EP4152931A1 - Utilisation de l'acide 4-phénylbutyrique et/ou de l'acide 3-phénylbutyrique et/ou de l'acide 2-phénylbutyrique pour la prévention et le traitement des maladies cryptogamiques - Google Patents

Utilisation de l'acide 4-phénylbutyrique et/ou de l'acide 3-phénylbutyrique et/ou de l'acide 2-phénylbutyrique pour la prévention et le traitement des maladies cryptogamiques

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Publication number
EP4152931A1
EP4152931A1 EP21726401.9A EP21726401A EP4152931A1 EP 4152931 A1 EP4152931 A1 EP 4152931A1 EP 21726401 A EP21726401 A EP 21726401A EP 4152931 A1 EP4152931 A1 EP 4152931A1
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EP
European Patent Office
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pba
plant
fungus
oomycete
fungi
Prior art date
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Pending
Application number
EP21726401.9A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Jean-Luc CACAS
Damien VASSELON
Olivier LAMOTTE
Benoît POINSSOT
Anne-Sophie WALKER
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institut National D'enseignement Superieur Pour L'agriculture L'alimentation Et L'environnement
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Institut des Sciences et Industries du Vivant et de lEnvironnement AgroParisTech
Universite de Bourgogne
Institut National de Recherche pour lAgriculture lAlimentation et lEnvironnement
Original Assignee
Universite Bourgogne Franche Comte
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Institut des Sciences et Industries du Vivant et de lEnvironnement AgroParisTech
Institut National Superieur des Sciences Agronomiques de lAlimentation et de lEnvironnement
Universite de Bourgogne
Institut National de Recherche pour lAgriculture lAlimentation et lEnvironnement
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Filing date
Publication date
Application filed by Universite Bourgogne Franche Comte, Centre National de la Recherche Scientifique CNRS, Institut des Sciences et Industries du Vivant et de lEnvironnement AgroParisTech, Institut National Superieur des Sciences Agronomiques de lAlimentation et de lEnvironnement, Universite de Bourgogne, Institut National de Recherche pour lAgriculture lAlimentation et lEnvironnement filed Critical Universite Bourgogne Franche Comte
Publication of EP4152931A1 publication Critical patent/EP4152931A1/fr
Pending legal-status Critical Current

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Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N37/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids
    • A01N37/10—Aromatic or araliphatic carboxylic acids, or thio analogues thereof; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
    • A01P3/00—Fungicides

Definitions

  • the present invention relates to the use of 4-phenylbutyric acid (4-PBA), 3-phenylbutyric acid (3-PBA), 2-phenylbutyric acid (2-PBA) or combinations thereof for to fight preventively or curatively against diseases affecting plants and plant products and caused by fungi and oomycetes.
  • Blast and other plant diseases such as soybean rust (Phakopsora pachyrhizi), wheat stem rust (Puccinia graminis), corn smut (Ustilago maydis) and potato late blight (Phytophtora infestans) contribute to the loss of 125 million tonnes of these crops (enough to feed 600 million people), and cause an overall shortfall US $ 60 billion (Fisher et al., Nature, 2012, 484 (7393): 186-194).
  • the present invention relates to the use of 4-phenylbutyric acid (4-PBA) and / or 3-phenylbutyric acid (3-PBA) and / or 2-phenylbutyric acid.
  • (2-PBA) to prevent or treat fungal diseases caused by fungi and oomycetes.
  • 4-PBA makes it possible to protect plants against gray rot caused by the fungus Botrytis cinerea, 4-PBA having fungistatic or fungicidal activity; and that 4-PBA can more generally be used to treat a wide range of fungal diseases caused by fungi or oomycetes.
  • 4-PBA Compared to the active chemical ingredients currently available on the market, 4-PBA has the advantage of being toxic neither to humans nor to the environment at the doses used, including the plants to which it is administered. In addition, it is relatively inexpensive. The inventors have further shown that 4-PBA is capable of limiting the growth of the primary hyphae of several strains of Zymoseptoria tritici (or Mycosphaerella graminicola), exhibiting single or multiple resistance to different classes of chemical fungicides commonly used. . 3-Phenylbutyric acid (3-PBA) and 2-Phenylbutyric acid (2-PBA) have also each been shown to have the same fungistatic or fungicidal effect.
  • the present invention relates to the use of 2-PBA, or 3-PBA, or 4-PBA, or one of their salts, or one of their combinations, as a fungicidal or fungistatic agent, for the prevention or the treatment of a fungal disease affecting a plant or plant product.
  • Cryptogamic disease is caused by a fungus or oomycete.
  • the fungus or oomycete can be biotrophic, necrotrophic or hemibiotrophic. In some preferred embodiments, the fungus or oomycete is biotrophic.
  • the fungus is chosen from phytopathogenic fungi belonging to the genera Alternaria, Athelia, Armillaria, Aspergillus, Bipolaris, Blumeria, Botrytis (Cochliobolus), Carpenteles, Ceratocystis, Cercospora, Choanephora, Cladosporium, Claviceumria, Cryphotrichectectic Diaporthe (Phomopsis), Erysiphe, Eurotium, Fusarium, Ganoderma, Gibberella, Glomerella, Magnaporthe, Macalpinomyces, Melampsora, Monilia, Moniliophthora, Microcyclus, Mycena, Mycosphaerella, Nectria, Neonectria, Olpidium, Poucotusa, Poucotellia, Phaerochaotellia, Poucochainete, Poucochaotellia, Pénochao , Pleospora,
  • Podosphaera Puccinia, Rhizoctonia, Rhizopus, Sclerotinia, Seiridium, Stemphylium, Septoria, Sphaerotheca, Sporisorium, Synchytrium, Taphrina, Tilletia, Thanatephorus, Trichoderma, Typhula, Ulocladium, Ustilago, Urocystis, Uromyces, Uromyces.
  • the oomycete is chosen from phytopathogenic oomycetes belonging to the genera Albugo, Aphanomyces, Bremia, Peronospora, Peronosclerospora, Phytophthora, Plasmodiophora, Plasmopara, Polymyxa,
  • the plant is a field crop, vegetable, ornamental, tree, or shrub.
  • the plant is a plant belonging to the Malvaceae, Solanaceae, Cucurbitaceae, Crucifera or Brassicaceae, Compositae or Asteraceae, Umbellifera or Apiaceae, Liliaceae or Asparagaceae, Rosaceae, Polygonaceae, Lamiaceae, Vitaceae, Fabaceae, Poaceae, Liliaceae, Rubiaceae, Musaceae, Orchidaceae, Lauraceae, Alliaceae, Chenopodiaceae, Valerianaceae, Caprifoliaceae, Verbenaceae, Plantaginaceae, Scrofulariaceae, Ericaceae, Primulaceae, Oleaceae, Apocynaceae, Asclepiadaceae, Gentianaceae, Boraginaceae, Araliaceae, Grossulariaceae, Myrtaceae, Eleagnaceae, Lythraceae
  • the plant product can be selected from seeds, seeds, tubers, and bulbs. Alternatively, the plant product can be chosen from fruits, vegetables, and post-harvest grains. Fe plant product can also be a food product 4 th range. Alternatively, the plant product can be post-cut timber, for example construction timber.
  • the fungal disease affecting the plant or plant product is selected from the group consisting of gray rot or botrytis, downy mildew, fusarium, Sigatoka, Poidium, alternaria, anthracnose, smuts , caries, septoria, moniliosis or monilia, rust, helminthosporiosis, sclerotinia, scab, verticillium wilt, leaf blister, blister, coryneum or riddled disease, entomosporiosis, damping-off, l 'esca, eutypia, gum disease, gravel, mal secco, blackfoot, blast, and Dutch elm disease.
  • the fungal disease is caused by a fungus or oomycete resistant to at least one conventional fungicide (particularly a synthetic fungicide).
  • the fungal disease is septoria blight of wheat caused by the fungus Zymoseptoria tritici, particularly a strain of Zymoseptoria tritici which exhibits single or multiple resistance to conventional fungicides, such as fungicides belonging to the benzimidazole classes, cytochrome b inhibitors, succinate dehydrogenase inhibitors, or sterol demethylation inhibitors.
  • 2-PBA, or 3-PBA, or 4-PBA, or a salt thereof, or a combination thereof described herein can result in improved performance.
  • preserve plant products eg in the case of fruit, vegetables, post-harvest grain in the case of food products from 4 th range, and in the case of post-cut wood).
  • Use may also result in seed protection and / or improved seedling emergence in the case of seeds and seeds.
  • the invention also relates to a method for the prevention or treatment of a fungal disease in a plant or a plant product, the method comprising the application of 2-PBA, or of 3-PBA, or of 4-PBA , or a salt thereof, or a combination thereof, to the plant or to the soil surrounding the plant or to the plant product.
  • Cryptogamic disease is caused by a fungus or oomycete.
  • 2-PBA or one of its salts, 3-PBA or one of its salts, 4-PBA or one of its salts, or one of their combinations is applied (e ) in an amount effective to inhibit germination or growth of the fungus or G oomycete, and / or to inhibit the movement of zoospores of G oomycete, and / or to destroy (cause death) of the fungus or G oomycete.
  • the invention also relates to a method of destroying a phytopathogenic fungus or oomycete and / or of inhibiting the growth of a phytopathogenic fungus or oomycete to prevent and / or treat a fungal disease affecting a plant or a product.
  • plant the method comprising the application of 2-PBA or one of its salts, of 3-PBA or one of its salts, of 4-PBA or one of its salts, or one of their combinations, to the plant and / or to the soil surrounding the plant or to the plant product.
  • the fungus or oomycete, the plant or plant product, and the fungal disease are as described above.
  • the uses and methods according to the invention are characterized in that 2-PBA, or 3-PBA, or 4-PBA, or one of their salts, or one of their combinations, is applied pre-emergence of the plant.
  • 2-PBA, or 3-PBA, or 4-PBA, or a salt thereof, or a combination thereof is applied post-emergence of the plant.
  • the uses and methods according to the invention are characterized in that 2-PBA, or 3-PBA, or 4-PBA, or one of their salts, or a combination thereof, is applied to aerial parts of the plant, to the roots of the plant, to the seeds, tubers or bulbs of the plant, and / or to the fruits or grains of the plant.
  • the invention also relates to a method for improving the preservation of a plant product liable to be affected by a phytopathogenic fungus or oomycete, the method comprising the application of an effective amount of 2-PBA, or 3-PBA, or 4-PBA, or a salt thereof or a combination thereof, to the plant product, the method being characterized in that the effective amount is sufficient to inhibit the germination or growth of the fungus or of phytopathogenic oomycete, and / or to inhibit the movement of oomycete zoospores, and / or to destroy (cause death) of the fungus or oomycete, and thereby prevent fungal disease.
  • the invention also relates to a method of protecting seeds or improving seedling emergence, the method comprising applying an effective amount of 2-PBA, or 3-PBA, or 4-PBA, or one of their salts or one of their combinations, to seeds intended for sowing, the method being characterized in that the seeds are liable to be affected by a phytopathogenic fungus or oomycete and in that the quantity effective is sufficient to inhibit germination or growth of the phytopathogenic fungus or oomycete, and / or to inhibit the movement of oomycete zoospores, and / or to destroy (cause death) of the fungus or oomycete , and thus prevent fungal disease.
  • the phytopathogenic fungus or oomycete is responsible for damping-off, and the fungal disease is damping-off.
  • the invention also relates to a phytosanitary composition comprising, as fungicidal or fungistatic agent, 2-PBA, or 3-PBA, or 4-PBA, or one of their salts, or one of their salts. combinations.
  • the invention also relates to a coating or film-coating solution for seeds comprising, as fungicidal or fungistatic agent, 2-PBA, or 3-PBA, or 4-PBA, or one of their salts. , or one of their combinations.
  • FIG. 1 Effect of 2-PBA and 3-PBA on Spore Germination and Mycelial Growth of B. cinerea in Liquid Medium in vitro, and Direct Effect of 3-PBA on Growth of Primary Hyphae of B. cinerea in Liquid Medium in vitro. See Example 4.
  • Figure 10 Inhibition of Radial Growth of Mycelium of Different Species of Phytopathogenic Fungi by 4-PBA ((a) Fusarium graminearum, (b) Fusarium verticilloides, (c) Leptosphaeria maculans, (d) Flelminthosporium teres and (e) Magnaporthe oryzae). See Example 6.
  • Figure 11 Inhibition of Radial Growth of Mycelium of Different Species of Phytopathogenic Fungi by 4-PBA ((a) Fusarium oxysporum f. sp. melonis, (b) Colletotrichum lindemuthianum, (c) Alternaria solani, (d) and (e) for the respective strains 1 and 1509 of Alternaria brassicicola, (f) Sclerotinia sclerotorum and (g) Cercospora beticold). See Example 6.
  • Figure 14 Effect of increasing concentrations of 4-PBA on the growth of primary hyphae of seven isolates of the fungus Zymoseptoria tritici in vitro.
  • the x-axis refers to the 4-PBA (C) concentrations used in the assay (expressed as a decimal logarithm) while the y-axis refers to the calculated percentages of inhibition of the length of the primary hyphae. compared to controls which grew without 4-PBA.
  • the characteristics of the seven isolates studied are shown in Table 4. See Example 9. Description of the Embodiments.
  • the present invention relates to the use of 4-phenylbutyric acid (4-PBA) or 3-phenylbutiric acid (3-PBA) or 2-phenylbutiric acid (2-PBA) or a salt thereof or a combination thereof as a fungicidal or fungistatic agent for preventing or treating disease in a plant or plant product.
  • 4-Phenylbutyric acid also called 4-phenylbutanoic acid
  • 4-PBA is a small molecule which, due to its biological properties, has found application in the field of pharmacy and whose use in the field of agriculture has recently been proposed.
  • 4-PBA is a chaperone molecule, that is to say a molecule which assists proteins in their maturation by providing them with adequate three-dimensional folding (Cohen et al., Nature, 2003, 426: 905-909).
  • 4-PBA inhibits the stress of the endoplasmic reticulum and abolishes the triggering of the UPR (Unfolded Protein Response).
  • 4-PBA is approved for treatment of diseases of the urea cycle (Maestri et al., N. Engl. J. Med., 1996, 335: 855-859), and has been proposed as a therapeutic agent in the treatment of pathologies such as type diabetes. 2 and neurodegenerative diseases.
  • Fusarium head blight a disease caused by Fusarium graminearum, a necrotrophic fungus of the genus Fusarium, has been shown to be preventable by applying chaperone molecules, such as 4-PBA, to crops (US request 2010/0261694), the chaperone molecule acting by suppressing programmed cell death of plant cells caused by the fungus.
  • chaperone molecules such as 4-PBA
  • the present inventors have described the antibacterial properties of 4-PBA and its use in the treatment and prevention of plant diseases (WO 2014/009402).
  • 4-PBA can be used in the form of 4-phenylbutyric acid or in the form of a salt thereof.
  • 4-PBA salt is meant any compound obtained by reacting 4-PBA, which functions as an acid, with an appropriate base to form, for example, an alkali metal salt, such as sodium, potassium, and lithium; an alkaline earth metal salt, such as calcium and magnesium; a salt of a transition metal, such as manganese, copper, zinc and iron; an ammonium salt; a phosphonium salt; a sulfonium salt; an oxonium salt; a choline salt; or a salt with an organic base containing a nitrogen atom, such as trimethylamine, triethylamine, tributylamine, N, N-dimethylaniline, N-methylpiperidine, N-methylmorpholine, diethylamine, dicyclohexylamine, dibenzylamine, pyridine, guanidine, hydrazin
  • a 4-PBA salt used in the practice of the present invention is a sodium, potassium, calcium, magnesium, manganese, copper, zinc, iron, ammonium, sodium salt. phosphonium, sulfonium, or oxonium.
  • 4-PBA can be synthesized by any method, for example by reacting benzene with butyrolactone in the presence of aluminum chloride followed by neutralization in the presence of base as described in US Pat. No. 6,372,938. 2. 3-PBA and its salts
  • 3-Phenylbutyric acid (also called 3-phenylbutanoic acid) is an isomer of 4-PBA. As indicated above and as demonstrated in the experimental part, 3-phenylbutyric acid, like 4-PBA, exhibits fungistatic or fungicidal activity.
  • 3-PBA can be used in the form of 3-phenylbutyric acid or in the form of a salt thereof.
  • 3-PBA salt is meant any compound obtained by reacting 3-PBA, which functions as an acid, with an appropriate base as indicated above in the case of 4-PBA.
  • a 3-PBA salt used in the practice of the present invention is a sodium, potassium, calcium, magnesium, manganese, copper, zinc, iron, ammonium, sodium salt. phosphonium, sulfonium, or oxonium.
  • 3-PBA can be synthesized by any method, for example by reaction (Fujisawa et al., Tetrahedron Letters, 1980, 21 (22): 2181-2184). 3-PBA can also be obtained by degradation of hydrocarbons by certain microorganisms (Simoni et al., Applied and Environmental Microbiol., 1996, 62 (3): 749-755; Le Thi Nhi-Cong et al., Journal of Basic Microbiology, 2010, 50 (3): 241-253).
  • 2-Phenylbutyric acid also called 2-phenylbutanoic acid
  • 2-phenylbutanoic acid is an isomer of 2-PBA.
  • 2-phenylbutyric acid like 4-PBA and 3-PBA, exhibits fungistatic or fungicidal activity.
  • 2-PBA can be used in the form of 2-phenylbutyric acid or in the form of a salt thereof.
  • 2-PBA salt is meant any compound obtained by reacting 2-PBA, which functions as an acid, with an appropriate base as indicated above in the case of 4-PBA and 3-PBA.
  • a 2-PBA salt used in the practice of the present invention is a sodium, potassium, calcium, magnesium, manganese, copper, zinc, iron, ammonium, sodium salt. phosphonium, sulfonium, or oxonium.
  • 2-PBA can be synthesized by any method (Aratake et al., Preparation of 2-phenylbutyric acids, Jpn. Kokai Tokkyo Koho, 1998, 4pp). 2-PBA can also be produced by bacteria of the genus Nocardia when they are cultured in liquid medium in the presence of a hydrocarbon, phenyldodecane (Baggi et al., Biochem. J., 1972, 126: 1091-1097).
  • a combination of 3-PBA and 4-PBA (or their salts) can therefore advantageously be used in the context of the present invention.
  • “combination” is meant here a pre-prepared mixture (or admixture) of the two molecules or else a simultaneous, separate or sequential administration of the two molecules.
  • the time between the administration of the first molecule and the administration of the second molecule should be such that the beneficial synergistic effect of the combination is maintained.
  • This also applies to a combination of 3-PBA and 2-PBA (or their salts) and to a combination of 2-PBA and 4-PBA (or their salts), whether or not there is one. synergy between the two molecules.
  • a combination of 3-PBA, 2-PBA and 4-PBA (or their salts) can also advantageously be used in the context of the present invention.
  • “combination” is meant here a pre-prepared mixture (or admixture) of the three molecules or else a simultaneous, separate or sequential administration of the three molecules.
  • the three molecules can be administered in any suitable proportion. .
  • 4-PBA, or 3-PBA, or 2-PBA, or a salt thereof, or a combination thereof is applied to plants or plant products in the form of an aqueous solution.
  • 4-PBA, or 3-PBA, or 2-PBA, or a salt thereof, or a combination thereof can be used alone or in combination with other substances such as, for example, insecticides, acaricides, fungicides, nematicides, bactericides, herbicides, safeners, plant growth regulators, nutrient supplements, and / or fertilizers.
  • a plant protection or phytosanitary composition comprising, as fungicidal or fungistatic agent, 4-PBA, or 3-PBA, or 2-PBA, or one of their salts, or one of their combinations, is an object of the present invention.
  • the inventors have demonstrated an antifungal effect of 4-PBA, 3-PBA, 2-PBA, their salts and their combinations (“the compounds and combinations described here”) on certain phytopathogenic fungi and oomycetes.
  • antifungal is understood here to denote a substance which kills (fungicidal effect) fungi and / or oomycetes and / or which slows down (fungistatic effect) the growth and / or multiplication of fungi and / or oomycetes.
  • the invention relates to the use of 4-PBA, or one of its salts, of 3-PBA, or one of its salts, of 2-PBA, or one of its salts. salts, or a combination thereof, as a fungicidal or fungistatic agent for the prevention and / or treatment of diseases caused by fungi or oomycetes in plants and / or plant products.
  • phytopathogenic fungi and oomycetes By “phytopathogenic fungi and oomycetes” is meant herein fungi and oomycetes capable of causing diseases in plants and / or plant products.
  • 4-PBA has a very broad spectrum of action, exhibiting activity against very distant fungi from a phylogenetic point of view, whether these phytopathogens are biotrophic or necrotrophic or even hemibiotrophic.
  • biotrophic refers to a pathogen which colonizes the living tissue of a plant
  • necrotrophic refers to a pathogen which kills plant cells before colonizing them.
  • hemibiotrophic designates a pathogen exhibiting a short phase of biotrophic exploitation followed by a phase of necrotrophic exploitation.
  • the present invention can be used for the prevention or treatment of a disease which affects a plant or a plant product and caused by a biotrophic, necrotrophic or hemibiotrophic fungus or oomycete.
  • Phytopathogenic Fungi To. Phytopathogenic Fungi.
  • Phytopathogenic fungi which can be destroyed or whose growth can be inhibited by any of the compounds and combinations described herein can belong to any of the different groups in the kingdom of Eumycetes or 'true fungi', namely Ascomycetes, Basidiomycetes and Chytridiomycetes.
  • the two most important groups of phytopathogenic fungi are Ascomycetes which cause for example gray rot or botrytis, fusarium, powdery mildew, septoria, scab, and G ergot of rye, and Basidiomycetes which cause for example rusts and smuts.
  • Ascomycetes are a large division of fungi that are characterized by spores formed inside ascus. They contain many species that are useful to humans such as yeasts used in baking, brewing and winemaking, edible mushrooms such as morels and truffles, but also many phytopathogenic fungi of cultivated plants.
  • Botrytis cinerea which is responsible for gray rot which plagues several crops of major agronomic interest such as grapes, sunflowers. , tomato, strawberry.
  • Botrytis cinerea is included in the list of the ten most scientifically and economically important fungal pathogens established in 2012 (Dean et al., Mol. Plant Pathol., 2012, 13 (4): 414-430) .
  • Another species of the genus Botrytis is Botrytis pseudocinerea which has a broad spectrum similar to that of B. cinera.
  • phytopathogenic ascomycetes include the fungi of the genus Colletotrichum, which is one of the most important groups of phytopathogenic fungi globally.
  • Fungi of the genus Colletotrichum attack more than 3200 species of monocotyledonous and dicotyledonous plants and are responsible for numerous fungal diseases, in particular anthracnoses, which are particularly damaging when they affect fruits.
  • Colletotrichum species are also on the list of the ten most scientifically and economically important fungal pathogens.
  • species in the genus Colletotrichum (C.) include, without limitation, C. acutatum (which particularly affects strawberry, blueberry, almond, citrus, avocado, mango, olive, peach), C. arachidis, C.
  • capsici (which affects basil, chickpea, pepper and pigeon pea), C. cereale, (which affects turf), C. chlorophyti (which affects various species of herbaceous plants, especially legumes), C. cojfeanum (which affects coffee trees), C. coccodes (which affects hops, tomatoes and potatoes), C. crassipes, C. dematium (which keeps on residue crops, seeds and some weeds), C. dematium f. spinaciae (which affects sugar beets), C. gloeosporioides (which particularly affects tomatoes and olives), C. wisteria (which affects soybeans and tomatoes), C. gossypii (which affects cotton trees), C.
  • graminicola which affects cereals and especially maize
  • C. higginsianum which affects many plants of the Brassicaceae family
  • C. kahawae which affects coffee berries on Cojfea arabica crops
  • C. lindemuthianum which affects beans
  • C. lini C. mangenotii, C. musae (which affects bananas and plantains)
  • C. nigrum which affects tomatoes
  • C. orbiculare which affects melons and cucumber
  • C. pisi which affects wild rice and sorghum
  • C. tabacum which affects tobacco plants in nurseries
  • C. theaesinensis which affects tea plants
  • C. trifolii which affects alfalfa
  • C. truncatum which has a wide host range and particularly affects pepper, eggplant, melon, chickpea, and grapes).
  • cryptogamic disease causing ascomycetes which can be destroyed or whose growth or germination can be inhibited using the present invention include imperfect fungi or Deuteromycetes, which are septate, septate hyphal fungi, which multiply in a non-sexual way.
  • the two major genera of deuteromycetes are: Fusarium and Aspergillus. Fungi of the genus Fusarium cause a disease called Fusarium wilt.
  • F. Two species of the genus Fusarium (F.) are on the list of the ten most scientifically and economically important fungal pathogens: F. graminearum (which affects cereals, especially wheat, corn and barley) and F.
  • Fusarium species include, without limitation, F. culmorum (which affects cereals, potatoes, asparagus, and which is responsible for various symptoms including damping-off), F. crookwellense (which affects very many cultivated plants, including wheat, corn, raspberry, poplar, potato, etc.), F. euwallaceae (which affects many tree species, especially the leaves of Aceraceae, Fabaceae and Fagaceae, and which poses a serious threat to avocado crops), F. solani (which affects peas, beans, potatoes and many types of cucurbits), F. sulphureum (which affects potatoes), F.
  • F. culmorum which affects cereals, potatoes, asparagus, and which is responsible for various symptoms including damping-off
  • F. crookwellense which affects very many cultivated plants, including wheat, corn, raspberry, poplar, potato, etc.
  • F. euwallaceae which affects many tree species, especially the leaves of Aceraceae, Fabacea
  • avenaceum which affects many crop plants like wheat, corn, potato, raspberry, poplar, etc.
  • F. moniliforme which is one of the most prevalent fungi in food samples such as maize
  • F. proliferatum which affects asparagus, maize, rice, and other cultures
  • F. sporotrichioides which affects cereal crops
  • F. subglutinans which affects maize and mango
  • F. verticillioides which affects wheat and maize
  • Deuteromycete fungi of the genus Aspergillus thrive on decaying organic matter, in soil, compost, foodstuffs, cereals. They do not attack plants during their full growth. For the most part, these are classic saprophytes which, through wounds, penetrate certain fruits or on seed carriers, especially in hot and humid weather. When the seeds are harvested wet (or when they get wet during storage), Aspergillus grow rapidly and turn into pests, which leads to a decrease in germination.
  • species in the genus Aspergillus include, without limitation, A. niger (which is widely distributed on forage, corn seeds), A. flavus (which colonizes seeds of sunflower and Poaceae), A.
  • phytopathogenic ascomycetes which can be killed or whose growth can be inhibited using the present invention include fungi of the genus Podosphaera which are responsible for various forms of powdery mildew.
  • the host plants mostly belong to the Rosaceae family.
  • species in the genus Podosphaera include, without limitation, P. clandestina var. clandestina (which affects apricots and peaches), P. fiisca (which affects melons and squash), P. leucrotricha (which affects apples and pears), P.
  • phytopathogenic ascomycetes include fungi of the genus Mycosphaerella, in particular the anamorphic form: Spetoria, which is responsible for many diseases called septoria.
  • species in the genus Mycosphaerella include, without limitation, M. arachidis, M. areola, M. berkeleyi, M. bolleana, M. brassicicola, M. caricae, M.
  • M. cerasella caryigena, M. cerasella, M . coffeicola, M. confusa, M. cruenta, M. dendroides, M. eumusae, M. gossypina, M. graminicola (which is on the list of the ten most scientifically and economically important fungal pathogens), M . henningsii, M. horii, M. juglandis, M. lageniformis, M. linicola, M. louisianae, M. musae, M. musicola, M. palmicola, M. pinodes, M. pistaciarum, M. pistacina, M. platanifolia, M. polymorpha, M. pomi, M.
  • S. species in the genus Spetoria
  • species in the genus Spetoria include, without limitation, S. dadauci, S. lactucae, S. leucanthemi, S. anthurii, S. bataticola, S. paeoniae, S. lycopersici, S. azaleae, S hydrangeae, S. apiicola, S. chrysanthemella, S. adanensis, S. gladioli, S. petroselini, S. pisi, S. secalis, S. glycines, S. helianthi.
  • species of Monilia and Monilinia include, without limitation, Monilia / Monilinia laxa (which is responsible for the blight of pome fruit trees), and Monilia / Monilinia fructigena (which is responsible for the blight of black fruit trees). stone fruit).
  • ascomycetes causing fungal diseases include fungi of the genus Sclerotinia, some species of which cause white rot or sclerotinia.
  • species in the genus Sclerotinia include, without limitation, S. minor (which affects carrots, tomatoes, sunflowers, peanuts and lettuce), S. cepivorum, S. sclerotiorum (which affects various plants including rapeseed, sunflower, beans, carrot, etc.), S. trifoliorum (which affects alfalfa, red clover and chickpea), S. borealis (which affects barley, rye and wheat), S. bulborum (which affects bulb plants).
  • This genus comprises more than 40 closely related species, many of which are pathogens of cereals, and generally specific to a host plant species, causing diseases in these plants of the helminthosporiosis group.
  • species of the genus Bipolaris (B.) include, without limitation, B. victoriae, B. cactivora, B. sorokiniana, B. zeicola, B. maydis, B. oryzae.
  • Examples of species in the genus Cochliobolus include, without limitation, C. victoriae, C. sativus, C. carbonum, C. heterostrophus, C. miyabeanus.
  • Other examples of ascomycetes causing fungal diseases which can be prevented or treated using the present invention include fungi of the genus Alternaria and Ulocladium which cause a fungal disease called Alternaria.
  • Examples of species in the genus Alternaria (A.) include, without limitation, A. alternata, A. alternantherae, A. arborescens, A. arbusti, A. blumeae, A. brassicae, A. brassicicola, A. burnsii, A .
  • Trichoderma viride which is the causative agent of green rot in onions and dieback of Pinus nigra (black bread) seedlings
  • C. coerulescens which affects maple
  • C. fimbriata which attacks plants very varied, which range from cocoa to sweet potato
  • C. oblonga and C. obpyriformis which are saprobic species and which affect Eucalyptus species and acacias
  • - fungi of the genus Diaporthe (D.) whose anamorphic form is
  • Phomopsis for example the species P. asparagi, P. asparagicola, P. cannabina, P. coffeae, P. ganjae, P. javanica, P. longicolla, P. mangiferae, P. prunorum, P. sclerotioides, P. theae, P. viticola and the species D. arctii, D. dulcamarae, D. eres, D. helianthi, D. lagunensis, D. lokoyae, D. melonis, D. orthoceras, D. perniciosa, D. phaseolorum, D. phaseolorum var.
  • fungi of the genus Pestalotia for example the species Pestalotia longiseta (which affects tea plants) and Pestalotia rhododendri (which affects azaleas and rhododendrons); fungi of the genus Seiridium (which is the anamorphic form of the genus Lepteutypa), for example the species Seiridium cardinale (pathogen of cortical canker of cypress); fungi of the genus Verticillium, which includes pathogens and saprophytes that cause wilt diseases or vericilliosis, such as for example the species Verticillium alboatrum and Verticillium dahliae.
  • Pestalotia for example the species Pestalotia longiseta (which affects tea plants) and Pestalotia rhododendri (which affects azaleas and rhododendrons)
  • fungi of the genus Cercospora which form leaf spots, for example the species C. angreci, C. apii, C. apiicola, C. arachidicola, C. asparagi, C. atrofiliformis, C. beticola, C. bolleana , C. brachypus, C. brassicicola, C. brunkii, C. cannabis, C. capsici, C. carotae, C. citrullina, C. coffeicola, C. coryli, C. orylina, C. eleusine, C. fragariae, C . fuschiae, C. fusca, C. fusimaculans, C. kikuchii, C.
  • fungi of the genus Microcyclus including the species Microcyclus low-density virus
  • fungi of the genus Nectria the species of which affect fruit crops, for example Nectria cinnabarina (anamorph stage: Tubercularia vulgaris) which affects apple tree and other species of trees or shrubs such as peach, currant, raspberry
  • fungi of the genus Penicillium which is a genus of imperfect fungi (deuteromycetes), such as for example the species Penicillium digitatum and Penicillium italicum which are agents of green and blue rots in citrus fruits
  • fungi of the genus Pleospora (P.) including the species P.
  • fungi of the genus Magnaporthe for example l the species Magnaporthe oryzae (which is included in the list of the ten most scientifically and economically important fungal pathogens and which is the first pathogen of intensive monocultures of rice, causing blast); and fungi of the genus Blumeria, including the species Blumeria graminis which is the agent of a fungal disease called cereal powdery mildew, which affects certain plants of the Poaceae family.
  • Basidiomycetes (or Basidiomycata or 'cap fungi'), which constitute a large division of fungi, are characterized by spores formed at the end of specialized cells, the basidia. They contain edible mushrooms and poisonous mushrooms.
  • the phytopathogenic basidiomycetes which can be killed or whose growth can be inhibited using the present invention are the fungi of the genus Ustilago which cause anthrax in many plant species, in particular the fungi. Poaceae (grasses).
  • species in the genus Ustilago include, without limitation, U. maydis (which is on the list of the ten most scientifically and economically important fungal pathogens and which is responsible for smut in corn) , U.
  • Smuts can also be caused by phytopathogenic fungi of the genus Sporisorium (S.), examples of species of which include, without limitation, S. scitamineum (which is responsible for smut in sugarcane), and S. cruentum, S. sorghi and S. ehrenbergii (all three of which cause smut in sorghum).
  • Smuts can also be caused by fungi of the genus Sporisorium, such as, for example, the species Sporisorium scitamineum which parasitizes plants of the genus Saccharum and which is responsible for smut in sugar cane.
  • basidiomycetes that cause anthrax-like fungal diseases include fungi of the genus Urocystis which particularly attack grasses and other plant families.
  • species of the genus Urocystis include, without limitation, U. agropyri, U. arxanensi, U. brassicae, U. occulta, U. tritici or occulta, U. tranzscheliana, and U. xilinhotensis.
  • phytopathogenic basidiomycetes include fungi of the genus Puccinia, the species of which are on the list of the ten most scientifically and economically important fungal pathogens.
  • Fungi of the genus Puccinia are microscopic fungi responsible for fungal diseases called rusts, and which can affect many plants, from the herbaceous layer to large trees, as well as certain crops (potatoes, tomatoes, cereals, etc.) .
  • species of the genus Puccinia include, without limitation, P. asparagi, P. graminis, P. hordei, P. horiana, P., psidii, P. recondita, P.
  • Rusts can also be caused by fungi of the genus Uromyces (U.), examples of species of which include, without limitation, U. appendiculatus, U. trifolii, U. betae, U. decoratus, U. visiae-fabae, U. striatus, U. dactylidis, U. aloes, U. dianthi, U. graminis, etc.
  • Fungi of the genus Melampsora can also cause rusts which can be prevented or treated using the present invention. Examples of species in the genus Melampsora (M.) Include, without limitation, M.
  • Uni which is one of the ten most scientifically and economically important fungal pathogens, and which attacks flax
  • M. alliipopulina which attacks plants of the garlic family
  • M. pinitorqua which attacks various species of pine
  • M. laricipopulina which attacks larch
  • M. medisae which attacks various hosts including larch.
  • This genus of fungi comprises around 175 phytopathogenic species which affect various species of plants of the Poaceae family (grasses) and which are responsible in particular for caries in cereals.
  • Tilletia (T.) species include, without limitation, T. foetida or T. caries (which affects wheat), T. indicia (which affects wheat), T. pancicii (which affects barley), T. tritici (which affects wheat), T. secalis (which affects rye), T. controversa (which affects wheat and rye), T. horrida (which affects rice).
  • phytopathogenic basidiomycetes include parasitic fungi of the genus Armillaria which are destructive forest pathogens that cause a root disease called white rot. Armillaria being a facultative saprophyte, it also feeds on dead plant material. Examples of species in the genus Armillaria include, without limitation, Armillaria heimii (which attacks tea plants), Armillaria sinapina (which attacks willows, birches, spruces).
  • This genus includes many pathogenic plant species, which are responsible in particular for the red root rot disease which affects trees (usually deciduous trees) in tropical regions.
  • species of the genus Ganoderma include without limitation, G. adspersum, G. applanatum, G. brownii, G. lobatum, G. lucidum, G. megaloma, G. meridithiae, G. orbiforme, G. philipii, G. sessile, Ganoderma tornatum, G. zonatum.
  • Thantephorus which are usually saprophytic but sometimes attack weakened living plants, e.g. field crops, especially Rhizoctonia solani (which is one of the fungi responsible for damping off, but also attacks potato, cereals, sugar beet, rice), Rhizoctonia oryzae, Rhizoctonia cerealis, Rhizoctonia leguminicola, Rhizoctonia rubi and fungi of the genus Phanerochaete (P.) whose species are capable of degrading the lignin of the woody polymer into carbon dioxide and causing white rot in conifers and deciduous trees, for example the species P. chrysosporium, P. allantospora, P . arizonica, P. avellanea, Phanerochaete burtii, P. carnosa, P. tuberculata, P. velutina.
  • Rhizoctonia solani which is one of the fungi responsible for damping
  • Chytridiomycetes (Chytridiomycota) or chytrids, constitute a large group of saprophytic or parasitic fungi, mainly composed of aquatic fungi. Some species of chytrid fungi can attack corn, alfalfa and a number of other plants.
  • Chytridiomycetes which cause fungal diseases that can be prevented or treated using the present invention, there is, for example, Synthytrium endobioticum, which is the causative agent of potato wart scab.
  • the phytopathogenic oomycetes can belong to any of the different families of the class of Oomycetes (Oomycota) which comprises more than 90 genera and between 800 and 1000 species.
  • Oomycota the class of Oomycetes
  • the genus Albugo contains 40 to 50 species of biotrophic parasites of flowering plants.
  • Examples of Albugo (A.) species that induce white rust include, without limitation, A. candida (which affects crucifers), A.
  • tragopogoni ipomoeae-panduratae (which affects sweet potato), A. tragopogonis, A occidentalis (which affects spinach), A. tragopogonis, A. horiana (which affects chrysanthemum), A. tragopogonis, A. tragopogoni (which affects sunflower).
  • phytopathogenic oomycetes include, without limitation, oomycetes of the Peronosporales family comprising the following genera: Bremia, Peronospora, Phytophthora, Plasmopara, Pseudoplasmopara, Sclerophthora and Sclerospoara, most of which are obligate parasites responsible for late blight.
  • Bremia Peronospora
  • Phytophthora Plasmopara
  • Pseudoplasmopara Pseudoplasmopara
  • Sclerophthora Sclerospoara
  • species of the genus Bremia include, for example, Bremia lactucea (which is responsible for downy mildew of lettuce and artichoke).
  • species in the genus Peronospora (P.) include, without limitation, P. antirrhini, P. arborescens, P. cactorum, P. destructor, P. farinosa, P.
  • P. examples include, without limitation, P. parasita (which affects Solanaceae - potato, tomato, tobacco, etc.), P. capsici (which is responsible for damping off seedlings and which has a broad spectrum of action against chili, tomato, eggplant, bean, pumpkin, pumpkin, cucumber, melon, watermelon), P. cactorum, P. citrophthora, P.
  • Plasmopara examples include in particular Plasmopara viticola which is an agent of downy mildew of grapevine.
  • species of the genus Sclerophthora include in particular Sclerophthora macrospora which is responsible for downy mildew in cereals, affecting cereals and various species of grasses.
  • species of the genus Sclerospoara in particular include Sclerospora graminicola which affects maize and millet.
  • species of the genus Pythium include, without limitation, P. acanthicum, P. aphanidermatum, P. aristosporum, P. arrhenomanes, P. buismaniae, P. camurandrium, P. prophyrae (which causes red rot), P. debaryanum, P. deliense, P.
  • dissotocum P. emineosum, P. graminicola, P . heterothallicum, P. hypogynum, P. irregulare, P. iwayamae, P. middletonii, P. myriotylum (which causes soft root rot in crops, such as peanuts, tomatoes, rye, wheat, l oats, cucumber, soybeans, sorghum, tobacco, cabbage and corn), P. okanoganense, P. oopapillum, P. paddicum, P. perniciosum, P. rostratum, P. scleroteichum, P. spinosum, P. splendens, P. sulcatum, P. tracheiphilum, P.
  • phytopathogenic oomycetes include, without limitation, oomycetes of the Saprolegniales family which include a single phytopathogenic genus: Aphanomyces.
  • species in the genus Aphanomyces include, without limitation, A. euteiches (which is a major parasite of various legumes including field peas, alfalfa, and clover), and A. cochlioides (which affects commodities such as spinach, Swiss chard, beets and other related species).
  • the phytopathogenic oomycetes which it is possible to destroy or for which it is possible to inhibit the growth or germination or else to inhibit the movement of zoospores using the present invention include, without limitation, the phytopathogenic fungi of the genera Albugo, Aphanomyces, Bremia, Peronospora, Peronosclerospora, Phytophthora, Plasmodiophora, Plasmopara, Polymyxa, Pseudoplasmopara, Pythium, Sclerophthora and Sclerospoara.
  • Plants and Plant Products a. Plants.
  • the invention can be applied to a wide variety of plants, including field crops, vegetable plants, ornamental plants, trees and shrubs, whether in vegetable gardens, in greenhouses or in open spaces. field.
  • the plants can be dicotyledonous plants, such as in particular Malvaceae (eg cotton, etc.), Solanaceae (eg tobacco, tomato, potato, eggplant, etc.), Cucurbitaceae (eg melons , cucumber, watermelon, squash, etc.), Crucifers or Brassicaceae (eg rapeseed, mustard, etc.), Compositae or Asteraceae (eg chicory, etc.), Umbelliferae or Asparagaceae (eg carrot, cumin, etc.), Rosaceae (especially trees and shrubs whose fruits are of economic importance), Polygonaceae (eg sorrel, rhubarb, buckwheat, etc.), Lamiaceae (eg basil, marjoram, mint, oregano, rosemary , savory, sage, thyme, etc.), Vitaceae (eg vine) or Fabaceae (eg peanuts, broad beans, beans, lentils, pea
  • a compound according to the invention is applied to a plant which is cultivated for the purpose of producing food, ornamental plants, building materials (wood, straw), energy (fuelwood, ethanol, biodiesel), fibers (textile fibers, insulation materials), drugs (medicinal plants), and the like.
  • Examples of plants cultivated for the purpose of producing building materials include, without limitation, acacia, mahogany, alis, alder, birch, cedar, cherry (birch), chestnut, hornbeam, oak, cypress, douglas, spruce, maple, ash, beech, yew, larch, walnut, olive, elm, poplar, Scots pine , plane tree, pear tree, fir, sycamore, lime, and the like.
  • the invention is applied to a transgenic plant.
  • transgenic plant is understood to mean a plant which has been obtained by techniques of genetic manipulation. More specifically, a transgenic plant is a plant of which at least one cell contains exogenous nucleotide sequences introduced through human intervention. Typically, transgenic plants express DNA sequences which confer on these plants one or more characters different from those of non-transgenic plants of the same species.
  • Plant Products The invention can also be applied to a plant product.
  • plant product or “plant product” is understood here to mean any plant or part of a plant that is useful to humans. Thus, a plant product can be chosen from seeds, seeds, tubers and bulbs.
  • a plant product can be chosen from fruits, vegetables, and post-harvest grains.
  • a vegetable can be a root (e.g. carrot, beetroot), a tuber (e.g. potato, Jerusalem artichoke), a bulb (e.g. onion), a young shoot (e.g. asparagus), a pseudo-stem (e.g. . leek), a petiole (e.g. chard, celery), a set of leaves (e.g. lettuce, endive), a flower (eg artichoke, cauliflower), fruit (eg tomato, cucumber), or seed (eg peas, beans, beans).
  • a root e.g. carrot, beetroot
  • a tuber e.g. potato, Jerusalem artichoke
  • a bulb e.g. onion
  • a young shoot e.g. asparagus
  • a pseudo-stem e.g. . leek
  • a petiole e.g. chard,
  • a plant product may be a food product 4 th range.
  • the 4 th range of food includes agricultural products fresh, raw, washed, peeled and cut (classic and mixed salads, raw vegetables, fresh herbs, vegetables and fruits) for consumption.
  • the products are packaged in ambient air or modified atmosphere, or else under vacuum, in sachets or trays, and stored by refrigeration.
  • a plant product can be post-felling or post-cutting timber (eg, construction timber).
  • timber eg, construction timber
  • wood is experiencing renewed interest among manufacturers and the general public.
  • the natural and biodegradable nature of wood also constitutes the main barrier to its implementation and use. Indeed, this material, which is particularly sensitive to its environment, is liable to be altered by biological organisms. The use of wood in industry therefore depends on its ability to resist these external attacks.
  • Several factors are responsible for the development of fungi on cut wood: the period when the trees are cut, the drying times but also the final situation of the wood such as exposure to humidity, the proximity of vegetation (forests), etc. 3. Cryptogamic Diseases
  • Plant diseases which can be treated according to the invention include any disease caused by a phytopathogenic fungus or oomycete which is destroyed and / or whose growth is inhibited by 4-PBA or one of its salts, for example 3-PBA and / or one of its salts, by 2-PBA and / or one of its salts, and / or by one of their combinations.
  • Cryptogamic diseases which can be prevented or treated by a method according to the invention include, without limitation, gray rot or botrytis, downy mildew, fusarium, Sigatoka, Toidium, white blight, anthracnose, smuts, blight. caries, septoria, blister or monilia, rust, helminthosporiosis, sclerotinia, scab, verticillium wilt, leaf blister, blister, coryneum or riddled disease, entomosporiosis, damping-off, esca , eutypia, gum disease, gravel, mal secco, blackfoot, blast, and Dutch elm disease.
  • Gray rot or botrytis is a fungal disease caused by the fungus Botrytis cinerea (Botryotinia fuckeliana). Botrytis cinerea attacks a large number of cultivated plants (Vitaceae, Solanaceae, Cucurbitaceae, Rosaceae and Fabaceae). Viticulture, market gardening, arboriculture and floriculture are affected by gray rot. This fungus is very often saphrophyte, that is to say that it grows on dead or decaying organic matter, and also has the characteristic of being able to develop on living matter, in particular flowers (for example on roses) or fleshy fruits (grapes, strawberries, etc.). Fruits or vegetables are covered with a characteristic brownish then gray felting.
  • Botrytis cinerea Botryotinia fuckeliana
  • Botrytis cinerea attacks a large number of cultivated plants (Vitaceae, Solanaceae, Cucurbitaceae, Rosaceae and Fabaceae).
  • Downy mildew is the generic name for a series of fungal diseases affecting many plant species, but taking epidemic proportions in certain crops of great economic importance, such as grapes, tomatoes, potatoes, lettuce or squash. These diseases are caused by oomycete microorganisms of the following genera: Plasmopara, Phytophthora, Peronospora and Sclerophthora. They show up as brown spots or the appearance of white, cottony mold, followed by general wilting of the leaf, twig, or the entire plant. The affected tuber rots quickly, even during storage.
  • Downy mildew can affect beet (. Peronospora farinosa, and Peronospora farinosa f. Sp. Betae), apricot (Phytophthora cactorum), sugar cane (Peronosclerospora sacchari), carrot (Phytophthora megasperma and Plasmospora crustosa), strawberry (Phytophthora cactorum), wallflower (Peronospora matthiolae and Flyaloperonaspora cheiranthi), lettuce (Bremia lactucae), alfalfa (.
  • Peronospora trifoliorum lamb's lettuce (Peronospora valerianellae), watermelon (Phytlerophthora) potato (Phytophreschora) infestans), primrose (Peronospora oerteliana), rubarb (Peronospora jaapiana), artichoke (Bremia lactucae), tomato (Phytophthora infestans), grapevine (Plasmopara viticola), violet (Peronospora violae), spinach ⁇ Peronospora farinosa f. sp.
  • Fusarium wilt are common fungal diseases of plants, which are caused by certain fungi commonly present in the soil, of the genus Fusarium but which in these cases develop parasitically. These diseases develop in crops and can affect asparagus (Fusarium (F.) culmorum), beans (F. solani f. Sp. Phaseoli), peas (F. solani f.
  • gladioli cereals (Fusarium culmorum, Gibberella rosea, Gibberella avenacea, Gibberella intricans and Monographella nivalis), ears (Gibberella zeae), asparagus roots (F. oxysporum f. Sp. Asparag ⁇ ), the roots of cacti (F. oxysporum f. Sp. Opuntiarum), the roots and crown of tomatoes (F. oxysporum f. Sp. Radicis- lycopersici), the roots and the crown of cucumber (F. oxysporum f. sp.
  • Vascular fusarium wilt can affect lentis (F. oxysporum f. Sp. Lentis), watermelon (F. oxysporum f. Sp. Niveum), tomato (F. oxysporum f. Sp. Lycopersici), tulip (F.
  • Powdery mildew or powdery mildew
  • Powdery mildew is the generic name given to a series of cryptogamic diseases caused by the asexual form of certain ascomycete fungi belonging to the order Erysiphales and the family Erysiphaceae. It mainly attacks certain tree species such as oak, maple, quince, apple or hawthorn, which are particularly sensitive to it. It is manifested by kinds of pustules appearing on the leaves and fruits, and which can develop to form a white felting.
  • Powdery mildew can affect cashews (O ⁇ dium anacardi ⁇ ), tomatoes (O ⁇ dium lycopersici, Leveillula taurica and O ⁇ dium neolycopersic ⁇ ), beet (Erysiphe betae), heather (O ⁇ dium ericinum), carrot (Leveillula taurica), carrot (Leveillula taurica) (Golovinomyces cichoracearum), lettuce (Golovinomyces cichoracearum), alfalfa (Leveillula taurica), bilberry (Podosphaera myrtillina), potato (Golovinomyces cichoracearum), verbena (Sphaeripheeca verbenae), lobster apricot tree (Podosphaera tridactyl), artichoke (Leveillula taurica), hawthorn (Podosphaera clandestina), alder (Microsphaera penicillata), endive (Golovinomy
  • Poinsettia O ⁇ dium poinsettiae
  • pear Podosphaera leucotricha
  • pea Erysiphe polygoni f. Sp. Pisi
  • apple Podosphaera leucotricha
  • rose Podosphaera pannosa
  • soybean Merosphaera diffusa
  • tobacco Golovinomyces cichoracearum
  • clover Merosphaera trifolii
  • privet Essiphe ligustri
  • Alternaria blight is the generic name for a series of fungal diseases caused by various species of fungi of the genera Alternaria and Ulocladium. The fungus is preserved in the soil under plant debris in the form of mycelium, conidia or chlamydospheres. The spread of conidia is by wind or rain. Alternaria can affect beets (A. alternata), carrots (A. dauci), chicory (A. cichorri), potatoes (A. alternata and A. solani), citrus fruits (A. alternata and A. citri), crucifers (A. brassicicola and A. brassicae), fruits (A. and U. chartarum), nightshades (A. solani), wheat (A.
  • Anthracnose is the generic name for a series of cryptogamic diseases caused by various species of phytopathogenic ascomycete fungi belonging to different genera (Apiognomania, Colletrotrichum, Discula, Gloeosporium, Glomerrela, Gnomonia, Pseudopeziza, etc.).
  • Anthracnose weakens the plant by reducing its leafy capital, is harmful to fruit production, but does not directly threaten the life of the plant. Round, brown patches of dryness appear on the fruits.
  • Anthracnose can affect bananas (Colletotrichum musae), bilberries (Glomerella cingulata), broad beans (Didymella fabae and Aschochyta fabae), lettuce (Microdochium panattonianum), alfalfa (Colletotrichum destructivum and Colletotrichum trifolii), almond tree (Glomerella cingulata), sweet potato (Elsinoe batatas), peanut (Sphaceloma arachidis), tomato (Glomerella cingulata and Colletotrichum coccodes), vine (Elsinoe ampelina), eggplant (Glomerella cingulata), avocado ( Sphaceloma perseae), spinach (Colle
  • Smuts are fungal diseases caused by basidiomycete fungi mostly belonging to the Ust ⁇ laginomycotina subdivision.
  • the smuts more particularly affect plants of the Poaceae family (grasses) and in particular cereals, but also other cultivated plants.
  • the most economically important hosts are maize (Ustilago maydis), barley (Ustilago segetum var. Hordei), wheat, oats (Ustilago hordeif. Sp. Avenae), sugarcane (Ustilago scitaminea) or Sporisorium scitamineum) and forage grasses.
  • Smuts can also affect sorghum (Sporisorium sorghi), anemone (Urocystis anemones), potato (Thecaphora solan ⁇ ), grape (Elsinoe ampelina), violet (Urocystis violae), onion (Urocystis colchic ⁇ ) , cork oak (Biscogniauxia mediterranea), gladiolus (Urocystis gladiolicola), maize (Ustilago maydis), millet (Ustilago crameri, Sphcelotheca destruens), Manchurian wild rice (Ustilago esculenta).
  • smut include, without limitation, stem smut (eg, stem smut of grasses (Ustilago hypodytes), stalk smut of rye (Urocystis occulta)); ear smut (e.g. corn ear smut (Sphacelotheca reiliana); leaf smut (eg dahlia leaf smut (Entyloma calendulae f sp.
  • stem smut eg, stem smut of grasses (Ustilago hypodytes), stalk smut of rye (Urocystis occulta)
  • ear smut e.g. corn ear smut (Sphacelotheca reiliana)
  • leaf smut eg dahlia leaf smut (Entyloma calendulae f sp.
  • smut for example black smut of rice (Tilletia barclayana)
  • bare smut for example bare smut of oats (Ustilago segetum var. avenae), bare smut of barley (Ustilago segetum var. nuda), loose smut of wheat (Ustilago segetum var. tritici), loose smut of sorghum (Sphcelotheca cruenta)
  • striped smut eg striped smut of millet (Ustilago striiformis)
  • Septoria can also affect carrot (Septoria dauci), lettuce (Septoria lactucae), daisy (Septoria leucanthem ⁇ ), anthurium (Septoria anthurii), sweet potato (Septoria bataticola), peony (Septoria paeoniae), tomato (Septoria lycopersic ⁇ ), oats (Phaeosphaeria avenaria), azalea (Septoria azaleae), hydrangea (Septoria hydrangeae), barley (Zymoseptoria passerinii and Phaeosphaeria avenaria f. sp.
  • brambles (Sphaerulina) rubi), celery (Septoria apiicola), hemp (Didymella arcuata), chrysanthemum (Septoria chrysanthemella and Septoria adanensis), raspberry (Sphaerulina rub ⁇ ), gladiolus (Septoria gladiol ⁇ ), currant (Mycrosphaerella ribis), parsley (Septoria petroselin ⁇ ), pear (Mycrosphaerella pyr ⁇ ), pea (Septoria pis ⁇ ), rose (Sphaerulina rehmiana), rye (Septoria secalis), soybean (Septoria glycines), and sunflower (Septoria helianth ⁇ ).
  • Moniliosis or monilia is the generic name for various fungal diseases of fruit trees caused by different species of fungi of the genus Monilinia, including Monilinia fructigena which mainly attacks pome fruits and Monilinia laxa of stone fruits.
  • Moniliosis affects injured fruits (by hail, insect stings and / or bites, bird pecks). The fruits are covered with a brown spot and white dots distributed in ordered concentric circles. The fruits eventually rot on the tree and often remain mummified without falling. Almost all fruit species of the Rosaceae family (apple, pear, cherry, plum, peach, quince, apricot and almond) are susceptible to moniliosis.
  • One of the most serious plagues of this crop also known as ice rot
  • cocoa blight Moniliophthora rorer ⁇ ).
  • Rusts are fungal diseases of which the responsible pathogens are parasitic basidiomycete fungi of the order Pucciniales (formerly Uredinales). They are manifested by pustules that appear on the leaves. Some rusts are caused by oomycetes of the order Peronosporales (white rusts). These phytopathogenic agents are obligate parasites, which can only develop on a living plant.
  • Rusts can affect garlic (Puccinia allii), aloe (Uromyces aloes), almond (Melampsora amygdalinae and Tranzschelia pruni-spinosae), peanut (Puccinia arachidis), asparagus (Puccinia asparag ⁇ ), l 'hawthorn (Puccinia substriata), banana (Uromyces musae), beet (Uromyces betae), heather (Thekopsora fischeri), sugar cane (Puccinia kuehnii and Puccinia melanocephala), chicory (Puccina hieracii), coffee ( Hemileia vastratrix), celery (Puccinia api ⁇ ), cherry (Puccinia cerasi), chrysanthemum (Puccinia chrysanthemi), quince (Gymnosporangium clavipes), cotton (Phakopsora
  • Rusts also include American rusts, Asian rusts, tropical rusts, mesh or European rusts, white rusts, brown rusts, yellow rusts, orange rusts, black rusts, common rusts, crown rusts, stem rusts, needle rusts, leaf rusts, dwarf rusts, blister rusts, and blister rusts.
  • Helminthosporiosis is a fungal disease caused by various species of ascomycete fungi and mainly affects grasses, such as oats (Pyrenophora avenae and Cochliobolus victoriae - anamorph: Bipolaris victoriae), poppy (Pleospora papaveracea), barley (Pyrenophora graminae), cereals (Cochliobolus sativus - anamorph: Bipolaris sorokiniana), forage grasses (Pyrenophora dictyoides), succulents (Bipolaris cactivora), jute (Corynespora corchorum), maize (Cochliobolus carbonum - anamorph: Bipolaris zeicola, Setosphaeria turcica - anamorph: Excerohilum turcicum, Cochliobolus heterostrophus - anamorph: Bipolaris ze
  • Sclerotinia also called white rot
  • Sclerotinia is a fungal disease caused by attack by parasitic fungi of the genus Sclerotinia (Sclerotinia minor, Sclerotinia cepivorum and Sclerotinia sclerotiorum). It is one of the most devastating plant pathologies in the world, affecting the yield and quality of some thirty crops of economic importance, including sunflower, carrot, artichoke, onion, rapeseed, soybeans, beans, peas, chickpeas, etc.
  • Scab are fungal diseases caused by various fungi and particularly affect apple trees (apple scab caused by Venturia inaequalis), peach trees (black peach scab caused by Venturia carpophila), plum trees (plum scab caused by Cladosporium carpophilum, pear trees (pear scab caused by Venturia pyrina) and olive trees (olive scab or peacock eye disease caused by Spilocaea oleaginum) They affect both leaves and fruits.
  • Verticillium wilt also known as verticillium wilt or verticillium wilt
  • Verticillium wilt is a fungal disease that affects more than 300 species of herbaceous, annual or perennial, or woody plants. This disease is caused by various species of ascomycete fungi, of land-based origin, of the genus Verticillium (family of Plectosphaerellaceae). The distribution of the two main pathogens is different: Verticillium alboatrum occurs mainly in temperate zones while Verticillium dahliae is dominant in tropical and subtropical zones.
  • Tomato leaf blight also called olive mold
  • Tomato leaf blight is a fungal disease caused by the fungus Fulvia fulva (Cooke) Ciferri (or Cladopsorium fulvum Cooke).
  • the disease manifests itself as yellowish spots, which gradually necrosis on the upper surface of the leaves, and greenish gray felting (mold) on the underside. Only in the most severe cases, flowers and fruits can be affected. In case of early attack, that is to say before the formation of fruits, yield losses can be significant.
  • Leaf curl is a fungal disease of peach and almond, caused by the fungus Taphrina deformans, which causes deformation of the leaves and can cause serious damage to trees producing peaches and nectarines.
  • Cryneum screening is a disease caused by an ascomycete fungus Stigmina carpophila, formerly known as Coryneum beijerinckii. It attacks all aerial parts of the tree (branches, leaves and fruits) and affects fruit trees such as cherries, plums, peaches, almonds and apricots.
  • Entomosporiosis is a fungal disease that particularly affects quince trees and is caused by Entomosporium maculatum. Red spots appear on the leaves which turn yellow and eventually fall off.
  • Damping-off is a disease characterized by the death of sown seedlings, and which is very quickly contagious. The base of young plants turns gray and soft, and the seedling dies within 24 hours. Several phytopathogenic fungi and oomycetes can cause the disease: Botrytis, Fusarium, Phytophthora, Rhizoctonia, Sclerotinia, Phoma, and Pythium, the latter being the most common and feared.
  • Esca, or grapevine stroke is one of the oldest diseases of the vine. It is attributed to three airborne fungi: Phaeoacremonium aleophilium, Phaeomoniella chlamydospora and Eutypa lata.
  • Eutypiosis is a fungal disease of the vine caused by a species of lignicolous ascomycete fungi, Eutypa lata. Symptoms of the disease include, for example, dwarfed twigs, dwarfed and chorosed leaves, and brown necrosis on wood. Gum disease is a plant disease characterized by the discharge of a gummy substance on the surface of branches or the trunk of certain trees. It affects more particularly certain deciduous trees, in particular fruit trees of the genus Prunus (cherry, plum, apricot and peach) and some others, such as citrus.
  • the responsible fungus (Cytospora, Botryosphaeria dothidea) is a wood fungus, the spores of which penetrate inside the plant, as a result of injuries inflicted on the branches or on the bark for any reason: pruning, branch breakage, bursting bark, animal scratches, insect attack, gel. These spores develop and form a mycelium which invades and destroys the structural wood of the tree on which it feeds.
  • Mal secco is a fungal disease affecting citrus fruits, and more particularly the lemon tree (Citrus limon), the pathogen of which is an ascomycete fungus of the order Pleosporales: Plenodomus tracheiphilus.
  • the tree is most often infected as a result of injury.
  • This disease is a serious vascular disease that prevents the sap from circulating properly and causes the affected branch to dry out.
  • the disease spreads from the extremities to the trunk, causing in the short to medium term (1 or 2 years) the dieback of the plant, then its death.
  • Black foot is a fungal disease that is caused by the fungus
  • Blast is a fungal disease caused by the fungus Magnaporthe grisea. It is the first pathogen of intensive rice monocultures, the stems of which it necroses at the level of the ears. From an economic point of view, this fungus, which is present in around 85 countries around the world, is responsible for significant losses each year. Magnaporthe grisea also attacks other Poaceae: wheat, rye, barley and millet.
  • Dutch elm disease also called Dutch elm disease, is a fungal disease caused by Osphiostoma ulmi.
  • One of the first symptoms is a deformation of the bark of the branches of the adult elm, then the foliage dries up.
  • the invention relates to a method of treating and / or preventing a fungal disease in a plant or a plant product, comprising the application of 3-PBA or one of its salts, of 2-PBA or one of its salts, of 4-PBA or one of its salts, or one of their combinations, to the plant and / or to the soil surrounding the plant or to the plant product.
  • Cryptogamic disease is caused by a phytopathogenic fungus and / or oomycete.
  • PBA or a salt thereof, 4-PBA or a salt thereof, or a combination thereof is applied in an amount sufficient (or effective) to inhibit germination or growth of the phytopathogenic fungus or oomycete and / or to inhibit the movement of zoospores of the phytopathogenic oomycete and / or to destroy (cause death) of the phytopathogenic fungus or oomycete.
  • the invention also relates to a method of destroying a phytopathogenic fungus or oomycete and / or of inhibiting the growth of a phytopathogenic fungus or oomycete to prevent and / or treat a fungal disease affecting a plant or a product.
  • plant comprising the application of 3-PBA or one of its salts, of 2-PBA or one of its salts, of 4-PBA or one of its salts, or one of their combinations, to the plant and / or to the soil surrounding the plant or to the plant product.
  • the application of one of the compounds and combinations described herein can be carried out by any method known in the art.
  • the application can be done by treating the soil or the soil (by watering, injection or spraying); by treating growing substrates (potting soil, compost, etc.); by treatment with nutrient solutions; by irrigation (drip or sprinkler system); by treatment of the aerial parts of the plant (by watering or spraying, or by fumigation in the case of greenhouse crops); by treatment of seeds (by film coating or coating) or other propagation material (for example, by powdering tubers or plants, by soaking bulbs, cuttings or plants); by soaking or showering post-harvest fruits or vegetables; by processing stored grains; by treatment of cut wood (for example by a surface impregnation process such as short dipping or by application with a brush or brush or by spraying or else by a deep impregnation process in an autoclav
  • the term “aerial parts of a plant” is understood to mean the portion of the plant which is commonly referred to as foliage, and which is located above the ground.
  • the aerial part or foliage of a plant includes the leaves, stems, flowers, and fruits.
  • the term “fruit” has its definition here used in botany, and therefore designates the plant organ containing one or more seeds. The term “fruit” therefore also includes vegetables.
  • phytopathogenic agent / plant or plant product pair i.e. prevention or treatment of fungal disease or improvement in the conservation of post-harvest plant products (vegetables, fruits, grains) , etc.) or post-cutting (wood), or optimization of the emergence of seedlings
  • desired effect i.e. prevention or treatment of fungal disease or improvement in the conservation of post-harvest plant products (vegetables, fruits, grains) , etc.) or post-cutting (wood), or optimization of the emergence of seedlings
  • those skilled in the art know how to determine the most suitable application mode (s).
  • the dose applied corresponds to a concentration that is non-toxic for humans and the environment.
  • the compound or combination is applied by spraying to the plants or parts of plants to be treated.
  • the compound or combination is preferably applied in a dose ranging from 0.0005 to 3 kg / ha, more preferably from 0.001 to 2 kg / ha, and more preferably still from 0.005 at 1 kg / ha.
  • an effective amount denotes an amount of a compound or combination which is sufficient to achieve the intended purpose (eg prevention of fungal disease, treatment of fungal disease, improvement of the conservation of post-harvest plant products (vegetables, fruits, grains, etc.) or post-cutting (wood), optimization of the emergence of seedlings).
  • An effective amount is not significantly toxic for the plant or the plant product, or for humans or animals when it is a treatment applied to products intended for human or animal consumption.
  • An effective amount is generally between about 0.1 and about 1000 ppm (parts per million), preferably between 1 and 500 ppm.
  • a treatment according to the invention may correspond to a single application of a compound or of a combination described here or to several applications, for example applications spaced by a specific duration of time (e.g. spaced apart by one week). , or spaced a month or several months apart, etc.).
  • 3-PBA or one of its salts, 2-PBA or one of its salts, 4-PBA or one of its salts, or one of their salts. combinations can be applied pre-emergence and / or post-emergence of the plant.
  • pre-emergence of the plant and “pre-emergence of the plant” are used interchangeably here and refer to the period after sowing before the cultivated plant emerges from the ground.
  • post-emergence of the plant and “post-emergence of the plant” are used interchangeably and denote the period when the cultivated plant emerged from the ground.
  • Treatment with any of the compounds and combinations described here can result in a series of benefits for plants and plant products.
  • Such benefits can be manifested, for example, by a decrease in the presence, in the plant or in the plant product, of the number and / or the severity of the symptoms of a fungal disease caused by the fungus or oomycete; an improvement in the storage stability of the plant once harvested (and / or of its fruits once picked); an improvement in the appearance of the plant or plant product due to the absence, or the presence of a limited number of sites of necrosis, blight, stain, rot, gall, tumor, or wilt in the tissues of the plant or plant product; improved biomass; improved root growth; improved runner production; an increase in leaf area; improved sexual and / or vegetative reproduction; an increase in the number of flowers; an increase in fruit volume; improved fruit appearance; an increase in the concentration of nutrients and constituents such as, for example, carbohydrates or carbohydrates, lipids, proteins, vitamins, minerals, and fibers, etc.
  • an improvement, increase, or decrease in a property is generally at least 3%, preferably at least 5%, and more preferably still at least 10% relative to a plant. or a plant product which has not been treated with a compound or combination described herein.
  • the present invention relates to a method for improving the preservation of a plant product susceptible to being affected by a phytopathogenic fungus or oomycete, the method comprising applying an effective amount of 3-PBA or one of them. of its salts, of 2-PBA or of one of its salts, of 4-PBA or of one of its salts, or of one of their combinations, to the plant product, the method being characterized in that the effective amount is sufficient to inhibit germination or growth of the phytopathogenic fungus or oomycete or to inhibit the movement of zoospores of the phytopathogenic oomycete, or to destroy the phytopathogenic fungus or oomycete, and thus prevent fungal disease.
  • the plant product may be selected from the group consisting of fruits, vegetables, seeds, foodstuffs 4 th generation, and wood cut.
  • seed treatment is the preparation of seeds for sowing, especially using pesticides.
  • the purpose of this treatment is to protect seeds or young plants from pathogenic germs, in particular those naturally present in the soil, and animal parasites and to stimulate the germination and growth of plants.
  • the fungicidal protection of seeds remains essential against certain very damaging diseases for which there is no means of control in vegetation.
  • the seeds coated with phytosanitary products with fungicidal and / or insecticidal action ensure preservation of the yield potential from sowing.
  • Adjuvants such as film-coaters and coatings facilitate sowing and improve the effectiveness of treatments.
  • Seed coating corresponds to the application of a film microporous which allows the products to be fixed by a very thin layer without modifying the shape of the seed.
  • Seed coating is a form of thicker seed covering, intended to facilitate sowing, and which may contain fertilizers, growth factors, as well as an inert filler and polymer outer shell.
  • seed treatments In addition to reducing the damage caused by diseases and preserving the yield potential from sowing, seed treatments have the advantage of reducing the use of phytosanitary products and therefore reducing costs, working time and handling of phytosanitary products by farmers.
  • seed treatments are controversial today due to risks to the environment (runoff, pollinators) and potentially to human or animal health.
  • the compounds of the present invention which are more environmentally friendly, can replace conventional plant protection products in seed treatment.
  • the invention relates to a method of protecting seeds or improving seedling emergence, the method comprising applying an effective amount of 3-PBA or a salt thereof, 2-PBA or one of its salts, 4- PBA or one of its salts, or a combination thereof, to seeds intended for sowing, the method being characterized in that the seeds are capable of being affected by a phytopathogenic fungus or oomycete and in that the effective amount is sufficient to inhibit germination or growth of the phytopathogenic fungus or oomycete or to inhibit the movement of zoospores of the oomycete, or to destroy the fungus or oomycete phytopathogenic, and thus prevent fungal disease.
  • the fungal disease is damping-off.
  • the invention also relates to a method of preventing damping-off comprising the application of an effective amount of 3-PBA or one of its salts, 2-PBA or one of its salts. , of 4-PBA or a salt thereof, or of a combination thereof, to seeds intended for sowing, the method being characterized in that the effective amount is sufficient to inhibit the germination or the growth of the fungus or of the phytopathogenic oomycete or to inhibit the movement of oomycete zoospores, or to destroy the phytopathogenic fungus or oomycete, and thus prevent fungal disease.
  • combinations, used in a method of seed protection, improvement of seedling emergence or prevention of damping-off, is present in a seed coating or film-coating solution.
  • coating is meant here a process of coating the seeds by covering them with a material (usually polymeric) in order to standardize the size and shape of the kernels in order to facilitate sowing.
  • film-coating is meant here a process of completely covering the seeds with a thin layer (or microporous film) so that the seed retains its original shape.
  • Coating and film coating solutions can usually contain additional ingredients such as pesticides.
  • the invention therefore also relates to a coating or film-coating solution for seeds comprising, as fungicidal or fungistatic agent, an effective amount of 3-PBA or one of its salts, or of 2-PBA or one of its salts, or of 4-PBA or one of its salts, or one of their combinations.
  • Example 1 Protection of Plants by 4-PBA against Gray Rot Caused by the Fungus Botrytis cinerea
  • cinerea (composed of 6 g / L of Potato Dextrose Broth or PDB medium [Sigma-Aldrich, P6685], the pH of which was 5,15) containing or not containing 4-PBA at a final concentration of ImM.
  • the stock solution of 4-PBA with a concentration of 10 mM has always been prepared extemporaneously.
  • the inoculum was obtained from a sporulating mycelial culture aged 10 to 14 days carried out in the dark at a temperature of 22 ° C on sterile solid PDA medium (which was composed of 24 g / L of PDB medium and 15g / L of agar). The inoculum has never been stored for more than 10 days at 4 ° C before use.
  • Disease intensity was also measured via the ratio of leaf concentrations of genomic DNA of B. cinerea and A. thaliana. Briefly, to extract the genomic DNA, the samples were ground in 200mM Tris-HCl buffer, pH 7.5 containing 250mM NaCl, 25mM EDTA and 0.5% SDS (v / v). The genomic DNA contained in the centrifugation supernatant (18,000xg for 10 minutes) was precipitated with isopropanol (v / v) at room temperature, then pelletized by centrifugation.
  • gDNA genomic DNA
  • the PCR reactions were carried out in a final volume of 10 pL containing 5 pL of Mastermix (Sso Advanced Universal SYBR Green Supermix, # 172-5270, BioDRad), 4.4 ⁇ L of DNA template diluted to the appropriate concentration and 0.3 ⁇ L of each of the two primers (final concentration of 3.3 mM per primer).
  • the PCR conditions were as follows: 2 minutes at 50 ° C, 10 minutes at 95 ° C, then 15 seconds at 95 ° C and 1 minute at 60 ° C; the last two steps being repeated 39 times.
  • the results in Figure 1d show the means and standard deviations for 3 independent experiments, including 4 biological replicates (each composed of 3-4 leaves) per condition (+/- 4-PBA), per experiment.
  • Figure la shows representative symptoms of gray rot obtained on leaves of A. thaliana during the 5 independent experiments carried out in the presence and absence of 4-PBA.
  • the molecule was present in the inoculum, the relative proportions of lesions (classified according to their diameter) observed after 4 days were modified compared to those of leaves inoculated with the fungus alone ( Figure lb).
  • 37% of the leaves inoculated with the spore solution containing 4-PBA did not show symptoms while only 5% of the leaves infected with B. cinerea were devoid of lesions.
  • the molecule also made it possible to reduce the proportions of lesions whose diameter was greater than 4 mm, dropping it from 48% to 23%.
  • the inoculum of the fungus B. cinerea (strain BMM), which was used to infect the leaf discs, was prepared as in the example previously described for Arabette des Dames.
  • the discs were inoculated either with a spore solution containing no 4-PBA or with a spore solution containing 4-PBA at a final concentration of 1 mM.
  • Two titers of inoculum were tested with this experimental design: 5.10 4 spores / mL and 5.10 5 spores / mL.
  • the volume of inoculum used was 3 ⁇ L per disc.
  • the Petri dishes were hermetically sealed and placed in a phytotronic chamber under long-day conditions (16 hours of day at a temperature of 24 ° C and 8 hours of night at a temperature of 19 ° C) at an intensity average light of 300 pE / m 2 / s. Symptoms of the disease were photographed and quantified 3 days after inoculation. The longest diameter of the leaf lesions was measured using an electronic caliper. Disease intensity was also measured via the ratio of foliar gDNA concentrations of B. cinerea and S. lycopersicum as described above.
  • Panel (a) shows lesions characteristic of gray rot caused by the fungus B. cinerea on tomato. Visually, less development of the fungus is observed on the leaf discs in the presence of 4-PBA. This observation is confirmed by the effects of 4-PBA on the distribution lesions by diameter class (panel b) and on the mean diameter of these lesions (panel c). Indeed, in the presence of the molecule in the rinoculum, the proportions of lesions larger than 4 mm in diameter are greatly reduced, going from 73% to 15% for a concentration of 5.10 4 spores / mL and from 60% to 23%. for a concentration of 5.10 5 spores / mL.
  • the discs devoid of lesions and / or showing lesions of a size less than 2 mm in diameter are widely represented in the population infected in the presence of 4-PBA (of the order of 35 to 40% depending on the titre of rinoculum); which is not the case in the absence of the compound.
  • 4-PBA of the order of 35 to 40% depending on the titre of rinoculum
  • the effect of 4-PBA also results in a drop in mean lesion diameter of 68% for the lowest spore concentration and 58% for the highest concentration.
  • a commercial grape variety (Vitis vinifera, cultivar Gamay) was cultivated in a greenhouse for 6 weeks.
  • Leaf discs 1.7 cm in diameter were then punched out from the leaves of row 1 and 2, then inoculated with a solution of spores of the BMM strain of the fungus B. cinerea (5.10 4 spores / mL) containing 4-PBA (to a final concentration of 1 mM) or not containing the compound.
  • the inoculum was prepared as mentioned above for the experiments carried out with A. thaliana.
  • a volume of 6 pL was deposited on each disk. Incubation of the infected discs was carried out as for the experiments carried out on tomato leaf discs.
  • Example 2 Direct effect of 4-PBA on the Arabidopsis thaliana plant
  • FIG. 5b presents the data obtained, showing an average mass per equivalent plant under the 2 cultivation conditions.
  • the 4-PBA molecule therefore has no effect on the above-ground biomass of A. thaliana when administered by spray at a concentration of 1 mM. It will be noted that this concentration is the concentration at which the molecule is effective in protecting Arabette des Dames, tomatoes and vines against B. cinerea (see Example 1). 2. Evaluation of the Phytotoxicity of 4-PBA in Arabidopsis thaliana
  • A. thaliana (Col-0 ecotype) were sown in individual pots directly on potting soil without a prior stratification step.
  • the seedlings were grown in short days (8 hours of daylight at a temperature of 21 ° C / 16 hours at night at a temperature of 18 ° C) at an average light intensity of 120 pE / m 2 / s, for 5 weeks .
  • a solution of 4-PBA (at a final concentration of 0.5 or 1 mM) was then infiltrated at the level of the abaxial surface of the most developed leaves using a syringe without a needle, at a rate of 3 to 4 infiltrated leaves per plant. The experiment was repeated 3 times. Each experiment included around ten plants. Six sheets representative of the 3 experiments were photographed 48 hours after infiltration (Figure 5c).
  • the BMM strain of the fungus B. cinerea was cultured for about 10 days on solid PDA medium (24 g / L of PDB and 15 g / L of agar) in the dark and at a temperature of 22 ° C.
  • a cylinder of agar containing the mycelium at its top was then cut with a sterile cookie cutter 6 mm in diameter, then placed in the center of Petri dishes (round 9 cm in diameter) containing a PDA medium supplemented or not with of 4-PBA.
  • the 4-PBA prepared extemporaneously, was added directly to the molten culture medium at final concentrations of 1, 2 and 5 mM.
  • the controls were carried out by adding a volume of sterile water equivalent to the highest concentration of 4-PBA.
  • B. cinerea spores (BMM strain) was prepared as mentioned above in Example 1, at a concentration of 5.10 4 spores / ml in a PDB medium at 6 g / L. This suspension was supplemented or not with 4-PBA at the final concentrations indicated in panels a, c and d of FIG. 7. To determine the average length of the primary hyphae and the germination rate of the spores, drops of 12 ⁇ L of the 2 types of suspension were placed on glass slides and the whole was incubated at saturated humidity for 16 to 18 hours, in the dark and at a temperature of 22 ° C.
  • 4-PBA also possesses a potent anti-germination activity, which results in an inhibition of spore germination of 86% ( Figure 7c) and a strong repression of the mycelial growth (94%) measured by nephelometry ( Figure 7d).
  • 4-PBA is a weak acid, it has been observed that it causes a decrease in the pH of the culture medium (from 5.15 to 4.48) when it is added to it. a final concentration of 1 mM.
  • Example 3 the mycelial development was evaluated by measuring the absorbance at a wavelength of 600 nm.
  • a spore suspension (5.10 4 spores / mL) with a volume of 10 mL, supplemented or not with phenylbutyric acids (2-, 3- or 4-PBA) at the concentrations indicated in figure 8b, was incubated. for 2 and 4 days at room temperature before quantification by nephelometry.
  • This experiment was repeated twice and each of the experiments included one biological triplicate, as well as one technical triplicate per biological replicate. The rate of inhibition reported (expressed in%) was calculated by comparison with controls whose medium was inoculated with the fungus alone.
  • Figure 8a shows from left to right the structural formulas of 4-phenylbutyric acid, and of these two isomers, 3-phenylbutyric and 2-phenylbutyric acids. While the 3 molecules show a comparable relative efficiency in suppressing the growth of B. cinerea in liquid medium at a final concentration of 5 mM (regardless of the incubation time, 2 or 4 days), the 2 isomers are less efficient. compared to 4-PBA at a final concentration of 1 mM. After 4 days of incubation, for example, the inhibition rate caused by 2-PBA and 3-PBA is around 70% while that caused by 4-PBA is 97%. We will note despite everything that these inhibition rates remain relatively high for a fungus such as B. cinerea, the growth of which in rich medium is extremely rapid.
  • Example 6 Inhibition of the Radial Growth of the Mycelium of 12 Species of Phytopathogenic Fungi by 4-PBA Materials and Methods.
  • the fungi and oomycetes studied, as well as their respective growth temperature and culture medium, are described in Table 1 below.
  • the 2 oomycetes P. parasitica and P. capsici are by far the most sensitive microorganisms to 4-PBA among those we tested ( Figure 12a and b). Indeed, the difference between the ECso calculated for B. cinerea and that of P. parasitica is 7 orders of magnitude (Table 2 and Figure 6b). In other words, this oomycete is about 12 million times more sensitive to the molecule than the fungus.
  • Example 8 Inhibition of Radial Growth of the Mycelium of Phanerochaete chrysosporium by 4-PBA
  • the fungus Phanerochaete chrysosporium is equipped with an enzymatic device allowing it to degrade the lignin constituting the wood. This fungal species therefore does not attack living plants, but can deteriorate timber. It is responsible for white rot in homes.
  • P. chrysosporium shows hypersensitivity to 4-PBA, since it is unable to grow at concentrations 2 and 5 mM finals ( Figure 13). In addition, it takes 14 days for this fungus to overcome a supplementation of the culture medium in 4-PBA up to 1 mM, that is to say exactly twice as long as what it takes for B. cinerea to colonize. the entire Petri dish under the same conditions ( Figure 6a).
  • Example 9 Demonstration of the Antifungal Properties of 4-PBA on the Fungus Zymoseptoria tritici in Vitro 1. Inhibition of the Growth of the Primary Hypha of Z. tritici by 4-PBA
  • the spore suspension thus obtained was then deposited at a rate of 300 ⁇ L per Petri dish containing a solid PG medium (10 g / L glucose, 2 g / L K2HPO4, 2g / L KH2PO4, 12.5 g / l agar, pH 6.3).
  • the medium was supplemented or not with 4-PBA, at increasing concentrations, using a stock solution of the molecule prepared extemporaneously.
  • a range of 4-PBA concentrations ranging from 100 mg / L (0.6 mM) to 400 mg / L (2.44 mM), and including six concentrations, was performed (ie one experiment).
  • the inoculated solid media were incubated for 48 hours at 17 ° C.
  • FIG. 14 shows in fact that, two days after the start of the experiment, the decrease in the average length of the primary hyphae is all the greater as the concentration of 4-PBA is high.
  • Table 3 Median inhibitory concentrations of 4-PBA determined experimentally for seven isolates of the fungus Zymospetoria tritici.
  • 4-PBA is not only capable of limiting the growth of the primary hyphae of an isolate exhibiting simple resistance to benzimidazoles (isolate 37-30), but also of inhibiting that of isolates exhibiting multiple resistance, whether or not this phenotype is linked to an increased efflux phenotype of the fungicide (non-“MultiDrug-Resistance” isolates 14-FT-A1, STDP-047915 and ST-5548 and “MultiDrug Resistance” isolates 3741).
  • the EC 50 calculated for all of these isolates is of the same order of magnitude (approximately ImM), indicating once again that the efficiency of the molecule is comparable to that observed for other fungi (Examples 3, 6, 7 and 8).
  • Table 4 Characteristics of the seven isolates of the fungus Zymoseptoria tritici tested for their sensitivity to 4-PBA in vitro.

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Abstract

La présente invention concerne l'utilisation de l'acide 2-phénylbutyrique, ou de l'acide 3-phénylbutyrique, ou de l'acide 4-phénylbutyrique, ou de l'un de leurs sels, ou de l'une de leurs combinaisons, pour lutter contre les maladies cryptogamiques causées par les champignons et les oomycètes. La présente invention porte également sur l'utilisation de ces composés et de ces combinaisons comme agents fongicides ou fongistatiques pour la prévention ou le traitement curatif de maladies cryptogamiques.

Description

Utilisation de l’Acide 4-Phénylbutyrique et/ou de l’Acide 3-Phénylbutyrique et/ou de l’Acide 2-Phénylbutyrique pour la Prévention et le Traitement des
Maladies Cryptogamiques
Demande de Brevet Parente La présente demande de brevet revendique la priorité de la demande de brevet français numéro FR 20 05221 déposée le 20 mai 2020. Le contenu de la demande de brevet français est incorporé par référence dans sa totalité.
Domaine Technique
La présente invention concerne l’utilisation de l’acide 4-phénylbutyrique (4-PBA), de l’acide 3-phénylbutyrique (3-PBA), de l’acide 2-phénylbutyrique (2-PBA) ou de leurs combinaisons pour lutter de manière préventive ou curative contre les maladies affectant les plantes et les produits végétaux et causées par des champignons et des oomycètes.
Contexte de l’Invention La lutte contre les maladies végétales est une préoccupation majeure de l’agriculture. On estime qu’au niveau mondial environ un tiers des récoltes est détruit au champ ou lors du stockage par des agents pathogènes (insectes, virus, bactéries, oomycètes ou champignons). Cela se traduit par des pertes économiques considérables et, peut, dans certaines régions du globe, conduire à des problèmes de sous-alimentation ou de malnutrition des populations.
Plus que les virus ou les bactéries, ce sont désormais les champignons qui sont les microorganismes les plus menaçants pour la sécurité alimentaire et la biodiversité. Etant donné qu’ils sont responsables de 70 à 90% de toutes les maladies des végétaux, une liste des dix agents pathogènes fongiques les plus importants sur le plan scientifique et économique a été établie (Dean et al., Mol. Plant Pathol., 2012, 13(4): 414-430). Magnaporthe oryzae, qui cause la pyriculariose dans les monocultures intensives de riz, occupe la première place de cette liste en raison de son potentiel catastrophique de destruction des approvisionnements alimentaires mondiaux (Fry et al., BioScience, 1997, 47: 363-371). La pyriculariose et d’autres maladies de plantes, telles que la rouille du soja ( Phakopsora pachyrhizi), la rouille de la tige de blé ( Puccinia graminis ), le charbon du maïs ( Ustilago maydis ) et le mildiou de la pomme de terre ( Phytophtora infestans ) contribuent à la perte de 125 millions de tonnes de ces cultures (quantité suffisante pour nourrir 600 millions de personnes), et causent un manque à gagner global de 60 milliards de dollars US (Fisher et al., Nature, 2012, 484(7393): 186-194). De plus, bien que hautement improbable, il a été estimé que des épidémies simultanées des 5 principales cultures vivrières (riz, blé, soja, pomme de terre et maïs) entraîneraient une famine catastrophique dans le monde, affectant 2,7 milliards de personnes (Fisher et al., Nature, 2012, 484(7393): 186-194). Dans le passé, les champignons ont sérieusement compromis la sécurité alimentaire. Par exemple, dans les années 1840, Foomycète Phytophthora infestans a provoqué la Grande Famille en Irlande, entraînant la mort d’un million de personnes et le déplacement géographique d’un autre million de personnes, résultant en une diminution de 20% de la population irlandaise (Fry et al., BioScience, 1997, 47: 363-371). Cet évènement n’a pas seulement été une tragédie humanitaire, mais a également eu une incidence considérable sur l’évolution de l’histoire politique et économique de l’Europe. En Inde, la famine du Bengale en 1943 a été responsable de la mort de 2 à 4 millions de personnes - mort résultant, au moins en partie, des pertes des cultures de riz causées par Cochliobolus miyabeanus (Padmanabhan, Annu. Rev. Phytopathol., 1973, 11, 11-24). Dans le sud des Etats-Unis, Cochliobolus heterostrophus a été à l’origine d’une épidémie de mildiou dans les années 1971-72, qui a résulté en des pertes très importantes de récoltes (Ullstrup, Annu. Rev. Phytopathol., 1972, 10: 37-50).
Mais les maladies cryptogamiques ne sont pas des “choses du passé”, et le XXIeme siècle est loin d’en être épargné. Le phénomène est, au contraire, en pleine expansion. Aujourd’hui, une plante sur huit, en moyenne, ne donnera pas de fruits à cause des maladies fongiques, et ce malgré l’effet positif des politiques de protection des cultures. A cela s’ajoute l’apparition de souches virulentes de champignons phytopathogènes. Ainsi, par exemple, Puccinia graminis , qui est un redoutable champignon responsable de la rouille noire du blé, dont une souche virulente est apparue en 1999 en Ouganda, s’est depuis étendu à plusieurs pays d’Afrique et du Moyen Orient et a anéanti 80% des récoltes de certaines régions d’Afrique au début des années 2000. Ce champignon qui risque de se propager rapidement au-delà des régions déjà affectées pourrait provoquer un désastre dans la production de blé et mettre en danger la sécurité alimentaire dans le monde, et ce d’autant plus qu’il s’est montré virulent contre plusieurs gènes de résistance qui, auparavant, protégeaient le blé contre la rouille noire.
Aujourd’hui, nous sommes mal équipés pour contrôler l’émergence et la prolifération des maladies fongiques et éviter une perte de biodiversité et des pénuries alimentaires à l’avenir. Il existe donc toujours un besoin de nouvelles stratégies de lutte contre les maladies cryptogamiques.
Résumé de l’Invention
D’une façon générale, la présente invention concerne l’utilisation de l’acide 4- phénylbutyrique (4-PBA) et/ou de l’acide 3-phénylbutyrique (3-PBA) et/ou de l’acide 2-phénylbutyrique (2-PBA) pour prévenir ou traiter les maladies cryptogamiques causées par les champignons et les oomycètes. Les inventeurs ont en effet montré que le 4-PBA permet de protéger les plantes contre la pourriture grise causée par le champignon Botrytis cinerea, le 4-PBA ayant une activité fongistatique ou fongicide ; et que le 4-PBA peut plus généralement être utilisé pour traiter une large gamme de maladies cryptogamiques causées par des champignons ou des oomycètes. Comparé aux principes actifs chimiques actuellement disponibles sur le marché, le 4-PBA a l’avantage de n’être toxique ni pour l’homme ni pour l’environnement aux doses utilisées, y compris pour les plantes auxquelles il est administré. De plus, il est relativement peu coûteux. Les inventeurs ont de plus montré que le 4-PBA est capable de limiter la croissance de l’hyphe primaire de plusieurs souches de Zymoseptoria tritici (ou Mycosphaerella graminicola ), présentant une résistance simple ou une résistance multiple à différentes classes de fongicides chimiques couramment employés. L’acide 3-phénylbutyrique (3-PBA) et l’acide 2-phénylbutyrique (2-PBA) ont chacun également été démontrés comme ayant ce même effet fongistatique ou fongicide. De plus, l’association de 3-PBA avec le 4-PBA, à des concentrations respectives où aucune des deux molécules ne montre d’activité antifongique in vivo , permet pourtant de protéger la tomate contre la pourriture grise causée par Botrytis cinerea , révélant une synergie d’action entre ces deux molécules.
En conséquence, dans un premier aspect, la présente invention concerne l’utilisation de 2-PBA, ou de 3-PBA, ou de 4-PBA, ou de l’un de leurs sels, ou de l’une de leurs combinaisons, en tant qu’ agent fongicide ou fongistatique, pour la prévention ou le traitement d’une maladie cryptogamique affectant une plante ou un produit végétal. La maladie cryptogamique est causée par un champignon ou un oomycète.
Le champignon ou l’ oomycète peut être biotrophe, nécrotrophe ou hémibiotrophe. Dans certains modes de réalisation préférés, le champignon ou l’ oomycète est biotrophe.
Dans certains modes de réalisation, le champignon est choisi parmi les champignons phytopathogènes appartenant aux genres Alternaria, Athelia, Armillaria, Aspergillus, Bipolaris, Blumeria, Botrytis ( Cochliobolus ), Carpenteles, Ceratocystis, Cercospora, Choanephora, Cladosporium, Claviceps, Colletotrichum, Cryphonectria, Diaporthe ( Phomopsis ), Erysiphe, Eurotium, Fusarium, Ganoderma, Gibberella, Glomerella, Magnaporthe, Macalpinomyces, Melampsora, Monilia, Moniliophthora, Microcyclus, Mycena, Mycosphaerella, Nectria, Neonectria, Olpidium, Pénicillium, Pestalotia, Phakopsora, Phanerochaete, Phellinus, Physoderma, Pleospora,
Podosphaera, Puccinia, Rhizoctonia, Rhizopus, Sclerotinia, Seiridium, Stemphylium, Septoria, Sphaerotheca, Sporisorium, Synchytrium, Taphrina, Tilletia, Thanatephorus , Trichoderma, Typhula, Ulocladium, Ustilago, Urocystis, Uromyces, Verticillium et Zymoseptoria.
Dans certains modes de réalisation, l’ oomycète est choisi parmi les oomycètes phytopathogènes appartenant aux genres Albugo, Aphanomyces, Bremia, Peronospora, Peronosclerospora, Phytophthora, Plasmodiophora, Plasmopara, Polymyxa,
Pseudoplasmopara, Pythium, Sclerophthora et Sclerospoara.
Dans certains modes de réalisation, la plante est une plante de grande culture, une plante potagère, une plante d’ornement, un arbre ou un arbuste.
Dans certains modes de réalisation, la plante est une plante appartenant à la famille des Malvacées, des Solanacées, des Cucurbitacées, des Crucifères ou Brassicacées, des Composées ou Astéracées, des Ombellifères ou Apiacées, des Liliacées ou Asparagacées, des Rosacées, des Polygonacées, des Lamiacées, des Vitacées, des Fabacées, des Poacées, des Liliacées, des Rubiacées, des Musacées, Orchidacées, des Lauracées, des Alliacées, des Chénopodiacées, des Valérianacées, des Caprifoliacées, des Verbénacées, des Plantaginacées, des Scrofulariacées, des Ericacées, des Primulacées, des Oléacées, des Apocynacées, des Asclépiadacées, des Gentianacées, des Boraginacées, des Araliacées, des Grossulariacées, des Myrtacées, des Eléagnacées, des Lythracées, des Onagracées, des Thyméléacées, des Passifloracées, des Tiliacées, des Bombacacées, des Linacées, des Géraniacées, des Rutacées, des Violacées, des Cistacées, des Hypéricacées, des Théacées, des Myristicacées, des Papavéracées, des Fumariacées, des Anonacées, des Renonculacées, des Caryophyllacées, des Fagacées, des Juglandacées, des FTrticacées, des Moracées, des Santalacées, des Cannabinacées, des Piperacées, des Salicacées, des Bétulacées, des Arécacées, des Zingibéracées, des Broméliacées, des Pinacées, des Cupressacées, des Ginkgoacées, des Cycadacées, des Équisétacées, des Fycopodes ou des sélaginelles.
Fe produit végétal peut être choisi parmi les semences, les graines, les tubercules, et les bulbes. Alternativement, le produit végétal peut être choisi parmi les fruits, les légumes, et les grains post-récolte. Fe produit végétal peut également être un produit alimentaire de 4eme gamme. En variante, le produit végétal peut être du bois post-coupe, par exemple du bois de construction.
Dans certains modes de réalisation, la maladie cryptogamique affectant la plante ou le produit végétal est choisie dans le groupe constitué par la pourriture grise ou botrytis, le mildiou, la fusariose, la cercosporiose, Poïdium, l’alternariose, l’anthracnose, les charbons, les caries, la septoriose, la moniliose ou monilia, la rouille, l’helminthosporiose, la sclérotiniose, la tavelure, la verticilliose, la cladosporiose, la cloque, la coryneum ou maladie criblée, l’entomosporiose, la fonte des semis, l’esca, l’eutypiose, la gommose, la gravelle, le mal secco, le pied noir, la pyriculariose, et la graphiose de l’orme.
Dans certains modes de réalisation, la maladie cryptogamique est causée par un champignon ou un oomycète résistant à au moins un fongicide conventionnel (en particulier un fongicide de synthèse). Dans certains modes de réalisation, la maladie cryptogamique est la septoriose du blé causée par le champignon Zymoseptoria tritici, en particulier une souche de Zymoseptoria tritici qui présente une résistance simple ou une résistance multiple aux fongicides conventionnels, tels que fongicides appartenant aux classes des benzimidazoles, des inhibiteurs du cytochrome b, des inhibiteurs de succinate déshydrogénase, ou des inhibiteurs de déméthylation des stérols.
F’utilisation de 2-PBA, ou de 3-PBA, ou de 4-PBA, ou de l’un de leurs sels, ou de l’une de leurs combinaisons décrite ici peut résulter en une amélioration de la conservation des produits végétaux (par exemple dans le cas des fruits, des légumes, des grains post-récolte, dans le cas des produits alimentaires de 4eme gamme, et dans le cas du bois post-coupe). L’utilisation peut également résulter en une protection des semences et/ou à une amélioration de la levée des semis dans le cas des semences et des graines.
Sont également fournies ici des méthodes pour la mise en œuvre de l’invention.
Ainsi, l’invention concerne aussi une méthode pour la prévention ou le traitement d’une maladie cryptogamique chez une plante ou un produit végétal, la méthode comprenant l’application de 2-PBA, ou de 3-PBA, ou de 4-PBA, ou de l’un de leurs sels, ou de l’une de leurs combinaisons, à la plante ou au sol environnant la plante ou au produit végétal. La maladie cryptogamique est causée par un champignon ou un oomycète. Préférablement, le 2-PBA ou l’un de ses sels, le 3-PBA ou l’un de ses sels, le 4-PBA ou l’un de ses sels, ou l’une de leurs combinaisons, est appliqué(e) en une quantité efficace pour inhiber la germination ou la croissance du champignon ou de G oomycète, et/ou pour inhiber le mouvement des zoospores de G oomycète, et/ou pour détruire (causer la mort) du champignon ou de G oomycète.
En conséquence, l’invention concerne également une méthode de destruction d’un champignon ou oomycète phytopathogène et/ou d’inhibition de la croissance d’un champignon ou oomycète phytopathogène pour prévenir et/ou traiter une maladie cryptogamique affectant une plante ou un produit végétal, la méthode comprenant l’application de 2-PBA ou l’un de ses sels, de 3-PBA ou l’un de ses sels, de 4-PBA ou l’un de ses sels, ou d’une de leurs combinaisons, à la plante et/ou au sol environnant la plante ou au produit végétal.
Dans ces méthodes, le champignon ou l’oomycète, la plante ou le produit végétal, et la maladie cryptogamique sont comme décrits plus haut.
Dans certains modes de réalisation, les utilisations et les méthodes selon l’invention sont caractérisées en ce que le 2-PBA, ou le 3-PBA, ou le 4-PBA, ou l’un de leurs sels, ou l’une de leurs combinaisons, est appliqué(e) pré-émergence de la plante. Alternativement ou additionnellement, le 2-PBA, ou le 3-PBA, ou le 4-PBA, ou l’un de leurs sels, ou l’une de leurs combinaisons, est appliqué(e) post-émergence de la plante.
Dans certains modes de réalisation, les utilisations et les méthodes selon l’invention sont caractérisées en ce que le 2-PBA, ou le 3-PBA, ou le 4-PBA, ou l’un de leurs sels, ou l’une de leurs combinaisons, est appliqué(e) aux parties aériennes de la plante, aux racines de la plante, aux semences, tubercules ou bulbes de la plante, et/ou aux fruits ou grains de la plante.
L’invention concerne aussi une méthode pour améliorer la conservation d’un produit végétal susceptible d’être affecté par un champignon ou oomycète phytopathogène, la méthode comprenant l’application d’une quantité efficace de 2- PBA, ou le 3-PBA, ou de 4-PBA, ou de l’un de leurs sels ou de l’une de leurs combinaisons, au produit végétal, la méthode étant caractérisée en ce que la quantité efficace est suffisante pour inhiber la germination ou la croissance du champignon ou de l’oomycète phytopathogène, et/ou pour inhiber le mouvement des zoospores de l’ oomycète, et/ou pour détruire (causer la mort) du champignon ou de l’oomycète, et prévenir ainsi une maladie cryptogamique.
Dans cette méthode, le champignon ou l’oomycète, le produit végétal, et la maladie cryptogamique sont comme décrits plus haut. L’invention concerne également une méthode de protection des semences ou d’amélioration de la levée des semis, la méthode comprenant l’application d’une quantité efficace de 2-PBA, ou le 3-PBA, ou de 4-PBA, ou de l’un de leurs sels ou de l’une de leurs combinaison, à des graines destinées aux semis, la méthode étant caractérisée en ce que les graines sont susceptibles d’être affectées par un champignon ou oomycète phytopathogène et en ce que la quantité efficace est suffisante pour inhiber la germination ou la croissance du champignon ou de l’oomycète phytopathogène, et/ou pour inhiber le mouvement des zoospores de l’oomycète, et/ou pour détruire (causer la mort) du champignon ou de l’oomycète, et prévenir ainsi une maladie cryptogamique.
Dans certains modes de réalisation de cette méthode de protection des semis ou d’amélioration de la levée des semis, le champignon ou oomycète phytopathogène est responsable de la fonte des semis, et la maladie cryptogamique est la fonte des semis.
L’invention concerne également une composition phytosanitaire comprenant, en tant qu’agent fongicide ou fongistatique, du 2-PBA, ou le 3-PBA, ou du 4-PBA, ou l’un de leurs sels, ou l’une de leurs combinaisons. L’invention concerne aussi une solution d’enrobage ou de pelliculage des semences comprenant, en tant qu’agent fongicide ou fongistatique, du 2-PBA, ou le 3- PBA, ou du 4-PBA, ou l’un de leurs sels, ou l’une de leurs combinaisons. Une description plus détaillée de certains modes de réalisation préférés de l’invention est donnée ci-dessous.
Légendes des Figures
Figure 1. Protection de l’Arabette des Dames (Arabidopsis thaliana, écotype Columbia-0) contre B. cinerea par le 4-PBA. Voir Exemple 1.
Figure 2. Protection de la tomate (Moneymaker) contre B. cinerea par le 4-PBA. Voir Exemple 1.
Figure 3. Protection de la tomate (M82) contre B. cinerea par le 4-PBA. Voir Exemple 1.
Figure 4. Protection de la Vigne {Vilis vinifera cv. Gamay ) contre B. cinerea par le 4-PBA. Voir Exemple 1.
Figure 5. Evaluation de l’Impact du 4-PBA sur la Croissance à’ Arabidopsis thaliana , et évaluation de la Phytotoxicité du 4-PBA chez Arabidopsis thaliana. Voir Exemple 2.
Figure 6. Inhibition de la Croissance Radiale du Mycélium de B. cinerea par le 4- PBA. Voir Exemple 3.
Figure 7. Inhibition de la Germination des Spores et de la Croissance de l’Hyphe Primaire de B. cinerea par le 4-PBA. Voir Exemple 3.
Figure 8. Effet du 2-PBA et du 3-PBA sur la Germination des Spores et la Croissance Mycélienne de B. cinerea en Milieu Liquide in vitro, et Effet Direct du 3- PBA sur la Croissance de l’Hyphe Primaire de B. cinerea en Milieu Liquide in vitro . Voir Exemple 4.
Figure 9. Protection de la Tomate contre la Pourriture Grise par une Combinaison de 4-PBA et d’un de ces Isomères, le 3-PBA. Voir Exemple 5.
Figure 10. Inhibition de la Croissance Radiale du Mycélium de Différentes Espèces de Champignons Phytopathogènes par le 4-PBA ((a) Fusarium graminearum, (b) Fusarium verticilloides, (c) Leptosphaeria maculans, (d) Flelminthosporium teres et (e) Magnaporthe oryzae). Voir Exemple 6.
Figure 11. Inhibition de la Croissance Radiale du Mycélium de Différentes Espèces de Champignons Phytopathogènes par le 4-PBA ((a) Fusarium oxysporum f. sp. melonis, (b) Colletotrichum lindemuthianum, (c) Alternaria solani, (d) et (e) pour les souches respectives 1 et 1509 d 'Alternaria brassicicola, (f) Sclerotinia sclerotorum et (g) Cercospora beticold). Voir Exemple 6.
Figure 12. Inhibition de la Croissance Radiale de Deux Oomycètes Phytopathogènes par le 4-PBA. Voir Exemple 7.
Figure 13. Inhibition de la Croissance Radiale du Mycélium de Phanerochaete chrysosporium par le 4-PBA. Voir Exemple 8.
Figure 14. Effet de concentrations croissantes en 4-PBA sur la croissance de l’hyphe primaire de sept isolats du champignon Zymoseptoria tritici in vitro. L’axe des abscisses fait référence aux concentrations en 4-PBA (C) utilisées dans l’essai (exprimées en logarithme décimale) alors que l’axe des ordonnées fait référence aux pourcentages d’inhibition de la longueur de l’hyphe primaire calculés par rapport à des témoins ayant poussés sans 4-PBA. Les caractéristiques des sept isolats étudiés sont présentées dans le tableau 4. Voir Exemple 9. Description des Modes de Réalisation
Comme mentionné plus haut, la présente invention concerne l’utilisation de l’acide 4-phénylbutyrique (4-PBA) ou de l’acide 3-phénylbutirique (3-PBA) ou de l’acide 2-phénylbutirique (2-PBA) ou de l’un de leurs sels ou de l’une de leurs combinaisons en tant qu’ agent fongicide ou fongistatique pour prévenir ou traiter une maladie chez une plante ou un produit végétal.
I - 4-PBA, 3-PBA, 2-PBA, leurs Sels et leurs Combinaisons
1. Le 4-PBA et ses Sels
L’acide 4-phénylbutyrique (également appelé acide 4-phénylbutanoïque), 4-PBA, est une petite molécule qui, en raison de ses propriétés biologiques, a trouvé application dans le domaine de la pharmacie et dont l’utilisation dans le domaine de l’agriculture a récemment été proposée.
Le 4-PBA est une molécule chaperonne, c’est-à-dire une molécule qui assiste les protéines dans leur maturation en leur assurant un repliement tridimensionnel adéquat (Cohen et al., Nature, 2003, 426: 905-909). Plusieurs études ont montré que, chez les mammifères, le 4-PBA inhibe le stress du réticulum endoplasmique et abolit le déclenchement de l’UPR (Unfolded Protein Response). Le 4-PBA est approuvé pour le traitement des maladies du cycle de l’urée (Maestri et al., N. Engl. J. Med., 1996, 335: 855-859), et a été proposé comme agent thérapeutique dans le traitement de pathologies comme le diabète de type 2 et les maladies neurodégénératives.
Chez les plantes, il a été reporté que l’application de 4-PBA aux cultures permet de contrôler la production d’auxine (une phytohormone de croissance végétale) et d’augmenter ainsi leurs rendements (Brevet US 6,245,717). L’application de 4-PBA aux plantes a également été décrite comme résultant en une amélioration de la résistance des plantes aux stress abiotiques, comme la sécheresse, la chaleur ou l’aridité (Demande US 2012/0077677). Il a été démontré qu’il est possible de prévenir la fusariose de l’épi, une maladie causée par Fusarium graminearum, un champignon nécrotrophe du genre Fusarium, par application de molécules chaperonnes, telles que le 4-PBA, aux cultures (Demande US 2010/0261694), la molécule chaperonne agissant en supprimant la mort cellulaire programmée des cellules végétales causée par le champignon. Enfin, les présents inventeurs ont décrit les propriétés antibactériennes du 4-PBA et son utilisation dans le traitement et la prévention de maladies végétales (WO 2014/009402).
Dans le contexte de l’invention, le 4-PBA peut être utilisé sous forme d’acide 4- phénylbutyrique ou sous la forme d’un de ses sels. Par “sel de 4-PBA”, on entend tout composé obtenu en faisant réagir le 4-PBA, faisant fonction d’acide, avec une base appropriée pour former, par exemple, un sel de métal alcalin, tel que le sodium, le potassium, et le lithium; un sel de métal alcalino-terreux, tel que le calcium et le magnésium; un sel d’un métal de transition, tel que le manganèse, le cuivre, le zinc et le fer; un sel d’ammonium; un sel de phosphonium; un sel de sulfonium; un sel d’oxonium; un sel de choline; ou encore un sel avec une base organique contenant un atome d’azote, telle que la triméthylamine, la triéthylamine, la tributylamine, la N,N- diméthylaniline, la N-méthylpipéridine, la N-méthylmorpholine, la diéthylamine, la dicyclohexylamine, la dibenzylamine, la pyridine, la guanidine, l’hydrazine et la quinine. Préférablement, un sel de 4-PBA utilisé dans la mise en œuvre de la présente invention est un sel de sodium, de potassium, de calcium, de magnésium, de manganèse, de cuivre, de zinc, de fer, d’ammonium, de phosphonium, de sulfonium, ou d’oxonium.
Le 4-PBA peut être synthétisé par n’importe quelle méthode, par exemple par réaction du benzène avec la butyrolactone en présence de chlorure d’aluminium suivie d’une neutralisation en présence de base comme décrit dans le brevet US 6,372,938. 2. Le 3-PBA et ses Sels
L’acide 3-phénylbutyrique (également appelé acide 3-phénylbutanoïque) est un isomère du 4-PBA. Comme indiqué plus haut et comme démontré dans la partie expérimentale, l’acide 3-phénylbutyrique, tout comme 4-PBA, présente une activité fongistatique ou fongicide.
Dans le contexte de la présente l’invention, le 3-PBA peut être utilisé sous forme d’acide 3-phénylbutyrique ou sous la forme d’un de ses sels. Par “sel de 3-PBA”, on entend tout composé obtenu en faisant réagir le 3-PBA, faisant fonction d’acide, avec une base appropriée comme indiqué ci-dessus dans le cas du 4-PBA. Préférablement, un sel de 3-PBA utilisé dans la mise en œuvre de la présente invention est un sel de sodium, de potassium, de calcium, de magnésium, de manganèse, de cuivre, de zinc, de fer, d’ammonium, de phosphonium, de sulfonium, ou d’oxonium.
Le 3-PBA peut être synthétisé par n’importe quelle méthode, par exemple par réaction (Fujisawa et al., Tetrahedron Letters, 1980, 21(22): 2181-2184). Le 3-PBA peut également être obtenu par dégradation d’hydrocarbures par certains microorganismes (Simoni et al., Applied and Environmental Microbiol., 1996, 62(3): 749-755 ; Le Thi Nhi-Cong et al., Journal of Basic Microbiology, 2010, 50(3): 241- 253).
3. Le 2-PBA et ses Sels L’acide 2-phénylbutyrique (également appelé acide 2-phénylbutanoïque) est un isomère du 2-PBA. Comme indiqué plus haut et comme démontré dans la partie expérimentale, l’acide 2-phénylbutyrique, tout comme 4-PBA et le 3-PBA, présente une activité fongistatique ou fongicide.
Dans le contexte de la présente l’invention, le 2-PBA peut être utilisé sous forme d’acide 2-phénylbutyrique ou sous la forme d’un de ses sels. Par “sel de 2-PBA”, on entend tout composé obtenu en faisant réagir le 2-PBA, faisant fonction d’acide, avec une base appropriée comme indiqué ci-dessus dans le cas du 4-PBA et du 3-PBA. Préférablement, un sel de 2-PBA utilisé dans la mise en œuvre de la présente invention est un sel de sodium, de potassium, de calcium, de magnésium, de manganèse, de cuivre, de zinc, de fer, d’ammonium, de phosphonium, de sulfonium, ou d’oxonium.
Le 2-PBA peut être synthétisé par n’importe quelle méthode (Aratake et al., Préparation of 2-phenylbutyric acids, Jpn. Kokai Tokkyo Koho, 1998, 4pp). 2-PBA peut également être produit par des bactéries du genre Nocardia lorsqu’elles sont cultivées en milieu liquide en présence d’un hydrocarbure, le phényldodécane (Baggi et al., Biochem. J., 1972, 126 : 1091-1097).
4. Combinaisons de 4-PBA, 3-PBA et 2-PBA Les inventeurs ont démontré que l’association du 3-PBA avec le 4-PBA, à des concentrations respectives où aucune des deux molécules ne présente d’activité antifongique in vivo, permet pourtant de protéger la tomate contre la pourriture grise causée par le champignon Botrytis cinerea. Une synergie d’action entre le 3-PBA et le 4-PBA a donc été mise en évidence. Les termes “synergie”, “action synergique” et “synergie d’action”, qui sont utilisés ici de manière interchangeable, désignent une action coordonnée des deux molécules créant un effet plus grand que la somme des effets attendus si elles avaient opéré indépendamment, ou créant un effet que chacune d’entre elles n’aurait pas pu obtenir en agissant isolément.
Une combinaison de 3-PBA et de 4-PBA (ou de leurs sels) peut donc avantageusement être utilisée dans le contexte de la présente invention. Par “combinaison”, on entend ici un mélange (ou admixtion) pré-préparé des deux molécules ou bien une administration simultanée, séparée ou séquentielle des deux molécules. Lorsque l’administration est séquentielle ou séparée, le délai entre l’administration de la première molécule et l’administration de la deuxième molécule doit être tel que l’effet synergique bénéfique de la combinaison est conservé. Cela s’applique également à une combinaison de 3-PBA et de 2-PBA (ou de leurs sels) et à une combinaison de 2-PBA et de 4-PBA (ou de leurs sels), qu’il existe ou non une synergie entre les deux molécules.
Lorsqu’une combinaison de 3-PBA et de 4-PBA (ou de leurs sels) est un mélange (ou admixtion), ce mélange peut être préparé dans n’importe quelles proportions appropriées pour atteindre le but recherché. De même, lorsqu’une combinaison correspond à une administration simultanée, séparée ou séquentielle de 3-PBA et de 4- PBA (ou de leurs sels), les deux molécules peuvent être administrées dans n’importe quelle proportion appropriée. Ainsi le rapport 3-PBA:4-PBA peut varier d’environ 99:1 (w/w = poids/poids) à environ 1:99 (w/w), et être par exemple environ 95:5 (w/w), environ 90:10 (w/w), environ 85:15 (w/w), environ 80:20 (w/w), environ 75:25 (w/w), environ 70:30 (w/w), environ 65:35 (w/w), environ 60:40 (w/w), environ 55:45 (w/w), environ 50:50 (w/w), environ 45:55 (w/w), environ 40:60 (w/w), environ 35:75 (w/w), environ 30:70 (w/w), environ 25:75 (w/w), environ 20:80 (w/w), environ 15:85, environ 10:90 (w/w) ou environ 5:95 (w/w). Le terme “environ”, tel qu’utilisé ici en référence à un nombre, comprend généralement des nombres qui se situent dans une fourchette de 10% dans l’une ou l’autre direction du nombre (supérieur ou inférieur au nombre), sauf dans le cas où ce nombre dépasse 100% d’une valeur possible. Cela s’applique également à une combinaison de 3-PBA et de 2-PBA (ou de leurs sels) et à une combinaison de 2-PBA et de 4-PBA (ou de leurs sels).
Une combinaison de 3-PBA, de 2-PBA et de 4-PBA (ou de leurs sels) peut également avantageusement être utilisée dans le contexte de la présente invention. Par “combinaison”, on entend ici un mélange (ou admixtion) pré-préparé des trois molécules ou bien une administration simultanée, séparée ou séquentielle des trois molécules. De même, lorsqu’une combinaison correspond à une administration simultanée, séparée ou séquentielle de 3-PBA, de 2-PBA et de 4-PBA (ou de leurs sels), les trois molécules peuvent être administrées dans n’importe quelle proportion appropriée. Ainsi le rapport 3-PBA:2-PBA:4-PBA peut varier d’environ 98:1:1 (w/w = poids/poids) à environ 1:98:1 (w/w = poids/poids) à environ 1:1:98 (w/w = poids/poids).
5. Compositions
Généralement, le 4-PBA, ou le 3-PBA, ou le 2-PBA, ou l’un de leurs sels, ou l’une de leurs combinaisons, est appliqué(e) aux plantes ou produits végétaux sous la forme d’une solution aqueuse. Le 4-PBA, ou le 3-PBA, ou le 2-PBA, ou l’un de leurs sels, ou l’une de leurs combinaisons peut être utilisé(e) seul(e) ou en combinaison avec d’autres substances comme, par exemple, des insecticides, des acaricides, des fongicides, des nématicides, des bactéricides, des herbicides, des phytoprotecteurs, des régulateurs de croissance végétal des compléments d’éléments nutritifs, et/ou des engrais.
Une composition phytopharmaceutique ou phytosanitaire comprenant, en tant qu’ agent fongicide ou fongistatique, du 4-PBA, ou du 3-PBA, ou du 2-PBA, ou l’un de leurs sels, ou l’une de leurs combinaisons, est un objet de la présente invention. II - Utilisations du 4-PBA, 3-PBA, 2-PBA leurs Sels et leurs Combinaisons comme Agents Fongicides ou Fongistatiques
Les inventeurs ont mis en évidence un effet antifongique du 4-PBA, du 3-PBA, du 2-PBA, de leurs sels et de leurs combinaisons (“les composés et combinaisons décrits ici”) sur certains champignons et oomycètes phytopathogènes. Par “antifongique” , on entend désigner ici une substance qui tue (effet fongicide) les champignons et/ou oomycètes et/ou qui ralentit (effet fongistatique) la croissance et/ou la multiplication des champignons et/ou oomycètes. En conséquence, l’invention concerne l’utilisation de 4- PBA, ou de l’un de ses sels, de 3-PBA, ou de l’un de ses sels, de 2-PBA, ou de l’un de ses sels, ou de l’une de leurs combinaisons, comme agent fongicide ou fongistatique pour la prévention et/ou le traitement de maladies causées par des champignons ou des oomycètes chez les plantes et/ou les produits végétaux.
1. Champignons et Oomycètes Phytopathogènes
Par “ champignons et oomycètes phytopathogènes” , on entend désigner ici des champignons et oomycètes susceptibles de provoquer des maladies chez les plantes et/ou les produits végétaux. Les inventeurs ont démontré que le 4-PBA avait un très large spectre d’action, présentant une activité contre des champignons très distants d’un point de vue phylogénétique, que ces phytopathogènes soient biotrophes ou nécrotrophes ou encore hémibiotrophes. Le terme “ biotrophe ” désigne un agent pathogène qui colonise les tissus vivants d’une plante, et le terme “ nécrotrophe désigne un agent pathogène qui tue les cellules végétales avant de les coloniser. Le terme “ hémibiotrophe ” désigne un agent pathogène présentant une courte phase d’exploitation biotrophe suivie d’une phase d’exploitation nécrotrophe. Ainsi, la présente invention peut être utilisée pour la prévention ou le traitement d’une maladie qui affecte une plante ou un produit végétal et causée par un champignon ou un oomycète biotrophe, nécrotrophe ou hémibiotrophe. a. Les Champignons Phytopathogènes. Les champignons phytopathogènes qui peuvent être détruits ou dont la croissance peut être inhibée par l’un des composés et combinaisons décrits ici peuvent appartenir à n’importe lequel des différents groupes du règne des eumycètes ou ‘champignons vrais’, à savoir les Ascomycètes, les Basidiomycètes et les Chytridiomycètes. Les deux groupes les plus importants de champignons phytopathogènes sont les Ascomycètes qui causent par exemple la pourriture grise ou botrytis, les fusarioses, les oïdiums, les septorioses, la tavelure, et G ergot de seigle, et les Basidiomycètes qui provoquent par exemple les rouilles et les charbons.
Les Ascomycètes (ou Ascomycota) constituent une vaste division des champignons qui sont caractérisés par des spores formées à l’intérieur d’asques. Ils contiennent de nombreuses espèces utiles à l’Homme comme les levures utilisées en boulangerie, brasserie et vinification, des champignons comestibles comme les morilles et les truffes, mais également de nombreux champignons phytopathogènes des plantes cultivées. Parmi les ascomycètes qui causent des maladies cryptogamiques que l’on peut prévenir ou traiter en utilisant la présente invention, on trouve le Botrytis cinerea qui est responsable de la pourriture grise qui sévit sur plusieurs cultures d’intérêt agronomique majeur comme la vigne, le tournesol, la tomate, la fraise. Botrytis cinerea fait partie de la liste des dix agents pathogènes fongiques les plus importants sur le plan scientifique et économique qui a été établie en 2012 (Dean et al., Mol. Plant Pathol., 2012, 13(4): 414-430). Une autre espèce du genre Botrytis est Botrytis pseudocinerea qui a un large spectre similaire à celui de B. cinera.
D’autres exemples d’ascomycètes phytopathogènes incluent les champignons du genre Colletotrichum, qui est l’un des plus importants groupes de champignons phytopathogènes au niveau mondial. Les champignons du genre Colletotrichum attaquent plus de 3200 espèces de plantes monocotylédones et dicotylédones et sont responsables de nombreuses maladies cryptogamiques, notamment les anthracnoses, particulièrement dommageables lorsqu’elles affectent les fruits. Les espèces de Colletotrichum font également partie de la liste des dix agents pathogènes fongiques les plus importants sur le plan scientifique et économique. Des exemples d’espèces du genre Colletotrichum (C.) incluent, sans limitation, C. acutatum (qui affecte en particulier le fraisier, le myrtillier, l’amandier, les agrumes, l’avocatier, le manguier, l’olivier, le pêcher), C. arachidis, C. capsici, (qui affecte le basilic, le pois-chiche, le poivre et le pois cajan), C. cereale, (qui affecte le gazon), C. chlorophyti (qui affecte diverses espèces de plantes herbacées, notamment les légumineuses), C. cojfeanum (qui affecte les caféiers), C. coccodes (qui affecte le houblon, la tomate et la pomme de terre), C. crassipes, C. dematium (qui se conserve sur les résidus de culture, les semences et certaines plantes adventices), C. dematium f. spinaciae (qui affecte la betterave à sucre), C. gloeosporioides (qui affecte en particulier les tomates et les olives), C. glycines (qui affecte le soja et la tomate), C. gossypii (qui affecte les cotonniers), C. graminicola (qui affecte les céréales et notamment le maïs), C. higginsianum (qui affecte de nombreuses plantes de la famille des Brassicacées), C. kahawae (qui affecte les baies de caféiers sur les cultures de Cojfea arabica ), C. lindemuthianum (qui affecte le haricot), C. lini, C. mangenotii, C. musae (qui affecte les bananes et les plantains), C. nigrum (qui affecte les tomates), C. orbiculare (qui affecte les melons et le concombre), C. pisi, C. sublineola (qui affecte le riz sauvage et le sorgho), C. tabacum (qui affecte les plants de tabac dans les pépinières), C. theaesinensis (qui affecte les théiers), C. trifolii (qui affecte la luzerne), C. truncatum (qui a une large gamme d’hôtes et affecte notamment le poivron, l’aubergine, le melon, le pois chiche, et les raisins).
D’autres exemples d’ascomycètes causant des maladies cryptogamiques que l’on peut détruire ou dont on peut inhiber la croissance ou la germination en utilisant la présente invention incluent les champignons imparfaits ou Deutéromycètes, qui sont des champignons septés, à hyphes septés, qui se multiplient de façon non-sexuée. Les deux genres majeurs de deutéromycètes sont: Fusarium et Aspergillus. Les champignons du genre Fusarium causent une maladie appelée fusariose. Deux espèces du genre Fusarium (F.) font partie de la liste des dix agents pathogènes fongiques les plus importants sur le plan scientifique et économique: F. graminearum (qui affecte les céréales, notamment le blé, le maïs et l’orge) et F. oxysporum (qui affecte de nombreuses plantes cultivées comme le bananier, le cotonnier, le melon, la tomate, etc.). D’autres espèces de Fusarium incluent, sans limitation, F. culmorum (qui affecte les céréales, la pomme de terre, l’asperge, et qui est responsable de divers symptômes dont la fonte des semis), F. crookwellense (qui affecte de très nombreuses plantes cultivées, dont le blé, le maïs, le framboisier, le peuplier, la pomme de terre, etc.), F. euwallaceae (qui affecte de nombreuses espèces d’arbres, notamment les feuilles des Aceraceae, Fabaceae et Fagaceae, et qui représente une menace sérieuse pour les cultures d’avocatiers), F. solani (qui affecte les pois, les haricots, la pomme de terre et de nombreux types de cucurbitacées), F. sulphureum (qui affecte la pomme de terre), F. avenaceum (qui affecte de nombreuses plantes cultivées comme le blé, le maïs, la pomme de terre, le framboisier, le peuplier, etc.), F. moniliforme (qui est l’un des champignons les plus répandus dans les échantillons alimentaires de base tels que le maïs), F. proliferatum (qui affecte l’asperge, le maïs, le riz, et d’autres cultures), F. sporotrichioides (qui affecte les cultures céréalières), F. subglutinans (qui affecte le maïs et la mangue), F. verticillioides (qui affecte le blé et le maïs), etc.
Les champignons deutéromycètes du genre Aspergillus se développent sur la matière organique en décomposition, dans le sol, le compost, les denrées alimentaires, les céréales. Ils n’attaquent pas les plantes pendant leur pleine croissance. Pour la plupart, ce sont des saprophytes classiques qui, à la faveur de blessures pénètrent dans certains fruits ou sur les porte-graines, surtout par temps chaud et humide. Lorsque les graines sont récoltées humides (ou qu’elles s’humidifient lors du stockage), les Aspergillus évoluent rapidement et se transforment en parasites, ce qui entraîne une diminution de la faculté germinative. Des exemples d’espèces du genre Aspergillus (A.) incluent, sans limitation, A. niger (qui est largement répandu sur le fourrage, les semences de maïs), A. flavus (qui colonise les semences de tournesol et de Poacées), A. ochraceus (qui est phytopathogène pour les pommes et les poires), A. ter reus (qui est fréquent sur les céréales ensilées, la paille, le fourrage et autres substrats végétaux). D’autres exemples d’ascomycètes phytopathogènes qu’il est possible de tuer ou dont il est possible d’inhiber la croissance en utilisant la présente invention incluent les champignons du genre Podosphaera qui sont responsables de diverses formes d’oïdium. Les plantes hôtes appartiennent pour la plupart à la famille des Rosaceae. Des exemples d’espèces du genre Podosphaera (P.) incluent, sans limitation, P. clandestina var. clandestina (qui affecte les abricots et les pêches), P. fiisca (qui affecte les melons et les courges), P. leucrotricha (qui affecte les pommes et les poires), P. macularis (qui affecte le houblon, la camomille, la canneberge, les fraises, le chanvre), P. pannosa (qui affecte les plantes de la famille des roses), P. tridactyla (qui affecte les amandes), P. fuliginea (qui affecte les Cucurbitacées). D’autres exemples d’ascomycètes phytopathogènes incluent les champignons du genre Mycosphaerella, en particulier la forme anamorphe: Spetoria, qui est responsable de nombreuses maladies appelées septorioses. Des exemples d’espèces du genre Mycosphaerella ( M .) incluent, sans limitation, M. arachidis, M. areola, M. berkeleyi, M. bolleana, M. brassicicola, M. caricae, M. caryigena, M. cerasella, M. coffeicola, M. confusa, M. cruenta, M. dendroides, M. eumusae, M. gossypina, M. graminicola (qui fait partie de la liste des dix agents pathogènes fongiques les plus importants sur le plan scientifique et économique), M. henningsii, M. horii, M. juglandis, M. lageniformis, M. linicola, M. louisianae, M. musae, M. musicola, M. palmicola, M. pinodes, M. pistaciarum, M. pistacina, M. platanifolia, M. polymorpha, M. pomi, M. punctiformis , M. pyri. Des exemples d’espèces du genre Spetoria (S.) incluent, sans limitation, S. dadauci, S. lactucae, S. leucanthemi, S. anthurii, S. bataticola, S. paeoniae, S. lycopersici, S. azaleae, S. hydrangeae, S. apiicola, S. chrysanthemella, S. adanensis, S. gladioli, S. petroselini, S. pisi, S. secalis, S. glycines, S. helianthi.
D’autres exemples d’ascomycètes phytopathogènes qu’il est possible de tuer ou dont il est possible d’inhiber la croissance en utilisant la présente invention incluent les champignons du genre Monilia (qui est le nom donné à la forme asexuée de Monïlinid). Ces champignons sont responsables d’une maladie des fruits appelée moniliose. Des exemples d’espèces de Monilia et Monilinia incluent, sans limitation, Monilia/Monilinia laxa (qui est responsable de la moniliose des arbres fruitiers à fruits à pépins), et Monilia/Monilinia fructigena (qui est responsable de la moniliose des arbres fruitiers à fruits à noyau).
D’autres exemples d’ascomycètes causant des maladies cryptogamiques que l’on peut prévenir ou traiter en utilisant la présente invention incluent les champignons du genre Sclerotinia, dont certaines espèces sont à l’origine de la pourriture blanche ou sclérotiniose. Des exemples d’espèces du genre Sclerotinia (S.) incluent, sans limitation, S. minor (qui affecte les carottes, les tomates, les tournesols, les cacahuètes et la laitue), S. cepivorum, S. sclerotiorum (qui affecte diverses plantes dont le colza, le tournesol, les haricots, la carotte, etc.), S. trifoliorum (qui affecte la luzerne, le trèfle rouge et le pois-chiche), S. borealis (qui affecte l’orge, le seigle et le blé), S. bulborum (qui affecte les plantes à bulbes).
D’autres exemples d’ascomycètes phytopathogènes qu’il est possible de détruire ou dont il est possible d’inhiber la croissance ou la germination en utilisant la présente invention incluent les champignons du genre Bipolaris (dont le stade téléomorphe est Cochliobolus ). Ce genre comprend plus de 40 espèces étroitement apparentées, dont beaucoup sont des agents pathogènes des céréales, et généralement spécifiques d’une espèce de plante-hôte, provoquant chez ces plantes des maladies du groupe des helminthosporioses. Des exemples d’espèces du genre Bipolaris (B.) incluent, sans limitation, B. victoriae, B. cactivora, B. sorokiniana, B. zeicola, B. maydis, B. oryzae. Des exemples d’espèces du genre Cochliobolus (C.) incluent, sans limitation, C. victoriae, C. sativus, C. carbonum, C. heterostrophus, C. miyabeanus. D’autres exemples d’ascomycètes causant des maladies cryptogamiques que l’on peut prévenir ou traiter en utilisant la présente invention incluent les champignons du genre Alternaria et Ulocladium qui causent une maladie cryptogamique appelée alternariose. Des exemples d’espèces du genre Alternaria (A.) incluent, sans limitation, A. alternata, A. alternantherae, A. arborescens, A. arbusti, A. blumeae, A. brassicae, A. brassicicola, A. burnsii, A. carthami, A. celosiae, A. cinerariae, A. cichorri, A. citri, A. conjuncta, A. chrysanthemi, A. cucumerina, A. dauci, A. dianthi, A. dianthicola, A. euphorbiicola, A. gaisen, A. helianthicola, A. hungarica, A. japonica, A. infectoria, A. leucanthemi, A. limicola, A. linicola, A. longpipes, A. macrospora, A. padwickii, A. molesta, A. panax, A. perpunctulata, A. petroselini, A. radicina, A. raphani, A. saponariae, A. senecionis, A. solani, A. tomata, A. tenuissima, A. triticina, A. chrysanthemi, A. porri, A. mali, A. helianthi, A. solani, A. triticina, A. zinniae. Des exemples d’espèces du genre Ulocladium incluent, sans limitation, Ulocladium consortiale et Ulocladium chartarum. D’autres exemples d’ascomycètes phytopathogènes qu’il est possible de détruire ou dont il est possible d’inhiber la croissance ou la germination en utilisant la présente invention incluent, sans limitation: les champignons du genre Trichoderma, dont l’espèce Trichoderma viride qui est l’agent causal de la pourriture verte de l’oignon et du dépérissement des plantules de Pinus nigra (Pain noir); les champignons du genre Claviceps, qui comprend environ 50 espèces connues, dont l’espèce Claviceps purpurea (qui cause l’ergot du seigle et qui parasite les graminées et les céréales), Claviceps fusiformis (qui affecte le mil), Claviceps africana (qui affecte le sorgho); - les champignons du genre Ceratocystis (C.) qui attaquent en particulier les arbres fruitiers et forestiers, dont l’espèce C. adiposa, C. coerulescens (qui affecte l’érable), C. fimbriata (qui s’attaque à des plantes très variées, qui vont du cacaoyer à la patate douce), C. oblonga et C. obpyriformis qui sont des espèces saprobes et qui affectent les espèces d’Eucalyptus et les acacias; - les champignons du genre Diaporthe ( D .), dont la forme anamorphe est
Phomopsis (P.), par exemple les espèces P. asparagi, P. asparagicola, P. cannabina, P. coffeae, P. ganjae, P. javanica, P. longicolla, P. mangiferae, P. prunorum, P. sclerotioides, P. theae, P. viticola et les espèces D. arctii, D. dulcamarae, D. eres, D. helianthi, D. lagunensis, D. lokoyae, D. melonis, D. orthoceras, D. perniciosa, D. phaseolorum, D. phaseolorum var. caulivora, D. phaseolorum var. phaseolorum, D. phaseolorum var. soja, D. rudis, D. tanakae, etc.; - les champignons du genre Pestalotia, par exemple les espèces Pestalotia longiseta (qui affecte les théiers) et Pestalotia rhododendri (qui affecte les azalées et les rhododendrons); les champignons du genre Seiridium (qui est la forme anamorphe du genre Lepteutypa), par exemple l’espèce Seiridium cardinale (agent pathogène du chancre cortical du cyprès); les champignons du genre Verticillium, qui comprend des agents pathogènes et saprophytes qui causent des maladies de flétrissement ou vericilliose, comme par exemple les espèces Verticillium alboatrum et Verticillium dahliae. les champignons du genre Cercospora (C.) qui forment des taches foliaires, par exemple les espèces C. angreci, C. apii, C. apiicola, C. arachidicola, C. asparagi, C. atrofiliformis , C. beticola, C. bolleana, C. brachypus, C. brassicicola, C. brunkii, C. cannabis, C. capsici, C. carotae, C. citrullina, C. coffeicola, C. coryli, C. orylina, C. eleusine, C. fragariae, C. fuschiae, C. fusca, C. fusimaculans , C. kikuchii, C. lentis, C. longpipes, C. longissima, C. mamaonis, C. mangiferae, C. medicaginis, C. melongenae, C. minima, C. minuta, C. musea, C. nicotianae, C. papayae, C. penniseti, C. pisa- sativae, C. plantanicola, C. rosicola, C. sojina, C. solani, C. sorhii, C. tuberculans, C. vexans, C. zeae-maydis, C. per sonata les champignons du genre Cladosporium (C.), comme par exemple les espèces C. fulvum (qui est responsable de la moisissure des feuilles de tomate), C. cladosporioides et C. herbarum (qui sont responsables de la pourriture des vignes), C. cladosporioides (qui est responsable de la pourriture des fleurs de fraisiers), C. cucumerinum (que l’on retrouve sur les melons, les courgettes et les courges), C. musae (qui attaque les bananiers); les champignons du genre Microcyclus, dont l’espèce Microcyclus ulei qui attaque les arbres du genre Hevea; les champignons du genre Nectria, dont les espèces affectent les cultures de fruits, par exemple Nectria cinnabarina (stade anamorphe: Tubercularia vulgaris ) qui affecte le pommier et d’autres espèces d’arbres ou arbustes comme le pêcher, le groseiller, le framboisier; les champignons du genre Pénicillium qui est un genre de champignons imparfaits (deutéromycètes), comme par exemple les espèces Pénicillium digitatum et Pénicillium italicum qui sont des agents de pourritures vertes et bleues des agrumes; les champignons du genre Pleospora (P.), dont les espèces P. alfalfae, P. betae, P. herbarum, P. papaveracea, P. lycopersici, P. tarda, et P. theae les champignons du genre Magnaporthe, par exemple l’espèce Magnaporthe oryzae (qui fait partie de la liste des dix agents pathogènes fongiques les plus importants sur le plan scientifique et énonomique et qui est le premier pathogène des monocultures intensives de riz, causant la pyriculariose); et les champignons du genre Blumeria, dont l’espèce Blumeria graminis qui est l’agent d’une maladie fongique appelée blanc des céréales ou oïdium des céréales, qui touche certains végétaux de la famille de Poaceae. Les Basidiomycètes (ou Basidiomycata ou ‘champignons à chapeau’), qui constituent une vaste division des champignons, sont caractérisés par des spores formées à l’extrémité de cellules spécialisées, les basides. Ils contiennent des champignons comestibles et des champignons vénéneux. Parmi les basidiomycètes phytopathogènes qu’il est possible de tuer ou dont il est possible d’inhiber la croissance en utilisant la présente invention, on trouve les champignons du genre Ustilago qui provoquent la maladie du charbon chez de nombreuses espèces de plantes, en particulier les Poaceae (graminées). Des exemples d’espèces du genre Ustilago (U.) incluent, sans limitation, U. maydis (qui fait partie de la liste des dix agents pathogènes fongiques les plus importants sur le plan scientifique et énonomique et qui est responsable du charbon du maïs), U. avenae (qui affecte l’avoine), U. esculenta (qui affecte le maïs, l’orge, l’avoine, le riz sauvage de Mandchourie), U. nuda (qui affecte l’orge), U. tritici (qui affecte le blé), etc. Les charbons peuvent également être causés par des champignons phytopathogènes du genre Sporisorium (S.), dont des exemples d’espèces incluent, sans limitation, S. scitamineum (qui est responsable du charbon de la canne à sucre), et S. cruentum, S. sorghi et S. ehrenbergii (qui tous trois causent le charbon du sorgho). Les charbons peuvent également être causés par des champignons du genre Sporisorium, comme par exemple l’espèce Sporisorium scitamineum qui parasite les plantes du genre Saccharum et qui est responsable du charbon de la canne à sucre.
D’autres exemples de basidiomycètes qui causent des maladies cryptogamiques de type charbon incluent les champignons du genre Urocystis qui attaquent en particulier les graminées et d’autres familles de plantes. Des exemples d’espèces du genre Urocystis (U.) incluent, sans limitation, U. agropyri, U. arxanensi, U. brassicae, U. occulta, U. tritici ou occulta, U. tranzscheliana, et U. xilinhotensis .
D’autres exemples de basidiomycètes phytopathogènes incluent les champignons du genre Puccinia, dont les espèces font partie de la liste des dix agents pathogènes fongiques les plus importants sur le plan scientifique et énonomique. Les champignons du genre Puccinia sont des champignons microscopiques responsables des maladies fongiques appelées rouilles, et qui peuvent affecter de nombreux végétaux, de la strate herbacée jusqu’aux grands arbres, ainsi que certaines cultures (pomme de terre, tomate, céréales, etc.). Des exemples d’espèces du genre Puccinia (P.) incluent, sans limitation, P. asparagi, P. graminis, P. hordei, P. horiana, P., psidii, P. recondita, P. psidii, P. striiformis, P. triticina. Les rouilles peuvent également être causées par des champignons du genre Uromyces (U.), dont des exemples d’espèces incluent, sans limitation, U. appendiculatus, U. trifolii, U. betae, U. decoratus, U. visiae-fabae, U. striatus, U. dactylidis, U. aloes, U. dianthi, U. graminis, etc. Les champignons du genre Melampsora peuvent également provoquer des rouilles qu’il est possible de prévenir ou de traiter en utilisant la présente invention. Des exemples d’espèces du genre Melampsora ( M .) incluent, sans limitation, M. Uni (qui est l’un des dix agents pathogènes fongiques les plus importants sur le plan scientifique et énonomique, et qui attaque le lin), M. alliipopulina (qui attaque les plantes de la famille des ails), M. pinitorqua (qui attaque diverses espèces de pin), M. laricipopulina (qui attaque le mélèze), M. medisae (qui attaque divers hôtes dont le mélèze).
D’autres exemples de basidiomycètes phytopathogènes que l’on peut détruire ou dont on peut inhiber la croissance ou la germination en utilisant la présente invention incluent les champignons du genre Tilletia. Ce genre de champignons comprend environ 175 espèces phytopathogènes qui affectent diverses espèces de plantes de la famille des Poaceae (graminées) et qui sont responsables en particulier des caries des céréales. Des exemples d’espèces de Tilletia (T.) incluent, sans limitation, T. foetida ou T. caries (qui affecte le blé), T. indicia (qui affecte le blé), T. pancicii (qui affecte l’orge), T. tritici (qui affecte le blé), T. secalis (qui affecte le seigle), T. controversa (qui affecte le blé et le seigle), T. horrida (qui affecte le riz).
D’autres exemples de basidiomycètes phytopathogènes incluent les champignons parasites du genre Armillaria qui sont des agents pathogènes forestiers destructeurs qui provoquent une maladie racinaire appelée pourriture blanche. Armillaria étant un saprophyte facultatif, il se nourrit également de matériel végétal mort. Des exemples d’espèces du genre Armillaria incluent, sans limitation, Armillaria heimii (qui attaque les théiers), Armillaria sinapina (qui attaque les saules, les bouleaux, les épicéas).
D’autres exemples de basidiomycètes phytopathogènes qu’il est possible de tuer ou dont il est possible d’inhiber la croissance en utilisant la présente invention incluent les champignons parasites du genre Ganoderma qui sont saprophytes. Ce genre comprend de nombreuses espèces pathogènes des plantes, qui sont responsables notamment de la maladie du pourridié rouge qui affecte les arbres (généralement les feuillus) dans les régions tropicales. Des exemples d’espèces du genre Ganoderma (G.) incluent sans limitation, G. adspersum, G. applanatum, G. brownii, G. lobatum, G. lucidum, G. megaloma, G. meridithiae, G. orbiforme, G. philipii, G. sessile, Ganoderma tornatum, G. zonatum.
D’autres exemples de basidiomycètes phytopathogènes qui peuvent être détruits ou dont la croissance peut être inhibée en utilisant la présente invention incluent, sans limitation: les champignons parasites du genre Moniliophthora qui sont originaires des régions tropicales, comme par exemple les espèces Moniliophthora roreri (responsable de la moniliose ou pourriture des cabosses du cacaoyer) et Moniliophthora perniciosa (responsable de la maladie du balai de sorcière, également chez les cacaoyers); - les champignons du genre Rhizoctonia (dont l’état sexué est appelé
Thantephorus), qui sont habituellement saprophytes mais qui s’attaquent parfois à des plantes vivantes affaiblies, par exemple des plantes de grande culture, en particulier Rhizoctonia solani (qui est l’un des champignons responsables de la fonte des semis, mais qui attaque aussi la pomme de terre, les céréales, la betterave à sucre, le riz), Rhizoctonia oryzae, Rhizoctonia cerealis, Rhizoctonia leguminicola, Rhizoctonia rubi et les champignons du genre Phanerochaete (P.) dont les espèces sont capables de dégrader la lignine du polymère ligneux en dioxyde de carbone et de provoquer la pourriture blanche des conifères et des feuillus, par exemple les espèces P. chrysosporium, P. allantospora, P. arizonica, P. avellanea, Phanerochaete burtii, P. carnosa, P. tuberculata, P. velutina.
Les Chytridiomycètes (Chytridiomycota) ou chytrides, constituent un vaste groupe de champignons saprophytes ou parasites, majoritairement composés de champignons aquatiques. Certaines espèces de champignons chytrides peuvent s’attaquer au maïs, à la luzerne et à un certain nombre d’autres plantes. Parmi les Chytridiomycètes qui causent des maladies cryptogamiques que l’on peut prévenir ou traiter en utilisant la présente invention, on trouve par exemple Synthytrium endobioticum, qui est l’agent causal de la galle verruqueuse de la pomme de terre.
Ainsi, les champignons phytopathogènes qu’il est possible de détruire ou dont il est possible d’inhiber la croissance ou la germination en utilisant la présente invention incluent, sans limitation, les champignons phytopathogènes des genres Alternaria, Athelia, Armillaria, Aspergillus, Bipolaris, Blumeria, Botrytis ( Cochliobolus ), Carpenteles, Ceratocystis, Cercospora, Choanephora, Cladosporium, Claviceps, Colletotrichum, Cryphonectria, Diaporthe ( Phomopsis ), Erysiphe, Eurotium, Fusarium, Ganoderma, Gibberella, Glomerella, Magnaporthe, Macalpinomyces, Melampsora, Monilia, Moniliophthora, Microcyclus, Mycena, Mycosphaerella, Nectria, Neonectria, Olpidium, Pénicillium, Pestalotia, Phakopsora, Phanerochaete, Phellinus, Physoderma, Pleospora, Podosphaera, Puccinia, Rhizoctonia, Rhizopus, Sclerotinia, Seiridium, Stemphylium, Septoria, Sphaerotheca, Sporisorium, Synchytrium, Taphrina, Tilletia, Thanatephorus, Trichoderma, Typhula, Ulocladium, Ustilago, Urocystis, Uromyces, et Verticillium. b. Les Oomycètes Phytopathogènes. Dans le contexte de la présente invention, les oomycètes phytopathogènes peuvent appartenir à n’importe laquelle des différentes familles de la classe d’ Oomycètes (Oomycota) qui comprend plus de 90 genres et entre 800 et 1000 espèces. Ainsi, parmi les oomycètes phytopathogènes qu’il est possible de détruire ou dont il est possible d’inhiber la croissance ou la germination en utilisant la présente invention, on trouve les oomycètes de la famille des Albuginaceae, qui comprend un seul genre Albugo. Le genre Albugo comporte de 40 à 50 espèces de parasites biotrophes des plantes à fleurs. Des exemples d’espèces d’ Albugo (A.) qui induisent la rouille blanche incluent, sans limitation, A. candida (qui affecte crucifères), A. tragopogoni ipomoeae-panduratae (qui affecte la patate douce), A. tragopogonis, A. occidentalis (qui affecte l’épinard), A. tragopogonis, A. horiana (qui affecte le chrysanthème), A. tragopogonis, A. tragopogoni (qui affecte le tournesol).
D’autres exemples d’oomycètes phytopathogènes incluent, sans limitation, les oomycètes de la famille des Peronosporales comprenant les genres suivants: Bremia, Peronospora, Phytophthora, Plasmopara, Pseudoplasmopara, Sclerophthora et Sclerospoara, la plupart étant des parasites obligatoires responsables du mildiou. Des exemples d’espèces du genre Bremia incluent par exemple Bremia lactucea (qui est responsable du mildiou de laitue et de l’artichaud). Des exemples d’espèces du genre Peronospora (P.) incluent, sans limitation, P. antirrhini, P. arborescens, P. cactorum, P. destructor, P. farinosa, P. hyoscyamo, P. jaapiana, P. matthiolae, P. manshurica, P. oerteliana, P. spara, P. trifoliorum, P. viciae, P. violae, P. valerianellae. Des exemples d’espèces du genre Phytophthora (P.) incluent, sans limitation, P. parasita (qui affecte les Solanacées - pomme de terre, tomate, tabac, etc.), P. capsici (qui est responsable de la fonte des semis et qui a un large spectre d’action contre le piment, la tomate, l’aubergine, le haricot, la citrouille, le potiron, le concombre, le melon, la pastèque), P. cactorum, P. citrophthora, P. drechsleri, P. erythroseptica, P. infestons, P. megasperma, P. nicotianae, P. parasitica, P. phaseoli, P. sojae. Des exemples d’espèces du genre Plasmopara incluent en particulier Plasmopara viticola qui est un agent du mildiou de la vigne. Des exemples d’espèces du genre Sclerophthora incluent en particulier Sclerophthora macrospora qui est responsable du mildiou des céréales, affectant les céréales et diverses espèces de graminées. Des exemples d’espèces du genre Sclerospoara incluent en particulier Sclerospora graminicola qui affecte le maïs et le mil.
D’autres exemples d’oomycètes phytopathogènes qu’il est possible de détruire ou dont il est possible d’inhiber la croissance ou la germination en utilisant la présente invention incluent, sans limitation, les oomycètes de la famille des Pythiales, qui comprennent les Pythium ssp. qui sont le plus souvent des agents des fontes de semis (ou pythium) pour de nombreux types de plantes sauvages et cultivées. Des exemples d’espèces du genre Pythium (P.) incluent, sans limitation, P. acanthicum, P. aphanidermatum, P. aristosporum, P. arrhenomanes, P. buismaniae, P. camurandrium, P. prophyrae (qui cause la pourriture rouge), P. debaryanum, P. deliense, P. dissotocum, P. emineosum, P. graminicola, P. heterothallicum, P. hypogynum, P. irregulare, P. iwayamae, P. middletonii, P. myriotylum (qui provoque la pourriture molle des racines dans les cultures, telles que l’arachide, la tomate, le seigle, le blé, l’avoine, le concombre, le soja, le sorgho, le tabac, le chou et le maïs), P. okanoganense, P. oopapillum, P. paddicum, P. perniciosum, P. rostratum, P. scleroteichum, P. spinosum, P. splendens, P. sulcatum, P. tracheiphilum, P. ultimum, P. violae , P. volutum. Encore d’autres exemples d’oomycètes phytopathogènes incluent, sans limitation, les oomycètes de la famille des Saprolegniales qui comprennent un seul genre phytopathogène: Aphanomyces. Des exemples d’espèces du genre Aphanomyces (A.) incluent, sans limitation, A. euteiches (qui est un parasite majeur de différentes légumineuses dont le pois fourrager, la luzerne, et le trèfle), et A. cochlioides (qui affecte des produits de base tels que les épinards, les bettes à cardes, les betteraves et d’autres espèces apparentées).
Ainsi les oomycètes phytopathogènes qu’il est possible de détruire ou dont il est possible d’inhiber la croissance ou la germination ou encore d’inhiber le mouvement des zoospores en utilisant la présente invention incluent, sans limitation, les champignons phytopathogènes des genres Albugo, Aphanomyces , Bremia, Peronospora, Peronosclerospora, Phytophthora, Plasmodiophora, Plasmopara, Polymyxa, Pseudoplasmopara, Pythium, Sclerophthora et Sclerospoara.
2. Plantes et Produits Végétaux a. Les Plantes. L’invention peut être appliquée à une large variété de plantes, y compris les plantes de grandes cultures, les plantes potagères, les plantes d’ornement, les arbres et les arbustes, que ce soit dans des jardins potagers, en serre ou en plein champ.
En particulier, les plantes peuvent être des plantes dicotylédones, telles que notamment les Malvacées (ex. cotonnier, etc.), les Solanacées (ex. tabac, tomate, pomme de terre, aubergine, etc.), les Cucurbitacées (ex. melons, concombre, pastèque, courges, etc.), les Crucifères ou Brassicacées (ex. colza, moutarde, etc.), les Composées ou Astéracées (ex. chicorée, etc.), les Ombellifères ou Asparagacées (ex. carotte, cumin, etc.), les Rosacées (en particulier arbres et arbustes dont les fruits ont une importance économique), les Polygonacées (ex. oseille, rhubarbe, sarrasin, etc.), les Lamiacées (ex. basilic, marjolaine, menthe, origan, romarin, sarriette, sauge, thym, etc.), les Vitacées (ex. vigne) ou les Fabacées (ex. arachide, fève, haricot, lentille, petit pois, pois chiche, soja, etc.); ou des plantes monocotylédones, telles que notamment les Céréales (ex. blé, orge, avoine, riz, maïs, etc.) ou les Liliacées (ex. oignon, ail, etc.). D’autres plantes incluent les Rubiacées, les Musacées, les Orchidacées, les Lauracées, les Alliacées, les Chénopodiacées, les Valérianacées, les Caprifoliacées, les Verbénacées, les Plantaginacées, les Scrofulariacées, les Ericacées, les Primulacées, les Oléacées, les Apocynacées, les Asclépiadacées, les Gentianacées, les Boraginacées, les Araliacées, les Grossulariacées, les Myrtacées, les Eléagnacées, les Lythracées, les Onagracées, les Thyméléacées, les Passifloracées, les Tiliacées, les Bombacacées, les Linacées, les Géraniacées, les Rutacées, les Violacées, les Cistacées, les Hypéricacées, les Théacées, les Myristicacées, les Papavéracées, les Fumariacées, les Anonacées, les Renonculacées, les Caryophyllacées, les Fagacées, les Juglandacées, les Urticacées, les Moracées, les Santalacées, les Cannabinacées, les Piperacées, les Salicacées, les Bétulacées, les Arécacées, les Zingibéracées, les Broméliacées, les Pinacées, les Cupressacées, les Ginkgoacées, les Cycadacées, les Équisétacées, les Lycopodes ou les sélaginelles. Dans certains modes de réalisation, un composé selon l’invention est appliqué à une plante qui est cultivée dans le but de produire de l’alimentation, des plantes d’ornement, des matériaux de construction (bois, paille), de l’énergie (bois de feu, éthanol, biodiesel), des fibres (fibres textiles, matériaux d’isolation), des médicaments (plantes médicinales), et similaires. Des exemples de plantes cultivées incluent, sans limitation, l’abricotier, l’acacia, l’ail, l’amandier, l’ananas, l’anis, l’arachide, l’artichaut, l’asperge, l’aubergine, l’avocatier, l’avoine, le bananier, le basilic, le bergamotier, la betterave, le blé, le brocoli, le cacaoyer, le caféier, le cannelier, la capucine, le cardon, la carotte, le caroubier, le cassissier, le céleri, le cerfeuil, le cerisier, le chanvre, la chicorée, le chicon, le chou, le chou-fleur, le ciboule, la ciboulette, le citronnier, la citrouille, la clémentine, le cocaïer, le cocotier, le cognassier, le colatier, le colza, le concombre, la coriandre, le cotonnier, la courgette, le cresson, le cumin, le cyprès, le dattier, l’endive, l’épinard, l’estragon, l’épeautre, l’engrain, le fraisier, le framboisier, le figuier, le géranium, la gentiane, le gingembre, le ginseng, le goyavier, le grenadier, la groseille, la guarana, la guimauve, le houblon, le haricot, l’iris, le jasmin, le kaki, le kiwi, le kola, la laitue, le laurier, la lavande, la lentille, le lilas, le lin, le lis blanc, le litchi, le lupin, la luzerne, le lys, la mâche, le maïs, le mandarinier, la mangue, le manioc, le melon, la menthe, le mil, le millet, la moutarde, le mûrier, le muscadier, le navet, la navette d’hiver, la navette d’été, le noisetier, le noyer, l’oignon, l’olivier, l’oranger, l’orchidée, l’orge, l’origan, la pastèque, la patate douce, le pavot, le pêcher, le persil, le piment, la pivoine, le plantain, le poireau, le poirier, le pois, le poivrier, le poivron, la pomme de terre, le pommier, le potiron, le prunier, le radis, le raifort, la rhubarbe, le ricin, le riz, la roquette, le rosier, le rutabaga, le safran, la salade, le salsifis, le sarrasin, le seigle, le sésame, le sorgho, le souchet, le souchet sucré, le souci, le théier, la tomate, le topinambour, le trèfle, la tulipe, le thym, le tournesol, le triticale, le tilleul, la vanille, la verveine, la vigne, et similaires.
Des exemples de plantes cultivées dans le but de produire des matériaux de construction incluent, sans limitation, l’acacia, l’acajou, l’alisier, l’aulne, le bouleau, le cèdre, le cerisier (merisier), le châtaignier, le charme, le chêne, le cyprès, le douglas, l’épicéa, l’érable, le frêne, le hêtre, l’if, le mélèze, le noyer, l’olivier, l’orme, le peuplier, le pin sylvestre, le platane, le poirier, le sapin, le sycomore, le tilleul, et similaires.
Dans certains modes de réalisation, l’invention est appliquée à une plante transgénique. On entend par “ plante transgénique” une plante ayant été obtenue par des techniques de manipulation génétique. Plus spécifiquement, une plante transgénique est une plante dont au moins une cellule contient des séquences nucléotidiques exogènes introduites par l’intermédiaire d’une intervention humaine. Typiquement, les plantes transgéniques expriment des séquences ADN qui confèrent à ces plantes un ou plusieurs caractères différents de ceux de plantes non-transgéniques de la même espèce. b. Les Produits Végétaux. L’invention peut également être appliquée à un produit végétal. On entend ici par “ produit végétal” ou “ produit de plante” toute plante ou partie de plante utile à l’Homme. Ainsi, un produit végétal peut être choisi parmi les semences, les graines, les tubercules, et les bulbes. Alternativement, un produit végétal peut être choisi parmi les fruits, les légumes, et les grains post-récolte. Un légume peut être une racine (ex. carotte, betterave rouge), un tubercule (ex. pomme de terre, topinambour), un bulbe (ex. oignon), une jeune pousse (ex. asperge), une pseudo-tige (ex. poireau), un pétiole (ex. bette, céleri), un ensemble de feuilles (ex. laitue, endive), une fleur (ex. artichaut, chou-fleur), un fruit (ex. tomate, concombre), ou une graine (ex. pois, fèves, haricots).
Alternativement, un produit végétal peut être un produit alimentaire de 4eme gamme. La 4eme gamme de produits alimentaires regroupe les produits agricoles frais, crus, lavés, épluchés et coupés (salades classiques et mélangées, crudités, herbes fraîches, légumes et fruits) destinés à la consommation. Les produits sont conditionnés sous air ambiant ou atmosphère modifiée ou encore sous vide, en sachet ou en barquette, et conservés par réfrigération.
En variante, un produit végétal peut être du bois post-abattage ou post-coupe (par exemple du bois de construction). Dans le contexte actuel, visant à favoriser le développement durable, le bois connaît un regain d’intérêt auprès des industriels et du grand public. Toutefois, le caractère naturel et biodégradable du bois constitue également la barrière principale à sa mise en œuvre et à son utilisation. En effet, ce matériau particulièrement sensible à son environnement est susceptible d’être altéré par des organismes biologiques. L’utilisation du bois dans l’industrie dépend alors de sa capacité à résister à ces attaques extérieures. Plusieurs facteurs sont responsables du développement des champignons sur le bois coupé: la période de coupe des arbres, les temps de séchage mais également la situation finale du bois comme l’exposition à l’humidité, la proximité de végétations (forêts), etc. 3. Les Maladies Cryptogamiques
Les maladies de plantes qu’il est possible de traiter selon l’invention incluent toute maladie causée par un champignon ou oomycète phytopathogène qui est détruit et/ou dont la croissance est inhibée par le 4-PBA ou l’un de ses sels, par le 3-PBA et/ou l’un de ses sels, par le 2-PBA et/ou l’un de ses sels, et/ou par Tune de leurs combinaisons.
Les maladies cryptogamiques qui peuvent être prévenues ou traitées par une méthode selon l’invention incluent, sans limitation, la pourriture grise ou botrytis, le mildiou, la fusariose, la cercosporiose, Toïdium, l’altemariose, l’anthracnose, les charbons, les caries, la septoriose, la moniliose ou monilia, la rouille, l’helminthosporiose, la sclérotiniose, la tavelure, la verticilliose, la cladosporiose, la cloque, la coryneum ou maladie criblée, l’entomosporiose, la fonte des semis, l’esca, l’eutypiose, la gommose, la gravelle, le mal secco, le pied noir, la pyriculariose, et la graphiose de l’orme.
La pourriture grise ou botrytis est une maladie cryptogamique due au champignon Botrytis cinerea (Botryotinia fuckeliana). Botrytis cinerea attaque un grand nombre de plantes cultivées ( Vitaceae , Solanaceae, Cucurbitaceae, Rosaceae et Fabaceae). La viticulture, le maraîchage, G arboriculture et la floriculture sont concernées par la pourriture grise. Ce champignon est très souvent saphrophyte, c’est-à-dire qu’il se développe sur de la matière organique morte ou en décomposition, et a aussi la caractéristique de pouvoir se développer sur de la matière vivante, en particulier des fleurs (par exemple sur des rosiers) ou des fruits charnus (raisins, fraises, etc.). Les fruits ou les légumes se recouvrent d’un feutrage brunâtre puis gris caractéristique. Les fleurs atteintes se flétrissent et les feuilles se couvrent de taches de couleurs crème à brun puis pourrissent ou sèchent. En général, les tiges atteintes de taches sèchent et le rameau les portant meurt, et les racines pourrissent. Le mildiou est le nom générique d’une série de maladies cryptogamiques affectant de nombreuses espèces de plantes, mais prenant des proportions épidémiques dans certaines cultures de grande importance économique, telles que la vigne, la tomate, la pomme de terre, la laitue ou les courges. Ces maladies sont provoquées par des microorganismes oomycètes des genres suivants: Plasmopara, Phytophthora, Peronospora et Sclerophthora. Elles se manifestent par des taches brunes ou une apparence de moisissures blanches et cotonneuses, suivies d’un flétrissement général de la feuille, d’un rameau ou de toute la plante. Le tubercule atteint pourrit rapidement, même au cours de la conservation. Le mildiou peut affecter la betterave (. Peronospora farinosa, et Peronospora farinosa f. sp. betae), l’abricotier ( Phytophthora cactorum), la canne à sucre ( Peronosclerospora sacchari), la carotte ( Phytophthora megasperma et Plasmospora crustosa), la fraise ( Phytophthora cactorum ), la giroflée ( Peronospora matthiolae et Flyaloperonaspora cheiranthï), la laitue ( Bremia lactucae), la luzerne (. Peronospora trifoliorum), la mâche ( Peronospora valerianellae), la pastèque {Phytophthora dreschsleri), la pomme de terre {Phytophthora infestans), la primevère {Peronospora oerteliana), la rubarbe {Peronospora jaapiana ), l’artichaut {Bremia lactucae), la tomate {Phytophthora infestans ), la vigne {Plasmopara viticola), la violette {Peronospora violae), l’épinard {Peronospora farinosa f. sp. spinaciae), l’oignon {Peronospora destructor), les agrumes {Phytophthora citrophthora et Phytophthora nicotianae var. parasitica ), les céréales ( Sclerophthora macrospora ), les chénopadiacées ( Peronospora farinosa), les crucifères ( Hyaloperonospora parasitica ), les cucurbitacées ( Pseudoperonospora cubensis ), les poiriers ( Phytophthora cactorum), le céleri ( Plasmopara apii et Plasmopara crustosa), le chanvre ( Pseudoperonospora cannabina ), le chou ( Hyaloperonospora brassicae), le collet du cerisier ( Phytophthora cactorum ), le collet du pommier ( Phytophthora cactorum ), le concombre ( Pseudoperonospora cubensis), le fraisier ( Phytophthora fragariae), le haricot ( Phytophthora phaseoli), le houblon ( Pseudoperonospora humuli), le maïs ( Peronosclerospora maydis), le muflier ( Peronospora antirrhini ), le pavot ( Peronospora arborescens), le poivron ( Phytophthora capsici ), le pois ( Peronospora viciae), le pommier ( Phytophthora cactorum), le rosier ( Peronospora sparsa), le soja ( Peronospora manshurica), le sorgho ( Peronospora manshurica, Peronosclerospora shorgi, Peronosclerospora philippinensis et Peronosclerospora sacchari), le tabac ( Peronospora hyoscyami), le tournesol ( Plasmopara halstedii ou Plasmopara helianthi), le trèfle ( Peronospora trifoliorum). D’autres formes de la maladie incluent le mildiou gris du coton ( Mycophaerella areola), le mildium polyphage de la tomate ( Phytophthora cactorum), le mildiou terrestre de la tomate ( Phytophthora nicotianae var. parasitica), et le mildiou zoné de la tomate ( Phytophthora nicotianae var. parasitica). Les fusarioses sont des maladies fongiques courantes des végétaux, qui sont causées par certains champignons couramment présents dans le sol, du genre Fusarium mais ayant dans ces cas un développement parasitaire. Ces maladies se développent dans les cultures et peuvent affecter l’asperge ( Fusarium (F.) culmorum), le haricot (F. solani f. sp. phaseoli), le pois {F. solani f. sp. pisi), la betterave (F. oxysporum f. sp. fetae), la pomme de terre (F. coeruleum), le maïs (la tige: Gibberella fujikuroi, F. culmorum et Gibberella zeae l’épi: F. poae et F. tricinctum), la vanille (F. oxysporum f. sp. vanillae), l’ananas (Gibberella fujikuroi var. subglutinans), l’œillet (F. oxysporum f. sp. dianthi), les broméliacées (F. oxysporum f. sp. aechmea), les bulbes (F. oxysporum f. sp. gladioli), les céréales (Fusarium culmorum, Gibberella rosea, Gibberella avenacea, Gibberella intricans et Monographella nivalis), les épis (Gibberella zeae), les racines de l’asperge (F. oxysporum f. sp. asparagï), les racines des cactées (F. oxysporum f. sp. opuntiarum), les racines et le collet des tomates (F. oxysporum f. sp. radicis- lycopersici), les racines et le collet du concombre (F. oxysporum f. sp. cucumerinum), le blé ( Gibberella fujikuroï), le cacaoyer ( Albonectria rigidiuscula), le caféier ( Gibberella stilboides ), le cognassier ( Gibberella baccata ), le collet des cucurbitacées (F. oxysporum f. sp. cucurbitae ), le cotonnier (F. oxysporum f. sp. vasinfectum ), le glaïeul (F. oxysporum f. sp. gladiolï), le lin (F. oxysporum f. sp. Uni), le maïs ( Gibberella acuminata, Gibberella fujikuroï var. subglutinans, et Gibberella zeae), le palmier à huile (F. oxysporum f. sp. elaeidis ), le palmier dattier (F. oxysporum f. sp. albedinis), le soja (F. oxysporum f. sp. glycines et F. oxysporum f. sp. tracheiphilum ), le tubercule de la pomme de terre ( Gibberella cyanogena), et le bananier (F. oxysporum f. sp. cubensei). La fusariose vasculaire peut affecter la lentille (F. oxysporum f. sp. lentis ), la pastèque (F. oxysporum f. sp. niveum ), la tomate (F. oxysporum f. sp. lycopersici), la tulipe (F. oxysporum f. sp. tulipae), les crucifères (F. oxysporum f. sp. conglutinans), le caféier ( Gibberella xylarioides ), le chou (F. oxysporum f. sp. conglutinans), le chrysanthème (F. oxysporum f. sp. chrysanthemï), le concombre (F. oxysporum f. sp. cucumerinum), le cyclamen (F. oxysporum var aurantiacum), le fraisier (F. oxysporum f sp. fragariae), le haricot (F. oxysporum f. sp. phaseoli), le melon (F. oxysporum f. sp. melonis), le pois (F. oxysporum f. sp. pisï), le pois chiche ( Gibberella baccata et F. oxysporum f. sp. ciceris), et le radis (F. oxysporum f. sp. raphanï).
L’oïdium, ou maladie du blanc, est le nom générique donné à une série de maladies cryptogamiques causées par la forme asexuée de certains champignons ascomycètes appartenant à l’ordre des Erysiphales et à la famille des érysiphacées. Elle s’attaque principalement à certaines espèces d’arbres comme le chêne, l’érable, le cognassier, le pommier ou l’aubépine, qui y sont particulièrement sensibles. Elle se manifeste par des sortes de pustules apparaissant sue les feuilles et les fruits, et qui peuvent se développer pour former un feutrage blanc. L’oïdium peut affecter la noix de cajou ( Oïdium anacardiï), la tomate ( Oïdium lycopersici, Leveillula taurica et Oïdium neolycopersicï), la betterave ( Erysiphe betae), la bruyère ( Oïdium ericinum), la carotte ( Leveillula taurica), la chicorée ( Golovinomyces cichoracearum), la laitue ( Golovinomyces cichoracearum), la luzerne ( Leveillula taurica), la myrtille (Podosphaera myrtillina), la pomme de terre ( Golovinomyces cichoracearum), la verveine ( Sphaerotheca verbenae), la vigne ( Erysiphe necator), l’abricotier ( Podosphaera tridactyl), l’artichaut ( Leveillula taurica), l’aubépine ( Podosphaera clandestina), l’aulne ( Microsphaera penicillata), l’endive ( Golovinomyces cichoracearum), l’hévéa ( Oïdium heveae), l’hortensia ( Microsphaera polonica), l’œillet (' Oïdium dianthi), les agrumes (Oïdium tingitaninum), les berbéris ( Microsphaera berberidis), les borraginacées ( Golovinomyces cynoglossï), les céréales ( Blumeria graminis ), les chèvrefeuilles ( Erysiphe lonicerae), les crucifères ( Erysiphe cruciferarum), les cucurbitacées ( Golovinomyces cichoracearum Golovinomyces orontii, Leveillula cucurbitacearum et Podosphaera fusca), les lamiacées ( Erysiphe biocellata ), les plantes ornementales ( Golovinomyces orontii ), les solanacées ( Leveillula taurica), le bégonia ( Microsphaera begoniae), le cerisier ( Podosphaera clandestina), le châtaignier ( Microsphaera penicillata ), le chêne ( Microsphaera alphitoides), le chrysanthème ( Oïdium chrysanthemï), le cognassier ( Podosphaera leucotricha ), le concombre (Podosphaera fusca), le cotonnier (Leveillula taurica), le cyclamen (Oïdium cyclaminis), le fraisier (Podosphaera aphanis), le framboisier (Podosphaera aphanis), le frêne (Phyllactinia fraxin), le fusain (Erysiphe euonymï), le groseillier (Podosphaera mors-uvae), le haricot (Podosphaera fusca), le houblon (Podosphaera macularis), le lilas (Oïdium syringae), le lin (Golovinomyces orontii), le manguier (Oïdium mangiferae), le marronnier (Erysiphe flexuosa), le noyer pecan (Microsphaera penicillata), le papayer (Oïdium caricae-papapyae et Oïdium indicum), le pêcher (Podosphaera pannosa), le platane (Erysiphe platani). Le poinsettia (Oïdium poinsettiae), le poirier (Podosphaera leucotricha), le pois (Erysiphe polygoni f. sp. pisi), le pommier (Podosphaera leucotricha), le rosier (Podosphaera pannosa), le soja (Microsphaera diffusa), le tabac (Golovinomyces cichoracearum), le trèfle (Microsphaera trifolii), et le troène (Erysiphe ligustri).
L’alternariose, ou brûlure alternarienne, est le nom générique d’une série de maladies fongiques dues à diverses espèces de champignons des genres Alternaria et Ulocladium. Le champignon se conserve dans le sol sous les débris végétaux sous forme de mycélium, de conidies ou de chlamydosphères. La dissémination des conidies se fait par le vent ou la pluie. L’alternariose peut toucher la betterave (A. alternata), la carotte (A. dauci), la chicorée (A. cichorri), la pomme de terre (A. alternata et A. solani), les agrumes (A. alternata et A. citri), les crucifères (A. brassicicola et A. brassicae), les fruits (A. et U. chartarum), les solanacées (A. solani), le blé (A. triticina), le carthame (A. carthami), le chou (A. brassicae), le chrysanthème (A. chrysanthemï), le cotonnier (A. macrospora), le navet (A. brassicae), le poireau (A. porri), le pommier (A. mali), le tournesol (A. helianthï) et le tabac (A. alternata). L’anthracnose est le nom générique d’une série de maladies cryptogamiques causées par diverses espèces de champignons ascomycètes phytopathogènes appartenant à différents genres ( Apiognomania , Colletrotrichum, Discula, Gloeosporium, Glomerrela, Gnomonia, Pseudopeziza, etc.). L’antracnose affaiblit la plante en diminuant son capital feuillu, est nuisible à la production fruitière, mais ne menace pas directement la vie de la plante. Sur les fruits apparaissent des taches rondes et brunes de dessèchement. L’antracnose peut affecter la banane ( Colletotrichum musae ), l’airelle ( Glomerella cingulata), la fève (Didymella fabae et Aschochyta fabae), la laitue ( Microdochium panattonianum), la luzerne ( Colletotrichum destructivum et Colletotrichum trifolii ), l’amandier ( Glomerella cingulata ), la patate douce ( Elsinoe batatas), l’arachide ( Sphaceloma arachidis ), la tomate ( Glomerella cingulata et Colletotrichum coccodes ), la vigne ( Elsinoe ampelina ), l’aubergine ( Glomerella cingulata ), l’avocatier ( Sphaceloma perseae ), l’épinard ( Colletotrichum dematium f. spinaciae ), l’hévéa ( Glomerella cingulata ), l’oignon blanc ( Colletotrichum circinans), l’olivier ( Colletotrichum acutatum et Colletotrichum gloeosporioides ), l’oranger
( Elsinoe australis), l’orme ( Stegophora ulmea), les agrumes ( Glomerella cingulata et Glomerella acutata), les baies du cafiér ( Colletrichum kahawae), les céréales (Glomerella graminicola ), les cucurbitacées ( Glomerella lagenarium), les légumineuses fourragères ( Kabatiella caulivora ), les liliacées ( Colletotrichum circinans), les pommes ( Glomerella cingulata et Neofabraea alba), le cassissier ( Drepanopeziza ribis f. sp. nigrï), le cerisier ( Blumeriella hiemalis), le citronnier ( Glomerella cingulata ), le cotonnier ( Glomerella gossypiï), le fraisier (Gnomonia fructicola, Glomerella acutata, Colletotrichum fragariae), le framboisier ( Elsinoe veneta), le groseillier (Drepanopeziza ribis), le haricot (Colletotrichum lindemuthianum), le jute (Colletotrichum corchorum), le lin-graine (Colletotrichum lini), le maïs
(Mycosphaerella zeae-maydis et Glomerella graminicola), le manguier (Colletotrichum gloeosporioides), le noyer (Gnomonia leptostyla), le palmier à huile (Cercospora elaeidis et Melanconium elaeidis), le pêcher (Neofabraea malicorticis), le piment (Glomerella cingulata), le platane (Gnomonia veneta), le poireau (Colletotrichum circinans), poirier (Neofabraea malicortic et Elsinoe piri), le pois (Phoma pinodella, Colletotrichum lindemuthianum, Didymella pisi et Didymella pinodes), le pois-chiche (Mycosphaerella rabiei), le poivron (Colletotrichum capsici), le pommier ( Elsinoe piri et Neofabraea malicroticis), le rosier ( Elsinoe rosarum), le saule (Drepanopeziza salicis, le soja ( Colletotrichum truncatum, Glomerella glycines et Sphaceloma glycines), le tabac ( Colletotrichum tabacum), et le trèfle ( Colletotrichum destructivum).
Les charbons sont des maladies cryptogamiques causées par des champignons basidiomycètes appartenant pour la plupart à la sous-division des Ustïlaginomycotina. Les charbons affectent plus particulièrement les plantes de la famille des Poaceae (graminées) et notamment les céréales, mais aussi d’autres plantes cultivées. Les hôtes les plus importants sur le plan économique sont le maïs ( Ustilago maydis), l’orge ( Ustilago segetum var. hordei), le blé, l’avoine ( Ustilago hordeif. sp. avenae ), la canne à sucre ( Ustilago scitaminea ou Sporisorium scitamineum ) et les graminées fourragères. Les charbons peuvent également affecter le sorgho ( Sporisorium sorghi), l’anémone ( Urocystis anémones ), la pomme de terre ( Thecaphora solanï), la vigne ( Elsinoe ampelina), la violette ( Urocystis violae), l’oignon ( Urocystis colchicï), le chêne-liège ( Biscogniauxia mediterranea), le glaïeul ( Urocystis gladiolicola), le maïs ( Ustilago maydis ), le millet ( Ustilago crameri, Sphcelotheca destruens), le riz sauvage de Mandchourie ( Ustilago esculenta). D’autres formes de charbons incluent, sans limitation, le charbon de la tige (par exemple charbon de la tige des graminées ( Ustilago hypodytes), de la tige du seigle ( Urocystis occulta)); charbon de l’épi (par exemple charbon de l’épi du maïs (Sphacelotheca reiliana); charbon des feuilles (par exemple charbon des feuilles du dahlia ( Entyloma calendulae f sp. dahliae), charbon des feuilles du riz ( Eballistra oryzae)); le charbon noir (par exemple le charbon noir du riz ( Tilletia barclayana)); le charbon nu (par exemple le charbon nu de l’avoine ( Ustilago segetum var. avenae), le charbon nu de l’orge ( Ustilago segetum var. nuda), le charbon nu du blé ( Ustilago segetum var. tritici), le charbon nu du sorgho ( Sphcelotheca cruenta)); le charbon strié (par exemple le charbon strié du mil ( Ustilago striiformis)). Les septorioses sont des maladies fongiques des végétaux causées par diverses espèces de champignons de la famille des Mycosphaerellaceae, en particulier du genre Septoria. Ces maladies, qui touchent un très grand nombre de plantes hôtes, se caractérisent notamment par des taches sur les feuilles et les fruits et des chancres de la tige. La principale maladie de ce type, sur le plan économique, est la septoriose du blé, qui affecte le blé et d’autres espèces du genre Triticum et se rencontre dans toutes les zones de culture du blé à travers le monde. Due principalement à Septoria tritici et Speptoria nodorum, elle peut causer des pertes de rendements de plus de 40%. Les épidémies peuvent être très dommageables du fait de leur développement exponentiel. La septoriose peut également affecter la carotte ( Septoria dauci ), la laitue ( Septoria lactucae), la marguerite ( Septoria leucanthemï), l’anthurium ( Septoria anthurii), la patate douce ( Septoria bataticola), la pivoine ( Septoria paeoniae), la tomate ( Septoria lycopersicï), l’avoine ( Phaeosphaeria avenaria), l’azalée ( Septoria azaleae), l’hortensia ( Septoria hydrangeae), l’orge ( Zymoseptoria passerinii et Phaeosphaeria avenaria f. sp. triticea), les ronces ( Sphaerulina rubï), le céleri ( Septoria apiicola), le chanvre ( Didymella arcuata), le chrysanthème ( Septoria chrysanthemella et Septoria adanensis ), le framboisier ( Sphaerulina rubï), le glaïeul ( Septoria gladiolï), le groseiller ( Mycrosphaerella ribis ), le persil ( Septoria petroselinï), le poirier ( Mycrosphaerella pyrï), le pois ( Septoria pisï), le rosier ( Sphaerulina rehmiana), le seigle ( Septoria secalis), le soja ( Septoria glycines), et le tournesol ( Septoria helianthï).
La moniliose ou monilia est le nom générique de diverses maladies fongiques des arbres fruitiers provoquées par différentes espèces de champignons du genre Monilinia, dont Monilinia fructigena qui s’attaque principalement aux fruits à pépins et Monilinia laxa aux fruits à noyau. La moniliose touche les fruits blessés (par la grêle, les piqûres et/ou morsures d’insectes, les coups de bec d’oiseaux). Les fruits se recouvrent d’une tache de couleur marron et de points blancs répartis en cercles concentriques ordonnés. Les fruits finissent par pourrir sur l’arbre et restent souvent momifiés sans tomber. Presque toutes les espèces fruitières de la famille des rosacées (pommier, poirier, cerisier, prunier, pêcher, cognassier, abricotier et amandier) sont sensibles à la moniliose. La moniliose du cacaoyer ( Moniliophthora rorerï) est l’un des plus graves fléaux de cette culture (aussi connu sous le nom de pourriture glaciale).
Les rouilles sont des maladies cryptogamiques dont les agents pathogènes responsables sont des champignons basidiomycètes parasites de l’ordre des Pucciniales (anciennement Uredinales). Elles se manifestent par des pustules qui apparaissent sur les feuilles. Certaines rouilles sont dues à des oomycètes de l’ordre des Peronosporales (rouilles blanche). Ces agents phytopathogènes sont des parasites obligatoires, ne pouvant se développer que sur un végétal vivant. Les rouilles peuvent affecter l’ail ( Puccinia allii), l’aloès ( Uromyces aloes), l’amandier ( Melampsora amygdalinae et Tranzschelia pruni-spinosae), l’arachide ( Puccinia arachidis), l’asperge ( Puccinia asparagï), l’aubépine ( Puccinia substriata), le bananier ( Uromyces musae), la betterave ( Uromyces betae), la bruyère (Thekopsora fischeri), la canne à sucre ( Puccinia kuehnii et Puccinia melanocephala), la chicorée (Puccina hieracii), le caféier ( Hemileia vastratrix ), le céleri ( Puccinia apiï), le cerisier ( Puccinia cerasi ), le chrysanthème ( Puccinia chrysanthemi), le cognassier ( Gymnosporangium clavipes ), le cotonnier ( Phakopsora gossypii et Puccinia cacabata), l’endive ( Puccinia hieracii ), la fétuque ( Uromyces dactylidis ), la fève ( Uromyces viciae-fabae ), le figuier (Cerotelium fici), le framboisier ( Phragmidium rubi-idaei ), le glaïeul ( Puccinia gladiolï), le goyavier ( Puccinia psidiï), le groseillier ( Puccinia ribis ), le haricot ( Uromyces appendiculatus ), l’hortensia ( Pucciniastrum hydrangeae ), les iris ( Puccinia iridis ), la laitue (Puccina hieracci ), le lin ( Melampsora lini), la luzerne ( Uromyces striatus ), les malvacées ( Puccinia malvacearum), le manioc ( Uromyces manihotis), le maïs ( Puccinia polysora ), le millet ( Puccinia substriata), le mûrier ( Cerotelium fici), la menthe ( Puccinia menthae), le néflier ( Gymnosporangium confusium), les ombellifères ( Puccinia pimpinellae), le pêcher ( Puccinia cerasi), le persil ( Puccinia nitida et Puccinia rubiginosa), le peuplier ( Melampsora larici-populina et Melampsora populnea), le pin (Cronartium comandrae), la pivoine ( Cronartium flaccidum), le pistachier ( Pileolaria terebinthin), le poireau ( Puccinia porri), le pois ( Uromyces pisi et Uromyces viciae- fabae), le pois chiche ( Uromyces ciceris-arietini), le prunier ( Tranzschelia pruni- spinosae), le roseau ( Puccinia phragmitis), le rosier ( Phragmidium mucronatum), la rhubarbe ( Puccinia phragmitis), les rosacées ( Phragmidium tuberculatum), le salsifis ( Puccinia jackyana), le sapin ( Pucciniastrum goeppertianum), le soja ( Phakopsora pachyrhizi), le sorgho ( Puccinia purpurea), le teck ( Olivea tectonae), le tournesol ( Puccinia helianthï), le trèfle (Uromyces trifolii), la vigne ( Phakopsora euvitis). Les rouilles comptent également les rouilles américaines, les rouilles asiatiques, les rouilles tropicales, les rouilles grillagées ou européennes, les rouilles blanches, les rouilles brunes, les rouilles jaunes, les rouilles orangées, les rouilles noires, les rouilles communes, les rouilles couronnées, les rouilles de la tige, les rouilles des aiguilles, les rouilles des feuilles, les rouilles naines, les rouilles vésiculaires, et les rouilles vésiculeuses.
L’helminthosporiose est une maladie fongique causée par diverses espèces de champignons ascomycètes et qui affecte principalement les graminées, comme l’avoine ( Pyrenophora avenae et Cochliobolus victoriae - anamorphe: Bipolaris victoriae), le pavot ( Pleospora papaveracea), l’orge ( Pyrenophora graminae), les céréales ( Cochliobolus sativus - anamorphe: Bipolaris sorokiniana), les graminées fourragères ( Pyrenophora dictyoides), les plantes grasses ( Bipolaris cactivora), le jute ( Corynespora corchorum), le maïs ( Cochliobolus carbonum - anamorphe: Bipolaris zeicola, Setosphaeria turcica - anamorphe: Excerohilum turcicum, Cochliobolus heterostrophus - anamorphe: Bipolaris maydis), du riz ( Cochliobolus miyabeanus - anamorphe: Bipolaris oryzae ) et du seigle ( Pyrenophora japonicd). La slérotiniose (également appelée pourriture blanche) est une maladie cryptogamique due à l’attaque de champignons parasites du genre Sclerotinia (Sclerotinia minor, Sclerotinia cepivorum et Sclerotinia sclerotiorum) . C’est une des pathologies végétales les plus dévastatrices à travers le monde, affectant le rendement et la qualité d’une trentaine de cultures d’importance économique, dont le tournesol, la carotte, l’artichaut, l’oignon, le colza, le soja, le haricot, le pois, le pois chiche, etc.
Les tavelures sont des maladies cryptogamiques causées par divers champignons et affectant notamment les pommiers (tavelure du pommier due à Venturia inaequalis), les pêchers (tavelure noire du pêcher due à Venturia carpophila ), les pruniers (tavelure du prunier due à Cladosporium carpophilum, les poiriers (tavelure du poirier due à Venturia pyrina) et les oliviers (tavelure de l’olivier ou maladie de l’œil de paon due à Spilocaea oleaginum). Elles altèrent aussi bien les feuilles que les fruits.
La verticilliose (également connue sous les noms de flétrissement verticilien ou flétrissure verticillienne) est une maladie fongique qui affecte plus de 300 espèces de plantes herbacées, annuelles ou vivaces, ou ligneuses. Cette maladie est causée par diverses espèces de champignons ascomycètes, d’origine tellurique, du genre Verticillium (famille des Plectosphaerellaceae). La répartition des deux principaux agents pathogènes est différente: Verticillium alboatrum est présent surtout dans les zones tempérées tandis que Verticillium dahliae est dominant dans les zones tropicales et subtropicales. La cladosporiose de la tomate, également appelée moisissure olive, est une maladie cryptogamique provoquée par le champignon Fulvia fulva (Cooke) Ciferri (ou Cladopsorium fulvum Cooke). La maladie se manifeste par des taches jaunâtres, qui se nécrosent progressivement sur la face supérieure des feuilles et par un feutrage (moisissure) gris verdâtre de la face inférieure. Seulement dans les cas les plus graves, les fleurs et les fruits peuvent être atteints. En cas d’attaque précoce, c’est-à-dire avant la formation des fruits, les pertes de rendements peuvent être importantes. La cloque est une maladie cryptogamique du pêcher et de l’amandier, due au champignon Taphrina deformans, qui se traduit par des déformations des feuilles et qui peut causer d’importants dommages aux arbres producteurs de pêches et de nectarines.
La criblure à Cryneum est une maladie provoquée par un champignon ascomycète Stigmina carpophila, anciennement connu sous le nom de Coryneum beijerinckii. Elle s’attaque à l’ensemble des parties aériennes de l’arbre (branches, feuilles et fruits) et affecte les arbres fruitiers comme les cerisiers, les pruniers, les pêchers, les amandiers et les abricotiers.
L’entomosporiose est une maladie cryptogamique qui touche particulièrement les cognassiers et est causée par Y Entomosporium maculatum. Des taches rouges apparaissent sur les feuilles qui deviennent jaunes et finissent par tomber.
La fonte des semis est une maladie qui se caractérise par la mort des jeunes plants semés, et qui est très rapidement contagieuse. La base des jeunes plantes devient grise et molle, et la plantule meurt en 24 heures. Plusieurs champignons et oomycètes phytopathogènes peuvent causer la maladie: Botrytis, Fusarium, Phytophthora, Rhizoctonia, Sclerotinia, Phoma, et Pythium, ce dernier étant le plus commun et le plus redouté.
L’esca, ou apoplexie de la vigne, est d’une des plus anciennes maladies de la vigne. Elle est attribuée à trois champignons à dissémination aérienne: Phaeoacremonium aleophilium, Phaeomoniella chlamydospora et Eutypa lata.
L’eutypiose est une maladie cryptogamique de la vigne provoquée par une espèce de champignons ascomycètes lignicoles, Eutypa lata. Les symptômes de la maladie incluent, par exemple, des rameaux nanifiés, des feuilles nanifiées et chorosées, et de nécroses brunes sur le bois. La gommose est une maladie des plantes qui se caractérise par l’écoulement d’une substance gommeuse à la surface de branches ou du tronc de certains arbres. Elle affecte plus particulièrement certains arbres à feuilles caduques, notamment les arbres fruitiers du genre Prunus (cerisiers, pruniers, abricotiers et pêchers) et quelques autres, comme les agrumes. Le champignon responsable ( Cytospora , Botryosphaeria dothidea ) est un champignon lignicole, dont les spores pénètrent à l’intérieur du végétal, à la suite de blessures infligées aux branches ou à l’écorce pour une raison quelconque: taille, cassure de branche, éclatement de l’écorce, griffure animale, attaque d’insectes, gel. Ces spores se développent et forment un mycélium qui envahit et détruit le bois structurant de l’arbre dont il se nourrit.
Le Mal secco est une maladie cryptogamique touchant les agrumes, et plus particulièrement le citronnier ( Citrus limon ) dont l’agent pathogène est un champignon ascomycète de l’ordre des Pleosporales: Plenodomus tracheiphilus . L’arbre est infecté le plus souvent à la suite de blessures. Cette maladie est une grave maladie vasculaire qui empêche la sève de circuler correctement et entraîne le dessèchement de la branche atteinte. La maladie se propage des extrémités au tronc, entraînant à court ou moyen terme (1 ou 2 ans) le dépérissement de la plante, puis sa mort. Le pied noir est une maladie cryptogamique qui est causée par le champignon
Didymella et qui provoque une nécrose du collet (partie d’une plante qui est comprise entre la tige et les racines) chez les Brassicacées, notamment le chou et le colza.
La pyriculariose est une maladie cryptogamique provoquée par le champignon Magnaporthe grisea. C’est le premier pathogène des monocultures intensives de riz dont il nécrose la tige au niveau des épis. D’un point de vue économique, ce champignon, qui est présent dans 85 pays environ dans le monde entier, est responsable d’importantes pertes chaque année. Magnaporthe grisea attaque aussi d’autres Poaceae : le blé, le seigle, l’orge et le millet.
La graphiose de l’orme, également appelée maladie hollandaise de l’orme, est une maladie fongique causée par Osphiostoma ulmi. Un des premiers symptômes est une déformation de l’écorce des branches de l’orme adulte, puis le feuillage se dessèche.
Il est entendu que d’autres maladies cryptogamiques que celles mentionnées ici peuvent être traitées ou prévenues en utilisant la présente invention.
III - Méthodes d’Utilisation du 4-PBA, 3-PBA, 2-PBA, leurs Sels et leurs Combinaisons
Des méthodes ou procédés sont également fournis pour la mise en œuvre de l’invention. Dans les méthodes selon l’invention, les champignons et oomycètes phytopathogènes, les plantes et les produits végétaux, et les maladies cryptogamiques sont comme décrits plus haut. Ainsi, l’invention concerne une méthode de traitement et/ou de prévention d’une maladie cryptogamique chez une plante ou un produit végétal, comprenant l’application de 3-PBA ou l’un de ses sels, de 2-PBA ou l’un de ses sels, de 4-PBA ou l’un de ses sels, ou de l’une de leurs combinaisons, à la plante et/ou au sol environnant la plante ou au produit végétal. La maladie cryptogamique est causée par un champignon et/ou oomycète phytopathogène. Dans certains modes de réalisation préférés, le 3-PBA ou l’un de ses sels, le 2-
PBA ou l’un de ses sels, le 4-PBA ou l’un de ses sels, ou l’une de leurs combinaisons, est appliqué(e) en une quantité suffisante (ou efficace) pour inhiber la germination ou la croissance du champignon ou oomycète phytopathogène et/ou pour inhiber le mouvement des zoospores de l’oomycète phytopathogène et/ou pour détruire (causer la mort) du champignon ou oomycète phytopathogène.
En conséquence, l’invention concerne également une méthode de destruction d’un champignon ou oomycète phytopathogène et/ou d’inhibition de la croissance d’un champignon ou oomycète phytopathogène pour prévenir et/ou traiter une maladie cryptogamique affectant une plante ou un produit végétal, comprenant l’application de 3-PBA ou l’un de ses sels, de 2-PBA ou l’un de ses sels, de 4-PBA ou l’un de ses sels, ou d’une de leurs combinaisons, à la plante et/ou au sol environnant la plante ou au produit végétal.
1. Application de 3-PBA, de 2-PBA, de 4-PBA, de l’une de leurs Combinaisons aux Plantes ou Produits Végétaux Dans la mise en œuvre de l’invention, l’application d’un des composés et combinaisons décrits ici peut être réalisée par n’importe quelle méthode connue dans l’art. Par exemple, l’application peut se faire par traitement du sol ou au sol (par arrosage, injection ou pulvérisation); par traitement des substrats de culture (terreau, compost, etc.); par traitement à l’aide de solutions nutritives; par irrigation (système de goutte à goutte ou par aspersion); par traitement des parties aériennes de la plante (par arrosage ou pulvérisation, ou par fumigation dans le cas de cultures sous serre); par traitement des semences (par pelliculage ou enrobage) ou d’autres matériels de propagation (par exemple, par poudrage des tubercules ou des plants, par trempage des bulbes, des boutures ou des plants); par trempage ou douchage des fruits ou des légumes post-récolte; par traitement des grains stockés; par traitement du bois coupé (par exemple par un procédé d’imprégnation superficielle comme le trempage court ou par application à la brosse ou au pinceau ou par pulvérisation ou encore par un procédé d’imprégnation profonde en autoclave). Dans le contexte de la présente invention, on entend par “parties aériennes d’une plante”, la portion de la plante que l’on nomme communément feuillage, et qui se trouve au-dessus du sol. D’une manière générale, la partie aérienne ou feuillage d’une plante comprend les feuilles, les tiges, les fleurs, et les fruits. Le terme “fruit” a ici sa définition utilisée en botanique, et désigne donc l’organe végétal contenant une ou plusieurs graines. Le terme “fruit” englobe donc également les légumes.
En fonction du couple agent phytopathogène/plante ou produit végétal et de l’effet désiré (c’est-à-dire prévention ou traitement d’une maladie cryptogamique ou amélioration de la conservation de produits végétaux post-récolte (légumes, fruits, grains, etc.) ou post-coupe (bois), ou optimisation de la levée des semis), l’homme du métier sait déterminer la ou les modes d’application les plus adaptés.
L’homme du métier sait également déterminer la ou les doses optimales d’un composé ou d’une combinaison décrite ici, à appliquer pour obtenir le résultat voulu. D’une façon générale, la dose appliquée correspond à une concentration non toxique pour l’homme et l’environnement. Dans certains modes de réalisation, le composé ou la combinaison est appliqué(e) par pulvérisation aux plantes ou parties de plantes à traiter. Dans ces modes de réalisation, le composé ou la combinaison, est de préférence appliqué(e) en une dose allant de 0,0005 à 3 kg/ha, plus préférablement allant de 0,001 à 2 kg/ha, et plus préférablement encore de 0,005 à 1 kg/ha. Le terme “quantité efficace”, telle qu’utilisé ici, désigne une quantité d’un composé ou d’une combinaison qui est suffisante pour atteindre le but recherché (ex. prévention d’une maladie cryptogamique, traitement d’une maladie cryptogamique, amélioration de la conservation de produits végétaux post-récolte (légumes, fruits, grains, etc.) ou post-coupe (bois), optimisation de la levée des semis). Une quantité efficace n’est pas significativement toxique pour la plante ou le produit végétal, ou encore pour l’homme ou l’animal lorsqu’il s’agit d’un traitement appliqué à des produits destinés à la consommation humaine ou animale. Une quantité efficace est généralement comprise entre environ 0,1 et environ 1000 ppm (parties par million), préférablement entre 1 et 500 ppm. La quantité efficace exacte d’un composé ou d’une combinaison décrite ici varie en fonction de la maladie cryptogamique à contrôler, du type de formulation utilisée, du procédé d’application, de l’espèce de la plante ou de la nature du produit végétal, des conditions climatiques, etc. L’homme du métier sait déterminer une quantité efficace en fonction de ces différents facteurs. De plus, un traitement selon l’invention peut correspondre à une seule application d’un composé ou d’une combinaison décrite ici ou à plusieurs applications, par exemple des applications espacées par une durée de temps spécifique (ex. espacées d’une semaine, ou espacées d’un mois ou de plusieurs mois, etc.). Dans le contexte de la présente invention, le 3-PBA ou l’un de ses sels, le 2-PBA ou l’un de ses sels, le 4-PBA ou l’un de ses sels, ou l’une de leurs combinaisons, peut être appliqué(e) pré-émergence et/ou post-émergence de la plante. Les termes “pré émergence de la plante” et “pré-levée de la plante” sont utilisés ici indifféremment et désignent la période après semis avant que la plante cultivée ne sorte de terre. Les termes “post-émergence de la plante” et “post-levée de la plante” sont utilisés ici indifféremment et désigne la période où la plante cultivée est sortie de terre.
Un traitement par un des composés et combinaisons décrits ici peut résulter en une série d’avantages pour les plantes et produits végétaux. De tels avantages peuvent se manifester, par exemple, par une diminution de la présence, dans la plante ou dans le produit végétal, du nombre et/ou de la gravité des symptômes d’une maladie cryptogamique causée par le champignon ou oomycète; une amélioration de la stabilité au stockage de la plante un fois récoltée (et/ou de ses fruits un fois cueillis); une amélioration de l’aspect de la plante ou du produit végétal due à l’absence, ou à la présence d’un nombre limité de sites de nécrose, de brûlure, de tâche, de pourriture, de galle, de tumeur, ou de flétrissure dans les tissus de la plante ou du produit végétal; une amélioration de la biomasse; une amélioration de la croissance des racines; une amélioration de la production des stolons; une augmentation de la surface des feuilles; une amélioration de la reproduction sexuée et/ou végétative; une augmentation du nombre des fleurs; une augmentation du volume des fruits; une amélioration de l’aspect des fruits; une augmentation de la concentration des éléments nutritifs et des constituants comme, par exemple, les glucides ou carbohydrates, les lipides, les protéines, les vitamines, les minéraux, et les fibres, etc.
Dans ce qui précède, une amélioration, une augmentation, ou une diminution d’une propriété est généralement d’au moins 3%, préférablement d’au moins 5%, et plus préférablement encore d’au moins 10% par rapport à une plante ou un produit végétal qui n’a pas été traité(e) par un composé ou une combinaison décrit ici. 2. Amélioration de la Stabilité des Produits Végétaux au Stockage
L’utilisation d’un des composés et combinaisons décrits ici peut résulter en une amélioration de la conservation des produits végétaux (par exemple les fruits, les légumes et les graines post-récolte, les produits alimentaires de 4eme génération, et le bois post-coupe). Une amélioration de la conservation peut se traduire par une augmentation de la durée de stockage des produits végétaux.
En conséquence, la présente invention concerne une méthode pour améliorer la conservation d’un produit végétal susceptible d’être affecté par un champignon ou oomycète phytopathogène, la méthode comprenant l’application d’une quantité efficace de 3-PBA ou de l’un de ses sels, de 2-PBA ou de l’un de ses sels, de 4-PBA ou de l’un de ses sels, ou de l’une de leurs combinaisons, au produit végétal, la méthode étant caractérisée en ce que la quantité efficace est suffisante pour inhiber la germination ou la croissance du champignon ou oomycète phytopathogène ou pour inhiber le mouvement des zoospores de l’ oomycète phytopathogène, ou pour détruire le champignon ou oomycète phytopathogène, et prévenir ainsi une maladie cryptogamique. Le produit végétal peut être sélectionné dans le groupe constitué par les fruits, les légumes, les graines, les produits alimentaires de 4eme génération, et le bois coupé.
3. Optimisation de la Levée des Semis L’utilisation d’un des composés et combinaisons décrits ici peut résulter en une protection des semences et une amélioration de la levée des semis.
En agriculture et en horticulture, le traitement des semences est la préparation des graines destinées aux semis, notamment au moyen de pesticides. Ce traitement a pour objectif de protéger les semences ou les jeunes plantes des germes pathogènes, en particulier ceux naturellement présents dans le sol, et des parasites animaux et de stimuler la germination et la croissance des plantes. Ainsi, par exemple, la protection fongicide des semences reste incontournable contre certaines maladies très dommageables et pour lesquelles il n’existe aucun moyen de lutte en végétation. Les graines enrobées avec des produits phytosanitaires à action fongicide et/ou insecticide assurent une préservation du potentiel du rendement dès le semis. Les adjuvants tels que les pelliculants et les enrobants facilitent le semis et améliorent l’efficacité des traitements. Le pelliculage des semences correspond à l’application d’un film microporeux qui permet de fixer les produits par une couche très fine sans modifier la forme de la graine. L’enrobage des semences est une forme de recouvrement des semences plus épaisse, destiné à faciliter le semis et qui peut contenir des engrais, des facteurs de croissance, ainsi qu’une charge inerte et une enveloppe extérieure en polymère.
En plus de diminuer les dégâts causés par les maladies et de préserver le potentiel de rendement dès le semis, les traitements des semences ont l’avantage de diminuer l’utilisation de produits phytosanitaires et donc de réduire les coûts, le temps de travail et la manipulation des produits phytosanitaires par les agriculteurs. Cependant, les traitements des semences sont aujourd’hui controversés en raison de risques sur l’environnement (eaux de ruissellement, pollinisateurs) et potentiellement sur la santé humaine ou animale.
Les composés de la présente invention, qui sont plus respectueux de l’environnement, peuvent remplacer les produits phytopharmaceutiques conventionnels dans le traitement des semences.
En conséquence, l’invention concerne une méthode de protection des semences ou d’amélioration de la levée des semis, la méthode comprenant l’application d’une quantité efficace de 3-PBA ou l’un de ses sels, de 2-PBA ou de l’un de ses sels, de 4- PBA ou l’un de ses sels, ou d’une de leurs combinaisons, à des graines destinées aux semis, la méthode étant caractérisée en ce que les graines sont susceptibles d’être affectées par un champignon ou oomycète phytopathogène et en ce que la quantité efficace est suffisante pour inhiber la germination ou la croissance du champignon ou de l’ oomycète phytopathogène ou pour inhiber le mouvement des zoospores de l’ oomycète, ou pour détruire le champignon ou oomycète phytopathogène, et prévenir ainsi une maladie cryptogamique.
Dans certains modes de réalisation, la maladie cryptogamique est la fonte des semis. En conséquence, l’invention concerne également une méthode de prévention de la fonte des semis comprenant l’application d’une quantité efficace de 3-PBA ou l’un de ses sels, de 2-PBA ou de l’un de ses sels, de 4-PBA ou l’un de ses sels, ou d’une de leurs combinaisons, à des graines destinées aux semis, la méthode étant caractérisée en ce que la quantité efficace est suffisante pour inhiber la germination ou la croissance du champignon ou de l’ oomycète phytopathogène ou pour inhiber le mouvement des zoospores de l’oomycète, ou pour détruire le champignon ou oomycète phytopathogène, et prévenir ainsi une maladie cryptogamique.
Dans certains modes de réalisation, le 3-PBA ou l’un de ses sels, ou le 2-PBA ou l’un de ses sels, ou le 4-PBA ou l’un de ses sels, ou l’une de leurs combinaisons, utilisé dans une méthode de protection des semences, d’amélioration de la levée des semis ou de prévention de la fonte des semis, est présent dans une solution d’enrobage ou de pelliculage de graines. Par “enrobage”, on entend ici, un processus qui consiste à enrober les semences en les recouvrant d’un matériau (généralement polymérique) dans le but d’uniformiser la taille et la forme des grains afin de faciliter le semis. Par “pelliculage”, on entend ici, un processus qui consiste à recouvrir entièrement les semences d’une fine couche (ou film microporeux) de sorte que la semence garde sa forme d’origine. Les solutions d’enrobage et de pelliculage peuvent généralement contenir des ingrédients supplémentaires tels que des pesticides.
L’invention concerne donc également une solution d’enrobage ou de pelliculage des semences comprenant, en tant qu’agent fongicide ou fongistatique, une quantité efficace de 3-PBA ou l’un de ses sels, ou de 2-PBA ou l’un de ses sels, ou de 4-PBA ou l’un de ses sels, ou d’une de leurs combinaisons.
A moins qu’ils ne soient définis d’une autre manière, tous les termes techniques et scientifiques utilisés dans la description ont la même signification que celle couramment comprise par un spécialiste ordinaire du domaine auquel appartient cette invention.
Exemples
Les exemples suivants décrivent certains modes de réalisation de la présente invention. Cependant, il est entendu que les exemples ne sont présentés qu’à titre illustratif seulement et ne limitent en aucun cas la portée de l’invention. Exemple 1: Protection des Plantes par le 4-PBA contre la Pourriture Grise Causée par le Champignon Botrytis cinerea
1. Protection de l’Arabette des Dames ( Arabidopsis thaliana, écotype Columbia-0)
Matériels et Méthodes. Les graines d’ Arabidopsis thaliana (Col-0) ont été semées directement en terre sans étape de stratification préalable. Les plantules ont été cultivées en jours courts (8 heures de jour à une température de 21°C/16h de nuit à une température de 18°C) à une intensité lumineuse de 120 pE/m2/s, pendant 5 à 6 semaines. Les feuilles matures des plantes ainsi obtenues ont alors été inoculées avec une solution de spores de la souche BMM de B. cinerea (composée de 6g/L de milieu Potato Dextrose Broth ou PDB [Sigma-Aldrich, P6685], dont le pH était de 5,15) contenant ou non du 4-PBA à une concentration finale de ImM. La solution mère de 4- PBA d’une concentration de 10 mM a toujours été préparée extemporanément. L’inoculum a été obtenu à partir d’une culture mycélienne sporulante âgée de 10 à 14 jours réalisée à l’obscurité à une température de 22°C sur milieu PDA solide stérile (lequel était composé de 24g/L de milieu PDB et de 15g/L d’agar). L’inoculum n’a jamais été stocké plus de 10 jours à 4°C avant utilisation. Il a été dilué extemporanément à une concentration de 5.104 spores/mL avant inoculation pour toutes les expériences. En moyenne, 3 à 4 feuilles ont été inoculées par plante, à raison de 6 pL d’inoculum par feuille. Après inoculation, les plantes ont été placées dans une enceinte fermée hermétiquement jusqu’à la fin de l’expérience. Les symptômes de la maladie ont été photographiés et quantifiés 4 jours après inoculation. Le diamètre le plus long des lésions foliaires a été mesuré à l’aide d’un pied à coulisse électronique (CD-15DAX, Mitutoyo, Paris, Lrance).
L’intensité de la maladie a également été mesurée via le ratio des concentrations foliaires en ADN génomique de B. cinerea et d’A. thaliana. Brièvement, pour extraire l’ADN génomique, les échantillons ont été broyés dans un tampon Tris-HCl 200mM, pH 7,5 contenant 250 mM de NaCl, 25 mM d’EDTA et 0,5% de SDS (v/v). L’ADN génomique contenu dans le surnageant de centrifugation (18.000xg pendant 10 minutes) a été précipité à l’isopropanol (v/v) à température ambiante, puis culoté par centrifugation. Le culot a ensuite été lavé à l’éthanol 70%, puis resuspendu dans un tampon Tris-HCl 10 mM pH 8,0 contenant ImM d’EDTA et l’ADN extrait a été dosé par spectrophotométrie. Des gammes de concentrations d’ADN génomique (ADNg) du champignon et de la plante ont été effectuées pour déterminer la zone de linéarité en PCR quantitative (données non montrées). Ces gammes nous ont permis de calculer les concentrations d’ADNg provenant des 2 organismes dans les échantillons foliaires, ainsi que les ratios représentés dans la figure ld à l’aide d’une échelle logarithmique (pour plus de détails, voir Gachon & Saindrenan, Plant Physiol. Biochem., 2004, 42 : 367- 371). Des amorces spécifiques ont été utilisées en PCR quantitative. Les réactions de PCR ont été réalisées dans un volume final de 10 pL contenant 5 pL de Mastermix (Sso Advanced Universal SYBR Green Supermix, #172-5270, BioDRad), 4,4 pL de matrice ADN diluée à la concentration adéquate et 0,3 pL de chacune des deux amorces (concentration finale de 3,3 mM par amorce). Les conditions de PCR étaient les suivantes : 2 minutes à 50°C, 10 minutes à 95°C, puis 15 secondes à 95°C et 1 minute à 60°C ; les deux dernières étapes étant répétées 39 fois. Les résultats de la figure ld présentent les moyennes et écart- types pour 3 expériences indépendantes, incluant 4 réplicats biologiques (chacun composé de 3-4 feuilles) par condition (+/- 4-PBA), par expérience.
Résultats. La figure la montre des symptômes représentatifs de pouriture grise obtenus sur des feuilles d’A. thaliana lors des 5 expériences indépendantes réalisées en présence et en absence de 4-PBA. Lorsque la molécule était présente dans l’inoculum, les proportions relatives des lésions (classées selon leur diamètre) observées au bout de 4 jours ont été modifiées par rapport à celles de feuilles inoculées avec le champignon seul (Figure lb). En effet, 37% des feuilles inoculées avec la solution de spores contenant le 4-PBA ne présentaient pas de symptômes alors que seulement 5% des feuilles infectées avec B. cinerea étaient dépourvues de lésions. Inversement, la molécule a également permis de diminuer les proportions de lésions dont le diamètre était supérieur à 4 mm, la faisant chuter de 48% à 23%. Le diamètre moyen des lésions a été divisé par 2,2 fois (Figure le). Enfin, l’intensité moindre de la maladie a été corroborée par la comparaison des ratios d’ADNg du champignon sur celui de la plante (Figure ld), lesquels montraient une diminution médiane d’un facteur 10 lors d’une inoculation en présence de 4-PBA.
L’ensemble de ces résultats démontre la capacité du 4-PBA à protéger l’Arabette des Dames (plante de la famille des Brassicacées) contre le développement du champignon B. cinerea.
2. Protection de la Tomate (Solarium lycopersicum )
Matériels et Méthodes. Deux variétés commerciales de tomate ( Solanum lycopersicum) ont été testées: l’une, nommée Moneymaker, dédiée à la production de tomates de table, et l’autre, nommée M82, dédiée à la fabrication de Ketchup. Les graines ont été semées directement sur terreau sans étape de stratification préalable. Les plantules ont été cultivées en jours longs (16 heures de jour à une température de 21°C/8h de nuit à une température de 18°C), à une intensité lumineuse de 120 pE/m2/s, pendant 5 à 6 semaines. Des disques foliaires (1,6 cm de diamètre) de ces deux variétés ont ensuite été découpés à l’emporte-pièce sur les feuilles terminales et sub-terminales des branches 3 et 4 des plantes (en comptant à partir de la branche la plus basse). Ces disques ont été disposés dans une boîte de Pétri sur un papier Wattman 3M imbibé d’eau distillée à raison de 20 disques par boîte. L’inoculum du champignon B. cinerea (souche BMM), qui a servi pour infecter les disques foliaires, a été préparé comme dans l’exemple précédemment décrit pour l’Arabette des Dames. Les disques ont été inoculés soit avec une solution de spores ne contenant pas de 4-PBA, soit avec une solution de spores contenant du 4-PBA à une concentration finale de 1 mM. Deux titres d’inoculum ont été testés avec ce design expérimental: 5.104 spores/mL et 5.105 spores/mL. Le volume d’inoculum utilisé était de 3 pL par disque. Pour une boîte, la moitié des disques était inoculée avec la solution de spores contenant du 4-PBA alors que l’autre moitié était inoculée avec la solution dépourvue de la molécule. Après inoculation, les boîtes de Pétri ont été fermées hermétiquement et placées dans une chambre phytotronique en conditions de jours longs (16 heures de jour à une température de 24°C et 8 heures de nuit à une température de 19°C) à une intensité lumineuse moyenne de 300 pE/m2/s. Les symptômes de la maladie ont été photographiés et quantifiés 3 jours après inoculation. Le diamètre le plus long des lésions foliaires a été mesuré à l’aide d’un pied à coulisse électronique. L’intensité de la maladie a également été mesurée via le ratio des concentrations foliaires en ADNg de B. cinerea et de S. lycopersicum comme décrit ci-dessus. Trois expériences indépendantes ont été réalisées pour chacune des deux concentrations en inoculum (5.104 et 5.105 spores/mL). Chacune des expériences comportaient vingt disques foliaires par condition. Les résultats présentés correspondent à la moyenne des trois expériences ± l’écart type. Pour les expériences de PCR quantitative, un réplicat biologique au sein d’une expérience correspondait à 5 disques foliaires ; soit quatre réplicat biologique par condition et par expérience. Dans les figures 2 et 3, ** indique une différence statistique significative d’après un test bilatéral non paramétrique de Mann-Whitney avec un risque a inférieur à 1%.
Résultats. Les résultats obtenus pour la variété Moneymaker sont présentés dans la Figure 2. Le panel (a) montre des lésions caractéristiques de la pourriture grise causée par le champignon B. cinerea sur tomate. Visuellement, on observe un développement moindre du champignon sur les disques foliaires en présence de 4-PBA. Cette observation est confirmée par les effets qu’occasionne le 4-PBA sur la distribution des lésions par classe de diamètre (panel b) et sur le diamètre moyen de ces lésions (panel c). En effet, en présence de la molécule dans rinoculum, les proportions de lésions de taille supérieure à 4 mm de diamètre sont largement diminuées, passant de 73% à 15% pour une concentration de 5.104 spores/mL et de 60% à 23% pour une concentration de 5.105 spores/mL. De plus, les disques dépourvus de lésions et/ou présentant des lésions d’une taille inférieure à 2mm de diamètre sont largement représentées dans la population infectée en présence de 4-PBA (de l’ordre 35 à 40% en fonction du titre de rinoculum) ; ce qui n’est pas le cas en l’absence du composé. L’effet du 4-PBA se traduit également par une chute du diamètre moyen des lésions de 68% pour la concentration en spores la plus faible et de 58% pour la concentration la plus élevée. Ces résultats sont corroborés par les ratios d’ADNg du champignon sur celui de la plante (panel d), puisque les ratios médians sont respectivement 40 et 10 fois moins importants pour des infections réalisées en présence de 4-PBA que pour celles effectuées avec le champignon seul à des concentrations de 5.104 et 5.105 spores/mL. Les résultats obtenus pour la variété M82 sont présentés dans la Ligure 3. Ces derniers sont semblables à ceux obtenus pour la variété Moneymaker, montrant une efficacité équivalente du 4-PBA à protéger les deux variétés de tomate contre le développement du champignon B. cinerea.
En conclusion, l’ensemble de ces données démontrent clairement que le 4-PBA, lorsqu’il est en contact avec les spores du champignon B. cinerea à une concentration finale de 1 mM, améliore les symptômes foliaires de la pourriture grise pour les 2 variétés de tomate commerciale que sont Moneymaker et M82. On notera par ailleurs que l’activité protectrice du composé administré à cette concentration est extrêmement robuste, puisqu’une augmentation d’un facteur 10 de la concentration de rinoculum n’affecte que peu l’efficacité de la molécule.
3. Protection de la Vigne ( Vitis vinifera cv. Gamay )
Matériels et Méthodes. Un cépage commercial de vigne (Vitis vinifera, cultivar Gamay) a été cultivé en serre pendant 6 semaines. Des disques foliaires de 1,7 cm de diamètre ont alors été découpés à l’emporte-pièce sur les feuilles de rang 1 et 2, puis inoculés avec une solution de spores de la souche BMM du champignon B. cinerea (5.104 spores/mL) contenant du 4-PBA (à une concentration finale de 1 mM) ou ne contenant pas le composé. L’inoculum a été préparé comme mentionné ci-dessus pour les expériences réalisées avec A. thaliana. Un volume de 6 pL a été déposé sur chaque disque. L’incubation des disques infectés a été conduite comme pour les expériences réalisées sur disques foliaires de tomate. Les symptômes de maladie ont été photographiés et quantifiés 3 jours après l’infection via la distribution des lésions en fonction de leur diamètre et par la mesure du plus grand diamètre des lésions. Une expérience a été effectuée sur 40 disques foliaires par modalité (+/- 4-PBA). Les résultats présentés dans la figure 4 correspondent à la moyenne ± l’écart type. Dans cette figure, ** indique une différence statistique significative d’après un test bilatéral non paramétrique de Mann-Whitney avec un risque a inférieur à 1%.
Résultats. Lorsqu’il est directement en contact avec les spores du champignon, le 4-PBA est capable de protéger les disques foliaires de vigne, montrant une efficacité de protection semblable à celle qui a été observée sur l’Arabette des dames et les deux variétés de tomate, à une dose d’inoculum (5.104 spores/mL) et une concentration finale en molécule (1 mM) identiques. En présence de 4-PBA, on observe en effet une chute du diamètre moyen des lésions de l’ordre de 75% (Figure 4c), ainsi qu’un changement marqué de la répartition des symptômes foliaires en faveur de lésions de plus petites tailles (Figure 4b).
L’ensemble des données présentées dans cet Exemple 1 (Figures 1, 2, 3 et 4) démontrent très clairement que la molécule 4-PBA est capable de protéger efficacement de la pourriture grise 3 plantes différentes appartenant à des familles phylogénétiques très distinctes et présentant un intérêt agronomique manifeste : les Brassicacées, les Solanacées et les Vitacées.
Exemple 2 : Effet direct du 4-PBA sur la plante Arabidopsis thaliana
1. Evaluation de l’Impact du 4-PBA sur la Croissance d’ Arabidopsis thaliana
Matériels et Méthodes. Les graines d’A. thaliana (écotype Col-0) ont été semées en pots individuels directement sur terreau sans étape de stratification préalable. Au total, 24 plantules ont été cultivées en jours courts (16 heures de jour à une température de 24°C et 8 heures de nuit à une température de 19°C) à une intensité lumineuse moyenne de 300pE/m2/s, pendant 4 semaines. Ces plantes ont ensuite été séparées en 2 lots de 12 plantes chacun, l’un arrosé avec de l’eau distillée, l’autre avec une solution de 4-PBA à une concentration finale de 1 mM. En pratique, les arrosages ont eu lieu une fois par semaine à jour et heure fixes, pendant 4 semaines consécutives (Figure 5a). Ils ont été réalisés par bassinage pendant une heure à l’aide de 500 mL d’eau ou de 500 mL d’une solution de 4-PBA (préparée extemporanément) en fonction du lot de plantes. La rosette de chacune des plantules a ensuite été pesée pour évaluer l’impact d’un arrosage au 4-PBA sur la croissance végétative. Les données présentées dans la figure 5b correspondent à des moyennes ± l’écart type pour une expérience, incluant 12 plantes par condition n.s. indique une absence de différence statistique entre les 2 moyennes comparées à l’aide d’un test t de Student avec une valeur a inférieure à 1%.
Résultats. Afin de déterminer un éventuel impact du 4-PBA sur la croissance végétative, des plantes ont été arrosées régulièrement avec une solution de 4-PBA ou de l’eau distillée pour le lot témoin (Figure 5a). La figure 5b présente les données obtenues, montrant une masse moyenne par plante équivalente dans les 2 conditions de culture. La molécule 4-PBA n’a donc pas d’effet sur la biomasse aérienne d’A. thaliana lorsqu’elle est administrée par arrosage à une concentration de 1 mM. On notera que cette concentration est la concentration à laquelle la molécule est efficace pour protéger l’Arabette des Dames, la tomate et la vigne contre B. cinerea (voir Exemple 1). 2. Evaluation de la Phytotoxicité du 4-PBA chez Arabidopsis thaliana
Matériels et Méthodes. Les graines d’A. thaliana (écotype Col-0) ont été semées en pots individuels directement sur terreau sans étape de stratification préalable. Les plantules ont été cultivées en jours courts (8 heures de jour à une température de 21°C / 16 heures de nuit à une température de 18°C) à une intensité lumineuse moyenne de 120 pE/m2/s, pendant 5 semaines. Une solution de 4-PBA (à une concentration finale de 0,5 ou 1 mM) a alors été infiltrée au niveau de la face abaxiale des feuilles les plus développées à l’aide d’une seringue sans aiguille, à raison de 3 à 4 feuilles infiltrées par plante. L’expérience a été répétée 3 fois. Chaque expérience incluait une dizaine de plantes. Six feuilles représentatives des 3 expériences ont été photographiées 48 heures après infiltration (Figure 5c).
Résultats. Le cliché présenté dans la figure 5c montre une absence de symptômes macroscopiques 48 heures après l’infiltration des feuilles avec une solution de 4-PBA, quelle que soit la concentration de la solution, 0,5 ou 1 mM. Ces données suggèrent une absence de toxicité de la molécule dans la gamme de concentrations où elle est active pour protéger les plantes contre les maladies cryptogamiques (voir Exemple 1). L’ensemble des données présentées dans ce deuxième exemple suggèrent que le traitement au champ par épandage de la molécule pourrait être possible à termes sans que cela n’ impacte négativement les rendements de production des plantes.
Exemple 3: Mise en Evidence des Propriétés Anti-fongiques du 4-PBA sur le Champignon Botrytis cinerea in vitro
1. Inhibition de la Croissance Radiale du Mycélium de B. cinerea par le 4-
PBA
Matériels et Méthodes. La souche BMM du champignon B. cinerea a été cultivée pendant environ 10 jours sur milieu PDA solide (24 g/L de PDB et 15 g/L d’agar) à l’obscurité et à une température de 22°C. Un cylindre de gélose comportant le mycélium à son sommet a alors été découpé avec un emporte-pièce stérile de 6 mm de diamètre, puis déposé au centre de boîtes de Pétri (rondes de 9 cm de diamètre) contenant un milieu PDA supplémenté ou non avec du 4-PBA. Le 4-PBA, préparé extemporanément, a été directement ajouté dans le milieu de culture en fusion à des concentrations finales de 1, 2 et 5 mM. Les témoins ont été réalisés en ajoutant un volume d’eau stérile équivalent à la concentration la plus élevée en 4-PBA. Les boîtes ont été placées à l’obscurité à une température de 22°C tout au long de l’expérience. La croissance radiale du mycélium (exprimée en mm) a été suivie par mesure du diamètre le plus long avec un pied à coulisse électronique sur une période de 26 jours. La figure 6a présente les données obtenues pour 3 expériences indépendantes, comprenant chacune 2 réplicats biologiques (moyennes ± écart-types pour n=6 à chaque point cinétique). Ces données ont permis de calculer l’évolution cinétique de la concentration médiane inhibitrice du 4-PBA (notée EC50 dans la figure 6b) à laquelle la croissance radiale du mycélium est diminuée de moitié. Pour cela, la régression linéaire suivante a été utilisée : Taux d’inhibition (%) = f(ln[4-PBA]).
Résultats. Dans la mesure où le 4-PBA est capable de protéger les plantes lorsqu’il est directement ajouté dans Tinoculum (Exemple 1), cela suggère un effet direct de la molécule sur le champignon B. cinerea. C’est ce que nous avons voulu vérifier en cultivant le champignon en présence du composé in vitro. Les résultats obtenus montrent que le 4-PBA ralentit la croissance radiale du mycélium de manière dépendante de la dose (Figure 6a). D’autre part, même si l’efficacité de la molécule diminue avec le temps (augmentation des EC50 présentée dans la Figure 6b), la rémanence du principe actif peut atteindre jusqu’à 23 jours lorsque celui-ci est ajouté au milieu de culture à une concentration de 5 mM (Figure 6a).
Ces résultats démontrent un effet direct, au minimum fongistatique, du 4-PBA vis-à-vis du champignon B. cinerea. 2. Inhibition de la Germination des Spores et de la Croissance de l’Hyphe
Primaire de B. cinerea par le 4-PBA
Matériels et Méthodes. Une solution de spores de B. cinerea (souche BMM) a été préparée comme mentionné ci-dessus dans l’Exemple 1, à une concentration de 5.104 spores/mL dans un milieu PDB à 6 g/L. Cette suspension a été supplémentée ou non en 4-PBA aux concentrations finales indiquées dans les panels a, c et d de la figure 7. Pour déterminer la longueur moyenne des hyphes primaires et le taux de germination des spores, des gouttes de 12 pL des 2 types de suspension ont été déposées sur des lames de verre et le tout a été incubé à hygrométrie saturante pendant 16 à 18 heures, à l’obscurité et à une température de 22°C. A partir de photographies prises en microscopie optique, la longueur de l’hyphe primaire (exprimée en mm) a été mesurée en utilisant le logiciel Image J (Schneider et al. Nature Methods, 2012, 9: 671-675) et le taux de germination a été calculé. Quatre expériences indépendantes ont ainsi été effectuées (Figure 7a, moyennes ± écart-types pour n=255 hyphes primaires mesurés en condition témoin et n=311 hyphes primaires mesurés en condition 4-PBA; Figure 7c, moyennes ± écart-types pour n=499 spores comptés en condition témoin et n=297 spores comptés en condition 4-PBA). Le développement mycélien a également été évalué par mesure de l’absorbance à une longueur d’onde de 600 nm (Figure 7d). Pour cela, une suspension de spores d’un volume de 10 mL, supplémenté ou non en 4-PBA, a été incubée pendant 4 jours à température ambiante avant quantification par néphélométrie. Cette expérience a été répétée 3 fois et chacune des expériences comprenait une triplicat biologique, ainsi qu’un triplicat technique par réplicat biologique. Pour ces expériences, un test bilatéral non paramétrique de Mann-Whitney a été réalisé afin de déterminer les différences statistiques. ** indique une différence significative entre les 2 moyennes avec un risque a inférieure à 1%. Pour évaluer l’influence du pH sur la croissance des hyphes primaires de B. cinerea (Figure 7b), le pH du milieu de culture liquide a été ajusté à un pH de 4,48 à l’aide d’une solution d’acide chlorhydrique avant stérilisation ; l’addition de 4-PBA à une concentration finale de 1 mM dans ce milieu (dont le pH est de 5,15) occasionnant une chute de 0,67 unité de pH. Des gouttes de 12 pL des 2 types de suspension (5.104 spores/mL) ont été déposées sur des lames de verre et le tout a été incubé à hygrométrie saturante pendant 16 à 18 heures, à l’obscurité et à une température de 22°C. A partir de photographies prises en microscopie optique, la longueur de l’hyphe primaire (exprimée en mm) a été mesurée en utilisant le logiciel Image J (Schneider et al. Nature Methods, 2012, 9: 671-675). Les résultats obtenus pour 4 expériences indépendantes sont présentés dans la figure 7b (moyennes ± écart-types pour n=544 hyphes primaires mesurés à un pH de 4,48 et n=643 hyphes primaires mesurés à un pH de 5,15). Pour ces expériences, les différences statistiques ont été évaluées par un test t de Student. n.s. indique une absence de différence significative entre les 2 moyennes avec un risque a fixé à 5%.
Résultats. Afin de mieux appréhender l’effet du 4-PBA sur le développement de B. cinerea, des tests en milieu liquide ont été réalisés in vitro comme décrit ci-avant. Les résultats de la figure 7a confirment l’activité fongistatique de la molécule observée précédemment sur milieu solide (Figure 6a). Dès une concentration de 0,1 mM, le 4- PBA est en effet capable de limiter la croissance de l’hyphe primaire du champignon (sans pour autant affecter le taux de germination des spores qui était de 100% pour ces 4 expériences indépendantes, données non montrées). À une concentration 10 fois plus élevée (soit 1 mM), le 4-PBA possède aussi une activité anti-germinative puissante, qui se traduit par une inhibition de la germination des spores de 86% (Figure 7c) et une forte répression de la croissance mycélienne (94%) mesurée par néphélométrie (Figure 7d). Cependant, dans la mesure où le 4-PBA est un acide faible, il a été remarqué qu’il occasionnait une diminution du pH du milieu de culture (qui passe de 5,15 à 4,48) lorsqu’il y est ajouté à une concentration finale de 1 mM. Pour savoir si cette diminution de pH pouvait être responsable de l’inhibition du taux de germination observée, des spores ont été incubées pendant 16 à 18 heures (en l’absence de 4-PBA) soit dans un milieu de culture à un pH de 4,48, soit dans un milieu de culture à un pH de 5,15 (Figure 7b). Dans ces deux conditions, le taux de germination était de 100% (données non montrées) et la longueur moyenne des hyphes primaires était statistiquement comparable. Ces résultats démontrent clairement que l’activité fongistatique du 4-PBA, qu’elle soit anti-germinative ou qu’elle s’exerce sur la croissance de l’hyphe primaire, est indépendante du pH et relève d’une activité intrinsèque à la molécule.
L’ensemble des données décrites pour cet exemple suggère fortement que l’activité protectrice du 4-PBA contre la pourriture grise (rapportée pour l’Arabette de Dames, la tomate et la vigne) s’exerce au moins via un effet direct sur le champignon ; une activité de stimulation de défense des plantes ne pouvant être exclue à ce stade. D’autre part, cette protection des plantes résulte au minimum d’une activité fongistatique du composé. La potentielle activité fongicide du 4-PBA est en cours d’étude. Exemple 4: Mise en Evidence des Propriétés Anti-fongiques des Isomères du 4- PBA sur le Champignon Botrytis cinerea in vitro
1. Effet du 2-PBA et du 3-PBA sur la Germination des Spores et la Croissance Mycélienne de B. cinerea en Milieu Liquide in vitro
Matériels et Méthodes. Comme dans l’exemple 3 (paragraphe 2), le développement mycélien a été évalué par mesure de l’absorbance à une longueur d’onde de 600 nm. Pour cela, une suspension de spores (5.104 spores/mL) d’un volume de 10 mL, supplémenté ou non en acides phénylbutyriques (2-, 3- ou 4-PBA) aux concentrations indiquées dans la figure 8b, a été incubée pendant 2 et 4 jours à température ambiante avant quantification par néphélométrie. Cette expérience a été répétée 2 fois et chacune des expériences comprenait une triplicat biologique, ainsi qu’un triplicat technique par réplicat biologique. Le taux d’inhibition rapportée (exprimé en %) a été calculé par comparaison aux témoins dont le milieu a été inoculé avec le champignon seul.
Résultats. La figure 8a présente de gauche à droite les formules développées de l’acide 4-phénylbutyrique, et de ces deux isomères, les acides 3-phénylbutyrique et 2- phénylbutyrique. Alors que les 3 molécules montrent une efficacité relative comparable pour réprimer la croissance de B. cinerea en milieu liquide à une concentration finale de 5 mM (quel que soit le temps d’incubation, 2 ou 4 jours), les 2 isomères sont moins efficaces comparativement au 4-PBA à une concentration finale de 1 mM. Au bout de 4 jours d’incubation par exemple, le taux d’inhibition causé par le 2-PBA et le 3-PBA avoisine les 70% alors que celui occasionné par le 4-PBA est de 97%. On notera malgré tout que ces taux d’inhibition restent relativement élevés pour un champignon tel que B. cinerea, dont la croissance en milieu riche est extrêmement rapide.
A l’instar du 4-PBA, les deux isomères ont donc eux aussi une activité fongistatique mise en évidence in vitro sur le champignon B. cinerea. 2. Effet Direct du 3-PBA sur la Croissance de l’Hyphe Primaire de B. cinerea en Milieu Liquide in vitro
Matériels et Méthodes. L’influence du 3-PBA sur la croissance de l’hyphe primaire du champignon B. cinerea a été mesurée dans les mêmes conditions que celles décrites pour le 4-PBA dans l’exemple 3-2. Les données rapportées dans la figure 8c représentent des moyennes ± l’écart-type pour 2 expériences indépendantes (n=217 hyphes primaires mesurés en condition témoin et n=110 hyphes primaires mesurés en condition 4-PBA). Un test bilatéral non paramétrique de Mann-Whitney a été réalisé afin de déterminer les différences statistiques. ** indique une différence significative entre les 2 moyennes avec un risque a inférieure à 1%. Résultats. Comme pour le 4-PBA, le 3-PBA présente une activité fongistatique limitant la croissance de l’hyphe primaire de B. cinerea (Figure 8c). Cette activité mise en évidence in vitro se traduit par une diminution de 38% de la longueur moyenne des hyphes. Cela confirme les données présentées dans la figure 8b.
Exemple 5 : Protection de la Tomate contre la Pourriture Grise par une Combinaison de 4-PBA et d’un de ces Isomères, le 3-PBA
Matériels et Méthodes. Les tests d’absorbance présentées dans les panels a et d de la figure 9 ont été effectués comme cela est décrit dans l’exemple 3-2, à l’exception que les mesures ont été faites 3 jours après inoculation du milieu de culture et qu’elles proviennent d’un duplicat technique. Les solutions de spores utilisées sont celles qui ont servi à l’inoculation des disques foliaires de la variété de tomate M82. Deux expériences indépendantes d’inoculation de disques ont été réalisées comme cela est décrit dans l’exemple 1-2. Les données de ces expériences sont présentées sous la forme de moyenne ± écart-type (panels b et e) et sous la forme de moyennes (panels c et f). Un test bilatéral non paramétrique de Kruskal-Wallis (selon la procédure de comparaison multiple par paires de Conover-Iman) a été appliqué pour déterminer les différences statistiques significatives entre les diamètres moyens des lésions mesurées pour chacune des conditions (seuil a inférieur à 1%). Des lettres identiques indiquent une absence de différence significative entre échantillons, et inversement.
Résultats. Lorsque des disques foliaires de tomate sont inoculés avec des solutions de spores contenant des concentrations croissantes en 4-PBA (de 0,5 à 2,5mM), une diminution de l’intensité des symptômes de la maladie est observée. Elle se caractérise par une chute progressive des diamètres moyens des lésions foliaires en fonction de la concentration du composé (Figure 9b) et une augmentation en parallèle des proportions de lésions de faibles diamètres (inférieurs à 2mm), ainsi que de celles des disques dépourvus de symptômes (Figure 9c). Cet effet dépendant de la dose sur plante est en miroir de ce qui se passe in vitro (diminution de l’absorbance avec la concentration en 4-PBA, Figure 9a), montrant que la protection des tissus végétaux par le 4-PBA s’exerce au minimum par un effet direct sur le champignon. Les expériences menées avec des inocula contenant seulement du 3-PBA indiquent une tendance similaire (Figure 9a, b, c), avec l’exception notable que l’isomère, à concentration équivalente, est moins efficace que le 4-PBA pour protéger les disques foliaires de la pourriture grise. En effet, il faut atteindre par exemple une concentration de 5 mM en 3-PBA pour obtenir un effet similaire à celui du 4-PBA à une concentration de 2,5 mM. Ces données sont en accord avec les interprétations issues des figures 7 et 8.
Dans la perspective où le 4-PBA et ses isomères pourraient être utilisés en combinaison pour optimiser l’efficacité d’un futur traitement et limiter l’apparition de champignons résistants (puisqu’il est plus difficile pour un microorganisme pathogène de contourner deux principes actifs qu’un seul), l’efficacité de protection contre B. cinerea d’une association de 4-PBA et 3-PBA a été évaluée à diverses concentrations. Dans ces conditions, la combinaison des 2 molécules à des concentrations de 0,5 mM chacune se traduit par un effet de synergie potentialisatrice sur la croissance du champignon in vitro (Figure 9d), le diamètre moyen des lésions (Figure 9e) et la répartition des symptômes (Figure 9f), puisque l’effet observé sur ces différents paramètres est supérieur à celui résultant de la somme des effets provoqués par les composés seuls. Pour ce qui concerne les 2 autres combinaisons de concentrations, l’effet synergique est principalement additif et s’exprime au niveau du diamètre des lésions et de la distribution de ces dernières.
En conclusion, ce jeu de données démontre que le 3-PBA est, lui aussi, efficace pour protéger des plantes contre le développement de B. cinerea et que l’association du 4-PBA avec son isomère est encore plus efficace que les deux molécules prises séparément.
Exemple 6 : Inhibition de la Croissance Radiale du Mycélium de 12 Espèces de Champignons Phytopathogènes par le 4-PBA Matériels et Méthodes. Les champignons et oomycètes étudiés, ainsi que leur température de croissance et milieu de culture respectifs, sont décrits dans le tableau 1 ci-dessous.
Tableau 1
Les conditions d’expérimentation et de culture sont les mêmes que celles décrites dans l’exemple 3 (paragraphe 1). Les données présentées dans les figures 10 et 11 sont issues d’une seule expérience comprenant un duplicat biologique (moyenne ± écart- type). Dans la figure 10, le panel (a) montre les résultats obtenus en croissance radiale pour Fusarium graminearum, le panel (b) pour Fusarium verticilloides, le panel (c) pour Leptosphaeria maculans, le panel (d) pour Flelminthosporium teres et le panel (e) pour Magnaporthe oryzae. Dans la figure 11, le panel a montré les résultats obtenus pour Fusarium oxysporum f. sp. melonis, le panel b pour Colletotrichum lindemuthianum, le panel c pour Alternaria solani, les panels d et e pour les souches respectives 1 et 1509 d 'Alternaria brassicicola, le panel (f) pour Sclerotinia sclerotorum et le panel (g) pour Cercospora beticola. A partir de ces résultats et lorsque cela était possible, les concentrations médianes inhibitrices (notées EC50) ont été calculées comme dans l’exemple 3. Les résultats obtenus sont présentés dans le Tableau 2 ci-dessous. Pour s’affranchir des vitesses de croissance différentes des divers espèces fongiques, les EC50 ont toutes été calculées pour le jour où les champignons cultivés en conditions témoins (milieu supplémenté en eau) avaient colonisé la boîte de Pétri entière.
Tableau 2. Résultats. Afin de déterminer le spectre d’action potentiel du 4-PBA, des expériences de croissance radiale ont été conduites sur des champignons s’attaquant aux plantes de grande culture (dont le colza, le blé, le maïs, l’orge et le riz, voir Figure 10) et aux plantes maraîchères (dont le melon, le haricot, la tomate, la pomme de terre, le choux et la betterave, voir Figure 11). On notera que tous les champignons testés sont sensibles au 4-PBA, suggérant que la molécule peut être utilisée pour traiter une large gamme de maladies cryptogamiques, en plus de la pourriture grise. Pour les champignons les plus récalcitrants tels que F. graminearum (Figure 10a), la rémanence de la molécule peut atteindre jusqu’à 10 jours à la concentration la plus faible testée (soit ImM), et peut se prolonger au jusqu’à 30 jours pour certaines espèces hypersensibles comme Helminthosporium teres (Figure lOd) et Colletotrichum lindemunthianum (Figure 10b).
Les concentrations médianes inhibitrices, rapportées dans le Tableau 2, permettent de comparer la sensibilité respective des différents champignons et isolats au 4-PBA, indépendamment de leur vitesse de croissance. Ainsi, seuls les champignons S. sclerotorum et C. beticola présentent une sensibilité d’un ordre de grandeur comparable à celle de B. cinerea avec une EC50 comprise entre 2 et 3mM (Tableau 2 et figure 6b). Globalement, tous les autres champignons pour lesquels les données sont rapportées dans les figures 10 et 11 sont 2 à 11 fois plus sensibles au 4-PBA que B. cinerea ; exception faite du champignon H. teres (responsable de l’helminthosporiose de l’orge), qui est le plus sensible d’entre tous avec une EC50 450.000 fois plus faible que celle de B. cinerea.
L’ensemble de ces résultats montre que le 4-PBA possède une activité fongistatique au large spectre dès une concentration de 1 mM. Cette activité est probablement doublée d’une activité fongicide à des concentrations plus élevées (tels que 2 et 5mM), mais les expériences réalisées ne nous permettent pas de conclure avec certitude sur ce point.
Exemple 7 : Inhibition de la Croissance Radiale de Deux Oomycètes Phytopathogènes par le 4-PBA
Matériels et Méthodes. Les 2 oomycètes étudiés, ainsi que leur température de croissance et milieu de culture respectifs, sont décrits dans le tableau 1 (ci-dessus). Les conditions d’expérimentation et de culture sont les mêmes que celles décrites dans l’exemple 3 (paragraphe 1). Les données présentées dans la figure 12 sont issues d’une seule expérience comprenant un duplicat biologique (moyenne ± écart- type). Dans cette figure, le panel (a) montre les résultats obtenus en croissance radiale pour Phytophthora parasitica et le panel (b) pour Phytophthora capsici. L’ECso calculée pour le premier oomycète est rapportée dans le Tableau 2 (ci-dessus). Résultats. Aux champs ou en serres, les oomycètes sont responsables de maladies cryptogamiques dont il est souvent difficile de se débarrasser autrement que par traitement chimique. Parmi celles-ci on peut citer le mildiou, qui peut se développer sur de nombreuses espèces végétales d’intérêt agronomique (comme la pomme de terre, la tomate ou la vigne).
De manière tout à fait remarquable, les 2 oomycètes P. parasitica et P. capsici sont de loin les microorganismes les plus sensibles au 4-PBA parmi ceux que nous avons testés (Figure 12a et b). En effet, la différence entre l’ECso calculée pour B. cinerea et celle de P. parasitica est de 7 ordres de grandeur (Tableau 2 et Figure 6b). En d’autres termes, cet oomycète est environ 12 millions de fois plus sensible à la molécule que le champignon.
Ces résultats démontrent une activité biostatique du 4-PBA vis-à-vis des oomycètes étudiés dès une concentration finale de ImM, et suggèrent une activité biocide à des concentrations plus élevées, pouvant expliquer l’absence totale de croissance sur 20 jours des 2 oomycètes à des concentrations de 2 et 5 mM. Ils permettent également d’extrapoler l’utilisation du 4-PBA pour traiter des maladies cryptogamiques causées par des oomycètes, en plus de celle découlant d’une infection par des champignons.
Exemple 8 : Inhibition de la Croissance Radiale du Mycélium de Phanerochaete chrysosporium par le 4-PBA
Matériels et Méthodes. La température de croissance et le milieu de culture du champignon Phanerochaete chrysosporium sont décrits dans le Tableau 1 ci-dessus. Les conditions d’expérimentation et de culture sont les mêmes que celles décrites dans l’exemple 3 (paragraphe 1). Les données présentées dans la figure 13 sont issues d’une seule expérience comprenant un duplicat biologique (moyenne ± écart-type).
Résultats. Le champignon Phanerochaete chrysosporium est équipé d’un attirail enzymatique lui permettant de dégrader la lignine constitutive du bois. Cette espèce fongique ne s’attaque donc pas aux plantes vivantes, mais peut détériorer le bois de construction. Il est responsable de la pourriture blanche dans les habitations. Dans conditions expérimentales utilisées ici, P. chrysosporium montre une hypersensibilité au 4-PBA, puisqu’il est incapable de se développer à des concentrations finales de 2 et 5 mM (Figure 13). Par ailleurs, il faut 14 jours à ce champignon pour surmonter une supplémentation du milieu de culture en 4-PBA à hauteur de 1 mM, soit exactement 2 fois plus de temps que ce qu’il n’en faut à B. cinerea pour coloniser la totalité de la boîte de Pétri dans les mêmes conditions (Figure 6a). Ces données démontent une fois de plus l’activité anti- fongique du 4-PBA et permettent d’envisager une potentielle utilisation de la molécule pour traiter le bois de construction infecté par des champignons ou prévenir une éventuelle infection.
Exemple 9 : Mise en Evidence des Propriétés Antifongiques du 4-PBA sur le Champignon Zymoseptoria tritici in vitro 1. Inhibition de la Croissance de l’Hyphe Primaire de Z. tritici par le 4-PBA
Matériels et Méthodes. Pour déterminer la sensibilité au 4-PBA du champignon Zymoseptoria tritici (ou Mycosphaerella graminicola, qui est responsable d’une des principales maladies du blé : la septoriose), la souche IPO-323 a été utilisée. Une suspension de spores de cet isolat a été préparée dans de l’eau osmosée stérile à une concentration finale de 5.106 spores/mL à partir de cultures réalisées pendant 4 jours à 17°C à l’obscurité sur un milieu solide à pH 5.9 (dont la composition était la suivante : 20g/L d’extrait de malt, 5g/L d’extrait de levure et 12.5 g/L d’agar). La suspension de spore ainsi obtenue a ensuite été déposée à raison de 300 pL par boîte de Pétri contenant un milieu solide PG (10 g/L glucose, 2g/L K2HPO4, 2g/L KH2PO4, 12,5 g/l agar, pH 6.3). Le milieu a été supplémenté ou non avec du 4-PBA, à des concentrations croissantes, en utilisant une solution mère de la molécule préparée extemporanément. Une gamme de concentrations de 4-PBA allant de 100 mg/L (0,6 mM) à 400 mg/L (2,44 mM), et incluant six concentrations, a été effectuée (soit une expérience). Après dépôt de la suspension de spores, les milieux solides inoculés ont été incubés pendant 48 heures à 17°C à l’obscurité et la longueur des hyphes primaires a alors été mesurée sous microscope. Les résultats présentés dans la Figure 14 sont issus de la moyenne de la longueur de 10 hyphes primaires par concentration. La longueur des hyphes de chaque modalité contenant du 4-PBA a été normalisée par rapport à la longueur des hyphes de la modalité sans 4-PBA. Ces données normalisées ont été utilisées pour calculer FEC50 (Tableau 3) en ajustant à un modèle à trois paramètres pour courbes sigmoïdes, tel qu’implémenté dans le logiciel GraphPad Prism. Résultats. La sensibilité au 4-PBA du champignon Zymoseptoria tritici, responsable de la septoriose du blé, a été évaluée par mesure de l’inhibition de la croissance de l’hyphe primaire in vitro en utilisant la souche de référence IPO-323. La Figure 14 montre en effet que, deux jours après le début de l’expérience, la diminution de la longueur moyenne de l’hyphe primaire est d’autant plus importante que la concentration en 4-PBA est élevée.
Comme pour les Exemples 3, 6, 7 et 8, ces données démontrent l’activité fongistatique du 4-PBA vis-à-vis de Z. tritici et étendent ainsi son spectre d’action à un champignon phytopathogène supplémentaire. On notera par ailleurs que l’efficacité du 4-PBA contre ce nouveau champignon est comparable à celle déterminée pour les autres champignons (Tableau 2 de l’Exemple 6), comme en témoigne l’ECso calculée de 0,657 mM (Tableau 3).
Tableau 3 : Concentrations médianes inhibitrices du 4-PBA déterminées expérimentalement pour sept isolats du champignon Zymospetoria tritici.
2. Inhibition par le 4-PBA de la Croissance de l’Hyphe Primaire de Six Isolats de Z. tritici Résistants à des Fongicides Conventionnels.
Matériels et Méthodes. La sensibilité au 4-PBA de six isolats (souches pures) du champignon Z. tritici, dont la résistante acquise à des fongicides conventionnels a été démontrée génétiquement, a été déterminée comme décrit ci-avant ( cf section Matériel & Méthodes du point 1). Une seule expérience a été réalisée par isolat. Cette expérience incluait une gamme de concentrations par isolat et la mesure de la longueur de 10 hyphes primaires par concentration et par isolat. Les données correspondantes sont présentées dans la Figure 14 et le tableau 3. Les caractéristiques des différents isolats utilisés sont présentées dans le tableau 4.
Résultats. Dans un contexte où plusieurs souches de Z. tritici ont sélectionné des résistances à différentes classes de fongicides chimiques couramment employés (tels que les benzimidazoles, les inhibiteurs du cytochrome b, les inhibiteurs de succinate déshydrogénase ou encore les inhibiteurs de déméthylation des stérols), il était important de savoir si le 4-PBA pouvait représenter une alternative. Pour cela, six isolats dont la résistance acquise a été caractérisée phénotypiquement et génotypiquement ont été testés vis-à-vis de leur sensibilité au 4-PBA. Comme pour la souche de référence IPO-323, la Figure 14 montre que l’activité fongistatique du 4-PBA contre ces six souches pures est fonction de la concentration utilisée. Ainsi, le 4-PBA est non seulement capable de limiter la croissance de l’hyphe primaire d’un isolat présentant une résistance simple aux benzimidazoles (isolat 37-30), mais également d’inhiber celle d’isolats présentant des résistances multiples, que ce phénotype soit lié à un phénotype d’efflux accru du fongicide ou non (isolats non « MultiDrug-Resistance » 14-FT-A1, STDP-047915 et ST-5548 et isolats « MultiDrug Résistance » 3741). D’autre part, l’ECso calculée pour l’ensemble de ces isolats est du même ordre de grandeur (environ ImM), indiquant une fois encore que l’efficacité de la molécule est comparable à celle observée pour d’autres champignons (Exemples 3, 6, 7 et 8). Tableau 4 : Caractéristiques des sept isolats du champignon Zymoseptoria tritici testées vis-à-vis de leur sensibilité au 4-PBA in vitro.
Les phénotypes et génotypes de résistance aux fongicides des isolats décrits dans ce tableau peuvent être retrouvés en détails dans la publication de Garnault et al. (Pest Manag. Sci., 2019, 75: 1794-1807). Abréviations : DMI, sterol DeMethylation Inhibitor ; MDR, Multi
Drug Résistance ; Qol, Quinone outside inhibitor; SDHI, Succinate DeHydrogenase Inhibitor. L’ensemble de ces données renseigne indirectement sur un potentiel mode d’action du 4-PBA, montrant vraisemblablement qu’il s’agit d’une nouvelle classe de fongicides. De plus, ces résultats suggèrent fortement que le 4-PBA pourrait être employé à termes pour traiter la septoriose du blé, même lorsqu’elle est causée par des souches de Z. tritici résistantes aux fongicides de synthèse.

Claims

Revendications
1. Utilisation de l’acide 2-phénylbutyrique (2-PBA), ou de l’acide 3- phénylbutyrique (3-PBA), ou de l’acide 4-phénylbutyrique (4-PBA), ou de l’un de leurs sels, ou de l’une de leurs combinaisons, comme agent fongique ou fongistatique, pour prévenir ou traiter une maladie cryptogamique chez une plante ou un produit végétal, la maladie cryptogamique étant causée par un champignon ou un oomycète.
2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que : le champignon est sélectionné parmi les champignons phytopathogènes appartenant aux genres : Altemaria, Athelia, Armillaria, Aspergillus, Bipolaris, Blumeria, Botrytis (Cochliobolus), Carpenteles, Ceratocystis, Cercospora, Choanephora, Cladosporium, Claviceps, Colletotrichum, Cryphonectria, Diaporthe (Phomopsis), Erysiphe, Eurotium, Fusarium, Ganoderma, Gibberella, Glomerella, Magnaporthe, Macalpinomyces, Melampsora, Monilia, Moniliophthora, Microcyclus, Mycena, Mycosphaerella, Nectria, Neonectria, Olpidium, Pénicillium, Pestalotia, Phakopsora, Phanerochaete, Phellinus, Physoderma, Pleospora, Podosphaera, Puccinia, Rhizoctonia, Rhizopus, Sclerotinia, Seiridium, Stemphylium, Septoria, Sphaerotheca, Sporisorium, Synchytrium, Taphrina, Tilletia, Thanatephorus, Trichoderma, Typhula, Ulocladium, Ustilago, Urocystis, Uromyces, Verticillium et Zymoseptoria; et l’ oomycète est sélectionné parmi les oomycètes phytopathogènes appartenant aux genres : Albugo, Aphanomyces, Bremia, Peronospora, Peronosclerospora, Phytophthora, Plasmodiophora, Plasmopara, Polymyxa, Pseudoplasmopara, Pythium, Sclerophthora et Sclerospoara.
3. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisée en ce que la plante est une plante de grande culture, une plante potagère, une plante d’ornement, un arbre ou un arbuste.
4. Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce que la plante appartient à la famille des Malvacées, des Solanacées, des Cucurbitacées, des Crucifères ou Brassicacées, des Composées ou Astéracées, des Ombellifères ou Apiacées, des Liliacées ou Asparagacées, des Rosacées, des Polygonacées, des Lamiacées, des Vitacées, des Fabacées, des Poacées, des Liliacées, des Rubiacées, des Musacées, Orchidacées, des Lauracées, des Alliacées, des Chénopodiacées, des Valérianacées, des Caprifoliacées, des Verbénacées, des Plantaginacées, des Scrofulariacées, des Ericacées, des Primulacées, des Oléacées, des Apocynacées, des Asclépiadacées, des Gentianacées, des Boraginacées, des Araliacées, des Grossulariacées, des Myrtacées, des Eléagnacées, des Lythracées, des Onagracées, des Thyméléacées, des Passifloracées, des Tiliacées, des Bombacacées, des Linacées, des Géraniacées, des Rutacées, des Violacées, des Cistacées, des Hypéricacées, des Théacées, des Myristicacées, des Papavéracées, des Fumariacées, des Anonacées, des Renonculacées, des Caryophyllacées, des Fagacées, des Juglandacées, des Urticacées, des Moracées, des Santalacées, des Cannabinacées, des Piperacées, des Salicacées, des Bétulacées, des Arécacées, des Zingibéracées, des Broméliacées, des Pinacées, des Cupressacées, des Ginkgoacées, des Cycadacées, des Équisétacées, des Lycopodes ou des sélaginelles.
5. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisée en ce que le produit végétal est choisi parmi les semences, les graines, les tubercules, les fruits post-récolte, les légumes post-récolte, les grains post-récolte, les produits alimentaires de 4eme gamme, et le bois post-coupe.
6. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 et 3-5, caractérisée en ce que la maladie cryptogamique est choisie dans le groupe constitué par la pourriture grise ou botrytis, le mildiou, la fusariose, la cercosporiose, l’oïdium, l’alternariose, l’anthracnose, les charbons, les caries, les septorioses, la moniliose ou monilia, les rouilles, l’helminthosporiose, la sclérotiniose, la tavelure, la verticilliose, la cladosporiose, la cloque, la coryneum ou maladie criblée, l’entomosporiose, la fonte des semis, l’esca, l’eutypiose, la gommose, la gravelle, le mal secco, le pied noir, la pyriculariose, et la graphiose de l’orme.
7. Utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que la maladie cryptogamique est causée par un champignon ou un oomycète résistant à au moins un fongicide conventionnel.
8. Utilisation selon la revendication 6 ou la revendication 7, caractérisée en ce que la maladie cryptogamique est la septoriose du blé causée par le champignon Zymoseptoria tritici, en particulier une souche de Zymoseptoria tritici qui présente une résistance simple ou une résistance multiple aux fongicides conventionnels.
9. Méthode pour prévenir ou traiter une maladie cryptogamique causée par un champignon ou oomycète chez une plante ou un produit végétal, la méthode comprenant l’application d’une quantité efficace de 2-PBA, ou de 3-PBA, ou de 4-PBA, ou de l’un de leurs sels, ou de l’une de leurs combinaisons, à la plante ou au sol environnant la plante ou au produit végétal, la quantité efficace étant suffisante pour détruire le champignon ou oomycète ou pour inhiber la germination ou la croissance du champignon ou oomycète ou pour inhiber le mouvement des zoospores d’oomycètes.
10. Méthode pour améliorer la conservation d’un produit végétal susceptible d’être affecté par un champignon ou oomycète phytopathogène, la méthode comprenant l’application d’une quantité efficace de 2-PBA, ou de 3-PBA, ou de 4-PBA, ou de l’un de leurs sels, ou de l’une de leurs combinaisons, au produit végétal, la quantité efficace étant suffisante pour détruire le champignon ou oomycète ou pour inhiber la germination ou la croissance du champignon ou oomycète ou pour inhiber le mouvement des zoospores.
11. Méthode pour protéger les semences et/ou pour améliorer la levée des semis, la méthode comprenant l’application d’une quantité suffisante de 2-PBA, ou de 3- PBA, ou de 4-PBA, ou de l’un de leurs sels, ou de l’une de leurs combinaisons, à des graines destinées aux semis, la méthode étant caractérisée en ce que les graines sont susceptibles d’être affectées par un champignon ou oomycète phytopathogène et en ce que la quantité efficace est suffisante pour détruire le champignon ou oomycète ou pour inhiber la germination ou la croissance du champignon ou oomycète ou pour inhiber le mouvement des zoospores d’oomycètes.
12. Méthode selon la revendication 11, caractérisée en ce que le champignon ou l’oomycète phytopathogène est responsable de la fonte des semis.
13. Composition phytosanitaire comprenant, en tant qu’agent fongicide ou fongistatiques, du 2-PBA, ou du 3-PBA, ou du 4-PBA, ou l’un de leurs sels, ou l’une de leurs combinaisons.
14. Solution d’enrobage ou de pelliculage des semences comprenant, en tant qu’agent fongicide ou fongistatique, du 2-PBA, ou du 3-PBA, ou du 4-PBA, ou l’un de leurs sels, ou l’une de leurs combinaisons.
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