ES2619612T3 - Formulaciones y métodos de tratamiento de afecciones de la piel - Google Patents

Abstract

Formulación líquida para su uso en el tratamiento tópico de psoriasis, que comprende: un fotosensibilizador en la cantidad del 0,001% al 1%, en la que el fotosensibilizador presenta citotoxicidad cuando se expone a la luz en el espectro visible y el fotosensibilizador es hipericina o un derivado de hipericina; y un disolvente orgánico en la cantidad del 25% al 75%, en la que el disolvente orgánico aumenta la permeabilidad de la piel y el disolvente orgánico es dimetilsulfóxido.

Description

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DESCRIPCION

Campo de la invencion

La presente invencion se refiere a formulaciones liquidas para su uso en el tratamiento topico de psoriasis. Antecedentes de la invencion

La terapia fotodinamica (TF) es un tratamiento que usa un compuesto, generalmente denominado fotosensibilizador o agente de fotosensibilizacion, y un tipo particular de luz. Los fotosensibilizadores pueden producirse de manera natural o pueden sintetizarse. Cuando los fotosensibilizadores se exponen a una longitud de onda de luz especffica, ejercen un efecto citotoxico sobre las celulas cercanas, lo que puede producir muerte celular en estas celulas. Se ha mostrado que los fotosensibilizadores presentan actividades anticancerfgenas y antivirales notables.

El linfoma de celulas T cutaneo (LCTC), que incluye micosis fungoide (MF) y sfndrome de Sezary, son tumores malignos de celulas T que migran a la piel y representan los tipos mas comunes de linfoma de celulas T. LCTC afecta a de aproximadamente 25.000 a 50.000 individuos en los Estados Unidos. MF presenta lo mas comunmente implicacion cutanea limitada, manifestado como maculas eritematosas, escamosas o placas finas. A medida que MF progresa, los pacientes desarrollan mas lesiones cutaneas infiltradas (placas gruesas o tumores), y finalmente implicacion de ganglios linfaticos, sangre u organos viscerales. Histopatologicamente, las lesiones cutaneas de MF tempranas se caracterizan por infiltrados de celulas T en la epidermis y dermis superior.

La psoriasis es una enfermedad cutanea autoinmunitaria, cronica caracterizada por inflamacion mediada por celulas T que da como resultado una proliferacion de celulas epidermicas aumentada. Normalmente esta asociada con infiltrados neutrofilos y linfocfticos de celulas T intensos superficialmente en la piel con lesiones. La psoriasis afecta a aproximadamente el 2% de la poblacion total en los eE.UU. Segun los National Institutes of Health, hasta 7,5 millones de americanos tienen psoriasis. Los sexos se ven afectados por igual, y la aparicion puede producirse desde la infancia hasta la edad anciana.

Las verrugas son la manifestacion mas comun de la infeccion con el virus del papiloma humano (VPH). Pueden producirse sobre cualquier superficie mucosa o cutanea. El diagnostico de la verruga se basa principalmente en la morfologfa clfnica. A menudo las lesiones pueden ser cronicas. Los individuos inmunodeprimidos tienen mayor riesgo de desarrollar carcinoma epidermoide en sitios de infeccion por VPH. Ademas, la infeccion genital con VPH se ha implicado como causa frecuente de carcinoma epidermoide de la region genital y del cuello uterino. Actualmente, las verrugas no se tratan comunmente mediante terapia fotodinamica.

Combinaciones de agentes de fotosensibilizacion y luz ultravioleta (UV) son tratamientos establecidos para LCTC y psoriasis. El tratamiento con psoraleno-luz ultravioleta A (PUVA), un regimen usado comunmente para el tratamiento de psoriasis, es una forma de TF. El tratamiento con PUVA implica la administracion de un compuesto de psoraleno a un paciente, seguido por iluminacion de la piel del paciente con luz que tiene una longitud de onda que corresponde a radiacion ultravioleta A (UV-A). Tanto LCTC como psoriasis presentan altas tasas de respuesta clfnica a la terapia con PUVA. La luz ultravioleta A, tambien conocida como UV de onda larga, o luz negra, tiene normalmente una longitud de onda de 315 nm - 400 nm. Aunque el tratamiento con PUVA proporciona alivio de la psoriasis, la exposicion de la piel a radiacion UV-A puede tener varios efectos no deseados, incluyendo una reaccion similar a una quemadura solar e induccion de tumores cutaneos. Ademas, PUVA parece ejercer efectos carcinogenicos con tratamiento prolongado dando como resultado una tasa significativa de canceres de piel distintos de melanoma asf como melanoma maligno. El hallazgo de que psoraleno es mutagenico y se intercala en el ADN, acompanado de la asociacion de la terapia con PUVA con el desarrollo de cancer de piel, aumenta la necesidad de formas mas seguras de fototerapia en el tratamiento de LCTC y psoriasis.

La hipericina es un compuesto natural encontrado en los tallos y petalos de plantas del genero hipericum. Dentro de este genero hay ocho familias y 43 especies, incluyendo la planta de hierba de San Juan comun, Hipericum perforatum. La hipericina es el agente fototoxico principal de la hierba de San Juan. El nombre qufmico es 4,5,7,4',5',7'-dimetil-meso-naftodiantbrona, un compuesto que se compone de ocho anillos conjugados que contienen seis grupos hidroxilo, dos grupos carbonilo y dos metilo en un patron simetrico cuando se invierte alrededor de un eje central. Cuando se disuelve en disoluciones de etanol produce un compuesto fluorescente brillante.

La hipericina se activa de manera maxima mediante luz visible a longitudes de onda producidas por una lampara de sodio (590 nm) o luz fluorescente blanca frfa, lo que reduce significativamente los efectos secundarios asociados con la irradiacion UV y permite una penetracion en la piel mas profunda. La hipericina tiene una semivida relativamente larga (20-24 horas) lo que permite una activacion repetida por la luz con dosis individuales. Se ha demostrado que este compuesto esta presente en la piel tras la administracion sistemica y se ha mostrado que tiene una biodisponibilidad de aproximadamente el 20% tras la administracion oral. Sin embargo, los pacientes que se

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trataron de manera sistemica con hipericina pueden verse afectados por fotosensibilidad sistematica e intensa.

Se han descrito las propiedades fotodinamicas de la hipericina. Tras la irradiacion con luz visible o UV, la hipericina en disolucion puede excitar el oxfgeno a su estado singlete y generar radicales superoxido, lo que puede conducir a la oxidacion de grupos imidazol de triptofano en protefnas, a la oxidacion de acidos grasos en sistemas biologicos, o a otras reacciones qufmicas. La hipericina se activa de manera maxima mediante luz de aproximadamente 570650 nm de longitud de onda, es decir en la region amarilla del espectro electromagnetico. Aunque la hipericina se ha conocido durante muchos anos, y aunque la aplicacion de hipericina no fotoactivada se ha investigado en estudios clfnicos de sus actividades anticancerfgenas y antivirales, se conoce muy poco sobre el mecanismo de accion de este compuesto a nivel bioqufmico o molecular. Se ha demostrado que la fotorreaccion de la hipericina produce oxfgeno singlete. Ademas, existen evidencias de que la hipericina inhibe la actividad protefna cinasa y, por tanto, puede ejercer su actividad biologica a traves de rutas que son muy diferentes de, por ejemplo, psoraleno. Ademas, la hipericina se une a fosfolfpidos, tales como membranas celulares que comprenden fosfatidilcolina, y a partfculas retrovirales, probablemente asociandose con la envuelta lipfdica de las mismas.

Fox et al (documento U.S. 6.001.882) da a conocer metodos de uso de hipericina y derivados de hipericina que, cuando se fotoactivan usando luz visible o UV-A, son utiles para tratar numerosas enfermedades y trastornos en mamfferos. La hipericina y los derivados de hipericina se usan para inhibir la proliferacion y acumulacion de leucocitos de mamffero y para inducir apoptosis en leucocitos de mamffero. Tambien se contemplan aplicaciones topicas de hipericina y derivados de hipericina para el tratamiento de LCTC y psoriasis por Fox et al.

Floyd E. Fox et al. (URL:
http://www.nature.com/jid/journal/v111/n2/pdf/5600130a.pdf) notifican estudios sobre el efecto de la hipericina en linfoma de celulas T cutaneo, en los que se usaron disoluciones madre de hipericina y 8- metoxipsoraleno en alcohol bencflico.

Van De Putte Marie et al. (International Journal of Oncology, Lychina, GR, vol. 28, n.° 3.2006-03-01) notifican estudios sobre la biodistribucion de hipericina tras la inyeccion de hipericina suspendida en solucion salina tamponada con fosfato, o disolucion de hipericina en una mezcla de DMSO, polietilenglicol y agua.

El documento WO 2009/066294 A1 da a conocer dispositivos para terapia fotodinamica, que comprenden una composicion para el tratamiento de trastornos de la piel, por ejemplo psoriasis. El fotosensibilizador preferido es hipericina; aunque pueden prepararse geles/cremas/pomada, el portador tambien puede comprender un disolvente seleccionado de agua, etanol, butilenglicol, propilenglicol, alcohol isopropflico, isoprenglicol, glicerina.

Actualmente, existe la necesidad de formulaciones terapeuticas altamente efectivas y novedosas para el tratamiento de afecciones de la piel asociadas con infiltracion de linfocitos, particularmente psoriasis, y tambien metodos para usar dichas formulaciones para el tratamiento de tal afeccion de la piel.

Descripcion detallada de la invencion

La hipericina es un agente fotodinamico conocido con potencial para tratar una variedad de enfermedades cutaneas caracterizadas por infiltrados linfocfticos, incluyendo psoriasis, liquen plano y LCTC. De manera similar a otros agentes de fotosensibilizacion conocidos, el oxfgeno singlete es el producto principal en la fotosensibilizacion de hipericina. En presencia de irradiacion con luz, la hipericina excita el oxfgeno a su estado singlete y puede generar radicales superoxido que pueden conducir a la oxidacion de grupos imidazol de triptofano en protefnas y a la oxidacion de acidos grasos en sistemas biologicos. La hipericina se activa de manera maxima mediante luz en la region amarilla del espectro fotodinamico a aproximadamente 570-650 nm de longitud de onda. Ademas, la hipericina, fotoactivada con luz o bien UV-A o bien blanca, puede casi completar la apoptosis (94%) de celulas de LCTC malignas cultivadas.

En un ensayo clfnico de fase I realizado en sujetos sanos, se determino que la dosis fototoxica minima (DFM) de luz visible de hipericina administrada por via topica en pomada hidrofila era de 4 J/cm2, mientras que a 8 J/cm2 se observaron reacciones fototoxicas energicas. A concentraciones del 0,1% y el 0,5%, la hipericina produce fotosensibilidad cutanea cuando se aplica por via topica bajo oclusion y se activa mediante luz visible 24 horas tras aplicacion topica. No hubo reacciones cutaneas con hipericina al 0,02% a ninguna dosis de luz.

Basandose en los datos obtenidos en el ensayo de fase I, que identifico concentraciones de hipericina y dosis de luz que producen respuestas fotosensibles cutaneas en voluntarios, se realizo un estudio multicentrico, de etiqueta abierta de fase II, controlado por placebo para evaluar la seguridad, tolerancia y eficacia de hipericina topica y luz visible en el tratamiento de psoriasis vulgar y MF temprano. Los metodos y resultados son los que se detallan en el siguiente estudio. Se descubrio de manera inesperada que las formulaciones de hipericina topicas convencionales, tales como pomada hidrofila, no son satisfactorias en estudios clfnicos para el tratamiento de psoriasis, mientras que se muestra que formulaciones lfquidas de hipericina y derivados son altamente eficaces para el tratamiento de psoriasis.

Este estudio se disena para evaluar la seguridad y eficacia de hipericina topica en concentraciones del 0,1% y el

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0,25% bajo oclusion durante 24 horas seguido por administracion de luz visible en dosis que oscilan entre 8 y 20 J/cm2 dos veces a la semana durante 6 semanas para el tratamiento de psoriasis o MF. Uno de los cuatro centros implicados en el estudio administro hipericina topica en concentraciones del 0,05 y el 0,1%. La concentracion de hipericina y la dosis de luz se basaron en el estudio de fase I descrito anteriormente con voluntarios normales.

Se aplico una cantidad topica normalizada de hipericina en o bien pomada o bien formula lfquida a placas definidas sobre la piel de sujetos voluntarios. La cantidad de hipericina en cada aplicacion topica fue tal como sigue: el 0,05% = 0,005 mg/cm2; el 0,1% = 0,01 mg/cm2 y el 0,25% = 0,025 mg/cm2. Cada paciente tratado tenia lesiones comparables tratadas con preparacion de placebo y farmaco activo.

Se aplico cada tratamiento con hipericina o placebo dos veces a la semana durante un periodo de 24 horas antes de la irradiacion. Se cubrio cada sitio de aplicacion con algodon Webril no absorbente de igual area y se ocluyo con cinta oclusiva (Blenderm, 3M); se retiro el exceso de farmaco antes de la irradiacion (24 horas tras aplicacion del farmaco).

La irradiacion se realizo usando bombillas fluorescentes visibles (590-650 nm) (bombillas fluorescentes blancas frfas GE, tubos fluorescentes de 20 vatios alojados en un blanco reflectante) durante un periodo que no excedfa de 15 minutos (numero total de Julios de aproximadamente 5/cm2). La dosis de luz se administro dos veces a la semana, separadas por al menos un dfa.

Se aumento la dosis de luz una vez a la semana en 1 Julio/cm2 hasta que aparecieron sfntomas o signos de fototoxicidad. En ese punto, la dosis podia o bien mantenerse o bien reducirse en 1 Julio/cm2 si la fototoxicidad era pronunciada (eritema cutaneo mayor de 1 + [eritema visible minimoj).

Se evaluaron las reacciones cutaneas cada semana inmediatamente tras la irradiacion y de nuevo a las 48 y 72 horas mas tarde. Los sitios de irradiacion se examinaron dos veces a la semana a partir de entonces y se registraron todos los cambios; por ejemplo, eritema, edema, descamacion, pigmentacion, etc.

En este estudio se puntuaron las respuestas de lesion segun las siguientes escalas en la evaluacion de cada paciente: CR de lesion=regresion completa de la lesion tratada; PR=>50% de disminucion del area de lesion durante el tratamiento; estable=<50% de disminucion del tamano o <25% de aumento del tamano durante la terapia; progresion=>25% de aumento del tamano durante la terapia. El criterio de exito/fracaso para cada lesion en cada paciente era si habfa una mejora del 50% o mejor en el area de lesion al final del ciclo de tratamiento de 6 semanas. Si era asf, se puntuaba al paciente como que respondfa para esa lesion. La tabla 1 indica los criterios de clasificacion para la respuesta del paciente.

Tabla 1. Criterios para la respuesta al tratamiento

Descriptor

Criterio Puntuacion numerica

MF Peor

Aumento en el tamano de lesion 7

Sin respuesta

Sin cambio en el tamano de lesion 6

Respuesta escasa

< 25% de reduccion del tamano 5

Respuesta moderada

> 25% de reduccion pero < 25% 4

Respuesta buena

>= 50% de reduccion pero < 75% 3

Respuesta excelente

>=75% de reduccion pero < 100% 2

Respuesta completa

100% de reduccion/resolucion completa 1

Psoriasis

La “respuesta” a las 6 semanas requerfa que las puntuaciones de lesion combinadas fueran del 50% o menos de las puntuaciones de lesion de nivel inicial para descamacion, eritema y elevacion de placas.

En este estudio se incluyeron pacientes femeninas no embarazadas u hombres de 18 a 70 anos de edad con LCTC en fase de placa o macula estable o psoriasis vulgar de tipo placa estable de al menos 4 meses en las dos ramas de enfermedad del estudio (MF y psoriasis) en 4 centros de estudio. La inclusion de pacientes planeada fue de 10-12 pacientes con LCTC y 10-12 con psoriasis. Se incluyeron un total de 12 pacientes para la rama de MF (los 12 eran evaluables) y se incluyeron 13 pacientes en la rama de psoriasis (11 eran evaluables).

Se administro hipericina sintetizada qufmicamente por VimRx Pharmaceuticals de Wilmington, Delaware. Se preparo la hipericina como una disolucion madre en propilenglicol con una cantidad apropiada de disolucion madre de hipericina anadida a una base hidrofila fundida que contenfa metilparabeno, propilparabeno, laurilsulfato de sodio, alcohol estearflico, vaselina blanca y agua purificada (pomada hidrofila USP, un ejemplo no limitativo de pomada hidrofila es una base de pomada que consiste en el 25% de cada uno de vaselina blanca y alcohol estearflico, el 12% de propilglicol emulsionado en un 37% de agua mediante un 1% de laurilsulfato; conservado en parabeno). Se uso pomada placebo como tratamiento de control.

Se trataron todos los pacientes que recibieron tratamiento para MF con la preparacion de pomada (referencia). Para

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los pacientes con psoriasis, se trataron 5 pacientes con disoluciones acuosas al 0,1% y al 0,25% de hipericina en dimetilsulfoxido (DMSO) y se trataron 6 pacientes con las preparaciones de pomada hidrofila USP. La forma de dosificacion lfquida consistio en disolver o bien 0,2 ml o bien 0,5 ml de disolucion madre de hipericina (disolucion en polietilenglicol) en 44,8 o 44,5 ml de DMSO al 50%/agua y mezclar con un agitador magnetico.

Se analizo la respuesta o falta de respuesta, de cada lesion tratada con o bien pomada placebo o bien con una pomada que contenfa hipericina como una distribucion binomial (es decir, sf/no). Este era un analisis apropiado para la respuesta que era de naturaleza cuantal. Para la hipotesis nula (sin respuesta al tratamiento) se supuso que no se producirfa la resolucion espontanea de la lesion en el punto de tiempo de 6 semanas especificado por protocolo. Es decir, se tomo la probabilidad real de regresion espontanea de la lesion (definida como < 50% de su tamano de nivel inicial para LCTC y hasta < 50% de su puntuacion de nivel inicial combinada para lesiones de psoriasis) como cero (0%). Para el analisis de MF, se empleo una regresion logfstica de medidas repetidas para obtener valores de p. Para el analisis de los datos de psoriasis, se empleo una prueba de chi-cuadrado de razon de probabilidad.

La poblacion de estudio en ambas ramas de tratamiento del estudio contenfa aproximadamente dos veces mas hombres (n = 8 para MF y n = 7 para grupos de tratamiento de psoriasis) que de mujeres (n =4 tanto para grupos de tratamiento de MF como psoriasis); la edad promedio de los pacientes para pacientes con MF era de 55+16,5 anos (media+ DE) y para los pacientes con psoriasis de 45+16,4 anos (vease la tabla 2 para las caracterfsticas de los pacientes). Cinco pacientes abandonaron de manera prematura; un sujeto revoco la inclusion condicional y 4 abandonaron porque el protocolo era demasiado exigente. Dos de estos pacientes eran pacientes con psoriasis que se trataron durante solo un dfa antes de abandonar y por tanto no eran evaluables para la eficacia.

Tabla 2. Datos demograficos para todos los pacientes evaluables tratados para LCTC o psoriasis

Diagnostico

MF Psoriasis

Numero de pacientes

12 11

Edad (media+DE)

55+16,5 45+16,5

Numero de hombres/mujeres

8/4 7/4

Numero tratado> 6 semanas

7 2

Resultados de eficacia para MF

Se considero que una lesion habfa respondido al tratamiento si el tamano de la lesion se redujo en un 50% o mas tras 6 semanas de tratamiento con pomada de hipericina. En las tablas 3 y 4 se resumen los resultados tras 6 semanas de tratamiento.

Tabla 3. Respuestas de lesiones de MF de pacientes individuales a pomada de hipericina tras seis semanas de tratamiento

Tratamiento con hipericina

Sitio-paciente

Placebo 0,05% 0,1% 0,25% +Paciente que responde?

CW-001

N - S S S

CW-004

N - N N N

CW-007

S - N3 N N

CW-010

N - N S S

CW-012

N - N S S

CW-016

N - N N N

A-001

N - N N N

A-002

N - S S S

A-003

N - S S S

C-001

N N N - N

C-002

N S S - S

MDA-001

N - S n/a S

La tendencia general en las dos dosis mas altas fue similar para los efectos de la hipericina sobre la reduccion de lesiones de MF 2: 50%; el tamano de muestra para la dosis del 0,05% fue insuficiente para extraer ninguna conclusion sobre la eficacia (tabla 4). A concentraciones de hipericina del 0,1% y el 0,25%, el 41,7 (5 de 12) y el 55,6% (5 de 9) de los pacientes respondieron al tratamiento; las respuestas a ambos tratamientos fueron significativamente diferentes de las lesiones tratadas con pomada placebo (p 2: 0,04 para ambas concentraciones). La conclusion global es que la hipericina es eficaz frente a lesiones de MF cuando se aplica por via topica a concentraciones del 0,1% al 0,25% dos veces a la semana seguido por irradiacion de luz blanca 24 horas despues a 8 - 20 J/cm2 de piel.

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Grupo de tratamiento

Pacientes responden/totala que Porcentaje de pacientes que responden3

Todos los pacientes que responden a hipericina

7/12 58,3%b

Dosis de hipericina del 0,25%

5/9c 55,6%b

Dosis de hipericina del 0,1 %

5/12 41,7%b

Dosis de hipericina del 0,05%

1/2 50,0%

Pacientes que responden a placebo

1/12 8,3%

a Los datos reflejan el numero de pacientes que tuvieron una respuesta a cualquier dosis; algunos pacientes pueden haber sido pacientes que responden a mas de una dosis de tratamiento. b p <= 0,04 frente a placebo (lfmites binomiales exactos)

c No se trataron tres pacientes con la dosis del 0,25% de hipericina.________________________________

Resultados de eficacia para el tratamiento de psoriasis

La distribucion de las respuestas de los pacientes con psoriasis a concentraciones de placebo e hipericina del 0,05%, el 0,1% y el 0,25% en el tiempo de evaluacion de 6 semanas especificado por protocolo se proporciona en las tablas 5 y 6. Al examinar la tabla 6, es importante tener en cuenta que los 5 primeros pacientes en uno de los sitios, la Universidad de Pensilvania, se trataron con pomadas de hipericina (referencia) mientras que los 6 pacientes con psoriasis restantes en los otros sitios se trataron con una formulacion lfquida de hipericina en DMSO acuoso/agua. Las excepciones a esto incluyeron al sexto paciente de la Universidad de Pensilvania que se trato con pomada y paciente MD Anderson, MDA-002, que se trato con pomada de hipericina al 0,1% y al 0,25%.

Para las dos formulaciones de concentracion superior (el 0,1% y el 0,25%) cuando se combinaron los datos para las formulaciones de tanto pomada como lfquida, la comparacion por parejas de los tratamientos al 0,25% (el 45,4% de pacientes que responden) y al 0,1% (el 36,4% de pacientes que responden) en comparacion con las lesiones tratadas con placebo demostraron un efecto estadfsticamente significativo (p < 0,02 para ambas concentraciones) de hipericina sobre la reduccion de la lesion por psoriasis. Las comparaciones por parejas para el tratamiento de concentracion mas baja (el 0,05% para ambas formulaciones combinadas) no mostraron una diferencia significativa en comparacion con el placebo. Los resultados para los pacientes tratados con la formulacion lfquida solo eran similares a aquellos cuando se combinaron los datos de ambas formulaciones (tabla 6). La tendencia de la dosis para la formulacion lfquida sola demostro efectos relacionados con la dosis de hipericina sobre la reduccion/mejora de la lesion por psoriasis.

Tabla 5. Respuesta de psoriasis a hipericina tras seis semanas de tratamiento

Tratamiento con hipericina

Sitio-paciente_____Placebo______0,05%______0,1%______0,25% ^Paciente que responde?

CW-006

N - S S S

CW-011

N - N N N

CW-014

N - S S S

CW-015

N - S S S

CW-017

- N S S

P-001

N N N - N

P-003

N N N - N

P-004

N N N - N

P-005

N N N - N

P-006

N S N - S

MDA-002

N - S S S

Los resultados de eficacia para la formulacion de pomada fueron mucho mas bajos que los del tratamiento lfquido a todas las dosis sometidas a prueba no demostrando ninguna de las dosis de pomada una diferencia estadfsticamente significativa (p > 0,05) de los pacientes tratados con placebo.

Globalmente, la conclusion es que la hipericina en la formulacion lfquida era altamente eficaz frente a la psoriasis cuando se aplicaba por via topica a concentraciones del 0,1% al 0,25% seguido por irradiacion de luz blanca 24 horas despues a de 8 a 20 J/cm2 de piel. La formulacion de pomada no produjo efectos estadfsticamente mejores que el placebo a ninguna de las dosis sometidas a prueba.

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Todos pomada + lfquido Todos los pacientes que responden a hipericina Dosis de hipericina del 0,25% Dosis de hipericina del 0,1% Respuesta a la dosis del 0,05% Pacientes que responden a placebo

Pacientes que responden/totala 6/11 5/11 4/11 1/11 0/11 Porcentaje de pacientes que respondena 54,6%b 45,4%b 36,4%a,b 9,1% 0,00%

Todos pomada + lfquido Lfquido

Pacientes que responden/totala Porcentaje de pacientes que respondena

Todos los pacientes que responden a hipericina

4/5 80,0%b

Dosis de hipericina del 0,25%

4/5 80,0%b

Dosis de hipericina del 0,1%

3/5 60,0%b

Pacientes que responden a placebo Pomada (referencia)

0/5 0,0%

Todos los pacientes que responden a hipericina

2/6 33,3%

Dosis de hipericina del 0,25%

1/6 16,7%

Dosis de hipericina del 0,1%

1/6 16,7%

Respuesta a la dosis del 0,05%

1/6 16,7%

Pacientes que responden a placebo

0/6 0/6

a Los datos reflejan el numero de pacientes que tuvieron una respuesta a pueden haber sido pacientes que responden a mas de una dosis de tratamiento b p <= 0,02 frente a placebo (lfmites binomiales exactos)

cualquier dosis; algunos pacientes

No se notificaron muertes o acontecimientos adversos graves durante la realizacion de este estudio. Los unicos acontecimientos adversos notificados fueron quemadura, picor, eritema y prurito de leve a moderado en el sitio de la aplicacion tfpico de reacciones fototoxicas esperadas del farmaco de estudio.

Basandose en las observaciones de laboratorio basicas de que la hipericina con exposicion a luz visible podia inducir una alta tasa de apoptosis de linfocitos sangufneos perifericos, tanto transformados como no transformados, se genero la hipotesis de que la hipericina serfa probablemente eficaz en el tratamiento de una amplia variedad de trastornos linfociticos de la piel incluyendo psoriasis, LCTC, liquen plano y otros. Los resultados de este estudio de fase II confirman y amplfan las observaciones in vitro con respecto a la eficacia terapeutica tanto para psoriasis como para MF.

En la rama de MF del estudio, solo se sometio a prueba la formulacion de pomada a concentraciones del 0,05%, el 0,1% y el 0,25% (referencia). Se trataron los pacientes dos veces a la semana con pomadas placebo y activas seguido por exposicion a luz visible a de 8 a 20 J/cm2 24 horas tras la aplicacion. Las dos concentraciones superiores de pomada de hipericina (el 0,1 y el 0,25%) produjeron reducciones mayores del 50% de las placas de LCTC en el 41,7 y el 55,6% de los pacientes, respectivamente. Estos cambios fueron estadisticamente mayores de manera significativa a los observados para lesiones tratadas con placebo en los mismos pacientes. A la concentracion de hipericina mas baja sometida a prueba, el 0,05%, uno de los pacientes tratados presento reducciones de al menos el 50% en las lesiones de LCTC; debido al limitado tamano de esta poblacion, no pueden extraerse conclusiones referentes a la eficacia de esta concentracion.

Para pacientes con lesiones de psoriasis, se emplearon dos formulaciones (liquida o pomada) en diferentes sitios en concentraciones del 0,05%, el 0,1% y el 0,25%. Solo se observaron reducciones en lesiones de psoriasis de mas del 50% en uno de seis (16,7%) pacientes en respuesta a las tres concentraciones de pomada de hipericina (referencia); estos resultados no eran estadisticamente diferentes de las lesiones en los mismos pacientes tratadas con placebo. Por el contrario, las lesiones tratadas con la formulacion liquida produjeron reducciones estadisticamente significativas en el tamano de las lesiones de psoriasis a concentraciones del 0,1% (el 60,0% de los pacientes) y el 0,25% (el 80%) en comparacion con las lesiones tratadas con placebo en los mismos pacientes. La concentracion al 0,05% de la formulacion de hipericina liquida no se sometio a prueba. La base de las diferencias en la respuesta a lesiones de psoriasis con respecto a las formulaciones de pomada y lfquidas se desconoce pero probablemente esta relacionada con un mayor grado de penetracion de la formulacion liquida en las lesiones.

Ambas formulaciones de hipericina eran seguras experimentando la mayorfa de los pacientes solo fototoxicidad de leve a moderada en el sitio de aplicacion tras la exposicion a luz visible.

El mecanismo mediante el que la hipericina fotoactivada topica proporciona beneficios clfnicos para tratar enfermedades cutaneas inflamatorias caracterizadas por infiltrados linfociticos incluye la generacion de oxfgeno

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singlete y apoptosis, y es un mecanismo similar al de otros agentes, tales como acido 5-aminolevulfnico y otras porfirinas usadas en la terapia fotodinamica que se sabe que tienen eficacia clfnica en el tratamiento de enfermedades cutaneas inflamatorias. Normalmente, la apoptosis mediada por especies reactivas de oxfgeno se ejecuta predominantemente por medio de la ruta intrfnseca (mitocondrial). Esta es particularmente ventajosa para trastornos tales como LCTC que se ha mostrado a menudo que presentan rutas apoptoticas extrfnsecas defectuosas (mediadas por receptor de muerte) incluyendo FAS y TRAIL. Ademas, los estudios sobre el mecanismo de actividad antitumoral indican que la hipericina se une a la protefna chaperona, protefna de choque termico 90 (Hsp 90) lo que conduce a su ubiquitinizacion. Esto afecta a varias protefnas cliente crfticas que regulan las rutas de crecimiento celular dando como resultado su desestabilizacion, rapida degradacion y eliminacion en ultima instancia lo que conduce a la muerte celular. Ademas, se sabe que la hipericina es un inhibidor de protefna cinasa C potente, alterando de ese modo los mecanismos de senalizacion celular e induciendo apoptosis.

La caracterfstica clfnica que distingue la terapia con hipericina de la terapia con PUVA es su falta de actividad mutagenica en contraposicion con las propiedades mutagenicas de psoraleno y luz UV. Ademas, la hipericina se activa de manera maxima a 590 nm, que esta en la frecuencia visible de luz blanca, en vez de por UV-A de onda larga, lo que requiere lamparas especializadas. Globalmente los datos de este ensayo clfnico de fase II apoyan la afirmacion de que el tratamiento con hipericina topica combinado con luz visible es prometedor como alternativa mas segura a la terapia con PUVA convencional para el tratamiento de MF y psoriasis de leve a moderado.

La cantidad de fotosensibilizador segun la formulacion lfquida de la presente invencion, preferiblemente fotosensibilizadores que presentan efecto citotoxico cuando se exponen a la luz en el espectro visible, es del 0,001% al 1%, preferiblemente del 0,02% al 0,5%. La cantidad tfpica del fotosensibilizador aplicado a la piel es normalmente de 0,0001 mg/cm2 a 0,5 mg/cm2, preferiblemente de 0,0001 mg/cm2 a 0,1 mg/cm2, mas preferiblemente de 0,0001 mg/cm2 a 0,05 mg/cm2.

Particularmente, el estudio descubre de manera inesperada que la formulacion de hipericina lfquida es superior en comparacion con hipericina en la preparacion de pomada hidrofila. Se considera que el sistema de disolvente usado en la formulacion de hipericina lfquida facilita la permeacion de hipericina a traves de las lesiones psoriasicas. En la formulacion lfquida de la presente invencion, se usa un sistema de disolvente de DMSO y agua. Se usa el 25-75% de DMSO con esta formulacion lfquida, preferiblemente, se usa el 40-60% de DMSO.

Tambien son adecuados disolventes similares que promueven la permeabilidad de las lesiones psoriasicas para la presente invencion, que pueden incluir agua, disolventes proticos, disolventes aproticos polares y disolventes aromaticos polares, y combinaciones de los mismos.

Cualquier disolvente molecular que contenga H+ disociable se denomina disolvente protico. Las moleculas de tales disolventes pueden donar un H+ (proton). En cambio, los disolventes aproticos no pueden donar hidrogeno. Disolventes proticos adecuados pueden incluir agua, polietilenglicoles, propilenglicol, polivinilpirrolidona, metoxipropilenglicol, glicerol y glicofurol.

Los disolventes aproticos polares son disolventes que comparten el poder de disolucion de iones con los disolventes proticos pero carecen de un hidrogeno acido. Estos disolventes tienen generalmente constantes dielectricas altas y alta polaridad. Los disolventes aproticos polares pueden incluir N-metilpirrolidona, N-metil-2-pirrolidon- dimetilformamida, dimetilacetamida, dimetilformamida, N-metil-morfolina, y-butirolactona, acetonitrilo, hexametilfosforotriamida y hexametilfosforamida.

Los disolventes aromaticos polares pueden incluir compuestos haloaromaticos, alcohol bencflico; alcohol 1- feniletflico; alcohol 2-feniletflico; 3-fenilpropanol; 2-fenilpropanol; 2-fenoxietanol; 2,2-dimetil-3-fenilpropanol; 2,2- dimetil-3-(3-metilfenil)propanol; alcohol 1,1 -dimetil-2-feniletflico; 1,1 -dimetil-3-fenilpropanol; 1 -etil-1 -metil-3-

fenilpropanol; 2-metil-5-fenilpentanol; 3-metil-5-fenilpentanol; 3-fenil-2-propen-1-ol; alcohol 4-metoxi-bencflico; 1-(4- isopropilfenil)etano, acetato de bencilo; propionato de bencilo , isobutirato de bencilo; isovalerato de bencilo, acetato de 2-feniletilo; propionato de 2-feniletilo, isobutirato de 2-feniletilo, isovalerato de 2-feniletilo, acetato de 1 -feniletilo, acetato de alfa-triclorometilbencilo, acetato de alfa,alfa-dimetilfeniletilo, butirato de alfa,alfa-dimetilfeniletilo; acetato de cinamilo, isobutirato de 2-fenoxietilo, acetato de 4-metoxibencilo, eteres aralifaticos tales como, por ejemplo, 2- feniletil metil eter, 2-feniletil isoamil eter, 2-feniletil-1 -etoxietil eter, fenilacetaldehfdo-dimetil-acetal, fenilacetaldehfdo- dieteil-acetal, hidratropaldehfdo-dimetil-acetal, fenilacetaldehfdo-glicerol-acetal, 2,4,6-trimetil-4-fenil-1,3-dioxano, 4,4a,5,9b-tetrahidroindeno[1,2-d]-m-dioxina y 4,4a,5,9b-tetrahidro-2,4-dimetilindeno[1,2-d]-m-dioxina.

Adicionalmente, tambien pueden usarse tensioactivos para facilitar la permeabilidad de la piel. Los tensioactivos pueden incluir arilsulfonatos de alquilo, sulfatos de alquilo, amidas y aminas sulfonadas, eteres y esteres sulfatados y sulfonados, sulfonatos de alquilo, esteres polietoxilados, mono y digliceridos, esteres diacetiltartaricos de monogliceridos, esteres de poliglicerol, esteres y etoxilatos de sorbitano, esteres lactilados, fosfolfpidos, esteres de polioxietilen-sorbitano, esteres de propilenglicol y esteres de sacarosa.

Tambien pueden usarse otros potenciadores de la permeacion de la piel con la formulacion de la presente invencion. Otros potenciadores de la permeacion de la piel incluyen decilmetilsulfoxido, 1-decil-metil-sulfoxido, analogos de 1-

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decil-metil-sulfoxido, monoetil eter de dietilenglicol, monolaurato de polietilenglicol, monolaurato de glicerol, monolaurato de propilenglicol, etanol, eucaliptol, lecitina, las azacicloheptan-2-onas 1-sustituidas, particularmente 1- n-dodecilciclazacicloheptan-2-ona (disponible con la marca comercial Azone® de Nelson Research & Development Co., Irvine, CA), “compuestos de desordenamiento de la envuelta celular” tales como laurato de metilo o acido oleico en combinacion con N-(hidroxietil)pirrolidona, dioles C 3-C 4, o un sistema binario de acido oleico, olefnas o alcohol oleflico en combinacion con un alcohol inferior.

Tambien se descubre que una formulacion lfquida de este tipo se usa para aumentar la eficacia de tratamiento sobre psoriasis, por ejemplo psoraleno, glucocorticoides, inhibidores de calcineurina (por ejemplo, tacrolimus), e inhibidores de histona desacetilasa.

Tambien se descubre que puede usarse eficazmente un metodo de terapia fotodinamica que usa luz en el espectro visible para el tratamiento de una afeccion de la piel asociada con acumulacion de leucocitos en la piel. Estas afecciones pueden incluir linfoma de celulas T cutaneo y psoriasis. En comparacion con la terapia fotodinamica usando luz UV, el uso de luz visible es mucho mas seguro, puesto que elimina el efecto mutagenico y carcinogenico perjudicial de la luz UV. Un experto en la tecnica habitual seleccionarfa uno o mas fotosensibilizadores apropiados que presenten efecto citotoxico cuando se exponen a la luz visible de una longitud de onda particular, aplicarfa el fotosensibilizador seleccionado a una lesion cutanea del paciente que estarfa aquejado de la afeccion de la piel y expondrfa el area de piel tratada al espectro apropiado de luz visible. Se muestra que la hipericina es segura y eficaz para el tratamiento de LCTC y psoriasis segun este metodo. Fotosensibilizadores adecuados para este metodo particular son preferiblemente permeables en la piel, o pueden hacerse permeables en la piel con disolvente o potenciadores de la permeacion en la piel. Tambien es preferible que los fotosensibilizadores produzcan oxfgeno singular cuando se exponen a la luz en el espectro visible. Pueden usarse otros fotosensibilizadores segun este metodo. Como ejemplo sin limitacion, puede aplicarse acido aminolevulfnico, por via topica, en concentraciones del 10 al 20% y exponerse a la luz a 600-700 nm.

Las formaciones lfquidas y metodos de tratamiento detallados anteriormente pueden adaptarse al tratamiento de verrugas. Particularmente, puede usarse terapia fotodinamica de hipericina. En este ejemplo particular, se establece que la hipericina, in vitro, tiene actividad viricida activada por luz. La activacion por luz de hipericina (a concentraciones de 1 ~ 20 J.tg) durante 15 - 30 minutos inactiva tftulos infecciosos (5 - 6 log10) de VIH y de virus de la diarrea bovina (VDVB).

Tal como se usa en el presente documento, el termino “hipericina y derivado de hipericina” significa hipericina, protohipericina, pseudohipericina, heliantrona, o una combinacion de las mismas. Esta claro para un experto en la tecnica que pueden realizarse numerosas modificaciones insignificantes en la estructura qufmica de la hipericina, protohipericina, pseudohipericina o heliantrona y que muchas de tales modificaciones no alteraran significativamente la actividad biologica de la molecula. Por tanto, las moleculas de hipericina, protohipericina, pseudohipericina y heliantrona que se han modificado de manera no significativa, de manera que la actividad biologica no se ha alterado significativamente, se incluyen dentro de la definicion de un derivado de hipericina apropiado. Un experto en la tecnica apreciara que puedan usarse los metodos ensenados en el presente documento para distinguir moleculas de hipericina, protohipericina, pseudohipericina o heliantrona modificadas que tienen actividad biologica alterada de manera no significativa de las que tienen actividad biologica alterada significativamente.

Tal como se usa en el presente documento, el termino “luz visible” y “luz en el espectro visible” significa la parte del espectro electromagnetico que es visible para o puede detectarse por el ojo humano. La radiacion electromagnetica en este intervalo de longitudes de onda se denomina luz visible o simplemente luz. Un ojo humano tfpico respondera a longitudes de onda de desde aproximadamente 390 hasta 750 nm. Normalmente, la luz violeta esta entre aproximadamente 380-450 nm, la luz azul esta entre aproximadamente 450-495 nm, la luz verde esta entre aproximadamente 495-570 nm, la luz amarilla esta entre aproximadamente 570-590 nm, la luz naranja esta entre aproximadamente 590-620 nm y la luz roja esta entre aproximadamente 620-750 nm.

Claims (3)

1. REIVINDICACIONES

   1. Formulacion liquida para su uso en el tratamiento topico de psoriasis, que comprende:

   5 un fotosensibilizador en la cantidad del 0,001% al 1%, en la que el fotosensibilizador presenta

   citotoxicidad cuando se expone a la luz en el espectro visible y el fotosensibilizador es hipericina o un derivado de hipericina;

   y un disolvente organico en la cantidad del 25% al 75%, en la que el disolvente organico aumenta la 10 permeabilidad de la piel y el disolvente organico es dimetilsulfoxido.
2. 2. Formulacion liquida de un fotosensibilizador segun la reivindicacion 1 para su uso en el tratamiento de psoriasis que comprende las etapas de:

   15 aplicar por via topica la formulacion liquida a una lesion cutanea de un paciente aquejado de psoriasis; y

   exponer la lesion cutanea a una fuente de luz.
3. 3. Formulacion liquida para su uso segun la reivindicacion 2, en la que la fuente de luz es una fuente de luz

   20 visible que emite luz que tiene una longitud de onda de entre 500 nm y 650 nm, una longitud de onda de

   entre 390 nm y 750 nm, una longitud de onda de entre 380 nm y 750 nm, una longitud de onda de entre 495 nm y 570 nm, una longitud de onda de entre 450 nm y 495 nm, una longitud de onda de entre 570 nm y 590 nm, una longitud de onda de entre 590 nm y 620 nm, o una longitud de onda de entre 620 nm y 750 nm.