NOUVELLES OUINOLONES FLUOREES, LEUR PROCEDE DE PREPARATION ET LES COMPOSITIONS PHARMACEUTIQUES EN RENFERMANT NOVEL FLUORINATED OUINOLONES, THEIR PREPARATION PROCESS AND THE PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING THE SAME
La présente invention se rapporte à de nouvelles quinolones fluorées et à leur procédé de préparation. The present invention relates to new fluorinated quinolones and to their process of preparation.
Elle a plus particulièrement pour objet de nouvelles difluroquinolones substituées en position 7 par un groupement pipéridique . More particularly, it relates to new difluroquinolones substituted in position 7 by a piperidic group.
Elle a spécifiquement pour objet les nouveaux acides difluoroquinolone 3-carboxyliques répondant à la formule générale I : Its specific subject is the new difluoroquinolone 3-carboxylic acids corresponding to the general formula I:
dans laquelle R représente un radical éthyle, fluoroéthyle, allyle eu benzyle éventuellement substitué par un ou plusieurs halogènes, et R1 représente de l'hydrogène, un reste acyle dérivé d'un acide organique aliphatique, cyclanique ou aromatique, mono- ou polycarboxylique, mono ou polyhydroxylé ou un reste d'acide alcoylcarbonique, in which R represents an ethyl, fluoroethyl, allyl or benzyl radical optionally substituted by one or more halogens, and R 1 represents hydrogen, an acyl residue derived from an aliphatic, cyclanic or aromatic, mono- or polycarboxylic acid, mono or polyhydroxylated or a residue of alkylcarbonic acid,
R2 représente de l'oxygène, lié par une liaison semi-polaire, R 2 represents oxygen, linked by a semi-polar bond,
et n est égal à 0 ou 1. and n is 0 or 1.
L'invention concerne également les sels des acides quinolone 3-carboxyliques de formule générale I avec une base minérale ou organique. The invention also relates to the salts of quinolone 3-carboxylic acids of general formula I with an inorganic or organic base.
Parmi les composés de formule générale I, on distinguera plus particulièrement les quinolones substitués à l'azote en position 1 : a) par un radical éthyle Among the compounds of general formula I, the quinolones substituted for nitrogen in position 1 will be distinguished more particularly: a) by an ethyl radical
b) par un radical fluoroéthyle b) by a fluoroethyl radical
c) par un radical allyle c) by an allyl radical
d) par un radical benzyle de formule
dans laquelle Z est de l'hydrogène ou un atome d'halogène et n1 est égal à 1, 2 ou 3. d) by a benzyl radical of formula wherein Z is hydrogen or a halogen atom and n 1 is 1, 2 or 3.
On pourra donc ainsi différencier quatre sous-groupes : We can thus differentiate four subgroups:
- les dérivés N-éthylés de formule I. - N-ethyl derivatives of formula I.
dans laquelle R1 est défini comme précédemment in which R 1 is defined as above
- les dérivés N-allylés de formule IB - N-allyl derivatives of formula I B
dans laquelle R1 est défini comme précédemment. - les dérivés N-fluoroéthylés de formule IC
in which R 1 is defined as above. - N-fluoroethylated derivatives of formula I C
dans laquelle R1 est défini comme précédemment. in which R 1 is defined as above.
- les dérivés N-benzylés de formule I D - N-benzylated derivatives of formula I D
dans laquelle R1 est défini comme précédemment in which R 1 is defined as above
Z est de l'hydrogène ou un atome d'halogène Z is hydrogen or a halogen atom
et n est égal à 1, 2 ou 3. Parmi les dérivés acylés, on citera plus particulièrement ceux qui dérivent d'un acide polycarboxylique comme l'acide succinique, l'acide subérique, l'acide glucarique, l'acide glutamique, l'acide aspartique, l'acide phtalique, l'acide terephtalique, l'acide camphorique et les dérivés similaires, ou bien d'un acide hydroxycarboxylique comme l'acide gluconique, l'acide lactobionique, l'acide gluconσheptonique, l'acide glucogluconoheptonique. and n is equal to 1, 2 or 3. Among the acylated derivatives, mention will be made more particularly of those derived from a polycarboxylic acid such as succinic acid, suberic acid, glucaric acid, glutamic acid, l aspartic acid, phthalic acid, terephthalic acid, camphoric acid and similar derivatives, or alternatively a hydroxycarboxylic acid such as gluconic acid, lactobionic acid, gluconσheptonic acid, glucogluconoheptonic acid .
Les dérivés carboxyliques de formule générale I peuvent être convertis en sel par addition d'une base minérale ou organique. Les principaux sels utilisables sont ceux de métaux alcalins, de métaux alcalinoterreux, d'cimmonium, de Fer, d'Aluminium; les sels d'alcoylamine, les sels d'hydroxyalcoylamines, les sels de phenylalcoylamines, les sels de pyridylalcoylamine, les sels de cyclanylamines, de dicyclanylalcoylamine, etc.. Parmi ces sels, les sels de sodium, de
lithium, de N-méthylglucamine et de tromethanol sont ceux actuellement préférés. The carboxylic derivatives of general formula I can be converted into salt by the addition of an inorganic or organic base. The main salts which can be used are those of alkali metals, alkaline earth metals, antimony, iron, aluminum; the alkyllamine salts, the hydroxyalkylamine salts, the phenylalkoylamine salts, the pyridylalkoylamine salts, the cyclanylamine salts, of dicyclanylalkoylamine, etc. Among these salts, the sodium salts, lithium, N-methylglucamine and tromethanol are those currently preferred.
Ces dérivés peuvent exister sous forme de N-oxyde dont la solubilité dans l'eau et les milieux aqueux est un peu améliorée par rapport à celle des dérivés pipéridiques. Ces derniers composés ne peuvent être salifiés par un acide minéral ou organique car la basicité de l'azote tertiaire est trop faible. Lorsque R1 est le reste acyle d'un acide organique dicarboxylique, il est possible de former un sel du carboxyle resté libre, notamment avec une base minérale alcaline ou alcalino-terreuse. These derivatives can exist in the form of N-oxide, the solubility of which in water and aqueous media is slightly improved compared to that of the piperidic derivatives. These latter compounds cannot be salified with a mineral or organic acid because the basicity of tertiary nitrogen is too low. When R 1 is the acyl residue of an organic dicarboxylic acid, it is possible to form a salt of the carboxyl which has remained free, in particular with an alkaline or alkaline earth mineral base.
Les composés, selon l'invention, présentent des propriétés antibactériennes tout-à-fait intéressantes, notamment vis-à-vis des germes gram(+). Ils sont aptes, de ce fait, à servir de principes actifs de médicaments destinés à traiter les infections bactériennes externes ou internes dues à des bactéries gram(+) ou gram(-) sensibles. A cette fin, ils seront utilisés sous forme de compositions pharmaceutiques destinées à l'administration parentérale, orale, rectale, permuqueuse ou topique. Ces compositions pharmaceutiques sont caractérisées par le fait qu'elles renferment, à titre de principe actif, au moins un composé de formule générale I, ou un de ses sels d'addition avec une base minérale ou organique, en association ou en mélange avec un excipient ou un véhicule inerte non toxique pharmaceutiquement-acceptable. The compounds according to the invention have quite interesting antibacterial properties, in particular with respect to gram (+) germs. They are therefore able to serve as active ingredients in drugs intended to treat external or internal bacterial infections caused by sensitive gram (+) or gram (-) bacteria. To this end, they will be used in the form of pharmaceutical compositions intended for parenteral, oral, rectal, permucosal or topical administration. These pharmaceutical compositions are characterized in that they contain, as active principle, at least one compound of general formula I, or one of its addition salts with an inorganic or organic base, in combination or in mixture with a pharmaceutically acceptable non-toxic excipient or inert carrier.
Parmi les formes pharmaceutiques envisagées, les formes injectables comme les solutés ou les suspensions injectables, réparties en ampoules, en flacons multi-doses ou en ampoules auto-injectables sont les formes les plus appropriées. Pour la voie orale, les formes sèches comme les comprimés nus ou enrobés, les dragées, les gélules, les capsules molles, les pilules, les sachets de poudre ou les microgranules sont les formes les plus appropriées. Among the pharmaceutical forms envisaged, the injectable forms such as solutes or injectable suspensions, distributed in ampoules, in multi-dose vials or in self-injecting ampoules are the most suitable forms. For the oral route, dry forms such as bare or coated tablets, dragees, capsules, soft capsules, pills, sachets of powder or microgranules are the most suitable forms.
Pour la voie topique, les gouttes nasales, les gouttes auriculaires et les préparations ophtalmiques sont les formes d'administration qui conviennent le mieux.
La posologie unitaire s'échelonne, selon les composés, de 100 mg à 500 mg et de préférence de 200 à 400 mg d'acide 1-R 1,4-dihydroquinoléinone 3-carboxylique. La posologie journalière varie en fonction de l'indication thérapeutique, de la sensibilité des souches microbiennes responsables de l'infection et de la voie d'administration. For the topical route, nasal drops, ear drops and ophthalmic preparations are the most suitable forms of administration. The unit dosage ranges, depending on the compounds, from 100 mg to 500 mg and preferably from 200 to 400 mg of 1-R 1,4-dihydroquinoline 3-carboxylic acid. The daily dosage varies depending on the therapeutic indication, the sensitivity of the microbial strains responsible for the infection and the route of administration.
Elle s'échelonne, pour l'administration parentérale, orale ou rectale, entre 100 et 1000 mg par jour. Par voie permuqueuse ou topique, la posologie journalière dépendra du pourcentage de pénétration dermique ou muqueux et du degré de diffusion dans l'organisme. It ranges, for parenteral, oral or rectal administration, between 100 and 1000 mg per day. Dermal or topical, the daily dosage will depend on the percentage of dermal or mucous penetration and the degree of diffusion in the body.
L'invention comprend encore un procédé d'obtention des composés de formule générale I qui consiste en ce que l'on fait réagir un acide 6,7,8-trifluoro 1-R 1,4-dihydroquinoléine 4-one 3-carboxylique de formule II The invention also comprises a process for obtaining the compounds of general formula I which consists in reacting a 6,7,8-trifluoro 1-R 1,4-dihydroquinoline 4-one 3-carboxylic acid of formula II
dans laquelle R est défini comme précédemment avec la 3-hydroxyméthylpipéridine en milieu basique, puis soumet l'acide 6,8-difluoro 7-(3-hydroxyméthylpipéridinyl-1 ) 1,4-dihydroquinoleine 4-one 3-carboxylique ainsi formé, de formule III in which R is defined as above with 3-hydroxymethylpiperidine in basic medium, then subjects 6,8-difluoro 7- (3-hydroxymethylpiperidinyl-1) 1,4-dihydroquinoleine 4-one 3-carboxylic acid thus formed, to formula III
dans laquelle R a les mêmes significations que précédemment que l'on peut soumettre à une acylation à l'aide d'un dérivé fonctionnel d'acide carboxylique in which R has the same meanings as above which can be subjected to acylation using a functional derivative of carboxylic acid
ou à une carbonatation à l 'aide d'un chloroformiate d'alcoyle or to carbonation using an alkyl chloroformate
ou à une salification par addition d'une base minérale ou organique ou encore à un N-oxydation par l'action d'un hydroperoxyde minéral ou organique. Les exemples suivants illustrent l'invention. Ils ne la limitent en aucune façon : or to a salification by addition of a mineral or organic base or also to an N-oxidation by the action of a mineral or organic hydroperoxide. The following examples illustrate the invention. They do not limit it in any way:
_ EXEMPLE I _ EXAMPLE I
ACIDE 7-(3-HYDROXYMETHYLPIPERIDINYL-1 ) 6,8-DIFLUORO 1-ETHYL 4-OXO 1,4-DIHYDROQUINOLEINYL-3 CARBOXYLIQUE (Composé 1 ) ACID 7- (3-HYDROXYMETHYLPIPERIDINYL-1) 6,8-DIFLUORO 1-ETHYL 4-OXO 1,4-DIHYDROQUINOLEINYL-3 CARBOXYLIC (Compound 1)
On dissout 1,25 g d'acide 6 ,7-8-trifluoro 1-éthyl 4-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylique dans 10 ml de diméthylformamide que l'on additionne de 1 , 45 g de 3-hydroxyméthylpipéridine . On chauffe vers 140° le mélange réactionnel pendant 4 heures , puis , après refroidissement à température ordinaire, on dilue à l'eau jusqu'à ce que la cristallisation s 'amorce . Après une heure de repos, on sépare les cristaux que l' on essore , lave à l'eau puis à l'ethanol et enfin sèche sous pression réduite . 1.25 g of 6,7-8-trifluoro 1-ethyl 4-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylic acid are dissolved in 10 ml of dimethylformamide, which is added with 1.45 g of 3-hydroxymethylpiperidine. The reaction mixture is heated to 140 ° for 4 hours, then, after cooling to room temperature, diluted with water until crystallization begins. After standing for one hour, the crystals are separated and drained, washed with water then with ethanol and finally dried under reduced pressure.
On recueille ainsi 1,4 g de dérivé piperidinique que l'on recristallise pour l'analyse de l'ethanol additionné de quelques gouttes de diméthylformamide. On obtient ainsi 0,9 g de produit pur fondant (bloc Kofler) à 171°C. 1.4 g of piperidine derivative are thus collected which are recrystallized for the analysis of ethanol supplemented with a few drops of dimethylformamide. 0.9 g of pure melting product is thus obtained (Kofler block) at 171 ° C.
Le spectre IR est en accord avec la structure. The IR spectrum is in agreement with the structure.
L'analyse par CCM et élution par un mélange chloroforme méthanol (8.2) indique la présence d'un produit monotache par fluorescence.
L' acide 7-( 3-hydroxyméthylpipéridinyl-1 ) 6 , 8-difluoro 1-fluoroéthyl 4-oxo 1 , 4-dihydroguinoleinyl-3 carboxylique est préparé de la même façon à partir de l 'acide 6 , 7 , 8-trifluoro 1 -fluoroéthyl 4-oxo1 , 4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylique . Il fond à 230°C ( Composé 2 ) . Analysis by TLC and elution with a chloroform-methanol mixture (8.2) indicates the presence of a single-spot product by fluorescence. 7- (3-hydroxymethylpiperidinyl-1) 6, 8-difluoro 1-fluoroethyl 4-oxo 1, 4-dihydroguinoleinyl-3 carboxylic acid is prepared in the same way from 6, 7, 8-trifluoro acid 1 -fluoroethyl 4-oxo1, 4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylic. It melts at 230 ° C (Compound 2).
L'acide 7-(3-hydroxyméthylpipéridinyl-1) 6,8-difluoro 1-(p.fluorobenzyl) 4-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylique est préparé de la même façon au départ de l'acide 6,7,8-trifluoro 1-(p.fluorobenzyl) 4-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylique. Il fond à 225°C (Composé 3). 7- (3-hydroxymethylpiperidinyl-1) 6,8-difluoro 1- (p.fluorobenzyl) 4-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3-carboxylic acid is prepared in the same way starting from acid 6,7 , 8-trifluoro 1- (p.fluorobenzyl) 4-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylic. It melts at 225 ° C (Compound 3).
L'acide 7-(3-hydroxyméthylpipéridinyl-1) 6,8-difluoro 1-allyl 4-oxo l,4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylique est obtenu d'une façon similaire. Il fonc à 173°C (Composé 4). 7- (3-hydroxymethylpiperidinyl-1) 6,8-difluoro 1-allyl 4-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylic acid is obtained in a similar manner. It darkens at 173 ° C (Compound 4).
L'acide 7-(3-hydroxyméthylpipéridinyl-1) 6,8-difluoro 1-(o.fluorobenzyl) 4-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylique est préparé de la même façon au départ de l'acide 6,7,8-trιfluoro 1-(o.fluorobenzyl) 5-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylique.il fond à 186°C (Composé11). 7- (3-hydroxymethylpiperidinyl-1) 6,8-difluoro 1- (o.fluorobenzyl) 4-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3-carboxylic acid is prepared in the same way starting from acid 6,7 , 8-trιfluoro 1- (o.fluorobenzyl) 5-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylique.il melts at 186 ° C (Compound11).
EXEMPLE IIEXAMPLE II
PREPARATICN DE L'ACIDE 7- [ (N-PHENYI-CARBAMOYLO YMETHYL) PIPERIDINYL-1 ]PREPARATICN OF ACID 7- [(N-PHENYI-CARBAMOYLO YMETHYL) PIPERIDINYL-1]
6,8-DIFLUORO 1-ETHYL 4-OXO 1 , 4-DIHYDROQUINOLEINYL-3 CARBOXYLIQUE 6,8-DIFLUORO 1-ETHYL 4-OXO 1, 4-DIHYDROQUINOLEINYL-3 CARBOXYLIC
( Composé 5 ) (Compound 5)
On dissout 1,46 g d'acide 7-(3-hydroxyméthylpipéridinyl-1) 6,8-difluoro 1-éthyl 4-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylique dans 12 ml de diméthyl formamide à température ordinaire, puis on ajoute progressivement sous agitation, 1,1 ml d'isocyanate de phényle. On laisse la réaction se poursuivre à température ordinaire pendant deux heures, puis on dilue le milieu à l'ethanol pour détruire l'excès de réactif. L'allophanate précipite. On sépare les cristaux, on les essore puis on les lave et on les sèche. On recueille ainsi 0,6 g de produit brut fondant à 187°C. 1.46 g of 7- (3-hydroxymethylpiperidinyl-1) 6,8-difluoro 1-ethyl 4-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3-carboxylic acid are dissolved in 12 ml of dimethyl formamide at ordinary temperature, then added gradually with stirring, 1.1 ml of phenyl isocyanate. The reaction is allowed to continue at ordinary temperature for two hours, then the medium is diluted with ethanol to destroy the excess reagent. The allophanate precipitates. The crystals are separated, wrung out, then washed and dried. 0.6 g of crude product is thus collected, melting at 187 ° C.
Par concentration du filtrat et reprise à l'ethanol, on obtient un deuxième jet pesant 0,5 g.
Les deux fractions sont réunies puis recristallisées d'un mélange éthanol-diméthyl formamide pour recueillir 0,8 g de produit pur fondant à 199-200°C. By concentrating the filtrate and taking up in ethanol, a second jet weighing 0.5 g is obtained. The two fractions are combined and then recrystallized from an ethanol-dimethyl formamide mixture to collect 0.8 g of pure product melting at 199-200 ° C.
La CCM suivie d'élution par un mélange chlorure de méthylène-méthanol (8:2) montre la présence d'un produit monotache (Rf=0,28). The TLC followed by elution with a methylene chloride-methanol mixture (8: 2) shows the presence of a single-stain product (Rf = 0.28).
Le spectre IR est conforme à la structure. The IR spectrum conforms to the structure.
Le produit est soluble dans la soude 1N en tiédissant. The product is soluble in 1N sodium hydroxide while warming.
De la même façon, on a obtenu le dérivé 1-allylé F=135° (Composé 6). Similarly, the 1-allyl derivative F = 135 ° was obtained (Compound 6).
EXEMPLE IIIEXAMPLE III
ACIDE 7-(3-PHTALOYLOXYMETHΥLPIPERIDINYL-1) 6,8-DIFLUORO 1-ETHYL 4-OXO 1,4-DIBΥDROQUINOLEINYL-3 CARBOXYLIQUE (Composé 7) ACID 7- (3-PHTALOYLOXYMETHΥLPIPERIDINYL-1) 6,8-DIFLUORO 1-ETHYL 4-OXO 1,4-DIBΥDROQUINOLEINYL-3 CARBOXYLIC (Compound 7)
L'acide 7-(3-hydroxyméthylpipéridinyl) 6,8-difluoro 1-éthyl 4-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylique est chauffé pendant 8 heures à 130° avec 2 g (0,0145M) d'anhydride phtalique dans 49 ml de diméthylsulfoxyde. Après refroidissement, on verse le mélange réactionnel dans l'eau, on sépare le précipité qui s'est formé, on l'essore puis on le recristallise dans un mélange de diméthyl formamide et d'éthanol. On isole 1,5 g de cristaux crème fondant à 223°C. Le spectre IR et la micro analyse sont en accord avec cette structure. 7- (3-hydroxymethylpiperidinyl) 6,8-difluoro 1-ethyl 4-oxo 1,4-dihydroquinoleinyl-3-carboxylic acid is heated for 8 hours at 130 ° with 2 g (0.0145M) of phthalic anhydride in 49 ml of dimethyl sulfoxide. After cooling, the reaction mixture is poured into water, the precipitate which has formed is separated, drained and then recrystallized from a mixture of dimethyl formamide and ethanol. 1.5 g of cream crystals, melting at 223 ° C., are isolated. The IR spectrum and micro analysis are in agreement with this structure.
De la même façon, on prépare le dérivé 1-allylé qui fond à 188°C (Composé 8). In the same way, the 1-allyl derivative is prepared which melts at 188 ° C (Compound 8).
EXEMPLE IVEXAMPLE IV
ACIDE 7-(3-SUCCINOYLOXYMETHYL IPERIDINYL- 6,8-DIFLUORO 1-ETHYL 4-OXOACID 7- (3-SUCCINOYLOXYMETHYL IPERIDINYL- 6,8-DIFLUORO 1-ETHYL 4-OXO
1,4-DIHYDROQUINOLEINYL-3 C ARBOXYLIQUE (Composé 9 ) On dissout 1,5 g d'acide 6 ,8-difluoro 7-( 3-hydroxyméthylpipéridinyl )1,4-DIHYDROQUINOLEINYL-3 C ARBOXYLIC (Compound 9) 1.5 g of 6,8-difluoro 7- (3-hydroxymethylpiperidinyl) acid are dissolved
1-éthyl 4-oxo 1, 4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylique dans 15 ml de diméthylsulf oxyde et 1,5 ml de pyridine.
On ajoute alors 1,8 g d'anhydride succinique préalablement dissout dans 10 ml de diméthyl suifoxyde. On chauffe le mélange pendant 3 heures à 110-115°, puis on laisse revenir à température ordinaire. On verse alors la solution dans l'eau glacée et laisse cristalliser pendant une heure. On sépare le précipité qui s'est formé, on l'essore, puis le lave à l'eau et à l'ethanol et le sèche sous vide. On recristallise le produit de l'ethanol. 1-ethyl 4-oxo 1, 4-dihydroquinoleinyl-3 carboxylic acid in 15 ml of dimethylsulfoxide and 1.5 ml of pyridine. Then 1.8 g of succinic anhydride previously dissolved in 10 ml of dimethyl sulfoxide are added. The mixture is heated for 3 hours at 110-115 °, then allowed to return to room temperature. The solution is then poured into ice water and allowed to crystallize for one hour. The precipitate which has formed is separated, drained, then washed with water and ethanol and dried under vacuum. The product is recrystallized from ethanol.
On recueille 1,1 g de cristaux incolores fondant à 140°C. 1.1 g of colorless crystals are collected, melting at 140 ° C.
Le spectre IR et la micro analyse sont en accord avec la structure. The IR spectrum and micro analysis are in agreement with the structure.
De la même façon, on prépare l'acide 7-(3-succιnoyloxyméthylpipéridinyl-1) 6,8-difluoro 1-allyl 4-oxo 1,4-dihydroquιnoleinyl 3-carboxylique qui fond à 130°C (Composé 10). In the same way, 7- (3-succιnoyloxymethylpiperidinyl-1) 6,8-difluoro 1-allyl 4-oxo 1,4-dihydroquιnoleinyl 3-carboxylic acid is prepared which melts at 130 ° C. (Compound 10).
EXEMPLE VEXAMPLE V
DETERMINATION DE L'ACTIVITE ANTIBACTE.RIENNE DES COMPOSES SELONDETERMINATION OF ANTIBACTE.RIENNE ACTIVITY OF COMPOUNDS ACCORDING TO
L'INVENTION THE INVENTION
Matériel et méthodes Material and methods
Les produits ont été testés vis-à-vis de 6 souches de référence - 3 espèces à grain positif : The products have been tested against 6 reference strains - 3 species with a positive grain:
. Bacillus subtilis ATCC 9372 . Bacillus subtilis ATCC 9372
. Staphylococcus aureus ATCC 25923 . Staphylococcus aureus ATCC 25923
. Streptococcus faecalis ATCC 8043 . Streptococcus faecalis ATCC 8043
- 3 espèces à gram négatif - 3 gram negative species
. Escherichia coli ATCC 25922 . Escherichia coli ATCC 25922
. Pseudαmonas aeruginosa ATCC 22853 . Pseudαmonas aeruginosa ATCC 22853
. Acinetobacter calcoaceticus variété anitratum ATCC 17903 . Acinetobacter calcoaceticus variety anitratum ATCC 17903
La mesure des concentrations minimales inhibitrices a été faite par une technique de microdilution (*) en milieu liquide (bouillon de MuellerHinton) sous un volume de 100 μl et pour une gamme de concentration
allant de 128 à 0,06 mg/l, préparé à partir d'une solution-mère d'antibiotique titrant 512 mg/l. La préparation de ces solutions-mère effectuée a varié selon les molécules en fonction des critères de solubilité. The minimum inhibitory concentrations were measured by a microdilution technique (*) in liquid medium (MuellerHinton broth) in a volume of 100 μl and for a concentration range ranging from 128 to 0.06 mg / l, prepared from a stock solution of antibiotic titrating 512 mg / l. The preparation of these stock solutions carried out varied according to the molecules as a function of the solubility criteria.
L'inoculation se fait en ajoutant dans chaque cupule 10 μl d'une dilution en eau physiologique d'un bouillon de 18H en bouillon coeur cervelle telle que chaque cupule contient environ 10 bactéries/ml. La concentration minimale inhibitrice est lue comme la première concentration d'antibiotique ne donnant pas de culture, macroscopiquement visible après 18H d'incubation à 37°. (*) microplaques et inoculateur Dynatech
The inoculation is done by adding to each cup 10 μl of a dilution in physiological water of a broth of 18 hours in broth of the brain, such that each cup contains about 10 bacteria / ml. The minimum inhibitory concentration is read as the first concentration of non-culture-giving antibiotic, macroscopically visible after 18 hours of incubation at 37 °. (*) Dynatech microplates and inoculator
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