EP3509663B1 - Procédé automatisé et appareil pour la collecte de leucocytes à partir de sang total - Google Patents
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- Procédé de séparation de lymphocytes et/ou de cellules souches du sang total dans un dispositif de séparation de cellules sanguines automatisé (1), dans lequel le dispositif de séparation de cellules sanguines automatisé (1) n'est pas relié à un patient, comprenant les étapes- d'alimentation d'un ensemble de tubes comportant un tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) et installé sur le dispositif de séparation de cellules sanguines automatisé, en utilisant des échantillons de sang qui ont déjà été prélevés chez un patient,- dans une chambre de séparation (30) d'une unité de centrifugation (40), de séparation des fractions de globules rouges (37) et de plasma (36), avec une fraction de couche leuco-plaquettaire (38) comportant des lymphocytes et/ou des cellules souches entre les fractions de globules rouges (37) et de plasma (36), dans lequel les fractions de plasma (36) et de globules rouges (37) ne sont pas reperfusées dans le patient mais sont collectées dans des récipients de collecte (56),- d'accumulation de la couche leuco-plaquettaire (38) entre les fractions de globules rouges (37) et de plasma (36) dans la chambre de séparation (30) ;- de condensation de la fraction de couche leuco-plaquettaire (38) dans la chambre de séparation (30),- de déversement de la couche leuco-plaquettaire (38) sur le dispositif détecteur (115) au niveau d'un panneau avant (100) du dispositif de séparation de cellules sanguines automatisé (1), dans lequel dans un flux de fluide, la fraction de couche leuco-plaquettaire (38) suit la fraction de plasma (36) et est suivie par la fraction de globules rouges (37) ;- de transfert et de collecte de la couche leuco-plaquettaire (38) comprenant les lymphocytes et/ou les cellules souches dans un récipient de collecte (53),dans lequel sont appliqués, pour le transfert et la collecte de la couche leuco-plaquettaire (38) comprenant les lymphocytes et/ou les cellules souches dans un récipient de collecte (53), au moins deux critères, dans lequel- un dispositif détecteur (115) surveille la turbidité et la couleur du flux de fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) et le transfert de la couche leuco-plaquettaire (38) comprenant les lymphocytes et/ou les cellules couches dans le récipient de collecte (53) est lancé lorsque la turbidité du flux de fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) en tant que premier critère augmente tout en indiquant qu'en outre les plaquettes, des lymphocytes et/ou des cellules souches sont contenus dans le flux de fluide, et lorsqu'un signal d'absorption représentant une couleur du flux de fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) augmente tout en indiquant la présence de lymphocytes et/ou de cellules souches et au moins un décompte de plaquettes réduit dans le flux de fluide, et- le transfert de la couche leuco-plaquettaire (38) comprenant les lymphocytes et/ou les cellules souches dans le récipient de collecte (53) est fini lorsqu'un seuil prédéfini de la couleur du flux de fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) en tant que deuxième critère est atteint, dans lequel le seuil correspond à un taux d'hématocrite prédéfini.
- Procédé selon la revendication 1, dans lequel le dispositif détecteur (115) comprend un capteur optique.
- Procédé selon la revendication 2, dans lequel le capteur optique comprend une DEL rouge pour la mesure de la turbidité et une DEL verte pour la mesure de l'absorption de la lumière verte par des globules rouges (37) dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124).
- Procédé selon la revendication 3, dans lequel la lumière transmise à travers le fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) et la lumière émise vers l'arrière sont toutes les deux détectées par des phototransistors, et la section de mesure vers l'arrière fait office d'une branche de mesure de référence pour permettre la compensation des effets du vieillissement et de la dérive de température dans les DEL.
- Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans lequel une pince de déversement (110) est associée au tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124), et dans lequel un dispositif de traitement (133) est prévu, lequel reçoit des signaux d'un dispositif détecteur (115) et qui déclenche la pince de déversement (110) pour changer sa position en commutant la pince de déversement (110) dans une direction d'un récipient de collecte (53) pour des lymphocytes et/ou des cellules souches ou en commutant la pince de déversement (110) dans une direction d'un autre récipient de collecte pour des globules rouges.
- Procédé selon la revendication 5, dans lequel l'augmentation de la turbidité et le signal d'absorption représentant une couleur du flux de fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) déclenche un signal depuis le dispositif détecteur (115) au dispositif de traitement (133), et le dispositif de traitement (133) déclenche le lancement du transfert et de la collecte de la couche leuco-plaquettaire (38) comprenant les lymphocytes et/ou les cellules souches en commutant la pince de déversement (110) dans la direction du récipient de collecte (53) pour des lymphocytes et/ou des cellules souches.
- Procédé selon la revendication 5 ou 6, dans lequel l'atteinte du seuil prédéfini de la couleur du flux de fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) déclenche un signal depuis le dispositif détecteur (115) au dispositif de traitement (133) et le dispositif de traitement (133) déclenche la fin du transfert et de la collecte de la couche leuco-plaquettaire (38) comprenant les lymphocytes et/ou les cellules couches en commutant la pince de déversement (110) dans la direction de l'autre récipient de collecte pour des globules rouges.
- Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, dans lequel le seuil prédéfini de la couleur du flux de fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) est une couleur rouge correspondant à un taux d'hématocrite allant jusqu'à 25 %, de manière préférée allant jusqu'à 20 % ou 15 %, de manière davantage préférée allant jusqu'à 14 %, 13 %, 12 %, 11 % ou 10 %, idéalement allant jusqu'à 9 %, 8 %, 7 %, 6 % ou 5 %.
- Procédé selon la revendication 2 ou l'une quelconque des revendications 3 à 8 si elles dépendent de la revendication 2, dans lequel la collecte de la couche leuco-plaquettaire (38) comprenant les lymphocytes et/ou les cellules souches est finie après que le capteur optique a détecté que le seuil de couleur est atteint et après qu'un volume par défaut supplémentaire de la couche leuco-plaquettaire (38) est autorisé à traverser la pince de déversement (110).
- Procédé selon la revendication 9, dans lequel le procédé est réalisé en plusieurs cycles, dans lequel dans les cycles d'une première moitié de procédure, après détection par le capteur optique du seuil de couleur, le volume par défaut supplémentaire de la couche leuco-plaquettaire (38), qui comprend les lymphocytes et/ou les cellules souches, est autorisé à traverser la pince de déversement (110), avant que la collecte de la couche leuco-plaquettaire (38) comprenant les lymphocytes et/ou les cellules souches ne soit finie ; et dans un autre cycle quelconque après la première moitié de procédure, après détection par le capteur optique du seuil de couleur, un volume par défaut supplémentaire réduit de la couche leuco-plaquettaire (38) est autorisé à traverser la pince de déversement (110) avant que la collecte de la couche leuco-plaquettaire (38) comprenant les lymphocytes et/ou les cellules souches ne soit finie.
- Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes 1 à 10, dans lequel un produit collecté dans le récipient de collecte (53) contient sensiblement des lymphocytes et/ou des cellules souches.
- Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, dans lequel un produit collecté dans le récipient de collecte (53) présente un décompte réduit de plaquettes, de granulocytes et de globules rouges ou est sensiblement exempt de plaquettes, de granulocytes et de globules rouges.
- Procédé selon la revendication 12, dans lequel le produit collecté dans le récipient de collecte (53) présente un taux d'hématocrite, qui est inférieur à 10 %, 9 % ou 8 % lorsque les cellules souches sont collectées en tant que produit et est inférieur à 5 %, 4 %, 3 % ou 2 % lorsque des lymphocytes sont collectés en tant que produit.
- Dispositif de séparation de cellules sanguines (1) pour séparer des lymphocytes et/ou des cellules souches du sang total dans une procédure automatisée, comprenant :- une section de pompage (20) destinée à pomper un fluide à travers un ensemble de tubes comportant un tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) installé sur le dispositif de séparation de cellules sanguines automatisé (1),- un compartiment centrifuge (40), qui comprend une chambre de séparation (30) pour la séparation automatisée d'une fraction de couche leuco-plaquettaire (37) comportant des lymphocytes et/ou des cellules souches du sang total, dans lequel dans un flux de fluide, la fraction de couche leuco-plaquettaire (38) suit une fraction de plasma (36) et est suivie par une fraction de globules rouges (37),- un dispositif détecteur (115) destiné à mesurer une valeur de mesure indiquant la présence de lymphocytes et/ou de cellules souches dans le flux de fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124), et destiné à mesurer une valeur de mesure indiquant la présence de globules rouges dans le flux de fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124),- une pince automatique (110) destinée à diriger le flux de fluide dans une direction d'un récipient de collecte (53) pour des lymphocytes et/ou des cellules souches ou à diriger le flux de fluide dans une direction pour la reperfusion dans un patient, et- un dispositif de traitement (133) destiné à commander la pince automatique (110), le dispositif de traitement (113) étant constitué pour commuter la position de la pince automatique (110) dans la direction du récipient de collecte (53) lorsque le dispositif détecteur (115) mesure une valeur de mesure indiquant la présence de lymphocytes et/ou de cellules souches dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124), et le dispositif processeur (133) étant constitué en outre pour commuter la position de la pince automatique (110) dans la direction pour la reperfusion lorsque le dispositif détecteur (115) détecte des globules rouges (37) dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124),dans lequel sont appliqués, pour le transfert et la collecte de la couche leuco-plaquettaire (38) comprenant les lymphocytes et/ou les cellules souches dans le récipient de collecte (53), au moins deux critères, dans lequel- le dispositif détecteur (115) surveille la turbidité et la couleur du flux de fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) et le transfert de la couche leuco-plaquettaire (38) comprenant les lymphocytes et/ou les cellules souches dans le récipient de collecte (53) est lancé, lorsque la turbidité du flux de fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) en tant que premier critère augmente tout en indiquant qu'en outre les plaquettes, les lymphocytes et/ou les cellules souches sont contenues dans le flux de fluide et lorsqu'un signal d'absorption représentant une couleur du flux de fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) augmente tout en indiquant la présence de lymphocytes et/ou de cellules souches et au moins un décompte de plaquettes réduit dans le flux de fluide, et- le transfert et la collecte de la couche leuco-plaquettaire (38) comprenant les lymphocytes et/ou les cellules souches dans le récipient de collecte (53) sont finis lorsqu'un seuil prédéfini de la couleur du flux de fluide dans le tube pour plasma/couche leuco-plaquettaire (124) en tant que deuxième critère est atteint, dans lequel le seuil correspond à un taux d'hématocrite prédéfini.
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