexilsulfinilo. Por ejemplo, un grupo alquilsulfinilo puede ser alquilsulfinilo C1-6, alquilsulfinilo C1-5, alquilsulfinilo C1-4, alquilsulfinilo C1-3, etilsulfinilo o metilsulfinilo.
"Alquilsulfonilo" se refiere a un radical -S(O)2R en el que R es alquilo o cicloalquilo como se define en el presente documento. Ejemplos de grupos alquilsulfonilo incluyen metilsulfonilo, etilsulfonilo, propilsulfonilo, isopropilsulfonilo, butilsulfonilo y ciclohexilsulfonilo. Por ejemplo, un grupo alquilsulfonilo puede ser alquilsulfonilo C1-6, alquilsulfonilo C1-5, alquilsulfonilo C1-4, alquilsulfonilo C1.3, etilsulfonilo o metilsulfonilo.
"Alcoxi" se refiere a un radical -OR en el que R es alquilo como se define en el presente documento. Los ejemplos de grupos alcoxi incluyen metoxi, etoxi, propoxi y butoxi. Por ejemplo, un grupo alcoxi puede ser alcoxi C1-6, alcoxi C1-5, alcoxi C1-4, alcoxi C1-3, y puede ser, etoxi o metoxi.
"Arilo" por sí mismo o como parte de otro sustituyente se refiere a un radical de hidrocarburo aromático monovalente obtenido a partir de la retirada de un átomo de hidrógeno de un único átomo de carbono de un sistema de anillo aromático parental. Arilo abarca anillos aromáticos carbocíclicos de 5 o 6 miembros, por ejemplo, benceno; sistemas de anillo bicíclico en el que al menos un anillo es carbocíclico y aromático, por ejemplo, naftaleno, indano, y tetralina; y sistemas de anillo tricíclico en el que al menos un anillo es carbocíclico y aromático, por ejemplo, fluoreno. Arilo abarca sistemas de anillos múltiples que tienen como mínimo un anillo carbocíclico aromático condensado con al menos un anillo carbocíclico aromático, anillo de cicloalquilo, o anillo de heterocicloalquilo. Por ejemplo, arilo incluye un anillo de fenilo condensado con un anillo heterocicloalquilo de 5 a 7 miembros que contiene uno o más heteroátomos seleccionados entre N, O y S. Para tales sistemas de anillos bicíclicos condensados en los que solo uno de los anillos es un anillo aromático carbocíclico, el átomo de carbono del radical puede estar en el anillo aromático carbocíclico o en el anillo heterocicloalquilo. Ejemplos de grupos arilo incluyen grupos obtenidos a partir de aceantrileno, acenaftileno, acefenantrileno, antraceno, azuleno, benceno, criseno, coroneno, fluoranteno, fluoreno, hexaceno, hexafeno, hexaleno, as-indaceno, s-indaceno, indano, indeno, naftaleno, octaceno, octafeno, octaleno, ovaleno, pentaceno, pentaleno, pentafeno, perileno, fenaleno, fenantreno, piceno, pleyadeno, pireno, pirantreno, rubiceno, trifenileno, trinaftaleno, y similares. Por ejemplo, un grupo arilo puede ser arilo C6-10, arilo C6-9, arilo C6-8 o fenilo. Arilo, sin embargo, no abarca ni solapa de ninguna forma con el heteroarilo, definido independientemente en el presente documento.
"Arilalquilo" se refiere a un radical alquilo acíclico en el que uno de los átomos de hidrógeno unidos a un átomo de carbono se reemplaza con un grupo arilo. Ejemplos de grupos arilalquilo incluyen bencilo, 2-feniletan-1-ilo, 2-fenileten-1-ilo, naftilmetilo, 2-naftiletan-1-ilo, 2-naftileten-1-ilo, naftobencilo, 2-naftofeniletan-1-ilo y similares. Cuando se pretenden restos alquilo específicos, se usa la nomenclatura arilalquanilo, arilalquenilo o arilalquinilo. Por ejemplo, un grupo arilalquilo puede ser arilalquilo C7-16, por ejemplo, el resto alcanilo, alquenilo o alquinilo del grupo arilalquilo es C1-6 y el resto arilo es C6-10, o un grupo arilalquilo puede ser arilalquilo C7-16, por ejemplo, el resto alcanilo, alquenilo o alquinilo del grupo arilalquilo es C1-6 y el resto arilo es C6-10. Por ejemplo, un grupo arilalquilo puede ser arilalquilo C7-9, en el que el resto alquilo es alquilo C1-3 y el resto arilo es fenilo. Por ejemplo, un grupo arilalquilo puede ser arilalquilo C7-16, arilaquilo C7-14, arilaquilo C7-12, arilaquilo C7-10, arilalquilo C7-8 o bencilo.
Los bioisósteros son átomos o moléculas que se ajustan a la definición más amplia de isósteros. El concepto de bioisosterismo se basa en la noción de que un solo átomo, grupos, mitades o moléculas completas, que tienen similitudes químicas y físicas, producen efectos biológicos similares. Un bioisóstero de un compuesto parental todavía puede ser reconocido y aceptado por su objetivo apropiado, pero sus funciones se alterarán en comparación con la molécula parental. Los parámetros afectados con reemplazos bioisostéricos incluyen, por ejemplo, tamaño, conformación, efectos inductivos y mesoméricos, polarizabilidad, capacidad para interacciones electrostáticas, distribución de carga, capacidad de formación de enlaces H, pKa (acidez), solubilidad, hidrofobicidad, lipofilicidad, hidrofilicidad, polaridad, potencia, selectividad, reactividad, o estabilidad química y metabólica, ADME (absorción, distribución, metabolismo y excreción). Aunque es común en los productos farmacéuticos, los grupos carboxilo o los grupos funcionales de ácido carboxílico (-CO2H) en una molécula original se pueden reemplazar con un sustituto adecuado o (bio) isóstero para superar las deficiencias químicas o biológicas mientras se conservan los atributos deseados de la molécula original que lleva uno o más grupos carboxilo o grupos funcionales ácido carboxílico (-CO2H). Ejemplos de sustitutos adecuados o (bio)isósteros de grupos carboxilo o grupos funcionales de ácido carboxílico (-CO2H) incluyen ácidos hidroxámicos (-CONR12OH); ácidos borónico (-B(OH)(OR12), ácidos fosfínicos o derivados de los mismos (-PO(OH)R12), ácido fosfónico o derivados de los mismos (-PO(OH)(OR12), ácido sulfínico (-SOOH), ácido sulfónico (-SO2OH), sulfonamida (-SO2NHR12 o -NHSO2R12) sulfonimida o acil sulfonimida (-SO2NHCOR12 o -CONHSO2R12), sulfonilureas (-SO2NHCONHR12 o -NHCONHSO2R12), amida (-CONHR12 o -NHCOR12), en el que R12 en cualquiera de los anteriores se selecciona entre hidrógeno, alquilo C1-6, fluoroalquilo C1-4, cicloalquilo C3-6 y arilo C6-10, acilcianamida (-CONHCN); 2,2,2-trifluoroetan-1-ols (-CH(CF3)OH), 2,2,2-trifluorometil cetonas e hidratos de los mismos (-COCF3 y -C(OH)2CF3), heterociclos ácidos y sus tautómeros anulares, tales como, por ejemplo, tetrazol, 5-oxo-1,2,4-oxadiazol, 5-oxo-1,2,4-tiadiazol, 5-tioxo-1,2,4-oxadiazol, tiazolidinadiona, oxazolidinadiona, oxadiazolidinediona, 3-hidroxiisoxazol, 3-hidroxiisotiazol, 1-hidroxiimidazol, 1-hidroxi-pirazol, 1-hidroxi-triazol, 1H-imidazol-2-ol, tetrazol-5-tiol, 3-hidroxiquinolin-2-onas, 4-hidroxiquinolin-2-onas, ácido tetrónico, ácido tetrámico, mercaptoazoles, tales como sulfanil-1H-imidazol, sulfinil-1 H-imidazol, sulfonil-1H-imidazol, sulfanil-1 H-triazol, sulfinil 1H-triazol, sulfonil-1H-triazol, sulfanil-1 W-1,2,4-triazol, sulfinil-1H-1,2,4-triazol, sulfonil-1 W-1-1,2,4-triazol, sulfanil-1,4-dihidro-1,2,4-triazol-5-ona, sulfinil-1,4-dihyclro-1,2,4-triazol-5-ona, sulfonil-1,4-dihidro-1,2,4-triazol-5-ona, sulfanil 1H-tetrazol, sulfanil 2H-tetrazol, sulfinil iH-tetrazol, sulfinil 2H-tetrazol, sulfonil IH-tetrazol, sulfonil 2H-tetrazol o sulfonimidamidas; y; oxocarbociclos ácidos o polienos cíclicos y sus formas de resonancia, tales como, por ejemplo, ciclopentano-1,3-dionas, ácidos escuáricos, escuaramidas, escuaramatos mixtos o 2,6-difluorofenoles.
Los "compuestos" de Fórmula (1) y los restos de Fórmula (2) descritos en el presente documento incluyen cualquier compuesto específico dentro de estas fórmulas. Los compuestos pueden identificarse por su estructura química y/o nombre químico. Los compuestos se nombran utilizando el programa de nomenclatura ChemDraw Ultra 12.0 (CambridgeSoft, Cambridge, MA). Cuando la estructura química y el nombre químico entran en conflicto, la estructura química determina la identidad del compuesto. Los compuestos descritos en el presente documento pueden comprender uno o más centros estereogénicos y/o dobles enlaces y, por lo tanto, pueden existir como estereoisómeros tales como isómeros de doble enlace (es decir, isómeros geométricos), enantiómeros, diastereómeros o atropisómeros. En consecuencia, cualquier estructura química dentro del alcance de la especificación representada, en su totalidad o en parte, con una configuración relativa abarca todos los enantiómeros y estereoisómeros posibles de los compuestos ilustrados, incluida la forma estereoisoméricamente pura (por ejemplo, geométricamente pura, enantioméricamente pura o diastereoméricamente pura) y mezclas enantioméricas y estereoisoméricas. Las mezclas enantioméricas y estereoisoméricas pueden resolverse en sus componentes enantiómeros o estereoisómeros usando técnicas de separación o técnicas de síntesis quiral bien conocidas por el experto en la materia.
Los compuestos de Fórmula (1) y restos de Fórmula (2) incluyen isómeros ópticos de compuestos de Fórmula (1) y restos de Fórmula (2), racematos de los mismos y otras mezclas de los mismos. En tales realizaciones, los enantiómeros o diastereómeros individuales pueden obtenerse por síntesis asimétrica o por resolución de los racematos. La resolución de los racematos se puede lograr, por ejemplo, mediante métodos convencionales tales como cristalización en presencia de un agente de resolución o cromatografía, usando, por ejemplo, una columna de cromatografía líquida de alta presión (HPLC) quiral con fases estacionarias quirales. Además, los compuestos de Fórmula (1) incluyen formas (Z) y (E) (o formas cis y trans) de compuestos con dobles enlaces como isómeros geométricos simples o mezclas de los mismos.
Los compuestos de Fórmula (1) y las fracciones de Fórmula (2) también pueden existir en varias formas tautoméricas que incluyen la forma enol, la forma ceto y mezclas de las mismas. En consecuencia, las estructuras químicas representadas en el presente documento abarcan todas las formas tautoméricas posibles de los compuestos ilustrados. Los compuestos pueden existir en formas no solvatadas así como formas solvatadas, incluyendo formas hidratadas. Determinados compuestos pueden existir en múltiples formas cristalinas, cocristalinas o amorfas. Los compuestos de fórmula (1) incluyen sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, o solvatos farmacéuticamente aceptables de la forma de ácido libre de cualquiera de los anteriores, así como formas cristalinas de cualquiera de los anteriores
Los compuestos de Fórmula (1) también se denominan en el presente documento derivados de p-aminoácidos sustituidos en p y/o análogos de aminoácidos p sustituidos en p.
"Resto quimioterapéutico" se refiere a un resto eficaz en el tratamiento del cáncer que incluye, cualquiera de los desvelados en el presente documento. Un resto quimioterapéutico puede ser cualquier resto quimioterapéutico adecuado de fármacos achemoterapéuticos conocidos en la técnica que retiene la actividad citotóxica cuando se une directa o indirectamente a través de un resto espaciador adecuado a un derivado de p-aminoácido, análogo de paminoácido o p-aminoácido. (bio)isóstero de ácido carboxílico como elemento de reconocimiento de LAT1 proporcionado por la presente divulgación. El conjugado o producto de fusión del resto quimioterapéutico con el derivado de p-aminoácido, el análogo de p-aminoácido o el (bio)isóstero de ácido carboxílico de p-aminoácido es simultáneamente un sustrato selectivo para el transportador LAT1/4F2hc.
En la presente divulgación, el resto quimioterapéutico se selecciona entre una mostaza nitrogenada (-N(-CR2-CR2-X)2), un N-monoalquilo o N,N-dialquil triazeno (-N=N-NR2), un haloacetamida (-NR-CO-CH2-X), un epóxido (-CROCR-R), una aziridina (-NC2H4), un aceptor de Michael (-CR=CR-EWG-), un sulfonato o un bissulfonato éster (-OSO2R o ROSO2-), una N-nitrosourea (-n R-CO-N(NO)R), una bissulfonil hidrazina (R"SO2-NR-N(-)-SO2R"', -SO2-NR-NR'-SO2R"' o R"SO2-NR-NR'-SO2-), un fosforamidato (-O-P(=O)(N(R)-CH2-CH2-X)2 o -O-P(=O)(N(-CH2-CH2-X)2)2, y un radionúclido, tal como, por ejemplo, 131-yodo (131[I]-) o 211-astatina (211[At]-).
En la presente divulgación de un compuesto de Fórmula (1), el resto quimioterapéutico es un resto Fórmula (2a):
-A-NQ(-Z-C(R11 )2-C(R11 )2-R9)(-C(R1 )2-C(R11 )2-R9) (2a)
en el que,
A se selecciona entre un enlace ("-"), oxígeno (-O-), azufre (-S-), amino (NR10-), metileno (-CH2-), metilenooxi (-CH2-O-), oxicarbonilo (-O-C(=O)-), tiocarbonilo (-S-C(=O)-), aminocarbonilo (-Nr 10-C(=O)-), oxitiocarbonilo (-O-C(=S)-), tiotiocarbonilo (-S-C(=S)-), aminotiocarbonilo (-NR10-C(=S)-), metilenooxicarbonilo (-CH2-O-C(=O)-), metilenotiocarbonilo (-CH2-S-C(=O)-), metilenoaminocarbonilo (-CH2-NR10-C(=O)-), metilenooxitiocarbonilo (-CH2-O-C(=S)-), metilenotiotiocarbonilo (-CH2-S-C(=S)-), metilenoaminotiocarbonilo (-CH2-NR10-C(=S)-), carbonilo (-C(=O)-), metilencarbonilo (-CH2-C(=O)-), tiocarbonilo (-C(=S)-) y metilentiocarbonilo (-CH2-C(=S)-);
Z se selecciona entre un enlace ("-") y oxígeno (-O-);
Q se selecciona entre -O-(un átomo de oxígeno con carga negativa) que está unido a un átomo de nitrógeno con carga positiva) y un par de electrones libres (:), con la condición de que cuando Q es -O-(un átomo de oxígeno cargado negativamente que está unido a un átomo de nitrógeno cargado positivamente), A se selecciona entre un enlace ("-") y metileno (-CH2-), Z es un enlace ("-"), y el resto quimioterapéutico de Fórmula (2) es un N-óxido (-A-n (-o -)(-C(R11)2-C(R11)2-R9)2); y
cada R11 se selecciona independientemente entre hidrógeno, deuterio y alquilo C1-3; y
cada R9 se selecciona independientemente entre flúor (-F), cloro (-Cl), bromo (-Br), yodo (-I), alquil sulfonato (-OSO2R40, en el que R40 se selecciona entre alquilo C1-4), (per)fluoroalquilsulfonato C1-4 (-0 SO2R40, en el que R40 se selecciona entre (per)fluoroalquilo C1-4) y arilo sulfonato (sustituido) (-OSO2R40, en el que R40 se selecciona entre arilo C6-10).
"Cicloalquilo" se refiere a un radical alquilo cíclico, saturado o parcialmente insaturado. Por ejemplo, un grupo cicloalquilo puede ser cicloalquilo C3-6, cicloalquilo C3-5, cicloalquilo C5-6, ciclopropilo, ciclopentilo o ciclohexilo. Por ejemplo, el cicloalquilo puede seleccionarse entre ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.
"Cicloalquilalquilo" se refiere a un radical alquilo acíclico en el que uno de los átomos de hidrógeno unidos a un átomo de carbono se reemplaza con un grupo cicloalquilo como se define en el presente documento. Cuando se pretenden restos alquilo específicos, se usa la nomenclatura cicloalquilalquilo, cicloalquilalquenilo o cicloalquilalquinilo. Por ejemplo, un grupo cicloalquilalquilo puede ser cicloalquilalquilo C4-30, por ejemplo, el resto alcanilo, alquenilo, o alquinilo del grupo cicloalquilalquilo es C1-10 y el resto cicloalquilo del resto cicloalquilalquilo es C3-20. Un grupo cicloalquilalquilo puede ser cicloalquilalquilo C4-20, por ejemplo, el resto alcanilo, alquenilo, o alquinilo del grupo cicloalquilalquilo es C1-8 y el resto cicloalquilo del grupo cicloalquilalquilo es C3-12. Por ejemplo, cicloalquilalquilo puede ser cicloalquilalquilo C4-9, en el que el resto alquilo del grupo cicloalquilalquilo es alquilo C1-3 y el resto cicloalquilo del grupo cicloalquilalquilo es cicloalquilo C3-6. Por ejemplo, un grupo cicloalquilalquilo puede ser cicloalquilalquilo C4-12, cicloalquilalquilo C4-10, cicloalquilalquilo C4-8 o cicloalquilalquilo C4-6. Por ejemplo un grupo cicloalquilalquilo puede ser ciclopropilmetilo (-CH2-ciclo-C3H5), ciclopentilmetilo (-CH2-ciclo-C5H9) o ciclohexilmetilo (-CH2-ciclo-C6Hn ). Por ejemplo, un grupo cicloalquilalquilo puede ser ciclopropiletenilo (-CH=CH-ciclo-C3H5), ciclopentiletinilo (-CEC-ciclo-C5H9) o similares.
"Cicloalquilheteroalquilo" por sí mismo o como parte de otro sustituyente se refiere a un grupo heteroalquilo en el que uno o más de los átomos de carbono (y ciertos átomos de hidrógeno asociados) de un grupo alquilo se reemplazan independientemente con el mismo o diferente grupo o grupos heteroatómicos y en el que uno de los átomos de hidrógeno unido a un átomo de carbono se reemplaza con un grupo cicloalquilo. Cuando se pretenden restos alquilo específicos, se usa la nomenclatura cicloalquilheteroalcanilo, cicloalquilheteroalquenilo y cicloalquilheteroalquinilo. Por ejemplo, el grupo heteroatómico de cicloalquilheteroalquilo se puede seleccionar entre -O-, -S-,-NH-, -N(-CH3)-, -SO­ y -SO2-, el grupo heteroatómico puede seleccionarse entre -O-y -NH- y el grupo heteroatómico puede ser -O- o -NH-.
"Cicloalquiloxi" se refiere a un radical -OR en el que R es cicloalquilo como se define en el presente documento. Ejemplos de grupos cicloalquiloxi incluyen ciclopropiloxi, ciclobutiloxi, ciclopentiloxi y ciclohexiloxi. Por ejemplo, un grupo cicloalquiloxi puede ser cicloalquiloxi C3-6, cicloalquiloxi C3-5, cicloalquiloxi C5-6, ciclopropiloxi, ciclobutiloxi, ciclopentiloxi o ciclohexiloxi.
"Enfermedad "se refiere a una enfermedad, trastorno, afección o síntoma de cualquiera de los anteriores.
"Fluoroalquilo" se refiere a un grupo alquilo como se define en el presente documento en el que uno o más de los átomos de hidrógeno se reemplazan con un flúor. Por ejemplo, un grupo fluoroalquilo puede ser fluoroalquilo C1-6, fluoroalquilo C1-5, fluoroalquilo C1-4 o fluoroalquilo C1-3. Por ejemplo, el grupo fluoroalquilo puede ser pentafluoroetilo (-CF2CF3) o trifluorometilo (-CF3).
"Fluoroalcoxi" se refiere a un grupo alcoxi como se define en el presente documento en el que uno o más de los átomos de hidrógeno se reemplazan con un flúor. Por ejemplo, un grupo fluoroalcoxi puede ser fluoroalcoxi C1-6, fluoroalcoxi C1-5, fluoroalcoxi C1-4 o fluoroalcoxi C1-3, y puede ser -OCF2CF3 o -OCF3.
"Derivado de aminoácido p sustituido en p" se refiere a derivados de aminoácido p sustituido que tienen un grupo carboxilo, por ejemplo, aminoácido p sustituido en p.
"Análogo de p-aminoácido sustituido en p" se refiere a derivados de aminoácidos p sustituidos en p en los que el grupo carboxilo se reemplaza con un grupo de ácido fosfínico, un grupo de ácido sulfínico u otros, por ejemplo, ácido 3-aminopropilfosfínicos, ácido 3-aminopropilsulfínicos y otros.
"Halógeno" se refiere a un grupo flúor, cloro, bromo o yodo.
"Heteroalcoxi" se refiere a un grupo alcoxi en el que uno o más de los átomos de carbono están reemplazados por un heteroátomo. Por ejemplo, el grupo heteroalcoxi puede ser heteroalcoxi C1-6, heteroalcoxi C1-5, heteroalcoxi C1-4 o heteroalcoxi C1-3. Por ejemplo, el grupo heteroatómico de heteroalcoxi se puede seleccionar entre -O-, -S-, -NH-, -NR-, -SO2- y -SO2-, el grupo heteroatómico puede seleccionarse entre -O- y -NH-, el grupo heteroatómico puede ser -O-y -NH-. Por ejemplo, un grupo heteroalcoxi puede ser heteroalcoxi C1-6, heteroalcoxi C1-5, heteroalcoxi C1-4 o heteroalcoxi C1.3.
"Heteroalquilo" por sí mismo o como parte de otro sustituyente se refiere a un grupo alquilo en el que uno o más de los átomos de carbono (y ciertos átomos de hidrógeno asociados) se reemplazan independientemente con el mismo o diferente grupo o grupos heteroatómicos. Ejemplos de grupos heteroatómicos incluyen -O-, -S-, -NH-, -NR-, -O-O-, -S-S-, =N-N=, -N=N-, -N=N-NR-, -PR-, -P(O)OR-, -P(O)R-, -POR-, -SO-, -SO2-, -Sn(R)2- y similares, donde cada R se selecciona independientemente entre hidrógeno, alquilo C1-6, alquilo C1-6 sustituido, arilo C6-12, arilo C6-12 sustituido, arilaquilo C7-18, arilalquilo C7-18 sustituido, cicloalquilo C3-7, cicloalquilo C3-7 sustituido, heterocicloalquilo C3-7, heterocicloalquilo C3-7 sustituido, heteroalquilo C1-6, heteroalquilo C1.6 sustituido, heteroarilo C6-12, heteroarilo C6-12 sustituido, heteroarilalquilo C7-18 y heteroarilalquilo C7-18 sustituido. Por ejemplo, cada R puede seleccionarse independientemente entre hidrógeno y alquilo C1-3. La referencia a, por ejemplo, un heteroalquilo C1-6, significa un grupo alquilo C1-6 en el que al menos uno de los átomos de carbono (y determinados átomos de hidrógeno asociados) está reemplazado por un heteroátomo. Por ejemplo, heteroalquilo C1-6 incluye grupos que tienen cinco átomos de carbono y un heteroátomo, grupos que tienen cuatro átomos de carbono y dos heteroátomos, etc. Por ejemplo, el grupo heteroatómico del heteroalquilo puede seleccionarse entre -O-, -S-, -NH-, -N(-CH3)-, -SO- y -SO2-, , el grupo heteroatómico puede seleccionarse entre -O- y -NH- y el grupo heteroatómico puede ser -O- o -NH-. Por ejemplo, un grupo heteroalquilo puede ser heteroalquilo C1-6, heteroalquilo C1-5 o heteroalquilo C1-4 o heteroalquilo C1-3.
"Heteroarilo" por sí mismo o como parte de otro sustituyente se refiere a un radical heteroaromático monovalente obtenido a partir de la retirada de un átomo de hidrógeno de un solo átomo de un sistema de anillo heteroaromático parental. El heteroarilo abarca múltiples sistemas de anillos que tienen al menos un anillo heteroaromático condensado con al menos otro anillo, que puede ser aromático o no aromático. Por ejemplo, heteroarilo abarca anillos bicíclicos en los que un anillo es heteroaromático y el segundo anillo es un anillo heterocicloalquilo. Para tales sistemas de anillos heteroarilo bicíclicos condensados en los que solo uno de los anillos contiene uno o más heteroátomos, el carbono radical puede estar en el anillo aromático o en el anillo heterocicloalquilo. Por ejemplo, cuando el número total de átomos de N, S y O en el grupo heteroarilo excede de uno, los heteroátomos pueden o no ser adyacentes entre sí. Por ejemplo, el número total de heteroátomos en el grupo heteroarilo no puede ser más de dos. Por ejemplo, el grupo heteroaromático puede seleccionarse entre -O-, -S-, -NH-, -N(-CH3)-, -SO- y -SO2-, , el grupo heteroaromático puede seleccionarse entre -O- y -NH- y el grupo heteroaromático puede ser -O- o -NH-. Por ejemplo, un grupo heteroarilo puede seleccionarse entre heteroarilo C5-10, heteroarilo C5-9, heteroarilo C5-8, heteroarilo C5-7, heteroarilo C5-6 y puede ser heteroarilo C5 y heteroarilo C6.
Ejemplos de grupos heteroarilo incluyen grupos obtenidos a partir de acridina, arsindol, carbazol, a-carbolina, cromano, cromeno, cinolina, furano, imidazol, indazol, indol, indolina, indolizina, isobenzofurano, isocromeno, isoindol, isoindolina, isoquinolina, isotiazol, isoxazol, naftiridina, oxadiazol, oxazol, perimidina, fenantridina, fenantrolina, fenazina, ftalazina, pteridina, purina, pirano, pirazina, pirazol, piridazina, piridina, pirimidina, pirrol, pirrolizina, quinazolina, quinolina, quinolizina, quinoxalina, tetrazol, tiadiazol, tiazol, tiofeno, triazol, xanteno, tiazolidina, oxazolidina y similares. Los grupos heteroarilo pueden ser los obtenidos a partir de tiofeno, pirrol, benzotiofeno, benzofurano, indol, piridina, quinolina, imidazol, oxazol, o pirazina. Por ejemplo, heteroarilo puede ser heteroarilo C5 y puede seleccionarse entre furilo, tienilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, isotiazolilo o isoxazolilo. Por ejemplo, heteroarilo puede ser heteroarilo C6 y puede seleccionarse entre piridinilo, pirazinilo, pirimidinilo y piridazinilo.
"Heteroarilalquilo" se refiere a un grupo arilalquilo en el que uno de los átomos de carbono (y ciertos átomos de hidrógeno asociados) se reemplaza con un heteroátomo. Por ejemplo, un grupo heteroarilalquilo puede ser heteroarilalquilo C6-16, heteroarilalquilo C6-14, heteroarilalquilo C6-12, heteroarilalquilo C6-10, heteroarilalquilo C6-8 o heteroarilalquilo C7 y puede ser heteroarilalquilo C6. Por ejemplo, el grupo heteroaromático en heteroarilalquilo puede seleccionarse entre -O-, -S-, -NH-, -N(-CH3)-, -SO- y -SO2-, , el grupo heteroaromático puede seleccionarse entre -O-y -NH-, o el grupo heteroaromático puede ser -O- o -NH-.
"Heterocicloalquilo" por sí mismo o como parte de otro sustituyente se refiere a un radical alquilo cíclico saturado o insaturado en el que uno o más átomos de carbono (y ciertos átomos de hidrógeno asociados) se reemplazan independientemente con el mismo o diferente heteroátomo; o a un sistema de anillo aromático parental en el que uno o más átomos de carbono (y ciertos átomos de hidrógeno asociados) se reemplazan independientemente con el mismo o diferente heteroátomo de modo que el sistema de anillo viola la regla de Hückel. Ejemplos de heteroátomos para reemplazar el átomo o átomos de carbono, incluyen N, P, O, S y Si. Ejemplos de grupos heterocicloalquilo incluyen grupos obtenidos a partir de epóxidos, azirinas, tiiranos, imidazolidina, morfolina, piperazina, piperidina, pirazolidina, pirrolidina, quinuclidina, y similares. Por ejemplo, heterocicloalquilo puede ser heterocicloalquilo C5 y puede seleccionarse entre pirrolidinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, imidazolidinilo, oxazolidinilo, tiazolidinilo, doxolanilo y ditiolanilo. Por ejemplo, heterocicloalquilo puede ser heterocicloalquilo C6 y puede seleccionarse entre piperidinilo, tetrahidropiranilo, piperizinilo, oxazinilo, ditianilo y dioxanilo. Por ejemplo un grupo heterocicloalquilo puede ser heterocicloalquilo C3-6, heterocicloalquilo C3-5, heterocicloalquilo C5-6 y puede ser, heterocicloalquilo C5 o heterocicloalquilo C6. Por ejemplo, el grupo heteroaromático de heterocicloalquilo puede seleccionarse entre -O-, -S-, -NH-, -N(-CH3)-, -SO- y -SO2-, el grupo heteroatómico puede seleccionarse entre -O- y -NH- y el grupo heteroatómico puede ser -O- o -NH-.
"Heterocidoalquilalquilo" se refiere a un grupo cicloalquilalquilo en el que uno o más átomos de carbono (y ciertos átomos de hidrógeno asociados) del anillo cicloalquilo se reemplazan independientemente con el mismo o diferente heteroátomo. Por ejemplo, el heterocicloalquilalquilo puede ser heterocicloalquilalquilo C4-12, heterocicloalquilalquilo C4-10, heterocicloalquilalquilo C4-8, heterocicloalquilalquilo C4-6 o heterocicloalquilalquilo Ca-7, , heterocicloalquilalquilo C6 o heterocicloalquilalquilo C7. Por ejemplo, el grupo heteroaromático de heterocicloalquilalquilo puede seleccionarse entre -O-, -S-, -NH-, -N(-CH3)-, -SO- y -SO2-, el grupo heteroatómico puede seleccionarse entre -O- y -NH- y el grupo heteroatómico puede ser -O- o -NH-.
"Mesilo" se refiere al grupo -OS(O)2Me u -OMs.
"Sistema de anillo aromático parental" se refiere a un sistema de anillo cíclico o policíclico insaturado que tiene un sistema de electrones n (pi) conjugados cíclicos con 4n+2 electrones (regla de Hückel). Dentro de la definición de "sistema de anillo aromático parental" se incluyen los sistemas de anillos condensados en el que uno o más de los anillos son aromáticos y uno o más de los anillos están saturados o insaturados, tales como, por ejemplo, fluoreno, indano, indeno, fenaleno, etc. Ejemplos de sistemas de anillos aromáticos parentales incluyen aceantrileno, acenaftileno, acefenantrileno, antraceno, azuleno, benceno, criseno, coroneno, fluoranteno, fluoreno, hexaceno, hexafeno, hexaleno, as-indaceno, s-indaceno, indano, indeno, naftaleno, octaceno, octafeno, octaleno, ovaleno, pentaceno, pentaleno, pentafeno, perileno, fenaleno, fenantreno, piceno, pleyadeno, pireno, pirantreno, rubiceno, trifenileno, trinaftaleno, y similares.
"Sistema de anillos heteroaromáticos parental" se refiere a un sistema de anillos aromáticos en el que uno o más átomos de carbono (y cualquier átomo de hidrógeno asociado) se reemplazan independientemente con el mismo heteroátomo o con diferentes heteroátomos de tal manera que se mantenga el sistema continuo de electrones n característico de sistemas aromáticos y un número de electrones n correspondientes a la regla de Hückel (4n+2). Ejemplos de heteroátomos para reemplazar los átomos de carbono, incluyen N, P, O, S y Si, etc. Se incluyen específicamente dentro de la definición de "sistemas de anillos heteroaromáticos parentales" los sistemas de anillos condensados en los que uno o más de los anillos son aromáticos y uno o más de los anillos están saturados o insaturados, tales como, por ejemplo, arsindol, benzodioxano, benzofurano, cromano, cromeno, indol, indolina, xanteno, etc. Ejemplos de sistemas de anillos heteroaromáticos parentales incluyen arsindol, carbazol, p-carbolina, cromano, cromeno, cinolina, furano, imidazol, indazol, indol, indolina, indolizina, isobenzofurano, isocromeno, isoindol, isoindolina, isoquinolina, isotiazol, isoxazol, naftiridina, oxadiazol, oxazol, perimidina, fenantridina, fenantrolina, fenazina, ftalazina, pteridina, purina, pirano, pirazina, pirazol, piridazina, piridina, pirimidina, pirrol, pirrolizina, quinazolina, quinolina, quinolizina, quinoxalina, tetrazol, tiadiazol, tiazol, tiofeno, triazol, xanteno, tiazolidina, oxazolidina y similares.
"Paciente" se refiere a un mamífero, por ejemplo, un ser humano. El término "paciente" se usa indistintamente con "sujeto".
"Farmacéuticamente aceptable" se refiere a aprobado o aprobable por una agencia reguladora del gobierno federal o estatal o enumerado en la Farmacopea de los Estados Unidos u otra farmacopea generalmente reconocida para uso en animales, y más particularmente en seres humanos.
"Sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal de un compuesto, que posee la actividad farmacológica deseada del compuesto original. Tales sales incluyen sales de adición de ácido, formadas con ácidos inorgánicos y uno o más grupos funcionales protonables tales como aminas primarias, secundarias o terciarias dentro del compuesto original. Ejemplos de ácidos inorgánicos incluyen ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares. En determinadas realizaciones las sales se forman con ácidos orgánicos, tales como ácido acético, ácido propiónico, ácido hexanoico, ácido ciclopentanopropiónico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido 3-(4-hidroxibenzoil)benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido 1,2-etano-disulfónico, ácido 2-hidroxietanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido 4-clorobencenosulfónico, ácido 2-naftalenosulfónico, ácido 4-toluenosulfónico, ácido alcanforsulfónico, ácido 4-metilbiciclo[2.2.2]-oct-2-eno-1-carboxílico, ácido glucoheptónico, ácido 3-fenilpropiónico, ácido trimetilacético, ácido butilacético terciario, ácido laurilsulfúrico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido hidroxinaftoico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido mucónico, y similares. En determinadas realizaciones, se forma una sal cuando uno o más protones ácidos presentes en el compuesto original son reemplazados por un ion metálico, por ejemplo, un ion de metal alcalino, un ion alcalinotérreo o un ion aluminio o combinaciones de los mismos; o se coordina con una base orgánica tal como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, W-metilglucamina y similares. En determinadas realizaciones, una sal farmacéuticamente aceptable es la sal clorhidrato. En determinadas realizaciones, una sal farmacéuticamente aceptable es la sal sódica. En determinadas realizaciones en las que un compuesto tiene dos o más grupos ionizables, una sal farmacéuticamente aceptable comprende uno o más contraiones, tales como una bi-sal, por ejemplo, una sal diclorhidrato.
La expresión "sal farmacéuticamente aceptable" incluye hidratos y otros solvatos, así como sales en forma cristalina o no cristalina. Cuando se describe una sal farmacéuticamente aceptable particular, se entiende que la sal particular (por ejemplo, una sal de hidrocloruro) es un ejemplo de una sal, y que se pueden formar otras sales usando técnicas conocidas por un experto en la materia. Adicionalmente, un experto en la materia podrá convertir la sal farmacéuticamente aceptable en el correspondiente compuesto, base libre y/o ácido libre, usando técnicas generalmente conocidas en la técnica. Véase también: Stahl y Wermuth, C.G. (Editores), Handbook of Pharmaceutical Salts, Wiley-VCH, Weinheim, Alemania, 2008.
"Pharmaceutically acceptable vehicle" se refiere a un diluyente farmacéuticamente aceptable, un adyuvante farmacéuticamente aceptable, un excipiente farmacéuticamente aceptable, un portador farmacéuticamente aceptable, o una combinación de cualquiera de los anteriores con el que un compuesto proporcionado por la presente divulgación puede administrarse a un paciente y que no destruye su actividad farmacológica y que no es tóxico cuando se administra en dosis suficientes para proporcionar una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto.
"Composición farmacéutica" se refiere a un compuesto de Fórmula (1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, con el que el compuesto de Fórmula (1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra a un paciente. Se conocen en la técnica vehículos farmacéuticamente aceptables.
"Solvato" se refiere a un complejo molecular de un compuesto con una o más moléculas de disolvente en una cantidad estequiométrica o no estequiométrica. Tales moléculas de disolvente son las que se utilizan comúnmente en la técnica farmacéutica, que se sabe que son inocuas para un paciente, por ejemplo, agua, etanol y similares. Un complejo molecular de un compuesto o resto de un compuesto y un disolvente puede estabilizarse mediante fuerzas intramoleculares no covalentes, tales como, por ejemplo, fuerzas electrostáticas, fuerzas de van der Waals o enlaces de hidrógeno. El término "hidrato" se refiere a un solvato en el que una o más moléculas de disolvente es agua.
"Sustituido" se refiere a un grupo en el que uno o más átomos de hidrógeno se reemplazan independientemente con el mismo o diferentes sustituyentes. Por ejemplo, cada sustituyente puede independientemente seleccionarse entre halógeno, -OH, -CN, -CF3, -OCF3, =O, -NO2, alcoxi C1-6, alquilo C1-6, -COOR, -NR2 y -CONR2; en el que cada R se selecciona independientemente entre hidrógeno y alquilo C1-6. Por ejemplo, cada sustituyente puede independientemente seleccionarse entre halógeno, -NH2, -OH, alcoxi C1-3 y alquilo C1-3, trifluorometoxi y trifluorometilo. Por ejemplo, cada sustituyente puede independientemente seleccionarse entre- OH, metilo, etilo, trifluorometilo, metoxi, etoxi y trifluorometoxi. Por ejemplo, cada sustituyente puede seleccionarse entre alquilo C1-3, =O, alquilo C1-3, alcoxi C1-3 y fenilo. Por ejemplo, cada sustituyente se selecciona entre -OH, -NH2, alquilo C1-3 y alcoxi C1-3.
"Tratar" o "tratamiento" de una enfermedad se refiere a detener o mejorar una enfermedad o al menos uno de los síntomas clínicos de una enfermedad o trastorno, reducir el riesgo de adquirir una enfermedad o al menos uno de los síntomas clínicos de una enfermedad, reducir el desarrollo de una enfermedad o al menos uno de los síntomas clínicos de la enfermedad o reducir el riesgo de desarrollar una enfermedad o al menos uno de los síntomas clínicos de una enfermedad. "Tratar" o "tratamiento" también se refiere a inhibir la enfermedad, ya sea físicamente (por ejemplo, estabilización de un síntoma discernible), fisiológicamente (por ejemplo, estabilización de un parámetro físico), o ambos, y a inhibir al menos un parámetro físico. o manifestación que puede o no ser discernible para el paciente. En determinadas realizaciones, "tratar" o "tratamiento" se refiere a retrasar la aparición de la enfermedad o al menos uno o más síntomas de la misma en un paciente que puede estar expuesto o predispuesto a una enfermedad o trastorno aunque ese paciente aún no experimente o no presente síntomas de la enfermedad.
"Cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a la cantidad de un compuesto que, cuando se administra a un sujeto para tratar una enfermedad, o al menos uno de los síntomas clínicos de una enfermedad, es suficiente para afectar tal tratamiento de la enfermedad o síntoma de la misma. La "cantidad terapéuticamente eficaz" puede variar dependiendo, por ejemplo, en el compuesto, la enfermedad y/o síntomas de la enfermedad, gravedad de la enfermedad y/o síntomas de la enfermedad o trastorno, la edad, peso y/o salud del paciente a tratar, y el criterio del médico que prescribe. Los expertos en la materia pueden determinar una cantidad apropiada en cualquier caso dado o ser capaz de determinarla mediante experimentación rutinaria.
"Dosis terapéuticamente eficaz" se refiere a una dosis que proporciona un tratamiento eficaz de una enfermedad o trastorno en un paciente. Una dosis terapéuticamente eficaz puede variar de un compuesto a otro y de un paciente a otro, y puede depender de factores tales como el estado del paciente y la vía de administración. Se puede determinar una dosis terapéuticamente eficaz de acuerdo con procedimientos farmacológicos rutinarios conocidos por los expertos en la materia.
"Triflilo" se refiere al grupo -OS(O)2CF3 o -OTf.
Transportador LAT1/4F2hc
El número de registro de GenBank para LAT1/4F2hc humano es NP_003477/NP_002385. A menos que resulte evidente de otro modo por el contexto, la referencia a un transportador tal como LAT1/4F2hc (así como a otros transportadores desvelados en el presente documento) incluye la secuencia de aminoácidos descrita o codificada por el número de referencia de GenBank y, variantes alélicas, afines e inducidas y fragmentos de las mismas que retienen esencialmente la misma actividad transportadora. Habitualmente tales variantes muestran al menos el 90 % de identidad de secuencia con la secuencia de aminoácidos o ácidos nucleicos de Genbank ilustrativa. Las variantes alélicas a nivel del ADN son el resultado de la variación genética entre individuos de la misma especie. Algunas variantes alélicas a nivel del ADN que provocan sustitución, deleción o inserción de aminoácidos en proteínas codificadas por el ADN da como resultado la correspondiente variación alélica a nivel de proteína. Las formas afines de un gen se refieren a la variación entre genes relacionados estructural y funcionalmente entre especies. Por ejemplo, el gen humano que muestra la mayor identidad de secuencia y la relación funcional más cercana a un gen de ratón es la forma afín humana del gen de ratón.
Para la comparación de secuencias, normalmente una secuencia actúa como secuencia de referencia, con la que se comparan las secuencias de prueba. Cuando se usa un algoritmo de comparación de secuencias, las secuencias de prueba y de referencia se introducen en un ordenador, se designan las coordenadas de subsecuencia, si fuera necesario, y se designan los parámetros del programa del algoritmo de secuencias. El algoritmo de comparación de secuencias permite el cálculo del porcentaje de identidad de secuencia para la secuencia o secuencias de prueba con respecto a la secuencia de referencia, basándose en los parámetros del programa designados. El alineamiento óptimo de secuencias para comparación puede realizarse mediante métodos conocidos por los expertos en la materia. Compuestos
Los agentes anticancerosos proporcionados por la presente divulgación son compuestos de Fórmula (1):
Figure imgf000013_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en la que:
al menos uno de R1 y R5 se selecciona independientemente entre halógeno, -N(R10)2, -N+(-O-)(R10)2, -N(OR10)(R10), -NO2, -NO, -N(R10)(S(=O)R10), -N(R10)(S(=O)2R10), -N(R10)(C(O)R10), -N(R10)(C(O)OR10), -N(R10)(C(O)N(R10)2, -CN, -COOR10, -CON(R10)2, -OH, -SH, alquilsulfanilo C1-4, alquilsulfinilo C1-4, alquilsulfonilo C1-4, -S(O)N(R10)2, -S(O)2N(R10)2, fluoroalquilo C1-4, fluoroalcoxi C1-4, alquilo C1-6, alquilo C1-6 sustituido, alcoxi C1-6, alcoxi C1-6 sustituido, cicloalquilo C3-6, cicloalquilo C3-6 sustituido, cicloalquiloxi C3-6, cicloalquiloxi C3-6 sustituido, cicloalquilalquilo C4-12, cicloalquilalquilo C4-12 sustituido, arilo C6-10, arilo C6-10 sustituido, arilaquilo C7-16, arilalquilo C7-16 sustituido, heteroalquilo C1-6, heteroalquilo C1-6 sustituido, heteroalcoxi C1-6, heteroalcoxi C1-6 sustituido, heterocicloalquilo C3-6, heterocicloalquilo C3-6 sustituido, heterocicloalquilalquilo C4-12, heterocicloalquilalquilo C4-12 sustituido, heteroarilo C5-10, heteroarilo C5-10 sustituido, heteroarilalquilo C6-16 y heteroarilalquilo C6-16 sustituido; uno de R1, R2, R3, R4, y R5 comprende un resto quimioterapéutico;
cada uno del otro de R1, R2, R3 , R4 y R5 se selecciona independientemente entre hidrógeno, deuterio, halógeno, -OH, -N(R10)2, -NO2, -NO, -CN, -COOR10, -CON(R10)2, alquilsulfanilo C1-4, alquilsulfinilo C1-4, alquilsulfonilo C1-4, alquilo C1-6, alquilo C1-6 sustituido, cicloalquilo C3-6, cicloalquilo C3-6 sustituido, heteroalquilo C1-6, heteroalquilo C1-6 sustituido, alcoxi C1-6, alcoxi C1-6 sustituido, heteroalcoxi C1-6, heteroalcoxi C1-6 sustituido, cicloalquilalquilo C4-8 y cicloalquilheteroalquilo C4-8;
R6 se selecciona entre un ácido carboxílico (-COOH), un análogo de ácido carboxílico y un (bio)isóstero de ácido carboxílico;
cada R7 se selecciona independientemente entre hidrógeno, deuterio, halógeno, hidroxilo, alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, bencilo y fenilo; o dos R7 junto con el carbono al que están unidos forman un anillo seleccionado entre un anillo cicloalquilo C3-6 y un anillo heterocicloalquilo C3-6;
R8 se selecciona entre hidrógeno, deuterio, halógeno, alquilo C1-6, alquilo C1-6 sustituido, heteroalquilo C1-6, heteroalquilo C1-6 sustituido, alcoxi C1-6, alcoxi C1-6 sustituido, heteroalcoxi C1-6, heteroalcoxi C1-6 sustituido, cicloalquilo C3-6, cicloalquilo C3-6 sustituido, cicloalquiloxi C3-6, cicloalquiloxi C3-6 sustituido, -OH, -COOR10, fluoroalquilo C1-4, fluoroalcoxi C1-4, cicloalquilo C3-6 y fenilo;
cada R10 se selecciona independientemente entre hidrógeno, alquilo C1-4 y alcoxi C1-4, o dos R10 geminales junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico de 3 a 6 miembros;
L es -(X)a-, en el que,
cada X se selecciona independientemente entre un enlace ("-") y -C(R16)2-, en el que cada R16 se selecciona independientemente entre hidrógeno, deuterio, halógeno, hidroxilo, alquilo C1-4 y alcoxi C1-4, o dos R16 junto con el carbono al que están unidos forman un anillo cicloalquilo C3-6 o un anillo heterocicloalquilo C3-6 , -O-, -S-, -SO-, -SO2-, -CO- y -N(R17)-, en el que R17 se selecciona entre hidrógeno y alquilo C1-4; y
a se selecciona entre 0, 1,2, 3 y 4; y
cada sustituyente se selecciona independientemente entre halógeno, -OH, -NH2, -N(R10)2, -NO2, -CF3, =O (oxo), alquilo C1-3, alcoxi C1-3 y fenilo; en el que cada R10 se selecciona independientemente entre hidrógeno y alquilo C1-3.
De acuerdo con la divulgación, un resto quimioterapéutico puede ser cualquier resto quimioterapéutico adecuado de un fármaco quimioterapéutico conocido en la técnica que retiene la actividad citotóxica cuando se une a través de un resto espaciador, por ejemplo, un anillo arilo y un engarce L, a un derivado de p-aminoácido, análogo de p-aminoácido o p-aminoácido. (bio)isóstero de ácido carboxílico como elemento de reconocimiento de LAT1 proporcionado por la presente divulgación. El conjugado o producto de fusión del resto quimioterapéutico con el derivado de p-aminoácido, el análogo de p-aminoácido o el (bio)isóstero de ácido carboxílico de p-aminoácido es simultáneamente un sustrato selectivo para el transportador LAT1/4F2hc.
De acuerdo con la divulgación, el resto quimioterapéutico puede ser un resto de Fórmula (2):
Figure imgf000014_0001
en la que,
A se selecciona entre un enlace ("-"), oxígeno (-O-), azufre (-S-), amino (-NR10-), metileno (-CH2-), metilenooxi (-CH2-O-), oxicarbonilo (-O-C(=O)-), tiocarbonilo (-S-C(=O)-), aminocarbonilo (-NR10-C(=O)-), oxitiocarbonilo (-O-C(=S)-), tiotiocarbonilo (-S-C(=S)-), aminotiocarbonilo (-NR10-C(=S)-), metilenooxicarbonilo (-CH2-O-C(=O)-), metilenotiocarbonilo (-CH2-S-C(=O)-), metilenoaminocarbonilo (-CH2-n R10-C(=O)-), metilenooxitiocarbonilo (-CH2-O-C(=S)-), metilenotiotiocarbonilo (-CH2-S-C(=S)-), metilenoaminotiocarbonilo (-Ch2-NR10-C(=S)-), carbonilo (-C(=O)-), metilencarbonilo (-CH2-C(=O)-), tiocarbonilo (-C(=S)-) y metilentiocarbonilo (-CH2-C(=S)-);
Z se selecciona entre un enlace ("-") y oxígeno (-O-);
Q se selecciona entre -O-(un átomo de oxígeno con carga negativa) que está unido a un átomo de nitrógeno con carga positiva) y un par de electrones libres (:), con la condición de que cuando Q es -O-(un átomo de oxígeno cargado negativamente que está unido a un átomo de nitrógeno cargado positivamente), A se selecciona entre un enlace ("-") y metileno (-CH2-), Z es un enlace ("-"), y el resto quimioterapéutico de Fórmula (2) es un N-óxido (-A-N+(-O-)(-C(R11)2-C(R11)2-R9)2);
cada R11 se selecciona independientemente entre hidrógeno, deuterio y alquilo C1-3; y
cada R9 se selecciona independientemente entre flúor (-F), cloro (-Cl), bromo (-Br), yodo (-I), alquil sulfonato (-OSO2R40, en el que R40 se selecciona entre alquilo C1-4), (per)fluoroalquilsulfonato C1-4 (-o SO2R40, en el que R40 se selecciona entre (per)fluoroalquilo C1-4) y arilo sulfonato (sustituido) (-OSO2R40, en el que R40 se selecciona entre arilo C6-10).
De acuerdo con la divulgación, un resto quimioterapéutico de Fórmula (2) puede seleccionarse entre la estructura -A-N(-Z-C(R11)2-C(R11)2-R9)(-C(R11)2-C(R11)2-R9 y (-AN+(-O-)(-C(R11)2-C(R11)2-R9)2, en el que,
A se selecciona entre un enlace ("-"), metileno (-CH2-), oxígeno (-O-), metilenooxi (-CH2-O-), oxicarbonilo (-O-C(=O)-), metilenooxicarbonilo (-CH2-O-C(=O)-), carbonilo (-C(=O)-) y metilenocarbonilo (-CH2-C(=O)-); cada R11 se selecciona independientemente entre hidrógeno y deuterio; y
cada R9 se selecciona independientemente entre flúor (-F), cloro (-Cl), bromo (-Br), yodo (-I), alquil sulfonato (-OSO2R40, en el que R40 se selecciona entre alquilo C1-4), (per)fluoroalquilsulfonato C1-4 (-o SO2R40, en el que R40 se selecciona entre (per)fluoroalquilo C1-4) y arilo sulfonato (sustituido) (-OSO2R40, en el que R40 se selecciona entre arilo C6-10).
De acuerdo con la divulgación, un resto quimioterapéutico de Fórmula (2) tiene la estructura -A-NQ(-Z-C(R11)2-C(R11)2-R9)(-C(R11)2-C(R11)2-R9, en la que,
A es un enlace ("-");
Q es un par de electrones libres (:);
Z es un enlace ("-");
cada R11 se selecciona independientemente entre hidrógeno y deuterio; y
cada R9 se selecciona independientemente entre cloro (-Cl), bromo (-Br), yodo (-I), alquil sulfonato (-OSO2R40, en el que R40 se selecciona entre alquilo C1-4 alquilo) y (per)fluoroalquilsulfonato C1.4 (-OSO2R40, en el que R40 se selecciona entre (per)fluoroalquilo C1-4) y el resto quimioterapéutico es -N(-CH2-mDm-CH2-nDn-R9)2, en el que m y n se seleccionan independientemente entre 0, 1 y 2. En la presente divulgación de un compuesto de Fórmula (1), el resto quimioterapéutico comprende -N(-CH2-CH2-R9)2, en el que cada R9 se selecciona independientemente entre cloro (-Cl), bromo (-Br), yodo (-I), metilsulfoniloxi (-OSO2CH3) y trifluorometilsulfoniloxi (-OSO2CF3).
En la presente divulgación de un compuesto de Fórmula (1), R6 se selecciona entre ácido carboxílico (-COOH), ácidos hidroxámicos (-CONR12OH), ácidos borónicos (-B(OH)(OR12), ácidos fosfínicos o derivados de los mismos (-PO(OH)R12) y ácido fosfónico o derivados de los mismos (-PO(OH)(OR12)), ácido sulfínico (-SOOH), ácido sulfónico (-SO2OH), sulfonamida (-SO2NHR12 o -NHSO2R12) sulfonimida o acil sulfonimida (-SO2NHCOR12 o -CONHSO2R12), sulfonilureas (-SO2NHCONHR12 o -NHCONHSO2R12), amida (-CONHR12 or -NHCOR12), acilcianamida (-CONHCN), 2,2,2-trifluoroetan-1-ols (-CH(CF3)OH), 2,2,2-trifluorometil cetonas e hidratos de las mismas (-COCF3 y - C(OH)2CF3), heterociclos ácidos y tautómeros anulares de cualquiera de los anteriores, y oxocarbociclos ácidos o polonas cíclicas y formas de resonancia de cualquiera de los anteriores; en el que R12 se selecciona entre hidrógeno, alquilo C1-6, fluoroalquilo C1-4, cicloalquilo C3-6 y arilo C6-10.
Los compuestos de la presente invención son compuestos de Fórmula (1) en la que R6 es -COOH.
En la presente divulgación de un compuesto de Fórmula (1), cada R7 se selecciona independientemente entre hidrógeno, deuterio, halógeno, hidroxilo y alquilo C1-4 o dos R7 geminales junto con el átomo de carbono al que están unidos forman un anillo cicloalquilo C3-5.
Los compuestos de la presente invención son compuestos de Fórmula (1) en la que cada R7 es hidrógeno.
En la presente divulgación de un compuesto de Fórmula (1), R8 se selecciona entre hidrógeno, deuterio, halógeno, hidroxilo, alquilo C1-4, alcoxi C1-4, fluoroalquilo C1-4, fluoroalcoxi C1-4 y ciclopropilo.
Los compuestos de la presente invención son compuestos de Fórmula (1) en la que R8 es hidrógeno.
En la presente descripción de un compuesto de Fórmula (1), cada R10 se selecciona independientemente entre hidrógeno y alquilo C1-4, o dos R10 junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un heterociclo de 3 a 5 miembros.
En la presente divulgación de un compuesto de Fórmula (1), L es (-X-)a en la que a se selecciona entre 0, 1, 2, 3 y 4, y X se selecciona entre oxígeno (-O-), azufre (-S-), sulfinilo (-SO-), sulfonilo (-SO2-), carbonilo (-CO-), -C(R16)2- en la que R16 se selecciona independientemente entre hidrógeno, deuterio, halógeno, hidroxilo y alquilo C1-4 y amino (-NR17-), en el que R17 se selecciona entre hidrógeno, metilo, y etilo.
En la presente divulgación de un compuesto de Fórmula (1), comprende se selecciona de un enlace ("-"), metileno (-CH2-), fluorometileno (-CFH-), difluorometileno (-CF2-), hidroximetileno (-C(OH)H-), etano-1,1 -diilo (-CHCH3-), propano-2,2-diilo (-C(c H3)2-), propano-1,1-diilo (-c H(CH2-CH3)-), oxígeno (-O-), azufre (-S-), sulfinilo (-SO-), sulfonilo (-SO2-), carbonilo (-CO-) y amino (-NR17-), en el que R17 se selecciona entre hidrógeno, metilo, y etilo.
En determinadas realizaciones de un compuesto de Fórmula (1), la estereoquímica absoluta del átomo de carbono beta es (R).
En determinadas realizaciones de un compuesto de Fórmula (1), la estereoquímica absoluta del átomo de carbono beta es (S).
En determinadas realizaciones de un compuesto de Fórmula (1), la estereoquímica absoluta del átomo de carbono p tiene la configuración (R), la estereoquímica axial absoluta (atropisomería) es Ra, y la estereoquímica absoluta de un compuesto de fórmula (1) es (R,Ra).
En determinadas realizaciones de un compuesto de Fórmula (1), la estereoquímica absoluta del átomo - de carbono p tiene la configuración (R), la estereoquímica axial absoluta (atropisomería) es Sa, y la estereoquímica absoluta de un compuesto de fórmula (1) es (R,Sa).
En determinadas realizaciones de un compuesto de Fórmula (1), la estereoquímica absoluta del átomo de carbono p tiene la configuración (S), la estereoquímica axial absoluta (atropisomería) es Ra, y la estereoquímica absoluta de un compuesto de fórmula (1) es (S,Ra).
En determinadas realizaciones de un compuesto de Fórmula (1), la estereoquímica absoluta del átomo de carbono p tiene la configuración (S), la estereoquímica axial absoluta (atropisomería) es Sa, y la estereoquímica absoluta de un compuesto de fórmula (1) es (S,Sa).
En la presente divulgación, un compuesto de Fórmula (1) se selecciona entre:
Ácido 3-amino-3-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]propanoico (1);
Ácido 3-amino-3-[4-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]propanoico (2);
Ácido 3-amino-4-[4-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (4);
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (6);
Ácido (3S)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metoxi-fenil]butanoico (7);
Ácido (3S)-3-amino-4-[3-[bis(2-cloroetil)amino]-2,6-dimetil-fenil]butanoico (8);
Ácido (3S)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-metil-butanoico (9);
Ácido [(2R)-2-amino-3-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]propil]fosfínico (10);
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(bis(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (11);
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(bis(2-bromoetil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (12);
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-cloroetil(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metilfenil]butanoico (13);
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-bromoetil(2-cloroetil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (14);
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-bromoetil(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metilfenil]butanoico (15);
Ácido (3S)-3-amino-4-[[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]amino]-4-oxo-butanoico (16);
Ácido (3S)-3-amino-4-[2-[bis(2-cloroetil)amino]fenoxi]butanoico (17);
Ácido (3R)-3-amino-5-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]pentanoico (18);
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-cloroetil(clorometil)carbamoil)oxi-2-metilfenil]butanoico (19);
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)carbamoiloximetil]-2-nitro-fenil]butanoico (20);
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-cloroetoxi(2-cloroetil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (21);
Óxido de 3-[(2R)-2-amino-4-hidroxi4-oxo-butil]-W,A/-bis(2-cloroetil)-4-metil-bencenoamina (22); y
Ácido (3R)-3-amino-4-[2-[bis(2-cloroetil)carbamoil]fenil]butanoico (23);
o una sal farmacéuticamente aceptable o sales de cualquiera de los anteriores. En determinadas realizaciones de la presente invención, un compuesto de Fórmula (1) se selecciona entre:
Ácido 3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (3); y
Ácido (3S)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (5); o una sal farmacéuticamente aceptable o sales de cualquiera de los anteriores.
En determinadas realizaciones de cualquiera de los anteriores compuestos, una sal farmacéuticamente aceptable es la sal clorhidrato.
En determinadas realizaciones de cualquiera de los anteriores compuestos, una sal farmacéuticamente aceptable es la sal diclorhidrato.
En determinadas realizaciones de un compuesto de Fórmula (1), una sal farmacéuticamente aceptable es la sal clorhidrato.
En determinadas realizaciones de un compuesto de Fórmula (1), una sal farmacéuticamente aceptable es la sal diclorhidrato.
En determinadas realizaciones, los compuestos de Fórmula (1) son sustratos selectivos para el transportador LAT1/4F2hc.
En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una Vmáx dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 10% de la Vmáx de gabapentina. En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una Vmáx dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 20 % de la Vmáx de gabapentina. En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una Vmáx dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 30% de la Vmáx de gabapentina. En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una Vmáx dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 40% de la Vmáx de gabapentina. En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una Vmáx dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 50 % de la Vmáx de gabapentina. En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una Vmáx dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 60% de la Vmáx de gabapentina. En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una Vmáx dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 70% de la Vmáx de gabapentina. En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una Vmáx dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 80 % de la Vmáx de gabapentina. En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una Vmáx dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 90% de la Vmáx de gabapentina. En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una Vmáx dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 100 % de la Vmáx de gabapentina.
En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una captación dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 10 % de la de gabapentina medida a una concentración extracelular de 1 mM (1 mmol/l) y una captación dependiente de sistema A, de sistema N, de sistema ASC y de LAT2/4F2hc de menos del 50% de la de L-leucina medida a una concentración extracelular de 1 mM (1 mmol/l). En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una captación dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 10 % de la de gabapentina medida a una concentración extracelular de 1 mM (1 mmol/l); y una captación dependiente de sistema A, de sistema N, de sistema ASC y de LAT2/4F2hc de menos del 40 % de la de L-leucina medida a una concentración extracelular de 1 mM (1 mmol/l). En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una captación dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 10 % de la de gabapentina medida a una concentración extracelular de 1 mM (1 mmol/l); y una captación dependiente de sistema A, de sistema N, de sistema ASC y de LAT2/4F2hc de menos del 30 % de la de L-leucina medida a una concentración extracelular de 1 mM (mmol/l). En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una captación dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 10 % de la de gabapentina medida a una concentración extracelular de 1 mM (1 mmol/l); y una captación dependiente de sistema A, de sistema N, de sistema ASC y de LAT2/4F2hc de menos del 20 % de la de L-leucina medida a una concentración extracelular de 1 mM (1 mmol/l). En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una captación dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 10 % de la de gabapentina medida a una concentración extracelular de 1 mM (1 mmol/l); y una captación dependiente de sistema A, de sistema N, de sistema ASC y de LAT2/4F2hc de menos del 10 % de la de L-leucina medida a una concentración extracelular de 1 mM (1 mmol/l). En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una captación dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 10% de la de gabapentina medida a una concentración extracelular de 1 mM (1 mmol/l); y una captación dependiente de sistema A, de sistema N, de sistema ASC y de LAT2/4F2hc de menos del 5 % de la de L-leucina medida a una concentración extracelular de 1 mM (1 mmol/l). En determinadas realizaciones, los compuestos proporcionados por la presente divulgación exhiben una captación dependiente de LAT1/4F2hc de al menos el 10% de la de gabapentina medida a una concentración extracelular de 1 mM (1 mmol/l); y una captación dependiente de sistema A, de sistema N, de sistema ASC y de LAT2/4F2hc de menos del 1 % de la de L-leucina medida a una concentración extracelular de 1 mM (1 mmol/l).
Los compuestos de Fórmula (1) pueden adaptarse como profármacos para lograr propiedades farmacocinéticas deseables. Por ejemplo, los profármacos adecuados de derivados de p-aminoácidos p sustituidos y análogos de paminoácidos p sustituidos en se desvelan por Gallop, et al., Patente de EE.UU. N.° 7.109.239, Patente de EE.UU. N.° 6.972.341, Patente de EE.UU. N.° 6.818.787 y Patente de EE.UU. N.° 7.227.028. Los profármacos de los compuestos de Fórmula (1) incluyen los sistemas de profármacos desvelados por Gallop, et al., así como otros conocidos en la técnica.
Síntesis de compuestos
Los compuestos descritos en el presente documento pueden obtenerse a través de los métodos de síntesis generales ilustrados en los Esquemas 1-10. Los métodos de síntesis generales útiles en la síntesis de compuestos, precursores y materiales de partida descritos en el presente documento están disponibles en la técnica. Los materiales de partida útiles para preparar compuestos e intermedios de los mismos y/o practicar los métodos descritos en el presente documento, están disponibles en el mercado o pueden prepararse mediante métodos de síntesis bien conocidos (March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, M. B.Smith, 7a edición, John Wiley & Sons, Hoboken, Nueva Jersey, EE.UU., 2013; Advanced Organic Chemistry: Part B: Reaction and Synthesis, F. A. Carey y R. J. Sundberg, 5a edición, Springer, Alemania, 2010; Comprehensive Organic Transformations, 2a edición y R. C. Larock, Wiley-VCH, Weinheim, Alemania, 1999).
Adicionalmente, como será evidente para los expertos en la materia, puede ser necesario el uso de grupos protectores convencionales o estrategias protectoras para evitar que determinados grupos funcionales experimenten reacciones no deseadas. Los grupos protectores adecuados para diversos grupos funcionales así como las condiciones adecuadas para proteger y desproteger grupos funcionales particulares se conocen bien en la técnica. Por otro lado, muchos métodos para la retirada selectiva de grupos protectores sin afectar a la arquitectura molecular deseada también son bien conocidos en la técnica (Wuts y Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis, 4a ed, 2007, Wiley-Interscience, John Wiley & Sons, Inc., Hoboken, Nueva Jersey).
Se apreciará que cuando se dan condiciones de proceso típicas o preferidas, por ejemplo, temperaturas de reacción, tiempos de reacción, relaciones molares de reactivos, disolventes, presiones, etc., también pueden usarse cualesquiera otras condiciones de proceso. Las condiciones óptimas de reacción pueden variar con los reactivos, disolventes, grupos funcionales y grupos protectores particulares usados, pero dichas condiciones pueden determinarse por un experto en la materia mediante procedimientos de optimización rutinarios.
Adicionalmente, determinados compuestos proporcionados por la presente divulgación pueden contener uno o más centros estereogénicos. En consecuencia y, si se desea, dichos compuestos pueden prepararse o aislarse como estereoisómeros puros, por ejemplo, como enantiómeros individuales, diastereómeros, atropisómeros, rotámeros o como mezclas enriquecidas en estereoisómeros o racematos. Todos dichos estereoisómeros están incluidos dentro del alcance de la presente divulgación. Pueden prepararse estereoisómeros puros (o mezclas enriquecidas de los mismos) usando, por ejemplo, materiales de partida ópticamente activos, reactivos estereoselectivos tales como catalizadores quirales y auxiliares bien conocidos en la técnica. Como alternativa, las mezclas racémicas de tales compuestos pueden separarse o enriquecerse parcialmente usando, por ejemplo, métodos cromatográficos con fases estacionarias quirales, agentes de resolución quiral y similares, también bien conocidos en la técnica y fácilmente adaptables al compuesto particular que se va a separar.
Ha habido un interés cada vez mayor en la síntesis de p-aminoácidos con diversos patrones de sustitución. Dependiendo de la ubicación y el número de sustituyentes, los p-aminoácidos se categorizan como aminoácidos (a) p2- (mono-a-sustituidos), (b) p3- (mono-p-sustituidos), (c) p23- (a,p-di-sustituidos), (d) p22- (a,a-disustituidos o ageminal-disustituidos), (e) p33- (p,p-disustituidos o p-geminal-disustituidos), (f) p223- (a,a,p-trisustituidos), (g) p233-(a,p,p-trisustituidos) o (h) p2233- (a,a,p,p-tetra-sustituidos). Muchos métodos para la síntesis de p-aminoácidos protegidos y no protegidos con una amplia diversidad de tipos y números de sustituyentes en forma racémica, enantioo diastereoméricamente enriquecida o pura a partir de materiales de partida comerciales o conocidos son bien conocidos en la técnica (Enantioselective Synthesis of p-Amino Acids, 2a edición, E. Juaristi y V. Soloshonok, John Wiley & Sons, 2005, Hoboken, Nueva Jersey, EE.UU., 2005; Smith, Methods of Non-a-Amino Acid Synthesis, Marcel Dekker, Inc., Nueva York, EE.UU., 1995; Cole, Tetrahedron, 1994, 50 (32), 9517-9582; Juaristi, et al., Aldrich Chim. Acta, 1994, 27(1), 3-11; Lelais y Seebach, Biopolymers (Peptide Science), 2004, 76, 206-243; Sewald, Amino Acids, 1996, 11, 397-408; Seebach, et al., Synthesis, 2009, (1), 1-32; y Abele y Seebach, Eur. J. Org. Chem., 2000, (1), 1­ 15).
En particular, se conocen bien en la técnica muchos métodos para preparar p-aminoácidos racémicos u ópticamente activos p3-sustituidos protegidos y no protegidos, análogos de p-aminoácidos o (bio)isósteros de ácido carboxílico de p-aminoácidos a partir de materiales de partida comerciales o conocidos.
En determinadas realizaciones, tales derivados pueden usarse como materiales de partida convenientes para la preparación de los compuestos diana proporcionados por la presente divulgación. En determinadas realizaciones, pueden usarse p-aminoácidos racémicos u ópticamente activos p3-sustituidos protegidos y no protegidos adecuadamente funcionalizados, análogos de p-aminoácidos o (bio)isósteros de ácido carboxílico de p-aminoácidos como materiales de partida para la preparación de los compuestos diana proporcionados por la presente divulgación.
En determinadas realizaciones, los materiales de partida pueden usarse en su forma totalmente protegida en donde el grupo amino o un equivalente sintético o un precursor del mismo y el ácido carboxílico, ácido fosfínico, ácido sulfínico, (bio)isósteros de ácido carboxílico o equivalentes sintéticos o precursores de cualquiera de los anteriores están apropiadamente protegidos.
En determinadas realizaciones, los materiales de partida pueden usarse en su forma semiprotegida en donde el grupo amino o un equivalente sintético o un precursor del mismo está protegido y el grupo ácido carboxílico, ácido fosfínico, ácido sulfínico o grupo funcional (bio)isóstero de ácido carboxílico o equivalentes sintéticos o precursores de cualquiera de los anteriores están desprotegidos o libres.
En determinadas realizaciones, los materiales de partida pueden usarse en su forma semiprotegida en donde el grupo amino está desprotegido o libre y el ácido carboxílico, ácido fosfínico, ácido sulfínico o (bio)isósteros de ácido carboxílico o equivalentes sintéticos o precursores de cualquiera de los anteriores están apropiadamente protegidos.
En determinadas realizaciones, los materiales de partida pueden usarse en su forma completamente desprotegida en donde el grupo amino y el ácido carboxílico, ácido fosfínico libre, ácido sulfínico libre o (bio)isóstero de ácido carboxílico libre o equivalentes sintéticos o precursores de cualquiera de los anteriores están desprotegidos.
En determinadas realizaciones, los p-aminoácidos racémicos u ópticamente activos p3 sustituidos protegidos y desprotegidos, los análogos de p-aminoácidos o los (bio)isósteros del ácido carboxílico de los p-aminoácidos llevan un grupo funcional químico que enlaza el átomo de carbono p3 a un sistema de anillo aromático. En determinadas realizaciones, el sistema de anillo aromático se funcionaliza con un grupo de anclaje para instalar un resto quimioterapéutico.
Los métodos de manipulaciones de síntesis y modificaciones del andamio de p-aminoácidos protegido o no protegido subyacente son bien conocidos en la técnica. En determinadas realizaciones, el andamio subyacente de paminoácidos subyacente puede modificarse para permitir la incorporación regio- y/o estereoselectiva de funcionalidades moleculares auxiliares. Las funcionalidades moleculares auxiliares pueden, por ejemplo, incorporarse para modular la interacción con las proteínas transportadoras LAT1, por ejemplo, la efectividad de translocación a través de membranas biológicas (unión a la proteína transportadora LAT1 y capacidad de transporte mediado por LATI), ayudar a la modulación de parámetros fisicoquímicos, o para modular la actividad del resto de W-mostaza fisiológicamente activo, por ejemplo, citotoxicidad.
En determinadas realizaciones, el anillo de arilo subyacente puede modificarse para permitir la incorporación regioselectiva de grupos funcionales que pueden convertirse en restos quimioterapéuticos mediante el uso de reactivos, métodos y protocolos bien conocidos en la técnica.
En determinadas realizaciones, el anillo de arilo subyacente puede modificarse para permitir la incorporación regioy/o estereoselectiva de funcionalidades moleculares auxiliares en el andamio areno. Las funcionalidades moleculares auxiliares pueden, por ejemplo, incorporarse para modular la interacción con las proteínas transportadoras LAT1, por ejemplo, la efectividad de translocación a través de membranas biológicas (unión a la proteína transportadora LAT1 y capacidad de transporte mediado por LAT1) o para modular la actividad del resto quimioterapéutico fisiológicamente activo, por ejemplo, citotoxicidad.
Muchos otros métodos para la preparación de los p-aminoácidos racémicos u ópticamente activos p3 sustituidos protegidos y desprotegidos, apropiadamente funcionalizados o sustituidos, análogos de p-aminoácidos o (bio)isósteros de ácido carboxílico de p-aminoácidos, derivados o precursores de cualquiera de los anteriores a partir de materiales de partida comerciales o conocidos y métodos y protocolos de empleo se describen en el presente documento, se describen en la técnica o serán fácilmente evidentes para el experto en la materia. En consecuencia, los métodos presentados en los esquemas proporcionados por la presente divulgación son ilustrativos más que comprehensivos.
En referencia al Esquema 1, los materiales de partida seleccionados y representativos para la preparación de paminoácidos p-ramificados funcionalizados con W-mostaza, los análogos de p-aminoácidos o los (bio)isósteros de ácido carboxílico de p-aminoácidos son compuestos de Fórmula (A). Esta selección no pretende ser limitante de ninguna manera.
Con respecto al Esquema 1, en determinadas realizaciones R1 y/o R5 y el engarce L se definen como se describen en el presente documento; uno de R2, R3, y R4 en compuestos de Fórmula (A) es -E-MH, en la que E es un enlace ("-"), un átomo de oxígeno (-O-), un grupo metileno (-CH2-), un grupo metilenooxi (-CH2-O-), un grupo carbonilo (-CO-) o un grupo metilenocarbonilo (-CH2-CO-), y en el que MH es un grupo amino (-NH2), un grupo hidroxilo (-OH) o un grupo sulfhidrilo (-SH). Cada uno de los otros R2 , R3 y R4 restantes es hidrógeno; cada R7 y cada R8 es hidrógeno.
Con respecto al Esquema 1, por ejemplo, (a) E-MH es equivalente a un grupo amino aromático primario (-NH2, anilina) cuando E es un enlace ("-") y MH es un grupo amino (-NH2), (b) -E-MH es equivalente a un grupo O-aril hidroxilamino primario (-O-NH2) cuando E es un átomo de oxígeno (-O-) y MH es un grupo amino (-NH2), (c) -E-MH es equivalente a un grupo aminometilo primario (-CH2-NH2, amina bencílica primaria) cuando E es un grupo metileno (-CH2-) y MH es un grupo amino (-NH2), (d) -E-MH es equivalente a un grupo hidroxilo aromático (-OH, fenol) cuando E es un enlace ("-") y MH es un grupo hidroxilo (-OH), (e) -E-MH es equivalente a un grupo hidroximetilo (-CH2-OH, alcohol bencílico) cuando E es un grupo metileno (-CH2-) y MH es un grupo hidroxilo (-OH), (f) -E-MH es equivalente a un grupo hidroxilamino O-bencílico primario (-CH2-O-NH2) cuando E es un grupo metilenoxi (-CH2-O-) y Mh es un grupo amino (-NH2), (g) -E-MH es equivalente a un grupo sulhidrilo aromático (-SH, derivado de tiofenol) cuando E es un enlace ("-") y MH es un grupo hidroxilo (-OH), (h) -E-MH es equivalente a un grupo metilensulhidrilo (-CH2-SH, tiol bencílico) cuando E es un grupo metileno (-CH2-) y MH es un grupo sulfhidrilo (-SH), (i) -E-MH es equivalente a un grupo de ácido carboxílico aromático (-CO-OH, ácido benzoico) cuando E es un grupo carbonilo (-C(=O)-) y MH es un grupo hidroxilo (-OH), (j) -E-MH es equivalente a un grupo ácido carboxílico (-CO-OH, ácido benzoico) cuando E es un grupo metilencarbonilo (-CH2-C(=O)-) y MH es un grupo hidroxilo (-OH).
Los expertos en la materia entenderán que en algunas realizaciones de la divulgación el grupo "-E-" en los grupos funcionales -E-MH presentados en los siguientes esquemas es equivalente al grupo -A- en la definición de la composición de un resto quimioterapéutico como se describe en el presente documento.
Con respecto al Esquema 1, en determinadas realizaciones R20 en compuestos de Fórmula (A) es un grupo carboxilo protegido, tal como un alquil éster inferior de un grupo carboxilo, por ejemplo, un metilo, etilo, o éster terc-butílico o un derivado de éster bencílico, por ejemplo, bencilo, pentametilbencilo o (4-metoxi)bencilo. En determinadas realizaciones, R20 en compuestos de Fórmula (A) es un grupo éster ferc-butílico (CO2fBu). En determinadas realizaciones, R20 en compuestos de Fórmula (A) es un grupo éster metílico (CO2Me).
Con respecto al Esquema 1, en determinadas realizaciones, R20 en compuestos de Fórmula (A) es un derivado de ácido fosfínico protegido, por ejemplo, 1,1 -dietiloxietiletoxifosfino-1 -ona (-P(=O)(OEt)[C(OEt)2Me] (Patente U.S. n.° 8.344.028; Baylis, Tetrahedron Lett, 1995, 36(51), 9385-9388; y Burgos-Lepley, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2006, 16, 2333-2336). En determinadas realizaciones, R20 en compuestos de Fórmula (A) tiene fosfonatos y fosfinatos protegidos alternativamente como se describe en la técnica (Palacios, et al., Chem. Rev., 2005, 105,899-931; y Lejzak, et al., J. Enzyme Inhibit., 1993, 7(2), 97-103).
Con respecto al Esquema 1, en determinadas realizaciones, R20 en compuestos de Fórmula (A) es un derivado precursor de ácido sulfínico protegido, por ejemplo, un 2-mercaptobenzotiazol (Carruthers, et al., Bioorg. Med. Chem.
Lett, 1995, 5, 237-240; Carruthers, etal., Bioorg. Med. Chem. Lett, 1998, 5, 3059-3064; y Okawara, etal., Chem. Lett., 1984, 2015; C. E. Burgos-Lepley, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2006, 16, 2333-2336).
Con respecto al Esquema 1, en determinadas realizaciones, R20 en los compuestos de Fórmula (A) es un (bio) isóstero de ácido carboxílico protegido o desprotegido que incluye un 1H-tetrazol protegido o no protegido (Ballatore, et al., ChemMedChem, 2013, 8(3), 385-395; Bryans, et al., Patente U.S. n.° 6.518.289; y Burgos-Lepley, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2006, 16, 2333-2336).
Con respecto al Esquema 1, en determinadas realizaciones de compuestos de Fórmula (A), Q es N(H)-PG cuando PG es un grupo protector de nitrógeno adecuado, por ejemplo, terc-butoxicarbonilo (Boc), aliloxicarbonilo (alloc), benciloxicarbonilo (Cbz, Z), etoxicarbonilo, metoxicarbonilo, (fi/S)-1-fenil-etoxicarbonilo, (fi)-1-fenil-etoxicarbonilo, (S)-1-fenil-etoxicarbonilo, 1-metil-1-fenil-etoxicarbonilo, formilo, acetilo, trifluoroacetilo, benzoílo, trifenilmetilo (tritilo), 4-metoxifenil-difenilmetilo o di-(4-metoxifenil)-fenilmetilo y similares. En determinadas realizaciones, PG en compuestos de Fórmula (A), es terc-butoxicarbonilo (Boc) y Q es N(H)Boc (N(H)CO2tBu). En determinadas realizaciones de compuestos de Fórmula (A), PG es benciloxicarbonilo (Cbz, Z) y Q es N(H)-Cbz (N(H)COOBn). En determinadas realizaciones de compuestos de Fórmula (A), PG es acetilo y Q es N(H)-Ac (N(H)COMe).
Con respecto al Esquema 1, en determinadas realizaciones de compuestos de Fórmula (A), Q es N(PG)2, cuando PG es un grupo protector de nitrógeno, tal como un grupo protector tipo imida, por ejemplo, ftalilo o terc-butoxicarbonilo (Boc). En determinadas realizaciones de compuestos de Fórmula (A) PG es ftalilo y Q es N(ftalilo). En determinadas realizaciones de compuestos de Fórmula (A), PG es terc-butoxicarbonilo y Q es N(Boc)2.
Con respecto al Esquema 1, en determinadas realizaciones de compuestos de Fórmula (A), la funcionalidad amina protegida es una imina en la que Q es N es CR30R31 y cada uno de R30 y R31 se selecciona independientemente de alquilo C1-4 ramificado, alquilo C1-4 no ramificado, arilo sustituido, arilo no sustituido, heteroarilo sustituido y heteroarilo no sustituido.
En consecuencia, las estructuras presentadas en los esquemas proporcionados por la presente divulgación son ilustrativas en lugar de exhaustivas.
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Con respecto al Esquema 2, en determinadas realizaciones R1 y/o R5 , R20, E, el engarce L y los grupos protectores PG y Q se definen como se describen en el presente documento; uno de R2 , R3 y R4 en compuestos de Fórmula (C) es -E-NH2, en la que E es un enlace ("-"), un átomo de oxígeno (-O-), un grupo metileno (-CH2-) o grupo metilenoxi (-CH2-O-) y en el que MH es un grupo amino (-NH2) de modo que -E-NH2 es equivalente a a) un grupo amino aromático primario (-NH2, anilina), b) un grupo O-aril hidroxilamino primario (-O-NH2), c) un grupo aminometilo primario (-CH2-NH2), o un grupo O-bencil hidroxilamino primario (-CH2-O-NH2). Cada uno de los otros R2 , R3 y R4 restantes es hidrógeno; cada R7 y cada R8 es hidrógeno. X es un grupo saliente adecuado por ejemplo, cloro (-Cl) o bromo (-Br).
Con respecto al Esquema 2, la conversión del grupo amino primario como en los compuestos de fórmula (B) al grupo N,N-bis-(2-hidroxietil)amino (N,N-bis-(2-hidroxietilación)) como en los compuestos de Fórmula (C) puede lograrse haciendo reaccionar compuestos de Fórmula (B) en disolventes adecuados tales como aproximadamente 25-75 % en volumen de ácido acético acuoso (HOAc), ácido acético glacial, agua, tetrahidrofurano (THF), etanol (EtOH), 1,4-dioxano, o mezclas de cualquiera de los anteriores con un exceso de óxido de etileno (oxirano) (aproximadamente 4­ 20 equivalentes) a una temperatura de aproximadamente -20 °C a aproximadamente la temperatura ambiente durante aproximadamente 12-48 horas. Como alternativa, la mezcla de reacción se puede calentar en un recipiente de reacción sellado desde aproximadamente 80-140 °C durante tiempos comparables (Palmer, et al., J. Med. Chem. 1990, 33(1), 112-121; Jordan, et al., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10(8), 2625-2633; Abela Medici, et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. I, 1997, (20), 2258-2263; Feau, et al., Org. Biomolecular Chem., 2009, 7(24), 5259-5270; Springer, et al., J. Med. Chem., 1990, 33(2), 677-681; Taylor, et al., Chem. Biol. Drug Des., 2007, 70(3), 216-226; Buss, et al., J. Fluorine Chem., 1986, 34(1), 83-114; Larden y Cheung, Tetrahedron Lett., 1996, 37(42), 7581-7582; Spreitzer y Puschmann, Monatshefte für Chemie, 2007, 138(5), 517-522; Niculesscu-Duvaz, et al., J. Med. Chem., 2004,47(10), 2651-2658; Weisz, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1995, 5(24), 2985-2988; Thorn, et al., J. Org. Chem, 1975,40(11), 1556-1558; Baraldini, et al., J. Med., Chem., 2000, 53(14), 2675-2684; Zheng, et al., Bioorg., Med., Chem., 2010, 18(2), 880-886; Gourdi, et al., J., Med., Chem., 1990, 33(4), 1177-1186; Haines, et al., J. Med. Chem., 1987, 30, 542-547; Matharu, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2010, 20, 3688-3691; y Kupczyk-Subotkowska, et al., J. Drug Targeting, 1997, 4(6), 359­ 370).
Con respecto al Esquema 2, la conversión del grupo amino primario como en los compuestos de Fórmula (B) en el grupo N,N=bis-(2-hidroxietil)amino (N,N-bis-(2-hidroxietilación)) como en los compuestos de Fórmula (C) puede lograrse haciendo reaccionar compuestos de Fórmula (B) en disolventes adecuados tales como agua con un exceso de aproximadamente 2-5 equivalentes de un derivado de 2-halógeno etanol adecuado, por ejemplo, 2-cloroetanol (ClCH2CH2OH) o 2-bromoetanol (BrCH2CH2OH), y aproximadamente 2,0 equivalentes de una base inorgánica adecuada, tal como bicarbonato sódico (NaHCOa), carbonato sódico (Na2CO3) o carbonato de calcio (CaCO3) a aproximadamente temperatura de reflujo durante aproximadamente 8-24 horas. Opcionalmente, la reacción puede realizarse en presencia de a cantidad catalítica (aproximadamente 10 % mol) de yoduro potásico (KI) (Palmer, et al., J. Med. Chem. 1990, 33(1), 112-121; Coggiola, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2005, 15(15), 3551-3554; Verny y Nicolas, J. Label. Cmpds Radiopharm., 1988, 25(9), 949-955; y Lin, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2011, 21(3), 940-943).
Con respecto al Esquema 3, en determinadas realizaciones, los haluros de arilo deficientes en electrones de Fórmula (D), activados con sustituyentes fuertemente captadores de electrones para reacciones de sustitución aromática nucleofílica (SNAr) en el anillo de arilo, pueden ser materiales de partida útiles para incorporar grupos N,N-bis-(2-funcionalizado)etilamino como en los compuestos de fórmula (E) en los que los correspondientes grupos N,N-bis-(2-funcionalizados)etilamino son grupos N,N-bis-(2-hidroxietil)amino. Los grupos salientes de uso común (-X) para reacciones SNAr incluyen halógeno, por ejemplo, flúor (-F), cloro (-Cl), bromo (-Br), con grupos de activación de accesorios en la posición 2 o 4 con respecto al grupo saliente (posiciones orto o para). Tales grupos disminuyen la densidad de electrones en el anillo areno y aumentan la susceptibilidad al ataque nucleofílico y al desplazamiento del grupo saliente (-X). Ejemplos de grupos activadores fuertemente captadores de electrones (EWG) incluyen trifluorometilo (-CF3), ciano (-CN), nitro (-NO2), amida (-CON(R10)2) y formilo (-CHO).
Las aminas secundarias útiles para la introducción de la funcionalidad N,N-bis-(2-hidroxietil)amino incluyen dietanolamina (HN(CH2CH2OH)2), derivados de dietanolamina protegidos, por ejemplo, Dietanolamina protegida con O-benciléter (HN(CH2CH2OBn)2) o precursores del grupo N,N-bis-(2-hidroxietil)amino putativo, por ejemplo, 3-pirrolina. El empleo de una dietanolamina protegida con O-benciléter (HN(CH2CH2OBn)2) o 3-pirrolina requiere la conversión de los productos de sustitución de intermedio correspondientes en compuestos de fórmula (E) que lleven los grupos amino N,N-bis-(2-hidroxietilo) objetivo usando métodos bien conocidos en la técnica.
Con respecto al Esquema 3, en determinadas realizaciones R1 y/o R5 , R10, R20, el engarce L, el grupo protector PG y Q, el grupo de captación de electrones (EWG), el grupo saliente (-X) y la amina secundaria HNR2 se definen como se describe en el presente documento; R1 y/o R5 también pueden representar un grupo captador de electrones (EWG); uno o más de R2, R3 y R4 en compuestos de Fórmula (G) o de Fórmula (H) es un grupo saliente adecuado (-X)), uno o más de R2 , R3 y R4 es un grupo captador de electrones (EWG) preferiblemente en la posición 2 o 4 con respecto al grupo saliente X; cada uno de los otros R2, R3 y R4 restantes es hidrógeno; cada uno de R7 y R8 es hidrógeno.
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Con respecto al Esquema 3, los derivados de N,N bis(2-hidroxietil)amino como en los compuestos de Fórmula (E) pueden prepararse mediante reacciones de sustitución aromática nucleofílica (SNAr) de haluros aromáticos de Fórmula (D) activados por grupos captadores de electrones (EWG), por reacción con un exceso de aproximadamente 1,5-5 equivalentes de la amina pura, por ejemplo, HN(CH2CH2OH)2, HN(CH2CH2OBn)2 o 3-pirrolina, (condiciones de reacción débilmente básicas) o soluciones de la amina secundaria en disolventes anhidros apróticos polares, por ejemplo, dimetilsulfóxido anhidro (DMSO), N,N-dimetilformamida (DMF), N,N-dimetilacetamida (DMAc), acetonitrilo (MeCN), 1,4-dioxano, tetrahidrofurano (THF), o mezclas de los anteriores a una temperatura de aproximadamente 80­ 200 °C (tubo cerrado herméticamente), durante aproximadamente 1-12 horas para proporcionar compuestos funcionalizados con N,N-bis(2-hidroxietil)amino de Fórmula (E). La reacción también se puede llevar a cabo en presencia de un catalizador, por ejemplo, polvo de cobre (aproximadamente 10 % mol) (Atwell, etal., J. Med. Chem., 2007, 50(6), 1197-1212; Palmer, et al., J. Med. Chem., 1994, 37, 2175-2184; Palmer, et al., J. Med. Chem., 1992, 35(17), 3214-3222; Palmer, et al., J. Med. Chem, 1990, 33(1), 112-121; Davies, et al., J. Med. Chem. 2005, 48(16), 5321-5328; Jordan, et al., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10(8), 2625-2633; Dheyongera, et al., Bioorg. Med. Chem., 2005, 13(3), 689-698; Lin, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2011,21(3), 940-943; y Ferlin, et al., Bioorg. Med. Chem., 2004, 12(4), 771-777).
Con respecto al Esquema 3, los métodos para convertir el grupo N,N-bis-(2-benciloxietil)amino en un grupo N,N-bis-(2-hidroxietil)amino incluyen, por ejemplo, la hidrogenólisis catalítica de los grupos de éter bencílico usando catalizadores heterogéneos, por ejemplo, Pd al 5-10% sobre carbono (Pd/C) o Raney®-níquel en condiciones de reacción de hidrogenación estándar son conocidas en la técnica (Vincent y Prunet, Tetrahedron Lett, 2006, 47(24), 4075-4077).
Con respecto al Esquema 3, a conversión del anillo 3-pirrolina del resto N-aril-3-pirrolina en un grupo N,N-bis-(2-hidroxietil)amino como en los compuestos de Fórmula (E) incluye la escisión oxidativa del C= C-doble con el reactivo de Lemieux-Johnson (tetróxido de osmio/peryodato sódico, OsO4/NaIO4) o por ozonolisis con una mezcla de gas O3/O2. El tratamiento reductor, por ejemplo, con complejo de borano-dimetilsulfuro (BH3-Me2S), trifenilfosfina (Ph3P), tiourea (C(=S)(NH2)2) o polvo de cinc, produce el intermedio de grupos N,N-bis(2-oxoetil)amino que posteriormente se pueden reducir al grupo N,N-bis-(2-hidroxietil)amino deseado como en los compuestos de Fórmula (E) con reactivos reductores adecuados, por ejemplo, complejo borano-THF (BH3 THF), o borohidruro sódico (NaBH4), en condiciones de reacción estándar (Palmer y Denny, Synth. Commun., 1987, 17 (5), 601-610).
En general, la actividad biológica de las mostazas nitrogenadas se basa en la presencia de una funcionalidad N,N-bis (2-cloroetilo). Los efectos quimioterapéuticos y citotóxicos están directamente asociados a la alquilación del ADN debido al fuerte carácter electrofílico de la funcionalidad N,N-bis(2-cloroetilo). La formación de enlaces covalentes que incluyen enlaces cruzados entre cadenas (ICL) es altamente citotóxica e implica la interrupción de procesos celulares fundamentales, incluida la replicación del ADN que conduce a la muerte celular.
En la técnica se conocen muchos métodos y reactivos para convertir alcoholes primarios en cloruros de alquilo primarios, incluida la conversión de grupos N,N-bis(2-hidroxietil)amino en grupos N,N-bis(2-cloroetil)amino. Los métodos más comunes incluyen el uso de ácido clorhídrico concentrado (HCl) y varios cloruros inorgánicos de azufre o fósforo que se usan en forma pura o como soluciones en disolventes inertes como hidrocarburos clorados, hidrocarburos aromáticos o disolventes polares no próticos, a temperatura ambiente o a temperaturas elevadas. Otros métodos y reactivos de cloración útiles incluyen, por ejemplo, combinaciones de trifenilfosfina y tricloroacetonitrilo (Ph3P/Cl3CCN), dicloruro de trifenilfosfina (Ph3PCh) (preparada a partir de Ph3P y Ch), trimetilsililcloruro y tricloruro de bismuto (111) (Me3SiCl/BiCl3), mezclas de Ph3P y tetracloruro de carbono (CCU) o cloruro de metanosulfonilo (MeSO2Cl) en piridina a temperatura elevadas.
Con respecto al Esquema 4, un experto en la técnica apreciará que la presencia de un grupo protector o funcional particular en los compuestos de Fórmula (F) y Fórmula (G) determina la elección de un reactivo, método o condición de reacción particular para la reacción de doro-deshidroxiladón.
Con respecto al Esquema 4, en determinadas realizaciones R1 y/o R5, R20, el engarce L, E, los grupos protectores PG y Q se definen como se describen en el presente documento; uno de R2, R3 y R4 en compuestos de Fórmula (F) es un grupo -E-W,W-bis(2-hidroxietil)amino (-E-N(CH2-CH2-OH)2); cada uno de los otros R2, R3 y R4 restantes es hidrógeno; y cada uno de R7 y R8 es hidrógeno.
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Con respecto al Esquema 4, en algunas realizaciones, los compuestos de W,W-bis(2-hidroxietilo) de fórmula (F) se pueden hacer reaccionar con un exceso de aproximadamente 2-15 equivalentes de cloruro de tionilo (SOCl2) ya sea en forma pura o como una solución en un disolvente orgánico anhidro, por ejemplo, diclorometano (d Cm ), cloroformo (CHCl3), 1,2-dicloroetano (DCM), benceno mezclas de cualquiera de los anteriores a temperaturas de aproximadamente 0 °C (baño de hielo) -40 °C o calentado a reflujo durante aproximadamente 0,5-3 horas para proporcionar compuestos de Fórmula (M) o de Fórmula (N) (Palmer, et al., J. Med. Chem. 1990, 33(1), 112-121; Jordan, et al., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10(8), 2625-2633; Abela Medici, et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1997, (20), 2258-2263; Taylor, et al., Chem. Biol. Drug Des., 2007, 70(3), 216-226; Dheyongera, Bioorg. Med. Chem. 2005, 13(3), 689-698; Zheng, Bioorg. Med. Chem. 2010, 18(2), 880-886; Gourdi, J. Med. Chem., 1990, 33(4), 1177-1186; y Lin, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2011, 21(3), 940-943). La reacción se puede llevar a cabo opcionalmente en presencia de una cantidad catalítica de cloruro de cinc (ZnCh) (10 % mol a 40 % mol) o en presencia de una cantidad catalítica de W,W-dimetilformamida (DMF) para facilitar la reacción (Squires, et al., J. Org. Chem., 1975, 40(1), 134­ 136; y Abela Medici, et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1997, (20), 2258-2263).
Con respecto al Esquema 4, en algunas realizaciones, los compuestos de W,W-bis(2-hidroxietilo) de Fórmula (F) también se pueden hacer reaccionar con un exceso de aproximadamente 2-10 equivalentes de oxicloruro de fósforo (V) (cloruro de fosforilo, POCh) ya sea en forma pura o como una solución en un disolvente orgánico anhidro, por ejemplo, benceno, acetonitrilo, piridina, o mezclas de cualquiera de los anteriores a una temperatura de aproximadamente 0 °C (baño de hielo) a aproximadamente la temperatura ambiente. La mezcla de reacción también se puede calentar desde aproximadamente 80 °C hasta aproximadamente la temperatura de reflujo durante aproximadamente 0,5-6 horas para proporcionar compuestos de Fórmula (G) (Palmer, et al., J. Med. Chem. 1990, 33(1), 112-121; Feau, et al., Org. Biomolecular Chem., 2009, 7(24), 5259-5270; Valu, et al., J. Med. Chem., 1990, 33(11), 3014-3019; P. G. Baraldini, et al., J. Med., Chem., 2000, 53(14), 2675-2684; Gourdi, et al., J., Med., Chem., 1990, 33(4), 1177-1186; Haines, et al., J. Med. Chem., 1987, 30, 542-547; y Matharu, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2010, 20, 3688-3691).
Con respecto al Esquema 4, en algunas realizaciones, los compuestos de W,W-bis(2-hidroxietilo) de fórmula (F) también se pueden hacer reaccionar con un exceso de tetracloruro de carbono (CCU), opcionalmente en un disolvente inerte, por ejemplo, diclorometano (DCM), en presencia de un exceso de trifenilfosfina (Ph3P) durante aproximadamente 8-24 horas a aproximadamente temperatura ambiente o a temperatura de reflujo durante aproximadamente 2-6 horas para proporcionar compuestos de Fórmula (G) (Buss, et al., J. Fluorine Chem., 1986, 34(1), 83-114; y Kupczyk-Subotkowska, et al., J. Drug Targeting, 1997, 4(6), 359-370).
Con respecto al Esquema 4, en algunas realizaciones, los compuestos de W,W-bis(2-hidroxietilo) de fórmula (F) también se pueden hacer reaccionar con cloruro de metanosulfonilo (MeSO2Cl, MsCl) en piridina anhidra a aproximadamente la temperatura ambiente o a aproximadamente 70-100 °C durante aproximadamente 1-3 horas para proporcionar compuestos de Fórmula (G) (Jordan, et al., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10(8), 2625-2633; Abela Medici, et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1997, (20), 2258-2263; Springer, et al., J. Med. Chem., 1990, 33(2), 677-681; y Larden y Cheung, Tetrahedron Lett., 1996, 37(42), 7581-7582).
Con respecto al Esquema 5, aunque los haluros son grupos salientes comunes en reacciones de sustitución nucleofílica con fines de síntesis, a menudo es más conveniente utilizar los correspondientes alcoholes tales como los que se encuentran en los grupos W,W-bis(2-hidroxietil)amino de los compuestos de Fórmula (H). Dado que el OH generalmente se considera un grupo saliente pobre, a menos que esté protonado, la conversión de un grupo hidroxi como en los grupos N,N-bis (2-hidroxietil) amino de compuestos de Fórmula (H) en grupos éster reactivos, más comúnmente grupos éster sulfónico, convierte el grupo hidroxilo en un grupo funcional con una mayor susceptibilidad a ser desplazado por un nucleófilo entrante, incluidos los iones halogenuro. Los grupos N,N-bis(2-aril- o (polifluoro)alquilsulfoniloxi)amino de aril- o (polifluoro)alquilsulfonatos de Fórmula (I) y ésteres sulfónicos similares se preparan con mayor frecuencia a partir de grupos N,N-bis(2-hidroxi)amino de dioles de fórmula (H) mediante reacción con un cloruro o anhídrido de aril- o (polifluoro)alquil-sulfonilo apropiado en presencia de una base adecuada, por ejemplo, piridina (catalizador nucleofílico). Además, son frecuentemente usados para activación como grupos de salida aún más potentes, grupos éster sulfónico aromáticos (R40 es arilo (substituido)), grupos éster sulfónico alifáticos (R40 es arilo (substituido)) y, en particular, grupos éster sulfónico(poli)fluorinados (R40 es poli-F-alquilo).
Con respecto al Esquema 5, en ciertas realizaciones el grupo R40 en los compuestos de Fórmula (I) o Fórmula (K) es, por ejemplo, fenilo y el grupo saliente es fenilsulfoniloxi (PhSO2O), 4-metilfenilo (para-metilfenilo) y el grupo saliente es tosilato (4-metilfenilsulfoniloxi, TsO), 4-bromofenilo (para-bromofenilo) y el grupo saliente es brosilato (4-bromofenilsulfoniloxi, BsO) o 4-nitrofenilo (para-nitrofenilo) y el grupo saliente es nosilato (4-nitrofenilsulfoniloxi, NsO), metilo y el grupo saliente es mesilato (metanosulfoniloxi, MsO), trifluometilo y el grupo saliente es triflato (trifluorometanosulfoniloxi, TfO), nonafluoro-n-butilo y el grupo saliente es nonaflato (nonafluorobutanosulfoniloxi) o 2,2,2-trifluoroetilo y el grupo saliente es tresilato (2,2,2-trifluoroetanosulfoniloxi). En algunas realizaciones, el R40 de compuestos de Fórmula (I) y Fórmula (K) es metilo y el grupo saliente es mesilato (metansulfoniloxi, MsO). En algunas realizaciones, el grupo R40 de compuestos de Fórmula (I) y de Fórmula (K) es trifluorometilo y el grupo saliente es triflato (trifluorometansulfoniloxi, TfO).
Con respecto al Esquema 5, haluros de tipo N-mostaza de fórmula (J), Fórmula (K) y Fórmula (L) que contienen (a) un grupo N,N-bis (2-halogenoetil) amino (compuestos de Fórmula (J)), (b) un grupo N-(2-hatogenoctil)amino-, N-(2-halogenoetil)amino-(compuestos de Fórmula (L) o N-mostazas halógenas mixtas), o (c) una N-(2-halogenoetil)amino, grupos N-(2-aril- o (polifluoro)alquilsulfoniloxietil)amino (compuestos de Fórmula (K) o N-mostazas de halógeno sulfonato híbrido), se pueden preparar a partir de los correspondientes ésteres de ésteres de ácido sulfónico de Fórmula (P) mediante reacción con un exceso o una cantidad casi estequiométrica de un haluro de metal alcalino (MX, MX') en un disolvente orgánico prótico o no prótico adecuado a temperatura elevada (sustitución de halo-dessulfoniloxi)
Con respecto al Esquema 5, en determinadas realizaciones M en MX o MX' es un catión de metal alcalino, por ejemplo, litio (Li+) y sodio (Na+), X y X' en MX o MX' son aniones de haluro, por ejemplo, cloruro (Cl-), bromuro (Br) y yoduro (I­ ). MX o MX' son haluros de metales alcalinos, por ejemplo, cloruro de litio (LiCl), bromuro de litio (LiBr), cloruro sódico (NaCl), bromuro sódico (NaBr) o yoduro sódico (NaI). En determinados compuestos de Fórmula (J), Formula (K) y Fórmula (L), X es un halógeno, por ejemplo, cloro (-Cl), bromo (-Br) o yodo (-I) (Palmer, et al., J. Med. Chem. 1990, 33(1), 112-121; Palmer, et al., J. Med. Chem., 1994, 37, 2175-2184; Palmer, et al., J. Med. Chem., 1996, 39(13), 2518­ 2528; Davies, et al., J. Med. Chem. 2005, 48(16), 5321-5328; Niculesscu-Duvaz, et al., J. Med. Chem., 2004, 47(10), 2651-2658; Weisz, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1995, 5(24), 2985-2988; Thorn, J. Org. Chem, 1975, 40(11), 1556­ 1558; Lin, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2011, 21(3), 940-943; Gourdi, et al., J. Med. Chem. 1990, 33(4), 1177-1186; Yang, et al., Tetrahedron, 2007, 63(25), 5470-5476; Ferlin, et al., Bioorg. Med. Chem., 2004, 12(4), 771-777; y Coggiola, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2005, 15(15), 3551-3554).
Con respecto al Esquema 5, los grupos N-(2-halogenoetil)amino, N-(2-aril- o alquilsulfoniloxietil)amino de Fórmula (K) (N-mostazas híbridas de sulfonato de halógeno) también se pueden preparar a partir de haluros de alquilo primarios de Fórmula (J) que contiene grupos N,N-bis(2-halogenoetil)amino a través de (a) una halo-deshalogenación (reacción de intercambio de haluro) o (b) una reacción de sustitución metatética de sulfoniloxi de-halógeno con sulfonatos de plata solubilizados AgOSO2R40, en el que R40 se define como se describe en el presente documento en condiciones suaves en disolventes orgánicos apróticos (Emmons y Ferris, J Am. Chem. Soc., 1953, 75(9), 2257).
Con respecto al Esquema 5, por ejemplo en determinadas realizaciones R1 y/o R5, R20, R40, X, X', E, el engarce L, los grupos protectores PG y Q se definen como en el presente documento; uno de R2, R3 y R4 en compuestos de Fórmula (H) es -E-N(CH2-CH2-OH)2, cada uno de los demás R2, R3 y R4 es hidrógeno; y cada uno de R7 y R8 es hidrógeno.
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Esquema 5
Con respecto al Esquema 5, en determinadas realizaciones, el grupo W,W-bis(2-hidroxietil)amino de compuestos de Fórmula (H) puede convertirse en grupos W,W-bis(2-(polifluoro)alquil- o arilsulfoniloxietil)amino de compuestos de Fórmula (I) (S-alcoxi-descloración) haciendo reaccionar dioles de Fórmula (H) con un exceso de un (perfluoro)alquilo aril-sulfonil anhídrido (R40SO2)2O) adecuado (aproximadamente 2,5-5 equivalentes), por ejemplo, metanosulfonil anhídrido (R40 es metilo (Me), (MeSO2)2O)), en un disolvente inerte como diclorometano anhidro (DCM) o tetrahidrofurano (THF) o una mezcla de cualquiera de los anteriores en presencia de un exceso (aproximadamente 2­ 10 equivalentes) de una base adecuada, por ejemplo, trietilamina anhidra (Et3N, TEA) o piridina anhidra, a una temperatura de aproximadamente 0 °C a aproximadamente la temperatura ambiente durante aproximadamente 0,5­ 24 horas para producir ásteres de ácido bis-sulfónico de Fórmula (I). La reacción se puede llevar a cabo opcionalmente en presencia de una cantidad catalítica (aproximadamente 20 % mol) de 4-W,W-(dimetilamino)piridina (DMAP).15*20
Con respecto al Esquema 5, en determinadas realizaciones, usando condiciones de reacción comparables con respecto a los disolventes, bases, estequiometría de reactivos, temperatura, catalizadores y duración como se describe para la reacción de dioles de fórmula (H) con anhídridos de (polifluoro) alquil o aril sulfonilo, los dioles de Fórmula (H) también se pueden hacer reaccionar con haluros de alquil- o aril-sulfonilo adecuados, por ejemplo, cloruro de metanosulfonilo (cloruro de mesilo, MsCl) (R40 es Me), MeSO2Cl), para proporcionar los ásteres de ácido bissulfónico deseados de Fórmula (I).
Con respecto al Esquema 5, en determinadas realizaciones, los grupos W,W-bis(2-(polifluoro)alquil- o arilsulfoniloxietil)amino como en los compuestos de Fórmula (I) pueden convertirse (sustitución de halo-des-sulfoniloxi) en grupos W,W-bis(halogenoetil)amino de compuestos de Fórmula (J) haciendo reaccionar ésteres bis-sulfonílicos de Fórmula (I) con un exceso de una sal de haluro de metal alcalino adecuada MX, por ejemplo, cloruro de litio (LiCl), bromuro de litio (LiBr), cloruro sódico (NaCl), bromuro sódico (NaBr) o yoduro sódico (Nal) (4-16 equivalentes) en un disolvente orgánico, por ejemplo, W,W-dimetilformamida (DMF), W,W-dimetilacetamida (DMAc), acetona, 2-butanona (metil etil cetona, m Ek ), 3-metil-2-butanona (isopropil metil cetona, MIPK), acetonitrilo (MeCN), metanol (MeOH), tetrahidrofurano (THF), acetato de etilo (EtOAc), o una mezcla de cualquiera de los anteriores, a temperatura ambiente o calentados a aproximadamente 50-150 °C durante aproximadamente 0,5-6 horas para proporcionar compuestos de Fórmula (J).
Con respecto al Esquema 5, en determinadas realizaciones que usan condiciones de reacción comparables con respecto a los disolventes, temperatura y duración como se describe para la preparación de compuestos de Fórmula (J), la reacción de ésteres bis-sulfonílicos de Fórmula (I) también se puede llevar a cabo en presencia de aproximadamente un equivalente molar de una sal de haluro de metal alcalino adecuada MX, como se define en el presente documento, para proporcionar compuestos de Fórmula (K) que portan grupos W-(2-halogenoetil)-,W-(2-metilsulfoniloxietil)amino (N-mostazas mixtas de halógeno/sulfonilato).
Con respecto al Esquema 5, en algunas realizaciones los compuestos de Fórmula (J) se pueden convertir en N-mostazas mixtas de halógeno/sulfonilato de Fórmula (K) haciendo reaccionar derivados de N-mostaza de Fórmula (J) en la que X es bromo (-Br) con aproximadamente 1,0 equivalente o un poco menos de una sal de sulfonato de plata soluble adecuada, por ejemplo, mesilato de plata (AgOSO2Me, AgOMs) en un disolvente polar tal como acetonitrilo (MeCN) a aproximadamente la temperatura de reflujo para proporcionar la mezcla de N-mostaza halógeno/mesilato de Fórmula (K) (reacción metética).
Con respecto al Esquema 5, en determinadas realizaciones, usando condiciones de reacción comparables con respecto a los disolventes, temperatura y duración como se describe para la preparación de compuestos de Fórmula (J) y de Fórmula (K), la reacción de N-mostazas de bis-halógeno de Fórmula (J) o de N-mostazas de halógeno / mesilato mixtas de Fórmula (R) también se puede llevar a cabo en presencia de aproximadamente un equivalente molar de una sal de haluro de metal alcalino adecuada MX', como se define en el presente documento, para proporcionar compuestos de Fórmula (L) que portan grupos N-(2-halogenoetil)-,N-(2-halogenoetil)amino (N-mostazas de halógeno mixtas).
La W-alquilación reductora es una forma de aminación/alquilación que implica la reacción de un grupo amino con un grupo carbonilo a una amina en presencia de un agente reductor adecuado mediante una imina intermedia o una imina protonada. El componente del grupo carbonilo es más comúnmente una funcionalidad aldehido o cetona, el grupo amino es más comúnmente amoníaco, un grupo amino alifático primario o secundario, o un grupo amino aromático primario o secundario (anilina). Para las aminaciones reductoras indirectas, la imina intermedia puede aislarse y reducirse con un agente reductor adecuado. Para las aminaciones reductoras directas, la reacción se puede llevar a cabo simultáneamente, con la formación y la reducción de imina al mismo tiempo, normalmente usando agentes reductores que son más reactivos a las iminas protonadas que a las cetonas, y que son estables en condiciones moderadamente ácidas, por ejemplo, cianoborohidruro sódico (Na(CN)BH3) o triacetoxiborohidruro sódico (NaB(OAc)aH.
Con respecto al Esquema 6, el grupo amino primario de los compuestos de Fórmula (M) en una forma de sal adecuada, por ejemplo, una sal clorhidrato (HCl) (Ar-E-NH2 HCl) o como base libre (Ar-E-NH2) puede someterse a una reacción de W-alquilación reductora usando compuestos halocarbonílicos adecuados (X es F, Cl o, Br) o derivados de los mismos, por ejemplo un dimetil acetal, y agentes reductores como son bien conocidos en la técnica (Palani, et al., J. Med. Chem., 2005, 48(15), 4746-4749; van Oeveren, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2007, 17(6), 1527-1531; Delfourne, et al., Bioorg. Med. Chem., 2004, 12(15), 3987-3994; Delfourne, et al., J. Med. Chem., 2002, 47(17), 3765-3771; y M. Jordan, et al., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10(8), 2625-2633).
Los compuestos de halocarbonilo adecuados incluyen, por ejemplo, ácido 2-cloroacético (ClCH2CO2H, X es Cl)), 2-cloroacetaldehído (ClCH2CHO, X es Cl)) o 2-bromoacetaldehído dimetilacetal (McO)2CHCH2Br, X es Br), opcionalmente proporcionado como soluciones en disolventes adecuados, por ejemplo, una solución al 50 % en peso de 2-cloroacetaldehído (ClCH2CHO, X es Cl)) en agua.
Con respecto al Esquema 6, agentes reductores adecuados para W-alquilaciones reductoras de grupos amino primarios tales como en compuestos de Fórmula (M) que usan ácido 2-cloroacético incluyen boranos, preferentemente complejo de borano-tetrahidrofurano (H3B THF), y determinados borohidruros de metales alcalinos, por ejemplo, borohidruro de litio (LBH4) o borohidruro sódico (NaBH4).
Con respecto al Esquema 6, la reacción se llevó a cabo generalmente en presencia de disolventes orgánicos, tales como disolventes próticos, por ejemplo, metanol (MeOH), ácido acético, (HOAc), ácido trifluoroacético (TFA), ácido fosfórico al 85 % en peso (H3PO4), ácido acético glacial (HOAC), ácido fórmico al 98 % en peso o agua, o disolventes orgánicos inertes, por ejemplo, acetonitrilo (MeCN), diclorometano (DCM), tetrahidrofurano (THF), benceno o mezclas equivalentes de cualquiera de los anteriores a una temperatura de aproximadamente 0 °C aproximadamente la temperatura de reflujo y durante aproximadamente 0,5-18 horas. En realizaciones en las que se usa 2-cloroacetaldehído, los agentes reductores adecuados pueden incluir, por ejemplo, cianoborohidruro sódico (Na(CN)BH3), triacetoxiborohidruro sódico (NaB(OAc)3H y borohidruro sódico (NaBH4).
También se puede emplear la reducción mediante hidrogenación. Las condiciones de hidrogenación preferidas incluyen hidrogenación catalítica, por ejemplo, usando paladio sobre carbono (Pd/C) como catalizador. Como fuente de hidrógeno, puede emplearse hidrógeno gaseoso (gas H2) a presiones que varían desde aproximadamente la presión atmosférica hasta aproximadamente 1,03 MPa (150 psi), o sales de amonio adecuadas, por ejemplo, hidrogenocarbonato de amonio (H4NHCO3). La hidrogenación puede realizarse a temperatura ambiente.
Con respecto al Esquema 6, en determinadas realizaciones, R1 y/o R5, R20, E, el engarce L, el grupo halógeno X y el grupo protector PG y Q se definen como en el presente documento; uno de R2 , R3, y R4 en compuestos de Fórmula (M) es -E-NH2, en la que E es un enlace ("--"), un átomo de oxígeno (-O-), un grupo metileno (-CH2-) o grupo metilenoxi (-CH2-O-) y en el que MH es un grupo amino (-NH2) de modo que -E-NH2 es equivalente a a) un grupo amino aromático primario (-NH, anilina), b) un grupo O-aril hidroxilamino primario (-O-NH2), c) un grupo aminometilo primario (-CH2-NH2), o un grupo O-bencil hidroxilamino primario (-CH2-O-NH2); cada uno de los otros R2 , R3 y R4 restantes es hidrógeno; cada uno de R7 y R8 es hidrógeno.
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Con respecto al Esquema 6, en determinadas realizaciones, el grupo amino primario de los compuestos de Fórmula (M) se puede convertir en grupos W,W-bis(1-halogenoetil)amino como en los compuestos de Fórmula (N) haciendo reaccionar compuestos de Fórmula (M) con un exceso de aproximadamente 4-10 equivalentes de un compuesto de 2-halogenocarbonilo, por ejemplo, una solución al 50 % en peso de 2-cloroacetaldehído en agua y un exceso de aproximadamente 3-8 equivalentes de un agente reductor adecuado, por ejemplo, cianoborohidruro sódico (NaB(CN)H3). En determinadas realizaciones, la reacción puede realizarse en mezclas de metanol (MeOH) con ácido trifluoroacético (TFA), ácido acético glacial (HOAc), ácido fórmico al 98 % en peso (FA) o ácido fosfórico al 85 % en peso (H3PO4). Por ejemplo, en determinadas realizaciones, mezclas de MeOH/ácido 1:1 (v/v), 2:1 (v/v) o 1:2 (v/v) y temperaturas de reacción de aproximadamente 0-40 °C y tiempos de reacción de aproximadamente 0,5-18 horas se emplean para proporcionar W-mostazas protegidas de Fórmula (N).
La estramustina (Emcyt®, Estracit®) es un agente de quimioterapia antimicrotúbulo indicado en los EE. UU. Para el tratamiento paliativo del cáncer de próstata metastásico y/o progresivo. Es un derivado del estrógeno (específicamente, estradiol) con un resto éster de W-mostaza-carbamato.
Con respecto al Esquema 7, los métodos para funcionalizar alcoholes o fenoles con derivados carbamoílicos de aminas secundarias que producen carbamatos como en, por ejemplo, compuestos de fórmula (Q) en los que M es oxígeno (-O-) y G es oxígeno (= O) incluyen cloruro de carbamoílo o p-nitrofenilcarbamatos y son bien conocidos en la técnica. De forma análoga, es bien conocido en la técnica que los carbamatos como en, por ejemplo, compuestos de Fórmula (Q) en la que M es oxígeno (-O-) y G es oxígeno (=O) también son accesibles a través de la activación de alcoholes o fenoles con fórmico adecuado. derivados de éster que incluyen fosgeno (COCh), trifosgeno (bis(triclorometil)carbonato (BTC)) o 1,1'-carbonildiimidazol (CDI) seguido de reacción con una amina apropiadamente funcionalizada como HN(CH2-CH2-R9)2 en el que R9 es cloro (-Cl), bromo (-Br), yodo (-I) o (polifluoro)alquil- o arilsulfoniloxi (-OSO2R40) o combinaciones de los mismos y R40 se define como se describe en el presente documento.
De forma análoga y con respecto al Esquema 7, se conocen muchos métodos en la literatura y son conocidos por los expertos en la materia para preparar compuestos de Fórmula (Q) relacionados con carbamatos que incluyen a) S-tiocarbamatos en los que M es azufre (-S-) y G es oxígeno (=O), b) O-tiocarbamatos en el que M es oxígeno (-O-) y G es azufre (=S), c) ditiocarbamatos en los que M es azufre (-S-) y G es azufre (=S), d) ureas en las que M es nitrógeno (-NR10-), y en el que R10 se define como se describe en el presente documento y G es oxígeno (=O) o tioureas en las que M es nitrógeno (-NR10-) y G es azufre (=S).
Con respecto al Esquema 7, en determinadas realizaciones un compuesto de Fórmula (O) es, por ejemplo, a) un fenol en el que E es un enlace ("-") y MH es un grupo hidroxilo (-OH), a) una anilina en la que E es un enlace ("-") y MH es un grupo amino (-NR10H), c) un tiofenol en el que E es un enlace ("-") y MH es un grupo sulfhidrilo (-SH), d) una O-arilhidroxilamina en la que E es oxígeno (-O-) y MH es un grupo amino (-NR10H), e) un alcohol bencílico en el que E es metileno (-CH2-) y MH es un grupo hidroxilo (-OH), f) una amina bencílico en la que E es metileno (-CH2-) y MH es un grupo amino (-NR10H), g) un tiol bencílico en el que E es metileno (-CH2-) y MH es sulfhidrilo (-SH), h) una hidroxilamina O-bencílica en la que E es metilenooxi (-CH2-O-) y MH es un grupo amino (-NR10H).
Con respecto al Esquema 7, en determinadas realizaciones, R1 y/o R5, R10, R20, E, M, Z, el engarce L, y el grupo protector PG y Q se definen como se describen en el presente documento; uno de R2, R3 y R4 en compuestos de Fórmula (O) es -E-MH como se describe en el presente documento; cada uno de los otros R2, R3 y R4 restantes es hidrógeno; cada uno de R7 y R8 es hidrógeno; Lg es un grupo saliente adecuado, tal como cloro (-Cl), 4-nitrofeniloxi (NO2C6H4O-) o imidazol; y R9 es cloro (-Cl), bromo (-Br), yodo (-I), o (polifluoro)alquil- o arilsulfoniloxi (-OSO2R40) o combinaciones de los mismos y R40 se define como se describe en el presente documento.
Esquema 7
Con respecto al Esquema 7, en determinadas realizaciones el alcohol, el grupo tiol o el grupo amino de compuestos de Fórmula (O) puede convertirse en el grupo N,N-bis(2-halogeno- o 2-sulfoniloxietil)carbamoílo o N,N-bis(2-halogenoo 2-sulfoniloxietil)tiocarbamoílo de compuestos de Fórmula (Q) haciendo reaccionar un compuesto de Fórmula (O) con, por ejemplo, cloruro de N,N-bis(2-cloroetil)carbamoílo comercial (Fex, et al., Patente U.S. n.° 3.299.104), en el que LG es cloro (-Cl), R9 es cloro (-Cl) y G es oxígeno (=O) o N,N-bis(2-cloroetil)carbamato de (4-nitrofenilo) conocido en el que LG es 4-nitrofenol (4-NO2-Ph-O-), R9 es cloro (-Cl) y G es oxígeno (=O) en disolventes adecuados, tales como piridina, o trietilamina en mezclas 1,4-dioxano/benceno y similares a temperaturas de aproximadamente 0-60 °C para proporcionar derivados de carbamato, tiocarbamato o urea de Fórmula (Q).
Con respecto al Esquema 7, en determinadas realizaciones, el grupo MH de compuestos de Fórmula (O) puede activarse a sus correspondientes cloroformiatos, tiocloroformiatos o carbonil imidazoles de fórmula (P) con, por ejemplo, fosgeno, tiosfosgeno, trifosgeno, carbonildiimidazol (CDI), tiocarbonildiimidazol (TCDI) similares, en presencia de una base adecuada, tal como carbonato de metal inorgánico, por ejemplo, carbonato potásico (K2CO3) y bicarbonatos, por ejemplo, hidrogenocarbonato sódico (NaHCO3), en disolventes inertes adecuados conocidos en la técnica. Los cloroformiatos o tiocloroformiatos de Fórmula (P) se convierten posteriormente en los correspondientes carbamatos de Fórmula (Q) mediante la reacción con una amina apropiadamente funcionalizada, tal como tal como HN(CH2-CH2-R9)2 en el que R9 es cloro (-Cl), bromo (-Br), yodo (-l) o (polifluoro)alquil- o arilsulfoniloxi (-OSO2R40) o combinaciones de los mismos y R40 se define como se describe en el presente documento, por ejemplo, clorhidrato de bis(2-cloroetil)amina comercial, en el que R9 es cloro (-Cl) o 2-bromo-N-(2-bromoetil)etanamina en la que R9 es bromo (-Br), y en presencia de una base, tal como carbonato de metal inorgánico, por ejemplo, carbonato potásico (K2CO3) y bicarbonato, por ejemplo, hidrogenocarbonato sódico (NaHCO3), acetato de etilo (EtOAc), agua o mezclas de cualquiera de los anteriores para producir carbamatos de Fórmula (Q).
En general, la actividad biológica de las mostazas nitrogenadas se basa en la presencia de una funcionalidad alquilante N,N-bis(2-cloroetilo). Los efectos quimioterapéuticos y citotóxicos están directamente asociados a la alquilación del ADN debido al fuerte carácter electrofílico de la funcionalidad N,N-bis(2-cloroetilo). La formación de enlaces covalentes que incluyen enlaces cruzados entre cadenas (ICL) es altamente citotóxica e implica la interrupción de procesos celulares fundamentales, incluida la replicación del ADN que conduce a la muerte celular.
Debido a esta propiedad, las mostazas nitrogenadas se han utilizado durante varios años en investigaciones de laboratorio y en el tratamiento clínico del crecimiento maligno. Desafortunadamente, la dosis eficaz de mostaza nitrogenada es en muchos casos cercana a la dosis tóxica y por lo tanto es deseable encontrar una mostaza nitrogenada o una clase de compuestos de tipo mostaza nitrogenada que posean la alta actividad carcinolítica del compuesto original pero que tengan toxicidad modulada.
El engarce amida enmascara las propiedades alquilantes y tóxicas del resto de mostaza nitrogenada para que el huésped total no esté sujeto a efectos tóxicos indeseables que se encuentran en ocasiones con la terapia con mostaza nitrogenada: el resto de aminoácidos de la molécula facilita el suministro selectivo de la mostaza nitrogenada "enmascarada" a través del mecanismo de transporte de aminoácidos en las células tumorales, en la que la mayor actividad amidasa de la célula tumoral libera la mostaza nitrogenada reactivada dentro de sí misma. Por tanto, en efecto, será posible obtener el efecto máximo de la mostaza nitrogenada sobre el tumor y el efecto tóxico mínimo sobre el huésped (Patente U.S. n.° 3.235.594).
Con respecto al Esquema 8, las amidas de mostazas nitrogenadas de la presente divulgación se preparan condensando ácidos carboxílicos de Fórmula (R) en la que E es un grupo carbonilo (-C(=O)-) o un grupo metilencarbonilo (-CH2-C(=O)-) con una amina apropiadamente funcionalizada como HN(CH2-CH2-R9)2 en el que X es cloro (-Cl), bromo (-Br), yodo (-I) o (polifluoro)alquil- o arilsulfoniloxi (-OSO2R40) o combinaciones de los mismos y R40 se define como se describe en el presente documento, para proporcionar amidas de mostazas nitrogenadas de Fórmula (S).
Con respecto al Esquema 8, se conocen en la técnica innumerables métodos de acoplamiento para facilitar la formación de enlaces amida como en los compuestos de Fórmula (S) a partir de ácidos carboxílicos de Fórmula (R) (Montalbetti y Falque, Tetrahedron, 2005, 61, 10827-10852; y Valeur y Bradley, Chem. Soc. Rev., 2009, 38, 606-631).
Con respecto al Esquema 8, en determinadas realizaciones, R1 y/o R5, R20, E, el engarce L, y el grupo protector PG y Q se definen como se describen en el presente documento; uno de R2, R3 y R4 en compuestos de Fórmula (R) es -E-OH como se describen en el presente documento; cada uno de los otros R2, R3 y R4 restantes es hidrógeno; cada uno de R7 y R8 es hidrógeno; y R9 es una funcionalización adecuada que proporciona las propiedades de alquilación de la mostaza nitrogenada.
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Con respecto al Esquema 8, en determinadas realizaciones el grupo (tio)carboxilo de los compuestos de Fórmula (R) puede activarse como haluros de acilo, azidas de acilo, carbocílico simétrico o asimétrico, anhídridos carbónico o borónicos, imidazoles de acilo, ésteres activados, sales de fosfonio, sales de uronio o sales de amonio seguidas de amonólisis del intermedio activado después de un aislamiento previo o in situ con una amina apropiadamente funcionalizada tal como HN(CH2-CH2-R9)2 para proporcionar amidas de mostaza nitrogenada de Fórmula (S).
Con respecto al Esquema 9, en determinadas realizaciones el grupo conector "A" del resto -A-N(CH2-CH2-R9)2 es un enlace ("-"), oxígeno (-O-), azufre (-S-), amino (-NR10-), metileno (-CH2-), metilenooxi (-CH2-O-), oxicarbonilo (-O-C(=O)-), tiocarbonilo (-S-C(=O)-), aminocarbonilo (-NR10-C(=O)-), oxitiocarbonilo (-O-C(=S)-), tiotiocarbonilo (-S-c (=S)-), aminotiocarbonilo (-NR10-C(=S)-), metilenooxicarbonilo (-CH2-O-C(=O)-), metilenotiocarbonilo (-CH2-S-C(=O)-), metilenoaminocarbonilo (-CH2-NR10-C(=O)-), metilenooxitiocarbonilo (-CH2-O-C(=S)-), metilenotiotiocarbonilo (-CH2-S-C(=S)-), metilenoaminotiocarbonilo (-CH2-NR10-C(=S)-), carbonilo (-C(=O)-), metilencarbonilo (-CH2-C(=O)-), tiocarbonilo (-C(=S)-) o metilentiocarbonilo (-CH2-C(=S)-).
Con respecto al Esquema 9, en determinadas realizaciones, liberación de derivados de aminoácidos p-sustituidos con N-mostaza funcionalizados no protegida o análogos de aminoácidos p-sustituidos con N-mostaza funcionalizados no protegida o (bio)isósteros de ácido carboxílico de Fórmula (U) a partir de sus correspondientes precursores de Fórmula (T) puede realizarse en condiciones ácidas acuosas (hidrólisis) (Taylor, etal., Chem. Biol. Drug Des., 2007, 70(3), 216­ 226; Buss, et al., J. Fluorine Chem., 1986, 34(1), 83-114; A. J. Abela, et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1997, (20), 2258-2263; Weisz, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1995, 5(24), 2985-2988; Zheng, Bioorg., Med., Chem., 2010, 18(2), 880-886; Haines, et al., J. Med. Chem., 1987, 30, 542-547; y Matharu, et al., Bioorg., Med., Chem., Lett., 2010, 20, 3688-3691).
Con respecto al Esquema 9, en determinadas realizaciones, liberación de derivados de aminoácidos p-sustituidos con N-mostaza funcionalizados no protegida o análogos de aminoácidos p-sustituidos con N-mostaza funcionalizados no protegida o (bio)isósteros de ácido carboxílico de Fórmula (U) a partir de sus correspondientes precursores de Fórmula (T) también puede realizarse en condiciones ácidas anhidras (Springer, et al., J. Med. Chem., 1990, 33(2), 677-681; Davies, et al., J. Med. Chem. 2005,48(16), 5321-5328; Niculesscu-Duvaz, et al., J. Med. Chem., 2004,47(10), 2651­ 2658; Verny y Nicolas, J. Label. Cmpds, Radiopharm., 1988, 25(9), 949-955; Thorn, et al., J. Org. Chem, 1975, 40(11), 1556-1558; Baraldini, et al., J. Med. Chem., 2000, 53(14), 2675-2684; Gourdi, et al., J. Med. Chem., 1990, 33(4), 1177­ 1186; y Kupczyk-Subotkowska, et al., J. Drug Targeting, 1997, 4(6), 359-370).
Con respecto al Esquema 9, los expertos en la materia entenderán que los precursores de p-aminoácidos sustituidos en p funcionalizados con N-mostaza protegidos de Fórmula (T) o los precursores de (bio)isósteros de ácido carboxílico o análogos de p-aminoácidos sustituidos en N-mostaza protegidos de Fórmula (T) que llevan diferentes combinaciones de grupos protectores adecuados también se pueden preparar. Diferentes combinaciones de grupos protectores pueden requerir reactivos específicos y condiciones de reacción para la eliminación efectiva de un conjunto específico de diferentes grupos de protección para proporcionar derivados de aminoácidos p sustituidos con N-mostaza no protegidos o derivados de aminoácidos p sustituidos con N-mostaza no protegidos, análogos o (bio)isósteros de ácido carboxílico de Fórmula (U).
Con respecto al Esquema 9, en determinadas realizaciones de compuestos de Fórmula (T) y de Fórmula (U) R1 y/o R5, R9, el grupo conector A, los grupos protectores PG y Q, y el engarce L se definen como se describen en el presente documento; R6 es un ácido carboxílico desprotegido, un análogo de ácido carboxílico o un (bio)isóstero de ácido carboxílico como se define en el presente documento; R20 es un ácido carboxílico protegido, un análogo de ácido carboxílico o un (bio)isóstero de ácido carboxílico como se define en el presente documento; uno de R2, R3 y R4 es un grupo N,N-bis-(2-functionalizado)etilamino (grupo mostaza nitrogenada) enlazado a un conector A (-A-N(CH2-CH2-R9)2); cada uno de los restantes R2, R3 y R4 es hidrógeno; cada uno de R7 y R8 es hidrógeno.
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Esquema 9
Con respecto al Esquema 9, la desprotección global ácida hidrolítica de compuestos de Fórmula (T) para proporcionar derivados de aminoácidos p-sustituidos con N-mostaza funcionalizados o análogos de aminoácidos p-sustituidos con N-mostaza o (bio)isósteros de ácido carboxílico de Fórmula (U) se puede lograr tratando los precursores protegidos de Fórmula (T) a temperaturas elevadas de aproximadamente 40-150 °C con ácidos minerales acuosos, por ejemplo, ácido clorhídrico 2 M a -12 M (HCl) durante aproximadamente 6-24 horas. En determinadas realizaciones, pueden usarse mezclas del ácido mineral con disolventes orgánicos. Una mezcla de reacción de ácido mineral acuoso útil para facilitar la desprotección global es, por ejemplo, una mezcla 1:1 (v/v) de ácido clorhídrico concentrado (~ 12 M o ~ HCl al 37 % en peso) con 1,4-dioxano.
Con respecto al Esquema 9, se pueden usar otros ácidos minerales acuosos con un anión no nucleófilo conocido en la técnica para facilitar la desprotección global ácida hidrolítica de compuestos de Fórmula (T) que portan grupos protectores sensibles a la hidrólisis o lábiles en ácido del resto carboxílico protegido, del (bio)isóstero de ácido carboxílico protegido, o de la funcionalidad amino de los compuestos de Fórmula (T) para proporcionar derivados de aminoácidos p-sustituidos con N-mostaza funcionalizados o análogos de aminoácidos p-sustituidos con N-mostaza o (bio)isósteros de ácido carboxílico de Fórmula (U).
Con respecto al Esquema 9, los ácidos minerales adecuados pueden incluir, por ejemplo, soluciones acuosas diluidas o concentradas de ácido bromhídrico (HBr), ácido yodhídrico (HI), ácido sulfúrico (H2SO4), ácido perclórico (HClO4) y ácido fosfórico (H3PO4), mezclas de cualquiera de los anteriores o mezclas con disolventes orgánicos adecuados, por ejemplo, 1,4-dioxano, con cualquiera de los anteriores.
Está dentro de la capacidad de un experto en la materia seleccionar ácidos minerales acuosos específicos y adecuados y condiciones de reacción para la desprotección global ácida hidrolítica ácida hidrolítica de compuestos de Fórmula (T) para proporcionar derivados de aminoácidos p sustituidos con p-sustituidos con N-mostaza o análogos de p-aminoácidos sustituidos en p funcionalizados con N-mostaza o (bio)isósteros de ácido carboxílico de Fórmula (U).
Con respecto al Esquema 9, desprotección global simultánea de compuestos de Fórmula (T) en la que R20 es un resto lábil a los ácidos derivado de un ácido carboxílico, por ejemplo, CO2tBu, CO2-pentametilbencilo, CO2-(4-metoxi)bencilo o CO2-tritilo, y Q es un grupo amino protegido obtenido a partir de un grupo protector de N lábil a los ácidos, por ejemplo, N(H)Boc, N(H)tritilo, N(H)(4-metoxi)fenil-difenilmetilo o N(H)di-((4-metoxi)fenil))-fenilmetilo, también se puede lograr mediante la reacción con ácidos orgánicos fuertes en condiciones anhidras para liberar derivados de aminoácidos p sustituidos con N-mostaza funcionalizados libres (no protegida) o análogos de aminoácidos p sustituidos con N-mostaza o ácido carboxílico (bio)isósteres de fórmula (U).
En determinadas realizaciones, los ácidos fuertes (orgánicos) útiles para la desprotección global en condiciones anhidras incluyen ácido trifluoroacético (TFA), ácido fórmico al 98 % en peso (FA), ácido metanosulfónico (MeSO3H), ácido fosfórico al 85 % en peso (H3PO4), cloruro de hidrógeno 2 M (HCl) en éter dietílico (Et2O), cloruro de hidrógeno 4 M (HCl) en 1,4-dioxano o una solución saturada de HCl en acetato de etilo (EtOAc) (Li, et al., J. Org. Chem., 2006, 71, 9045-9050).
Dependiendo de la sensibilidad general a los ácidos fuertes (orgánicos), los compuestos de Fórmula (T) pueden reaccionar con ácido puro o fuerte puro (orgánico) o con soluciones del ácido orgánico fuerte en disolventes inertes adecuados como diclorometano (DCM), dicloroetano (DCE), 1,4-dioxano, éter dietílico (Et2O), tetrahidrofurano (THF) o tolueno, normalmente en proporciones que varían desde ácido puro (orgánico) hasta aproximadamente al 10 % en volumen de ácido (orgánico) en dicho disolvente inerte, y temperaturas de reacción que varían de aproximadamente 0-50 °C durante aproximadamente 1-24 horas para proporcionar derivados de p-aminoácidos sustituidos con psustituidos con W-mostaza no protegidos o análogos de p-aminoácidos sustituidos con p-sustituidos con W-mostaza no protegidos o (bio)isósteres de ácido carboxílico de Fórmula (U).
Opcionalmente, se pueden añadir de 2 a 5 equivalentes de un agente eliminador adecuado, como trietisilano (Et3SiH) (TES), triisopropilsilano (/PraSiH), tioanisol o 1,2-ditioetano (HSCH2CH2HS) a la mezcla de reacción para suprimir la formación de reacciones secundarias no deseadas y subproductos originarios, por ejemplo, a partir de la alquilación de armazones aromáticos ricos en electrones o grupos sulfuro en condiciones de desprotección global descritas en el presente documento para proporcionar derivados de aminoácidos p sustituidos con W-mostaza no protegida o derivados de aminoácidos p-sustituidos con N-mostaza no protegidos o análogos de p-aminoácidos sustituidos con psustituidos con N-mostaza no protegidos o (bio)isósteres de ácido carboxílico de Fórmula (U).
La de derivados de aminoácidos p-sustituidos con W-mostaza funcionalizados no protegidos o análogos de aminoácidos p-sustituidos con W-mostaza funcionalizados no protegidos o (bio)isósteros de ácido carboxílico de Fórmula (U) de materiales de partida sin reaccionar, subproductos no deseados y las impurezas se pueden lograr usando, por ejemplo, técnicas de extracción en fase sólida (SPE), por ejemplo, con cartuchos q Ma ® (Waters, EE. UU.), cartuchos LiChrolut® (EMD Chemicals, EE. UU.), o cartuchos Whatman SAX (Whatman, EE. UU.), TLC preparativa en fase normal o inversa, HPLC semipreparativa o preparativa de fase inversa (RP), cristalización, precipitación o cualquier otro método adecuado conocido en la técnica.
Los derivados de aminoácidos p sustituidos con W-mostaza funcionalizados no protegidos purificados o los análogos de aminoácidos p sustituidos con W-mostaza no protegidos o los (bio)isósteros de ácido carboxílico de Fórmula (U) pueden aislarse usando cualquiera de los métodos conocidos en la materia. Por ejemplo, tales métodos incluyen la retirada de disolventes de HPLC (fase móvil) de las fracciones combinadas que contienen los derivados de aminoácidos p-sustituidos con W-mostaza funcionalizados o los análogos de aminoácidos p-sustituidos con W-mostaza o ácido carboxílico (bioisósteros) de Fórmula (U) a presión reducida con un evaporador rotatorio, o retirada de mezclas de disolventes (acuosos) mediante liofilización primaria.
Se puede usar cualquier método conocido en la técnica para producir sales de adición de ácido o sales que incluyen sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables o sales de compuestos de Fórmula (U) (Handbook of Pharmaceutical Salts - Properties, Selection, and Use, Stahl y Wermuth, Wiley-VCH, Weinheim, Alemania, 2008).
La liofilización puede realizarse opcionalmente en presencia de uno o más equivalentes de un ácido mineral, opcionalmente con un contraión farmacéuticamente aceptable, para formar sales de adición de ácido (farmacéuticamente aceptables) de compuestos de Fórmula (U). Por ejemplo, se pueden añadir uno o más equivalentes de ácido clorhídrico (HCl) antes de la liofiliación para formar sales mono, di o policlorhidrato de compuestos de Fórmula (U) o mezclas de los mismos.
La liofilización puede realizarse opcionalmente en presencia de uno o más equivalentes de una base, opcionalmente con un contraión farmacéuticamente aceptable, para formar sales (farmacéuticamente aceptables) de compuestos de Fórmula (U). Por ejemplo, se pueden añadir uno o más equivalentes de hidrogenocarbonato sódico (NaHCOa) antes de la liofiliación para formar sales mono, di o polisódicas de compuestos de Fórmula (U) o mezclas de los mismos.
Un rasgo característico de los tumores sólidos es la presencia de células en concentraciones de oxígeno muy bajas (hipoxia; presión parcial de oxígeno en tejido tumoral de 0,05-5,0 %) a menudo alrededor de áreas de necrosis. Existen vínculos claros entre la hipoxia y la falta de respuesta a la radioterapia y la resistencia intrínseca a la terapia citotóxica. También se ha demostrado que la hipoxia en los tumores tiende a seleccionar un fenotipo más maligno (Wilson y Hay, Nat. Rev. Canc., 2011, 11, 393-410; y Brown y Wilson, Nat. Rev. Cane., 2004, 4, 437-447).
Los procesos metabólicos reductores son más frecuentes en el entorno hipóxico de los tumores sólidos. Los sistemas de enzimas reductoras tienen la capacidad de reducir determinados grupos funcionales. Por ejemplo, se sabe que los W-óxidos aromáticos y alifáticos (-N+(O')R2) son reducibles a las aminas correspondientes (-NR2) y los grupos nitro (-NO2) pueden reducirse a las aminas correspondientes (-NH2) o a hidroxilaminas (-NH(OH) dependiendo de la saturación de oxígeno del tejido (Denny, et al., Br. J. Cane., 1996, 74, Supl. XXVII, S32-S38; y Nagasawa, et al., Biol. Pharm. Bull., 2006, 29(12), 2335-2342).
Un enfoque prometedor para el diseño de mostazas selectivas de células cancerosas aprovecha la reducción enzimática selectiva de compuestos nitroarílicos en las células hipoxicas (carentes de oxígeno) que se encuentran en los tumores sólidos. Derivados de W-óxidos de mostazas nitrogenadas, incluidos W-óxidos de melfalán (PX-478; Kirkpatrick, et al., Patente U.S. n.° 7.399.785; Koh, et al., Mol. Cane. Ther., 2008, 7(1), 90-100; www.medkoo.com) y clorambucil (Kirkatrick, et al., AntiCancer Drugs, 1994, 5,467-472; Tercel, et al., J. Med. Chem., 1995, 38, 1247-1252; y Kirckpatrick, Patente U.S. n.° 5.602.273) se han investigado como profármacos biorreductores con toxicidad sistémica reducida en comparación con los fármacos parentales. Esos fármacos aprovechan a) la naturaleza hipóxica y b) la naturaleza reductora de determinadas células tumorales. El grupo funcional N-óxido desactiva el agente alquilante extremadamente reactivo a través de la captura del par de electrones solitarios del resto de mostaza nitrogenada parental, disminuyendo así las propiedades alquilantes y las toxicidades fuera del objetivo asociadas a eso. Se cree que la activación biorreductora dentro del entorno o medio del tumor hipóxico por las células hipóxicas y sus sistemas de enzimas reductoras restaura la citotoxicidad de las mostazas nitrogenadas libres. El efecto general es un índice terapéutico mejorado de los N-óxidos de mostazas nitrogenadas en relación con sus mostazas nitrogenadas parentales.
Dependiendo del pH y la naturaleza del solvente, particularmente solventes orgánicos apróticos, se sabe que los N-óxidos de las mostazas nitrogenadas se reordenan intramolecularmente a las correspondientes hidroxilaminas más estables con un potencial citotóxico intrínseco notablemente menor (Tercel, et al., J. Med. Chem., 1995, 38, 1247­ 1252; y Kirckpatrick, Patente US n.° 5.602.273). Sin embargo, también se sabe que dichas hidroxilaminas pueden volver a convertirse en los N-óxidos parentales in vivo, en los que estos últimos pueden reducirse en el entorno hipóxico y reductor de las células tumorales donde las mostazas nitrogenadas subyacentes ejercen su citotoxicidad.
Con respecto al Esquema 10, en determinadas realizaciones de compuestos de Fórmula (V), Formula (W) y de Fórmula (X) R1 y/o R5 , R6 , R9, y el engarce L se definen como se describen en el presente documento; uno de R2 , R3, y R4 es un grupo W,W-bis-(2-functionalizo)etilamino (grupo mostaza nitrogenada) enlazado a un grupo conector "A" (-A-N(CH2-CH2-R9)2) en el que el grupo conector "A" es un enlace ("-") o un grupo metileno (-CH2-); cada uno de los restantes R2 , R3 y R4 es hidrógeno; cada uno de R7 y R8 es hidrógeno.
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Con respecto al Esquema 10, la N-oxidación del grupo N-mostaza de compuestos de Fórmula (V) con un ligero exceso de ácido 3-cloroperbezoico (ácido meta-cloroperbenzoico, mCPBA) en un disolvente, tal como diclorometano (DCM) aproximadamente a temperatura ambiente seguido por tratamiento con hidrogenocarbonato sódico proporciona la hidroxilamina más estable (a través de la reordenación putativa a través de una especie de oxazetidinio cíclico) de Fórmula (W).
Con respecto al Esquema 10, la N-oxidación del grupo N-mostaza de compuestos de Fórmula (V) con 3-5 equivalentes de ácido peracético (MeCO(O2H)), preparado a partir de peróxido de hidrógeno acuoso al 35 % en peso (H2O2) en ácido acético glacial (HOAc), en un disolvente tal como diclorometano (DCM) a aproximadamente temperatura ambiente seguido de extracción ácida, proporcionó el correspondiente N-óxido de Fórmula (X).
Caracterización
Para determinar la medida en que los compuestos proporcionados por la presente divulgación ingresan a las células a través del transportador LAT1/4F2hc, pueden realizarse ensayos de captación de aminoácidos en células que se transfectan con ADN que codifica las subunidades LAT1 y 4F2hc usando, por ejemplo, células HEK (riñón embrionario humano) o CHO (ovario de hámster chino). Los ovocitos también pueden inyectarse con ARNc LATI y 4F2hc para expresar el transportador LAT1/4F2hc. Los compuestos pueden seleccionarse para determinar la especificidad del transportador LAT1/4F2hc o para el transporte en células que expresan de forma endógena una pluralidad de transportadores. Los resultados de un método de detección (por ejemplo, un ensayo de competición de captación, intercambio o captación directa) usando una célula que expresa el transportador LAT1/4F2hc pueden compararse con los resultados de una célula o células control que carecen del transportador LAT1/4F2hc o en presencia de un inhibidor específico del transportador LAT1/4F2hc.
En experimentos de competición, se determina la capacidad de un compuesto para unirse específicamente al transportador LAT1/4F2hc. Un sustrato conocido (sustrato de referencia) para el transportador LAT1/4F2hc y un compuesto de prueba se añaden a las células que expresan el transportador LAT1/4F2hc. Por ejemplo, la gabapentina puede usarse como una referencia porque demuestra una alta selectividad por LAT1/4F2hc. La gabapentina no es un sustrato para los transportadores de aminoácidos intestinales B0+, ATB0+ y LAT2, mientras que la gabapentina puede ser un sustrato para el transportador de cationes orgánicos OCTN2 (Cundy, et al., J Pharm Exp Ther, 2004, 311(1), 315-323; y Grigat, et al., Drug Metabol Disp, 2009, 37(2), 330-337). La cantidad o velocidad de transporte del sustrato de referencia en presencia del compuesto de prueba se compara con la cantidad o velocidad de transporte del sustrato de referencia en ausencia del compuesto de prueba. Si la cantidad o velocidad de transporte del sustrato de referencia disminuye por la presencia del compuesto de prueba, el compuesto de prueba se une al transportador LAT1/4F2hc.
Los compuestos que se unen al transportador LAT1/4F2hc pueden analizarse más a fondo para determinar si se transportan por el transportador LAT1/4F2hc o solo compiten por unirse al transportador. El transporte de un compuesto al interior de una célula puede determinarse detectando una señal desde el interior de una célula procedente de diversos indicadores. El indicador puede ser tan sencillo como un marcador tales como un fluoróforo, un cromóforo, un radionúclido, o un indicador puede ser un agente que se detecta utilizando cromatografía líquidaespectroscopía de masas (CL/EM/EM). Pueden usarse los mismos métodos de detección para determinar si un informador se transporta desde el espacio intracelular al medio administrando el compuesto de prueba al exterior de la célula y tomando muestras del medio para detectar la presencia del informador intracelular después de un período de tiempo predeterminado (ensayos de intercambio).
Habiendo determinado que un compuesto es un sustrato para LAT1/4F2hc, puede realizarse un cribado adicional para determinar la selectividad del compuesto hacia otros transportadores de membrana. La selectividad se refiere a las afinidades con las que un compuesto se transporta por diferentes transportadores. Para demostrar la selectividad para LATI/4F2hc, un compuesto puede ensayarse en ensayos de captación y/o competición para otros transportadores. Los transportadores que potencialmente podrían transportar sustratos LAT1/4F2hc incluyen SLC1A4 (ASCT1; NP_003029), SLC1A5 (ASCT2; NP_005619), SLC6A1 (GAT1; NP_003033), SLC6A5 (GlyT2; NP_004202), SLC6A6 (TauT; NP_003034), SLC6A8 (CT1; NP_005620), SLC6A9 (GlyT1; NM_008865), SLC6A11 (GAT3; NP_55044), SLC6A12 (BGT1; NP_003035), SLC6A13 (GAT2; NP_057699), SLC6A14 (ATB0+; NP_009162), SLC6A15 (B0AT2; NP_001139807), SLC6A17 (XT1; NP_001010898), SLC6A18 (B0AT3; NP_872438), SLC6A19 (B0AT1; NP_001003841), SLC7A6 (y+LAT2; NP 001070253), SLC7A7 (y+LAT1; NP 001119577), SLC7A8 (LAT2; NP_036376), SLC7A9 (b0+AT; NP_055085), SCL7A10 (ASC-1; NP_062823), SLC15A1(PepT1; NP_005064), SLC15A2 (PepT2; NP_066568), SLC16A1 (MCT1; NP_003042), SLC16A2 (MCT8; NP_006508), SLC16A10 (TAT1; NP_061063), SLCO1B1 (OATP1B1; NP_006437), SLCO1B3 (OATP1B3; NP_062818), SLC22A1 (OCT1; NP_003048), SLC22A2 (OCT2; NP_003049), SLC22A4 (OCTN1; NP_003050), SLC22A5 (OCTN2; NP_003051), SLC22A8 (OAT3; NP_004245), SLC36A1 (PAT1; NP_510968), SLC36A1 (PAT1; NP_510968), SLC36A2 (PAT2; NP_861441), SLC38A1 (SNAT1; NP_109599), SLC38A2 (SNAT2; NP 061849), SLC38A3 (SNAT3; NP_006832), SLC38A4 (SNAT4; NP_060488), SLC38A5 (SNAT5; NP_0277053), SLC43A1 (LAT3; NP_003618) y SLC43A2 (LAT4; NP_689559).
Los genes humanos necesarios para la expresión funcional de un transportador de interés pueden clonarse usando PCR, secuenciarse completamente y subclonarse en plásmidos que se pueden usar para la expresión en células de mamíferos o en ovocitos de Xenopus laevis. Salvo que se indique lo contrario, todas las subunidades de un transportador de interés se coexpresan en cada sistema heterólogo descrito en los ejemplos. Debido a que muchas líneas celulares de mamíferos exhiben altos niveles de actividad de transporte de aminoácidos, la expresión en ovocitos de Xenopus laevis puede ser ventajosa debido a los bajos niveles de transporte de aminoácidos endógenos. Para evaluar la función de transporte de una proteína transportadora específica, puede ser deseable clonar el ADNc y expresar la proteína en células que tienen una baja actividad de transporte endógeno. Los ensayos de competición pueden realizarse con compuestos marcados que son sustratos óptimos (sustratos de referencia) para el transportador de interés. Normalmente, los niveles de absorción de un compuesto de prueba se comparan con la absorción de un sustrato de referencia para el transportador de interés.
Los compuestos de Fórmula (1) son sustratos para LAT1/4F2hc y tienen una Vmáx de al menos el 10 %, el 20 % y, en determinadas realizaciones, al menos el 50 % de la de gabapentina. Al mismo tiempo, los compuestos tienen una baja afinidad hacia los transportadores de aminoácidos del sistema A, sistema N, sistema ASC, y el sistema L transportador LAT2/4F2hc.
Pueden usarse estudios de biodistribución con ratas normales y con tumores para determinar la disposición de compuestos activamente transportados y la selectividad de la acumulación de sustrato en el tejido que expresa el transportador LAT1/4F2hc en comparación con otro tejido. Las técnicas de formación de imagen pueden dilucidar cualitativa y cuantitativamente el papel de las proteínas transportadoras en la disposición de los fármacos, por ejemplo, autorradiografía de cuerpo entero (WBA). La WBA permite tanto la visualización como la cuantificación de los niveles de compuestos marcados con radionúclidos en una sección delgada de todo el animal. La información obtenida mediante WBA es análoga a los datos obtenidos a partir de imágenes de diagnóstico, aunque sea en un solo punto en el tiempo.
Composiciones farmacéuticas
Los compuestos de Fórmula (1) o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos pueden incorporarse en composiciones farmacéuticas para administrar a un paciente por cualquier vía de administración apropiada, incluyendo intradérmica, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, subcutánea, intranasal, epidural, oral, peroral, sublingual, intracerebral, intravaginal, transdérmica, rectal, por inhalación o tópica. En determinadas realizaciones, las composiciones farmacéuticas proporcionadas por la presente divulgación son formulaciones inyectables. En determinadas realizaciones, las composiciones farmacéuticas proporcionadas por la presente divulgación son formulaciones intravenosas. En determinadas realizaciones, las composiciones farmacéuticas proporcionadas por la presente divulgación son formulaciones orales. Las formulaciones orales pueden ser formas de dosificación orales.
Las composiciones farmacéuticas proporcionadas por la presente divulgación pueden comprender una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo junto con una cantidad adecuada de uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables para proporcionar una composición para la administración adecuada a un paciente. En la técnica se describen vehículos y métodos farmacéuticos adecuados para preparar composiciones farmacéuticas.
En determinadas realizaciones, puede administrarse un compuesto de Fórmula (1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo mediante inyección intravenosa. Las formas adecuadas de inyección incluyen soluciones o dispersiones acuosas estériles de un compuesto de Fórmula (1). En determinadas realizaciones, un compuesto puede formularse en una solución tampón fisiológica. Antes de la administración, un compuesto de Fórmula (1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede esterilizarse mediante cualquier técnica reconocida en la técnica, incluyendo la adición de agentes antibacterianos o antifúngicos, por ejemplo, parabeno, clorobutanol, fenol, ácido sórbico, timersol y similares. En determinadas realizaciones, un compuesto de Fórmula (1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede esterilizarse por filtración antes de la administración a un sujeto minimizando o eliminando de esta manera la necesidad de agentes de esterilización adicionales. Una dosis inyectable de un compuesto de Fórmula (1) puede incluir de aproximadamente 0,01 ml a aproximadamente 10 ml, de aproximadamente 0,1 ml a aproximadamente 10 ml, de aproximadamente 0,1 ml a aproximadamente 5 ml y, en determinadas realizaciones, de aproximadamente 1 ml a aproximadamente 5 ml.
Las composiciones farmacéuticas pueden comprender una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más compuestos de Fórmula (1), preferentemente en forma purificada, junto con una cantidad adecuada de un vehículo farmacéuticamente aceptable, para proporcionar una forma de administración adecuada a un paciente. Cuando se administran a un paciente, los compuestos y los vehículos farmacéuticamente aceptables son preferentemente estériles. El agua es un vehículo preferido cuando el compuesto se administra por vía intravenosa. También pueden emplearse soluciones salinas y soluciones acuosas de dextrosa y glicerol como vehículos líquidos, particularmente para soluciones inyectables. Los vehículos farmacéuticos adecuados también incluyen excipientes tales como almidón, glucosa, lactosa, sacarosa, gelatina, malta, arroz, harina, tiza, gel de sílice, estearato sódico, monoestearato de glicerol, talco, cloruro sódico, leche desnatada en polvo, glicerol, propileno, glicol, agua, etanol y similares. Las composiciones farmacéuticas también pueden contener cantidades menores de agentes humectantes o emulsionantes, o agentes tamponantes de pH. Además, pueden usarse agentes auxiliares, estabilizantes, espesantes, lubricantes y colorantes.
Las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto pueden fabricarse por medio de procesos de mezcla convencional, de disolución, de granulación, de levitación, de emulsión, de encapsulación, de atrapamiento o de liofilización. Las composiciones farmacéuticas pueden formularse de una manera convencional usando uno o más vehículos, diluyentes fisiológicamente aceptables; excipientes o auxiliares, que facilitan el procesamiento de compuestos en preparaciones que pueden usarse farmacéuticamente. La formulación adecuada depende de la vía de administración elegida.
Las composiciones farmacéuticas proporcionadas por la presente divulgación pueden tomar la forma de soluciones, suspensiones, emulsiones o cualquier otra forma adecuada para su uso. En la técnica se describen ejemplos de vehículos farmacéuticos adecuados.
Para la administración parenteral, los compuestos de Fórmula (1) pueden incorporarse en una solución o suspensión. La administración parenteral se refiere a la administración por inyección, por ejemplo por inyección intravenosa, intracapsular, intratecal, intrapleural, intratumoral, intraperitoneal o intravesical. En determinadas realizaciones, un compuesto de Fórmula (1) se administra por vía intravenosa.
Una solución o suspensión también puede comprender al menos uno de los siguientes adyuvantes: diluyentes estériles tales como agua para inyección, solución salina, aceites no volátiles, polietilenglicoles, glicerol, propilenglicol u otros disolventes sintéticos, antioxidantes, tales como ácido ascórbico o bisulfito sódico, tampones tales como acetatos, citratos o fosfatos y agentes para el ajuste de la tonicidad tales como cloruro sódico o dextrosa. Una preparación parenteral puede incluirse en ampollas, jeringuillas desechables o recipientes de múltiples dosificaciones hechos de vidrio o plástico.
Para la administración tópica, un compuesto de Fórmula (1) puede formularse como una solución, gel, pomada, crema, suspensión, etc. Para la administración transmucosa, pueden usarse en la formulación penetrantes apropiados para que la barrera que va a permearse. Dichos penetrantes son generalmente conocidos en la técnica. Las formulaciones sistémicas incluyen las diseñadas para la administración por inyección, por ejemplo, inyección subcutánea, intravenosa, intramuscular, intratecal o intraperitoneal, así como aquellas diseñados para administración transdérmica, transmucosa, oral o pulmonar. Pueden prepararse formulaciones sistémicas en combinación con un principio activo adicional que mejore el aclaramiento mucociliar de la mucosidad de las vías respiratorias o reduzca la viscosidad de la mucosa. Estos principios activos incluyen, por ejemplo, bloqueantes del canal de sodio, antibióticos, A/-acetilcisteína, homocisteína, 2-mercaptoetanosulfonato sódico (MESNA) y fosfolípidos.
Cuando un compuesto es ácido o básico, puede incluirse en cualquiera de las formulaciones descritas anteriormente como ácido libre o base libre, una sal farmacéuticamente aceptable, un solvato de cualquiera de los anteriores, o un hidrato de cualquiera de los anteriores. Las sales farmacéuticamente aceptables retienen sustancialmente la actividad del ácido o base libre, pueden prepararse mediante reacción con bases o ácidos y tienden a ser más solubles en disolventes acuosos y otros disolventes próticos que la forma de base o ácido libre correspondiente.
Evaluar la respuesta de un solo paciente a la terapia y calificar a un paciente para una terapia óptima se encuentran entre los mayores desafíos de la atención médica moderna y se relacionan con las tendencias en la medicina personalizada. Los novedosos derivados de p-aminoácidos p sustituidos y los análogos de p-aminoácidos p sustituidos proporcionados por la presente divulgación tienen una alta selectividad por LATl/4F2hc. Los compuestos radiomarcados para tomografía por emisión de positrones (PET) o tomografía computarizada por emisión de fotón único (SPECT) con la misma selectividad hacia LAT1/4F2hc pueden usarse para predecir la efectividad del tratamiento basándose en un análisis de pacientes caso por caso de un solo estudio, excluyendo de esta manera a los sujetos que se espera que no se beneficien del tratamiento. Las exploraciones PET/SPECT que usan sustratos selectivos LAT1/4F2hc radiomarcados, una vez correlacionados con la concentración, los derivados de p-aminoácidos p sustituidos o los análogos de p-aminoácidos p sustituidos de Fórmula (1) pueden proporcionar un mapa de distribución tridimensional, que después puede usarse para cálculos macroscópicos de dosis.
En consecuencia, está dentro de la capacidad de los expertos en la materia ensayar y usar los compuestos de Fórmula (1 ) y/o composiciones farmacéuticas de los mismos para terapia.
Dosis terapéutica
Un compuesto de Fórmula (1) y/o una composición farmacéutica del mismo puede usarse generalmente en una cantidad eficaz para lograr el propósito pretendido. Para el uso para tratar una enfermedad tal como cáncer, un compuesto de Fórmula (1) y/o composiciones farmacéuticas del mismo, puede administrarse o aplicarse en una cantidad terapéuticamente eficaz.
La cantidad de un compuesto de Fórmula (1) y/o composición farmacéutica del mismo que será eficaz en el tratamiento de un trastorno o afección particular descrito en el presente documento dependerá en parte de la naturaleza del trastorno o afección, y puede determinarse mediante técnicas clínicas convencionales conocidas en la técnica. Además, pueden emplearse opcionalmente ensayos in vitro o in vivo para ayudar a identificar los intervalos óptimos de dosificación. La cantidad de un compuesto de Fórmula (1) y/o composición farmacéutica del mismo administrada dependerá de, entre otros factores, el sujeto que se está tratando, el peso corporal del sujeto, la gravedad de la afección, la forma de administración y el criterio del médico prescriptor.
Un compuesto de Fórmula (1) puede ensayarse in vitro e in vivo, para la actividad terapéutica deseada, antes de su uso en seres humanos. Por ejemplo, pueden usarse ensayos in vitro para determinar si se prefiere la administración de un compuesto específico o una combinación de compuestos. También puede demostrarse que los compuestos son eficaces y seguros usando sistemas de modelos animales.
En determinadas realizaciones, una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (1) y/o una composición farmacéutica del mismo proporcionará un beneficio terapéutico sin provocar una toxicidad sustancial. La toxicidad de los compuestos de Fórmula (1) y/o las composiciones farmacéuticas de los mismos puede determinarse usando procedimientos farmacéuticos convencionales y el experto en la materia puede determinarla fácilmente. La relación de dosis entre efectos tóxicos y terapéuticos es el índice terapéutico. En determinadas realizaciones, un compuesto de Fórmula (1) y/o composición farmacéutica del mismo exhibe un índice terapéutico particularmente alto en el tratamiento de enfermedades y trastornos. En determinadas realizaciones, una dosis de un compuesto de Fórmula (1) y/o una composición farmacéutica del mismo estará dentro de un intervalo de concentraciones circulantes que incluyen una dosis eficaz con una toxicidad mínima.
Kits
Un compuesto de Fórmula (1), una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica de cualquiera de los anteriores pueden incluirse en un kit que puede usarse para administrar el compuesto a un paciente con fines terapéuticos. Un kit puede incluir una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (1 ) adecuado para la administración a un paciente e instrucciones para administrar la composición farmacéutica al paciente. En determinadas realizaciones, un kit para su uso en el tratamiento del cáncer en un paciente comprende un compuesto de Fórmula (1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, un vehículo farmacéuticamente aceptable para administrar el compuesto e instrucciones para administrar el compuesto a un paciente.
Las instrucciones suministradas con un kit pueden imprimirse y/o suministrarse, por ejemplo, como medio de lectura electrónica, una cinta de vídeo, una cinta de audio, un dispositivo de memoria flash o puede publicarse en un sitio web de Internet o distribuirse a un paciente y/o proveedor de atención médica como una comunicación electrónica.
Usos terapéuticos
Los compuestos de Fórmula (1) pueden usarse para el tratamiento de cáncer en un paciente, en donde el tejido canceroso expresa el LAT1/4F2hc. En determinadas realizaciones, el tejido canceroso que expresa el transportador LAT1/4F2hc está en el cerebro del paciente.
Los compuestos de fórmula (1) pueden usarse en el tratamiento de una amplia diversidad de neoplasias donde se produce una captación mediada por LAT1/4F2hc elevada. Los compuestos de Fórmula (1) son particularmente útiles para tratar tumores cerebrales, incluyendo metástasis de otros tumores sólidos, tales como cáncer de pulmón o de mama, en el cerebro.
En determinadas realizaciones, puede administrarse un compuesto de Fórmula (1) o una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (1) para tratar un cáncer que se sabe que se trata con un agente alquilante, tal como, por ejemplo, melfalán.
En determinadas realizaciones, un compuesto de Fórmula (1) o una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (1) puede usarse para tratar, por ejemplo, uno o más de los siguientes cánceres: leucemia linfoblástica aguda en adultos (all), leucemia linfoblástica aguda infantil (all), leucemia mieloide aguda infantil (aml), leucemia mieloide aguda en adultos (aml), carcinoma de la corteza suprarrenal infantil, cánceres relacionados con el SIDA, linfoma relacionado con el SIDA, cáncer anal, cáncer del apéndice, astrocitoma, tumor teratoide/rabdoide atípico infantil, carcinoma de células basales (no melanoma), cáncer del conducto biliar extrahepático, cáncer de vejiga infantil, cáncer de huesos, osteosarcoma, histiocitoma fibroso maligno, craneofaringioma infantil, glioma del tronco encefálico infantil, tumor cerebral adulto, tumor cerebral infantil, glioma del tronco encefálico infantil, tumores embriónicos del sistema nervioso central infantiles, astrocitoma cerebeloso infantil, tumor cerebral, astrocitoma cerebral/glioma maligno, carcinoma ductal in situ, ependimoblastoma infantil, ependimoma infantil, estesioneuroblastoma infantil, meduloblastoma infantil, meduloepitelioma infantil, tumores del parénquima pineal de diferenciación intermedia infantiles, tumores neuroectodérmicos primitivos supratentoriales y pineoblastoma, glioma de la vía visual e hipotalámico infantil, tumores cerebrales y medulares invantiles, cáncer de mama, cáncer de mama infantil, cáncer de mama masculino, tumores bronquiales infantiles, tumores hematopoyéticos del linaje linfoide, tumores hematopoyéticos del linaje mieloide, linfoma de Burkitt, tumor carcinoide infantil, tumor carcinoide gastrointestinal, carcinoma de cabeza y cuello, tumores embriónicos del sistema nervioso central infantiles, linfoma primario del sistema nervioso central, astrocitoma cerebeloso infantil, astrocitoma cerebral/glioma maligno, cáncer de cuello uterino infantil, cánceres infantiles, cordoma infantil, leucemia linfocítica crónica (cll), trastornos mieloproliferativos crónicos, cáncer colorrectal, linfoma cutáneo de células T, tumores embriónicos del sistema nervioso central infantiles, tumor desmoplásico de células redondas pequeñas, cáncer de endometrio, ependimoblastoma infantil, ependimoma infantil, cáncer esofágico, cáncer esofágico infantil, familia de tumores de Ewing, tumor de células germinales extracraneales infantil, tumor de células germinales extragonadales, cáncer del conducto biliar extrahepático, cáncer de ojo, Melanoma intraocular, retinoblastoma, cáncer de vesícula biliar, cáncer gástrico (estómago), cáncer gástrico (estómago) infantil, tumor carcinoide gastrointestinal, tumor del estroma gastrointestinal (glst), tumor de células del estroma gastrointestinal infantil, tumor de células germinales extracraneales infantil, tumor de células germinales extragonadales, tumor de células germinales ováricas, tumor/enfermedad trofoblástico gestacional, glioma en adultos, glioblastoma, de tallo cerebral infantil, astrocitoma cerebral infantil, glioma de la vía visual e hipotalámico infantil, tricoleucemia, cáncer de corazón infantil, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de cabeza y cuello infantil, cáncer hepatocelular (de hígado) en adultos (primario), cáncer hepatocelular (de hígado) infantil (primario), linfoma de Hodgkin de adultos, linfoma de Hodgkin infantil, cáncer hipofaríngeo, glioma hipotalámico y de la vía visual infantil, melanoma intraocular, tumores neuroendocrinos pancreáticos (tumores de células de los islotes), tumores del páncreas endocrino (tumores de células de los islotes), sarcoma de Kaposi, cáncer de riñón (células renales), cáncer de riñón, cáncer laríngeo, cáncer laríngeo infantil, leucemia linfoblástica aguda en adultos, leucemia linfoblástica aguda infantil, leucemia mieloide aguda en adultos, leucemia mieloide aguda infantil, leucemia mielógena crónica (cml), tricoleucemia, cáncer de labios y de la cavidad oral, cáncer hepático primario en adultos, cáncer de hígado primario infantil, cáncer de pulmón no microcítico, cáncer de pulmón microcítico, linfoma relacionado con el SIDA, linfoma de Burkitt, linfoma de células T, linfoma de células B, linfoma cutáneo de células T, linfoma de Hodgkin de adultos, linfoma de Hodgkin infantil, linfoma no Hodgkiniano en adultos, linfoma no Hodgkiniano infantil, linfoma primario del sistema nervioso central, histiocitosis de células de Langerhans, macroglobulinemia de Waldenstrom, histiocitoma fibroso maligno de hueso y osteosarcoma, meduloblastoma infantil, meduloepitelioma infantil, melanoma, melanoma intraocular (ojo), carcinoma de células de Merkel, mesotelioma maligno adulto, mesotelioma infantil, cáncer de cuello escamoso metastásico con primario oculto, cáncer de boca, neoplasias mielodisplásicas/mieloproliferativas, carcinoma del tracto de línea media que implica el gen nUt, síndrome de neoplasia endocrina múltiple infantil, mieloma múltiple/neoplasia de células plasmáticas, micosis fungoide, síndromes mielodisplásicos enfermedades mielodisplásicas/mieloproliferativas, leucemia mielógena crónica, leucemia mieloide aguda en adultos, leucemia mieloide aguda infantil, mieloma múltiple, trastornos mieloproliferativos crónicos, tumores malignos de células germinales, cáncer de la cavidad nasal y del seno paranasal, cáncer nasofaríngeo, cáncer de nasofaringe infantil, neuroblastoma, linfoma no Hodgkiniano en adultos, linfoma no Hodgkiniano infantil, cáncer de pulmón no microcítico, cáncer oral infantil, cáncer de labios y de la cavidad oral, cáncer orofaríngeo, osteosarcoma e histiocitoma fibroso maligno de hueso, cáncer de ovario infantil, cáncer epitelial de ovario, tumor de células germinales ováricas, tumor ovárico de bajo potencial maligno, cáncer pancreático, cáncer pancreático infantil, tumores de células de los islotes, papilomatosis infantil, cáncer del seno paranasal y de la cavidad nasal, cáncer paratiroideo, cáncer de pene, cáncer faríngeo, feocromocitoma, tumores del parénquima pineal de diferenciación intermedia infantiles, pineoblastoma infantil y tumores neuroectodérmicos primitivos supratentoriales, tumor de la pituitaria, paraganglioma, neoplasia de células plasmáticas/mieloma múltiple, blastoma pleuropulmonar, blastoma pleuropulmonar infantil, linfoma primario del sistema nervioso central (snc), cáncer de mama y del embarazo, linfoma primario del sistema nervioso central, cáncer de próstata, cáncer rectal, cáncer de células renales (riñón), cáncer de células renales (riñón) infantil, pelvis renal y uréter, cáncer de células transicionales, carcinoma de las vías respiratorias que implica el gen nUt en el cromosoma 15, retinoblastoma, rabdomiosarcoma infantil, cáncer de glándula salival, cáncer de glándula salival infantil, sarcoma (familia de tumores dwing), sarcoma de Kaposi, sarcoma de tejidos blandos en adultos, sarcoma de tejidos blandos infantil, sarcoma uterino, síndrome de Sézary, cáncer de piel (no melanoma), cáncer de piel infantil, melanoma, carcinoma de piel de células de Merkel, cáncer de pulmón microcítico, cáncer de intestino delgado, sarcoma de tejidos blandos en adultos, sarcoma de tejidos blandos infantil, carcinoma de células escamosas (no melanoma), cáncer de cuello escamoso y metastásico con primario oculto, cáncer de estómago (gástrico), cáncer de estómago (gástrico) infantil, tumores neuroectodérmicos primitivos supratentoriales infantiles, linfoma cutáneo de células T, cáncer testicular, cáncer de garganta, timoma y carcinoma tímico, timoma y carcinoma tímico infantiles, cáncer de tiroides, cáncer de tiroides infantil, tumor trofoblástico gestacional, carcinoma de sitio primario desconocido en adultos, cáncer de sitio primario desconocido infantil, cánceres inusuales infantiles, cáncer de células de transición de uréter y pelvis renal, cáncer de uretra, cáncer de endometrio uterino, sarcoma uterino, cáncer de vagina, cáncer de vagina infantil, glioma de la vía visual e hipotalámico infantil, cáncer vulvar, macroglobulinemia de Waldenstrom, tumor de Wilms, cánceres de mujeres y metástasis sistémicas y centrales de cualquiera de los anteriores.
En determinadas realizaciones, un compuesto de Fórmula (1) o una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (1) puede usarse para tratar, por ejemplo, uno o más de los siguientes cánceres en los que el cáncer se selecciona de cualquiera de los cánceres primarios del cerebro y del SNC en adultos y niños incluyendo glioblastoma (GBM) y astrocistoma, cánceres de piel incluyendo melanoma, cánceres de pulmón incluyendo cánceres de pulmón microcíticos, cánceres de pulmón no microcíticos (NSCLC) y cánceres de pulmón macrocíticos, cánceres de mama incluyendo cáncer de mama triple negativo (TNBC), cánceres de sangre incluyendo síndrome mielodisplásico (MDS), mieloma múltiple (MM) y leucemia mieloide aguda (AML), cáncer de próstata incluyendo cáncer de próstata resistente a la castración (CRPC), cánceres de hígado incluyendo carcinoma hepatocelular (HCC), cánceres esofágicos y gástricos y cualquier metástasis sistémica y central de cualquiera de los anteriores.
Los compuestos de Fórmula (1) pueden usarse para tratar un cáncer en el que existe una actividad de transporte diferencial de LAT1/4F2hc en relación con el tejido circundante y/o tejido en otros órganos del cuerpo. Se espera que los pacientes que tienen un tumor que exhibe una mayor actividad de transporte de LAT1/4F2hc que el tejido no enfermo respondan más favorablemente al tratamiento con un agente terapéutico que es un sustrato para el transportador LAT1/4F2hc y que experimenten menos efectos adversos asociados a los efectos del agente terapéutico en tejido no enfermo. Los compuestos de Fórmula (1) son agentes terapéuticos, son sustratos para el transportador LAT1/4F2hc y exhiben citotoxicidad.
La cantidad de un compuesto de Fórmula (1) que será eficaz en el tratamiento de un cáncer dependerá, al menos en parte, de la naturaleza de la enfermedad, y puede determinarse mediante técnicas clínicas convencionales conocidas en la técnica. Además, pueden emplearse ensayos in vitro o in vivo para ayudar a identificar los intervalos óptimos de dosificación. Los regímenes de dosificación y los intervalos de dosificación también pueden determinarse mediante métodos conocidos por los expertos en la materia. La cantidad administrada de compuesto de Fórmula (1) puede depender de, entre otros factores, el sujeto que se está tratando, el peso corporal del sujeto, la gravedad de la enfermedad, la vía de administración y el criterio del médico prescriptor.
Para administración sistémica, puede estimarse inicialmente una dosis terapéuticamente eficaz a partir de ensayos in vitro. Las dosis iniciales también pueden estimarse a partir de datos in vivo, por ejemplo, modelos animales, usando técnicas que se conocen en la técnica. Dicha información puede usarse para determinar de forma más precisa las dosis útiles en seres humanos. Un experto habitual en la materia puede optimizar la administración a seres humanos basándose en datos de animales.
Una dosis del compuesto de Fórmula (1) e intervalos de dosificación apropiados puede seleccionarse para mantener una concentración terapéuticamente eficaz sostenida del compuesto de Fórmula (1) en la sangre de un paciente y, en determinadas realizaciones, sin exceder una concentración mínima adversa.
En determinadas realizaciones, las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de Fórmula (1) pueden administrarse una vez al día, dos veces al día y, en determinadas realizaciones, a intervalos de más de una vez al día. La dosificación puede administrarse sola o en combinación con otros fármacos y puede continuar tanto tiempo como sea necesario para un tratamiento eficaz de la enfermedad. La dosificación también puede realizarse usando una administración continua o semicontinua durante un período de tiempo. La dosificación incluye administrar una composición farmacéutica a un mamífero, tal como un ser humano, en estado alimentado o en ayunas.
Una composición farmacéutica puede administrarse en una forma de dosificación única o en formas de dosificación múltiples o como una dosis continua o acumulada durante un período de tiempo. Cuando se usan múltiples formas de dosificación, la cantidad de compuesto de Fórmula (1) contenida dentro de cada una de las múltiples formas de dosificación puede ser la misma o diferente.
Los intervalos de dosificación diaria adecuados para la administración pueden variar de aproximadamente 2 mg a aproximadamente 50 mg de un compuesto de Fórmula (1) por kilogramo de peso corporal.
Los intervalos de dosificación diaria adecuados para la administración pueden variar de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 100 mg de un compuesto de Fórmula (1) por metro cuadrado (m2) de superficie corporal.
En determinadas realizaciones, puede administrarse un compuesto de Fórmula (1) para tratar el cáncer en un sujeto en una cantidad de aproximadamente 50 mg a aproximadamente 2000 mg por día, de aproximadamente 100 g a aproximadamente 1.500 g por día, de aproximadamente 200 mg a aproximadamente 1000 mg al día, o en cualquier otra dosis diaria apropiada.
En determinadas realizaciones, las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de Fórmula (1) pueden administrarse para tratar el cáncer en un sujeto para proporcionar una concentración terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (1) en la sangre o plasma del sujeto. En determinadas realizaciones, una concentración terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (1) en la sangre o el plasma de un sujeto es de aproximadamente 1 pg/ml a aproximadamente 60 pg/ml, de aproximadamente 2 pg/ml a aproximadamente 50 pg/ml, de aproximadamente 5 pg/ml a aproximadamente 40 pg/ml, de aproximadamente 5 pg/ml a aproximadamente 20 pg/ml y, en determinadas realizaciones, de aproximadamente 5 pg/ml a aproximadamente 10 pg/ml. En determinadas realizaciones, una concentración terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (1) en la sangre o el plasma de un sujeto es de aproximadamente 2 pg/ml, al menos aproximadamente 5 pg/ml, al menos aproximadamente 10 pg/ml, al menos aproximadamente 15 pg/ml, al menos aproximadamente 25 pg/ml y, en determinadas realizaciones, al menos aproximadamente 30 pg/ml. En determinadas realizaciones, una concentración terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (1) en la sangre o el plasma de un sujeto es menor que una cantidad que provoca efectos adversos inaceptables incluyendo efectos adversos a la homeostasis. En determinadas realizaciones, una concentración terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (1) en la sangre o el plasma de un sujeto es una cantidad suficiente para restaurar y/o mantener la homeostasis en el sujeto.
En determinadas realizaciones, las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de Fórmula (1) pueden administrarse para tratar el cáncer en un sujeto para proporcionar una concentración terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (1) en la sangre o plasma de un sujeto durante un periodo de tiempo extendido tal como, por ejemplo, durante al menos aproximadamente 4 horas, durante al menos aproximadamente 6 horas, durante al menos aproximadamente 8 horas, durante al menos aproximadamente 10 horas y en determinadas realizaciones, durante al menos aproximadamente 12 horas.
La cantidad de un compuesto de Fórmula (1) administrada puede variar durante un régimen de tratamiento.
Las composiciones farmacéuticas proporcionadas por la presente divulgación pueden comprender además uno o más compuestos farmacéuticamente activos además de un compuesto de Fórmula (1). Dichos compuestos pueden proporcionarse para tratar el cáncer que se está tratando con el compuesto de Fórmula (1) o para tratar una enfermedad, trastorno o afección distinta del cáncer que se está tratando con el compuesto de Fórmula (1).
En determinadas realizaciones, puede usarse un compuesto de Fórmula (1) en combinación con al menos otro agente terapéutico. En determinadas realizaciones, puede administrarse un compuesto de Fórmula (1) a un paciente junto con otro compuesto para tratar el cáncer en el sujeto. En determinadas realizaciones, el al menos otro agente terapéutico puede ser un compuesto diferente de Fórmula (1). Un compuesto de Fórmula (1) y el al menos otro agente terapéutico pueden actuar de forma aditiva o, y en determinadas realizaciones, de forma sinérgica. El al menos un agente terapéutico adicional puede incluirse en la misma composición farmacéutica o vehículo que comprende el compuesto de Fórmula (1) o puede estar en una composición farmacéutica o vehículo separado. En consecuencia, los métodos proporcionados por la presente divulgación incluyen además, además de administrar un compuesto de Fórmula (1), administrar uno o más agentes terapéuticos eficaces para tratar el cáncer o una enfermedad, trastorno o enfermedad distintos del cáncer. Los métodos proporcionados por la presente divulgación incluyen la administración de un compuesto de Fórmula (1) y uno o más de otros agentes terapéuticos siempre que la administración combinada no inhiba la eficacia terapéutica de un compuesto de Fórmula (1) y/o no produzca efectos de combinación adversos.
En determinadas realizaciones, las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de Fórmula (1) pueden administrarse simultáneamente con la administración de otro agente terapéutico, que puede ser parte de la misma composición farmacéutica que, o en una composición farmacéutica diferente a la que comprende un compuesto de Fórmula (1). Un compuesto de Fórmula (1) puede administrarse antes o después de la administración de otro agente terapéutico. En determinadas realizaciones de la terapia de combinación, la terapia de combinación puede comprender alternar entre la administración de un compuesto de Fórmula (1) y una composición que comprende otro agente terapéutico, por ejemplo, para minimizar los efectos adversos de los medicamentos asociados a un fármaco en particular. Cuando un compuesto de Fórmula (1) se administra al mismo tiempo que otro agente terapéutico que potencialmente puede producir un efecto adverso del fármaco incluyendo, por ejemplo, toxicidad, el otro agente terapéutico puede administrarse a una dosis que caiga por debajo del umbral en el que se desencadena la reacción adversa al fármaco.
En determinadas realizaciones, las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de Fórmula (1) pueden administrarse con una o más sustancias para mejorar, modular y/o controlar la liberación, biodisponibilidad, efectividad terapéutica, potencia terapéutica, estabilidad y similares de un compuesto de Fórmula (1). Por ejemplo, para mejorar la efectividad terapéutica de un compuesto de Fórmula (1), puede coadministrarse un compuesto de Fórmula (1) o una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (1) con uno o más principios activos para aumentar la absorción o difusión del compuesto de Fórmula (1) desde el tracto gastrointestinal a la circulación sistémica, o para inhibir la degradación del compuesto de Fórmula (1) en la sangre de un sujeto. En determinadas realizaciones, una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (1) puede coadministrarse con un principio activo que tiene efectos farmacológicos que mejoran la efectividad terapéutica del compuesto de Fórmula (1).
En determinadas realizaciones, puede administrarse un compuesto de Fórmula (1) o una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (1) junto con un agente conocido o que se cree que es eficaz en el tratamiento del cáncer en un paciente.
Por ejemplo, en determinadas realizaciones, puede administrarse un compuesto de Fórmula (1) o una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (1) junto con otros agentes quimioterapéuticos, tales como, por ejemplo, W-acetilcisteína (NAC), adriamicina, alemtuzumab, amifostina, trióxido de arsénico, ácido ascórbico, bendamustina, bevacizumab, bortezomib, busulfán, butionina sulfoxima, carfilzomib, carmustina, clofarabina, ciclofosfamida, ciclosporina, citarabina, dasatinib, datinomicina, defibrotida, dexametasona, docetaxel, doxorrubicina, etopósido, filgrastim, floxuridina, fludarabina, gemcitabina, interferón alfa, ipilimumab, lenalidomida, leucovorina, melfalán, micofenolato mofetilo, paclitaxel, palifermina, panobinostat, pegfilrastim, prednisolona, prednisona, revlimid, rituximab, sirolimus, 2-mercaptoetanosulfonato de sodio (MESNA), tiosulfato de sodio, tacrolimus, temozolomida, talidomida, tioguanina, tiotepa, topotecán, velcade o una combinación de cualquiera de los anteriores. En determinadas realizaciones, un compuesto de Fórmula (1) y/o composiciones farmacéuticas del mismo pueden usarse en terapia de combinación con otros agentes quimioterapéuticos que incluyen uno o más antimetabolitos tales como análogos de ácido fólico; análogos de pirimidina tales como fluorouracilo, floxuridina y arabinósido de citosina; análogos de purina tales como mercaptopurina, tiogunaina y pentostatina; productos naturales tales como vinblastina, vincristina, etopósido, tertipósido, dactinomicina, daunorrubicina, doxurubicina, bleomicina, mitamicina, mitomicina C, L-asparaginasa e interferón alfa; complejos de coordinación de platino tales como cis-platino y carboplatino; mitoxantrona; hidroxiurea; procarbazina; hormonas y antagonistas tales como prednisona, caproato de hidroxiprogesterona, acetato de medroxiprogesterona, acetato de megestrol, dietilestilbestrol, etinilestradiol, tamoxifeno, propionato de testosterona, fluoximesterona, flutamida y leuprolida, agentes anti-angiogénesis o inhibidores tales como angiostatina, ácidos retinoicos, paclitaxel, derivados de estradiol y derivados de tiazolopirimidina; agentes de prevención de la apoptosis; y radioterapia.
En determinadas realizaciones, un compuesto de Fórmula (1) puede coadministrarse con un compuesto que inhibe la reparación del ADN tales como, por ejemplo, O6-bencilguanina (O6-BG).
En determinadas realizaciones, un compuesto de Fórmula (1) puede coadministrarse con un compuesto que bloquea y/o inhibe transportadores distintos de LAT1 tales como, por ejemplo, aminoácidos. En determinadas realizaciones, los compuestos de Fórmula (1) pueden administrarse a un paciente junto con uno o más aminoácidos tales como, por ejemplo, arginina (Arg), serina (Ser), lisina (Lys), asparagina (Asn), glutamina (Gln), treonina (Thr), o mezclas de cualquiera de los anteriores. En determinadas realizaciones, la coadministración de aminoácidos está destinada a saturar los transportadores de aminoácidos que interactúan con los compuestos de Fórmula (1) y, por lo tanto, aumentan la selectividad por LAT1.
La efectividad de administrar un compuesto de Fórmula (1) para tratar el cáncer puede evaluarse usando estudios in vitro y en animales y en ensayos clínicos.
La idoneidad de los compuestos de Fórmula (1) y/o las composiciones farmacéuticas de los mismos para tratar los cánceres enumerados anteriormente puede determinarse mediante métodos descritos en la técnica. Por ejemplo, se conocen los detectores desarrollados para demostrar la actividad antitumoral de los agentes oncolíticos (Miller, et al., J Med Chem, 1977, 20(3), 409413; Sweeney, et al., Cancer Res, 1978, 38(9), 2886-2891; y Weiss y Von Hoff, Semin Oncol, 1985, 12(3 Supl 4), 69-74). En consecuencia, está bien en la capacidad de los expertos en la técnica ensayar y usar los compuestos y/o composiciones farmacéuticas de los mismos para tratar las enfermedades o trastornos anteriores.
Los métodos proporcionados por la presente divulgación tienen uso en animales, incluyendo mamíferos, tal como en seres humanos.
Ejemplos
Los siguientes ejemplos describen en detalle la síntesis de compuestos de Fórmula (1), la caracterización de compuestos de Fórmula (1) y los usos de compuestos de Fórmula (1). Resultará evidente para los expertos en la materia que pueden realizarse muchas modificaciones, tanto a materiales como a métodos, sin apartarse del alcance de la divulgación.
Protocolos experimentales generales
Todos los reactivos y disolventes se compraron a proveedores comerciales y se usaron sin más purificación o manipulación.
Los espectros de RMN de protones se registraron en un espectrómetro Varian Mercury Plus de 300 MHz equipado con un imán Oxford, un ordenador host Sun Sunblade 150, un sistema operativo Solaris, Software de procesamiento de datos VNMR y una impresora HP LaserJet. Cuando se indique específicamente, se usó un espectrómetro Varian VNMRS 400 (400 MHz). CDCla (99,8 % D), MeOH-d4 (CD3OD, 99,8+% D), deuteróxido (D2O) (99,8+ % D) se usaron como disolventes de registro a menos que se indique lo contrario. Se usaron las señales de disolvente CHCh, MeOH-d3 , HDO o tetrametilsilano (TMS) para la calibración de los espectros individuales.
La cromatografía analítica en capa fina (TLC) se realizó usando láminas de TLC con respaldo de aluminio EMD Millipore (EMD5554-7) prerrecubiertas con gel de sílice 60 F254 (200 pm de espesor, 60 A de tamaño de poro) donde F254 es un indicador fluorescente con un 254 nm longitud de onda de excitación. Se usó una lámpara UV ENF-240C Spectroline® (Spectronics Corporation, EE.UU.) para la detección y visualización de TLC. Los reactivos de coloración o tinción para la detección y visualización de TLC, por ejemplo, una solución etanólica de ninhidrina o una solución acuosa de permanganato potásico al 0,2 % en peso (KMnO4), se prepararon de acuerdo con métodos conocidos en la técnica.
La CL/EM analítica se realizó en un sistema Shimadzu LC/MS-2020 Prominence Series equipado con un módulo de bus de comunicación CBM-20A (Shimadzu 228-45012-32), un detector SPD-20AV UV/VIS (Shimadzu 228-45004-32), un inyector automático SIL-20AC (Shimadzu 228-45136-32), desgasificador DGU-20A5 (Shimadzu 22845019-32), dos bombas LC-20AD XP HPLC (Shimadzu 228-45137-32), una columna Agilent Zorbax 5 pm XDB-C18 2,1*50 mm (Agilent 960 967-902) y un ordenador de sobremesa comercial e impresora para el cálculo de datos. Los gradientes de agua (disolvente A) (Arrowhead, Nestle North America, Inc.) y acetonitrilo (MeCN; disolvente B) (EMD AX0145-1 o Aldrich CHROMASOLV® 439134) que contenían 0,075 % en volumen de ácido fórmico (EMD FX0440-7) se usaron en análisis de CL/EM analíticos.
La LC/UV analítica se realizó en un sistema Agilent Serie 1100 equipado con un desgasificador Agilent Serie 1100 (Agilent G1379A), una bomba cuádruple Agilent Serie 1100 (Agilent G1311A), un Automuestreador Agilent Serie 1100 (ALS) (Agilent G1329A), un Agilent COLCOM serie 1100 (Agilent G1316A), una columna HPLC Phenomenex Gemini C18 5 pm 110A de tamaño de poro 150 * 4,6 mm (Phenomenex 00F-4435-E0), una computadora personal Compaq Presario y una impresora HP LaserJet P2015 para el cálculo de datos. Los gradientes de agua (disolvente A) (Arrowhead, Nestle North America, Inc.) y acetonitrilo (MeCN; disolvente B) (EMD AX0145-1 o Aldrich CHROMASOLV® 439134) que contenían 0,075 % en volumen de ácido fórmico (EMD FX0440-7) se usaron en análisis de CL/UV analíticos.
La HPLC preparativa se realizó con un sistema Varian ProStar Series equipado con un detector UV-VIS modelo 340 UV-C, un módulo de suministro de disolvente modelo 210, una columna de HPLC preparativa Hamilton PRP-112-20 pm 100 A 21,2 * 250 mm (Hamilton 79428), y un ordenador personal de sobremesa comercial para el cálculo de datos. Los gradientes de agua (disolvente A) (Arrowhead, Nestle North America, Inc.) y acetonitrilo (MeCN; disolvente B) (EMD AX0145-1 o Aldrich CHROMASOLV® 439134) que contenían 0,1 % en volumen de ácido fórmico (EMD FX0440-7) se usaron para purificaciones de HPLC preparativas.
El aislamiento de compuestos a partir de mezclas de disolventes acuosos, por ejemplo, acetonitrilo/agua/0,1 % en volumen de ácido fórmico, se logró mediante la liofilización primaria de fracciones combinadas y congeladas (después de la liofilización) a presión reducida a temperatura ambiente usando múltiples liofilizadores como Heto Drywinner DW 6-85-1, Heto FD4 o VIRTIS Freezemobile 25 ES equipado con una bomba de alto vacío. Opcionalmente, y si el compuesto aislado tiene grupos funcionales ionizables tales como un grupo amino o un ácido carboxílico, el proceso de liofilización se llevó a cabo en presencia de un exceso (aproximadamente 1,1 a 5,0 equivalentes) de ácido clorhídrico (HCl) 1,0 M para producir el compuesto o compuestos purificados como la sal de clorhidrato correspondiente (sal de HCl), sales de diclorhidrato y/o el correspondiente ácido carboxílico libre protonado. Los puntos de fusión se determinaron por duplicado con un sistema de punto de fusión automático SRS OptiMelt MPA-100 con tecnología de procesamiento de imágenes digitales y no están corregidos (Stanford Research Systems, EE.UU.).
Las filtraciones se realizaron usando Celite® 545 comercial (EMD CX0574-1) que se comprimió en embudos Biichner de vidrio para crear un tapón de 2-5 cm de espesor. Las mezclas de reacción que contenían productos secundarios de reacción precipitados o residuos de catalizador heterogéneos se eliminaron por filtración usando técnicas convencionales. Debe tenerse cuidado al filtrar los catalizadores activados o los metales finamente dispersos (¡ignición!).
Salvo que se indique lo contrario, el tratamiento acuoso constituye normalmente la dilución de un producto de reacción bruto, con o sin disolvente de reacción residual, con ácido clorhídrico (HCl) 1,0 M o una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (NH4Cl), extracción múltiple con un disolvente orgánico, por ejemplo, acetato de etilo (EtOAc), éter dietílico (Et2O) o diclorometano (DCM), lavando con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico (NaHCOa) y salmuera (solución acuosa saturada de cloruro sódico (NaCl)), secado de la fase orgánica (extractos orgánicos combinados) sobre sulfato de magnesio anhidro (MgSO4) (EMD MX0075-1) o sulfato sódico Na2SO4) (EMD SX0760E-3), filtración, lavado del residuo del filtro y evaporación de los filtrados combinados a presión reducida usando un evaporador rotatorio a temperatura ambiente o elevada seguido de purificación del compuesto, por ejemplo, cromatografía en columna de gel de sílice, cristalización o valoración.
La cromatografía en columna de gel de sílice se realizó con gel de sílice (aproximadamente 100-200 ml de gel de sílice por gramo de compuesto) 600,04-0,063 mm (40-63 pm, malla 230-400) (EMD Millipore EM1.09385.9026/EM1.09385.1033/EM1.09385.2503) usando disolventes simples o mezclas de disolventes adecuados, por ejemplo, acetato de etilo (EtOAc) y hexano o diclorometano (DCM) y metanol (MeOH), como se determina por TLC. Las muestras/fracciones que contenían el producto deseado detectado por TLC analítica y/o CL/EM analítica o CL/UV se combinaron y los disolventes se retiraron a presión reducida usando un evaporador rotatorio Heidolph Laborota 4001 Efficient (Heidolph, Alemania) (Heidolph 519-10000-01-5) equipado con un baño calefactor de dígitos HB (Heidolph 517-01002-01-4) y una bomba de vacío de control de válvula Rotavac (Heidolph 591-00130-01-0).
Los nombres químicos se generaron usando el programa de nomenclatura ChemDraw Ultra 12.0 (CambridgeSoft, Cambridge, MA, EE.UU.).
Descripción 1
Procedimiento general para la reducción de ácidos benzoicos a alcoholes bencílicos
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Hay, et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1999, 2759-2770; Fujikawa, et al., J. Am. Chem. Soc., 2008, 130, 14533-14543; Allen, et al., Publicación international n.° WO 2010/122089; y Gerspacher, et al., Publicación international n.° WO2008/031594), borano dimetilsulfuro comercial (BH3 DMS, BH3. SMc2) (2,0 M en THF) (50 ml, 100 mmol) o complejo de borano tetrahidrofurano (BH3-THF) (1,0 M en THF) (100 ml, 100 mmol) se añadió gota a gota a temperatura ambiente a una solución agitada del ácido nitrobenzoico (50 mmol) en THF anhidro (250 ml). Opcionalmente, la reacción se realizó en presencia de borato de trimetil (B(OMe)3) (200 mmol). La solución se calentó a reflujo durante 4-6 horas (temperatura del baño de aceite de ~75 °C). La reacción se controló por TLC y/o CLEM hasta su finalización. Después de enfriarse a aproximadamente 5 °C (baño de hielo), la reacción se interrumpió cuidadosamente con una mezcla 1:1 (v/v) de metanol (MeOH)/agua (25 ml) seguido de ácido clorhídrico 5 N (HCl) (50 ml). La mezcla se calentó a aproximadamente 50 °C durante aproximadamente 30-60 min y la mayoría de los disolventes volátiles se retiraron a presión reducida. Se añadió agua y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico (NaHCO3) (1x) y con salmuera (1x), se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro (MgSO4), se filtraron y los disolventes se evaporaron a sequedad a presión reducida. Si fuese necesario, el material en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice o se volvió a cristalizar.
Descripción 2
Procedimiento general para la oxidación de alcoholes bencílicos a aldehidos aromáticos
Variante A: Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Parikh, et al., J. Am. Chem. Soc. 1967, 89, 5505-5507; y Jandeleit, et al., Patente U.S. n.° 8.168.617), a una solución del alcohol (50 mmol), dimetilsulfóxido (DMSO) (28,5 ml, 400 mmol), trietilamina (Et3N, TEA) (34,8 ml, 250 mmol) en diclorometano anhidro (DCM) (300 ml) se le añadió a 0 °C (baño de hielo) en pequeñas porciones un complejo de trióxido de azufre-piridina comercial (PirSOa) (23,9 g, 150 mmol). La mezcla de reacción se agita con calentamiento gradual a temperatura ambiente durante aproximadamente 4-12 horas. La reacción se controló por TLC y/o CLEM hasta su finalización. La mayor parte de los volátiles se evaporó a presión reducida y el residuo se diluyó con ácido clorhídrico 2 M hasta que se vuelve ácido. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (EtOAc) (3*). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico (NaHCO3) (1 *) y con salmuera (1 *), se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro (MgSO4), se filtraron y los disolventes se evaporaron a sequedad a presión reducida. Si fuese necesario, el material en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice o se volvió a cristalizar.
Variante B: Adaptando un protocolo bibliográfico conocido (Aoyama, et al., Synlett, 1998, 35-36), se añadió óxido de manganeso (IV) (MnO2) activado comercial (250-275 mmol) a temperatura ambiente a una solución del alcohol bencílico (25 mmol) en diclorometano (DCM) (100 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 12-24 h. La reacción se controló por TLC y/o CLEM hasta su finalización. La mezcla de reacción se filtró sobre un lecho corto de Celite® 545 y el filtrado se concentró a presión reducida. El material es a menudo de suficiente pureza para ser usado directamente en la siguiente etapa sin aislamiento ni purificación adicionales. Si fuese necesario, el material en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice o se volvió a cristalizar.
Variante C: Adaptando un protocolo bibliográfico conocido (Corey y Suggs, Tetrahedron Lett., 1975, 16(31), 2647­ 2650; y Fujikawa, et al., J. Am. Chem. Soc., 2008, 130, 14533-14543), a una solución del alcohol bencílico (20 mmol) en diclorometano (DCM) (100 ml) se le añadió clorocromato de piridinio (Pir+CrOaCt, PCC) (28-40 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo (55 °C temperatura del baño de aceite) durante 1-4 horas. La reacción se controló por TLC y/o CLEM hasta su finalización. La reacción se enfrió a temperatura ambiente. El tratamiento y el aislamiento y la purificación del producto se llevaron a cabo como se describe para la Variante B.
Descripción 3
Procedimiento general para los ácidos 3-amino-3-arilpropiónicos mediante la reacción de Rodionov
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Tran y Weaver, Tetrahedron, 2002, 58, 7449-7461; y Lebedev, et al., Russian J. Gen. Chem, 2005, 75(7), 1113-1124), los ácidos 3-amino-3-arilpropiónicos se prepararon en un recipiente de acuerdo con Rodionov calentando una mezcla del aldehído aromático (30 mmol, ácido malónico (30 mmol) y acetato de amonio (NH4OAc) (4,7 g, 60,7 mmol) en etanol (aproximadamente 50-100 ml) a reflujo durante aproximadamente 12-48 horas (baño de aceite). La reacción fue seguida de CL/EM hasta su finalización. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente cuando el compuesto diana precipitó generalmente. El precipitado se filtró con un embudo Büchner y el residuo del filtro se lavó con EtOH adicional (2*). El producto recogido se secó a presión reducida para producir el compuesto diana generalmente como sólidos incoloros que a menudo son de pureza suficiente para usarse directamente en la siguiente etapa sin procedimientos de purificación ni aislamiento adicionales.
Descripción 4
Procedimiento general para la preparación de ésteres metílicos de aminoácidos
Adaptando protocolos bibliográficos (Fuchs, et al., la publicación de Estados Unidos n.° 2010/144681; y Allison, et al., Publicación U.S. n.° 2006/069286), los aminoácidos libres (desprotegidos) o W-(terc-butoxicarbonilo) protegidos (10 mmol) se suspendieron en metanol anhidro (MeOH) (aproximadamente 30-80 ml) y se enfriaron a aproximadamente 0 °C (baño de hielo). Se añadió cuidadosamente cloruro de tionilo puro (SOCh) (40-50 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante aproximadamente 1-6 h antes de enfriar hasta temperatura ambiente. La reacción fue seguida por CL/EM hasta su finalización. Los disolventes se evaporaron a presión reducida usando un rotavapor. El residuo se coevaporó con MeOH adicional (2 x 50) para retirar los volátiles residuales y el disolvente. Los disolventes residuales se retiraron a presión reducida para producir los ésteres metílicos de aminoácidos generalmente como sólidos incoloros, que son generalmente de suficiente pureza para usarse directamente en la siguiente etapa sin más procedimientos de purificación y aislamiento.
Descripción 5
Procedimiento general para la N-protección de aminoácidos con cloroformiatos de alquilo
Adaptando protocolos bibliográficos bien conocidos en la técnica, el derivado de aminoácido no protegido o una sal del mismo, por ejemplo se suspendió una sal clorhidrato (10 mmol) en diclorometano anhidro (DCM) (aproximadamente 30-50 ml) y la mezcla se enfrió a aproximadamente 0 °C (baño de hielo). Se añadió diisopropiletilamina pura (DIPEA, base de Hünigs) (20-50 mmol) seguido del cloroformiato de alquilo apropiado (15 mmol), por ejemplo, cloroformiato de bencilo (ZCl o CbzCl) o cloroformiato de etilo, se añadió gota a gota y la mezcla de reacción se agitó gradualmente con calentamiento gradual a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se controló mediante TLC y/o CL/EM hasta su finalización. Los disolventes se retiraron a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El residuo se diluyó con ácido clorhídrico 1,0 molar (HCl) y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (EtOAc) (3*). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato sódico anhidro (Na2SO4) o sulfato de magnesio anhidro (MgSO4) y se filtraron usando un embudo de Büchner. El residuo del filtro se lavó con EtOAc adicional y los filtrados orgánicos combinados se evaporaron a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El material en bruto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice o se volvió a cristalizar para proporcionar los compuestos diana.
Descripción 6
Procedimiento general para la reducción de nitro-aromatos a anilinas
Variante A: Adaptando un protocolo bibliográfico conocido (Chandrappa, et al., Synlett, 2010, (20), 3019-3022), a una suspensión del derivado nitro aromático (10 mmol) en una mezcla de etanol (EtOH) o metanol (MeOH) con agua (10­ 20 ml alcohol:0,5-3 ml de agua), se le añadieron polvo de hierro (Fe) (30-100 mmol) y dihidrato de cloruro de calcio (CaCh'2H2O) (5-10 mmol). La mezcla de reacción resultante se calentó desde aproximadamente 50 °C hasta aproximadamente reflujo (baño de aceite) durante aproximadamente 0,5-3 h. La reacción fue seguida por TLC (tinción con nihidrina) y/o CL/EM analítica hasta su finalización. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de un lecho corto de Celite® 545 para retirar residuos de hierro. El coadyuvante de filtración se lavó con una mezcla adicional de alcohol / agua o acetato de etilo (EtOAc) (3*). Los filtrados orgánicos combinados se secaron sobre sulfato sódico anhidro (Na2SO4) o sulfato de magnesio anhidro (MgSO4), el agente secante se filtró, el residuo del filtro se lavó con MeOH o EtOAc adicional, se filtró sobre un embudo Büchner y los filtrados combinados se evaporaron a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El material en bruto puede purificarse mediante cromatografía en columna de gel de sílice usando preferentemente mezclas de diclorometano (DCM) y metanol que contienen opcionalmente trietilamina al 1-5 % en volumen o se vuelve a cristalizar.
Variante B: Adaptando protocolos bibliográficos bien conocidos en la técnica, el derivado nitro aromático (10 mmol) se disolvió en metanol (MeOH), etanol (EtOH), acetato de etilo (EtOAc) o mezclas de cualquiera de los anteriores (25­ 50 ml). Se añadió el catalizador heterogéneo (5 o 10 % en peso de paladio sobre carbón vegetal que contiene ~ 50 % en peso de agua) (aproximadamente 25-50 % en peso con respecto al derivado nitro aromático). Opcionalmente, se añadió una pequeña cantidad de aditivos ácidos, por ejemplo, unas gotas de HOAc o ácido clorhídrico (HCl) 1,0 M para activar el catalizador. La atmósfera se cambió a hidrógeno (técnica de evacuación/llenado 3*) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente a aproximadamente 103,42 kPa (15 psi) (globo de H2) durante 1-12 h. Opcionalmente, la reacción se llevó a cabo en un reactor de acero inoxidable o en un aparato de hidrogenación Parr si se requirieses presiones más altas de H2. La reacción se controló por TLC y/o CLEM hasta su finalización. La mezcla de reacción se filtró sobre un lecho corto de Celite® 545, el coadyuvante de filtración se lavó con MeOH y los filtrados combinados se evaporan a presión reducida. El material en bruto se purificó como se describe en la Variante A.
Descripción 7
Procedimiento General para la N-alquilación reductora
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Palani, et al., J. Med. Chem., 2005, 48(15), 4746-4749; van Oeveren, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2007, 17(6), 1527-1531; Delfoume, et al., Bioorg. Med. Chem., 2004, 12(15), 3987-3994; Delfourne, et al., J. Med. Chem., 2002, 47(17), 3765-3771; y Jordan, et al., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10(8), 2625­ 2633) a una solución de la anilina (o una suspensión de una sal de adición de anilina, por ejemplo, una sal clorhidrato) (10 mmol) en metanol (MeOH) (30 ml) a aproximadamente 5-15 °C (baño de agua con algo de hielo) se le añadieron ácido trifluoroacético (TFA) (15 ml) (Variante A ), ácido acético (15-20 ml) (HOAc) (Variante B) o ácido fosfórico al 85 % en peso (H3PO4) (Variante C). A la solución enfriada, se le añadió 2-cloroacetaldehído comercial (ClCH2CHO) (~50 % en peso en agua, ~7,87 M) (-6,5 ml, -50 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 15­ 30 min a esta temperatura cuando se añadió cianoborohidruro sódico (NaB^CN) (2,51 g, 40 mmol) en pequeñas porciones (¡desprendimiento exotérmico de hidrógeno!). La mezcla de reacción se agitó durante 15-120 min con calentamiento gradual a temperatura ambiente. En algunos casos, se generan copiosas cantidades de un precipitado durante la reacción. La reacción se controló mediante TLC y/o CL/EM hasta su finalización. La mayoría de los volátiles (variantes A y B) se evaporaron a presión reducida (evaporador rotatorio; temperatura del baño de ambiente a 35 °C). El residuo se disolvió en acetato de etilo (EtOAc) y la fase orgánica se lavó sucesivamente con una solución saturada acuosa de hidrogenocarbonato sódico (NaHCOa) (2*) y salmuera (1*). La solución orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro (MgSO4), se filtró y los disolventes orgánicos se evaporaron a sequedad a presión reducida. Si se usan ácidos no volátiles (Variante C), la mezcla de reacción se diluye con agua y se neutraliza (pH 5-7) con hidrogenocarbonato sódico sólido (NaHCOa). La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (EtOAc) (3*) y los extractos orgánicos combinados se trataron como se describen para las Variantes A y B. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice o se volvió a cristalizar.
Descripción 8
Procedimiento General para la Desprotección mediante hidrólisis ácida con ácidos acuosos fuertes
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Taylor, et al., Chem. Biol. Drug Des., 2007, 70(3), 216-226; Buss, et al., J. Fluorine Chem., 1986, 34(1), 83-114; Abela, et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1997, (20), 2258-2263; Weisz, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1995, 5(24), 2985-2988; Zheng, Bioorg., Med., Chem., 2010, 18(2), 880-886; Haines, et al., J. Med. Chem., 1987, 30, 542-547; y Matharu, et al., Bioorg., Med., Chem., Lett., 2010, 20, 3688-3691), la retirada hidrolítica de los grupos protectores se realizó calentando una suspensión o solución de la correspondiente N-mostaza protegida (1 mmol) en 2-12 M de un ácido hidrohalogénico acuoso (5-10 ml / mmol) o un 20-80 % en volumen. mezcla de un ácido hidrohalogenico acuoso 2-12 M con 1,4-dioxano (5-10 ml/mmol) a una temperatura elevada de aproximadamente 30°C a aproximadamente 150 °C (tubo cerrado herméticamente) durante 1-24 h. La reacción fue seguida por TLC y/o CL/EM hasta su finalización. Los productos secundarios orgánicos, por ejemplo, ácido ftálico o ácido benzoico, se pueden extraer con un disolvente orgánico, por ejemplo, acetato de etilo (EtOAc) o cloroformo (CHCh). La solución acuosa o los disolventes orgánicos volátiles se evaporaron usando un evaporador rotatorio (temperatura del baño de agua de 40 °C a 60 °C) para producir el producto diana en bruto que puede disolverse en acetonitrilo acuoso (MeCN) al -50 % en volumen seguido de liofilización. Cuando sea aplicable, el compuesto objetivo bruto se purificó adicionalmente mediante purificación RP-HPLC usando mezclas de acetonitrilo/agua que contienen 0,05-0,1 % en volumen de ácido fórmico (FA) o ácido trifluoroacético (TFA) seguido de liofilización primaria, opcionalmente en presencia de 1,0 o un exceso de un ácido capaz de formar productos de adición de sal farmacéuticamente aceptables. Cuando sea aplicable, el material en bruto se purificó por recristalización, titulación o precipitación repetida.
Descripción 9
Desprotección global en condiciones anhidras con ácidos fuertes
Variante A: Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Springer, et al., J. Med. Chem., 1990, 33(2), 677-681; Davies, et al., J. Med. Chem. 2005, 48(16), 5321-5328; Niculesscu-Duvaz, et al., J. Med. Chem., 2004,47(10), 2651­ 2658; Verny y Nicolas, J. Label. Cmpds, Radiopharm., 1988, 25(9), 949-955; Thorn, et al., J. Org. Chem, 1975,40(11), 1556-1558; Baraldini, et al., J. Med. Chem., 2000, 53(14), 2675-2684; Gourdi, et al., J. Med. Chem., 1990, 33(4), 1177­ 1186; y Kupczyk-Subotkowska, et al., J. Drug Targeting, 1997,4(6), 359-370), una solución del correspondiente precursor de aminoácido p sustituido con W,W-bis(2-cloroetil)arilo protegido (1,0 mmol) en ácido trifluoroacético puro (TFA), una mezcla de TFA y diclorometano (DCM) o 1,2-dicloroetano (DCE) (TFA al 90 % en vol. a disolvente orgánico al 90 % en vol.) o ácido fórmico (HCO2H) al 98 % (10-25 ml/mmol) se agitó aproximadamente a temperatura ambiente durante aproximadamente 1-24 h. Opcionalmente, captadores (2-5 mmol) tales como trietilsilano (EtaSiH), triisopropilsilano (IiPr3SiH), tioanisol (PhSMe) o 1,2-ditioetano (HSCH2CH2HS) se añadieron a la mezcla de reacción para suprimir reacciones secundarias no deseadas (Metha, Tetrahedron Lett., 1992, 33(37), 5411-5444). La reacción fue seguida por TLC y/o CL/EM analítica hasta su finalización. El disolvente se retiró a presión reducida usando un evaporador rotatorio (temperatura del baño de agua a aparoximadamente 30 °C). Opcionalmente, las trazas de ácido residual se retiran azeotrópicamente mediante co-evaporación repetida (5-10*) a presión reducida usando un codisolvente adecuado, por ejemplo, acetato de etilo (EtOAc), tolueno o DCM para producir el compuesto diana en bruto, que puede usar directamente en experimentos in vitro o in vivo. La purificación adicional se realizó como se describe para la Descripción 8.
Variante B: Adaptando protocolos bibliográficos conocidos, una solución del precursor de Y-aminoácido sustituido con W,W-bis(2-cloroetil)arilo protegido correspondiente (1,0 mmol) en cloruro de hidrógeno 2 M en éter dietílico (HCl 2,0 M en Et2O) o cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (HCl 4,0 M en 1,4-dioxano) se agitó a aproximadamente la temperatura ambiente durante aproximadamente 1-36 h. Opcionalmente, los depuradores son los mismos que en la variante A. La reacción fue seguida de TLC y/o CL/EM analítica hasta su finalización. La mezcla de reacción se centrifugó durante aproximadamente 10 min a 3000 rpm, el sobrenadante se decanta o se pipetea y el precipitado se suspendió en Et2O anhidro repitiendo la secuencia de centrifugación/lavado (2-3*). El compuesto diana en bruto puede usarse directamente en experimentos in vitro o in vivo. La purificación adicional se realizó como se describe para la Descripción 8.
Descripción 10
Procedimiento general para la bromación de alcoholes bencílicos a bromuros bencílicos
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Harrison y Diehl, Org. Synth., 1955, Coll. Vol. 3, 370), el alcohol bencílico (50 mmol) se disolvió en diclorometano anhidro (DCM) (aproximadamente 100-150 ml) y la solución se enfrió a aproximadamente 0° (baño de hielo). A la solución se le añadió gota a gota una solución comercial 1,0 M de tribromuro de fósforo (PBr3) (50 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante aproximadamente 1-2 h a esta temperatura. La reacción fue seguida de TLC hasta su finalización. La mezcla de reacción se vertió sobre una mezcla de hielo triturado y una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio. Después de la separación de fases, la fase acuosa se extrajo con DCM o acetato de etilo (EtOAc) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con una solución saturada acuosa de hidrogenocarbonato sódico (NaHCO3) (1x) y salmuera (1 *), se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro (MgSO4), se filtraron, el residuo del filtro se lavó con DCM y los filtros orgánicos combinados se evaporaron a presión reducida. Si fuese necesario, el material en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice o se volvió a cristalizar.
Descripción 11
Procedimiento general para la homologación de aminoácidos Arndt-Eistert
Parte A: Adaptando protocolos bibliográficos (Aldrich Technical Bulletin: Diazald® y Diazomethane Generators; Black, Aldrichchimica Acta, 1983, 16(1), 3-10; y Lombardy, Chem. Ind., 1990, 708), una solución de diazometano (CH2N2) en éter dietílico (Et2O) se preparó recientemente antes de su uso en un aparato Aldrich Diazald® mediante la adición de una solución de N-metil-N-nitrosotolueno-4-sulfonamida comercial (Diazald®) (15 g, 70,0 mmol) en Et2O (150 ml) a una mezcla de reacción que contenía hidróxido de potasio (KOH) (15 g, 267 mmol) en Et2O (25 ml), agua (30 ml) y 2-(2-etoxietoxi)etanol (50 ml) a aproximadamente 65 °C (baño de aceite). La reacción se completó cuando el color amarillo desapareció. El CH2N2 está atrapado en Et2O.
Parte B: Adaptando protocolos bibliográficos (Podlech y Seebach, Liebigs Ann., 1995, 1217- 1228; Limbach, et al., Liebigs Ann., 2006, 89(7), 1427 -1441; Podlech y Seebach, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1995, 34(4), 471-472; Müller, et al., Synthesis, 1998, (6), 837-841); y Bartosz-Bechowski y Konopinska, J. Prakt. Chem., 1989, 331(3), 532-536), se disolvió un derivado de aminoácido N-protegido (10 mmol) en una atmósfera de nitrógeno en tetrahidrofurano anhidro (THF) y la solución se enfrió a aproximadamente -20 °C (baño de hielo seco/acetona). A la solución se le añadió N-metilmorfolina (NMM) (13 mmol), seguido de cloroformiato de isobutilo puro (12 mmol). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -20 °C durante aproximadamente 2 h, cuando se añadió un exceso de (5-10 equivalentes) de la solución etérea de diazometano recién preparada. Opcionalmente, el clorhidrato de NMM (NMM HCl) precipitado se filtró en una atmósfera de nitrógeno antes de la diazotación. La mezcla de reacción se calentó gradualmente a temperatura ambiente y se agitó durante 2 h más. El exceso de diazometano se apagó con unas gotas de ácido acético (HOAc). Los disolventes se retiraron a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El residuo se disolvió en una mezcla de Et2O y acetato de etilo (EtOAc). El tratamiento acuoso básico con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico (NaHCOa) y la cromatografía en columna de gel de sílice proporcionan los diazocetonmas normalmente como sólidos de color amarillo claro.
Parte C: Adaptando protocolos bibliográficos (véase Parte B), se disolvió una diazocetona N-protegida (10 mmol) en una atmósfera de nitrógeno en metanol anhidro (MeOH) (aproximadamente 2-4 ml) y tetrahidrofurano anhidro (THF) (aproximadamente 20-25 ml) y la solución se desgasificó y se colocó en un atmósfera de nitrógeno (ciclo de evacuación/recarga 3 veces) y en exclusión de la luz (solar). Una mezcla de benzoato de plata (AgBz) (5,0 mmol) en THF (aproximadamente 5-10 ml) y trietilamina (TEA) (20 mmol) se añadió lentamente a temperatura ambiente. ¡Desprendimiento de gas! La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 1-4 horas a temperatura ambiente y se concentró a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El residuo se purifica por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando mezclas de (EtOAc) y hexano.
Descripción 12
Procedimientos generales para la preparación de ésteres de succinimidilo
Adaptando un protocolo bibliográfico (Dexter y Jackson, J. Org. Chem., 1999, 64, 7579-7585), a una solución agitada del éster p-alquílico del ácido aspártico N-protegido (25 mmol) en acetato de etilo (EtOAc) o acetonitrilo (MeCN) (aproximadamente 25-75 ml) se le añadió N-hidroxisuccinimida sólida (NHS, HOSu) (26-28 mmol) a aproximadamente 0° (baño de hielo). Una solución de diciclohexilcarbodimide (DCC) (25-26 mmol) en EtOAc o MeCN (aproximadamente 25 ml) se añadió lentamente. Opcionalmente, se añadió DCC sólido en pequeñas porciones. Opcionalmente, cualquiera de los agentes de activación de ácido carboxílico comunes se puede usar para esta reacción (Montalbetti y Falque, Tetrahedron, 2005, 61, 10827-10852; y Valeur y M Bradley, Chem. Soc. Rev., 2009, 38, 606-631).La reacción se agitó con calentamiento gradual a temperatura ambiente durante aproximadamente 6-24 horas. La reacción se controló por TLC hasta su finalización. La diciclohexilurea (DCU) precipitada se filtró con un embudo Büchner y el filtrado se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico (NaHCOa) (3x), salmuera (1x), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro (MgSO4), se filtró y se evaporó a presión reducida usando un evaporador rotatorio. Los ésteres de OSu se obtuvieron usualmente con un rendimiento cuantitativo y pueden tener la pureza suficiente para usarse directamente en las etapas siguientes sin aislamiento ni purificación adicionales.
Descripción 13
Procedimientos generales para la reducción de ésteres de succinimidilo a alcoholes
Adaptando un protocolo bibliográfico (Dexter y Jackson, J. Org. Chem., 1999, 64, 7579-7585), borohidruro sódico (NaBH4) (15-20 mmol) se disolvió en agua (aproximadamente 3-6 ml) y tetrahidrofurano (aproximadamente 25-50 ml) a aproximadamente 0 °C (baño de hielo). Se añadió una solución del éster de succimidilo (10,0 mmol) en THF (aproximadamente 5-10 ml) durante aproximadamente 1 minuto. La reacción se controló mediante TLC hasta su finalización (<30 min). La reacción se interrumpió a través de la adición de ácido clorhídrico 1,0 M (pH ~ 1 -2) o una solución saturada acuosa de cloruro de amonio (NH4Cl). Los volátiles (THF) se retiraron parcialmente a presión reducida usando un evaporador rotatorio. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (EtOAc) (3*). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con una solución saturada acuosa de hidrogenocarbonato sódico (NaHCO3) (1 *), salmuera (1 *), se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro (MgSO4), se filtraron y se evaporaron a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando mezclas de EtOAc y hexano.
Descripción 14
Procedimientos generales para la preparación de yoduros a partir de alcoholes
Adaptando un protocolo bibliográfico (Dexter y Jackson, J. Org. Chem., 1999, 64, 7579-7585), trifenilfosfina (40 mmol), imidazol (40 mmol) y yodo (40 mmol) se añadieron a diclorometano anhidro (DCM) (aproximadamente 100-120 ml). Una solución del alcohol (40 mmol) en DCM (aproximadamente 40 ml) se añadió a temperatura ambiente. La reacción se controló por TLC hasta su finalización (aproximadamente 1-2 h). La mezcla de reacción se filtró (embudo de Büchner) para retirar el óxido de trifenilfosfina precipitado (Ph3PO) y el filtrado se lavó con una solución acuosa 1,0 M de tiosulfato sódico (Na2S2O3) (2 *), salmuera (1 *), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro (MgSO4), se filtró y se evaporó a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El residuo se suspendió primero en éter dietílico (retirada de Ph3PO adicional), se filtró a través de un lecho corto de gel de sílice o se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice.
Descripción 15
Procedimiento general para el acoplamiento de Negishi con haluros aromáticos
Parte A: Adaptando protocolos bibliográficos (Dexter y Jackson, J. Org. Chem., 1999, 64, 7579-7585; Dexter, et al., J. Org. Chem., 2000, 65, 7417-7421; Jackson y M. Perez-Gonzales, Org. Synth., 2005, 81, 77-88; Ross, J. Org. Chem., 2010, 75, 245-248; Anzalone, et al., Patente U.S. n.° 8.710,256; Hoepping, et al., Publicación internacional n.° WO 2014/095739; y Jackson y Perez-Gonzales, Org. Synth., 2005, 81, 77-88), polvo de cinc (Zn) (30 mmol, 3-6 equivalentes) se suspendió en una atmósfera de gas inerte (nitrógeno o argón) en N,N-dimetilformamida desgasificada anhidra (DMF), N,N-dimetil acetamida (DMAc o DMA), tetrahidrofurano (Th F) o 2-metil-tetrahidrofurano (2-Me-THF) (aproximadamente 5-10 ml). El cinc metálico se activó mediante la adición de yodo elemental (I2) (aproximadamente 1,5-3,0 mmol, 15-30 % mol) y cloruro de trimetilsililo (MeSiCl, TMSCl) (aproximadamente 1,5-3,0 mmol, 15-30 % mol). Después de disminuir la exotermia, se añadió el compuesto de yodo apropiado (5-10 mmol), opcionalmente como una solución en una pequeña cantidad del mismo disolvente anhidro y desgasificado, seguido de la adición de las mismas cantidades de I2 y TMSCl. Opcionalmente, puede usarse una combinación de 1,2-dibromoetano (3 mmol, 30 % mol) y TMSCl (6 % mol) para activar el polvo de cinc. Después de que la exotermia disminuyese a temperatura ambiente y la sedimentación del polvo de cinc, el sobrenadante que contiene el compuesto orgánico de cinc apropiado estaba listo para usarse en la reacción de acoplamiento cruzado de Negishi posterior.
Parte B: Adaptando protocolos bibliográficos (véase Parte A), el sobrenadante que contenía el compuesto orgánico de cinc apropiado se transfirió a una solución del haluro de arilo (6,5-13 mmol, 1,3 equivalentes), tris(bencilidenoacetona)dipaladio (Pd2(dba)3) (0,125-0,25 mmol, 2,5 % mol) y tris(o-tolil)fosfina (P(o-tol)3) (0,5-1 mmol, 10 % mol) o SPhos (2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo) (0,25-0,5 mmol, 5% mol) en N,N-dimetilformamida (DMF) anhidra desgasificada en seco, N,N-dimetil acetamida (DMAc o DMA), tetrahidrofurano (THF) o 2-metiltetrahidrofurano (2-Me-THF) (aproximadamente 5-10 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1-12 horas o se calentó bajo una atmósfera de gas inerte hasta aproximadamente 40-60 °C durante aproximadamente 1-12 horas. Se requirió calentamiento para acoplar de forma cruzada los bromuros de arilo. La reacción fue seguida por TLC y/o CLEM hasta su finalización. A la dilución con agua le siguió la extracción de la fase acuosa con acetato de etilo. (EtOAc) (3*). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con una solución saturada acuosa de hidrogenocarbonato sódico (NaHCO3) (1 *), salmuera (1 *), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro (MgSO4), se filtró y se evaporó a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando mezclas de EtOAc y hexano.
Descripción 16
Procedimiento general para la N,N-Bis-(2-hidroxietilación) de anilinas con óxido de etileno
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Palmer, et al., J. Med. Chem. 1990, 33(1), 112-121; Jordan, et al., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10(8), 2625-2633; Abela Medici, et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1997, (20), 2258­ 2263; Feau, et al., Org. Biomolecular Chem., 2009, 7(24), 5259-5270; Springer, et al., J. Med. Chem., 1990, 33(2), 677-681; Taylor, et al., Chem. Biol. Drug Des., 2007, 70(3), 216-226; Buss, et al., J. Fluorine Chem., 1986, 34(1), 83­ 114; Larden y Cheung, Tetrahedron Lett., 1996, 37(42), 7581-7582; Spreitzer y Puschmann, Monatshefte für Chemie, 2007, 138(5), 517-522; Niculesscu-Duvaz, et al., J. Med. Chem., 2004, 47(10), 2651-2658; Weisz, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1995, 5(24), 2985-2988; Thorn, et al., J. Org. Chem, 1975, 40(11), 1556-1558; Baraldini, et al., J. Med., Chem., 2000, 53(14), 2675-2684; Zheng, et al., Bioorg., Med., Chem., 2010, 18(2), 880-886; Gourdi, et al., J., Med., Chem., 1990, 33(4), 1177-1186; Haines, et al., J. Med. Chem., 1987, 30, 542-547; Matharu, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2010, 20, 3688-3691; y Kupczyk-Subotkowska, et al., J. Drug Targeting, 1997, 4(6), 359-370), una mezcla de la correspondiente anilina (25,0 mmol) en ácido acético acuoso (HOAc) (25-75 % vol.) (25-100 ml) se enfrió a aproximadamente -20 °C (baño de hielo/cloruro sódico) a aproximadamente 0 °C (baño de hielo). Opcionalmente, el disolvente también puede ser ácido acético glacial (HOAc), agua, tetrahidrofurano (THF), etanol (EtOH), 1,4-dioxano (para reacciones a temperaturas más altas) o mezclas de cualquiera de los anteriores. Se añadió un exceso de óxido de etileno (oxirano) (100-400 mmol) a la mezcla de reacción pura en forma preenfriada o disuelta en cualquiera de los disolventes anteriores o mezclas de los mismos. La mezcla de reacción se agitó aproximadamente a la temperatura ambiente durante aproximadamente 12-48 h. Como alternativa, la mezcla de reacción puede calentarse en un tubo de reacción cerrado herméticamente a 80-140 °C durante un tiempo similar. La reacción fue seguida de TLC y/o CL/EM y usualmente se completó cuando la mezcla de reacción se volvió transparente. Los disolventes se retiraron a presión reducida usando un evaporador rotatorio (temperatura del baño de agua de 40-60 °C). El residuo se diluyó con acetato de etilo (EtOAc), se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro (MgSO4) o sulfato sódico (Na2SO4), se filtró y los disolventes se retiraron a presión reducida usando un evaporador rotatorio para producir el compuesto objetivo, que se puede usar directamente en la siguiente etapa. Además, el material en bruto puede purificarse por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando EtOAc, metanol (MeOH), diclorometano y hexanos, o mezclas de cualquiera de los anteriores para formar el compuesto diana purificado. Como alternativa, el compuesto diana en bruto además puede purificarse mediante recristalización.
Descripción 17
Procedimientos generales para la cloración de grupos W,W-bis(2-hidroxietilo)
Variante A: Cloración con cloruro de tionilo (SOCI2)
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Palmer, et al., J. Med. Chem. 1990, 33(1), 112-121; Jordan, et al., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10(8), 2625-2633; Abela Medici, et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1997, (20), 2258­ 2263; Taylor, et al., Chem. Biol. Drug Des., 2007, 70(3), 216-226; Dheyongera, Bioorg. Med. Chem. 2005, 13(3), 689­ 698; Zheng, Bioorg. Med. Chem. 2010, 18(2), 880-886; Gourdi, J. Med. Chem., 1990, 33(4), 1177-1186; y Lin, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2011, 21(3), 940-943), a una solución de cloruro de tionilo (SOCh) (10-75 mmol) en un disolvente orgánico anhidro, por ejemplo, diclorometano (DCM), cloroformo (CHCh), 1,2-dicloroetano (DCM), benceno, o mezclas de cualquiera de los anteriores (25-100 ml) a una temperatura de aproximadamente 0°C (baño de hielo) a aproximadamente la temperatura ambiente, el correspondiente derivado de N,N-bis (2-hidroxietilo) (5,0 mmol), ya sea en forma pura (porciones) o como una solución en un pequeño volumen en cualquiera de los disolventes anteriores. La mezcla de reacción se agitó de aproximadamente la temperatura ambiente a aproximadamente 40 °C o se calentó a reflujo durante aproximadamente 10 minutos a aproximadamente 3 h. Opcionalmente, la reacción se realizó usando SOCl2 puro directamente como disolvente. Opcionalmente, la reacción se realizó en presencia de una cantidad catalítica de cloruro de cinc (ZnCh) (10 %mol a 40 % mol) o N,N-dimetilformamida (aproximadamente 1 a 3 gotas) para facilitar la reacción (Squires, et al., J. Org. Chem., 1975, 40(1), 134-136; y Abela Medici, et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1997, (20), 2258-2263). La reacción fue seguida por TLC y/o CL/EM hasta su finalización. Los volátiles (disolventes y exceso de SOCh) se retiraron a presión reducida usando un evaporador rotatorio. Opcionalmente, se añadió una pequeña cantidad de codisolvente, por ejemplo, de benceno, para ayudar en la coevaporación azeotrópica y la retirada del exceso de agente de cloración residual. El residuo se diluyó con ácido clorhídrico 1,0 M (HCl). La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (EtOAc) (3 veces) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico (NaHCOa) (2*) y salmuera (1*). La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro (MgSO4) o sulfato sódico (Na2SO4), se filtró y los disolventes se retiraron a presión reducida usando un rotavapor. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice usando mezclas de EtOAc y hexanos.
Variante B: Cloración con cloruro de fosforilo (POCh)
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Palmer, et al., J. Med. Chem. 1990, 33(1), 112-121; Feau, et al., Org. Biomolecular Chem., 2009, 7(24), 5259-5270; Valu, et al., J. Med. Chem., 1990, 33(11), 3014-3019; Baraldini, et al., J. Med., Chem., 2000, 53(14), 2675-2684; Gourdi, et al., J., Med., Chem., 1990, 33(4), 1177-1186; Haines, et al., J. Med. Chem., 1987, 30, 542-547; y Matharu, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2010, 20, 3688-3691), a una solución de oxicloruro de fósforo (V) (cloruro de fosforilo, POCh) (10-50 mmol) en un disolvente orgánico anhidro, por ejemplo, benceno, acetonitrilo, piridina, o mezclas de cualquiera de los anteriores (25-100 ml) a una temperatura de aproximadamente 0 °C (baño de hielo) a aproximadamente la temperatura ambiente, el correspondiente derivado de N,N-bis (2-hidroxietilo) (5,0 mmol), ya sea en forma pura (porciones) o como una solución en un pequeño volumen en cualquiera de los disolventes anteriores. El resto de la reacción, el tratamiento y el aislamiento del producto se llevaron a cabo esencialmente como se describe en la Variante A.
Variante C: Cloración con cloruro de metanosulfonilo/piridina
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Jordan, et al., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10(8), 2625-2633; Abela Medici, et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1997, (20), 2258-2263; Springer, et al., J. Med. Chem., 1990, 33(2), 677­ 681; Larden y Cheung, Tetrahedron Lett., 1996, 37(42), 7581-7582), una solución de cloruro de metanosulfonilo (MsCl) (20,0 mmol) en piridina anhidra (aproximadamente 10 ml) se añadió gota a gota con agitación y a una temperatura de aproximadamente 0 °C (baño de hielo) a una solución del derivado correspondiente de N,N-bis(2-hidroxietilo) (5 mmol) en piridina anhidra (aproximadamente 10 ml). Después de aproximadamente 30 minutos, la mezcla de reacción se calentó a 50-100 °C durante aproximadamente 1-3 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, los precipitados potenciales, si los hubiese, por ejemplo, metansulfonato de piridinio, se filtraron antes de que los disolventes se retiraron parcialmente a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El resto de la reacción, el tratamiento y el aislamiento del producto se llevaron a cabo esencialmente como se describe en la Variante A.
Variante D: Cloración con trifenilfosfina/tetraclorocarbono (PPh3/CCl4)
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Buss, et al., J. Fluorine Chem., 1986, 34(1), 83-114; y Kupczyk-Subotkowska, et al., J. Drug Targeting, 1997,4(6), 359-370), una solución del derivado correspondiente de N,N-bis(2-hidroxietilo) (5 mmol) en diclorometano anhidro (DCM) (aproximadamente 25 ml) que contenía tetracloruro de carbono (CCl4) (15-25 mmol) se enfrió a aproximadamente 0 °C (baño de hielo). Como alternativa, se usó tetracloruro de carbono puro (CCU) (25 ml) como un disolvente de reacción. La mezcla de reacción se agitó y se añadió en porciones trifenilfosfina (Ph3P) (10-15 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 8-14 h con calentamiento gradual a temperatura ambiente. Como alternativa, la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante aproximadamente 2-6 h. La reacción fue seguida por TLC y/o CL/EM hasta su finalización. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y los disolventes se retiraron a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El residuo se trituró con éter dietílico (Et2O) (3*) para retirar algo de óxido de trifenilfosfina (PI^PO). La fase orgánica se evaporó a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El resto de la reacción, el tratamiento y el aislamiento del producto se llevaron a cabo esencialmente como se describe en la Variante A.
Descripción 18
Procedimiento general para la mesilación de grupos N,N-bis (2-hidroxietilo)
Variante A: Adaptando protocolos bibliográficos (Davies, et al., J. Med. Chem. 2005, 48(16), 5321-5328; Springer, et al., J. Med. Chem., 1990, 33(2), 677-681; Niculesscu-Duvaz, et al., J. Med. Chem., 2004,47(10), 2651-2658; y Yang, et al., Tetrahedron, 2007, 63(25), 5470-5476), a una solución enfriada (aproximadamente 0 °C (baño de hielo)) del correspondiente derivado de of N,N-bis(2-hidroxietilo) (5,0 mmol) en diclorometano anhidro (DCM) (25-50 ml) se le añadieron trietilamina (Et3N, TEA) (25,0 mmol) o piridina anhidra (25,0 mmol) y una cantidad catalítica de 4-N,N-(dimetilamino)piridina (DMAP) (1,0 mmol, 20 % mol). Se añadió en porciones metanosulfonil anhídrido (Ms2O) (20,0 mmol) o como una solución en DCM (5-10 ml). La mezcla de reacción se agitó con calentamiento gradual a temperatura ambiente durante aproximadamente 8-24 h. La reacción fue seguida por TLC y/o CL/EM. Los disolventes se retiraron a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El residuo se diluyó con ácido clorhídrico 1,0 M (HCl) y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (EtOAc) (3*). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con una solución saturada acuosa de hidrogenocarbonato sódico (NaHCOa) y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro (MgSO4) o sulfato sódico (Na2SO4), se filtraron y los disolventes se retiraron a presión reducida usando un evaporador rotatorio para producir el compuesto diana, que puede usarse directamente en la siguiente etapa. Como alternativa, el residuo en bruto además puede purificarse por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando EtOAc, metanol (MeOH), diclorometano (DCM) y hexanos, o mezclas de cualquiera de los anteriores para formar el compuesto diana purificado. Como alternativa, el compuesto diana en bruto además puede purificarse mediante recristalización.
Variante B: Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Palmer, et al., J. Med. Chem. 1990, 33(1), 112-121; B. D. Palmer, et al., J. Med. Chem., 1994, 37, 2175-2184; Palmer, et al., J. Med. Chem, 1996, 39(13), 2518-2528; Spreitzer y Puschmann, Monatshefte für Chemie, 2007, 138(5), 517-522; Lin, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2011, 21(3), 940­ 943; Gourdi, et al., J. Med. Chem., 1990, 33(4), 1177-1186; Ferlin, et al., Bioorg. Med. Chem., 2004, 12(4), 771-777; Thorn, et al., J. Org. Chem, 1975, 40(11), 1556-1558; Coggiola, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2005, 15(15), 3551­ 3554), a una solución enfriada (aproximadamente 0 °C (baño de hielo)) del correspondiente derivado de N,N-bis(2-hidroxietilo) (5,0 mmol) en diclorometano anhidro (DCM), tetrahidrofurano (THF), acetato de etilo (EtOAc) o una mezcla de los mismos (20-40 ml) se le añadieron trietilamina (EtaN, TEA) (15,0 mmol) o piridina anhidra (25,0 mmol). Se añadió gota a gota cloruro de metanosulfonilo (MsCl) (12,5 mmol) a la mezcla de reacción. La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 1-2 h a esta temperatura. La reacción fue seguida por TLC y/o CL/EM. El tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en gel de sílice se realizaron como se describe para la Variante A.
Descripción 19
Procedimiento general para la conversión de Finkelstein en grupos N,N-bis(2-halogenoetilo)
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Palmer, et al., J. Med. Chem. 1990, 33(1), 112-121; Palmer, et al., J. Med. Chem., 1994, 37, 2175-2184; Palmer, et al., J. Med. Chem., 1996, 39(13), 2518-2528; Davies, et al., J. Med. Chem. 2005, 48(16), 5321-5328; Niculesscu-Duvaz, et al., J. Med. Chem., 2004, 47(10), 2651-2658; Weisz, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1995, 5(24), 2985-2988; Thorn, J. Org. Chem, 1975,40(11), 1556-1558; Lin, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2011, 21(3), 940-943; Gourdi, et al., J. Med. Chem. 1990, 33(4), 1177-1186; Yang, et al., Tetrahedron, 2007, 63(25), 5470-5476; Ferlin, et al., Bioorg. Med. Chem., 2004, 12(4), 771-777; y Coggiola, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2005, 15(15), 3551-3554), una suspensión del correspondiente derivado de N,N-bis(2metilsulfoniloxietilo) (5,0 mmol) y un haluro de metal alcalino, por ejemplo, cloruro de litio (LiCl), bromuro de litio (LiBr), cloruro sódico (NaCl), bromuro sódico (NaBr) o yoduro sódico (NaI) (20-80 mmol) en un disolvente orgánico anhidro, por ejemplo, N,N-dimetilformamida (DMF), N,Ñ-dimetilacetamida (DMAc), acetona, 2-butanona (metil etil cetona, MEK), 3-metil-2-butanona (isopropil metil cetona, MIPK), acetonitrilo (MeCN), metanol (MeOH), tetrahidrofurano (THF), acetato de etilo (EtOAc) o una mezcla de cualquiera de los anteriores (10-30 ml), se agitó a temperatura ambiente o se calentó a 50-150°C durante aproximadamente 1-12 h. La reacción fue seguida por TLC y/o CL/EM hasta su finalización. Los disolventes se retiraron parcial o completamente a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El residuo se diluyó con ácido clorhídrico 1,0 M (HCl) y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (EtOAc) (3*). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con una solución saturada acuosa de hidrogenocarbonato sódico (NaHCOs) y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro (MgSO4) o sulfato sódico (Na2SO4), se filtraron y los disolventes se retiraron a presión reducida usando un evaporador rotatorio para producir el compuesto diana, que puede usarse directamente en la siguiente etapa. Como alternativa, el residuo en bruto además puede purificarse por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando EtOAc, metanol (MeOH), diclorometano (DCM) y hexanos, o mezclas de cualquiera de los anteriores para formar el compuesto diana purificado. Como alternativa, el compuesto diana en bruto además puede purificarse mediante recristalización.
Ejemplo de referencia 1
Ácido 3-amino-3-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]propanoico (1)
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Etapa A: (2-Metil-5-nitro-fenil)metanol (1a)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 1, se preparó 2-metil-5-nitrofenil)metanol (1a) a partir de ácido 2-metil-5-nitrobenzoico comercial (50,0 g, 276 mmol) con complejo de borano y sulfuro de dimetilo (2,0 M BH3 SMe2 en THF) (166 ml, 332 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (400 ml) para producir 44,0 g prendimiento cuantitativo) del compuesto diana (1a) en forma de un sólido de color amarillo pálido que era de suficiente pureza para usarse directamente en la siguiente etapa sin aislamiento ni purificación adicional. Fr: ~0,50 (EtOAc/Hxn =1:1 v/v). RMN 1H (300 MHz, CDCl3): 58,30 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,05 (dd, J = 8,4, 2,4 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 4,78 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 2,41 (s, 3H), 1,87 (t a, J = 5,1 Hz, 1H) ppm. El compuesto también está disponible comercialmente.
Etapa B: 2-Metil-5-nitro-benzaldehído (1b)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 2 (Variante A), se preparó 2-metil-5-nitrobenzaldehído (1b) (Beech, J. Chem. Soc. (C), 1967, 2374-2375) a partir de 2-metil-5-nitro-fenil)metanol (1a) (16,3 g, 97,3 mmol) en presencia de dimetilsulfóxido (Dm So ) (56,8 ml, 62,6 g, 0,80 mol), trietilamina (TEA, Et3N) (69,5 ml, 50,6 g, 0,50 mmol) y complejo de trióxido de azufre y piridina (SO3 piridina) (47,8 g, 0,30 mol) en diclorometano (600 ml). La purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando una mezcla de acetato de etilo (EtOAc) y hexano (EtOAc/hexano = 1:4 v/v) proporcionó 12,6 g (rendimiento del 78 %) of el compuesto diana (1b) en forma de un sólido de color amarillo-beis.
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 2 (Variante B), se preparó 2-metil-5-nitrobenzaldehído (1b) (Beech, J. Chem. Soc. (C), 1967, 2374-2375) a partir de 2-metil-5-nitro-fenil)metanol (1b) (4,03 g, 24,1 mmol) en presencia de dióxido de manganeso (MnO2) (22 g, 254 mmol) en diclorometano (DCM) (100 ml). El tratamiento proporcionó 3,56 g (rendimiento del 89 %) del compuesto diana (1b) en forma de un sólido de color amarillo pálido a beis. El material era de suficiente pureza para usarse directamente en la siguiente etapa sin aislamiento y purificación adicional.
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 2 (Variante C), se preparó 2-metil-5-nitrobenzaldehído (1b) (Beech, J. Chem. Soc. (C), 1967, 2374-2375) a partir de 2-metil-5-nitro-fenil)metanol (1a) (5,00 g, 29,9 mmol) en presencia de clorocromiato de piridinio (PCC) (9,02 g, 41,9 mmol) en diclorometano (DCM) (150 ml). La purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando mezclas de acetato de etilo (EtOAc) y hexano (EtOAc/hexano = 1:4 v/v ^ EtOAc/hexano = 1:4 v/v) proporcionó 4,67 g (rendimiento del 94 %) del compuesto diana (1b) en forma de un sólido de color amarillo-beis. Fr: -0 ,76 (EtOAc/Hxn = 1:2 v/v). RMN 1H (300 MHz, CDCh): 810,32 (s, 1H), 8,65 (dd, J = 2,7 Hz, 1H), 8,31 (dd, J = 8,4, 2,4 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 2,79 (s, 3H) ppm. El compuesto también está disponible comercialmente.
Etapa C: Ácido 3-amino-3-(2-metil-5-nitro-fenil)propanoico (1c)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 3, se preparó ácido 3-amino-3-(2-metil-5-nitrofenil)propanoico (1c) a partir de 2-metil-5-nitro-benzaldehído (1b) (5,0 g, 30,3 mmol), ácido malónico (3,2 g, 30,3 mmol) y acetato amónico (NH4OAc) (4,7 g, 60,7 mmol) en etanol (EtOH) (70 ml) a reflujo durante 48 horas (baño de aceite). La reacción fue seguida por CL/EM hasta su finalización. El tratamiento de filtración proporcionó 2,2 g (rendimiento del 32 %) del compuesto diana (1c) en forma de un sólido incoloro que era de suficiente pureza para usarse directamente en la siguiente etapa sin procedimientos de purificación ni aislamiento adicionales. RMN 1H (300 MHz, D2O): 88,20 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,01 (dd, J = 8,1,2,1 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 4,84 (t, J = 6,9 Hz, 1H), 2,80-2,60 (m, 2H), 2,37 (s, 3H) ppm. CL/EM: Tr = 0,480 min; IEN (pos.) m/z = 225,1 (M+H+)+, IEN (neg.) m/z = 223,0 (M-H+)- 447,1 (2M-H)+.
Etapa D: Clorhidrato de 3-amino-3-(2-metil-4-nitro-fenil)propanoato de metilo (1d)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 4, se preparó clorhidrato de 3-amino-3-(2-metil-4-nitrofenil)propanoato de metilo (1d) en una suspensión en metanol anhidro (MeOH) (40 ml) a partir de ácido 3-amino-3-(2-metil-5-nitro-fenil)propanoico (1c) (2,2 g, 9,81 mmol) con cloruro de tionilo puro (SOCh) (3,54 ml, 5,8 g, 49,1 mmol). El tratamiento evaporativo proporcionó 2,73 g (rendimiento aproximadamente cuantitativo) del compuesto diana (1d) en forma de un sólido incoloro, que era de pureza suficiente para usarse directamente en el siguiente paso sin más procedimientos de purificación y aislamiento. RMN 1H (300 Mh z , DMSO-d6): 88,86 (s a, 3H), 8,60 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 8,11 (dd, J = 8,4, 2,1 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,86 (m a, 1H), 3,53 (s, 3H), 3,29 (dd, J = 16,8, 6,0 Hz, 1H), 3,13 (dd, J = 16,8, 8,7 Hz, 1H) ppm. CL/EM: Tr = 0,492 min; IEN (pos.) m/z = 239,1 (M+H+)+.
Etapa E: 3-Benciloxicarbonilamino-3-(2-methy1-5-nitro-fenil)propanoato de metilo (1e)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 5, se preparó 3-benciloxicarbonilamino-3-(2-metil-5-nitrofenil)propanoato de metilo (1e) a partir de clorhidrato de 3-amino-3-(2-metil-4-nitro-fenil)propanoato de metilo en bruto (1d) (2,7 g, 9,81 mmol), cloroformiato de bencilo (ZCl, CbzCl) (2,20 ml, 2,63 g de pureza del 95 % = 2,5 g, 14,7 mmol), y diisopropiletilamina (DIPEA, base de Hünigs) (6,87 ml, 5,1 g, 39,2 mmol) en diclorometano anhidro (DCM) (50 ml). El tratamiento acuoso ácido y la purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice proporcionaron 3,4 g (rendimiento del 92 %) del compuesto objetivo (1e) como un sólido incoloro. Fr= 0,44 (EtOAc/Hxn = 1:2 v/v). RMN 1H (300 MHz, CDCla): 88,16 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,24 (dd, J = 8,4, 2,4 Hz, 1H), 7,38-7,26 (m, 6H), 5,86 (d a, 1H), 5,42-5,36 (m a, 1H), 5,09 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 5,04 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,64 (s, 3H), 2,84-2,78 (m a, 2H) ppm. CL/EM: T = 1,790 min; IEN (pos.) m/z = 373,2 (M+H+)+, 767,6 (2M+Na+)+, IEN (neg.) mlz = 743,2 (2M-H+)-.
Etapa F: 3-(5-Amino-2-metil-fenil)-3-benciloxicarbonilamino-propanoato de metilo (1f)
Siguiendo el Procedimiento General para la Descripción 6 (Variante A ), se preparó 3-(5-amino-2-metil-fenil)-3-benciloxicarbonilamino-propanoato de metilo (1f) a partir de 3-benciloxicarbonilamino-3-(2-metil-5-nitrofenil)propanoato de metilo (1e) (3,35 g, 8,99 mmol), polvo de hierro (Fe) (4,5 g, 81,1 mmol) y dihidrato de cloruro de calcio (CaCh'2H2O) (0,6 g, 4,05 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH)/agua (68 ml:12 ml v/v). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 2 horas (baño de aceite). La retirada de los residuos de hierro mediante los procedimientos de filtración y aislamiento del compuesto produjo 3,1 g (aproximadamente rendimiento cuantitativo) del compuesto objetivo (1f) en forma de un sólido de color amarillo claro que tenía la pureza suficiente para usarse directamente en la siguiente etapa sin aislamiento ni purificación adicionales. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 87,85 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,36-7,24 (m, 5H), 6,74 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,51 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 6,33 (dd, J = 8,4, 2,4 Hz, 1H), 5,10-5,00 (m, 1H), 4,98 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 4,92 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 4,79 (s a, 2H), 3,54 (s, 3H) ppm. CL/EM: T = 1,072 min; IEN (pos.) m/z = 365,1 (M+Na+)+, 685,2 (2M+Na+)+, 702,2 (2M+Na+)+.
Etapa G: 3-Benciloxicarbonilamino-3-[5-[bis(2-doroetil)amino]-2-metilfenil]propanoato de metilo (1g)
Siguiendo el Procedimiento General para la Descripción 7 (Variante A), se preparó 3-benciloxicarbonilamino-3-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]propanoato de metilo (1g) a partir de 3-(5-amino-2-metil-fenil)-3-benciloxicarbonilamino-propanoato de metilo (1f) (3,1 g, 9,0 mmol), 2-cloroacetaldehído (~50 % en peso en agua, ~7,87 M) (5,8 ml, 45,6 mmol) y cianoborohidruro sódico (NaBHsCN) (2,4 g de pureza del 95 % = 2,3 g, 36,6 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH) (60 ml) y ácido trifluoroacético (TFA) (30 ml). El tratamiento acuoso y la purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice con una mezcla de acetato de etilo (EtOAc) hexano (EtOAc/hexano = 1:2, v/v) proporcionó 2,90 g (rendimiento del 69 %) del compuesto del título (1g) como un sólido incoloro. Fr = 0,55 (EtOAc/hexano = 1:2, v/v, ninhidrina negativa). RMN 1H (300 MHz, CDCls): 57,40-7,32, (m a, 5H), 7,03 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,58 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,52 (dd, J = 8,4, 2,7 Hz, 1H), 5,78-5,62 (m a, 1H), 5,34-5,26 (m, 1H), 5,09 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 5,07 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 3,78-3,54 (m, 11H), 2,84-2,78 (m, 2H) ppm. CL/EM: Tr = 2,271 min; IEN (pos.) m/z = 467,1 (M+H+)+, 489,1 (M+Na+)+. CL/UV: Tr = 12,939 min, AUC al 100,0 % a A = 254 nm.
Etapa H: Ácido 3-amino-3-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]propanoico (1)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 8, se preparó ácido 3-amino-3-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metilfenil]propanoico (1) se preparó a través de desprotección hidrolítica de 3-benciloxicarbonilamino-3-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metilfenil]propanoato de metilo (1g) (2,9 g, 6,2 mmol) en una mezcla de ácido clorhídrico concentrado (Hcl) (20 ml) y 1,4-dioxano (20 ml) a aproximadamente 100 °C (baño de aceite) en 48 horas. El residuo se purificó por HPLC preparativa, se congeló inmediatamente después de la recogida, seguido de liofilización primaria para proporcionar 728 mg (rendimiento del 33 %) del compuesto objetivo (1) como un sólido incoloro. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 56,98 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,56 (dd, J = 8,4, 2,4 Hz, 1H), 4,36 (dd, J = 9,9, 4,5 Hz, 1H), 3,56-3,53 (m a, 8H), 2,48-2,44 (m, 2H) ppm. CL/EM: Tr = 1,226 min; IEN (pos.) mlz = 319,2 (M+H+)+, IEN (neg.) m/z = 316,9 (M-H+)-, 635,1 (2M-H+)-. CL/UV: Tr = 6,723 min, AUC al 99,3 % a A = 254 nm. Se prepararon varios lotes de sales mono o diclorhidrato de (1) mediante liofilización primaria de soluciones de (5) en acetonitrilo acuoso (MeCN) que contenían 1,0 equiv. de ácido clorhídrico (HCl) 1,0 N o un exceso de ácido clorhídrico (HCl) concentrado 1,0 N o superior.
Ejemplo de referencia 2
Ácido 3-amino-3-[4-)bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]propanoico (2)
Figure imgf000051_0001
Etapa A: (2-Metil-4-nitro-fenil)metanol (2a)
Siguiendo el Procedimiento General de 1, se preparó 2-metil-4-nitro-fenil)metanol (2a) a partir de ácido 2-metil-4-nitrobenzoico comercial (5,0 g, 27,6 mmol) con complejo de borano y sulfuro de dimetilo (2,0 M BH3-SMe2 en THF) (27,6 ml, 55,2 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (100 ml) para producir 4,62 g (rendimiento cuantitativo) del compuesto diana (7a) en forma de un sólido de color amarillo pálido que era de suficiente pureza para usarse directamente en la siguiente etapa sin aislamiento ni purificación adicional. Fr: ~0,50 (EtOAc/Hxn = 1:1 v/v). RMN 1H (300 MHz, CDCh): 8 8,07 (dd, J = 8,4, 2,1 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 4,79 (s, 2H), 2,38 (s, 3H), 1,87 (s a, 1H) ppm. Los datos espectroscópicos corresponden a los datos proporcionados en la bibliografía. El compuesto también está disponible comercialmente.
Etapa B: 2-Metil-4-nitro-benzaldehído (2b)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 2 (Variante B), se preparó 2-metil-4-nitrobenzaldehído (2b) se preparó a partir de 2-metil-4-nitro-fenil)metanol (1a) (8,4 g, 50,3 mmol) en presencia de dióxido de manganeso (MnO2) (48,1 g, 553 mmol). El tratamiento proporcionó 7,5 g (rendimiento del 90 %) del compuesto objetivo (7b) en forma de un sólido de color amarillo. El material era de suficiente pureza para usarse directamente en la siguiente etapa sin aislamiento y purificación adicional. Fr: ~0,58 (EtOAc/Hxn = 1:2 v/v). RMN 1H (300 MHz, CDCh): 810,39 (s, 1h ), 8,20 (dd, J = 8,4, 2,1 Hz, 1H), 8,14 (s a, 1H), 7,98 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 2,79 (s, 3H) ppm. Los datos espectroscópicos corresponden a los datos proporcionados en la bibliografía. El compuesto también está disponible comercialmente.
Etapa C: Ácido 3-amino-3-(2-metil-4-nitro-fenil)propanoico (2c)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 3, se preparó ácido 3-amino-3-(2-metil-4-nitrofenil)propanoico (2c) a partir de 2-metil-4-nitro-benzaldehído (2b) (800 mg, 5,0 mmol), ácido malónico (520 mg, 5,0 mmol) y acetato amónico (NH4OAc) (578 mg, 7,5 mmol) en etanol (EtOH) (10 ml) a reflujo durante 48 h (baño de aceite). La reacción fue seguida por CL/EM hasta su finalización. El tratamiento de filtración proporcionó 510 mg (45 % de rendimiento) del compuesto diana (1c) como un sólido casi incoloro que tenía la pureza suficiente para usarse directamente en la siguiente etapa sin purificación ni aislamiento adicionales. RMN 1H (300 MHz, D2O): 88,01-7,97 (m, 2H), 7,46 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,83 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 2,70-2,65 (m, 2H), 2,33 (s, 3H) ppm. CL/EM: T = 1,274 min; IEN (pos.) mlz = 225,1 (M+H+)+.
Etapa D: Clorhidrato de 3-amino-3-(2-metil-4-nitro-fenil)propanoato de metilo (2d)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 4, se preparó clorhidrato de 3-amino-3-(2-metil-4-nitrofenil)propanoato de metilo (2d) en una suspensión en metanol anhidro (MeOH) (10 ml) a partir de ácido 3-amino-3-(2-metil-4-nitro-fenil)propanoico (2c) (510 mg, 2,27 mmol) con cloruro de tionilo puro (SOCh) (2,0 ml, 3,28 g, 27,5 mmol). El tratamiento evaporativo proporcionó 2,73 g (rendimiento aproximadamente cuantitativo) del compuesto diana (1d) en forma de un sólido incoloro, que era de pureza suficiente para usarse directamente en el siguiente paso sin purificación ni aislamiento adicionales. CL/EM: Tr = 0,508 min; IEN (pos.) m/z = 239,1 (M+H+)+.
Etapa E: 3-(Etoxicarbonilamino)-3-(2-metil-4-nitro-fenil)propanoato de metilo (2e)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 5, se preparó 3-(etoxicarbonilamino)-3-(2-metil-4-nitrofenil)propanoato de metilo (2e) a partir de clorhidrato de 3-amino-3-(2-metil-4-nitro-fenil)propanoato de metilo en bruto (2e) (624 mg, 2,27 mmol), cloroformiato de etilo (EtOCOCl) (327 pl, 371 mg 3,42 mmol) y diisopropiletilamina (DIPEA, base de Hünigs) (1,12 ml, 885 mg, 6,84 mmol) en diclorometano anhidro (DCM) (10 ml). La cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionó 701 mg (rendimiento aproximadamente cuantitativo) del compuesto diana (2e) en forma de un sólido incoloro. Fr = 0,42 (EtOAc/Hxn = 1:1 v/v).
Etapa F: 3-(4-Amino-2-metil-fenil)-3-(etoxicarbonilamino)propanoato de metilo (2f)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 6 (Variante B), se preparó 3-(4-amino-2-metil-fenil)-3-(etoxicarbonilamino)propanoato de metilo (2f) a partir de 3-(etoxicarbonilamino)-3-(2-metil-4-nitro-fenil)propanoato de metilo (2e) (701 mg, 2,26 mmol) a través de hidrogenación (aproximadamente 103,42 kPa (15 psi); globo lleno de H2) en presencia de Pd dal 10 % en peso/C que contenía agua al 50 % en peso (~70 mg) y una temperatura ambiente durante aproximadamente 12 horas para proporcionar 632 mg (rendimiento aproximadamente cuantitativo) del compuesto diana (2f) en forma de un aceite parduzco, que era de pureza suficiente para usarse en el siguiente paso sin purificación ni aislamiento adicionales. c L/EM: Tr = 0,533 min; IEN (pos.) m/z = 303,1 (M+H+)+.
Etapa G: 3-[4-[Bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-(etoxicarbonilamino)-propanoato de metilo (2g)
Siguiendo el Procedimiento General para la Descripción 7 (Variante A ), se preparó 3-[4-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metilfenil]-3-(etoxicarbonilamino)-propanoato de metilo (2g) a partir de 3-(4-amino-2-metil-fenil)-3-(etoxicarbonilamino)propanoato de metilo (2f) (632 mg, 2,26 mmol), 2-cloroacetaldehído (~50 % en peso en agua, ~7,87 M) (1,44 ml, 11,3 mmol), y cianoborohidruro sódico (NaBHaCN) (598 mg de pureza del 95 % = 568 g, 9,04 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH) (20 ml) y ácido trifluoroacético (TFA) (10 ml). La purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice con una mezcla de acetato de etilo (EtOAc)/hexano (EtOAc/hexano = 1:1, v/v) proporcionó 714 mg (rendimiento del 78 %) del compuesto del título (2g) en forma de un sólido incoloro. Fr = 0,54 (EtOAc/Hxn = 1:2 v/v, ninhidrina negativa). RMN 1H (300 MHz, CDCls): 57,11 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,49 (dd, J = 8,7, 2,7 Hz, 1H), 6,44 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,36-5,22 (m, 2H), 4,08 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 3,76-3,54 (m, 11H), 2,90-2,70 (m, 2H), 2,39 (s, 3H), 1,21 (t, J = 7,2 Hz, 3H) ppm. CL/EM: Tr= 2,174 min; IEN (pos.) m/z = 405,1 (M+H+)+.
Etapa H: Ácido 3-amino-3-[4-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]propanoico (2)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 8, se preparó ácido 3-amino-3-[4-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metilfenil]propanoico (2) se preparó a través de desprotección hidrolítica de 3-[4-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-(etoxicarbonilamino)-propanoato de metilo (2g) (150 mg, 0,37 mmol) en ácido clorhídrico concentrado (HCl) (5 ml) a aproximadamente 100 °C (baño de aceite) en 48 h. El residuo se purificó parcialmente mediante HPLC preparativa, se congeló inmediatamente después de la recogida, seguido de liofilización primaria para proporcionar 40 mg del compuesto diana (1) como un sólido incoloro. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 57,30 (d, J = 50,3 Hz, 1H), 6,63 (dd, J = 6 ,6 , 2,1 Hz, 1H), 6,56 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 4,55 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 3,76-3,62 (m a, 8H), 2,84 (dd, J = 12,3, 5,1 Hz, 1H), 2,71 (dd, J = 12,0, 5,7 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H) ppm. CL/EM: Tr= 1,094 min; IEN (neg.) m/z = 317,0 (M-H+)-. CL/UV: Tr = 7,393 min, AUC al 98,6 % a A = 254 nm.
Ejemplo 3
Ácido 3-amino-4-[5-[bis(2-chioroethyt)amino]-2-metil-fenil]butanoico (3)
Figure imgf000053_0001
Etapa A: 2-(Bromometil)-1-metil-4-nitro-benceno (3a)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 10, se preparó 2-(bromometil)-1-metil-4-nitro-benceno (3a) a través de bromación de (2-metil-5-nitro-fenil)metanol (1a) (11,0 g, 65,8 mmol) (preparado como se describe en el Ejemplo 1) disuelto en diclorometano (DCM) (110 ml) con una solución de tribromuro de fósforo (PBr3) en (PBr31,0 M en DCM) (65,8 ml). El tratamiento acuoso proporcionó 11,3 g (rendimiento del 75 %) de un sólido de color amarillo claro que tenía la pureza suficiente para usarse directamente y sin más aislamiento y purificación en la siguiente etapa. Fr= 0,56 (EtOAc/Hxn = 1:5 v/v). RMN 1H (300 MHz, CDCh): 58,19 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 8,07 (dd, J = 8,4, 2,7 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 4,53 (s, 2H), 2,52 (s, 2H) ppm. Los datos espectroscópicos corresponden a los datos proporcionados en la bibliografía. El compuesto también está disponible comercialmente.
Etapa B: 2-Acetamido-2-[(2-metil-5-nitro-fenil)metil]propanodioato de dietilo (3b)
Adaptando un protocolo de bibliografía (Haudegond, et al., J. Org. Chem., 1979, 44 (17), 3063-3065), se preparó una solución etanólica de etanolato sódico (NaOEt) (35,6 mmol) a partir de sodio elemental (Na) (819 mg, 35,6 mmol) en etanol anhidro (EtOH) (80 ml) en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente. Cuando cesó el desprendimiento de H2, se añadió en pequeñas porciones 2-acetamidopropanodioato de dietilo comercial (7,9 g, 36,4 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 75 °C (baño de aceite) durante aproximadamente 30 min antes de añadir 2-(bromometil)-1-metil-4-nitrobenceno (3a) (8,2 g, 35,6 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo (baño de aceite) durante aproximadamente 10 h. La reacción fue seguida por CL/EM hasta su finalización. El sólido se recogió por filtración usando un embudo Büchner y el residuo se lavó sucesivamente con EtOH (2*) y acetato de etilo (EtOAc) (1*), y se secó a presión reducida para proporcionar 8,4 g (rendimiento del 64 %) del compuesto diana 2-acetamido-2-[(2-metil-5-nitrofenil)metil]propanodioato de dietilo (3b) como un sólido incoloro. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 88,29 (s, 1H), 8,00 (dd, J = 8,1, 2,4 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 4,15 (c, J = 7,2 Hz, 4H), 3,58 (s, 2H), 2,26 (s, 3H), 1,90 (s, 3H), 1,17 (t, J = 7,2 Hz, 6H) ppm. CL/EM: T = 1,818 min; IEN (pos.) m/z = 367,1 (M+H+)+, 755,3 (2M+Na+)+.
Etapa C: Clorhidrato del ácido 2-amino-3-(2-metil-5-nitro-fenil)propanoico (3c)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 8, se preparó clorhidrato del ácido 2-amino-3-(2-metil-5-nitrofenil)propanoico (3c) mediante hidrólisis ácida de 2-acetamido-2-[(2-metil-5-nitro-fenil)metil]propanodioato de dietilo (3b) (8,4 g, 22,9 mmol) con ácido clorhídrico concentrado (~37 % en peso) (HCl) (150 ml). La suspensión se calentó a reflujo (baño de aceite) durante aproximadamente 6 h. La reacción fue seguida por CL/e M hasta su finalización. La solución transparente enfriada se evaporó a presión reducida usando un evaporador rotatorio para producir 6,7 g (rendimiento aproximadamente cuantitativo) del compuesto diana (3c) en forma de un sólido incoloro. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 88,58 (s a, 3H), 8,12 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 8,03 (dd, J = 8,4, 2,4 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 4,20-4,10 (m, 1H), 3,25 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 2,42 (s, 3H) ppm. CL/EM: T = 0,705 min; IEN (pos.) m/z = 225,1 (M+H+)+, 449,1 (2M+H+)+; IEN (neg.) m/z = 223,0 (M-H+)- 447,1 (2M-H+)-
Etapa D: Ácido 2-benciloxicarbonilamino-3-(2-metil-5-nitro-fenil)propanoico (3d)
Adaptando un protocolo de bibliografía, se preparó ácido 2-benciloxicarbonilamino-3-(2-metil-5-nitrofenil)propanoico (3d) a partir de clorhidrato del ácido 2-amino-3-(2-metil-5-nitrofenil)propanoico (3c) (6,7 g, 25,7 mmol) en 1,4-dioxano (50 ml) y una solución ac. al 10% en peso de hidróxido sódico (NaOH) (~3,75 M, 13,7 ml, 51,4 mmol) a aproximadamente 0 °C (baño de hielo). Se añadió agua (32 ml) seguido de hidrogenocarbonato de sodio sólido (NaHCOa) (2,15 g, 25,7 mmol) y (2,5-dioxopirrolidin-1-il)carbonato de bencilo comercial (CbzOSu) (6,4 g, 25,7 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los volátiles se retiraron a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El tratamiento ácido a un pH de aproximadamente 3 y trituración del producto bruto con acetato de etilo (EtOAc) y hexano (Hxn) (EtOAc / Hxn = 3: 7) a aproximadamente 50 °C (baño de aceite), el sólido se recogió mediante filtración (embudo Buchner) para proporcionar 6,1 g (rendimiento del 65 %) del compuesto objetivo (3d) como un sólido incoloro. RMN 1H (300 MHz, CDCh): 88,02-7,98 (m, 2H), 7,40-7,21 (m, 6H), 5,33 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,06 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 5,03 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,74-4,70 (m, 1H), 3,57 (dd, J = 14,7, 5,4 Hz, 1H), 3,08 (dd, J = 14,4, 7,8 Hz, 1H), 2,45 (s, 3H) ppm. CL/EM: Tr = 1,812 min; IEN (neg.) m/z = 357,1 (M-H+)-, 715,1 (2M-H+)-.
Etapa E: W-[3-Diazo-1-[(2-metil-5-mtro-feml)metil]-2-oxo-propM]carbamato de bencilo (3e)
Siguiendo el procedimiento general de la Descripción 11 (Parte A), se preparó recientemente una solución de diazometano (CH2N2) en éter dietílico (Et2O) antes de su uso en un aparato Aldrich Diazald® a partir de N-metil-N-nitrosotolueno-4-sulfonamida comercial (Diazald®) (15 g, 70,0 mmol), hidróxido de potasio (KOH) (15 g, 267 mmol) en una mezcla de Et2O (25 ml), agua (30 ml) y 2-(2-etoxietoxi) etanol (50 ml) a aproximadamente 65 °C (baño de aceite). El destilado etéreo se atrapó en Et2O (150 ml).
Siguiendo el procedimiento general de la Descripción 11 (Parte B), el anhídrido mixto de (3d) se preparó a partir de ácido 2-benciloxicarbonilamino-3-(2-metil-5-nitro-fenil)propanoico (3d) (3,0 g, 8,38 mmol), W-metilmorfolina (NMM) (1,20 ml, 1,1 g, 10,9 mmol), cloroformiato de isobutilo puro (1,34 ml, 1,4 g, 10,1 mmol) a aproximadamente -20 °C (baño de hielo seco/acetona) en una atmósfera de nitrógeno. Después de 2 horas a -20 °C, se añadió un exceso de (~ 6 equivalentes) de la solución etérea de diazometano recién preparada (~100 ml). El trabajo acuoso y la purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice (EtOAc/Hxn = 2:3 v/v) proporcionó 2,5 g (rendimiento del 85 % del compuesto objetivo, W-[3-diazo-1-[(2-metil-5-nitro-fenil)metil]-2-oxo-propil]carbamato de bencilo (3e) en forma de un sólido de color amarillo claro. Fr = 0,25 (EtOAc/Hxn = 2:3 v/v). RMN 1H (300 MHz, CDCla): 88,02-7,98 (m, 2H), 7,40-7,24 (m, 6H), 5,46 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,29 (s, 1H), 5,05 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 5,02 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 4,52-4,46 (m, 1H), 3,23 (dd, J = 14,1, 6,6 Hz, 1H), 2,97 (dd, J = 13,8, 7,8 Hz, 1H), 2,44 (s, 3H) ppm.
Etapa F: 3-Benciloxicarbonilamino-4-(2-metil-5-nitro-fenil)butanoato de metilo (3f)
Siguiendo el procedimiento general de la Descripción 11 (Parte C), se preparó 3-benciloxicarbonilamino-4-(2-metil-5-nitro-fenil)butanoato de metilo (3f) a partir de W-[3-diazo-1-[(2-metil-5-nitro-fenil)metil]-2-oxo-propil]carbamato de bencilo (3e) (2,5 g, 6,55 mmol) y una mezcla de benzoato de plata (AgBz) (0,75 g, 3,3 mmol) en THF (5 ml) y trietilamina (TEA) (1,93 ml, 1,4 g, 13,1 mmol) en una mezcla de metanol anhidro desgasificado (MeOH) (2,1 ml) y tetrahidrofurano anhidro desgasificado (THF) (15 ml) a temperatura ambiente y en una atmósfera de nitrógeno. El tratamiento evaporativo seguido de purificación por cromatografía en columna de gel de sílice (EtOAc/Hxn = 2:3, v/v) proporcionó 2,1 g (rendimiento del 82 %) del compuesto diana (3f) en forma de un sólido incoloro. Fr = 0,33 (EtOAc/Hxn = 2:3 v/v). RMN 1H (300 MHz, CDCl3): 88,00-87,95 (m, 2H), 7,38-7,24 (m, 6H), 5,48 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 5,02 (s, 2H), 4,30-4,21 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,06-3,01 (m, 1H), 2,97-2,54 (m, 1H), 2,64-2,50 (m, 2H), 2,48 (s, 3H) ppm.
Etapa G: 4-(5-Amino-2-metil-fenil)-3-benciloxicarbonilamino-butanoato de metilo (3g)
Siguiendo el Procedimiento General para la Descripción 6 (Variante A ), se preparó 4-(5-amino-2-metil-fenil)-3-benciloxicarbonilamino-butanoato de metilo (3 g) a partir de 3-benciloxicarbonilamino-4-(2-metil-5-nitro-fenil)butanoato de metilo (3f) (2,1 g, 5,4 mmol), polvo de hierro (Fe) (2,7 g, 48,9 mmol) y dihidrato de cloruro de calcio (C a C h ^^O ) (0,35 g, 2,4 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH)/agua (41 ml:7,5 ml, v/v). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante aproximadamente 2 horas (baño de aceite). La retirada de los residuos de hierro mediante los procedimientos de filtración y aislamiento del compuesto produjo 1,9 g (-rendimiento cuantitativo) del compuesto objetivo (3g) en forma de un sólido de color amarillo claro que tenía la pureza suficiente para usarse directamente en la siguiente etapa sin aislamiento ni purificación adicionales. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 87,38-7,24 (m, 5H), 6,75 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,36-6,30 (m, 2H), 4,97 (s, 2H), 4,72 (s a, 2H), 4,15-3,85 (m, 1H), 3,50 (s, 3H), 3,18-3,14 (m, 2H), 2,68-2,64 (m, 1H), 2,50-2,35 (m, 1H, superpuesta con disolvente), 2,09 (s, 3H) ppm. CL/EM: Tr= 1,158 min; IEN (pos.) m/z = 379,1 (M+H+)+, 713,4 (2M+H+)+.
Etapa H: 3-Benciloxicarbonilamino4-[5-[bis(2-cloroetil)aminol-2-metilfenil]butanoato de metilo (3h)
Siguiendo el Procedimiento General para la Descripción 7 (Variante A), se preparó 3-benciloxicarbonilamino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoato de metilo (3i) a partir de 4-(5 -amino-2-metil-fenil)-3-benciloxicarbonilamino-butanoato de metilo (3h) (1,9 g, 5,3 mmol), 2-cloroacetaldehído (-50 % en peso en agua, -7 ,87 M) (3,4 ml, 26,5 mmol) y cianoborohidruro sódico (NaBH3CN) (1,41 g de pureza del 95 % = 1,34 g, 21,3 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH) (34 ml) y ácido trifluoroacético (TFA) (17 ml). La purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice con una mezcla de acetato de etilo (EtOAc)/hexano (EtOAc/hexano =1:2, v/v) proporcionó 2,16 g (rendimiento del 85 %) del compuesto del título (3h) en forma de un sólido incoloro. Fr = 0,37 (EtOAc/hexano = 1:2, v/v, ninhidrina negativa). RMN 1H (300 MHz, CDCl3): 87,36-7,24 (m, 5H), 7,03 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,50 (dd, J = 8,4, 2,7 Hz, 1H), 6,44-6,41 (m a, 1H), 5,50 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 5,08 (s, 2H), 4,26-418 (m a, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,70-3,54 (m, 8H), 2,96 (dd, J = 13,8, 6,3 Hz, 1H), 2,76 (dd, J = 13,8, 8,4 Hz, 1H), 2,55 (d a, J = 4,8 Hz, 2H), 2,26 (s, 3H) ppm. CL/EM: Tr = 2,526 min; IEN (pos.) m/z = 503,1 (M+H+)+. CL/UV: T = 6,552 min, AUC al 100,0 % a A = 254 nm.
Etapa I: Ácido 3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (3)
Siguiendo el Procedimiento General para la Descripción 8, se preparó ácido 3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (3) a través de hidrólisis ácida de 3-benciloxicarbonilamino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metilfenil]butanoato de metilo (3i) (2,16 g, 4,15 mmol) en una mezcla de ácido clorhídrico concentrado (HCl) (30 ml) y 1,4-dioxano (30 ml). El residuo se purificó por HPLC preparativa, se congeló inmediatamente después de la recogida, seguido de liofilización primaria para proporcionar 722 mg del compuesto diana (3) en forma de un polvo incoloro. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 87,30 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,56-6,50 (m, 2H), 3,76-3,60 (m a, 10 H), 3,65-3,36 (m a, 1H), 2,75 (dd, J = 13,5, 6,6 Hz, 1H), 2,65 (dd, J = 13,2, 7,8 Hz, 1H), 2,13 (s, 3H), 2,06 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 2,00 (dd, J = 16,2, 9,3 Hz, 1H) ppm. CL/EM: T = 1,094 min; IEN (pos.) m/z = 333,1 (M+H+)+; IEN (neg.) m/z = 330,9.0 (M-H+)-. CL/UV: Tr = 7,134 min, AUC al 95,5 % a A = 254 nm. Los datos analíticos corresponden a los datos analíticos del isómero (S) (5) y del isómero (R) (6). Se pueden preparar varios lotes de sales mono o diclorhidrato de (3) mediante liofilización primaria de soluciones de (3) en acetonitrilo acuoso (MeCN) que contienen 1,0 equiv. de ácido clorhídrico (HCl) 1,0 N o un exceso de ácido clorhídrico (HCl) concentrado 1,0 N o superior.
Ejemplo de referencia 4
Ácido 3-amino-4-[4-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (4)
Figure imgf000056_0001
Etapa A: 1-(Bromometil)-4-nitro-benceno (4a)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 10, se preparó 1-(bromometil)-4-nitrobenceno (4a) a través de bromación de (2-metil-4-nitro-fenil)metanol (2a) (18,0 g, 108 mmol) (preparado como se describe en el Ejemplo 2) disuelto en diclorometano (DCM) (200 ml) con una solución de tribromuro de fósforo (PBr3) en (PBr31,0 M en DCM) (108 ml). El tratamiento acuoso proporcionó 16,0 g (rendimiento del 64 %) de un sólido de color amarillo claro que tenía la pureza suficiente para usarse directamente y sin más aislamiento y purificación en la siguiente etapa. Fr = 0,51 (EtOAc/Hxn = 1:5 v/v). Los datos espectroscópicos corresponden a los datos proporcionados en la bibliografía.
Etapa C: Clorhidrato de 2-amino-3-(2-metil-4-nitro-fenil)propanoato de metilo (4c)
Adaptando protocolos bibliográficos, se preparó clorhidrato de 2-amino-3-(2-metil-4-nitrofenil)propanoato de metilo (4c) a través de alquilación de [(fenilmetilideno)amino]acetato de metilo comercial (1,84 g, 10,4 mmol), con 1-(bromometil)-4-nitrobenceno (4b) (2,86 g, 12,5 mmol), carbonato potásico (K2CO3) (4,31 g, 31,2 mmol), cloruro de benciltrietilamonio (BTEAC) (237 mg, 1,04 mmol) en acetonitrilo (MeCN) (30 ml). La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 6 horas a temperatura ambiente, se filtró y se concentró a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El residuo se diluyó con éter dietílico (Et2O) y la capa orgánica se lavó con salmuera. Las fases se separaron y la capa orgánica se concentró hasta un volumen total de aproximadamente 20 ml. Se añadió ácido clorhídrico 1,0 M (HCl) (50 ml) y la mezcla de reacción se mantuvo durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó adicionalmente con éter dietílico (Et2O) y las fases se separaron. La fase acuosa se concentró a presión reducida usando un evaporador rotatorio.
Siguiendo la Síntesis General de la Descripción 4, el material en bruto se diluyó con metanol anhidro (MeOH) (20 ml) y se trató con exceso de cloruro de tionilo (SOCl2) a aproximadamente 0 °C (baño de hielo). Después, la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80 °C (baño de aceite) durante aproximadamente 1 h, antes de retirar los disolventes y los volátiles a presión reducida usando un evaporador rotatorio para proporcionar 2,18 g (rendimiento del 76 %) del compuesto diana (4c) en forma de un sólido incoloro. CL/EM: Tr = 0,687 min; IEN (pos.) m/z = 239,1 (M+H+)+.
Etapa D: 2-Benciloxicarbonilamino-3-(2-metil-4-nitro-fenil)propanoato de metilo (4d)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 5, se preparó 2-benciloxicarbonilamino-3-(2-metil-4-nitrofenil)propanoato de metilo (4d) a partir de clorhidrato de 2-amino-3-(2-metil-4-nitro-fenil)propanoato de metilo (4c) (2,18 g, 7,94 mmol), cloroformiato de bencilo (CbzCl, ZCl) (1,65 ml, 1,97 g, 11,9 mmol), y diisopropiletilamina (DIPEA, base de Hünigs) (3,92 ml, 3,07 g, 23,7 mmol) en diclorometano (DCM) (50,0 ml). El tratamiento acuoso y la purificación mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (EtOAc/Hxn = 1:2 v/v) proporcionó 1,94 g (rendimiento del 40 %) del compuesto objetivo (4d) en forma de un sólido incoloro. Fr = 0,44 (EtOAc/Hxn = 1:2 v/v). RMN 1H (400 MHz, CDCla): 88,06-8,00 (m, 1H), 7,94-7,86 (m, 1H), 7,40-7,20 (m, 6H), 5,36 (d, 1H), 5,06 (d, 1H), 5,00 (d, 1H), 4,70-4,60 (m, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,26 (dd, 1H), 3,04 (dd, 1H), 2,40 (s, 3H) ppm. CL/EM: T = 2,085 min; IEN (pos.) m/z = 373,3 (M+H+)+; IEN (neg.) m/z = 371,1 (M-H+)-.
Etapa E: Ácido 2-benciloxicarbonilamino-3-(2-metil-4-nitro-fenil)propanoico (4e)
Adaptando un protocolo bibliográfico (Dayal, et al., Steroids, 1990, 55(5), 233-237), una mezcla de reacción de 2-benciloxicarbonilamino-3-(2-metil-4-nitrofenil)propanoato de metilo (4d) (1,94 g, 5,20 mmol) y monohidrato de hidróxido de litio comercial (UO HH 2O) (436 mg, 10,4 mmol) en una mezcla de tetrahidrofurano (THF)/metanol (MeOH)/agua (20:10:10 ml v/v/v) se agitó a temperatura ambiente. La reacción fue seguida por TLC y CL/EM hasta su finalización. El tratamiento acuoso ácido a aproximadamente pH 4 y la cristalización posterior en acetato de etilo (EtOAc) proporcionó 900 mg (rendimiento del 48 %) del compuesto objetivo (4e) en forma de un sólido incoloro. RMN 1H (400 MHz, CDCla): 87,96-7,92 (m, 1H), 7,90-7,80 (m, 1H), 7,36-7,18 (m, 6H), 5,62 (d, 1H), 5,00 (d, 1H), 4,93 (d, 1H), 4,60-4,50 (m, 1H), 3,26 (dd, 1H), 2,98 (dd, 1H), 2,38 (s, 3H) ppm. CL/EM: T = 1,818 min; IEN (pos.) m/z = 359,1 (M+H+)+; IEN (neg.) m/z = 357,0 (M-H+)-.
Etapa F: W-(3-Diazo-1-[(2-metil-4-mtro-ciclohexa-2,4-dien-1-il)metil]-2-oxopropil]carbamato de bencilo (4f)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 12 (Partes A-B), se preparó A/-[3-diazo-1-[(2-metil-4-nitrociclohexa-2,4-dien-1-il)metil]-2-oxo-propil]carbamato de bencilo (4f) se preparó a partir de ácido 2-benciloxicarbonilamino-3-(2-metil-4-nitro-fenil)propanoico (4e) (700 mg, 1,97 mmol), W-metilmorfolina (NMM) (433 pl, 398 mg, 3,94 mmol), cloroformiato de isobutilo (515 pl, 538 mg, 3,94 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (THF) (10 ml) y aproximadamente 16 mmol de diazometano recién preparado en Et2O. La cromatografía en columna sobre gel de sílice (EtOAc/Hxn = 1:2 v/v) proporcionó 350 mg (rendimiento del 46 %) del compuesto diana (4f) en forma de un sólido incoloro. Fr = 0,24 (EtOAc/Hxn = 1:2, v/v). RMN 1H (400 MHz, CDCh): 88,02-7,98 (m, 1H), 7,96-7,88 (m, 1H), 7,38­ 7,20 (m, 6H), 5,40 (d, 1H), 5,20 (s, 1H), 5,08 (d, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,50-4,40 (m, 1H), 3,18 (dd, 1H), 2,96 (dd, 1H), 2,42 (s, 3H) ppm. CL/EM: T = 1,991 min; IEN (pos.) m/z = 405,0 (M+Na+)+.
Etapa G: 3-Benciloxicarbonilamino-4-(2-metil-4-nitro-fenil)butanoato de metilo (4g)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 12 (Parte C), se preparó 3-benciloxicarbonilamino-4-(2-metil-4-nitro-fenil)butanoato de metilo (4g) a partir de W-[3-diazo-1-[(2-metil-4-nitro-ciclohexa-2,4-dien-1-il)metil]-2-oxopropil]carbamato de bencilo (4f) (350 mg, 0,916 mmol) en metanol (MeOH) (10 ml) y benzoato de plata (AgBz) (0,75 g, 3,3 mmol) disuelto en trietilamina (TEA) (3,0 ml, 2,29 g, 4,32 mmol). La cromatografía en columna sobre gel de sílice (EtOAc/Hxn = 2:3 v/v) proporcionó 220 mg (rendimiento del 62 %) del compuesto diana (4g) en forma de un sólido de color amarillo pálido. RMN 1H (400 MHz, CDCh): 88,02-7,98 (m, 1H), 7,92-7,86 (m, 1H), 7,40-7,18 (m, 6H), 5,46 (d, 1H), 5,04-4,96 (m, 2H), 4,28-4,18 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,08 (dd, 1H), 2,90 (dd, 1H), 2,60 (dd, 1H), 2,54 (dd, 1H), 2,44 (s, 3H) ppm. CL/EM: T = 2,082 min; IEN (pos.) m/z = 387,2 (M+H+)+; IEN (neg.) m/z = 384,9 (M-H+)~.
Etapa H: 4-(4-Amino-2-metil-fenil)-3-benciloxicarbonilamino-butanoato de metilo (4h)
Siguiendo el Procedimiento General para la Descripción 6 (Variante A ), se preparó 4-(4-amino-2-metil-fenil)-3-benciloxicarbonilamino-butanoato de metilo (4h) a partir de 3-benciloxicarbonilamino-4-(2-metil-4-nitro-fenil)butanoato de metilo (4g) (220 mg, 0,570 mmol), polvo de hierro (Fe) (286 mg, 5,13 mmol) y cloruro de calcio anhidro (CaCh) (28 mg, 0,257 mmol) en metanol acuoso al 85 % de volumen (MeOH) (20 ml). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante aproximadamente 2 horas (baño de aceite). La retirada de los residuos de hierro mediante los procedimientos de filtración y aislamiento del compuesto produjo 200 mg (aproximadamente rendimiento cuantitativo) del compuesto objetivo (4h) en forma de un aceite de color amarillo claro que tenía la pureza suficiente para usarse directamente en la siguiente etapa sin aislamiento ni purificación adicionales. CL/EM: Tr = 1,034 min; IEN (pos.) m/z = 357,1 (M+H+)+, 379,1 (M+Na+)+.
Etapa I: 3-Benciloxicarbonilamino-4-[4-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metilfenil]butanoato de metilo (4i)
Siguiendo el Procedimiento General para la Descripción 7 (Variante A), se preparó 3-benciloxicarbonilamino-4-[4-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoato de metilo (4i) a partir de 4-(4-amino-2-metil-fenil)-3-benciloxicarbonilamino-butanoato de metilo (4h) (200 mg, 0,561 mmol), 2-cloroacetaldehído (~50 % en peso en agua, -7,87 M) (357 |ji, 2,87 mmol), y cianoborohidruro sódico (NaBH3CN) (148 mg de pureza del 95 % = 141 mg, 2,24 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH) (20 ml) y ácido trifluoroacético (TfA) (10 ml). El tratamiento acuoso y purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice con una mezcla de acetato de etilo (EtOAc)/hexano (EtOAc/hexano = 2:3, v/v) proporcionó 260 mg (rendimiento del 96 %) del compuesto del título (4i) en forma de un aceite incoloro. F = 0,41 (EtOAc/Hxn = 1:2, v/v). RMN 1H (400 MHz, CDCb): 57,40-7,28 (m, 5H), 6,92-6,88 (d, 1H), 6,46-6,38 (m, 2H), 5,38 (d, 1H), 5,10-5,00 (m, 2H), 4,10-4,00 (m, 1H), 3,70-3,56 (m, 11H), 2,84 (dd, 1H), 2,70 (dd, 1H), 2,58-2,42 (m, 2H), 2,30 (s, 3H) ppm. CL/EM: Tr = 2,470 min; IEN (pos.) m/z = 481,2 (M+H+)+.
Etapa J: Ácido 3-amino-4-[4-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (4)
Siguiendo el Procedimiento General para la Descripción 8, se preparó ácido 3-amino-4-[4-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (4) a través de hidrólisis de 3-benciloxicarbonilamino-4-[4-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metilfenil]butanoato de metilo (4i) (260 mg, 0,54 mmol) en una mezcla de ácido clorhídrico concentrado (h Cí) (1 ml) y 1,4-dioxano (1 ml). La purificación por HPLC preparativa proporcionó 82 mg (46 % de recuperación) del compuesto diana (4) después de la liofilización primaria en forma de un sólido incoloro. RMN 1H (400 MHz, DMsO-d6): 56,96­ 6,90 (d, 1H), 6,56-6,46 (m, 2H), 3,70-3,56 (m a, 9H), 3,30 (s a, superpuesto con señal de agua, 3H), 2,70 (dd, 1H), 2,56 (dd, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,10-1,98 (m, 2H) ppm. CL/EM: Tr= 1,195 min; IEN (pos.) m/z = 333,1 (M+H+)+; IEN (neg.) m/z = 331,0 (M-H+)-. CL/UV: Tr = 7,896 min, AUC al 96,5 % a A = 254 nm. Se pueden preparar varios lotes de sales mono o diclorhidrato de (4) mediante liofilización primaria de soluciones de (4) en acetonitrilo acuoso (MeCN) que contienen 1,0 equiv. de ácido clorhídrico (HCl) 1,0 N o un exceso de ácido clorhídrico (HCl) concentrado 1,0 N o superior.
Ejemplo 5
Ácido (3S)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (5)
Figure imgf000058_0001
Etapa A: (2R)-2-(íerc-Butoxicarbomlammo)-butanodioato de O1-(2,5-dioxopirrolidin-1-il)O4-metilo (5a) Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 12, Se preparó O4-metil (2R)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-butanodioato de O1-(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (5a) a partir de ácido (2R)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-4-metoxi-4-oxobutanoico (9,46 g, 38,3 mmol) (disponible comercialmente o preparado a partir de H-D-Asp(OMe)-OHHCl comercial (10,5 g, 57,3 mmol) (preparable siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 4) y B0C2O (12,5 g, 57,3 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano (100 ml) y una solución acuosa de hidróxido sódico (NaOH) 1,0 N recién preparada (126 ml, 126 mmol) (9,46 g (rendimiento del 67% ) (Keller, et al., Org. Synth., 1985,63, 160)), N-hidroxisuccinimida (1-hidroxipirrolidin-2,5-diona, HOSu, NHS) (4,69 g, 40,8 mmol), y diciclohexilcarbodiimida (DCC) (8,02 g, 38,9 mmol en acetato de etilo (EtoAc) (120 ml) a temperatura ambiente. La filtración y el tratamiento acuoso proporcionaron 13,2 g (rendimiento cuantitativo) del compuesto del título (5a) como un sólido incoloro que tenía la pureza suficiente para usarse directamente y sin aislamiento ni purificación adicional en la siguiente etapa. Fr-0,45 (EtOAc/hexano = 1:1, v/v). RMN 1H (300 MHz, CDCh): 85,64 (d a, J = 9,3 Hz, 1H), 5,03-4,96 (m, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,12 (dd, J = 17,4, 4,5 Hz, 1H), 3,12 (dd, J = 17,7, 4,5 Hz, 1H), 2,83 (s a, 4H), 1,45 (s, 9H) ppm. CL/EM: T = 1,463 min; IEN (pos.) m/z = 367,15 (M+Na+)+.
Etapa B: (3R)-3-(ferc-Butoxicarbomlammo)-4-hidroxi-butanoato de metilo (5b)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 13, se preparó (3R)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-4-hidroxibutanoato de metilo (5b) a través de reducción de (2R)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-butanodioato de O1-(2,5-dioxopirrolidin-1-il) O4-metilo (5a) (13,2 g, 38,3 mmol) con borohidruro sódico (NaBH4) (2,41 g, 63,7 mmol) en tetrahidrofurano (THF)/agua (133 ml/17 ml). El tratamiento acuoso y purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice con una mezcla de acetato de etilo (EtOAc)/hexano (EtOAc/hexano = 4:3, v/v) proporcionó 5,73 g (rendimiento del 43 % en 3 etapas) del compuesto del título (5b) en forma de un aceite incoloro. Fr ~0,34 (EtOAc/hexano = 1:1, v/v). RMN 1H (400 MHz, CDCla): 85,30 (d a, 1H), 4,06-3,92 (m, 1H), 3,70-3,68 (m, superpuesto, 5H), 2,63 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 1,43 (s, 9H) ppm. CL/EM: T = 1,027 min; IEN (pos.) m/z = 489,25 (2M+Na+)+. Los datos analíticos se corresponden con los datos analíticos para el enantiómero (S) en la bibliografía (Dexter y Jackson, J. Org. Chem., 1999, 64, 7579-7585).
Etapa C: (3R)-3-(ferc-Butoxicarbomlammo)-4-yodo-butanoato de metilo (5c)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 14, se preparó (3R)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-4-yodobutanoato de metilo (5c) a partir de (3R)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-4-hidroxi-butanoato de metilo (5b) (5,73 g, 24,6 mmol), yodo (I2) (6,23 g, 24,6 mmol), trifenilfosfina (PPhb) (6,45 g, 24,6 mmol) e imidazol (1,67 g, 24,6 mmol) en diclorometano anhidro (DCM) (100 ml). El tratamiento reductor acuoso y purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice con una mezcla de acetato de etilo (EtOAc)/hexano (EtOAc/hexano = 7:3, v/v) proporcionó 4,30 g (rendimiento del 51 %) del compuesto del título (5c) en forma de un sólido incoloro a beis. Fr~0,79 (EtOAc/hexano = 7:3, v/v). RMN 1H (400 MHz, CDCh): 85,10 (d a, J = 7,2 Hz, 1H), 4,00-3,80 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,50-3,36 (m, 2H), 2,76 (dd, J = 16,5, 5,4 Hz, 1H), 2,62 (dd, J = 16,5, 6,3 Hz, 1H), 1,43 (s, 9H) ppm. Los datos analíticos se corresponden con los datos analíticos para el enantiómero (S) en la bibliografía (Dexter y Jackson, J. Org. Chem., 1999, 64, 7579-7585).
Etapa D: (3S)-4-(5-Ammo-2-metN-feml)-3-(íerc-butoxicarbomlammo)butanoato de metilo (5d)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte A ), se activó polvo de cinc (Zn) (1,96 g, 30,0 mmol) con yodo elemental (I2) (190 mg, 0,75 mmol, 15 % mol) y cloruro de trimetilsililo (MeSiCl, TMSCl) (95 pl, 81 mg, 0,75 mmol, 15 % en moles) en W,W-dimetilformamida anhidra desgasificada (DMF) (6 ml). El producto de inserción de cinc se preparó a partir de (3R)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-4-yodo-butanoato de metilo (5c) (1,72 g, 5,0 mmol) en presencia de I2 adicional (190 mg, 0,75 mmol, 15 % mol) y t Ms CI (95 pl, 81 mg, 0,75 mmol, 15 % mol).
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte B), el producto de inserción de cinc de (5c) se usó in situ para un acoplamiento cruzado con 3-yodo-4-metil-anilina comercial (583 mg, 2,5 mmol) en presencia de tris(bencilidenoacetona)dipaladio (Pd2(dba^) ( 57 mg, 0,03 mmol, 2,5 % mol) y tris(o-tolil)fosfina (P(o-tol)3) (76 mg, 0,25 mmol, 10% mol) en DMF desgasificada anhidra (6 ml). La filtración, el tratamiento acuoso y la purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice con mezclas de acetato de etilo (EtOAc)/hexano (EtOAc/hexano = 7:3 ^ 1:1, v/v) proporcionó 1,04 g (rendimiento del 65 %) del compuesto del título (5d) en forma de un aceite viscoso de color amarillo. Fr -0 ,28 (EtOAc/hexano = 1:1, v/v). RMN 1H (400 MHz, CDGh): 86,89 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,48-6,44 (m, 2H), 5,10-5,02 (m a, 1H), 4,18-4,08 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 3,30 (s a, 2H), 2,82-2,78 (dd a, 1H), 2,70 (dd, J = 10,2, 6,0 Hz, 1H), 2,51 (dd, J = 16,0, 5,2 Hz, 1H), 2,45 (dd, J = 16,0, 5,6 Hz, 1H), 2,19 (s, 3H), 1,38 (s, 9H) ppm. CL/EM: T = 1,320 min. CL/EM: m/z = 323,20 (M+H+)+, 345,15 (M+Na+)+.
Etapa E: (3S)-4-[5-[bis(2-CloroetM)ammo]-2-metN-feml]-3-(ferc-butoxicarbomlammo)butanoato de metilo (5e)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 7 (Variante C), se preparó (3S)-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-(terc-butoxicarbonilamino)butanoato de metilo (5e) a partir de (3S)-4-(5-amino-2-metil-fenil)-3-(tercbutoxicarbonilamino)-butanoato de metilo (5d) (967 mg, 3,0 mmol), 2-cloroacetaldehído (-50 % en peso en agua, -7 ,87 M) (3,05 ml, 24,0 mmol) y cianoborohidruro sódico (NaB^CN) (624 mg de pureza del 95 % = 593 mg, 9,43 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH) (18 ml) y ácido fosfórico al 85 % en peso (^ P O 4) (8,1 ml). El tratamiento acuoso y purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice con una mezcla de acetato de etilo (EtOAc)/hexano (EtOAc/hexano = 1:4, v/v) proporcionó 1,4 g (rendimiento del 97 %) del compuesto del título (5e) en forma de un aceite incoloro. Fr -0 ,32 (EtOAc/Hxn = 4:1, v/v). RMN 1H (400 MHz, CDCh): 87,00 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,42 (s, 1H), 5,10-5,04 (m a, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,67-3,59 (m, 8H), 2,90-2,80 (m, 1H), 2,78­ 2,70 (m, 1H), 2,60-2,40 (m, 2H), 2,23 (s, 3H), 1,37 (s, 9H) ppm. CL/EM: T = 2,533min; IEN (pos.) m/z = 447,15 (M+H+)+, 469,15 (M+Na+)+.
Etapa F: Ácido (3S)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (5)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 8, se preparó ácido (3S)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (5) a través de desprotección hidrolitico de (3S)-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-(tercbutoxicarbonilamino)butanoato de metilo (5e) (-1,4 g, 3,13 mmol) en una mezcla de ácido clorhídrico concentrado (HCl) (7,5 ml) y 1,4-dioxano (7,5 ml). Parte del material bruto obtenido después del tratamiento se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar aproximadamente 20 mg del compuesto objetivo (5) como un sólido incoloro después de la liofilización primaria. RMN 1H (400 MHz, MeOH-d4): 57,04 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,59 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,54 (s, 1H), 3,74-3,68 (m a, 4H), 3,67-3,62 (m a, 4H), 3,58-3,50 (m, 1H), 2,92-2,86 (m, 2H), 2,44 (dd, J = 16,8, 4,0 Hz, 1H), 2,31 (dd, J = 16,8, 8,4 Hz, 1H), 2,22 (s, 3H) ppm. Los datos analíticos corresponden a los datos analíticos obtenidos para el compuesto racémico (3). Se pueden preparar varios lotes de sales mono o diclorhidrato de (6) mediante liofilización primaria de soluciones de (5) en acetonitrilo acuoso (MeCN) que contienen 1,0 equiv. de ácido clorhídrico (HCl) 1,0 N o un exceso de ácido clorhídrico (HCl) concentrado 1,0 N o superior.
Ejemplo de referencia 6
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (6)
Figure imgf000060_0001
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 12, se preparó (2S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-butanodioato de O1-(2,5-dioxopirrolidin-1-il)O4-terc-butilo (6a) a partir de ácido (2S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-4-terc-butoxi-4-oxo-butanoico (8,32 g, 28,8 mmol) (disponible comercialmente o preparado siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 4 a partir de H-L-Asp(OtBu)-OH comercial (5,68 g, 30,0 mmol) y Boc2O (6,55 g, 30,0 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano (25 ml) y una solución acuosa 1,0 N de hidróxido sódico (NaOH) recién preparada (33 ml, 33 mmol) (8,33 g, rendimiento del 96 %) (Keller, etal., Org. Synth., 1985, 63, 160)), W-hidroxisuccinimida (1-hidroxipirrolidin-2,5-diona, HOSu, NHS) (3,53 g, 30,7 mmol) y diciclohexilcarbodiimida (DCC) (6,03 g, 29,2 mmol en acetato de etilo (EtoAc) (100 ml) a temperatura ambiente. La filtración y el tratamiento acuoso proporcionaron 11,8 g (rendimiento cuantitativo) del compuesto del título (6a) como un sólido incoloro que tenía la pureza suficiente para usarse directamente y sin aislamiento ni purificación adicional en la siguiente etapa. Fr ~0,56 (EtOAc/hexano = 1:1, v/v); Fr ~0,34 (EtOAc/hexano = 1:2, v/v). RMN 1H (300 MHz, CDCh): 85,63 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 5,00-4,92 (m, 1H), 3,01 (dd, J = 17,4, 5,1 Hz, 1H), 2,84 (dd, superpuesto, J = 17,4, 4,8 Hz, 1H), 2,84 (s, superpuesto, 4H), 1,47 (s, 9H), 1,45 (s, 9H) ppm. CL/EM: T = 2,567 min; IEN (pos.) m/z = 409,15 (M+Na+)+, 795,35 (2M+Na+)+; IEN (neg.) m/z = 384,90.
Etapa B: (3S)-3-(terc-Butoxicarbomlammo)-4-hidroxi-butanoato de tere-butilo (6b)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 13, se preparó (3S)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-4-hidroxibutanoato de terc-butilo (6b) a través de reducción de (2S)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-butanodioato de O1-(2,5-dioxopirrolidin-1-il) O4-terc-butilo (6a) (11,8 g, 30,5 mmol) con borohidruro sódico (NaBH4) (2,31 g, 61,0 mmol) en tetrahidrofurano (THF)/agua (110 ml/16 ml). El tratamiento acuoso y purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice con una mezcla de acetato de etilo (EtOAc)/hexano (EtOAc/hexano = 11:9, v/v) proporcionó 7,30 g (rendimiento del 87 %) del compuesto del título (6b) en forma de un aceite viscoso incoloro. Fr ~0,52 (EtOAc/hexano = 1:1, v/v). RMN 1H (400 MHz, CDCla): 85,23 (d a, J = 5,1 Hz, 1H), 4,02-3,90 (m, 1H), 3,67 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 2,55 (dd, superpuesto, J = 15,3, 6,0 Hz, 1H), 2,48 (dd, superpuesto, J = 15,3, 6,3 Hz, 1H), 1,44 (s, 9H), 1,43 (s, 9H) ppm. CL/EM: Tr = 1,887 min; IEN (pos.) m/z = 298,10 (M+Na+)+; m/z = 573,35 (2M+Na+)+.
Etapa C: (3S)-3-(terc-Butoxicarbonilamino)-4-yodo-butanoato de terc-butilo (6c)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 14, se preparó (3S)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-4-yodobutanoato de terc-butilo (6c) a partir de (3S)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-4-hidroxi-butanoato de terc-butilo (6b) (4,46 g, 16,2 mmol), yodo (I2) (4,10 g, 16,2 mmol), trifenilfosfina (PPhb ) (4,25 g, 16,2 mmol) e imidazol (1,10 g, 16,2 mmol) en diclorometano anhidro (DCM) (70 ml). El tratamiento reductor acuoso y purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice con mezclas de acetato de etilo (EtOAc)/hexano (EtOAc/hexano = 7: 3 ^ 1:1, v/v) proporcionó 4,20 g (rendimiento del 67 %) del compuesto del título (6c) en forma de un sólido incoloro a beis. Fr -0,79 (EtOAc/hexano = 7:3, v/v). RMN 1H (400 MHz, CDCh): 85,09 (d a, J = 8,4 Hz, 1H), 3,90-3,80 (m, 1H), 3,44-3,30 (m, 2H), 2,60 (dd, J = 15,9, 6,0 Hz, 1H), 2,51 (dd, J = 15,9, 6,0 Hz, 1H), 1,45 (s, 9H), 1,43 (s, 9H) ppm. CL/EM: Tr = 2,332 min; IEN (neg.) m/z = 384,80 (M-H+)-.
Etapa D: (3R)-4-(5-Amino-2-metil-fenil)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-butanoato de terc-butilo (6d)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte A ), se activó polvo de cinc (Zn) (4,07 g, 62,3 mmol) con yodo elemental (I2) (396 mg, 1,56 mmol, 15 % mol) y cloruro de trimetilsililo (MeSiCl, TMSCl) (197 pl, 169 mg, 0,75 mmol, 15 % en moles) en W,A/-dimetilformamida anhidra desgasificada (DMF) (6 ml). El producto de inserción de cinc se preparó a partir de (3S)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-4-yodo-butanoato de terc-butilo (6c) (4,01 g, 10,4 mmol) en presencia de I2 elemental adicional (396 mg, 1,56 mmol, 15 % mol) y TMSCl (197 pl, 169 mg, 0,75 mmol, 15 % mol).
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte B), el producto de inserción de cinc de (6c) se usó in situ para un acoplamiento cruzado con 3-yodo-4-metil-anilina comercial (1,21 g, 5,2 mmol) en presencia de tris(bencilidenoacetona)dipaladio (Pd2(dba^) ( 119 mg, 0,13 mmol, 2,5 % mol) y tris(o-tolil)fosfina (P(o-tol)3) (158 mg, 0,52 mmol, 10 % mol) en DMF desgasificada anhidra (6 ml). La filtración, el tratamiento acuoso y purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice con una mezcla de acetato de etilo (EtOAc)/hexano (EtOAc/hexano = 7:3, v/v) proporcionó 1,15 g (rendimiento del 61 %) del compuesto del título (6d) en forma de un aceite viscoso de color amarillo. Fr~0,28 (EtOAc/hexano = 1:1, v/v). RMN 1H (300 MHz, CDCh): 86,91 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,50-6,46 (m, 2H), 5,20-5,10 (m a, 1H), 4,18-4,00 (m, 1H), 3,24 (s a, 2H), 2,88-2,78 (dd a, 1H), 2,70 (dd, 1H), 2,44 (dd, J = 15,4 Hz, 5,4 Hz, 1H), 2,36 (dd, J = 15,4 Hz, 5,4 Hz, 1H), 2,22 (s, 3H), 1,45 (s, 9H), 1,40 (s, 9H) ppm. CL/EM: Tr = 1,433 min; IEN (pos.) m/z = 365,20 (M+H+)+.
Etapa E: (3R)-4-[5-[bis(2-Cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-(terc-butoxicarbonilamino)butanoato de terc-butilo (6e)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 7 (Variante C), se preparó (3R)-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-(terc-butoxicarbonilamino)butanoato de terc-butilo (6e) a partir de (3R)-4-(5-amino-2-metil-fenil)-3-(tercbutoxicarbonilamino)-butanoato de terc-butilo (6d) (1,07 g, 2,92 mmol), 2-cloroacetaldehído (~50 % en peso en agua, ~7,87 M) (3,0 ml, 23,6 mmol) y cianoborohidruro sódico (NaB^C N ) (1,25 g de pureza del 95 % = 1,19 g, 18,9 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH) (18 ml) y ácido fosfórico al 85 % en peso (^ P O 4) (9 ml). El tratamiento acuoso y purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice con una mezcla de acetato de etilo (EtOAc)/hexano (EtOAc/hexano = 1:6, v/v) proporcionó 1,06 g (rendimiento del 74 %) del compuesto del título (6e) en forma de un aceite incoloro. Fr~0,55 (EtOAc/hexano = 1:4, v/v). RMN 1H (400 MHz, CDCh): 86,98 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,45 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,42 (s, 1H), 5,00 (d a, 1H), 4,18-4,00 (m, 1H), 3,70-3,50 (m, 8H), 2,80-2,60 (m, 2H), 2,41 (dd, J = 16,0, 5,6 Hz, 1H), 2,32 (dd, J = 16,0, 6,0 Hz, 1H), 2,21 (s, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,32 (s, 9H) ppm. CL/EM: Tr = 2,944 min; IEN (pos.) m/z = 489,20 (M+H+)+.
Etapa F: Ácido (3R)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (6)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 8, se preparó ácido (3R)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]butanoico (6) a través de desprotección hidrolítica de (3R)-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-(terebutoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (6e) (160 mg, 0,33 mmol) en una mezcla de ácido clorhídrico concentrado (HCl) (1 ml) y 1,4-dioxano (1 ml). El material en bruto obtenido después del tratamiento se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar aproximadamente 86 mg (recuperación del 79 %) del compuesto objetivo (6) como un sólido incoloro después de la liofilización primaria. RMN 1H (400 MHz, MeOH-d4): 57,04 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,59 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,54 (s, 1H), 3,74-3,68 (m a, 4H), 3,67-3,62 (m a, 4H), 3,60-3,52 (m, 1H), 2,92-2,86 (m, 2H), 2,46 (dd, J = 16,8, 4,0 Hz, 1H), 2,34 (dd, J = 16,8, 8,4 Hz, 1H), 2,22 (s, 3H) ppm. CL/EM: Tr =1,317 min; AUC al 100 % a A = 254 nm; IEN (pos.) m/z = 333,05 (M+H+)+. CL/UV: Tr = 8,489 min, AUC al 99,1 % a A = 254 nm. Los datos analíticos corresponden a los datos analíticos obtenidos para el compuesto racémico (3).
Se pueden preparar varios lotes de sales mono o diclorhidrato de (6) mediante liofilización primaria de soluciones de (6) en acetonitrilo acuoso (MeCN) que contienen 1,0 equiv. de ácido clorhídrico (HCl) 1,0 N o un exceso de ácido clorhídrico (HCl) concentrado 1,0 N o superior. Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante B), las sales de diclorhidrato de (6) también se pueden preparar mediante desprotección con HCl 2 N en éter dietílico (HCl 2 N en Et2O) para producir el compuesto diana (6) como una sal sólida de diclorhidrato después de la evaporación de los disolventes y la liofilización de una solución acuosa. El material tiene generalmente una pureza suficiente para usarse directamente y sin aislamiento ni purificación adicionales en desprendimiento in vitro y/o in vivo.
Ejemplo de referencia 7
Ácido (3S)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metoxi-fenil]butanoico (7)
Figure imgf000062_0001
Etapa A: (3S)-4-(5-Ammo-2-metoxi-feml)-3-(terc-butoxicarbomlammo)-butanoato de metilo (7a)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte A), se activó polvo de cinc (Zn) (392 mg, 6,0 mmol) con yodo elemental (I2) (38 mg, 0,15 mmol, 15 % mol) y cloruro de trimetilsililo (MeSiCl, TMSCl) (19 pl, 16 mg, 0,15 mmol, 15 % en moles) en N,N-dimetilformamida anhidra desgasificada (DMF) (2 ml). El producto de inserción de cinc se preparó a partir de (3R)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-yodo-butanoato de metilo (5c) (343 mg, 1,0 mmol) en presencia de I2 adicional (38 mg, 0,15 mmol, 15 % mol) y TMSCl (19 pl, 16 mg, 0,15 mmol, 15 % mol).
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte A), el producto de inserción de cinc de (5c) se usó in situ para un acoplamiento cruzado con 3-yodo-4-metoxi-anilina comercial (249 mg, 1,0 mmol) en presencia de tris(bencilidenoacetona)dipaladio (Pd2(dba)3) ( 23 mg, 0,025 mmol, 2,5 % mol) y tris(o-tolil)fosfina (P(o-tol)3) (30 mg, 0,10 mmol, 10% mol) en DMF desgasificada anhidra (3 ml). La filtración, el tratamiento acuoso y la purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice con acetato de etilo (EtOAc)/hexano y mezclas de diclorometano (DCM)/EtOAc (EtOAc/hexano = 1:1, v/v ^ - DCM/EtOAc = 1:1, v/v) proporcionó ~280 mg (rendimiento del 66 %; ~ pureza del 80 % mediante AUC) del compuesto del título (7a) en forma de un aceite de color amarillo viscoso. Fr ~0,23 (EtOAc/hexano = 1:1, v/v). RMN 1H (300 MHz, CDCl3): 56,90 (s a, 1H), 6,78 (d a, J = 8,1 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 5,28 (d a, J = 8,1 Hz, 1H), 4,40-4,10 (m, 1H), 3,37 (s, 3H), 2,90-2,80 (m a, 1H), 2,75 (dd, J = 12,6, 6,3 Hz, 1H), 2,50 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 1,35 (s, 9H) ppm. CL/EM: Tr= 0,908 min; IEN (pos.) m/z = 339,15 (M+H+)+, 677,40 (2M+H+)+, 699,35 (2M+Na+)+.
Etapa B: (3S)-4-[5-[bis(2-CloroetN)ammol-2-metoxi-feml]-3-(ferc-butoxicarbomlammo)butanoato de metilo (7b)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 7 (Variante C), se preparó (3S)-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metoxi-fenil]-3-(terc-butoxicarbonilamino)butanoato de metilo (7b) a partir de (3S)-4-(5-amino-2-metoxi-fenil)-3-(tercbutoxicarbonilamino)-butanoato de metilo (7a) (280 mg, 0,83 mmol, ~ pureza del 80 %), 2-cloroacetaldehído (~50 % en peso en agua, ~7,87 M) (842 pl, 6,63 mmol), y cianoborohidruro sódico (NaBHsCN) (105 mg de pureza del 95 % = 100 mg, 1,59 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH) (5 ml) y ácido fosfórico al 85 % en peso (H3PO4) (2,5 ml). El tratamiento acuoso y purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice con una mezcla de acetato de etilo (EtOAc)/hexano (EtOAc/hexano = 1:4, v/v) proporcionó 104 mg (rendimiento del 27 %) del compuesto del título (7b) en forma de un aceite incoloro. Fr ~0,30 (EtOAc/hexano = 1:4); Cl/EM: Tr = 2,493 min; IEN (pos.) m/z = 463,20 (M+H+)+.
Etapa C: Ácido (3S)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metoxi-fenil[butanoico (7)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 8, se preparó ácido (3S)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metoxi-fenil]butanoico (7) a partir de (3S)-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metoxi-fenil]-3-(tercbutoxicarbonilamino)butanoato de metilo (7b) (104 mg, 0,224 mmol) por hidrólisis en una mezcla de ácido clorhídrico concentrado (HCl) (3 ml) y 1,4-dioxano (3 ml) a aproximadamente 60 °C (baño de aceite) durante aproximadamente 6 horas para proporcionar ~90 mg (~ rendimiento del 95 %) el compuesto del título (7) en forma de una sal diclorhidrato después de la evaporación de los disolventes a presión reducida. CL/EM: Tr = 1,207 min; pureza de -100 % mediante AUC a A = 254 nm. IEN (pos.) m/z = 349,05 (M+H+)+.
Ejemplo de referencia 8
Ácido (3S)-3-amino-4-[3-[bis(2-cloroetil)amino]-2,6-dimetil-fenil]butanoico (8)
Figure imgf000063_0001
Etapa A: (3S)-4-(3-Ammo-2,6-dimetN-feml)-3-(ferc-butoxicarbomlammo)-butanoato de metilo (8a)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte A), se activó polvo de cinc (Zn) (392 mg, 6,0 mmol) con yodo elemental (I2) (38 mg, 0,15 mmol, 15 % mol) y cloruro de trimetilsililo (MeSiCl, TMSCl) (19 pl, 16 mg, 0,15 mmol, 15 % en moles) en N,N-dimetilformamida anhidra desgasificada (DMF) (3 ml). El producto de inserción de cinc se preparó a partir de (3R)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-4-yodo-butanoato de metilo (5c) (343 mg, 1,0 mmol) en presencia de I2 adicional (38 mg, 0,15 mmol, 15 % mol) y TMSCl (19 pl, 16 mg, 0,15 mmol, 15 % mol).
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte B), el producto de inserción de cinc de (5c) se usó in situ para un acoplamiento cruzado con 3-yodo-2,4-dimetil-anilina (247 mg, 1,0 mmol; preparable siguiendo la Descripción 6 de 2-yodo-1,3-dimetil-4-nitrobenceno (2,78 g, 10,0 mmol), 5,6 g de hierro en polvo (Fe) y cloruro de calcio deshidratado (CaCl2-2H2O) (1,47 g, 10,0 mmol) en una mezcla de etanol (EtOH) (20 ml) y agua ( 1 ml)) en presencia de tris(bencilidenoacetona)dipaladio (Pd2(dba)3) (23 mg, 0,025 mmol, 2,5 % mol) y tris(o-tolil)fosfina (P(otol)3) (30 mg, 0,10 mmol, 10 % mol) en DMF desgasificada anhidra (3 ml). La filtración, el tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (8a).
Etapa B: (3S)-4-[3-[bis(2-CloroetM)ammo1-2,6-dimetM-feml]-3-(ferc-butoxicarbomlammo)butanoato de metilo (8b)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 7 (Variante C), se preparó (3S)-4-[3-[bis(2-cloroetil)amino]-2,6-dimetil-fenil]-3-(terc-butoxicarbonilamino)butanoato de metilo (8b) a partir de (3S)-4-(3-amino-2,6-dimetil-fenil)-3-(tercbutoxicarbonilamino)-butanoato de metilo (8a) (336 mg, 1,0 mmol), 2-cloroacetaldehído (-50 % en peso en agua, -7,87 M) (700 |jl, 5,51 mmol), y cianoborohidruro sódico (NaBH3CN) (264 mg de pureza del 95 % = 251 mg, 4,0 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH) (6 ml) y ácido fosfórico al 85 % en peso (H3PO4) (3 ml). El tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (8b).
Etapa C: Ácido (3S)-3-ammo-4-[3-[bis(2-cloroetN)ammo]-2,6-dimetN-feml]butanoico (8)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 8, se prepararse a partir de un compuesto ácido (3S)-3-amino-4-[3-[bis(2-cloroetil)amino]-2,6-dimetil-fenil]butanoico (8) a partir de (3S)-4-[3-[bis(2-cloroetil)amino]-2,6-dimetil-fenil]-3-(terc-butoxicarbonilamino)butanoato de metilo (8b) (461 mg, 1,0 mmol) por hidrólisis en una mezcla de ácido clorhídrico concentrado (HCl) (aproximadamente 5 ml) y 1,4-dioxano (aproximadamente 5 ml) a aproximadamente 60 °C durante aproximadamente 15 horas para proporcionar el compuesto del título (8) en forma de una sal sólida de diclorhidrato después del aislamiento usando evaporación y liofilización. El material así obtenido se purificó mediante RP-HPLC preparativa usando un gradiente de agua/acetonitrilo/0,1 % en volumen de ácido fórmico para producir el compuesto del título (8) como una sal diclorhidrato después de la liofilización final de los disolventes en presencia de un exceso de ácido clorhídrico 1 M (HCl).
Ejemplo de referencia 9
Ácido (3S)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-metil-butanoico (9)
Figure imgf000064_0001
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 12, se preparó (2R)-2-benciloxicarbonilamino-2-metilbutanodioato de O'-(2,5-dioxopirrolidin-1-il) O4-metilo (9a) a partir de ácido (2R)-2-benciloxicarbonilamino-4-metoxi-2-metil-4-oxo-butanoico (2,95 g, 10,0 mmol) (preparable en dos etapas a partir de ácido (R)-a-metilaspártico comercial: i) SOCI2, MeOH, 0 °C ^ temperatura ambiente, 3 h; ii) Cbz-OSu (A/-(benciloxicarboniloxi)succinimida), K3PO4 ac./tolueno, 0 °C ^ temperatura ambiente, 14 h) siguiendo un protocolo bibliográfico conocido (Gauvreau, et al., Publicación internacional n.° WO 2008/088690)), A/-hidroxisuccinimida (1-hidroxipirrolidin-2,5-diona, HOSu, NHS) (1,21 g, 10,5 mmol) y diciclohexilcarbodiimida (DCC) (2,06 g, 10,0 mmol en acetato de etilo (EtoAc) (40 ml) a temperatura ambiente. La filtración y el tratamiento acuoso proporcionan el compuesto del título (9a) que puede ser de pureza suficiente para usarse directamente en la siguiente etapa sin aislamiento ni purificación adicionales.
Etapa B: (3R)-3-Benciloxicarbonilamino-4-hidroxi-3-metil-butanoato de metilo (9b)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 13, se preparó (3R)-3-benciloxicarbonilamino-4-hidroxi-3-metilbutanoato de metilo (9b) a través de reducción de (2R)-2-benciloxicarbonilamino-2-metil-butanodioato de O1-(2,5-dioxopirrolidin-1-il) O4-metilo (9a) (3,92 g, 10,0 mmol) con borohidruro sódico (NaBH4) (757 mg, 20,0 mmol) en tetrahidrofurano (THF)/agua (40 ml/5 ml). El tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (9b).
Etapa C: (3R)-3-Benciloxicarbonilamino-4-yodo-3-metil-butanoato de metilo (9c)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 14, se preparó (3R)-3-benciloxicarbonilamino-4-yodo-3-metilbutanoato de metilo (9c) a partir de (3R)-3-benciloxicarbonilamino-4-hidroxi-3-metil-butanoato de metilo (9b) (2,81 g, 10,0 mmol), yodo (I2) (2,54 g, 10,0 mmol), trifenilfosfina (PPh3) (2,62 g, 10,0 mmol) e imidazol (681 mg, 10,0 mmol) en diclorometano anhidro (DCM) (50 ml). El tratamiento reductor acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionó el compuesto del título (9c).
Etapa D: (3S)-4-(5-Amino-2-metil-fenil)-3-benciloxicarbonilamino-3-metil-butanoato de metilo (9d)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte A), se activó polvo de cinc (Zn) (784 mg, 12,0 mmol) con yodo elemental (I2) (76 mg, 0,30 mmol, 15 % mol) y cloruro de trimetilsililo (MeSiCl, TMsCl) (38 pl, 32 mg, 0,30 mmol, 15 % en moles) en W,W-dimetilformamida anhidra desgasificada (DMF) (6 ml). El producto de inserción de cinc se prepara a partir de (3R)-3-benciloxicarbonilamino-4-yodo-3-metil-butanoato de metilo (9c) (782 mg, 2,0 mmol) en presencia de I2 adicional (76 mg, 0,30 mmol, 15 % mol) y TMSCl (38 pl, 32 mg, 0,30 mmol, 15 % mol).
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte B), el producto de inserción de cinc de (9c) se usó in situ para un acoplamiento cruzado con 3-yodo-4-metil-anilina comercial (466 mg, 2,0 mmol) en presencia de tris(bencilidenoacetona)dipaladio (Pd2(dba)3) ( 46 mg, 0,05 mmol, 2,5 % mol) y tris(o-tolil)fosfina (P(o-tol)3) (60 mg, 0,20 mmol, 10 % mol) en DMF desgasificada anhidra (6 ml). La filtración, el tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (9d).
Etapa E: (3S)-3-Benciloxicarbonilamino-4-15-(bis(2-hidroxietil)amino)-2-metil-fenil]-3-metil-butanoato de metilo (9e)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 16, se preparó (3S)-3-benciloxicarbonilamino-4-[5-(bis(2-hidroxietil)amino)-2-metil-fenil]-3-metil-butanoato de metilo (9e) a partir de (3S)-4-(5-amino-2-metil-fenil)-3-benciloxicarbonilamino-3-metil-butanoato de metilo (9d) (3,70 g, 10,0 mmol) a través de reacción con óxido de etileno (12,5 ml, 11,0 g, 100,0 mmol) en 15 ml de ácido acético acuoso al 50 % de vol. (HOAc) durante 24 horas a temperatura ambiente para producir el compuesto del título (9e) después del tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía sobre gel de sílice.
Etapa F: (3S)-3-Benciloxicarbonilamino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-metil-butanoato de metilo (9f)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 17, se preparó (3S)-3-benciloxicarbonilamino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-metilbutanoato de metilo (9f) a partir de (3S)-4-(5-amino-2-metil-fenil)-3-benciloxicarbonilamino-3-metil-butanoato de metilo (9d) (1,85 g, 5,0 mmol) a través de reacción con i) cloruro de tionilo (SOCh) (3,63 ml, 5,93 g, 50 mmol) en 25 ml de cloroformo anhidro (CHCh) durante 2 horas a temperatura de reflujo (Variante A), ii) cloruro de fosforilo (POCh) (2,34 ml, 3,83 g, 25,0 mmol) en benceno anhidro (20 ml) durante aproximadamente 5 h a una temperatura de aproximadamente 80 °C (Variante B), iii) cloruro de metanosulfonilo (MsCl) (1,94 ml, 2,86 g, 25,0 mmol) en piridina anhidra (20 ml) durante 2 horas a 90 °C (Variante C), o iv) trifenilfosfina (Ph3P) (2,62 g, 10,0 mmol) y tetracloruro de carbono (CCU) (1,45 ml, 2,31 g, 15,0 mmol) en diclorometano anhidro (DCM) (20 ml) a temperatura ambiente durante 8 horas (Variante D) para producir el compuesto diana (9f) después del tratamiento y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice.
Etapa G: Ácido (3S)-3-amino-4-15-ibis(2-cloroetil)aminol-2-metil-fenil]-3-metil-butanoico (9)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 8, se prepararse usando ácido (3S)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-metil-butanoico (9) a través de desprotección hidrolítica de (3S)-3-benciloxicarbonilamino4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-metil-butanoato de metilo (9f) (495 mg, 1,0 mmol) en una mezcla de ácido clorhídrico concentrado (HCl) (5 ml) y 1,4-dioxano (5 ml) y obtenida en forma de una sal sólida de diclorhidrato después del aislamiento usando evaporación y la liofilización. El material así obtenido se purificó mediante RP-HPLC preparativa usando un gradiente de agua/acetonitrilo/0,1 % en volumen de ácido fórmico para producir el compuesto del título (9) como una sal diclorhidrato después de la liofilización final de los disolventes en presencia de un exceso de ácido clorhídrico 1 M (HCl).
Ejemplo de referencia 10
Ácido [(2R)-2-amino-3-[5-[bis(2-doroetil)amino]-2-metil-fenil]propil]fosfínico (10)
Figure imgf000066_0001
Etapa A: (2R)-2-(ferc-Butoxicarbomlammo)-3-(1,1-dietoxietil(etoxi)-fosforil)propanoato de metilo (10a)
Adaptando protocolos bibliográficos, se preparó (2R)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-3-(1,1-dietoxietil(etoxi)-fosforil)propanoato de metilo (10a) a partir de (2R)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-3-yodo-propanoato de metilo comercial (Jackson y Perez-Gonzalez, Org. Synth., 2005, 81,77-88) (3,29 g, 10,0 mmol) y 1-(1-etoxi-1-etoxifosfonoiletoxi)etano (2,10 g, 10,0 mmol) (preparable a partir de ácido hipofosforoso acuoso al 80-90% en peso (H3PO2), trietilortoacetato y BF3-catalizador de eterato (BF3 • OEt2); (Baylis, Tetrahedron Lett., 1995, 36(51), 9385-9388) en presencia de hidruro sódico (NaH) (suspensión al 60 % en peso en aceite mineral) (400 mg, 10,0 mmol) en tolueno anhidro (50 ml). La reacción fue seguida por TLC y/o c L/EM hasta su finalización. El tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (10a).
Etapa B: Ácido (2R)-2-(ferc-butoxicarbomlammo)-3-(1,1-dietoxietil(etoxi)-fosforil)propanoico (10b)
Adaptando un protocolo bibliográfico conocido (Dayal, et al., Steroids, 1990, 55(5), 233-237), una mezcla de reacción de (2R)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-3-(1,1-dietoxietil(etoxi)-fosforil)propanoato de metilo (10a) (4,11 g, 10,0 mmol) y monohidrato de hidróxido de litio comercial (LD H H 2O) (839 mg, 20,0 mmol) en una mezcla de agua (20 ml) y metanol (MeOH) (5 ml) se agitó a temperatura ambiente. La reacción se controló mediante TLC y/o CL/EM hasta su finalización. El tratamiento acuoso ácido y la purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice proporcionan el compuesto del título, ácido (2R)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-3-(1,1-dietoxietil(etoxi)fosforil)propanoico (10b) que puede usarse directamente en la siguiente etapa sin aislamiento ni purificación adicionales.
Etapa C: (2R)-2-(íerc-Butoxicarbomlammo)-3-(1,1-dietoxietM(etoxi)fosforM)propanoato de (2,5-dioxopirrolidin-1- ilo)(10c)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 12, se preparó (2R)-2-(íerc-butoxicarbonilamino)-3-(1,1-dietoxietil(etoxi)fosforil)propanoato de (2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (10c) a partir de ácido (2R)-2-(íercbutoxicarbonilamino)-3-(1,1-dietoxietil(etoxi)-fosforil)propanoico (10b) (3,97 g, 10,0 mmol), W-hidroxisuccinimida (1-hidroxipirrolidin-2,5-diona, HOSu, Nh S) (1,21 g, 10,5 mmol) y diciclohexilcarbodiimida (d Cc ) (2,06 g, 10,0 mmol en acetato de etilo (EtoAc) (40 ml) a temperatura ambiente. La filtración y el tratamiento acuoso proporcionan el compuesto del título (10c) que puede ser de pureza suficiente para usarse directamente en la siguiente etapa sin aislamiento ni purificación adicionales.
Etapa D: W-[(1R)-1-[(1,1-DietoxietM(etoxi)fosforN)metM]-2-hidroxietN]carbamato de íerc-butilo (10d)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 13, se preparó A/-[(1R)-1-[(1,1-dietoxietil(etoxi)fosforil)metil]-2-hidroxi-etil]carbamato de íerc-butilo (10d) a través de reducción de (2R)-2-(íerc-butoxicarbonilamino)-3-(1,1-dietoxietil(etoxi)fosforil)propanoato de (2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (10c) (4,95 g, 10,0 mmol) con borohidruro sódico (NaBH4) (757 mg, 20,0 mmol) en tetrahidrofurano (THF)/agua (40 ml/5 ml). El tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (10d).
Etapa E: W-[(1S)-1-[(1,1-DietoxietM(etoxi)fosforN)metM]-2-yodo-etM]carbamato de íerc-butilo (10e)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 14, se preparó W-[(1S)-1-[(1,1-dietoxietil(etoxi)fosforil)metil]-2-yodo-etil]carbamato de íerc-butilo (10e) a partir de A/-[(1R)-1-[(1,1-dictoxietil(etoxi)fosforil)metil]-2-hidroxietil]carbamato de íerc-butilo (10d) (3,83 g, 10,0 mmol), yodo (I2) (2,54 g, 10,0 mmol), trifenilfosfina (PPh3) (2,62 g, 10,0 mmol) e imidazol (681 mg, 10,0 mmol) en diclorometano anhidro (DCM) (50 ml). El tratamiento reductor acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionó el compuesto del título (10e).
Etapa F: W-[(1R)-1-[(5-Ammo-2-metN-fenM)metM]-2-(1,1-dietoxietN(etoxi)fosforN)etM]carbamato de íerc-butilo (10f)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte A), se activó polvo de cinc (Zn) (784 mg, 12,0 mmol) con yodo elemental (I2) (76 mg, 0,30 mmol, 15 % mol) y cloruro de trimetilsililo (MeSiCl, t Ms C i) (38 pl, 32 mg, 0,30 mmol, 15 % en moles) en W,W-dimetilformamida anhidra desgasificada (DMF) (6 ml). El producto de inserción de cinc se prepara a partir de W-[(1S)-1-[(1,1-dictoxietil(etoxi)fosforil)metil]-2-yodoetil]carbamato de íerc-butilo (10e) (987 mg, 2,0 mmol) en el presencia de I2 adicional (76 mg, 0,30 mmol, 15 % mol) y Tm Sc I (38 pl, 32 mg, 0,30 mmol, 15 % mol).
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte B), que se usó in siíu para el acoplamiento cruzado con 3-yodo-4-metil-anilina comercial (466 mg, 2,0 mmol) en presencia de tris(bencilidenoacetona)dipaladio (Pd2(dba)3) (46 mg, 0,05 mmol, 2,5 % mol) y tris(o-tolil)fosfina (P(o-tol)3) (60 mg, 0,20 mmol, 10 % mol) en Dm F desgasificada anhidra (6 ml). La filtración, el tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (10f).
Etapa G: W-[(1R)-1-[[5-1bis(2-CloroetM)ammo]-2-metN-feml]metM]-2-(1,1-dietoxietM(etoxi)fosforN)etN]carbamato de íerc-butilo (10g)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 7 (Variante C), se preparó A/-[(1R)-1-[[5-[bis(2-cloroetil)am¡no]-2- metil-fenil]metil]-2-(1,1-dietoxietil(etoxi)fosforil)etil]carbamato de íerc-butilo (10g) a partir de W-[(1R)-1-[(5-amino-2-metil-fenil)metil]-2-(1,1-dietoxietil(etoxi)fosforil)etil]carbamato de íerc-butilo (10f) (472 mg, 1,0 mmol), 2-cloroacetaldehído (~50 % en peso en agua, -7,87 M) (700 pl, 5,51 mmol), y cianoborohidruro sódico (NaBH3CN) (264 mg de pureza del 95 % = 251 mg, 4,0 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH) (6 ml) y ácido fosfórico al 85 % en peso (H3PO4) (3 ml). El tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (10g).
Etapa H: Ácido [(2R)-2-amino-3-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]propil]fosfínico (10)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 8, se preparó ácido [(2R)-2-amino-3-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]propil]fosfínico (10) a través de desprotección hidrolítica de W-[(1R)-1-[[5-[bis(2-cloroetil)am¡no]-2-metilfenil]metil]-2-(1,1-dietoxietil(etoxi)fosforil)etil]carbamato de íerc-butilo (10g) (598 mg, 1,0 mmol) en una mezcla de ácido clorhídrico concentrado (HCl) (5 ml) y 1,4-dioxano (5 ml) y obtenida en forma de una sal sólida de diclorhidrato después del aislamiento usando evaporación y liofilización. El material así obtenido se purificó mediante RP-HPLC preparativa usando un gradiente de agua/acetonitrilo/0,1 % en volumen de ácido fórmico para producir el compuesto del título (9) como una sal diclorhidrato después de la liofilización final de los disolventes en presencia de un exceso de ácido clorhídrico 1 M (HCl).
Ejemplo de referencia 11
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-metilsulfoniloxietil(propil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (11)
Figure imgf000068_0001
Variante A: Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 16, se preparó (3R)-4-[5-(bis(2-hidroxietil)amino)-2-metil-fenil]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (11a) a partir de (3R)4-(5-amino-2-metil-fenil)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-butanoato de tere-butilo (6d) (3,64 g, 10,0 mmol) a través de reacción con óxido de etileno (12,5 ml, 11,0 g, 100,0 mmol) en 15 ml de ácido acético acuoso al 50 % de vol. (HOAc) durante 24 horas a temperatura ambiente para producir el compuesto del título (11) después del tratamiento y la purificación por cromatografía sobre gel de sílice.
Variante B: Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Palmer, et al., J. Med. Chem. 1990, 33(1), 112-121; Coggiola, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2005, 15(15), 3551-3554; Verny y Nicolas, J. Label. Cmpds Radiopharm., 1988, 25(9), 949-955; y Lin, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2011, 21(3), 940-943), una mezcla de reacción de (3R)-4-(5-amino-2-metil-fenil)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-butanoato de tere-butilo (6d) (3,64 g, 10,0 mmol) y 2-cloroetanol comercial (2,68 ml, 3,22 g, 40,0 mmol), carbonato de calcio (CaCO3) (2,0 g, 20,0 mmol, 2,0 equivalentes) en agua (aproximadamente 35 ml) y una cantidad catalítica de yoduro potásico (KI) (166 mg, 1,0 mmol, 10 % mol) se calentó a reflujo durante aproximadamente 12-24 horas. La reacción fue seguida por TLC y/o CL/EM hasta su finalización. El pH de la mezcla de reacción se ajustó a -7 con una solución acuosa 2,5 M (10 % en peso) de hidróxido sódico (NaOH). El tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto diana (11a).
Etapa B: (3R)-4-[5-(bis(2-Metilsulfomloxietil)ammo)-2-metil-feml]-3-(terc-butoxicarbomlammo)butanoato de ferc-butilo (11b)
Siguiendo los Procedimientos Generales de la Descripción 18, se preparó (3R)-4-[5-(bis(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (11b) a partir de (3R)-4-[5-(bis(2-hidroxietil)amino)-2-metil-fenil]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (11a) (2,26 g, 5,0 mmol) y metanosulfonil anhídrido (Ms2O) (3,48 g, 20,0 mmol) en presencia de trietilamina (TeA, Et3N) (3,48 ml, 2,54 g, 25,0 mmol) y 4-N,N-(dimetilamino)piridina (DMAP) (122 mg, 1,0 mmol, 20 mol-%) en diclorometano anhidro (DCM) (30 ml) (Variante A) o cloruro de metanosulfonilo (MsCl) (0,96 ml, 1,44 g, 12,5 mmol) en presencia de trietilamina (TEA, Et3N) (2,10 ml, 1,52 g, 15,0 mmol) o piridina (4,0 ml, 3,96 g, 50,0 mmol) en diclorometano anhidro (DCM) (30 ml) (Variante B) para producir el compuesto diana (11b) después del tratamiento y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice.
Etapa C: Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(bis(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (11)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante B), se preparó ácido (3R)-3-amino-4-[5-(bis(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (11) a partir de (3R)-4-[5-(bis(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metilfenil]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (11b) (609 mg, 1,0 mmol) en HCl 2 N en éter dietílico (HCl 2 N en Et2O) (10 ml, 20 mmol) para producir el compuesto diana (11) en forma de una sal sólida de diclorhidrato después de la evaporación de los disolventes y la liofilización a partir de una solución acuosa. El material además, puede purificarse por HPLC preparativa seguido de liofilización. Opcionalmente, la liofilización se realiza en presencia de 1 equivalente o un exceso de ácido clorhídrico 1,0 M (HCl).
Ejemplo de referencia 12
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(bis(2-bromoetil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (12)
Figure imgf000069_0001
Etapa A: (3R)-4-15-(bis(2-Bromoetil)ammo)-2-metil-feml]-3-(ferc-butoxicarbomlammo)butanoato de ferc-butilo (12a)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 19, se preparó (3R)-4-[5-(bis(2-bromoetil)amino)-2-metil-fenil]-3-(tere-butoxicarbonilam¡no)butanoato de tere-butilo (12a) a partir de (3R)-4-[5-(bis(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fen¡l]-3-(tere-butoxicarbon¡lam¡no)butanoato de tere-butilo (11b) (1,22 g, 2,0 mmol) a través de reacción con bromuro de litio (LiBr) (1,74 g, 20,0 mmol) en tetrahidrofurano (THF) (10 ml) a temperatura de reflujo durante aproximadamente 6 h para producir el compuesto del título (12a) después del tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice con mezclas de acetato de etilo (EtOAc) y hexano.
Etapa B: Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(bis(2-bromoetil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (12)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante A), se preparó ácido (3R)-3-amino-4-[5-(bis(2-bromoetil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (12) a partir de (3R)-4-[5-(bis(2-bromoetil)amino)-2-metil-fenil]-3-(terebutoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (12a) (578 mg, 1,0 mmol) a través de desprotección en una mezcla de ácido trifluoroacético (TFA)/diclorometano (Dc m ) (TFA/DCM = 1:1 v/v, 10 ml) a temperatura ambiente durante aproximadamente 6 h para producir el compuesto diana (12) en forma de una sal de ditrifluoroacetato después de la evaporación y la liofilización a partir de una solución acuosa de acetonitrilo. El material además, puede purificarse por RP-HPLC preparativa usando un gradiente de agua/acetonitrilo/ácido fórmico al 0,1 % en vol. seguido de liofilización en presencia de 1,0 equivalente o un exceso de ácido bromhídrico 1,0 M (HBr).
Ejemplo de referencia 13
Ácido (3R)-3-amino-4-(5-(2-cloroetil(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (13)
Figure imgf000069_0002
Etapa A: (3R)-3-(terc-Butoxicarbomlammo)-4-[5-(2-cloroetil(2-metilsulfomloxietil)ammo)-2-metilfenil]butanoato de terc-butilo (13a)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 19, se preparó (3R)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-[5-(2-cloroetil(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metilfenil]butanoato de tere-butilo (13a) a partir de (3R)-4-[5-(bis(2 metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (11b) (2,44 g, 4,0 mmol) a través de reacción con cloruro de litio (LiCl) (186 mg, 2,2 mmol) en acetonitrilo anhidro (MeCN) (20 ml) a temperatura de reflujo durante 1,5 h para producir el compuesto del título (13a) después del tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice.
Etapa B: Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-doroetil(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (13) Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante A), se preparó ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-cloroetil(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (13) a partir de (3R)-3-(tere-butoxicarbonilamino)4-[5-(2-cloroetil(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]butanoato de tere-butilo (13a) (549 mg, 1,0 mmol) a través de desprotección en una mezcla de ácido trifluoroacético (TFA) diclorometano (Dc M) (TFA/DCM = 1:1 v/v, 10 ml) a temperatura ambiente durante aproximadamente 6 h para producir el compuesto diana (13) en forma de una sal de ditrifluoroacetato después de la evaporación y la liofilización a partir de una solución acuosa de acetonitrilo.
Ejemplo de referencia 14
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-bromoetil(2-cloroetil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (14)
Figure imgf000070_0001
Etapa A: (3R)-4-[5-(2-BromoetM(2-doroetM)ammo)-2-metM-feml]-3-(terc-butoxicarbomlammo)butanoato de terc-butilo (14a)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 19, se preparó (3R)-4-[5-(2-bromoetil(2-cloroetil)amino)-2-metilfenil]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (14a) a partir de (3R)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-[5-(2-cloroetil(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]butanoato de tere-butilo (13a) (1,10 g, 2,0 mmol) a través de reacción con cloruro de litio (LiBr) (191 mg, 2,2 mmol) en acetonitrilo anhidro (MeCN) (10 ml) a temperatura de reflujo durante aproximadamente 2 h para producir el compuesto del título (14a) después del tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice.
Etapa B: Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-bromoetil(2-cloroetil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (14)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante A), se preparó ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-bromoetil(2-cloroetil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (14) a partir de (3R)-4-[5-(2-bromoetil(2-cloroetil)amino)-2-metilfenil]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (14a) (533 mg, 1,0 mmol) a través de desprotección en una mezcla de ácido trifluoroacético (TFA)/diclorometano (DCM) (TFA/DCM = 1:1 v/v, 10 ml) a temperatura ambiente durante aproximadamente 6 h para producir el compuesto diana (14) en forma de una sal de ditrifluoroacetato después de la evaporación y la liofilización a partir de una solución acuosa de acetonitrilo. El material además, puede purificarse por RP-HPLC preparativa, usando un gradiente de agua/acetonitrilo/ácido fórmico al 0,1 % en vol. seguido de liofilización.
Ejemplo de referencia 15
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-bromoetil(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (15)
Figure imgf000071_0001
Etapa A: (3R)-4-[5-(2-Bromoetil(2-metilsulfomloxietil)ammo)-2-metil)-feml]-3-(fercbutoxicarbonilamino)butanoato de ferc-butilo (15a)
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Emmons y A.F. Ferris, J. Am Chem. Soc. 1953, 75(9), 2257-2257), se preparó (3R)-4-[5-(2-bromoetil(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (15a) a partir de (3R)-4-[5-(bis(2-bromoetil)amino)-2-metil-fenil]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (12a) (1,16 g, 2,0 mmol) con metanosulfonato de plata (mesilato de plata, AgOMs) (365 mg, 1,8 mmol) en acetonitrilo anhidro (MeCN) (8 ml) a temperatura de reflujo durante aproximadamente 1 h en exclusión de luz. El tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (15a).
Etapa B: Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-bromoetil(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (15)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante A), se preparó ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-bromoetil(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (15) a partir de (3R)-4-[5-(2-bromoetil(2-metilsulfoniloxietil)amino)-2-metil-fenil]-3-(terf-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (15a) (594 mg, 1,0 mmol) a través de desprotección en una mezcla de ácido trifluoroacético (TFA)/diclorometano (d Cm ) (TFA/DCM = 1:1 v/v, 10 ml) a temperatura ambiente durante aproximadamente 6 h para producir el compuesto diana (15) en forma de una sal de ditrifluoroacetato después de la evaporación y la liofilización a partir de una solución acuosa de acetonitrilo. El material además, puede purificarse por RP-HPLC preparativa, usando un gradiente de agua/acetonitrilo/ácido fórmico al 0,1 % en vol. seguido de liofilización.
Ejemplo de referencia 16
Ácido (3S)-3-amino-4-[[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]amino]-4-oxo-butanoico (16)
Figure imgf000071_0002
Etapa A: W-[5-[Bis(2-cloroetilammo]-2-metil-feml]acetamida (16a)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 7 (Variante A), se preparó N-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metilfenil]acetamida (16a) a partir de N-(5-amino-2-metilfenil)acetamida comercial (161 mg, 1,0 mmol), 2-cloroacetaldehído (-50 % en peso en agua, -7,87 M) (700 pl, 5,51 mmol) y cianoborohidruro sódico (NaBH3CN) (264 mg de pureza del 95 % = 251 mg, 4,0 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH) (6 ml) y ácido trifluoroacético (3 ml). El tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (16a).
Etapa B: Wí ,Wí-Bis(2-cloroetN)-4-metN-benceno-1,3-diamma (16b)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 8, se preparó Ní ,Ní-bis(2-cloroetil)-4-metil-benceno-1,3-diamina (16b) a partir de N-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]acetamida de metilo (16a) (289 mg, 1,0 mmol) por hidrólisis en ácido clorhídrico concentrado (HCl) (aproximadamente 5 ml) a reflujo durante aproximadamente 2 horas para proporcionar el compuesto del título (16b) en forma de una sal sólida de diclorhidrato después del aislamiento usando evaporación y liofilización. El material así obtenido se puede usar directamente en la etapa siguiente sin aislamiento y purificación adicionales en la siguiente etapa.
Etapa C: (3S)-4-[[5-[bis(2-CloroetN)ammo]-2-metN-feml]ammo]-3-(ferc-butoxicarbomlammo)-4-oxo-butanoato de ferc-butilo (16c)
Adaptando un protocolo bibliográfico conocido (Levi y Weed, Patente U.S. n.° 3.235.594 (1966)), a una solución de (2S)-2-(tere-butoxicarbonilamino)-butanodioato de O1-(2,5-dioxopirrolidin-1-il) O4-tere-butilo (Boc-L-Asp(Osu)-OtBu) (6a) (386 mg, 1,0 mmol) en acetonitrilo anhidro (MeCN) (10 ml) se le añadió N1,N1-bis(2-cloroetil)-4-metil-benceno-1,3-diamina (16b) en forma de una sal de bis clorhidrato (320 mg, 1,0 mmol) seguido de trietilamina pura (Et3N, TEA) (321 pl, 233 mg, 2,3 mmol). La mezcla de reacción se agita durante aproximadamente 12 h a temperatura ambiente. La reacción fue seguida por TLC y/o CL/EM hasta su finalización. Los disolventes volátiles se retiraron a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto diana (16c).
Etapa D: Ácido (3S)-3-amino-4-[[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]amino]-4-oxo-butanoico (16)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante B), se preparó ácido (3S)-3-amino4-[[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]amino]-4-oxo-butanoico (16) se preparó a partir de (3S)-4-[[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]amino]-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-oxo-butanoato de tere-butilo (16c) (518 mg, 1,0 mmol) en HCL 2,0 N en éter dietílico (HCl 2,0 N en Et2O) (10 ml, 20 mmol) para producir el compuesto diana (15) en forma de una sal sólida de diclorhidrato después de la evaporación de los disolventes y la liofilización a partir de una solución acuosa. El material además, puede purificarse por HPLC preparativa seguido de liofilización. Opcionalmente, la liofilización se realizó en presencia de 1 equivalente de ácido clorhídrico 1,0 M (HCl).
Ejemplo de referencia 17
Ácido (3S)-3-amino-4-(2-[bis(2-cloroetil)amino]fenoxi]butanoico (17)
Figure imgf000072_0001
Etapa A: (3S)-3-(ferc-Butoxicarbonilamino)-4-(2-nitrofenoxi)butanoato de ferc-butilo (17a)
Adaptando procedimientos bibliográficos (Bookster, etal., Publicación internacional n.° WO 2010/047982), se preparó (3S)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-(2-nitrofenoxi)butanoato de tere-butilo (17a) a partir de (3S)-3-(terebutoxicarbonilamino)-4-yodo-butanoato de tere-butilo (6c) (1,16 g, 3,0 mmol) y 2-nitrofenol comercial (558 mg, 4,0 mmol) en presencia de carbonato de cesio (Cs2CO3) (1,63 g, 5,0 mmol) en N,N-dimetilformamida anhidra (DMF) (10 ml) a 50 °C (baño de aceite). El tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (17a).
Etapa B: (3S)-4-(2-Ammofenoxi)-3-(terc-butoxicarbonilammo)butanoato de tere-butilo (17b)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 6 (Variante B), se preparó (3S)-4-(2-aminofenoxi)-3-(terebutoxicarbonilamino)butanoato por tere-butilo (17b) por reducción catalítica de (3S)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-(2-nitrofenoxi)butanoato de tere-butilo (17a) (793 mg, 2,0 mmol) en presencia de paladio al 10 % en peso sobre carbono (Pd/C) que contenía agua a -50 % en peso (~350 mg) en metanol (MeOH) (20 ml) y en una atmósfera de hidrógeno (~ 103,42 kPa (15 psi), globo de H2). El material en bruto, después de la filtración sobre Celite® 545, puede usarse directamente y sin aislamiento adicional en la siguiente etapa o puede purificarse por cromatografía sobre gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (17b).
Etapa C: (3S)-4-[2-[bis(2-Cloroetil)amino]fenoxi]-3-(terc-butoxicarbonil-amino)butanoato de tere-butilo (17c) Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 7 (Variante C), se preparó (3S)-4-[2-[bis(2-cloroetil)amino]fenoxi]-3-(tere-butoxicarbonil-amino)butanoato de tere-butilo (17c) a partir de (3S)-4-(2-aminofenoxi)-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (17b) (733 mg, 2,0 mmol), 2-cloroacetaldehído (~50 % en peso en agua, ~7,87 M) (1,27 ml, 10,0 mmol) y cianoborohidruro sódico (NaBH3CN) (529 mg de pureza del 95 % = 503 mg, 8,0 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH) (10 ml) y ácido fosfórico al 85 % en peso (H3PO4) (3 ml). El tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (17c).
Etapa D: Ácido (3S)-3-amino-4-[2-(bis(2-cloroetil)amino]fenoxi]butanoico (17)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante B), se preparó ácido (3S)-3-amino-4-[2-[bis(2-cloroetil)amino]fenoxi]butanoico (17) a partir de (3S)-4-[2-[bis(2-cloroetil)amino]fenoxi]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (17c) (491 mg, 1,0 mmol) en HCl 2,0 N en éter dietílico (HCl 2,0 N en Et2O) (10 ml, 20 mmol) para producir el compuesto diana (17) en forma de una sal sólida de diclorhidrato después de la evaporación de los disolventes y la liofilización a partir de una solución acuosa. El material además, puede purificarse por HPLC preparativa seguido de liofilización. Opcionalmente, la liofilización se realizó en presencia de 1 equivalente de ácido clorhídrico 1,0 M (HCl).
Ejemplo de referencia 18
Ácido (3R)-3-amino-5-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]pentanoico (18)
Figure imgf000073_0001
Etapa A: Yoduro de 1(2S)-4-terc-butoxi-2-(terc-butoxicarbonilamino)-4-oxo-butil]-trifenilfosfonio (18a) Adaptando un procedimiento bibliográfico (Rémond, et al., J. Org. Chem., J. Org. Chem. 2012, 77, 7579-7587), se preparó yoduro de [(2S)-4-terc-butoxi-2-(terc-butoxicarbonilamino)-4-oxo-butil]-trifenil-fosfonio (18a) a partir de (3S)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-4-yodo-butanoato de terc-butilo (6c) (1,16 g, 3,0 mmol) y trifenilfosfina (Ph3P) (1,81 g, 6,9 mmol) a 80 °C en una atmósfera de nitrógeno. Después de enfriar a temperatura ambiente y la trituración con tolueno y éter dietílico (Et2O), el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con una mezcla de acetona y hexano.
Etapa B: (3S)-3-(terc-Butoxicarbomlammo)-5-(2-metN-5-mtro-fenM)pent-4-enoato de tere-butilo (18b)
Adaptando un procedimiento bibliográfico (Jandeleit et al., Patente U.S. n.° 8.168,617 (2012)), se preparó (3S)-3-( tercbutoxicarbonilamino)-5-(2-metil-5-nitro-fenil)pent-4-enoato de terc-butilo (18b) a partir de yoduro de [(2s)-4-terc-butoxi-2-(terc-butoxicarbonilamino)-4-oxo-butil]-trifenil-fosfonio (18a) (1,30 g, 2,0 mmol), 2-metil-5-nitro-benzaldehído (1b) (495 mg, 3,0 mmol) (comercial o preparado en dos etapas a partir de ácido 2-metil-5-nitrobenzoico comercial (i) BH3'SMe2, THF, reflujo, ii) MnO2, DCM, temperatura ambiente) como se describe en el Ejemplo 1) con una solución ~1,0 M terc-butóxido potásico comercial (KOtBu) (3,0 ml, 3,0 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (THF) (10 ml) con calentamiento gradual de 0° (baño de hielo) a temperatura ambiente durante 24 horas. El tratamiento acuoso y la purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice proporcionan el compuesto del título (18b) como una mezcla de isómeros geométricos (isómeros (E)/(Z)).
Etapa C: (3R)-5-(5-Amino-2-metil-fenil)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-pentanoato de terc-butilo (18c)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 6 (Variante B), se preparó (3R)-5-(5-amino-2-metil-fenil)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-pentanoato de terc-butilo (18c) por reducción catalítica de (3S)-3-(tercbutoxicarbonilamino)-5-(2-metil-5-nitrofenil)pent-4-enoato de terc-butilo (18b) (813 mg, 2,0 mmol) en presencia de paladio al 10 % en peso sobre carbono (Pd/C) que contenía agua a ~50 % en peso (~40 mg) en metanol (MeOH) (20 ml) y en una atmósfera de hidrógeno (-103,42 kPa (15 psi), globo de H2). El material en bruto, después de la filtración sobre Celite® 545, puede usarse directamente y sin aislamiento adicional en la siguiente etapa o puede purificarse por cromatografía sobre gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (18c).
Etapa D: (3R)-5-[5-[bis(2-Cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-(terc-butoxicarbonilamino)pentanoato de terc-butilo (18d)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 7 (Variante C), se preparó (3R)-5-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-(terc-butoxicarbonilamino)pentanoato de terc-butilo (18d) a partir de (3R)-5-(5-amino-2-metil-fenil)-3-(terc-butoxicarbonilamino)-pentanoato de terc-butilo (18c) (757 mg, 2,0 mmol),
2-cloroacetaldehído (-50 % en peso en agua, -7 ,87 M) (1,27 ml, 10,0 mmol) y cianoborohidruro sódico (NaBHaCN) (529 mg de pureza del 95 % = 503 mg, 8,0 mmol) en una mezcla de metanol (MeOH) (10 ml) y ácido fosfórico al 85 % en peso (H3PO4) (3 ml). El tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (18d).
Etapa E: Ácido (3R)-3-amino-5-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]pentanoico (18)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante B), se preparó ácido (3R)-3-amino-5-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]pentanoico (18) a partir de (3R)-5-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-(tercbutoxicarbonilamino)pentanoato de terc-butilo (18d) (504 mg, 1,0 mmol) en HCl 2,0 N en éter dietílico (HCl 2,0 N en Et2O) (10 ml, 20 mmol) para producir el compuesto diana (18) en forma de una sal sólida de diclorhidrato después de la evaporación de los disolventes y la liofilización a partir de una solución acuosa. El material además, puede purificarse por HPLC preparativa seguido de liofilización. Opcionalmente, la liofilización se realizó en presencia de 1 equivalente de ácido clorhídrico 1,0 M (HCl).
Ejemplo de referencia 19
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-cloroetil(clorometil)carbamoil)oxi-2-metilfenil]butanoico (19)
Figure imgf000075_0001
Etapa A: (3R)-3-(terc-Butoxicarbomlammo)-4-(5-hidroxi-2-metN-feml)-butanoato de tere-butilo (19a) Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte A), se activó polvo de cinc (Zn) (392 mg, 6,0 mmol) con yodo elemental (I2) (38 mg, 0,15 mmol, 15 % mol) y cloruro de trimetilsililo (MeSiCl, TMSCl) (19 pl, 16 mg, 0 ,l5 mmol, 15 % en moles) en N,N-dimetilformamida anhidra desgasificada (DMF) (3 ml). El producto de inserción de cinc se preparó a partir de (3S)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-yodo-butanoato de tere-butilo (6c) (385 mg, 1,0 mmol) en presencia de I2 adicional (38 mg, 0,15 mmol, 15 % mol) y TMSCl (19 pl, 16 mg, 0,15 mmol, 15 % mol). Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte B), el producto de inserción de cinc de (6c) se usó in situ para un acoplamiento cruzado con 3-yodo-4-metilfenol comercial (234 mg, 1,0 mmol) en presencia de tris(bencilidenoacetona)dipaladio (Pd2(dba)3) ( 23 mg, 0,025 mmol, 2,5 % mol) y tris(o-tolil)fosfina (P(o-tol)3) (30 mg, 0,10 mmol, 10 % mol) en DMF desgasificada anhidra (3 ml). La filtración, el tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (19a).
Etapa B: (3R)-3-(terc-Butoxicarbomlammo)-4-15-(2-cloroetM(dorometM)-carbamoM)oxi-2-metM-feml]butanoato de tere-butilo (19b)
Adaptando un protocolo bibliográfico conocido (Fex, etal., Patente de EE.UU. N.° 3,299,104), se preparó (3R)-3-(terebutoxicarbonilamino)-4-[5-(2-cloroetil(clorometil)-carbamoil)oxi-2-metil-fenil]butanoato de tere-butilo (19b) a través de carbamoilación de (3s)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-(5-hidroxi-2-metil-fenil)-butanoato de tere-butilo (19a) (731 mg, 2,0 mmol) con cloruro de Ñ-N-bis(2-cloroetil)carbamoílo comercial (439 pl, 614 mg, 3,0 mmol) en piridina anhidra (15 ml) a aproximadamente 0 °C. La mezcla de reacción se agitó con calentamiento gradual a temperatura ambiente. La reacción se controló mediante TLC y/o CL/EM hasta su finalización. El exceso de cloruro de carbamoílo se destruyó con hielo picado. El tratamiento acuoso seguido de purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice proporcionó el compuesto del título (19b).
Etapa C: Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-cloroetil(clorometil)carbamoil)oxi-2-metil-fenil]butanoico (19) Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante B), se preparó ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-cloroetil(clorometil)carbamoil)oxi-2-metil-fenil]butanoico (19) a partir de (3R)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-[5-(2-cloroetil(clorometil)-carbamoil)oxi-2-metil-fenil]butanoato de tere-butilo (19b) (519 mg, 1,0 mmol) en HCl 2,0 N en éter dietílico (HCl 2,0 N en Et2O) (10 ml, 20 mmol) para producir el compuesto diana (19) en forma de una sal sólida de diclorhidrato después de la evaporación de los disolventes y la liofilización a partir de una solución acuosa. El material además, puede purificarse por HPLC preparativa seguido de liofilización. Opcionalmente, la liofilización se realizó en presencia de 1 equivalente de ácido clorhídrico 1,0 M (HCl).
Ejemplo de referencia 20
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)carbamoiloximetil]-2-nitro-fenil]butanoico (20)
Figure imgf000076_0001
Etapa A: (3R)-3-(terc-ButoxicarbonMammo)-4-[5-(hidroximetM)-2-mtro-feml]butanoato de tere-butilo (20a)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte A), se activó polvo de cinc (Zn) (392 mg, 6,0 mmol) con yodo elemental (I2) (38 mg, 0,15 mmol, 15 % mol) y cloruro de trimetilsililo (MeSiCl, TMSCl) (19 pl, 16 mg, 0 ,l5 mmol, 15 % en moles) en N,N-dimetilformamida anhidra desgasificada (DMF) (3 ml). El producto de inserción de cinc se preparó a partir de (3S)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-yodo-butanoato de tere-butilo (6c) (385 mg, 1,0 mmol) en presencia de I2 adicional (38 mg, 0,15 mmol, 15 % mol) y TMSCl (19 pl, 16 mg, 0,15 mmol, 15 % mol).
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte A), el producto de inserción de cinc de (6c) se usó in situ para un acoplamiento cruzado con (3-bromo-4-nitrofenil)metanol comercial (232 mg, 1,0 mmol) en presencia de tris(bencilidenoacetona)dipaladio (Pd2(dba)3) ( 23 mg, 0,025 mmol, 2,5 % mol) y tris(o-tolil)fosfina (P(o-tol)-3) (30 mg, 0,10 mmol, 10 % mol) en DMF desgasificada anhidra (3 ml). La filtración, el tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (20a).
Etapa B: (3R)-4-(5-(bis(2-CloroetM)carbamoMoximetM)-2-mtro-fenM)-3-(terc-butoxicarbomlammo)butanoato de tere-butilo (20b)
Adaptando un protocolo bibliográfico conocido (Fex, et al., Patente de EE.UU. N.° 3,299,104), se preparó (3R)-4-[5-[bis(2-cloroetil)carbamoiloximetil]-2-nitro-fenil]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (20b) a través de carbamoilación de (3R)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-[5-(hidroximetil)-2-nitro-fenil]butanoato de tere-butilo (20a) (731 mg, 2,0 mmol) con cloruro de N,N-bis(2-cloroetil)carbamoílo comercial (439 pl, 614 mg, 3,0 mmol) en piridina anhidra (15 ml) a aproximadamente 0 °C. La mezcla de reacción se agita con calentamiento gradual a temperatura ambiente. La reacción se controló mediante TLC y/o CL/EM hasta su finalización. El exceso de cloruro de carbamoílo se destruyó con hielo picado. El tratamiento acuoso seguido de purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice proporcionó el compuesto del título (20b).
Etapa C: Ácido (3R)-3-amino-4-15-[bis(2-cloroetil)carbamoiloximetil]-2-nitro-fenil]butanoico (20)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante B), se preparó ácido (3R)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)carbamoiloximetil]-2-nitro-fenil]butanoico (20) a partir de (3R)-4-[5-[bis(2-cloroetil)carbamoiloximetil]-2-nitrofenil]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (20b) (578 mg, 1,0 mmol) en HCl 2,0 N en éter dietílico (HCl 2,0 N en Et2O) (10 ml, 20 mmol) para producir el compuesto diana (20) en forma de una sal sólida de diclorhidrato después de la evaporación de los disolventes y la liofilización a partir de una solución acuosa. El material además, puede purificarse por HPLC preparativa seguido de liofilización. Opcionalmente, la liofilización se realizó en presencia de 1 equivalente de ácido clorhídrico 1,0 M (HCl).
Ejemplo de referencia 21
Ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-cloroetoxi(2-cloroetil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (21)
Figure imgf000077_0001
Etapa A: (3R)-3-(ferc-Butoxicarbomlammo)-4-[5-(2-doroetoxi(2-doroetN)ammo)-2-metil-feml]butanoato de tere-butilo (2la)
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Tercel, etal., J. Med. Chem. 1995, 38, 1247-1252; Kirkpatrick, Patente U.S. n.° 5.602.278; Kirkpatrick, et al., Anti-Cancer Drugs, 1994, 5,467-472; y Kirkpatrick, et al., Patente U.S. n.° 7.399.785), se preparó (3R)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-[5-(2-cloroetoxi(2-cloroetil)amino)-2-metilfenil]butanoato de tere-butilo (21a) añadiendo ácido 3-cloroperoxibenzoico (1,42 g, 80 % en peso, 6,6 mmol) a una solución de (3R)-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (6e) (2,43 g, 5,0 mmol) en diclorometano (d Cm ) (30 ml) a aproximadamente temperatura ambiente durante aproximadamente 2 h. La reacción fue seguida por TLC y/o CL/EM hasta su finalización. Después de interrumpirse con una solución saturada acuosa de hidrogenocarbonato sódico (NaHCO3), la mezcla de reacción se extrajo con DCM (3*). El tratamiento acuoso adicional y la purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice dan el compuesto del título (21a).
Etapa B: Ácido (3R)-3-ammo-4-[5-(2-doroetoxi(2-doroethy1)ammo)-2-metil-feml]butanoico (21)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante B), se preparó ácido (3R)-3-amino-4-[5-(2-cloroetoxi(2-cloroetil)amino)-2-metil-fenil]butanoico (21) a partir de (3K)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-[5-(2-cloroetoxi(2-cloroetil)amino)-2-metil-fenil]butanoato de tere-butilo (21a) (506 mg, 1,0 mmol) en HCl 2 N en éter dietílico (HCl 2,0 N en Et2O) (10 ml, 20 mmol) para producir el compuesto diana (21) en forma de una sal sólida de diclorhidrato después de la evaporación de los disolventes y la liofilización a partir de una solución acuosa. El material además, puede purificarse por HPLC preparativa seguido de liofilización. Opcionalmente, la liofilización se realiza en presencia de 1 equivalente o un exceso de ácido clorhídrico 1,0 M (HCl).
Ejemplo de referencia 22
Óxido de 4-[1-(ammometN)-3-hidroxi-1-metil-3-oxo-propN]-M,M-bis(2-doroetN)-3-metN-bencenoamma (22) Etapa A: Óxido de 3-[(2R)-4-ferc-butoxi-2-(ferc-butoxicarbomlammo)-4-oxo-butil-W,W-bis(2-doroetil)-4-metilbencenoamina (22a)
Adaptando protocolos bibliográficos conocidos (Tercel, etal., J. Med. Chem. 1995, 38, 1247-1252; y Kirkpatrick, etal., Patente U.S. n.° 7.399.785), se preparó recientemente ácido peracético (H3CCO3H) añadiendo peróxido de hidrógeno (H2O2) (1,5 ml de una solución acuosa al 35 % en peso, 14,0 mmol) gota a gota a anhídrido acético (Ac2O) (1,52 ml, 1,65 g, 16,0 mmol). Cuando la mezcla de reacción fue homogénea, se añadió una solución de (3R)-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metil-fenil]-3-(tere-butoxicarbonilamino)butanoato de tere-butilo (6e) (1,61 g, 3,29 mmol) en diclorometano (DCM) (20 ml) con agitación vigorosa aproximadamente a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 h. La reacción fue seguida por TLC y/o CL/EM hasta su finalización. La reacción se interrumpió con ácido clorhídrico (HCl) 2,0 N y la capa acuosa se separó y se lavó repetidamente con DCM hasta que los extractos orgánicos fueron incoloros. La fase acuosa se evaporó a sequedad a presión reducida, se secó sobre sulfato sódico anhidro (Na2SO4) y se redujo parcialmente en volumen. Se añadió éter dietílico (Et2O) para separar el compuesto del título. óxido de 3-[(2R)4-tere-butoxi-2-(tere-butoxicarbonilamino)4-oxo-butil]-N,N-bis(2-cloroetil)-4-metil-bencenoamina (22a). El material puede purificarse por cromatografía en columna sobre gel de sílice.
Etapa B: Óxido de 3-[(2R)-2-ammo-4-hidroxi-4-oxo-butil]-W,W-bis(2-doroetil)-4-metil-bencenoamma (22) Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante B), se preparó óxido de 3-[(2R)-2-amino-4-hidroxi-4-oxo-butil]-N,N-bis(2-cloroetil)-4-metil-bencenoamina (22) a partir de óxido de 3-[(2R)-4-tere-butoxi-2-(terebutoxicarbonilamino)4-oxo-butil]-N,N-bis(2-cloroetil)-4-metil-bencenoamina (22a) (506 mg, 1,0 mmol) en 2 N HCl en éter dietílico (HCl 2 N en Et2O) (10 ml, 20 mmol) para producir el compuesto diana (22) en forma de una sal sólida de diclorhidrato (222HCl) después de la evaporación de los disolventes y la liofilización a partir de una solución acuosa. El material además, puede purificarse por HPLC preparativa seguido de liofilización. Opcionalmente, la liofilización se realiza en presencia de 1 equivalente o un exceso de ácido clorhídrico 1,0 M (HCl).
Ejemplo de referencia 23
Ácido (3R)-3-amino-4-[2-[bis(2-cloroetil)carbamoil)fenil]butanoico (23)
Figure imgf000078_0001
Etapa A: 2-[(2R)-4-ferc-Butoxi-2-(ferc-butoxicarbomlammo)-4-oxobutil]benzoato de metilo (23a) Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte A), se activó polvo de cinc (Zn) (392 mg, 6,0 mmol) con yodo elemental (I2) (38 mg, 0,15 mmol, 15 % mol) y cloruro de trimetilsililo (MeSiCl, TMSCl) (19 pl, 16 mg, 0,15 mmol, 15 % en moles) en N,N-dimetilformamida anhidra desgasificada (DMF) (3 ml). El producto de inserción de cinc se preparó a partir de (3S)-3-(tere-butoxicarbonilamino)-4-yodo-butanoato de tere-butilo (6c) (385 mg, 1,0 mmol) en presencia de I2 adicional (38 mg, 0,15 mmol, 15 % mol) y TMSCl (19 pl, 16 mg, 0,15 mmol, 15 % mol).
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 15 (Parte B), el producto de inserción de cinc se usó in situ para un acoplamiento cruzado con 2-yodobenzoato de metilo comercial (262 mg, 1,0 mmol) en presencia de tris(bencilidenoacetona)dipaladio (Pd2(dba)3) ( 23 mg, 0,025 mmol, 2,5 % mol) y tris(o-tolil)fosfina (P(o-tol)3) (30 mg, 0,10 mmol, 10 % mol) en DMF desgasificada anhidra (3 ml). La filtración, el tratamiento acuoso y la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice proporcionaron el compuesto del título (23a).
Etapa B: Ácido 2-[(2R)4-ferc-butoxi-2-(ferc-butoxicarbomlammo)-4-oxo-butil]benzoico (23b)
Adaptando un protocolo bibliográfico conocido (Dayal, et al., Steroids, 1990, 55(5), 233-237), una mezcla de reacción de 2-[(2R)-4-terc-butoxi-2-(terc-butoxicarbonilamino)-4-oxo-butil]benzoato de metilo (23a) (1,97 g, 5,0 mmol) y monohidrato de hidróxido de litio comercial (LO H H 2O) (420 mg, 10,0 mmol) en una mezcla de agua (10 ml) y metanol (MeOH) (3 ml) se agitó a temperatura ambiente. La reacción se controló mediante TLC y/o CL/EM hasta su finalización. El disolvente se retiró parcialmente a presión reducida usando un evaporador rotatorio. El tratamiento acuoso ácido y la purificación por cromatografía en columna de gel de sílice proporcionan el compuesto del título ácido -2-[(2R)-4-terc-butoxi-2-(terc-butoxicarbonilamino)-4-oxobutil]benzoico (23b) que puede usarse directamente en la siguiente etapa sin aislamiento ni purificación adicional.
Etapa C: (3R)-4-(2-(bis(2-Cloroetil)carbamoil)feml]-3-(ferc-butoxicarbomlammo)butanoato de íerc-butilo (23c)
Adaptando un protocolo bibliográfico conocido (Levi y Weed, Patente U.S. n.° 3.235.594), a una mezcla de reacción de ácido 2-[(2R)-4-terc-butoxi-2-(terc-butoxicarbonilamino)-4-oxobutil]benzoico (23b) (759 mg, 2,0 mmol), N-hidroxisuccinimida (NHS, HOSu) (235 mg, 2,2 mmol) en acetonitrilo anhidro (MeCN) (10 ml) se le añadió diciclohexilcarbodiimida sólida (DCC) (433 mg, 2,1 mmol) en pequeñas porciones a aproximadamente temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 12 horas y el producto secundario de diciclohexilurea precipitado se filtró usando un embudo Büchner. El filtrado se trató con di-(2-cloroetil)amina clorhidrato (2-cloro-N-(2-cloroetil)etanamina clorhidrato; HN(CH2-CH2-Cl)2-HCl) (393 mg, 2,2 mmol) seguido de trietilamina pura (Et3N, TEA) (321 pl, 233 mg, 2,3 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 12 horas a temperatura ambiente. La reacción fue seguida por TLC y/o CL/EM hasta su finalización. El tratamiento acuoso ácido y la purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice proporcionan el compuesto del título (3R)-4-[2-[bis(2-cloroetil)carbamoil]fenil]-3-(terc-butoxicarbonilamino)butanoato de terc-butilo (23c).
Etapa E: Ácido (3R)-3-amino-4-[2-[bis(2-cloroetil)carbamoil]fenil]butanoico (23)
Siguiendo el Procedimiento General de la Descripción 9 (Variante B), se preparó ácido (3R)-3-amino-4-[2-[bis(2-cloroetil)carbamoil]fenil]butanoico (23) a partir de (3R)-4-[2-[bis(2-cloroetil)carbamoil]fenil]-3-(tercbutoxicarbonilamino)butanoato de terc-butilo (23c) (504 mg, 1,0 mmol) en HCl 2 N en éter dietílico (HCl 2 N en Et2O) (10 ml, 20 mmol) para producir el compuesto diana (23) en forma de una sal sólida de diclorhidrato después de la evaporación de los disolventes y la liofilización a partir de una solución acuosa. El material además, puede purificarse por HPLC preparativa seguido de liofilización. Opcionalmente, la liofilización se realiza en presencia de 1 equivalente o un exceso de ácido clorhídrico 1,0 M (HCl).
Ejemplo 24
Ensayos de inhibición de la absorción de LAT1
La capacidad de los compuestos para interactuar con LAT1 se midió usando un ensayo de absorción competitiva radiomarcado con [3H]-Gabapentina (GP) en placas de 96 pocillos con células LLCPK que expresan condicionalmente hLAT1. 5 x 104 células/pocillo se sembraron en placa en placas blancas, de fondo transparente en presencia o ausencia de tetraciclina o doxciclina para inducir la expresión de hLAT1. El día siguiente, las células se trataron con butirato para estimular la expresión adicional de hLAT1. El tercer día, las células se lavaron y después se incubaron con 50.000 cpm de [3H]-GP en PBS en presencia o ausencia de 1 mM de compuesto de prueba al menos por triplicado durante 15 min. Al final del tiempo de ensayo, se retiró la solución de incubación y las placas se lavaron tres veces con 100 pl de PBS enfriado con hielo. Se añadieron 150 pl de líquido de centelleo a cada pocillo y se midió la radiactividad retenida dentro de las células en un contador de centelleo de 96 pocillos. Los datos se expresan como un porcentaje de captación específica de [3H]-GP. Se usaron GP sin marcar y otros aminoácidos grandes (fenilalanina y leucina) como controles.
La capacidad de diversos compuestos para interactuar con LAT1 se evaluó midiendo la inhibición de la captación de [3H]-GP en células que expresan LAT1 en presencia de compuesto de prueba 1 mM. Se usaron GP sin marcar y fenilalanina (Phe) y leucina (Leu) como controles. Después de la incubación durante 15 minutos, las células se lavaron, se añadió líquido de centelleo y se determinó la radiactividad unida a las células en un contador de centelleo. Los datos se expresan como un porcentaje de captación específica de GP.
La captación específica de gabapentina marcada radiactivamente en células que expresan LAT1 se inhibió por 1 mM de gabapentina no marcada, fenilalanina, leucina y los compuestos de los Ejemplos de Referencia 1, 2 y 4 y el Ejemplo 3. El tratamiento con gabapentina, fenilalanina, leucina y el compuesto del Ejemplo 3 dieron como resultado una absorción específica de menos del 10%. Los compuestos de los Ejemplos de Referencia 1, 2 y 4 dieron como resultado una captación específica superior al 20 % pero inferior al 50 % a esta concentración. La absorción específica de gabapentina radiomarcada en ausencia de cualquier compuesto fue del 100 %.
Ejemplo 25
Ensayos de citotoxicidad in vitro específicos de LATI
La citotoxicidad in vitro específica de LATI de los compuestos se evaluó usando un ensayo clonigénico modificado en placas de 96 pocillos con células LLCPK que expresan condicionalmente HLAT1. 1000 células/pocillo se sembraron en placa en placas de fondo transparente en presencia o ausencia de tetraciclina o doxciclina para inducir la expresión de hLAT1. El día siguiente, las células se trataron con butirato para estimular la expresión adicional de hLAT1. El tercer día, las células se lavaron y se incubaron con diversas concentraciones de compuestos de prueba en tampón PBS al menos por cuadriplicado durante 30 minutos. Al final del tratamiento, los compuestos de prueba se retiraron y se añadió medio de crecimiento a las células. Se permitió que las poblaciones clonales crecieran hasta que los pocillos de control (tratamiento simulado) estuvieron cerca de la confluencia (7 a 10 días). El crecimiento celular se cuantificó fijando y coloreando las células después del lavado con violeta cristal en glutaraldehído, retirando por lavado el tinte no adherido, solubilizando las células teñidas en ácido acético y monitorizando la absorbancia a 530 nm. Los datos de cada concentración de prueba se expresaron como el porcentaje de controles con tratamiento simulado vivos (% de células supervivientes). La especificidad de LAT1 se determinó por la toxicidad diferencial en células inducidas (LAT1+) frente a no inducidas (sin LAT1) para expresar hLAT1. Melfalán, un compuesto de A/-mostaza, se usó como un control.
La citotoxicidad específica de LAT1 de diversos compuestos se evaluó tratando células que expresan o no expresan LATI con 3 |jM de compuesto de prueba durante 30 min. Se usó melfalán como un compuesto de control. Después del tratamiento, se lavaron las células y se añadió medio de crecimiento. Se permitió que las células supervivientes proliferaran durante 7-10 días, y después se tiñeron y se cuantificaron. Los resultados se expresaron como el porcentaje de células no tratadas (% de células supervivientes).
El porcentaje de células supervivientes para el melfalán y el compuesto del Ejemplo de Referencia 2 fue aproximadamente el mismo en las células que expresan LATI y en las células que no expresan LATI. El porcentaje de células supervivientes para los compuestos de los Ejemplos de Referencia 1 y 4 y el Ejemplo 3 se redujo significativamente en al menos un 25 % en las células que expresan LATI en comparación con las células que no expresan LATI.
Se evaluó la citotoxicidad in vitro de los dos enantiómeros de QBS 10072 tratando células que expresan LATI con diversas concentraciones del isómero S (círculos sólidos) o R (círculos abiertos) durante 30 min. Después del tratamiento, se lavaron las células y se añadió medio de crecimiento. Se permitió que las células supervivientes proliferaran durante 7-10 días, y después se tiñeron y se cuantificaron. Los resultados se expresaron como el porcentaje de células no tratadas (% de células supervivientes) y se representaron gráficamente frente a la concentración de prueba.
Se evaluó la citotoxicidad in vitro de los enantiómeros únicos del Ejemplo 3 tratando células que expresan LAT1 con diversas concentraciones del isómero S (círculos sólidos) o R (círculos abiertos) durante 30 min. Después del tratamiento, se lavaron las células y se añadió medio de crecimiento. Se permitió que las células supervivientes proliferaran durante 7-10 días, y después se tiñeron y se cuantificaron. Los resultados se expresaron como el porcentaje de células no tratadas (% de células supervivientes) y se representaron gráficamente frente a la concentración de prueba.
Ejemplo 26
Ensayos de supresión del crecimiento tumoral in vivo
La capacidad de suprimir el crecimiento de tumores in vivo se midió usando un modelo de efectividad B16 (Kato, et al., Cancer Res., 1994, 54, 5143-5147). Brevemente, el flanco trasero de los ratones C57BL/6 se inyectaron con 5 * 105 células de melanoma B16 por vía subcutánea. Una vez que los tumores alcanzaron los 40 mm3, los animales se separaron en varios brazos de tratamiento (n = 5) y se dosificaron diariamente por vía intraperitoneal con vehículo o compuesto de prueba (5 y 10 mg/kg) durante 12 días. Los tamaños de los tumores se controlaron cada tres días durante hasta tres semanas. Se usó melfalán como un compuesto control (2,5 mg/kg). Los resultados se presentan en la Tabla 1.
T l 1: r i n m r l r m B in viv
Figure imgf000080_0001

Claims (7)

REIVINDICACIONES
1. El compuesto ácido 3-amino-4-[5-[bis(2-doroetil)amino]-2-metilfenil]butanoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:
Figure imgf000081_0001
2. El compuesto ácido (3S)-3-amino-4-[5-[bis(2-cloroetil)amino]-2-metilfenil]butanoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:
Figure imgf000081_0002
3. Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de acuerdo con cualquier reivindicación anterior o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable del mismo.
4. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2 para su uso en el tratamiento del cáncer, en donde el cáncer expresa el transportador LAT1/4F2hc.
5. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 3 para su uso en el tratamiento del cáncer, en donde el cáncer expresa el transportador LAT1/4F2hc.
6. Un compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 4, en donde el cáncer se selecciona de cáncer de próstata, glioblastoma, cáncer de mama triple negativo y mieloma múltiple.
7. Una composición farmacéutica para su uso de acuerdo con la reivindicación 5, en donde el cáncer se selecciona de cáncer de próstata, glioblastoma, cáncer de mama triple negativo y mieloma múltiple.
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