ES2334744B1 - Procedimiento enzimatico para la obtencion del acido docosahexaenoicoomega-3 y del acido docosapentaenoico omega-6, a partir de aceites vegetales, y sus productos. - Google Patents
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Abstract
Procedimiento enzimático para la obtención del
ácido docosahexaenoico Omega-3 y ácido
docosapentaenoico
Omega-6, a partir de aceites vegetales, y sus productos.
Omega-6, a partir de aceites vegetales, y sus productos.
El procedimiento enzimático para la obtención
del ácido docosahexaenoico y del ácido docosapentaenoico de forma
independiente, a partir de los precursores de la serie
Omega-3 y Omega-6, el ácido
\alpha-linolénico y el linoléico, respectivamente.
Los precursores proceden de aceites vegetales, lo que supone una
ventaja económica frente a las técnicas empleadas actualmente. El
invento se basa en el empleo de enzimas endógenas presentes en
eucariotas superiores (5-desaturasa,
6-desaturasa y elongasa), y de dos enzimas presentes
en unas microalgas marinas (elongasa y
4-desaturasa), dando como resultado una nueva ruta
metabólica.
Las enzimas son clonadas en vectores de
expresión idóneos para la bacteria utilizada (E. Coli), de
manera que obtenemos bacterias transformadas genéticamente con DNAs
que codifican para las cinco enzimas. Tras la
sobre-expresión y purificación de las enzimas, son
inmovilizadas en columnas independientes, lo que permite la
ejecución de la ruta metabólica de forma seriada.
Description
Procedimiento enzimático para la obtención del
ácido docosahexaenoico Omega-3 y ácido
docosapentaenoico Omega-6, a partir de aceites
vegetales, y sus productos.
La presente invención se refiere a un proceso
biotecnológico enzimático empleado para la obtención del ácido
docosahexaenoico, el cual formado por una cadena de 22 carbonos con
seis dobles enlaces cis en las posiciones (4, 7, 10, 13, 16 y 19)
(C22:6^{4,7,10,13,16,19}), y es principal ácido graso
poli-insaturado de la serie
Omega-3, a partir del precursor ácido
\alpha-linolénico presente en un alto porcentaje
en diversos aceites vegetales. Así como el producto final de la
serie Omega-6, el ácido docosapentaenoico
Omega-6, el cual está formado por una cadena de 22
carbonos con cinco dobles enlaces cis en las posiciones (4, 7,10,
13 y 16) (C22:5^{4,7,10,13,16}), a partir del precursor de la
ruta, el ácido linoleico, contenido en un alto porcentaje en aceites
vegetales.
El objeto de la invención es, por tanto,
proporcionar un nuevo método técnicamente viable y económicamente
rentable para la obtención de los principales ácidos grasos
esenciales, el ácido docosahexaenoico y el ácido docosapentaenoico
Omega-6, mediante reacciones enzimáticas a partir de
los precursores de la rutas de la series de los ácidos grasos
Omega-3 y Omega-6. El invento se
basa en el empleo de enzimas endógenas de eucariotas superiores,
las cuales son comunes en las rutas metabólicas de los ácidos
Omega-3 y 6, como son:
5-desaturasa, 6-desaturasa y una
elongasa, y por otro lado dos enzimas procedentes de unas
microalgas marinas (una elongasa y una
4-desaturasa), dando como resultado una nueva ruta
metabólica mucho más eficaz y económica frente a las actuales.
El presente invento pretende solucionar el
problema actual existente, nuestro organismo produce una muy baja
cantidad de ácido docosahexaenóico a partir del precursor, el ácido
\alpha-linolénico, presente en la dieta
(mayoritariamente tras la ingesta de pescado azul).
Actualmente se suceden dos situaciones opuestas,
por un lado el ritmo de vida actual hace difícil la alimentación de
forma equilibrada y por otro lado, la esperanza de vida media ha
aumentado mucho en los últimos años, lo que hace que nos
preocupemos por alcanzar una mejora en nuestra calidad de vida.
Estas situaciones han impulsado la investigación en alimentos
funcionales, en la industria farmacéutica, la cosmética, y otras
industrias.
Los beneficios actuales asignados al ácido
docosahexaenoico, hacen de este un producto con un gran potencial
en diferentes industrias (alimentaria, ganadera, farmacéutica y/o
cosmética).
La invención que aquí se describe, tiene como
principal objetivo la obtención de un producto final con un gran
valor añadido (el ácido docosahexaenoico), utilizando como punto de
partida el precursor de la ruta metabólica
\hbox{Omega-3} contenido aceites
vegetales. Su ejecución consiste en extrapolar las condiciones que
ocurren en la naturaleza en eucariotas superiores y en microalgas
marinas, mediante la obtención de algunas de las enzimas implicadas
en ambas rutas metabólicas.
Por otro lado, el hecho de que la síntesis de
los ácidos grasos de la serie Omega-3 y
Omega-6, sean procesos interdependientes hace que
ambas rutas sean motivo de estudio en dicha invención, ya que ambas
rutas compiten por las mismas enzimas.
Las tecnologías a identificar para escalar la
ruta metabólica a nivel industrial, vienen dadas en función de las
propiedades químicas y bioquímicas de las diferentes enzimas, de
manera que permanezcan inalterables tras su extrapolación a nivel
industrial. El planteamiento industrial consistirá en sustituir las
columnas en las cuales se van a inmovilizar las enzimas, por
reactores, de manera que se puedan obtener cantidades elevadas
tanto de los productos intermediarios de las rutas como de los
productos finales, los ácidos docosahexaenoico y docosapentaenoico
\hbox{Omega-6.}
\vskip1.000000\baselineskip
En el estudio del estado de la técnica se han
identificado en las bases de datos de la oficina española de
patentes y marcas, dos patentes que reflejan la importancia del uso
ácido docosahexaenoico frente a diversas enfermedades.
1. Patente número: 200402057 con fecha de
publicación 01.03.2006.
- Título: Suplemento alimenticio basado en la utilización de ácidos grasos Omega-3 (DHA-EPA) para el tratamiento de la fatiga crónica.
- Este procedimiento consiste en el "Suplemento alimenticio basado en la utilización de ácidos grasos Omega-3 (DHA-EPA) para el tratamiento del síndrome de fatiga crónica que consiste en la ingesta de un suplemento diario de ácidos grasos Omega-3 durante seis meses en forma oleoil o cápsulas blandas distribuido en las tres principales comidas diarias".
\newpage
2. Patente número: 200202963 con fecha de
publicación 16.06.2004.
- Título: Utilización del ácido docosahexaenoico como principio activo para el tratamiento de la lipodistrofia.
- Este procedimiento consiste en la "Utilización de ácido docosahexaenoico como principio activo para el tratamiento de la lipodistrofia. Utilización de un extracto de origen animal, vegetal o producido por un microorganismo que comprende como principio activo ácido docosahexaenoico para la fabricación de un medicamento destinado al tratamiento de la lipodistrofia en un mamífero. Dicho tratamiento es eficaz y supera los inconvenientes de los tratamientos actuales de la lipodistrofia en pacientes con infección por VIH".
En ambas patentes, se estudia la aplicación y el
efecto que tiene la administración del ácido docosahexaenoico sobre
diferentes enfermedades: fatiga crónica y lipodistrofia, en la
primera de ellas se administra como aditivo alimenticio y en la
segunda, como principio activo. Sin embargo, en ninguna de estas
patentes se proponen estrategias diferentes a las actuales para
mejorar el rendimiento en la obtención de DHA.
El ácido docosahexaenoico es un ácido graso
altamente insaturado, ya que posee 6 dobles enlaces, pertenece a la
familia de ácidos grasos poli-insaturados
Omega-3 de cadena muy larga (superiores a 18
carbonos). Las funciones biológicas y los requerimientos
nutricionales de este ácido graso han llamado poderosamente la
atención en los últimos 10 ó 15 años. Los ácidos grasos
Omega-3 y Omega-6 son considerados
esenciales debido a que los mamíferos no pueden incorporar dobles
enlaces en las posiciones 3 y 6 (considerando el grupo funcional
carboxilo el extremo más alejado), por lo que estos ácidos grasos ó
sus precursores deben ser adquiridos desde la dieta.
Los dos ácidos precursores (ácido linoleico
C18:2 Omega-6 y el ácido
\alpha-linolénico C18:3 Omega-3)
compiten por la misma enzima 6-desaturasa, sin
embargo esta tiene mayor afinidad por el ácido
\alpha-linolénico. La relación ideal entre ácido
linoleico y a-linolénico es de 5:1 a 15:1.
El hecho de que la síntesis de ácido
docosahexaenóico, y en general de los ácidos grasos
Omega-3 sea un proceso interdependiente de la
síntesis de los ácidos grasos Omega-6, hace que sea
necesario un mayor aporte en la ingesta del precursor ácido
linoleico, este está presente en aceites vegetales y maíz. La dieta
occidental actual se basa principalmente en un consumo masivo de
aceites vegetales, carnes procedentes de cerdos y pollos
alimentados con harinas de maíz y una reducción en la ingesta de
pescado azul (rico en ácido docosahexaenóico procedente de algas y
fitoplancton), el resultado es un aporte dietario mayoritariamente
constituido por ácidos grasos Omega-6 y como
consecuencia una inhibición en la síntesis de ácido docosahexaenóico
y ácido eicosapentaenoico (C20:5), este último es un intermediario
en la ruta metabólica para la obtención de ácido
docosahexaenóico.
Cada día se conocen más los beneficios asociados
con la ingesta del principal ácido graso Omega-3,
el ácido docosahexaenoico. Existen un gran número de estudios que
demuestran el papel del ácido docosahexaenoico en personas sanas
(principal componente de las membranas celulares, de las membranas
neuronales, así como de los fotorreceptores de la retina,
componente esencial de la leche materna, fundamental durante la
gestación para la adecuada formación del feto), así como los
beneficios que supone su administración frente a determinadas
enfermedades (Esquizofrenia, Alzheimer) Por todo ello, es lógico
que cada día se investigué más acerca del ácido
docosahexaenoico.
A día de hoy, la principal fuente de obtención
del principal ácido graso Omega-3, el ácido
docosahexaenoico, es a partir del aceite de pescado y/o algas
marinas, ambos son recursos bien limitados, además en el aceite de
pescado el porcentaje de ácido docosahexaenoico no supera el 12%
del total de ácidos grasos. Respecto a las microalgas marinas, son
bien conocidas las desventajas que presentan:
- -
- Gran dificultad en la localización e identificación de las especies adecuadas.
- -
- Se conocen más de 40.000 especies de microalgas, de las cuales sólo se han explorado los usos potenciales de apenas unas decenas.
- -
- Los trabajos de búsqueda de nuevas especies son lentos, complejos y costosos, especialmente para la localización de nuevas especies ricas en ácidos grasos.
El objeto de invención que aquí se presenta,
consiste en un procedimiento enzimático alternativo para la
obtención del ácido docosahexaenoico y del ácido docosapentaenoico
Omega-6 a partir de los precursores esenciales
contenidos en aceites vegetales.
Previo a la presentación de solicitud de la
invención que aquí se detalla, los autores de la invención han
estudiado las diferentes fuentes alternativas para la obtención de
los precursores esenciales de la serie Omega-3 y
Omega-6, el ácido
\alpha-linolénico y el ácido linoleico,
respectivamente, dichos estudios, revelan que algunos aceites
vegetales son una muy buena fuente para la extracción de los
precursores esenciales en la ruta de los ácidos grasos
Omega-3 y los Omega-6.
Por otro parte, pensamos que existe una
necesidad real de mejorar la obtención de ácido docosahexaenóico a
partir su precursor (ácido \alpha-linolénico). En
mamíferos la conversión del ácido eicosapentaenoico (C20:5),
intermediario en la ruta metabólica, para la obtención de ácido
docosahexaenóico, ocurre de forma indirecta y minoritaria, siendo
necesarias dos elongaciones, una desaturación y una
\beta-oxidación (Ruta de Sprecher) (figura 1).
Esta invención mejora el paso de ácido eicosapentaenoico a ácido
docosahexaenóico, mediante la utilización de dos enzimas
procedentes de microalgas marinas.
Lo que dicha invención propone,, es la obtención
del precursor de la serie de ácidos grasos Omega-3,
el ácido \alpha-linolénico, el cual está presente
en un alto porcentaje en determinados aceites vegetales
(50-60% en el aceite de linaza), de manera que
mediante reacciones enzimáticas y por convergencia en una ruta
metabólica se puede obtener un alto porcentaje del producto final,
el ácido docosahexaenoico.
La consecuencia de que ambas rutas metabólicas,
la de la serie Omega-3 y la de la serie
Omega-6, sean rutas interdependientes en eucariotas
superiores, hace que en esta invención, ambas series sean objeto de
estudio.
Uno de los principales ácidos grasos de la serie
Omega-6, es el ácido araquidónico, está formado por
una cadena de 20 carbonos con cuatro dobles enlaces cis en las
posiciones (5, 8, 11 y 14) (C20:4^{5,8,11,14}), es un producto
intermedio que juega un papel relevante en nuestro organismo.
El ácido araquidónico, es un ácido graso
esencial requerido por la mayoría de los mamíferos, algunos de
ellos tienen poca capacidad de convertir ácido linoleico en ácido
araquidónico, por lo que se toma en la dieta. Está presente en las
membranas celulares, y es el precursor en la producción de
eicosanoides (prostaglandinas, tromboxanos y leucotrienos), los
cuales actúan como potentes reguladores intracelulares participando
en gran medida en los procesos inflamatorios y en la respuesta
inmune.
Una de las ideas más innovadoras de la
invención, consiste en el diseño de una ruta convergente partiendo
de dos rutas metabólicas previamente descritas en la obtención del
ácido docosahexaenoico, una de ellas ocurre en eucariotas
superiores, de la cual seleccionamos las enzimas de la parte más
eficaz de la ruta, los tres primeros pasos, y la otra parte de la
ruta ocurre en algas marinas, seleccionamos los dos últimas
enzimas, ya que estas son menos eficientes en eucariotas
superiores.
Inicialmente, los aceites vegetales (con alto
contenido en ácido \alpha-linolénico y ácido
linoleico), son sometidos a un primer proceso de extracción y de
purificación para obtener un alto porcentaje cualitativo y
cuantitativo de los precursores de la serie Omega-3
y Omega-6, el ácido
\alpha-linolénico y ácido linoleico.
Las enzimas implicadas en las rutas metabólicas
son donadas en bacterias, sobre-expresadas y
purificadas. A continuación son inmovilizadas de forma
independiente en columnas que contienen las resinas adecuadas.
De forma más concreta, los precursores, de forma
independiente, son sometidos a una primera reacción enzimática,
pasando a través de una columna en cuya resina se ha inmovilizado
la primera enzima de la ruta metabólica que aquí se detalla (figura
1). La reacción se lleva a flujo lento-constante.
Tras la elución del primer producto de la serie
Omega-3 (ácido estearidónico C 18:4), una vez
valorado el porcentaje de obtención de dicho producto, este es
adicionado a la 2ª columna que contiene la 2ª enzima inmovilizada.
Este proceso se reproduce de forma seriada, de manera que el
producto obtenido en cada una de las reacciones enzimáticas se
adiciona a la siguiente columna, la cual contiene la enzima
adecuada en cada etapa, así hasta la 5ª y última reacción, donde se
obtiene el producto con mayor añadido o ácido docosahexaenóico.
Con el mismo procedimiento se lleva a cabo el
proceso biotecnológico enzimático para la síntesis de los ácidos
grasos de la serie Omega-6. El precursor de la
serie, el ácido linoleico, es sometido a una primera reacción
enzimática, pasando a través de una columna en cuya resina se ha
inmovilizado la primera enzima (figura 1). La reacción se lleva a
flujo lento-constante. Tras la elución del primer
producto de la serie Omega-6 (ácido
\gamma-linolénico C18:2), se valora el porcentaje
de obtención del producto, este se adiciona a la 2ª columna que
contiene la 2ª enzima inmovilizada. El proceso se reproduce de
forma seriada, de forma que el producto obtenido en cada una de las
reacciones enzimáticas se adiciona a la siguiente columna, la cual
contiene la enzima adecuada en cada etapa, así hasta la 5ª y última
reacción, donde se obtiene el ácido docosapentaenoico
Omega-6.
La invención propone partir de altos porcentajes
de los precursores de la ruta, estos son sometidos a una serie de
reacciones enzimáticas existentes en la naturaleza, y el resultado
es la obtención de altos porcentajes del ácido graso esencial de
interés, el ácido docosahexaenoico y del ácido docosapentaenoico
Omega-6.
Esta invención solventa un problema real en
cuanto a la baja concentración de ácido docosahexaenoico contenido
en aceites de pescado y por otro lado una reducción en el coste de
la materia prima.
Para la mejor compresión de la invención que
aquí se detalla, se acompaña una figura (figura 1), que muestra la
ruta enzimática alternativa que en dicha invención se describe,
tanto para la serie de los ácidos grasos Omega-3
como para la de los ácidos grasos Omega-6. Las cinco
enzimas empleadas son las mismas para ambas series, ya que compiten
por los mismos sustratos. Las tres primeras enzimas
(6-desaturasa, elongasa y
5-desaturasa) están presentes en eucariotas
superiores, mientras que las dos últimas (elongasa y
4-desaturasa) están presentes en microalgas marinas,
estas últimas son seleccionadas por poseer una mayor actividad
catalítica que las homólogas en eucariotas superiores.
La figura también muestra la ruta de Sprecher,
que tiene lugar en eucariotas superiores, a través de la cual el
ácido docosapentaenoico dará lugar al ácido docoshexaenoico, pero
de forma indirecta, lo que hace que sea menos eficiente que si
ocurriese de forma directa, dicha problemática se intenta subsanar
con la presente invención, que emplea dos enzimas procedentes de
microalgas para las dos reacciones finales (una elongación y una
desaturación).
\vskip1.000000\baselineskip
Primer
ejemplo
En un ejemplo de realización del procedimiento
enzimático para la obtención del principal ácido graso de la serie
Omega-3 (el ácido docosahexaenoico), se parte del
precursor de la ruta metabólica de la serie
Omega-3, el ácido
\alpha-linolénico, presente en un alto porcentaje en algunos aceites vegetales.
\alpha-linolénico, presente en un alto porcentaje en algunos aceites vegetales.
Para el procedimiento biotecnológico que aquí se
detalla, partimos de un aceite vegetal rico en el precursor
ácido
\alpha-linolénico, el cual es sometido a un primer fraccionamiento mediante la tecnología basada en cromatografía de fluidos supercríticos, el resultado es obtener el precursor de la serie Omega-3 más concentrado y sin contaminantes.
\alpha-linolénico, el cual es sometido a un primer fraccionamiento mediante la tecnología basada en cromatografía de fluidos supercríticos, el resultado es obtener el precursor de la serie Omega-3 más concentrado y sin contaminantes.
A partir del precursor, ácido
\alpha-linolénico, se inicia el procedimiento
enzimático que se detalla en dicha invención.
Las cinco enzimas necesarias, han sido
previamente clonadas en vectores de expresión, los cuales se han
utilizado para transformar bacterias (E. Coli) debido a la
facilidad de expresión de proteínas de estas bacterias y de su
transformación con genomas que codifican para enzimas.
A continuación, las enzimas son inmovilizadas en
columnas adecuadas a su composición y tamaño, de manera que
permanezcan estables sus centros activos.
La ejecución de la ruta se realiza de forma
seriada de manera que el precursor de la ruta, el ácido
\alpha-linolénico (C18:3) (figura 1), se añade a
la primera columna que contiene la 1ª enzima inmovilizada,
6-desaturasa, el producto mayoritario (ácido
estearidónico (C18:4)) de la 1ª reacción, se añade a la 2ª columna
con la enzima elongasa inmovilizada, el producto mayoritario (ácido
eicosatetraenóico (C20:4)) de la 2ª reacción se añade a la 3ª
columna que contiene a la enzima 5-desaturasa
inmovilizada, su producto mayoritario (ácido eicosapentaenoico
(C20:5)), se añade a la 4ª columna con la enzima elongasa
inmovilizada, y su producto mayoritario (ácido docosapentaenoico
(C22:5)), se añade a la 5ª columna que contiene inmovilizada a la
enzima 4-desaturasa, para finalmente, obtener como
producto final mayoritario el principal ácido graso de la serie
Omega 3, el ácido docosahexaenoico.
Las diferentes reacciones se realizan a mediante
flujo lento-constante Este proceso se reproduce de
forma seriada, de manera que el producto mayoritario obtenido en
cada una de las reacciones enzimáticas se adiciona a la siguiente
columna, la cual contiene la enzima adecuada en cada etapa, así
hasta la 5ª y última reacción, donde se obtiene principalmente ácido
docosahexaenóico.
El producto obtenido mediante el procedimiento
enzimático a partir del precursor de la serie
Omega-3, el ácido
\alpha-linolénico, se caracteriza para demostrar que se trata de un producto constituido principalmente por ácidos grasos, en concreto por el ácido docosahexaenoico, con propiedades afines al ácido docosahexaenoico existente en el mercado.
\alpha-linolénico, se caracteriza para demostrar que se trata de un producto constituido principalmente por ácidos grasos, en concreto por el ácido docosahexaenoico, con propiedades afines al ácido docosahexaenoico existente en el mercado.
\vskip1.000000\baselineskip
Segundo
ejemplo
En un ejemplo de realización del procedimiento
enzimático para la obtención del ácido docosapentaenoico
Omega-6 se parte del precursor de la ruta
metabólica de la serie Omega-6, el ácido linoleico,
presente en un alto porcentaje en algunos aceites vegetales.
Para el procedimiento biotecnológico que aquí se
detalla, partimos de un aceite vegetal rico en el precursor ácido
linoleico, el cual es sometido a un primer fraccionamiento mediante
la tecnología basada en cromatografía de fluidos supercríticos, el
resultado es obtener el precursor de la serie
Omega-6 más concentrado y sin contaminantes.
A partir del precursor, ácido linoleico, se
inicia el procedimiento enzimático que se detalla en dicha
invención.
Las cinco enzimas necesarias, han sido
previamente clonadas en vectores de expresión, los cuales se han
utilizado para transformar bacterias (E. Coli) debido a la
facilidad de expresión de proteínas de estas bacterias y de su
transformación con genomas que codifican para enzimas.
A continuación, las enzimas son inmovilizadas en
columnas adecuadas a su composición y tamaño, de manera que
permanezcan estables sus centros activos.
La ejecución de la ruta se realiza de forma
seriada de manera que el precursor de la ruta, el ácido linoleico
(C18:2) (figura 1), se añade a la primera columna que contiene la
1ª enzima inmovilizada, 6-desaturasa, el producto
mayoritario (ácido \gamma-linolénico (C 18:3)) de
la 1ª reacción, se añade a la 2ª columna con la enzima elongasa
inmovilizada, el producto mayoritario (ácido
dihomo-\gamma-linolénico (C20:3))
de la 2ª reacción se añade a la 3ª columna que contiene a la enzima
5-desaturasa inmovilizada, su producto mayoritario
(ácido araquidónico (C20:4)), se añade a la 4ª columna con la enzima
elongasa inmovilizada, y su producto mayoritario (ácido
docosatetraenóico (C22:4)), se añade a la 5ª columna que contiene
inmovilizada a la enzima 4-desaturasa, para
finalmente, obtener como producto final mayoritario el principal el
ácido docosapentaenoico Omega-6.
Las diferentes reacciones se realizan a mediante
flujo lento-constante Este proceso se reproduce de
forma seriada, de manera que el producto mayoritario obtenido en
cada una de las reacciones enzimáticas se adiciona a la siguiente
columna, la cual contiene la enzima adecuada en cada etapa, así
hasta la 5ª y última reacción, donde se obtiene principalmente ácido
docosapentaenoico Omega-6.
El producto obtenido mediante el procedimiento
enzimático a partir del precursor de la serie
Omega-6, el ácido linoleico, se caracteriza para
demostrar que se trata de un producto constituido principalmente por
ácidos grasos, en concreto por el ácido docosapentaenoico
Omega-6, con propiedades afines al ácido
docosapentaenoico Omega-6, existente en el
mercado.
Claims (4)
1. Procedimiento enzimático para la obtención de
los ácidos grasos poli-insaturados de las series
Omega-3 y Omega-6, a partir de los
precursores de la serie Omega-3, el ácido
\alpha-linolénico, y de la serie
Omega-6, el ácido linoleico, contenidos en un alto
porcentaje de algunos aceites vegetales. Dicho procedimiento está
caracterizado por el empleo de una ruta metabólica
alternativa a las actuales, las tres primeras etapas y enzimas están
presentes en diferentes organismos (mamíferos, hongos, algas,
nematodos) y las dos últimas etapas y enzimas son específicas de un
tipo concreto de algas marinas. Para la ejecución del procedimiento
enzimático, las tres primeras enzimas
(6-desaturasa; elongasa,
5-desaturasa) procedentes de mamíferos y/o
microalgas y las dos últimas enzimas (elongasa y
4-desaturasa) procedentes de microalgas, son
donadas en vectores de expresión procariotas y/o eucariotas
independientes.
Procedimiento enzimático que comprende las
siguientes reacciones seriadas (figura 1):
- -
- 1ª reacción: Desaturación, del ácido \alpha-linolénico (C18:3) y del ácido linoleico (C 18:2) para dar lugar al ácido estearidónico (C 18:4) y al ácido \gamma-linolénico (C18:3) respectivamente, mediante la enzima 6-desaturasa.
- -
- 2ª reacción: Elongación, del ácido estearidónico (C 18:4) y del ácido \gamma-linolénico (C18:3) para dar lugar al ácido eicosatetraenoico (C20:4) y ácido dihomo-\gamma-linolénico (C20:3) respectivamente, mediante la enzima elongasa.
- -
- 3ª reacción: Desaturación, del ácido eicosatetraenoico (C20:4) y del ácido dihomo-\gamma-linolénico (C20:3) para dar lugar al ácido eicosapentaenoico (C20:5) y al ácido araquidónico (C20:4) respectivamente, mediante la enzima 5-desaturasa.
- -
- 4ª reacción: Elongación, del ácido eicosapentaenoico (C20:5) y del ácido araquidónico (C20:4) para dar lugar al ácido docosapentaenoico (C22:5) y al ácido docosatetraenoico (C22:4) respectivamente, mediante la enzima elongasa.
- -
- 5ª reacción: Desaturación, del ácido docosapentaenoico (C22:5) y del ácido docosatetraenoico (C22:4) para dar lugar al ácido docosahexaenoico (C22:6) y al ácido docosapentaenoico (C22:5) respectivamente, mediante la enzima 4-desaturasa.
2. Procedimiento enzimático para la obtención de
los ácidos grasos poli-insaturados de las series
Omega-3 y Omega-6, según
reivindicación 1, caracterizado por el uso de enzimas
sobre-expresadas y purificadas a partir de las
bacterias y/o levaduras transformadas con vectores de expresión
adecuados que contienen las secuencias de las diferentes enzimas
que actúan en la ruta metabólica.
3. Procedimiento enzimático para de los ácidos
grasos poli-insaturados de las series
Omega-3 y Omega-6, según
reivindicación 1, caracterizado por el uso de enzimas
inmovilizadas individualmente en columnas, así como en otros
sistemas de inmovilización (soportes, células procariotas y/o
eucariotas) adecuadas a su tamaño y composición.
4. Productos y subproductos correspondientes a
los ácidos grasos poli-insaturados de las series
Omega-3 y Omega-6 obtenidos mediante
el procedimiento enzimático a partir de los precursores de las
series Omega-3 y Omega-6, según
reivindicación 1, con propiedades afines a los productos existentes
en el mercado.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ES200802066A ES2334744B1 (es) | 2008-07-11 | 2008-07-11 | Procedimiento enzimatico para la obtencion del acido docosahexaenoicoomega-3 y del acido docosapentaenoico omega-6, a partir de aceites vegetales, y sus productos. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ES200802066A ES2334744B1 (es) | 2008-07-11 | 2008-07-11 | Procedimiento enzimatico para la obtencion del acido docosahexaenoicoomega-3 y del acido docosapentaenoico omega-6, a partir de aceites vegetales, y sus productos. |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2334744A1 ES2334744A1 (es) | 2010-03-15 |
| ES2334744B1 true ES2334744B1 (es) | 2011-04-06 |
Family
ID=41722662
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES200802066A Withdrawn - After Issue ES2334744B1 (es) | 2008-07-11 | 2008-07-11 | Procedimiento enzimatico para la obtencion del acido docosahexaenoicoomega-3 y del acido docosapentaenoico omega-6, a partir de aceites vegetales, y sus productos. |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| ES (1) | ES2334744B1 (es) |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2510462A1 (en) * | 2002-12-19 | 2004-07-08 | University Of Bristol | Method for producing polyunsaturated fatty acids in a transgenic plant or microorganism comprising an introduced delta-9-elongase and a delta-8-desaturase |
| MX342029B (es) * | 2003-08-01 | 2016-09-12 | Basf Plant Science Gmbh * | Metodo para la produccion de acidos grasos poli - insaturados en organismos transgenicos. |
| DE102004062543A1 (de) * | 2004-12-24 | 2006-07-06 | Basf Plant Science Gmbh | Verfahren zur Herstellung mehrfach ungesättigter Fettsäuren in transgenen Pflanzen |
| CN102559364B (zh) * | 2004-04-22 | 2016-08-17 | 联邦科学技术研究组织 | 用重组细胞合成长链多不饱和脂肪酸 |
| PL1756280T3 (pl) * | 2004-04-22 | 2015-04-30 | Commw Scient Ind Res Org | Synteza długołańcuchowych wielonienasyconych kwasów tłuszczowych w komórkach rekombinowanych |
-
2008
- 2008-07-11 ES ES200802066A patent/ES2334744B1/es not_active Withdrawn - After Issue
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES2334744A1 (es) | 2010-03-15 |
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