ES2233219T1 - Nuevo metodo para la identificacion de compuestos antibacterianos. - Google Patents
Nuevo metodo para la identificacion de compuestos antibacterianos.Info
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Abstract
Un método para la identificación de un antagonista o inhibidor de la expresión de un gen que codifica un polipéptido esencial para el crecimiento o supervivencia bacteriano, en donde dicho gen se selecciona del grupo formado por ygbB, yfhC, yacE, ychB, yejD, yrfl, yggJ, yjeE, yia0, yrdC, yhbC, ygbP, ybeY, gcpE, kdtB, pfs, ycaJ, b1808, yeaA, yagF, b1983, yidD, yceG y/o yjbC, estando indicada la secuencia de dichos genes en la figura 1, ó un fragmento, derivado u ortólogo del mismo, comprendiendo dicho método los pasos de: (a) análisis de un antagonista o inhibidor candidato, o de una muestra que comprende una pluralidad de dichos antagonistas o inhibidores candidatos para la inhibición o reducción de la transcripción de dicho gen o de un fragmento o un derivado del mismo; o (b) análisis de un antagonista o inhibidor candidato o de una muestra que comprende una pluralidad de dichos antagonistas o inhibidores candidatos para la inhibición o reducción de la traducción del ARNm transcrito de dicho gen o de un fragmento o un derivado del mismo; y (c) identificación de un antagonista o inhibidor o de una muestra que comprende una pluralidad de dichos antagonistas o inhibidores candidatos que dan resultados positivos en el paso (a) y/o (b).
Description
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<110> GPC Biotech AG
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<120> Método nuevo para la identificación
de compuestos antibacterianos
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<212> DNA
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Escherichia coli
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 34
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 35
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 1968
\vskip0.400000\baselineskip
<212> DNA
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Escherichia coli
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 35
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 36
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 717
\vskip0.400000\baselineskip
<212> DNA
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Escherichia coli
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 36
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 37
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 258
\vskip0.400000\baselineskip
<212> DNA
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Escherichia coli
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 37
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 38
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 1023
\vskip0.400000\baselineskip
<212> DNA
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Escherichia coli
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 38
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 39
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 873
\vskip0.400000\baselineskip
<212> DNA
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Escherichia coli
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 39
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 40
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 159
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Escherichia coli
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 40
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 41
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 158
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Haemophilus influenzae
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 41
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 42
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 158
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Bacillus subtilis
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 42
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 43
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 161
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Synechocystis sp.
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 43
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 44
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 399
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Treponema pallidum
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 44
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 45
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 406
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Helicobacter pylori
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 45
Claims (21)
1. Un método para la identificación de un
antagonista o inhibidor de la expresión de un gen que codifica un
polipéptido esencial para el crecimiento o supervivencia bacteriano,
en donde dicho gen se selecciona del grupo formado por ygbB, yfhC,
yacE, ychB, yejD, yrfl, yggJ, yjeE, yia0, yrdC, yhbC, ygbP, ybeY,
gcpE, kdtB, pfs, ycaJ, b1808, yeaA, yagF, b1983, yidD, yceG y/o
yjbC, estando indicada la secuencia de dichos genes en la figura 1,
ó un fragmento, derivado u ortólogo del mismo, comprendiendo dicho
método los pasos de:
(a) análisis de un antagonista o inhibidor
candidato, o de una muestra que comprende una pluralidad de dichos
antagonistas o inhibidores candidatos para la inhibición o reducción
de la transcripción de dicho gen o de un fragmento o un derivado
del mismo; o
(b) análisis de un antagonista o inhibidor
candidato o de una muestra que comprende una pluralidad de dichos
antagonistas o inhibidores candidatos para la inhibición o reducción
de la traducción del ARNm transcrito de dicho gen o de un fragmento
o un derivado del mismo; y
(c) identificación de un antagonista o inhibidor
o de una muestra que comprende una pluralidad de dichos antagonistas
o inhibidores candidatos que dan resultados positivos en el paso
(a) y/o (b).
2. Un método para el análisis de un antagonista o
inhibidor candidato de un polipéptido o ARNm esencial para el
crecimiento o supervivencia bacteriano, codificado por un gen
seleccionado del grupo formado por ygbB, yfhC, yacE, ychB, yejD,
yrfl, yggJ, yjeE, yia0, yrdC, yhbC, ygbP, ybeY, gcpE, kdtB, pfs,
ycaJ, b1808, yeaA, yagF, b1983, yidD, yceG y/o yjbC, estando
indicada la secuencia de dichos genes en la figura 1, ó un
fragmento, derivado u ortólogo de los mismos, comprendiendo dicho
método los pasos de:
(a) contacto de una célula bacteriana con un
antagonista o inhibidor candidato o una muestra que comprende una
pluralidad de dichos antagonistas o inhibidores candidatos, y
(b) análisis de si dicho contacto conduce a la
inhibición del crecimiento de la célula y/o a su muerte.
3. Un método para el análisis de un antagonista o
inhibidor candidato de la función de un gen esencial para el
crecimiento o supervivencia bacteriano, en donde dicho gen se
selecciona del grupo formado por ygbB, yfhC, yacE, ychB, yejD,
yrfl, yggJ, yjeE, yiaO, yrdC, yhbC, ygbP, ybeY, gcpE, kdtB, pfs,
ycaJ, b1808, yeaA, yagF, b1983, yidD, yceG y/o yjbC, estando
indicada la secuencia de dichos genes en la figura 1, ó un
fragmento, derivado u ortólogo de los mismos, comprendiendo dicho
método los pasos de:
(a) contacto de una célula bacteriana que
comprende dicho gen con un antagonista o inhibidor candidato o una
muestra que comprende una pluralidad de dichos antagonistas o
inhibidores candidatos, y
(b) análisis de si dicho contacto conduce a la
inhibición del crecimiento de la célula y/o a su muerte.
4. El método de una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 3, que comprende además la identificación de un
antagonista o inhibidor, opcionalmente de dicha muestra de
antagonistas o inhibidores candidatos.
5. El método de una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4 en donde dicho inhibidor o antagonista está
además mejorado mediante peptidomiméticos, o mediante la aplicación
del (de los) paso(s) de presentación del fago o la técnica
combinatoria de la genoteca.
6. Un método para diseñar un antagonista o
inhibidor mejorado para el tratamiento de una infección bacteriana o
transtorno o enfermedad relacionado con una infección bacteriana,
el cual comprende los pasos de:
(a) identificación del sitio de unión de un
antagonista o inhibidor al polipéptido ygbB, yfhC, yacE, ychB,
yejD, yrfl, yggJ, yjeE, yiaO, yrdC, yhbC, ygbP, ybeY, gcpE, kdtB,
pfs, ycaJ, b1808, yeaA, yagF, b1983, yidD, yceG y/o yjbC, estando
mostrada la secuencia de dichos genes en la figura 1, u obtenida
mediante, o identificada mediante, el método de una cualquiera de
las reivindicaciones 1 a 5 mediante mutagénesis dirigida al sitio y
estudios del polipéptido quimérico;
(b) modelado molecular tanto del sitio de unión
de dicho antagonista o inhibidor como de la estructura de dicho
polipéptido; y
(c) modificación de dicho antagonista o inhibidor
para mejorar la especificidad de la unión o afinidad para el
polipéptido.
7. Un antagonista o inhibidor de la actividad de
un polipéptido codificado por un gen seleccionado del grupo formado
por ygbB, yfhC, yacE, ychB, yejD, yrfl, yggJ, yjeE, yiaO, yrdC,
yhbC, ygbP, ybeY, gcpE, kdtB, pfs, ycaJ, b1808, yeaA, yagF, b1983,
yidD, yceG y/o yjbC, estando mostrada la secuencia de dichos genes
en la figura 1 ó fragmento, derivado u ortólogo del mismo o de la
expresión de un gen que codifica dicho polipéptido o dicho
fragmento, derivado u ortólogo, u obtenido mediante, o identificado
mediante, el método de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a
6.
8. Un método para la producción de un agente
terapéutico que comprende la síntesis del antagonista o inhibidor
identificado, analizado o diseñado de acuerdo con el método de una
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 ó el antagonista o
inhibidor de la reivindicación 7 ó un análogo o derivado del
mismo.
9. Un método para la producción de una
composición que comprende los pasos del método de una cualquiera de
las reivindicaciones 1 a 6 ó la síntesis del antagonista o
inhibidor de la reivindicación 7, y formulación de dicho inhibidor
o antagonista en una forma farmacéuticamente aceptable.
10. Una composición que comprende un antagonista
o inhibidor de la reivindicación 7, el agente terapéutico producido
por el método de la reivindicación 8, ó el antagonista o inhibidor
obtenido mediante, o identificado en, el método de una cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 6, ó producido de acuerdo con la
reivindicación 9, y opcionalmente una carga farmacéuticamente
aceptable.
11. La composición de la reivindicación 10, la
cual es una composición farmacéutica.
12. La composición de la reivindicación 10, la
cual es un kit.
13. La composición de una cualquiera de las
reivindicaciones 10 a 12, que comprende además un antibiótico y/o
una citocina.
14. Empleo de un polipéptido codificado por un
gen seleccionado del grupo formado por ygbB, yfhC, yacE, ychB, yejD,
yrfl, yggJ, yjeE, yiaO, yrdC, yhbC, ygbP, ybeY, gcpE, kdtB, pfs,
ycaJ, b1808, yeaA, yagF, b1983, yidD, yceG y/o yjbC, estando
mostrada la secuencia de dichos genes en la figura 1, ó un
fragmento, derivado u ortólogo del mismo o de uno cualquiera de
dichos genes para la identificación de un antagonista o inhibidor
de la actividad de dicho polipéptido o dicho fragmento, derivado u
ortólogo o de la expresión de un gen que codifica dicho polipéptido
o dicho fragmento, derivado u ortólogo.
15. Empleo de un antagonista o inhibidor de la
reivindicación 7, el agente terapéutico producido por el método de
la reivindicación 8, ó el antagonista o inhibidor obtenido mediante
o identificado en, el método de una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 6, ó producido de acuerdo con la reivindicación
9, ó identificado mediante el empleo de una cualquiera de las
reivindicaciones, para la preparación de una composición
farmacéutica para el tratamiento de (una)
infección(es) bacteriana(s), transtorno(s) y/o enfermedad(es), relacionada(s) con infecciones bacterianas.
infección(es) bacteriana(s), transtorno(s) y/o enfermedad(es), relacionada(s) con infecciones bacterianas.
16. Un método para el tratamiento o prevención de
infecciones bacterianas o enfermedades o transtornos relacionados
con infecciones bacterianas que comprenden el paso de
administración a un sujeto en necesidad del mismo, del antagonista
o inhibidor obtenido mediante, o identificado en, el método de una
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 ó producido de acuerdo con
la reivindicación 9, opcionalmente comprendido en la composición
farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 11.
17. Empleo de un polipéptido codificado por un
gen seleccionado del grupo formado por ygbB, yfhC, yacE, ychB, yejD,
yrfl, yggJ, yjeE, yiaO, yrdC, yhbC, ygbP, ybeY, gcpE, kdtB, pfs,
ycaJ, b1808, yeaA, yagF, b1983, yidD, yceG y/o yjbC, estando
mostrada la secuencia de dichos genes en la figura 1, ó un
fragmento, derivado u ortólogo del mismo o uno cualquiera de dichos
genes para la exploración de los polipéptidos que interaccionan con
dicho polipéptido empleando tecnologías de interacción
proteína-proteína, y/o para la validación de que
dicha interacción es efectivamente esencial para la supervivencia
bacteriana y/o para la exploración de antagonistas e inhibidores de
dicha interacción.
18. Empleo de un polipéptido codificado por un
gen seleccionado del grupo formado por ygbB, yfhC, yacE, ychB, yejD,
yrfl, yggJ, yjeE, yiaO, yrdC, yhbC, ygbP, ybeY, gcpE, kdtB, pfs,
ycaJ, b1808, yeaA, yagF, b1983, yidD, yceG y/o yjbC, estando
mostrada la secuencia de dichos genes en la figura 1, ó un
fragmento, derivado u ortólogo del mismo o uno cualquiera de dichos
genes para la exploración de polipéptidos para detectar la unión de
polipéptidos a dicho polipéptido, y/o para la validación de los
péptidos que se unen a dicho polipéptido como prevención del
crecimiento de bacterias o que son letales a las bacterias después
de la expresión de dichos polipéptidos en dichas bacterias, y/o
para la exploración de moléculas pequeñas que desplazan
competitivamente dichos péptidos.
19. Empleo de mutantes condicionales en un gen
seleccionado del grupo formado por ygbB, yfhC, yacE, ychB, yejD,
yrfl, yggJ, yjeE, yiaO, yrdC, yhbC, ygbP, ybeY, gcpE, kdtB, pfs,
ycaJ, b1808, yeaA, yagF, b1983, yidD, yceG y/o yjbC, estando
mostrada la secuencia de dichos genes en la figura 1, ó un
fragmento, derivado u ortólogo de la misma o de ligandos suplentes
contra dichos genes expresados en las bacterias para inducir un
fenotipo letal en las bacterias y/o para el análisis de dichas
bacterias para marcadores suplentes mediante la comparación de ARN ó
perfiles de proteína en dichas bacterias con perfiles de ARN ó
proteína en bacterias tipo salvaje, y/o el empleo de dichos
marcadores suplentes para la identificación de antagonistas de la
función esencial de dicho gen.
20. Un método para la identificación o
aislamiento de un marcador suplente que comprende los pasos como se
han descrito en la reivindicación 19.
21. Un método para la identificación o
aislamiento de un marcador suplente que comprende los pasos de:
(a) inducción de un fenotipo letal en las
bacterias que contiene un mutante condicional de un gen seleccionado
del grupo formado por ygbB, yfhC, yacE, ychB, yejD, yrfl, yggJ,
yjeE, yiaO, yrdC, yhbC, ygbP, ybeY, gcpE, kdtB, pfs, ycaJ, b1808,
yeaA, yagF, b1983, yidD, yceG y/o yjbC, estando mostrada la
secuencia de dichos genes en la figura 1; y
(b) análisis de dichas bacterias comparando el
perfil de ARN ó de proteína de dichas bacterias con bacterias del
tipo salvaje.
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