EP1745061A1 - Novel amphiphilic compounds, preparation method thereof and applications of same - Google Patents

Novel amphiphilic compounds, preparation method thereof and applications of same

Info

Publication number
EP1745061A1
EP1745061A1 EP05767494A EP05767494A EP1745061A1 EP 1745061 A1 EP1745061 A1 EP 1745061A1 EP 05767494 A EP05767494 A EP 05767494A EP 05767494 A EP05767494 A EP 05767494A EP 1745061 A1 EP1745061 A1 EP 1745061A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
formula
compound
group
represent
carbon atoms
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
EP05767494A
Other languages
German (de)
French (fr)
Inventor
Philippe Barthelemy
Michel Camplo
Mark W. Grinstaff
Louis Moreau
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Aix Marseille Universite
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Universite dAvignon et des Pays de Vaucluse
Original Assignee
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Universite de la Mediterranee Aix Marseille II
Universite dAvignon et des Pays de Vaucluse
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Centre National de la Recherche Scientifique CNRS, Universite de la Mediterranee Aix Marseille II, Universite dAvignon et des Pays de Vaucluse filed Critical Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Publication of EP1745061A1 publication Critical patent/EP1745061A1/en
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation

Definitions

  • the present invention relates to new amphiphilic compounds, their preparation process and their applications in particular to transfection.
  • One method of choice is the introduction of specific genetic material into a cell or transfection.
  • the compounds used for this purpose such as the liposome formulation of a mono cationic lipid (N- [1- (2,3-Dioleoyloxy)] - N, N, N- trimethylammonium propane methylsulfate in sterile water ( concentration 1 mg / ml) called DOTAP), polyethyleneimine (PEI) or lipofectamine, have a low rate of effectiveness.
  • X represents an oxygen or sulfur atom, or a group -CH 2 -
  • B represents a purine or pyrimidine base, such as uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine or hypoxanthine, optionally substituted, or a base non-natural mono-or bi-cyclic heterocylic, each cycle comprising 4 to 7 links, optionally substituted, Li and L 2 , identical or different, represent an oxycarbonyl group -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, an oxygen atom, or alternatively, Li and L 2, together, form a ketal group of formula
  • Ri and R 2 represent a linear or branched alkyl chain containing from 2 to 30 carbon atoms, preferably from 6 to 25 carbon atoms, in particular from 8 to 25 carbon atoms, saturated or partially unsaturated, possibly totally or partially fluorinated, optionally substituted on the chain end carbon by a fluorine atom or by a benzyl or naphthyl ester or ether and R 3 represents a hydroxy, amino group, a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine group, phosphatidylethanolamine, O-alkyl-phosphatidylethanolamine, O- alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium, a group NH 2 -R 4 , NHR R 5 or NR R 5 R 6 in which R 4l R 5 and R 6 , identical or different, represent an atom d hydrogen or a linear or branched alkyl or hydroxy
  • CO-V- in which V and W identical or different represent a bond -O -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2 , and n can take the values of 1 at 500 and A T and A 2 which are identical or different, represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl radical containing from 2 to 5 carbon atoms, with the exception of the compounds in which: - X represents an oxygen atom,
  • R 3 represents a hydroxy group and either L1 and L2, identical represent an oxycarbonyl group, Ri and R 2 identical represent a C 2 to C ⁇ 7 alkyl, and B represents cytosine, adenosine or a 6-methoxypurine, or Li and L 2 together form a ketal group, identical Ri and R 2 represent methyl and B represents adenosine.
  • X represents an oxygen atom.
  • Preferred compounds of preferred formula (I) are those in which: X represents an oxygen or sulfur atom, - B represents a purine or pyrimidine base such as uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine or hypoxanthine, Li and L 2 , identical or different, represent an oxycarbonyl group -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, an oxygen atom, - Ri and R 2 , identical or different, represent a linear or branched alkyl chain containing from 2 to 30 carbon atoms, preferably from 6 to 25 carbon atoms, in particular from 8 to 25 carbon atoms, saturated or partially unsaturated, possibly totally or partially fluorinated, optionally substituted on the chain end carbon by a fluorine atom or by a benzyl or naphthyl ester or ether and R 3 represents a
  • - B represents cytosine, adenosine or 6-methoxypuhne
  • - Ri and R 2 identical represent a C 2 to C 17 alkyl and - R 3 represents a hydroxy group.
  • Other preferred compounds of formula (I) are those in which R 3 represents an amino group, a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, O-alkyl-phosphatidylethanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium group.
  • R 4 , R 5 and R 6 identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydroxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a ZW-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 -) n - N - A1 CH 2 -V- A2 or - (- CH 2 -CH-) n - I CO-V- in which V and W identical or different represent a bond -0 -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2l and n can take the values from 1 to 500 and Ai and A 2 identical or different represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 atoms of ca linear or branched carbon or acyl containing
  • - B represents a purine or pyrimidine base chosen from uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine
  • - X represents an oxygen or sulfur atom
  • - L 1 and L 2 represent an oxycarbonyl, thiocarbamate, carbonate or carbamate group, and are preferably identical
  • - Ri and R 2 represent an undecyl, tridecyl, pentadecyl, heptadecyl radical, nonadecyl, cis, cis, cis, cis-4,7,10,13-nonadec-tetraenyl, arachidonyl, c s-8-heptadecenyl
  • - R 3 represents an amino radical, methylamine, dimethylamine, trimethylamine, O-alkylphosphatidylcholine and - the counterion, if
  • the invention relates to compounds of formula (I) above, in which Li and L 2 , together, form a ketal or thiocetal group, corresponding to the formula (la) below:
  • R 3 represents an amino, phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine group, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, O-alkylphosphatidylethanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium, an NH 2 -R 4 group , NHR R 5 or NR 4 R 5 R 6 in which R, R 5 and R 6 , identical or different represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydroxyalkyl radical containing 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a ZW-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO -CH 2 -CH 2 -) n - N
  • n is advantageously between 1 and 500, preferably between 1 and 100, especially between 1 and 50, very particularly between 1 and 10.
  • linear or branched alkyl containing 1 to 5 carbon atoms is meant for example a methyl, ethyl, propyl radical , i-propyl, n-butyl, i-butyl, tert-butyl, preferably methyl or ethyl.
  • the purine or pyrimidine base, or the non-natural heterocyclic base can be substituted with at least one substituent chosen, for example, from a halogen, an amino group, a carboxy group, carbonyl group, carbonylamino group, hydroxy group, azido, cyano, alkyl, cycloalkyl, perfluoroalkyl, alkyloxy (e.g. methoxy), oxy carbonyl, vinyl, ethynyl, propynyl, acyl etc.
  • substituent chosen, for example, from a halogen, an amino group, a carboxy group, carbonyl group, carbonylamino group, hydroxy group, azido, cyano, alkyl, cycloalkyl, perfluoroalkyl, alkyloxy (e.g. methoxy), oxy carbonyl, vinyl, ethynyl, propynyl, acyl etc.
  • non-natural heterocyclic base means a base other than uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine or hypoxanthine, which does not exist in nature.
  • R 3 represents a cationic group, for example a phosphonium or NR RsR ⁇ group as defined above
  • the counterion can be chosen, for example, from tosylate, halide, nitrate, sulfate, sulfonate, and thiosulfate anions.
  • the present invention also relates to a process for the preparation of the new compounds of formulas (I) as defined above as of their salts in which Li and L 2 , which are identical, represent an oxycarbonyl, thiocarbonyl, carbamate or carbonate group and R 3 represents an NH-R 4 , NR R 5 or NR 4 R 5 R 6 group in which R 4 , R 5 and R ⁇ , identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 atoms carbon, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a ZW-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 -) n - N - ⁇ II CH 2 -V- A 2 or - (- CH 2 -CH-) n -
  • CO-V- in which V and W identical or different-represent a bond -O -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2 , n can take the values of 1 at 500 and Ai and A 2 identical or different represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl radical containing from 2 to 5 carbon atoms, characterized in that a derivative is reacted of formula (II)
  • Ts represents a residue of an activating agent of a hydroxyl such as a tosyl or mesyl residue, which is reacted in an acid medium and then with a compound of formula R ⁇ - LR 7 (V) or R 2 -L 2 -R 7 (V) in which Ri, R 2 , - ⁇ and L 2 have the meaning already indicated and R 7 represents a residue of an activating agent such as carbonyldiimidazole, dicyclohexylcarbodiimide, hydroxybenzotriazole, or thiocarbonyldiimidazole, or a halogen atom, to obtain a compound of formula (VI)
  • R 4 , R 5 and R 6 identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydoxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, to obtain the expected compound of formula (I), that isolate if desired.
  • reaction of the derivative of formula (II) with acetone is carried out in the presence of a catalytic amount of an acid such as sulfuric acid
  • reaction of the derivative of formula (III) with an activating agent of a hydroxyl is carried out in pyridine in particular using a sulfonyl halide which is preferably a tosyl halide, mesyl or trifluoromethanesulfonyl such as their chloride or bromide.
  • a sulfonyl halide which is preferably a tosyl halide, mesyl or trifluoromethanesulfonyl such as their chloride or bromide.
  • reaction of the derivative of formula (IV) with the compound of formula (V) or (V) is preceded by acidification with trifluoroacetic acid and is carried out in water.
  • the present invention also relates to a process for the preparation of the new compounds of formula (I) as defined above, as well as their salts, in which Li and L 2 , identical represent an oxycarbonyl, thiocarbonyl, carbamate, or carbonate group and R 3 represents a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O- alkylphosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylethanolamine, O-alkylphosphatidylethanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate or phosphonium group what is reacted with a compound of formula (III) above with a compound of formula (VIT)
  • X represents an oxygen or sulfur atom
  • Rs and R 9 identical or different represent a radical, linear or cyclic or branched alkyl or O-alkyl containing from 1 to 20 carbon atoms and Hal represents a halogen atom
  • B has the meaning already indicated
  • R 3 represents a phosphate, O-alkylphosphate, phosphonate, thiophosphate or phosphonium group, which is reacted if necessary with a trialkylamine of formula (VII) as defined above, for obtaining a compound of formula (VIII) in which R 3 represents a phosphatidylcholine or phosphatidylethanolamine group, which is then reacted in an acid medium and then with a compound of formula R1-L 1 -R7 (V) or R 2 -L 2 -R 7 (V) in which Ri, R 2 , L1 and L 2 have the meaning already indicated and R represents an activating agent such as carbonyl
  • the reaction of the compound of formula (III) above with the compound of formula (VIT) is carried out in the presence of triethylamine (approximately 0.5 M) in tetrahydrofuran under an inert atmosphere at 0 ° C for one hour and then at room temperature for about 18 h.
  • concentrations preferably used are approximately 0.3 M for the compound of formula (III) and approximately 0.4 M for the compound VII '.
  • the reaction of the compound of formula (VIII) with the trialkylamine (VII) is carried out with a large excess of trialkylamine (approximately 200 equivalents) in the presence of a binary mixture of acetonitrile / tetrahydrofuran approximately 1/1 at approximately 70 ° C for approximately 48 h.
  • concentration preferably used is approximately 0.2 M for the compound of formula (VII).
  • the present invention also relates to a process for the preparation of the new compounds of formula (I) or (la), as defined above, as well as their salts, in which Li and L 2 , together, form a ketal group or thioketal, in which R 3 represents an NH-R 4 , NR 4 R 5 or NR 4 R 5 R6 group in which R 4 , R5 and R 6 , identical or different, represent a hydrogen atom or a linear alkyl radical or branched containing from 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a residue ZW-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 -) n - N - A ⁇ II CH 2 -V- A 2 or - (- CH 2 -CH-) n - I CO-V- in which V and W, identical or different, represent a bond -0 -, - S-, or -NH-, Z can take
  • Ts represents a residue of an activating agent of a hydroxyl such as a tosyl or mesyl residue, which is reacted with a compound of formula (VII) as defined previously R 4
  • the reaction of the derivative of formula (II) with hentriacontan-16-one is carried out in the presence of a catalytic amount of an acid, such as paratoluenesulfonic acid (APTS),
  • APTS paratoluenesulfonic acid
  • the reaction of the derivative of formula (III ') with an activating agent of a hydroxyl is carried out in pyridine in particular using a sulfonyl halide which is preferably a halide of tosyle, mesyle or trifluorométhanesulfonyle, like their chloride or bromide.
  • a binary solvent such as a tetrahydrofuran / acetonitrile mixture.
  • the present invention also relates to a process for the preparation of the new compounds of formula (I) in which and L 2 , together, form a ketal or thioketal group or of formula (la), as defined above, as well as of their salts, in which R 3 represents a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O- alkylphosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, O- alkylphosphatidylethanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate or phosphonium group, characterized in that a compound of formula (III) is reacted ') above with a compound of formula (VIT) in which X represents an oxygen or sulfur atom, R 8 and R 9 , identical or different, represent a radical, linear or cyclic or branched alkyl or O-alkyl containing from 1 to 20 carbon atoms and Hal represents an atom halogen, to obtain a compound of formula (I) in which Li and L 2
  • R 3 represents a phosphate, O-alkylphosphate, phosphonate, thiophosphate or phosphonium group, which is reacted if necessary with a trialkylamine of formula (VII) as defined above, for obtaining a phosphate alkylamine compound of formula (Ia) in which R3 represents a phosphatidylcholine or phosphatidylethaloamine group, which is isolated if desired; then, if we want to obtain a compound of formula (la) in which B has the meaning already indicated and R 3 represents an O-alkylphosphatidylcholine or O-alkylphosphatidylethanolamine group, a compound of formula R 10 -J is reacted with the meaning already indicated, with a compound (la) in which B has the meaning already indicated and R 3 represents a phosphatidylcholine or phosphatidylethanolamine group.
  • the preferentially used concentrations are approximately 0.3 M for the compound of formula (III ') and approximately 0.4 M for the compound (VIT), the reaction of the compound of formula (la) with trialkylamine (VII) is carried out with a large excess of trialkylamine (approximately 200 equivalents) in the presence of a binary mixture of acetonitrile / tetrahydrofuran approximately 1/1 at approximately 70 ° C for approximately 48 h.
  • the concentration preferably used is approximately 0.2 M for the compound of formula (la).
  • the invention also relates to the use of the compounds of formula (I)
  • - X represents an oxygen or sulfur atom, or a group -CH 2 -
  • B represents a purine or pyrimidine base, such as uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine or hypoxanthine, optionally substituted, or a non-natural mono-or bi-cyclic heterocylic base each cycle of which has 4 to 7 links, optionally substituted, - Li and L 2 , identical or different, represent an oxycarbonyl group -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH- , carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, an oxygen atom, or else, Li and L 2 ⁇ together, form a ketal group of formula or a thiocetal group of formula
  • Ri and R 2 represent a linear or branched alkyl hydrophobic chain containing from 2 to 30 carbon atoms, preferably from 6 to 25 carbon atoms, in particular from 8 to 25 carbon atoms, saturated or partially unsaturated, optionally totally or partially fluorinated, optionally substituted on the chain end carbon by a fluorine atom or by a benzyl or naphthyl ester or ether and R 3 represents a hydroxy, amino group, a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine group , phosphatidylethanolamine, O-alkylphosphatidylethanolamine, thiophosphate, phosphonium, an NH 2 -R 4 group , NHR 4 R 5 or NR 4 R 5 R 6 in which R 4 , R 5 and R ⁇ , which are identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydroxyalky
  • said biologically active molecules or macromolecules can be chosen from active principles, nucleic acids such as DNA or RNA molecules, antisense DNA, PNA, messenger RNA, RNA interference (siRNA's), plasmids, duplex oligonucleotides, single-stranded oligonucleotides, triplex oligonucleotides, peptides, polysaccharides, etc.
  • nucleic acids such as DNA or RNA molecules, antisense DNA, PNA, messenger RNA, RNA interference (siRNA's), plasmids, duplex oligonucleotides, single-stranded oligonucleotides, triplex oligonucleotides, peptides, polysaccharides, etc.
  • - anticancer agents such as taxol derivatives, AraC (cytarabine), troxacitabine, navelbine, vinflunine, acronycin and its derivatives , analogs of rebeccamycin, anti-angiogenic molecules, retinoic acid, arsenic, cis platinum and its derivatives, intercalating agents, 5-FU, Idoxuridine (IdU) or DMDC;
  • - antiviral agents such as, for example, cyclic nucleoside derivatives such as BVDU (anti-herpes), TFT (anti-herpes), ribavirin and analogues (anti-HCV,) AZT, ddC, d4T, 3TC, CBV, ddl, abacavir (anti-HIV, anti-HBV), lavidarabine or AraA (anti-HBV, anti-HZV, anti-HSV); acyclic taxol derivatives, AraC (cytar
  • the compounds of formula (I) can also forming covalent complexes, with different stoichiometries, with certain active principles, such as cis-platinum and its derivatives.
  • the compounds of formula (I) above also have very interesting properties. They are capable of forming supramolecular assemblies such as micelles, inverted micelles, liposomes (uni lamellar, multi lamellar, small or giant), hexagonal phases, gel phases, toroids, emulsions, micro emulsions, helices, tubes, fibers or disks, alone or in combination with an active principle or a genetic material, said supramolecular assemblies also being an object of the invention.
  • the use of said assemblies for the transport and / or in-vitro, ex-vivo and in-vivo delivery of biologically active molecules or macromolecules, in particular biologically active molecules or macromolecules as defined above, represents a subsequent subject of the invention.
  • the compounds of formula (I) or said supramolecular assemblies can enter into the formulation of pharmaceutical compositions. These can in particular be in solid form, solutions, emulsions or gels. In these pharmaceutical compositions, they can be present at concentrations by weight generally ranging from 0.01 to almost 100%, in particular from 0.05 to 5%, and from 0.01 to almost 100% for the solutions and emulsions. and from 1 to 50% for gels.
  • the compounds of formula (I) above as well as the supramolecular assemblies as defined above) can be used alone or included in a formulation in which they can represent from 1 to 99%, comprising known amphiphilic compounds, nonionic , for example polyethylene glycol, cationic, anionic, zwitterionic derivatives (DMPC, DLPC, DPPC, DSPC, DOPC, DMPE, DOPE, DPPE, etc.) including cationic lipids (such as DOTAP), polycationic compounds (like the PEI).
  • DOTAP cationic lipids
  • the present application also relates to a composition for the transfer of genes comprising a gene and a compound of formula (I) as defined above.
  • said compound of formula (I) is in the form of a supramolecular assembly as defined above.
  • the above formulations can be used according to different protocols for gene transfer as for transfection as electroporation, particle bombardment, delivery by liposomes, delivery by gel, delivery by vector. no viral and receptor-mediated genes.
  • they can be used in solution or gel, for example as a culture medium, or deposited on a support surface such as on mica or silica in particular for growing cells.
  • the genes can in particular be used in the form of plasmids.
  • the gel form is particularly advantageous for the purposes of the invention.
  • the present application also relates to a method for the transfer of genes in which a gene is transferred into a host organism using a compound of formula (I) as defined above.
  • the compounds of formula (I) and the above supramolecular formulations or assemblies, in particular the gel form can be used for the transfection of nonadherent cells.
  • the invention also relates, according to a subsequent aspect, to the use of compounds of formula (I) above and supramolecular assemblies of said compounds as described above for the delivery and / or transport in vitro, ex vivo and in vivo of marker molecules and / or having biological activity, in particular lanthanide or actinide salts.
  • the supramolecular assemblies of compounds according to the invention mentioned above can be used to complex salts of actinides or lanthanides, in particular salts of cerium, thorium or uranium, in particular in the form of microspheres.
  • said microspheres are formed in an aqueous phase.
  • - B represents cytosine, adenosine or a 6-methoxypurine
  • R 3 represents a hydroxy group
  • active principle also called pro-drug
  • the substituent B may represent a base corresponding to a base present in the chemical structure of said active principle, for example a purine or pyrimidine base, optionally substituted, or an unnatural heterocyclic base, mono- or bicyclic, optionally substituted, for example , triazole, thiazole benzimidazole or pyridine-2-one.
  • 5-fluorouridine 5-FU
  • 5-trifluorouridine TFT
  • 5-lodouridine 5 -IU
  • the compounds of formula (I) can also be used as a carrier structure for a luminescent probe, for example when the substituent B represents a fluorescent molecule, for example a purine derivative such as 2-aminopurine.
  • Preferred compounds for the purposes of the uses mentioned above are compounds of formula (I) in which: X represents an oxygen or sulfur atom, B represents a purine or pyrimidine base such as uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine or hypoxanthine, Li and L 2 , identical or different, represent an oxycarbonyl group -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, an oxygen atom, and Ri, R 2 , and R 3 are as defined above.
  • Stage A 5'-dimethoxytrityluridine 2 g of chlorodimethoxytrityl, 1.1 g of uridine and a catalytic amount of N, N-dimethyl aminopyridine (DMAP) are dissolved in 25 ml of pyridine. Mix for 24 h at room temperature. The pyridine is removed under reduced pressure and the resulting crude product is purified on silica gel (eluent DCM / methanol 95/5) to obtain 2.14 g of the expected product.
  • DMAP N, N-dimethyl aminopyridine
  • Stage B 5'-dimethoxytrityl-2 ', 3'-dimyristoyl uridine.
  • 0.50 g of the product obtained in Stage A is dissolved in 100 ml of freshly distilled dichloromethane (DCM), 0.46 g of myristic acid, 0.41 g of dicyclohexylecarbodiimide (DCC), and 0.24 g of N, N-dimethylaminopyridine (DMAP).
  • DCM dichloromethane
  • DCC dicyclohexylecarbodiimide
  • DMAP N, N-dimethylaminopyridine
  • Stage C 2 ', 3'-dimyristoyl uridine An excess of a 3% solution of trichloroacetic acid is dissolved in 50 ml of freshly distilled DCM 0.78 g of the product obtained in Stage B of Example 1 from DCM. The mixture is brought under stirring for 30 min at room temperature under an inert atmosphere. 3 ml of methanol are then added to the reaction mixture. The organic phase is washed 3 times with 20 ml of water, and dried over sodium sulfate. The residual methylene chloride is removed under reduced pressure. It is further dried under very reduced pressure for 1 h. The resulting white powder is then recrystallized from 20 ml of freshly distilled DCM. 0.464 g of the expected product is obtained.
  • Example 2 2 ′, 3′-distearoyl uridine 1.30 g of the product obtained in Stage A of Example 1 are dissolved in 100 ml of freshly distilled DCM, 2.37 g of stearic acid, 1.71 g of DCC, and 1.00 g of DMAP. The mixture is brought under stirring for 48 h at room temperature under an inert atmosphere. After filtration, the organic phase is washed 3 times with 20 ml of water, and dried over sodium sulfate. The residual methylene chloride is removed under reduced pressure. It is further dried under high vacuum for 1 h.
  • the resulting white powder was dissolved in 50 ml of freshly distilled dichloromethane and a 3% excess of trichloroethylacetic acid in DCM is added to the solution under an inert atmosphere. After 15 min, 5 ml of methanol are added to the solution. The organic phase is washed 3 times with 20 ml of water, and dried over sodium sulfate. The solvent is removed under reduced pressure and 1.1 g of the expected product are obtained after crystallization from methylene chloride.
  • Example 3 bis (2 ', 3'-myristoyl) -5' - (phosphocholine) -uridine
  • Stage A 1- (6-hvdroxymethyl-2.2-dimethyltetrahvdro-furo f3.4-d ⁇ 1, 31dioxol-4-yl) -1 H-pyrimidine-2,4-dione
  • 2.33 g of paratoluene sulfonic acid are added to 1g of uridine in 180 ml of anhydrous acetone. After 4 h at room temperature, the acetone is evaporated and the residual crude product is dissolved in 200 ml of ethyl acetate.
  • Stage B Uridine-oxo-dioxaphospholane 30 ml of freshly distilled tetrahydrofuran (THF) and 803 ⁇ l of triethanolamine (TEA) are added to 0.8 g of the compound obtained in Stage A, under an inert atmosphere. The mixture is cooled to 0 ° C. and 414 ⁇ l of 2-chloro-2-oxo-1, 3,2-dioxaphospholane are added dropwise. The reaction mixture is stirred at room temperature for 15 h. Then, the triethanolamine salts are removed by filtration under suction at 0 ° C. Most of the solvent is evaporated under reduced pressure at 0 ° C and
  • Stage C Uridine acetonide phosphocholine 4 ml of anhydrous trimethylamine are condensed at -50 ° C. under an inert atmosphere. 10 ml of dry acetonitrile at -40 ° C and the crude product obtained in stage B are added to the cold trimethylamine. The reaction mixture is stirred at 60 ° C for 48 h. After evaporation of the residual trimethylamine at room temperature and filtration, a solid is isolated. White. The raw material was successively triturated with ethyl acetate and dichloromethane. 1.35 g of the expected product are thus obtained in the form of a hygroscopic solid after drying under very reduced pressure.
  • Stage D Uridine phosphocholine 0.20 g of the compound obtained in Stage C are mixed for 24 h at room temperature in 1.5 ml of 98% formic acid. The excess formic acid is evaporated together with ethanol. Crystallization from a methanol-ethanol binary mixture produces 0.127 g of the expected product in the form of a white hygroscopic solid.
  • RF 0.72 (reverse phase, MeOH / H 2 O: 8/2).
  • Stage E Bis- (2 ', 3'-myristoyl) -5' - (phosphocholine) -uridine 185 mg of myristic acid, 148 mg of DCC and 88 mg of DMAP in 20 ml of anhydrous dimethylformamide. After 70 h at room temperature, the dicyclohexylurea (DCU) is removed by filtration. The solvent is evaporated and the residual solid is triturated twice in 25 ml of ether. 123 mg of expected product, after chromatography (LH 20 DCM / MeOH 5/5). RF: 0.26 (reverse phase, DCM / MeOH 5/5).
  • Example 4 bis- (2 ', 3'-stearoyl) -5' - (phosphocholine) uridine
  • uridine phosphocholine 555 mg of stearic acid, 402 mg of DCC, 238 mg of DMAP in 20 ml are added. anhydrous dimethylformamide. After 72 h at room temperature, the solvent is evaporated and the residual solid is dissolved in 20 ml of methylene chloride. The DCU is removed by filtration and the solvent is evaporated.
  • Example 5 bis- (2 ', 3'-arachidoyl) -5' - (phosphocholine) uridine
  • Example 6 bis- (2 ', 3'-oleoyl) -5' - (phosphocholine) uridine
  • Example 7 O-Ethyl-bis- (2 ', 3'-oleoyl) -5' - (phosphocholine) -uridine (O-Ethyl DOUPC) 90 mg of bis- (2 ', 3'-oleoyl) -5' - (phosphocholine) uridine of Example 6 are dissolved in 2 ml of anhydrous DCM under an inert atmosphere and protected from light. 25 ⁇ l of ethyl triflate are added to the mixture and the reaction medium is stirred, protected from light for 12 h. The solvent is then evaporated and the residual ethyl triflate is removed under reduced pressure.
  • Example 8 Bis- (2 ', 3'-oleoyl) -5' - (phosphocholine) -adenosine (DQAPC) Stage A: 5 '- (phosphocholine) -adenosine 150 mg of 2', 3 '- (isopropylidene) - 5 '- (phosphocholine) -adenosine and 181 mg of paratoluenesulfonic acid monohydrate are dissolved in 25 ml of methanol. The mixture is heated to reflux. After 4 h, the solvent is evaporated under reduced pressure, and the crude product is dissolved in 4 ml of anhydrous ethanol and crystallized after addition of ethyl acetate.
  • Stage B Bis- (2 ', 3'-oleoyl) -5' - (phosphocholine) -adenosine (DOAPC) 172 mg of carbonyl diimidazole are added to 337 ⁇ l of oleic acid dissolved in 5 ml of anhydrous dimethylformamide (DMF) under argon. After 5 h of stirring at room temperature, the reaction medium is transferred to a flask containing 320 mg of 5 'tosylate (phosphocholine) -adenosine and 274 mg of paratoluenesulfonic acid in 5 ml of anhydrous DMF. The mixture is stirred for 24 hours at room temperature under argon (the pH is kept below 7).
  • DMF dimethylformamide
  • the DMF is distilled under reduced pressure and the crude product is purified on an exclusion column, Sephadex LH20, DCM: MeOH 5/5. 123 mg of a highly hygroscopic product are isolated. (Yield: 23%).
  • Example 9 Bis- (2 ', 3'-C ⁇ H5Fr7 ⁇ ) -5' - (phosphocholine) -uridine 720 mg of acid 4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,8,9 , 9,10,10,11, 11, 11-heptadecafluoro-undecanoic, 303 mg of DCC and 180 mg of DMAP are added to 200 mg of uridine phosphocholine in 12 ml of anhydrous DMF. After 24 h at room temperature, the DMF is evaporated and the residual solid is dissolved in 20 ml of a dichloromethane /: methanol mixture 1: 1. The DCU is removed by filtration and the solvent is evaporated.
  • Uridine Palmitonide In a 50 ml two-necked flask, 1 g of hentriacontan-16-one (2.22 mmol), 2.7 g of uridine (11, 11 mmol) and 0.42 g of are weighed. APTS (2.22 mmol). The reactor is placed under an atmosphere of anhydrous nitrogen, then 20 ml of anhydrous THF and 1.85 ml of triethyl orthoformate are added. The reaction medium is stirred and brought to reflux. After 18 h, the reaction is stopped by the addition of 0.6 ml of TEA. The reaction medium is poured into 50 ml of water containing 50 g of ice and 4 g of sodium hydrogencarbonate.
  • Example 11 Uridine-oxo-dioxaphospholane palmitonide To 0.5 g of uridine palmitonide obtained in Example 9, 7 ml of freshly distilled THF and 187 ⁇ l of triethylamine are added under an inert atmosphere. The mixture is cooled to 0 ° C. and 109 ⁇ l of 2-chloro-2-oxo-1, 3,2-dioxaphospholane are added dropwise. The reaction mixture is stirred at room temperature for 15 h. Then, the triethylamine salts are removed by filtration under suction at 0 ° C. Most of the solvent is evaporated under reduced pressure at 0 ° C and 3 ml of the residual solution are used directly without purification additional to the next stage.
  • Example 13 Adenosine palmitonide In a 25 ml two-necked flask, 1.17 g of palmitone diethoxycetal (2.22 mmol), 0.975 g of adenosine paratoluenesulfonate (2.22 mmol) and 0.042 g of APTS are placed. , 22 mmol). The reactor is placed under an atmosphere of anhydrous nitrogen, then 8 ml of anhydrous THF and 2 ml of anhydrous dimethylformamide (DMF) are added. The reaction medium is stirred and brought to reflux. After 15 hours, the reaction is stopped by the addition of 5 ml of anhydrous TEA.
  • DMF dimethylformamide
  • the reaction medium is poured into 50 ml of a saturated sodium hydrogen carbonate solution, the aqueous phase is extracted with twice 60 ml of dichloromethane. The organic phase is washed with 30 ml of water, dried over sodium sulfate and the solvent is evaporated under reduced pressure.
  • EXAMPLE 14 Adenosine-oxo-dioxaphospholane palmitonide 8 ml of adenosine palmitonide is added to 0.5 g (0.71 mmol) of adenosine palmitonide.
  • Example 15 Adenosine phosphocholine palmitonide (PAPC)
  • PAPC Adenosine phosphocholine palmitonide
  • 4 ml of anhydrous trimethylamine is condensed at -50 ° C. under an inert atmosphere.
  • 2 ml of dry acetonitrile and 4 ml of crude adenosine-oxo-dioxaphospholane palmitonide obtained in Example 14 are added to the cold trimethylamine.
  • the tube is sealed and the reaction mixture is stirred at 65 ° C. for 48 hours. h.
  • Example 16 Use of 2 ', 3'-dioleoyl-5' - (N, N, N-trimethylammonium) uridine tosylate for transfection
  • Preliminary transfection studies were carried out taking into account the published work [M. C. Pedroso de Lima et al., Advance Drug Delivery Reviews 47 (2001) 277-294]. These tests carried out on cell lines of HCT 116, Calu 6, Hela, HEK 293 types with the plasmid p-TRACER have shown for the 2 ', 3'-dioleoyl-5' - (N, N, N-trimethylammonium) tosylate ) uridine with similar efficacy to that of DOTAP. In addition, cytotoxicity was found to be less or almost nonexistent in the case of 2 ', 3'-dioleoyl-5' - (N, N, N-trimethylammonium) uridine tosylate.
  • Example 17 Formation of a gel usable for transfection 1- A mixture in aqueous phase of the compound (la) Uridine phosphocholine stearonide (SUPC) also called 2 ', 3'-pentatriacontan-18-onide-5' - ( phosphocholine), prepared analogously to the palmitonide PUPC compound of Example 12 (at concentrations between 0.001 and 10%) and of a cationic compound (PEI, lipofectamine, DOTAP, DOTAU etc). The suspension obtained is then heated then cooled over 5 cycles of rise and fall over temperature ranges from -20 ° C to + 60 ° C.
  • SUPC Uridine phosphocholine stearonide
  • DOTAP DOTAU
  • Tm phase transition temperatures
  • the suspension obtained is heated and then cooled over 5 temperature cycles from -20 ° C. to 60 ° C.
  • the transfection can then be carried out as described in D. Luo, K. Haverstick, N. Belcheva, E. Han and WM Saltzman, Macromolecules, 2002, 35, 3456.
  • the plasmid can be added to the mixture obtained at the end of the first step at a temperature below Tm.
  • a gel can be produced from the DSUPC compound of Example 4 or the PUPC compound of Example 12.
  • Example 18 Formation of a gel of a compound of formula (which can be used for transfection The procedure is as in Example 17, except that the plasmid / cationic compound complex is produced independently of the gel. complex is then added at a temperature higher than Tm to the gel previously formed. In this case the gel was produced by suspending SUPC (at concentrations between 0.001 and 10%) in the aqueous phase. heated then cooled over 5 cycles of rise and fall over temperature ranges from -20 ° C. to 60 ° C. According to the same protocol, a gel can be produced from the DSUPC compound of Example 4 or from the PUPC compound from example 12.
  • SUPC at concentrations between 0.001 and 10%
  • Example 19 Preparation of microspheres comprising actinides or lanthanides 25 mg of bis- (2 ', 3'-stearoyl) -5' - (phosphocholine) uridine prepared in Example 4 (DSUPC) lyophilized are hydrated for 2 min at 75 ° C by
  • microspheres can be prepared with cerium III nitrate or uranium nitrate.

Abstract

The invention relates to a compound having formula (I), wherein: X = O, S or -CH2-; B = a purine or pyrimidine base; L1, L2, = an oxycarbonyl, thiocarbamate, carbonate and carbamate group, an oxygen atom, or together form a ketal or thioketal group; R1, R2 = a linear or branched alkyl; and R3 = a group selected from hydroxy, amino, phosphate, phosphonate, O-alkyl phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, O-alkyl-phosphatidylethanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium, NH2-R4, cyclodextrin group, NHR4R5 or NR4R5R6, in which R4, R5 and R6, = H or an alkyl or hydroxyalkyl radical or a group having formula (II), wherein V and W = bond -O-,-S-, or -NH-, Z = R3, R1 or R2, n = 1 to 500, and A1 and A2 = alkyl at C1-C5 or acyl at C1-C5, and, if necessary, the counter-ion is selected from among tosylate, halide, nitrate, sulphate, sulphonate and thiosulphate. The invention also relates to the use of compounds having formula (I) for the transport and/or delivery of biologically-active molecules or macromolecules.

Description

Nouveaux composés amphiphiles, leur procédé de préparation et leurs applications New amphiphilic compounds, their preparation process and their applications
La présente invention concerne de nouveaux composés amphiphiles, leur procédé de préparation et leurs applications notamment à la transfection. On cherche toujours à mettre au point des vecteurs synthétiques capables de transférer des gènes dans le noyau des cellules. Une méthode de choix est l'introduction de matériel génétique spécifique dans une cellule ou transfection. Mais les composés utilisés à cette fin, comme la formulation de liposome d'un lipide mono cationique (N-[1-(2,3-Dioléoyloxy)]-N,N,N- triméthylammonium propane méthylsulfate dans de l'eau stérile (concentration 1 mg/ml) appelée DOTAP), la polyéthylènimine (PEI) ou la lipofectamine, présentent un faible taux d'efficacité. On peut citer notamment les lipides cationiques dérivés du cholestérol et possédant une tête polaire à base de groupes guanidinium.De plus, ces molécules présentent donc une toxicité non négligeable puisqu'elles peuvent provoquer l'éclatement des membranes cellulaires et en conséquence la mort des cellules. Il serait donc souhaitable de disposer de vecteurs synthétiques capables de transférer des gènes dans le milieu intracellulaire avec un bon taux d'efficacité. Il serait également souhaitable de disposer de tels vecteurs synthétiques pas ou peu toxiques. Il serait aussi souhaitable que le vecteur reste stable au moment du transfert des gènes dans le milieu intracellulaire. II serait par ailleurs souhaitable de disposer de formulations composées de ces vecteurs pour la délivrance et/ou le transport in vitro, ex vivo et in vivo de molécules, macromolécules biologiquement actives telles que des principes actifs, des acides nucléiques, des peptides, des polysaccharides. Enfin, il était également souhaitable de disposer de formulations composées de ces vecteurs permettant la délivrance et/ou le transport in vitro, ex vivo et in vivo de molécules marqueurs et/ou ayant une activité biologique, en particulier des sels de lanthanides ou d'actinides. Or, après de longues recherches, la demanderesse a découvert avec etonnement que de nouveaux composés amphiphiles apportaient une réponse aux problèmes évoqués ci-dessus. C'est pourquoi la présente demande a pour objet un composé de formule (I)The present invention relates to new amphiphilic compounds, their preparation process and their applications in particular to transfection. We are still looking to develop synthetic vectors capable of transferring genes into the nucleus of cells. One method of choice is the introduction of specific genetic material into a cell or transfection. However, the compounds used for this purpose, such as the liposome formulation of a mono cationic lipid (N- [1- (2,3-Dioleoyloxy)] - N, N, N- trimethylammonium propane methylsulfate in sterile water ( concentration 1 mg / ml) called DOTAP), polyethyleneimine (PEI) or lipofectamine, have a low rate of effectiveness. Mention may in particular be made of cationic lipids derived from cholesterol and having a polar head based on guanidinium groups. In addition, these molecules therefore have a non-negligible toxicity since they can cause the rupture of cell membranes and consequently the death of cells. . It would therefore be desirable to have synthetic vectors capable of transferring genes into the intracellular medium with a good rate of efficiency. It would also be desirable to have available such low or low toxic synthetic vectors. It would also be desirable for the vector to remain stable at the time of the transfer of the genes into the intracellular medium. It would also be desirable to have formulations composed of these vectors for the delivery and / or in vitro, ex vivo and in vivo transport of biologically active molecules, macromolecules such as active principles, nucleic acids, peptides, polysaccharides . Finally, it was also desirable to have formulations composed of these vectors allowing the delivery and / or transport in vitro, ex vivo and in vivo of marker molecules and / or having a biological activity, in particular lanthanide or actinide salts. However, after extensive research, the Applicant has surprisingly discovered that new amphiphilic compounds provide an answer to the problems mentioned above. This is why the present application relates to a compound of formula (I)
dans laquelle X représente un atome d'oxygène, de soufre, ou un groupe -CH2-, B représente une base purique ou pyrimidique, telle que uracile, adénine, guanine, cytosine, thymine ou hypoxanthine, éventuellement substituée, ou encore une base hétérocylique mono-ou bi-cyclique non naturelle dont chaque cycle comporte 4 à 7 chaînons, éventuellement substituée, Li et L2, identiques ou différents, représentent un groupement oxycarbonyl -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, un atome d'oxygène, ou encore, Li et L2, ensemble, forment un groupement cétal de formule in which X represents an oxygen or sulfur atom, or a group -CH 2 -, B represents a purine or pyrimidine base, such as uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine or hypoxanthine, optionally substituted, or a base non-natural mono-or bi-cyclic heterocylic, each cycle comprising 4 to 7 links, optionally substituted, Li and L 2 , identical or different, represent an oxycarbonyl group -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, an oxygen atom, or alternatively, Li and L 2, together, form a ketal group of formula
ou un groupement thiocétal de formule or a thiocetal group of formula
R-i et R2, identiques ou différents représentent une chaîne alkyle linéaire ou ramifiée renfermant de 2 à 30 atomes de carbone, de préférence de 6 à 25 atomes de carbone, notamment de 8 à 25 atomes de carbone, saturée ou partiellement insaturée, éventuellement totalement ou partiellement fluorée, éventuellement substituée sur le carbone d'extrémité de chaîne par un atome de fluor ou par un ester ou éther benzylique ou naphtylique et R3 représente un groupement hydroxy, amino, un groupement phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidyléthanolamine, O-alkyl-phosphatidyléthanolamine, O- alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium, un groupement NH2-R4, NHR R5 ou NR R5R6 dans lesquels R4l R5 et R6, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou hydroxyalkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou R3 représente un reste cyclodextrine ou un reste Z-W-CO-CH2-CH2-(- N-CO-CH2-CH2-)n- N - AT I I CH2-V- A2 ou -(-CH2-CH-)n- Ri and R 2 , identical or different, represent a linear or branched alkyl chain containing from 2 to 30 carbon atoms, preferably from 6 to 25 carbon atoms, in particular from 8 to 25 carbon atoms, saturated or partially unsaturated, possibly totally or partially fluorinated, optionally substituted on the chain end carbon by a fluorine atom or by a benzyl or naphthyl ester or ether and R 3 represents a hydroxy, amino group, a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine group, phosphatidylethanolamine, O-alkyl-phosphatidylethanolamine, O- alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium, a group NH 2 -R 4 , NHR R 5 or NR R 5 R 6 in which R 4l R 5 and R 6 , identical or different, represent an atom d hydrogen or a linear or branched alkyl or hydroxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a ZW-C residue O-CH 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 -) n - N - A T II CH 2 -V- A 2 or - (- CH 2 -CH-) n -
CO-V- dans lesquels V et W identiques ou différents représentent une liaison -O-,-S-, ou -NH-, Z peut prendre les significations de R3, Ri et R2, et n peut prendre les valeurs de 1 à 500 et AT et A2 identiques ou différents représentent un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou acyle linéaire ou ramifié renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, à l'exception des composés dans lesquels : - X représente un atome d'oxygène ,CO-V- in which V and W identical or different represent a bond -O -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2 , and n can take the values of 1 at 500 and A T and A 2 which are identical or different, represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl radical containing from 2 to 5 carbon atoms, with the exception of the compounds in which: - X represents an oxygen atom,
- R3 représente un groupe hydroxy et soit L1 et L2, identiques représentent un groupement oxycarbonyl, Ri et R2 identiques représentent un alkyle en C2 à Cι7, et B représente la cytosine, l'adénosine ou une 6-méthoxypurine , soit Li et L2 ensemble forment un groupement cétal, Ri et R2 identiques représentent un méthyle et B représente l'adénosine. De préférence, X représente un atome d'oxygène. Des composés préférés de formule (I) préférés sont ceux dans laquelle : X représente un atome d'oxygène ou de soufre, - B représente une base purique ou pyrimidique telle que uracile, adénine, guanine, cytosine, thymine ou hypoxanthine, L-i et L2, identiques ou différents, représentent un groupement oxycarbonyl -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, un atome d'oxygène, - Ri et R2, identiques ou différents représentent une chaîne alkyle linéaire ou ramifiée renfermant de 2 à 30 atomes de carbone, de préférence de 6 à 25 atomes de carbone, notamment de 8 à 25 atomes de carbone, saturée ou partiellement insaturée, éventuellement totalement ou partiellement fluorée, éventuellement substituée sur le carbone d'extrémité de chaîne par un atome de fluor ou par un ester ou éther benzylique ou naphtylique et R3 représente un groupement hydroxy, amino, un groupement phosphate, phosphonate, O-alkylphosphatidylcholine, thiophosphate, phosphonium, un groupement NH2-R , NHR4R5 ou NR4R5R6 dans lesquels R , R5 et Rβ, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou hydroxyalkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou R3 représente un reste cyclodextrine ou un reste Z-W-CO-CH2-CH2-(-N-CO-CH2-CH2-)n- N - Ai CH2-V- A2 ou -(-CH2-CH-)n- I CO-V- dans lesquels V et W identiques ou différents représentent une liaison -O-.-S-, ou -NH-, Z peut prendre les significations de R3, Ri et R2, et n peut prendre les valeurs de 1 à 500 et Ai et A2 identiques ou différents représentent un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou acyle linéaire ou ramifié renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, à l'exception des composés dans lesquels : - X représente un atome d'oxygène ,- R 3 represents a hydroxy group and either L1 and L2, identical represent an oxycarbonyl group, Ri and R 2 identical represent a C 2 to Cι 7 alkyl, and B represents cytosine, adenosine or a 6-methoxypurine, or Li and L 2 together form a ketal group, identical Ri and R 2 represent methyl and B represents adenosine. Preferably, X represents an oxygen atom. Preferred compounds of preferred formula (I) are those in which: X represents an oxygen or sulfur atom, - B represents a purine or pyrimidine base such as uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine or hypoxanthine, Li and L 2 , identical or different, represent an oxycarbonyl group -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, an oxygen atom, - Ri and R 2 , identical or different, represent a linear or branched alkyl chain containing from 2 to 30 carbon atoms, preferably from 6 to 25 carbon atoms, in particular from 8 to 25 carbon atoms, saturated or partially unsaturated, possibly totally or partially fluorinated, optionally substituted on the chain end carbon by a fluorine atom or by a benzyl or naphthyl ester or ether and R 3 represents a hydroxy, amino group, a phosphate, phosphonate, O-alkylphosphatidylcholine, thioph group osphate, phosphonium, a group NH 2 -R, NHR 4 R 5 or NR 4 R 5 R 6 in which R, R 5 and Rβ, identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydroxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a ZW-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 -) n - N - Ai CH 2 -V residue - A 2 or - (- CH 2 -CH-) n - I CO-V- in which V and W identical or different represent a bond -O -.- S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2 , and n can take the values from 1 to 500 and Ai and A 2 identical or different represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl containing from 2 to 5 carbon atoms, with the exception of compounds in which: - X represents an oxygen atom,
- B représente la cytosine, l'adénosine ou la 6-méthoxypuhne ,- B represents cytosine, adenosine or 6-methoxypuhne,
- Li et L2, identiques, représentent un groupement oxycarbonyl,- Li and L 2 , identical, represent an oxycarbonyl group,
- Ri et R2 identiques représentent un alkyle en C2 à C17 et - R3 représente un groupe hydroxy. D'autres composés de formule (I) préférés sont ceux dans lesquels R3 représente un groupement amino, un groupement phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidyléthanolamine, O- alkyl-phosphatidyléthanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium, un groupement NH2-R , NHR4R5 ou NR R5R6 dans lesquels R4, R5 et R6, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou hydroxyalkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou R3 représente un reste cyclodextrine ou un reste Z-W-CO-CH2-CH2-(-N-CO-CH2-CH2-)n- N - A1 CH2-V- A2 ou -(-CH2-CH-)n- I CO-V- dans lesquels V et W identiques ou différents représentent une liaison -0-,-S-, ou -NH-, Z peut prendre les significations de R3, Ri et R2l et n peut prendre les valeurs de 1 à 500 et Ai et A2 identiques ou différents représentent un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou acyle linéaire ou ramifié renfermant de 2 à 5 atomes de carbone. Parmi les composés ci-dessus décrits, on retient notamment les dérivés de formule (I), dans laquelle : - B représente une base purique ou pyrimidique choisie parmi l'uracile, l'adénine, la guanine, la cytosine, la thymine, - X représente un atome d'oxygène ou de soufre, - L1 et L2 représentent un groupement oxycarbonyl, thiocarbamate, carbonate ou carbamate, et sont de préférence identiques, - Ri et R2 représentent un radical undécyle, tridécyle, pentadécyle, heptadécyle, nonadécyle, cis,cis,cis,cis-4,7,10,13-nonadec-tétraènyle, arachidonyle, c s-8-heptadécènyle, - R3 représente un radical aminé, méthylamine, diméthylamine, triméthylamine, O-alkylphosphatidylcholine et - le contre-ion, le cas échéant, est un iodure ou un tosylate. On retient plus particulièrement les composés de formule (I) ci- dessus, dans laquelle : - B représente l'uracile ou l'adénine, - X représente un atome d'oxygène, - Li et L2 représentent un groupement oxycarbonyl, et sont de préférence identiques, et - R3 représente un radical triméthyl aminé ou O-éthyl phosphocholine. Parmi les composés de l'invention, on peut citer de plus- Ri and R 2 identical represent a C 2 to C 17 alkyl and - R 3 represents a hydroxy group. Other preferred compounds of formula (I) are those in which R 3 represents an amino group, a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, O-alkyl-phosphatidylethanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium group. NH 2 -R, NHR4R5 or NR R 5 R6 group in which R 4 , R 5 and R 6 , identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydroxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a ZW-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 -) n - N - A1 CH 2 -V- A2 or - (- CH 2 -CH-) n - I CO-V- in which V and W identical or different represent a bond -0 -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2l and n can take the values from 1 to 500 and Ai and A 2 identical or different represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 atoms of ca linear or branched carbon or acyl containing 2 to 5 carbon atoms. Among the compounds described above, there are in particular the derivatives of formula (I), in which: - B represents a purine or pyrimidine base chosen from uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine, - X represents an oxygen or sulfur atom, - L 1 and L 2 represent an oxycarbonyl, thiocarbamate, carbonate or carbamate group, and are preferably identical, - Ri and R 2 represent an undecyl, tridecyl, pentadecyl, heptadecyl radical, nonadecyl, cis, cis, cis, cis-4,7,10,13-nonadec-tetraenyl, arachidonyl, c s-8-heptadecenyl, - R 3 represents an amino radical, methylamine, dimethylamine, trimethylamine, O-alkylphosphatidylcholine and - the counterion, if necessary, is an iodide or a tosylate. The compounds of formula (I) above are more particularly retained, in which: - B represents uracil or adenine, - X represents an oxygen atom, - Li and L 2 represent an oxycarbonyl group, and are preferably identical, and - R 3 represents a trimethylamine or O-ethyl phosphocholine radical. Among the compounds of the invention, there may also be mentioned
- le tosylate de 2', 3'-dioléoyl-5'-(N,N,N-triméthylammonium) uridine (DOTAU)- 2 ', 3'-dioleoyl-5' tosylate - (N, N, N-trimethylammonium) uridine (DOTAU)
- le tosylate de 2', 3'-dioléoyl-5'-(N,N,N-triméthylammonium) adénosine- 2 ', 3'-dioleoyl-5' tosylate - (N, N, N-trimethylammonium) adenosine
- le tosylate de2', 3'-dimyristoyl-5'-(N,N,N-triméthylammonium) uridine- 2 ', 3'-dimyristoyl-5' tosylate - (N, N, N-trimethylammonium) uridine
- le triflate de 2', 3'-dioléoyl-5'-(O-éthyl phosphocholine) uridine (O-éthylDOUPC).- the 2 ', 3'-dioleoyl-5' triflate - (O-ethyl phosphocholine) uridine (O-ethylDOUPC).
Selon un aspect préféré, l'invention concerne des composés de formule (I) ci-dessus, dans laquelle Li et L2, ensemble, forment un groupement cétal ou thiocétal, répondant à la formule (la) ci -dessous :According to a preferred aspect, the invention relates to compounds of formula (I) above, in which Li and L 2 , together, form a ketal or thiocetal group, corresponding to the formula (la) below:
dans laquelle X, B, Ri, R2 et R3 sont tels que définis ci-dessus pour la formule (I), et in which X, B, Ri, R 2 and R 3 are as defined above for formula (I), and
- Y représente un atome d'oxygène ou de soufre à l'exception des composés dans lesquels :- Y represents an oxygen or sulfur atom with the exception of the compounds in which:
- X et Y représentent un atome d'oxygène , B représente l'adénosine, Ri et R2 identiques représentent un méthyle et R3 représente un groupe hydroxy. Des composés de formule (la) préférés sont ceux dans lesquels R3 représente un groupement amino, phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidyléthanolamine, O-alkyl- phosphatidyléthanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium, un groupement NH2-R4, NHR R5 ou NR4R5R6 dans lesquels R , R5 et R6, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou hydroxyalkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou R3 représente un reste cyclodextrine ou un reste Z-W-CO-CH2-CH2-(-N-CO-CH2-CH2-)n- N - A1 I I CH2-V- A2 ou -(-CH2-CH-)n- I CO-V- dans lesquels V et W identiques ou différents représentent une liaison -O-,-S-, ou -NH-, Z peut prendre les significations de R , Ri et R2, et n peut prendre les valeurs de 1 à 500 et Ai et A2 identiques ou différents représentent un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou acyle linéaire ou ramifié renfermant de 2 à 5 atomes de carbone. Parmi les composés ci-dessus décrits, les dérivés de formule (la) dans laquelle - B représente une base purique ou pyrimidique choisie parmi l'uracile, l'adénine, la guanine, la cytosine, la thymine, - X représente un atome d'oxygène ou de soufre, - Ri et R2 représentent un radical undécyle, tridécyle, pentadécyle, heptadécyle, nonadécyle, cis,cis,cis,cis-4,7,10,13-nonadec-tétraènyle, arachidonyle, c/s-8-heptadécènyle, - R3 représente un radical aminé, méthyl aminé, diméthyl aminé, triméthyl aminé, O-alkyl phosphatidylcholine et - le contre ion, le cas échéant, est un iodure ou un tosylate, sont des composés préférés de l'invention. On retient plus particulièrement les composés de formule (la) ci- dessus dans laquelle - B représente l'uracile ou l'adénine, - X représente un atome d'oxygène, et - R3 représente un radical phosphocholine, O-éthylphosphocholine ou triméthylamine. Parmi les composés préférés de formule (la), on peut citer, de plus : - le 2', 3'- hentriacontan-16-onide-5'-( phosphocholine) uridine - le 2', 3'- hentriacontan-16-onide-5'-( phosphocholine) adénine - le tosylate de 2',3'-hentriacontan-16-onide-5'-(N,N,N-triméthylammonium) uridine - le tosylate de 2',3'-hentriacontan-16-onide-5'-(O-éthylphosphocholine) uridine Dans les formules (I) et (la) définies ci-dessus, n est avantageusement compris entre 1 et 500, de préférence compris entre 1 et 100, notamment compris entre 1 et 50 , tout particulièrement compris entre 1 et 10. Dans les formules (I) et (la) définies ci-dessus, par alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, on entend par exemple un radical méthyle, éthyle, propyle, i-propyle, n-butyle, i-butyle, tert-butyle, de préférence méthyle ou éthyle. Egalement, dans les formules (I) et (la) ci-dessus, la base purique ou pyrimidique, ou la base hétérocyclique non naturelle peut être substituée par au moins un substituant choisi, par exemple, parmi un halogène, un groupe amino, un groupe carboxy , un groupe carbonyl, un groupe carbonylamino, un groupe hydroxy, azido, cyano, alkyle, cycloalkyle, perfluoroalkyle, alkyloxy (par exemple, méthoxy), oxy carbonyle, vinyl, ethynyl, propynyl, acyle etc. On entend par « base hétérocyclique non naturelle » une base autre que uracile, adénine, guanine, cytosine, thymine ou hypoxanthine, qui n'existe pas dans la nature. Lorsque, dans les formules (I) et (la) définies ci-dessus, R3 représente un groupement cationique, par exemple un groupement phosphonium ou NR RsRβ tel que défini plus haut, le contre-ion peut être choisi, par exemple, parmi les anions tosylate, halogénure, nitrate, sulfate, sulfonate, et thiosulfate.- X and Y represent an oxygen atom, B represents adenosine, Ri and R 2 identical represent a methyl and R 3 represents a hydroxy group. Preferred compounds of formula (la) are those in which R 3 represents an amino, phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine group, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, O-alkylphosphatidylethanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium, an NH 2 -R 4 group , NHR R 5 or NR 4 R 5 R 6 in which R, R 5 and R 6 , identical or different represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydroxyalkyl radical containing 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a ZW-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO -CH 2 -CH 2 -) n - N - A1 II CH 2 -V- A2 or - (- CH 2 -CH-) n - I CO-V- in which V and W identical or different represent a bond -O -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R, Ri and R 2 , and n can take the values from 1 to 500 and Ai and A 2 identical or different represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl containing from 2 to 5 carbon atoms. Among the compounds described above, the derivatives of formula (Ia) in which - B represents a purine or pyrimidine base chosen from uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine, - X represents an atom d oxygen or sulfur, - Ri and R 2 represent an undecyl, tridecyl, pentadecyl, heptadecyl, nonadecyl, cis, cis, cis, cis-4,7,10,13-nonadec-tetraenyl, arachidonyl radical, c / s- 8-heptadecenyl, - R 3 represents an amino, methyl amino, dimethyl amino, trimethyl amino, O-alkyl phosphatidylcholine radical and - the counter ion, if appropriate, is an iodide or a tosylate, are preferred compounds of the invention . The compounds of formula (la) above are more particularly retained in which - B represents uracil or adenine, - X represents an oxygen atom, and - R 3 represents a phosphocholine, O-ethylphosphocholine or trimethylamine. Among the preferred compounds of formula (la), there may also be mentioned: - 2 ', 3'- hentriacontan-16-onide-5' - (phosphocholine) uridine - 2 ', 3'- hentriacontan-16- onide-5 '- (phosphocholine) adenine - 2', 3'-hentriacontan-16-onide-5 '- (N, N, N-trimethylammonium) uridine - 2', 3'-hentriacontan- tosylate 16-onide-5 '- (O-ethylphosphocholine) uridine In the formulas (I) and (la) defined above, n is advantageously between 1 and 500, preferably between 1 and 100, especially between 1 and 50, very particularly between 1 and 10. In the formulas (I) and (la) defined above, by linear or branched alkyl containing 1 to 5 carbon atoms, is meant for example a methyl, ethyl, propyl radical , i-propyl, n-butyl, i-butyl, tert-butyl, preferably methyl or ethyl. Also, in formulas (I) and (la) above, the purine or pyrimidine base, or the non-natural heterocyclic base can be substituted with at least one substituent chosen, for example, from a halogen, an amino group, a carboxy group, carbonyl group, carbonylamino group, hydroxy group, azido, cyano, alkyl, cycloalkyl, perfluoroalkyl, alkyloxy (e.g. methoxy), oxy carbonyl, vinyl, ethynyl, propynyl, acyl etc. The term "non-natural heterocyclic base" means a base other than uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine or hypoxanthine, which does not exist in nature. When, in the formulas (I) and (la) defined above, R 3 represents a cationic group, for example a phosphonium or NR RsRβ group as defined above, the counterion can be chosen, for example, from tosylate, halide, nitrate, sulfate, sulfonate, and thiosulfate anions.
La présente invention a également pour objet un procédé de préparation des nouveaux composés de formules (I) tels que définis ci-dessus que de leurs sels dans laquelle Li et L2, identiques, représentent un groupement oxycarbonyl, thiocarbonyl, carbamate, ou carbonate et R3 représente un groupement NH-R4, NR R5 ou NR4R5R6 dans lesquels R4, R5 et Rβ, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou R3 représente un reste cyclodextrine ou un reste Z-W-CO-CH2-CH2-(- N-CO-CH2-CH2-)n- N - ^ I I CH2-V- A2 ou -(-CH2-CH-)n-The present invention also relates to a process for the preparation of the new compounds of formulas (I) as defined above as of their salts in which Li and L 2 , which are identical, represent an oxycarbonyl, thiocarbonyl, carbamate or carbonate group and R 3 represents an NH-R 4 , NR R 5 or NR 4 R 5 R 6 group in which R 4 , R 5 and Rβ, identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 atoms carbon, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a ZW-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 -) n - N - ^ II CH 2 -V- A 2 or - (- CH 2 -CH-) n -
CO-V- dans lesquels V et W identiques ou différents-représentent une liaison -O-,-S-, ou -NH-, Z peut prendre les significations de R3, Ri et R2, n peut prendre les valeurs de 1 à 500 et Ai et A2 identiques ou différents représentent un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou acyle linéaire ou ramifié renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, caractérisé en ce que l'on fait réagir un dérivé de formule (II)CO-V- in which V and W identical or different-represent a bond -O -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2 , n can take the values of 1 at 500 and Ai and A 2 identical or different represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl radical containing from 2 to 5 carbon atoms, characterized in that a derivative is reacted of formula (II)
(il) dans laquelle B et X ont la signification déjà indiquée, avec l'acétone pour obtenir un composé de formule (III) (II) in which B and X have the meaning already indicated, with acetone to obtain a compound of formula (III)
<'"> <">
dans laquelle B et X ont la signification déjà indiquée, que l'on fait réagir avec un agent d'activation d'un hydroxyle comme un halogénure de sulfonyle, pour obtenir un composé de formule (IV) in which B and X have the meaning already indicated, which is reacted with an activating agent of a hydroxyl such as a sulfonyl halide, to obtain a compound of formula (IV)
dans laquelle B et X ont la signification déjà indiquée et Ts représente un reste d'un agent d'activation d'un hydroxyle comme un reste tosyle ou mésyle, que l'on fait réagir en milieu acide puis avec un composé de formule Rι-L R7 (V) ou R2-L2-R7 (V) dans laquelle Ri, R2, -\ et L2 ont la signification déjà indiquée et R7 représente un reste d'un agent activant tel que le carbonyldiimidazole, le dicyclohexylcarbodiimide, l'hydroxybenzotriazole, ou le thiocarbonyldiimidazole, ou un atome d'halogène, pour obtenir un composé de formule (VI)in which B and X have the meaning already indicated and Ts represents a residue of an activating agent of a hydroxyl such as a tosyl or mesyl residue, which is reacted in an acid medium and then with a compound of formula Rι- LR 7 (V) or R 2 -L 2 -R 7 (V) in which Ri, R 2 , - \ and L 2 have the meaning already indicated and R 7 represents a residue of an activating agent such as carbonyldiimidazole, dicyclohexylcarbodiimide, hydroxybenzotriazole, or thiocarbonyldiimidazole, or a halogen atom, to obtain a compound of formula (VI)
que l'on fait réagir avec un composé de formule (VII) which is reacted with a compound of formula (VII)
dans laquelle R4, R5 et R6, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou hydoxyalkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, pour obtenir le composé de formule (I) attendu, que l'on isole si désiré. Dans des conditions préférentielles de mise en oeuvre du procédé ci-dessus décrit, - la réaction du dérivé de formule (II) avec l'acétone est réalisée en présence d'une quantité catalytique d'un acide tel que l'acide sulfurique, - la réaction du dérivé de formule (III) avec un agent d'activation d'un hydroxyle est réalisée dans la pyridine notamment à l'aide d'un halogénure de sulfonyle qui est de préférence un halogénure de tosyle, de mésyle ou de trifluorométhanesulfonyle comme leur chlorure ou bromure. - la réaction du dérivé de formule (IV) avec le composé de formule (V) ou (V) est précédée d'une acidification par l'acide trifluoroacétique et est réalisée dans l'eau. - la réaction du dérivé de formule (VI) avec un composé de formule (VII) est réalisée dans un solvant binaire comme un mélange tétrahydrofurane/acétonitrile. Les composés de formule (II) sont des dérivés naturels connus appelés nucléosides et non naturels, décrits dans la littérature par exemple par in which R 4 , R 5 and R 6 , identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydoxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, to obtain the expected compound of formula (I), that isolate if desired. Under preferential conditions for implementing the process described above, - the reaction of the derivative of formula (II) with acetone is carried out in the presence of a catalytic amount of an acid such as sulfuric acid, - the reaction of the derivative of formula (III) with an activating agent of a hydroxyl is carried out in pyridine in particular using a sulfonyl halide which is preferably a tosyl halide, mesyl or trifluoromethanesulfonyl such as their chloride or bromide. - The reaction of the derivative of formula (IV) with the compound of formula (V) or (V) is preceded by acidification with trifluoroacetic acid and is carried out in water. - The reaction of the derivative of formula (VI) with a compound of formula (VII) is carried out in a binary solvent such as a tetrahydrofuran / acetonitrile mixture. The compounds of formula (II) are known natural derivatives called nucleosides and non-natural, described in the literature for example by
J.A. Secrist, R.M. Riggs, K.N. Tiwari and J.A. Montgomery dans Synthesis and anti-HIV activity of 4'-thio-2',3'-didéoxynucleosides. J. Med. Chem. 1992, 35(3), p. 533-538." ou pouvant être préparés de manière analogue. La présente invention a également pour objet un procédé de préparation des nouveaux composés de formule (I) tels que définis ci-dessus, ainsi que de leurs sels, dans laquelle Li et L2, identiques représentent un groupement oxycarbonyl, thiocarbonyl, carbamate, ou carbonate et R3 représente un groupement phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O- alkylphosphatidylcholine, phosphatidyléthanolamine, O-alkyl- phosphatidyléthanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate , thiophosphate ou phosphonium, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (III) ci-dessus avec un composé de formule (VIT)JA Secrist, RM Riggs, KN Tiwari and JA Montgomery in Synthesis and anti-HIV activity of 4'-thio-2 ', 3'-dideoxynucleosides. J. Med. Chem. 1992, 35 (3), p. 533-538. "Or which can be prepared in an analogous manner. The present invention also relates to a process for the preparation of the new compounds of formula (I) as defined above, as well as their salts, in which Li and L 2 , identical represent an oxycarbonyl, thiocarbonyl, carbamate, or carbonate group and R 3 represents a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O- alkylphosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylethanolamine, O-alkylphosphatidylethanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate or phosphonium group what is reacted with a compound of formula (III) above with a compound of formula (VIT)
dans laquelle X représente un atome d'oxygène ou de soufre, Rs et R9 identiques ou différents représentent un radical, alkyle ou O-alkyle linéaire, cyclique ou ramifié renfermant de 1 à 20 atomes de carbone et Hal représente un atome d'halogène, pour obtenir un composé de formule (VIII) dans laquelle B a la signification déjà indiquée et R3 représente un groupement phosphate, O-alkylphosphate, phosphonate, thiophosphate ou phosphonium, que l'on fait réagir le cas échéant avec une trialkylamine de formule (VII) telle que définie plus haut, pour obtenir un composé de formule (VIII) dans laquelle R3 représente un groupement phosphatidylcholine ou phosphatidyléthanolamine, que l'on fait ensuite réagir en milieu acide puis avec un composé de formule R1-L1-R7 (V) ou R2-L2-R7 (V) dans lesquelles Ri, R2, L1 et L2 ont la signification déjà indiquée et R représente un agent activant tel que le carbonyl diimidazole, le dicyclohexylcarbodiimide, l'hydroxybenzotriazole, ou le thiocarbonyldiimidazole, ou un atome d'halogène, pour obtenir le composé de formule (I) attendu que l'on isole si désiré ; puis, si on veut obtenir un composé de formule (I) dans laquelle B a la signification déjà indiquée et R3 représente un groupement O-alkyl phosphatidylcholine, O-alkyl phosphatidyléthanolamine, on fait réagir un composé de formule Rio-J, dans laquelle R10 représente une chaîne alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 10 atomes de carbone et J est un groupement activant de type halogénure, tosylate ou triflate avec un composé (I) dans laquelle B a la signification déjà indiquée et R3 représente un groupement phosphatidylcholine ou phosphatidyléthanolamine. in which X represents an oxygen or sulfur atom, Rs and R 9 identical or different represent a radical, linear or cyclic or branched alkyl or O-alkyl containing from 1 to 20 carbon atoms and Hal represents a halogen atom , to obtain a compound of formula (VIII) in which B has the meaning already indicated and R 3 represents a phosphate, O-alkylphosphate, phosphonate, thiophosphate or phosphonium group, which is reacted if necessary with a trialkylamine of formula (VII) as defined above, for obtaining a compound of formula (VIII) in which R 3 represents a phosphatidylcholine or phosphatidylethanolamine group, which is then reacted in an acid medium and then with a compound of formula R1-L 1 -R7 (V) or R 2 -L 2 -R 7 (V) in which Ri, R 2 , L1 and L 2 have the meaning already indicated and R represents an activating agent such as carbonyl diimidazole, dicyclohexylcarbodiimide, hydroxybenzotriazole, or thiocarbonyldiimidazole, or an atom of ' halogen, to obtain the compound of formula (I) expected to be isolated if desired; then, if we want to obtain a compound of formula (I) in which B has the meaning already indicated and R 3 represents an O-alkyl phosphatidylcholine, O-alkyl phosphatidylethanolamine group, a compound of formula Rio-J is reacted, in which R1 0 represents a linear or branched alkyl chain containing from 1 to 10 carbon atoms and J is an activating group of halide, tosylate or triflate type with a compound (I) in which B has the meaning already indicated and R 3 represents a group phosphatidylcholine or phosphatidylethanolamine.
Dans des conditions préférentielles de mise en oeuvre du procédé ci-dessus décrit : - la réaction du composé de formule (III) ci-dessus avec le composé de formule (VIT) est réalisée en présence de triéthylamine (environ 0,5 M) dans le tétrahydrofurane sous atmosphère inerte à 0°C pendant une heure puis à température ambiante pendant environ 18 h. Les concentrations préférentiellement utilisées sont de 0,3 M environ pour le composé de formule (III) et 0,4 M environ pour le composé VII'. - la réaction du composé de formule (VIII) avec la trialkylamine (VII) est réalisée avec un large excès de trialkylamine (environ 200 équivalents) en présence d'un mélange binaire acétonitrile/ tétrahydrofurane environ 1/1 à environ 70°C pendant approximativement 48 h. La concentration préférentiellement utilisée est de 0,2 M environ pour le composé de formule (VII). - la réaction du composé de formule (VIII) à la concentration de 0,05 M avec un composé de formule (V) ou (V) à la concentration de 0,2 M en présence de 0,2 M de dicyclohexylcarbodiimide, de 0,2 M de diméthylaminopyridine dans le dimethylformamide est précédée d'une acidification par de l'HCI 1,2 N dans un mélange méthanol/eau à température ambiante, pour obtenir un composé de formule (I). Dans un deuxième temps la réaction du composé de formule (I) à la concentration de 0,05 M dans le dichlorométhane anhydre sous azote (une atmosphère) et à température ambiante en présence d'un triflate d'alkyle à la concentration de 0,1 M, pendant 24 h pour obtenir un composé de formule (I) ou (la).Under preferential conditions for implementing the process described above: - the reaction of the compound of formula (III) above with the compound of formula (VIT) is carried out in the presence of triethylamine (approximately 0.5 M) in tetrahydrofuran under an inert atmosphere at 0 ° C for one hour and then at room temperature for about 18 h. The concentrations preferably used are approximately 0.3 M for the compound of formula (III) and approximately 0.4 M for the compound VII '. the reaction of the compound of formula (VIII) with the trialkylamine (VII) is carried out with a large excess of trialkylamine (approximately 200 equivalents) in the presence of a binary mixture of acetonitrile / tetrahydrofuran approximately 1/1 at approximately 70 ° C for approximately 48 h. The concentration preferably used is approximately 0.2 M for the compound of formula (VII). the reaction of the compound of formula (VIII) at the concentration of 0.05 M with a compound of formula (V) or (V) at the concentration of 0.2 M in the presence of 0.2 M of dicyclohexylcarbodiimide, of 0 , 2 M of dimethylaminopyridine in dimethylformamide is preceded by acidification with 1.2 N HCl in a methanol / water mixture at room temperature, to obtain a compound of formula (I). Secondly, the reaction of the compound of formula (I) at the concentration of 0.05 M in anhydrous dichloromethane under nitrogen (one atmosphere) and at room temperature in the presence of an alkyl triflate at the concentration of 0, 1 M, for 24 h to obtain a compound of formula (I) or (la).
La présente invention a également pour objet un procédé de préparation des nouveaux composés de formule (I) ou (la), telles que définies ci-dessus, ainsi que de leurs sels, dans laquelle Li et L2, ensemble, forment un groupement cétal ou thiocétal, dans lesquelles R3 représente un groupement NH-R4, NR4R5 ou NR4R5R6 dans lesquels R4, R5 et R6, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou R3 représente un reste cyclodextrine ou un reste Z-W-CO-CH2-CH2-(-N-CO-CH2-CH2-)n- N - A^ I I CH2-V- A2 ou -(-CH2-CH-)n- I CO-V- dans lesquels V et W, identiques ou différents, représentent une liaison -0-,-S-, ou -NH-, Z peut prendre les significations de R3, Ri et R2, n peut prendre les valeurs de 1 à 500 et AT et A2ι identiques ou différents, représentent un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou acyle linéaire ou ramifié renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, caractérisé en ce que l'on fait réagir un dérivé de formule (II) tel que défini précédemmentThe present invention also relates to a process for the preparation of the new compounds of formula (I) or (la), as defined above, as well as their salts, in which Li and L 2 , together, form a ketal group or thioketal, in which R 3 represents an NH-R 4 , NR 4 R 5 or NR 4 R 5 R6 group in which R 4 , R5 and R 6 , identical or different, represent a hydrogen atom or a linear alkyl radical or branched containing from 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a residue ZW-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 -) n - N - A ^ II CH 2 -V- A 2 or - (- CH 2 -CH-) n - I CO-V- in which V and W, identical or different, represent a bond -0 -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2 , n can take the values from 1 to 500 and AT and A 2ι identical or different, represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl radical containing from 2 to 5 carbon atoms, characterized in that a derivative of formula (II) is reacted as defined above
(il) dans laquelle B et X ont la signification déjà indiquée, avec une cétone de formule Rι-CO-R2 ou un diméthoxycétai de formule Rι-C(OMe)2-R2 pour obtenir un composé de formule (III') (II) in which B and X have the meaning already indicated, with a ketone of formula Rι-CO-R 2 or a dimethoxyketai of formula Rι-C (OMe) 2 -R 2 to obtain a compound of formula (III ')
HH
("π dans laquelle B et X ont la signification déjà indiquée, que l'on fait réagir avec un agent d'activation d'un hydroxyle comme un halogénure de sulfonyle, pour obtenir un composé de formule (IV)' ( "π in which B and X have the meaning already indicated, which is reacted with an activating agent of a hydroxyl such as a sulfonyl halide, to obtain a compound of formula (IV) '
dans laquelle B et X ont la signification déjà indiquée et Ts représente un reste d'un agent d'activation d'un hydroxyle comme un reste tosyle ou mésyle, que l'on fait réagir avec un composé de formule (VII) tel que défini précédemment R4 in which B and X have the meaning already indicated and Ts represents a residue of an activating agent of a hydroxyl such as a tosyl or mesyl residue, which is reacted with a compound of formula (VII) as defined previously R 4
-N. R6 R5 (VII) dans laquelle R , R5 et R6, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou hydoxyalkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, pour obtenir le composé de formule (I) dans laquelle L1 et L2, ensemble, forment un groupement cétal ou thiocétal ou de formule (la) attendu, que l'on isole si désiré. Dans des conditions préférentielles de mise en oeuvre du procédé ci-dessus décrit, - la réaction du dérivé de formule (II) avec la hentriacontan-16-one est réalisée en présence d'une quantité catalytique d'un acide, tel que l'acide paratoluènesulfonique (APTS), - la réaction du dérivé de formule (III') avec un agent d'activation d'un hydroxyle est réalisée dans la pyridine notamment à l'aide d'un halogénure de sulfonyle qui est de préférence un halogénure de tosyle, de mésyle ou de trifluorométhanesulfonyle, comme leur chlorure ou bromure. - la réaction du dérivé de formule (IV) avec un composé de formule (VII) est réalisée dans un solvant binaire comme un mélange tétrahydrofurane/acétonitrile.-NOT. R 6 R 5 (VII) in which R, R5 and R 6 , identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydoxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, to obtain the compound of formula ( I) in which L1 and L 2 , together, form a ketal or thiocetal group or of the expected formula (la), which is isolated if desired. Under preferential conditions for implementing the process described above, - the reaction of the derivative of formula (II) with hentriacontan-16-one is carried out in the presence of a catalytic amount of an acid, such as paratoluenesulfonic acid (APTS), - the reaction of the derivative of formula (III ') with an activating agent of a hydroxyl is carried out in pyridine in particular using a sulfonyl halide which is preferably a halide of tosyle, mesyle or trifluorométhanesulfonyle, like their chloride or bromide. - The reaction of the derivative of formula (IV) with a compound of formula (VII) is carried out in a binary solvent such as a tetrahydrofuran / acetonitrile mixture.
La présente invention a également pour objet un procédé de c préparation des nouveaux composés de formule (I) dans laquelle et L2, ensemble, forment un groupement cétal ou thiocétal ou de formule (la), telles que définies ci-dessus, ainsi que de leurs sels, dans lesquelles R3 représente un groupement phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O- alkylphosphatidylcholine, phosphatidyléthanolamine, O- alkylphosphatidyléthanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate ou phosphonium, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (III') ci-dessus avec un composé de formule (VIT) dans laquelle X représente un atome d'oxygène ou de soufre, R8 et R9, identiques ou différents, représentent un radical, alkyle ou O-alkyle linéaire, cyclique ou ramifié renfermant de 1 à 20 atomes de carbone et Hal représente un atome d'halogène, pour obtenir un composé de formule (I) dans laquelle Li et L2, ensemble, forment un groupement cétal ou thiocétal ou de formule (la) attenduThe present invention also relates to a process for the preparation of the new compounds of formula (I) in which and L 2 , together, form a ketal or thioketal group or of formula (la), as defined above, as well as of their salts, in which R 3 represents a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O- alkylphosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, O- alkylphosphatidylethanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate or phosphonium group, characterized in that a compound of formula (III) is reacted ') above with a compound of formula (VIT) in which X represents an oxygen or sulfur atom, R 8 and R 9 , identical or different, represent a radical, linear or cyclic or branched alkyl or O-alkyl containing from 1 to 20 carbon atoms and Hal represents an atom halogen, to obtain a compound of formula (I) in which Li and L 2 , together, form a ketal or thioketal group or of formula (la) expected
dans laquelle B a la signification déjà indiquée et R3 représente un groupement phosphate, O-alkylphosphate, phosphonate, thiophosphate ou phosphonium, que l'on fait réagir le cas échéant avec une trialkylamine de formule (VII) telle que définie plus haut, pour obtenir un composé de type phosphate alkylamine de formule (la) dans laquelle R3 représente un groupe phosphatidylcholine ou phosphatidyléthaloamine, que l'on isole si désiré ; puis, si on veut obtenir un composé de formule (la) dans laquelle B à la signification déjà indiquée et R3 représente un groupement O-alkylphosphatidylcholine ou O-alkylphosphatidyléthanolamine, on fait réagir un composé de formule R10-J, à la signification déjà indiquée, avec un composé (la) dans laquelle B a la signification déjà indiquée et R3 représente un groupement phosphatidylcholine ou phosphatidyléthanolamine. in which B has the meaning already indicated and R 3 represents a phosphate, O-alkylphosphate, phosphonate, thiophosphate or phosphonium group, which is reacted if necessary with a trialkylamine of formula (VII) as defined above, for obtaining a phosphate alkylamine compound of formula (Ia) in which R3 represents a phosphatidylcholine or phosphatidylethaloamine group, which is isolated if desired; then, if we want to obtain a compound of formula (la) in which B has the meaning already indicated and R 3 represents an O-alkylphosphatidylcholine or O-alkylphosphatidylethanolamine group, a compound of formula R 10 -J is reacted with the meaning already indicated, with a compound (la) in which B has the meaning already indicated and R 3 represents a phosphatidylcholine or phosphatidylethanolamine group.
Dans des conditions préférentielles de mise en oeuvre du procédé ci-dessus décrit : - la réaction du composé de formule (III') ci-dessus avec le composé de formule (VIT) est réalisée en présence de triéthylamine (environ 0,5 M) dans le tétrahydrofurane sous atmosphère inerte à 0°C pendant une heure puis à température ambiante pendant environ 18 h. Les concentrations préférentiellement utilisées sont de 0,3 M environ pour le composé de formule (III') et 0,4 M environ pour le composé (VIT), la réaction du composé de formule (la) avec la trialkylamine (VII) est réalisée avec un large excès de trialkylamine (environ 200 équivalents) en présence d'un mélange binaire acétonitrile/ tétrahydrofurane environ 1/1 à environ 70°C pendant approximativement 48 h. La concentration préférentiellement utilisée est de 0,2 M environ pour le composé de formule (la). Dans un deuxième temps la réaction du composé de formule (la) à la concentration de 0,05 M dans le dichlorométhane anhydre sous azote (une atmosphère) et à température ambiante en présence d'un triflate d'alkyle à la concentration de 0,1 M, pendant 24 h pour obtenir un composé de formule (la).Under preferential conditions for implementing the process described above: - the reaction of the compound of formula (III ′) above with the compound of formula (VIT) is carried out in the presence of triethylamine (approximately 0.5 M) in tetrahydrofuran under an inert atmosphere at 0 ° C for one hour and then at room temperature for about 18 h. The preferentially used concentrations are approximately 0.3 M for the compound of formula (III ') and approximately 0.4 M for the compound (VIT), the reaction of the compound of formula (la) with trialkylamine (VII) is carried out with a large excess of trialkylamine (approximately 200 equivalents) in the presence of a binary mixture of acetonitrile / tetrahydrofuran approximately 1/1 at approximately 70 ° C for approximately 48 h. The concentration preferably used is approximately 0.2 M for the compound of formula (la). Secondly, the reaction of the compound of formula (la) at the concentration of 0.05 M in anhydrous dichloromethane under nitrogen (one atmosphere) and at room temperature in the presence of an alkyl triflate at the concentration of 0, 1 M, for 24 h to obtain a compound of formula (la).
L'invention concerne également l'utilisation des composés de formule (I)The invention also relates to the use of the compounds of formula (I)
dans laquelle - X représente un atome d'oxygène, de soufre, ou un groupe -CH2-, B représente une base purique ou pyrimidique, telle que uracile, adénine, guanine, cytosine, thymine ou hypoxanthine, éventuellement substituée, ou encore une base héterocylique mono-ou bi-cyclique non naturelle dont chaque cycle comporte 4 à 7 chaînons, éventuellement substituée, - Li et L2, identiques ou différents, représentent un groupement oxycarbonyl -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, un atome d'oxygène, ou encore, Li et L2ι ensemble, forment un groupement cétal de formule ou un groupement thiocétal de formule in which - X represents an oxygen or sulfur atom, or a group -CH 2 -, B represents a purine or pyrimidine base, such as uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine or hypoxanthine, optionally substituted, or a non-natural mono-or bi-cyclic heterocylic base each cycle of which has 4 to 7 links, optionally substituted, - Li and L 2 , identical or different, represent an oxycarbonyl group -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH- , carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, an oxygen atom, or else, Li and L 2ι together, form a ketal group of formula or a thiocetal group of formula
Ri et R2, identiques ou différents représentent une chaîne hydrophobe alkyle linéaire ou ramifiée renfermant de 2 à 30 atomes de carbone, de préférence de 6 à 25 atomes de carbone, notamment de 8 à 25 atomes de carbone, saturée ou partiellement insaturée, éventuellement totalement ou partiellement fluorée, éventuellement substituée sur le carbone d'extrémité de chaîne par un atome de fluor ou par un ester ou éther benzylique ou naphtylique et R3 représente un groupement hydroxy, amino, un groupement phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidyléthanolamine, O-alkylphosphatidyléthanolamine, thiophosphate, phosphonium, un groupement NH2-R4, NHR4R5 ou NR4R5R6 dans lesquels R4, R5 et Rβ, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou hydroxyalkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou R3 représente un reste cyclodextrine ou un reste Z-W-CO-CH2-CH2-(-N-CO-CH2-CH2-)n- N - A I ! CH2-V- A2 ou -(-CH2-CH-)n- I CO-V- dans lesquels V et W identiques ou différents représentent une liaison -O-,-S-, ou -NH-, Z peut prendre les significations de R3, Ri et R2, et n peut prendre les valeurs de 1 à 500 et Ai et A2 identiques ou différents représentent un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou acyle linéaire ou ramifié renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, pour le transport et/ou la délivrance in-vitro, ex-vivo et in-vivo de molécules ou de macromolécules biologiquement actives. En particulier, lesdites molécules ou macromolécules biologiquement actives peuvent être choisies parmi des principes actifs, des acides nucléiques tels que des molécules d'ADN ou d'ARN, d'ADN anti-sens, de PNA, d'ARN messager, d'ARN interférence (siRNA's), des plasmides, des oligonucléotides duplex, des oligonucléotides simple brin, des oligonucléotides triplex, des peptides, des polysaccharides, etc. A titre d'illustrations de principes actifs, on peut citer, par exemple : - des agents anti cancéreux tels que les dérivés du taxol, l'AraC (cytarabine), la troxacitabine, la navelbine, la vinflunine, l'acronycine et ses dérivés, les analogues de la rébeccamycine, les molécules anti-angiogéniques, l'acide rétinoïque, I' arsenic, le cis platine et ses dérivés, les agents intercalants, le 5-FU, l'Idoxuridine (IdU) ou le DMDC ; - des agents antiviraux tels que, par exemple, les dérivés nucléosidiques cycliques tels que BVDU (anti-herpès), TFT (anti-herpès), ribavirine et analogues (anti-HCV,) l'AZT, la ddC, la d4T, la 3TC, la CBV, la ddl, l'abacavir (anti-HIV, anti-HBV), lavidarabine ou l'AraA (anti-HBV, anti-HZV, anti-HSV) ; des dérivés nucléosides acycliques tels que l'acyclovir, le gancyclovir, le penciclovir, le cidofovir, le tenofovir (anti-HSV) ; ou encore d'autres molécules telles que, par exemple, l'nterferon (anti-(HCV), ou les acides nucléiques tels que l'ADN, l'ARN, l'ARNi, les ARN aptamers, les ARN antisens ; - des agents anti-radicaux libres tels que, par exemple, des dérivés polyphénoliques d'origine végétale tels que l'acide gallique, l'acide caféique, l'anthocyane, le resvératrol, les flavonoides etc. Les composés de formule (I) peuvent également former des complexes covalents, avec différentes stoechiométries, avec certains principes actifs, comme par exemple le cis-platine et ses dérivés. Les composés de formule (I) ci-dessus possèdent également de très intéressantes propriétés. Ils sont capables de former des assemblages supramoléculaires tels que des micelles, des micelles inversées, des liposomes (uni lamellaires, multi lamellaires, petits ou géants), phases hexagonales, phases gel, toroïdes, émulsions, micro émulsions, hélices, tubes, fibres ou disques, seuls ou en combinaison avec un principe actif ou un matériel génétique, lesdits assemblages supramoléculaires étant également un objet de l'invention. L'utilisation des dits assemblages pour le transport et/ou la délivrance in-vitro, ex-vivo et in-vivo de molécules ou de macromolécules biologiquement actives, en particulier des molécules ou de macromolécules biologiquement actives telles que définies plus haut, représente un objet ultérieur de l'invention. En vue de cette utilisation, les composés de formule (I) ou lesdits assemblages supramoléculaires peuvent entrer dans la formulation de compositions pharmaceutiques. Celles-ci peuvent notamment se présenter sous forme solide, de solutions, d'émulsions ou de gels. Dans ces compositions pharmaceutiques, ils peuvent être présents à des concentrations en poids allant généralement de 0,01 à près de 100 %, notamment de 0,05 à 5 %, et de 0,01 à près de 100 % pour les solutions et émulsions et de 1 à 50 % pour les gels. Les composés de formule (I) ci-dessus ainsi que les assemblages supramoléculaires tels que définis ci- dessus) peuvent être utilisés seuls ou inclus dans une formulation dans laquelle ils peuvent représenter de 1 à 99 %, comprenant des composés amphiphiles connus, non ioniques, par exemple des dérivés de polyéthylène glycol, cationiques, anioniques, zwitterioniques (DMPC, DLPC, DPPC, DSPC, DOPC, DMPE, DOPE, DPPE, etc. ...) incluant les lipides cationiques (comme le DOTAP), les composés polycationiques (comme le PEI). C'est pourquoi la présente demande a aussi pour objet une composition pour le transfert de gènes comprenant un gène et un composé de formule (I) tel que définie ci-dessus. Avantageusement, ledit composé de formule (I) se trouve sous la forme d'un assemblage supramoléculaire tel que défini plus haut. En vue de leur mise en œuvre, les formulations ci-dessus peuvent être utilisées selon différents protocoles de transfert de gènes comme de transfection comme l'électroporation, le bombardement de particules, la délivrance par liposomes, la délivrance par gel, la délivrance par vecteur non viral et les gènes médiés par des récepteurs. Dans ce but, ils peuvent être utilisés en solution ou gel, par exemple comme milieu de culture, ou déposés sur surface support comme sur mica ou silice notamment pour faire pousser des cellules. Les gènes peuvent notamment être utilisés sous forme de plasmides. La forme gel est particulièrement intéressante aux fins de l'invention . Elle peut être utilisée, par exemple, pour le transport et/ou la délivrance in-vitro, ex-vivo et in-vivo de molécules ou de macromolécules biologiquement actives telles que définies plus haut, en particulier de principes actifs, ou, notamment, pour le transfert de gènes dans un organisme hôte. C'est pourquoi la présente demande a également pour objet un procédé pour le transfert de gènes dans lequel on transfère un gène dans un organisme hôte à l'aide d'un composé de formule (I) tel que défini ci-dessus. Selon un aspect avantageux de l'invention, les composés de formule (I) et les formulations ou assemblages supramoléculaires ci-dessus , en particulier la forme gel, peuvent être utilisées pour la transfection de cellules non adhérentes . L'invention concerne également, selon un aspect ultérieur, l'utilisation de composés de formule (I) ci-dessus et des assemblages supramoléculaires desdits composés tels que décrits plus haut pour la délivrance et/ou le transport in vitro, ex vivo et in vivo de molécules marqueurs et/ou ayant une activité biologique, en particulier des sels de lanthanides ou d'actinides. En particulier, les assemblages supramoléculaires de composés selon l'invention mentionnés plus haut peuvent être utilisés pour complexer des sels d'actinides ou de lanthanides, en particulier des sels de cérium, de thorium ou d'uranium, notamment sous forme de microsphères . Avantageusement, lesdites microsphères sont formées dans une phase aqueuse. Ces structures trouvent des applications intéressantes dans divers domaines, comme par exemple pour la fabrication de nano- ou micro-objets utilisable pour la radiothérapie, par exemple, dans le traitement de tumeurs, par émission d'une radiation létale localisée, ou pour la décorporation d'éléments contaminants comme des éléments radioactifs (élimination par chélation d'éléments contaminants dans un organisme vivant). Dans le cadre de l'utilisation des composés de formule (I) pour le transport et/ou la délivrance in-vitro, ex-vivo et in-vivo de molécules ou de macromolécules biologiquement actives, les composés de formule (I), à l'exception des composés dans lesquels : - X représente un atome d'oxygène , Ri and R 2 , identical or different, represent a linear or branched alkyl hydrophobic chain containing from 2 to 30 carbon atoms, preferably from 6 to 25 carbon atoms, in particular from 8 to 25 carbon atoms, saturated or partially unsaturated, optionally totally or partially fluorinated, optionally substituted on the chain end carbon by a fluorine atom or by a benzyl or naphthyl ester or ether and R 3 represents a hydroxy, amino group, a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine group , phosphatidylethanolamine, O-alkylphosphatidylethanolamine, thiophosphate, phosphonium, an NH 2 -R 4 group , NHR 4 R 5 or NR 4 R 5 R 6 in which R 4 , R 5 and Rβ, which are identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydroxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a ZW-CO-CH residue 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 -) n - N - AI! CH 2 -V- A 2 or - (- CH 2 -CH-) n - I CO-V- in which V and W identical or different represent a bond -O -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2 , and n can take the values from 1 to 500 and Ai and A 2 identical or different represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl containing 2 to 5 carbon atoms, for in-vitro, ex-vivo and in-vivo transport and / or delivery of biologically active molecules or macromolecules. In particular, said biologically active molecules or macromolecules can be chosen from active principles, nucleic acids such as DNA or RNA molecules, antisense DNA, PNA, messenger RNA, RNA interference (siRNA's), plasmids, duplex oligonucleotides, single-stranded oligonucleotides, triplex oligonucleotides, peptides, polysaccharides, etc. By way of illustrations of active principles, there may be mentioned, for example: - anticancer agents such as taxol derivatives, AraC (cytarabine), troxacitabine, navelbine, vinflunine, acronycin and its derivatives , analogs of rebeccamycin, anti-angiogenic molecules, retinoic acid, arsenic, cis platinum and its derivatives, intercalating agents, 5-FU, Idoxuridine (IdU) or DMDC; - antiviral agents such as, for example, cyclic nucleoside derivatives such as BVDU (anti-herpes), TFT (anti-herpes), ribavirin and analogues (anti-HCV,) AZT, ddC, d4T, 3TC, CBV, ddl, abacavir (anti-HIV, anti-HBV), lavidarabine or AraA (anti-HBV, anti-HZV, anti-HSV); acyclic nucleoside derivatives such as acyclovir, gancyclovir, penciclovir, cidofovir, tenofovir (anti-HSV); or other molecules such as, for example, interferon (anti (HCV), or nucleic acids such as DNA, RNA, RNAi, aptamer RNA, antisense RNA; anti-free radical agents such as, for example, polyphenolic derivatives of plant origin such as gallic acid, caffeic acid, anthocyanin, resveratrol, flavonoids etc. The compounds of formula (I) can also forming covalent complexes, with different stoichiometries, with certain active principles, such as cis-platinum and its derivatives. The compounds of formula (I) above also have very interesting properties. They are capable of forming supramolecular assemblies such as micelles, inverted micelles, liposomes (uni lamellar, multi lamellar, small or giant), hexagonal phases, gel phases, toroids, emulsions, micro emulsions, helices, tubes, fibers or disks, alone or in combination with an active principle or a genetic material, said supramolecular assemblies also being an object of the invention. The use of said assemblies for the transport and / or in-vitro, ex-vivo and in-vivo delivery of biologically active molecules or macromolecules, in particular biologically active molecules or macromolecules as defined above, represents a subsequent subject of the invention. For the purpose of this use, the compounds of formula (I) or said supramolecular assemblies can enter into the formulation of pharmaceutical compositions. These can in particular be in solid form, solutions, emulsions or gels. In these pharmaceutical compositions, they can be present at concentrations by weight generally ranging from 0.01 to almost 100%, in particular from 0.05 to 5%, and from 0.01 to almost 100% for the solutions and emulsions. and from 1 to 50% for gels. The compounds of formula (I) above as well as the supramolecular assemblies as defined above) can be used alone or included in a formulation in which they can represent from 1 to 99%, comprising known amphiphilic compounds, nonionic , for example polyethylene glycol, cationic, anionic, zwitterionic derivatives (DMPC, DLPC, DPPC, DSPC, DOPC, DMPE, DOPE, DPPE, etc.) including cationic lipids (such as DOTAP), polycationic compounds (like the PEI). This is why the present application also relates to a composition for the transfer of genes comprising a gene and a compound of formula (I) as defined above. Advantageously, said compound of formula (I) is in the form of a supramolecular assembly as defined above. In view of their implementation, the above formulations can be used according to different protocols for gene transfer as for transfection as electroporation, particle bombardment, delivery by liposomes, delivery by gel, delivery by vector. no viral and receptor-mediated genes. For this purpose, they can be used in solution or gel, for example as a culture medium, or deposited on a support surface such as on mica or silica in particular for growing cells. The genes can in particular be used in the form of plasmids. The gel form is particularly advantageous for the purposes of the invention. It can be used, for example, for the transport and / or the in-vitro, ex-vivo and in-vivo delivery of biologically active molecules or macromolecules as defined above, in particular of active principles, or, in particular, for the transfer of genes into a host organism. This is why the present application also relates to a method for the transfer of genes in which a gene is transferred into a host organism using a compound of formula (I) as defined above. According to an advantageous aspect of the invention, the compounds of formula (I) and the above supramolecular formulations or assemblies, in particular the gel form, can be used for the transfection of nonadherent cells. The invention also relates, according to a subsequent aspect, to the use of compounds of formula (I) above and supramolecular assemblies of said compounds as described above for the delivery and / or transport in vitro, ex vivo and in vivo of marker molecules and / or having biological activity, in particular lanthanide or actinide salts. In particular, the supramolecular assemblies of compounds according to the invention mentioned above can be used to complex salts of actinides or lanthanides, in particular salts of cerium, thorium or uranium, in particular in the form of microspheres. Advantageously, said microspheres are formed in an aqueous phase. These structures find interesting applications in various fields, such as for the manufacture of nano- or micro-objects usable for radiotherapy, for example, in the treatment of tumors, by emission of localized lethal radiation, or for decorporation of contaminating elements such as radioactive elements (elimination by chelation of contaminating elements in a living organism). In the context of the use of the compounds of formula (I) for the transport and / or the in-vitro, ex-vivo and in-vivo delivery of biologically active molecules or macromolecules, the compounds of formula (I), the exception of the compounds in which: - X represents an oxygen atom,
- B représente la cytosine, l'adénosine ou une 6-méthoxypurine ,- B represents cytosine, adenosine or a 6-methoxypurine,
- Li et L2, identiques représentent un groupement oxycarbonyl ou, ensemble, forment un groupement cétal, et- Li and L 2 , identical represent an oxycarbonyl group or, together, form a ketal group, and
- R3 représente un groupe hydroxy, peuvent être utilisés en tant que précurseurs de principe actif (également appelés pro-drogue). A cette fin, on peut, par exemple, utiliser les différentes configurations des liaisons du cycle furanosyl, sur lesquelles des groupements supplémentaires peuvent éventuellement être ajoutés ou les groupements existants peuvent être modifiés chimiquement . Alternativement, le substituant B peut représenter une base correspondant à une base présente dans la structure chimique dudit principe actif par exemple une base purique ou pyrimidique, éventuellement substituée, ou encore une base hétérocyclique non naturelle, mono- ou bicyclique, éventuellement substituée, par exemple, le triazole, le thiazole le benzimidazole ou la pyridine-2-one. A titre d'illustration de principes actifs pour lesquels les composés de formule (I) peuvent être utilisés comme pro-drogues, on peut citer, par exemple, la ribavirine (B = 1 ,2,4-triazole-3-carboxamide), le 2- bromo-5,6-dichloro-1 -β-D-ribofuranosyl-benzimidazole(B = benzimidazole), la 5-fluorouridine (5-FU), le 5-trifluorouridine (TFT), le 5-lodouridine (5-IU), le 5-Bromovinyluridine (BVU), la nevitudine (B = 5-(prop-2-yn-1-yl)) ou la thiazofurine (B = thiazole-4-carboxamide) . Les composés de formule (I) peuvent également être utilisés comme structure porteuse d'une sonde luminescente, par exemple lorsque le substituant B représente une molécule fluorescente, par exemple un dérivé de purine comme la 2-aminopurine . Des composés préférés aux fins des utilisations mentionnées ci- dessus sont des composés de formule (I) dans laquelle : X représente un atome d'oxygène ou de soufre, B représente une base purique ou pyrimidique telle que uracile, adénine, guanine, cytosine, thymine ou hypoxanthine, Li et L2, identiques ou différents, représentent un groupement oxycarbonyl -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, un atome d'oxygène, et Ri, R2, et R3 sont tels que définis plus haut.- R 3 represents a hydroxy group, can be used as precursors of active principle (also called pro-drug). To this end, it is possible, for example, to use the different configurations of the furanosyl ring bonds, on which additional groups can optionally be added or the existing groups can be chemically modified. Alternatively, the substituent B may represent a base corresponding to a base present in the chemical structure of said active principle, for example a purine or pyrimidine base, optionally substituted, or an unnatural heterocyclic base, mono- or bicyclic, optionally substituted, for example , triazole, thiazole benzimidazole or pyridine-2-one. By way of illustration of active principles for which the compounds of formula (I) can be used as prodrugs, mention may be made, for example, of ribavirin (B = 1,2,4-triazole-3-carboxamide), 2- bromo-5,6-dichloro-1 -β-D-ribofuranosyl-benzimidazole (B = benzimidazole), 5-fluorouridine (5-FU), 5-trifluorouridine (TFT), 5-lodouridine (5 -IU), 5-Bromovinyluridine (BVU), nevitudine (B = 5- (prop-2-yn-1-yl)) or thiazofurine (B = thiazole-4-carboxamide). The compounds of formula (I) can also be used as a carrier structure for a luminescent probe, for example when the substituent B represents a fluorescent molecule, for example a purine derivative such as 2-aminopurine. Preferred compounds for the purposes of the uses mentioned above are compounds of formula (I) in which: X represents an oxygen or sulfur atom, B represents a purine or pyrimidine base such as uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine or hypoxanthine, Li and L 2 , identical or different, represent an oxycarbonyl group -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, an oxygen atom, and Ri, R 2 , and R 3 are as defined above.
Les conditions préférentielles relatives aux molécules amphiphiles dérivées de nucléosides, telles que décrites plus haut, s'appliquent également aux autres objets de l'invention visés ci-dessus, notamment aux compositions pharmaceutiques, compositions pour le transfert de gènes, procédés pour le transfert de gènes et utilisations mentionnées ci-dessus. Les exemples qui suivent illustrent la présente demande.The preferential conditions relating to amphiphilic molecules derived from nucleosides, as described above, also apply to the other objects of the invention referred to above, in particular to pharmaceutical compositions, compositions for gene transfer, methods for the transfer of genes and uses mentioned above. The following examples illustrate the present application.
Exemple 1 : 2', 3'- dimyristoyl uridineExample 1: 2 ', 3'- dimyristoyl uridine
Stade A : 5'-diméthoxytrityluridine On dissout, dans 25 ml de pyridine, 2 g de chlorodiméthoxytrityle, 1 ,1 g d'uridine et une quantité catalytique de N,N-diméthyl aminopyridine (DMAP). On mélange pendant 24 h à température ambiante. On élimine sous pression réduite la pyridine et on purifie le brut résultant sur silicagel (éluant DCM/méthanol 95/5) pour obtenir 2,14 g du produit attendu. H NMR (CDCI3) δ in ppm: 3,48 (m, 2H, 2H5'), 3,7 (s, 6H, 2 OCH3), 4,17 (m, 1H, H4'), 4,35 (m, 1H, H3'), 4,42 (m, 1 H, OH), 5,24 (s, 1 H, H2'), 5,31 (d, J=8,2Hz, 1H, CH), 6,00 (m, 1 H, HV), 6,8 (d, J=8,9Hz 4H, Harom), 7,24 (m, 9H, Harom), 7,95 (d, J=8,2Hz, 1H, CH), 8,6(m, 1 H, NH).13C NMR (CDCI3) δ en ppm: 55,25 (OCH3), 61 ,80 (C5'), 69,57 (C3'), 72,90 (C4'), 83,46 (C2'), 86,90 (CV), 90,14 (Ctrit), 102,18 (CH uridine), 113,21 (Carom), 140,43 (CH uridine), 123,82-149,41 (Carom), 151 ,17 (CO, uridine), 158,57 (OCH3), 163,94 (CO, uridine).Stage A: 5'-dimethoxytrityluridine 2 g of chlorodimethoxytrityl, 1.1 g of uridine and a catalytic amount of N, N-dimethyl aminopyridine (DMAP) are dissolved in 25 ml of pyridine. Mix for 24 h at room temperature. The pyridine is removed under reduced pressure and the resulting crude product is purified on silica gel (eluent DCM / methanol 95/5) to obtain 2.14 g of the expected product. H NMR (CDCI 3 ) δ in ppm: 3.48 (m, 2H, 2H5 '), 3.7 (s, 6H, 2 OCH 3 ), 4.17 (m, 1H, H4'), 4.35 (m, 1H, H3 '), 4.42 (m, 1H, OH), 5.24 (s, 1H, H2'), 5.31 (d, J = 8.2Hz, 1H, CH) , 6.00 (m, 1H, HV), 6.8 (d, J = 8.9Hz 4H, Harom), 7.24 (m, 9H, Harom), 7.95 (d, J = 8, 2Hz, 1H, CH), 8.6 (m, 1H, NH). 13 C NMR (CDCI 3 ) δ in ppm: 55.25 (OCH 3 ), 61, 80 (C5 '), 69.57 (C3'), 72.90 (C4 '), 83.46 (C2') , 86.90 (CV), 90.14 (Ctrit), 102.18 (CH uridine), 113.21 (Carom), 140.43 (CH uridine), 123.82-149.41 (Carom), 151 , 17 (CO, uridine), 158.57 (OCH 3 ), 163.94 (CO, uridine).
Stade B 5'-diméthoxytrityl-2', 3'-dimyristoyl uridine. On dissout, dans 100 ml de dichlorométhane (DCM) fraîchement distillé 0,50 g du produit obtenu au stade A, 0,46 g d'acide myristique, 0,41 g de dicyclohexylecarbodiimide (DCC), et 0,24 g de N,N-diméthylaminopyridine (DMAP). On porte le mélange sous agitation pendant 24 h à température ambiante sous atmosphère inerte. Après filtration, on lave la phase organique 3 fois par 20 ml d'eau, on sèche sur sulfate de sodium. Le dichlorométhane résiduel est éliminé sous pression réduite. Après chromatographie sur silicagel (éluant DCM / méthanol 95/5), on obtient 79 g du produit attendu. 1H NMR (CDCI3) δ in ppm : 0,8 (t, J = 7Hz, 6H, 2 CH3), 1 ,2 (m,Stage B 5'-dimethoxytrityl-2 ', 3'-dimyristoyl uridine. 0.50 g of the product obtained in Stage A is dissolved in 100 ml of freshly distilled dichloromethane (DCM), 0.46 g of myristic acid, 0.41 g of dicyclohexylecarbodiimide (DCC), and 0.24 g of N, N-dimethylaminopyridine (DMAP). The mixture is brought under stirring for 24 h at room temperature under an inert atmosphere. After filtration, the organic phase is washed 3 times with 20 ml of water and dried over sodium sulfate. The residual dichloromethane is removed under reduced pressure. After chromatography on silica gel (eluent DCM / methanol 95/5), 79 g of the expected product are obtained. 1 H NMR (CDCI3) δ in ppm: 0.8 (t, J = 7Hz, 6H, 2 CH 3 ), 1, 2 (m,
40H, 20CH2), 2,3 (m, 4H, 2CH2), 3,4 (m, 2H, 2H5'), 3,8 (m, 6H, 2 OCH3), 4,2 (s, 1 H, H4'), 5,25 (m, 2H, CH et H2'), 5,6 (m, 1H, H3'), 6,2 (m, 1 H, HT), 6,8 (d, J = 9Hz 4H, Harom), 7,24 (m, 9H, Harom), 7,7 (d, J = 8 Hz, 1H, CH), 8,2 (m, 1 H, NH)40H, 20CH 2 ), 2.3 (m, 4H, 2CH 2 ), 3.4 (m, 2H, 2H5 '), 3.8 (m, 6H, 2 OCH 3 ), 4.2 (s, 1 H, H4 '), 5.25 (m, 2H, CH and H2'), 5.6 (m, 1H, H3 '), 6.2 (m, 1H, HT), 6.8 (d, J = 9Hz 4H, Harom), 7.24 (m, 9H, Harom), 7.7 (d, J = 8 Hz, 1H, CH), 8.2 (m, 1H, NH)
Stade C : 2',3'-dimyristoyl uridine On dissout, dans 50 ml de DCM fraîchement distillé 0,788 g du produit obtenu au stade B de l'exemple 1 , un excès de d'une solution à 3% d'acide trichloracétique dans du DCM. On porte le mélange sous agitation pendant 30 min à température ambiante sous atmosphère inerte. 3 ml de méthanol sont ensuite ajoutés au mélange réactionnel. On lave la phase organique 3 fois par 20 ml d'eau, et on sèche sur sulfate de sodium. Le chlorure de méthylène résiduel est éliminé sous pression réduite. On sèche encore sous pression très réduite pendant 1 h. La poudre blanche résultante est ensuite recristallisée dans 20 ml de DCM fraîchement distillé.0,464 g du produit attendu est obtenu. 1H NMR (CDCI3) δ en ppm: 0,8 (t, J=6,6Hz, 6 H, 2CH3), 1 ,2 (m, 40H, 20CH2), 2,3 (m, 4H, 2CH2), 3,4 (m, 1 H, OH), 3,84 (dd, J=12Hz, J=2Hz, 1 H, H5'), 3,93 (dd, 1H, H5'), 4,17 (m, 1H, H4'), 5,27 (s, 1H, H2'), 5,44 (m, 1H, H3'), 5,74 (dd, J=8Hz, J=2Hz, 1 H, CH), 6,00 (m, 1 H, HV), 7,65 (d, J=8Hz, 1 H, CH), 8,2(m, 1 H, NH).13C NMR (CDCI3) δ en ppm: 14,07 (CH3), 22,65 (CH2), 24,67 (CH2), 24,87 (CH2), 29,04-29,62 (CH2), 31 ,88 (CH2), 33,83 (CH2CO), 33,99 (CH2CO), 61 ,80 (C5'), 71 ,04 (C3'), 72,90 (C4'), 83,66 (C2'), 87,61 (CV), 103,15 (CH), 140,71 (CH), 150,40 (CO, uridine), 163,06 (CO, uridine), 172,46 (CO, ester), 172,84 (CO, ester). High Resolution MS: [M+H]+, théorique m/z=665,4663, observé m/z=665.4731 .Stage C: 2 ', 3'-dimyristoyl uridine An excess of a 3% solution of trichloroacetic acid is dissolved in 50 ml of freshly distilled DCM 0.78 g of the product obtained in Stage B of Example 1 from DCM. The mixture is brought under stirring for 30 min at room temperature under an inert atmosphere. 3 ml of methanol are then added to the reaction mixture. The organic phase is washed 3 times with 20 ml of water, and dried over sodium sulfate. The residual methylene chloride is removed under reduced pressure. It is further dried under very reduced pressure for 1 h. The resulting white powder is then recrystallized from 20 ml of freshly distilled DCM. 0.464 g of the expected product is obtained. 1 H NMR (CDCI 3 ) δ in ppm: 0.8 (t, J = 6.6 Hz, 6 H, 2CH 3 ), 1, 2 (m, 40H, 20CH 2 ), 2.3 (m, 4H, 2CH 2 ), 3.4 (m, 1H, OH), 3.84 (dd, J = 12Hz, J = 2Hz, 1H, H5 '), 3.93 (dd, 1H, H5'), 4 , 17 (m, 1H, H4 '), 5.27 (s, 1H, H2'), 5.44 (m, 1H, H3 '), 5.74 (dd, J = 8Hz, J = 2Hz, 1 H, CH), 6.00 (m, 1 H, HV), 7.65 (d, J = 8 Hz, 1 H, CH), 8.2 (m, 1 H, NH). 13 C NMR (CDCI 3 ) δ in ppm: 14.07 (CH 3 ), 22.65 (CH 2 ), 24.67 (CH 2 ), 24.87 (CH 2 ), 29.04-29.62 (CH 2 ), 31, 88 (CH 2 ), 33.83 (CH 2 CO), 33.99 (CH 2 CO), 61, 80 (C5 '), 71, 04 (C3'), 72.90 (C4 '), 83.66 (C2'), 87.61 (CV), 103.15 (CH), 140.71 (CH), 150.40 (CO, uridine), 163.06 (CO, uridine), 172.46 (CO, ester), 172, 84 (CO, ester). High Resolution MS: [M + H] + , theoretical m / z = 665.4663, observed m / z = 665.4731.
Exemple 2 : 2',3'-distéaroyl uridine On dissout, dans 100 ml de DCM fraîchement distillé 1 ,30 g du produit obtenu au stade A de l'exemple 1 , 2,37 g d'acide stéarique, 1 ,71 g de DCC, et 1 ,00 g de DMAP. On porte le mélange sous agitation pendant 48 h à température ambiante sous atmosphère inerte. Après filtration, on lave la phase organique 3 fois par 20 ml d'eau, et on sèche sur sulfate de sodium. Le chlorure de méthylène résiduel est éliminé sous pression réduite. On sèche encore sous vide poussé pendant 1 h. La poudre blanche résultante a été dissoute dans 50 ml de dichlorométhane fraîchement distillé et un excès de 3 % d'acide trichloréthylacetique dans le DCM est ajouté sous atmosphère inerte à la solution. Après 15 min, on ajoute 5 ml de méthanol dans la solution. La phase organique est lavée 3 fois avec 20 ml d'eau, et séchée sur sulfate de sodium. On élimine le solvant sous pression réduite et on obtient 1 ,1 g du produit attendu après cristallisation dans le chlorure de méthylène. 1H NMR (CDCI3) δ en ppm H NMR (CDCI3) δ en ppm : 0,8 (t, J=6,6Hz, 6 H, 2CH3), 1 ,2 (m, 60H, 30CH2), 2,3 (m, 4H, 2CH2), 3,6 (m, 1 H, OH), 3,85 (dd, J=12,1 Hz, J=2,2Hz, 1H, H5'), 3,93 (dd, 1 H, H5'), 4,17 (d, , J=2,2Hz, 1 H, H4'), 5,28 (s, 1 H, H2'), 5,44 (m, 1 H, H3'), 5,75 (d, J=8,2Hz, 1H, CH), 6,00 (m, 1H, HV), 7,7 (d, J=8,2Hz, 1 H, CH), 8,4(m, 1H, NH).13C NMR NMR (CDCI3) δ en ppm : 14,01 (CH3), 22,65 (CH2), 24,75 (CH2), 24,88 (CH2), 29,09-29,68 (CH2), 31 ,91 (CH2), 33,84 (CH2CO), 34,04 (CH2CO), 61 ,94 (C5'), 70,84 (C31), 72,91 (C4'), 83,54 (C2'), 88,17 (CV), 103,20 (CH), 140,49 (CH), 150,21 (CO, uridine), 162,45 (CO, uridine), 172,36 (CO, ester), 172,76 (CO, ester). High Resolution MS: [M-H], théorique m/z=775,5915, observé m/z=775,5874.Example 2: 2 ′, 3′-distearoyl uridine 1.30 g of the product obtained in Stage A of Example 1 are dissolved in 100 ml of freshly distilled DCM, 2.37 g of stearic acid, 1.71 g of DCC, and 1.00 g of DMAP. The mixture is brought under stirring for 48 h at room temperature under an inert atmosphere. After filtration, the organic phase is washed 3 times with 20 ml of water, and dried over sodium sulfate. The residual methylene chloride is removed under reduced pressure. It is further dried under high vacuum for 1 h. The resulting white powder was dissolved in 50 ml of freshly distilled dichloromethane and a 3% excess of trichloroethylacetic acid in DCM is added to the solution under an inert atmosphere. After 15 min, 5 ml of methanol are added to the solution. The organic phase is washed 3 times with 20 ml of water, and dried over sodium sulfate. The solvent is removed under reduced pressure and 1.1 g of the expected product are obtained after crystallization from methylene chloride. 1 H NMR (CDCI3) δ in ppm H NMR (CDCI3) δ in ppm: 0.8 (t, J = 6.6Hz, 6 H, 2CH 3 ), 1, 2 (m, 60H, 30CH 2 ), 2 , 3 (m, 4H, 2CH 2 ), 3.6 (m, 1H, OH), 3.85 (dd, J = 12.1 Hz, J = 2.2Hz, 1H, H5 '), 3, 93 (dd, 1H, H5 '), 4.17 (d,, J = 2.2Hz, 1H, H4'), 5.28 (s, 1H, H2 '), 5.44 (m, 1H, H3 '), 5.75 (d, J = 8.2Hz, 1H, CH), 6.00 (m, 1H, HV), 7.7 (d, J = 8.2Hz, 1H, CH), 8.4 (m, 1H, NH). 13 C NMR NMR (CDCI3) δ in ppm: 14.01 (CH 3 ), 22.65 (CH 2 ), 24.75 (CH 2 ), 24.88 (CH 2 ), 29.09-29.68 (CH 2 ), 31, 91 (CH 2 ), 33.84 (CH 2 CO), 34.04 (CH 2 CO), 61, 94 (C5 '), 70.84 (C3 1 ), 72.91 (C4 '), 83.54 (C2'), 88.17 (CV), 103.20 (CH), 140.49 (CH), 150.21 (CO, uridine), 162.45 (CO, uridine ), 172.36 (CO, ester), 172.76 (CO, ester). High Resolution MS: [MH], theoretical m / z = 775.5915, observed m / z = 775.5874.
Exemple 3: bis(2',3'-myristoyl)-5'-(phosphocholine)-uridine Stade A : 1-(6-hvdroxyméthyl-2.2-diméthyltétrahvdro-furo f3.4-dïï1 ,31dioxol- 4-yl)-1 H-pyrimidine-2,4-dione On ajoute 2,33 g d'acide paratoluène sulfonique à 1g d'uridine dans 180 ml d'acétone anhydre. Après 4 h à la température ambiante, on évapore l'acétone et le produit brut résiduel est dissout dans 200 ml d'acétate d'éthyle. La phase organique est lavée trois fois avec 20 ml d'une solution aqueuse à 10 % d'hydrogénocarbonate, puis séchée sur sulfate de sodium. Le solvant est éliminé sous pression réduite. On obtient ainsi 0,179 g d'une poudre blanche correspondant aux propriétés attendues. RF = 0,58 (DCM/méthanol 9/1) RMN 1H (300 MHz, DMSO) : δ 1 ,27 (s, 3H, CH3), 1 ,49 (s, 3H, CH3), 3,34 (m, 1H, H5), 3,58 (m, 1H, H5), 4,07 (m, 1 H, H4), 4,75 (m, 1 H, H2), 4,91 (m, 1 H, Hz , 5,09 (m, 1 H, OH), 5,64 (d, 1 H, J = 8,1 Hz, H6), 5,84 (m, 1H, Hr), 7,80 (d, 1 H, J = 9,0 Hz, H5), 11 ,37 (m, 1 H, NH)Example 3: bis (2 ', 3'-myristoyl) -5' - (phosphocholine) -uridine Stage A: 1- (6-hvdroxymethyl-2.2-dimethyltetrahvdro-furo f3.4-dïï1, 31dioxol-4-yl) -1 H-pyrimidine-2,4-dione 2.33 g of paratoluene sulfonic acid are added to 1g of uridine in 180 ml of anhydrous acetone. After 4 h at room temperature, the acetone is evaporated and the residual crude product is dissolved in 200 ml of ethyl acetate. The organic phase is washed three times with 20 ml of a 10% aqueous hydrogen carbonate solution, then dried over sodium sulfate. The solvent is removed under reduced pressure. 0.179 g of a white powder is thus obtained corresponding to the expected properties. RF = 0.58 (DCM / methanol 9/1) 1 H NMR (300 MHz, DMSO): δ 1.27 (s, 3H, CH 3 ), 1.49 (s, 3H, CH 3 ), 3, 34 (m, 1H, H 5 ), 3.58 (m, 1H, H 5 ), 4.07 (m, 1 H, H 4 ), 4.75 (m, 1 H, H 2 ), 4, 91 (m, 1 H, H z , 5.09 (m, 1 H, OH), 5.64 (d, 1 H, J = 8.1 Hz, H 6 ), 5.84 (m, 1H, H r ), 7.80 (d, 1 H, J = 9.0 Hz, H 5 ), 11, 37 (m, 1 H, NH)
Stade B : Uridine-oxo-dioxaphospholane On ajoute, à 0,8 g du composé obtenu au stade A, 30 ml de tétrahydrofuranne (THF) fraîchement distillé et 803 μl de triéthanolamine (TEA) sous atmosphère inerte. Le mélange est refroidi à 0°C et on ajoute goutte à goutte 414 μl de 2-chloro-2-oxo-1 ,3,2-dioxaphospholane. Le mélange réactionnel est placé sous agitation à température ambiante pendant 15 h. Ensuite, les sels de triéthanolamine sont éliminés par filtration sous aspiration à 0°C. La plupart du solvant est évaporée sous pression réduite à 0°C etStage B: Uridine-oxo-dioxaphospholane 30 ml of freshly distilled tetrahydrofuran (THF) and 803 μl of triethanolamine (TEA) are added to 0.8 g of the compound obtained in Stage A, under an inert atmosphere. The mixture is cooled to 0 ° C. and 414 μl of 2-chloro-2-oxo-1, 3,2-dioxaphospholane are added dropwise. The reaction mixture is stirred at room temperature for 15 h. Then, the triethanolamine salts are removed by filtration under suction at 0 ° C. Most of the solvent is evaporated under reduced pressure at 0 ° C and
8 ml de la solution résiduelle sont directement utilisés sans purification supplémentaire au stade suivant.8 ml of the residual solution are used directly without further purification in the next stage.
Stade C : Uridine acétonide phosphocholine On condense 4 ml de triméthylamine anhydre à -50°C sous atmosphère inerte. On ajoute à la triméthylamine froide 10 ml d'acétonitrile sec à -40°C et le produit brut obtenu au stade B. On maintient le mélange réactionnel sous agitation à 60°C pendant 48 h. Après évaporation de la triméthylamine résiduelle à température ambiante et filtration, on isole un solide blanc. Le matériau brut a été trituré successivement avec de l'acétate d'éthyle et du dichlorométhane. On obtient ainsi 1 ,35 g du produit attendu sous forme d'un solide hygroscopique après séchage sous pression très réduite. RF : 0,50 (phase reverse, MeOH/H2O : 8/2). 1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ 1 ,29 (s, 3H, CH3), 1 ,49 (s, 3H, CH3), 3,15 (s, 9H, N(CH3)3), 3,56 (t, 2H, J = 4,2 Hz, NCH2), 3,83 (t, 2H, J = 3,9 Hz, CH2O), 4,06 (m, 2H, H5), 4,17 (q, 1 H, J = 7,9/3,6 Hz, H4), 4,81 (m, 1H, H2 or H3), 4,94 (m, 1 H, H2 or H3), 5,62 (d, 1 H, J = 8,1 Hz, H6), 5,84 (d, 1 H, J = 2,4 Hz, Hr), 7,86 (d, 1 H, J = 8,1 Hz, H5). 13C NMR (75 MHz, DMSO) : δ 26,39 (CH3), 28,25 (CH3), 54,30 (N(CH3)3), 59,63 (d, J = 5,2 Hz, NCH2), 65,68 (CH2O), 66,62 (C5<), 82,13 (Cz), 84,73 (C2), 86,49 (d, J = 7,1 Hz, C4), 92,71 (d ), 103,10 (C5), 114,22 (OCO), 143,58 (C6), 151 ,64 (C2), 164,50 (C4). 31P NMR (121 MHz, CD3OD) : -0,537 ppm. Haute résolution FAB MS (MH+) (théorique = 450,1641 , observé = 450,1634)Stage C: Uridine acetonide phosphocholine 4 ml of anhydrous trimethylamine are condensed at -50 ° C. under an inert atmosphere. 10 ml of dry acetonitrile at -40 ° C and the crude product obtained in stage B are added to the cold trimethylamine. The reaction mixture is stirred at 60 ° C for 48 h. After evaporation of the residual trimethylamine at room temperature and filtration, a solid is isolated. White. The raw material was successively triturated with ethyl acetate and dichloromethane. 1.35 g of the expected product are thus obtained in the form of a hygroscopic solid after drying under very reduced pressure. RF: 0.50 (reverse phase, MeOH / H 2 O: 8/2). 1 H NMR (300 MHz, DMSO):, 1.29 (s, 3H, CH 3 ), 1.49 (s, 3H, CH 3 ), 3.15 (s, 9H, N (CH 3 ) 3 ) , 3.56 (t, 2H, J = 4.2 Hz, NCH 2 ), 3.83 (t, 2H, J = 3.9 Hz, CH 2 O), 4.06 (m, 2H, H 5 ), 4.17 (q, 1 H, J = 7.9 / 3.6 Hz, H 4 ), 4.81 (m, 1H, H 2 or H 3 ), 4.94 (m, 1 H, H 2 or H 3 ), 5.62 (d, 1 H, J = 8.1 Hz, H 6 ), 5.84 (d, 1 H, J = 2.4 Hz, H r ), 7.86 (d, 1 H, J = 8.1 Hz, H 5 ). 13 C NMR (75 MHz, DMSO): δ 26.39 (CH 3 ), 28.25 (CH 3 ), 54.30 (N (CH 3 ) 3 ), 59.63 (d, J = 5.2 Hz, NCH 2 ), 65.68 (CH 2 O), 66.62 (C 5 <), 82.13 (C z ), 84.73 (C 2 ), 86.49 (d, J = 7, 1 Hz, C 4 ), 92.71 (d), 103.10 (C 5 ), 114.22 (OCO), 143.58 (C 6 ), 151, 64 (C 2 ), 164.50 (C 4 ). 31 P NMR (121 MHz, CD 3 OD): -0.537 ppm. High resolution FAB MS (MH + ) (theoretical = 450.1641, observed = 450.1634)
Stade D : Uridine phosphocholine On mélange pendant 24 h à température ambiante 0,20 g du composé obtenu au stade C dans 1 ,5 ml d'acide formique à 98 %. L'excès d'acide formique est évaporé en même temps que de l'éthanol. La cristallisation dans un mélange binaire méthanol-éthanol produit 0,127 g du produit attendu sous forme d'un solide hygroscopique blanc. RF : 0,72 (phase inverse, MeOH/H2O : 8/2). 1H NMR (300 MHz, D2O) : δ 3,09 (s, 9H, N(CH3)3), 3,55 (m, 2H, NCH2), 3,99 (m, 1 H, H3), 4,06 (m, 1H, H4), 4,12 (m, 1H, H2), 4,19 (m, 4H, CH2O et Hs), 5,78 (m, 2H, Hr et H6), 7,73 (d, J = 8,1 Hz, H5). 3C NMR (75 MHz, D2O) : δ 49,59 (N(CH3)3) 54,67 (N(CH3)3), 60,25 (d, J = 4,8 Hz, NCH2), 65,40 (d, J = 5,7 Hz, CH2O), 66,67 (C5), 70,07 (C3), 74,32 (C2), 83,38 (CV), 89,79 (C ), 103,09 (C5), 142,26 (C6), 152,30 (C2), 166,77 (C4). 3 P NMR (121 MHz, D2O) : 0,392 ppm.Stage D: Uridine phosphocholine 0.20 g of the compound obtained in Stage C are mixed for 24 h at room temperature in 1.5 ml of 98% formic acid. The excess formic acid is evaporated together with ethanol. Crystallization from a methanol-ethanol binary mixture produces 0.127 g of the expected product in the form of a white hygroscopic solid. RF: 0.72 (reverse phase, MeOH / H 2 O: 8/2). 1 H NMR (300 MHz, D 2 O): δ 3.09 (s, 9H, N (CH 3 ) 3 ), 3.55 (m, 2H, NCH 2 ), 3.99 (m, 1 H, H 3 ), 4.06 (m, 1H, H 4 ), 4.12 (m, 1H, H 2 ), 4.19 (m, 4H, CH 2 O and H s ), 5.78 (m, 2H, H r and H 6 ), 7.73 (d, J = 8.1 Hz, H 5 ). 3 C NMR (75 MHz, D 2 O): δ 49.59 (N (CH 3 ) 3 ) 54.67 (N (CH 3 ) 3 ), 60.25 (d, J = 4.8 Hz, NCH 2 ), 65.40 (d, J = 5.7 Hz, CH 2 O), 66.67 (C 5 ), 70.07 (C 3 ), 74.32 (C 2 ), 83.38 (CV ), 89.79 (C), 103.09 (C 5 ), 142.26 (C 6 ), 152.30 (C 2 ), 166.77 (C 4 ). 3 P NMR (121 MHz, D 2 O): 0.392 ppm.
Stade E : Bis-(2',3'-myristoyl)-5'-(phosphocholine)-uridine On ajoute à 100 mg du produit obtenu au stade D, 185 mg d'acide myristique, 148 mg de DCC et 88 mg de DMAP dans 20 ml de diméthylformamide anhydre. Après 70 h à la température ambiante, la dicyclohexylurée (DCU) est éliminé par filtration. Le solvant est évaporé et le solide résiduel est trituré deux fois dans 25 ml d'éther. On obtient 123 mg du produit attendu, après chromatographie (LH 20 DCM/MeOH 5/5). RF: 0.26 (phase inverse, DCM/MeOH 5/5). 1H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 0,85 (t, j = 7,2 Hz, 6H, CH3), 1 ,23 (m, 40H, CH2), 1 ,54 (quint, ; = 10,2 / 7,2 Hz, 4H, CH2CH2CO2), 2,31 (m, 4H, CH2CO2), 3,39 (s, 9H, N(CH3)3), 3,91 (m, 2H, CH2N), 4,12 (m, 2H, CH2O), 4,21 (m, 2H, Hs), 4,37 (m, 1H, H4), 5,48 (m, 2H, H2 and H3), 5,72 (d, / = 8,1 Hz, 1H, Hi), 5,93 (d, = 5,4 Hz, 1 H, H6), 7,82(d, / = 8,0 Hz, 1 H, H5). 31P NMR (121 MHz, CDCI3) : -0,193 ppm. High-resolution FAB MS (MH+) (théorique = 830,5296, observé = 830,5274)Stage E: Bis- (2 ', 3'-myristoyl) -5' - (phosphocholine) -uridine 185 mg of myristic acid, 148 mg of DCC and 88 mg of DMAP in 20 ml of anhydrous dimethylformamide. After 70 h at room temperature, the dicyclohexylurea (DCU) is removed by filtration. The solvent is evaporated and the residual solid is triturated twice in 25 ml of ether. 123 mg of expected product, after chromatography (LH 20 DCM / MeOH 5/5). RF: 0.26 (reverse phase, DCM / MeOH 5/5). 1 H NMR (300 MHz, CDCI 3 ): δ 0.85 (t, j = 7.2 Hz, 6H, CH 3 ), 1.23 (m, 40H, CH 2 ), 1.54 (quint,; = 10.2 / 7.2 Hz, 4H, CH 2 CH 2 CO 2 ), 2.31 (m, 4H, CH 2 CO 2 ), 3.39 (s, 9H, N (CH 3 ) 3 ), 3.91 (m, 2H, CH 2 N), 4.12 (m, 2H, CH 2 O), 4.21 (m, 2H, H s ), 4.37 (m, 1H, H 4 ), 5.48 (m, 2H, H 2 and H 3 ), 5.72 (d, / = 8.1 Hz, 1H, Hi), 5.93 (d, = 5.4 Hz, 1 H, H 6 ), 7.82 (d, / = 8.0 Hz, 1 H, H 5 ). 31 P NMR (121 MHz, CDCI 3 ): -0.193 ppm. High-resolution FAB MS (MH + ) (theoretical = 830.5296, observed = 830.5274)
Exemple 4 bis-(2',3'-stéaroyl)-5'-(phosphocholine) uridine On ajoute à 200 mg d'uridine phosphocholine, 555 mg d'acide stéarique, 402 mg de DCC, 238 mg de DMAP dans 20 ml de diméthylformamide anhydre. Après 72 h à la température ambiante, le solvant est évaporé et le solide résiduel est dissous dans 20 ml de chlorure de méthylène. Le DCU est éliminé par filtration et le solvant est évaporé. Le produit brut est purifié par chromatographie d'exclusion (LH 0, DCM/méthanol 5/5). On obtient 175 mg du produit attendu (RF = 0,17) (phase inverse DCM/méthanol 5/5).Example 4 bis- (2 ', 3'-stearoyl) -5' - (phosphocholine) uridine To 200 mg of uridine phosphocholine, 555 mg of stearic acid, 402 mg of DCC, 238 mg of DMAP in 20 ml are added. anhydrous dimethylformamide. After 72 h at room temperature, the solvent is evaporated and the residual solid is dissolved in 20 ml of methylene chloride. The DCU is removed by filtration and the solvent is evaporated. The crude product is purified by exclusion chromatography (LH 0, DCM / methanol 5/5). 175 mg of the expected product are obtained (RF = 0.17) (DCM / methanol reverse phase 5/5).
Exemple 5 bis-(2',3'-arachidoyl)-5'-(phosphocholine) uridine On opère comme à l'exemple 3, et à partir de 611 mg d'acide arachidique, 402 mg de DCC, 238 mg de DMAP et 200 mg d'uridine phosphocholine, on obtient 73 mg du produit attendu (RF = 0,15) (phase inverse DCM/méthanol 5/5).Example 5 bis- (2 ', 3'-arachidoyl) -5' - (phosphocholine) uridine The procedure is as in Example 3, and from 611 mg of arachidic acid, 402 mg of DCC, 238 mg of DMAP and 200 mg of uridine phosphocholine, 73 mg of the expected product are obtained (RF = 0.15) (DCM / methanol reverse phase 5/5).
Exemple 6 bis-(2',3'-oléoyl)-5'-(phosphocholine) uridine On opère comme à l'exemple 3 mais sous atmosphère inerte et à l'abri de la lumière, et à partir de 619 μl d'acide oléique, 402 mg de DCC, 238 mg de DMAP et 200 mg d'uridine phosphocholine, on obtient après 72 h 150 mg du produit attendu (RF = 0,30) (phase inverse DCM/méthanol 5/5). Dans ce cas, le mélange est effectué à l'abri de la lumière. 1H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 0.76 (t, j = 6.8 Hz, 6H, CH3), 1.15 (m, 40H, CH2), 1.45 (m, 4H, CH2CH2CO2), 1.89 (m, 8H, CH2CHCH), 2.18 (q, J = 16.8/8.7 Hz, 4H, CH2CO2), 3.31 (s, 9H, N(CH3)3), 3.67 (m, 2H, CH2N), 4.96 (m, 1H, Hs), 4.08 (m, 1 H, H5), 4.13 (m, 1H, H4), 4.22 (m, 2H, CH2OP), 5.22 (m, 4H, CH=CH), 5.44 (m, 2H, H2. et H3 <), 5.63 (m, 1 H, H,1), 5.67 (m, 1H, H6), 7.61 (d, ; = 7.7 Hz, 1 H, H5), 11.01 (s, 1 H, NH).31P NMR (121 MHz, CDCI3) : -0.807 ppm.Example 6 bis- (2 ', 3'-oleoyl) -5' - (phosphocholine) uridine The procedure is as in Example 3 but under an inert atmosphere and protected from light, and from 619 μl of oleic acid, 402 mg of DCC, 238 mg of DMAP and 200 mg of uridine phosphocholine, after 72 h 150 mg of the expected product are obtained (RF = 0.30) (DCM / methanol reverse phase 5/5). In this case, the mixing is carried out protected from light. 1 H NMR (300 MHz, CDCI 3 ): δ 0.76 (t, j = 6.8 Hz, 6H, CH 3 ), 1.15 (m, 40H, CH 2 ), 1.45 (m, 4H, CH 2 CH 2 CO 2 ) , 1.89 (m, 8H, CH 2 CHCH), 2.18 (q, J = 16.8 / 8.7 Hz, 4H, CH 2 CO 2 ), 3.31 (s, 9H, N (CH 3 ) 3 ), 3.67 (m, 2H, CH 2 N), 4.96 (m, 1H, H s ), 4.08 ( m, 1 H, H 5 ), 4.13 (m, 1H, H 4 ), 4.22 (m, 2H, CH 2 OP), 5.22 (m, 4H, CH = CH), 5.44 (m, 2H, H 2 . and H 3 < ), 5.63 (m, 1 H, H, 1 ), 5.67 (m, 1H, H 6 ), 7.61 (d,; = 7.7 Hz, 1 H, H 5 ), 11.01 (s, 1 H , NH). 31 P NMR (121 MHz, CDCI 3 ): -0.807 ppm.
Exemple 7: O-Ethyl-bis-(2',3'-oléoyl)-5'-(phosphocholine)-uridine (O-Ethyl DOUPC) 90 mg de bis-(2',3'-oléoyl)-5'-(phosphocholine) uridine de l'exemple 6 sont solubilisés dans 2 ml de DCM anhydre sous atmosphère inerte et à l'abri de la lumière. 25 μl de triflate d'éthyle sont ajoutés au mélange et le milieu réactionnel est agité à l'abri de la lumière pendant 12 h. Le solvant est ensuite évaporé et le triflate d'éthyle résiduel est enlevé sous pression réduite. Le produit brut obtenu est purifié par chromatographie sur silice (Silicagel : 1 g, DCM/MeOH 9/1). 60,4 mg de produit pur sont isolés, (rendement : 56 %). RF (deux diastéréoisomères ) : 0,20 et 0,18 (DCM/MeOH 9/1). 1 H NMR (300 MHz, CDCI3) : δ 0,87 (t, j = 6,2 Hz, 6H, CH3), 1.26 (m, 43H, (CH2)n, OCH2CH3), 1 ,57 (m, 4H, CH2CH2CO2), 2,00 (m, 8H, CH2CH=CH), 2,32 (m, 4H, CH2CO2), 3,20 (s, 9H, N(CH3)3), 3,75 (m, 2H, CH2N), 4,26 (m, 4H, H5' and OCH2CH3), 4,44 (m, 1H, H4'), 4,57 (m, 2H, CH2OP), 5,33 (m, 4H, CH=CH), 5,51 (m, 2H, H2' and H3'), 5.70 (m, 1H, H5), 5,94 (m, 1 H, HT), 7,69 (m, 1 H, H6). 13C NMR (75,468 MHz, CDCI3): δ 14,07 (CH3), 15,71 (OCH2CH3), 22,66 (CH2CH3), 24,68 (CH2CH2C=O), 24,75 (CH2CH2C=O), 27,20 (CH2CH), 29,14-29,74 (CH2)n, 31 ,88 (CH2CH2CH3), 33,76 (CH2C=O), 54,14 N+(CH3)3, 59,97 (m, 2C, CH2OP), 64,46 (C5'), 65,97 (N+CH2), 70,25 (C3'), 72,69 (C2'), 80,87 (C4'), 89,91 (CV), 102,89 (C5), 129,61 (CHCH2), 129,99 (CHCH2), 141 ,86 (C6), 150,51 (C2), 164,11 (C4), 172,74 (C=O), 172,79 (C=O). 31 P NMR (121 MHz, CDCI3) : -4,096 ppm.Example 7: O-Ethyl-bis- (2 ', 3'-oleoyl) -5' - (phosphocholine) -uridine (O-Ethyl DOUPC) 90 mg of bis- (2 ', 3'-oleoyl) -5' - (phosphocholine) uridine of Example 6 are dissolved in 2 ml of anhydrous DCM under an inert atmosphere and protected from light. 25 μl of ethyl triflate are added to the mixture and the reaction medium is stirred, protected from light for 12 h. The solvent is then evaporated and the residual ethyl triflate is removed under reduced pressure. The crude product obtained is purified by chromatography on silica (Silicagel: 1 g, DCM / MeOH 9/1). 60.4 mg of pure product are isolated, (yield: 56%). RF (two diastereoisomers): 0.20 and 0.18 (DCM / MeOH 9/1). 1 H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 0.87 (t, j = 6.2 Hz, 6H, CH3), 1.26 (m, 43H, (CH 2 ) n, OCH 2 CH 3 ), 1.57 (m, 4H, CH 2 CH 2 CO 2 ), 2.00 (m, 8H, CH 2 CH = CH), 2.32 (m, 4H, CH 2 CO 2 ), 3.20 (s, 9H, N (CH 3 ) 3 ), 3.75 (m, 2H, CH 2 N), 4.26 (m, 4H, H5 'and OCH 2 CH 3 ), 4.44 (m, 1H, H4'), 4.57 (m, 2H, CH 2 OP), 5.33 (m, 4H, CH = CH), 5.51 (m, 2H, H2 'and H3'), 5.70 (m, 1H, H5), 5.94 (m, 1 H, HT), 7.69 (m, 1 H, H6). 13C NMR (75.468 MHz, CDCI 3 ): δ 14.07 (CH 3 ), 15.71 (OCH 2 CH 3 ), 22.66 (CH 2 CH 3 ), 24.68 (CH 2 CH 2 C = O ), 24.75 (CH 2 CH 2 C = O), 27.20 (CH 2 CH), 29.14-29.74 (CH 2 ) n, 31, 88 (CH 2 CH 2 CH 3 ), 33 , 76 (CH 2 C = O), 54.14 N + (CH 3 ) 3, 59.97 (m, 2C, CH 2 OP), 64.46 (C5 '), 65.97 (N + CH 2 ) , 70.25 (C3 '), 72.69 (C2'), 80.87 (C4 '), 89.91 (CV), 102.89 (C5), 129.61 (CHCH 2 ), 129.99 (CHCH 2 ), 141, 86 (C6), 150.51 (C2), 164.11 (C4), 172.74 (C = O), 172.79 (C = O). 31 P NMR (121 MHz, CDCI 3 ): -4.096 ppm.
Exemple 8: Bis-(2',3'-oléoyl)-5'-(phosphocholine)-adénosine (DQAPC) Stade A : 5'-(phosphocholine)-adénosine 150 mg de 2',3'-(isopropylidène)-5'-(phosphocholine)-adénosine et 181 mg d'acide paratoluènesulfonique monohydrate sont solubilisés dans 25 ml de méthanol. Le mélange est chauffé au reflux. Après 4 h, le solvant est évaporé sous pression réduite, et le produit brut est dissous dans 4 ml d'éthanol anhydre et cristallisé après addition d'acétate d'éthyle. Le surnageant est enlevé par décantation. Après séchage sous pression réduite, 113 mg d'une poudre blanche hygroscopique sont isolés. (Rendement : 59 %). RF : 0,75 (phase inverse, MeOH/H2O : 8/2). 1 H NMR (300 MHz, DMSO) : δ 2,28 (s, 3H, CH3), 3,11 (s, 9H, N(CH3)3), 3,63 (t, 2H, J = 4,9 Hz, NCH2), 4,16 (m, 2H, H4' and H3'), 4,22 (m, 1 H, H2'), 4,30 (m, 2H, H5'), 4,56 (t, 2H, J = 4,9 Hz, CH2O), 6,00 (d, 1 H, J = 5,1 Hz, HT), 7,12 (d, 2H, J = 7,7 Hz, H arom), 7,51 (d, 2H, J = 8,1 Hz, H arom), 8,53 (s, 1H, H8), 8,68 (s, 1H, H2). 13C NMR (75 MHz, DMSO) : δ 20,74 (CH3), 52,98 (N(CH3)3), 59,86 (C5'), 64,67 (CH2O), 66,05 ( NCH2), 69,95 (C3'), 73,67 (C2'), 83,06 (C4'), 87,78 (C1')r 118,66 (C5), 125,43 (2C, CH arom.), 128,15 (2C, CH arom.), 137,98 (C8), 142,01 (C arom.), 145,06(C arom.), 145,39 (C4), 148,33 (C2), 150,27 (C6). 31P NMR (121 MHz, DMSO) : -1 ,557 ppm. High resolution FAB MS (MH+) (théorique = 433,1601 , observé =433,1616).Example 8: Bis- (2 ', 3'-oleoyl) -5' - (phosphocholine) -adenosine (DQAPC) Stage A: 5 '- (phosphocholine) -adenosine 150 mg of 2', 3 '- (isopropylidene) - 5 '- (phosphocholine) -adenosine and 181 mg of paratoluenesulfonic acid monohydrate are dissolved in 25 ml of methanol. The mixture is heated to reflux. After 4 h, the solvent is evaporated under reduced pressure, and the crude product is dissolved in 4 ml of anhydrous ethanol and crystallized after addition of ethyl acetate. The supernatant is removed by decantation. After drying under reduced pressure, 113 mg of a white hygroscopic powder are isolated. (Yield: 59%). RF: 0.75 (reverse phase, MeOH / H2O: 8/2). 1 H NMR (300 MHz, DMSO): δ 2.28 (s, 3H, CH 3 ), 3.11 (s, 9H, N (CH3) 3), 3.63 (t, 2H, J = 4, 9 Hz, NCH2), 4.16 (m, 2H, H4 'and H3'), 4.22 (m, 1 H, H2 '), 4.30 (m, 2H, H5'), 4.56 ( t, 2H, J = 4.9 Hz, CH2O), 6.00 (d, 1 H, J = 5.1 Hz, HT), 7.12 (d, 2H, J = 7.7 Hz, H arom ), 7.51 (d, 2H, J = 8.1 Hz, H arom), 8.53 (s, 1H, H8), 8.68 (s, 1H, H2). 13C NMR (75 MHz, DMSO): δ 20.74 (CH 3 ), 52.98 (N (CH 3 ) 3 ), 59.86 (C5 '), 64.67 (CH 2 O), 66.05 (NCH 2 ), 69.95 (C3 '), 73.67 (C2'), 83.06 (C4 '), 87.78 (C1') r 118.66 (C5), 125.43 (2C, CH arom.), 128.15 (2C, CH arom.), 137.98 (C8), 142.01 (C arom.), 145.06 (C arom.), 145.39 (C4), 148, 33 (C2), 150.27 (C6). 31P NMR (121 MHz, DMSO): -1.557 ppm. High resolution FAB MS (MH +) (theoretical = 433.1601, observed = 433.1616).
Stade B : Bis-(2',3'-oléoyl)-5'-(phosphocholine)-adénosine (DOAPC) 172 mg de carbonyle diimidazole sont ajoutés à 337 μl d'acide oléique dissous dans 5 ml de diméthylformamide (DMF) anhydre sous argon. Après 5 h d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est transféré dans un ballon contenant 320 mg de tosylate de 5'-(phosphocholine)-adénosine et 274 mg d'acide paratoluènesulfonique dans 5 ml de DMF anhydre. Le mélange est agité pendant 24 heures à température ambiante sous argon (le pH est maintenu en dessous de 7). Le DMF est distillé sous pression réduite et le produit brut est purifié sur colonne d'exclusion, Sephadex LH20, DCM:MeOH 5/5. 123 mg d'un produit hautement hygroscopique sont isolés. (Rendement : 23 %). RF : 0,16 (phase inverse, DCM/MeOH: 5/5). 1 H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 0,85 (m, 6H, CH3), 1 ,25 (m, 40H, CH2), 1 ,58 (m, 4H, CH2CH2CO2), 1 ,98 (m, 8H, CH2CH=CH), 2,17 (m, 4H, CH2CO2), 3,20 (s, 9H, N(CH3)3), 3,66 (m, 2H, CH2N+), 4,03 (m, 2H, H5'), 4,24 (m, 3H, H4' et CH2OP), 5,32 (m, 4H, CH=CH), 5,56 (m, 2H, H2' et H3'), 5,81 (m, 1 H, H5), 6,12 (m, 1H, HT), 7,27 (m, 2H, NH2), 8,22 (s, 1H, H8), 8,63 (s, 1H, H2). 13C NMR (75,468 MHz, CDCI3): δ 14,.07 (CH3), 22,62 (CH2CH3), 24,84 (CH2CH2C=O), 24,90 (CH2CH2C=O), 27,18 (CH2CH), 29,03-29,72 (CH2)n, 31 ,85 (CH2CH2CH3), 33,80 (CH2C=O), 33,99 (CH2C=O), 54,13 N+(CH3)3, 59,35 (CH2O), 63,50 (C5'), 65,97 (N+CH2), 69,36 (C3'), 71 ,80 (C2'), 82,94 (C4'), 85,06 (CV), 118,96 (C5), 129,53 (CHCH2), 129,99 (CHCH2), 139,23 (C8), 149,97 (C4), 153,29 (C2), 155,98 (C6), 172,28 (C=O), 172,54 (C=O). 31P NMR (121 MHz, CDCI3) : -0,810 ppm. FAB+ MS (MH+): 961.Stage B: Bis- (2 ', 3'-oleoyl) -5' - (phosphocholine) -adenosine (DOAPC) 172 mg of carbonyl diimidazole are added to 337 μl of oleic acid dissolved in 5 ml of anhydrous dimethylformamide (DMF) under argon. After 5 h of stirring at room temperature, the reaction medium is transferred to a flask containing 320 mg of 5 'tosylate (phosphocholine) -adenosine and 274 mg of paratoluenesulfonic acid in 5 ml of anhydrous DMF. The mixture is stirred for 24 hours at room temperature under argon (the pH is kept below 7). The DMF is distilled under reduced pressure and the crude product is purified on an exclusion column, Sephadex LH20, DCM: MeOH 5/5. 123 mg of a highly hygroscopic product are isolated. (Yield: 23%). RF: 0.16 (reverse phase, DCM / MeOH: 5/5). 1 H NMR (300 MHz, CDCI 3 ): δ 0.85 (m, 6H, CH 3 ), 1.25 (m, 40H, CH 2 ), 1.58 (m, 4H, CH 2 CH 2 CO 2 ), 1.98 (m, 8H, CH 2 CH = CH), 2.17 (m, 4H, CH 2 CO 2 ), 3.20 (s, 9H, N (CH 3 ) 3 ), 3.66 (m, 2H, CH2N +), 4.03 (m, 2H, H5 '), 4.24 (m, 3H, H4' and CH 2 OP), 5.32 (m, 4H, CH = CH), 5 , 56 (m, 2H, H2 'and H3'), 5.81 (m, 1H, H5), 6.12 (m, 1H, HT), 7.27 (m, 2H, NH 2 ), 8 , 22 (s, 1H, H8), 8.63 (s, 1H, H2). 13C NMR (75.468 MHz, CDCI 3 ): δ 14, .07 (CH 3 ), 22.62 (CH 2 CH 3 ), 24.84 (CH 2 CH 2 C = O), 24.90 (CH 2 CH 2 C = O), 27.18 (CH 2 CH), 29.03-29.72 (CH 2 ) n , 31, 85 (CH 2 CH 2 CH 3 ), 33.80 (CH 2 C = O), 33.99 (CH 2 C = O), 54.13 N + (CH 3 ) 3 , 59.35 (CH 2 O), 63, 50 (C5 '), 65.97 (N + CH 2 ), 69.36 (C3'), 71, 80 (C2 '), 82.94 (C4'), 85.06 (CV), 118.96 (C5), 129.53 (CHCH2), 129.99 (CHCH 2 ), 139.23 (C8), 149.97 (C4), 153.29 (C2), 155.98 (C6), 172.28 (C = O), 172.54 (C = O). 31P NMR (121 MHz, CDCI3): -0.810 ppm. FAB + MS (MH +): 961.
Exemple 9: Bis-(2',3'-Cι H5Fr7θ)-5'-(phosphocholine)-uridine 720 mg d'acide 4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,10,10,11 ,11 ,11- heptadécafluoro-undécanoique, 303 mg de DCC et 180 mg de DMAP sont ajoutés à 200 mg d'uridine phosphocholine dans 12 ml de DMF anhydre. Après 24 h à température ambiante, le DMF est évaporé et le solide résiduel est dissous dans 20 mL d'un mélange dichlorométhane/:méthanol 1 :1. La DCU est éliminée par filtration et le solvant est évaporé. Le produit brut est purifié sur colonne d'exclusion (LH 20, DCM/MeOH 5/5). 280 mg de produit sont isolés. RF: 0,30 (phase inverse, DCM/MeOH 5/5). 1 H NMR (300,130 MHz, CD3OD): δ 2,31 (m, 4H, -CF2CH2-), 3,64 (m, 4H, -CO2CH2-), 4,23 (s, 9H, N(CH3)3), 4,65 (m, 2H, CH2N+), 5,09 (m, 2H, H5'), 5.28 (m, 2H, CH2O), 5,40 (m, 1H, H4'), 6,47 (m, 1 H, H3'), 6,58 (m, 1H, H2'), 6,79 (d, j = 8.12 Hz, 1 H, H5), 7,14 (d, j = 6,61 Hz, 1 H, HT), 8,90 (d, j = 8,12 Hz, 1 H, H6). 13C NMR (75,468 MHz, CD3OD): δ 26,03 (-C=OCH2-), 26,99 (-C=OCH2-), 31 ,91 (-CF2CH2-), 33,22 (-CF2CH2-), 54,78 N+(CH3)3, 60,64 (CH2O), 66,13 (C5'), 67,58 (N+CH2), 73,08 (C3'), 74,97 (C2'), 83,12 (C4'), 87,89 (CV), 103,93 (C5), 106,25 (-CF2-), 107,68 (-CF2-), 108,05 (-CF2-), 108,15 (-CF2-), 111 ,60 (-CF2-), 112,17 (-CF3), 112,67 (-CF2-), 116,62 (-CF2-), 142,30 (C6), 152,40 (C2), 165,82 (C4), 171 ,73 (-C=O-), 171 , .94 (-C=O-). 19F NMR (282 MHz, CD3OD): -82,81 (t, j = 10,31 Hz , 3F, CF3), -82,94 (t, j = 10,31 Hz , 3F, CF3), -116,25 (m, 4F, CF2), -123,38 (m, 12F, CF2), -124,22 (m, 4F, CF2), - 124,92 (m, 4F, CF2), -127,78 (m, 4F, CF2). 31PNMR (121 ,495 MHz, CD3OD) : - 0,557 ppm. FAB+ MS (MH+): 1358.Example 9: Bis- (2 ', 3'-Cι H5Fr7θ) -5' - (phosphocholine) -uridine 720 mg of acid 4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,8,9 , 9,10,10,11, 11, 11-heptadecafluoro-undecanoic, 303 mg of DCC and 180 mg of DMAP are added to 200 mg of uridine phosphocholine in 12 ml of anhydrous DMF. After 24 h at room temperature, the DMF is evaporated and the residual solid is dissolved in 20 ml of a dichloromethane /: methanol mixture 1: 1. The DCU is removed by filtration and the solvent is evaporated. The crude product is purified on an exclusion column (LH 20, DCM / MeOH 5/5). 280 mg of product are isolated. RF: 0.30 (reverse phase, DCM / MeOH 5/5). 1 H NMR (300,130 MHz, CD3OD): δ 2.31 (m, 4H, -CF 2 CH 2 -), 3.64 (m, 4H, -CO 2 CH 2 -), 4.23 (s, 9H , N (CH 3 ) 3 ), 4.65 (m, 2H, CH 2 N +), 5.09 (m, 2H, H5 '), 5.28 (m, 2H, CH 2 O), 5.40 (m , 1H, H4 '), 6.47 (m, 1H, H3'), 6.58 (m, 1H, H2 '), 6.79 (d, j = 8.12 Hz, 1H, H5), 7 , 14 (d, j = 6.61 Hz, 1 H, HT), 8.90 (d, j = 8.12 Hz, 1 H, H6). 13C NMR (75.468 MHz, CD 3 OD): δ 26.03 (-C = OCH 2 -), 26.99 (-C = OCH 2 -), 31, 91 (-CF 2 CH 2 -), 33, 22 (-CF 2 CH 2 -), 54.78 N + (CH 3) 3, 60.64 (CH 2 O), 66.13 (C5 '), 67.58 (N + CH 2), 73.08 (C3 '), 74.97 (C2'), 83.12 (C4 '), 87.89 (CV), 103.93 (C5), 106.25 (-CF 2 -), 107.68 (- CF 2 -), 108.05 (-CF 2 -), 108.15 (-CF 2 -), 111, 60 (-CF2-), 112.17 (-CF 3 ), 112.67 (-CF 2 -), 116.62 (-CF 2 -), 142.30 (C6), 152.40 (C2), 165.82 (C4), 171, 73 (-C = O-), 171, .94 ( -C = O-). 19F NMR (282 MHz, CD 3 OD): -82.81 (t, j = 10.31 Hz, 3F, CF3), -82.94 (t, j = 10.31 Hz, 3F, CF 3 ), -116.25 (m, 4F, CF 2 ), -123.38 (m, 12F, CF2), -124.22 (m, 4F, CF 2 ), - 124.92 (m, 4F, CF 2 ) , -127.78 (m, 4F, CF 2 ). 31PNMR (121, 495 MHz, CD 3 OD): - 0.557 ppm. FAB + MS (MH +): 1358.
Exemple 10: Uridine palmitonide Dans un ballon bicol de 50 ml, on pèse 1 g de hentriacontan-16- one (2,22 mmoles), 2,7 g d'uridine (11 ,11 mmoles) et 0,42 g d'APTS (2,22 mmoles). Le réacteur est placé sous atmosphère d'azote anhydre on ajoute alors 20 ml de THF anhydre et 1 ,85 ml de triéthyl orthoformiate. Le milieu réactionnel est agité et porté à reflux. Après 18 h, la réaction est stoppée par l'addition de 0,6 ml de TEA. Le milieu réactionnel est versé dans 50 ml d'eau contenant 50 g de glace et 4 g d'hydrogénocarbonate de sodium. Après 15 min d'agitation à température ambiante, la phase aqueuse est extraite par deus fois 75 ml de dichlorométhane. La phase organique est séchée sur sulfate de sodium et le solvant est évaporé sous pression réduite. Le produit brut obtenu est élue dans 4 ml de dichlorométhane et on ajoute du méthanol jusqu'à l'apparition d'un précipité, on laisse cristalliser le produit à température ambiante. Le produit cristallisé est récupéré par filtration, après séchage sous pression réduite on obtient 0,740 g d'uridine palmitonide sous la forme d'une poudre blanche. (Rendement = 49%).EXAMPLE 10 Uridine Palmitonide In a 50 ml two-necked flask, 1 g of hentriacontan-16-one (2.22 mmol), 2.7 g of uridine (11, 11 mmol) and 0.42 g of are weighed. APTS (2.22 mmol). The reactor is placed under an atmosphere of anhydrous nitrogen, then 20 ml of anhydrous THF and 1.85 ml of triethyl orthoformate are added. The reaction medium is stirred and brought to reflux. After 18 h, the reaction is stopped by the addition of 0.6 ml of TEA. The reaction medium is poured into 50 ml of water containing 50 g of ice and 4 g of sodium hydrogencarbonate. After 15 min of stirring at room temperature, the aqueous phase is extracted twice with 75 ml of dichloromethane. The organic phase is dried over sodium sulfate and the solvent is evaporated under reduced pressure. The crude product obtained is eluted in 4 ml of dichloromethane and methanol is added until a precipitate appears, the product is left to crystallize at room temperature. The crystallized product is recovered by filtration, after drying under reduced pressure, 0.740 g of uridine palmitonide is obtained in the form of a white powder. (Yield = 49%).
1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ en ppm : 0,87 (t, J=6,6Hz, 6 H, 2CH3), 1 ,24 (m, 48H, 24CH2), 1 ,41 (m, 4H, 2CH3CH2), 1,56 (m, 2H, CCH2), 1 ,73 (m, 2H, CCH2), 3,05 (m, 1H, OH), 3,80 (dd, J=12,0Hz, J=3,6Hz, 1H, H5'), 3,91 (dd, J=12,0Hz, J=2,7Hz 1 H, H5'), 4,28 (m, 1 H, H4'), 4,95 (dd, J=6,6Hz, J=3,6Hz, 1 H, H3'), 5,04 (dd, J=6,6Hz, J=2,7Hz, 1 H, H2'), 5,55 (d, J=2,7Hz, 1H, HV), 5,72 (d, J=8,1 Hz, 1H, CH), 7,33 (d, J=8,1Hz, 1H, CH), 9,43 (m, 1 H, NH). 13C NMR NMR (75 MHz, CDCI3) δ en ppm : 14,10 (CH3), 22,70 (CH2), 23,54 (CH2), 24,15 (CH2), 29,33- 29,81 (CH2), 31,89 (CH2), 36,85 (CH2COO), 36,98 (CH2COO), 62,65 (C5'), 80,29 (C4'), 83,84 (C2'), 87,29 (C3'), 96,34 (CV), 102,56 (CH), 118,39 (OCO), 143,16 (CH), 150,32 (CO), 163,33 (CO). FAB+ SM=677. 1 H NMR (300 MHz, CDCI 3 ) δ in ppm: 0.87 (t, J = 6.6 Hz, 6 H, 2CH 3 ), 1, 24 (m, 48H, 24CH 2 ), 1, 41 (m , 4H, 2CH 3 CH 2 ), 1.56 (m, 2H, CCH 2 ), 1.73 (m, 2H, CCH 2 ), 3.05 (m, 1H, OH), 3.80 (dd, J = 12.0Hz, J = 3.6Hz, 1H, H5 '), 3.91 (dd, J = 12.0Hz, J = 2.7Hz 1H, H5'), 4.28 (m, 1H , H4 '), 4.95 (dd, J = 6.6Hz, J = 3.6Hz, 1H, H3'), 5.04 (dd, J = 6.6Hz, J = 2.7Hz, 1H , H2 '), 5.55 (d, J = 2.7Hz, 1H, HV), 5.72 (d, J = 8.1Hz, 1H, CH), 7.33 (d, J = 8, 1Hz, 1H, CH), 9.43 (m, 1H, NH). 13 C NMR NMR (75 MHz, CDCI 3 ) δ in ppm: 14.10 (CH 3 ), 22.70 (CH 2 ), 23.54 (CH 2 ), 24.15 (CH 2 ), 29.33 - 29.81 (CH 2 ), 31.89 (CH 2 ), 36.85 (CH 2 COO), 36.98 (CH 2 COO), 62.65 (C5 '), 80.29 (C4') , 83.84 (C2 '), 87.29 (C3'), 96.34 (CV), 102.56 (CH), 118.39 (OCO), 143.16 (CH), 150.32 (CO ), 163.33 (CO). FAB + SM = 677.
Exemple 11 : Uridine-oxo-dioxaphospholane palmitonide On ajoute, à 0,5 g d'uridine palmitonide obtenu à l'exemple 9, 7 ml de THF fraîchement distillé et 187 μl de triéthylamine sous atmosphère inerte. Le mélange est refroidi à 0°C et on ajoute goutte à goutte 109 μl de 2-chloro-2- oxo-1 , 3,2-dioxaphospholane. Le mélange réactionnel est placé sous agitation à température ambiante pendant 15 h. Ensuite, les sels de triéthylamine sont éliminés par filtration sous aspiration à 0°C. La plupart du solvant est évaporée sous pression réduite à 0°C et 3 ml de la solution résiduelle sont directement utilisés sans purification supplémentaire au stade suivant.Example 11: Uridine-oxo-dioxaphospholane palmitonide To 0.5 g of uridine palmitonide obtained in Example 9, 7 ml of freshly distilled THF and 187 μl of triethylamine are added under an inert atmosphere. The mixture is cooled to 0 ° C. and 109 μl of 2-chloro-2-oxo-1, 3,2-dioxaphospholane are added dropwise. The reaction mixture is stirred at room temperature for 15 h. Then, the triethylamine salts are removed by filtration under suction at 0 ° C. Most of the solvent is evaporated under reduced pressure at 0 ° C and 3 ml of the residual solution are used directly without purification additional to the next stage.
Exemple 12 : Uridine phosphocholine palmitonide (PUPC) On condense 4 ml de triméthylamine anhydre à -50°C sous atmosphère inerte. On ajoute à la triméthylamine froide 4 ml d'acétonitrile sec et l'Uridine-oxo-dioxaphospholane palmitonide brut obtenu à l'exemple 11. On maintient le mélange réactionnel sous agitation à 65°C pendant 48 h. Après évaporation de la triméthylamine résiduelle et des solvants, on isole un solide blanc. Ce solide brut est éluer dans 3 ml de dichlorométhane anhydre et floculé dans de l'acétone anhydre. L'opération est répétée trois fois et on obtient 189 mg d'un solide blanc hygroscopique pur. Rendement = 29,3 %.Example 12: Uridine phosphocholine palmitonide (PUPC) 4 ml of anhydrous trimethylamine are condensed at -50 ° C. under an inert atmosphere. 4 ml of dry acetonitrile and the uridine-oxo-dioxaphospholane palmitonide obtained in Example 11 are added to the cold trimethylamine. The reaction mixture is stirred at 65 ° C. for 48 h. After evaporation of the residual trimethylamine and of the solvents, a white solid is isolated. This crude solid is eluted in 3 ml of anhydrous dichloromethane and flocculated in anhydrous acetone. The operation is repeated three times and 189 mg of a pure white hygroscopic solid are obtained. Yield = 29.3%.
Exemple 13 : Adenosine palmitonide Dans un ballon bicol de 25 ml, on place 1 ,17 g de palmitone diethoxycetal (2,22 mmoles), 0,975 g de paratoluenesulfonate d'adenosine (2,22 mmoles) et 0,042 g d'APTS (0,22 mmoles). Le réacteur est placé sous atmosphère d'azote anhydre on ajoute alors 8 ml de THF anhydre et 2 ml de diméthylformamide (DMF) anhydre. Le milieu réactionnel est agité et porté à reflux. Après 15 heures, la réaction est stoppée par l'addition de 5 ml de TEA anhydre. Le milieu réactionnel est versé dans 50 ml d'une solution d'hydrogénocarbonate de sodium saturée, la phase aqueuse est extraite par deux fois 60 ml de dichlorométhane. La phase organique est lavée avec 30 ml d'eau, séchée sur sulfate de sodium et le solvant est évaporé sous pression réduite. Le produit brut obtenu est purifié sur gel de silice neutralisé par 2% de TEA (éluant AcOEt 100%). On obtient 556 mg d'Adénosine palmitonide sous la forme d'un solide blanc. (Rendement = 36%).Example 13: Adenosine palmitonide In a 25 ml two-necked flask, 1.17 g of palmitone diethoxycetal (2.22 mmol), 0.975 g of adenosine paratoluenesulfonate (2.22 mmol) and 0.042 g of APTS are placed. , 22 mmol). The reactor is placed under an atmosphere of anhydrous nitrogen, then 8 ml of anhydrous THF and 2 ml of anhydrous dimethylformamide (DMF) are added. The reaction medium is stirred and brought to reflux. After 15 hours, the reaction is stopped by the addition of 5 ml of anhydrous TEA. The reaction medium is poured into 50 ml of a saturated sodium hydrogen carbonate solution, the aqueous phase is extracted with twice 60 ml of dichloromethane. The organic phase is washed with 30 ml of water, dried over sodium sulfate and the solvent is evaporated under reduced pressure. The crude product obtained is purified on silica gel neutralized with 2% TEA (eluent AcOEt 100%). 556 mg of adenosine palmitonide are obtained in the form of a white solid. (Yield = 36%).
1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ en ppm : 0,87 (t, J=6,6Hz, 6 H, 2CH3), 1 ,25 (m, 48H, 24CH2), 1 ,47 (m, 4H, 2CH3CH2), 1 ,57 (m, 2H, CCH2), 1 ,78 (m, 2H, CCH2), 2,10 (m, 1 H, OH), 3,79 (m, 2H, H5'), 4,52 (m, 1 H, H4'), 5,16 (m, 2H, H2' et H3'), 5,89 (d, J= 4,5 Hz, 1 H, HV), 6,01 (s, 2H, NH2), 7,82 (s, 1 H, CH), 8,30 (s, 1 H, CH). 13C NMR NMR (75 MHz, CDCI3) δ en ppm : 14,10 (CH3), 22,66 (CH2), 23,81 (CH2), 24,22 (CH2), 29,34-30,06 (CH2), 31 ,90 (CH2), 36,45 (CH2COO), 37,23 (CH2COO), 63,38 (C5'), 81 ,42 (C4'), 83,19 (C3'), 86,43 (C2'), 94,05 (CV), 118,03 (OCO), 121 ,07 (C5), 140,16 (C6), 148,42 (C8), 152,63 (C2), 155,98 (C4). HR SM [M-H+], théorique = 700,5735, observé = 700, 5741. 1 H NMR (300 MHz, CDCI 3 ) δ in ppm: 0.87 (t, J = 6.6 Hz, 6 H, 2CH 3 ), 1.25 (m, 48H, 24CH 2 ), 1.47 (m , 4H, 2CH 3 CH 2 ), 1.57 (m, 2H, CCH 2 ), 1.78 (m, 2H, CCH 2 ), 2.10 (m, 1H, OH), 3.79 (m , 2H, H5 '), 4.52 (m, 1H, H4'), 5.16 (m, 2H, H2 'and H3'), 5.89 (d, J = 4.5Hz, 1H , HV), 6.01 (s, 2H, NH 2 ), 7.82 (s, 1H, CH), 8.30 (s, 1H, CH). 13 C NMR NMR (75 MHz, CDCI3) δ in ppm: 14.10 (CH 3 ), 22.66 (CH 2 ), 23.81 (CH 2 ), 24.22 (CH 2 ), 29.34- 30.06 (CH 2 ), 31, 90 (CH 2 ), 36.45 (CH 2 COO), 37.23 (CH 2 COO), 63.38 (C5 '), 81, 42 (C4'), 83.19 (C3 '), 86.43 (C2'), 94.05 (CV), 118.03 (OCO), 121.07 (C5), 140.16 (C6), 148.42 (C8), 152.63 (C2), 155.98 (C4). HR SM [MH + ], theoretical = 700.5735, observed = 700, 5741.
Exemple 14: Adénosine-oxo-dioxaphospholane palmitonide On ajoute à 0,5 g (0,71 mmoles) d'adénosine palmitonide 8 ml deEXAMPLE 14 Adenosine-oxo-dioxaphospholane palmitonide 8 ml of adenosine palmitonide is added to 0.5 g (0.71 mmol) of adenosine palmitonide.
THF fraîchement distillé sous atmosphère inerte. La suspension est refroidie àTHF freshly distilled under an inert atmosphere. The suspension is cooled to
0°C et on ajoute goutte à goutte 98 μl de 2-chloro-2-oxo-1 ,3,2- dioxaphospholane. Le mélange réactionnel est placé sous agitation à température ambiante pendant 2 h. La majorité du solvant est évaporée sous pression réduite à 0°C et 4 ml de la solution résiduelle sont directement utilisés sans purification supplémentaire au stade suivant.0 ° C and 98 μl of 2-chloro-2-oxo-1, 3,2-dioxaphospholane are added dropwise. The reaction mixture is stirred at room temperature for 2 h. The majority of the solvent is evaporated under reduced pressure at 0 ° C and 4 ml of the residual solution are used directly without further purification in the following stage.
Exemple 15 : Adénosine phosphocholine palmitonide (PAPC) Dans un tube à sceller, on condense 4 ml de triméthylamine anhydre à -50°C sous atmosphère inerte. On ajoute à la triméthylamine froide 2 ml d'acétonitrile sec et les 4 ml d'Adénosine-oxo-dioxaphospholane palmitonide brut obtenu à l'exemple 14. Le tube est scellé et le mélange réactionnel est maintenu sous agitation à 65°C pendant 48 h. Après évaporation de la triméthylamine résiduelle et des solvants, on isole un solide blanc. Ce solide brut est élue dans 5 ml de méthanol anhydre et filtré. Le filtrat est concentré sous pression réduite et purifié sur colonne Sephadex LH20,Example 15: Adenosine phosphocholine palmitonide (PAPC) In a sealing tube, 4 ml of anhydrous trimethylamine is condensed at -50 ° C. under an inert atmosphere. 2 ml of dry acetonitrile and 4 ml of crude adenosine-oxo-dioxaphospholane palmitonide obtained in Example 14 are added to the cold trimethylamine. The tube is sealed and the reaction mixture is stirred at 65 ° C. for 48 hours. h. After evaporation of the residual trimethylamine and of the solvents, a white solid is isolated. This crude solid is eluted in 5 ml of anhydrous methanol and filtered. The filtrate is concentrated under reduced pressure and purified on a Sephadex LH20 column,
DCM/méthanol 1/1. On obtient 252 mg d'un solide pur blanc et hygroscopique.DCM / methanol 1/1. 252 mg of a pure white and hygroscopic solid are obtained.
Rendement = 41 %.Yield = 41%.
1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ en ppm : 0,87 (t, J=6,6Hz, 6 H, 1 H NMR (300 MHz, CDCI 3 ) δ in ppm: 0.87 (t, J = 6.6 Hz, 6 H,
2CH3), 1 ,25 (m, 48H, 24CH2), 1 ,48 (m, 4H, 2CH3CH2), 1 ,55 (m, 2H, CCH2), 1 ,742CH 3 ), 1.25 (m, 48H, 24CH 2 ), 1.48 (m, 4H, 2CH 3 CH 2 ), 1.55 (m, 2H, CCH 2 ), 1.74
(m, 2H, CCH2), 3,20 (s, 9H, N(CH3)3), 3,58 (m, 2H, NCH2), 3,75 (m, 2H, H5'),(m, 2H, CCH 2 ), 3.20 (s, 9H, N (CH 3 ) 3 ), 3.58 (m, 2H, NCH 2 ), 3.75 (m, 2H, H5 '),
4,00 (m, 2H ; CH2O), 4,49 (m, 1 H, H4'), 4,94 (m, 2H, H2' et H3'), 5,46 (m, 1 H, H1 '), 6,19 (s, 2H, NH2), 8,22 (s, 1 H, CH), 8,53 (s, 1 H, CH). 13C NMR NMR (754.00 (m, 2H; CH 2 O), 4.49 (m, 1H, H4 '), 4.94 (m, 2H, H2' and H3 '), 5.46 (m, 1H, H1 '), 6.19 (s, 2H, NH 2 ), 8.22 (s, 1H, CH), 8.53 (s, 1H, CH). 13 C NMR NMR (75
MHz, CDCI3) δ en ppm : 14,11 (CH3), 22,69 (CH2), 23,64 (CH2), 24,27 (CH2),MHz, CDCI3) δ in ppm: 14.11 (CH 3 ), 22.69 (CH 2 ), 23.64 (CH 2 ), 24.27 (CH 2 ),
29,39-29,77 (CH2), 31 ,94 (CH2), 36,54 (CH2COO), 36,97 (CH2COO), 54,0529.39-29.77 (CH 2 ), 31, 94 (CH 2 ), 36.54 (CH 2 COO), 36.97 (CH 2 COO), 54.05
(N(CH3)3), 59,41 (NCH2), 63,00 (C5'), 65,86 (CH2O), 81 ,33 (C4'), 83,17 (C3'),(N (CH 3 ) 3 ), 59.41 (NCH 2 ), 63.00 (C5 '), 65.86 (CH 2 O), 81, 33 (C4'), 83.17 (C3 '),
86,08 (C2'), 95,28 (CV), 117,63 (OCO), 126,61 (C5), 140,46 (C6), 148,35 (C8), 152,29 (C2), 154,80 (C4). FAB+ SM=866.86.08 (C2 '), 95.28 (CV), 117.63 (OCO), 126.61 (C5), 140.46 (C6), 148.35 (C8), 152.29 (C2), 154.80 (C4). FAB + SM = 866.
Exemple 16 : Utilisation du tosylate de 2', 3'-dioléoyl-5'-(N,N,N- triméthylammonium) uridine pour la transfection Des études préliminaires de transfection ont été réalisées en tenant compte des travaux publiés [M. C. Pedroso de Lima et al., Advance Drug Delivery Reviews 47 (2001) 277-294]. Ces essais réalisés sur des lignées cellulaires de types HCT 116, Calu 6, Hela, HEK 293 avec le plasmide p-TRACER ont montré pour le tosylate de 2', 3'-dioléoyl-5'-(N,N,N-triméthylammonium) uridine des efficacités similaires à celles de la DOTAP. En outre, la cytotoxicité s'est avérée moindre voire quasi inexistante dans le cas du tosylate de 2', 3'-dioléoyl-5'-(N,N,N- triméthylammonium) uridine.Example 16: Use of 2 ', 3'-dioleoyl-5' - (N, N, N-trimethylammonium) uridine tosylate for transfection Preliminary transfection studies were carried out taking into account the published work [M. C. Pedroso de Lima et al., Advance Drug Delivery Reviews 47 (2001) 277-294]. These tests carried out on cell lines of HCT 116, Calu 6, Hela, HEK 293 types with the plasmid p-TRACER have shown for the 2 ', 3'-dioleoyl-5' - (N, N, N-trimethylammonium) tosylate ) uridine with similar efficacy to that of DOTAP. In addition, cytotoxicity was found to be less or almost nonexistent in the case of 2 ', 3'-dioleoyl-5' - (N, N, N-trimethylammonium) uridine tosylate.
Exemple 17 : Formation d'un gel utilisable pour la transfection 1- On constitue un mélange en phase aqueuse du composé (la) Uridine phosphocholine stéaronide (SUPC) également appelé 2', 3'- pentatriacontan-18-onide-5'-(phosphocholine), préparé de manière analogue au composé palmitonide PUPC de l'exemple 12, (à des concentrations comprises entre 0.001 et 10 %) et d'un composé cationique (PEI, lipofectamine, DOTAP, DOTAU etc). La suspension obtenue est ensuite chauffée puis refroidie sur 5 cycles de montée et descente sur des plages de températures allant de -20 °C à + 60°C. 2) La phase colloïdale obtenue est chauffée à une température légèrement supérieure à la températures de transition de phase Tm (par exemple, la phase colloïdale est chauffée à une température de 38-40°C pour SUPC dont Tm = 33°C. On rajoute le plasmide, puis la suspension obtenue est chauffée puis refroidie sur 5 cycles de température de -20°C à 60°C. On peut ensuite procéder à la transfection comme décrit dans D. Luo, K. Haverstick, N. Belcheva, E. Han and W. M. Saltzman, Macromolecules, 2002, 35, 3456. Alternativement, selon une autre procédure, le plasmide peut être ajouté au mélange obtenu à l'issue de la première étape à une température inférieure à la Tm.Example 17: Formation of a gel usable for transfection 1- A mixture in aqueous phase of the compound (la) Uridine phosphocholine stearonide (SUPC) also called 2 ', 3'-pentatriacontan-18-onide-5' - ( phosphocholine), prepared analogously to the palmitonide PUPC compound of Example 12 (at concentrations between 0.001 and 10%) and of a cationic compound (PEI, lipofectamine, DOTAP, DOTAU etc). The suspension obtained is then heated then cooled over 5 cycles of rise and fall over temperature ranges from -20 ° C to + 60 ° C. 2) The colloidal phase obtained is heated to a temperature slightly higher than the phase transition temperatures Tm (for example, the colloidal phase is heated to a temperature of 38-40 ° C for SUPC whose Tm = 33 ° C. We add the plasmid, then the suspension obtained is heated and then cooled over 5 temperature cycles from -20 ° C. to 60 ° C. The transfection can then be carried out as described in D. Luo, K. Haverstick, N. Belcheva, E. Han and WM Saltzman, Macromolecules, 2002, 35, 3456. Alternatively, according to another procedure, the plasmid can be added to the mixture obtained at the end of the first step at a temperature below Tm.
Selon le même protocole, on peut réaliser un gel à partir du composé DSUPC de l'exemple 4 ou du composé PUPC de l'exemple 12.According to the same protocol, a gel can be produced from the DSUPC compound of Example 4 or the PUPC compound of Example 12.
Exemple 18 : Formation d'un gel de d'un composé de formule (la utilisable pour la transfection On procède comme dans l'exemple 17, à l'exception du fait que le complexe plasmide/composé cationique est fabriqué indépendamment du gel. Ce complexe est ensuite rajouté à une température supérieure à la Tm au gel préalablement constitué. Dans ce cas le gel a été fabriqué en mettant en suspension de la SUPC (à des concentrations comprises entre 0.001 et 10 %) en phase aqueuse. Cette suspension est ensuite chauffée puis refroidie sur 5 cycles de montée et descente sur des plages de températures allant de -20°C à 60°C. Selon le même protocole, on peut réaliser un gel à partir du composé DSUPC de l'exemple 4 ou du composé PUPC de l'exemple 12.Example 18: Formation of a gel of a compound of formula (which can be used for transfection The procedure is as in Example 17, except that the plasmid / cationic compound complex is produced independently of the gel. complex is then added at a temperature higher than Tm to the gel previously formed. In this case the gel was produced by suspending SUPC (at concentrations between 0.001 and 10%) in the aqueous phase. heated then cooled over 5 cycles of rise and fall over temperature ranges from -20 ° C. to 60 ° C. According to the same protocol, a gel can be produced from the DSUPC compound of Example 4 or from the PUPC compound from example 12.
Exemple 19 : Préparation de microsphères comprenant des actinides ou des lanthanides 25 mg de bis-(2',3'-stéaroyl)-5'-(phosphocholine)uridine préparée à l'exemple 4 (DSUPC) lyophilisés sont hydratés pendant 2 min à 75 °C parExample 19: Preparation of microspheres comprising actinides or lanthanides 25 mg of bis- (2 ', 3'-stearoyl) -5' - (phosphocholine) uridine prepared in Example 4 (DSUPC) lyophilized are hydrated for 2 min at 75 ° C by
500 μl d'une solution aqueuse de nitrate de thorium IV (0,16 M) à leur pH acide naturel. Le précipité formé (microsphères) est lavé 2 fois avec 200 μl d'eau distillée puis lyophilisé.500 μl of an aqueous solution of thorium IV nitrate (0.16 M) at their natural acid pH. The precipitate formed (microspheres) is washed twice with 200 μl of distilled water and then lyophilized.
Caractérisation du précipité (microsphères) : RMN 3 P : d = -12,0 ppmCharacterization of the precipitate (microspheres): 3 P NMR: d = -12.0 ppm
(DSUPC seule, d = -1 ,2 ppm).(DSUPC only, d = -1, 2 ppm).
FTIR (solide KBr) : vibration d'élongation C=O : 1653 cm"1, vibration d'élongation N-H : 3262 cm"1 . SAXS (Small Angle X-ray Scattering), q = 1 ,10 nm"1 , d = 5,71 nm.FTIR (solid KBr): vibration of elongation C = O: 1653 cm "1 , vibration of elongation NH: 3262 cm " 1 . SAXS (Small Angle X-ray Scattering), q = 1, 10 nm "1 , d = 5.71 nm.
Selon le même protocole, on peut préparer des microsphères avec du nitrate de cérium III ou du nitrate d'uranium. According to the same protocol, microspheres can be prepared with cerium III nitrate or uranium nitrate.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composé de formule (I)1. Compound of formula (I)
dans laquelle X représente un atome d'oxygène, de soufre, ou un groupe -CH2-, B représente une base purique ou pyrimidique, éventuellement substituée, ou encore une base héterocylique mono-ou bi-cyclique non naturelle dont chaque cycle comporte 4 à 7 chaînons, éventuellement substituée, Li et L2, identiques ou différents, représentent un groupement oxycarbonyl -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, un atome d'oxygène, ou encore, Li et L2, ensemble, forment un groupement cétal de formule in which X represents an oxygen or sulfur atom, or a group -CH 2 -, B represents a purine or pyrimidine base, optionally substituted, or an unnatural mono-or bi-cyclic heterocylic base each cycle of which comprises 4 with 7 links, optionally substituted, Li and L 2 , identical or different, represent an oxycarbonyl group -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO- NH-, an oxygen atom, or Li and L 2 together form a ketal group of formula
ou un groupement thiocétal de formule or a thiocetal group of formula
Ri et R2, identiques ou différents représentent une chaîne alkyle linéaire ou ramifiée renfermant de 2 à 30 atomes de carbone, de préférence de 6 à 25 atomes de carbone, notamment de 8 à 25 atomes de carbone, saturée ou partiellement insaturée, éventuellement totalement ou partiellement fluorée, éventuellement substituée sur le carbone d'extrémité de chaîne par un atome de fluor ou par un ester ou éther benzylique ou naphtylique et R3 représente un groupement hydroxy, amino, un groupement phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidyléthanolamine, O-alkyl-phosphatidyléthanolamine, O- alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium, un groupement NH2-R4, NHR Rδ ou NR4R5R6 dans lesquels R , R5 et Re, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou hydroxyalkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou R3 représente un reste cyclodextrine ou un reste Z-W-CO-CH2-CH2-(-N-CO-CH2-CH2-)n- N - Ai Ri and R 2 , identical or different, represent a linear or branched alkyl chain containing from 2 to 30 carbon atoms, preferably from 6 to 25 carbon atoms, in particular from 8 to 25 carbon atoms, saturated or partially unsaturated, possibly totally or partially fluorinated, optionally substituted on the chain end carbon by a fluorine atom or by a benzyl or naphthyl ester or ether and R 3 represents a hydroxy, amino group, a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, O-alkyl-phosphatidylethanolamine, O- alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium group, an NH 2 -R 4 , NHR Rδ or NR 4 group R 5 R 6 in which R, R5 and Re, which are identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydroxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a ZW residue -CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 -) n - N - Ai
CH2-V- A2 ou -(-CH2-CH-)n- CO-V- dans lesquels V et W identiques ou différents représentent une liaison -O-,-S-, ou -NH-, Z peut prendre les significations de R3, Ri et R2, et n peut prendre les valeurs de 1 à 500 et Ai et A2 identiques ou différents représentent un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou acyle linéaire ou ramifié renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, à l'exception des composés dans lesquels :CH 2 -V- A 2 or - (- CH 2 -CH-) n - CO-V- in which V and W identical or different represent a bond -O -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2 , and n can take the values from 1 to 500 and Ai and A 2 identical or different represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl containing from 2 to 5 carbon atoms, with the exception of compounds in which:
- X représente un atome d'oxygène , - R3 représente un groupe hydroxy et soit L1 et L2, identiques représentent un groupement oxycarbonyl, Ri et R2 identiques représentent un alkyle en C2 à Cι7, et B représente la cytosine, l'adénosine ou une 6-méthoxypurine , soit L1 et L2 ensemble forment un groupement cétal, Ri et R2 identiques représentent un méthyle et B représente l'adénosine. - X represents an oxygen atom, - R 3 represents a hydroxyl group and either L1 and L2, identical represent an oxycarbonyl group, Ri and R 2 identical represent a C 2 to C 7 alkyl, and B represents cytosine, l adenosine or a 6-methoxypurine, ie L 1 and L 2 together form a ketal group, identical Ri and R 2 represent methyl and B represents adenosine.
2. Composé de formule (I) selon la revendication 1 , dans laquelle X représente un atome d'oxygène ou de soufre, - B représente une base purique ou pyrimidique, Li et L2, identiques ou différents, représentent un groupement oxycarbonyl -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, un atome d'oxygène, Ri et R2, identiques ou différents représentent une chaîne alkyle linéaire ou ramifiée renfermant de 2 à 30 atomes de carbone, de préférence de 6 à 25 atomes de carbone, notamment de 8 à 25 atomes de carbone, saturée ou partiellement insaturée, éventuellement totalement ou partiellement fluorée, éventuellement substituée sur le carbone d'extrémité de chaîne par un atome de fluor ou par un ester ou éther benzylique ou naphtylique et - R3 représente un groupement hydroxy, amino, un groupement phosphate, phosphonate, O-alkylphosphatidylcholine, thiophosphate, phosphonium, un groupement NH2-R , NHR4R5 ou NR4R5R6 dans lesquels R4, R5 et RQ, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou hydroxyalkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou R3 représente un reste cyclodextrine ou un reste Z-W-CO-CH2-CH2-(-N-CO-CH2-CH2-)n- N - Ai CH2-V- A2 ou -(-CH2-CH-)n-2. Compound of formula (I) according to claim 1, in which X represents an oxygen or sulfur atom, - B represents a purine or pyrimidine base, Li and L 2 , identical or different, represent an oxycarbonyl group -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, an oxygen atom, Ri and R 2 , identical or different, represent a linear or branched alkyl chain containing from 2 to 30 carbon atoms, preferably from 6 to 25 carbon atoms, in particular from 8 to 25 carbon atoms, saturated or partially unsaturated, optionally totally or partially fluorinated, optionally substituted on the chain end carbon by a fluorine atom or by a benzyl ester or ether or naphthyl and - R 3 represents a hydroxy, amino group, a phosphate, phosphonate, O-alkylphosphatidylcholine, thiophosphate, phosphonium group, an NH 2 -R group, NHR 4 R 5 or NR 4 R 5 R 6 in which R 4 , R 5 and RQ, identical or different represent have a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydroxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a ZW-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO- CH 2 -CH 2 -) n - N - Ai CH 2 -V- A 2 or - (- CH 2 -CH-) n -
CO-V- dans lesquels V et W identiques ou différents représentent une liaison -0-,-S-, ou -NH-, Z peut prendre les significations de R3, Ri et R2, et n peut prendre les valeurs de 1 à 500 et Ai et A2 identiques ou différents représentent un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou acyle linéaire ou ramifié renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, à l'exception des composés dans lesquels : - X représente un atome d'oxygène ,CO-V- in which V and W identical or different represent a bond -0 -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2 , and n can take the values from 1 to 500 and Ai and A 2 identical or different represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl radical containing from 2 to 5 carbon atoms, with the exception of the compounds in which : - X represents an oxygen atom,
- B représente la cytosine, l'adénosine ou la 6-méthoxypurine ,- B represents cytosine, adenosine or 6-methoxypurine,
- Li et L2, identiques, représentent un groupement oxycarbonyl,- Li and L 2 , identical, represent an oxycarbonyl group,
- Ri et R2 identiques représentent un alkyle en C2 à Cι7 et- Ri and R 2 identical represent a C 2 to Cι 7 alkyl and
- R3 représente un groupe hydroxy. - R 3 represents a hydroxy group.
3. Composé selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que B représente une base purique ou pyrimidique choisie parmi l'uracile, l'adénine, la guanine, la cytosine, la thymine, X représente un atome d'oxygène ou de soufre, Li et L2 représentent un groupement oxycarbonyl, thiocarbamate, carbonate ou carbamate, Ri et R2 représentent un radical undécyle, tridécyle, pentadécyle, heptadécyle, nonadécyle, cis,cis,cis,cis-4,7,10,13-nonadec- tétraènyle, arachidonyle, c/s-8-heptadécènyle, R3 représente un radical aminé, méthylamine, diméthylamine, triméthylamine, O-alkylphosphatidylcholine et le contre ion est un iodure ou un tosylate. 3. Compound according to one of claims 1 or 2, characterized in that B represents a purine or pyrimidine base chosen from uracil, adenine, guanine, cytosine, thymine, X represents an oxygen atom or sulfur, Li and L 2 represent an oxycarbonyl, thiocarbamate, carbonate or carbamate group, Ri and R 2 represent an undecyl, tridecyl, pentadecyl, heptadecyl, nonadecyl, cis, cis, cis, cis-4,7,10 radical 13-nonadectetetraenyl, arachidonyl, c / s-8-heptadecenyl, R 3 represents an amino radical, methylamine, dimethylamine, trimethylamine, O-alkylphosphatidylcholine and the counter ion is an iodide or a tosylate.
4. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que B représente l'uracile ou l'adénine, X représente un atome d'oxygène, Li et L2 représentent un groupement oxycarbonyl et sont identiques, et R3 représente un radical triméthylamine. 4. Compound according to any one of claims 1 to 3, characterized in that B represents uracil or adenine, X represents an oxygen atom, Li and L 2 represent an oxycarbonyl group and are identical, and R 3 represents a trimethylamine radical.
5. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, choisi parmi : - le tosylate de 2', 3'-dioléoyl-5'-(N,N,N-triméthylammonium) uridine (DOTAU)5. Compound according to any one of claims 1 to 4, chosen from: - 2 ', 3'-dioleoyl-5' tosylate - (N, N, N-trimethylammonium) uridine (DOTAU)
- le tosylate de 2', 3'-dioléoyl-5'-(N,N,N-triméthylammonium) adénosine- 2 ', 3'-dioleoyl-5' tosylate - (N, N, N-trimethylammonium) adenosine
- le tosylate de2', 3'-dimyristoyl-5'-(N,N,N-triméthylammonium) uridine- 2 ', 3'-dimyristoyl-5' tosylate - (N, N, N-trimethylammonium) uridine
- le triflate de 2', 3'-dioléoyl-5'-(O-éthyl, phosphocholine) uridine. - the 2 ', 3'-dioleoyl-5' triflate - (O-ethyl, phosphocholine) uridine.
6. Composé de formule (I) ci-dessus, dans laquelle Li et L2, ensemble, forment un groupement cétal ou thiocétal, répondant à la formule (la) ci -dessous : dans laquelle X, B, Ri, R2 et R3 sont tels que définis dans la revendication 1 et6. Compound of formula (I) above, in which Li and L 2 , together, form a ketal or thiocetal group, corresponding to the formula (la) below: in which X, B, Ri, R 2 and R 3 are as defined in claim 1 and
- Y représente un atome d'oxygène ou de soufre à l'exception des composés dans lesquels :- Y represents an oxygen or sulfur atom with the exception of the compounds in which:
- X et Y représentent un atome d'oxygène , B représente l'adénosine, Ri et R2 identiques représentent un méthyle et R3 représente un groupe hydroxy. - X and Y represent an oxygen atom, B represents adenosine, Ri and R 2 identical represent a methyl and R 3 represents a hydroxy group.
7. Composé de formule (I) selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans laquelle R3 représente un groupement amino, un groupement phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O- alkylphosphatidylcholine, phosphatidyléthanolamine, O-alkyl- phosphatidyléthanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium, un groupement NH2-R4, NHR4R5 ou NR4R5R6 dans lesquels R4, R5 et R6, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou hydroxyalkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou R3 représente un reste cyclodextrine ou un reste Z-W-CO-CH2-CH2-(-N-CO-CH2-CH2-)n- N - A1 CH2-V- A2 ou -(-CH2-CH-)n-7. Compound of formula (I) according to any one of claims 1 to 6, in which R 3 represents an amino group, a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O- alkylphosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, O-alkylphosphatidylethanolamine group, O- alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium, an NH 2 -R4, NHR4R5 or NR4R5R6 group in which R 4 , R 5 and R 6 , identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydroxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a residue ZW-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 -) n - N - A1 CH 2 -V- A2 or - (-CH 2 -CH-) n -
CO-V- dans lesquels V et W identiques ou différents représentent une liaison -O-,-S-, ou -NH-, Z peut prendre les significations de R3, Ri et R2, et n peut prendre les valeurs de 1 à 500 et Ai et A2 identiques ou différents représentent un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou acyle linéaire ou ramifié renfermant de 2 à 5 atomes de carbone. CO-V- in which V and W identical or different represent a bond -O -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2 , and n can take the values of 1 at 500 and Ai and A 2 identical or different represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl radical containing from 2 to 5 carbon atoms.
8. Composé de formule (I) selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, dans laquelle représente R3 représente un groupement cationique, par exemple un groupement phosphonium ou NR4R5R6 tel que défini dans la revendiaction 1 , et le contre-ion est choisi parmi les anions tosylate, halogénure, nitrate, sulfate, sulfonate, et thiosulfate. 8. Compound of formula (I) according to any one of claims 1 to 7, in which represents R 3 represents a group cationic, for example a phosphonium or NR 4 R 5 R 6 group as defined in claim 1, and the counterion is chosen from tosylate, halide, nitrate, sulfate, sulfonate, and thiosulfate anions.
9. Composé selon l'une quelconque des revendications 6 à 8, caractérisé en ce B représente l'uracile ou l'adénine, X représente un atome d'oxygène, et R3 représente un radical phosphocholine,9. Compound according to any one of claims 6 to 8, characterized in that B represents uracil or adenine, X represents an oxygen atom, and R 3 represents a phosphocholine radical,
O-éthylphosphocholine ou triméthylamine. O-ethylphosphocholine or trimethylamine.
10. Composé selon l'une quelconque des revendications 6 à 8, choisi parmi : - le 2', 3'- hentriacontan-16-onide-5'-( phosphocholine) uridine le 2', 3'- hentriacontan-16-onide-5'-( phosphocholine) adénine le tosylate de 2',3'-hentriacontan-16-onide-5'-(N,N,N-triméthylammonium) uridine le tosylate de 2',3'-hentriacontan-16-onide-5'-(O-éthylphosphocholine) uridine 11. Procédé de préparation d'un composé de formule (I) tel que défini à l'une des revendications 1 à 5, ainsi que de ses sels, dans laquelle Li et L2, identiques représentent un groupement oxycarbonyl, thiocarbonyl, carbamate, ou carbonate et R3 représente un groupement NH-R , NR4R5 ou NR4R5R6 dans lesquels R , R5 et R6, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou R3 représente un reste cyclodextrine ou un reste Z-W-CO-CH2-CH2-(-N-CO-CH2-CH2-)n- N - Ai CH2-V- A2 ou -(-CH2-CH-)n- I CO-V- dans lesquels V et W identiques ou differents-représentent une liaison -0-,-S-, ou -NH-, Z peut prendre les significations de R3, Ri et R2, n peut prendre les valeurs de 1 à 500 et Ai et A2 identiques ou différents représentent un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou acyle linéaire ou ramifié renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, caractérisé en ce que l'on fait réagir un dérivé de formule (II) (il) dans laquelle B et X ont la signification déjà indiquée, avec l'acétone pour obtenir un composé de formule (III)10. Compound according to any one of claims 6 to 8, chosen from: - 2 ', 3'- hentriacontan-16-onide-5' - (phosphocholine) uridine 2 ', 3'- hentriacontan-16-onide -5 '- (phosphocholine) adenine 2', 3'-hentriacontan-16-onide-5 'tosylate - (N, N, N-trimethylammonium) uridine 2', 3'-hentriacontan-16-onide tosylate -5 '- (O-ethylphosphocholine) uridine 11. Process for the preparation of a compound of formula (I) as defined in one of claims 1 to 5, as well as its salts, in which Li and L 2 , identical represent an oxycarbonyl, thiocarbonyl, carbamate or carbonate group and R 3 represents an NH-R, NR 4 R 5 or NR 4 R 5 R 6 group in which R, R 5 and R 6 , identical or different, represent an atom d hydrogen or a linear or branched alkyl radical containing 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a residue ZW-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 - ) n - N - Ai CH 2 -V- A 2 or - (- CH 2 -CH-) n - I CO-V- in which V and W identical or different-represent a bond -0 -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2 , n can take the values of 1 at 500 and Ai and A 2 identical or different represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl radical containing from 2 to 5 carbon atoms, characterized in that a derivative is reacted of formula (II) (II) in which B and X have the meaning already indicated, with acetone to obtain a compound of formula (III)
(m) (M)
dans laquelle B et X ont la signification déjà indiquée, que l'on fait réagir avec un agent d'activation d'un hydroxyle comme un halogénure de sulfonyle, pour obtenir un composé de formule (IV)in which B and X have the meaning already indicated, which is reacted with an activating agent of a hydroxyl such as a sulfonyl halide, to obtain a compound of formula (IV)
dans laquelle B et X ont la signification déjà indiquée et Ts représente un reste d'un agent d'activation d'un hydroxyle comme un reste tosyle ou mésyle, que l'on fait réagir que l'on fait réagir en milieu acide puis avec un composé de formule R Lι-R7 (V) ou R2-L2-R7 (V') dans laquelle R1 ( R2, Li et L2 ont la signification déjà indiquée et R7 représente un reste d'un agent activant tel que le carbonyl diimidazole, le dicyclohexylcarbodiimide, l'hydroxybenzotriazole, ou le thiocarbonyldiimidazole, ou un atome d'halogène, pour obtenir un composé de formule (VI) in which B and X have the meaning already indicated and Ts represents a residue of an activating agent of a hydroxyl such as a tosyl or mesyl residue, which is reacted which is reacted in an acid medium and then with a compound of formula R Lι-R 7 (V) or R 2 -L 2 -R 7 (V ') in which R 1 ( R 2 , Li and L 2 have the meaning already indicated and R7 represents a residue of activating agent such as carbonyl diimidazole, dicyclohexylcarbodiimide, hydroxybenzotriazole, or thiocarbonyldiimidazole, or a halogen atom, to obtain a compound of formula (VI)
que l'on fait réagir avec un composé de formule (VII)which is reacted with a compound of formula (VII)
dans laquelle R4, R et Rβ, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, ou hydoxyalkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, pour obtenir le composé de formule (I) attendu que l'on isole si désiré. 12. Procédé de préparation d'un composé de formule (I) tel que défini à l'une des revendications 1 à 5, ainsi que de ses sels, dans laquelle Li et L2, identiques représentent un groupement oxycarbonyl, thiocarbonyl, carbamate, ou carbonate et R3 représente un groupement phosphate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidyléthaloamine, O- alkylphosphatidyléthaloamine, O-alkylphosphate, phosphonate, thiophosphate ou phosphonium, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (III) ci-dessus avec un composé de formule (VIT) in which R 4 , R and Rβ, identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydoxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, to obtain the compound of formula (I) expected as we isolate if desired. 12. Process for the preparation of a compound of formula (I) as defined in one of claims 1 to 5, as well as of its salts, in which Li and L 2 , which are identical, represent an oxycarbonyl, thiocarbonyl, carbamate group, or carbonate and R3 represents a phosphate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidylethaloamine, O- alkylphosphatidylethaloamine, O-alkylphosphate, phosphonate, thiophosphate or phosphonium group, characterized in that a compound of formula (III) above is reacted with a compound of formula (VIT)
dans laquelle X représente un atome d'oxygène ou de soufre, R8 et Rg identiques ou différents représentent un radical, alkyle ou O-alkyle linéaire, cyclique ou ramifié renfermant de 1 à 20 atomes de carbone et Hal représente un atome d'halogène, pour obtenir un composé de formule (VIII) dans laquelle B a la signification déjà indiquée et R3 représente un groupement phosphate, O-alkylphosphate, phosphonate, thiophosphate ou phosphonium, que l'on fait réagir le cas échéant avec une trialkylamine de formule (VII) telle que définie plus haut, pour obtenir un composé de formule (VIII) dans laquelle R3 représente un groupement phosphatidylcholine ou phosphatidyléthanolamine, que l'on fait ensuite réagir en milieu acide puis avec un composé de formule Rι-Lι-R7 (V) ou R2-L2-R7 (V) dans lesquelles R1 f R2, Li et L2 ont la signification déjà indiquée et R7 représente un agent activant, pour obtenir le composé de formule (I) attendu que l'on isole si désiré ; puis, si ont veut obtenir un composé de formule (I) dans laquelle B a la signification déjà indiquée et R3 représente un groupement O-alkyl phosphatidylcholine ou O-alkyl phosphatidyléthanolamine, on fait réagir un composé de formule R10-J, dans laquelle R10 représente une chaîne alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 10 atomes de carbone et J un groupement activant avec un composé (I) dans laquelle B a la signification déjà indiquée et R3 représente un groupement phosphatidylcholine ou phosphatidyléthanolamine. 13. Procédé de préparation des nouveaux composés de formule (I) selon l'une quelconque des revendications 6 à 10, ainsi que de leurs sels, dans laquelle L1 et L2, ensemble, forment un groupement cétal ou thiocétal, dans laquelles R3 représente un groupement NH-R4, NR4R5 ou NR R5R6 dans lesquels R4, R5 et Rβ, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou R3 représente un reste cyclodextrine ou un reste Z-W-CO-CH2-CH2-(- N-CO-CH2-CH2-)n- N - Ai I I CH2-V- A2 ou -(-CH2-CH-)n- I CO-V- dans lesquels V et W identiques ou differents-représentent une liaison -0-,-S-, ou -NH-, Z peut prendre les significations de R3, Ri et R2, n peut prendre les valeurs de 1 à 500 et Ai et A2 identiques ou différents représentent un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou acyle linéaire ou ramifié renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, caractérisé en ce que l'on fait réagir un dérivé de formule (II) in which X represents an oxygen or sulfur atom, R 8 and R g identical or different represent a radical, linear or cyclic or branched alkyl or O-alkyl containing from 1 to 20 carbon atoms and Hal represents an atom halogen, to obtain a compound of formula (VIII) in which B has the meaning already indicated and R 3 represents a phosphate, O-alkylphosphate, phosphonate, thiophosphate or phosphonium group, which is reacted if necessary with a trialkylamine of formula (VII) as defined above, for obtaining a compound of formula (VIII) in which R 3 represents a phosphatidylcholine or phosphatidylethanolamine group, which is then reacted in an acid medium and then with a compound of formula Rι-Lι-R 7 (V) or R 2 -L 2 -R 7 (V) in which R 1 f R 2 , Li and L 2 have the meaning already indicated and R 7 represents an activating agent, to obtain the compound of formula (I) expected which is isolated if desired; then, if we want to obtain a compound of formula (I) in which B has the meaning already indicated and R 3 represents an O-alkyl phosphatidylcholine or O-alkyl phosphatidylethanolamine group, a compound of formula R1 0 -J is reacted in which R1 0 represents a linear or branched alkyl chain containing from 1 to 10 carbon atoms and J an activating group with a compound (I) in which B has the meaning already indicated and R 3 represents a phosphatidylcholine or phosphatidylethanolamine group. 13. Process for the preparation of the new compounds of formula (I) according to any one of claims 6 to 10, as well as their salts, in which L 1 and L 2 , together, form a ketal or thiocetal group, in which R 3 represents an NH-R 4 , NR 4 R 5 or NR R 5 R 6 group in which R 4 , R5 and Rβ, identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 atoms carbon, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a ZW-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 -) n - N - Ai II CH 2 -V- A 2 or - (- CH 2 -CH-) n - I CO-V- in which V and W which are identical or different - represent a bond -0 -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2 , n can take the values from 1 to 500 and Ai and A 2 identical or different represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl containing from 2 to 5 carbon atoms , characterized in that a derivative of formula (II) is reacted
(H) dans laquelle B et X sont tels que définis dans la revendication 1 , avec une cétone de formule Rι-CO-R2 ou un diméthoxycétal de formule R C(OMe)2-R2 pour obtenir un composé de formule (III') (H) in which B and X are as defined in claim 1, with a ketone of formula Rι-CO-R 2 or a dimethoxyketal of formula RC (OMe) 2 -R 2 to obtain a compound of formula (III ' )
(III') que l'on fait réagir avec un agent d'activation d'un hydroxyle comme un halogénure de sulfonyle, pour obtenir un composé de formule (IV)' (III ') which is reacted with an activating agent of a hydroxyl such as a sulfonyl halide, to obtain a compound of formula (IV)'
dans laquelle Ts représente un reste d'un agent d'activation d'un hydroxyle, que l'on fait réagir avec un composé de formule (VII) tel que défini précédemment R, in which Ts represents a residue of a hydroxyl activating agent, which is reacted with a compound of formula (VII) as defined above R
-N. R6 R5 (VII) dans laquelle R4, R5 et R6, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou hydoxyalkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, pour obtenir le composé de formule (I) dans laquelle Li et L2, ensemble, forment un groupement cétal ou thiocétal ou de attendu, que l'on isole si désiré. 14. Procédé de préparation d'un composé de formule (I) dans laquelle Li et L2, ensemble, forment un groupement cétal ou thiocétal selon l'une quelconque des revendications 6 à 10, ainsi que de ses sels, dans lesquelles R3 représente un groupement phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidyléthanolamine, O- alkyl-phosphatidyléthanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate ou phosphonium, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (III')-NOT. R 6 R 5 (VII) in which R 4 , R 5 and R 6 , which are identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydoxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, to obtain the compound of formula (I) in which Li and L 2 , together, form a ketal or thiocetal or expected group, which is isolated if desired. 14. Process for the preparation of a compound of formula (I) in which Li and L 2 , together, form a ketal or thiocetal group according to any one of claims 6 to 10, as well as its salts, in which R 3 represents a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, O-alkyl-phosphatidylethanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate or phosphonium group, characterized in that a compound of formula (III ') is reacted
('"') avec un composé de formule (VII') ('"' ) with a compound of formula (VII ')
R8 — P — Hal R9 (VII') dans laquelle X représente un atome d'oxygène ou de soufre, R8 et Rg, identiques ou différents, représentent un radical, alkyle ou O-alkyle linéaire, cyclique ou ramifié renfermant de 1 à 20 atomes de carbone et Hal représente un atome d'halogène, pour obtenir un composé de formule (I) ou (la) dans laquelle L1 et L2, ensemble, forment un groupement cétal ou thiocétal attendu dans laquelle B a la signification déjà indiquée et R3 représente un groupement phosphate, O-alkylphosphate, phosphonate, thiophosphate ou phosphonium, que l'on fait réagir le cas échéant avec une trialkylamine de formule (VII) telle que définie plus haut, pour obtenir un composé de formule (la) dans laquelle R3 représente un groupe phosphatidylcholine ou phosphatidyléthaloamine, que l'on isole si désiré ; puis, si on veut obtenir un composé de formule (la) dans laquelle B à la signification déjà indiquée et R3 représente un groupement O-alkylphosphatidylcholine ou O-alkylphosphatidyléthanolamine, on fait réagir un composé de formule R10-J, dans laquelle R10 représente une chaîne alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 10 atomes de carbone et J est un groupement activant, avec un composé (la) dans laquelle B a la signification déjà indiquée et R3 représente un groupement phosphatidylcholine ou phosphatidyléthanolamine. 15. Utilisation des composés de formule (I)R 8 - P - Hal R 9 (VII ') in which X represents an oxygen or sulfur atom, R 8 and Rg, identical or different, represent a radical, linear or cyclic or branched alkyl or O-alkyl containing 1 to 20 carbon atoms and Hal represents a halogen atom, to obtain a compound of formula (I) or (la) in which L 1 and L 2 , together, form an expected ketal or thioketal group in which B has the meaning already indicated and R 3 represents a phosphate, O-alkylphosphate, phosphonate, thiophosphate or phosphonium group, which is reacted if necessary with a trialkylamine of formula (VII) as defined above, for obtaining a compound of formula (la) in which R 3 represents a phosphatidylcholine or phosphatidylethaloamine group, which is isolated if desired; then, if a compound of formula (la) is to be obtained in which B has the meaning already indicated and R 3 represents an O-alkylphosphatidylcholine or O-alkylphosphatidylethanolamine group, a compound of formula R 10 -J is reacted, in which R 10 represents a linear or branched alkyl chain containing from 1 to 10 carbon atoms and J is an activating group, with a compound (la) in which B has the meaning already indicated and R 3 represents a phosphatidylcholine or phosphatidylethanolamine group. 15. Use of the compounds of formula (I)
dans laquelle X représente un atome d'oxygène, de soufre, ou un groupe -CH2-, B représente une base purique ou pyrimidique, éventuellement substituée, ou encore une base héterocylique mono-ou bi-cyclique non naturelle dont chaque cycle comporte 4 à 7 chaînons, éventuellement substituée, - L1 et L2, identiques ou différents, représentent un groupement oxycarbonyl -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, un atome d'oxygène, ou encore, Li et L2ι ensemble, forment un groupement cétal de formule in which X represents an oxygen or sulfur atom, or a group -CH 2 -, B represents a purine or pyrimidine base, optionally substituted, or an unnatural mono-or bi-cyclic heterocylic base each cycle of which comprises 4 with 7 links, optionally substituted, - L 1 and L 2 , identical or different, represent an oxycarbonyl group -O-CO-, thiocarbamate -O-CS-NH-, carbonate -O-CO-O-, carbamate -O-CO-NH-, an oxygen atom, or Li and L 2ι together form a ketal group of formula
ou un groupement thiocétal de formule or a thiocetal group of formula
Ri et R2, identiques ou différents représentent une chaîne alkyle linéaire ou ramifiée renfermant de 2 à 30 atomes de carbone, de préférence de 6 à 25 atomes de carbone, notamment de 8 à 25 atomes de carbone, saturée ou partiellement insaturée, éventuellement totalement ou partiellement fluorée, éventuellement substituée sur le carbone d'extrémité de chaîne par un atome de fluor ou par un ester ou éther benzylique ou naphtylique et R3 représente un groupement hydroxy, amino, un groupement phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine, phosphatidyléthanolamine, O-alkyl-phosphatidyléthanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate , phosphonium, un groupement NH2-R4, NHR4R5 ou NR4R5R6 dans lesquels R4, R5 et Re, identiques ou différents représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou hydroxyalkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone, ou R3 représente un reste cyclodextrine ou un reste Z-W-CO-CH2-CH2-(-N-CO-CH2-CH2-)n- N - A-, I I CH2-V- A2 ou -(-CH2-CH-)n- CO-V- dans lesquels V et W identiques ou différents représentent une liaison -0-,-S-, ou -NH-, Z peut prendre les significations de R3, Ri et R2, et n peut prendre les valeurs de 1 à 500 et Ai et A2 identiques ou différents représentent un radical alkyle linéaire ou ramifié renfermant de 1 à 5 atomes de carbone ou acyle linéaire ou ramifié renfermant de 2 à 5 atomes de carbone, pour le transport et/ou la délivrance de molécules ou de macromolécules biologiquement actives. 16. Utilisation selon la revendication 15, caractérisée en ce que le composé de formule (I) est sous forme d'un assemblage supramoléculaire tel que des micelles, des micelles inversées, des liposomes, phases hexagonales, phases gel, toroïdes, émulsions, micro émulsions, hélices, tubes, fibres ou disques, seul ou en combinaison avec un principe actif ou un matériel génétique. 17. Utilisation selon la revendication 16, caractérisée en ce que ledit assemblage supramoléculaire est un gel. 18. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 15 à 17, caractérisée en ce que lesdites molécules ou de macromolécules biologiquement actives sont choisies parmi des principes actifs, des acides nucléiques tels que des molécules d'ADN ou d'ARN, d'ADN anti-sens, de PNA, d'ARN messager, d'ARN interférence (siRNA's), des plasmides, des oligonucléotides duplex, des oligonucléotides simple brin, des oligonucléotides triplex, des peptides et des polysaccharides. 19. Une composition pharmaceutique, renfermant un principe actif et un composé de formule (I) tel que défini dans la revendication 15. 20. Une composition pharmaceutique, renfermant un principe actif et un composé de formule (I) tel que défini dans l'une quelconque des revendication 1 à 10. 21. Une composition pharmaceutique selon les revendications 19 ou 20, caractérisée en ce que ledit composé de formule (I) est sous forme d'un assemblage supramoléculaire tel que des micelles, des micelles inversées, des liposomes, phases hexagonales, phases gel, toroïdes, émulsions, micro émulsions, hélices, tubes, fibres ou disques. 22. Une composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications 19 à 21 , caractérisée en ce qu'elle renferme un composé de formule (I) à une concentration en poids allant de 0,05 à 5 %. 23. Une composition pour le transfert de gènes comprenant un gène et un composé de formule (I) telle que définie dans la revendication 15. 24. Une composition pour le transfert de gènes comprenant un gène et un composé de formule (I) telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 10. 25. Une composition pour le transfert de gènes selon l'une des revendications 23 ou 24, caractérisée en ce que ledit composé de formule (I) est sous forme d'un assemblage supramoléculaire tel que des micelles, des micelles inversées, des liposomes, phases hexagonales, phases gel, toroïdes, émulsions, micro émulsions, hélices, tubes, fibres ou disques. 26. Un procédé pour le transfert de gènes dans lequel on transfère un gène dans un organisme hôte à l'aide d'un composé de formule (I) telle que définie dans la revendication 15. 27. Un procédé pour le transfert de gènes dans lequel on transfère un gène dans un organisme hôte à l'aide d'un composé de formule (I) telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 10. 28. Un procédé pour le transfert de gènes selon l'une des revendications 26 ou 27, caractérisé en ce que ledit composé de formule (I) est sous forme d'un assemblage supramoléculaire tel que des micelles, des micelles inversées, des liposomes, phases hexagonales, phases gel, toroïdes, émulsions, micro émulsions, hélices, tubes, fibres ou disques. 29. Un procédé selon la revendication 28, caractérisé en ce que ledit assemblage supramoléculaire est un gel. 30. Un procédé pour le transfert de gènes selon l'une quelconque des revendications 27 à 29, caractérisé en ce qu'il s'agit de la transfection de cellules non adhérentes. 31. Assemblages supramoléculaire tels que des micelles, des micelles inversées, des liposomes, phases hexagonales, phases gel, toroïdes, émulsions, micro émulsions, hélices, tubes, fibres ou disques, comprenant un composé de formule (I) telle que définie dans la revendication 15, seul ou en combinaison avec un principe actif ou un matériel génétique. 32 Assemblage supramoléculaire selon la revendication 31, caractérisé en ce qu'il comprend un composé de formule (I) telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 10. 33. Utilisation d'un assemblage supramoléculaire selon l'une des revendication 31 ou 32, pour complexer des sels d'actinides ou de lanthanides, en particulier des sels de cérium, de thorium ou d'uranium. 34. Utilisation d'un composé de formule (I) telle que définie dans la revendication 16 comme structure porteuse d'une sonde luminescente. 35. Utilisation d'un composé de formule (I) telle que définie dans l'une quelconque des revendication 1 à 10 en tant que précurseurs de principe actif . Ri and R 2 , identical or different, represent a linear or branched alkyl chain containing from 2 to 30 carbon atoms, preferably from 6 to 25 carbon atoms, in particular from 8 to 25 carbon atoms, saturated or partially unsaturated, possibly totally or partially fluorinated, optionally substituted on the chain end carbon by a fluorine atom or by a benzyl or naphthyl ester or ether and R 3 represents a hydroxy, amino group, a phosphate, phosphonate, phosphatidylcholine, O-alkylphosphatidylcholine group, phosphatidylethanolamine, O-alkyl-phosphatidylethanolamine, O-alkylphosphate, thiophosphate, phosphonium, a group NH 2 -R 4 , NHR 4 R 5 or NR 4 R 5 R 6 in which R 4 , R 5 and Re, which are identical or different, represent a hydrogen atom or a linear or branched alkyl or hydroxyalkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms, or R 3 represents a cyclodextrin residue or a Z residue W-CO-CH 2 -CH 2 - (- N-CO-CH 2 -CH 2 -) n - N - A-, II CH 2 -V- A 2 or - (- CH 2 -CH-) n - CO-V- in which V and W identical or different represent a bond -0 -, - S-, or -NH-, Z can take the meanings of R 3 , Ri and R 2 , and n can take the values from 1 to 500 and Ai and A 2 which are identical or different, represent a linear or branched alkyl radical containing from 1 to 5 carbon atoms or linear or branched acyl radical containing from 2 to 5 carbon atoms, for the transport and / or the delivery of biologically active molecules or macromolecules. 16. Use according to claim 15, characterized in that the compound of formula (I) is in the form of a supramolecular assembly such as micelles, inverted micelles, liposomes, hexagonal phases, gel phases, toroids, emulsions, micro emulsions, propellers, tubes, fibers or discs, alone or in combination with an active ingredient or genetic material. 17. Use according to claim 16, characterized in that said supramolecular assembly is a gel. 18. Use according to any one of claims 15 to 17, characterized in that said biologically active molecules or macromolecules are chosen from active principles, nucleic acids such as DNA or RNA, DNA molecules antisense, PNA, messenger RNA, interference RNA (siRNA's), plasmids, duplex oligonucleotides, single-stranded oligonucleotides, triplex oligonucleotides, peptides and polysaccharides. 19. A pharmaceutical composition containing an active ingredient and a compound of formula (I) as defined in claim 15. 20. A pharmaceutical composition containing an active ingredient and a compound of formula (I) as defined in any one of claims 1 to 10. 21. A pharmaceutical composition according to claims 19 or 20, characterized in that said compound of formula (I) is in the form of a supramolecular assembly such as micelles, inverted micelles, liposomes , hexagonal phases, gel phases, toroids, emulsions, microemulsions, propellers, tubes, fibers or discs. 22. A pharmaceutical composition according to any one of claims 19 to 21, characterized in that it contains a compound of formula (I) at a concentration by weight ranging from 0.05 to 5%. 23. A composition for gene transfer comprising a gene and a compound of formula (I) as defined in claim 15. 24. A composition for gene transfer comprising a gene and a compound of formula (I) as defined in any one of claims 1 to 10 25. A composition for gene transfer according to one of claims 23 or 24, characterized in that said compound of formula (I) is in the form of a supramolecular assembly such as micelles, inverted micelles, liposomes. , hexagonal phases, gel phases, toroids, emulsions, microemulsions, propellers, tubes, fibers or discs. 26. A method for the transfer of genes in which a gene is transferred into a host organism using a compound of formula (I) as defined in claim 15. 27. A method for the transfer of genes into which one transfers a gene into a host organism using a compound of formula (I) as defined in any one of claims 1 to 10. 28. A method for the transfer of genes according to one of Claims 26 or 27, characterized in that said compound of formula (I) is in the form of a supramolecular assembly such as micelles, inverted micelles, liposomes, hexagonal phases, gel phases, toroids, emulsions, microemulsions, helices , tubes, fibers or discs. 29. A method according to claim 28, characterized in that said supramolecular assembly is a gel. 30. A method for the transfer of genes according to any one of claims 27 to 29, characterized in that it is the transfection of nonadherent cells. 31. Supramolecular assemblies such as micelles, inverted micelles, liposomes, hexagonal phases, gel phases, toroids, emulsions, microemulsions, helices, tubes, fibers or discs, comprising a compound of formula (I) as defined in claim 15, alone or in combination with an active ingredient or genetic material. 32 Supramolecular assembly according to claim 31, characterized in that it comprises a compound of formula (I) as defined in any one of claims 1 to 10. 33. Use of a supramolecular assembly according to one claims 31 or 32, for complexing salts of actinides or lanthanides, in particular salts of cerium, thorium or uranium. 34. Use of a compound of formula (I) as defined in claim 16 as a support structure for a luminescent probe. 35. Use of a compound of formula (I) as defined in any one of claims 1 to 10 as precursors of active principle.
EP05767494A 2004-04-29 2005-04-27 Novel amphiphilic compounds, preparation method thereof and applications of same Withdrawn EP1745061A1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0404554A FR2869616B1 (en) 2004-04-29 2004-04-29 NOVEL AMPHIPHILIC COMPOUNDS, PROCESS FOR THEIR PREPARATION AND THEIR APPLICATIONS IN PARTICULAR FOR TRANSFECTION
PCT/FR2005/001042 WO2005116043A1 (en) 2004-04-29 2005-04-27 Novel amphiphilic compounds, preparation method thereof and applications of same

Publications (1)

Publication Number Publication Date
EP1745061A1 true EP1745061A1 (en) 2007-01-24

Family

ID=34946821

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EP05767494A Withdrawn EP1745061A1 (en) 2004-04-29 2005-04-27 Novel amphiphilic compounds, preparation method thereof and applications of same

Country Status (3)

Country Link
EP (1) EP1745061A1 (en)
FR (1) FR2869616B1 (en)
WO (1) WO2005116043A1 (en)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2924430B1 (en) * 2007-11-30 2010-03-19 Univ Bordeaux 2 PROCESS FOR THE PREPARATION OF NANOPARTICLES BASED ON FUNCTIONAL AMPHIPHILIC MOLECULES OR MACROMOLECULES AND THEIR USE
FR2945946B1 (en) 2009-05-29 2011-08-26 Univ Victor Segalen Bordeaux 2 MULTI-COMPARTMENT FORMULATIONS BASED ON FUNCTIONAL AMPHIPHILIC MOLECULES OR MACROMOLECULES
EP2691118B1 (en) * 2011-03-31 2019-05-01 Schäfer, Konstanze Perfluorinated compounds for the non-viral transfer of nucleic acids
FR2985916B1 (en) 2012-01-25 2015-12-04 Univ Bordeaux Segalen HYDROGEL DECONTAMINATION OF AQUEOUS SAMPLES CONTAINING NANOPARTICLES
EP3085360A1 (en) 2015-04-20 2016-10-26 Universite De Bordeaux Lipid based nanocarrier compositions loaded with metal nanoparticles and therapeutic agent
EP3095790A1 (en) * 2015-05-22 2016-11-23 Universite De Bordeaux Nucleoside-lipid compounds with ph-sensitive dialkylorthoester chains and their use for transportation or vectorization of at least one therapeutic agent
EP3502684A1 (en) 2017-12-22 2019-06-26 Universite De Bordeaux Method for metal ion detection in aqueous solutions using nucleolipid compounds
FR3078064A1 (en) 2018-02-22 2019-08-23 Universite de Bordeaux PROCESS FOR DECONTAMINATING AN AQUEOUS LIQUID MEDIUM CONTAINING MICROPOLLUTANTS
WO2022194926A1 (en) 2021-03-17 2022-09-22 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Nanoparticles comprising a core with a phenazine derivative and a shell with a nucleolipid and uses thereof
WO2023135299A1 (en) 2022-01-17 2023-07-20 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Oligonucleotide solid nucleolipid nanoparticles for tackling antibiotic resistance

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004052905A2 (en) * 2002-12-10 2004-06-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral nucleoside derivatives

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2626792A1 (en) * 1976-06-15 1977-12-29 Kowa Co Adenosine-5'-phosphoric acid derivs. and their salts - prepd. by acylating adenosine-5'-phosphate and opt. desalting or salt exchanging
WO2005007810A2 (en) * 2003-06-16 2005-01-27 Grinstaff Mark W Functional synthetic molecules and macromolecules for gene delivery

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004052905A2 (en) * 2002-12-10 2004-06-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral nucleoside derivatives

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LOUIS MOREAU ET AL: "Nucleoside phosphocholine amphiphile for in vitro DNA transfection", MOLECULAR BIOSYSTEMS, vol. 1, no. 3, 1 January 2005 (2005-01-01), pages 260, XP055214110, ISSN: 1742-206X, DOI: 10.1039/b503302k *
See also references of WO2005116043A1 *

Also Published As

Publication number Publication date
FR2869616A1 (en) 2005-11-04
WO2005116043A1 (en) 2005-12-08
FR2869616B1 (en) 2008-10-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2005116043A1 (en) Novel amphiphilic compounds, preparation method thereof and applications of same
EP3615510B1 (en) Novel carbonyl lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids
CA2805761C (en) Nanoparticles of gemcitabine derivatives
JP2021521140A (en) Oligonucleotide composition and its usage
BR112021010853A2 (en) MODIFIED AMINE LIPIDS
EP0541467B1 (en) Utilisation of amphiphilic alkyldiamides compounds with two sugar groups for the preparation of surface-active compositions
JP2010018625A (en) Phospholipid-like compound
EP2435031B1 (en) Functional amphiphilic molecule or macromolecule formulations with multiple compartments
EP2297176B1 (en) Novel nucleic acid transfer system
FR2924430A1 (en) PROCESS FOR THE PREPARATION OF NANOPARTICLES BASED ON FUNCTIONAL AMPHIPHILIC MOLECULES OR MACROMOLECULES AND THEIR USE
WO2016152980A1 (en) Oligonucleotide derivative, oligonucleotide construct using same, and methods for producing these
CA2292837A1 (en) Novel class of nucleic acid cationic transfecting agents
JPH11507031A (en) Thiocationic lipids, pharmaceutical compositions and methods of using the same
FR2987359A1 (en) DIAMINOPHENOTHIAZINIUM DERIVATIVES FOR THE MARKING OF BIOMOLECULES, PROCESS AND MARKING MEDIUM OF OLIGONUCLEOTIDES AND OLIGONUCLEOTIDES OBTAINED
JP6779916B2 (en) Its use for transporting or vectorizing nucleoside-lipid compounds with pH sensitive dialkyl orthoester chains and at least one therapeutic agent
CA2353576A1 (en) Novel nucleic acid transferring agents, compositions containing them and uses

Legal Events

Date Code Title Description
PUAI Public reference made under article 153(3) epc to a published international application that has entered the european phase

Free format text: ORIGINAL CODE: 0009012

17P Request for examination filed

Effective date: 20061122

AK Designated contracting states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HU IE IS IT LI LT LU MC NL PL PT RO SE SI SK TR

DAX Request for extension of the european patent (deleted)
RIN1 Information on inventor provided before grant (corrected)

Inventor name: BARTHELEMY, PHILIPPE

Inventor name: MOREAU, LOUIS

Inventor name: CAMPLO, MICHEL

Inventor name: GRINSTAFF, MARK, W.

17Q First examination report despatched

Effective date: 20110506

STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: THE APPLICATION IS DEEMED TO BE WITHDRAWN

18D Application deemed to be withdrawn

Effective date: 20180929