ES2285923B1 - Producto para su utilizacion en la prevencion y tratamiento de enfermedades cardiovasculares, cancer y enfermedades inflamatorias cronicas. - Google Patents
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Abstract
Producto que contiene, como mínimo, ácido oleico y licopeno junto con antioxidantes de origen natural, tales como {be}-carotenos, retinol, fitoesteroles, tirosol y ácidos grasos, administrado por vía oral e indicado especialmente en la prevención de la enfermedad cardiovascular, y en aquellas patologías mediadas por una activación anómala del factor NF-{ka}B como son las enfermedades crónicas y algunos tipos de cánceres como el de colón y el de próstata.
Description
Producto para su utilización en la prevención y
tratamiento de enfermedades cardiovasculares, cáncer y enfermedades
inflamatorias crónicas.
La presente invención se refiere a un nuevo
producto que contiene ácido oleico y licopeno que es útil para la
prevención y el tratamiento del cáncer, enfermedades
cardiovasculares y enfermedades inflamatorias crónicas.
Durante los últimos años se han identificado los
mecanismos celulares y moleculares que regulan los procesos
inflamatorios que tienen lugar durante la ateromatosis, la
arteriosclerosis y la enfermedad cardiovascular. El desencadenante
de la alteración estructural y funcional de la pared arterial es la
concentración de LDL oxidada en el plasma y en la propia pared
arterial. Está demostrado que la forma de LDL oxidada es más
importante en la enfermedad cardiovascular que los niveles
absolutos de colesterol total, colesterol-HDL y
colesterol-LDL. Esto es debido a la forma de actuar
de LDL oxidada que es un activador del proceso inflamatorio
cardiovascular.
En primer lugar, la LDL oxidada induce una
alteración endotelial que consiste principalmente en la
interrupción en el proceso de producción de óxido nítrico (NO) que
daña a las células endoteliales iniciándose un proceso en el cual se
va perdiendo el tono vascular y además estas células comienzan a
expresar moléculas de adhesión en su superficie que atraen a los
monocitos de la sangre al foco vascular dañado. Estos monocitos
migran al interior de la pared vascular fagocitando partículas de
colesterol-LDL oxidado, activándose y
transformándose en lo que conocemos como "células espumosas".
La acumulación de estas células espumosas (placa aterogénica) es
verdaderamente dañina para la pared vascular por varios motivos, 1)
se pierde el tono vascular, 2) se produce una alteración en el
flujo sanguíneo que favorece los procesos trombóticos locales, 3)
las células espumosas producen citoquinas inflamatorias
(fundamentalmente Interleuquina 1 y Factor de necrosis tumoral,
TNF\alpha) que regulan el proceso de inflamación local, y 4)
estas células espumosas producen una serie de enzimas conocidas
como metaloproteinasas que destruyen la matriz extracelular del
tejido conectivo, y al disminuir la cantidad de colágeno, hacen la
placa de ateroma más frágil, por lo que la inflamación arterial,
además, facilita la rotura de la placa, y consiguientemente, la
aparición de clínica isquémica. Una gran parte de todos estos
procesos esta regulada por la activación del factor de transcripción
nuclear kappa B (NF-\kappaB). (Véase Libby,
Ridker, Maseri. Inflammation and Atherosclerosis.
Circulation. (2002);105:1135-1143,
Zapolska-Downar. Mononuclear Cell Recruitment and
Inflammation in Atherosclerosis. Vascular disease prevention.
(2004); 1, 41-51).
El término NF-\kappaB engloba
una familia de factores de transcripción ampliamente expresados
que, en mamíferos, está constituida por 5 miembros: p65 (RelA),
RelB, c-Rel, NF-\kappaB1 (p50 y
su precursor p105) y NF-\kappaB2 (p52 y su
precursor p100). La ruta de NF-\kappaB se activa
por una gran variedad de estímulos inflamatorios que pueden ser
inhibidos mediante nutracéuticos (término referido en la presente
invención como componentes de los alimentos que aportan un
beneficio añadido para la salud), validando así el uso de los
mismos en la prevención no sólo de la enfermedad cardiovascular
sino también en los procesos inflamatorios crónicos que acompañan a
la malignidad de ciertos cánceres humanos (por ejemplo, de colon y
próstata). Véase (Siebenlist, Brown, Claudio. Control of
lymphocyte development by Nuclear
Factor-\kappaB. Nature Reviews. (2005); 5,
435-445, Kumar, Takada, Boriek, Aggarwal. Nuclear
factor-\kappaB: its role in health and
disease. Journal of Molecular Medicine. (2004);
82:434-448).
Tanto el aceite de oliva como el tomate han
demostrado ser dos alimentos de extraordinario valor como alimentos
funcionales y, por lo tanto, beneficiosos para la salud. Estos
beneficios para la salud son debidos a las diversas actividades
biológicas claramente demostradas para la mayoría de los compuestos
presentes en ambos alimentos.
El extracto de tomate es rico en licopeno,
fitoeno, fitoflueno, \beta-caroteno, tocoferoles
y otros productos fitoquímicos bioactivos. El licopeno, fitoeno,
fitoflueno y \beta-caroteno son carotenoides
presentes en la dieta y se encuentran de manera habitual en el
suero humano. La vitamina E en el tomate se halla como una mezcla de
\alpha, \beta, \gamma y \Delta tocoferoles. Los carotenoides
son pigmentos naturales que contribuyen a las pigmentaciones
amarillas, naranjas y rojas de los tejidos vegetales, que son
sintetizados únicamente por plantas, hongos, bacterias y algas y,
por lo tanto, deben de ser incorporados en la dieta.
Un gran número de estudios epidemiológicos han
sugerido una asociación entre el alto consumo de vegetales y frutas
ricas en carotenoides y una reducción del riesgo de sufrir cáncer.
El principal órgano que se ha relacionado con el consumo de licopeno
es la próstata. Se han desarrollado diversos estudios clínicos en
los que se investiga sobre el efecto del licopeno en varones. Tras
una dieta rica en este caroteno, se observa un incremento de dicho
compuesto en el plasma de los sujetos. Existen pruebas de que este
incremento en las concentraciones de licopeno en el suero y en los
tejidos, se relaciona con un descenso del estrés oxidativo y del
daño al ADN provocado en células de la próstata. Una medida clínica
de la posibilidad de sufrir cáncer de próstata consiste en la
medida de la concentración de una enzima concreta, la fosfatasa
alcalina, en sangre. Sujetos a los que se administran ingestas
elevadas de tomate sufren un descenso en los niveles sanguíneos de
dicha enzima. Normalmente niveles bajos de fosfatasa alcalina
indican un mejor estado de salud del tejido prostático. En varios
estudios clínicos se demuestra una menor incidencia de cáncer de
próstata en individuos alimentados con mayores dosis de licopeno y
que, gracias a ello, presentaban mayores niveles de licopeno en el
plasma. El mayor efecto del licopeno fue observado en hombres que
consumían frecuentemente productos derivados del tomate cocinados,
tales como la salsa de tomate con aceite. En un análisis de niveles
de antioxidantes en el plasma, únicamente el licopeno fue el
compuesto que parecía tener una asociación significante y
consistente con la prevención del cáncer de próstata. Véase Wertz,
Siler, Goralczyck. Lycopene: modes of action to promote
prostate health. Archives of biochemistry and biophysics. (2004);
430(1):127-34, Weisburger. Lycopene and
tomato products in health promotion. Experimental biological
medicine. (2002); 227:924-927, Campbell,
Canene-Adams, Lindshield, Boileau, Clinton, Erdman.
Tomato phytochemicals and prostate cancer risk. Journal of
Nutrition. (2004); 134: 3486S-3492S, Giovanucci.
A review of epidemiologic studies of tomatoes, lycopene, and
prostate cancer. Experimental Biological Medicine. (2002);
227:852-859.
Además de los efectos anticancerígenos del
licopeno a los que acabamos de hacer referencia, se han descrito
otros efectos biológicos mediados por este compuesto. Se ha
demostrado que el consumo de licopeno se asocia también con una
menor incidencia de enfermedad cardiovascular. Concretamente,
algunos científicos han estudiado la asociación del licopeno y
otros carotenoides con las lipoproteínas de baja densidad (LDL),
las cuales juegan un papel muy importante en el desarrollo de
aterosclerosis. También se ha demostrado que el licopeno inhibe la
activación del factor NF-\kappaB. Véase (Sesso,
Buring, Norkus, Gaziano. Plasma lycopene, other carotenoids, and
retinol and the risk of cardiovascular disease in women.
American Journal of Clinical Nutrition. (2004);
79:47-53, Panasenko, Sharov, Briviba, Sies.
Interaction of peroxynitrite with carotenoids in human low
density proteins. Archives of biochemistry and biophysics.
(2000); 373: 302-305, Kim, Kim, Ahn, Lee, Moon, Lee,
Park. Lycopene suppresses the
lipopolysaccharide-induced phenotypic and functional
maturation of murine dendritic cells through inhibition of
mitogen-activated protein kinases and nuclear
factor-\kappaB. Immunology. (2004); 113
203-211).
El consumo de aceite de oliva, especialmente en
su calidad "virgen extra" aporta a nuestra salud una serie de
ventajas biosaludables, hasta el punto de convertirla en la grasa
vegetal más beneficiosa para la salud humana, de acuerdo con
numerosos estudios científicos.
El aceite de oliva tiene un elevado contenido en
grasas monoinsaturadas, que en un consumo habitual contribuyen a la
disminución de la concentración de colesterol en la sangre. Además
de los ácidos grasos, el aceite de oliva consta de una fracción
insaponificable. Se trata de un grupo muy heterogéneo de sustancias
presentes en baja concentración, y entre las que se incluyen
carotenos, escualeno y otros hidrocarburos, tocoferoles,
fitoesteroles, polifenoles y numerosos compuestos que contribuyen a
conferir al aceite su color, sabor y aroma característicos. Estos
componentes desarrollan importantes actividades biológicas, ya que
muchos de ellos actúan como vitaminas y antioxidantes naturales y
pueden tener efectos en la disminución del colesterol,
antiaterogénicos y antiinflamatorios. En este sentido, es
destacable el contenido en vitamina E del aceite de oliva virgen
extra, ya que un consumo moderado de aceite cubre la mayor parte de
las recomendaciones dietéticas de esta vitamina. Véanse (Welters,
Tadayyon, Scarpello, Smith, Morgan.
Mono-unsaturated fatty acids protect against
\beta-cell apoptosis induced by saturated fatty
acids, serum withdrawal or cytokine exposure. FEBS letters.
(2004); 560: 103-108, Beauchamp, Keast, More, Lin,
Pika, Han, Lee, Smith, Breslin. Ibuprofen-like
activity in extra-virgin olive oil. Nature.
(2005); 437: 45-46, Kris-Etherton,
Pearson, Hargrove, Wan, Moriarty, Fishell, Etherton.
High-monounsaturated fatty acid diets lower both
plasma cholesterol and triacylglicerol concentrations. American
Journal of Clinical Nutrition. (1999); 70:1009-15,
Owen, Haubner, Würtele, Hull, Spiegelhalder, Bartsch. Olives and
olive oil in cancer prevention. European Journal of Cancer
Prevention. (2004); 13:319-326, Panagiotakos,
Pitsavos, Polychronopoulos, Chrysohoou, Zampelas, Trichopoulo.
Can a Mediterranean diet moderate the development and clinical
progression of coronary heart disease? A systematic review.
Medical Science Monitor. (2004); 10(8):
RA193-198).
Los efectos en la concentración y en la
composición de las grasas en la dieta y la toma de colesterol en el
desarrollo de la enfermedad coronaria cardiovascular son la base de
la hipótesis lipídica de la aterosclerosis. Por lo tanto, la
composición de la dieta no se relaciona únicamente con la
concentración de lípidos y lipoproteínas circulantes, sino también
con la incidencia y la prevalencia de la enfermedad cardiovascular
en la población. La clase y la densidad de las LDL, en combinación
con la genética y la dieta de cada individuo, debe de jugar un
importante papel en el riesgo de que un sujeto sufra enfermedad
coronaria. Otra propiedad ventajosa de los ácidos grasos
monoinsaturados es su poder contra la oxidación de las lipoproteínas
LDL, hecho demostrado ampliamente. La oxidación de las LDL es
probablemente un factor importante en la aterogénesis, ya que las
partículas LDL oxidadas no pueden ser reconocidas por el receptor
LDL y, entonces, se asocian a unos receptores de macrófagos, de
modo que estos acumulan el colesterol llevando a la formación de
células espumosas y de secciones de grasa. Estos sucesos provocan el
desarrollo de la aterosclerosis. Los ácidos grasos monoinsaturados,
gracias a su estructura química, son muchos más estables y menos
propensos a la peroxidación lipídica que los ácidos grasos
poliinsaturados (más inestables). Es decir, una alta ingesta de
ácidos grasos monoinsaturados nos lleva a un aumento de la
concentración de estos ácidos grasos en las partículas LDL. Esto
nos lleva a una menor susceptibilidad de estas partículas a las
modificaciones por oxidación in vitro, cuando lo comparamos
con partículas de LDL que contienen altas concentraciones de ácidos
grasos poliinsaturados (consecuencia de una dieta rica en estos
ácidos grasos). Véase (Wahrburg. What are the health effects of
fat? European Journal of Nutrition. (2004); 43 :
I/6-I/11, Monserrat Fitó Colomer. Efectos
antioxidantes del aceite de oliva y de sus compuestos fenólicos.
2003. Tesis Doctoral).
Las olivas y el aceite de oliva contienen altas
concentraciones de antioxidantes fenólicos, de escualeno y de
vitamina E. Algunos estudios han demostrado la relación entre el
consumo de alimentos ricos en vitamina E y una menor mortalidad por
enfermedad cardiovascular.
El hidroxitirosol forma parte de los
compuestos fenólicos del aceite de oliva. Se ha observado su
ingestión por parte del organismo, lo que es imprescindible para
demostrar su actividad. Este compuesto presenta una fuerte actividad
antioxidante, que defiende a las LDL de ser oxidadas. Esta
actividad antioxidante es incluso mayor que la de tocoferoles o
carotenos. Véase (Tuck, Hayball. Major phenolic compounds in
olive oil: metabolism and health effects. Journal of
Nutritional Biochemistry. (2002);
13(11):636-644, Visioli, Poli, Galli.
Antioxidant and other biological activities of phenols from
olives and olive oil. Medicinal Research Reviews. (2002);
22(1):65-75, Mateos, Domínguez, Espartero,
Cert. Antioxidant effect of phenolic compounds,
\alpha-tocopherol, and other minor components in
virgin olive oil. Journal of Agricultural and Food Chemistry.
(2003); 51(24):7170-5, Puerta, Domínguez,
Gutiérrez, Flavill, Hoult. Effects of virgin olive phenolics on
scavenging of reactive nitrogen species and upon sinergic
neurotransmission. Life Sciences. (2001);
69(10):1213-22, Rune, Blomhoff. Dietary
antioxidants and cardiovascular disease. Current Opinion in
Lipidology. (2005); 16(1):47-54).
A diferencia de los productos conocidos ya en la
técnica, la presente invención proporciona un producto que
comprende, principalmente, ácido oleico y licopeno, junto con otros
antioxidantes naturales, y que presenta las siguientes ventajas: (a)
por su capacidad antioxidante, puede regular la oxidación de las LDL
que provocan el desarrollo de la enfermedad cardiovascular; (b)
debido a la presencia de compuestos inhibidores del factor de
transcripción NF-\kappaB, puede regular fenómenos
inflamatorios, los cuales se relacionan con la aparición y
desarrollo de diversas patologías crónicas como la enfermedad
cardiovascular, la artritis reumatoide, y la inflamación asociada a
tumores; (c) gracias a que contiene compuestos potencialmente
anticancerígenos, puede impedir, disminuir o retrasar el riesgo de
cáncer de diversas etiologías; (d) debido a la presencia de
antioxidantes naturales se produce un efecto sinérgico; (e) es
fácil de preparar y (f) tiene un sabor agradable para el paladar.
Dichas ventajas se pueden encontrar individualizadas en diferentes
productos, pero no existe un producto como tal que englobe todas
estas características.
\vskip1.000000\baselineskip
Un aspecto de la presente invención se refiere a
un nuevo nutracéutico que comprende cantidades terapéuticamente
efectivas de ácido oleico (ácido graso monoinsaturado con
propiedades reguladoras de la respuesta inflamatoria) y licopeno
(carotenoide con actividad preventiva de la enfermedad
cardiovascular), que se emplean junto con cantidades adecuadas de
uno o varios de los siguientes compuestos: (a)
\beta-caroteno (principalmente procedente del tomate y del
aceite de oliva y precursor de la Vitamina A con una importante
capacidad antioxidante) y/o una cantidad equimolar de sus
derivados, preferiblemente, tales como retinol (vitamina A) y
derivados del mismo; (b) retinol (principalmente procedente
del tomate y del aceite de oliva) y todos sus derivados por acción
(bio)química, preferiblemente, sus isómeros retinol
todo-trans y 11-cis retinol, los
productos de oxidación ácido retinoico todo-trans,
ácido 13-cis retinoico, ácido 9-cis
retinoico y el producto de reducción 11-cis retinal,
junto con todos los derivados del mismo; (c) ácidos grasos
libres (principalmente procedentes del aceite de oliva y actúan
como reguladores del metabolismo de las LDL) tales como el ácido
linoleico, linolénico, palmítico, esteárico, araquidónico,
palmitoleico, gadoleico y behénico, así como los derivados por
(de)saturación de los mismos, preferiblemente ácido
palmítico, esteárico, oleico, linoleico, linolénico, araquidónico;
(d) fitoesteroles (compuestos pertenecientes a la fracción
insaponificable del aceite de oliva que combinan un amplio rango de
actividades biológicas antioxidantes, anticancerígenos y
antiaterogénicas), tales como \beta-sitosterol,
camesterol, estigmasterol, cicloartenol, sitostanol, campestanol,
preferiblemente \beta-sitosterol, o
concentraciones equimolares de sus derivados (conjugados de ácidos
grasos libres formando ésteres) y sus productos de saturación, tales
como los tocoferoles (pueden actuar reduciendo el riesgo de sufrir
enfermedad cardiovascular) junto con sus isómeros
\alpha-vitamina E-, \beta y \gamma, y otros
tocotrienoles; (e) tirosol (ácido fenilacético derivado de
la tirosina ([2-(4-hidroxifenil)etanol])
perteneciente a la fracción insaponificable del aceite de oliva) y
sus derivados procedentes de la hidrogenación, tales como el
hidroxitirosol
[2-(3,4-dihidroxifenil)etanol].
La adición de estos antioxidantes naturales a la
mezcla inicial compuesta por licopeno y ácido oleico proporciona un
efecto que puede sumarse a la actividad antioxidante que se
proporcionaría si actuasen cada uno de manera individual.
En una realización preferente de la presente
invención se proporciona una composición, preparada mediante mezcla
y homogeneización, que se administra de forma oral y que en un
volumen de 20 ml contiene:
- \bullet
- Ácido Oleico en una cantidad que varía entre 1 y 15 g.
- \bullet
- Licopeno en una cantidad que varía entre 1 y 125 mg.
- \bullet
- \beta-caroteno en una cantidad que varía entre 0,1 y 10 mg.
- \bullet
- Ácido linoleico en una cantidad que varía entre 0,1 y 10 g.
- \bullet
- Ácido palmitoleico en una cantidad que varía entre 0,01 y 2 g.
- \bullet
- Fitoesteroles en una cantidad que varía entre 1 y 100 mg.
- \bullet
- \alpha-Tocoferol (vitamina-E) en una cantidad que varía entre 0,1 y 10 mg.
- \bullet
- Derivado de tirosol, preferiblemente el tirosol-hidroxitirosol en una cantidad entre 0,01 y 1 mg.
\newpage
Otro aspecto de la presente invención se refiere
a la utilización del presente compuesto como:
(a) antioxidante, ya que puede regular la
oxidación de las LDL que provocan el desarrollo de la enfermedad
cardiovascular;
(b) regulador de procesos inflamatorios debido a
la presencia de compuestos inhibidores del factor de transcripción
NF-\kappaB, donde dichos procesos se relacionan
con la aparición y el desarrollo de diversas patologías crónicas
tales como la enfermedad cardiovascular, la artritis reumatoide, y
la inflamación asociada a tumores;
(c) potencialmente anticancerígeno, ya que puede
impedir, disminuir o retrasar el riesgo de cáncer de diversas
etiologías;
Los siguientes ejemplos no son limitativos e
ilustran la invención para una composición de extracto de tomate,
aceite de oliva y una mezcla de aceite de oliva y extracto de
tomate.
Ejemplo
1
Células. Una línea celular 5.1, que es un
clon derivado de Jurkat transfectado establemente con un plásmido
que contiene el gen de la luciferasa dirigido por el promotor
HIV-LTR, se mantuvo en crecimiento exponencial en
medio RPMI 1640 suplementado con un 10% de suero bovino fetal
inactivado por calor, 2 mM de L-glutamina, 1 mM
HEPES, antibióticos y 200 \mug/ml de G418.
Ensayo de luciferasa. La línea celular
5.1 se preincubó durante 30 minutos con extracto de tomate que
tenía un contenido mínimo en licopeno del 6%, seguido de una
estimulación con TNF\alpha (2 ng/ml) durante 6 horas. A
continuación, las células se lisaron en 25 mM
tris-fosfato pH 7,8, 8 mM MgCl_{2}, 1 mM DTT, 1%
Triton X-100, y 7% glicerol. La actividad
luciferasa se midió empleando un Autolumat LB 9501 atendiendo a las
instrucciones del kit de ensayo de luciferasa y la concentración de
proteínas se midió mediante el método Bradford. Para eliminar el
ruido de fondo provocado por la solución de lisis, este valor fue
sustraído en cada valor del experimento y se expresó la activación
como una inducción proporcional con respecto a células sin
tratar.
Composición del extracto: El extracto de
tomate empleado para el ensayo contiene principalmente: licopeno
(6%), fitoeno (0,6%), fitoflueno (0,5%),
\beta-caroteno (0,2%), tocoferoles (2%),
fitoesteroles (0,6%).
Ejemplo
2
Ensayo de retardo en gel. Aislamiento de
proteínas y ensayo de movilidad electroforética (EMSA). Se
estimularon las células 5.1 (10^{6}/ml) en un medio completo
indicado anteriormente con extracto de tomate con un contenido
mínimo en licopeno del 6%. A continuación, se lavaron las células
dos veces con tampón fosfato salino frío, se aislaron las proteínas
de los extractos nucleares y se determinó la concentración de
proteínas mediante el método Bradford (Bio-rad).
Para el ensayo de movilidad electroforética (EMSA) la sonda
consenso de NF-\kappaB
5'-AGTTGAGGGGACTTTCCCAGG-3' se marcó
en la cola con [\gamma-^{32}P]ATP. La
mezcla para la reacción de unión contenía 3 \mug de extracto
proteico, 0,5 \mug de poly(dl-dC), 20 mM
HEPES, pH 7,70 mM NaCl, 2 mM DTT, 0,01% NP-40, 100
\mug/ml BSA, 4% Ficoll, y 100.000 cpm de fragmentos de ADN
marcados en la cola en un volumen total de 20 \mul. Después de 30
minutos de incubación a 4ºC, la mezcla se sometió a electroforesis
en gel de poliacrilamida al 6% que contenía 89 mM
Tris-borato, 89 mM ácido bórico, y 1 mM EDTA. Los
geles se sometieron previamente a electroforesis a 225V durante 30
minutos y, a continuación, durante 2 horas tras la carga de las
muestras. Estos geles se secaron y se expusieron a una película de
rayos X a -80ºC.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
3
Células. Se utilizó una línea celular
5.1, tal como la descrita en el ejemplo 1.
Ensayo de luciferasa. La línea celular
5.1 se preincubó durante 30 minutos con ácido oleico en las
concentraciones indicadas, seguido de una estimulación con
TNF\alpha (2 ng/ml) durante 6 horas. La actividad transcripcional
de NF-\kappaB se midió de la misma manera que en
el ejemplo 1.
Ejemplo
4
Células. La línea celular A549 de
adenocarcinoma de pulmón se mantuvo en medio DMEM (Dulbecco's
modified Eagle's), complementado con un 10% de suero bovino
fetal inactivado por calor.
Transfecciones transitorias y ensayo de
luciferasa. Las células A549 (10^{5}/ml) se transfectaron con
el gen reportero LTR-Luc y con el
KBF-Luc. Las transfecciones se llevaron a cabo
empleando el agente de transfección LipofectAMINE PLUS, de acuerdo
con las instrucciones del fabricante, durante 24 horas. Después de
la incubación con ácido oleico durante 30 minutos, se estimularon
las células transfectadas durante 6 horas con TNF\alpha (2
ng/ml). La actividad transcripcional de NF-\kappaB
se midió de la misma manera que en el ejemplo 1.
\newpage
Ejemplo
5
Células. Se utilizó una línea celular
5.1, tal como la descrita en el ejemplo 1.
Ensayo de luciferasa. Se preincubó la
línea celular 5.1 durante 30 minutos con ácido oleico en presencia
de licopeno, seguido de una estimulación con TNF\alpha (2 ng/ml)
durante 6 horas. La actividad transcripcional de
NF-\kappaB se midió de la misma manera que en el
ejemplo 1.
A la vista de los resultados se puede observar
que tanto el licopeno del extracto de tomate como el ácido oleico
del aceite de oliva ofrecen resultados óptimos por separado en la
inhibición de la activación del factor de transcripción
NF-\kappaB, concretamente, en el ejemplo 1 con
extracto de tomate para células linfoides, el índice de activación
disminuye hasta, aproximadamente, 25 cuando la concentración aumenta
hasta 125 \mug/ml, mientras que en el ejemplo 3 con ácido oleico
de la misma concentración para células linfoides, el índice de
activación disminuye hasta, aproximadamente,
7-8.
En el ejemplo 2, se observa una menor cantidad
de NF-\kappaB unida al ADN al aumentar la
concentración del extracto de tomate.
En el ejemplo 4, se observa un efecto similar al
ejemplo 3 aunque en este caso se actúa sobre células
cancerígenas.
Finalmente, el ejemplo 5 utiliza una mezcla de
ácido oleico y licopeno variando la concentración de licopeno (10
\muM y 20 \muM). Se observa claramente que existe un efecto
sinérgico ya que el índice de activación disminuye hasta valores por
debajo de 5. Además, cuanto mayor es la concentración de licopeno
más bajo es éste índice.
En conclusión, es evidente que la combinación de
ambos componentes (licopeno y ácido oleico) produce un mayor efecto
sobre la inhibición de la activación del factor de transcripción
NF-\kappaB, el cual está implicado en los procesos
relacionados con la aparición y el desarrollo de diversas
patologías crónicas, tales como la enfermedad cardiovascular, la
artritis reumatoide, y la inflamación asociada a tumores.
Claims (12)
1. Producto que comprende una cantidad
terapéuticamente efectiva de licopeno y una cantidad
terapéuticamente efectiva de ácido oleico y cantidades adecuadas de
uno o varios de los siguientes compuestos:
(a) \beta-caroteno y/o una cantidad
equimolar de sus derivados, tales como retinol (vitamina A) y
derivados del mismo;
(b) retinol y todos sus derivados por
acción (bio)química, preferiblemente, sus isómeros retinol
todo-trans y 11-cis retinol, los
productos de oxidación ácido retinoico todo-trans,
ácido 13-cis retinoico, ácido 9-cis
retinoico y el producto de reducción 11-cis
retinal, junto con todos los derivados del mismo;
(c) ácidos grasos libres, tales como el
ácido linoleico, linolénico, palmítico, esteárico, araquidónico,
palmitoleico, gadoleico y behénico, así como los derivados por
(de)saturación de los mismos, preferiblemente, ácido
palmítico, esteárico, oleico, linoleico, linolénico,
araquidónico;
(d) fitoesteroles, tales como
\beta-sitosterol, camesterol, estigmasterol,
cicloartenol, sitostanol, campestanol, preferiblemente
\beta-sitosterol, o concentraciones equimolares
de sus derivados (conjugados de ácidos grasos libres formando
ésteres) y sus productos de saturación, tales como los tocoferoles
junto con sus isómeros \alpha-vitamina E-,
\beta y \gamma, y otros tocotrienoles;
(e) tirosol y sus derivados procedentes
de la hidrogenación, tales como el hidroxitirosol
[2-(3,4-dihidroxifenil)etanol].
2. Producto, según la reivindicación 1, que
comprende, preferiblemente: ácido oleico (1-15 g),
ácido palmitoleico (0,01-2 g), licopeno
(1-125 mg), \beta-caroteno
(0,1-10 mg), ácido linoleico
(0,1-10 g), fitoesteroles (1-100
mg), \alpha-tocoferol (0,1-10 mg),
derivado de tirosol (0,01-1 mg).
3. Producto, según las reivindicaciones 1 y 2,
en el que, como mínimo, el ácido oleico actúa como
antioxidante.
4. Producto, según las reivindicaciones 1 y 2,
en el que, como mínimo, el ácido oleico actúa como inhibidor de NF-
\kappaB.
5. Producto, según las reivindicaciones 1 y 2,
en el que, como mínimo, el licopeno actúa como antioxidante.
6. Producto, según las reivindicaciones 1 y 2,
en el que, como mínimo, el licopeno actúa como inhibidor de
NF-\kappaB.
7. Producto, según las reivindicaciones 1 y 2,
en el que el ácido linoleico actúa como antioxidante adicional.
8. Producto, según las reivindicaciones 1 y 2,
en el que el ácido palmitoleico actúa como antioxidante
adicional.
9. Producto, según las reivindicaciones 1 y 2,
en el que el \alpha-tocoferol actúa como
antioxidante adicional.
10. Producto, según las reivindicaciones 1 y 2,
en el que un derivado de tirosol actúa como antioxidante
adicional.
11. Producto, según las reivindicaciones 1 y 2,
en el que los fitoesteroles actúan como antioxidante adicional.
12. Utilización de una combinación de licopeno y
ácido oleico junto con uno o varios de los siguientes
compuestos:
(a) \beta-caroteno y/o una cantidad
equimolar de sus derivados, tales como retinol (vitamina A) y
derivados del mismo;
(b) retinol y todos sus derivados por
acción (bio)química, preferiblemente, sus isómeros retinol
todo-trans y 11-cis retinol, los
productos de oxidación ácido retinoico todo-trans,
ácido 13-cis retinoico, ácido 9-cis
retinoico y el producto de reducción 11-cis
retinal, junto con todos los derivados del mismo;
(c) ácidos grasos libres, tales como el
ácido linoleico, linolénico, palmítico, esteárico, araquidónico,
palmitoleico, gadoleico y behénico, así como los derivados por
(de)saturación de los mismos, preferiblemente, ácido
palmítico, esteárico, oleico, linoleico, linolénico,
araquidónico;
(d) fitoesteroles, tales como
\beta-sitosterol, camesterol, estigmasterol,
cicloartenol, sitostanol, campestanol, preferiblemente
\beta-sitosterol, o concentraciones equimolares
de sus derivados (conjugados de ácidos grasos libres formando
ésteres) y sus productos de saturación, tales como los tocoferoles
junto con sus isómeros \alpha-vitamina E-,
\beta y \gamma, y otros tocotrienoles;
(e) tirosol y sus derivados procedentes
de la hidrogenación, tales como el hidroxitirosol
[2-(3,4-dihidroxifenil)etanol].
para la preparación de un nuevo producto que se
administra por vía oral y actúa como:
(a) antioxidante, ya que puede regular la
oxidación de las LDL que provocan el desarrollo de la enfermedad
cardiovascular;
(b) regulador de procesos inflamatorios debido a
la presencia de compuestos inhibidores del factor de transcripción
NF-\kappaB, donde dichos procesos se relacionan
con la aparición y el desarrollo de diversas patologías crónicas,
tales como la enfermedad cardiovascular, la artritis reumatoide, y
la inflamación asociada a tumores;
(c) potencialmente anticancerígeno, ya que puede
impedir, disminuir o retrasar el riesgo de cáncer de diversas
etiologías.
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