ES2888425T3 - Métodos y composiciones relacionados con el antagonismo del receptor de glucocorticoides y con el cáncer de próstata - Google Patents

Abstract

Una combinación de un antagonista del receptor de glucocorticoides (RG) y un antagonista del receptor de andrógenos (RA) o una terapia de privación de andrógenos, para su uso en un método de tratamiento de un cáncer de próstata resistente a la castración en un sujeto, en donde dicho antagonista del RA se selecciona entre MDV3100, ARN-509, flutamida, bicalutamida, nilutamida y acetato de ciproterona.

Description

DESCRIPCIÓN

Métodos y composiciones relacionados con el antagonismo del receptor de glucocorticoides y con el cáncer de próstata

Antecedentes de la invención

Esta solicitud reivindica el beneficio de prioridad de la solicitud provisional de Estados Unidos N.° de serie 61/603.137, presentada el 24 de febrero de 2012.

Esta invención se realizó con soporte del gobierno otorgado por el National Institutes of Health. El gobierno posee determinados derechos sobre la invención.

I. Campo de la invención

Las realizaciones de esta invención están dirigidas generalmente a la biología y a la medicina. En determinados aspectos, se proporcionan métodos y composiciones para tratar a un paciente con cáncer de próstata con un antagonista del receptor de glucocorticoides (RG). De manera más específica, los métodos comprenden tratar a un sujeto con cáncer de próstata resistente a la castración con un antagonista del RG, en particular en un sujeto que ha recibido previamente y demostrado progresión del cáncer de próstata a pesar de la terapia de privación de andrógenos.

II. Antecedentes

Los cánceres de próstata localizados son tratados con intención curativa mediante cirugía o radiación, sin embargo, hasta un 40 % de los pacientes desarrollarán enfermedad recurrente con el tiempo, y sigue siendo la segunda causa principal de muerte relacionada con cáncer en hombres (Jemal et al., 2010; Ward y Moul, 2005). Existen factores predictivos establecidos de recurrencia o progresión del cáncer de próstata y nomogramas de pronóstico ampliamente utilizados, que en gran parte utilizan criterios patológicos comunes (Han et al., 2003; Pound et al., 1999; Makarov et al., 2007; Stephenson et al., 2006). Asimismo, existen múltiples biomarcadores en desarrollo para ayudar a perfeccionar aún más el pronóstico del cáncer de próstata (Fradet, 2009; Fiorentino et al., 2010). No obstante, los factores biológicos que modulan la biología y la progresión del cáncer de próstata a pesar de la terapia antiandrógenos siguen siendo un área importante de investigación.

La mayoría de los cánceres de próstata dependen del receptor de andrógenos (RA) para la supervivencia y la proliferación celular, y la vía sigue siendo importante en la progresión del cáncer de próstata incluso en pacientes cuya enfermedad avanza a pesar de la terapia de privación de andrógenos (Zegarra-Moro et al., 2002; Scher y Sawyers, 2005). Recientemente, se ha descubierto que la quinasa 1 regulada por suero/glucocorticoides (SGK1) está regulada al alza por la activación del RA en líneas celulares de cáncer de próstata, lo que resulta en una mayor supervivencia de las células de cáncer de próstata in vitro (Shanmugam et al., 2007; Zou et al., 2009; Bolton et al., 2007). La SGK1 es una proteína quinasa de serina/treonina con un 54 % de homología en su dominio catalítico con Akt y está implicada en multitud de funciones metabólicas y de supervivencia celular (Tessier y Woodgett, Jr., 2006). La SGK1 es inducida transcripcionalmente y su producto proteico desempeña un papel importante en las respuestas celulares a factores de estrés tales como oxidación, calor y radiación ultravioleta (Tessier y Woodgett, 2006). Se ha demostrado que la SGK1 está sobreexpresada en una proporción de cánceres de mama humanos (Sahoo et al., 2005) y que es importante en la protección contra la apoptosis inducida por estrés en líneas celulares de cáncer de mama (Mikosz et al., 2001; Wu et al., 2004). De forma similar, las líneas celulares de cáncer de próstata sensibles a andrógenos que expresan ectópicamente SGK1 demuestran una mayor supervivencia tras la privación de andrógenos en comparación con las que no sobreexpresan la SGK1 (Shanmugam et al., 2007). Adicionalmente, los estudios in vitro que utilizan ARN de interferencia pequeños dirigidos a SGK1 o inhibidores farmacológicos de moléculas pequeñas de SGK1 demuestran que la inhibición de la actividad de la SGK1 conduce a una disminución del crecimiento celular del cáncer de próstata mediado por andrógenos (Shanmugam et al., 2007; Sherk et al., 2008). Los inventores demostraron que la expresión de SGK1 es elevada en cánceres de próstata primarios y que se reduce tras la terapia antiandrógenos (Szmulewitz et al., 2010). Hasta donde saben los inventores, solo ha habido otro estudio en el que se examinó la expresión de la SGK1 en tumores de próstata humanos primarios; de forma algo sorprendente, la expresión de la SGK1 disminuyó significativamente en los cánceres de próstata en comparación con la hipertrofia prostática (Rauhala et al., 2005). Además del RA, la SGK1 es también una diana directa de la activación del receptor de glucocorticoides (RG) en las células epiteliales. Curiosamente, regímenes de quimioterapia convencionales para el cáncer de próstata resistente a la castración incluyen glucocorticoides tales como prednisona, un agonista del RG (Tannock et al., 2004; Petrylak et al., 2006). Aunque una proporción de pacientes muestran respuestas mediante una reducción del marcador tumoral AEP y obtienen beneficios paliativos del tratamiento con glucocorticoides, no se dispone de datos de fase III que demuestren que los glucocorticoides proporcionen un beneficio de supervivencia (Fakih et al., 2002). Por lo tanto, no está claro cómo funcionan los glucocorticoides en el cáncer de próstata metastásico. Hasta la fecha, hay unos pocos informes que examinen la expresión del RG en el cáncer de próstata humano (Yemelyanov et al., 2007; Mohler et al., 1996) y no hay información alguna acerca del estado del RG en el cáncer de próstata de pacientes privados de andrógenos. Scher et al., The Lancet, 2010, vol. 375, n.° 9724, págs. 1437-1446 divulgan la utilidad de los antagonistas del RA MDV3100 y bicalutamida en el tratamiento del cáncer de próstata resistente a la castración.

Sumario de la invención

La presente invención se refiere a una combinación de un antagonista del receptor de glucocorticoides (RG) y un antagonista del receptor de andrógenos (RA) o una terapia de privación de andrógenos, para su uso en un método de tratamiento de un cáncer de próstata resistente a la castración en un sujeto, en donde dicho antagonista del RA se selecciona entre MDV3100, ARN-509, flutamida, bicalutamida, nilutamida y acetato de ciproterona.

La presente invención se refiere adicionalmente a un antagonista del RG para su uso en un método de tratamiento del cáncer de próstata resistente a la castración en un sujeto, comprendiendo el método administrar el antagonista del RG a dicho sujeto en combinación con un antagonista del RA o una terapia de privación de andrógenos, en donde dicho antagonista del RA se selecciona entre MDV3100, ARN-509, flutamida, bicalutamida, nilutamida y acetato de ciproterona.

Por otra parte, la presente invención se refiere a un antagonista del RA o a una terapia de privación de andrógenos para su uso en un método de tratamiento del cáncer de próstata resistente a la castración en un sujeto, comprendiendo el método administrar el antagonista del RA o una terapia de privación de andrógenos en combinación con un antagonista del RG a dicho sujeto, en donde dicho antagonista del RA se selecciona entre MDV3100, ARN-509, flutamida, bicalutamida, nilutamida y acetato de ciproterona.

Algunos aspectos incluyen generar un perfil de expresión para el receptor de glucocorticoides (RG), lo que significa obtener el nivel de expresión de RA o RG directa o indirectamente midiendo o evaluando la actividad o expresión. Los métodos incluyen medir o evaluar directamente el nivel de expresión o actividad que se refiere a medir o evaluar una muestra para determinar el nivel de expresión de RA o RG (proteína o transcripto) en la célula. La obtención indirecta del nivel de expresión incluye la medición o evaluación de la expresión o actividad de un gen o proteína que se correlaciona con la expresión o actividad del RA o RG. En algunos aspectos, el nivel de expresión de RA o RG puede obtenerse indirectamente midiendo o evaluando la expresión de un gen sensible al RA o al RG, que se refiere a un gen cuya expresión se ve afectada de manera dependiente de la dosis por la expresión o actividad del RA o RG. La expresión se refiere a la expresión de proteínas o a la expresión de ARN (transcripto). Los métodos pueden implicar cualquier tipo de expresión y los expertos en la materia conocen bien una variedad de ensayos. Por ejemplo, se puede realizar una PCR cuantitativa para obtener los niveles de expresión de ARN. El chip de Affymetrix utilizado en los Ejemplos también proporciona información en lo que respecta a los niveles de expresión de ARN. Como alternativa, pueden emplearse en los aspectos reactivos para detectar los niveles de expresión de proteínas. Los métodos pueden incluir sondas, cebadores y/o anticuerpos que son específicos para RG o RA con el fin de evaluar los niveles de expresión.

En algunos aspectos, el nivel de actividad del RG se mide evaluando el nivel de expresión del RG. En aspectos adicionales, la expresión del RG es la expresión del transcrito del RG. En otros aspectos, la expresión del RG es la expresión de la proteína del RG. Como se ha analiza anteriormente, en algunos aspectos, el nivel de actividad del RG se mide evaluando el nivel de expresión de uno o más genes sensibles al RG. Un gen sensible al RG puede ser uno o más de los siguientes: MCL1, SAP30, DUSP1, SGK1, SMARCA2, PTGDS, TNFRSF9, SFN, LAPTM5, GPSM2, SORT1, DPT, NRP1, ACSL5, BIRC3, NNMT, IGFBP6, PLXNC1, SLC46A3, C14orf139, PIAS1, IDH2, SERPINF1, ERBB2, PECAM1, LBH, ST3GAL5, IL1R1, BlN1, WIPF1, TFPI, FN1, FAM134A, NRIP1, RAC2, SPP1, PHF15, BTN3A2, SESN1, MAP3K5, DPYSL2, SEMA4D, STOM, o MAOA.

En algunos aspectos, existe una etapa de evaluar o medir el nivel de actividad del receptor de glucocorticoides (RG) en una muestra biológica del paciente que contiene células de cáncer de próstata. Como se ha analiza anteriormente, el nivel de actividad del RG puede obtenerse directa o indirectamente. Se contempla específicamente que los niveles de actividad o expresión de glucocorticoides se refieren a la actividad o expresión de los genes o proteínas RGa, RGp, o ambos. A menos que se indique específicamente lo contrario, los términos "receptor de glucocorticoides" o "RG" se refieren a ambas formas. Los aspectos analizados con respecto al receptor de glucocorticoides o RG también pueden implementarse únicamente con RGa o únicamente con RGp.

Los métodos también pueden incluir la obtención de un nivel de expresión del receptor de andrógenos (RA) en las células de cáncer de próstata del paciente. El nivel puede obtenerse mediante la obtención de los resultados de un ensayo que midió el nivel de expresión del RA. En algunos aspectos, el nivel se obtiene midiendo o evaluando el nivel de expresión del RA.

En un aspecto de la divulgación, se proporciona un método para tratar el cáncer de próstata resistente a la castración en un sujeto que comprende administrar a dicho sujeto un antagonista del receptor de glucocorticoides (RG). El sujeto puede presentar cáncer de próstata con privación de andrógenos, y/o puede haber sido tratado previamente o estar siendo tratado actualmente con terapia de privación de andrógenos, tal como con leuprolida goserelina, triptorelina, histrelina, degerelix o castración quirúrgica. El sujeto puede haber sido previamente o estar siendo tratado con un antagonista del receptor de andrógenos (RA), tal como MDV3100, ARN-509, flutamida, bicalutamida, nilutamida, o acetato de ciproterona. El sujeto puede presentar un cáncer de próstata con una elevada expresión de RG. El antagonista del RG puede ser beclometasona, betametasona, budesonida, ciclesonida, flunisolida, fluticasona, GSK650394, mifepristona, mometasona o triamcinoclona. En aspectos adicionales puede ser CORT 0113083 o CORT 00112716.

El sujeto puede ser tratado con una segunda terapia contra el cáncer de próstata, tal como la terapia de privación de andrógenos, incluyendo leuprolida goserelina, triptorelina, histrelina o castración quirúrgica. La segunda terapia contra el cáncer de próstata puede ser un inhibidor de la síntesis de andrógenos, tal como ketoconazol, abiraterona, TAK-700 y TOK001. La segunda terapia contra el cáncer de próstata puede ser quimioterapia, radioterapia, crioterapia, inmunoterapia o cirugía convencional. La segunda terapia contra el cáncer de próstata puede administrarse antes de dicho antagonista del RG, después de dicho antagonista del RG o al mismo tiempo que dicho antagonista del RG. El antagonista del RG puede administrarse sistémica, regional o localmente en el sitio del tumor, o puede administrarse por vía oral, intravenosa, intraarterial, en la vasculatura del tumor o vía intratumoral. El antagonista del RG se administra más de una vez, tal como 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9,10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25 o más veces.

El método puede comprender además evaluar la expresión del RG en un tejido de cáncer de próstata de dicho sujeto. El método puede comprender además evaluar la expresión del receptor de andrógenos en un tejido de cáncer de próstata de dicho sujeto. El cáncer de próstata puede ser metastásico o recurrente. El sujeto puede haber sido tratado previamente tanto con terapia de privación de andrógenos como con un antagonista del receptor de andrógenos.

En otro aspecto, se proporciona un método para inhibir la progresión del cáncer de próstata resistente a la castración en un sujeto que comprende administrar a dicho sujeto un antagonista del receptor de glucocorticoides (RG). Un aspecto adicional comprende un método para prevenir el desarrollo del cáncer de próstata resistente a la castración en un sujeto que comprende administrar a dicho sujeto un antagonista del receptor de glucocorticoides (RG). Otro aspecto más comprende un método para inhibir la actividad del receptor de glucocorticoides en los tejidos del cáncer de próstata en un sujeto que comprende administrar a dicho sujeto un antagonista del RG. Un aspecto adicional comprende un método para tratar el cáncer de próstata resistente a la castración en un sujeto que comprende administrar a dicho sujeto un antagonista del receptor de glucocorticoides (RG) y un esteroide.

Otro aspecto comprende un método para tratar el cáncer de próstata en un sujeto que comprende coadministrar a dicho sujeto un antagonista del receptor de andrógenos (RA) y un antagonista del receptor de glucocorticoides (RG). Además, un aspecto puede comprender un método para tratar el cáncer de próstata en un sujeto cuyo tumor se ha vuelto resistente a la terapia anti-RA que comprende añadir un antagonista del receptor de glucocorticoides (RG) a su terapia. Un aspecto adicional más comprende un método para tratar el cáncer de próstata en un sujeto cuyo tumor se ha vuelto resistente a la terapia anti-RA que comprende coadministrar a dicho sujeto un antagonista del receptor de glucocorticoides (RG) y una quimioterapia citotóxica. Un aspecto adicional implica un método para tratar el cáncer de próstata en un sujeto que comprende coadministrar a dicho sujeto un antagonista del receptor de glucocorticoides (RG) y un fármaco que disminuye los niveles circulantes de testosterona. Otro aspecto comprende un método para tratar el cáncer de próstata en un sujeto que comprende alternar administraciones a dicho sujeto de un antagonista del receptor de andrógenos (RA) y un antagonista del receptor de glucocorticoides (RG).

Los aspectos también pueden incluir cuándo el paciente es tratado con más de un tipo de terapia contra el cáncer. Esto puede ser después de que se determine que el paciente tiene un pronóstico particular o después de que se conozca el estado del perfil de expresión de RG y RA del paciente. En algunos aspectos, un paciente es tratado con al menos dos de los siguientes: radiación, quimioterapia o un producto biológico. En aspectos particulares, el paciente puede ser tratado con un antiandrógeno, inhibidor de la quinasa y/o agente antiangiogénico.

En otro aspecto, el método puede comprender la alternancia del antagonismo del RA y del antagonismo del RG. Por lo tanto, los métodos pueden abordar el cambio del tumor hacia adelante y hacia atrás entre los mecanismos de señalización que superan el bloqueo del receptor. Por ejemplo, los métodos pueden incluir una terapia con antagonistas del RA seguida de una terapia con antagonistas del RG, seguida de una terapia con antagonistas del RA, seguida de una terapia con antagonistas del RG, y así sucesivamente.

Cualquier método puede incluir también el tratamiento del paciente con cáncer de próstata, que puede incluir administrar directamente o proporcionar una terapia contra el cáncer. En algunos aspectos, un médico o doctor puede prescribir una terapia contra el cáncer que el paciente se administra a sí mismo.

Para lograr estos métodos, un doctor, un médico, o su personal puede recuperar una muestra biológica de un paciente para la evaluación. La muestra puede ser una biopsia, tal como una biopsia de tejido o de un tumor de próstata. La muestra puede ser analizada por el médico o su personal, o puede ser enviada a un laboratorio externo o independiente. El médico puede ser consciente acerca de si la prueba proporciona información concerniente al nivel de expresión o actividad del RG y/o RA del paciente, o el médico puede que tenga conocimiento únicamente de que la prueba indica directa o indirectamente que la misma refleja que el paciente tiene un pronóstico particular o que se le puede dar una puntuación de pronóstico particular. Asimismo, el médico puede conocer el estado del RA o RG del paciente, tal como RA+ o RA-, o RG+ o RG-. Como alternativa, él o ella puede ser consciente solo de que la prueba o ensayo indica que el paciente tiene un pronóstico desfavorable, o el peor pronóstico.

Otros aspectos incluyen un medio legible por ordenador que tiene módulos de software para realizar un método que comprende los actos de: (a) comparar los datos del receptor de glucocorticoides obtenidos de una muestra de cáncer de próstata de un paciente con una referencia; y (b) proporcionar una evaluación del estado del receptor de glucocorticoides a un médico para su uso en la determinación de un régimen terapéutico apropiado para un paciente.

En aspectos adicionales, el medio legible por ordenador comprende además un módulo de software para evaluar el estado del receptor de estrógenos de la muestra de cáncer de próstata del paciente.

También se incluyen sistemas informáticos. En algunos aspectos, tienen un procesador, memoria, almacenamiento de datos externo, mecanismos de entrada/salida, una pantalla, para evaluar la actividad del receptor de glucocorticoides, que comprende: (a) una base de datos; (b) mecanismos lógicos en el ordenador que generan para la base de datos una referencia de expresión génica sensible al RG; y (c) un mecanismo de comparación en el ordenador para comparar la referencia de expresión génica sensible al r G con los datos de expresión de una muestra del paciente utilizando un modelo de comparación para determinar un perfil de expresión génica del RG de la muestra.

Otros aspectos incluyen un portal accesible a Internet para proporcionar información biológica construida y dispuesta para ejecutar un método implementado por ordenador para proporcionar: (a) una comparación de datos de expresión génica de uno o más genes sensibles al RG en una muestra de paciente con un índice indicador calculado; y (b) proporcionar una evaluación de la actividad o expresión del RG a un médico para su uso en la determinación de un régimen terapéutico apropiado para un paciente.

Además de compilar, recopilar y/o procesar datos relacionados con el estado del RG, métodos, medios y sistemas también pueden incluir los mismos aspectos con respecto a los datos relacionados con el estado del RA. Tales aspectos pueden ser en lugar de o además de los aspectos relacionados con el estado o datos del RG.

Los aspectos también incluyen métodos para destruir las células de cáncer de próstata que comprenden administrar a un paciente con cáncer de próstata una cantidad eficaz de una combinación de compuestos anticancerosos, en donde los compuestos anticancerosos comprenden un antagonista del receptor de glucocorticoides y un quimioterápico. En otros aspectos, existen métodos para tratar el cáncer de próstata en un paciente que comprenden administrar al paciente una cantidad eficaz de antagonista del receptor de glucocorticoides y un quimioterapéutico. En aspectos adicionales, se proporcionan métodos para tratar células de cáncer de próstata insensibles a la quimioterapia que comprenden administrar a un paciente con cáncer de próstata una cantidad eficaz de un antagonista del receptor de glucocorticoides seguido de quimioterapia.

Otros métodos incluyen métodos para tratar el cáncer de próstata en un paciente que comprenden: a) administrar radiación o al menos un primer quimioterapéutico al paciente; b) administrar posteriormente una cantidad eficaz de un antagonista del receptor de glucocorticoides al paciente; y, c) administrar de nuevo radiación o al menos un segundo quimioterapéutico al paciente después de administrar el antagonista del receptor de glucocorticoides al paciente.

En algunos aspectos, existen métodos para tratar el cáncer de próstata en un paciente que comprenden: a) administrar una cantidad eficaz de un antagonista del receptor de glucocorticoides al paciente, en donde el paciente expresa niveles detectables del RG antes de la administración del antagonista del RG; b) administrar a continuación una cantidad eficaz de radiación o al menos un quimioterapéutico.

Se contempla que en los métodos descritos en el presente documento, las células de cáncer de próstata pueden sufrir apoptosis tras el tratamiento expuesto en el presente documento. Por otra parte, en algunos aspectos, la combinación de un antagonista del receptor de glucocorticoides y un agente o compuesto anticanceroso induce más apoptosis que el tratamiento con solo el tratamiento anticanceroso.

Los antagonistas del receptor de glucocorticoides son conocidos por los expertos en la materia. Se refiere a un compuesto o sustancia que no provoca una respuesta biológica en sí misma al unirse al receptor de glucocorticoides, pero bloquea o amortigua las respuestas mediadas por agonistas. Los ejemplos incluyen, aunque sin limitación, beclometasona, betametasona, budesonida, ciclesonida, flunisolida, fluticasona, mifepristona, mometasona y triamcinolona. En aspectos adicionales puede ser CORT 0113083 o CORT 00112716. En aspectos adicionales, el antagonista del receptor de glucocorticoides tiene un nivel indetectable o un nivel inferior de actividad como antagonista del receptor de progesterona. En determinados aspectos, el antagonista del receptor de glucocorticoides tiene una actividad de unión superior a 10 veces, 50 veces, 100 veces, 200 veces, 300 veces, 400 veces, 500 veces, 1000 veces menor (o cualquier intervalo derivable de ello) para otro receptor hormonal en comparación con su actividad de unión para el receptor de glucocorticoides. En aspectos específicos, el receptor hormonal es el receptor de estrógenos o el receptor de progesterona.

En algunos aspectos, un paciente había sido tratado previamente con una terapia anticancerosa, tal como radiación, quimioterapia o inmunoterapia (o una combinación o múltiples terapias de las mismas). En determinados aspectos, una primera terapia anticancerosa anterior a la terapia con el antagonista del receptor de glucocorticoides fue administrada por última vez más de dos semanas antes del antagonista del receptor de glucocorticoides o su combinación con una segunda terapia anticancerosa. En determinados aspectos, esta primera terapia anticancerosa que no incluye un antagonista del receptor de glucocorticoides se administró por última vez al paciente con cáncer de próstata al menos 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 días, y/o 1, 2, 3, 4, o 5 semanas, y/o 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, o 12 meses antes del tratamiento con un antagonista del receptor de glucocorticoides. Los métodos de tratamiento pueden aplicarse al cáncer de próstata o a las células de cáncer de próstata que son quimiorresistentes o a las células de cáncer de próstata que no son quimiosensibles. Por otra parte, el tratamiento puede aplicarse al cáncer de próstata o a las células de cáncer de próstata a las que se les administró previamente un primer agente inductor de la apoptosis, pero que eran resistentes a la apoptosis.

Los métodos implican tratar el cáncer de próstata, particularmente un cáncer de próstata resistente a los antagonistas del RA, con una combinación de terapias que incluye un antagonista del receptor de glucocorticoides y una terapia anticancerosa que induce la apoptosis (en conjunto pueden ser referidos como una combinación de agentes o compuestos anticancerosos), tales como un quimioterapéutica o un antagonista del receptor de andrógenos (RA) tal como MDV-3100. En algunos aspectos, el quimioterapéutico es capecitabina, carboplatino, ciclofosfamida (Cytoxan), daunorrubicina, docetaxel (Taxotere), doxorrubicina (Adriamycin), epirrubicina (Ellence), fluorouracilo (también denominado 5-fluorouracilo o 5-FU), gemcitabina, eribulina, ixabepilona, metotrexato, mitomicina C, mitoxantrona, paclitaxel (Taxol), tiotepa, vincristina, o vinorelbina, o una combinación de estos agentes. En otros aspectos, la terapia con un antagonista del receptor de glucocorticoides se combina con MDV-3100, abiraterona, radiación, agente(s) quimioterapéutico(s) y radiación, una combinación de agentes quimioterapéuticos, o una combinación de uno o más agentes quimioterapéuticos y un fármaco antiandrógeno o receptor antiandrógenos.

Se contempla que en algunos aspectos de la terapia de combinación, el antagonista del receptor de glucocorticoides se administra en un plazo de 5, 10, 30, 45, 60 minutos, y/o 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 horas, y/o 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 días, o cualquier combinación de los mismos dentro de la administración de al menos uno o la combinación de los agentes o compuestos anticancerosos. En aspectos específicos, el antagonista del receptor de glucocorticoides se administra en un plazo de 2 horas, 12 horas o 24 horas de la administración de un agente o compuesto anticanceroso (o una combinación de tales agentes o compuestos).

En un aspecto adicional, los antagonistas del receptor de glucocorticoides (RG) pueden combinarse con antiquinasas tales como los inhibidores de la diana de rapamicina de los mamíferos (mTOR). Los ejemplos no limitantes de inhibidores de mTOR incluyen rapamicina, galato de epigalocatequina (EGCG), cafeína curcumina, resveratrol, temsirolimus, everolimus y ridaforolimus, y derivados y análogos de los mismos. Esta combinación puede utilizarse en composiciones y métodos divulgados a lo largo de la memoria descriptiva.

Se contempla específicamente que el tratamiento puede continuar o repetirse. En algunos aspectos, una vez tratado con la combinación de un antagonista del receptor de glucocorticoides y al menos un agente o compuesto anticanceroso, la totalidad o parte del tratamiento puede repetirse solo o en combinación con un agente o compuesto anticanceroso diferente.

En determinados aspectos, el antagonista del receptor de glucocorticoides se administra antes que el otro agente o terapia incluido en la terapia de combinación. En determinados aspectos, el antagonista del receptor de glucocorticoides se administra en un plazo de 5, 10, 30, 45, 60 minutos, y/o 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 horas, y/o 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 días, o cualquier combinación de los mismos antes de la administración de al menos uno o la combinación de los agentes o compuestos anticancerosos. Se contempla específicamente que, en algunos aspectos, el antagonista del receptor de glucocorticoides se suministra antes de la administración del agente o compuesto anticanceroso, pero que el antagonista del receptor de glucocorticoides también se suministra simultáneamente o después de la administración de la dosis inicial o posterior del agente o compuesto anticanceroso. Como se ha analizado a lo largo de todo el documento, el agente o compuesto anticanceroso puede estar en una combinación de dichos agentes o compuestos. En determinados aspectos, el antagonista del receptor de glucocorticoides se administra hasta tres días antes de la administración del agente o compuesto anticanceroso.

De manera adicional o alternativa, el antagonista del receptor de glucocorticoides se administra después de la administración del otro agente o terapia incluido en la terapia de combinación. En determinados aspectos, el antagonista del receptor de glucocorticoides se administra en un plazo de 5, 10, 30, 45, 60 minutos, y/o 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 horas, y/o 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 días, o cualquier combinación de los mismos después de la administración de al menos uno o la combinación de los agentes o compuestos anticancerosos. Se contempla específicamente que, en algunos aspectos, el antagonista del receptor de glucocorticoides se administra después de la administración del agente o compuesto anticanceroso; dicha administración puede repetirse. Como se ha analizado a lo largo de todo el documento, el agente o compuesto anticanceroso puede estar en una combinación de dichos agentes o compuestos. En determinados aspectos, el antagonista del receptor de glucocorticoides se administra hasta tres días después de la administración del agente o compuesto anticanceroso.

Se contempla que las composiciones incluyan un antagonista del receptores de glucocorticoides y cualquier otro compuesto anticanceroso que se analiza en el presente documento. En algunos aspectos, la composición se encuentra en una formulación farmacéuticamente aceptable.

El uso de una o más composiciones puede emplearse basándose en los métodos descritos en el presente documento. Otros aspectos se analizan a lo largo de esta solicitud. Cualquier realización analizada con respecto a un aspecto de la invención se aplica también a otros aspectos de la invención y viceversa. Las realizaciones en la sección de Ejemplos se entienden como realizaciones que son aplicables a todos los aspectos de la tecnología descrita en el presente documento.

"Pronóstico de cáncer" se refiere generalmente a una anticipación o predicción del curso probable o del resultado del cáncer. Como se utiliza en el presente documento, el pronóstico de cáncer incluye la anticipación o predicción de uno cualquiera o más de los siguientes: duración de la supervivencia de un paciente susceptible de padecer un cáncer o ser diagnosticado con el mismo, duración de la supervivencia libre de recurrencia, duración de la supervivencia libre de progresión de un paciente susceptible de padecer un cáncer o ser diagnosticado con el mismo, tasa de respuesta en un grupo de pacientes susceptibles de padecer un cáncer o ser diagnosticados con el mismo, y/o duración de la respuesta en un paciente o grupo de pacientes susceptibles de padecer un cáncer o ser diagnosticados con el mismo.

En determinados aspectos, el pronóstico es una estimación de la probabilidad de supervivencia libre de metástasis de dicho paciente durante un periodo de tiempo predeterminado, p. ej., durante un periodo de 5 años.

En aspectos adicionales, el pronóstico es una estimación de la de la probabilidad de muerte de la enfermedad de dicho paciente durante un periodo de tiempo predeterminado, p. ej., durante un periodo de 5 años.

El término "recurrencia" se refiere a la detección del cáncer de próstata en forma de diseminación metastásica de células tumorales, recurrencia local, recurrencia contralateral o recurrencia del cáncer de próstata en cualquier sitio del cuerpo del paciente después de que el cáncer de próstata haya sido sustancialmente indetectable o sea sensible a los tratamientos.

Como se utiliza en el presente documento, "tratamiento" o "terapia" es una estrategia para obtener beneficio o resultados clínicos deseados. Esto incluye: reducir el número de células cancerosas; reducir el tamaño del tumor; inhibir (es decir, ralentizar hasta cierto punto y/o detener) la infiltración de células cancerosas en los órganos periféricos; inhibir (es decir, ralentizar hasta cierto punto y/o detener) la metástasis tumoral; inhibir, hasta cierto punto, el crecimiento tumoral; y/o aliviar hasta cierto punto uno o más de los síntomas asociados con el trastorno, reduciendo el tamaño del tumor, disminuyendo los síntomas resultantes de la enfermedad, aumentando la calidad de vida de aquellos que padecen la enfermedad, disminuyendo la dosis de otras medicaciones necesarias para tratar la enfermedad, retrasando la progresión de la enfermedad, y/o prolongando la supervivencia de los pacientes.

La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a una cantidad del fármaco que puede reducir el número de células cancerosas; reducir el tamaño del tumor; inhibir (es decir, ralentizar hasta cierto punto y preferentemente detener) la infiltración de células cancerosas en los órganos periféricos; inhibir (es decir, ralentizar hasta cierto punto y preferentemente detener) la metástasis tumoral; inhibir, hasta cierto punto, el crecimiento tumoral; y/o aliviar hasta cierto punto uno o más de los síntomas asociados con el trastorno. En la medida en que el fármaco puede evitar el crecimiento y/o destruir las células cancerosas existentes, puede ser citostático y/o citotóxico. Para la terapia del cáncer, la eficacia in vivo puede, por ejemplo, medirse evaluando la duración de la supervivencia, el tiempo hasta la progresión de la enfermedad (TPE), las tasas de respuesta (TR), la duración de la respuesta y/o la calidad de vida.

Los términos "sobreexpresar", "sobreexpresión", "sobreexpresado", "regular positivamente", o "regulado positivamente" se refieren indistintamente a un biomarcador que se transcribe o traduce a un nivel detectablemente mayor, normalmente en una célula cancerosa, en comparación con una célula no cancerosa o con una célula cancerosa que no está asociada con el peor pronóstico o el pronóstico más desfavorable. El término incluye la sobreexpresión debida a la transcripción, procesamiento postranscripcional, traducción, procesamiento postraduccional, localización celular y/o estabilidad del ARN y de la proteína, comparado con una célula no cancerosa o con una célula cancerosa que no está asociada con el peor pronóstico o el pronóstico más desfavorable. La sobreexpresión puede detectarse usando técnicas convencionales para detectar ARNm (es decir, RT-PCR, PCR, hibridación) o proteínas (es decir, ELISA, técnicas inmunohistoquímicas, espectroscopia de masas). La sobreexpresión puede ser del 10 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 % o más en comparación con una célula normal o con una célula cancerosa que no está asociada con el peor pronóstico o el pronóstico más desfavorable. En determinados casos, la sobreexpresión es de 1 vez, 2 veces, 3 veces, 4 veces, 5, 6, 7, 8, 9, 10 o 15 veces o más los niveles de transcripción o traducción en comparación con una célula no cancerosa o una célula cancerosa que no está asociada con el peor pronóstico o el pronóstico más desfavorable.

"Muestra biológica" incluye cortes de tejidos tales como muestras de biopsia y autopsia, así como cortes congelados tomados con fines histológicos. Tales muestras incluyen tejidos de cáncer de próstata, células cultivadas, p. ej., cultivos primarios, explantes y células transformadas. Una muestra biológica se obtiene normalmente de un mamífero, tal como un primate, p. ej., el ser humano.

Una "biopsia" comprende el proceso de extracción de una muestra de tejido para evaluación diagnóstica o pronóstica, y el espécimen de tejido en sí. Cualquier técnica de biopsia conocida en la técnica puede aplicarse a los métodos de diagnóstico y pronóstico de la presente divulgación. La técnica de biopsia aplicada dependerá del tipo de tejido a evaluar (p. ej., próstata), el tamaño y tipo del tumor, entre otros factores. Las técnicas representativas de biopsia incluyen, aunque sin limitación, biopsia por escisión, biopsia incisional, biopsia con aguja y biopsia quirúrgica. Una "biopsia por escisión" se refiere a la extirpación de una masa tumoral completa con un pequeño margen de tejido normal que la rodea. Una "biopsia incisional" se refiere a la extracción de una cuña de tejido que incluye un diámetro de sección transversal del tumor. Un diagnóstico o pronóstico realizado por endoscopia o fluoroscopia puede requerir una "biopsia con aguja gruesa", o una "biopsia por aspiración con aguja fina" que generalmente obtiene una suspensión de células del interior de un tejido diana. Se analizan las técnicas de biopsia, por ejemplo, en Harrison' s Principles of Internal Medicine (2005). La obtención de una biopsia incluye métodos tanto directos como indirectos, incluyendo la obtención de la biopsia del paciente o la obtención de la muestra de la biopsia después de haberla extraído del paciente.

El uso de la palabra "un" o "uno/a", cuando se usa junto con la expresión "que comprende" en las reivindicaciones y/o en la memoria descriptiva puede significar "uno/a", pero también está en consonancia con el significado de "uno/a o más", "al menos uno/a", y "uno/a o más de uno/a".

A lo largo de esta solicitud, el término "aproximadamente" se usa para indicar que un valor incluye la desviación estándar de error para el dispositivo o método que se emplea para determinar el valor.

El uso del término "o" en las reivindicaciones se usa para dar a entender "y/o" a menos que se indique explícitamente para referirse solo a alternativas o las alternativas sean mutuamente excluyentes, aunque la divulgación respalda una definición que se refiere solo a alternativas y a "y/o". También se contempla que cualquier elemento enumerado usando el término "o" también puede excluirse específicamente.

Como se usa en esta memoria descriptiva y en la(s) reivindicación(es), las palabras "comprendiendo" (y cualquier forma de comprender, tal como "comprenden" y "comprende"), "teniendo" (y cualquier forma de tener, tal como "tienen" y "tiene"), "incluyendo" (y cualquier forma de incluir, tal como "incluye" e "incluyen") o "conteniendo" (y cualquier forma de contener, tal como "contiene" y "contienen") son inclusivas o abiertas y no excluyen elementos o etapas de métodos adicionales que no se hayan mencionado.

Otros objetos, características y ventajas de la presente invención serán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada.

Descripción de los dibujos

Los siguientes dibujos forman parte de la presente memoria descriptiva y se incluyen para demostrar adicionalmente determinados aspectos de la presente invención. La invención puede entenderse mejor haciendo referencia a uno o más de estos dibujos en combinación con la descripción detallada de las realizaciones específicas presentadas en el presente documento.

FIGS. 1A-C. Análisis inmunohistoquímico de tejido de cáncer de próstata. (FIG. 1A) Expresión de SGK1. Imágenes representativas que muestran que la expresión de SGK1 aumentada en las células de cáncer de próstata en comparación con el epitelio benigno circundante (1er panel, aumento de 20X, se traza una línea negra para mostrar la demarcación del área cancerosa). En CP-ST (dos paneles centrales), la expresión de SGK1 es variable. En CP-PA, la expresión elevada de SGK1 era menos frecuente (40X). (FIG. 1B) El RG se expresó en un mayor porcentaje de CP-PA en comparación con CP-ST (40X). (FIG. 1C) La expresión de RA fue universalmente positiva y predominantemente nuclear tanto en CP-ST como en CP-PA (40X).

FIGS. 2A-C. Estimaciones de la supervivencia libre de progresión del AEP. Estimaciones de supervivencia del rango logarítmico de Kaplan-Meier de la supervivencia libre de progresión para (FIG. 2A). Todos los pacientes (FIG. 2B). Estratificado por grado de Gleason bajo (5-6) frente a intermedio/alto (7-9). (FIG. 2C) Estratificado por la expresión de SGK1 alta (3+) frente a baja (0 a 2+).

Descripción detallada

La SGK1 ha sido recientemente identificada como un gen diana regulado por el RA que codifica una proteína quinasa importante en la supervivencia de las células del cáncer de próstata. En la actualidad, hay una escasez de conocimientos sobre la expresión de SGK1 y su importancia clínica en los cánceres de próstata primarios. Los inventores examinaron la expresión de SGK1 junto con sus reguladores de los receptores nucleares RA y RG en el cáncer de próstata humano no tratado y privado de andrógenos. Descubrieron que la SGK1 se expresa en prácticamente todos los cánceres de próstata, pero que el nivel de expresión de SGK1 es variable. La expresión de SGK1 era sistemáticamente más intensa en las células epiteliales del tumor en comparación con el tejido prostático circundante no afectado, respaldando la idea de que el aumento de la actividad del RA induce la expresión de SGK1. Esta observación contradice un estudio anterior que examinaba la expresión de SGK1, que demostró una disminución de la expresión en las muestras de tejido tumoral en comparación con la hipertrofia prostática benigna (Rauhala et al., 2005). Esta diferencia puede deberse a la comparación del cáncer con la hipertrofia prostática benigna en el estudio anterior, en lugar de una comparación con el tejido prostático normal adyacente no afectado, como en este estudio. Asimismo, el hallazgo de que la expresión de SGK1 disminuye después de la terapia de privación de andrógenos ^{respalda el hallazgo de que la expresión de SGK1 está mediada por} Ra.

Aunque solo es estadísticamente significativo a los 5 años, es interesante que los inventores encontraran un mayor riesgo de recurrencia del cáncer de próstata en pacientes con menor expresión de SGK1. Este hallazgo contradice la hipótesis inicial de los inventores de que una alta expresión de SGK1 en cánceres de próstata primarios no tratados predeciría un mayor riesgo de recurrencia secundario a una mayor supervivencia de las células cancerosas. Sin embargo, dado que la SGK1 es un gen diana del RA, una menor expresión de SGK1 a pesar de una fuerte expresión del RA podría reflejar una señalización aberrante de la vía androgénica asociada a un fenotipo tumoral menos diferenciado. Esta hipótesis está en consonancia con la asociación entre un mayor grado de Gleason y una menor expresión de SGK1 encontrada en este estudio. Confirmando esta hipótesis, otro estudio que examinó la expresión del gen diana del RA AEP/HK3 en el cáncer de próstata encontró una relación inversa similar entre este gen regulado por RA y la recurrencia bioquímica (Sterbis et al., 2008). Por otro lado, una publicación reciente de Donovan et al. (2010) que utiliza un novedoso sistema de puntuación de inmunofluorescencia cualitativa para la expresión nuclear del RA encontró una asociación de una mayor expresión nuclear del RA con un aumento de la mortalidad específica del cáncer de próstata. Otros estudios que examinan los niveles de ARNm del RA (NR3C4) en el tejido del tumor primario también encontraron un aumento de la recaída bioquímica en los pacientes con mayor ARNm del RA (NR3C4) en comparación con los tejidos circundantes benignos (Rosner et al., 2007; Li et al., 2004). Estos hallazgos probablemente reflejan una diferencia entre la expresión medible del RA y la actividad real de la vía del RA, lo que refleja la complejidad de la señalización de la vía del RA en la biología del cáncer de próstata. Existen múltiples mecanismos posibles que subyacen a la potencial disminución de la señalización del RA, incluso en el entorno de la testosterona intacta. Éstos solo están saliendo a la luz ahora, e incluyen variantes de corte y empalme y mutaciones del RA (Guo et al., 2009; Koochekpour, 2010; Sun et al., 2010).

Queda claro que este estudio tiene varias limitaciones. La más importante es que el porcentaje de tumores con baja expresión de SGK1 fue solo del ~25 % del tamaño total de la muestra; el análisis de esta población es, por tanto, limitado. La segunda limitación importante es que muchos pacientes se perdieron durante el seguimiento con el tiempo. El amplio intervalo de seguimiento de 6 semanas hasta más de 15 años, puede confundir los análisis de s Lp . Adicionalmente, varias de las asociaciones estadísticas entre la expresión de SGK1 y los parámetros clínicos eran sugestivas de una asociación, si bien no cumplían el punto de corte de P < 0,05, aunque la asociación con recaída a los 5 años era estadísticamente significativa. Una muestra de mayor tamaño, potencialmente enriquecida para pacientes con enfermedad de mayor grado, probablemente reforzaría estos resultados. Asimismo, un seguimiento a largo plazo más en consonancia también permitiría realizar potencialmente análisis estadísticos más robustos. Tales estudios, incluyendo análisis multivariables, las curvas de funcionamiento del receptor y los coeficientes de correlación serían claramente necesarios para justificar el uso de la tinción de SGK1 como biomarcador pronóstico.

Aunque la SGK1 es un efector conocido de la vía de los glucocorticoides (Mikosz et al., 2001) y los glucocorticoides se utilizan en la terapia sistémica para el cáncer de próstata resistente a la castración, se sabe poco sobre la expresión del RG en el cáncer de próstata o sobre cómo los glucocorticoides pueden ejercer un efecto terapéutico. Hasta donde alcanza el conocimiento de los inventores, solo hay dos estudios previos que investigan la expresión del RG en el cáncer de próstata (Yemelyanov et al., 2007; Mohler et al., 1996). En consonancia con los datos de expresión del RG anteriores, los inventores también han descubierto que el RG se expresaba en aproximadamente un tercio de las muestras de CP en comparación con el tejido prostático normal adyacente. Curiosamente, este estudio demuestra que el RG se expresa en una mayor proporción de muestras de cáncer de próstata primario privadas de andrógenos en comparación con las no sometidas a tratamiento, algo que ninguno de los estudios anteriores había examinado. Asimismo, de las cinco muestras resistentes a la castración del grupo PC-PA, cuatro sobreexpresaban RG (80 %). Aunque el tamaño de la muestra es pequeño, este hallazgo es interesante y podría explicarse por el hecho de que en un entorno empobrecido de andrógenos, la expresión del RG aumenta para compensar la disminución de la actividad del RA. El RA y el RG comparten secuencias de dominio de unión al a Dn similares, así como algunos de los mismos genes efectores corriente abajo, incluyendo SGK1 (Cleutjens et al., 1997; Ho et al., 1993; Chen et al., 1997). Es bien sabido que el RA sigue siendo relevante en la progresión hacia el cáncer de próstata resistente a la castración (Zegarra-Moro et al., 2002; Scher y Sawyers, 2005). Los inventores también consideraron posible que en un entorno empobrecido de andrógenos, resistente a la castración, el RG podría conservar un papel en la regulación transcripcional de los genes regulados por andrógenos, tales como SGK1, y podría servir como vía de supervivencia para el cáncer de próstata resistente a la castración. La observación de los inventores de que la expresión de SGK1 permaneció alta en casi la mitad de los cánceres privados de andrógenos está en consonancia con esta hipótesis.

Por tanto, en estudios adicionales, los inventores analizaron si, tras la terapia de privación de andrógenos (TPA) y la pérdida de actividad del RA en las células de cáncer de próstata, la administración de antagonistas del RG tendría algún efecto. Como se muestra en el presente documento, los inventores demostraron que, en el contexto del antagonismo del receptor de andrógenos, los niveles del receptor de glucocorticoides (RG) dentro de las líneas celulares de cáncer de próstata resistentes a la castración aumentan en comparación con las que no han sido tratadas con la inhibición del RA, la activación del RG hace que estas líneas celulares resistentes a la castración sean más resistentes a la inhibición del RA, y que el tratamiento de estas líneas celulares con antagonistas del RG produce una inhibición sinérgica del crecimiento. Estos y otros aspectos de la invención se describen en detalle a continuación.

I. Cáncer de próstata

El cáncer de próstata es una forma de cáncer que se desarrolla en la próstata, una glándula del sistema reproductor masculino. Muchos cánceres de próstata son de crecimiento lento; sin embargo, sigue siendo la principal causa de muerte por cáncer en los hombres en los Estados Unidos. (en.wikipedia.org/wiki/Prostate_cancer - cite _note-0). Las células cancerosas pueden metastatizarse (extenderse) desde la próstata a otras partes del cuerpo, particularmente los huesos y los ganglios linfáticos. El cáncer de próstata puede causar dolor, dificultad para orinar, problemas durante las relaciones sexuales o disfunción eréctil. Otros síntomas pueden desarrollarse potencialmente durante los estadios posteriores de la enfermedad.

Las tasas de detección de cánceres de próstata varían ampliamente en todo el mundo, y en el sur y el este de Asia se detectan con menos frecuencia que en Europa, y especialmente en los Estados Unidos. El cáncer de próstata tiende a desarrollarse en hombres mayores de cincuenta años y es uno de los tipos de cáncer más prevalentes en los hombres, muchos nunca presentan síntomas, no se someten a ninguna terapia y finalmente, mueren por otras causas. Esto se debe a que el cáncer de próstata es, en la mayoría de los casos, de crecimiento lento, sin síntomas y dado que los hombres con la afección son mayores, a menudo mueren por causas no relacionadas con el cáncer de próstata, tales como enfermedad cardíaca/circulatoria, neumonía, otros cánceres no relacionados o vejez. Por otro lado, los cánceres de próstata más agresivos provocan más mortalidad relacionada con el cáncer que cualquier otro cáncer, excepto el cáncer de pulmón. Aproximadamente dos tercios de los casos crecen lentamente, el otro tercio es más agresivo y se desarrolla rápido.

Muchos factores, incluidos la genética y la dieta, se han relacionado con el desarrollo del cáncer de próstata. La presencia de cáncer de próstata puede estar indicada por síntomas, el examen físico, antígeno específico de la próstata (AEP), o biopsia. La prueba del AEP aumenta la detección del cáncer pero no disminuye la mortalidad (en.wikipedia.org/wiki/Prostate_cancer - cite_note-BMJ2010-4). Por otra parte, el cribado mediante la prueba de la próstata es controvertido en la actualidad y puede tener consecuencias innecesarias, incluso perjudiciales, en algunos pacientes. No obstante, la sospecha de cáncer de próstata normalmente se confirma tomando una biopsia de la próstata y examinándola con un microscopio. Se pueden realizar más pruebas, tales como tomografías computarizadas y gammagrafías óseas, para determinar si el cáncer de próstata se ha diseminado.

Las estrategias de gestión del cáncer de próstata deben guiarse por la gravedad de la enfermedad. Muchos tumores de bajo riesgo pueden seguirse de forma segura con una vigilancia activa. El tratamiento curativo generalmente implica cirugía, varias formas de radioterapia o, menos comúnmente, criocirugía; terapia hormonal y quimioterapia generalmente se reservan para los casos de enfermedad avanzada (aunque la terapia hormonal puede suministrarse con radiación en algunos casos).

La edad y la salud subyacente del hombre, la extensión de la metástasis, la apariencia bajo el microscopio y la respuesta del cáncer al tratamiento inicial son importantes para determinar el resultado de la enfermedad. La decisión de tratar o no el cáncer de próstata localizado (un tumor que está contenido en la próstata) con intención curativa es una decisión del paciente entre los efectos beneficiosos y perjudiciales esperados en términos de supervivencia y calidad de vida del paciente.

El cáncer de próstata temprano no suele causar síntomas. Algunas veces, sin embargo, el cáncer de próstata causa síntomas, a menudo similares a los de enfermedades de la próstata tales como la hipertrofia prostática benigna. Estos incluyen micción frecuente, nicturia (aumento de la micción por la noche), dificultad para iniciar y mantener un flujo constante de orina, hematuria (sangre en la orina), y disuria (dolor al orinar).

El cáncer de próstata se asocia con disfunción urinaria, ya que la glándula prostática rodea la uretra prostática. Los cambios en la glándula, por lo tanto, afectan directamente a la función urinaria. Debido a que los conductos deferentes depositan líquido seminal en la uretra prostática y las secreciones de la propia glándula prostática se incluyen en el contenido del semen, el cáncer de próstata también puede causar problemas con la función y el rendimiento sexual, tal como dificultad para lograr la erección o eyaculación dolorosa.

El cáncer de próstata avanzado puede diseminarse a otras partes del cuerpo, lo que puede provocar síntomas adicionales. El síntoma más común es el dolor de huesos, a menudo en las vértebras (huesos de la columna vertebral), la pelvis o las costillas. La diseminación del cáncer a otros huesos, tales como el fémur, suele ocurrir en la parte proximal del hueso. El cáncer de próstata en la columna también puede comprimir la médula espinal, causando debilidad en las piernas e incontinencia urinaria y fecal.

La única prueba que puede confirmar completamente el diagnóstico de cáncer de próstata es una biopsia, la extracción de pequeños trozos de próstata para un examen microscópico. Sin embargo, antes de una biopsia, se pueden realizar pruebas menos invasivas. Se pueden usar varias pruebas para recopilar más información sobre la próstata y el tracto urinario. El tacto rectal (TR) puede permitir al doctor detectar anomalías en la próstata. La cistoscopia muestra el tracto urinario desde el interior de la vejiga, utilizando un tubo de cámara delgado y flexible que se inserta por la uretra. La ultrasonografía transrectal crea una imagen de la próstata utilizando ondas sonoras a partir de una sonda en el recto. Las pruebas del nivel de AEP también se utilizan con frecuencia para detectar a los pacientes de mayor riesgo.

El cáncer de próstata es inicialmente "hormonodependiente", lo que significa que su crecimiento y progresión depende de las hormonas andrógenas. La mayoría de estas hormonas son producidas por los testículos. La mayoría de los cánceres hormonodependientes se vuelven refractarios después de uno a tres años y vuelven a crecer a pesar de la terapia hormonal. Previamente considerado "cáncer de próstata hormonorrefractario" o "cáncer de próstata independiente de andrógenos", el término "resistente a la castración" ha sustituido a "hormonorrefractario" porque, aunque ya no responden al tratamiento de castración (reducción de andrógeno/testosterona/DHT disponible por medios químicos o quirúrgicos), estos cánceres siguen dependiendo de las hormonas para la activación del receptor de andrógenos. Antes de 2004, todos los tratamientos para el cáncer de próstata resistente a la castración (CPRC) se consideraban paliativos y no se había demostrado que prolongaran la supervivencia. Sin embargo, ahora hay varios tratamientos disponibles para tratar el CPRC que mejoran la supervivencia.

El quimioterapéutico del cáncer docetaxel se ha utilizado como tratamiento para el CPRC con un beneficio de supervivencia media de 2 a 3 meses. La aprobación del docetaxel por parte de la FDA en 2004 fue significativa, ya que fue el primer tratamiento que demostró prolongar la supervivencia en el CPRC. En 2010, la FDA aprobó un tratamiento de quimioterapia de segunda línea conocido como cabazitaxel. El uso fuera de lo indicado en la etiqueta del fármaco oral ketoconazol a veces se utiliza para manipular adicionalmente las hormonas con un efecto terapéutico en el CPRC. Sin embargo, este fármaco puede tener muchos efectos secundarios y es probable que la abiraterona suplante su uso, ya que tiene un mecanismo de acción similar con menos efectos secundarios tóxicos. El tratamiento de inmunoterapia con sipuleucel-T también es eficaz en el tratamiento del CPRC con un beneficio de supervivencia media de 4,1 meses.

La terapia hormonal de segunda línea con abiraterona (Zytiga) completó un ensayo de fase 3 para pacientes con CPRC a los que les ha fallado la quimioterapia en 2010. Los resultados fueron positivos con una supervivencia general aumentada en 4,6 meses en comparación con el placebo. El 28 de abril de 2011, la Administración de Alimentos y Medicamentos de EE.UU. aprobó el acetato de abiraterona en combinación con prednisona para tratar a pacientes con cáncer de próstata resistente a la castración en estadio avanzado (metastásico) que habían recibido docetaxel (quimioterapia) previamente. Otra terapia de la vía antiandrógeno, MDV3100, es un inhibidor extremadamente potente y específico del receptor de andrógenos. En 2012 se publicó un ensayo clínico de fase III de MDV3100 en pacientes con cáncer de próstata resistente a la castración que habían recibido docetaxel (quimioterapia), y también demostró de manera similar una ventaja de supervivencia de 4-5 meses. Todavía no ha sido aprobado por la FDA, sin embargo, su aprobación es probable.

II. Antagonistas del receptor de glucocorticoides y andrógenos

A. Antagonistas del receptor de glucocorticoides

Las primeras investigaciones sobre los ligandos esteroideos condujeron a la identificación del antagonista no selectivo del RG, RU-486 (mifepristona), y del esteroide selectivo del RG RU-43044. Otros incluyen antagonistas-agonistas duales beclometasona, betametasona, budesonida, ciclesonida, flunisolida, fluticasona, mometasona y triamcinolona. Los compuestos estructuralmente relacionados que también son antagonistas del RG incluyen octahidrofenantrenos, dihidropiridinas espirocíclicas, trifenilmetanos y éteres de diarilo, cromenos, dibencil anilinas, dihidroisoquinolinas, pirimidinedionas, azadecalinas, aril pirazolo azadecalinas, 11-monoarilo esteroides, fenantrenos, dibenzol [2.2.2]cicloctaínas y derivados, dibenzoclicloheptanos y sus derivados, dibencil anilinesulfonamidas y sus derivados, dihetero(aril) pentanol, derivados de cromeno, Azadecalinas, aril quinolonas, 11,21-bisarilo esteroides y 11-arilo y 16-hidroxi esteroides. En conjunto, estos compuestos se denominan en el presente documento como "antagonistas del RG". Véase Moeler et al., Expert Opin., 17 (1), 2007).

B. Antagonistas del receptor de andrógenos

Acetato de ciproterona. El acetato de ciproterona es un antiandrógeno progestacional que inhibe directamente el receptor de andrógenos. El co-ciprindol combina (COCs) 2 mg de AEP con 35 |jg de etinilestradiol y se ha sugerido que la mayor cantidad de estrógenos en estos agentes conlleva un mayor potencial de VTE en comparación con los COCs convencionales que contienen una cantidad menor de estrógenos. Sin embargo, la evidencia de los efectos adversos del co-ciprindol en relación con el mayor riesgo de VTE sugiere que no es mayor que con los COCs de tercera generación. La ciproterona ya no se utiliza en los Estados Unidos.

Espironalactona. La espironalactona tiene acciones inhibidoras tanto del receptor de andrógenos como de la 5areductasa. La espironalactona no está exenta de efectos secundarios, aunque éstos dependen en gran medida de la dosis. Se ha observado posible hipercalemia, fatiga, cefalea, retención de líquidos y, raramente, melasma. Los estudios en animales han notificado una asociación con el carcinoma de mama en roedores, pero esto no se ha reproducido en los estudios en humanos. Todos los pacientes deben someterse a un control regular de sus electrolitos debido a los efectos de retención de potasio en el riñón.

Flutamida. La flutamida es un potente antagonista de andrógenos no esteroideo, se utiliza habitualmente en el tratamiento del cáncer de próstata. En términos de seguridad, se ha notificado una hepatotoxicidad fatal con la flutamida. Las primeras advertencias de hepatotoxicidad se notificaron en pacientes que utilizaban dosis de 750 mg diarios y se comunicaron antes de que se realizara estudio alguno de respuesta a la dosis. Actualmente se está investigando el uso de dosis más bajas de flutamida. No se han notificado casos de deterioro hepático con dosis de flutamida de 125 mg/día o menos, y los datos controlados con placebo sugieren que dosis tan bajas como 250-375 mg/día pueden ser eficaces para antagonizar la producción de andrógenos en las mujeres, especialmente cuando se combina con un anticonceptivo que contenga drospirenona.

Bicalutamida. La bicalutamida (comercializada como Casodex, Cosudex, Calutide, Kalumid) es un antiandrógeno oral no esteroideo utilizado en el tratamiento del cáncer de próstata y el hirsutismo. Se recomiendan 50 mg una vez al día en combinación con un análogo de la hormona liberadora de la hormona luteinizante o la castración quirúrgica o tras la progresión después de la castración como una maniobra hormonal secundaria.

Nilutamida. La nilutamida es un medicamento antiandrógeno utilizado en el tratamiento del cáncer de próstata en estadio avanzado. La nilutamida bloquea el receptor de andrógenos, impidiendo su interacción con la testosterona. Dado que la mayoría de las células del cáncer de próstata dependen de la estimulación del receptor de andrógenos para crecer y sobrevivir, la nilutamida puede prolongar la vida de los hombres con cáncer de próstata. La nilutamida se comercializa con el nombre de Nilandron en Estados Unidos y con el nombre de Anandron en Canadá. Se utiliza en combinación con un análogo de la hormona liberadora de la hormona luteinizante o con la castración quirúrgica, o en caso de progresión tras la castración como maniobra hormonal secundaria.

MDV3100. MDV3100 es un fármaco experimental antagonista del receptor de andrógenos desarrollado por Medivation para el tratamiento del cáncer de próstata resistente a la castración que se encuentra actualmente en ensayos clínicos de Fase 3. Medivation ha informado de un descenso de hasta el 89 % en los niveles séricos del antígeno específico de próstata tras un mes de toma del medicamento. Los primeros estudios preclínicos también sugieren que MDV3100 inhibe el crecimiento de las células del cáncer de mama.

MDV3100 tiene una afinidad de unión al receptor de andrógenos (RA) aproximadamente cinco veces superior a la del antiandrógeno bicalutamida. A diferencia de la bicalutamida, MDV3100 no promueve la translocación del RA al núcleo y además impide la unión del RA al ADN y del RA a las proteínas coactivadoras. Cuando las células LNCaP (una línea celular de cáncer de próstata) genomanipuladas para expresar niveles elevados de RA (como los encontrados en pacientes con cáncer de próstata avanzado) fueron tratadas con MDV3100, la expresión de los genes dependientes de los andrógenos AEP y TMPRSS2 se redujo, en contraste con la bicalutamida, cuya expresión se reguló positivamente. En las células VCaP que sobreexpresan los receptores de andrógenos, MDV3100 indujo la apoptosis, mientras que la bicalutamida no lo hizo. Por otra parte, MDV3100 se comporta como un antagonista del receptor de andrógenos mutante W741C, a diferencia de la bicalutamida, que se comporta como un agonista puro cuando se une al mutante W741C.

MDV 3100 resultó clínicamente activo en pacientes con cáncer de próstata metastásico resistente a la castración en ensayos de fase I y II en curso. El nivel de EAP disminuyó más del 50 por ciento en 40/65 pacientes sin tratar con quimioterapia y en 38/75 pacientes tratados con quimioterapia. Los recientes datos de seguimiento a largo plazo de estos primeros estudios clínicos, anunciados en febrero de 2011, fueron positivos. El tiempo medio hasta la progresión radiográfica fue de 56 semanas para los pacientes sin tratar con quimioterapia y de 25 semanas para la población postquimioterapia. Medivation está llevando a cabo varios ensayos internacionales de fase III. . El primer ensayo, conocido como AFFIRM, determinará la eficacia de MDV3100 en pacientes en los que ha fracasado previamente el tratamiento de quimioterapia con docetaxel. En noviembre de 2011, este ensayo se interrumpió después de que un análisis provisional revelara que los pacientes a los que se les administró el fármaco vivieron aproximadamente 5 meses más que los que tomaron placebo. Como se ha indicado anteriormente, estos informes preliminares se hicieron públicos a principios de 2012. Se espera que Medivation solicite la aprobación de la FDA en algún momento de 2012.

Hay otro ensayo de fase III, conocido como PREVAIL, que está investigando la eficacia de MDV3100 con pacientes que aún no han recibido quimioterapia. En octubre de 2011, este ensayo todavía está abierto a la inclusión. Adicionalmente, en marzo de 2011 se inició un ensayo de fase II en el que se compara el MDV3100 con un antiandrógeno de uso común, bicalutamida, en pacientes con cáncer de próstata que han progresado durante el tratamiento con terapia de análogos de LHRH (p. ej., leuprorelina) o castración quirúrgica.

III. Terapia contra el cáncer de próstata

Clásicamente, el cáncer de próstata metastásico se trata con una terapia de privación de andrógenos (TPA) de primera línea. La TPA reduce la testosterona sérica, la hormona que estimula la proliferación y la progresión de la enfermedad mediante la activación del receptor de andrógenos (RA) dentro de la célula cancerosa. Los pacientes responden a la TPA durante un tiempo limitado, una media de 2-3 años, después de lo cual, se considera que ha fracasado la terapia hormonal de primera línea y se considera que tienen cáncer de próstata resistente a la castración (CPRC). El CPRc es la forma letal de la enfermedad, que causa más de 30.000 muertes solo en los Estados Unidos.

El decapéptido, hormona liberadora de gonadotropinas, también denominado LHRH, fue aislado en 1971. La exposición crónica a LHRH acabó suprimiendo la testosterona mediante la desensibilización de las células hipofisarias a través de la regulación por disminución de los receptores de LHRH. Las sustituciones en la sexta posición de aminoácidos de LHRH dieron lugar a agonistas de LHRH significativamente más potentes. El depósito mensual de leuprolida fue el primer agonista de LHRH evaluado como tratamiento del cáncer de próstata avanzado. En un ensayo clínico aleatorizado, la leuprolida fue equivalente a 3 mg de DES en la reducción de la testosterona sérica a niveles de castración. La ventaja de la leuprolida fue una menor incidencia de toxicidad cardiovascular. La leuprolida acabó sustituyendo al DES y a la orquiectomía como enfoque preferido para la privación de andrógenos.

Durante los siguientes 30 años, las sustituciones en la sexta posición de aminoácidos produjeron goserelina, triptorelina e histrelina, que son los agonistas de LHRH disponibles comercialmente en los Estados Unidos. Los agonistas de LHRH se diferencian por su vía de administración (inyección intramuscular frente a inyección subcutánea frente a implante subcutáneo) y la frecuencia de administración (1-12 meses). Todos estos agonistas de LHRH parecen tener perfiles de efectos secundarios similares y la capacidad de reducir la testosterona sérica a niveles de castración. Solo se ha realizado 1 estudio en el que se comparan directamente diferentes agonistas de LHRH. La supervivencia general fue significativamente mayor con triptorelina en comparación con leuprolida, 97 % frente a 90,5 % de supervivencia a los 9 meses, respectivamente (P = 0,033). Aunque no estadísticamente significativo, hubo una tendencia a que la triptorelina mantuviera mejor los niveles de castración de testosterona durante un intervalo de 9 meses.

Uno de los descubrimientos que cambian el paradigma en el tratamiento del CPRC es que, a pesar de haber progresado pese a la TPA, el CPRC sigue siendo en gran parte estimulado por la señalización activa del receptor de andrógenos. Esto ha llevado al desarrollo de terapias dirigidas al eje andrógeno incluyendo abiraterona (De Bono et al., 2011), que disminuye la producción de otros ligandos de función similar a la testosterona, y más recientemente MDV3100, un potente inhibidor de segunda generación del receptor de andrógenos. Aunque MDV3100 mejora la supervivencia, sus beneficios son limitados, con una duración media del beneficio (supervivencia libre de progresión en el ensayo crucial de fase III) de poco más de 8 meses. Tras la progresión con MDV3100, la supervivencia media es inferior a 1 año, y no está claro cómo el cáncer de próstata se vuelve resistente a MDV3100 y a otros inhibidores potentes del RA similares.

De acuerdo con la presente divulgación, los cánceres de próstata resistentes a la inhibición del RA pueden ahora ser tratados con antagonistas del RG. Por tanto, se contempla específicamente que uno o más de los antagonistas del RG analizados en el presente documento pueden ser utilizados en el tratamiento del cáncer de próstata, y en particular, en el CPRC. Se contempla también que, en algunos aspectos, se emplee más de un antagonista del RG, mientras que en otros aspectos, solo se emplea uno como parte del método terapéutico (aunque puede administrarse varias veces). Se contempla que el segundo puede administrarse simultáneamente con el primero o pueden administrarse en momentos diferentes.

Por otra parte, las terapias con antagonistas del RG pueden combinarse, ventajosamente, con terapias convencionales contra el cáncer. Estas incluyen una o más seleccionadas entre el grupo de los tratamientos químicos o basados en radiación y cirugía. Las quimioterapias incluyen, por ejemplo, cisplatino (CDDP), carboplatino, cabazitaxel, mitoxantrona, procarbazina, mecloretamina, ciclofosfamida, camptotecina, ifosfamida, melfalán, clorambucilo, busulfán, nitrosurea, dactinomicina, daunorrubicina, doxorrubicina, bleomicina, plicomicina, mitomicina, etopósido (VP16), tamoxifeno, raloxifeno, agentes de unión a receptor de estrógeno, taxol, gemcitabina, navelbina, inhibidores de la farnesil-proteína transferasa, transplatino, 5-fluorouracilo, vincristina, vinblastina y metotrexato, o cualquier variante análoga o derivada de lo anterior.

Entre los agentes terapéuticos adecuados se incluyen, por ejemplo, alcaloides de la vinca, agentes que interrumpen la formación de microtúbulos (tales como colchicinas y sus derivados), agentes antiangiogénicos, anticuerpos terapéuticos, agentes dirigidos al EGFR, agentes dirigidos contra la tirosina quinasa (tales como inhibidores de tirosina quinasa), agentes dirigidos a la serina quinasa, complejos de metales de transición, inhibidores del proteasoma, antimetabolitos (tales como análogos de nucleósidos), agentes alquilantes, agentes basados en platino, antibióticos de antraciclina, inhibidores de la topoisomerasa, macrólidos, anticuerpos terapéuticos, retinoides (tales como todos los ácidos transretinoicos o derivados de los mismos); geldanamicina o un derivado de la misma (tal como 17-AAG), y otros agentes quimioterapéuticos convencionales bien reconocidos en la técnica.

Ciertos quimioterapéuticos son bien conocidos para su uso contra el cáncer de próstata. Estos quimioterapéuticos para el cáncer de próstata son capecitabina, carboplatino, ciclofosfamida (Cytoxan), cabazitaxel, daunorrubicina, docetaxel (Taxotere), doxorrubicina (Adriamycin), epirrubicina (Ellence), fluorouracilo (también denominado 5-fluorouracilo o 5-FU), gemcitabina, eribulina, ixabepilona, metotrexato, mitomicina C, mitoxantrona, paclitaxel (Taxol), tiotepa, vincristina, vinorelbina.

En algunos aspectos, el agente quimioterapéutico es cualquiera de (y en algunos aspectos seleccionado entre el grupo que consiste en) adriamicina, colchicina, ciclofosfamida, actinomicina, bleomicina, daunorrubicina, doxorrubicina, epirrubicina, mitomicina, metotrexato, mitoxantrona, fluorouracilo, carboplatino, carmustina (BCNU), metil-CCNU, cisplatino, etopósido, interferones, camptotecina y derivados de los mismos, fenesterina, taxanos y derivados de los mismos (p. ej., paclitaxel y derivados del mismo, taxotere y derivados del mismo y similares), topetecan, vinblastina, vincristina, tamoxifeno, piposulfan, nab-5404, nab-5800, nab-5801, Irinotecán, HKP, Ortataxel, gemcitabina, Herceptin®, vinorelbina, Doxil®, capecitabina, Gleevec®, Alimta®, Avastin®, Velcade®, Tarceva®, Neulasta®, Lapatinib, STI-571, ZD1839, Iressa® (gefitinib), SH268, genisteína, CEP2563, SU6668, SU11248, EMD121974, y Sorafenib.

En algunos aspectos, el agente quimioterapéutico es una composición que comprende nanopartículas que contienen un derivado de la tiocolchicina y una proteína portadora (tal como albúmina).

En aspectos adicionales, se administra una combinación de agentes quimioterapéuticos a las células de cáncer de próstata. Los agentes quimioterapéuticos pueden administrarse en serie (en minutos, horas o días de diferencia) o en paralelo; también pueden administrarse al paciente en una composición única premezclada. La composición puede contener o no un antagonista del receptor de glucocorticoides. Las combinaciones terapéuticas para el cáncer de próstata incluyen, pero sin limitación, las siguientes: AT (Adriamicina y Taxotere), AC ± T: (Adriamicina y Cytoxan, con o sin Taxol o Taxotere), CMF (Cytoxan, metotrexato y fluorouracilo), CEF (Cytoxan, Ellence y fluorouracilo), FAC (fluorouracilo, Adriamicina y Cytoxan), CAF (Cytoxan, Adriamicina y fluorouracilo) (los regímenes FAC y CAF utilizan los mismos medicamentos pero con dosis y frecuencias diferentes), TAC (Taxotere, Adriamicina y Cytoxan), y GET (Gemzar, Ellence y Taxol).

La expresión "un inhibidor de la serina/treonina quinasa", como se utiliza en el presente documento, se refiere a un compuesto que inhibe las serina/treonina quinasas. Un ejemplo de una diana de un inhibidor de serina/treonina quinasa incluye, pero sin limitación, proteína quinasa dependiente de ARNbc (PKR). Ejemplos de dianas indirectas de un inhibidor de serina/treonina quinasa incluyen, aunque sin limitación, MCP-1, NF-kB, eIF2a, COX2, RANTES, IL8,CYP2A5, IGF-1, CYP2B1, CYP2B2, CYP2H1, ALAS-1, HIF-1, eritropoyetina y/o CYP1A1. Un ejemplo de un inhibidor de serina/treonina quinasa incluye, pero sin limitación, Sorafenib y 2-aminopurina, también conocida como 1H-purina-2-amina (9CI). Sorafenib se comercializa como NEXAVAR. Los compuestos pueden usarse en combinación con un agonista del receptor de glucocorticoides.

La expresión "inhibidor de la angiogénesis", como se utiliza en el presente documento, se refiere a un compuesto que se dirige, disminuye o inhibe la producción de nuevos vasos sanguíneos. Las dianas de un inhibidor de la angiogénesis incluyen, aunque sin limitación, metionina aminopeptidasa-2 (MetAP-2), proteína inflamatoria de macrófagos-1 (MIP-1a), CCL5, TGF-p, lipoxigenasa, ciclooxigenasa y topoisomerasa. Las dianas indirectas de un inhibidor de la angiogénesis incluyen, aunque sin limitación, p21, p53, CDK2 y la síntesis de colágeno. Los ejemplos de un inhibidor de la angiogénesis incluyen, aunque sin limitación, Fumagilina, que se conoce como ácido 2,4,6,8-decatetraendioico, mono[3R,4S,5S,6R)-5-metoxi-4-[(2R,3R)-2-metil-3-(3-metil-2-butenil)oxi-ranil]-1-oxaspiro[2.5]oct-6-il]éster, (2E,4E,6E,8E)-(9Cl); Shikonin, que también se conoce como 1,4-naftalendiona, 5,8-dihidroxi-2-[(1R)-1 -hidroxi-4-metil-3-pentenil]-(9CI); Tranilast, que también se conoce como ácido benzoico, 2-[[3-(3,4-dimetoxifenil)-1-oxo-2-propenil]amino]-(9CI); ácido ursólico; suramin; talidomida y lenalidomida, y comercializados como REVLIMID. Los compuestos pueden usarse en combinación con un agonista del receptor de glucocorticoides.

Las radioterapias que causan daño en el ADN y se han usado ampliamente incluyen lo que comúnmente se conocen como rayos y, rayos X y/o la administración dirigida de radioisótopos a las células tumorales. Además, se contemplan otras formas de factores que dañan el ADN, tales como microondas y radiación UV. Es muy probable que todos estos factores afecten a una amplia gama de daños en el ADN, en los precursores de ADN, en la replicación y reparación de ADN, y en el ensamblaje y mantenimiento de los cromosomas. Los intervalos de dosificación de rayos X varían de dosis diarias de 50 a 200 roentgens durante periodos prolongados de tiempo (3 a 4 semanas), a dosis únicas de 2000 a 6000 roentgens. Los intervalos de dosificación para los radioisótopos varían ampliamente y dependen de la semivida del isótopo, de la fuerza y el tipo de radiación emitida, y de la captación por las células neoplásicas. En particular, se contempla la administración intravenosa de samario, estroncio y radio-223.

La terapia láser consiste en el uso de luz de alta intensidad para destruir las células tumorales. La terapia láser afecta a las células solo en la zona tratada. La terapia láser puede utilizarse para destruir el tejido canceroso y aliviar una obstrucción en el esófago cuando el cáncer no puede eliminarse mediante cirugía. El alivio de la obstrucción puede ayudar a reducir los síntomas, especialmente los problemas para tragar. La terapia fotodinámica (TFD), un tipo de terapia láser, implica el uso de fármacos que son absorbidos por las células cancerosas; cuando se exponen a una luz especial, los fármacos se activan y destruyen las células cancerosas. La TFD puede utilizarse para aliviar los síntomas del cáncer de esófago, tales como dificultad para tragar.

Los inmunoterapéuticos, en general, se basan en el uso de células y moléculas efectoras inmunitarias para dirigirse y destruir a las células cancerosas. El efector inmunitario puede ser, por ejemplo, un anticuerpo específico para algún marcador de superficie de una célula tumoral. El anticuerpo solo puede servir como un efector de la terapia o puede reunir otras células que efectúan realmente la destrucción celular. El anticuerpo también puede conjugarse con un fármaco o toxina (quimioterápico, radionúclido, cadena A de ricina, toxina colérica, toxina pertúsica, etc.) y servir simplemente como un agente de direccionamiento. Como alternativa, el efector puede ser un linfocito que porta una molécula de superficie que interactúa, directa o indirectamente, con una diana de células tumorales. Las diversas células efectoras incluyen linfocitos T citotóxicos y linfocitos NK.

La terapia génica es la inserción de polinucleótidos, entre los que se incluyen el ADN o el ARN, en las células y tejidos de un individuo para tratar una enfermedad. La terapia antisentido es también una forma de terapia génica. Un polinucleótido terapéutico puede administrarse antes, después o al mismo tiempo que una primera terapia contra el cáncer. En el presente documento se describe la administración de un vector que codifica una variedad de proteínas. Por ejemplo, la expresión celular de los oncogenes supresores de tumores exógenos ejercería su función de inhibir la proliferación celular excesiva, tal como p53, p16, FHIT y C-CAM

Los agentes adicionales que se van a utilizar para mejorar la eficacia terapéutica del tratamiento incluyen agentes inmunomoduladores, agentes que afectan la regulación positiva de receptores de superficie celular y uniones GAP, agentes citostáticos y de diferenciación, inhibidores de la adhesión celular, o agentes que aumentan la sensibilidad de las células hiperproliferativas a inductores apoptóticos. Los agentes inmunomoduladores incluyen el factor de necrosis tumoral; interferón alfa, beta y gamma; IL-2 y otras citocinas; F42K y otros análogos de citocinas; o MIP-1, MIP-1p, MCP-1, RANTES y otras quimiocinas. Se contempla además que la regulación positiva de los receptores de superficie celular o sus ligandos, tales como Fas/ligando de Fas, DR4 o DR5/TRAIL potenciaría las capacidades inductoras apoptóticas de la presente divulgación mediante el establecimiento de un efecto autocrino o paracrino sobre las células hiperproliferativas. Los aumentos en la señalización intercelular al elevar el número de uniones GAP aumentarían los efectos antihiperproliferativos en la población de células hiperproliferativas vecinas. En otros aspectos, pueden usarse agentes citostáticos o de diferenciación en combinación con la presente divulgación para mejorar la eficacia antihiperproliferativa de los tratamientos. Se contemplan inhibidores de la adhesión celular para mejorar la eficacia de la presente divulgación. Ejemplos de inhibidores de la adhesión celular son los inhibidores de la quinasa de adhesión focal (FAK, por sus siglas en inglés) y la lovastatina. Se contempla además que otros agentes que aumentan la sensibilidad de una célula hiperproliferativa a la apoptosis, tales como el anticuerpo c225, puedan usarse en combinación con la presente divulgación para mejorar la eficacia del tratamiento.

Pueden emplearse diversas combinaciones con un antagonista del receptor de glucocorticoides y un agente o compuesto anticanceroso (o una combinación de tales agentes y/o compuestos), por ejemplo, el antagonista del receptor de glucocorticoides es "A" y el agente o terapia anticanceroso convencional (o una combinación de tales agentes) administrado como parte de un régimen de terapia anticancerosa, es B":

A/B/A B/A/B B/B/A A/A/B A/B/B B/A/A A/B/B/B B/A/B/B B/B/B/A B/B/A/B A/A/B/B A/B/A/B A/B/B/A B/B/A/A B/A/A/B B/A/B/A A/A/A/B B/A/A/A A/B/A/A A/A/B/A

La administración de la terapia o agentes a un paciente seguirá los protocolos generales para el tratamiento/administración de dichos compuestos, teniendo en cuenta la toxicidad, en caso de que la hubiera, de la terapia. Se espera que los ciclos de tratamiento se repitan según sea necesario. También se contempla que diversas terapias convencionales, así como intervención quirúrgica, puedan aplicarse en combinación con la terapia descrita.

Los términos "contactado" y "expuesto", cuando se aplican a una célula, se usan en el presente documento para describir el proceso por el que un antagonista del RG y un agente quimioterápico o radioterápico se administran a una célula diana o se colocan en yuxtaposición directa con la célula diana. Para conseguir destrucción o estasis celular, ambos agentes se administran a una célula en una cantidad combinada eficaz para destruir la célula o evitar que se divida.

Aproximadamente un 60 % de las personas con cáncer se someterán a una cirugía de algún tipo, que incluye cirugía preventiva, diagnóstica o de estadiaje, curativa y paliativa. La cirugía curativa es un tratamiento contra el cáncer que se puede usar junto con otras terapias, tales como el tratamiento de la presente divulgación, quimioterapia, radioterapia, hormonoterapia, genoterapia, inmunoterapia y/o terapias alternativas.

La cirugía curativa incluye la resección en la que todo o parte del tejido canceroso se elimina, extirpa y/o destruye físicamente. Resección tumoral se refiere a la eliminación física de al menos parte de un tumor. Además de la resección tumoral, el tratamiento quirúrgico incluye cirugía láser, criocirugía, electrocirugía y cirugía controlada microscópicamente (cirugía de Mohs). Se contempla además que la presente divulgación pueda utilizarse junto con la eliminación de cánceres superficiales, de precánceres o de cantidades menores de tejido normal. Tras la escisión de parte de la totalidad de las células cancerosas, tejido o tumor, se puede formar una cavidad en el cuerpo. El tratamiento puede conseguirse por perfusión, inyección directa o aplicación local a la zona con o sin un tratamiento antineoplásico adicional.

Otros aspectos de la terapia incluyen la evaluación de la expresión o actividad del RA o RG. Los métodos para evaluar el nivel de expresión o actividad de estos receptores se describen con mayor detalle en la publicación de patente estadounidense n.° 2011/0269728.

IV. Formulaciones farmacéuticas, vías de administración y kits

Cuando se contemplen aplicaciones clínicas, será necesario preparar composiciones farmacéuticas en una forma apropiada para la aplicación prevista. En general, esto implicará preparar composiciones que estén esencialmente exentas de pirógenos, así como de otras impurezas que podrían ser dañinas para los seres humanos o los animales.

En general, se deseará emplear sales y tampones apropiados para estabilizar los vectores de suministro y permitir la captación por las células diana. Además, se emplearán tampones cuando se introduzcan células recombinantes en un paciente. Las composiciones acuosas de la presente divulgación comprenden una cantidad eficaz del vector para las células, disuelto o dispersado en un vehículo o medio acuoso farmacéuticamente aceptable. Dichas composiciones también se denominan inóculos. La expresión "farmacéuticamente" o "farmacéuticamente aceptable" se refiere a entidades moleculares y composiciones que no producen una reacción adversa, alérgica o negativa distinta cuando se administran a un animal o a un ser humano. Como se utiliza en el presente documento, un "vehículo farmacéuticamente aceptable" incluye cualquiera y todos los disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y retardantes de la absorción, y similares. El uso de tales medios y agentes para sustancias farmacéuticamente activas es bien conocido en la técnica. Excepto en el caso de que algún agente o medio convencional sea incompatible con los vectores o células de la presente divulgación, se contempla su uso en composiciones terapéuticas. En las composiciones también pueden incorporarse principios activos complementarios.

Las composiciones activas de la presente divulgación pueden incluir preparados farmacéuticos clásicos. La administración de estas composiciones terapéuticas de acuerdo con la presente divulgación se realizará a través de cualquier vía habitual, siempre que el tejido diana esté disponible a través de esa vía. Tales vías incluyen oral, nasal, bucal, rectal, vaginal o tópica. Como alternativa, la administración puede ser por inyección ortotópica, intradérmica, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal o intravenosa. Dichas composiciones normalmente se administrarán como composiciones farmacéuticamente aceptables, como se cita anteriormente. Es de particular interés la administración intratumoral directa, la perfusión de un tumor, o la administración local o regional a un tumor, por ejemplo, en la vasculatura local o regional o en el sistema linfático, a la vasculatura del tumor o en un lecho tumoral resecado.

El tratamiento puede repetirse, por ejemplo, cada 1, 2, 3, 4, 5, 6 o 7 días, o cada 1, 2, 3, 4 y 5 semanas o cada 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 o 12 meses. Estos tratamientos pueden ser, además, de dosificaciones variables. A un paciente se le puede administrar un solo compuesto o una combinación de antagonistas de RG descritos en el presente documento en una cantidad, es decir, es de al menos, o como máximo de 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 o 100 mg/kg (o de cualquier intervalo derivable de los mismos). A un paciente se le puede administrar un solo antagonista del RG o una combinación de compuestos descritos en el presente documento en una cantidad, es decir, es de al menos, o como máximo de 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 410, 420, 430, 440, 441, 450, 460, 470, 480, 490, 500 mg/kg/día (o de cualquier intervalo derivable de los mismos).

Los compuestos activos también pueden administrarse por vía parenteral o intraperitoneal. Las soluciones de los compuestos activos como base libre o sales farmacológicamente aceptables pueden prepararse en agua mezclada adecuadamente con un tensioactivo, tales como hidroxipropilcelulosa. También se pueden preparar dispersiones en glicerol, polietilenglicoles líquidos y mezclas de los mismos y en aceites. En condiciones normales de almacenamiento y uso, estas preparaciones contienen un conservante para prevenir el crecimiento de microorganismos.

Las formas farmacéuticas adecuadas para el uso inyectable incluyen soluciones o dispersiones acuosas estériles y polvos estériles para la preparación extemporánea de soluciones o dispersiones inyectables estériles. En todos los casos, la forma debe ser estéril y debe ser fluida en la medida en que exista facilidad de inyección. Debe ser estable en las condiciones de fabricación y almacenamiento y debe protegerse frente a la acción contaminante de microorganismos, tales como bacterias y hongos. El vehículo puede ser un disolvente o medio de dispersión que contenga, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol líquido, y similares), mezclas adecuadas de los mismos y aceites vegetales. La fluidez adecuada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento, tal como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula necesario en el caso de una dispersión y mediante el uso de tensioactivos. La prevención de la acción de microorganismos puede lograrse mediante diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico, timerosal y similares. En muchos casos, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares o cloruro de sodio. Puede lograrse absorción prolongada de las composiciones inyectables mediante el uso en las composiciones de agentes que retardan la absorción, por ejemplo, monoestearato de aluminio y gelatina.

Se preparan soluciones inyectables estériles incorporando los compuestos activos en la cantidad necesaria en el disolvente adecuado con varios de los otros ingredientes enumerados anteriormente, según sea necesario, seguido de esterilización por filtración. En general, se preparan dispersiones incorporando los diversos principios activos esterilizados en un vehículo estéril que contiene el medio de dispersión básico y los otros principios necesarios de entre los enumerados anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos de preparación preferidos son las técnicas de secado al vacío y liofilización, que producen un polvo del principio activo más cualquier ingrediente adicional deseado, a partir de la solución de los mismos previamente esterilizada por filtración.

Como se utiliza en el presente documento, un "vehículo farmacéuticamente aceptable" incluye cualquiera y todos los disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y retardantes de la absorción, y similares. En la técnica se conoce bien el uso de tales medios y agentes para sustancias farmacéuticas activas. Excepto en la medida en que cualquier medio o agente convencional sea incompatible con el principio activo, se contempla su uso en las composiciones terapéuticas. Además, en las composiciones pueden incorporarse principios activos complementarios.

Para la administración oral, los polipéptidos de la presente divulgación pueden incorporarse con excipientes y utilizarse en forma de enjuagues bucales y dentífricos no ingeribles. Se puede preparar un enjuague bucal incorporando el principio activo en la cantidad necesaria en un disolvente apropiado, tal como una solución de borato de sodio (solución de Dobell). Como alternativa, el principio activo puede incorporarse en un lavado antiséptico que contenga borato de sodio, glicerina y bicarbonato de potasio. El principio activo también se puede dispersar en dentífricos, incluyendo: geles, pastas, polvos y suspensiones. El principio activo se puede añadir en una cantidad terapéuticamente eficaz a una pasta dentífrica que puede incluir agua, aglutinantes, abrasivos, agentes aromatizantes, agentes espumantes y humectantes.

Las composiciones de la presente divulgación pueden formularse en forma neutra o de sal. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de adición de ácido (formadas con los grupos amino libres de la proteína) y que se forman con ácidos inorgánicos tales como, por ejemplo, los ácidos clorhídrico o fosfórico, o ácidos orgánicos, tales como acético, oxálico, tartárico, mandélico y similares. Las sales formadas con los grupos carboxilo libres también pueden obtenerse de bases inorgánicas tales como, por ejemplo, sodio, potasio, amonio, calcio o hidróxidos férricos, y bases orgánicas, tales como isopropilamina, trimetilamina, histidina, procaína y similares.

Tras la formulación, las soluciones se administrarán de una manera compatible con la formulación de dosificación y en una cantidad tal que sea terapéuticamente eficaz. Las formulaciones se administran fácilmente en una diversidad de formas farmacéuticas, tales como soluciones inyectables, cápsulas de liberación de fármacos y similares. Para la administración parenteral en una solución acuosa, por ejemplo, la solución debe tamponarse de manera adecuada en caso necesario y el diluyente líquido en primer lugar tiene que volverse isotónico con suficiente solución salina o glucosa. Estas soluciones acuosas particulares son especialmente adecuadas para la administración intravenosa, intramuscular, subcutánea e intraperitoneal. A este respecto, los medios acuosos estériles que pueden emplearse serán conocidos por los expertos en la materia a la luz de la presente divulgación. Por ejemplo, una dosificación podría disolverse en 1 ml de solución de NaCl isotónica y añadirse a 1000 ml de líquido de hipodermoclisis o inyectarse en el sitio propuesto de infusión, (véase, por ejemplo, "Remington's Pharmaceutical Sciences" 15a Ed., 1990). Se producirá necesariamente alguna variación en la dosificación dependiendo de la afección del sujeto que se está tratando. La persona responsable de la administración, en todo caso, determinará la dosis adecuada para el sujeto individual. Por otra parte, para la administración a seres humanos, las preparaciones deben cumplir los estándares de esterilidad, pirogenicidad, estándares generales de seguridad y pureza según las exigencias de los estándares de la Oficina de Productos Biológicos de la FDA.

Los kits pueden estar provistos de uno o más agentes de acuerdo con la presente divulgación, por ejemplo, en forma de un envase con una etiqueta. Los envases adecuados incluyen, por ejemplo, frascos, viales y tubos de ensayo. Los envases pueden formarse a partir de una diversidad de materiales tales como vidrio o plástico. La etiqueta en el envase puede indicar que la composición se usa para un pronóstico o aplicación terapéutica específico y también puede indicar instrucciones para su uso in vivo o in vitro, tales como los descritos anteriormente. El kit de la divulgación comprenderá normalmente el envase descrito anteriormente y uno o más envases que comprenden materiales deseables desde un punto de vista comercial y de usuario, incluyendo tampones, diluyentes, filtros, agujas, jeringas e insertos de paquetes con instrucciones de uso.

V. Ejemplos

Los siguientes ejemplos se dan con el fin de ilustrar diversas realizaciones de la invención y no pretenden limitar la presente invención de ninguna manera.

EJEMPLO 1 - MATERIALES Y MÉTODOS

Adquisición de tejidos humanos. El Centro de Investigación de Tejidos Humanos del Centro Médico de la Universidad de Chicago construyó micromatrices de tejidos con la aprobación de la Junta de Revisión Institucional. Como se ha descrito previamente, se utilizó un control de casos localizados para seleccionar 138 muestras de cáncer de próstata de más de 500 prostatectomías radicales consecutivas realizadas en la Universidad de Chicago entre 1995 y 2002 para la micromatriz de tejidos utilizada en este estudio (Lotan et al., 2007). Las zonas afectadas por el cáncer de próstata y el tejido prostático adyacente no neoplásico se perforaron (núcleos de 2 mm) de las muestras fijadas en formalina e incrustadas en parafina y se dispusieron con 72-108 núcleos por portaobjetos. Estos tejidos se denominan "cáncer de próstata sin tratamiento" (CP-ST). De este total (excluyendo los duplicados), 126 muestras tenían un grado de Gleason notificado, 125 disponían de datos de estadiaje y 122 tenían un AEP preoperatorio asociado. Adicionalmente, 18 secciones completas de tejido de cáncer de próstata tras un tratamiento hormonal (terapia de privación de andrógenos antiandrógeno o receptor antiandrógeno) se cortaron en secciones de 4 pm, montadas en portaobjetos para la tinción inmunohistoquímica. Estas muestras se denominan "cáncer de próstata privado de andrógenos" (CP-PA). Estas 18 muestras incluían muestras de tejido de cáncer de próstata procedentes de 10 prostatectomías radicales después de la privación de andrógenos preoperatoria, 6 prostatectomías transuretrales, 1 exenteración pélvica y 1 biopsia de cabeza de fémur con cáncer de próstata metastásico. Cinco de estas 18 secciones completas eran muestras de cánceres de próstata "resistentes a la castración" bona fide ya que las muestras procedían de pacientes con progresión de la enfermedad a pesar de la castración farmacológica o quirúrgica. La edad de los pacientes oscilaba entre los 42 y los 93 años (42-81 para los pacientes sin tratamiento y 48-93 para los pacientes privados de andrógenos), con una mediana de edad de 63 años y una edad media de 62,4 años. Las características de la enfermedad de los pacientes, entre las que se incluyen el grado, el estadio y el AEP se detallan en la Tabla I. La mayoría de las muestras sin tratamiento y con privación de andrógenos tenían un grado de Gleason entre 6 y 7 (75 % y 67 %, respectivamente). La mayoría de las muestras de prostatectomía estaban órganoconfinadas como estadio patológico t 2 (56 %). Veintiocho pacientes (20 %) tenían extensión extracapsular, y otros 23 pacientes (17 %) no estaban órgano-confinados debido a la invasión de la vesícula seminal, invasión de vejiga/recto, afectación ganglionar o metástasis ósea en el momento de la cirugía.

T l 1. r rí i l m r l n r ^ r

Inmunohistoquímica. Las tinciones inmunohistoquímicas para andrógenos (RA) y RG, así como para SGK1, se realizaron según lo descrito anteriormente (Sahoo et al., 2005; Niemeier et al., 2010; Belova et al., 2009). Brevemente, los portaobjetos se cubrieron con xileno durante un total de 10 min, acto seguido se sumergieron en etanol en diluciones decrecientes (de etanol al 100 % a etanol al 70 %) y se lavaron con solución salina tamponada con Tris (TBST) durante 2 min. Los antígenos se desenmascararon con tampón citrato de sodio pH 6,0, seguido de un tratamiento térmico a 95 °C. Tras el enfriamiento, los portaobjetos se colocaron en peróxido de hidrógeno al 3 % durante 20 min y luego se lavaron en TBST. A continuación, para bloquear la peroxidasa endógena y la proteína, los portaobjetos se incubaron en la oscuridad en una solución de leche-peróxido (90 partes de dH²O, 5 partes de leche desnatada y 5 partes de peróxido de hidrógeno al 3 %) y se lavaron de nuevo con TBST. El anticuerpo primario, en tampón de bloqueo, a continuación se aplicó al portaobjetos. Los portaobjetos se incubaron con el anticuerpo primario durante 30 min y luego se lavaron. Después de la aplicación del anticuerpo primario, se utilizó DAKO EnVision+ System-HRP (dAb (3,3'-diaminobenzidina)). La omisión de la etapa del anticuerpo primario sirvió como control negativo para todos los tejidos. Se usaron los anticuerpos siguientes: anti-RA (AR441 1:50, Dako), anti-RG (NCLGCR 1:20, Novocastra), y anti-SGK1 (1:150, Affinity Bioreagents, anticuerpo SGK1 C-terminal). Todos los anticuerpos se evaluaron de forma semicuantitativa tanto en el cáncer de próstata como en el tejido prostático adyacente no neoplásico. Se registró cualquier inmunorreactividad nuclear y/o citoplasmática. La intensidad se calificó en una escala de cuatro puntos, de 0 a 3, para representar negativa, débil, moderada y fuerte, respectivamente. Esta puntuación fue realizada por dos patólogos que revisaron juntos la inmunorreactividad y llegaron a una puntuación de consenso que se utilizó en los análisis.

Seguimiento y análisis de recurrencia del cáncer. Los datos de seguimiento se recopilaron utilizando la base de datos de cáncer de próstata de la Universidad de Chicago (UCPC). Todos los pacientes sometidos a cirugía, en este caso prostatectomía radical, se recogen en la base de datos electrónica de la UCPC. La base de datos contiene datos demográficos, quirúrgicos, patológicos, funcionales, así como datos de resultados oncológicos a largo plazo detallados. Los datos de seguimiento y de resultados se recopilaron mediante encuestas (por correo, correo electrónico y teléfono) a los 3, 6, 12 y 24 meses después de la intervención quirúrgica y, posteriormente, cada año. Se utilizó el apoyo profesional del Survey Lab de la Universidad de Chicago. Los resultados oncológicos se confirmaron mediante los resultados de los marcadores tumorales (AEP) enviados por correo/correo electrónico/fax, los informes de los tratamientos adyuvantes, así como las consultas a los registros de mortalidad. Para el análisis de la recurrencia del cáncer de próstata, la recurrencia del AEP tras la prostatectomía se definió como cualquier valor de AEP por encima de los límites inferiores de detección. Se consideró que los pacientes cuyo AEP no alcanzó el punto con el recuento más bajo a indetectable después de la prostatectomía cumplían el criterio de valoración de la recurrencia en la fecha del primer seguimiento del AEP. Los pacientes fueron censurados del análisis en el momento del último seguimiento si estaban vivos y no habían cumplido los criterios de recurrencia del AEP. El tiempo hasta la progresión del AEP se calculó para los grupos basados en el grado de Gleason y el estadio. Las puntuaciones de Gleason 5 y 6 se consideraron de bajo grado y se combinaron para este análisis. Del mismo modo, se agruparon las puntuaciones de Gleason 7, 8 y 9, ya que representan una biología más agresiva. Aunque se ha notificado que los cánceres con suma de Gleason 4 3 frente a 3 4 se comportan de forma diferente, muchos de los informes patológicos disponibles de este conjunto de tejidos no diferenciaban entre ambos, sino que enumeraron el cáncer como "Gleason 7". Por tanto, el grupo se analizó conjuntamente (Chan et al., 2000; Wright et al., 2009).

Análisis estadístico. Los datos se resumieron mediante estadísticas descriptivas. Se utilizó la prueba exacta de Fisher para comparar las variables categóricas (p. ej., niveles de tinción altos frente a bajos) entre los grupos. Se utilizó el método de Kaplan y Meier para estimar la supervivencia libre de progresión (SLP). Los análisis univariados para comparar la SLP entre grupos se realizaron mediante la prueba de rangos logarítmicos. Adicionalmente, la prueba de rangos logarítmicos de Wilcoxon-Breslow-Gehan, que da mayor peso a los puntos de datos más tempranos, se utilizó ^{para comparar la SLP entre los grupos de expresión de} SgK-1. ^{Se utilizaron modelos de regresión de riesgos} proporcionales de Cox univariado para estimar los cocientes de riesgo entre los grupos. Las tasas de SLP a los 2 y 5 años se compararon mediante una prueba de chi-cuadrado con una transformación log-log complementaria del estimador de Kaplan-Meier (Klein et al., 2007).

Estudios con antagonista del RG. Las líneas celulares de cáncer de próstata CWR-22RV1 (22RV1) y LAPC4 se cultivaron in vitro con varias combinaciones del antagonista del RA MDV3100 (10 pM), andrógeno sintético R1881 (10 nM), agonista del RG dexametasona (Dex, 1 pM o 100 nM, el inhibidor del RG mifepristona (Mif, 100 nM), o el inhibidor de la quinasa SGK1 GSK650394 (1 pM). SGK1-FLAG o vector se expresó de forma estable y se recogió la viabilidad celular, el AEP secretado y los lisados de proteínas.

EJEMPLO 2

Inmunohistoquímica de la expresión de SGK1, RG, y RA. RA y SGK1 se expresaron esencialmente en todo el epitelio prostático, incluyendo CP-ST, CP-PA, y tejido prostático adyacente no afectado (TPNA). Como se esperaba, la expresión nuclear del RA fue uniformemente fuerte (3+) en todas las muestras de tejido de cáncer de próstata, independientemente del estado del tratamiento (Tabla II, FIGS. 1A-C). La expresión de SGK1 fue consistentemente más intensa en las muestras de cáncer de próstata en comparación con el TPNA (FIGS. 1A-C). De manera adicional, la expresión de SGK1 fue más intensa en el núcleo que en el citoplasma. Dado que la expresión de SGK1 por inmunohistoquímica era intensa en la mayoría de los especímenes, la escala de cuatro puntos para la expresión de SGK1 se agrupó como alta (3+) frente a baja (0, 1 y 2+) para su posterior análisis. Con esta clasificación, 100 de 126 (79 %) muestras de CP-ST fueron fuertemente positivas para SGK1 en comparación con solo 8 de 18 (44 %) muestras de CP-PA (P % 0,003) (Tabla II, FIGS. 1A-C). No hubo asociación entre la expresión de SGK1 y el estadio del tumor. El porcentaje de pacientes con una puntuación de Gleason baja (suma de Gleason 5 o 6) y expresión de SGK1 baja fue casi la mitad que el porcentaje de tumores de alto grado de Gleason (7-9) con expresión de SGK1 baja (13,8 % frente a 26,5 %, P % 0,08). Esto implica que la expresión de SGK1 puede estar inversamente correlacionada con el grado del tumor de próstata.

Tabla 2. Ex resión inmunohisto uímica de SGKl RA RG

A continuación, los inventores examinaron la expresión del RG. A diferencia del RA, que era universalmente positiva independientemente de si el paciente estaba sin tratar o privado de andrógenos, la expresión del RG era más variable. Específicamente, la expresión del RG estaba presente en una proporción significativamente mayor de CP-PA en comparación con CP-ST (78 % frente a 38 % de tinción positiva, P % 0,002) (Tabla II, FIGS. 1A-C). Curiosamente, el RG se expresó en gran medida en cuatro de las cinco muestras de CP-PA resistente a la castración (80 %), lo que sugiere que el aumento de la actividad de del RG puede contribuir a la resistencia a la castración al eludir el bloqueo del RA.

Expresión de SGK1 y recurrencia del cáncer de próstata. Hasta la fecha, de los 122 pacientes con CP-ST de los que se dispone de datos de seguimiento, la recurrencia del AEP tras la prostatectomía se ha producido en el 37,7 % (n = 46). De los 76 pacientes que no han cumplido los criterios de recurrencia del AEP, el seguimiento medio es de 5,5 años (intervalo de 0,11-15,4 años). La supervivencia libre de progresión media [(SLP) = tiempo desde la prostatectomía hasta la recurrencia del AEP] para toda la cohorte es de 11,13 años (IC del 95 %: 8,8 no alcanzada) (FIG. 2A). El tiempo hasta la progresión del AEP también se calculó para los subgrupos de pacientes basados en el grado de Gleason y el estadio del tumor. Como se esperaba, hubo una diferencia estadísticamente significativa en la SLP entre los subgrupos de grado de Gleason "bajo" y "alto" (P = 0,004) (FIG. 2B), y los pacientes con puntuaciones de Gleason altas tenían un mayor riesgo de progresión (HR=2,51) en el análisis univariado. Un estadio tumoral más alto se asoció de forma similar con un mayor riesgo de recaída (P < 0,0001). Generalmente, hubo una tendencia no estadísticamente significativa hacia la disminución de la SLP (peor resultado) asociada a la expresión baja (0 a 2+) de SGK1 en comparación con la expresión alta de SGK1 (rango logarítmico P= 0,116; prueba de rango logarítmico de Wilcoxon-Gehan-Breslow P=0,077) (FIG. 2C). A los 2 años, 86,2 % (IC del 95 %: 77,3-91,7 %) de los pacientes estaban vivos sin progresión en el grupo de SGK1 alta frente a solo el 71,4 % (IC del 95 %: 49,1-85,2 %) vivos sin progresión en el grupo de expresión de SGK1 baja (P = 0,083). A los 5 años de seguimiento, el porcentaje de pacientes sin progresión en el grupo de SGK1 alta fue del 72,6 % (IC del 95 %: 61,8-80,8 %) frente a solo el 47,8 % (24,1-68,2 %) en el grupo de SGK1 baja (P = 0,034). Estos datos respaldan la hipótesis de que la expresión de SGK1 baja en los ^{tumores primarios de próstata se asocia con un peor resultado clínico en comparación con la expresión de} sGK1 ^alta. Este estudio proporciona una sólida evidencia traslacional, a partir de tejido prostático derivado de pacientes, de que la señalización del RA regula la expresión de la SGK1 en el cáncer de próstata. Curiosamente, hay una sugerencia de que la expresión de SGK1 está inversamente asociada con el grado y la recurrencia del cáncer. Es posible que la señalización aberrante del RA se asocie con un fenotipo poco diferenciado y un resultado desfavorable. Tras la privación de andrógenos, la expresión del RG aumenta y la expresión de SGK1 se mantiene alta en un subconjunto de pacientes. Se necesitan más estudios para aclarar el papel de la red RA/RG/SGK1 en la resistencia a la castración. Este estudio destaca una interesante interacción entre la señalización del RA, SGK1 y RG en el cáncer de próstata.

Estudios con antagonista del RG. La señalización sostenida del receptor de andrógenos (RA) es necesaria para el desarrollo del cáncer de próstata resistente a la castración (CPRC). Como se ha mostrado anteriormente, tras la terapia de privación de andrógenos para el cáncer de próstata, la expresión del receptor de glucocorticoides (RG) del tumor ^{aumenta. Se sabe que el} rG ^{y el RA comparten secuencias de unión al ADN similares y que regulan varios genes} diana comunes, incluyendo la proteína antiapoptótica quinasa regulada por suero/glucocorticoides 1 (SGK1). Los inventores plantearon la hipótesis de que el aumento de la expresión del RG podría compensar la disminución de la señalización del RA, facilitando así la resistencia a potentes inhibidores del RA mediante la expresión sostenida del inhibidor de la apoptosis. Después del tratamiento con MDV3100, la expresión del RG aumentó en las líneas celulares CWR-22RV1 y LAPC4. Aunque las tasas de proliferación de las líneas celulares que expresan SGK1 y el vector fueron más lentas tras el tratamiento con Dex, hubo una relativa protección contra la muerte celular asociada al MDV3100. Para las células LAPC4, la supervivencia celular en comparación con el control R1881 mejoró con Dex (66 % frente a 47 %, p<0,05). Para 22RV1, el tratamiento con Dex también aumentó la supervivencia de las células a pesar del MDV3100 (151 % frente al 51 % sin Dex). El tratamiento con Dex también provocó un aumento de la secreción de AEP a pesar del tratamiento con MDV3100. Para las células LAPC4, los niveles de AEP secretado (ng/nl) fueron de 22,7 (R1881), 1,4 (MDV3100) y 31,5 (MDV3100+Dex). Para los CWR-22RV1 hubo un antagonismo similar de la actividad de MDV3100 tras el tratamiento con Dex: 10,9, 4,4 y 41,9 para R1881, MDV3100 y MDV3100+Dex, respectivamente. La expresión de SGK1 se redujo con MDV3100, pero aumentó con la adición de Dex. Cuando se añadió mif además del tratamiento con MDV3100, se produjo un deterioro sinérgico de la supervivencia celular. Para las células LAPC4, en comparación con el control R1881+Dex, no hubo cambios en la supervivencia con la adición de Mif solo, pero sí una reducción significativa del 26 % y del 52 % en la muerte celular con MDV3100 y MDV3100+Mif, respectivamente.

Para comprobar si la SGK1 era necesaria para la protección contra la muerte celular mediada por el RG tras la inhibición del RA, las líneas celulares se cultivaron con o sin GSK650394. La supervivencia de las células de ambas líneas celulares se vio afectada tras el tratamiento con el inhibidor de la SGK1. Para LAPC4, en relación con el control R1881+Dex, el % de supervivencia fue del 58 % con MDV3100+Dex y solo del 19 % con la adición de GSK650394 (p < 0,05). Los resultados con las células 22RV1 fueron similares. Las células LAPC4 que sobreexpresan SGK1-Flag estaban protegidas del tratamiento con MDV3100 en comparación con los controles del vector: 61 % frente a 24 % de supervivencia (p < 0,05). Estos datos sugieren que el aumento de la expresión y la actividad del RG antagoniza la inhibición del RA y mantiene la supervivencia de las células tumorales. Asimismo, SGK1 parece ser un mediador corriente abajo de este efecto.

En conclusión, los inventores han demostrado que en el contexto de la TPA de primera línea, la expresión del receptor de glucocorticoides (RG) en los especímenes de cáncer de próstata humano aumenta en comparación con los que no ^{han sido tratados con TPA. Entendiendo que el CPRC está estimulado por la señalización del} Ra, ^{y que los inhibidores} del RA de segunda generación, como MDV3100, inhiben potentemente el RA en este entorno, los inventores se propusieron comprobar si la activación del RG podría compensar la reducción de la función del RA en el entorno del CPRC tratado con MDV3100, lo que conduciría a la resistencia a la terapia anti-RA. Los datos preclínicos obtenidos hasta la fecha respaldan el concepto de que el aumento de la actividad del RG en el CPRC tratado con inhibidores del RA, como MDV3100, puede compensar la disminución de la actividad del RA y proteger las células del CPRC de la muerte celular asociada a MDV3100 (y a otros inhibidores del RA). En los modelos preclínicos de los inventores con líneas celulares de CPRC, la adición de MDV3100 aumenta significativamente el nivel de expresión del RG en un plazo de 3-7 días. Asimismo, con la adición de un inhibidor del RG, tal como mifepristona, la actividad del RG puede ser superada, restaurando la disminución de la proliferación observada con MDV3100 en ausencia de activación del RG. Clínicamente, esto tiene implicaciones potenciales de alto nivel. Los pacientes con CPRC tienen hormonas endógenas circulantes y locales (glucocorticoides) que pueden activar el RG al valor inicial del estudio. Asimismo, Los pacientes con CPRC suelen ser tratados con dosis más altas de glucocorticoides sintéticos utilizados por sus propiedades antiinflamatorias. Por tanto, Los pacientes con CPRC tratados con MDV3100 pueden tener activados los RG en sus cánceres de próstata, lo que podría generar resistencia a la inhibición del RA en función de los datos descritos anteriormente. Por tanto, los inventores creen que un inhibidor del RG sinergizará con los inhibidores del RA de segunda generación, tales como MDV3100, y retrasará la aparición de la progresión del CPRC en los pacientes tratados con la combinación en comparación con los pacientes tratados con MDV3100 solo.

Todas las composiciones y métodos divulgados y reivindicados en el presente documento pueden realizarse y ejecutarse sin excesiva experimentación a la luz de la presente divulgación.

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Claims (16)

REIVINDICACIONES

1. Una combinación de un antagonista del receptor de glucocorticoides (RG) y un antagonista del receptor de andrógenos (RA) o una terapia de privación de andrógenos, para su uso en un método de tratamiento de un cáncer de próstata resistente a la castración en un sujeto, en donde dicho antagonista del RA se selecciona entre MDV3100, ARN-509, flutamida, bicalutamida, nilutamida y acetato de ciproterona.

2. La combinación para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicho antagonista del RG es:

(a) mifepristona;

(b) se selecciona entre el grupo que consiste en pirimidinedionas, azadecalinas y aril pirazolo azadecalinas; (c) se administra por vía sistémica, regional o local a un sitio del tumor, opcionalmente en donde el antagonista del RG se administra por vía oral, intravenosa, intraarterial, en la vasculatura del tumor o por vía intratumoral; y/o (d) se administra más de una vez.

3. La combinación para su uso de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde dicho sujeto presenta:

(a) un cáncer de próstata privado de andrógenos;

(b) un cáncer de próstata con una expresión de RG elevada; o

(c) un cáncer de próstata metastásico o recurrente.

4. La combinación para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde dicho sujeto:

(a) ha sido o está siendo tratado con terapia de privación de andrógenos; y/o

(b) ha sido tratado con un antagonista del RA.

5. La combinación para su uso de acuerdo con la reivindicación 4, en donde:

(a) dicha terapia de privación de andrógenos comprende un tratamiento con leuprolida goserelina, triptorelina, histrelina, degerelix o castración quirúrgica; o

(b) el antagonista del RA es MDV3100, ARN-509, flutamida, bicalutamida, nilutamida, o acetato de ciproterona.

6. La combinación para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde dicho sujeto es tratado con una segunda terapia contra el cáncer de próstata adicional.

7. La combinación para su uso de acuerdo con la reivindicación 6, en donde dicha terapia contra el cáncer de próstata adicional es:

(a) una terapia de privación de andrógenos;

(b) un inhibidor de la síntesis de andrógenos; o

(c) una quimioterapia, radioterapia, crioterapia, inmunoterapia o cirugía convencional.

8. La combinación para su uso de acuerdo con la reivindicación 7, en donde:

(a) dicha terapia de privación de andrógenos comprende un tratamiento con leuprolida goserelina, triptorelina, histrelina, o castración quirúrgica; o

(b) el inhibidor de la síntesis de andrógenos se selecciona entre ketococonazol, abiraterona, TAK-700 y TOK001.

9. La combinación para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el antagonista del RA es MDV3100.

10. La combinación para su uso de acuerdo con la reivindicación 6, en donde la terapia contra el cáncer de próstata adicional se suministra antes de, después o al mismo tiempo que dicho antagonista del RG.

11. La combinación para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, comprendiendo además el método:

(a) evaluar la expresión del RG en un tejido de cáncer de próstata de dicho sujeto; y/o

(b) evaluar la expresión del receptor de andrógenos en un tejido de cáncer de próstata de dicho sujeto.

12. La combinación para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la administración del antagonista del RG al sujeto:

(a) inhibe la progresión del cáncer de próstata;

(b) evita el desarrollo del cáncer de próstata; y/o

(c) inhibe la actividad del receptor de glucocorticoides en los tejidos de cáncer de próstata.

13. Un antagonista del RG para su uso en un método de tratamiento del cáncer de próstata resistente a la castración en un sujeto, comprendiendo el método administrar el antagonista del RG a dicho sujeto en combinación con un antagonista del RA o una terapia de privación de andrógenos, en donde dicho antagonista del RA se selecciona entre MDV3100, ARN-509, flutamida, bicalutamida, nilutamida y acetato de ciproterona.

14. El antagonista del RG para su uso de acuerdo con la reivindicación 13, en donde:

(a) el tumor de dicho sujeto se ha vuelto resistente a una terapia anti-RA, y el método comprende añadir el antagonista del RG a su terapia; o

(b) el método comprende alternar administraciones a dicho sujeto del antagonista del RA y del antagonista del RG.

15. Un antagonista del RA o terapia de privación de andrógenos para su uso en un método de tratamiento del cáncer de próstata resistente a la castración en un sujeto, comprendiendo el método administrar el antagonista del RA o una terapia de privación de andrógenos en combinación con un antagonista del RG a dicho sujeto, en donde dicho antagonista del RA se selecciona entre MDV3100, ARN-509, flutamida, bicalutamida, nilutamida y acetato de ciproterona.

16. La combinación para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, o el antagonista del RG para su uso de acuerdo con la reivindicación 13, o el antagonista del RA o terapia de privación de andrógenos para su uso de acuerdo con la reivindicación 15, en donde la terapia de privación de andrógenos se selecciona entre leuprorelina goserelina, triptorelina, histrelina y degerelix.