ES2560012T3 - Métodos y composiciones farmacéuticas para el tratamiento de enfermedades autoinmunitarias - Google Patents
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Abstract
Un polipéptido α-enolasa no citrulinado para su uso en un método para el tratamiento profiláctico de una enfermedad autoinmunitaria en un sujeto que lo necesite, donde dicho polipéptido α-enolasa no citrulinado comprende: una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste de la secuencia de aminoácidos que se extiende desde la posición 5 a la posición 21 en SEC ID Nº: 1, la secuencia de aminoácidos que se extiende desde la posición 6 a la posición 21 en SEC ID Nº: 2 y la secuencia de aminoácidos que se extiende desde la posición 5 a la posición 21 en SEC ID Nº: 3; o una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste de CKIHAREIFDSRGNPTVEC (SEC ID Nº: 4), CIHAREIFDSRGNPTVEC (SEC ID Nº: 5) y CKIIGREILDSRGNPTVEC (SEQ ID Nº: 6), que está ciclado mediante un enlace disulfuro entre los dos restos de cisteína.
Description
La expresión necesita que en los vectores se proporcionen señales adecuadas, tales como potenciadores/promotores de fuentes virales y de mamíferos, que puedan usarse para dirigir en la célula hospedadora la expresión de los ácidos nucleicos de interés. Normalmente, el ácido nucleico que se expresa está bajo el control transcripcional de un promotor. Un "promotor" se refiere a una secuencia de ADN que reconoce la maquinaria sintética de la célula o la maquinaria
5 sintética introducida, necesaria para iniciar la transcripción específica de un gen. Las secuencias de nucleótidos están unidas operativamente cuando la secuencia reguladora se relaciona funcionalmente con el ADN que codifica la proteína de interés (es decir, α-enolasa, una variante y similares). De tal forma, una secuencia de nucleótidos de un promotor está unida operativamente a una dada secuencia de ADN, si la secuencia de nucleótidos del promotor dirige la trascripción de la secuencia.
De forma semejante, la expresión "bajo control transcripcional" significa que el promotor está en la localización y en la orientación correctas, en relación al ácido nucleico, para controlar la iniciación de la ARN polimerasa y la expresión del gen. Puede utilizarse cualquier promotor que conduzca la expresión del ácido nucleico. No se piensa que sea importante el promotor particular empleado para controlar la expresión de un ácido nucleico de interés, en tanto sea 15 capaz de dirigir la expresión del ácido nucleico en la célula diana. Por lo tanto, cuando se elige una célula como diana, es preferible colocar la región codificante de ácido nucleico adyacente a, y bajo el control de, un promotor que sea capaz de expresarse en una célula de ser humano. Hablando en términos generales, tal promotor podría incluir un promotor de ser humano o viral. Pueden usarse para obtener elevado nivel de expresión de la secuencia codificante de interés, promotores comunes que incluyen, por ejemplo, el promotor del gen temprano inmediato del citomegalovirus humano (CMV), el promotor temprano de SV40, la repetición terminal larga del virus del sarcoma de Rous, de la [beta]actina, el promotor de la insulina de rata, el promotor de la fosfoglicerol quinasa y el promotor de la gliceraldehido-3fosfato deshidrogenasa, todos los cuales son promotores bien conocidos y fácilmente disponibles para los expertos en la materia. También se considera el uso de otros promotores virales, de células de mamífero o de fagos bacterianos, que se conocen bien en la técnica, para lograr la expresión de una secuencia codificante de interés, siempre que los
25 niveles de expresión sean suficientes para producir un rendimiento recuperable de la proteína de interés. Después de la transfección o trasformación, se puede optimizar el nivel y patrón de expresión de la proteína de interés mediante el empleo de un promotor con propiedades bien conocidas. También se pueden usar promotores inducibles.
Otro elemento regulador que se usa en la expresión de proteínas es un potenciador. Estos son elementos genéticos que aumentan la transcripción a partir de un promotor localizado en una posición distante en la misma molécula de ADN. Cuando una construcción de expresión hace uso de un inserto de ADNc, normalmente se desea incluir una secuencia señal de poliadenilación para efectuar la poliadenilación correcta del transcripto génico. Es adecuada para la práctica de la invención, cualquier secuencia señal de poliadenilación que se reconozca en células de la especie animal transgénica seleccionada, tales como las señales de poliadenilación de la hormona de crecimiento de ser humano o bovina, y de
Otro aspecto de la invención se refiere a una molécula de ácido nucleico que codifica un polipéptido α-enolasa de acuerdo con la invención para su uso en el tratamiento profiláctico de una enfermedad autoinmunitaria, como se define anteriormente.
Normalmente, dicho ácido nucleico es una molécula de ADN o de ARN, que puede incluirse en cualquier vector adecuado, tal como un plásmido, cósmido, episoma, cromosoma artificial, vector de fago o viral, como se describe anteriormente.
45 De esta manera, un objetivo adicional de la invención se refiere a un vector que comprende un ácido nucleico que codifica un polipéptido α-enolasa para su uso en el tratamiento profiláctico de una enfermedad autoinmunitaria, como se define anteriormente.
Un objetivo adicional de la invención se refiere a una célula hospedadora que comprende un ácido nucleico que codifica un polipéptido α-enolasa (o un vector que comprende un ácido nucleico del mismo) para el tratamiento profiláctico de una enfermedad autoinmunitaria, como se define anteriormente.
Los polipéptidos α-enolasa (o ácido nucleico que codifica un polipéptido α-enolasa, o un vector que comprende un ácido nucleico que codifica un polipéptido α-enolasa) de la invención, se administran en dicho sujeto en una cantidad
55 terapéuticamente eficaz.
Por una "cantidad terapéuticamente eficaz" se entiende una cantidad suficiente de polipéptidos α-enolasa (o ácido nucleico que codifica un polipéptido α-enolasa, o un vector que comprende un ácido nucleico que codifica un polipéptido α-enolasa) para conservar la integridad de la barrera celular endotelial vascular a una relación beneficio/riesgo razonable, aplicable a cualquier tratamiento médico. Se comprenderá que el uso total de los compuestos y composiciones de la presente invención se decidirá por el médico que atiende al paciente, dentro del alcance del buen juicio médico. El nivel de dosis terapéuticamente eficaz específica para cualquier paciente particular, dependerá de una diversidad de factores incluyendo el trastorno a tratar y la gravedad del trastorno; la actividad del compuesto específico empleado; la composición específica empleada, la edad, el peso corporal, la salud general, el sexo y la dieta del 65 paciente; el tiempo de administración, la vía de administración, y la tasa de excreción del compuesto específico empleado; la duración del tratamiento; los fármacos utilizados en combinación o en coincidencia con el polipéptido
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