ES2268874T5 - Mejora de ensayos de fijación mediante análisis multiepitópico - Google Patents

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Description

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E99931132
11-08-2015
utilizan unas partículas de látex fluorescentes, de 100 nm de tamaño, que están recubiertas mediante unión covalente con un anticuerpo anti-digoxigenina.
Este reactivo de detección también se incuba durante 20 minutos agitando a temperatura ambiente; a continuación, 5 se aspira, se lava y se seca por aspiración. Las áreas de ensayo se irradian luego con un láser de He-Ne de 633 nm de longitud de onda y la fluorescencia se mide a 670 nm de longitud de onda con una cámara CCD.
La fase sólida contiene áreas de ensayo específicas con los siguientes antígenos inmovilizados:
10 - Polipéptido p24 recombinante
-Transcriptasa inversa recombinante (RT)
-
Péptido gp41, 1
-
Péptido gp41, 2
15 Como tampón de la muestra se usó un tampón Tris 50 mM de pH 7,6 con los siguientes aditivos: 0,05% de Tween 20, 0,5% de albúmina de suero bovino (RSA), 0,1% de IgG bovino, 0,01% de metilisotiazolona, 3% de peptona.
Como solución reactiva 1 se empleó el tampón de muestra arriba descrito, que contiene los siguientes antígenos específicos del ensayo: 20
- p24 recombinante, marcado con digoxigenina
-Transcriptasa inversa recombinante marcada con digoxigenina
-
Péptido gp41, 1, marcado con digoxigenina
-
Péptido gp41, 2, marcado con digoxigenina
25 Como solución reactiva 2 se empleó un tampón Tris 50 mM de pH 8,0 con los siguientes aditivos: 0,05% de Tween 20, 0,9% de NaCl, 0,5% de RSA, 0,1% de azida sódica y 0,01% de partículas de látex fluorescentes recubiertas de un anticuerpo monoclonal anti-digoxigenina.
30 2. Comparación de un ensayo de anticuerpos anti-VIH mediante el formato microspot con los métodos convencionales
En este ensayo se midieron muestras llamadas de seroconversión. Estas muestras son tomas sucesivas de diversas personas, cuyo resultado VIH-negativo en suero se convierte en VIH-positivo. Cuanto más sensible es un método, 35 más pronto se puede detectar una señal de anticuerpo específico de VIH. Las muestras se midieron con el método de la presente invención (microspot) y, comparativamente, con un método conocido (Enzymun® de Boehringer Mannheim). Las sustancias específicas de VIH utilizadas para ello eran idénticas en ambos sistemas de ensayo, los cuales, por tanto, solo se diferencian, sobre todo, en el análisis por puntos individuales separados. En la tabla siguiente se representan los índices del valor umbral (índice de valor umbral = señalmuestra–señalfondo/2x señalcontrol
40 negativo) para ambos métodos, comparados además con datos de Western blot:
Panel de seroconversión de la firma BBI*
Día de la toma p24 RT Péptido gp41, 1 Péptido gp41, 2 Western blot Enzymun®
R 2ª toma
2 0,0 0,0 0,0 1,3 negativo 0,5
3ª toma
7 22,2 0,0 0,0 2,4 indiferente 15,4
4ª toma
13 17,4 2,6 4,4 36,4 positivo 36,0
AB 1ª toma
0 0,0 0,0 0,6 0,0 negativo 0,3
2ª toma
28 0,0 0,0 0,4 1,1 negativo 0,7
3ª toma
33 0,0 0,0 5,5 54,4 negativo 24,2
4ª toma
35 0,8 0,2 6,0 33,2 positivo 26,7
5ª toma
37 15,2 5,1 4,6 33,0 positivo 28,9
AD 5ª toma
21 0,0 0,0 0,0 0,0 negativo 0,3
6ª toma
25 0,2 0,0 1,6 3,7 positivo 0,9
7ª toma
28 14,1 0,3 11,1 65,5 positivo 24,5
AG 3ª toma
13 0,0 0,0 0,0 0,0 negativo 0,4
4ª toma
27 0,0 0,0 0,0 1,1 negativo 0,6
5ª toma
34 6,0 5,3 0,0 106,9 positivo 8,1
6ª toma
50 6,1 5,4 0,0 65,4 positivo 3,1
7ª toma
78 1,0 6,8 0,0 23,9 positivo 1,6
8ª toma
163 1,5 5,3 0,0 4,9 positivo 0,6
AI 1ª toma
0 0,0 0,0 1,2 0,1 indiferente 0,8
2ª toma
7 0,6 0,5 54,7 44,9 positivo 30,2
3ª toma
11 1,1 0,7 18,8 22,5 positivo 30,2
* Boston Biomedica Inc.
7
imagen6

Claims (1)

  1. imagen1
ES99931132.7T 1998-06-22 1999-06-22 Mejora de ensayos de fijación mediante análisis multiepitópico Expired - Lifetime ES2268874T5 (es)

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DE19827714 1998-06-22
DE19827714 1998-06-22
DE19838802A DE19838802A1 (de) 1998-06-22 1998-08-26 Verbesserung von Bindeassays durch Multiepitopanalyse und Kombination von Antigen- und Antikörper-Bestimmung
DE19838802 1998-08-26
PCT/EP1999/004310 WO1999067643A1 (de) 1998-06-22 1999-06-22 Verbesserung von bindeassays durch multiepitopanalyse und kombination von antigen- und antikörper-bestimmung

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AT (1) ATE333647T1 (es)
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ES (1) ES2268874T5 (es)
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0139373A1 (en) † 1983-08-26 1985-05-02 The Regents Of The University Of California Multiple immunoassay system
IL75464A (en) † 1984-06-12 1990-08-31 Orgenics Ltd Method and apparatus for multi-analyte assay
CA1272127A (en) † 1985-04-04 1990-07-31 Hybritech Incorporated Solid phase system for use in ligand-receptor assays
CA1335880C (en) * 1988-07-14 1995-06-13 Thomas P. O'connor Detection of an antibody and antigen in an immunoassay
US5120662A (en) † 1989-05-09 1992-06-09 Abbott Laboratories Multilayer solid phase immunoassay support and method of use
EP0608370B1 (en) * 1991-10-15 1998-01-07 Multilyte Limited Binding assay employing labelled reagent
BR9404967A (pt) † 1993-04-14 1999-06-15 Int Murex Tech Corp Imunoensaio
EP0904542B1 (en) * 1996-03-01 2005-06-29 Beckman Coulter, Inc. System for simultaneously conducting multiple ligand binding assays
DE19731465A1 (de) † 1997-07-22 1999-01-28 Boehringer Mannheim Gmbh Verwendung von Kontrollflächen zur Detektion von Störproben in einem Nachweisverfahren

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