ES2217011T3 - Acidos de lupulo usados para inhibir staphylococcus aureus. - Google Patents
Acidos de lupulo usados para inhibir staphylococcus aureus.Info
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Abstract
Procedimiento in vitro para mejorar la actividad de fertilización de los espermatozoides, en particular para aumentar la movilidad de los espermatozoides, que comprende el tratamiento de los espermatozoides in vitro con un inhibidor de fosfatidilinositol-3 kinasa (PI3K), 1. Uso de un compuesto seleccionado entre los ácidos hexahidro- beta, las sales de hexahidro-beta, los ácidos tetrahidro- iso-alfa, las sales de tetrahidro-iso-alfa y sus mezclas en la preparación de un medicamento tópico que afecta al crecimiento de Staphylococcus aureus en la zona vaginal, en el que el compuesto está presente en el medicamento en una cantidad efectiva para matar, inhibir o controlar de otra manera el crecimiento o proliferación de S. aureus sin impedir el crecimiento de Lactobacillus.
Description
Ácidos de lúpulo usados para inhibir
Staphylococcus aureus.
El presente invento se refiere al empleo de
compuestos que afectan al crecimiento de ciertas especies
bacterianas. Más específicamente, el presente invento se refiere al
empleo de los ácidos
tetrahidro-iso-alfa o ácidos
hexahidro-beta a concentraciones eficaces para
matar, inhibir o controlar de otra manera el crecimiento o
proliferación de
Staphylococcus aureus sin impedir el crecimiento de Lactobacillus, en la fabricación de un medicamento tópico para tratar enfermedades asociadas con infecciones e infestaciones de S. aureus, es decir, del síndrome de choque tóxico, sin desorganizar la flora bacteriana normal en el área de su aplicación.
Staphylococcus aureus sin impedir el crecimiento de Lactobacillus, en la fabricación de un medicamento tópico para tratar enfermedades asociadas con infecciones e infestaciones de S. aureus, es decir, del síndrome de choque tóxico, sin desorganizar la flora bacteriana normal en el área de su aplicación.
El síndrome de choque tóxico (toxic shock
syndrome, TSS) es una enfermedad conocida comúnmente, causada
por S. aureus. TSS es una enfermedad grave, inducida por
toxina, resultado de la exposición a la toxina de S. aureus
denominada toxina-1 del síndrome de choque
tóxico (TSST-1) (Iandolo, Ann. Rev. of Micro.
43:275-402, 1989). La enfermedad se caracteriza por
un comienzo repentino de síntomas, que incluyen fiebre elevada,
escalofríos, erupciones cutáneas, vómitos o diarrea y una caída
rápida de la presión sanguínea que conduce a un choque.
Se ha descrito que el síndrome de choque tóxico
ocurre tanto en hombres como en mujeres de todas las edades, con una
incidencia aproximada de dos casos anuales por cada 10.000 personas.
Sin embargo, el TSS se observa más comúnmente en mujeres
menstruantes, en las que el lugar primario de infección es la
vagina. La evidencia epidemiológica sugiere, especialmente, que las
mujeres que emplean tampones altamente absorbentes incurren en mayor
riesgo de desarrollar la enfermedad, dado que el tampón altamente
absorbente sirve de ambiente adecuado para el crecimiento de S.
aureus. Se ha publicado también que el TSS ocurre en bebés,
niños, hombres y mujeres no menstruantes, pero con una frecuencia
menor. Generalmente estos casos no están asociados con el uso de
tampones, pero resultan de heridas en la piel o infecciones en otras
partes del cuerpo. El empleo de anticonceptivos de barrera también
se ha implicado como otro factor de riesgo.
Debido al repentino comienzo de la enfermedad,
algunas personas que padecen el TSS no pueden recibir la
intervención médica adecuada antes de que resulten complicaciones
graves. Tales complicaciones pueden incluir fallo renal, fallo
cardiaco, fallo hepático y de choque profundo. Por consiguiente, se
hace un gran énfasis en la prevención de la enfermedad. Por ejemplo,
se advierte a las mujeres contra el uso de tampones de alta
absorbencia. Sin embargo, muchas mujeres no están dispuestas a
sacrificar la comodidad y la conveniencia del empleo de tampones de
alta absorbencia por lo que ellas perciben como un riesgo remoto de
desarrollar TSS. Por tanto, se está llevando a cabo un esfuerzo
considerable dirigido hacia el desarrollo de nuevos tampones capaces
de reducir el riesgo de contraer TSS en comparación con los tampones
convencionales.
Se han propuesto varias aproximaciones para
evitar el síndrome de choque tóxico por el empleo de tampones. Uno
de tales métodos incluye incorporar agentes bactericidas o
bacteriostáticos (es decir, antibióticos o fenol) dentro del tampón
para inhibir el crecimiento de S. aureus. Otros métodos
incluyen la incorporación de agentes que evitan la producción de la
TSST-1 o inactivan la TSST-1. Por
ejemplo, la patente de EE.UU. nº 4.405.323 describe la incorporación
de un agente antibacteriano, tal como povidona yodada, mercurio,
zinc, penicilina, eritromicina y nitrofurazona, dentro de un tampón
para prevenir TSS. La patente de EE.UU. nº 4.431.427 describe la
incorporación de un ácido soluble en agua (es decir, ácido cítrico,
glicólico, málico, tartárico o láctico) en un tampón en una cantidad
suficiente para mantener un pH de 4,5 o menor en los fluidos
absorbidos por el tampón a fin de inhibir el crecimiento de
bacterias patógenas. La publicación PCT WO 86/05388 describe que la
inclusión de un catión divalente no tóxico, tal como magnesio,
bario, calcio, estroncio o similar, en una almohadilla absorbente
tiene el efecto de inhibir la producción de TSST-1
por S. aureus. La patente de EE.UU. nº 4.585.792 describe que
el ácido L-ascórbico puede suministrarse en un
tampón a la zona vaginal a fin de inactivar las toxinas asociadas
con TSS. La patente de EE.UU. nº 5.389.374 describe que puede
inhibirse la producción de enterotoxinas de S. aureus
exponiendo a la bacteria a un material absorbente tratado o con un
mono- o con un diéster de alcohol alifático polihidroxilado.
Aunque el empleo de algunos de estos métodos se
ha mostrado eficaz en la inhibición del crecimiento de S.
aureus y TSS, su empleo también puede resultar problemático. Por
ejemplo, exponer una población bacteriana a antibióticos puede
seleccionar mutantes resistentes al antibiótico y disminuir la
eficacia del antibiótico en el tratamiento de infecciones futuras.
Además, la inclusión de antibióticos convencionales probablemente
dará como resultado un aumento considerable del coste para el
consumidor. Por otra parte, el empleo de antibióticos o de otros
agentes bactericidas o bacteriostáticos puede tener el efecto
indeseable de desorganizar la flora normal presente en la zona
vaginal, lo que finalmente daría como resultado el inicio de otras
infecciones y enfermedades bacterianas. Por ejemplo,
Lactobacillus es una de las bacterias predominantes entre la
flora vaginal normal. La administración de un compuesto que inhiba
Lactobacillus puede también tener el efecto añadido de
promover el establecimiento de otros microorganismos menos deseables
que también están presentes en la vagina. Por ejemplo, un número
bajo de Candida albicans puede estar presente en la vagina de
muchas mujeres asintomáticas sanas. La administración de un
compuesto que inhiba el crecimiento de Lactobacillus puede
tener también el efecto añadido de permitir crecer y predominar a
C. albicans, lo que daría como resultado una infección por
levaduras.
Sería ventajoso, por tanto, disponer de un método
para evitar TSS que no afecte a la flora bacteriana normal, que no
permita la selección de bacterias resistentes a antibiótico y que no
dé como resultado un aumento sustancial del coste global para el
consumidor. En particular, lo que se necesita es un método
relativamente económico para inhibir el crecimiento de S.
aureus sin impedir el crecimiento de Lactobacillus o de
otra microflora normal.
El presente invento se resume en que se describen
ciertos compuestos que son capaces de afectar al crecimiento de
Staphylococcus aureus, sin impedir el crecimiento de
Lactobacillus, cuando se aplican a ciertas concentraciones.
Estos compuestos se seleccionan entre ácidos
tetrahidro-iso-alfa, ácidos
hexahidro-beta y sus sales, mezclas o combinaciones.
Por consiguiente, el presente invento proporciona el empleo de un
compuesto seleccionado entre ácidos hexahidro-beta,
sales hexahidro-beta, ácidos
tetrahidro-iso-alfa, sales
tetrahidro-iso-alfa y sus mezclas en
la producción de un medicamento tópico que afecte al crecimiento de
Staphylococcus aureus en la zona vaginal, en el que el
compuesto está presente en el medicamento en una cantidad eficaz
para matar, inhibir o controlar de otra manera el crecimiento o
proliferación de S. aureus sin impedir el crecimiento de
Lactobacillus. Una cantidad eficaz de tales compuestos, por
ejemplo, incluye una concentración en el intervalo de 0,2 ppm a 25
ppm o, más preferiblemente, en el intervalo de 0,5 ppm a 12,5
ppm.
El medicamento puede ser un producto que contenga
un material absorbente y el compuesto. El material puede incluir,
por ejemplo, material de fibra de celulosa tal como los que se usan
típicamente en los productos de higiene femenina (es decir,
compresas femeninas, tampones, etc.), o los que se emplean para
absorber fluidos corporales o para aplicar compuestos empleados para
evitar o tratar infecciones bacterianas.
El medicamento puede incluir también una
composición que contenga un vehículo aceptable farmacéuticamente y
el compuesto. El vehículo puede incluir, por ejemplo, ungüentos o
lavados tópicos formulados para facilitar la administración eficaz
del compuesto.
Otros objetos, ventajas y características del
presente invento se mostrarán evidentes a partir de la siguiente
descripción detallada y ejemplos.
El presente invento describe compuestos que,
cuando se aplican a la zona vaginal a ciertas concentraciones,
afectan al crecimiento de Staphylococcus aureus sin impedir
el crecimiento de Lactobacillus. Los compuestos se
seleccionan entre ácidos
tetrahidro-iso-alfa, ácidos
hexahidro-beta, sus sales y sus mezclas y pueden
combinarse con varios materiales o vehículos para formar productos y
composiciones apropiadas para facilitar una administración eficaz.
El presente invento también describe empleos de los compuestos en la
producción de un medicamento que prevenga o trate la infección o
infestación por S. aureus en la zona vaginal sin desorganizar
la flora normal de Lactobacillus en la zona vaginal.
Los inventores han descubierto que los ácidos de
lúpulo tetrahidro-iso-alfa y
hexahidro-beta presentan, inesperadamente, distintos
efectos bactericidas o bacteriostáticos frente a
Lactobacillus comparado con S. aureus.
Específicamente, Lactobacillus y S. aureus muestran un
nivel diferente de sensibilidad a los ácidos
tetrahidro-iso-alfa y
hexahidro-beta, siendo S. aureus más sensible
que Lactobacillus. En consecuencia, ahora es posible inhibir
selectivamente S. aureus sin impedir el crecimiento de
Lactobacillus al poner en contacto S. aureus con una
cantidad de ácido
tetrahidro-iso-alfa o
hexahidro-beta que inhibe de manera eficaz S.
aureus, mientras permite seguir creciendo a
Lactobacillus.
La realización principal del presente invento es
proporcionar el uso de un compuesto seleccionado entre los ácidos
tetrahidro-iso-alfa, los ácidos
hexahidro-beta, sus sales y sus mezclas en la
producción de un medicamento para inhibir la infección o infestación
por S. aureus poniendo en contacto la zona vaginal con el
medicamento. Se pone en contacto la zona vaginal con una
concentración eficaz del compuesto que mata, inhibe o controla de
otra manera el crecimiento o proliferación de S. aureus sin
impedir el crecimiento de Lactobacillus. En la realización
preferida, se expone la proximidad de S. aureus a una
concentración efectiva del compuesto en un intervalo de 0,2 ppm a 25
ppm y, más preferiblemente, en el intervalo de 0,5 ppm a 12,5
ppm.
Según se emplea en esta memoria, el término
"compuesto" pretende incluir los ácidos
hexahidro-beta, las sales
hexahidro-beta, los ácidos
tetrahidro-iso-alfa, las sales
tetrahidro-iso-alfa y sus mezclas o
combinaciones.
Para afectar al crecimiento de S. aureus
el compuesto debe ponerse en contacto con la zona vaginal bien
independientemente o bien como parte de una composición o producto
en el que la composición o producto contenga una cantidad efectiva
del compuesto de acuerdo con el presente invento. En otra
realización, el compuesto puede disponerse en capas o revestirse
sobre un anticonceptivo de tipo barrera, tal como un diafragma o una
esponja anticonceptiva que se coloca en la zona vaginal.
Según se emplea en esta memoria, el término
"producto" incluye aquellos productos capaces de, bien
inherentemente o bien en virtud de la manera en la que están
reunidos, absorber líquidos tales como agua, orina, fluidos
menstruales, sangre y similares. Tales productos incluyen, por
ejemplo, productos catemeniales (p.ej., tampones), supositorios,
pañales desechables y compresas higiénicas, además de otros tipos de
tampones destinados para uso médico y/o quirúrgico. Productos que,
de acuerdo con el presente invento, pueden prepararse de acuerdo a
métodos conocidos para la producción de tales productos. En general,
los productos deben prepararse para permitir que una cantidad eficaz
del compuesto utilizado se ponga en contacto con la zona
vaginal.
En una realización, el producto comprende un
material absorbente y una cantidad de compuesto que mata, inhibe o
controla de otra forma y de manera eficaz el crecimiento o
proliferación en el entorno de S. aureus. Según se emplea en
esta memoria, el término "material absorbente" incluye, sin
limitaciones, fibras naturales o fibras sintéticas, películas,
espumas, pasta de madera, turba de musgo, polímeros superabsorbentes
y similares que sean capaces de, bien inherentemente o bien en
virtud de la manera en que se han reunido, absorber líquidos, tales
como agua, orina, fluidos menstruales, sangre y similares.
El término "composición" incluye las
composiciones capaces de, bien inherentemente o bien en virtud de su
formulación, emplearse como un ungüento tópico o irrigación vaginal.
Las composiciones pueden formularse de acuerdo a métodos conocidos
para la preparación de composiciones útiles farmacéuticamente. Las
formulaciones se describen en detalle en varias fuentes que son bien
conocidas y fácilmente disponibles para los expertos en la técnica.
Por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Science, por E. W.
Martin, describe formulaciones que pueden usarse en conexión con el
presente invento. En general, las composiciones deben formularse de
tal manera que una cantidad eficaz del compuesto utilizado se
combine con el vehículo apropiado para facilitar una administración
eficaz.
En una realización, la composición consiste en
una irrigación vaginal para matar, inhibir o controlar de otra forma
el crecimiento o proliferación de S. aureus en la vagina.
Esto es particularmente útil para proporcionar un tratamiento a una
mujer que le ayude a luchar contra una infección o infestación de
S. aureus que puede causarle el síndrome de choque tóxico.
Alternativamente, la composición puede formularse como un ungüento
tópico.
Se han llevado a cabo ensayos de concentración
inhibitoria mínima (CIM) de varios compuestos de lúpulo mediante el
empleo de especies de Staphylococcus aureus y de aislados
vaginales de Lactobacillus vaginalis, Lactobacillus
crispatus, Lactobacillus gasseri y Lactobacillus
jensenii como microorganismos de ensayo. Los ensayos de
Lactobacillus se llevaron a cabo en tubos de caldo MRS
(Difco) para Lactobacillus. Se añadió una alícuota de 0,1 ml
de una disolución 1% (p/p) de cada ácido de lúpulo en alcohol a un
tubo de caldo MRS estéril para dar una concentración final de 100
ppm del compuesto de lúpulo. Esta disolución se diluyó
consecutivamente en tubos con caldo MRS estéril empleando una serie
de diluciones dobles. Una segunda serie de diluciones preparadas
como anteriormente, pero empleando 0,1 ml de alcohol sin ácido de
lúpulo, se utilizó como control positivo de crecimiento bacteriano.
Cada tubo se inoculó con un cultivo fresco de (10^{4} células) de
una especie de Lactobacillus en caldo MRS. Los cultivos se
incubaron anaeróbicamente en un incubador de CO_{2} a 28ºC durante
cinco días. El crecimiento se evaluó por valoración visual y
registro del desarrollo de turbidez en el tubo de caldo.
Los ensayos CIM para Staphylococcus aureus
se llevaron a cabo en caldo tripticasa de soja de Difco (TSB)
empleando la misma técnica de dilución consecutiva y un nivel de
inóculo como el descrito anteriormente. El pH del TSB se ajustó a pH
7,0, pH 6,0 o pH 5,0 mediante el empleo de ácido clorhídrico. Los
tubos se incubaron aeróbicamente a 37ºC durante tres días y el
crecimiento se evaluó por valoración visual y se registró el
desarrollo de turbidez en el caldo.
Los resultados del ensayo CIM de los ácidos
tetrahidro-iso-alfa y ácidos
hexahidro-beta en S. aureus y
Lactobacillus se muestran en las Tablas 1 y 2,
respectivamente. Según se ilustra por comparación de las Tablas 1 y
2, resulta evidente que S. aureus es mucho más sensible a los
ácidos tetrahidro-iso-alfa y a los
ácidos hexahidro-beta que las especies de
Lactobacillus analizadas. En particular, Lactobacillus
mostró un fuerte crecimiento a concentraciones de ácido
hexahidro-beta y ácido
tetrahidro-iso-alfa tan altas como
12,5 ppm. En contraste, S. aureus no mostró, o lo hizo muy
débilmente, crecimiento en ácido
tetrahidro-iso-alfa y ácido
hexahidro-beta a concentraciones tan bajas como 1,56
ppm. La sensibilidad de S. aureus también parece aumentar
bajo condiciones ácidas, con la concentración inhibitoria mínima
disminuyendo a 0,78 ppm a pH 6,0 y a menos de 0,2 ppm a pH 5,0.
Normalmente, el pH de la vagina está en el intervalo de
aproximadamente 4,5 a 5,0.
Claims (8)
1. Uso de un compuesto seleccionado entre los
ácidos hexahidro-beta, las sales de
hexahidro-beta, los ácidos
tetrahidro-iso-alfa, las sales de
tetrahidro-iso-alfa y sus mezclas en
la preparación de un medicamento tópico que afecta al crecimiento de
Staphylococcus aureus en la zona vaginal, en el que el
compuesto está presente en el medicamento en una cantidad efectiva
para matar, inhibir o controlar de otra manera el crecimiento o
proliferación de S. aureus sin impedir el crecimiento de
Lactobacillus.
2. El uso de la reivindicación 1, en el que la
cantidad del compuesto está en el intervalo de 0,2 ppm a 25 ppm.
3. El uso de la reivindicación 1 ó 2, en el que
el medicamento es un producto que comprende un material absorbente y
el compuesto.
4. El uso de la reivindicación 3, en el que el
material absorbente se selecciona entre una fibra natural, una fibra
sintética, una película, una espuma, una pasta de madera, una turba
de musgo y un polímero superabsorbente.
5. El uso de la reivindicación 3 ó 4, en el que
el producto se selecciona entre un tampón, un supositorio, un pañal
desechable y una compresa higiénica.
6. El uso de la reivindicación 1 ó 2, en el que
el medicamento es una composición que contiene un vehículo aceptable
farmacéuticamente y el compuesto.
7. El uso de la reivindicación 1 ó 2, en el que
la composición es bien una irrigación o un ungüento tópico.
8. El uso de la reivindicación 1 ó 2, en el que
el medicamento es una barrera anticonceptiva.
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