ES2312961T3 - Usp de extracto de banano para el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal. - Google Patents

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Abstract

Una composición para uso en la prevención o tratamiento de la enfermedad intestinal inflamatoria que comprende una cantidad eficaz terapéuticamente de una fibra soluble obtenible del fruto de la Musa spp.

Description

Uso de extracto de banano para el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal.
La presente invención se refiere a composiciones y productos nutritivos que pueden usarse en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal (IBD) y en particular en la que dichas composiciones y productos comprenden extractos solubles obtenibles del fruto de la Musa spp.
La IBD es un término usado para describir la inflamación crónica, idiopática, del tracto gastrointestinal e incluye dos fenotipos principales: la enfermedad de Crohn (CD) y la colitis ulcerativa (UC). La enfermedad de Crohn está tipificada por la inflamación granulomatosa que afecta a cualquier parte del tracto gastrointestinal pero particularmente el área ileocecal. La colitis ulcerativa es específica del colon y está asociada con extensa lesión epitelial, abscesos en criptas y abundantes neutrófilos mucosales. Los pacientes con UC extensa o enfermedad de Crohn colónica tienen un riesgo incrementado de aproximadamente diez veces de desarrollar cáncer colorectal, el cual representa la causa principal de mortalidad asociada a la IBD.
La etiología de la IBD no es aún bien conocida. No obstante, existe un consenso creciente basado tanto en estudios sobre pacientes y a partir de modelos animales transgénicos de colitis, de que la inflamación intestinal es el resultado de una respuesta anormal a bacterias intestinales no patógenas. Algunas de las evidencias más sorprendentes de la implicación de bacterias en la patogénesis de la IBD surgen de estudios que demuestran la presencia de E. coli en biopsias mucosales ileales extraídas de pacientes con la enfermedad de Crohn. Estos organismos, a pesar de que carecen de marcadores convencionales de patogenicidad bacteriana, son capaces de invadir líneas de células intestinales y vivir con macrófagos sin inducir la apoptosis. Otros estudios, los cuales han usado una sonda ribosómica 16S de amplia especificidad para la hibridación in situ con el fin de detectar bacterias de todas las especies, han encontrado un incremento en bacterias no identificadas dentro de la capa de mucosa tanto en la UC como en la
CD.
Teniendo en cuenta la naturaleza debilitante de la IBD, así como la mortalidad asociada con la IBD, existe una necesidad de proporcionar composiciones y productos nuevos y mejorados que puedan usarse para tratar estas afecciones. Por ello, es un objeto de la presente invención el proporcionar composiciones y productos útiles en la prevención o tratamiento de la IBD.
De acuerdo con un primer aspecto de la presente invención, se proporciona una composición para uso en la prevención o tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal, que comprende una cantidad eficaz terapéuticamente de una fibra soluble obtenible del fruto de la Musa spp.
De acuerdo con un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona el uso de fibra soluble obtenible del fruto de la Musa spp para la fabricación de un medicamento para la prevención o tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal.
Por "fibra soluble" los autores de la invención entienden fibras capaces de disolverse en un medio acuoso (y también opcionalmente en la corriente sanguínea) que comprenden polisacáridos u oligosacáridos solubles procedentes de una fuente de no almidón. Dichas fibras son capaces de pasar a través del estómago y el intestino delgado al intestino grueso sin ser substancialmente digeridas. A continuación, las fibras pueden actuar como un substrato fermentable para bacterias en el intestino grueso. Pueden obtenerse diferentes tipos de fibra soluble a partir de fuentes alimenticias comunes tales como frutas, especialmente manzanas y naranjas; verduras y hortalizas; salvado de avena; cebada; y legumbres. Las fibras solubles procedentes de diversas fuentes contendrán cantidades variables de polisacáridos tales como hemicelulosas o pectinas, así como cantidades variables de derivados monosacáridos y oligosacáridos. Aunque la composición de la fibra soluble es característica de la fuente de la planta, variará en respuesta a factores tales como plantaciones, madurez y origen geográfico. Por el contrario, las fibras insolubles se encuentran en la pared celular de las plantas y aportan estructura a la planta. Una fuente de alimento común de fibra insoluble es salvado de trigo y frutas con pieles y semillas comestibles, tales como fresas. Las fibras insolubles ayudan a la digestión. Fundamentalmente, actúan como agente de relleno (dando como resultado un tiempo de tránsito más corto e incremento de la masa fecal); e igualmente retienen al agua conforme se mueven a través del tracto intestinal (ablandando las deposiciones y ayudando, de esta forma, a prevenir el estreñimiento).
Es de señalar que la fibra soluble de acuerdo con la presente invención puede estar en forma pura, o como alternativa, puede igualmente mezclarse con otros compuestos (siempre y cuando que dichos compuestos no inhiban las propiedades anti-inflamatorias de la fibra de acuerdo con la invención). En consecuencia, la presente invención abarca composiciones que comprenden cantidades eficaces de fibra soluble así como fibra insoluble.
Se prefiere que la fibra soluble usada de acuerdo con la invención sea no gelificante.
Sin desear quedar ligado a hipótesis alguna, el autor de la invención estima que las fibras solubles son útiles en el tratamiento y la prevención de la IBD en base a su conocimiento de este campo científico y al trabajo presentado en el Ejemplo 1.
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En él se reconoce que la IBD (por ejemplo, colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn) puede representar una respuesta alterada a la flora microbiana intestinal normal. En particular, en él se estima que existe una posibilidad de que obviamente las bacterias "inocuas" no patógenas pueden causar inflamación si penetran la capa de mucosa que cubre el intestino y se asocian entre sí íntimamente dentro de las células que recubren el intestino. Una etapa crítica en la colonización bacteriana del intestino es la adherencia de la bacteria a la mucosa a través de proteínas fimbriales y/o de superficie conocida como adhesina. Estas proteínas actúan como lectinas que reconocen señas de glucosilos expresados por glucoproteína o glucolípido de la célula de superficie huésped y juegan un papel clave en la patogenicidad bacteriana. Se ha demostrado glucosilación aberrante de glucoproteínas mocosales en la enfermedad colónica, habiéndose encontrado anormalidas similares en la colitis ulcerativa, enfermedad de Crohn y cáncer de colon. El autor de la invención estima que puede existir un sub-grupo de bacterias con adhesinas específicas para las estructuras carbohidrato que están expresadas en la mucosa de la enfermedad inflamatoria intestinal. De acuerdo con ello, la glucosilación aberrante de glucoproteínas mucosales colónicas observadas en la IBD pueden representar receptores para adhesinas específicas del E. coli asociado con lesiones inflamatorias intestinales
tempranas.
De acuerdo con ello, el autor de la invención ha caracterizado la adherencia de bacterias relacionadas con la enfermedad inflamatoria intestinal a estructuras de carbohidratos (véase Ejemplo 1). Ha encontrado que la adhesión de dichas bacterias a superficies de células puede bloquearse mediante algunos, pero no todos, carbohidratos complejos. En particular, ha encontrado que las fibras solubles de acuerdo con la invención fueron eficaces para prevenir la adhesión bacteriana y, de acuerdo con ello, tienen eficacia para la prevención o tratamiento de la IBD. En consecuencia, se estima que las fibras solubles pueden o bien imitar o competir con receptor bacterianos, previniendo, de esta forma, el reclutamiento bacteriano y la posterior inflamación.
La fibra soluble de acuerdo con la presente invención puede obtenerse de gomas parcialmente hidrolizadas de bajo peso molecular (por ejemplo, goma guar, goma de la falsa acacia, goma de heno griego, goma del quimbombó y otras gomas comestibles de baja viscosidad adecuadas), mucina submaxilar bovina (BSM), alginato o carrageenano parcialmente hidrolizado.
La fibra soluble de acuerdo con la presente invención puede obtenerse igualmente de un extracto de una fruta, verdura u hortaliza o cereal o una fracción activa de los mismos. La fracción activa puede obtenerse de un fruto o grano seleccionado entre frutos o plantas de las familias Solanaceae, Rutaceae, Cucurbitaceae, Rosaceae, Musaceae, Anacardiaceae, Vitacease, Arecaceae, Ericaceae, Lauraceae y Poaceae.
Los ejemplos de frutos que pueden usarse de acuerdo con la presente invención son los seleccionados entre las familias Solanaceae, Rutaceae, Cucurbitaceae, Rosaceae, Musaceae, Anacardiaceae, Bromeliaceae, Vitaceae, Arecaceae, Ericaceae y Lauraceae.
Los ejemplos de Solanaceae incluyen el tomate, por ejemplo la variedad de tomate Inglés. Los ejemplos de Rutaceae incluyen las especies Citrus tales como Citrus paradisii (pomelo), Citrus sinensis (naranja), Citrus limón (limón) y Citrus aurantifolia (lima). Los ejemplos de Cucurbitaceae incluyen Cucumis melo (melón), por ejemplo el melón melaza. Los ejemplos de Anacardiaceae incluyen Mangifera indica (mango). Los ejemplos de Rosaceae incluyen Pyrus sylvestris (manzana), Pyrus communis (pera), Anygdalus perisca o Prunus pérsica Var. nectarina (nectarina), Prunus armeniaca (albaricoque), Prunus domestica (ciruela), Prunus avium (cereza), Prunus pérsica (melocotón), la fresa y la zarzamora. Los ejemplos de Musaceae incluyen Musa paradisiaca (banana). Los ejemplos de Bromeliaceae incluyen Ananas sativus (piña). Los ejemplos de Lauraceae incluyen Persea gratissima o Persea americana (avocado). Los ejemplos de Vitaceae incluyen Vitis vinífera (uva). Los ejemplos de Arecaceae incluyen Phoenix dactilifera (dátil). Los ejemplos de Ericaceae incluyen el arándano.
Los ejemplos particulares de frutos, cuyos extractos o fracciones activas de los mismos se ha encontrado que son útiles de acuerdo con la invención son el tomate, pomelo, melón, mango, nectarina, fresa, ciruela, uva, pera, manzana y avocado. Los ejemplos particulares de hortalizas y verduras son la patata, zanahoria, chirivía, remolacha, calabaza, calabacines y pimiento. Los ejemplos particulares de cereales son granos de trigo, granos de cebada, granos de maíz y granos de arroz.
Sin embargo, los autores de la invención han encontrado que las fibras solubles obtenidas de la familia Musaceae (es decir, los géneros Musa y Ensete) son particularmente útiles. Las fibras solubles de la familia Musa spp (es decir, bananas o plátanos) tienen la mayor eficacia para el tratamiento o prevención de la IBD. Se conocen once especies de Musa pero las fibras solubles se obtienen preferiblemente de las plantaciones de Musa acuminata, Musa balbisiana, Musa paradisiaca o Musa sapientum.
Una fibra soluble preferida para uso en el tratamiento o prevención de la IBD es la obtenida de plátanos o bananas comestibles verdes (es decir, sin madurar).
La fibra soluble de acuerdo con la invención puede prepararse en su forma la más simple mediante la homogeneización de una fuente de la fibra (por ejemplo, carne de plátano) en una solución acuosa y, a continuación, separación por decantación del sobrenadante acuoso. Este sobrenadante puede usarse, a continuación, de acuerdo con la invención. Como alternativa, la mezcla puede centrifugarse para separar los sólidos de la solución acuosa que comprende la fibra soluble. Esta solución acuosa puede consistir esencialmente del jugo de la fruta, opcionalmente con la adición de agua extra adicionada durante la etapa de homogeneización. Dichos extractos acuosos pueden concentrarse, enriquecerse o condensarse, por ejemplo, mediante técnicas normalizadas, por ejemplo, evaporación bajo presión reducida. Los ejemplos de concentrados son aquellos en los cuales están concentrados al menos 2 veces, más usualmente, al menos 4 veces, por ejemplo al menos 8 veces, o al menos 40 veces, o al menos 100 veces, o al menos 200 veces, o al menos 1000 veces.
La solución acuosa puede fraccionarse para aislar una o más fracciones activas que comprenden la fibra soluble en ellas, por ejemplo, mediante filtración por peso molecular, o cromatografía sobre un soporte sólido adecuado tal como un gel de Sepharose (para cromatografía por exclusión de tamaño) o columna de intercambio de iones usando HPLC sobre una sílice o alúmina adecuadamente tratada, por ejemplo, sílice recubierta con ODS; o mediante extracción con disolvente.
La fibra soluble de acuerdo con la invención puede prepararse mediante una o más de las etapas siguientes:
(A) Se prefiere que la fibra soluble se prepare mediante estrujado o cortado en rodajas de la fruta (por ejemplo, plátano o banana) y, a continuación, manteniendo en ebullición la fruta en agua (preferiblemente agua estéril) durante entre 2 y 60 minutos, preferiblemente aproximadamente 30 minutos. Como alternativa, la fruta seca puede molerse y, a continuación, mantenerse en ebullición en agua tal como se ha expuesto anteriormente. Estos modos de tiempos de ebullición ayudan a romper el almidón (el autor de la invención ha encontrado que no es deseable tener un alto contenido en almidón en las fibras solubles). Después de la ebullición, la solución debería centrifugarse (por ejemplo a 10.000 g durante 10 minutos) para separar el material insoluble del sobrenadante. A continuación, el gránulo debería descartarse y el sobrenadante puede usarse como fibra soluble de acuerdo con la presente invención. El hecho de que el sobrenadante es útil es particularmente sorprendente a la luz de la técnica anterior que sugiere que la pulpa (es decir el material granulado) puede ser médicamente útil. Por ejemplo, Rabbini y otros, Gastroenterology, vol. 121, págs. 554-560, (2001)) sugiere que la pulpa de banana puede usarse para tratar la diarrea.
Sin embargo, debería resaltarse que el autor de la invención ha encontrado que la ebullición a 100°C no es esencial para la preparación de fibra soluble de acuerdo con la invención. Los ejemplos ilustran que la fruta homogeneizada tal como se ha descrito anteriormente puede producir fibra soluble usable (particularmente cuando se llevan a cabo etapas para eliminar almidón tal como se expone más adelante) sin necesariamente someter a ebullición la muestra.
(B) La fibra soluble preferida puede someterse a una etapa de tratamiento con una enzima capaz de hidrolizar los almidones y, de esta forma, eliminar el almidón de la fibra soluble. Para tal fin, pueden usarse enzimas degradantes del almidón tales como \alpha-amilasas procedentes de fuentes animales, bacterianas o fúngicas, amiloglucosidasas o pullulanasas, individualmente o en combinación. De acuerdo con ello, un protocolo preferido para la producción de fibra soluble implica que la fibra soluble sea extraída de plátanos mantenidos en ebullición y que sea tratada con una enzima, o enzimas, que digieran el almidón, para eliminar el almidón y producir una fracción Polisacárida Sin Almidón (NSP).
(C) Una etapa adicional que puede usarse en la preparación y enriquecimiento de fibra soluble de acuerdo con la invención, es una etapa de precipitación. Puede usarse una etapa de este tipo para precipitar la fibra soluble con el fin de que esta pueda separarse de otros contaminantes solubles en agua. A continuación, la fibra soluble precipitada puede mantenerse en forma de polvo (véase más adelante) o, como alternativa, puede volverse a suspender en un líquido de una composición y volumen definido (regulándose, de esta forma, la concentración de la fibra soluble). El autor de la invención ha encontrado que una vía ideal para precipitar la fibra soluble es agregar etanol al 80% a un extracto bruto de la fibra soluble. Como una alternativa a la precipitación, es de resaltar que puede usarse la diálisis.
Es de resaltar que las etapas (A) - (C) anteriormente mencionadas para el aislamiento de fibra soluble de acuerdo con la invención pueden combinarse para proporcionar un protocolo útil para la producción de fibra soluble. Dicho protocolo puede comprender:
(1) cortar fruta fresca y eliminar todas las pieles e introducir en una solución acuosa; o criodesecar la fruta entera (excluyendo las pieles), molerla e introducirla en una solución acuosa; o moler fruta desecada e introducirla en una solución acuosa; o tomar harina preparada a partir de fruta (por ejemplo, harina de plátano) e introducirla en una solución acuosa.
(2) A continuación, la solución procedente de (1) puede calentarse (por ejemplo, mantenerse en ebullición a 100°C) para gelatinizar el almidón y dispersar cualquier gránulo de almidón existente.
(3) Igualmente, el material puede hidrolizarse con enzimas digestoras del almidón para asegurar que se ha eliminado todo/la mayor parte del almidón.
(4) La fracción líquida remanente comprende polisacáridos sin almidón (NSP), la cual puede usarse como fibra soluble de acuerdo con la invención.
(5) A continuación, la fracción líquida puede precipitarse y lavarse con etanol al 80% y centrifugarse (a aproximadamente 10.000 g; es de señalar que pueden usarse fuerzas centrífugas más bajas). A continuación, se descarta el sobrenadante alcohólico y el residuo (el cual contiene tanto NSP soluble como insoluble) es criodesecado o secado por pulverización. El producto seco (el cual representa igualmente fibra soluble de acuerdo con la invención) puede, a continuación, almacenarse y reconstituirse cuando así se desee.
(6) Cuando se requiera fibra soluble en solución, el residuo seco puede mantenerse en ebullición en agua; centrifugarse (por ejemplo, a 10.000 g durante 10 minutos) y usar el sobrenadante según se requiera.
El sobrenadante (6) puede, opcionalmente, criodesecarse o secarse por pulverización para obtener una fibra soluble (en polvo) preferida de acuerdo con la invención.
Un protocolo preferido que implica la eliminación del almidón y que representa un procedimiento preferido para la producción de fibra soluble, comprende:
(i) Eliminación de las piles de plátanos de los plátanos y criodesecado del fruto entero (excluyendo las pieles) y, a continuación, molido.
(ii) A continuación, mantener en ebullición (100°C) el material molido durante aproximadamente 30 minutos en agua para gelatinizar el almidón y dispersar cualquier gránulo de almidón existente.
(iii) A continuación, hidrolizar el material con amilasa pancreática porcina (a 40°C) para asegurar que se ha eliminado todo/la mayor parte del almidón. Es más preferible que la fibra soluble para consumo humano sea tratada con \alpha-amilasa fúngica o bacteriana, amiloglucosidasa y pullulanasa.
(iv) La fracción líquida remanente comprende polisacáridos sin almidón (NSP). Esta, a continuación, se precipita y lava con etanol al 80% y centrifuga (a aproximadamente 10.000 g; es de señalar que pueden usarse fuerzas centrífugas más bajas). A continuación, se descarta el sobrenadante alcohólico y el residuo (el cual contiene tanto NSP soluble como insoluble) es criodesecado o secado por pulverización. Este producto criodesecado o secado por pulverización (el cual representa fibra soluble de acuerdo con la invención) puede, a continuación, almacenarse y reconstituirse cuando así se desee.
(v) Cuando se requiera fibra soluble en solución, el residuo criodesecado o secado por pulverización se mantiene en ebullición en agua durante aproximadamente 30 minutos; se centrifuga a 10.000 g durante 10 minutos y se usa el sobrenadante según se requiera.
El sobrenadante (v) puede, opcionalmente, criodesecarse nuevamente para obtener una fibra soluble (en polvo) preferida de acuerdo con la invención.
El autor de la invención ha encontrado que la materia comestible procedentes de plátanos (es decir, todo salvo las pieles) constituye aproximadamente 50% del plátano y la materia seca constituye aproximadamente el 31%. Los autores de la invención han encontrado que el rendimiento de NSP (de acuerdo con el protocolo anterior) es aproximadamente de 3-4% y aproximadamente el 40% de esta NSP representa fibra soluble de acuerdo con la invención.
Igualmente, el autor de la invención ha encontrado que un pH eficaz para una solución de fibra soluble es alrededor de pH 7. Un incremento en el pH incrementa la solubilidad pero se ha encontrado que una excesiva alcalinidad degrada los polisacáridos u oligosacáridos en la fibra soluble, dando como resultado una disminución de la eficacia.
La Tabla 1 ilustra el contenido en azúcar de una fibra soluble típica de acuerdo con las etapas (i) - (v) del protocolo expuesto anteriormente. El análisis del contenido en azúcar de una fibra soluble proporciona una "huella" para la fibra soluble procedente de una fuente particular. Es posible distinguir entre fibra soluble obtenida de plátanos y otras plantas (por ejemplo, vainas de guisante o trigo). De acuerdo con ello, es de resaltar que la fibra soluble preferida obtenida de Musa tiene un contenido en azúcar similar al mostrado en la Tabla 1.
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TABLA 1 
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1
Es más preferido que el contenido en azúcar sea similar al mostrado en la Tabla 2:
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TABLA 2
2
Las preparaciones de fibra soluble las más preferidas para uso de acuerdo con la invención se describen en los Ejemplos.
La IBD puede tratarse usando fibra soluble obtenida de una fuente natural (por ejemplo, preparada partir de banana o plátano). Como alternativa, pueden usarse azúcares sintéticos con la misma o similar composición de la fibra soluble preparada a partir de fuentes naturales.
Es de resaltar que puede obtenerse una preparación bruta mediante ebullición, o incluso solamente homogeneizando fruta en una solución acuosa. Los sólidos de frutas pueden granularse mediante centrifugación y el sobrenadante (conteniendo fibra soluble) puede usarse de acuerdo con la invención.
Las necesidades clínicas pueden dictar que una preparación bruta de este tipo (por ejemplo, el sobrenadante mencionado anteriormente) pueda ser necesario usarlo substancialmente "puro" o incluso diluido. Cuando este es el caso, el sobrenadante (tanto esté diluido o no) puede mezclarse con un cierto número de otros agentes que pueden agregarse por razones nutritivas, razones médicas o incluso para los fines de ajustar la apetencia al paladar de las fibras solubles para consumo por el sujeto a ser tratado.
Por ejemplo, la fibra soluble puede formularse con un producto lácteo (por ejemplo, leche, batido de leche o yogur) o un zumo de fruta (por ejemplo, zumo de naranja o similar), para producir una bebida/brebaje apetecible al paladar con el beneficio añadido de que contiene fibra soluble y, en consecuencia, será altamente adecuada como un refresco para los que sufren de la IBD.
Como alternativa, la preparación bruta puede incluirse en un líquido nutritivo para alimentación entérica. Por ejemplo, el sobrenadante puede mezclarse con solución salina o una solución acuosa (pueden incluirse otras vitaminas, minerales y nutrientes), para la alimentación entérica de sujetos.
Es de resaltar que puede requerirse la concentración de la preparación bruta procedente del primer protocolo o como alternativa desearse una composición en polvo. Cuando este es el caso, el extracto/sobrenadante bruto necesitará ser concentrado/deshidratado.
Las composiciones que comprenden fibra soluble pueden formularse en forma de polvos, gránulos o semisólidos para incorporación dentro de cápsulas. Para presentación en la forma de un semisólido, la fibra soluble puede disolverse o suspenderse en un vehículo semisólido o líquido viscoso tal como polietileno glicol, o un vehículo líquido tal como glicol, por ejemplo, propileno glicol, o glicerol o un aceite vegetal o de pescado, por ejemplo un aceite seleccionado entre aceite de oliva, aceite de girasol, aceite de azafrán, aceite de onagra, aceite de soja, aceite de hígado de bacalao, aceite de arenque, etc. A continuación, este puede usarse para rellenar cápsulas tanto del tipo de gelatina dura como gelatina blanda o hechas a partir de equivalentes de gelatina dura o blanda, siendo preferidas las cápsulas de gelatina blanda o equivalentes gelificantes para relleno de semisólidos o líquidos viscosos.
Los polvos que comprenden fibra soluble de acuerdo con la invención son particularmente útiles para la obtención de productos farmacéuticos o nutritivos que pueden usarse para prevenir o tratar la IBD.
La criodesecación o secado por pulverización representan procedimientos preferidos para la producción de un polvo que comprende fibras solubles de acuerdo con la invención. El secado por pulverización da como resultado mezclas de polvos granulares de libre fluidez con buenas propiedades de flujo y características de disolución rápidas.
Es de resaltar que el polvo producido por secado por pulverización o criodesecación mediante los protocolos expuestos anteriormente, representan fibra soluble en polvo preferida de acuerdo con la invención. Un polvo preferido es el obtenido de una solución de fibra soluble reconstituida producida mediante las etapas (i) - (v) (véase anteriormente), que posteriormente es criodesecada o secada por pulverización.
La fibra soluble en polvo puede reconstituirse en forma de una bebida/brebaje de baja viscosidad, transparente/traslúcida. La reconstitución puede ser en agua o leche o zumos de frutas tal como se ha expuesto anteriormente. Es de resaltar que el polvo puede envasarse en una bolsita y reconstituirse como una bebida por un sujeto cuando lo requiera o desee.
Las mezclas de polvos representan realizaciones preferidas de la invención. Dichas mezclas comprenden fibra soluble en polvo (tal como se ha descrito anteriormente) mezclada con otros ingredientes. Dichos ingredientes pueden agregarse por razones nutritivas o médicas o para mejorar la apetencia al paladar. La fibra soluble en polvo puede mezclarse con azúcares granulados de tamaños de partícula variables para obtener mezclas en polvo de libre fluidez de dulzor variable.
Como alternativa, pueden mezclarse edulcorantes naturales o edulcorantes artificiales (por ejemplo, aspartamo, sacarina y similares) con la fibra soluble en polvo para reconstitución en forma de una bebida edulcorada baja en calorías o de calorías reducidas. La mezcla en polvo puede comprender un suplemento mineral. El mineral puede ser uno cualquiera de entre calcio, magnesio, potasio, cinc, sodio, hierro, y sus diversas combinaciones.
Las mezclas en polvo pueden contener igualmente agentes tamponantes tal como tampones de citrato y fosfato, y agentes efervescentes formados a partir de carbonatos, por ejemplo, bicarbonatos tales como bicarbonato sódico o amónico, y un ácido sólido, por ejemplo ácido cítrico o una sal de citrato ácida.
La fibra soluble puede presentarse en forma de suplementos alimenticios o aditivos alimentarios, o puede incorporarse en alimentos, por ejemplo alimentos funcionales o nutricéuticos. Dichos productos pueden usarse como alimentos principales así como, bajo circunstancias en las que estos pueden ser una necesidad clínica.
Los polvos pueden incorporarse en barras alimenticias para aperitivo, por ejemplo barras de frutas, barras de nueces y barras de cereales. Para la presentación en la forma de barras alimenticias para aperitivo, el polvo puede mezclarse con uno cualquiera o más ingredientes seleccionados entre frutos secos tales como tomates, uvas y pasas secadas al sol, nueces o cereales molidos tales como avena o trigo.
Es de resaltar que la fibra soluble puede de manera ventajosa formularse en forma de un producto farmacéutico para uso como un medicamento (que requiere una prescripción u otro requisito).
La fibra soluble en polvo o fibra soluble líquida concentrada puede incorporarse igualmente en comprimidos, pastillas, dulces u otros productos alimenticios para ingestión oral. Es de resaltar igualmente que dicha fibra soluble en polvo o fibra soluble concentrada puede incorporarse dentro de cápsulas o dispositivos de lenta liberación que pueden ingerirse y son capaces de liberar fibra soluble dentro de los intestinos durante un largo período de tiempo.
Las fibras solubles pueden igualmente microencapsularse. Por ejemplo, la encapsulación puede ser mediante la formación de una cápsula de gel de alginato cálcico. Como excipientes para micro-encapsulación pueden usarse kappa-carrageenano, goma gelano, gelatina y almidón.
Las preparaciones brutas, concentrados líquidos, polvos y similares pueden combinarse con agentes terapéuticos conocidos para el tratamiento de la IBD. Como tales, la fibra soluble de acuerdo con la invención puede usarse en una terapia de combinación muy eficaz. Es de resaltar que la fibra soluble en solución puede actuar como un vehículo ideal para otros agentes terapéuticos para el tratamiento de la IBD.
La fibra soluble puede incluirse igualmente en terapias de combinación/simbióticas que incluyen una parte probiótica. Las bacterias contenidas dentro de muchas mezclas probióticas no poseen propiedades adhesivas de manera que no resultarían afectadas por la inclusión de fibra soluble de plátano.
Las composiciones de la invención pueden presentarse en la forma de formas de dosificación unitarias conteniendo una concentración definida de fibra soluble. Dichas formas de dosificación unitarias pueden seleccionarse con el fin de lograr un nivel deseado de actividad biológica.
La cantidad de una fibra soluble requerida por un sujeto está determinada por la actividad biológica y la biodisponibilidad, lo que a su vez depende de la formulación, modo de administración, propiedades fisicoquímicas de las fibras solubles y de si la fibra soluble está siendo usada como una monoterapia o en una terapia combinada. Generalmente, una dosis diaria para un adulto humano debería estar entre 0,1 g y 100 g de polvo criodesecado o secado por pulverización (en cualquier caso, formulado), más preferiblemente la dosis diaria está entre 1 g y 30 g (por ejemplo, aproximadamente 5 g, 10 g, ó 15 g, según se requiera).
Una forma de dosificación sólida o semisólida de la presente invención puede contener hasta aproximadamente 1000 mg de extracto seco conteniendo fibra soluble, por ejemplo hasta aproximadamente 800 mg.
La frecuencia de administración estará influenciada, igualmente, por los factores anteriormente mencionados y particularmente por la semivida y de las fibras solubles dentro del sujeto que está siendo tratado. Por ejemplo, la semivida estará influenciada por el estado de salud del sujeto, la movilidad del intestino y otros factores.
La fibra soluble es particularmente útil cuando está incluida en una formulación farmacéutica tal como un comprimido o cápsula. Dichas formulaciones pueden requerir que estén recubiertas enteramente si la biodisponibilidad así lo dicta. Pueden usarse los procedimientos conocidos, tales como los convencionalmente usados por la industria farmacéutica (por ejemplo, experimentación in vivo, ensayos clínicos, etc.) para establecer formulaciones específicas de composiciones farmacéuticas y regímenes terapéuticos precisos (tales como dosis diarias de los compuestos y la frecuencia de administración).
Es de resaltar que pueden usarse los procedimientos "nutricéuticos" convencionales para crear bebidas líquidas, mezclas de polvos y productos alimenticios que comprendan la fibra soluble.
Las dosis diarias pueden administrarse en forma de una administración única (por ejemplo, un comprimido diario para consumo oral o como una única bebida líquida). Como alternativa, la fibra soluble usada puede requerir la administración de dos o más veces durante un día. A modo de ejemplo, puede usarse una bebida de naranja de 100 ml conteniendo 0,1 - 20 g de fibra soluble secada por pulverización (preferiblemente 0,3 - 10 g de fibra soluble secada por pulverización y más preferiblemente 0,5 - 3,0 g) para cortar la sed a intervalos regularse a lo largo del día y, de esta forma, suministrar una dosis recomendada.
Es de resaltar que los productos nutritivos suplementados con fibra soluble representan un medio ideal para suministrar a sujetos con, o en riesgo de desarrollar, la IBD con fibra soluble de acuerdo con la presente invención. Por ello, de acuerdo con un tercer aspecto de la presente invención, se proporciona un producto nutritivo para uso en la prevención o tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal, que comprende una cantidad eficaz terapéuticamente de una fibra soluble obtenida del fruto de la Musa spp.
El producto nutritivo puede comprender:
(a) una bebida carbonatada o no carbonatada, embotellada, lista para usar, estable, semejante al agua, de baja viscosidad, transparente; o un líquido transparente concentrado para reconstitución conteniendo una fibra soluble no gelificante obtenida del fruto de la Musa spp;
(b) una mezcla en polvo/granular para ser reconstituida con agua o cualquier otro líquido ingerible oralmente tal como un líquido bebible, conteniendo una fibra soluble no gelificante obtenida del fruto de la Musa spp; o
(c) una mezcla en polvo/granular mezclada dentro un producto alimenticio (por ejemplo, una barra de chocolate, pastilla o similar).
El producto nutritivo puede ser tal como se ha descrito anteriormente y puede o no contener vitaminas solubles en agua, suplementos minerales adicionales, compuestos nutritivos, antioxidantes o aromatizantes.
La presente invención se ilustrará adicionalmente, a modo de ejemplos, con referencia a los dibujos adjuntos, en los cuales:
la Figura 1 ilustra la expresión fimbrial por un E. coli asociado a la mucosa, usando microscopio electrónico (algunos indicados mediante flechas) en el Ejemplo 1;
la Figura 2 es una gráfica que muestra un incremento significativo en las bacterias asociadas mucosalmente en pacientes con la enfermedad de Crohn en el Ejemplo 1;
la Figura 3 muestra que E. coli aislado a partir de tejido de la enfermedad de Crohn posee significativamente más actividad hemaglutinante en comparación con E. coli aislado de pacientes de control en el Ejemplo 1;
la Figura 4 muestra que las cepas aglutinantes de E. coli son capaces de unirse e invadir células I-407 a un nivel significativamente más alto que las cepas no aglutinantes de E. coli (esto valida el uso del ensayo de hemaglutinación para evaluar la inhibición de la adhesión de bacterias);
la Figura 5 es una gráfica que ilustra que la fibra soluble de plátano reduce de manera significativa la unión bacteriana a células en el Ejemplo 1; y
la Figura 6 es una gráfica que ilustra que la fibra soluble de plátano reduce de manera significativa la invasión bacteriana a células en el Ejemplo 1.
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Ejemplo 1
Los autores de la invención han llevado a cabo estudios con el fin de investigar biopsias de la IBD para determinar la presencia de poblaciones bacterianas que estuvieran o bien dentro de la capa de mucosa; o íntimamente asociadas con la mucosa; o bien que hubieran invadido la capa mucosal. Las bacterias cultivadas fueron cuidadosamente caracterizadas y las identificadas como de E. coli se estudiaron para determinar su capacidad para adherirse a glóbulos rojos humanos. Los E. coli adherentes se caracterizaron además para determinar la presencia de genes patógenos y adhesinas conocidas, sus características específicas de unión y su capacidad para invadir líneas de células intestinales humanas.
1.1 Materiales y procedimientos 1.1.1 Pacientes
Se estudiaron 60 pacientes. 18 con colitis ulcerativa, 14 con la enfermedad de Crohn y 28 controles normales. Durante la colonoscopia o la sigmoidoscopia se extrajeron biopsias de la mayor parte de los pacientes, un conjunto de biopsias se extrajeron de una muestra de recesión procedente de un paciente normal con inercia crónica.
1.1.2 Cultivo bacteriano
Se extrajeron cuatro biopsias o bien de muestras de tejido reseccionado (un paciente) o bien de la colonoscopia (59 pacientes). Las biopsias se colocaron en 10 ml de solución salina fisiológica y se transportaron sobre hielo al laboratorio. Las biopsias se colocaron en un Eppendorf de 1,5 ml conteniendo 500 \mul de solución de ditiotreitol (DTT) al 0,016% durante 15 minutos para eliminar la capa de mucosa. 50 \mul de DTT sobrenadante se cultivaron en placa sobre agar MacConkey y se incubaron a 37°C durante 24 horas. A continuación, las biopsias se separaron en dos Eppendorfs de 1,5 ml conteniendo o bien 500 \mul de solución salina estéril o bien 500 \mul de gentamicina (50 ml/l). Después de 30 minutos, las biopsias se lavaron 4 veces mediante transferencia de las mismas en Eppendorfs de 1,5 ml consecutivos conteniendo 500 \mul de solución salina. Después del cuarto lavado, se introdujo una biopsia procedente de cada Eppendorf (es decir, una de las biopsias tratada con gentamicina y una de las biopsias no tratada con gentamicina) en agua destilada estéril y desionizada, la otra biopsia procedente de cada Eppendorf se introdujo en 500 \mul de solución salina. Después de otros 30 minutos, 50 \mul de solución procedente de cada uno de los Eppendorfs finales se cultivaron en placa 
\hbox{sobre placas
de agar MacConkey. Después de 24 horas de  incubación a 37°C, se
llevó a cabo el recuento de colonias.}
1.1.3 Identificación bacteriana
Después de llevar a cabo el recuento de colonias, las colonias bacterianas se caracterizaron y 5 de cada subtipo de colonia se subcultivaron sobre agar nutriente. Se llevó a cabo el teñido gram y todas las bacterias identificadas como bastoncillos gram negativos se identificaron además usando kits de identificación bacteriana API20E (BioMerieux, Francia). Las muestras bacterianas procedentes de cada colonia subcultivada se almacenaron sobre esférulas Protect a -80°C.
1.1.4 Ensayo de resistencia a antibióticos
Se suspendió una colonia bacteriana aislada de un único pocillo en 5 ml de solución salina estéril usando colonias de bacterias extraídas de una placa de agar nutriente. 100 \mul de la suspensión bacteriana se cultivaron sobre placas de agar sensible. A continuación, se dispensaron discos antibióticos sobre la placa. Se usaron los antibióticos siguientes: Gentamicina, Trimetoprima, Sulfonomida, Ampicilina, Penicilina, Tetraciclina, Ácido Naladíxico, Cloranfenicol. Las placas bacterianas se incubaron a 37°C durante una noche. Se midieron los diámetros de crecimiento bacteriano alrededor de los discos y se calculó el grado de resistencia bacteriana a los antibióticos.
1.1.5 Condiciones de crecimiento bacteriano para expresión fimbrial máxima
La expresión fimbrial máxima se observó después del crecimiento de colonias bacterianas durante una noche sobre agar nutriente, se suspendieron en solución salina estéril y, a continuación, se dejaron a temperatura ambiente durante 48 horas. La expresión fimbrial se confirmó usando microscopio electrónico, pudiendo observarse en la Figura 1.
1.1.6 Ensayos de hemaglutinación
Se extrajo sangre procedente de un voluntario humano sano y se introdujo en un recipiente heparinizado. La sangre se lavó tres veces en PBS mediante centrifugación a 1000 rpm durante 5 minutos y mediante resuspensión del gránulo en PBS reciente. Después del tercer lavado, el gránulo se resuspendió en PBS con el fin de proporcionar una solución de glóbulos rojos al 1%. Las bacterias identificadas como de E. coli, y 5 cepas de E. coli asociadas con CD-ileal se desarrollaron con el fin de obtener la expresión fimbrial máxima (véase anteriormente). Las bacterias se suspendieron en solución salina para proporcionar una DO igual al patrón 5 de MacFarland. Se llevaron a cabo diluciones por duplicado de suspensión bacteriana en placas de hemaglutinación con fondo en forma de U de 96 pocillos (Dynex Technologies) hasta un volumen final de de 100 \mul por pocillo. A cada pocillo se agregaron 50 \mul de glóbulos rojos al 1%. La placa se golpeó suavemente para mezclar los contenidos de los pocillos y se dejó a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 horas.
1.1.7 Ensayos de hemaglutinación usando el panel de glóbulos rojos humano
Todos los E. coli se ensayaron contra a un panel de glóbulos rojos de tipo antigénico conocido. Estos incluyeron el panel 1 de ID (26 antígenos incluyendo Lewis, Lutheran, M, N, S, P, K, Kidd, Rhesus y otros), células Alrr, células Brr (grupos sanguíneos ABO) (NBS Reagents, Liverpool, Reino Unido) y células ii adultas (Diagnostics Scotland, Edinburgh, Reino Unido).
1.1.8 Ensayos de hemaglutinación con diferentes oligosacáridos/fibras
La caracterización adicional de hemaglutinación bacteriana se llevó a cabo usando un panel de oligosacáridos/
fibras. Las estructuras ensayadas fueron: mannosa (0,4 M), fucosa (0,4 M), galactosa (0,4 M), fetuína (50 \mug/ml), asialofetuína (50 \mug/ml), mucina submaxilar bovina (BSM), BSM hidrolizada, mucina submaxilar ovina (OSM), lactosa, lactulosa, siail TN, Gal-GalNAC, ácido N-glucolineuramínico, ácido N-acetilneuramínico, 3'-n-acetilneuraminil-lactosa, 6'-n-acetilneuraminil-lactosa, melibiosa, plataína, estaquiosa, galacto-oligosacárido obtenido de la leche, rafinosa, pectina, ácido poligalacturónico, y paralacto-n-hexaosa.
1.1.9 PCR
Las bacterias identificadas como aglutinantes E. coli se rastrearon para determinar tanto la patogenicidad de genes asociados con cepas virulentas de E. coli para genes adhesina conocidos. Estas fueron: VT1, VT2, VT2e, STI, STII, LTI, Einv, Eagg, CNF1, CNF11, EaeA, EaeB, EAF, Bfp, CDT, EAST, Hly, HlyA, pap, sfa, afa, M-aglutinina, fimH.
1.1.10 Electroforesis en gel de campo de impulsos
Las cepas aglutinantes de E. coli se ensayaron para determinar la clonalidad usando electroforesis en gel de campo de impulsos.
1.1.11 Ensayos de unión e invasión
Las bacterias aglutinantes se ensayaron para determinar su capacidad para adherirse y para invadir las líneas de células intestinales I-407 y HT-29. Se usó Shigella sonni como un control positivo para la invasión y la E. coli K12, una E. coli adherente pero no invasiva, se usó como un control negativo para la invasión. Las células se mantuvieron en DMEM (medio de Eagle modificado de Dulbecco, Sigma, Reino Unido) a 37°C, en CO_{2} al 5% suplementado con suero bovino fetal inactivado térmicamente al 10% (vol/vol) (Sigma, Reino Unido), L-glutamina al 1%, penicilina y estreptomicina. Las monocapas se sembraron dentro de placas de cultivo de tejidos de 24 pocillos (Costar, Reino Unido), con 4x10^{5} células/pocillo. Las células se incubaron durante 20 horas. Las monocapas se lavaron dos veces con solución salina tamponada con fosfato (PBS). Las bacterias se desarrollaron con el fin de maximizar la expresión fimbrial (48 horas en solución salina). Cada monocapa se infectó con aproximadamente 7x10^{6} bacterias/pocillo en medio de cultivo sin antibiótico. Después de 3 horas de incubación a 37°C, las monocapas se lavaron tres veces con PBS. Para determinar la invasión bacteriana, los pocillos se trataron con medio de cultivo reciente conteniendo gentamicina (100 \mug/ml), con el propósito de matar toda bacteria extracelular dado que la gentamicina no puede penetrar las células humanas. Después de una hora a 37°C, las monocapas se lavaron tres veces en PBS estéril. Las monocapas se lisaron mediante la adición de agua desionizada conteniendo Triton X-100 al 1% durante 5 minutos. Se llevaron a cabo diluciones de diez veces del lisato de células y se cultivaron 50 \mul sobre placas con agar nutriente. Las placas se incubaron a 37°C y se contaron las unidades de formación de colonias (CFUs) después de 24 horas. La unión bacteriana se calculó como recuentos de CFU total multiplicado por el factor de dilución, expresándose este igualmente como un porcentaje del número total de bacterias usado para inocular las cavidades. La invasión bacteriana se definió como el porcentaje de las bacterias unidas que sobrevivió al tratamiento con gentamicina. Se determinó el transcurso en función del tiempo de unión bacteriana y la invasión se determinó usando únicamente células I-407 durante un período de 5 horas.
1.1.12 Efecto de la fibra soluble de plátano sobre la unión e invasión de bacterias
Se estudió el efecto de la pre-incubación de bacterias con plátano sobre la unión e invasión de E. coli.
1.1.12.1 Preparación de fibra soluble de plátano criodesecada
Se eliminaron las pieles de los plátanos y la fruta entera (excluyendo las pieles) se criodesecó y, a continuación, se molió. A continuación se mantuvo en ebullición (100°C) durante aproximadamente 30 minutos en agua para gelatinizar el almidón y dispersar cualquier gránulo de almidón. A continuación, se hidrolizó con amilasa pancreática porcina (a 40°C) para asegurar que se había eliminado todo el almidón. La fracción de polisacáridos sin almidón (NSP) se precipitó y lavó con etanol al 80% y se centrifugó (aproximadamente a 10.000 g). A continuación, el sobrenadante alcohólico se descartó y el residuo (conteniendo tanto NSP soluble como insoluble) se criodesecó. Esta muestra criodesecada representa una fibra soluble en polvo de acuerdo con la invención.
1.1.12.2 Preparación de solución de fibra soluble de plátano
Cuando se requirió una muestra de fibra soluble, el residuo criodesecado (1.1.12.1) se mantuvo en ebullición en agua durante 30 minutos, se centrifugó a 10.000 g durante 10 minutos y el sobrenadante se consideró como la fibra soluble de plátano.
1.1.12.3 Preparación de fibra soluble de plátano criodesecada refinada
El sobrenadante (1.1.12.2) se criodesecó (tal como se ha descrito anteriormente) para formar una fibra soluble en polvo preferida de acuerdo con la invención.
1.1.13 Preparación de bacterias para uso en ensayos de unión e invasión
Se pipetearon dentro de dos Eppendorfs 1 ml de cultivo bacteriano, el cual se había desarrollado en solución salina estéril para lograr la expresión fimbrial máxima. Los tubos se centrifugaron a 10.000 g durante 5 minutos. El sobrenadante se descartó y el gránulo procedente de un tubo se resuspendió en 1 ml de solución de plátano soluble. El otro gránulo se resuspendió en 1 ml de solución salina estéril. Ambos Eppendorfs se rotaron en el equipo de rotación de células durante 30 minutos. Las suspensiones bacterianas se centrifugaron igual que anteriormente y los gránulos se lavaron dos veces en solución salina estéril. Finalmente, los gránulos se resuspendieron en 1 ml de solución salina estéril y se usaron en el ensayo de unión y de invasión como anteriormente.
1.2 Resultados 1.2.1 Bacterias asociadas mucosalmente incrementadas en la enfermedad de Crohn
Las bacterias se identificaron usando las técnicas microbiológicas descritas en la sección Procedimientos.
En total, de 707 colonias bacterianas sub-cultivadas, 406 fueron Gram negativas y 292 de estas se identificaron como E. coli. Se examinó la sensibilidad a antibióticos tales como gentamicina, trimetoprima, sulfonomida, ampicilina, tetraciclina, ácido nalaxídico y cloranfenicol para caracterizar adicionalmente las bacterias (datos no mostrados).
Las bacterias asociadas a la mucosa se cultivaron a partir del sobrenadante de biopsias tratadas con ditiotreitol (DTT) (el DTT elimina la capa de mucosa procedente de la biopsia expuesta a la mucosa). No se encontró una diferencia significativa en los números de bacterias asociadas a la mucosa entre grupos de pacientes (datos no mostrados). Sin embargo, la Figura 2 muestra un incremento significativo en bacterias asociadas mucosalmente en pacientes con la enfermedad de Crohn, en comparación con los pacientes de control, siendo positivo en un 79% (11/14) para bacterias asociadas mucosalmente de pacientes con la enfermedad de Crohn comparado con un 39% (11/28) de pacientes de control (P = 0,038; cuadrado de X). Las bacterias asociadas mucosalmente son aquellas que pueden recuperarse a partir de la superficie mucosal después de que se ha eliminado la mucosa de la superficie mediante tratamiento con DTT y lavado intenso.
Estos datos indican, tal como los autores de la invención sospechaban, que existe un incremento en las bacterias asociadas mucosalmente en la IBD.
1.2.2E. coli asociado mucosalmente expresa hemaglutininas
La Figura 3 ilustra que significativamente más E. coli aislados a partir de tejido de la enfermedad de Crohn poseen actividad hemaglutinante comparada con E. coli aislado a partir de pacientes de control. Los E. coli hemaglutinantes se identificaron en 39% (5/14) de pacientes con la enfermedad de Crohn comparado con un 4% (1/28) de controles (P = 0,01). Igualmente, fueron capaces de aglutinar un número incrementado de bacterias procedentes de pacientes con colitis ulcerosa.
Igualmente, se ha encontrado que las bacterias capaces de aglutinar corpúsculos de glóbulos rojos procedentes de un voluntario humano sano, fueron igualmente capaces de aglutinar corpúsculos de glóbulos rojos procedentes de un panel de corpúsculos de glóbulos rojos de tipo antigénico conocido suministrado por el centro de transfusión de sangre. Las cepas asociadas a la enfermedad de Crohn de E. coli mostró igualmente que tenían unión selectiva al panel de corpúsculos de glóbulos rojos. El patrón de unión de este E. coli sugiere que posee un grupo sanguíneo de adhesina específico "M". Esta bacteria se caracterizó además usando PCR.
Estos datos sugieren que el E. coli asociado mucosalmente interactúa con células intestinales mediante interacción con proteínas glucosiladas sobre la superficie de la célula. Esto se confirmó además la hipótesis de los autores de la invención con relación al mecanismo mediante el cual las bacterias invaden el intestino en la IBD.
1.2.3E. coli asociado mucosalmente se adhiere e invade células intestinales en cultivo
Se caracterizaron 16 cepas diferentes de E. coli aglutinante de acuerdo con los procedimientos 1.1.4, 1.1.9 y 1.1.10 y se sometieron a ensayos de unión e invasión de acuerdo con el procedimiento 1.1.11. En los experimentos, se usaron la línea de células colónica humana, HT29 y la línea de células intestinal humana, I-407.
Todos los E. coli aglutinantes mostraron que se adherían tanto a las líneas de células HT29 como I-407, pero la invasión principal, únicamente se observó en las células I-407 (véase Tabla 2). La invasión y la adherencia se calcularon usando el número medio de unidades de formación de colonias (CFUs) recuperadas a partir de células tratadas con gentamicina y no tratadas con gentamicina (n=4). (La gentamicina mata todos los E. coli no invasores pero no puede penetrar en las células intestinales, con lo cual deja las bacterias que han sido invadidas intactas). El LF82 es un E. coli adherente e invasivo (AIEC) aislado a partir de una lesión por la enfermedad de Crohn ileal. La Sighella sonnei se usó como un control positivo para la invasión, y el E. coli K12 se usó como un control negativo para la invasión. Es sabida la adherencia a células mediante una adhesina de unión mediante mannosa, pero no es
invasiva.
Se realizaron otros experimentos para comparar el E. coli aglutinante (tales como los procedentes de sujetos con la IBD) con E. coli no aglutinante, con respecto a su capacidad para atacar e invadir células I-407. La Figura 4 ilustra una correlación entre la capacidad de una bacteria para aglutinar y adherirse a células intestinales. De acuerdo con ello, esto sugiere además que las bacterias en la IBD invaden la mucosa mediante un mecanismo diana que implica glucoproteínas.
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TABLA 3 Invasión y adherencia de bacterias aglutinantes
3 
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1.2.4 El efecto de fibra soluble sobre bacterias aisladas procedentes de sujetos con IBD
Se ensayaron fibra soluble (preparada de acuerdo con 1.1.12.2) y otros carbohidratos para determinar su capacidad para modular la aglutinación, unión e invasión de células procedentes de sujetos con IBD.
1.2.4.1 Aglutinación
En todos los casos, se inhibió la aglutinación mediante fibra de plátano soluble y mucina submaxilar bovina (BSM) pero no después de hidrólisis con ácido suave de BSM para eliminar ácido siálico y fucosa.
Una diversidad de otros carbohidratos y glucoconjugados, incluyendo mannosa, fucosa, galactosa, lactosa, lactulosa, siailosil-Tn, Gal\beta1-3GalNAc, ácido N-glucolineuramínico, ácido N-acetilneuramínico, 3'-n-acetilneuraminil-lactosa, 6'-n-acetilneuraminil-lactosa, melibiosa, estaquiosa, galacto-oligosacárido obtenido de la leche, rafinosa, ácido poligalacturónico, y paralacto-n-hexaosa, fetuína, asialofetuína, mucina submaxilar bovina y pectina fueron no inhibidores.
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1.2.4.2 Inhibición de unión bacteriana mediante fibra soluble de plátano
Las cepas bacterianas fueron la 9, 12 y 14 (tal como se identifican en la Tabla 3). La Figura 4 ilustra que la fibra soluble de plátano redujo significativamente la unión bacteriana de las cepas bacterianas 9 y 12 a las células I-407. Puede observarse que no existe diferencia significativa para la cepa 14, aunque se observa una unión limitada para esta cepa en la presencia o ausencia de fibra soluble.
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1.2.4.3 Inhibición de invasión bacteriana mediante plátano
La Figura 5 ilustra que la invasión bacteriana se redujo mediante la pre-incubación de cada una de las tres cepas bacterianas (cepas 9, 12 y 14 de la Tabla 12) con fibra soluble de plátano.
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1.3 Exposición
Estos datos demuestran que la IBD tal como la enfermedad de Crohn está asociada con una prevalencia incrementada de E. coli asociado mucosalmente. Estos E. coli carecen de genes de patogenicidad conocida pero incluyen una alta proporción que expresa hemaglutininas, lo cual les permite adherirse, e invadir, líneas de células epiteliales intestinales. Los autores de la invención estiman que la naturaleza adhesiva e invasiva de la bacteria causa una afección inflamatoria y, de esta forma, caracteriza a la IBD.
Los autores de la invención han establecido un nexo entre IBD y la capacidad de las bacterias procedentes de sujetos con IBD para aglutinarse. De acuerdo con ello, han razonado que la unión de bacterias en IBD debe de estar regulada por carbohidratos y ensayaron muchos oligosacáridos con el fin de evaluar cuales o cuales no inhibían los efectos negativos de E. coli en IBD. La mayoría de los azúcares/oligosacáridos ensayados fueron incapaces de modular las bacterias. Sin embargo, de manera sorprendente, la fibra soluble procedente del plátano inhibió el E. coli. Esto condujo a los presentes autores a comprobar que la fibra soluble de acuerdo con la invención comprende bacterias que modifican oligosacáridos para uso terapéutico en IBD tal como la enfermedad de Crohn.
Es de resaltar que estos datos sugieren que la fibra soluble de acuerdo con la invención será igualmente útil para el tratamiento o prevención del desarrollo de otras afecciones gastrointestinales que pueden estar caracterizadas por la adhesión e invasión bacteriana (por ejemplo, cáncer de colon, enfermedad/infecciones diarreicas, gastroenteritis o enfermedad de almacenamiento de glucógeno de Tipo 1).
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Ejemplo 2
Producción de un polvo de fibra soluble de plátano para uso de acuerdo con la invención
Se dejaron caer 250 g de pulpa de plátano cortada dentro de 1.000 ml de agua en ebullición y, a continuación, se trataron tal como se ha descrito en 1.1.12.1. El rendimiento de fibra soluble criodeseacada (1.1.12.2) fue aproximadamente de 4,0 g.
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Ejemplo 3
Producción de una mezcla de polvo de fibra soluble de plátano para uso de acuerdo con la invención
Se mezclaron 3,0 g de polvo de fibra soluble criodesecada (Ejemplo 2) con 0,5 g de ácido cítrico, 26,3 g de azúcar granulada y 0,2 g de una mezcla criodesecada convencional de aromatizante.
Esta mezcla representa una formulación en polvo de libre fluidez (conteniendo 3,0 g de fibra soluble) que es adecuada para envasado en una bolsita. La mezcla en polvo puede diluirse hasta el sabor adecuado y ser bebida cuando así lo requiera por un sujeto que sufre de IBD.
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Ejemplo 4
Producción de una mezcla de polvo alternativa de fibra soluble de plátano para uso de acuerdo con la invención
Se mezclaron 3,0 g de polvo de fibra soluble criodesecada (Ejemplo 1.1.12.1) con 0,5 g de ácido cítrico, 26,3 g de azúcar granulada y 0,2 g de una mezcla criodesecada convencional de aromatizante.
Esta mezcla representa una formulación en polvo de libre fluidez (conteniendo 3,0 g de fibra soluble) que es adecuada para envasado en una bolsita. La mezcla en polvo puede diluirse hasta el sabor adecuado y ser bebida cuando así lo requiera por un sujeto que sufre de IBD.
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Ejemplo 5
Producción de una bebida de naranja para uso de acuerdo con la invención
(a) Se mezclaron 100 ml de preparación bruta (preparada de acuerdo con el procedimiento 1.1.12.2) con 100 ml de zumo de naranja concentrado al doble (zumo de naranja concentrado diluido en agua hasta el doble de concentra-
ción).
(b) Se disolvieron 3,5 g de polvo criodesecado (preparado de acuerdo con el procedimiento 1.1.12.1) en 100 ml de zumo de naranja (o como alternativa, con concentrado de zumo de naranja y agua).
(c) Se disolvieron 2,5 g de polvo criodesecado (preparado de acuerdo con el procedimiento 1.1.12.3) en 100 ml de zumo de naranja (o como alternativa, con concentrado de zumo de naranja y agua).
Las preparaciones de bebida de naranja (a, b o c) pueden ser consumidas por un sujeto inmediatamente, ser refrigeradas para consumo posterior o ser selladas en una botella o cartón para un período de almacenamiento más largo.
Es de señalar que el zumo de naranja puede ser substituido fácilmente con una alternativa agradable al paladar.
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Ejemplo 6
Producción de una formulación líquida nutritiva conteniendo fibra soluble de plátano para uso en alimentación entérica
Puede producirse una mezcla nutritiva líquida para uso en alimentación entérica en la cual el contenido total de la NSP (procedimiento tal como en el Ejemplo 1.1.12.1) está entre 0,1 y 10% del contenido de materia seca total de la mezcla alimenticia. El NSP puede mezclarse con solución salina o una solución acuosa, y pueden incluirse otras vitaminas, minerales y nutrientes según se requiera para la alimentación entérica de sujetos. Dichas formulaciones líquidas entéricas pueden ser envasadas en bolsas (por ejemplo, conteniendo 100 ml - 2.000 ml) para uso en una inmersión o para inserción dentro de una bomba de alimentación.
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Ejemplo 7
Se llevaron a cabo otros experimentos (siguiendo los protocolos descritos en el Ejemplo 1) con el fin de ensayar la eficacia de la fibra soluble de acuerdo con la invención que había sido preparada mediante homogeneización/extracción de la fibra a pH 7 (columna 3 de la Tabla 4); calentamiento de la solución o bien a 40°C o bien a 100°C (columna 4 de la Tabla 4); tratamiento de la solución calentada para eliminar el almidón (columna 5 de la Tabla 4); aislamiento de la fibra soluble (columna 3 de la Tabla 4).
TABLA 4
4
El volumen final es aproximadamente de 10 ml que corresponde a 200 mg de carne de plátano por ml.
Los datos ilustrados en la Tabla 4 demuestran que la fibra soluble obtenida de plátano y preparada tal como se ha descrito aquí (por ejemplo, Tubos 1-7) fue eficaz para la reducción de la aglutinación bacteriana. Este efecto es indicativo para una persona experta que la fibra soluble es útil para la prevención o tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal. Los Tubos 8 y 9 fueron controles positivos en tanto que los Tubos A y 5B-8D representan controles negativos.

Claims (22)

1. Una composición para uso en la prevención o tratamiento de la enfermedad intestinal inflamatoria que comprende una cantidad eficaz terapéuticamente de una fibra soluble obtenible del fruto de la Musa spp.
2. La composición de acuerdo con la reivindicación 1, en la que la fibra soluble se obtiene a partir de una solución acuosa decantable a partir de fruta homogeneizada.
3. La composición de acuerdo con la reivindicación 1 6 2, en la que la fibra soluble se obtiene a partir de la ebullición de la fruta.
4. La composición de acuerdo con la reivindicación 1, 2 ó 3, en la que la fibra soluble se trata para eliminar el almidón.
5. La composición de acuerdo con la reivindicación 4, en la que el almidón se elimina mediante digestión con enzima del almidón.
6. La composición de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, en la que la fibra soluble se obtiene a partir del precipitado de una solución acuosa tratada con etanol.
7. La composición de acuerdo con la reivindicación 6, en la que la solución acuosa se somete a una etapa de precipitación con etanol al 80%.
8. La composición de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, en la que la fibra soluble se obtiene mediante:
(1) cortado de la fruta fresca y eliminación de todas las pieles e introducción en una solución acuosa; o criodesecado de la fruta entera (excluyendo las pieles), molido e introducción en una solución acuosa; o molido de la fruta desecada e introducción de la misma en una solución acuosa; o toma de harina preparada a partir de fruta (por ejemplo, harina de plátano) e introducción en una solución acuosa;
(2) toma de la solución procedente de (1) y calentamiento para gelatinizar el almidón y dispersar cualquier gránulo de almidón existente;
(3) enfriamiento de la solución calentada (2) e hidrolización con enzimas digestoras del almidón para asegurar que se ha eliminado todo/la mayor parte del almidón;
opcionalmente, la solución (3) puede, a continuación, precipitarse y lavarse con etanol al 80% y centrifugarse; a continuación, se descarta el sobrenadante alcohólico y el residuo es criodesecado o secado por pulverización.
9. La composición de acuerdo con la reivindicación 9, en la que la fibra soluble se obtiene mediante:
(a) criodesecado y molido de la fruta entera pelada;
(b) calentamiento a ebullición del material molido para gelatinizar todo el almidón y dispersar cualquier gránulo de almidón existente;
(c) hidrolización del almidón en el material con amilasa;
(d) precipitación y lavado del material con etanol y criodesecación o secado por pulverización para producir un residuo; y
(e) reconstitución del residuo criodesecado o secado por pulverización, ebullición y centrifugación;
en la que el sobrenadante procedente de la centrifugación (e) comprende la fibra soluble.
10. La composición de acuerdo con cualquier reivindicación precedente en forma de polvo.
11. La composición de acuerdo con la reivindicación 10, en la que el polvo comprende el residuo seco de la reivindicación 9(d) o el sobrenadante de la reivindicación 9(e) el cual está criodesecado o secado por pulverización.
12. La composición de acuerdo con cualquier reivindicación precedente que comprende además al menos uno de entre aromatizante, azúcares, edulcorante, anti-oxidantes, minerales o vitaminas.
13. La composición de acuerdo con cualquier reivindicación precedente para la prevención o tratamiento de la enfermedad de Crohn.
14. La composición de acuerdo con cualquier reivindicación precedente en la que la fibra soluble procede del fruto de la Musa spp.
15. Un uso de fibra soluble obtenible del fruto de la Musa spp, para la fabricación de un medicamento para la prevención o tratamiento de la enfermedad intestinal inflamatoria.
16. El uso de acuerdo con la reivindicación 10, en la que el medicamento es una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-14 en combinación con un vehículo aceptable farmacéuticamente.
17. El uso de acuerdo con la reivindicación 15 ó 16, en la que el medicamento es un líquido, cápsula o comprimido para consumo oral.
18. Un producto nutricional para uso en la prevención o tratamiento de la enfermedad intestinal inflamatoria, que comprende una cantidad eficaz terapéuticamente de una fibra soluble obtenible del fruto de la Musa spp.
19. Un producto nutricional de acuerdo con la reivindicación 18 en la forma de un brebaje o bebida.
20. El producto nutricional de acuerdo con la reivindicación 19, que comprende entre 1 g/100 ml y 30 g/100 ml de fibra soluble.
21. Un producto nutricional de acuerdo con la reivindicación 18 en la forma de un polvo o una mezcla en polvo.
22. Un producto nutricional de acuerdo con la reivindicación 18 en la forma de una barra alimenticia u otra forma de producto alimenticio sólido.
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Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0302872D0 (en) * 2003-02-10 2003-03-12 Univ Liverpool Treatment of inflammatory bowel disease
US8945639B2 (en) 2003-02-10 2015-02-03 Provexis (Ibd) Limited Treatment of inflammatory bowel disease
AU2006233185A1 (en) * 2006-10-25 2008-05-15 Bestlan Bananas Pty Ltd Dietary Fibre from Plant Material
US8277865B2 (en) 2007-03-02 2012-10-02 Paul Ralph Bunke Nutritious fabricated snack products
GB0820972D0 (en) * 2008-11-17 2008-12-24 Provexis Ibd Ltd Treatment
EA028836B1 (ru) * 2009-08-12 2018-01-31 Мунисекхар Медасани Натуральный экстракт из цельных плодов банана (musa spp.)
AU2012332491A1 (en) * 2011-11-04 2014-05-29 General Mills, Inc. Methods and compositions for modulating gastrointestinal bacteria to promote health
EP3054781A4 (en) 2013-10-11 2017-05-31 Rajakaruna, Uppala Food additives and methods of making and using same
CN104524198A (zh) * 2015-01-29 2015-04-22 百色红色福地农业科技开发有限公司 野芭蕉胶囊配制及加工方法
WO2018081900A1 (en) * 2016-11-07 2018-05-11 Chef Low Cal Foods Inc. Microencapsulated non-starch polysaccharides for diet food compositions
DE202018001831U1 (de) 2018-04-10 2019-04-29 Trelogo Kg Balance-Trainingsgerät
US11882848B1 (en) 2022-11-14 2024-01-30 Calowry Inc. Calorie-reduced chocolate product comprising hydrated dietary fiber and methods for producing same

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3259508A (en) * 1962-11-06 1966-07-05 Aguirre Joaquin Method of drying bananas
US4921804A (en) * 1983-09-01 1990-05-01 Eastman Kodak Company Method for extracting bilirubin-specific enzyme preparation
US5234706A (en) * 1986-01-31 1993-08-10 Slimak K M Processes for products from potatoes and other roots, seeds, and fruit
AU628320B2 (en) * 1988-02-11 1992-09-17 University Of New England, The A method for the prevention, curing and/or soothing of gastro-intestinal ulcers
CA2104174A1 (en) * 1992-09-08 1994-03-09 Tsutomu Aritsuka Agents for suppression or lowering of blood lipids
AUPM836794A0 (en) * 1994-09-23 1994-10-20 University Of New England, The Improved method and composition for the treatment of ulcers
US6241983B1 (en) * 1994-10-28 2001-06-05 Metagenics, Inc. Bacteria-and fiber-containing composition for human gastrointestinal health
US6187315B1 (en) * 1995-03-03 2001-02-13 Atajje, Inc. Compositions and methods of treating cancer with tannin complexes
AUPP291598A0 (en) * 1998-04-14 1998-05-07 Allrad 3 Pty Ltd Food supplement
US20010046526A1 (en) * 2000-04-19 2001-11-29 C-Quest Treatment of fungal infections
GB0302872D0 (en) * 2003-02-10 2003-03-12 Univ Liverpool Treatment of inflammatory bowel disease

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