ES2877365T3 - Lípidos oxidados en el tratamiento de dolor crónico o neuropático - Google Patents

Lípidos oxidados en el tratamiento de dolor crónico o neuropático Download PDF

Info

Publication number
ES2877365T3
ES2877365T3 ES16156194T ES16156194T ES2877365T3 ES 2877365 T3 ES2877365 T3 ES 2877365T3 ES 16156194 T ES16156194 T ES 16156194T ES 16156194 T ES16156194 T ES 16156194T ES 2877365 T3 ES2877365 T3 ES 2877365T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
lipid
antagonist
chemotherapy
treatment
individual
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES16156194T
Other languages
English (en)
Inventor
Marco Sissignano
Gerd Geisslinger
Michael John Parnham
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fraunhofer Gesellschaft zur Forderung der Angewandten Forschung eV
Goethe Universitaet Frankfurt am Main
Original Assignee
Fraunhofer Gesellschaft zur Forderung der Angewandten Forschung eV
Goethe Universitaet Frankfurt am Main
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fraunhofer Gesellschaft zur Forderung der Angewandten Forschung eV, Goethe Universitaet Frankfurt am Main filed Critical Fraunhofer Gesellschaft zur Forderung der Angewandten Forschung eV
Application granted granted Critical
Publication of ES2877365T3 publication Critical patent/ES2877365T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A61K31/201—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids having one or two double bonds, e.g. oleic, linoleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/336—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having three-membered rings, e.g. oxirane, fumagillin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/28—Neurological disorders
    • G01N2800/2842—Pain, e.g. neuropathic pain, psychogenic pain
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/50—Determining the risk of developing a disease
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/92—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving lipids, e.g. cholesterol, lipoproteins, or their receptors

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Un procedimiento para la predicción de la aparición o la duración del dolor crónico o neuropático en un individuo, que comprende: a) separar el plasma de la muestra de sangre; b) medir la concentración de un lípido oxidado en el plasma; c) determinar la proporción de la elevación del lípido oxidado; en el que dicho lípido oxidado se selecciona del grupo que consiste en: 9,10-EpOME (ácido(±)9(10)-epoxi-12Z- octadecaenoico), 9-HODE (ácido(±)9-hidroxi-10 (E), 12(Z)-octadecadienoico) y 13-HODE (ácido(±)13-hidroxi-9(Z), 11(E)-octadecadienoico), en el que dicho dolor crónico o neuropático es neuropatía periférica debido a quimioterapia, y en el que la concentración del lípido se mide 24 horas después del inicio de la quimioterapia.

Description

DESCRIPCIÓN
Lípidos oxidados en el tratamiento de dolor crónico o neuropático
Campo de la invención
La presente invención se refiere al uso de lípidos oxidados como biomarcadores en la determinación y tratamiento del dolor crónico o neuropático; en particular, el dolor neuropático periférico inducido por quimioterapia (CIPNP).
Descripción
El dolor neuropático es un síndrome de dolor crónico o persistente que puede resultar de daño al sistema nervioso, los nervios periféricos, el ganglio de la raíz dorsal, la raíz dorsal o al sistema nervioso central. Los síndromes de dolor neuropático incluyen alodinia, diversas neuralgias tal como la neuralgia postherpética y la neuralgia del trigémino, el dolor fantasma y los síndromes de dolor regional complejo, tal como la distrofia simpática refleja y la causalgia. La causalgia se caracteriza a menudo por un dolor ardiente espontáneo combinado con hiperalgesia y alodinia. Trágicamente, no existe un procedimiento para tratar de manera adecuada, predecible y específica el dolor neuropático establecido, ya que los procedimientos de tratamiento actuales para el dolor neuropático consisten simplemente en tratar de ayudar al paciente a sobrellevar la situación mediante terapia psicológica u ocupacional, en lugar de reducir o eliminar el dolor experimentado. El tratamiento del dolor neuropático o crónico es un desafío para los médicos y los pacientes, ya que no existen medicamentos que se dirijan específicamente a la afección, y dado que los medicamentos que se usan actualmente producen solo un pequeño alivio y se basan en su eficacia en las afecciones de dolor agudo o en su eficacia en aliviar los efectos secundarios tal como la ansiedad y la depresión. La incidencia del dolor crónico está aumentando en la sociedad y su carga social es enorme tanto en el cuidado de la salud como en la pérdida de productividad. Actualmente no existen terapias científicamente validadas para aliviar el dolor crónico. Como resultado, la comunidad de la salud se enfoca en el 'manejo del dolor' usando terapias multimodales al mismo tiempo con la esperanza de proporcionar alguna mejora en la calidad de vida. Por lo tanto, existe una necesidad urgente por fármacos que puedan aliviar el dolor crónico.
El dolor neuropático periférico inducido por quimioterapia (CIPNP) es un efecto secundario grave limitante de la dosis de citostáticos, tal como taxanos, derivados del platino, alcaloides de la vinca y otros. Los síntomas generalmente comienzan con un hormigueo y pueden provocar ardor, dolor punzante y molesto, así como alodinia mecánica y por frío. Debido al CIPNP, algunos pacientes interrumpen la terapia contra el cáncer con citostáticos demasiado pronto, lo que aumenta el riesgo de progresión del tumor. Desafortunadamente, muchas sustancias prometedoras que ya están aprobadas para el tratamiento de diferentes tipos de dolor neuropático, como la gabapentina o la amitriptilina, parecen tener poco o ningún efecto analgésico en la monoterapia de CIPNP. Es necesario comprender los mecanismos celulares y moleculares para tratar o incluso prevenir el CIPNP y para poder mejorar la tasa de éxito general de la terapia citostática.
La intervención terapéutica temprana es crucial para la terapia del dolor neuropático [1, 2]. Por esta razón, los biomarcadores son especialmente importantes para el dolor neuropático y representan importantes marcadores de diagnóstico que pueden usarse para estrategias terapéuticas. Particularmente durante el tratamiento de pacientes con citostáticos o durante la diabetes, la aparición y la intensidad del dolor neuropático varía mucho entre los pacientes. En el caso ideal, los biomarcadores se pueden medir a partir del plasma de los pacientes y analizar sus concentraciones. Esto se puede utilizar para predecir la aparición, la intensidad y la duración del dolor neuropático incluso antes de que aparezcan los primeros síntomas en los pacientes [3]. En este sentido, los pacientes de alto riesgo podrían ser tratados de forma preventiva con fármacos eficaces para el tratamiento del dolor neuropático, tal como amitriptilina, gabapentina o duloxetina lo más temprano posible para reducir o incluso evitar el dolor neuropático.
Actualmente, no hay biomarcadores disponibles para la predicción de la aparición, la intensidad o la duración del dolor neuropático en los pacientes. Sin embargo, existe una gran demanda de dichos biomarcadores porque el dolor neuropático todavía es difícil de tratar y puede persistir durante toda la vida, especialmente cuando ya está completamente establecido. Existen varios estudios sobre causas genéticas [7], tal como polimorfismos de un solo nucleótido o mutaciones puntuales, que pueden explicar algunos síndromes de dolor (como el síndrome de dolor episódico familiar [8]), sin embargo, hasta el día de hoy, no existen biomarcadores predictivos, que podrían usarse para juzgar la susceptibilidad de una persona a desarrollar dolor neuropático.
El problema anterior se resuelve en un primer aspecto mediante un lípido oxidado para uso en el diagnóstico, prevención o tratamiento del dolor crónico o neuropático, que es la neuropatía periférica debido a quimioterapia.
El epoxilípido se selecciona del grupo que consiste en: 9,10-EpOME (ácido(±)9(10)-epoxi-12Z-octadecaenoico), 9-Ho De (ácido(±)9-hidroxi-10(E),(Z)-octadecadienoico) y 13-Ho De (ácido(±)13-hidroxi-9(Z),11(E)-octadecadienoico), lo más preferentemente es 9,10-EpOME (ácido (±)9(10)-epoxi-12Z-octadecaenoico).
Las realizaciones preferentes de la presente invención incluyen:
El lípido para uso en el diagnóstico, prevención o tratamiento del dolor neuropático en un individuo, en el que dicho dolor neuropático es dolor neuropático periférico inducido por quimioterapia (CIPNP).
La presente invención también proporciona el uso del lípido oxidado como se indicó anteriormente como un biomarcador en un procedimiento para la predicción de la aparición, la intensidad o la duración del dolor neuropático en un individuo.
En otra realización de la presente invención, la concentración del lípido oxidado se mide 24 horas después del inicio de la quimioterapia.
En una realización adicional de la invención, la concentración del lípido oxidado se mide a partir de plasma. En otra realización, la concentración se mide usando LC-MS/MS.
De acuerdo con la presente invención, el tratamiento del dolor en un individuo comienza cuando la concentración del epoxilípido y/o lípido oxidado es al menos 20%, preferentemente 30%, más preferentemente 40% mayor que el valor normal.
La presente invención proporciona además un procedimiento para la predicción la aparición, la intensidad o la duración del dolor neuropático en un individuo, que comprende:
a) separar el plasma de la muestra de sangre;
b) medir la concentración de un lípido oxidado en el plasma;
c) determinar la proporción de la elevación del lípido oxidado.
El epoxilípido se selecciona del grupo que consiste en: 9,10-EpOME (ácido(±)9(10)-epoxi-12Z-octadecaenoico), 9-HODE (ácido (±)9-hidroxi-10(E),12(Z)-octadecadienoico) y 13-HODE (ácido(±)13-hidroxi-9(Z),11(E)-octadecadienoico), preferentemente es 9,10-EpOME (ácido (±)9(10)-epoxi-12Z-octadecaenoico).
La concentración del lípido oxidado se mide tan pronto como 24 horas después del comienzo de la quimioterapia.
La presente invención proporciona además un tratamiento terapéutico de la neuropatía periférica debido a la quimioterapia en un individuo, caracterizado porque la terapia comienza antes de que aparezcan los primeros síntomas en el paciente.
El tratamiento de la neuropatía periférica debido a la quimioterapia comprende un antagonista de la epoxigenasa del citocromo P450 (CYP).
La terapia comienza después de que se haya detectado la elevación de un lípido oxidado de acuerdo con el procedimiento de esta invención.
En algunas realizaciones de la invención, el antagonista de CYP se selecciona del grupo que consiste en un antagonista de CYP1A, CYP2B, CYP2G, CYP2E, y preferentemente CYP2J. Lo más preferentemente, el antagonista de CYP es un antagonista de un homólogo de mamífero de CYP2J2 (antagonista de CYP2J2), preferentemente CYP2J2 humano, tal como telmisartán, aripiprazol o lo más preferentemente terfenadina.
Otro tratamiento terapéutico preferente es el uso de cualquier antagonista de CYP2J2, preferentemente un antagonista selectivo de CYP2J2. El término "antagonista selectivo de CYP2J2" se refiere a antagonistas de CYP2J2 que inhiben selectivamente la actividad, función o expresión de CYP2J2 pero no de otras enzimas relacionadas tal como, por ejemplo, moléculas de CYP3A. Para identificar si un antagonista candidato es un antagonista de CYP2J2, se puede emplear un ensayo de resplandor del citocromo P450 luminógeno. Las proteínas CYP catalizan la formación de metabolitos del ácido araquidónico. Los ensayos de CYP luminógeno utilizan prosustratos para la reacción de generación de luz de la luciferasa. Los CYP convierten los prosustratos en luciferina o un éster de luciferina, que produce luz en una segunda reacción con una mezcla de reacción de luciferasa denominada Reactivo de Detección de Luciferina (LDR). La cantidad de luz producida en la segunda reacción es proporcional a la actividad de CYP.
Otra terapia para el dolor comprende la inhibición de la actividad de, en particular, CYP2J2 que produce el compuesto metabólico 9,10-EpOME de acuerdo con la invención, un sensibilizador de la percepción del dolor mediado por canales iónicos. Inesperadamente, la inhibición de CYP2J2 de acuerdo con la invención demostró ser eficaz in vivo para aliviar el dolor neuropático inducido por paclitaxel en un modelo de ratón, lo que indica el uso de antagonistas de CYP2J2 como analgésico contra el dolor neuropático, en particular CIPNP.
Una realización adicional de la invención se refiere a la prevención o el tratamiento del dolor antes mencionado, que comprende la administración de dicho antagonista de CYP de la invención a un individuo que padece dicho dolor, y en el que dicho individuo recibió, recibe o recibirá quimioterapia. Por lo tanto, en las realizaciones preferentes, el individuo es un individuo que padece o está diagnosticado con una enfermedad cancerosa.
La quimioterapia en el contexto de la invención implica preferentemente la administración de un agente quimioterapéutico a un individuo necesitado de dicho tratamiento seleccionado de agentes antineoplásicos basados en pirimidinona tal como citarabina, 5-flurouracilo o agentes de platino, tal como cisplatino, o taxanos, tal como paclitaxel, docetaxel o cabazitaxel, o sus derivados. Es sabido que tales agentes quimioterapéuticos inducen dolor neuropático, en particular esto es conocido para los taxanos, que por lo tanto se prefieren en el contexto de la invención. El más preferente es paclitaxel.
En modelos animales de dolor neuropático [4, 5], se utiliza LC-MS/MS para realizar el perfil lipídico e, inesperadamente, se ha observado un aumento de las concentraciones de epoxilípidos específicos y lípidos oxidados de la vía del ácido araquidónico y linoleico. En particular, las concentraciones de 9,10-EpOME (ácido(±)9(10)-epoxi-12Z-octadecaenoico), 9-HODE (ácido(±)9-hidroxi-10(E),12(Z)-octadecadienoico) y 13-HODE (ácido(±)13-hidroxi-9(Z),11(E)-octadecadienoico) (Figura 1-3) se encuentran elevadas en varios tejidos relevantes para el dolor y en el plasma después del tratamiento con paclitaxel u oxaliplatino que conduce a dolor neuropático periférico. Estas concentraciones aumentadas ya pueden medirse 24 horas después de la inyección de paclitaxel u oxaliplatino en ratones, incluso antes de que los animales desarrollen dolor (Figura 1). Por lo general, en estos modelos se necesitan aproximadamente siete días hasta que se desarrolla la neuropatía periférica (Figura 1, derecha) [4-6]. Además, las concentraciones de los metabolitos del ácido araquidónico 12-HETE (ácido(±)12-hidroxi-5Z, 8Z,10E,14Z-eicosatetraenoico), 15-HETE (ácido (±)15-hidroxi-5Z,8Z,11Z,13E-eicosatetraenoico) y 6-ceto-prostaglandina-F1a se encuentran disminuidas en los tejidos relevantes para el dolor (Figura 2). En conjunto, estos resultados implican una cuantificación basada en espectrometría de masas de la proporción de 9,10-EpOME y otros lípidos oxidados en plasma como biomarcadores prometedores para predecir mayores riesgos de desarrollo de dolor neuropático. Si esto tiene éxito en los pacientes, un médico podría, por ejemplo, tratar a pacientes con concentraciones elevadas de 9,10-EpOME o 9-HODE en el plasma de forma preventiva para reducir o incluso prevenir la aparición de dolor neuropático.
9,10-EpOME y los demás lípidos oxidados se pueden medir fácilmente a partir del plasma (Figura 4). Sólo se requiere un pequeño volumen de aproximadamente 100 pl para este análisis. Los pacientes con cáncer que sufren efectos adversos de la quimioterapia o los pacientes con diabetes deben someterse a análisis de sangre con regularidad, de modo que una pequeña parte de la sangre pueda utilizarse para el análisis de lípidos sin estrés ni distracción adicionales. La medición de lípidos con LC-MS/MS es un procedimiento estándar (descrito a continuación) que ya se ha establecido en muchos laboratorios, por lo que el análisis de lípidos oxidados del plasma se puede realizar rápidamente, generalmente dentro de un día después de obtener el plasma de los pacientes Para la detección de estos lípidos también se pueden utilizar otros procedimientos para medir estos biomarcadores o sus proporciones, tal como ensayos inmunológicos enzimáticos como un kit disponible comercialmente.
Tabla 1: Clasificación química formal de biomarcadores de lípidos putativos
Figure imgf000004_0001
Tabla 2: Grupo de lípidos oxidados medidos por LC-MS/MS contiene:
Figure imgf000005_0001
Figure imgf000006_0001
Terminología:
• Lípido oxidado: Un lípido (ácido graso) que ha sido oxidado por una enzima oxigenasa (COX, ciclooxigenasa; LOX, lipoxigenasa o CYP, Citocromo-P450-Epoxigenasa). Estos lípidos oxidados tienen funciones de señalización en las células y median en muchas funciones biológicas diferentes. La oxidación generalmente consiste en la adición de un grupo reactivo a la molécula (generalmente grupo hidróxido o epóxido ^ epoxilípido).
• Dolor neuropático periférico: Una alteración de la función o cambio patológico en un nervio sensorial que causa dolor. Esto está mediado por una lesión o enfermedad del sistema nervioso somatosensorial periférico y generalmente aparece como dolor en las extremidades (pies o manos) causado por estímulos mecánicos leves (tal como el tacto) o temperaturas frías. El dolor neuropático periférico, también puede aparecer sin estimulaciones (dolor espontáneo). •
• Dolor neuropático inducido por quimioterapia: Dolor neuropático que es un efecto secundario (evento adverso) de una terapia contra el cáncer y es causado por la toxicidad de las terapias contra el cáncer.
• Citostáticos: Sustancias farmacológicas para el tratamiento del cáncer, tal como paclitaxel u oxaliplatino.
• Amitriptilina, gabapentina y duloxetina: Fármacos aprobados para el tratamiento del dolor neuropático.
• LC-MS/MS: Cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem, procedimiento analítico acoplado para la determinación y cuantificación específica de analitos de bajo peso molecular en muestras biológicas.
• InChIKey: Identificador Químico Internacional para sustancias químicas que ha sido empleado por la IUPAC (Unión Internacional de Química Pura y Aplicada) para la identificación específica de sustancias químicas.
Figuras:
Figura 1: (A) Concentraciones de 9,10-EpOME en tejido nervioso (nervio ciático, ganglios de la raíz dorsal lumbar (DRG) y asta dorsal de la médula espinal 24 h después de la inyección i.p. de paclitaxel (6 mg / kg) u oxaliplatino (3 mg / kg). Los datos se muestran como media ±SEM de cinco ratones por grupo; ANOVA de una vía, * p <0,05, *** p <0,001. (B) transcurso de tiempo de alodinia mecánica después de la inyección de paclitaxel en ratones.
Figura 2: (A) Concentraciones de 9,10-EpOME en tejido nervioso (nervio ciático, ganglios de la raíz dorsal lumbar (DRG) y asta dorsal de la médula espinal 8 días después de múltiples inyecciones i.p. de paclitaxel (4 x 2 mg / kg, inyección cada dos días). (B) Concentraciones de 6-ceto-PGF1a en tejido nervioso (nervio ciático, ganglios de la raíz dorsal lumbar y asta dorsal de la médula espinal 8 días después de múltiples inyecciones i.p. de paclitaxel (4 x 2 mg / kg, inyección cada dos días). Concentraciones de 12S- (C) y 15S-HETE (D) 8 días después de la inyección i.p. de paclitaxel (6 mg / kg) en tejido nervioso. Los datos se muestran como media ±SEM de cinco ratones por grupo; ANOVA unidireccional, * p <0,05, ** p <0,01, nd: no determinado.
Figura 3: Concentraciones de 13-HODE (A) y 9-HODE (B) en el tejido nervioso (nervio ciático, ganglios de la raíz dorsal lumbar (DRG) y el asta dorsal de la médula espinal 10 días después de la inyección i.p. de oxaliplatino (3 mg / kg, inyección cada dos días). Los datos se muestran como media ±SEM de cinco ratones por grupo; ANOVA unidireccional, * p <0,05.
Figura 4: Las concentraciones plasmáticas de 9,10-EpoME y su metabolito 9,10-DiHOME 8 días después del tratamiento con paclitaxel (6 mg / kg) pueden reducirse mediante la administración de telmisartán (10 mg / kg, 2 h). Los datos se muestran como media ±SEM de cinco ratones por grupo; ANOVA unidireccional, * p <0,05.
Ejemplos
Materiales y Procedimientos
Animales
Todos los experimentos con animales se realizaron de acuerdo con las recomendaciones de la Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio de los Institutos Nacionales de Salud y aprobados por los Comités de Ética para la Investigación Animal (Darmstadt) locales con el número de permiso F95/42. Para todos los experimentos de comportamiento se utilizaron sólo ratones C57BL/6N machos de 6-12 semanas de edad adquiridos en empresas comerciales de cría (Charles River, Sulzfeld, Alemania, Janvier, Le Geneset-Saint-Isle, FR). Para comparar los umbrales mecánicos se utilizaron compañeros de camada emparejados por edad y sexo como control.
Modelos de dolor neuropático periférico inducido por quimioterapia
Se disolvió paclitaxel en Cremophor EL/Etanol 1: 1 y se diluyó en solución salina. La dosis para inyección intraperitoneal se estableció en 6 mg/kg como se describió anteriormente [4]. El oxaliplatino se disolvió en solución salina. La dosis para inyección intraperitoneal se estableció en 3 mg/kg como se describió anteriormente [5].
Medición de lípidos oxidados a partir de plasma usando LC-MS/MS
Estándares y estándares internos
Para la medición de epoxilípidos se generan soluciones madre de HETE de los analitos 9,10-EpOME, 9-HODE, 13HODE, 12-HETE y 15-HETE y estándares internos 9,10-EpOME-d4, 9-HODE-d4, 13-HODE-d4, 12-HETE-d4 y 15-HETE-d4 con concentraciones de 2500 ng/ml en etanol. Los estándares de trabajo se obtuvieron mediante dilución adicional con un intervalo de concentración de 0,1-250 ng/ml para todos los analitos.
Para los prostanoides, se prepararon soluciones madre con 50.000 ng/ml de todos los analitos (6-ceto-PGF-i a ) y estándares internos (6-ceto-PGF1a -d4) en metanol. Los estándares de trabajo se obtuvieron mediante dilución adicional con un intervalo de concentración de 0,1-1.250 ng/ml.
Extracción de lípidos a partir de plasma
Los lípidos se extraen dos veces con 600 pl de acetato de etilo mediante extracción líquido-líquido. Las fases orgánicas combinadas se eliminaron a una temperatura de 45°C bajo una suave corriente de nitrógeno. Los residuos se reconstituyeron con 50 pl de metanol/agua/hidroxitolueno butilado (BHT) (50:50:10-3, v/v/v) (EpOME, HODE y HETE), o 50 pl de acetonitrilo/agua/ácido fórmico (20:80:0,0025, v/v/v) (6-ceto-PGF1a) y luego se centrifugó durante 2 min a 10.000 g y se transfirió a viales de vidrio en espera de análisis.
Instrumentación para la medición de lípidos
El sistema LC-MS/MS consiste en QTrap 5500 (AB Sciex, Darmstadt, Alemania) equipado con una fuente Turbo-V que funciona en modo de ionización por electropulverización negativa, una bomba HPLC binaria Agilent 1200 y un desgasificador (Agilent, Waldbronn, Alemania), y un muestreador automático HTC Pal (CTC analytics, Zwingen, Suiza). El nitrógeno de alta pureza para el espectrómetro de masas se produjo mediante un generador de nitrógeno NGM 22-LC-MS (cmc Instruments, Eschborn, Alemania).
Para la separación cromatográfica de EpOME, HODE y HETE, se utilizaron una columna y una precolumna Gemini NX C18 (150 x 2 mm de diámetro interior, tamaño de partícula de 5 pm y tamaño de poro de l l 0 A; Phenomenex, Aschaffenburg, Alemania). Para la separación cromatográfica de prostanoides se utilizó una columna Synergi 4u Hydro-RP (150 x 2 mm de diámetro interior, 4 pm, Phenomenex, Aschaffenburg, Alemania) y una precolumna del mismo material.
Gradiente LC y análisis de datos
Para las mediciones de EpOME, HODE y HETE se utilizó un gradiente lineal a un caudal de 0,5 ml/min con un tiempo de ejecución total de 17,5 min. La fase móvil A consiste en agua: amoníaco (100:0,05, v/v) y la fase móvil B de acetonitrilo amoníaco (100:0,05, v/v). El gradiente cambió de 85% A a 10% en 12 min. Estas condiciones se mantuvieron durante 1 min. Luego, la fase móvil volvió a cambiar a 85% A en 0,5 min y se mantuvo durante 4 min para reequilibrar la columna.
Para la separación cromatográfica de prostanoides se utilizó una columna Synergi 4u Hydro-RP (150 x 2 mm de diámetro interior, 4 mm, Phenomenex, Aschaffenburg, Alemania) y una precolumna del mismo material. La separación cromatográfica se llevó a cabo en modo de elución en gradiente a un caudal de 0,3 ml / min. El tiempo total de ejecución fue de 16 min. La fase móvil A consistió en agua / ácido fórmico (100:0,0025, v/v) y la fase móvil B de acetonitrilo / ácido fórmico (100:0,0025, v/v). El gradiente lineal comenzó con 90% A durante 1 min y luego cambió a 60% A en 1 min. Se mantuvo durante 1 min al 60% en la fase A. En 1 min, la fase móvil cambió al 50% en la fase A y se mantuvo durante 2 min. En 2 min, la fase móvil cambió a 10% A y se mantuvo durante 1 min. La composición del gradiente volvió a cambiar a 90% A en un minuto y se mantuvo durante 6 minutos para reequilibrar la columna.
Se inyectó un volumen de 20 pl (EpOME, HODE y HETE) o 45 pl (prostanoides) de las muestras extraídas en el sistema LC-MS/MS. La cuantificación se realizó con el software Analyst versión 1.6 (Applied Biosystems) utilizando el procedimiento estándar interno (espectrometría de masas por dilución de isótopos). Las proporciones del área del pico del analito y el área del estándar interno (eje y) se representaron frente a la concentración (eje x), y las curvas de calibración se calcularon mediante regresión de mínimos cuadrados con ponderación de concentración de 1 /cuadrado.
Referencias
1. Finnerup NB, Attal N, Haroutounian S, McNicol E, Baron R, Dworkin RH, Gilron I, Haanpaa M, Hansson P, Jensen TS et al: Pharmacotherapy for neuropathic pain in adults: a systematic review and meta-analysis. Lancet Neurol 2015, 14(2):162-173.
2. Dworkin RH, O'Connor AB, Audette J, Baron R, Gourlay GK, Haanpaa ML, Kent JL, Krane EJ, Lebel AA, Levy RM et al: Recommendations for the pharmacological management of neuropathic pain: an overview and literature update. Mayo Clin Proc 2010, 85(3 Suppl):S3-14.
3. Borsook D, Becerra L, Hargreaves R: Biomarkers for chronic pain and analgesia. Part 1: the need, reality, challenges, and solutions. Discov Med 2011, 11(58):197-207.
4. Alessandri-Haber N, Dina OA, Joseph EK, Reichling DB, Levine JD: Interaction of transient receptor potential vanilloid 4, integrin, and SRC tyrosine kinase in mechanical hyperalgesia. J Neurosci 2008, 28(5):1046-1057.
5. Nassini R, Gees M, Harrison S, De Siena G, Materazzi S, Moretto N, Failli P, Preti D, Marchetti N, Cavazzini A et al: Oxaliplatin elicits mechanical and cold allodynia in rodents via TRPA1 receptor stimulation. Pain 2011, 152(7):1621 -1631.
6. Materazzi S, Fusi C, Benemei S, Pedretti P, Patacchini R, Nilius B, Prenen J, Creminon C, Geppetti P, Nassini R: TRPA1 and TRPV4 mediate paclitaxel-induced peripheral neuropathy in mice via a glutathione-sensitive mechanism. Pflugers Arch 2012, 463(4):561-569.
7. Bennett DL, Woods CG: Painful and painless channelopathies. Lancet Neurol 2014.
8. Kremeyer B, Lopera F, Cox JJ, Momin A, Rugiero F, Marsh S, Woods CG, Jones NG, Paterson KJ, Fricker FR et al: A gain-of-function mutation in TRPA1 causes familial episodic pain syndrome. Neuron 2010, 66(5):671-680
Poulsen J N et al; "Ibudilast and SKF modulate cisplatin-evoked PGE2 release from isoalted trigeminal satellite glial cells" GLIA, vol. 61, Suppl 1; July 2013, pg S109; 11 th European Meeting on Glial cell function in health and disease, Berlin, Germany July 3-6, 2013.

Claims (10)

REIVINDICACIONES
1. Un procedimiento para la predicción de la aparición o la duración del dolor crónico o neuropático en un individuo, que comprende:
a) separar el plasma de la muestra de sangre;
b) medir la concentración de un lípido oxidado en el plasma;
c) determinar la proporción de la elevación del lípido oxidado;
en el que dicho lípido oxidado se selecciona del grupo que consiste en: 9,10-EpOME (ácido(±)9(10)-epoxi-12Z-octadecaenoico), 9-HODE (ácido(±)9-hidroxi-10 (E), 12(Z)-octadecadienoico) y 13-HODE (ácido(±)13-hidroxi-9(Z), 11(E)-octadecadienoico), en el que dicho dolor crónico o neuropático es neuropatía periférica debido a quimioterapia, y en el que la concentración del lípido se mide 24 horas después del inicio de la quimioterapia.
2. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicho lípido es 9,10-EpOME (ácido (±)9(10)-epoxi-12Z-octadecaenoico.
3. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en el que la concentración se mide a partir de plasma.
4. Procedimiento de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, en el que la concentración se mide utilizando LC-MS/MS.
5. Un antagonista de la expoxigenasa del citocromo P450 (CYP) para uso en el tratamiento de neuropatía periférica debido a quimioterapia en un individuo, caracterizado porque la terapia comienza antes de que aparezcan los primeros síntomas en un paciente, después de que se haya detectado la elevación de un lípido oxidado, en el que dicho lípido se selecciona del grupo que consiste en: 9,10EpOME (ácido(±)9(10)-epoxi-12Z-octadecaenoico), 9-HODE (ácido(±)9-hidroxi-10(E),12(Z)-octadecadienoico) y 13-h Od E (ácido(±)13-hidroxi-9(Z),11(E)-octadecadienoico), en el que el tratamiento del dolor en un individuo comienza cuando la concentración del lípido es al menos 20% mayor que el valor normal, y en el que la concentración del lípido se mide 24 horas después del inicio de la quimioterapia.
6. Antagonista de la expoxigenasa del citocromo P450 (CYP) para uso en el tratamiento de la neuropatía periférica debido a la quimioterapia en un individuo de acuerdo con la reivindicación 5, en el que el tratamiento del dolor en un individuo comienza cuando la concentración del lípido es al menos superior en un 30% al valor normal.
7. Antagonista de la expoxigenasa del citocromo P450 (CYP) para uso en el tratamiento de la neuropatía periférica debido a la quimioterapia en un individuo de acuerdo con la reivindicación 5 o 6, en el que el tratamiento del dolor en un individuo comienza cuando la concentración del lípido es al menos superior en un 40% al valor normal.
8. Antagonista de la expoxigenasa del citocromo P450 (CYP) para uso en el tratamiento de la neuropatía periférica debido a quimioterapia en un individuo de acuerdo con las reivindicaciones 5 a 7, en el que el antagonista de CYP se selecciona del grupo que consiste en un antagonista de CYP1A, CYP2B, CYP2C, CYp2e y CYP2J.
9. Antagonista de la expoxigenasa del citocromo P450 (CYP) para uso en el tratamiento de la neuropatía periférica debido a quimioterapia en un individuo de acuerdo con la reivindicación 8, en el que el antagonista de c Yp es un antagonista de un homólogo de mamífero de CYP2J2 (antagonista de CYP2J2), tal como telmisartán , aripiprazol o más preferentemente terfenadina.
10. Antagonista de la expoxigenasa del citocromo P450 (CYP) para uso en el tratamiento de la neuropatía periférica debido a quimioterapia en un individuo de acuerdo con las reivindicaciones 5 a 9, en el que la terapia comienza después de que se haya detectado la elevación de un lípido oxidado de acuerdo con los procedimientos reivindicados en las reivindicaciones 1 a 4.
ES16156194T 2016-02-17 2016-02-17 Lípidos oxidados en el tratamiento de dolor crónico o neuropático Active ES2877365T3 (es)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP16156194.9A EP3207926B8 (en) 2016-02-17 2016-02-17 Oxidized lipids in the treatment of chronic or neuropathic pain

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2877365T3 true ES2877365T3 (es) 2021-11-16

Family

ID=55361425

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES16156194T Active ES2877365T3 (es) 2016-02-17 2016-02-17 Lípidos oxidados en el tratamiento de dolor crónico o neuropático

Country Status (2)

Country Link
EP (1) EP3207926B8 (es)
ES (1) ES2877365T3 (es)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20200200775A1 (en) * 2017-04-26 2020-06-25 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Oxidized lipids as biomarkers for neuropathic pain

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2219450A4 (en) * 2007-11-08 2012-01-25 Univ California RELIEF OF NEUROPATHIC PAIN USING EET AND SEH INHIBITORS
US8709391B2 (en) * 2008-11-26 2014-04-29 Board Of Regents Of The University Of Texas System Family of pain producing substances and methods to produce novel analgesic drugs
EP2642293A1 (en) * 2012-03-22 2013-09-25 Nestec S.A. 9-oxo-octadecadienoic acid (9-oxo-HODE)as as biomarker for healthy ageing
EP2985036A3 (en) * 2014-08-14 2016-03-09 Fraunhofer Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. CYP2J2 antagonists in the treatment of pain

Also Published As

Publication number Publication date
EP3207926B1 (en) 2021-03-31
EP3207926B8 (en) 2021-07-14
EP3207926A1 (en) 2017-08-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Frise et al. Clinical iron deficiency disturbs normal human responses to hypoxia
Pijacka et al. Purinergic receptors in the carotid body as a new drug target for controlling hypertension
Leonhardt et al. Evidence for heterodimerization and functional interaction of the angiotensin type 2 receptor and the receptor MAS
Hong et al. Reciprocal changes in vanilloid (TRPV1) and endocannabinoid (CB1) receptors contribute to visceral hyperalgesia in the water avoidance stressed rat
Lecker et al. Tranexamic acid concentrations associated with human seizures inhibit glycine receptors
Fioramonti et al. Ventromedial hypothalamic nitric oxide production is necessary for hypoglycemia detection and counterregulation
Andersson et al. Streptozotocin stimulates the ion channel TRPA1 directly: involvement of peroxynitrite
Morena et al. Training-associated emotional arousal shapes endocannabinoid modulation of spatial memory retrieval in rats
Boccella et al. Ultra-micronized palmitoylethanolamide rescues the cognitive decline-associated loss of neural plasticity in the neuropathic mouse entorhinal cortex-dentate gyrus pathway
Hohmann et al. The G2A receptor (GPR132) contributes to oxaliplatin-induced mechanical pain hypersensitivity
Saito et al. Ascending projections of nociceptive neurons from trigeminal subnucleus caudalis: a population approach
Ma et al. α2δ‐1 couples to NMDA receptors in the hypothalamus to sustain sympathetic vasomotor activity in hypertension
Portelli et al. Inactivation of the constitutively active ghrelin receptor attenuates limbic seizure activity in rodents
Yang et al. Sex-and SERT-mediated differences in stimulated serotonin revealed by fast microdialysis
George et al. Mitochondrial calcium uniporter deletion prevents painful diabetic neuropathy by restoring mitochondrial morphology and dynamics
Yu et al. Dissociated sterol-based liver X receptor agonists as therapeutics for chronic inflammatory diseases
Franke et al. Progression and recovery of Parkinsonism in a chronic progressive MPTP-induction model in the marmoset without persistent molecular and cellular damage
Yoshihara et al. Long-term physical inactivity exacerbates hindlimb unloading-induced muscle atrophy in young rat soleus muscle
ES2891088T3 (es) Métodos de diagnóstico, agentes terapéuticos y usos de los mismos
Kodippili et al. Nitric oxide‐dependent attenuation of noradrenaline‐induced vasoconstriction is impaired in the canine model of Duchenne muscular dystrophy
ES2877365T3 (es) Lípidos oxidados en el tratamiento de dolor crónico o neuropático
Zeng et al. Glial cell line-derived neurotrophic factor ameliorates dextran sulfate sodium-induced colitis in mice via a macrophage-mediated pathway
Rey et al. Oxygen sensing in neurodegenerative diseases: current mechanisms, implication of transcriptional response, and pharmacological modulation
Kondo et al. Changes in hypothalamic neurotransmitter and prostanoid levels in response to NMDA, CRF, and GLP-1 stimulation
US7122326B2 (en) Identification of modulators of neurotransmitter activity of xanthurenic acid