ES2240345T3 - Derivados de amidinofenilalanina como inhibidores de trombina. - Google Patents
Derivados de amidinofenilalanina como inhibidores de trombina.Info
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Abstract
Los compuestos de la fórmula general I en donde R1 representa un residuo de la fórmula en donde R4 = H, (C1-C3) alquilo, OH, (C1-C3) alquilo-O, NH2; R2 representa un residuo de la fórmula en donde R5 = H, (C1-C3) alquilo, CF3, COOR9, R6 = H, (C1-C3) alquilo, CF3, COOR9, R7 = (C1-C3) alquilo, (C3-C6) cicloalquilo, R8 = (C1-C3) alquilo, (C3-C6) cicloalquilo, R9 = H, (C1-C3) alquilo, R10 = H, (C1-C3) alquilo, bencilo, R11 = H, SO2Me, CO2Me; R3 representa un residuo de la fórmula en donde R12 = H, (C1-C3) alquilo, acetilo y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
Description
Derivados de amidinofenilalanina como inhibidores
de trombina.
La invención pertenece al campo de la industria
farmacéutica y se relaciona con nuevos derivados de azafenilalanina,
procedimientos para su preparación y composiciones farmacéuticas que
los contienen. Los nuevos derivados de azafenilalanina tienen
actividad enzimática (proteasas de serina) y efecto
anticoagulante.
Existe una necesidad constante por nuevos
productos medicinales con actividad anticoagulante que puedan ser
administrados ya sea en forma oral o parenteral y que sean
altamente selectivos y de baja toxicidad. Recientemente, los
inhibidores de trombina de bajo peso molecular parecen ser de
creciente importancia en esta área.
La trombina como una proteasa de serina es una
enzima clave en los procesos de coagulación de la sangre y en el
desarrollo de la trombosis (Edit, J. F.; Allison, P.; Noble, S.;
Ashton, J.; Golino, P.; McNard, J.; Buja, L. M.; Willerson, J. T.,
J. Clin. Invest. 1989, 84, 18.).
La estructura cristalina de las proteasas de
serina de trombina y de la serina son conocidas (Bode, W.; Turk,
D.; Karshikov, A. J., Protein Sci. 1992, 1, 426).
Actualmente, los agentes anticoagulantes usados
son tóxicos y de efectividad limitada.
Los inhibidores de trombina de bajo peso
molecular deben ser de eficacia selectiva y pueden usarse por vía de
administración oral.
Existen antagonistas reversibles e irreversibles
de trombina (Kimball, S. D., Curr. Pharm. Design 1995,
1, 441, Das, J.; Kimball, S. D., Bioorg. Med. Chem.
1995, 3, 999, Kimball, S. D., Blood Coagulation and
Fibrinolysis 1995, 6, 511, Breznik, M.; Peèar, S.,
Farm. Vestn. 1997, 48, 545, Sanderson, P. E. J.;
Naylor-Olsen, A. M.; Current Med. Chem.
1998, 5, 289, Rewinkel, J. B. M.; Adang, A. E. P., Curr. Pharm.
Design 1999, 5, 1043, Wiley, M. R.; Fisher, M. J.; Exp. Opin.
Ther. Patents 1997, 7, 1265, Menear, K.; Current Med. Chem.
1998, 5, 457.
La mayoría de los antagonistas reversibles de
trombina se derivan de la estructura modificada
peptidomiméticamente
D-Phe-Pro-Arg. El
propósito de la modificación es el de proveer estabilidad química,
selectividad y efectividad.
La sustancia activa usada en Japón y en los
estados Unidos es argatroban (Kikumoto, R.; Tamao, Y.; Tezuka., T.;
Tonomura, S.; Hara, H., Ninomiya, K.; Hijikata, A.; Okamoto, S.,
Biochemistry 1984, 23, 85).
Los derivados de amidinofenilalanina y los
derivados de aminopiridilalanina tienen actividad antitrombótica
selectiva (Danilewicz, J., et al. WO 95/13274 (1995)).
Por reemplazo del grupo
amidino-piperidina P1 con una estructura débilmente
básica de
2-amino-6-metilpiridina,
se ha obtenido un efectivo y selectivo inhibidor de trombina que
puede ser usado para administración oral (Sanderson, P. E. J.; et
al., Bioorg. Med. Chem. 1998, 8, 817).
SI 20025 describe a los inhibidores de trombina
derivados de azafenilalanina.
Por lo tanto, el objeto de la presente invención
es superar los problemas encontrados en el estado de la técnica.
Los anteriores problemas se resuelven, por
ejemplo, por medio de un compuesto como se define en la
reivindicación 1, y un proceso como se define en la reivindicación
6, así como composiciones farmacéuticas como se definen en la
reivindicación 8.
La invención se relaciona particularmente con
nuevos derivados de azafenilalanina y análogos de los mismos de la
fórmula general (I)
en
donde
R^{1} representa un residuo de la fórmula
en donde R^{4} = H,
(C_{1}-C_{3})alquilo, OH,
(C_{1}-C_{3})alquilo-O,
NH_{2};
R^{2} representa un residuo de la fórmula
en donde
\;R^{5} = H, (C_{1}-C_{3})alquilo, CF_{3}, COOR^{9},
- R^{6} = H, (C_{1}-C_{3})alquilo, CF_{3}, COOR^{9},
- R^{7} = (C_{1}-C_{3})alquilo, (C_{3}-C_{6})cicloalquilo,
- R^{8} = (C_{1}-C_{3})alquilo, (C_{3}-C_{6})cicloalquilo,
- R^{9} = H, (C_{1}-C_{3})alquilo,
- R^{10} = H, (C_{1}-C_{3})alquilo, bencilo,
- R^{11} = H, SO_{2}Me, CO_{2}Me;
R^{3} representa un residuo de la fórmula
\vskip1.000000\baselineskip
en donde R^{12} = H,
(C_{1}-C_{3})alquilo,
acetilo
y sales farmacéuticamente aceptables de los
mismos.
En comparación con los compuestos, descritos en
SI 20025, los compuestos de la presente invención son de actividad
mayor. Ki de trombina (\muM) del compuesto a, de acuerdo con la
patente SI 20025, es 0,032, Ki de trombina (\muM) del compuesto
b, de acuerdo con la presente invención, es 0,005.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La invención también se relaciona particularmente
con un proceso para la preparación de derivados de azafenilalanina y
análogos de la fórmula general (I).
Ellos pueden prepararse convenientemente como
sigue:
a) 3-cianobenzaldehido de fórmula
(II)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
se convierte con
BOC-carbazato de la fórmula
(III)
al compuesto de la fórmula
(IV),
el cual se somete a reducción por
hidrogenación catalítica o con NaCNBH_{3}, y se convierte al
compuesto
(V),
que reacciona con trifosgeno y
amina de la fórmula
(VI),
en donde R^{5} y R^{6} tienen
el mismo significado que en la fórmula
(I),
o con trifosgeno y amina de la fórmula (VII u
VIII),
o con trifosgeno y amina de la
fórmula
(IX),
en donde R^{7} y R^{8} tienen
el mismo significado que en la fórmula
(I),
o con trifosgeno y amina de la fórmula (X),
en donde R^{10} tiene el mismo
significado que en la fórmula
(I),
en una reacción "one pot" al compuesto
(XI)
en donde R^{2} tiene el mismo
significado que en la fórmula
(I).
El grupo protector BOC en el compuesto (XI) se
remueve con HCl (g) en HOAC a temperatura ambiente para obtener el
compuesto (XII),
en donde R^{2} tiene el mismo
significado que en la fórmula
(I).
El cual reacciona con cloruro de sulfonilo
aromático hasta el compuesto (XIII),
en donde R^{2} y R^{3} tienen
el mismo significado que en la fórmula
(I).
El compuesto (XIII) se convierte al compuesto de
la fórmula (I)
en una forma usual. Este puede
obtenerse, por ejemplo, convirtiendo al compuesto (XIII) por
adición de una hidroxilamina y un alcohol anhidro tal como, por
ejemplo, etanol o un ácido mineral tal como, por ejemplo, HCl (g) y
por ejemplo, acetato de amonio, obteniendo así el compuesto
(I).
Cuando el compuesto (XIII) reacciona con
hidroxilamina en etanol anhidro, R^{4} simboliza al grupo OH,
después de la reacción del compuesto (XIII) con HCl (g) y acetato
de amonio, R^{4} simboliza hidrógeno.
Los compuestos de partida se preparan, a menos
que se orienten de otra manera, de acuerdo con los procedimientos
descritos en la literatura, por ejemplo, el compuesto de fórmula IV
como lo describe A. Fässler, et al., J. Med. Chem. 1996, 39,
3203-3215.
La invención se relaciona además con el uso de
compuestos de la fórmula I como compuestos terapéuticamente activos.
Los nuevos compuestos son preferiblemente inhibidores de trombina.
Ellos inhiben a la trombina y la formación de fibrina. Son útiles
en el tratamiento o prevención de una variedad de formas de
trombosis: (i) tromboembolismo venoso debido a la formación de un
trombo dentro de una vena (trombosis venosa) asociada con factores
de riesgo adquiridos (largos períodos en cama, cirugía, lesiones,
malignidad, estados de preñez y posparto o heredados (deficiencia
de inhibidores de coagulación natural), obstrucción u oclusión de
una arteria pulmonar por un trombo desprendido (embolia pulmonar),
(ii) tromboembolismo cardiogénico debido a la formación de un
trombo en el corazón asociado con arritmia cardiaca, defecto en una
válvula cardiaca, válvulas prostéticas cardíacas o enfermedad
cardiaca, embolismo de las arterias periféricas causado por un
trombo desprendido, más comúnmente en el cerebro (ataque de
isquemia), (iii) trombosis arterial debida a procesos
arterioscleróticos subyacentes en las arterias, que obstruyen u
ocluyen una arteria y causan isquemia de miocardio (angina de
pecho, síndrome coronario agudo) o muerte celular en el músculo
cardiaco (infarto de miocardio), obstrucciones u oclusiones de
arteria periférica (enfermedad arterial periférica isquémica) y
obstrucciones u oclusiones de la arteria después de un
procedimiento sobre vasos sanguíneos (reoclusión o restenosis
después de angioplastia coronaria transluminal, reoclusión o
restenosis después de angioplastia transluminal percutánea de
arterias periféricas) y (iv) en diferentes situaciones (por
ejemplo, en complicaciones durante el embarazo, en enfermedades
malignas que hacen metástasis, después de heridas de gran
extensión, en sepsis bacterial) cuando la activación trombogénica
causa formación diseminada de trombos dentro del sistema vascular
(coagulación intravascular diseminada).
Los compuestos de la presente invención pueden
usarse también como terapia adjunta junto con terapia trombolítica
en infartos de miocardio recientes, en combinación con aspirina en
pacientes con angina pectoral inestable, diseñada para sobrellevar
la angioplastia transluminal percutánea, y en el tratamiento de
pacientes con trombosis y con trombocitopenia inducida por
heparina.
Los compuestos de la presente invención pueden
ser usados además para la prevención de la coagulación de la sangre
que está en contacto con superficies no biológicas (prótesis
vascular, espirales vasculares, válvulas cardíacas prostéticas,
sistemas de circulación extracorporal, hemodiálisis) e in
vitro para prevenir la coagulación en muestras biológicas para
análisis o almacenamiento.
La presente invención también se relaciona
particularmente con composiciones farmacéuticas que comprenden los
compuestos de la fórmula I. Pueden formularse en presentaciones
inyectables u orales. El componente activo de la droga puede
combinarse con aditivos adecuados estándar relacionados con la forma
pretendida de administración. Las composiciones farmacéuticas
pueden prepararse de acuerdo con los procedimientos estándar. La
preparación puede formularse de tal forma que permita la liberación
controlada y sostenida del ingrediente activo. La dosificación, su
frecuencia y modo de administración que dependen de una variedad de
factores, depende también del ingrediente individual y de sus
parámetros cinéticos, así como de las necesidades terapéuticas del
paciente.
El efecto anticoagulante de los inhibidores de
trombina fue medido por medio de ensayos de tiempo de trombina (TT),
tiempo de tromboplastina parcial activada (aPTT), y tiempo de
protrombina (PT). Los inhibidores fueron añadidos a plasma humano
normal combinado en un rango de concentraciones, y la coagulación
fue registrada en un coagulómetro automatizado (Fibrintimer,
Dade/Behring). La concentración de inhibidor que duplicó el tiempo
de coagulación, se determinó para cada análisis.
En una muestra de plasma, la trombina convierte
al fibrinógeno en fibrina y se forma el coágulo. Se midió el tiempo
para la formación del coágulo. El tiempo de trombina se prolonga
debido a desórdenes en la polimerización de la fibrina, o debido a
la presencia de inhibidores de trombina.
- Trombina (Reactivo para la Prueba de Trombina, 1,5 IU/mL, Dade/Behring): se disolvió trombina bovina liofilizada en 5 mL de HEPES (25 mmol/L, pH 7,4). El reactivo se calentó a 37ºC antes de la prueba.
- Plasma combinado normal: se recolectó sangre venosa de 11 voluntarios aparentemente sanos (1 parte de solución de citrato de sodio 0,11 mol/L con 9 partes de sangre) y se centrifugó inmediatamente a 2000 x g durante 30 minutos a 4ºC. El plasma fue removido, combinado y almacenado en alícuotas a -70ºC hasta su utilización.
- Inhibidores: se disolvieron en DMSO (solución patrón 10 mM) y se diluyeron con agua destilada para las soluciones de trabajo (la concentración más alta 100 \muM).
Los inhibidores (10 \muL de solución de
trabajo, concentraciones desde 2,5 \muM hasta 100 \muM) y el
plasma combinado (90 \muL) fueron incubados a 37ºC durante 5
minutos, y luego se les añadió trombina (200 \muL). La formación
del coágulo se midió en un coagulómetro, por duplicado.
La incubación de plasma con la cantidad óptima de
fosfolípidos y un activador de superficie conduce a la activación de
los factores de la ruta de coagulación intrínseca. La adición de
iónes de calcio dispara el proceso de coagulación. Se midió el
tiempo de formación del coágulo de fibrina. El aPTT fue usado como
una prueba de selección para los desórdenes de coagulación de la
ruta de coagulación intrínseca.
- Pathromtin SL (Dade/Behring): partículas de dióxido de silicio, fosfolípidos vegetales, cloruro de sodio (2,4 g/L), Hopes (14,3 g/L, pH 7,6), azida de sodio (<1 g/L). El reactivo fue usado a temperatura ambiente (15-25ºC).
- Solución de cloruro de calcio: 0,025 mol/L, calentada a 37ºC.
- Plasma combinado normal: se recolectó sangre venosa de 11 voluntarios aparentemente sanos (1 parte de solución de citrato de sodio 0,11 mol/L con 9 partes de sangre) y se centrifugó inmediatamente a 2000 x g durante 30 minutos a 4ºC. El plasma fue removido, combinado y almacenado en alícuotas a -70ºC hasta su utilización.
- Inhibidores: se disolvieron en DMSO (solución patrón 10 mM) y se diluyeron con agua destilada para las soluciones de trabajo (la concentración más alta 100 \muM).
El inhibidor (10 \muL de solución de trabajo,
concentraciones desde 5 \muM hasta 100 \muM) y el plasma
combinado (90 \muL) fueron incubados a 37ºC durante 5 minutos. Se
añadió Pathromtin (100 \muL) y la muestra fue incubada por otros 2
minutos a 37ºC. La adición de cloruro de calcio (100 \muL)
disparó el proceso de coagulación y la formación del coágulo se
detectó con un coagulómetro, por duplicado.
Se añadió una cantidad óptima de tromboplastina y
calcio a la muestra de plasma y se midió el tiempo de formación del
coágulo de fibrina. El PT es una prueba de selección rápida y
sensible para los desórdenes de coagulación de la ruta extrínseca.
También es apropiada para la inducción y el seguimiento de la
terapia anticoagulante oral, para diagnosticar deficiencias
genéticas o adquiridas en los factores de coagulación, y para
revisar el desempeño de síntesis del hígado en las enfermedades
hepáticas. El PT se prolonga debido al déficit de factores de
coagulación extrínsecos, o debido a la presencia de
inhibidores.
- Tromboplastina (Thromborel S, Dade/Behring): se disolvió en 4 mL de agua destilada. El reactivo se encontraba a 37ºC por lo menos 30 minutos antes de usarlo.
- Plasma combinado normal: se recolectó sangre venosa de 11 voluntarios aparentemente sanos (1 parte de solución de citrato de sodio 0,11 mol/L con 9 partes de sangre) y se centrifugó inmediatamente a 2000 x g durante 30 minutos a 4ºC. El plasma fue removido, combinado y almacenado en alícuotas a -70ºC hasta su utilización.
- Inhibidores: se disolvieron en DMSO (solución patrón 10 mM) y se diluyeron con agua destilada para las soluciones de trabajo (la concentración más alta 100 \muM).
El inhibidor (10 \muL de solución de trabajo,
concentraciones desde 5 \muM hasta 100 \muM) y el plasma
combinado (90 \muL) fueron incubados a 37ºC durante 5 minutos y
luego se añadió Thromborel S (200 \muL). La formación del coágulo
se midió con un coagulómetro, por duplicado.
El efecto inhibidor de la enzima de los
compuestos, puede identificarse por determinación de la constante de
inhibición Ki. Esta denota el grado de disociación del complejo
enzima-inhibidor. Una constante de disociación baja
significa gran potencia del inhibidor. Ki puede determinarse
durante la reacción de la enzima con un sustrato cromogénico
específico, el cual, por hidrólisis causada por la enzima desarrolla
color. La reacción en el tiempo se registra por espectrofotometría,
y Ki se calcula a partir de parámetros cinéticos (Vmax, Km,
velocidad de reacción).
La capacidad de un compuesto para actuar como un
inhibidor de la actividad catalítica de la trombina humana, se
evaluó por determinación de Ki.
- Solución amortiguadora: HBSA, pH 7,5 (Hepes 10 mM, NaCl 150 mM, albúmina de suero bovino 0,1% p/v).
- Sustrato (S-2238: H-D-Phe-Pip-Arg-pNa HCl, 25 mg; Chromogenix): disuelto enagua destilada hasta una concentración de 1 mM. (km es 2,6 \muM).
- Trombina humana (308 NIH; Sigma): disuelta en suero fisiológico para dar una solución patrón de 20 NIH/mL.
- Inhibidores: se disolvieron en DMSO (solución patrón 10 mM) y se diluyeron con agua destilada para las soluciones de trabajo (la concentración final más alta de DMSO fue de 3%).
Se incubó una mezcla de 50 \muL de solución
amortiguadora, 50 \muL de inhibidor en agua (concentración final
desde 10 hasta 100 \muM) y 50 \muL de trombina (0,5 NIH U/mL
f.c.) durante 15 minutos a temperatura ambiente. La reacción se
inició con 50 \muL de S-2238 (20 \muM o 40
\muM f.c.) y se midió la absorbancia de cada muestra a 405 nm (a
25ºC) por triplicado cada 10 segundos durante un período de 15
minutos, usando un lector de placas de microtitulación (Tecan
Sunrise).
La actividad de la trombina se determinó a partir
del cambio en absorbancia en la parte linear de la gráfica de
velocidad. Ki se calculó de acuerdo con Cheng y Prussof (Biochem
Pharmacol, 1973) donde Ki es IC_{50}/(1+S/Km). La Km para el
sustrato se determinó bajo las condiciones del ensayo con al menos
6 concentraciones de sustrato variando alrededor de Km y se calculó
con el programa experto Curva, de regresión no linear.
La capacidad de un compuesto para actuar como un
inhibidor de la actividad catalítica de la tripsina se evaluó por
determinación de Ki.
- Solución amortiguadora: HBSA, pH 7,5 (Hepes 10 mM, NaCl 150 mM, albúmina de suero bovino 0,1% p/v).
- Sustrato (S-2222: N-benzoil-Ile-Glu-Gly-Arg-pNa HCl, 25 mg; Chromogenix): disuelto en agua destilada hasta una concentración de 2 mM. (km es 21 \muM).
- Tripsina (6000 E/mg prot.; Sigma): se disuelve en agua destilada para dar una solución patrón de 300 E/mL.
- Inhibidores: se disolvieron en DMSO (solución patrón 10 mM) y se diluyeron con agua destilada para las soluciones de trabajo (la concentración final más alta de DMSO fue del 10%).
Se incubaron 50 \muL de solución amortiguadora,
50 \muL del compuesto de prueba en agua (concentración final
desde 50 hasta 300 \muM) y 50 \muL de tripsina (3 mE/mL f.c.)
durante 15 minutos a temperatura ambiente. La reacción se inició con
50 \muL de S-2222 (50 \muM o 100 \muM f.c.) y
se midió la absorbancia de cada muestra a 405 nm (a 25ºC) por
triplicado cada 10 segundos durante un período de 15 minutos, usando
un lector de placas de microtitulación (Tecan Sunrise).
La actividad de la tripsina se determinó a partir
del cambio en absorbancia en la parte linear de la gráfica de
velocidad. Ki se calculó de acuerdo con Cheng y Prussof (Biochem
Pharmacol, 1973) donde Ki es IC_{50}/(1+S/Km). La Km para el
sustrato se determinó bajo las condiciones del ensayo con al menos
6 concentraciones de sustrato variando alrededor de Km y se calculó
con el programa experto Curva, de regresión no linear.
Por medio del uso de otra proteasa de serina como
la tripsina, con el sustrato cromogénico apropiado, se determinó la
selectividad de los inhibidores con respecto a la trombina. La
selectividad de un inhibidor se expresa como una relación de la Ki
para tripsina con la Ki para la trombina.
Usando una combinación de estimulación
trombogénica (0,045 ng/kg de factor tisular) y estasis, se probó la
habilidad de los compuestos para afectar la formación de los
trombos en un modelo de trombosis venosa en la rata.
La formación de trombos por una combinación de
estasis e hipercoagulabilidad fue inducida como lo describieron
Vogel et al. (Thromb. Res., 1989, 54,
399-410). Ratas macho Sprague-Dawley
(250-300 g) fueron anestesiadas con pentobarbitona
de sodio (30 mg/kg, intraperitoneal). El abdomen de los animales fue
abierto quirúrgicamente y después de una disección cuidadosa, se
expuso la vena cava y se la diseccionó fuera del tejido
circundante. Se administró suero fisiológico o los diferentes
compuestos por vía intravenosa, 5 minutos antes de la inducción de
la trombosis. Se prepararon dos suturas sueltas, alejadas 0,7 cm
sobre la vena cava inferior y todas las venas colaterales fueron
ligadas. Se inyectó el factor tisular humano (0,045 ng/kg,
intravenoso) dentro de la vena dorsal del pene. Diez segundos
después de finalizada la inyección, se estableció estasis por
estrechamiento de las dos, primero la proximal, y luego la distal.
La cavidad abdominal fue cerrada provisionalmente y se mantuvo el
estasis por 20 minutos. Se reabrió entonces la cavidad, el segmento
ligado se abrió longitudinalmente y se removieron los trombos
formados, se lavaron, se transfirieron sobre papel filtro, se
secaron durante la noche a 60ºC y se pesaron. Bajo estas condicione
experimentales, el peso del trombo de control fue de 5,5 \pm 0,1
mg (n = 15).
Se determinó el riesgo de hemorragia asociado al
tratamiento con los compuestos seleccionados, usando un modelo
experimental de sangrado: corte transversal de la cola de las
ratas.
El tiempo de sangrado se determinó por medio de
un corte transversal de la cola, a 2 mm de la punta, de ratas
anestesiadas con fenobarbital (30 mg/kg, intraperitoneal). Los
compuestos se inyectaron en forma intravenosa en las dosis
indicadas, 5 minutos después del corte de la cola. La sangre fue
cuidadosamente transferida cada 15 segundos, sobre un papel de
filtro. Se consideró que se logró la hemostasia cuando no se
observó más coloración de sangre por encima de 1 minuto.
La invención se describe además por medio de los
siguientes ejemplos, pero en ningún caso en forma limitante.
Se disolvió trifosgeno (2,296 g) en 15 ml de
diclorometano anhidro y se enfrió a -5ºC. Mientras se agitaba bajo
atmósfera de argón, se añadieron gota a gota, una solución de
N-1-(tert-butoxicarbonil)-N-2-[(3-cianofenil)metil]hidracina
(3,833 g) y N,N-diisopropiletilamina (4,040 ml) en
25 ml de diclorometano. Después de la adición, la mezcla de
reacción se agitó por otros 5 minutos, y una mezcla de
4-metil piperidina (1,836 ml) y
N,N-diisopropiletilamina (4,040 ml) en 25 ml de
diclorometano le fue añadida entonces inmediatamente, y se agitó a
temperatura ambiente durante otros 20 minutos. El solvente se
evaporó al vacío y el residuo se disolvió en 50 ml de acetato de
etilo, se lavó con 25 ml de ácido cítrico al 5%, con 25 ml de
solución de NaHCO_{3} al 5%, y con 25 ml de salmuera. La fase
orgánica se secó sobre MgSO_{4}, se filtró, y el filtrado se
evaporó bajo presión reducida.
La mezcla resultante se suspendió en 20 ml de
dietiléter y se añadieron 5 ml de hexano. El precipitado se filtró
por succión.
Rendimiento: 1.756 g (30.4%)
Rango de fusión: 147-150ºC
IR (KBr, cm^{-1}): 3275.0, 2922.7, 2229.3,
1722.3, 1632.3, 1497.3, 1445.5, 1367.6, 1252.9, 1157.0, 979.2,
805.1, 736.2, 573.7
RMN (DMSO-d_{6})): \delta
(ppm): 0.86 (d, J = 6,4 Hz, 3H, CH_{3}),
0.90-1.05 (m, 2H, Pip-H^{3,5}),
1.35 (s, 9H, Boc), 1.45-1.60 (m, 4H,
Pip-H^{3',5}'), 2.60-2.75 (m, 2H,
Pip-H^{2,6}), 3.70-3.85(m,
2H, Pip-H^{2',6'}), 4.52 (br s, 2H, CH_{2}),
7.58-7.66 (m, 1H, Bn-H^{5}),
7.79-7.85 (m, 1H, Bn-H^{6}),
7.93-8.05 (m, 2H, Bn-H^{2,4}),
11.05 (s, 1H, NH).
Peso molecular de C_{20} H_{27} N_{4}
O_{3}: calculado: 372; encontrado: 373 (MH^{+}).
El carboxilato de terc-butil
2-(3-cianobencil)-2-[(4-metil-1-piperidinil)carbonil]hidracina
(1.173 mg) se disolvió en 30 ml de ácido acético glacial y se
burbujeó HCl gaseoso a través de la solución durante 20 minutos. Se
hizo seguimiento al progreso de la reacción por TLC. Se evaporó el
ácido acético glacial en un rotaevaporador, y se vertió dietiléter
sobre el producto aceitoso. Se removió la fase líquida, el
precipitado resultante se secó a 50ºC y se desecó sobre NaOH durante
24 horas.
Rendimiento: 0,875 g (%) de la mezcla.
Rango de fusión: 170-173ºC
IR (KBr, cm^{-1}): 3417.8, 2934.6, 2664.1,
2227.3, 1711.6, 1641.3, 1433.7, 1402.3, 1249.6, 1132.0, 1017.8
RMN (DMSO-d_{6}): \delta
(ppm): 0.92 (d, J = 6,4 Hz, 3H, CH_{3}),
0.99-1.16 (m, 2H, Pip = H^{3,5}),
1.52-1.71 (m, 4H, Pip-H^{3',5'}),
2.90-3.05 (m, 2H, Pip-H^{2,6}),
3.80-3.95(m, 2H,
Pip-H^{2',6'}), 4.62 (s, 2H, CH_{2}),
7.59-7.69 (m, 1H, Bn-H^{4,5}),
7.79-7.88 (m, 1H,
Bn-H^{2,6}).
Peso molecular de C_{14}H_{19}ClN_{4}O:
calculado: 294.78; encontrado: 295(MH^{+}).
La
2-(3-cianobencil)-2-[(4-metil-1-piperidinil)carbonil]hidracina
(0.870 g) se disolvió en 50 ml de diclorometano, se enfrió a -5ºC y
durante la agitación, se añadieron 1,190 ml de trietilamina y 0,640
g de naftalen-2-sulfonilcloruro. La
mezcla de reacción se agitó a -5ºC durante 30 minutos y luego a
temperatura ambiente durante otras 24 horas. El solvente se evaporó
a presión reducida y se añadieron 100 ml de acetato de etilo al
residuo. En el embudo de separación se lo lavó dos veces con 50 ml
de agua, con 50 ml de ácido cítrico al 10% y con 50 ml de salmuera.
La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y el
filtrado se evaporó al vacío. El producto resultante fue suspendido
en dietiléter y el precipitado fue filtrado por succión. El
precipitado fue recristalizado entonces en etanol, y los cristales
fueron filtrados por succión.
Rendimiento: 0.464 g (35.6%)
Rango de fusión: 92-95ºC
IR (KBr, cm^{-1}): 3191.7, 2931.6, 2221.0,
1680.5, 1433.5, 1-333.1, 1168.8, 857.9, 749.4,
692.2
RMN H^{1} (DMSO-d_{6})):
\delta (ppm): 0.10-0.35 (m, 2H,
Pip-H^{3,3',5,5'}), 0.47 (d, 3H, J = 6.0
Hz, CH_{3}), 1.22-1.32 (m, 3H,
Pip-H^{3,3',4,4',5,5'}), 2.30-2.45
(m, 1H, Pip-H^{2,2'}), 2.65-2.80
(m, 1H, Pip-H^{6,6'}), 3.45-3.65
(m, 2H, Pip-H^{2,2', 6,6'}), 4,38 (br d, 2H,
CH_{2}), 7.47-7.55 (m, 2H,
Bn-H^{5,6}), 7.58-7.63 (m, 1H,
Bn-H^{2}), 7.63-7.80 (m, 4H,
Bn-H^{4} in Nf-H^{3,6,7}),
8.02-8.18 (m, 3H, Nf-H^{4,5,8}),
8.43 (s, 1H, Nf-H^{1}), 9.60 (s, 1H, NH). Dos
juegos de señales Peso molecular de C_{25}H_{26}N_{4}O_{3}S:
calculado: 462.6; encontrado: 463 (MH^{+})
La
N-(3-cianobencil)-N'-[(4-metil-1-piperidinil)carbonil]-2-naftaleno
sulfonohidrazida (0.223 g) se suspendió en 20 ml de etanol anhidro
bajo atmósfera de argón y se añadieron 0,032 g de hidroxilamina. La
mezcla de reacción fue calentada a temperatura de reflujo durante
24 horas y evaporada bajo presión reducida. El producto de reacción
se purificó por cromatografía en columna (eluyente:
cloroformo/metanol = 9/1 para dar cristales blancos.
Rendimiento: 0.215 g (38%)
Rango de fusión: 169-173ºC
IR (KBr, cm^{-1}): 3365.8, 3194.6, 2943.8,
2864.7, 1652.6, 1447.5, 1332.2, 1169.3, 1076.1, 756.2, 700.3,
553.2
RMN H^{1} (DMSO-d_{6}):
\delta (ppm): 0.01-0.36 (m, 2H,
Pip-H^{3,5}), 0.44 (d, 3H, J = 6.4 Hz,
CH_{3}), 1.15-1.27 (m, 3H,
Pip-H^{3,4,5}), 2.27-2.42 (m, 1H,
Pip-H^{2}), 2.56-2.75 (m, 1H,
Pip-H^{6}), 3.45-3.63 (m, 2H,
Pip-H^{2,6}), 4.35 (br d, 2H, CH_{2}), 7.14 (d,
1H, J = 7.9, Bn-H^{4}),
7.25-7.40 (m, 1H, Bn-H^{5}),
7.48-7.59 (m, 2H, Bn-H^{2,6}),
7.63-7.81 (m, 3H, Nf-H^{3,6,7}),
8.02-8.19 (m, 3H, Nf-H^{4,5,8}),
8.46 (s, 1H, Nf-H^{1}), 9.40 (s, 1H, NH), 9.78
(s, 1H, OH).
Peso molecular de
C_{25}H_{30}N_{5}O_{4}S: calculado: 495.6; encontrado: 496
(MH^{+}).
La
N'-(3-cianobencil)-N'-[(4-metil-1-piperidinil)carbonil]-2-naftaleno
sulfonohidrazida (0.200 g) fue suspendida en 10 ml de etanol, se la
enfrió en un baño de hielo y se burbujeó HCl dentro de la
suspensión durante 30 minutos. La mezcla se agitó a temperatura
ambiente durante 4 horas y luego se evaporó el solvente a presión
reducida. El residuo sólido fue lavado con éter isopropílico y
filtrado por succión. El precipitado resultante fue disuelto en 10
ml de etanol y se añadió acetato de amonio (0,092 g). La mezcla
resultante fue agitada a temperatura ambiente durante 20 horas, y
luego se pasó HCl a través de la solución durante 30 minutos.
Después de 24 horas, se formó el precipitado blanco que fue
filtrado por succión.
Rendimiento: 50.4 mg (52%)
Rango de fusión: 148-152ºC
IR (KBr, cm^{-1}): 3396.1, 3101.7, 2945.8,
1669.1, 1435.8, 1335.9, 1165.9, 1072.4, 749.4,668.4
RMN H^{1} (DMSO-d_{6}):
\delta (ppm): 0.01-0.40 (m, 2H,
Pip-H^{3,5}), 0.47 (d, 3H, J = 6.4 Hz,
CH_{3}), 1.15-1.29 (m, 3H,
Pip-H^{3,4,5}), 2.27-2.42 (m, 1H,
Pip-H^{2}), 2.56-2.75 (m, 1H,
Pip-H^{6}), 3.45-3.60 (m, 2H,
Pip-H^{2,6}), 4.41 (br d, 2H, CH_{2}), 7.14 (d,
1H, J = 7.9, Bn-H^{4}),
7.25-7.40 (m, 1H, Bn-H^{5}),
7.48-7.59 (m, 2H, Bn-H^{2,6}),
7.63-7.81 (m, 3H, Nf-H^{3,6,7}),
8.02-8.19 (m, 3H, Nf-H^{4,5,8}),
8.46 (s, 1H, Nf-H^{1}), 9.40 (s, 1H, NH).
Peso molecular de C_{24}H_{27}N_{5}O_{3}S
(base libre): calculado: 465.57; encontrado: 466 (MH^{+}).
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Se añadió 3-cianobenzaldehido
(40.0 mmol) suspendido en EtOH (100 mL) a una solución agitada de
carbazato de tert-butil (40,0 mmol) en EtOH. La
mezcla se calentó a temperatura de reflujo, y después de 4 horas,
el EtOH fue parcialmente evaporado al vacío. Se añadió agua (100
mL) y el producto precipitado se recolectó por filtración y se lavó
con dietiléter para dar el carboxilato de tert-butil
2-(3-cianobencilideno)-1-hidracina
como un sólido blanco.
Rendimiento: 77%.
PF: 115-158ºC.
IR (KBr): 3297, 2977, 2232, 1703, 1530, 1477,
1376, 1248, 1160, 1061, 941, 865 cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 246.
RMN H^{1} (300 MHz CDCl_{3}): 1.55 (s, 9H,
Boc-H), 7.55 (m, 2H, Bn-H), 7.93
(m, 3H, Bn-H en CH), 8.24 (s, 1H, NH).
Análisis elemental: calculado para
C_{13}H_{15}N_{3}O_{2}: C, 63.66; H, 6.16; N, 17.13,
encontrado C, 63.38; H, 6.18; N, 17.09.
Se disolvió carboxilato de tert-butil
2-(3-cianobencilideno)-1-hidracina
(60.0 mmol) en MeOH (250 mL) y se añadió Pd/C al 10% (10% p/p). La
mezcla fue hidrogenada durante 6 horas. El catalizador fue filtrado
y el filtrado fue evaporado al vacío para dar el carboxilato
aceitoso de tert-butil
2-(3-cianobencili)-1-hidracina
que cristalizó durante la noche.
Rendimiento: 95%.
PF: 75-80ºC.
IR (KBr): 3368, 2980, 2226, 1679, 1482, 1366,
1286, 1166, 793 cm^{-1}
MS (FAB): MH^{+} = 248.
RMN H^{1} (300 MHz CDCl_{3}): 1.47 (s, 9H,
Boc-H), 4.04 (br s, 2H, CH_{2}), 4.28 (br s, 1H,
NH), 6.09 (br s, 1H, NH), 7.12-7.41 (m, 4H,
Bn-H).
Análisis elemental: calculado para
C_{13}H_{17}N_{3}O_{2} \cdot ¼ H_{2}O: C, 62.01; H,
7.00; N, 16.69; encontrado C, 61.90; H, 7.22; N, 16.69.
El producto se preparó a partir de carboxilato de
tert-butil
2-(3-cianobencil)-1-hidracina
y 2-metilpiperidina, usando el procedimiento
descrito en el Ejemplo 1.
Rendimiento: 42%.
PF: aceite
IR (KBr): 3271, 2941, 2230, 1725, 1644, 1428
cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 373.
RMN H^{1} (300 MHz, CDCl_{3}): 1.22 (d,
J = 6,8 Hz, 3H, CH_{3}), 1.45 (s, 9H, Boc),
1.45-1.79 (m, 5H, Pip-H),
2.97-3.10 (m, 1H, Pip-H);
3.44-3.54 (m, 1H, Pip-H),
3.63-3.76 (m, 1H, Pip-H),
4.18-4.32 (m, 1H, Pip-H), 4.48 (s,
2H, CH_{2}), 6.30 (s, 1H, NH), 7.46 (t, J = 7.9 Hz, 1H,
Bn-H), 7.56-7.67 (m, 3H,
Bn-H).
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El producto se preparó a partir de carboxilato de
tert-butil
2-(3-cianobencil)-2-[(2-metil-1-piperidinil)carbonil]-1-hidracina,
usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 2.
Rendimiento: 91%.
PF: 135-137ºC.
IR (KBr): 3429, 2949, 2229, 2708, 2230, 1694,
1526, 1420 cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 273.
RMN H^{1} (300 MHz, CDCl_{3}): 1.23 (d,
J = 6,8 Hz, 3H, CH_{3}), 1.40-1.51 (m, 1H,
Pip-H) 1.52-1.79 (m, 5H,
Pip-H), 2.98-3.10 (m 1H,
Pip-H), 3.60-3.79 (m, 1H,
Pip-H), 4.25-4.38 8 (m, 1H,
Pip-H), 4.64 (s, 2H, CH_{2}), 7.53 (t, J =
7.9 Hz, 1H, Bn-H), 7.61-7.76 (m,
3H, Bn-H), 9.60 (br s, 2H, NH_{2}).
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
El producto se preparó a partir de carboxilato de
tert-butil
2-(3-cianobencil)-1-hidracina
y azepán, usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 1.
Rendimiento: 63%.
PF: aceite.
IR (KBr): 3287, 2925, 2223, 1726, 1634
cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 373.
RMN H^{1} (300 MHz, CDCl_{3}): 1.45 (s, 9H,
Boc), 1.53-1.62 (m, 4H,
Pip-H^{4,5}), 1.69-1.80 (m, 4H,
Pip-H^{3,6}), 3.39-3.46 (m, 4H,
Pip-H^{2,7}), 4.50 (s, 2H, CH_{2}), 6.25 (br s,
1H, NH), 7.45 (t, J = 7.9 Hz, 1H, Bn-H),
7.56-7.69 (m, 3H, Bn-H).
El producto se preparó a partir de carboxilato de
tert-butil
2-(1-azepanilcarbonil)-2-(3-cianobencil)-1-hidracina
y azepán, usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 2.
Rendimiento: 66%.
PF: aceite.
IR (KBr): 2926, 2702, 2230 1703,1521
cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 273.
RMN H^{1} (300 MHz, CDCl_{3}):
1.53-1.64 (m, 4H, Pip-H^{4,5}),
1.65-1.81 (m, 4H, Pip-H^{3,6}),
3.38-3.46 (m, 4H, Pip-H^{2,7}),
4.70 (s, 2H, CH_{2}), 7.48-7.64 (m, 2H,
Bn-H), 7.69-7.80 (m, 2H,
Bn-H), 9.60 (br s, 2H, NH_{2}).
El producto se preparó a partir de cloruro de
2-(3-cianobencil)-2-[(2-metil-1-piperidinil)carbonil]hidracina
y cloruro de naftaleno-2-sulfonilo,
usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 3.
Rendimiento: 14%.
PF: 116-119ºC.
IR (KBr): 3231, 2943, 2227. 1653 cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 273.
RMN H^{1} (300 MHz CDCl_{3}):
0.35-0.55 (m, 2H, Pip-H),
0.75-0.90 (m, 2H, Pip-H),
1.03-1.45 (m, 6H, Pip-H in
CH_{3}), 2.54-2.70 in 2.75-2.95
(m, 1H, Pip-H) 3.50-3.75 in
3.75-4.00 (m, 1H, Pip-H), 4.31 (br
d, 2H, CH_{2}), 7.35-7.70 (m, 7H,
Bn-H in Nph-H),
7.75-7.85(m, 1H, Nph-H),
7.86-8.00 (m, 3H, Nph-H), 8.42 (s,
1H, Nph-H), (dos juegos de señales).
Análisis elemental: calculado para
C_{25}H_{26}N_{4}O_{3}S: C, 64.91; H, 5.67; N, 12.11;
encontrado: C, 65.07; H, 5.58; N, 11.93.
El producto se preparó a partir de
N'-(3-cianobencil)-N'-[(2-metil-1-piperidinil)carbonil]-2-naftalenosulfonohidrazida
usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 4.
Rendimiento: 48%.
PF: 101-103ºC.
IR (KBr): = 3370, 2932, 1651 cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 496.
El producto se preparó a partir de cloruro de
2-(3-cianobencil)-2-[(2-metil-1-piperidinil)carbonil]hidracina
y
6-metoxi-2-naftalenosulfonil
usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 3.
Rendimiento: 26%.
PF: 169-173ºC.
IR (KBr): 3172, 2934, 2229, 1671, 1623
cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 493273.
RMN H^{1} (300 MHz, CDCl_{3}):
0.47-0.60 (m, 2H, Pip-H),
0.79-0.92 (m, 2H, Pip-H),
1.12-1.50 (m, 6H, Pip-H in
CH_{3}), 2.50-2.75 en 2.80-3.15
(m, 1H, Pip-H), 3.55-3.76 en
3.80-3.95 (m, 1H, Pip-H), 3.95 8s,
3H, OCH_{3}); 2.55-2.74 (m, 1H,
Pip-H), 3.45-3.65 (m, 2H,
Pip-H), 3.84 (s, 3H, CH_{3}), 4.32 (br d, 2H,
CH_{2}), 7.28-7.33 (m, 1H, Nph-H),
7.44-7.60 (m, 5H, Bn-H y
Nph-H), 7.75-7.88 (m, 3H,
Nph-H), 8.34 (d, 1H, J = 1.88 Hz,
Nph-H).
El producto se preparó a partir de
N'-(3-cianobencil)-6-metoxi-N'-[(2-metil-1-piperidinil)carbonil]-2-naftalenosulfonohidrazida
usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 4.
Rendimiento: 45%.
PF: 172-175ºC.
IR (KBr): 3368, 2937, 1647, 1160 cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 526.
RMN H^{1} (300 MHz, CDCl_{3}):
0.35-0.50 (m, 2H, Pip-H),
0.79-1.00 (m, 2H, Pip-H),
1.12-1.50 (m, 6H, Pip-H in
CH_{3}), 2.40-2.75 in 2.80-3.00
(m, 1H, Pip-H), 3.55-3.76 in
3.80-3.95 (m, 1H, Pip-H), 3.95 (s,
3H, OCH_{3}); 4.35 (br d, 2H, CH_{2}), 5.04 (s, 2H, NH_{2}),
7.15-7.65 (m, 6H, Nph-H in
Bn-H), 7.74-7.87 (m, 3H,
Nph-H), 8.34 (s, 1H, Nph-H).
Análisis elemental: calculado para
C_{26}H_{31}N_{5}O_{5}S \cdot EtOH: C, 58.83; H, 6.52; N,
12.25; encontrado: C, 59.41; H, 5.96; N, 12.09.
El producto se preparó a partir de cloruro de
2-(3-cianobencil)-2-[(4-metil-1-piperidinil)carbonil]hidracina
usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 3.
Rendimiento: 50%.
PF: 169-173ºC.
IR (KBr): 3168, 2932, 2232, 1671 cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 493.
RMN H^{1} (300 MHz,
DMSO-d_{6}): 0.15-0.40 (m, 2H,
Pip-H), 0.53 (d, 3H, J = 6.0 Hz, CH_{3}),
1.25-1.39 (m, 3H, Pip-H),
2.25-2.38 (m, 1H, Pip-H),
2.55-2.74 (m, 1H, Pip-H),
3.45-3.65 (m, 2H, Pip-H), 3.84 (s,
3H, CH_{3}), 4.32 (br d, 2H, CH_{2}), 7.28-7.33
(m, 1H, Nph-H), 7.44-7.54 (m, 3H,
Bn-H y Nph-H), 7.60 (d, 1H, J = 1.88
Hz, Bn-H), 7.60-7.76 (m, 2H,
Bn-H y Nph-H), 7.94 (d, 1H, J
= 8.66 Hz, Nph-H), 8.05 (d, 1H, J = 8.66 Hz,
Nph-H), 8.34 (d, 1H, J = 1.88 Hz,
Nph-H^{1}), 9.46 (s, 1H, NH).
El producto se preparó a partir de
N'-(3-cianobencil)-6-metoxi-N'-[(4-metil-1-piperidinil)carbonil]-2-naftalenosulfonohidrazida
usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 4.
Rendimiento: 36%.
PF: 154-156ºC.
IR (KBr): 3473, 3365, 2950, 1646 cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 526
RMN H^{1} (300 MHz, CDCl_{3}): 0.30 (br d,
3H, Pip-H), 0.58 (d, 3H, J = 6.0 Hz,
CH_{3}), 1.26 (br d, 3H, Pip-H), 2.45, (br s, 1H,
Pip-H), 2.63 (br d, 1H, Pip-H), 3.74
(br d, 2H, Pip-H), 3.97 (s, 3H, OCH_{3}), 4.34
(br d, 2H, CH_{2}), 4.94 (s, 2H, NH_{2})
7.17-7.35 (m, 4H, Nph-H y
Bn-H), 7.49-7.55 (m, 2H,
Bn-H), 7.77-7.89 (m, 4H,
Bn-H y Nph-H), 8.35 (m, 1H,
Bn-H), 8.65 (br s, 1H, NH), 9.02 (s, 1H, OH).
El producto se preparó a partir de
N'-(3-cianobencil)-6-metoxi-N'-[(4-metil-1-piperidinil)carbonil]-2-naftalenosulfonohidrazida
usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5.
Rendimiento: 26%.
PF 151-154ºC.
IR (KBr): 3054, 1677, 1624 cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 510.
RMN H^{1} (300 MHz, CDCl_{3}): 0.28 (br d,
3H, Pip-H), 0.54 (d, 3H, J = 6.0 Hz,
CH_{3}), 1.27 (br d, 3H, Pip-H), 2.45 (br s, 1H,
Pip-H), 2.64 (br s, 1H, Pip-H), 3.66
(br s, 2H, Pip-H), 3.95 (s, 3H, OCH_{3}), 4.32
(m, 2H, CH_{2}), 7.16-7.28 (m, 2H,
Nph-H), 7.36-7.40 (m, 2H,
Bn-H^{2,6}), 7.73-7.87 (m, 4H,
Bn-H^{5} y Nph-H), 7.95 (m, 1H,
Bn-H^{4}), 8.78 (br s, 2H, NH_{2}), 8.16 (br s,
2H, NH_{2}).
El producto se preparó a partir de cloruro de
N'-(1-azepanilcarbonil)-N'-(3-cianobencil)-2-naftalenosulfonohidrazida
y naftaleno-2-sulfonil, usando el
procedimiento descrito en el Ejemplo 3.
Rendimiento: 43%.
PF: 128-130ºC.
IR (KBr): 3190, 2942, 2223, 1674 cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 463.
RMN H^{1} (300 MHz,
DMSO-d_{6}): 0.63-1.40 (m, 8H,
Pip-H^{3,4,5,6}), 2.90-3.20 (m,
4H, Pip-H^{2,7}), 4.35 (br d, 2H, CH_{2}),
7.45-5.55 (m, 2H, Nph-H en
Bn-H), 7.50-7-75 (m,
5H, Nph-H en Bn-H),
8.02-8.15 (m, 3H, Nph-H), 8.45 (s,
1H, Nph-H), 9.56 (s, 1H, NH).
Análisis elemental: calculado para za C_{25}
H_{26} N_{4}O_{3} S: C, 64.91; H, 5.67; N, 12.11; encontrado:
C, 64.65; H, 5.78; N, 12.10.
El producto se preparó a partir de
N'-(1-azepanilcarbonil)-N'-(3-cianobencil)-2-naftalenosulfonohidrazida
usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 4.
Rendimiento: 79%.
PF: 152-155ºC.
IR (KBr): 3365, 2924, 1646 cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 496.
RMN H^{1} (300 MHz,
DMSO-d_{6}): 0.65-1.40 (m, 8H,
Pip-H^{3,4,5,6}), 2.90-3.20 (m,
4H, Pip-H^{2,7}), 4.34 (br d, 2H, CH_{2}), 5.87
(br s, 2H, NH_{2}), 7.45-5.55 (m, 2H,
Nph-H en Bn-H),
7.50-7.75 (m, 5H, Nph-H en
Bn-H), 8.02-8.15 (m, 3H,
Nph-H), 8.45 (s, 1H, Nph-H),9.35 (br
d, 1H, NH), 9.67 (br s, 1H, OH).
El producto se preparó a partir de
N'-(1-azepanilcarbonil)-N'-(3-cianobencil)-2-naftalenosulfonohidrazida,
usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 5.
Rendimiento: 36%.
PF: 151-154ºC.
IR (KBr): 3374, 3054, 2926, 1654, 1420, 1160
cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 480.
RMN H^{1} (300 DMSO-d_{6}):
0.60-1.45 (m, 8H,
Pip-H^{3,4,5,6}), 2.90-3.20 (m,
4H, Pip-H^{2,7}), 4.40 (br d, 2H, CH_{2}), 7.44
(d, J = 8,3 Hz, 2H, Bn-H^{2,6}),
7.62-7.80 (m, 5H, Bn-H^{3,5} en
Nph-H), 8.02-8.18 (m, 3H,
Nph-H), 8.45 (s, 1H, Nph-H), 9.09
(s, 2H, NH_{2}), 9.35 (s, 1H, NH).
El producto se preparó a partir de cloruro de
2-(3-cianobencil)-2-[(4-metil-1-piperidinil)carbonil]hidracina,
usando el procedimiento descrito en el Ejemplo 3.
Rendimiento: 15%.
PF: 128-130ºC.
IR (KBr): 3169, 2939, 2229, 1670 cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 493.
RMN H^{1} (300 MHz,
DMSO-d_{6}): 0.65-1.50 (m, 8H,
Pip-H^{3,4,5,6}), 2.85-3.20 (m,
4H, Pip-H^{2,7}), 3.91 (s, 3H, OCH_{3}) 4.35 (br
d, 2H, CH_{2}), 7.28-7.32 (m, 1H,
Bn-H), 7.42-7.52 (m, 3H,
Bn-H en Nph-H), 7.60 (br s, 1H,
Nph-H), 7.66-7.71 (m, 2H,
Nph-H), 7.92 (d, 1H, J = 8.7,
Nph-H), 8.04 (d, 1H, J = 8.7,
Nph-H), 8.33 (d, 1H, J = 1.5,
Nph-H), 9.44 (s, 1H, NH).
Análisis elemental: calculado para C_{26}
H_{28} N_{4} O_{4} S: C, 63.14; H, 6.11; N, 11.33;
encontrado: C, 63.26; H, 5.87; N, 11.06.
El producto se preparó a partir de
N'-(1-azepanilcarbonil)-N'-(3-cianobencil)-6-metoxi-2-
naftalenosulfonohidrazida, usando el procedimiento descrito en el
Ejemplo 4.
Rendimiento: 24%.
PF: 173-175ºC.
IR (KBr): 3459, 3368, 2932, 1648, cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 526.
RMN H^{1} (300 MHz, CDCl_{3}):
0.65-1.50 (m, 8H,
Pip-H^{3,4,5,6}), 2.85-3.20 (m,
4H, Pip-H^{2,7}), 3.97 (s, 3H, OCH_{3}) 4.35 (s,
2H, CH_{2}), 4.95, (s, 1H, NH) 7.28-7.32 (m, 1H,
Bn-H), 7.42-7.52 (m, 3H,
Bn-H en Nph-H), 7.60 (br s, 1H,
Nph-H), 7.66-7.71 (m, 2H,
Nph-H), 7.92 (d, 1H, J = 8,7 Hz,
Nph-H), 8.04 (d, 1H, J = 8.7 Hz,
Nph-H), 8.33 (d, 1H, J = 1.5 Hz,
Nph-H), 8.90 (br s, 1H, NH), 8.35 (s, 1H, OH).
Análisis Elemental: calculado para C_{26}
H_{31} N_{5} O_{5} S: C, 59.18; H, 6.30; N, 13.27;
encontrado: C, 59.68; H, 6.16; N, 12.88.
El producto se preparó a partir de
N'-(1-azepanilcarbonil)-N'-(3-cianobencil)-6-metoxi-2-
naftalenosulfonohidrazida, usando el procedimiento Ejemplo 5.
Rendimiento: 21%.
PF: 151-154ºC
IR (KBr): 3057, 2929, 1677, 1623, 1474, 1157
cm^{-1}.
MS (FAB): MH^{+} = 510.
RMN H^{1} (300 MHz CDCl_{3}):
0.65-1.40 (m, 8H,
Pip-H^{3,4,5,6}), 2.95-3.20 (m,
4H, Pip-H^{2,7}), 3.97 (s, 3H, OCH_{3}) 4.35 (br
s, 2H, CH_{2}), 7.44 (d, J = 8,3 Hz, 2H,
Bn-H^{2,6}), 7.62-7.80 (m, 5H, en
el Bn-H^{3,5} en Nph-H),
8.02-8.18 (m, 3H, Nph-H), 8.45 (s,
1H, Nph-H), 9.03 (s, 2H, NH_{2}), 9.35 (s, 2H,
NH_{2}).
Claims (11)
1. Los compuestos de la fórmula general I
en
donde
R^{1} representa un residuo de la fórmula
en donde R^{4} = H,
(C_{1}-C_{3})alquilo, OH,
(C_{1}-C_{3})alquilo-O,
NH_{2};
R^{2} representa un residuo de la fórmula
en donde
\;R^{5} = H, (C_{1}-C_{3})alquilo, CF_{3}, COOR^{9},
- R^{6} = H, (C_{1}-C_{3})alquilo, CF_{3}, COOR^{9},
- R^{7} = (C_{1}-C_{3})alquilo, (C_{3}-C_{6})cicloalquilo,
- R^{8} = (C_{1}-C_{3})alquilo, (C_{3}-C_{6})cicloalquilo,
- R^{9} = H, (C_{1}-C_{3})alquilo,
- R^{10} = H, (C_{1}-C_{3})alquilo, bencilo,
- R^{11} = H, SO_{2}Me, CO_{2}Me;
R^{3} representa un residuo de la fórmula
en donde R^{12} = H,
(C_{1}-C_{3})alquilo,
acetilo
y sales farmacéuticamente aceptables de los
mismos.
2. Un compuesto como el reivindicado en la
reivindicación 1, de fórmula I en donde R^{2} representa un grupo
seleccionado de:
3. Un compuesto como el reivindicado en la
reivindicación precedente en donde R^{3} representa un grupo
seleccionado de:
4. Un compuesto como el reivindicado en la
reivindicación 1 en donde dicho compuesto se selecciona del grupo
que consiste de:
N'-hidroxi-3-{[1-[(2-metil-1-piperidinil)carbonil]-2-(2-naftilsulfonil)hidrazino]metil}benceno
carboximidamida
N'-Hidroxi-3-({2-[(6-metoxi-2-naftil)sulfonil]-1-[(2-metil-1-piperidinil)carbonil]hidrazino}metil)bencenocar-
boximidamida
boximidamida
Cloruro de
Imino[3-({2-[(6-metoxi-2-naftil)sulfonil]-1-[(2-metil-1-piperidinil)carbonil]hidrazino}
metil)fenil]metanaminio
N'-Hidroxi-3-{[1-[(4-metil-1-piperidinil)carbonil]-2-(2-naftilsulfonil)hidrazino]metil}benceno
carboximidamida
Cloruro de
Imino(3-{[1-[(4-metil-1-piperidinil)carbonil]-2-(2-naftilsulfonil)hidrazino]metil}fenil)metanaminio
N'-Hidroxi-3-({2-[(6-metoxi-2-naftil)sulfonil]-1-[(4-metil-1-piperidinil)carbonil]hidrazimo}metil)bencenocarboximidamida
Cloruro de
Imino[3-({2-[(6-metoxi-2-naftil)sulfonil]-1-[(4-metil-1-piperidinil)carbonil]hidrazino}
metil)fenil]metanaminio
3-{[1-(1-Azepanilcarbonil)-2-(2-naftilsulfonil)hidrazino]metil}-N'-hidroxibenceno
carboximidamida
Cloruro de
(3-{[1-(1-Azepanilcarbonil)-2-(2-naftilsulfonil)hidrazino]metil}fenil)(imino)metanaminio
3-({1-(1-Azepanilcarbonil)-2-[(6-metoxi-2-naftil)sulfonil]hidrazino}metil)-N'-hidroxibenceno
carboximidamida
Cloruro de
[3-({1-(1-Azepanilcarbonil)-2-[(6-metoxi-2-naftil)sulfonil]hidrazino}metil)fenil](imino)metanaminio.
5. Compuestos de la fórmula I de acuerdo con la
reivindicación 1 para uso en terapia.
6. Un proceso para preparar compuestos de la
fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizados
porque el 3-cianobenzaldehido de la fórmula (II)
se convierte con
BOC-carbazato de la fórmula
(III)
al compuesto de la fórmula
(IV),
el cual se somete a reducción por
hidrogenación catalítica o con NaCNBH_{3}, y se convierte al
compuesto
(V),
que reacciona con trifosgeno y
amina de la fórmula
(VI),
en donde R^{5} y R^{6} tienen
el mismo significado que en la fórmula
(I),
o con trifosgeno y amina de la fórmula (VII u
VIII),
o con trifosgeno y amina de la
fórmula
(IX),
en donde R^{7} y R^{8} tienen
el mismo significado que en la fórmula
(I),
o con trifosgeno y amina de la fórmula (X),
en donde R^{10} tiene el mismo
significado que en la fórmula
(I),
en una reacción "one pot" al compuesto
(XI)
en donde R^{2} tiene el mismo
significado que en la fórmula
(I),
en el cual el grupo protector BOC se remueve con
HCl (g) en HOAC a temperatura ambiente para obtener el compuesto
(XII),
en donde R^{2} tiene el mismo
significado que en la fórmula
(I),
el cual reacciona con cloruro de sulfonilo
aromático hasta el compuesto (XIII),
en donde R^{2} y R^{3} tienen
el mismo significado que en la fórmula
(I).
que son entonces convertidos al compuesto de la
fórmula (I)
7. El uso de compuestos de la fórmula I de la
reivindicación 1, en la fabricación de medicamentos que inhiben la
trombina y la formación de fibrina.
8. El uso de acuerdo con la reivindicación 7, en
la fabricación de medicamentos que inhiben la trombina y la
formación de fibrina en la sangre del hombre y de otros
mamíferos.
9. Composiciones farmacéuticas que comprenden una
cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la fórmula I de
la reivindicación 1, y sustancias auxiliares farmacéuticamente
aceptables.
10. Composiciones farmacéuticas de acuerdo con la
reivindicación 8, para la inhibición de trombina en el hombre y en
otros mamíferos.
11. Composiciones farmacéuticas de acuerdo con la
reivindicación 8, para la inhibición de trombina y la formación de
fibrina en la sangre del hombre y de otros mamíferos.
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