ES2237763T3 - Procedimiento y medio para la determinacion del ioduro. - Google Patents

Abstract

LA INVENCION TRATA DE UN PROCEDIMIENTO Y UN MEDIO PARA LA DETERMINACION DE YODURO EN SOLUCIONES ACUOSAS, EN PARTICULAR EN LA ORINA. EL METODO SE CARACTERIZA PORQUE LA SOLUCION DE PRUEBA SE MEZCLA CON UN CROMOGENO Y UNA SOLUCION DE PERACIDO Y LA REACCION CROMATICA SE EVALUA VISUAL O FOTOMETRICAMENTE. EN EL CASO DE LA DETERMINACION DE YODURO EN ORINA LA PRUEBA SE TRATA PREVIAMENTE CON AYUDA DE UN CARBON ACTIVO PURIFICADO.

Description

Procedimiento y medio para la determinación del ioduro.

La invención se refiere a procedimientos y medios para el análisis semicuantitativo de ioduro en soluciones acuosas, preferentemente en orina.

El análisis del ioduro en la orina desempeña un papel importante en el diagnóstico clínico para controlar el funcionamiento de la tiroides. Asimismo, el análisis del ioduro en los alimentos y piensos adquiere cada vez más importancia. Hasta ahora no se han descrito métodos rápidos que permitan su utilización rutinaria para el análisis del ioduro en la orina.

En la mayoría de los procedimientos conocidos se procede a un tratamiento previo de la orina con un ácido fuerte o mediante incineración a altas temperaturas. A continuación se analiza el ioduro midiendo la reducción de los iones de cerio (IV) a iones de cerio (III) por el efecto catalítico del ioduro (reacción de Sandell-Kolthoff). El tratamiento previo con ácidos fuertes (clorato de potasio en ácido perclórico al 70%) o la incineración en seco de la orina con carbonato de potasio sirve para eliminar las sustancias que pueden influir sobre los iones de cerio durante la reducción. Durante esta operación se generan vapores tóxicos de ácido perclórico y, como es sabido, los percloratos así formados son explosivos.

En Anal. Chim. Acta 282, 87 (1993) se describe un procedimiento para el análisis de ioduro con cloropromacina y peróxido de hidrógeno que, sin embargo, resulta altamente susceptible a muchas sustancias presentes en la orina, así como en alimentos y piensos. Además, en DE-A 37 43 224 se describe un procedimiento para analizar perácidos en el que se añade un cromógeno y ioduro a la solución de ensayo. Sin embargo, un técnico en la materia no puede deducir de dicha publicación que esta reacción se pueda utilizar para demostrar la presencia de ioduro.

La tarea de la invención consiste en ofrecer una prueba sencilla y rápida para determinar la presencia de ioduro, con la cual incluso el personal no formado pueda determinar semicuantitativamente y cuantitativamente incluso cantidades reducidas de ioduro en soluciones acuosas sin necesidad de tratamientos previos y sin generar sustancias tóxicas.

La invención tiene por objeto un procedimiento para el análisis semicuantitativo del ioduro en la orina, que se caracteriza porque la muestra de orina se trata previamente con la ayuda de un carbón activo depurado y, a continuación, la solución de ensayo se mezcla con un cromógeno y una solución de perácido, de modo que la reacción cromática se evalúa por medios visuales o fotométricos. Resulta conveniente que el carbón activo depurado se encuentre en una columna de extracción.

Otro objeto de la invención consiste en los medios, es decir, las composiciones reactivas para determinar la presencia de ioduro en la orina, que contienen un cromógeno, una solución de perácido y una columna de extracción provista de un carbón activo.

Se ha observado que el procedimiento correspondiente a la invención resulta menos susceptible a perturbaciones y puede efectuarse con mucha más rapidez que los procedimientos conocidos para determinar la presencia de iodo en la orina. Es posible detectar concentraciones de ioduro de hasta 6 \mug/dl junto con una alta concentración de matriz aniónica. En las soluciones acuosas sin matriz orgánica, el umbral de detección de ioduro es de 0,2 \mug/dl.

En el procedimiento descrito en la presente invención se pueden utilizar todos los cromógenos conocidos por la literatura especializada que se oxidan en presencia de perácidos con ioduro como catalizador. Preferentemente, se utilizan aminas aromáticas, como son o- y p-fenilendiamina, bencidina y los derivados de bencidina, en particular la tetrametilbencidina. La concentración del cromógeno debe oscilar entre 1 y 5 mM, y preferentemente será aproximadamente de 2,5 mM.

Como soluciones de perácidos pueden utilizarse, por ejemplo, soluciones acuosas de ácido peracético, ácido perpriónico, ácido perbutírico, ácido perbenzoico, etc., utilizándose preferentemente una solución acuosa de ácido peracético. La concentración de esta solución debe oscilar entre el 1% y el 5%, y preferentemente será aproximadamente del 2,5%.

El medio descrito en la invención puede estar formado por dos soluciones, una solución de perácido y una solución de un cromógeno, o bien, junto con la solución de perácido, el cromógeno puede estar mezclado con un ácido orgánico, formando una matriz absorbente impregnada con dicha mezcla.

Como matriz absorbente pueden utilizarse todas aquellas matrices que suelen utilizarse para dichas pruebas rápidas. Lo más común es utilizar papel filtro, aunque también pueden emplearse otros productos absorbentes de celulosa, fibra de vidrio o plástico. Los soportes absorbentes, que preferentemente serán de papel filtro, se impregnan de la forma conocida con las soluciones que contienen el cromógeno y, en su caso, otros reactivos necesarios. Los papeles impregnados y secados pueden cortarse en zonas cuadradas o rectangulares que pueden pegarse o adherirse, de forma conocida, sobre películas de plástico o tiras de papel o metal.

Asimismo, los soportes absorbentes pueden colocarse sobre una cinta de plástico incluso antes de la impregnación en forma de tiras, y cortarse perpendicularmente a lo largo de la tira para formar varillas manejables, después de la impregnación.

A fin de que la reacción tenga lugar en un intervalo de pH óptimo, la solución de cromógeno contiene igualmente depresores. Si el análisis de ioduro se realiza con la ayuda de una matriz impregnada con las sustancias necesarias, resulta conveniente la presencia de depresores.

Pueden utilizarse como depresores aquellos que presenten un pH entre 3 y 7 y no perturben la reacción de detección. La concentración de depresores que debe utilizarse depende del pH de la solución de ensayo y de los ácidos o bases libres que ésta pueda contener. Como depresores se pueden utilizar sales comunes, como citratos, fosfatos, boratos, etc. Preferentemente se utilizan ácidos orgánicos sólidos, como ácido cítrico, ácido malónico, ácido succínico y sus sales, en particular ácido cítrico. Pueden emplearse, en lugar de soluciones de depresores listos para su uso, concentrados comerciales de depresores.

En caso de utilizarse tetrametilbencidina como cromógeno, el valor cromático más intenso se alcanza con un pH en torno a 4. También pueden utilizarse soluciones de depresores con un pH de hasta 7, si bien se obtienen unos umbrales de detección algo peores.

Para determinar la presencia de ioduro en la orina es importante que la solución de ensayo se trate previamente con la ayuda de carbonos activos, en particular con un carbón activo depurado. En vista de que las sustancias sulfurosas que contienen los carbones activos comerciales ejercen una influencia negativa sobre las reacciones cromáticas, generalmente es necesario depurarlos. Para ello se trata el carbón activo con un ácido clorhídrico 1 N, y a continuación se realiza su acondicionamiento con la solución de depresores utilizada para el análisis.

Puesto que el carbón activo se envasa preferentemente en una columna, el tamaño de los poros de éste debe situarse entre 50 y 150 \mum. Si se emplean poros más pequeños se limita la permeabilidad para soluciones acuosas, si se utilizan poros más grandes se reducen las propiedades de absorción del carbón activo. La columna de extracción contiene entre 0,1 y 0,4 g, preferentemente 0,2 g de carbón activo para un análisis. Por supuesto, el análisis puede efectuarse mediante el llamado método por lotes.

Para determinar la presencia de ioduro en la orina con ayuda de una columna de extracción que contiene carbón activo, la muestra de orina diluida con la solución de depresores se vierte en la columna acondicionada, desechándose después. A continuación, la muestra de orina que se desea analizar se depura con ayuda de la columna y se traslada a una copa graduada o a una cubeta. Tras este tratamiento previo, la muestra de orina se mezcla con la solución de cromógeno y, a continuación, con la solución de perácido, y se evalúa la reacción cromática tras un tiempo predeterminado, por ejemplo, de un minuto mediante una escala cromática o por medios fotométricos. El margen de detección de ioduro con el procedimiento descrito en la invención se sitúa entre 6 y 100 \mug/dl de ioduro. En el análisis de ioduro con ayuda de un soporte absorbente, el margen de detección es de 20 a 200 \mug/dl de ioduro.

El tratamiento previo de la muestra con carbón activo puede suprimirse, por ejemplo, si el análisis de ioduro se realiza en agua mineral, agua marina, sal común, etc. En aquellos casos en que debe retirarse una matriz por provocar alteraciones o en ausencia de sustancias que tienen un color propio y que, por ende, dificultan la evaluación fotométrica o visual, por ejemplo con determinados alimentos y piensos como la leche, es necesario el tratamiento previo de la muestra.

Ejemplo 1 Soluciones de reactivos Elaboración de la solución de cromógeno

Se disuelven 600 mg de tetrametilbencidina en 1000 ml de etanol (2,5 mM).

La solución de depresores lista para su uso (pH 4) contiene 11,7 g de ácido cítrico, 4,4 g de hidróxido de sodio y 1,6 g de cloruro de hidrógeno en 1000 ml de agua.

La solución de perácido contiene 2,5 g de ácido peracético en 100 ml de agua.

Ejemplo 2 Detección de ioduro en la orina a) Preparación de la muestra

En una columna de extracción con 0,2 g de carbón activo se añaden sucesivamente ácido clorhídrico 1 N y la solución de depresores mencionada en el ejemplo 1. Se vierten 2 ml de la muestra de orina disuelta en una solución de depresores (1 ml de orina, 4 ml de solución de depresores) y se desecha. A continuación se vierten en la columna otros 2 ml de la muestra disuelta de orina y se trasladan a una copa
graduada.

b) Realización del análisis

La muestra de orina se mezcla con 200 \mul de una solución de tetrametilbencidina a 2,5 mM, y a continuación con una gota de una solución de ácido peracético al 2,5%. Dependiendo de la concentración de ioduro se producirá una reacción cromática entre verde y azul, que se compara transcurrido un minuto con una escala cromática.

Para la evaluación fotométrica, la solución se vierte en una cubeta de 10 mm y el máximo de absorción se mide a 646 nm.

Ejemplo 3 Elaboración de una varilla de prueba

En una mezcla formada por 500 ml de etanol y 100 ml de agua se disuelven agitando sucesivamente 1,5 g de tetrametilbencidina y 2,5 g de ácido
cítrico.

Se impregna con la solución que contiene los cromógenos una tira de papel de 6 mm de ancho pegada sobre un soporte de película blanca de PVC de 8 cm de ancho (cantidad a aplicar: 1 ml de solución por metro de papel). Una vez seca, la película se corta en tiras de 6 mm de ancho (varillas de prueba).

En la muestra de orina preparada según el ejemplo 2a) se añade una gota de una solución de ácido peracético al 2,5% y se agita. La varilla de prueba se sumerge inmediatamente durante aproximadamente un segundo. Se elimina la solución sobrante. Tras otros 10 segundos se realiza una comparación con una escala cromática. Mediante las distintas tonalidades de azul de la zona de reacción se distinguen las siguientes concentraciones de ioduro: 20, 50, 100, 200
\mug/dl.

Claims (2)

1. Procedimiento semicuantitativo para determinar la presencia de ioduro en la orina en concentraciones de hasta 200 \mug/dl de ioduro, que se caracteriza porque la solución de muestra se trata previamente con ayuda de un carbón activo depurado y, a continuación, se mezcla con un cromógeno y una solución de perecido, de modo que la reacción cromática se evalúa por medios visuales o fotométricos.

2. El procedimiento descrito en la reivindicación 1, que se caracteriza porque para determinar la presencia de ioduro en la orina, la muestra se trata previamente con ayuda de una columna de extracción que contiene un carbón activo depurado.