EP0946194A1 - Composition vaccinale comportant comme adjuvant un compose sympathomimetique - Google Patents

Composition vaccinale comportant comme adjuvant un compose sympathomimetique

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EP0946194A1
EP0946194A1 EP97943940A EP97943940A EP0946194A1 EP 0946194 A1 EP0946194 A1 EP 0946194A1 EP 97943940 A EP97943940 A EP 97943940A EP 97943940 A EP97943940 A EP 97943940A EP 0946194 A1 EP0946194 A1 EP 0946194A1
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EP
European Patent Office
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composition according
adjuvant
acid
compound
surfactant
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP97943940A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Daniel Bout
Jérôme AUCOUTURIER
Vincent Ganne
Johan Hoebeke
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM
Societe dExploitation de Produits pour les Industries Chimiques SEPPIC SA
Original Assignee
Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM
Societe dExploitation de Produits pour les Industries Chimiques SEPPIC SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM, Societe dExploitation de Produits pour les Industries Chimiques SEPPIC SA filed Critical Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM
Publication of EP0946194A1 publication Critical patent/EP0946194A1/fr
Withdrawn legal-status Critical Current

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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59

Definitions

  • the present invention relates to new adjuvants for vaccine compositions as well as compositions comprising at least one antigen, in particular an antigen of viral, bacterial or parasitic origin and at least one adjuvant.
  • adjuvants in the compositions has been known for a long time.
  • the main purpose of these adjuvants is to increase the immune response.
  • These adjuvants are of various natures. They may for example consist of liposomes, emulsions comprising at least one oil phase and at least one aqueous phase, of the Freund adjuvant type or, more commonly in mineral salts insoluble in water. These mineral salts can constitute, for example in aluminum hydroxide, a cerium nitrate, zinc sulphate, colloidal iron hydroxide or calcium chloride. Aluminum hydroxide is the most commonly used adjuvant. These adjuvants are described in particular in the article by Rajesh K. Gupta et al "Adjuvants, balance between toxicity and adjuvanticity", Vaccine, vol. 1 1, Issue 3, 1993, pages 993-306.
  • the Applicant has therefore sought to develop substances capable of modulating and / or transiently increasing the level of intracellular messengers, such as cAMP, in order to increase the immune response without thereby inducing toxicity vis-à-vis the subjects treated.
  • the subject of the invention is a composition comprising: (i) at least one antigen or at least one in vivo generator of a compound comprising an amino acid sequence; and, (ii) at least one adjuvant, characterized in that said adjuvant comprises at least one sympathomimetic compound.
  • antigenic subunits can be, for example, a protein, a glycoprotein, a peptide, or a recombinant virus, in particular a non-enveloped virus such as adenoviruses, vaccinia virus, Canarypox virus, herpes viruses, baculoviruses; a non-enveloped living viral recombinant vector is also designated, the genome of which contains, preferably inserted into a part which is not essential for the replication of the corresponding enveloped virus, a sequence coding for an antigenic subunit inducing antibody synthesis and / or a protective effect against the above enveloped virus or pathogenic microorganism; these antigenic subunits can be, for example, a protein, a glycoprotein, a peptide, or
  • the aim of this last nucleotide sequence is to allow the expression of a compound comprising an amino acid sequence, this compound itself having the aim of triggering an immune reaction in a host organism;
  • sympathomimetic compounds is meant in particular amphetamines, catecholamines, phenylisopropylamines or tyramine.
  • isoproterenol L-epinephrine, levarterenol, ephedrine, phenylephedrine or salbutamol.
  • the latter also relates to a composition as defined above comprising, in addition, at least one pharmaceutically acceptable salt which is soluble in water, said salt consisting of an organic anion and of a metal cation.
  • a water-soluble salt within the meaning of the present invention can be such that its solubility in water is greater than or equal to 10 g / l and, preferably, between 10 and 2000 g / l.
  • the metal cation constituting said pharmaceutically acceptable salt is preferably a bivalent cation, advantageously this cation is a cation of a metal chosen from the group consisting of manganese, calcium and zinc.
  • Manganese is a metal which is very particularly preferred in the context of the present invention.
  • the organic anion constituting said pharmaceutically acceptable salt is advantageously an anion of a compound comprising at least one oxygen-containing functional group, preferably a phosphoric group or a carboxylic group.
  • Glycerophosphoric acid is a group anion preferred phosphoric.
  • the anions comprising at least one preferred carboxylic group are derived from compounds chosen from: acid oses, preferably acid oses having from 5 to 7 carbon atoms, more preferably those having 6 to 7 carbon atoms, mono or polycarboxylic acids, amino acids.
  • the preferred mono or polycarboxylic acids are fumaric acid or the compounds of formula (I)
  • R represents COOH, CHaCO, CHa or CH2OH
  • R ' represents H or COOH and s, t and u, which are identical or different, are between 0 and 3.
  • Preferred compounds of formula (I) are acetic acid, lactic acid, tartaric acid, malic acid, citric acid, pyruvic acid.
  • an acidic ose consists of an ose comprising at least one carboxylic function, a ose being a carbohydrate constituted by the reducing sugars.
  • These acid oses are advantageously derivatives of aldoses, obtained by oxidation of the primary alcohol function or of the aldehyde function into a carboxylic function.
  • Such compounds may very particularly consist of gluconic acid, glucuronic acid, fructoheptonic acid, gluconoheptonic acid, glucoheptonic acid.
  • the organic anion is a derivative of an amino acid, this amino acid can be an ⁇ -amino acid such as glutamic acid, methionine and, very particularly, aspartic acid.
  • a pharmaceutically acceptable salt, soluble in water according to the invention can comprise a polyvalent cation, in particular divalent, associated with an organic anion or with several organic anions of nature. different.
  • a bivalent cation such as the calcium cation can be associated with an anion derived from gluconoheptonic acid.
  • a composition thus defined contains between 0.02 and 3000 mg / ml, preferably 0.1 and 1000 mg / ml of the mineral salt and, in particular, between 0.1 and 150 mg / ml.
  • the composition as defined above can also contain an oil.
  • the composition according to the invention is advantageously in the form of an emulsion associating at least one aqueous phase and at least one oil phase.
  • This emulsion can be of the oil in water (O / W), water in oil (W / O), water in oil in water (W / O / W) or microemulsion type.
  • W / O / W and O / W emulsions are preferred.
  • Such an emulsion can be prepared according to the conventional methods for preparing an emulsion, in particular according to the methods described in patent applications EP-A-489,181 and EP-A-481,982.
  • the emulsion can be emulsified with stirring. constituent oil of the oil phase with the aqueous phase consisting of an aqueous solution or suspension containing the antigen.
  • An emulsion according to the invention can comprise, by weight, from 5 to 95% of oil phase for 95 to 5% of aqueous phase and, preferably, from 25 to 75% of oil phase for 75 to 25% of aqueous phase.
  • the emulsion should preferably be stable for at least 12 months when it is stored at 4 ° C.
  • the oils, consisting of said oily phase which can be used in the composition according to the invention are advantageously fluid oils chosen from natural or synthetic mineral oils, or non-mineral oils of vegetable, animal or synthetic origin known for their absence or their low toxicity.
  • Ra represents a saturated, linear or branched aliphatic radical, comprising from 4 to 24 carbon atoms
  • Z is the remainder of a sugar, preferably the glucose and n is between 1 and 5, preferably between 1, 1 and 2.
  • Particularly preferred surfactants are polyethylene glycol esters, obtained by condensation of a fatty acid, in particular a liquid fatty acid at 20 ° C. with a polyethylene glycol of molecular weight between 80 and 200; such a surfactant is sold by the company SEPPIC under the brand SIMULSOL 2599.
  • Another preferred surfactant in the context of the present invention consists of an ester obtained by condensation of a fatty acid, advantageously a fatty acid which is liquid at 20 ° C. with a sugar, sorbitol or glycerol.
  • Said sugar can consist of glucose, sucrose or, preferably, mannitol.
  • mannitol ester there may be mentioned mannitol oleates obtained by anhydrization of the polyhydroxylated carbon chain of mannitol which cyclizes in 1-4 or 2-6.
  • Derivatives of these polyethylene glycol, sorbitol or glycerol sugar esters can also be used. These derivatives exhibit modified hydrophilicity in particular by grafting hydrophilic functions such as alcohol, polyol, ethylene oxide, propylene oxide, carboxylic acid, amine or amide. Such derivatives may for example consist of fatty esters of polyoxyethylated sorbitan, such as TWEEN.
  • the surfactant is combined with the oily adjuvant before the emulsion is formed.
  • concentration of surfactant in the composition as defined above can be between 0.01 and 500 mg / ml, and preferably between 0.1 and 200 mg / ml.
  • Oils associated with a surfactant which are very particularly suitable in the context of the present invention are those sold by the company SEPPIC under the brand MONTANIDE.
  • the nature of these oils, the type of emulsion which they make it possible and the characteristics (viscosity and conductivity) of these emulsions are described in the international application WO94 / 1 6681, published on August 4, 1994 and, in particular, page 1 1, Table I.
  • These compositions according to the invention can be used for the treatment of human or veterinary diseases. In particular, they make it possible to relieve infectious diseases with an intracellular agent, in particular respiratory diseases, opportunistic infectious diseases and, within the framework of veterinary medicine, infectious diseases of fish.
  • the composition according to the invention can also contain substances which modulate immunity.
  • the oily adjuvant can also consist of a self-emulsifying oil, that is to say an oily preparation capable of forming a stable emulsion with an aqueous phase, practically without any energy supply, for example by dispersion in the aqueous phase by agitation slow mechanical.
  • a self-emulsifying oil that is to say an oily preparation capable of forming a stable emulsion with an aqueous phase, practically without any energy supply, for example by dispersion in the aqueous phase by agitation slow mechanical.
  • self-emulsifying oils as known in the European pharmacopoeia under the designations Labrafil and Simulsol. These oils are polyglycosylated glycerides.
  • Preferred self-emulsifiable oils are those described in French patent application No. 9500497 filed on January 18, 1995, in the name of the Applicant, entitled “use of ethoxylated fatty acid esters as self-emulsifiable components, in particular useful for the preparation of phytosanitary compositions or drugs for veterinary or human use ", the reference of which is incorporated into the present description.
  • These oils consist of esters of ethoxylated fatty acids corresponding to one of the following formulas:
  • R3, R5, R6, R ⁇ and R 10 represent a hydrocarbon chain, linear or branched, saturated or unsaturated having from 5 to 30 carbon atoms;
  • - R2 'F * 4' ⁇ 7 and ⁇ 9 represent a hydrocarbon chain, linear or branched, saturated or unsaturated having from 1 to 5 carbon atoms;
  • the total number of ethylene oxide molecules respectively represented in the aforementioned formulas II, III and IV by k, l + m, n + p + q being an integer such as the HLB (hydrophilic-lipophilic balance) value of said said said compounds is between about 4 and about 10, preferably between about 5 and about 9.
  • R- ⁇ is preferably chosen from the residues of palmitic, stearic, ricinoleic, oleic, linoleic and linolenic acids and R2 represents a methyl radical and k is an integer between 1 and
  • the preferred ethoxylated fatty acid esters of formula III are those where:
  • R ⁇ , R ⁇ and R 10 represent hydrocarbon chains having from 16 to 22 carbon atoms corresponding in particular to the fatty chains of rapeseed oil, corn, soybean, peanut and apricot kernels;
  • composition is then presented in the form of a micellar solution.
  • This can be prepared by simple mixing of the surfactant with a dispersion in water of the antigen or of the antigen generator in vivo.
  • the surfactant can be chosen from the surfactants described above, in combination with an oily adjuvant.
  • viruses which may constitute an antigen according to the present invention mention may be made of the rabies virus, herpesviruses such as Aujeszky's disease virus, orthomixoviruses such as Influenzae, picornaviruses such as fever virus foot and mouth disease or retroviruses such as HIV.
  • herpesviruses such as Aujeszky's disease virus
  • orthomixoviruses such as Influenzae
  • picornaviruses such as fever virus foot and mouth disease or retroviruses
  • retroviruses such as HIV.
  • a microorganism of the bacterial type which can constitute an antigen according to the present invention mention may be made of E. coli, and those of the genera Pasteurella, Furonculosis, Vibriosis, Staphylococcus and Streptococcus.
  • a parasite mention may be made of those of the genera Trypanosoma, Plasmodium and Leishmania.
  • the microorganism constituting a recombinant subunit vaccine is a non-enveloped recombinant virus, for example chosen from adenoviruses, vaccinia virus, canarypox virus, herpes viruses or baculoviruses.
  • the exogenous gene inserted into the microorganism can be, for example, from an Aujeszky or HIV virus.
  • the in vivo generators according to the invention can also consist of a recombinant plasmid comprising an exogenous nucleotide sequence, capable of expressing in a host organism a compound comprising an amino acid sequence.
  • the compound comprising the amino acid sequence which is expressed within the host organism can:
  • the generator in vivo when the generator in vivo is a recombinant microorganism, its concentration in the composition according to the invention can be between 10 2 and 10 15 microorganisms / ml, preferably between 10 5 and 10 12 microorganisms / ml.
  • the in vivo generator is a recombinant plasmid, its concentration in the composition according to the invention can be between 0.01 and 100 g / l.
  • a composition according to the invention can be used as a preventive or curative medicament.
  • a composition according to the invention can be administered to fish, crustaceans such as shrimps, poultry, in particular, geese, turkeys, pigeons and chickens, canines such as dogs, felines such as cats, pigs, primates, bovines, ovids and horses.
  • the composition according to the invention comprising at least one sympathomimetic compound as defined above, can also be administered to humans.
  • the administration of the composition can be carried out in a conventional manner by parenteral route, in particular by subcutaneous, intramuscular or intraperitoneal injection or by mucosal route in particular by oral route, rectal route, nasal route, vaginal route.
  • an adjuvant consisting of a sympathomimetic compound as defined above for the preparation of a vaccine intended for the prevention or treatment of a disease infectious, including an infectious disease caused by a virus or microorganism such as those mentioned above.
  • this adjuvant for the preparation of a composition intended to treat a functional disease, such as cancer or cystic fibrosis.
  • said adjuvant can be combined with a pharmaceutically acceptable salt, soluble in water and / or with an oily adjuvant, a surfactant or with an oily adjuvant itself associated with a surfactant; these oily adjuvants and surfactants being as defined above.
  • Adjuvant compositions comprising said sympathomimetic compound, said pharmaceutically acceptable salt and the oily adjuvant and / or the aforementioned surfactants constitute yet another aspect of the invention. Where appropriate, these adjuvant compositions comprising at least one aqueous phase.
  • the adjuvant compositions according to the invention comprising at least one oily adjuvant, and, if necessary, a surfactant, can be in the form of an emulsion.
  • the latter can be of the W / O, O / W, W / O / W or microemulsion type.
  • These emulsions can comprise by weight, from 0.5% to 99.5
  • the adjuvant composition according to the invention comprises, in addition to the sympathomimetic compound, optionally the pharmaceutically acceptable salt and an aqueous phase, only one or more surfactants, it is then in the form of a micellar solution.
  • the surfactant content of this micellar solution can be between 0.01 and 900 mg / ml, preferably between 1 and 250 mg / ml.
  • An adjuvant composition according to the invention usually comprises the sympathomimetic compound at a concentration of 10 "10 molar to 10 " 2 molar, preferably from 10 "7 Molar to 10 " 5 Molar. When it contains a pharmaceutically acceptable salt as defined above, it is at a concentration of 0.02 to 3000 mg / ml, preferably 0.1 to 1000 mg / ml, more preferably from 0.1 to 150 mg / ml.
  • compositions are useful for preparing the compositions according to the invention.
  • the latter can then be prepared by simple mixing of the adjuvant composition with a composition comprising an antigen or an in vivo generator of a compound comprising an amino acid sequence.
  • a composition comprising an antigen or an in vivo generator of a compound comprising an amino acid sequence can then be prepared by simple mixing of the adjuvant composition with a composition comprising an antigen or an in vivo generator of a compound comprising an amino acid sequence.
  • the first step before testing the adjuvant potential of ⁇ -adrenergic agonists was the demonstration of the receptor on cells involved in mucosal immunity, especially in cholera toxin target cells in the intestinal mucosa. of the mouse and the demonstration of the functional coupling of this receptor to its effector the enzyme adenylate cyclase.
  • enterocytes MODE-K cell line
  • PEYER plaque lymphocytes LPP
  • mesenteric lymph nodes LGM
  • intraepithelial lymphocytes LEL

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Abstract

Composition comprenant: (i) au moins un antigène ou au moins un générateur in vivo d'un composé comprenant une séquence d'acides aminés; et, (ii) au moins un adjuvant, caractérisée en ce que ledit adjuvant contient au moins un composé sympathomimétique; et leur utilisation comme médicament.

Description

COMPOSITION VACCINALE COMPORTANT COMME ADJUVANT UN COMPOSE SYMPATHOMIMETIQUE
La présente invention concerne de nouveaux adjuvants pour compositions vaccinales ainsi que des compositions comprenant au moins un antigène, notamment un antigène d'origine virale, bactérienne ou parasitaire et au moins un adjuvant.
L'utilisation d'adjuvants dans les compositions est connue depuis longtemps. Ces adjuvants ont pour objet principal de permettre l'augmentation de la réponse immunitaire. Ces adjuvants sont de natures diverses. Ils peuvent par exemple consister en des liposomes, des émulsions comprenant au moins une phase huile et au moins une phase aqueuse, du type adjuvants de Freund ou, de manière plus courante en des sels minéraux insolubles dans l'eau. Ces sels minéraux peuvent constituer par exemple en l'hydroxyde d'aluminium une nitrate de cérium, le sulfate de zinc, l'hydroxyde de fer colloïdal ou le chlorure de calcium. L'hydroxyde d'aluminium est l'adjuvant le plus couramment utilisé. Ces adjuvants sont décrits notamment dans l'article de Rajesh K. Gupta et al "Adjuvants, balance between toxicity and adjuvanticity", Vaccine, vol. 1 1 , Issue 3, 1993, pages 993-306.
L'immunisation locale est la voie la plus efficace pour induire une protection contre des agents pathogènes qui ont accès à l'organisme à travers les muqueuses. Néanmoins, la faible réponse immunitaire développée contre les antigènes administrés par cette voie exige l'emploi d'agents immunostimulants. L'adjuvant reconnu comme étant le plus puissant à stimuler l'immunité des muqueuses est la toxine cholérique, mais les effets toxiques qui lui sont associés restreignent son utilisation chez l'homme. Son efficacité semble corrélée avec la ribosylation de l'ADP sur une enzyme de type adénylate cyclase conduisant à une synthèse d'AMPc intracellulaire continue. Ces éléments de l'état de la technique sont connus et divulgués dans les publications suivantes : R.J. Jackson et Coll ; Infection and Immunity, oct. 1993, 4272-4279 ; Shin-ichi Tamura et Coll ; 1995, Vaccine 13, 339-341 .
La demanderesse a donc cherché à développer des substances capables de moduler et/ou d'augmenter de manière transitoire le taux de messagers intracellulaires, comme l'AMPc, pour augmenter la réponse immunitaire sans induire pour autant de toxicité vis-à-vis des sujets traités. L'invention a pour objet une composition comprenant : (i) au moins un antigène ou au moins un générateur in vivo d'un composé comprenant une séquence d'acides aminés ; et, (ii) au moins un adjuvant, caractérisée en ce que ledit adjuvant comprend au moins un composé sympathomimétique.
Par antigène ou au moins un générateur in vivo d'un composé comprenant une séquence d'acides aminés, on désigne soit des microorganismes tués, tels que les virus, les bactéries ou les parasites, soit des fractions purifiées de ces micro-organismes, soit des micro-organismes vivants dont le pouvoir pathogène a été atténué ; on peut citer notamment un virus recombinant notamment un virus non enveloppé tel que les adénovirus, le virus de la vaccine, le virus Canarypox, les herpès virus, les baculovirus ; on désigne aussi un vecteur recombinant viral non enveloppé vivant dont le génome contient, insérée de préférence dans une partie non essentielle pour la réplication du virus enveloppé correspondant, une séquence codant pour une sous-unité antigénique induisant une synthèse d'anticorps et/ou un effet protecteur contre le susdit virus enveloppé ou micro-organisme pathogène ; ces sous-unités antigéniques peuvent être par exemple, une protéine, une glycoprotéine, un peptide, ou une fraction peptidique et/ou protectrice contre une infection par un micro-organisme vivant tel un virus enveloppé, une bactérie ou un parasite. On peut citer notamment un plasmide recombinant constitué d'une séquence de nucléotide dans laquelle est insérée une séquence nucléotidique exogène, provenant d'un micro-organisme ou d'un virus pathogène. Cette dernière séquence nucléotidique a pour but de permettre l'expression d'un composé comprenant une séquence d'acides aminés, ce composé ayant lui-même pour but de déclencher une réaction immune dans un organisme hôte ;
Par composés sympathomimétiques, on désigne notamment les amphétamines, les catécholamines, les phénylisopropylamines ou la tyramine. Comme exemples de tels composés, on peut citer notamment l'isoprotérénol, la L-Epinephrine, le lévartérénol, l'éphédrine, la phényléphédrine ou le salbutamol.
Dans une première variante de la présente invention, celle-ci concerne aussi une composition telle que définie précédemment comprenant, en outre, au moins un sel pharmaceutiquement acceptable et soluble dans l'eau, ledit sel étant constitué d'un anion organique et d'un cation métallique. Un sel soluble dans l'eau au sens de la présente invention peut être tel que sa solubilité dans l'eau est supérieure ou égale à 10 g/1 et, de préférence, comprise entre 10 et 2000 g/l. Le cation métallique constitutif dudit sel pharmaceutiquement acceptable est de préférence un cation bivalent avantageusement ce cation est un cation d'un métal choisi dans le groupe constitué par le manganèse, le calcium et le zinc. Le manganèse est un métal tout particulièrement préféré dans le cadre de la présente invention. Il a en effet été constaté que ce sel pharmaceutiquement acceptable est soluble dans l'eau et permet l'induction d'une réponse immune particulièrement importante tout en présentant une toxicité faible. L'anion organique constitutif dudit sel pharmaceutiquement acceptable est avantageusement un anion d'un composé comprenant au moins un groupe fonctionnel oxygéné de préférence un groupe phosphorique ou un groupe carboxylique. L'acide glycérophosphorique est un anion à groupe phosphorique préféré. Les anions comprenant au moins un groupe carboxylique préféré sont dérivés de composés choisis parmi : les oses acides de préférence des oses acides ayant de 5 à 7 atomes de carbone, plus préférentiellement ceux ayant 6 à 7 atomes de carbone, les acides mono ou polycarboxyliques, les acides aminés.
Les acides mono ou polycarboxyliques préférés sont l'acide fumarique ou les composés de formule (I)
R'
I
R-(CH2)s-(COH)t-(CH2)u-COOH (I)
où R représente COOH, CHaCO, CHa ou CH2OH,
R' représente H ou COOH et s, t et u, identiques ou différents sont compris entre 0 et 3.
Des composés de formule (I) préférés sont l'acide acétique, l'acide lactique, l'acide tartrique, l'acide malique, l'acide citrique, l'acide pyruvique.
Au sens de la présente invention, un ose acide consiste en un ose comprenant au moins une fonction carboxylique, un ose étant un glucide constitué par les sucres réducteurs. Ces oses acides sont avantageusement des dérivés d'aldoses, obtenus par oxydation de la fonction alcool primaire ou de la fonction aldéhydique en fonction carboxylique. De tels composés peuvent tout particulièrement consister en l'acide gluconique, l'acide glucuronique, l'acide fructoheptonique, l'acide gluconoheptonique, l'acide glucoheptonique. Lorsque l'anion organique est un dérivé d'un acide aminé, cet acide aminé peut être un acide α-aminé tel que l'acide glutamique, la méthionine et, tout particulièrement, l'acide aspartique.
Un sel pharmaceutiquement acceptable, soluble dans l'eau selon l'invention peut comprendre un cation polyvalent, notamment divalent, associé à un anion organique ou à plusieurs anions organiques de nature différente. Ainsi, à titre d'exemple, un cation bivalent tel le cation du calcium peut être associé à un anion dérivé de l'acide gluconoheptonique.
Une composition ainsi définie contient entre 0,02 et 3000 mg/ml, de préférence 0, 1 et 1000 mg/ml du sel minéral et, notamment, entre 0, 1 et 150 mg/ml.
Dans une deuxième variante de l'invention, la composition telle que définie ci-dessus peut également contenir une huile. Dans un tel cas, la composition selon l'invention se présente avantageusement sous la forme d'un émulsion associant au moins une phase aqueuse et au moins une phase huile. Cette émulsion peut être du type huile dans eau (H/E), eau dans huile (E/H), eau dans huile dans eau (E/H/E) ou microémulsion. On préfère cependant les émulsions E/H/E et H/E. Une telle émulsion peut être préparée selon les méthodes classiques de préparation d'une émulsion, notamment selon les procédés décrits dans les demandes de brevet EP-A-489 181 et EP-A-481 982. Ainsi, on peut emulsionner sous agitation l'huile constitutive de la phase huile avec la phase aqueuse constituée d'une solution ou d'une suspension aqueuse contenant l'antigène.
Une émulsion selon l'invention peut comporter, en poids, de 5 à 95 % de phase huile pour 95 à 5 % de phase aqueuse et, de préférence, de 25 à 75 % de phase huile pour 75 à 25 % de phase aqueuse. L'émulsion doit être stable de préférence pendant au moins 12 mois quand elle est stockée à 4°C. Les huiles, constituées de ladite phase huileuse pouvant être utilisées dans la composition selon l'invention sont avantageusement des huiles fluides choisies parmi les huiles minérales naturelles ou synthétiques, ou les huiles non minérales d'origine végétale, animale ou synthétique connues pour leur absence ou leur faible toxicité.
Elles doivent être liquides à la température de stockage ( + 4°C) ou au moins donner des émulsions liquides à cette température. On choisira en particulier des huiles minérales à chaîne linéaire ayant un nombre d'atomes de carbone de préférence supérieur à 16 et exempte de composés aromatiques. Des exemples connus sont le MARCOL 52 et le DRAKEOL 6VR. On peut également utiliser des huiles synthétiques telles que les polyisobutènes ou les polyisopropènes. Parmi les huiles végétales, on choisira les huiles insaturées riches en acide oléique qui sont biodégradables, par exemple les huiles d'arachide, d'olive, de sésame, de soja ou de germes de blé. Pour les huiles animales, les mêmes critères de tolérance et d'efficacité immunitaire sont requises. A titre d'exemple comme huiles animales, on peut citer le squalane ou l'huile de spermaceti. A titre d'huile non minérale synthétique, on peut encore citer les esters d'alcools et d'acides gras tels que, par exemple, l'oléate d'éthyle, le myristate d'isopropyle, les mono di ou triglycérides, les esters de propylène glycol, les glycérides partiels, tels que les glycérides d'huile de maïs comme ceux commercialisés sous le nom de LANOL par la Société SEPPIC, la maïsine, ou l'oléate d'oléyle. Par ailleurs, la composition selon l'invention quand elle se présente sous forme d'une émulsion telle que définie plus haut, peut également avantageusement comporter un ou plusieurs agents tensioactifs émulgateurs. Ce dernier présente un caractère lipophile ou hydrophile caractérisé par une valeur HLB (hydrophile-lipophile- balance) comprise entre 1 et 19. Un tel tensioactif peut consister en :
- un alkylpolyglycoside ou un mélange d'alkylpolyglycosides de formule Ra-(O)-Zn où Ra représente un radical aliphatique saturé, linéaire ou ramifié, comprenant de 4 à 24 atomes de carbone, Z est le reste d'un sucre, de préférence le glucose et n est compris entre 1 et 5 de préférence entre 1 ,1 et 2.
- les saponines,
- les lécithines,
- les alcanols polyoxyéthylés, tels que ceux commercialisés sous la désignation BRU par la société ICI, - les polymères comprenant des blocs polyoxyéthylènes et polyoxypropylènes, tels que ceux commercialisés sous la désignation PLURONICS par la société BASF.
Des tensioactifs particulièrement préférés sont les esters de polyéthylèneglycol, obtenus par condensation d'un acide gras, notamment un acide gras liquide à 20°C avec un polyéthylèneglycol de poids moléculaire compris entre 80 et 200 ; un tel tensioactif est commercialisé par la Société SEPPIC sous la marque SIMULSOL 2599.
Un autre agent tensioactif préféré dans le cadre de la présente invention consiste en un ester obtenu par condensation d'un acide gras, avantageusement un acide gras liquide à 20°C avec un sucre, le sorbitol ou du glycérol. Ledit sucre peut consister en glucose, saccharose ou, de préférence, mannitol. A titre d'ester de mannitol particulièrement préféré, on peut citer des oléates de mannitol obtenus par anhydrisation de la chaîne carbonée polyhydroxylée du mannitol qui se cyclise en 1-4 ou en 2- 6.
Des dérivés de ces esters de sucre de polyéthylèneglycol, de sorbitol ou de glycérol peuvent être également mis en oeuvre. Ces dérivés présentent une hydrophilie modifiée notamment par greffage de fonctions hydrophiles telles que alcool, polyol, oxyde d'éthylène, oxyde de propylène, acide carboxylique, aminé ou amide. De tels dérivés peuvent par exemple consister en des esters gras de sorbitanne polyoxyéthylés, tels le TWEEN.
Les autres types de tensioactifs préférés consistent en des huiles végétales éthoxylés, telles que, par exemple l'huile de ricin polyéthoxylée, cette huile étant hydrogénée ou non, ou des esters de polyglycerol, notamment des esters de polyglycerol d'acides gras naturels tels que l'acide oléique, l'acide stéarique, l'acide ricinoléique ou l'acide isostéarique et, particulièrement, des ricinoléates ou des polyricinoléates de polyglycerol. Un agent tensioactif selon l'invention est de préférence pharmaceutiquement acceptable au niveau des muqueuses ; il doit notamment être dépourvu de métaux lourds et présenter des indices d'acides ou de peroxydes très faibles. Il est également souhaitable qu'il satisfasse les normes de tests d'innocuité tels que par exemple, ceux décrits par S. S. Berllin, Annales of Allergy, 1962, 20, 473 ou les tests de toxicité anormale décrits dans la pharmacopée européenne. Préférentiellement, l'agent tensioactif est associé à l'adjuvant huileux avant formation de l'émulsion. La concentration en agent tensioactif dans la composition telle que définie précédemment peut être comprise entre 0,01 et 500 mg/ml, et, de préférence, entre 0,1 et 200 mg/ml.
Des huiles associées avec un agent tensioactif (ester de mannitol) convenant tout particulièrement dans le cadre de la présente invention sont celles commercialisées par la Société SEPPIC sous la marque MONTANIDE. La nature de ces huiles, le type d'émulsion qu'elles permettent d'obtenir et les caractéristiques (viscosité et conductivitié) de ces émulsions sont décrites dans la demande internationale WO94/1 6681 , publiée le 4 août 1994 et, notamment, page 1 1 , tableau I. Ces compositions selon l'invention peuvent être utilisées pour le traitement des maladies humaines ou vétérinaires. Elles permettent notamment de soulager les maladies infectieuses avec agent intracellulaire, notamment les maladies respiratoires, les maladies infectieuses opportunistes et dans le cadre de la médecine vétérinaire les maladies infectieuses des poissons. La composition selon l'invention peut contenir aussi des substances modulatrices de l'immunité.
L'adjuvant huileux peut encore consister en une huile auto- émulsionnable, c'est-à-dire une préparation huileuse capable de former une émulsion stable avec une phase aqueuse, pratiquement sans apport d'énergie, par exemple par dispersion dans la phase aqueuse par agitation mécanique lente. A ce titre, on peut citer des huiles auto-émulsionnables telles connues dans la pharmacopée européenne sous les désignations Labrafil et Simulsol. Ces huiles sont des glycérides polyglycosés.
Des huiles auto-émulsionnables préférées sont celles décrites dans la demande de brevet français N° 9500497 déposée le 18 Janvier 1995, au nom de la Demanderesse, intitulée "utilisation d'esters d'acides gras éthoxylés comme composants auto-émulsionnables notamment utiles pour la préparation de compositions phytosanitaires ou de médicaments à usage vétérinaire ou humain", dont référence est intégrée à la présente description. Ces huiles consistent en des esters d'acides gras éthoxylés répondant à l'une des formules suivantes :
O
(II) Ri— 1 C— r [O— CH2-CH2]k— OR2
O O
« II
(III) R3— C— [O— CH2-CH2]ι — R4O— [CH2-CH2— θ]m — C-RB|
O O
(IV) R&— Il— [O— CH2-CH2]— —R7- CH-R9-O— [CH2-CH2— 0]q — H C-R10
I
dans lesquelles :
- R-) , R3, R5, R6, Rδ et R10 représentent une chaîne hydrocarbonée, linéaire ou ramifiée, saturée ou insaturée ayant de 5 à 30 atomes de carbone ; - R2' F*4' ^7 et ^9 représentent une chaîne hydrocarbonée, linéaire ou ramifiée, saturée ou insaturée ayant de 1 à 5 atomes de carbone ; le nombre total de molécules d'oxyde d'éthylène respectivement représenté dans les formules II, III et IV précitées par k, l + m, n + p + q étant un nombre entier tel que la valeur HLB (balance hydrophile-lipophile) desdits composés soit comprise entre environ 4 et environ 10, de préférence entre environ 5 et environ 9.
R-\ est de préférence choisi parmi les restes des acides palmitique, stearique, ricinoléique, oléique, linoléique et linolénique et R2 représente un radical méthyle et k est un nombre entier compris entre 1 et
5, de préférence égal à 2, et par ailleurs, les esters d'acides gras éthoxylés de formule III préférés sont ceux où :
(i) - Rβ, Rδ et R10 représentent des chaînes hydrocarbonées ayant de 16 à 22 atomes de carbone correspondant notamment aux chaînes grasses de l'huile de colza, de maïs, de soja, d'arachide et de noyaux d'abricots ;
- R7 et R9 représentent un groupe méthylène CH2 ;
- n, p, q représentent des nombres entiers tels que leur somme soit comprise entre 3 et 30, et de préférence égale à 20 ; ou
(ii) - Rg, Rβ et R10 représentent des chaînes hydrocarbonées correspondant aux chaînes grasses de l'huile de ricin ;
- R7 et R9 représentent un radical méthylène CH2 ;
- n, p, q représentent des nombres entiers tels que leur somme soit comprise entre 5 et 7.
La concentration en huile auto-émulsionnable dans la composition selon l'invention peut être comprise entre environ 5 et 700 g/l, de préférence entre environ 10 et 500 g/l.
Outre la phase huile et la phase aqueuse, la composition selon l'invention peut comporter un agent stimulant immunitaire conventionnel tel l'Avridine®, soit la N,N-dioctadecyl-N',N' - bis (2-hydroxyéthyl) propanediamine, les dérivés du MDP (muramyl dipeptide) notamment le threonyl-MDP, les dérivés de l'acide mycolique ou les dérivés du Lipide A. La composition selon l'invention peut comprendre encore un ou plusieurs agents tensioactifs, en l'absence de tout adjuvant huileux.
La composition se présente alors sous la forme d'une solution micellaire. Celle-ci peut être préparée par simple mélange de l'agent tensioactif avec une dispersion dans l'eau de l'antigène ou du générateur d'antigène in vivo. L'agent tensioactif peut être choisi parmi les agents tensioactifs décrits plus haut, en association avec un adjuvant huileux.
Ladite solution micellaire peut comporter de 0,5 à 500 mg/ml, de préférence de 1 à 250 mg/ml en agent tensioactif.
Une composition selon la présente invention peut comprendre un antigène tel qu'un virus, un micro-organisme, plus particulièrement une bactérie ou un parasite, ou un composé comprenant une chaîne peptidique. Un tel composé peut consister en une protéine ou une glycoprotéine, notamment une protéine ou une glycoprotéine issues d'un microorganisme, un peptide synthétique ou une protéine ou un peptide issu du génie génétique. Lesdits virus et micro-organisme peuvent être totalement inactivés ou vivants atténués. A titre de virus pouvant constituer un antigène selon la présente invention, on peut citer le virus de la rage, les herpèsvirus tels que le virus de la maladie d'Aujeszky, les orthomixovirus tels que Influenzae, les picornavirus tels que le virus de la fièvre aphteuse ou les rétrovirus tels que les VIH. A titre de micro-organisme du type bactérien pouvant constituer un antigène selon la présente invention, on peut citer E. coli, et ceux des genres Pasteurella, Furonculosis, Vibriosis, Staphylococcus et Streptococcus. A titre de parasite, on peut citer ceux des genres Trypanosoma, Plasmodium et Leishmania. Une composition selon l'invention comprend une concentration en antigène qui dépend de la nature de cet antigène et de la nature du sujet traité. Il est toutefois particulièrement remarquable qu'un adjuvant selon l'invention, associé ou non à un adjuvant huileux et/ou un agent tensioactif tels que définis plus haut, permet de diminuer d'une façon notable la dose habituelle d'antigène requise. La concentration adéquate d'antigène peut être déterminée de manière classique par l'homme du métier. Généralement, cette dose est de l'ordre de 0, 1 μg/ml à 1 g/ml plus généralement comprise entre 1 μg/ml et 100mg/ml. Une composition selon l'invention peut aussi comprendre un générateur in vivo d'un composé comprenant une séquence d'acides aminés, c'est-à-dire un composé biologique capable d'exprimer un tel composé dans l'organisme hôte dans lequel on a introduit ledit générateur in vivo. Le composé comprenant la séquence d'acides aminés, peut être une protéine, un peptide ou une glycoprotéine.
Ces générateurs in vivo sont généralement obtenus par des procédés issus du génie génétique.
Plus particulièrement, ils peuvent consister en des microorganismes vivants, généralement un virus, jouant le rôle de vecteur recombinant, dans lequel est insérée une séquence nucléotidique, notamment un gène exogène. Ces composés sont connus en tant que tels et utilisés notamment comme vaccin sous unitaire recombinant.
A cet égard, on peut se référer à l'Article de M. ELOIT et al., Journal of virology (1990) 71./ 2925-2431 dans la demande internationale WO-A-91 /00107 ou à la demande internationale WO- A- 94/ 16681 .
Avantageusement, le micro-organisme constitutif d'un vaccin sous-unitaire recombinant est un virus recombinant non enveloppé, par exemple choisi parmi les adénovirus, le virus de la vaccine, le canarypox virus, les herpès virus ou les baculovirus. Le gène exogène inséré dans le micro-organisme peut être, par exemple, issu d'un virus Aujeszky ou HIV. Les générateurs in vivo selon l'invention peuvent aussi consister en un plasmide recombinant comprenant une séquence nucléotidique exogène, capable d'exprimer dans un organisme hôte un composé comprenant une séquence d'acides aminés. De tels plasmides recombinants et leur mode d'administration dans un organisme hôte ont été décrits en 1990, par LIN et al., Circulation 82:2217,2221 ; COX et al., J. of VIROL, Sept. 1993, 67, 9, 5664-5667 et dans la demande internationale WO/FR 95/00345 du 21 Mars 1995, au nom de la Demanderesse, intitulée "Une composition comprenant un plasmide recombinant et ses utilisations comme vaccin et médicament".
Selon la nature de la séquence nucléotidique comprise dans le générateur in vivo, le composé comprenant la séquence d'acides aminés qui est exprimé au sein de l'organisme hôte, peut :
(i) être un antigène, et permettre le déclenchement d'une réaction immune,
(ii) avoir une action curative vis-à-vis d'une maladie essentiellement une maladie d'ordre fonctionnel, qui s'est déclenchée chez l'organisme hôte. Dans ce cas, le générateur in vivo permet un traitement de l'hôte, du type thérapie génique. A titre d'exemple, une telle action curative peut consister en une synthèse par le générateur in vivo de cytokine, comme les interleukines, notamment l'interleukine 2. Celles-ci permettent le déclenchement ou le renforcement d'une réaction immune visant à l'élimination sélective des cellules cancéreuses. La concentration en ledit générateur in vivo dans la composition selon l'invention dépend, là encore, notamment de la nature dudit générateur et de l'hôte dans lequel il est administré. Cette concentration peut être aisément déterminée par l'homme du métier, sur la base d'expérience de routine. A titre indicatif, on peut toutefois préciser que lorsque le générateur in vivo est un microorganisme recombinant, sa concentration dans la composition selon l'invention peut être comprise entre 102 et 1015 micro-organismes/ml, de préférence entre 105 et 1012 micro-organismes/ml. Lorsque le générateur in vivo est un plasmide recombinant, sa concentration dans la composition selon l'invention peut être comprise entre 0,01 et 100 g/l.
Une composition selon l'invention peut être utilisée comme médicament préventif ou curatif. Selon la nature de l'antigène ou du générateur in vivo, une composition selon l'invention peut être administrée à des poissons, des crustacés tels que les crevettes, des volailles, notamment, des oies, des dindes, des pigeons et des poulets, aux canidés tels le chien, aux félidés tels le chat, aux porcs, aux primates, aux bovidés, aux ovidés et aux chevaux. La composition selon l'invention comprenant au moins un composé sympathomimétique tel que défini ci-dessus, peut être également administrée à l'homme. L'administration de la composition peut se faire de manière classique par voie parentérale,, notamment par injection sous-cutanée, intramusculaire ou intrapéritonéale ou par voie mucosale notamment par voie orale, voie rectale, voie nasale, voie vaginale.
Selon un autre aspect de l'invention, celle-ci consiste en l'utilisation d'un adjuvant consistant en un composé sympathomimétique tel que défini ci-dessus pour la préparation d'un vaccin destiné à la prévention ou au traitement d'une maladie infectieuse, notamment une maladie infectieuse engendrée par un virus ou un micro-organisme tels ceux mentionnés plus haut.
Selon un autre aspect de l'invention, celle-ci consiste en l'utilisation de cet adjuvant pour la préparation d'une composition destinée à soigner une maladie d'ordre fonctionnel, telle le cancer ou la mucoviscidose. Dans l'une ou l'autre de ces utilisations, ledit adjuvant peut être associé à un sel pharmaceutiquement acceptable, soluble dans l'eau et/ou à un adjuvant huileux, un agent tensioactif ou à un adjuvant huileux lui- même associé à un agent tensioactif ; ces adjuvants huileux et tensioactifs étant tels que définis plus haut.
Des compositions adjuvantes comprenant ledit composé sympathomimétique, ledit sel pharmaceutiquement acceptable et l'adjuvant huileux et/ou les tensioactifs précités constituent encore un autre aspect de l'invention. Le cas échéant, ces compositions adjuvantes comprenant une phase aqueuse au moins.
Dans ce dernier cas, les compositions adjuvantes selon l'invention, comprenant au moins un adjuvant huileux, et, le cas échéant, un tensioactif, peuvent se présenter sous la forme d'une émulsion. Cette dernière peut être du type E/H, H/E, E/H/E ou microémulsion. Ces émulsions peuvent comprendre en poids, de 0,5 % à 99,5
% de phase huile pour 99,5 % à 0,5 % de phase aqueuse, de préférence, de 5 à 95 % de phase huile pour 95 à 5 % de phase aqueuse et, plus préférentiellement, de 25 à 75 % de phase huile pour 75 à 25 % de phase aqueuse. Le cas échéant, elles peuvent comprendre de 0,01 à 500 mg/ml, de préférence de 0,1 à 200 mg/ml d'un tensioactif au moins.
Lorsque la composition adjuvante selon l'invention ne comprend, outre le composé sympathomimétique, éventuellement le sel pharmaceutiquement acceptable et une phase aqueuse, qu'un ou plusieurs tensioactifs, elle se présente alors sous la forme d'une solution micellaire. La teneur en tensioactif de cette solution micellaire peut être comprise entre 0,01 et 900 mg/ml, de préférence entre 1 et 250 mg/ml.
Une composition adjuvante selon l'invention comprend habituellement le composé sympathomimétique à une concentration de 10"10 molaire à 10"2 molaire de préférence de 10"7 Molaire à 10"5 Molaire. Lorsqu'elle contient un sel pharmaceutiquement acceptable tel que défini précédemment, c'est à une concentration de 0,02 à 3000 mg/ml, de préférence 0,1 à 1000 mg/ml, plus préférentiellement de 0,1 à 150 mg/ml.
Ces compositions adjuvantes sont utiles pour préparer les compositions selon l'invention.
Ces dernières peuvent alors être préparées par simple mélange de la composition adjuvante avec une composition comprenant un antigène ou un générateur in vivo d'un composé comprenant une séquence d'acides aminés. L'exemple suivant permet de mettre en évidence les propriétés des compositions selon la présente invention.
Exemple : mise en évidence du récepteur β-adrénergique sur les cellules cibles de la toxine cholérique dans le système immunitaire des muqueuses. Le premier pas avant de tester le potentiel adjuvant des agonistes β-adrénergiques a été la mise en oeuvre en évidence du récepteur sur les cellules impliquées dans l'immunité des muqueuses, notamment dans les cellules cibles de la toxine cholérique au niveau de la muqueuse intestinale de la souris et la démonstration du couplage fonctionnel de ce récepteur à son effecteur l'enzyme adenylate cyclase. Dans ce but, nous avons mesuré, parallèlement, la production d'AMPc par quatre populations cellulaires après stimulation par différentes concentrations de toxine cholérique et d'un agoniste β-adrénergique, l'isoprotérénol.
Les populations cellulaires étudiées ont été les entérocytes (lignée cellulaire MODE-K), les lymphocytes des plaques de PEYER (LPP), les lymphocytes des ganglions mésentériques (LGM) et les lymphocytes intra- épitheliaux (LIE).
Les résultats montrent que tous les types étudiés répondent de manière plus ou moins intense à la stimulation par la toxine cholérique (voir figure 1 ), avec des index de stimulation de la production d'AMPc qui vont de 30 fois pour les entérocytes à 2 fois pour les lymphocytes de plaques de PEYER. Cette stimulation commence en général à partir de 10 ng/ml.
A l'exception des lymphocytes des plaques de PEYER tous les types cellulaires étudiés ont répondu à la stimulation β-adrénergique (figure 1 ), avec des index de stimulation allant de 3 fois pour les entérocytes à 1 ,5 fois pour les lymphocytes de ganglions mésentériques et les lymphocytes intra-épitheliaux. Dans tous les cas, la stimulation par l'isoprotérénol est observée à partir de 100nM. La production d'AMPc observée, est bien due à la stimulation du récepteur β-adrénergique, car elle est totalement inhibée par le propanolol, un antagoniste spécifique.
Il a ainsi été démontré la présence de récepteurs β-adrénergiques fonctionnels sur les entérocytes, les lymphocytes des ganglions mésentériques et les lymphocytes intra-épitheliaux. Il existe une co- localisation du récepteur de la toxine cholérique et du récepteur β- adrénergique sur trois des quatre populations cellulaires étudiées, ce qui nous a conduit à tester le potentiel adjuvant des agonistes β-adrénergiques montrant en définitive les avantages de compositions selon la présente invention contenant au moins un composé sympathomimétique adjuvant.

Claims

REVENDICATIONS
1 . Composition comprenant :
(i) au moins un antigène ou au moins un générateur in vivo d'un composé comprenant une séquence d'acides aminés; et, (ii) au moins un adjuvant, caractérisée en ce que ledit adjuvant contient au moins un composé sympathomimétique.
2. Composition selon la revendication 1 , caractérisée en ce que le composé sympathomimétique est une sympathomimétique a iné telle qu'une catecholamine, une amphétamine, une phénylisopropylamine ou la tyramine.
3. Composition selon la revendication 2, caractérisée en ce que le composé sympathomimétique est choisi parmi l'éphédrine ou l'isoprotérénol, la L-Epinephrine, le lévartérénol, la phényléphédrine ou le salbutamol.
4. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que l'adjuvant comprend en outre au moins un sel pharmaceutiquement acceptable et soluble dans l'eau, ledit sel étant constitué d'un anion organique et d'un cation métallique.
5. Composition selon la revendication 4, caractérisée en ce que le cation métallique est divalent et choisi dans le groupe constitué par les cations du zinc, du manganèse et du calcium.
6. Composition selon l'une des revendications 4 ou 5, caractérisée en ce que l'anion organique est dérivé d'un composé comprenant au moins un groupe fonctionnel oxygéné.
7. Composition selon la revendication 6, caractérisé en ce que le groupe fonctionnel est un groupe carboxylique ou un groupe phosphorique.
8. Composition selon la revendication 7, caractérisée en ce que l'anion organique est dérivé d'un composé choisi dans le groupe constitué par les acides aminés, les oses acides comprenant de 5 à 7 atomes de carbone, et l'acide glycérophosphorique.
9. Composition selon la revendication 8, caractérisée en ce que l'acide aminé est l'acide aspartique.
10. Composition selon la revendication 9, caractérisée en ce que l'ose acide est choisi dans le groupe constitué par l'acide gluconique, l'acide fructoheptonique et l'acide glucoheptonique.
1 1 . Composition selon la revendication 10, caractérisée en ce que le sel pharmaceutiquement acceptable est le gluconate de manganèse.
12. Composition selon l'une des revendications 1 à 1 1 , caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'une émulsion comprenant au moins une phase aqueuse et au moins une phase huile, la phase huile étant constituée par un adjuvant.
13. Composition selon la revendication 12, caractérisée en ce que l'émulsion est du type E/H/E, H/E ou microémulsion.
14. Composition selon l'une des revendications 12 ou 13, caractérisée en ce que l'adjuvant huileux est associé à un agent tensioactif, de préférence un agent tensioactif choisi parmi un ester obtenu par condensation d'un acide gras avec un sucre, un polyéthylèneglycol, le sorbitol du glycérol, ou un dérivé d'un tel ester dont l'hydrophilie a été modifiée, une huile végétale éthoxylée ou leurs mélanges.
15. Composition selon l'une des revendications 12 ou 13, caractérisée en ce que l'adjuvant huileux est associé à un agent tensioactif choisi parmi les esters de polyglycerol, notamment un ester de polyglycerol d'acides gras naturels et, de préférence, les ricinoléates ou les polyricinoléates de polyglycerol ou constituant en des huiles de ricin polyéthoxylées hydrogénées ou non.
16. Composition selon l'une des revendications 12 ou 13, caractérisée en ce que l'adjuvant huileux est une huile auto-émulsionnable.
17. Composition selon la revendication 16, caractérisée en ce que l'adjuvant huileux est un ester d'acides gras éthoxylés répondant à l'une des formules suivantes :
O O (III) R3— C— [O— CH2-CH2]ι — OR4O— [CH2-CH2— 0]m — C-RB|
O O
(IV) Re— C— [O— CH2-CH2]— O— R7- CH-R9-O— [CH2-CH2— θ]q — C-R10 I
dans lesquelles :
- R-] , R3, R5, Rβ, Rβ et R10 représentent une chaîne hydrocarbonée, linéaire ou ramifiée, saturée ou insaturée ayant de 5 à
30 atomes de carbone ;
- R2, R4, R7 et Rg représentent une chaîne hydrocarbonée, linéaire ou ramifiée, saturée ou insaturée ayant de 1 à 5 atomes de carbone ; le nombre total de molécules d'oxyde d'éthylène respectivement représenté dans les formules II, III et IV précitées par k, l + m, n + p + q étant un nombre entier tel que la valeur HLB (balance hydrophile-lipophile) desdits composés soit comprise entre environ 4 et environ 10, de préférence entre environ 5 et environ 9.
18. Composition selon l'une des revendications 1 à 1 1 , caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un agent tensioactif, ladite composition se présentant sous la forme d'une solution micellaire.
19. Composition selon la revendication 18, caractérisée en ce que l'agent tensioactif est soit un ester obtenu par condensation d'un acide gras avec un sucre ou du glycérol, ou un dérivé d'un tel ester dont l'hydrophilie a été modifiée ou soit une huile végétale éthoxylée
20. Composition selon l'une des revendications 1 à 19, comprenant en outre un stimulant immunitaire tel que l'Avridine®, les dérivés du MDP, les dérivés de l'acide mycolique ou les dérivés du lipide A.
21 . Composition selon l'une des revendications 1 à 20, pour la mise en oeuvre d'une méthode de traitement du corps humain ou animal.
22. Médicament selon la revendication 21 destiné à traiter ou à prévenir les maladies infectieuses et/ou fonctionnelles et notamment les maladies engendrées par un virus, un microorganisme ou un parasite.
23. Médicament selon la revendication 21 destiné à traiter ou à prévenir les maladies respiratoires.
24. Médicament selon la revendication 21 destiné à traiter la maladie d'Aujeszky chez les porcs, la toxoplasmose ovine ainsi que les maladies des poissons tel que le pou du saumon ou les maladies des crustacés.
25. Adjuvant tel que défini à l'une des revendications 4 à 19.
26. Utilisation de l'adjuvant tel que défini à l'une des revendications 1 à 19 pour la fabrication de vaccins destinés à la vaccination muqueuse, notamment orale, nasale, rectale ou vaginale.
27. Composition adjuvante comprenant une phase aqueuse, un adjuvant huileux, un tensioactif, éventuellement un sel constitué d'un anion organique et d'un cation métallique, caractérisée en ce qu'elle contient au moins un composé sympathomimétrique.
28. Composition selon la revendication 27 sous forme d'un émulsion E/H/E ou H/E.
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