EP1322172A1 - Controle biologique de la contamination fongique par l'application de geotrichum candidum - Google Patents

Controle biologique de la contamination fongique par l'application de geotrichum candidum

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EP1322172A1
EP1322172A1 EP01965335A EP01965335A EP1322172A1 EP 1322172 A1 EP1322172 A1 EP 1322172A1 EP 01965335 A EP01965335 A EP 01965335A EP 01965335 A EP01965335 A EP 01965335A EP 1322172 A1 EP1322172 A1 EP 1322172A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
geotrichum candidum
spraying
fungicide
mycotoxins
spores
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP01965335A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Patrick Boivin
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
INSTITUT FRANCAIS DES BOISSONS de la BRASSERIE MALTERIE
Original Assignee
INSTITUT FRANCAIS DES BOISSONS de la BRASSERIE MALTERIE
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Filing date
Publication date
Application filed by INSTITUT FRANCAIS DES BOISSONS de la BRASSERIE MALTERIE filed Critical INSTITUT FRANCAIS DES BOISSONS de la BRASSERIE MALTERIE
Publication of EP1322172A1 publication Critical patent/EP1322172A1/fr
Withdrawn legal-status Critical Current

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Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/30—Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A01N63/32—Yeast

Definitions

  • the invention relates to the application of a microorganism, Geotrichum candidum. in the form of a field spray, for the treatment of cereals contaminated by mold, in particular by Fusarium strains.
  • the present invention will find its application in the field of agriculture.
  • Cereal diseases in particular fusarium head blight, are the cause of major damage: loss of yield, depreciation of the quality of the harvest with deterioration in the technological values of cereals. These plant diseases are also responsible for the biosynthesis of mycotoxins that are found on grains at harvest.
  • the main mycotoxins produced by Fusarium are trichothecenes type A and B (Deoxynivalenol, Nivalenol or T2-toxin for example), supplemented by zearalenone and fumonisins for corn.
  • the nature of the mycotoxins depends on the Fusarium species present. In particular, certain mycotoxins resist processing conditions and can thus be found in finished products. They therefore present a risk for food security. It is therefore important to prevent Fusarium head blight, mold contamination of the grain and the production of mycotoxins during the growing of grain.
  • the main known means of combating contamination by molds is the treatment of crops by the use of fungicides.
  • Fungicides are biologically active chemicals and their application in fields can therefore present toxicological and ecological risks.
  • the low stability of fungicide products requires regular renewal of treatments during the vegetation.
  • the treatment must also have a sufficiently broad spectrum of action while being limited to fungi.
  • the effectiveness of these treatments is not total on ears (20 to 80% efficiency) and weak on grains (0 to 30% efficiency).
  • recent observatories carried out on different lots of cereals show that a large part of the lots have after treatment a still significant mycotoxin content of several hundred micrograms per kg.
  • the present invention aims to inhibit the development of fungal flora and in particular Fusarium species contaminating the ears and grains, as well as the production of secondary metabolites fungi, such as mycotoxins.
  • the use of selected non-pathogenic microorganisms has been proposed to reduce the development of the fungal flora in malting.
  • lactic acid bacteria are used to reduce the development of the fungal flora and more specifically of Fusarium (WO 94/16053).
  • the use of the strain Geotrichum candidum naturally present on barley during germination and on finished malt has also been proposed, on the one hand, to inhibit the development of the toxicogenic flora during malting and on the other hand , to improve the biochemical and physicochemical quality of malt (WO 96/34085).
  • An advantage of the selected Geotrichum candidum strain is that it does not produce toxic and teratogenic substances for a vertebrate, nor substances exhibiting genotoxic activities.
  • the present invention results in particular from studies on the contamination of the ears by Fusarium as a function of spraying tests in a crop field of Geotrichum candidum. Interestingly, these studies have shown an inhibitory effect of Geotrichum candidum on contamination by fungi such as Fusarium sp. They also show a decrease in the presence of mycotoxins and an increase in crop yields in the open field. More specifically, the invention provides a method of preventing or treating contaminations of cereals by fungi or molds producing mycotoxins, comprising spraying in fields an aqueous suspension of spores of a microorganism of the family of Geotrichum candidum with the following characteristics:
  • Mycotoxin-producing fungi or molds are in particular of the Fusarium species.
  • an aqueous suspension of spores of a strain of Geotrichum candidum derived from yeasts used in malting is sprayed. More preferably, these spores come from one of the strains deposited on September 6, 1994 under Nos. 1.1474 and 1.1975.
  • the spores of Geotrichum candidum are produced by the SKW biosystems system (BP20 77260 LA FERTE-SOUS-JOUARRE).
  • the spores are conditioned in solution at an approximate concentration of 5 ⁇ 10 8 units forming a colony per ml, (FCU) called mother solution.
  • FCU colony per ml
  • the concentration of Geotrichum candidum is diluted in an aqueous solution in a ratio of 1 to
  • microorganisms such as lactic acid bacteria, having a known effect in the biological control of the development of pathogenic microorganisms, are associated with Geotrichum candidum in the aqueous suspension.
  • the spores of Geotrichum candidum are sown by spraying an aqueous spore suspension in the field using sprayers conventionally used for herbicide, fungicide or insecticide treatments of field crops.
  • the sowing period is chosen from the different stages of the vegetation (tillering, start of run, 1 knot, 2 knots, 3 knots, swelling, exit from last leaf, last leaf spread, bursting of the seed, heading and flowering).
  • the seeding is carried out at once or in several times, at the different stages of the vegetation. Preferably, the seeding is carried out all at once, at the earing-flowering stage of the development of the cereals.
  • the invention thus makes it possible to treat cereals contaminated with fungi.
  • the cereals processed are in particular wheat, barley, rye, oats, corn or triticale.
  • the spraying of a suspension of spores of the Geotrichum candidum family is associated with a fungicidal treatment.
  • the results provided in the experimental part of the present text show an optimum effectiveness in terms of reduction in the production of mycotoxins and yield of crops in the fields when the spraying is carried out in combination with a fungicide treatment.
  • the fungicidal treatment includes the use of any type of fungicidal product alone or in combination according to known methods allowing a reduction in contamination by the fungal flora or in the production of mycotoxins. Examples of fungicide products are azoxystobin, bromuconazole, tebuconazole, epoxyconazole or kresoxymethyl.
  • the fungicide treatment is preferably applied at the last leaf stage of the development of the cereal or at the flowering stage.
  • An example of a fungicide treatment carried out at the last leaf stage includes kresoximmethyl and epoxiconazole.
  • An example of a fungicide treatment carried out at the flowering stage includes azoxystobin and bromuconazole.
  • the fungicide can be applied separately to the aqueous suspension comprising the spores or directly added to the aqueous suspension of spores of Geotrichum candidum.
  • the invention therefore relates to the use of a microorganism from the family of Geotrichum candidum in the manufacture of a preparation capable of treating or preventing diseases resulting from the contamination of cultures by fungi or molds, in particular foot rot, powdery mildew, rust, septotriosis, helminthosporiosis, rynchosporosis and fusarium wilt.
  • the invention also relates to the use of a Geotrichum candidum microorganism in the manufacture of a preparation capable of decreasing by at least 30% and preferably at least 50% the production of mycotoxins when growing cereal crops, fruits, vegetables and vines.
  • the microorganisms of the Geotrichum candidum family are used in the preparation of aqueous spore suspensions allowing the spraying of 10 9 to 10 13 spores per hectare.
  • the use of a microorganism of the Geotrichum candidum family as described above is associated with one or more fungicides. More preferably, the associated fungicides are chosen from azoxystobin, bromuconazole, epoxyconazole, krezoxymethyl or a combination of these.
  • Biological control can also be achieved by the use of a combination of different microorganisms. Indeed, it may be advantageous to combine the inhibitory effects of several microorganisms when they are complementary, in particular a fungus and a bacterium.
  • the invention relates to the use of Geotrichum candidum in combination with other microorganisms, such as lactic acid bacteria, which can play a beneficial role in the biological control of contamination or the production of mycotoxins.
  • Example 1 Comparison of the Percentage of Fusarium and Geotrichum Contamination on the Cobs as a Function of the Treatment Method Chosen To quantify the effect of spraying a suspension of Geotrichum candidum. 1 liter of stock solution per hectare containing 5 ⁇ 10 11 spores per liter (malting yeast IFBM, product of SKW Biosystem) was sprayed after dilution at different stages of the vegetation in order to obtain an implantation of Geotrichum candidum on the cobs.
  • the fungicide treatment used is a spray treatment of 0.5 liters of azoxystobin at 250 g / l ("Amistar” from Zeneca-Sopra) and 0.6 liters of a mixture of bromuconazole at 167 g / l and tebuconazole at 107 g / l (“Soleil” by Rhône-Poulenc Agro).
  • Example 2 Comparison of the quantity of mycotoxins produced and the yields of the cultures according to the chosen treatment method
  • Tables 2 and 3 are intended to show the effect of the treatment of Geotrichum candidum on the reduction of the production of mycotoxins during vegetation. This demonstration is carried out through the assay of deoxynivalenoi, the mycotoxin produced by Fusarium. most encountered on cereals. The experiments were carried out on wheat crops in 100 m 2 test plots (Table 2) in combination with a fungicide treatment (Amistar and sun) and in the open field (several hectares) (Table 3) in combination with a fungicide treatment by spraying with epoxiconazole at 125 g / l and kresoximmethyl at 125 g / l (OGAM treatment by BASF). TABLE 2:

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Abstract

L'invention a trait à un procédé de prévention ou de traitement des contaminations de céréales ou des moisissures producteurs de mycotoxines par l'application d'un micro-organisme de la famille de <u>Geotricum candidum</u>, sous forme de pulvérisation en champs. Elle porte aussi sur l'utilisation d'un micro-organisme de la famille de <u>Geotricum candidum</u>.

Description

CONTROLE BIOLOGIQUE DE LA CONTAMINATION FONGIQUE PAR L'APPLICATION DE < I > GEOTRICHUM CANDIDUM </ 1 >
L'invention a trait à l'application d'un micro-organisme, Geotrichum candidum. sous forme de pulvérisation en champ, pour le traitement des céréales contaminées par des moisissures, en particulier par des souches de Fusarium.
La présente invention trouvera son application dans le domaine de l'agriculture.
Les maladies des céréales, en particulier les fusarioses des épis sont à l'origine de dommages importants : perte de rendement, dépréciation de la qualité de la récolte avec altération des valeurs technologiques des céréales. Ces maladies des plantes sont aussi à l'origine de la biosynthèse de mycotoxines que l'on retrouve sur les grains à la récolte.
Il est en effet connu que toutes les céréales sont contaminées par des moisissures, en particulier des souches de Fusarium. Les principales espèces de Fusarium rencontrées sur les céréales sont les espèces graminearum, culmorum, sambucinum, poae, proliferatum, ou encore nivale. Les souches contaminant les céréales produisent des mycotoxines.
A titre d'exemple, les principales mycotoxines produites par Fusarium sont les trichothécènes de type A et B (Déoxynivalénol, Nivalénol ou T2-toxine par exemple), complémentées par la zéaralénone et les fumonisines pour le maïs. La nature des mycotoxines dépend des espèces de Fusarium présentes. En particulier, certaines mycotoxines résistent aux conditions de transformations et peuvent se retrouver ainsi dans les produits finis. Elles présentent alors un risque pour la sécurité alimentaire. Il est par conséquent important de prévenir la fusariose des épis, la contamination des grains par les moisissures et la production de mycotoxines au cours de la végétation des céréales.
Le principal moyen connu de lutte contre les contaminations par les moisissures est le traitement des cultures par l'utilisation de fongicides. Il reste que l'utilisation des fongicides en agriculture pose différents problèmes : Les fongicides sont des produits chimiques biologiquement actifs et leur application en champs peut donc présenter des risques toxicologiques et écologiques. D'autre part, la faible stabilité des produits fongicides nécessite le renouvellement régulier des traitements au cours de la végétation. Le traitement doit aussi avoir un spectre d'action suffisamment large tout en étant limité aux champignons. Enfin, l'efficacité de ces traitements n'est pas totale sur épis (20 à 80% d'efficacité) et faible sur grains (0 à 30% d'efficacité). De plus des observatoires menés récemment sur différents lots de céréales montrent qu'une grande partie des lots présentent après traitement une teneur en mycotoxines encore significative de plusieurs centaines de microgrammes par kg.
Il existe donc un réel besoin de développer des méthodes de traitements des contaminations par les moisissures qui constituent des alternatives aux méthodes de traitements par les fongicides.
Par l'ensemencement d'un micro-organisme non producteur de mycotoxines, la présente invention a pour but d'inhiber le développement de la flore fongique et en particulier des espèces Fusarium contaminant les épis et les grains, ainsi que la production de métabolites secondaires des champignons, tels que les mycotoxines.
Des méthodes de traitements similaires sont décrites dans l'état de la technique (W0 91/01641 , US 4,842,871, US 5,668,008) sous le nom de « contrôle biologique » et comprennent l'utilisation d'un micro-organisme non pathogène et non producteur de mycotoxines sur des produits de l'agriculture pour limiter le développement de flores microbiennes indésirables.
En particulier, l'utilisation de micro-organismes non pathogènes sélectionnés a été proposée pour réduire le développement de la flore fongique en malterie. Par exemple, des bactéries lactiques sont utilisées pour réduire le développement de la flore fongique et plus précisément de Fusarium (WO 94/16053). L'utilisation de la souche Geotrichum candidum naturellement présente sur l'orge en cours de germination et sur le malt fini a aussi été proposée, d'une part, pour inhiber le développement de la flore toxicogène au cours du maltage et d'autre part, pour améliorer la qualité biochimique et physico-chimique du malt (WO 96/34085). Un avantage de la souche Geotrichum candidum sélectionnée est qu'elle ne produit pas de substances toxiques et tératogènes pour un vertébré, ni de substances présentant des activités génotoxiques.
L'application de Geotrichum candidum en malterie n'était pas a priori transposable au champ en raison principalement des différences d'environnement et de méthodes d'ensemencement. Dans le cas de la malterie, l'ensemencement se fait en milieu liquide et en présence de nutriments organiques apportés principalement par les grains d'orge et à une température comprise entre 15 et 20°C. Au champ, l'ensemencement se fait par pulvérisation et dans des conditions atmosphériques variables.
La présente invention résulte en particulier d'études sur la contamination des épis par Fusarium en fonction d'essais de pulvérisation en champ de culture de Geotrichum candidum. De manière intéressante, ces études ont montré un effet inhibiteur de Geotrichum candidum sur la contamination par des champignons tels que Fusarium sp. Elles montrent aussi une diminution de la présence des mycotoxines et une augmentation des rendements des cultures en plein champ. Plus précisément, l'invention fournit un procédé de prévention ou de traitements des contaminations de céréales par des champignons ou des moisissures producteurs de mycotoxines comprenant la pulvérisation en champs d'une suspension aqueuse de spores d'un micro-organisme de la s famille de Geotrichum candidum possédant les caractéristiques suivantes :
- une absence d'activité mutagène mesurée par le test d'Ames,
- une absence de production de mycotoxines,
Des champignons ou des moisissures producteurs de mycotoxines sont notamment de l'espèce Fusarium.
Dans une forme préférée de l'invention, une suspension aqueuse de spores d'une souche de Geotrichum candidum issue de levures utilisées en malterie est pulvérisée. De manière encore préférée, ces spores sont issues de l'une des souches déposées le 6 septembre 1994 sous les n° 1.1474 et 1.1975.
Selon l'invention, les spores de Geotrichum candidum sont produites par le système SKW biosystems (BP20 77260 LA FERTE-SOUS- JOUARRE). Les spores sont conditionnées en solution à une concentration approximatives de 5x108 unités formant une colonie par ml, (FCU) appelée solution mère. Avant la pulvérisation, la concentration de Geotrichum candidum est diluée dans une solution aqueuse dans un rapport de 1 à
100.
Dans une autre forme de réalisation de l'invention, d'autres micro- organismes, tels que les bactéries lactiques, ayant un effet connu dans le contrôle biologique du développement de micro-organismes pathogènes, sont associés à Geotrichum candidum dans la suspension aqueuse.
L'ensemencement des spores de Geotrichum candidum s'effectue par pulvérisation en champ d'une suspension aqueuse de spores à l'aide de pulvérisateurs classiquement utilisés pour les traitements herbicides, fongicides ou insecticides des cultures en champs.
De 100 à 150 litres à l'hectare de dilution de la solution mère de spores de la famille de Geotrichum candidum sont pulvérisés. Ces valeurs correspondent à une pulvérisation de 109 à 1013 spores par hectare. La période d'ensemencement est choisie parmi les différents stades de la végétation (tallage, début montaison, 1 nœud, 2 nœuds, 3 nœuds, gonflement, sortie dernière feuille, dernière feuille étalée, éclatement de la graine, épiaison et floraison). L'ensemencement est réalisé en une seule fois ou en plusieurs fois, aux différents stades de la végétation. De manière préférée, l'ensemencement est réalisé en une seule fois, au stade épiaison- floraison du développement des céréales.
L'invention permet ainsi de traiter les céréales contaminées par des champignons. Les céréales traitées sont en particulier le blé, l'orge, le seigle, l'avoine, le maïs ou le triticale.
Dans une mise en œuvre particulière du procédé de l'invention, la pulvérisation d'une suspension de spores de la famille Geotrichum candidum est associée à un traitement fongicide. Les résultats fournis dans la partie expérimentale du présent texte montrent un optimum d'efficacité en terme de diminution de la production de mycotoxines et de rendement des cultures en champs lorsque la pulvérisation est réalisée en association avec un traitement fongicide. Le traitement fongicide comprend l'utilisation de tout type de produit fongicide seul ou en association selon des procédés connus permettant une diminution de la contamination par la flore fongique ou de la production de mycotoxines. Des exemples de produits fongicides sont l'azoxystobine, le bromuconazole, le tébuconazole, l'époxyconazole ou le kresoxyméthyle. Bien entendu, la liste des produits fongicides utilisables présenté ici n'est pas limitative. Le traitement fongicide est de préférence appliqué au stade dernière feuille du développement de la céréale ou au stade floraison. Un exemple de traitement fongicide réalisé au stade dernière feuille comprend du kresoximméthyl et de l'époxiconazole. Un exemple de traitement fongicide réalisé au stade floraison comprend de l'azoxystobine et du bromuconazole. Le fongicide peut être appliqué séparément à la suspension aqueuse comprenant les spores ou directement ajouté à la suspension aqueuse de spores de Geotrichum candidum.
Les résultats présentés dans les exemples ont permis de montrer l'efficacité de l'utilisation de Geotrichum candidum dans la prévention des contaminations des cultures par des champignons ou moisissures. Ces champignons ou moisissures sont à l'origine de nombreuses maladies telles que le piétin verse, l'oïdium, la rouille brune, la septotriose, l'helminthosporiose, la rynchosporose et la fusariose.
L'invention porte par conséquent sur l'utilisation d'un micro- oganisme de la famille de Geotrichum candidum dans la fabrication d'une préparation apte à traiter ou à prévenir les maladies résultant de la contamination des cultures par des champignons ou moisissures, notamment le piétin verse, l'oïdium, la rouille brune, la septotriose, l'helminthosporiose, la rynchosporose et la fusariose.
La contamination par le développement de moisissures concerne l'ensemble des produits de l'agriculture et plus particulièrement les céréales, les fruits, les légumes et les vignes. Ces contaminations peuvent s'accompagner d'une production de mycotoxines. La pulvérisation d'une suspension aqueuse de Geotrichum candidum permet de diminuer de manière significative la quantité de mycotoxines présentes sur les produits de l'agriculture. Par conséquent, l'invention porte également sur l'utilisation d'un micro-organisme de Geotrichum candidum dans la fabrication d'une préparation apte à diminuer d'au moins 30 % et de préférence au moins 50 % la production de mycotoxines lors de la végétation des cultures de céréales, de fruits, de légumes et des vignes.
Plus précisément, les micro-organismes de la famille de Geotrichum candidum sont utilisés dans la préparation de suspensions aqueuses de spores permettant la pulvérisation de 109 à 1013 spores à l'hectare. De manière préférée, l'utilisation d'un microorganisme de la famille de Geotrichum candidum telle que décrite plus haut est associée à un ou plusieurs fongicides. De manière encore préférée, les fongicides associées sont choisis parmi l'azoxystobine, le bromuconazole, l'époxyconazole, le krezoxyméthyle ou une association de ceux-ci.
Le contrôle biologique peut aussi être réalisé par l'utilisation d'une association de différents micro-organismes. En effet, il peut être avantageux de réunir les effets inhibiteurs de plusieurs micro-organismes lorsqu'ils sont complémentaires, notamment un champignon et une bactérie. En particulier, l'invention porte sur l'utilisation de Geotrichum candidum en association avec d'autres micro-organismes, tels que les bactéries lactiques, pouvant jouer un rôle bénéfique dans le contrôle biologique des contaminations ou de la production de mycotoxines.
Les exemples de mise en œuvre du procédé de l'invention permettent de montrer la faisabilité et l'efficacité du traitement en comparaison à d'autres traitements fongicides, sans en limiter la portée du procédé de l'invention. Ils permettent en particulier de comparer l'efficacité du traitement en fonction du stade de son application et en fonction de son association avec un traitement fongicide.
Exemple 1 : Comparaison du pourcentage de contamination de Fusarium et Geotrichum présents sur les épis en fonction de la méthode de traitement choisie Afin de quantifier l'effet de la pulvérisation d'une suspension de Geotrichum candidum. 1 litre de solution mère par hectare contenant 5x1011 spores par litre (Levure de malterie IFBM, produit de SKW Biosystem) a été pulvérisé après dilution à différents stades de la végétation afin d'obtenir une implantation de Geotrichum candidum sur les épis. Les résultats en pourcentage de contamination de Fusarium et Geotrichum présents sur les épis sont présentés dans le tableau 1 en fonction du stade auquel les traitements sont réalisés (stade dernière feuille ou stade floraison) et du procédé utilisé (procédé par pulvérisation des spores uniquement « Geotrichum », ou en association avec un traitement fongicide). Le pourcentage de grains contaminés est évalué par dépôt des grains sur un milieu gélose et incubation des boîtes permettant le développement des moisissures contaminantes. Le traitement fongicide utilisé est un traitement par pulvérisation de 0.5 litre d'azoxystobine à 250 g/l (« Amistar » de Zeneca-Sopra) et de 0.6 litre d'un mélange de bromuconazole à 167 g/l et de tébuconazole à 107 g/l (« Soleil » de Rhône- Poulenc Agro).
TABLEAU 1 :
Il est nécessaire de rappeler que le mode d'ensemencement de Geotrichum candidum par pulvérisation, est différent de celui utilisé en malterie.
Les résultats montrent clairement la possibilité d'obtenir une implantation de Geotrichum candidum sur les épis par un mode d'ensemencement par pulvérisation. De plus, ils montrent que cette implantation s'accompagne d'une diminution de la contamination par Fusarium. Ils montrent aussi qu'un optimum d'efficacité est obtenu quand la pulvérisation se fait au stade floraison. On constate enfin qu'un traitement Geotrichum candidum couplé avec un traitement fongicide (Amistar + soleil) au stade floraison permet l'implantation de Geotrichum candidum avec une diminution plus importante de la contamination par Fusarium.
Ces résultats démontrent ainsi l'efficacité de l'utilisation de souches de Geotrichum candidum dans le traitement ou la prévention des maladies développées par la contamination des cultures par des champignons ou moisissures par pulvérisation d'une suspension aqueuse de spores.
Exemple 2 : Comparaison de la quantité de mycotoxines produites et des rendements des cultures en fonction de la méthode de traitement choisie
Les résultats présentés dans les tableaux 2 et 3 ont pour but de montrer l'effet du traitement de Geotrichum candidum sur la réduction de la production de mycotoxines lors de la végétation. Cette démonstration est effectuée au travers du dosage du déoxynivalénoi, la mycotoxine produite par Fusarium. la plus rencontrée sur les céréales. Les expérimentations ont été réalisées sur des cultures de blé en parcelles d'essais de 100 m2 (tableau 2) en association avec un traitement fongicide (Amistar et soleil) et en plein champ (plusieurs hectares) (tableau 3) en association avec un traitement fongicide par pulvérisation d'époxiconazole à 125 g/l et de kresoximméthyl à 125 g/l (traitement OGAM de BASF). TABLEAU 2 :
TABLEAU 3
On note que les différentes associations fongicides / Geotrichum candidum ont un effet sur la réduction de la production de mycotoxines avec un effet amplifié quand Geotrichum candidum est pulvérisé à la floraison. Il convient d'observer, en outre, que cette amélioration s'accompagne d'une augmentation sensible et significative des rendements
(tableau 2). Ces résultats indiquent que l'utilisation de Geotrichum candidum éventuellement en combinaison avec un traitement fongicide permet :
(a) de diminuer le pourcentage d'épis contaminé par Fusarium ; (b) de réduire la production de mycotoxines ;
(c) d'augmenter significativement les rendements obtenus.

Claims

REVENDICATIONS
1. Procédé de prévention ou de traitement des contaminations de céréales par des champignons ou des moisissures producteurs de mycotoxines comprenant la pulvérisation en champs d'une suspension aqueuse de spores d'un microorganisme de la famille de
Geotrichum candidum possédant les caractéristiques suivantes :
0 une absence d'activité mutagène mesurée par le test d'Ames, 0 une absence de production de mycotoxines.
2. Procédé selon la revendication 1 dans lequel Geotrichum candidum est une levure de malterie.
3. Procédé selon la revendication 2 dans lequel Geotrichum candidum est l'une des souches déposées le 6 septembre 1994 sous les n° 1.1474 et 1.1975.
4. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3 dans lequel les champignons producteurs de mycotoxines sont de l'espèce
Fusarium.
5. Procédé selon l'une des revendications 1 à 4 dans lequel la pulvérisation est réalisée à raison de 109 à 1013 spores par hectare.
6. Procédé selon l'une des revendications précédentes dans lequel la pulvérisation est réalisée en une seule fois au stade épîaison- fforaison du développement des céréales ou en plusieurs fois au cours de la végétation entre le tallage et la floraison.
7. Procédé selon la revendication 1 dans lequel les céréales sont choisies parmi le blé, l'orge, le seigle, l'avoine, le maïs ou le triticale.
8. Procédé selon l'une des revendications précédentes dans lequel Geotrichum candidum est associé à d'autres microorganismes, notamment des bactéries lactiques.
9. Procédé selon la revendication 1 dans lequel la pulvérisation est associée à un traitement fongicide.
10. Procédé selon la revendication 9 dans lequel le fongicide est choisi parmi l'azoxystobine, le bromuconazole, le tébuconazole, l'epoxyconazole, le kresoxymethyle ou une association de ceux-ci.
11. Procédé selon la revendication 10 dans lequel le fongicide est appliqué au stade dernière feuille du développement de la céréale.
12. Procédé selon la revendication 10 dans lequel le fongicide est appliqué au stade floraison.
13. Procédé selon la revendication 12 dans lequel la pulvérisation est réalisée au stade floraison.
14. Procédé selon la revendication 10 dans lequel le fongicide est ajouté à la suspension aqueuse de spores de Geotrichum candidum.
15. Utilisation d'un microorganisme de la famille de Geotrichum candidum dans la fabrication d'une préparation apte à traiter ou prévenir les maladies résultant de la contamination des cultures par des champignons ou moisissures, notamment le piétin verse, l'oïdium, la rouille brune, la septotriose, l'helminthosporiose, la rhynchosporose et la fusariose.
16. Utilisation d'un microorganisme de la famille de Geotrichum candidum dans la fabrication d'une préparation apte à diminuer d'au moins 30% et de préférence au moins 50% la production de mycotoxines lors de la végétation de cultures de céréales, de fruits, de légumes, de vigne.
17. Utilisation selon l'une des revendications 15 ou 16 dans laquelle la préparation permet une pulvérisation de 109 à 1013 spores par hectare.
18. Utilisation selon l'une des revendications 15 ou 16 dans laquelle Geotrichum candidum est associé à d'autres microorganismes, notamment des bactéries lactiques.
19. Utilisation selon l'une des revendications 15 ou 16 dans laquelle
Geotrichum candidum est associé à un ou plusieurs fongicides.
20. Utilisation selon la revendication 19 dans laquelle le fongicide est choisi parmi l'azoxystobine , le bromuconazole, le tébuconazole, l'epoxyconazole, le kresoxymethyle, ou une association de ceux-ci.
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