EA046700B1 - Инъекционный антибиотический состав с замедленным высвобождением - Google Patents
Инъекционный антибиотический состав с замедленным высвобождением Download PDFInfo
- Publication number
- EA046700B1 EA046700B1 EA202190672 EA046700B1 EA 046700 B1 EA046700 B1 EA 046700B1 EA 202190672 EA202190672 EA 202190672 EA 046700 B1 EA046700 B1 EA 046700B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- florfenicol
- composition
- poloxamer
- weight
- concentration
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 144
- 238000009472 formulation Methods 0.000 title description 75
- 238000002347 injection Methods 0.000 title description 16
- 239000007924 injection Substances 0.000 title description 16
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 title description 9
- AYIRNRDRBQJXIF-NXEZZACHSA-N (-)-Florfenicol Chemical compound CS(=O)(=O)C1=CC=C([C@@H](O)[C@@H](CF)NC(=O)C(Cl)Cl)C=C1 AYIRNRDRBQJXIF-NXEZZACHSA-N 0.000 claims description 91
- 229960003760 florfenicol Drugs 0.000 claims description 81
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 55
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 claims description 52
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 49
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 claims description 40
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 claims description 31
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 claims description 26
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 claims description 25
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 claims description 25
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 claims description 24
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 18
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 16
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 12
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims description 7
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims description 7
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 claims description 4
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 claims description 3
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 claims description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 claims description 2
- 229940068918 polyethylene glycol 400 Drugs 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 60
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 57
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 51
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 49
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 41
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 41
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 31
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 27
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 18
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 17
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 16
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 13
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 13
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 13
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 13
- 229920001992 poloxamer 407 Polymers 0.000 description 13
- 229940044476 poloxamer 407 Drugs 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 description 11
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 10
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 10
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229940060568 nuflor Drugs 0.000 description 9
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 9
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 8
- 229920002565 Polyethylene Glycol 400 Polymers 0.000 description 8
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 8
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 8
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 7
- 239000004182 Tylosin Substances 0.000 description 7
- 229930194936 Tylosin Natural products 0.000 description 7
- 229960003022 amoxicillin Drugs 0.000 description 7
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 7
- LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N p-Hydroxyampicillin Natural products O=C1N2C(C(O)=O)C(C)(C)SC2C1NC(=O)C(N)C1=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 7
- 238000000518 rheometry Methods 0.000 description 7
- 229960004059 tylosin Drugs 0.000 description 7
- WBPYTXDJUQJLPQ-VMXQISHHSA-N tylosin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)O[C@H]([C@@H]([C@H]1N(C)C)O)O[C@@H]1[C@@H](C)[C@H](O)CC(=O)O[C@@H]([C@H](/C=C(\C)/C=C/C(=O)[C@H](C)C[C@@H]1CC=O)CO[C@H]1[C@@H]([C@H](OC)[C@H](O)[C@@H](C)O1)OC)CC)[C@H]1C[C@@](C)(O)[C@@H](O)[C@H](C)O1 WBPYTXDJUQJLPQ-VMXQISHHSA-N 0.000 description 7
- 235000019375 tylosin Nutrition 0.000 description 7
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 6
- -1 avilosin Chemical compound 0.000 description 6
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 102220487426 Actin-related protein 2/3 complex subunit 3_K15M_mutation Human genes 0.000 description 5
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- JTSDBFGMPLKDCD-XVFHVFLVSA-N tilmicosin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)[C@H](O)CC(=O)O[C@@H]([C@H](/C=C(\C)/C=C/C(=O)[C@H](C)C[C@@H]1CCN1C[C@H](C)C[C@H](C)C1)CO[C@H]1[C@@H]([C@H](OC)[C@H](O)[C@@H](C)O1)OC)CC)[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](N(C)C)[C@H]1O JTSDBFGMPLKDCD-XVFHVFLVSA-N 0.000 description 5
- ACTOXUHEUCPTEW-BWHGAVFKSA-N 2-[(4r,5s,6s,7r,9r,10r,11e,13e,16r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-5-[(2s,4r,5s,6s)-4,5-dihydroxy-4,6-dimethyloxan-2-yl]oxy-4-(dimethylamino)-3-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-10-[(2s,5s,6r)-5-(dimethylamino)-6-methyloxan-2-yl]oxy-4-hydroxy-5-methoxy-9,16-dimethyl-2-o Chemical compound O([C@H]1/C=C/C=C/C[C@@H](C)OC(=O)C[C@@H](O)[C@@H]([C@H]([C@@H](CC=O)C[C@H]1C)O[C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H](O[C@@H]2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@](C)(O)C2)[C@@H](C)O1)N(C)C)O)OC)[C@@H]1CC[C@H](N(C)C)[C@@H](C)O1 ACTOXUHEUCPTEW-BWHGAVFKSA-N 0.000 description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 4
- HZZVJAQRINQKSD-UHFFFAOYSA-N Clavulanic acid Natural products OC(=O)C1C(=CCO)OC2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N Lincomycin Natural products CN1CC(CCC)CC1C(=O)NC(C(C)O)C1C(O)C(O)C(O)C(SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004100 Oxytetracycline Substances 0.000 description 4
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 4
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 4
- ZRZNJUXESFHSIO-UHFFFAOYSA-N Pleuromutilin Natural products CC1C(O)C(C)(C=C)CC(OC(=O)CO)C2(C)C(C)CCC31C2C(=O)CC3 ZRZNJUXESFHSIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000004187 Spiramycin Substances 0.000 description 4
- GUARTUJKFNAVIK-QPTWMBCESA-N Tulathromycin A Chemical compound C1[C@](OC)(C)[C@@](CNCCC)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@H](CC)[C@@](C)(O)[C@H](O)[C@@H](C)NC[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C GUARTUJKFNAVIK-QPTWMBCESA-N 0.000 description 4
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 4
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 229960003324 clavulanic acid Drugs 0.000 description 4
- HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N clavulanic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1C(=C/CO)/O[C@@H]2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N 0.000 description 4
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 4
- 229960003722 doxycycline Drugs 0.000 description 4
- XQTWDDCIUJNLTR-CVHRZJFOSA-N doxycycline monohydrate Chemical compound O.O=C1C2=C(O)C=CC=C2[C@H](C)[C@@H]2C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@H](N(C)C)[C@@H]1[C@H]2O XQTWDDCIUJNLTR-CVHRZJFOSA-N 0.000 description 4
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 229960005287 lincomycin Drugs 0.000 description 4
- OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N lincomycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N 0.000 description 4
- 229960000282 metronidazole Drugs 0.000 description 4
- VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N metronidazole Chemical compound CC1=NC=C([N+]([O-])=O)N1CCO VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 4
- 229960000625 oxytetracycline Drugs 0.000 description 4
- 235000019366 oxytetracycline Nutrition 0.000 description 4
- IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N oxytetracycline Chemical compound C1=CC=C2[C@](O)(C)[C@H]3[C@H](O)[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N 0.000 description 4
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 4
- ZRZNJUXESFHSIO-VYTKZBNOSA-N pleuromutilin Chemical compound C([C@H]([C@]1(C)[C@@H](C[C@@](C)(C=C)[C@@H](O)[C@@H]2C)OC(=O)CO)C)C[C@]32[C@H]1C(=O)CC3 ZRZNJUXESFHSIO-VYTKZBNOSA-N 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 4
- 229960001294 spiramycin Drugs 0.000 description 4
- 235000019372 spiramycin Nutrition 0.000 description 4
- 229930191512 spiramycin Natural products 0.000 description 4
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 4
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 4
- 150000003456 sulfonamides Chemical class 0.000 description 4
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 4
- IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N terramycin dehydrate Natural products C1=CC=C2C(O)(C)C3C(O)C4C(N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)C4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960004885 tiamulin Drugs 0.000 description 4
- UURAUHCOJAIIRQ-QGLSALSOSA-N tiamulin Chemical compound CCN(CC)CCSCC(=O)O[C@@H]1C[C@@](C)(C=C)[C@@H](O)[C@H](C)[C@@]23CC[C@@H](C)[C@]1(C)[C@@H]2C(=O)CC3 UURAUHCOJAIIRQ-QGLSALSOSA-N 0.000 description 4
- 229960000223 tilmicosin Drugs 0.000 description 4
- IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N trimethoprim Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(CC=2C(=NC(N)=NC=2)N)=C1 IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960001082 trimethoprim Drugs 0.000 description 4
- 229960002859 tulathromycin Drugs 0.000 description 4
- 229920002511 Poloxamer 237 Polymers 0.000 description 3
- 229920002517 Poloxamer 338 Polymers 0.000 description 3
- KCJJINQANFZSAM-HZDSEHBESA-N [(2s,3s,4r,6s)-6-[(2r,3s,4r,5r,6r)-6-[[(4r,5s,6s,7r,9r,11e,13e,15r,16r)-4-acetyloxy-16-ethyl-15-[[(2r,3r,4r,5r,6r)-5-hydroxy-3,4-dimethoxy-6-methyloxan-2-yl]oxymethyl]-5,9,13-trimethyl-2,10-dioxo-7-(2-oxoethyl)-1-oxacyclohexadeca-11,13-dien-6-yl]oxy]-4-(d Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)O[C@H]([C@@H]([C@H]1N(C)C)O)O[C@@H]1[C@@H](C)[C@H](OC(C)=O)CC(=O)O[C@@H]([C@H](/C=C(\C)/C=C/C(=O)[C@H](C)C[C@@H]1CC=O)CO[C@H]1[C@@H]([C@H](OC)[C@H](O)[C@@H](C)O1)OC)CC)[C@H]1C[C@@](C)(O)[C@@H](OC(=O)CC(C)C)[C@H](C)O1 KCJJINQANFZSAM-HZDSEHBESA-N 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 3
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 3
- 239000012738 dissolution medium Substances 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 3
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 229960005404 sulfamethoxazole Drugs 0.000 description 3
- JLKIGFTWXXRPMT-UHFFFAOYSA-N sulphamethoxazole Chemical compound O1C(C)=CC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1 JLKIGFTWXXRPMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960002387 tylvalosin Drugs 0.000 description 3
- XLSYLQDVLAXIKK-NXEZZACHSA-N (1r,2s)-2-amino-3-fluoro-1-(4-methylsulfonylphenyl)propan-1-ol Chemical compound CS(=O)(=O)C1=CC=C([C@@H](O)[C@H](N)CF)C=C1 XLSYLQDVLAXIKK-NXEZZACHSA-N 0.000 description 2
- 108030001720 Bontoxilysin Proteins 0.000 description 2
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000194021 Streptococcus suis Species 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229940053031 botulinum toxin Drugs 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 238000009506 drug dissolution testing Methods 0.000 description 2
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 229960003943 hypromellose Drugs 0.000 description 2
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 2
- 238000002552 multiple reaction monitoring Methods 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- QEIXJGGCWUIRNP-ZPUUBZGTSA-N (8r,9s,13s,14s,17s)-13-methyl-6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthrene-3,17-diol;[(8s,13s,14s,17s)-13-methyl-3-oxo-2,6,7,8,14,15,16,17-octahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl] acetate Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1.C1CC2=CC(=O)CCC2=C2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](OC(=O)C)[C@@]1(C)C=C2 QEIXJGGCWUIRNP-ZPUUBZGTSA-N 0.000 description 1
- SPBDXSGPUHCETR-JFUDTMANSA-N 8883yp2r6d Chemical compound O1[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](OC)C[C@H](O[C@@H]2C(=C/C[C@@H]3C[C@@H](C[C@@]4(O[C@@H]([C@@H](C)CC4)C(C)C)O3)OC(=O)[C@@H]3C=C(C)[C@@H](O)[C@H]4OC\C([C@@]34O)=C/C=C/[C@@H]2C)/C)O[C@H]1C.C1C[C@H](C)[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@@]21O[C@H](C\C=C(C)\[C@@H](O[C@@H]1O[C@@H](C)[C@H](O[C@@H]3O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C3)[C@@H](OC)C1)[C@@H](C)\C=C\C=C/1[C@]3([C@H](C(=O)O4)C=C(C)[C@@H](O)[C@H]3OC\1)O)C[C@H]4C2 SPBDXSGPUHCETR-JFUDTMANSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004135 Bone phosphate Substances 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 208000030453 Drug-Related Side Effects and Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000002163 Mesapamea fractilinea Species 0.000 description 1
- 101100074998 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) nmp-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920000463 Poly(ethylene glycol)-block-poly(propylene glycol)-block-poly(ethylene glycol) Polymers 0.000 description 1
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical group CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 241000906446 Theraps Species 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012382 advanced drug delivery Methods 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000013011 aqueous formulation Substances 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 150000007514 bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000000227 bioadhesive Substances 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000007922 dissolution test Methods 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229920013746 hydrophilic polyethylene oxide Polymers 0.000 description 1
- 230000005661 hydrophobic surface Effects 0.000 description 1
- 239000012729 immediate-release (IR) formulation Substances 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 229940004975 interceptor Drugs 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 239000000468 intravenous fat emulsion Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- FJQXCDYVZAHXNS-UHFFFAOYSA-N methadone hydrochloride Chemical compound Cl.C=1C=CC=CC=1C(CC(C)N(C)C)(C(=O)CC)C1=CC=CC=C1 FJQXCDYVZAHXNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940028582 micotil Drugs 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000003883 ointment base Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- JLFNLZLINWHATN-UHFFFAOYSA-N pentaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCO JLFNLZLINWHATN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 229940051862 revalor Drugs 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 239000002511 suppository base Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 239000011885 synergistic combination Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001169 thermoplastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004416 thermosoftening plastic Substances 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 229920000428 triblock copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к составу с замедленным высвобождением, а более конкретно, к составу с замедленным высвобождением, который является подходящим для слабо растворимых антибиотиков, для ветеринарного применения.
Пероральное введение лекарственных препаратов, которое считается предпочтительным путем введения в медицине, по очевидным причинам является часто невозможным в ветеринарной медицине, особенно, когда это касается крупных домашних животных. По аналогичным причинам введение лекарственных препаратов, которые требуют многократного дозирования, часто оказывается трудным или даже непрактичным.
Замедленное высвобождение лекарственного средства после парентерального введения является, как правило, предпочтительнее перорального введения в ветеринарной медицине и позволяет лечить крупных домашних животных (таких как крупный рогатый скот), а также домашних и других животных. Известно, что уменьшение частоты дозирования повышает безопасность для пациентов, снижает частоту возникновения осложнений в месте инъекции и улучшает соблюдение протоколов введения лекарственных средств. Составы с замедленным высвобождением смягчают эффект болюсного введения во время инъекции и, таким образом, оказывают благотворное влияние на побочные эффекты лекарственного средства. Для некоторых профилактических применений и терапий однократное или нечастое введение стало стандартной процедурой. Например, введение один раз в месяц существует для большинства средств профилактики сердечных гельминтов, таких как Heartguard®, Sentinel® и Interceptor. Парентеральные составы с контролируемым высвобождением могут быть представлены в форме жидкостей, образующихся in situ твердых веществ и твердых веществ [Medlicott et al., Advanced Drug Delivery Reviews 2004, 56:1345-1365]. Продукты для парентерального введения с контролируемым высвобождением, пользующиеся наибольшим спросом, включают усилитель молока Posilac® (жидкая суспензия), антибиотик Micotil® (жидкий раствор), антибиотик Nuflor® (жидкий раствор) и усилитель роста Revalor® (твердый имплантат).
В последние годы сообщалось об исследованиях, включающих применение полоксамеров в составах с замедленным высвобождением. Полоксамеры представляют собой неионные триблок-сополимеры, которые состоят из блоков относительно гидрофильного полиэтиленоксида (РЕО) и относительно гидрофобного полипропиленоксида (РРО), расположенных в трехблочной структуре А-В-А: РЕО-РРО-РЕО. Водные гели полоксамера описаны, например, в патенте США 3740421. Полоксамеры применяют в качестве эмульгирующих агентов для внутривенных жировых эмульсий, в качестве солюбилизирующих агентов для поддержания прозрачности в эликсирах и сиропах, а также в качестве смачивающих агентов для антибактериальных средств. Их также можно применять в основах мазей или суппозиториев, а также в качестве связывающих веществ или покрытий для таблеток [Sweetman (Ed.), Martindale: The Complete Drug Reference, London: Pharmaceutical Press]. Гидрофобно-липофильный баланс (HLB) полоксамера может характеризоваться числом этиленоксидных и пропиленоксидных звеньев в сополимере. Из-за своей амфифильной природы сополимеры полоксамера проявляют свойства поверхностно-активного вещества, включая способность взаимодействовать с гидрофобными поверхностями и биологическими мембранами. В водных растворах при концентрациях выше критической концентрации мицеллообразования (CMC) эти сополимеры самоорганизуются в мицеллы. Диаметр мицелл полоксамера обычно варьируется от приблизительно 10 нм до 100 нм. Ядро мицелл состоит из гидрофобных блоков РРО, которые отделены от водной внешней среды гидратированной оболочкой из блоков РЕО. Ядро способно содержать различные терапевтические или диагностические реагенты [Bartrakova & Kabanov, Journal of Controlled Release 2008, 130:98-106]. Как правило, полоксамеры обозначаются буквой Р (для полоксамера), за которой следуют три цифры. Первые две цифры, умноженные на 100, дают приблизительную молекулярную массу ядра РРО, а последняя цифра, умноженная на 10, дает процентное содержание РЕО. Например, Р407 представляет собой полоксамер с молекулярной массой РРО, равной 4000 Да, и содержанием РЕО 70%. Согласно дополнительной системе обозначения (используемой, например, применительно к торговым наименованиям Pluronic® и Lutrol®), сополимер обозначается буквой, которая определяет его физическую форму при комнатной температуре: L для жидкости, Р для пасты, F для хлопьев (твердое вещество), за которой следуют две или три цифры. Первая цифра (или первые две цифры в трехзначном числе), умноженная на 300, обозначает приблизительную молекулярную массу гидрофобного блока, а последняя цифра, умноженная на 10, дает процентное содержание полиэтиленоксида (РЕО). Например, L61 представляет собой жидкий полоксамер с молекулярной массой РРО, равной 1800 Да, и содержанием РЕО 10%, который будет обозначаться как Р181 согласно системе обозначения, описанной выше.
В заявке на патент США 20090214685 описана термопластичная фармацевтическая композиция, содержащая ботулиновый токсин и биосовместимый полоксамер. Фармацевтическую композицию можно вводить в виде жидкости, и гелей после введения в систему доставки лекарственного средства с замедленным высвобождением, из которой ботулиновый токсин высвобождается в течение многодневного периода. В патенте США 7008628 описана фармацевтическая композиция, которая содержит линейный блок-сополимер, такой как полоксамер, модифицированный по концам биоадгезивным полимером, та
- 1 046700 ким как полиакриловая кислота. Полимер способен агрегировать в ответ на повышение температуры. В патенте США 7250177 описаны гелеобразующие полоксамеры, модифицированные поперечносшиваемой группой, такой как акрилат, которая может быть сшита с образованием термочувствительного и липофильного геля, полезного для доставки лекарственного средства или покрытия ткани. Дополнительный документ предшествующего уровня техники включает патент США 5035891 и US 2004/0247672. Международная заявка на патент WO 2012131678, на имя некоторых из авторов изобретения, относится к составам с замедленным высвобождением, включающим полоксамеры, в форме суспензии или другой форме нерастворенного активного агента, благодаря чему раскрытые составы позволяют использовать более высокие количества активного агента при однократном введении, при этом поддерживая приемлемые объемы вводимой дозы.
Флорфеникол представляет собой об используемый антибиотик широкого спектра действия, применяющийся, помимо прочего, для лечения респираторных заболеваний свиней (SRD). Одобренные ветеринарные препараты флорфеникола включают инъекционные составы, обычно содержащие 300 мг/мл. Один из таких одобренных продуктов для указанного инъекционного состава для ветеринарного применения растворяют в органическом растворителе N-метилпирролидоне (NMP). Некоторые составы для замедленного высвобождения флорфеникола были раскрыты ранее, включая китайскую заявку на патент CN 103202802, направленную на составы с замедленным высвобождением, которые включают полоксамеры и полисахариды. Раскрытие относится к нескольким различным полисахаридам и различным нагрузкам активного агента флорфеникола в указанных составах. Фармакокинетическое исследование образующегося in-situ геля для контролируемой доставки флорфеникола у свиней раскрыто в Geng et. al. [J. vet. Pharmacol. Therap. 38, 596-600], и продемонстрировано увеличение периода полужизни флорфеникола в плазме животных после введения гелей с 20% нагрузкой на основе полоксамеров и полисахарида на основе целлюлозы.
В данной области существует потребность в обеспечении инъекционных составов антибиотиков, которые могут высвобождать лекарственные средства контролируемым образом в течение продолжительных интервалов времени. Кроме того, в данной области существует потребность в обеспечении таких составов, которые будут успешно поддерживать минимальные уровни ингибирующей концентрации для различных ветеринарных патогенов. Существует еще одна потребность в данной области в обеспечении составов антибиотиков с высокой нагрузкой лекарственного средства, например, выше 25% и до около 50%, которые все еще можно вводить через обычные шприцы.
Краткое описание изобретения
Стабильность состава с замедленным высвобождением и влияние, которое указанная стабильность оказывает на профиль высвобождения активного агента в целевом организме во времени, является решающим фактором, который во многих случаях оказался неустойчивым равновесием между различными компонентами в составе. Неожиданно было обнаружено, что использование комбинации полоксамера, органического растворителя и необязательно производного целлюлозы, которое по меньшей мере частично растворимо в органических растворителях, в составе антимикробного агента с замедленным высвобождением привело к получению стабильного инъекционного состава в виде дисперсии, имеющего последовательный и воспроизводимый профиль высвобождения как in vitro, так и in vivo. Таким образом, в одно аспекте настоящее изобретение обеспечивает композицию, содержащую слаборастворимый антимикробный агент, по меньшей мере один полоксамер, органический растворитель и производное целлюлозы, которое по меньшей мере частично растворимо в органических растворителях, и водную среду, при этом указанная композиция является инъекционной. Кроме того, неожиданно было обнаружено, что при очень высокой нагрузке активного вещества, например, выше 35 мас.% или 40 мас.%, комбинации полоксамера и органического растворителя в воде может быть достаточной для обеспечения инъекционного состава, имеющего последовательный и воспроизводимый профиль высвобождения. Таким образом, в другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает композицию, содержащую антимикробный агент, по меньшей мере один полоксамер, органический растворитель и водную среду, где концентрация указанного антимикробного агента составляет более 35 мас.% и до более 40 мас.%, и при этом указанная композиция является инъекционной.
Таким образом, в настоящем документе обеспечена фармацевтическая композиция, содержащая биологически активный агент, полоксамер, водный носитель и органический сорастворитель, при этом указанная композиция представляет собой инъекционную композицию при комнатной температуре, при условии, что, когда концентрация указанного активного агента составляет менее 35 мас.%, композиция дополнительно содержит соединение на основе целлюлозы, которое по меньшей мере частично растворимо в органических растворителях. В одном варианте осуществления, когда концентрация лекарственного средства составляет более 35 мас.%, например, от 35 мас.% и до 50 мас.% или 55 мас.%, включают материал на основе целлюлозы. В других вариантах осуществления, когда концентрация лекарственного средства составляет более 35 мас.%, например, от 35 мас.% и до 50 мас.% или 55 мас.%, композиция не содержит материала на основе целлюлозы, например, составляет от 40 мас.% до 50 мас.%, или от 42,5 мас.% до 50 мас.%, или от 45 мас.% до 50 мас.%. Также, в настоящем документе обеспечена фармацевтическая композиция, содержащая биологически активный агент, полоксамер, водный носитель, органи
- 2 046700 ческий сорастворитель и соединение на основе целлюлозы, которое по меньшей мере частично растворимо в органических растворителях, где указанная композиция представляет собой инъекционную композицию при комнатной температуре, и при этом концентрация указанного биологически активного агента составляет более 10 мас.% и до 35 мас.%. Биологически активный агент может быть выбран из флорфеникола, линкомицина, тилозина, метронидазола, тилмикозина, спирамицина, эритромицина, тулатромицина, тиамулина, ампициллина, амоксициллина, клавулановой кислоты, пенициллина, стрептомицина, триметоприма, сульфонамида, сульфаметоксазола, плевромутилина, авилозина, тилиалозина, доксициклина и окситетрациклина. Предпочтительно биологически активным агентом является флорфеникол. Более того, предпочтительно флорфеникол может присутствовать в композиции при нагрузке от около 25 мас.% до около 50 мас.%. Органический сорастворитель может присутствовать в количестве от около 5 мас.% до около 15 мас.%. Материал на основе целлюлозы, который по меньшей мере частично растворим в органических растворителях, может представлять собой гидроксипропилцеллюлозу. Органический растворитель может быть выбран из группы, состоящей из N-метилпирролидона (NMP), диметилсульфоксида (DMSO), PEG 400, пропиленгликоля и этанола. Предпочтительно органический растворитель представляет собой N-метилпирролидон. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит органический растворитель, который представляет собой N-метилпирролидон, и материал на основе целлюлозы, который по меньшей мере частично растворим в органических растворителях, представляет собой гидроксипропилцеллюлозу, и биологически активный агент представляет собой флорфеникол при концентрации от 25 мас.% до 50 мас.%. В некоторых других предпочтительных вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит органический растворитель, который представляет собой N-метилпирролидон, и флорфеникол в концентрации от 35 мас.% до 50 мас.%. Также, в настоящем документе обеспечена фармацевтическая композиция, как определено в настоящем документе, для применения в лечении ветеринарной инфекции у животного, не являющегося человеком, путем введения указанному животному фармакологически эффективной дозы антибиотика в указанной композиции. Предпочтительно композицию вводят один раз указанному животному, не являющемуся человеком, за время курса лечения. Кроме того, предпочтительно введение включает внутримышечную инъекцию или подкожную инъекцию. В некоторых вариантах осуществления инфекция может быть вызвана патогеном свиней.
Краткое описание фигур
На фиг. 1 в схематическом виде представлены профили высвобождения флорфеникола из выбранных композиций.
На фиг. 2 в схематическом виде представлены профили высвобождения флорфеникола как эффект добавления органического растворителя.
На фиг. 3 представлены концентрации флорфеникола в плазме крови после однократного введения композиции в соответствии с изобретением по сравнению с двумя введениями коммерческого продукта.
На фиг. 4 представлены концентрации флорфеникола в плазме крови после однократного введения дополнительных композиций в соответствии с изобретением по сравнению с двумя введениями коммерческого продукта.
Подробное описание изобретения
Как описано выше, композиция с замедленным высвобождением по настоящему изобретению содержит активный биологический агент. В некоторых вариантах осуществления указанный биологический агент предпочтительно представляет собой антимикробный агент, который демонстрирует слабую растворимость в водной среде. Слабая растворимость может пониматься, как определено, например, в действующей Фармакопее США, но может быть лучше понята в контексте состава, как поясняется более подробно ниже. В соответствующем варианте осуществления антимикробный агент, используемый в композиции с замедленным высвобождением по настоящему изобретению, выбран из группы, состоящей из флорфеникола, линкомицина, тилозина, метронидазола, тилмикозина, спирамицина, эритромицина, тулатромицина, тиамулина, ампициллина, амоксициллина, клавулановой кислоты, пенициллина, стрептомицин, триметоприма, сульфонамида, сульфаметоксазола, плевромутилина, авилозина, тилвалозина, доксициклина и окситетрациклина. В некоторых предпочтительных на данный момент вариантах осуществления антимикробный агент представляет собой флорфеникол.
Согласно принципам настоящего изобретения нагрузка (т.е. количество биологически активного агента или антимикробного агента, которое вводят в инъекционную лекарственную форму) является высокой, обеспечивая пролонгированное и контролируемое высвобождение в течение нескольких дней. Высокой нагрузке инъекционной композиции по изобретению способствует, помимо других факторов, наличие состава, содержащего биологически активный агент, который может находиться в нерастворимой форме, тем самым образуя дисперсию в водной среде. Согласно принципам изобретения антибактериальный агент, диспергированный в составе, находится, до некоторой степени, в твердой форме. Предпочтительно более 90% лекарственного средства находится в нерастворимой форме, но лекарственное средство до 99,999% может находиться в нерастворимой форме. Нерастворимая форма лекарственного средства обычно включает основные соединения или соли, особенно имеющие низкую растворимость в воде, даже если может быть известна более растворимая соль.
- 3 046700
Нагрузка может варьироваться в зависимости от свойств нахождения активного агента в твердом состоянии. Когда лекарственное средство легко взаимодействует с водной средой или с полоксамером, или другими поверхностно-активными агентами, оно может образовывать пасту, то есть композицию, которую нелегко набрать шприцем (не набираемая шприцем) и/или не инъекционную при высоких значениях нагрузки. В этих случаях такие лекарственные средства можно применять при довольно низких значениях нагрузки, например, в диапазоне 12-20 мас.%, но, как правило, предпочтительна высокая нагрузка лекарственного средства. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления нагрузка составляет по меньшей мере около 20 мас.% инъекционной композиции.
В некоторых других вариантах осуществления нагрузка составляет от около 25 мас.% до около 30 мас.% инъекционной композиции. В некоторых других вариантах осуществления нагрузка составляет по меньшей мере около 30 мас.% инъекционной композиции. В некоторых дополнительных вариантах осуществления нагрузка составляет от около 30 до около 45 мас.% инъекционной композиции. В некоторых дополнительных вариантах осуществления нагрузка составляет от около 35 до около 50 мас.% инъекционной композиции. В некоторых вариантах осуществления нагрузка составляет от около 30 до около 35 мас.% инъекционной композиции. В некоторых конкретных вариантах осуществления, когда биологически активным агентом является флорфеникол, нагрузка флорфеникола, используемая для конкретных применений, может составлять 25-50 мас.%, такую как 28-32 мас.%, или 36-42 мас.%, или 44-48 мас.%.
Биологически активный агент образует дисперсию в водной среде с помощью сорастворителя. Следует понимать, что биологически активный агент должен быть в форме твердого вещества, например, порошка. Порошок может быть в форме агрегатов, гранул или порошка с покрытием, но предпочтительно порошок представляет собой порошок чистого лекарственного вещества с определенным распределением частиц по размерам. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления порошок имеет частицы размером менее чем около 90 микрон, более предпочтительно менее чем около 50 микрон. Иногда может быть выгодным использовать также частицы меньшего размера или даже микронизированный порошок. Без привязки к теории полагают, что порошок с меньшим размером частиц может увеличить пиковую концентрацию в плазме, получаемую из состава in vivo, по сравнению с обычным порошком лекарственного средства, даже если in vitro различие будет небольшим или незначительным. Микронизированный порошок или порошок с уменьшенным размером частиц может быть получен непосредственно из порошка биологически активного вещества, как общеизвестно в данной области, например, путем измельчения с высокой ударной нагрузкой или высоким усилием сдвига, просеивания под давлением и другими способами.
В некоторых предпочтительных вариантах осуществления биологически активный материал или антимикробный агент высвобождается из образованного in-situ геля композиции по настоящему изобретению в течение по меньшей мере 3 дней. В некоторых других вариантах осуществления материал высвобождается в течение 2-3 дней. В некоторых дополнительных вариантах осуществления материал высвобождается в течение 4-5 дней. В некоторых вариантах осуществления материал высвобождается в течение более 5 последовательных дней из единой инъекционной композиции по настоящему изобретению. Таким образом, высвобождение может быть описано скорее с точки зрения продолжительности высвобождения, а не какой-либо конкретной скорости. Продолжительность высвобождения in vivo может быть определена в плазме как концентрации лекарственного средства, сохраняющие значительные уровни с течением времени. В другом варианте осуществления продолжительность высвобождения in vivo может быть определена в целевом органе или ткани как концентрации лекарственного средства, сохраняющие значительные уровни с течением времени. В частности, поскольку активным агентом является антибиотик, продолжительность высвобождения может быть определена в плазме крови, и полученные концентрации могут быть сопоставлены с минимальными ингибирующими концентрациями антибиотиков для конкретных патогенов. In vitro, благодаря поддержанию условий достаточного разбавления, продолжительность высвобождения лекарственного средства может составлять от около 12 ч до около 3 дней, например, в условиях, описанных в разделе Примеры ниже.
В соответствии с некоторыми принципами настоящего изобретения выгодная комбинация органического сорастворителя, полоксамера в водной среде и производного целлюлозы, которое по меньшей мере частично растворимо в органических растворителях, дает синергетический эффект, обеспечивая стабильное и контролируемое высвобождение биологически активного агента в течение нескольких дней. Нагрузка лекарственного средства в составах, содержащих такое производное целлюлозы, может составлять всего лишь около 5 мас.% или около 10 мас.%. Однако, в зависимости от свойств антибиотика в твердом состоянии, нагрузка лекарственного средства может достигать 35 мас.% или 40 мас.%, или 45 мас.%, или 47,5 мас.%, или даже 50 мас.%. Более того, когда активный агент присутствует в концентрации выше 35 мас.%, неожиданно было обнаружено, что относительно стабильная и воспроизводимая кинетика высвобождения лекарственного средства может быть достигнута с помощью композиций, содержащих полоксамер, воду и органический сорастворитель, как определено в настоящем документе. Несмотря на то, что присутствие производного целлюлозы, которое по меньшей мере частично растворимо в органических растворителях, оказалось полезным даже при высокой нагрузке лекарственного средства, профили высвобождения без вспомогательного вещества неожиданно оказались достаточно
- 4 046700 стабильными, чтобы соответствовать требованиям текущей Фармакопеи США в отношении изменчивости высвобождения лекарственного средства из лекарственных форм с контролируемым высвобождением. Однако, когда нагрузка лекарственного средства составляет менее 35 мас.%, предпочтительно, чтобы композиция содержала производное целлюлозы, как описано ниже.
В соответствии с некоторыми вариантами осуществления описанный выше полоксамер выбран из группы, состоящей из полоксамера 407, полоксамера 188, полоксамера 237 и полоксамера 338, и их комбинации. В некоторых предпочтительных на данный момент вариантах осуществления полоксамер, как описано выше, представляет собой полоксамер 407.
Присутствие полоксамера позволяет композиции превращаться в гель при физиологической температуре и, следовательно, указанный полоксамер должен присутствовать в подходящей концентрации в инъекционной композиции, чтобы обеспечить образование стабильного геля, особенно в присутствии большого количества нерастворенного порошка активного вещества. Соответственно, концентрация полоксамера, как описано выше, составляет более 8 мас.% от общей массы состава. В зависимости от природы лекарственного средства, например размера частиц, растворимости лекарственного средства, его сродства к полоксамеру и от нагрузки лекарственного средства, количество полоксамера может составлять всего лишь 7-9 мас.% и до 16-20 мас.%.
Синергетический эффект некоторых вариантов осуществления настоящего изобретения достигается путем объединения указанного полоксамера с уникальной комбинацией органического сорастворителя и производного целлюлозы, которое по меньшей мере частично растворимо в органических растворителях. Химическая совместимость между производным целлюлозы и органическим растворителем, и соотношение между этими двумя компонентами определяют, вместе с концентрацией полоксамера, профиль высвобождения биологически активного агента. Не ограничиваясь каким-либо механизмом или теорией, постулируется, что, хотя органический растворитель может увеличивать растворимость биологически активного агента, он также замедляет скорость высвобождения указанного активного агента из композиции в форме геля в физиологических условиях, вследствие по его влияния на сам гель. Кроме того, постулируется, что по меньшей мере для некоторых лекарственных средств добавление производного целлюлозы, как описано выше, может отвечать за увеличение скорости высвобождения биологически активного агента, и что органический растворитель способствует снижению вариабельности общего профиля высвобождения в течение времени. Хотя молекулярная масса подлежащего использованию производного целлюлозы может быть выбрана в соответствии с требуемыми реологическими свойствами и предполагаемым профилем высвобождения, в соответствии с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения соотношение концентраций между указанным производным целлюлозы и указанным органическим растворителем обычно составляет от около 1:6 до около 1:20. Когда лекарственное средство присутствует в особенно высокой нагрузке, например, от более 35 мас.% до более 40 мас.%, соотношение концентраций между указанным производным целлюлозы и указанным органическим растворителем может составлять от около 1:10 до около 1:100.
Производное целлюлозы, которое по меньшей мере частично растворимо в органических растворителях, обычно является таким, что оно растворяется до некоторой заметной степени в обычных фармацевтических органических растворителях, например, в этаноле. Предпочтительно подходящее производное образует прозрачный раствор при растворении, например, 1 грамма производного в 100 мл 96%этанола при комнатной температуре. Одним подходящим производным целлюлозы, которое по меньшей мере частично растворимо в органических растворителях, является гидроксипропилцеллюлоза.
Гидроксипропилцеллюлоза обладает еще одним полезным свойством, заключающимся в том, что она также хорошо растворяется в водных растворах при комнатной температуре и становится менее растворимой при повышении температуры. Не ограничиваясь какой-либо теорией или механизмом действия, предполагается, что при инъекции композиции по изобретению животному растворимость гидроксипропилцеллюлозы снижается, что, в свою очередь, способствует стабильности образованного геля, приводя к лучшему контролю высвобождения биологически активного агента.
В некоторых связанных вариантах осуществления концентрация производного целлюлозы, как описано выше, составляет от около 0,5 мас.% до около 1,5 мас.% от общей массы инъекционной композиции. В некоторых других вариантах осуществления концентрация производного целлюлозы составляет от около 0,5 до около 1 мас.%. Когда лекарственное средство присутствует в очень высокой нагрузке, например, выше 40%, концентрация производного целлюлозы может составлять от около 0,05 мас.% до около 0,7 мас.%.
В некоторых вариантах осуществления описанный выше органический растворитель выбран из группы, состоящей из N-метилпирролидона (NMP), диметилсульфоксида (DMSO), PEG 400, пропиленгликоля и этанола. В некоторых предпочтительных в данный момент вариантах осуществления органический растворитель представляет собой NMP.
В некоторых связанных вариантах осуществления концентрация органического растворителя, как описано выше, составляет от около 1,5 мас.% до около 20 мас.% от общей массы инъекционной композиции. В некоторых других вариантах осуществления концентрация органического растворителя составляет от около 3 до около 15 мас.%. В еще некоторых других вариантах осуществления концентрация ор- 5 046700 ганического растворителя составляет от около 8 мас.% до около 12 мас.%.
В дополнительных соответствующих вариантах осуществления по меньшей мере один полоксамер, органический растворитель и производное целлюлозы растворены в водной среде. Водная среда обычно представляет собой воду, необязательно содержащую дополнительные растворенные добавки, такие как соли и/или буферы. Количество водной среды в препарате обычно представляет собой остаток от 100% композиции после вычитания соответствующего процентного содержания биологически активного агента, по меньшей мере одного полоксамера, производного целлюлозы, сорастворителя и других вспомогательных веществ в случае использования. Соли могут включать хлорид натрия, хлорид кальция или хлорид магния, а буферы могут включать моно-, ди- или трехосновные соли щелочных металлов и фосфаты.
Несмотря на то, что синергетический эффект, который может присутствовать для сорастворителя, производного целлюлозы, которое по меньшей мере частично растворимо в органических растворителях, и полоксамера в водной среде, несомненно является предпочтительным, когда лекарственное средство присутствует в очень высокой нагрузке, например, более 35 мас.% и до более 40 мас.%, влияние производного целлюлозы на стабилизацию системы может стать менее требующимся для получения фармацевтически приемлемой композиции, например, демонстрирующей профиль высвобождения с относительным стандартным отклонением значений концентраций в каждый момент времени ниже 10%. Как показано в примерах ниже, например, исключение гидроксипропилцеллюлозы из состава флорфеникола при нагрузке 47,5 мас.% привело к умеренному взрывному эффекту с увеличением относительного стандартного отклонения (RSD) в ранние моменты времени, но также к приемлемому профилю высвобождения.
В соответствии с принципами изобретения полученный состав представляет собой стабильный при комнатной температуре (например, в диапазоне 15-25°C) или в холоде (например, в диапазоне 2-8°C) инъекционный состав, который после инъекции в тело животного (например, имеющего температуру выше 35°C) трансформируется в гелеобразную форму, характеризующуюся тем, что обладает воспроизводимым и хорошо контролируемым профилем высвобождения биологически активного агента, включенного в него.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает способ изготовления инъекционных составов с замедленным высвобождением, содержащих антимикробный агент, по меньшей мере один полоксамер, органический растворитель и производное целлюлозы, которое по меньшей мере частично растворимо в органических растворителях, в водной среде, включающий следующие стадии: 1) смешивание воды и органического растворителя (известного как сорастворитель) и предпочтительно охлаждение полученной в результате смеси, 2) добавление последовательно или одновременно по меньшей мере одного полоксамера и указанного производного целлюлозы в [холодную] смесь, полученную на стадии 1, с последующим перемешиванием до растворения; и 3) добавление антимикробного агента в полученную смесь.
В некоторых вариантах осуществления описанный выше органический растворитель выбран из группы, состоящей из N-метилпирролидона (NMP), ДМСО (DMSO), ПЭГ (PEG 400), пропиленгликоля и этанола. В некоторых предпочтительных на данный момент вариантах осуществления органический растворитель представляет собой NMP.
В некоторых вариантах осуществления описанный выше полоксамер выбран из группы, состоящей из полоксамера 407, полоксамера 188, полоксамера 237, полоксамера 338 и их комбинации. В некоторых предпочтительных на данный момент вариантах осуществления полоксамер, как описано выше, представляет собой полоксамер 407.
В некоторых вариантах осуществления производное целлюлозы представляет собой гидроксипропилцеллюлозу.
В некоторых вариантах осуществления антимикробный агент, используемый на стадии 3, выбран из группы, состоящей из флорфеникола, линкомицина, тилозина, метронидазола, тилмикозина, спирамицина, эритромицина, тулатромицина, тиамулина, ампициллина, амоксициллина, клавулановой кислоты, пенициллина, стрептомицина, триметоприма, сульфонамида, суламетоксазола, плевромутилина, авилозина, тилвалозина, доксициклина, окситетрациклина. В некоторых предпочтительных на данный момент вариантах осуществления антимикробный агент представляет собой флорфеникол.
Термин биологически активный агент, используемый в настоящем документе и в формуле изобретения, является взаимозаменяемым с термином антибактериальный агент, лекарственное средство или антибиотики.
Используемый в настоящем документе и в формуле изобретения термин сорастворитель относится к органическому растворителю, который смешан с водным носителем или водой в составе по изобретению. В некоторых вариантах осуществления описанный выше органический растворитель выбран из группы, состоящей из N-метилпирролидона (NMP), DMSO, PEG 400, пропиленгликоля и этанола.
В дополнительном аспекте обеспечен способ лечения ветеринарных инфекций или применение композиций в лечении ветеринарных инфекций путем введения пациенту, нуждающемуся в этом, по меньшей мере одной инъекции инъекционных композиций с замедленным высвобождением, как в целом описано в настоящем документе, содержащих в водной среде антимикробный агент, по меньшей мере
- 6 046700 один полоксамер, органический растворитель и необязательно производное целлюлозы, которое по меньшей мере частично растворимо в органических растворителях. Предпочтительно способ включает однократное введение состава, но можно использовать более чем одну инъекцию в зависимости от необходимости и продолжительности лечения. При работе с ветеринарным пациентом предпочтительно свести к минимуму манипуляции с ним, чтобы таким образом уменьшить стресс у животного и усилия, требуемые для локализации, захвата и обращения с больным животным. Таким образом, однократное введение является предпочтительным. Альтернативно, способ включает многократные введения состава, в том случае, когда число введений ниже, чем требуется на данный момент для конкретного биологически активного агента.
Введение может включать одну инъекцию или несколько инъекций в несколько участков, если требуется большой объем инъекции. Благодаря преимуществам составов по настоящему изобретению может не потребоваться использование множества участков для инъекции, поскольку слаборастворимое лекарственное средство присутствует в достаточном количестве в относительно небольших объемах инъекции.
Введение обычно представляет собой внутримышечную инъекцию. Однако введение может также представлять собой подкожное введение, внутрибрюшинное введение, внутрикожное введение или введение в определенные участки, такое как внутривульвальное введение для коров и овец, интракаудальное введение или введение в ухо для крупного рогатого скота, интрамаммарное введение и т.п.
Ветеринарные инфекции, которые можно лечить в соответствии с изобретением, включают инфекции, вызванные патогенами свиней, инфекции крупного рогатого скота, инфекции домашней птицы, инфекции домашних животных или инфекции животных зоопарка и диких животных.
В некоторых вариантах осуществления описанный выше органический растворитель выбран из группы, состоящей из N-метилпирролидона (NMP), DMSO, PEG 400, пропиленгликоля и этанола. В некоторых предпочтительных на данный момент вариантах осуществления органический растворитель представляет собой NMP. В некоторых вариантах осуществления описанный выше полоксамер выбран из группы, состоящей из полоксамера 407, полоксамера 188, полоксамера 237, полоксамера 338 и их комбинации. В некоторых предпочтительных на данный момент вариантах осуществления полоксамер, как описано выше, представляет собой полоксамер 407. В некоторых вариантах осуществления производное целлюлозы представляет собой гидроксипропилцеллюлозу. В некоторых вариантах осуществления антимикробный агент выбран из группы, состоящей из флорфеникола, линкомицина, тилозина, метронидазола, тилмикозина, спирамицина, эритромицина, тулатромицина, тиамулина, ампициллина, амоксициллина, клавулановой кислоты, пенициллина, стрептомицина, триметоприма, сульфонамида, сульфаметоксазола, плевромутилина, авилозина, тилвалозина, доксициклина, окситетрациклина. В некоторых предпочтительных на данный момент вариантах осуществления антимикробный агент представляет собой флорфеникол.
Примеры
Материалы и способы.
Флорфеникол и N-метилпирролидон (NMP) приобретали у компании Sigma-Aldrich, Israel. Полоксамеры 407, 188, 338 и 237 получали у местного представителя BASF. Амоксициллин, тилозин, полимеры Klucel® (гидроксипропилцеллюлоза), PEG400 и пропиленгликоль получали в качестве подарка от фармацевтических компаний. Воду перед использованием очищали на колонке и перегоняли. Хлорид натрия приобретали у компании Merck, Israel.
Если не указано иное, инъекционные составы флорфеникола получали следующим образом.
Отмеренные количества воды и сорастворителя смешивали при комнатной температуре, добавляли соли или буферы, в случае присутствия в составе, и перемешивали до достижения растворения. Отмеренные количества полоксамера и производного целлюлозы охлаждали до 4°C в холодной комнате; отдельно охлаждали также смеси воды и сорастворителя. Затем полимеры добавляли к смеси воды и сорастворителя в тех же условиях и интенсивно перемешивали с использованием магнитной мешалки до получения прозрачного раствора. Затем к полученному раствору добавляли порошок флорфеникола (хлопья) и перемешивали в течение 24 часов в холодной комнате, чтобы гарантировать хорошее распределение в препарате. В качестве альтернативы, в частности, для составов с высокой нагрузкой, отмеренное количество флорфеникола помещали в ступку и геометрически растирали, то есть смешивали в ступке с сопоставимыми аликвотами раствора до тех пор, пока не была израсходована вся отмеренная аликвота приготовленного раствора.
Измерение температуры гелеобразования.
Гелеобразование измеряли путем переворачивания стеклянной пробирки, содержащей 0,5-1 мл состава, при возрастающей температуре. Температура, при которой состав прекращал стекать при переворачивании, считалась начальной температурой гелеобразования. В качестве альтернативы, для предварительного скрининга температуру повышали до 40°C и регистрировали время, за которое состав превращался в гелеобразную форму.
Температуру гелеобразования также измеряли реометрически, используя реометр Physica MCR 101 от фирмы Anton Paar, шпиндели параллельных пластин, разделенные зазором 200 мкм, с изменением
- 7 046700 температуры при скорости сдвига 100 с-1. Вторая производная кривой вязкости дала наиболее резкое изменение вязкости, которое считалось истинной точкой гелеобразования.
Определение флорфеникола.
Флорфеникол определяли с помощью HPLC, используя прибор HP1090, с УФ-детектором, измеряющим поглощение при 224 нм. Использовали колонку С-18 250x4,6, 5 мкм, с элюированием при 1,2 мл/мин, с подвижной фазой 25:75 ацетонитрил (ACN): обедненная по дейтерию вода (DDW). Флорфеникол элюировался в этих условиях через 4-4,5 мин.
Тестирование растворения.
Для тестирования кинетики растворения флорфеникола из составов цилиндры шприцев объемом 5 мл разрезали на сегменты по 2 мл, которые служили в качестве держателей - в форме трубки. Одну сторону закрывали листом Parafilm®, и аликвоты состава объемом около 2 мл при комнатной температуре точно отмеряли в указанные подготовленные пробирки-держатели через иглу 19G, используя подходящий шприц, таким образом оценивая инъекционную способность состава. Затем верхнюю сторону закрывали другим листом Parafilm® и помещали в предварительно нагретую до 40°C печь по меньшей мере на 15 мин для обеспечения гелеобразования. Затем листы Parafilm® аккуратно удаляли, пробиркудержатель помещали в грузило для тестера растворимости Sinker Basket и немедленно переносили в тестер растворимости Caleva 6ST (USP Apparatus 2), установленный на 20 об/мин при 40°C. Температуру выбирали таким образом, чтобы она соответствовала и имитировала температуру тела целевого животного (свиньи). Среда растворения представляла собой фосфатный буфер по ФСША, при рН 6,8, и на каждую пробирку-держатель использовали объем 900 мл. Образцы отбирали из среды растворения в предварительно определенные моменты времени, и объем корректировали свежей средой растворения. В конце тестирования пробирки-держатели промывали в сосудах для растворения и энергично перемешивали с получением извлекаемого количества материала, которое могло бы служить в качестве 100% эталона. Регистрировали процентиль максимальной концентрации флорфеникола в каждый момент времени со стандартным отклонением.
Кроме того, растворение некоторых композиций флорфеникола выполняли с использованием аппарата 5 ФСША (лопасть над диском), как указано ниже.
Пример 1. Сравнительный пример.
А. Для оценки эффективности составов, раскрытых в китайской заявке на патент CN 103202802, воспроизводили пример 7 (30% флорфеникол) указанной публикации и тестировали в описанных условиях. Так как публикация содержит недостаточно рекомендаций, касающихся марки используемой гипромеллозы, отдельно тестировали две марки, имеющие кажущуюся вязкость ниже 20 сП при тестируемых низких концентрациях (НРМС К4М и НРМС К15М). Вкратце, полоксамеры точно отмеривали, охлаждали и растворяли в большой порции холодной воды при 4°C с последующим добавлением гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМС). Остальные вспомогательные вещества были обеспечены из исходных растворов, и оставшееся содержание воды добавляли и тщательно перемешивали. Получали образцы составов, имеющие общее количество 25 граммов, образцы, изготовленные с использованием ГПМЦ (НРМС) К4М, обозначают как образец препарата 1.1, а образцы, изготовленные с использованием НРМС К15М, называют как образец препарата 1.2.
Для тестирования полезного эффекта органического растворителя в соответствии с настоящим изобретением изготавливали такие же составы, которые описаны выше, на этот раз с использованием приблизительно 20 мас.% N-метилпирролидона в качестве сорастворителя от общей массы растворителя (заменяя 20% воды органическим растворителем), тем самым получая образец препарата 1.3 и образец препарата 1.4, соответствующие НРМС К4М и НРМС К15М, соответственно.
Было обнаружено, что в экспериментальных условиях, то есть при комнатной температуре, образцы, изготовленные в соответствии с 1.1, и образцы, изготовленные в соответствии с 1.2, нельзя было набрать в шприц даже без иглы. Это свидетельствует о том, что указанный состав, изготовленный в соответствии с раскрытием CN 103202802 (пример 7), оказался не инъецируемым в описанных условиях. Для того, чтобы получить профиль высвобождения и результаты для указанных не инъецируемых составов, образцы добавляли с использованием шпателя. Следует также отметить, что добавление NMP в качестве сорастворителя повысило вязкость сверх применяемого на практике уровня (твердый гель даже при 4°C), тем не менее образцы, изготовленные в соответствии с 1.3 и 1.4, тестировали на высвобождение лекарственного средства, хотя они также не могли быть инъецированы.
В. Для получения инъекционных композиций изготавливали составы с 20% нагрузкой, следуя методике примера 7 и примера 6 публикации CN 103202802 предшествующего уровня техники. Вкратце, нагрузка флорфеникола была уменьшена за счет воды. Образец препарата 1.5 включал НРМС К15М и чистую воду, и образец препарата 1.6 включал НРМС К15М и 20 мас.% NMP в качестве сорастворителя. Полученные составы, соответствующие препаратам 1.5 и 1.6, содержащие 20 мас.% флорфеникола, легко вводились через тестируемую иглу и превращались в гель в условиях изготовления образца для тестирования растворения.
Для тестирования профиля высвобождения флорфеникола из составов, описанных выше, несмотря
- 8 046700 на отсутствие инъекционных свойств композиций, изготовленных в соответствии с 1.1-1.4, указанные композиции вносили в пробирки с помощью шпателя по обычной методике наполнения полутвердых круглых форм. Результаты представлены в табл. 1 ниже.
Из табл. 1 можно видеть, что в целом добавление NMP к композиции, содержащей НРМС, ускоряет скорость высвобождения флорфеникола из препаратов, и иногда снижает вариабельность, например, при сравнении препаратов 1.1 с 1.3, 1.2 с 1.4, 1.5 с 1.6.
Также, можно видеть, что инъекционный состав в соответствии с публикацией предшествующего уровня техники может иметь только 20% нагрузку флорфениколом, что также подтверждается другой публикацией тех же авторов, Z. X. Geng, H. M. Li, J. Tian, T. F. Liu, Z. G. Yu, J Vet Pharmacol Ther, Vol 38, Iss 6, Dec 2015, 596-600). Более высокая нагрузка не может быть достигнута в инъекционных композициях, в которых используется состав в соответствии с предшествующим уровнем техники.
Таблица1
| Препарат 1.1 | Препарат 1.2 | Препарат 1.3 | Препарат 1.4 | Препарат 1.5 | Препарат 1.6 | |||||||
| Время (ч) | Сред | sd | Сред | sd | Сред | sd | Сред | sd | Сред | sd | Сред | sd |
| 0.25 | 2,52 | 0,51 | 2,61 | 0,44 | 2,61 | 0,44 | 2,98 | 0,38 | 2,47 | 2,15 | 3,94 | 0,61 |
| 0.5 | 4,25 | 1,16 | 5,80 | 0,79 | 5,80 | 0,79 | 7,39 | 0,47 | 5,52 | 4,35 | 9,34 | 0,49 |
| 1 | 6,54 | 1,49 | 11,02 | 2,12 | 11,02 | 2,12 | 15,50 | 1,06 | 10,41 | 7,06 | 15,25 | 1Д5 |
| 1.5 | 8,34 | 1,45 | 15,44 | 2,92 | 15,44 | 2,92 | 22,30 | 1,78 | 15,76 | 7,09 | 20,28 | 1,48 |
| 2 | 9,43 | 1,60 | 18,70 | 3,28 | 18,70 | 3,28 | 27,90 | 2,65 | 19,59 | 6,84 | 24,13 | 1,81 |
| 3 | 12,56 | 3,02 | 23,94 | 3,23 | 23,94 | 3,23 | 36,28 | 3,94 | 27,20 | 6,40 | 30,80 | 2,96 |
| 4 | 16,40 | 3,22 | 28,94 | 2,33 | 28,94 | 2,33 | 43,82 | 3,11 | 32,61 | 5,57 | 37,23 | 4,07 |
| 5 | 20,63 | 5,31 | 35,19 | 4,10 | 35,19 | 4,10 | 49,79 | 2,01 | 36,75 | 4,77 | 42,60 | 4,02 |
| 6 | 23,73 | 5,72 | 38,59 | 1,59 | 38,59 | 1,59 | 55,42 | 2,43 | 41,78 | 6,86 | 48,17 | 3,10 |
| 7 | 27,12 | 6,67 | 42,20 | 1,93 | 42,20 | 1,93 | 57,69 | 1,87 | 43,69 | 4,76 | 53,70 | 2,96 |
| 8 | 30,22 | 7,38 | 45,46 | 1,71 | 45,46 | 1,71 | 63,62 | 5,77 | 46,27 | 4,46 | 59,21 | 5,93 |
| 24 | 48,68 | 9,42 | 72,25 | 7,96 | 72,25 | 7,96 | 87,11 | 7,07 | 75,23 | 8,86 | 85,66 | 7,62 |
| Мах вязкость | 44,9 Пас | 38,4 Пас | 18,3 Па с | 22,9 Пас | ||||||||
| Min вязкость | 0,59 Пас | 0,49 Пас | Плотный гель при 4°С | 0,18 Пас | 0,27 Пас | |||||||
| Гелеобр. 1°С | 12,9°С | 12,8°С | 18,4°С | 17,ГС | ||||||||
| Диапазон гелеобр. | 12,3- | 14,4 | 12,3 | 14,8 | 17,5 | -19,9 | 16,2-19,9 |
Пример 2.
Для оценки преимуществ состава флорфеникола с замедленным высвобождением в соответствии с принципами настоящего изобретения по сравнению с другим известным составом на основе геля с замедленным высвобождением, раскрытым в международной заявке на патент WO 2012131678, получали гели, содержащие 30% по массе флорфеникола. Выделяли и изучали эффект сорастворителя NMP, материала на основе целлюлозы гидроксипропилцеллюлозы и их синергической комбинации. Все составы продемонстрировали гелеобразование при температуре между 25 и 35°C (индивидуальные данные приводятся ниже), и профили высвобождения оценивали в соответствии со способом, описанным выше. Составы обобщены в таблицах ниже вместе с их соответствующими данными профилей высвобождения.
Препарат 2.1 соответствует варианту осуществления настоящего изобретения и содержит материал на основе целлюлозы гидроксипропилцеллюлозу; препарат 2.2 демонстрирует эффект отсутствия сорастворителя; препарат 2.3 демонстрирует эффект отсутствия гидроксипропилцеллюлозы (Klucel® EF) и сорастворителя NMP; и препарат 2.4 представляет собой препарат сравнения в соответствии с WO2012131678, не содержащий сорастворителя и целлюлозной добавки. Препарат 2.5 (варианта осуществления по изобретению) демонстрирует более низкую нагрузку (20 мас.% флорфеникола), и препарат 2.6 содержит 20% флорфеникола и для сравнения с препаратом 2.6 препарат без NMP.
При сравнении результатов, полученных для препаратов 2.1 и 2.3, можно легко заметить, что добавление NMP к составу в соответствии с WO 2012131678 вызывает значительное уменьшение высвобождения лекарственного средства со значительным уменьшением вариабельности между результатами. Кроме того, добавление гидроксипропилцеллюлозы к составу в соответствии с WO 2012131678 приводит к значительному снижению скорости высвобождения и относительно высокой вариабельности профиля высвобождения. Согласно результатам, только добавление обоих компонентов (NMP и НРС) обеспечивает синергетический эффект, что приводит к более низкой вариабельности (стандартное отклонение среднего значения относительно среднего значения является более низким) и увеличивает высвобождение лекарственного средства по сравнению с чистыми водными составами 2.2 и 2.3. Кроме того, можно видеть, что составы, имеющие 20% нагрузку в соответствии с изобретением, производят сопоставимое, но несколько более ослабленное высвобождение флорфеникола с еще меньшей вариабельностью, чем гипотетический 20% состав CN'802 с гипромеллозой вместо гидроксипропилцеллюлозы (препарат 1.5).
Результаты обобщены в табл. 2 ниже, а также на фиг. 1. На фиг. 1 показаны профили высвобожде
- 9 046700 ния с планками погрешностей, показывающими относительное стандартное отклонение (RSD) в каждый момент времени. Ромбы (♦) представляют препарат 2.1, заштрихованные квадраты () - препарат 2.2, заштрихованные треугольники (▲) - препарат 2.3 и знаки X (х) - препарат 2.4, где % FFC указывает совокупный процентиль высвобождения флорфеникола, и t (h) указывает время, прошедшее с начала эксперимента, в часах.
Таблица 2
| Препа | рат 2.1 | Препа | рат 2.2 | Препа! | рат 2.3 | Препа! | рат 2.4 | Препа! | рат 2.5 | Препа] | рат 2.6 | |
| Мас. (г) | % масса/ масса | Мас. (г) | % масса/ масса | Мас. (г) | % масса/ масса | Мас. (г) | % масса/ масса | Мас. (г) | % масса/ масса | Мас. (г) | % масса/ масса | |
| Флорфеникол | 7,50 | 30,00 | 7,50 | 30,00 | 7,50 | 30,00 | 7.50 | 30.00 | 5.00 | 20.00 | 5.00 | 20.00 |
| Полоксамер 407 | 3,00 | 12,00 | 3,00 | 12,00 | 3,13 | 12,50 | 3.13 | 12.00 | 3.43 | 13.72 | 3.43 | 13.72 |
| Klucel® EF | 0,19 | 0,75 | 0,19 | 0,75 | ... | ... | ... | — | 0.22 | 0.88 | 0.22 | 0.88 |
| DDW | 11,81 | 47,25 | 14,31 | 57,25 | 11,81 | 47,50 | 14.38 | 57.50 | 13.50 | 54.00 | 16.36 | 65.44 |
| NMP | 2,50 | 10,00 | — | ... | 2,50 | 10,00 | ... | — | 2.86 | 11.44 | ... | ... |
| Время (ч) | сред | станд.о тклон. | сред | станд.о тклон. | сред | станд.о тклон. | сред | станд.о тклон. | сред | станд.о тклон. | сред | станд.о тклон. |
| 0,25 | 1,37 | 0,50 | 1,33 | 0,56 | 1,05 | 0,52 | 9.29 | 1.05 | 1.75 | 0.87 | 4.40 | 1.55 |
| 0,5 | 2,80 | 0,98 | 2,75 | 1,24 | 1,72 | 0,65 | 14.97 | 1.44 | 3.46 | 0.31 | 5.66 | 2.81 |
| 1 | 5,70 | 2,02 | 5,21 | 2,30 | 2,89 | 1,Н | 21.85 | 4.01 | 7.34 | 0.62 | 9.69 | 4.11 |
| 1.5 | 8,76 | 2,76 | 7,64 | 3,57 | 3,96 | 1,43 | 26.20 | 4.98 | 11.06 | 0.74 | 12.18 | 4.95 |
| 2 | 11,67 | 3,86 | 9,42 | 4,03 | 5,48 | 1,23 | 28.28 | 5.34 | 15.90 | 1.11 | 13.85 | 5.75 |
| 3 | 16,53 | 4,56 | 12,39 | 4,45 | 8,71 | 2,23 | 32.91 | 5.76 | 20.70 | 1.08 | 16.29 | 7.76 |
| 4 | 20,39 | 4,78 | 15,01 | 4,77 | 11,42 | 3,22 | 36.29 | 6.21 | 26.25 | 1.17 | 18.84 | 8.52 |
| 5 | 24,00 | 4,61 | 17,34 | 4,72 | 13,53 | 3,75 | 39.61 | 6.67 | 30.54 | 1.56 | 21.09 | 9.93 |
| 6 | 27,59 | 4,94 | 19,64 | 4,45 | 15,30 | 3,88 | 42.83 | 7.66 | 33.59 | 1.10 | 23.24 | 8.98 |
| 7 | 30,34 | 4,63 | 21,80 | 4,20 | 16,93 | 3,97 | 45.93 | 8.81 | 36.57 | 0.64 | 27.32 | 8.40 |
| 8 | 33,67 | 4,68 | 23,61 | 4,24 | 18,49 | 4,00 | 48.57 | 9.02 | 39.74 | 0.71 | 30.22 | 8.09 |
| 24 | 64,18 | 4,63 | 57,38 | 6,57 | 40,47 | 4,47 | 78.06 | 11.68 | 66.69 | 5.16 | 59.45 | 12.58 |
| Реология | ||||||||||||
| Мах вязкость | 9,69 Па-с | 12,3 Па с | 11,4 Па с | 13 Па с | 8,11 Пас | 8,3 Па с | ||||||
| Min вязкость | 0,38 Па-с | 0,262 Па-с | 0,181 Па-с | 0,346 Па-с | 0,125 Па-с | 0,0819 Па-с | ||||||
| Гелеобраз. t°C | 27,1 °C | 24°С | 27,6°С | 23,9°С | 27,9°С | 25,3°С | ||||||
| Диапазон гелеобразов | 27,0-31,6 | 23,6-27,1 | 27-31,2 | 23,5-27,1 | 27,5-31,2 | 24,4-27,5 |
Пример 3.
Для оценки эффекта на состав выбранного сорастворителя, NMP, получали гели в соответствии с препаратом 2.1, и содержание NMP варьировалось от 5 до 20 мас.%, с получением препаратов 3.1 (5 мас.%) и 3,2 (20 мас.%).
Данные по высвобождению представлены в табл. 3 ниже, и профили показаны на фиг. 2 с планками погрешностей, указывающими RSD в каждый момент времени. Ромбы (♦) представляют препарат 3.1 (обозначенный как 5 мас.%), закрашенные квадраты () - препарат 2.1 (обозначенный как 10 мас.%) и закрашенные треугольники (▲) - препарат 3.2 (обозначенный как 20 мас.%), где% FFC указывает совокупный процентиль высвобождения флорфеникола, и t (ч) указывает время, прошедшее с начала эксперимента, в часах.
Можно видеть, что при 5 мас.% NMP вариабельность увеличивается, при этом профиль высвобождения остается почти неизменным, тогда как при 20% высвобождение немного ускоряется.
Таблица 3
| Препарат 3.1 | Препарат 3.2 | |||
| Время (ч) | сред | станд.отклон. | сред | станд.отклон. |
| 0,25 | 2,79 | 1,06 | 5,92 | 0,48 |
| 0,5 | 5,05 | 1,73 | 9,14 | 1,31 |
| 1 | 8,88 | 3,45 | 13,81 | 2,57 |
| 1,5 | 11,49 | 4,53 | 17,69 | 4,17 |
| 2 | 13,67 | 5,70 | 21,63 | 4,57 |
| 3 | 17,21 | 7,16 | 28,77 | 6,72 |
| 4 | 20,37 | 8,25 | 33,16 | 7,55 |
| 5 | 22,74 | 9,32 | 37,94 | 7,03 |
| 6 | 24,86 | 10,01 | 43,80 | 6,41 |
| 7 | 28,79 | 12,15 | 46,57 | 5,34 |
| 8 | 31,25 | 12,73 | 51,41 | 5,88 |
| 24 | 43,06 | 15,81 | 76,69 | 3,56 |
| Реология | ||||
| Мах вязкость | 6,16 Па с | 10,9 Па· с | ||
| Min вязкость | 0,23 Па с | 0,39 Па с | ||
| Гелеобразование, t°C | 26,4°С | 21,6°С | ||
| Диапазон гелеобразования | 26,2 -29,3 | 21,1-24,7 |
- 10 046700
Пример 4.
Для оценки влияния на состав дополнительных сорастворителей получали гели в соответствии с препаратом 2.1, и NMP заменяли на DMSO (препарат 4.1), пропиленгликолем (препарат 4.2), PEG 400 (препарат 4.3) или этанолом (препарат 4.4).
Профили высвобождения обобщены в табл. 4 ниже.
Можно легко видеть, что и DMSO, и PEG 400 обеспечивают профиль высвобождения, сравнимый с NMP, но более значительно снижают температуру гелеобразования раствора.
Таблица 4
| Препарат 4.1 | Препарат 4.2 | Препарат 4.3 | Препарат 4.4 | |||||
| Время(ч) | сред | станд. отклон. | сред | станд. отклон. | сред | станд. отклон. | сред | станд. отклон. |
| 0,25 | 2,27 | 0,36 | 1,38 | 0,37 | 2.44 | 0.69 | 1.53 | 0.80 |
| 0,5 | 4,44 | 0,70 | 2,36 | 0,90 | 4.86 | 1.35 | 2.57 | 1.39 |
| 1 | 8,61 | 1,18 | 3,65 | 1,36 | 9.52 | 2.57 | 3.94 | 1.96 |
| 1,5 | 11,14 | 1,00 | 4,44 | 1,59 | 12.93 | 3.94 | 4.92 | 2.27 |
| 2 | 13,09 | 0,92 | 5,34 | 1,63 | 15.28 | 4.50 | 5.86 | 2.45 |
| 3 | 15,98 | 1,59 | 6,89 | 1,72 | 19.62 | 6.25 | 7.66 | 2.82 |
| 4 | 18,70 | 2,62 | 8,14 | 1,91 | 23.53 | 7.55 | 9.17 | 3.37 |
| 5 | 21,61 | 4,36 | 9,61 | 2,08 | 27.58 | 8.78 | 10.84 | 3.61 |
| 6 | 24,26 | 5,55 | 10,82 | 2,05 | 30.58 | 9.32 | 12.20 | 3.72 |
| 7 | 27,28 | 6,75 | 12,45 | 2,21 | 33.89 | 9.78 | 13.97 | 4.29 |
| 8 | 30,14 | 7,61 | 13,70 | 2,42 | 36.84 | 10.12 | 15.49 | 5.06 |
| 24 | 68,9 | 7,22 | 32,8 | 4,48 | 69.36 | 4.96 | 36.31 | 11.66 |
| Реология | ||||||||
| Мах вязкость | 10,5 Па· с | 10,5 Па· с | 8,16 Па с | 4,25 Па· с | ||||
| Min вязкость | 0,29 Па· с | 0,37 Па с | 0,35 Па с | 0,21 Па· с | ||||
| Гелеобр t°C | 15,1°С | 22,0°С | 20,2°С | 33,8°С | ||||
| Диапазон темп, гелеобр. | 14,7-17,0 | 21,6-24,7 | 19,4-22,9 | Широкий |
Пример 5.
Для демонстрации эффекта изобретения in vivo проводили фармакокинетическое исследование, чтобы продемонстрировать пролонгированные и эффективные уровни в плазме после однократного введения флорфеникола у свиней. Исследование было одобрено этическим комитетом по исследованиям на животных (Ethics Committee for Animal Research studies) Еврейского университета Иерусалима. В общей сложности использовали шесть животных с двумя самками свиней в возрасте 3-4 месяцев. Катетер для центральной вены 20G вводили в яремную вену каждой свиньи для облегчения сбора крови. Все животные получали 40 мг/кг однократно препарата 2.1 в первой группе исследования, и либо 20 мг/кг Nuflor® (Merck Animal Health - 30% раствор флорфеникола в NMP), вводимого дважды с интервалом в 48 ч, или другое экспериментальное лечение во второй группе после периода отмывки в течение двух недель.
Образцы крови отбирали перед каждым введением препарата (время 0) и через 1, 2, 4, 6, 8, 10, 24, 30, 52, 72, 96, 144 и 196 ч после первого введения. Образцы собирали в гепаринизированные пробирки, плазму немедленно отделяли и хранили при -20°C до анализа. В день проведения анализа в образцы вносили внутренний стандарт (хлорамфеникол) и экстрагировали ацетонитрилом. В тот же день готовили стандарты. Определение исходного лекарственного средства, флорфеникола, и основного метаболита, флорфеникол-амина, проводили с использованием UHPLC-MS/MS (масс-спектрометр TSQ Quantum Access Max в режиме регистрации положительных ионов с использованием ионизации распылением в электрическом поле (ESI) и сбора данных в режиме мониторинга множественных реакций (MRM) в двух повторах. Получали результаты для флорфеникола (исходное соединение) и флорфеникол-амина (основной метаболит).
Анализ данных выполняли с использованием программного обеспечения Microsoft Excel. Значения площади под кривой (AUC) получали с помощью правила трапеций. Конечные наклоны идентифицировали с помощью полулогарифмического преобразования, и наклон рассчитывали путем подгонки кривых к данным экспоненциального спада. Все дальнейшие расчеты выполняли с подогнанными функциями. Деконволюцию не проводили из-за сложности модели, особенно для групп с двойным введением. Для этих групп Nuflor® данные конечного наклона также использовали для экстраполяции 48-часовых точек. Данные рассчитывали по усредненной кривой; диапазон отдельных значений представлен там, где это возможно.
Результаты для графика зависимости концентраций в плазме от времени для исходного соединения флорфеникола представлены на фиг. 3 для соответствующих сравнений. Пунктирная линия на каждом графике указывает вероятное максимальное значение МПК (MIC) 90 для типичных патогенов-мишеней респираторных заболеваний свиней. Планки погрешностей указывают на стандартную ошибку среднего. Стрелки указывают время введения. Ромбы (♦) представляют Nuflor, обозначенный как Лечение: Nuflor 20 мг/кг х2, n = 2), и закрашенные квадраты () представляют препарат 2.1 (обозначенный как Лечение
- 11 046700
Р2.1, 40 мг/кг х1, n = 5), где Концентрация (мкг/мл) указывает концентрацию флорфеникола в плазме крови, и Время (часы) обозначает время, прошедшее с начала эксперимента, в часах.
Фармакокинетические параметры, которые были получены для этих данных, обобщены в табл. 5 ниже.
Таблица 5
| Параметр | Р2.1 40 мг/кг | Nuflor 20 мг/кг х2 |
| Конечное ti/2 (ч) | 43,5 (36,7-53,2) | 53,1 11(20,3-78,2) |
| AUCinf (мкг х ч х мл'1) | 224,9 | 176,0 |
| AUC по MIC (AUIC) (мкг х ч х мл1) | 178,7 | 84,4 |
| Процентиль MIC (%) | 79,4 | 47,9 |
| Стах (мкг/мл) | 2,24 (1,62-2,79) | 2,77 (2,28-3,25) |
| Ттах (ч) | 10,8 (6-24) | 8 (6-10) |
Конечный период полужизни Nuflor® рассчитывали после второй инъекции; данные, полученные после первой инъекции, показывают значительно более короткий период полужизни, что указывает на быстрое выведение на ранних стадиях. Максимальная концентрация, сообщаемая для группы Nuflor, представляет собой максимальную концентрацию после первой инъекции.
Можно легко видеть, что препарат в соответствии с изобретением обеспечивает более высокое релевантное воздействие флорфеникола, что продемонстрировано с помощью AUIC и временного процентиля по MIC после однократной инъекции по сравнению с коммерческим продуктом.
Пример 6.
Для оценки способности системы справляться со сверхвысокой нагрузкой лекарственных средств, изготавливали также следующие составы флорфеникола по аналогии с описанными в настоящем документе. Препарат 6.1 содержал около 33 мас.% флорфеникола, 6,2 около 36 мас.% и 6,3 около 39 мас.%.
Композиции набирали в шприц через иглу 16G, затем инъецировали, и показали обратное термическое поведение, например, превращались в гель при нагревании и снова становились жидким при охлаждении. Профили высвобождения и реологические данные обобщены в табл. 6 ниже.
Таблица 6
| Препарат 6.1 | Препа | эат 6.2 | Препарат 6.3 | |||
| Масса (г) | О/ /0 масса/ масса | Масса (g) | О/ /о масса/ масса | Масса (g) | % масса/ масса | |
| Флорфеникол | 8,0 | 32,6 | 8,5 | 36.2 | 9.25 | 39.3 |
| Полоксамер 407 | з,о | 12,2 | з,о | 12.8 | 2.5 | 10.6 |
| Klucel® EF | 0,2 | 0,8 | 0,2 | 0.8 | 0.2 | 0.8 |
| DDW | И,4 | 46,2 | 10,1 | 43.3 | 10.0 | 42.6 |
| NMP | 2 | 8,2 | 1,6 | 6.9 | 1.6 | 6.9 |
| Время (ч) | сред, | sd | сред, | sd | сред. | sd |
| 0.25 | 1,41 | 0,31 | 1,59 | 0.40 | 2.26 | 0.47 |
| 0.5 | 2,41 | 0,35 | 2,85 | 0.63 | 4.28 | 0.93 |
| 1 | 4,38 | 0,87 | 5,41 | 1.09 | 7.69 | 1.17 |
| 1.5 | 5,94 | 1,32 | 7,42 | 1.57 | 11.33 | 1.54 |
| 2 | 7,19 | 1,72 | 9,36 | 2.07 | 14.64 | 1.32 |
| 3 | 9,33 | 2,36 | 13,14 | 3.10 | 20.54 | 1.27 |
| 4 | 11,09 | 2,71 | 16,40 | 4.21 | 25.56 | 1.42 |
| 5 | 12,57 | 3,22 | 19,10 | 5.10 | 29.44 | 1.77 |
| 6 | 14,27 | 3,55 | 21,04 | 5.31 | 33.14 | 1.31 |
| 7 | 15,64 | 3,55 | 23,39 | 6.01 | 36.91 | 1.64 |
| 8 | 17,12 | 4,00 | 25,23 | 6.10 | 40.65 | 0.84 |
| 24 | 36,45 | 7,16 | 59,74 | 7.54 | 77.95 | 5.15 |
| Реология | ||||||
| Мах вязкость | 13,1 Пас | 34,2 Па с | 18,9 Па с | |||
| Min вязкость | 0,28 Па с | 2,3 Па с | 1,01 Пас | |||
| Гелеобр.t°C | 24,4°С | 18,2°С | 26,2°С | |||
| Диапазон темп, гелеобр. | 23,9-28,4 | 18,0-20,3 | 25,8-28,1 |
Легко видеть, что составы формировали гели, реагирующие на повышение температуры, высвобождали лекарственное средство контролируемым образом с низкой вариабельностью, о чем свидетельствует низкое относительное стандартное отклонение в каждой точке.
Дополнительные композиции изготавливали при нагрузке 45 мас.% и выше. Флорфеникол просеивали через сито 50 микрон, чтобы получить фракцию частиц меньшего размера. Составы и результаты обобщены в табл. 7 ниже.
- 12 046700
Таблица 7
| Препарат 6.4 | Препарат 6.5 | Препарат 6.6 | Препарат 6.7 | Препарат 6.8 | ||||||
| Масса (г) | % масса/ масса | Масса (г) | % масса/ масса | Масса (г) | % масса/ масса | Масса (г) | % масса/ масса | Масса (г) | % масса/ масса | |
| Флорфеникол | 45,0 | 45,0 | — | — | — | 47.5 | 47.5 | |||
| Просеянный флорфеникол | - | - | 45,0 | 45,0 | 45,0 | 45.0 | 47.5 | 47.5 | - | - |
| Полоксамер 407 | 12,0 | 12,0 | 12,0 | 12,0 | 10,0 | 10.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 |
| Klucel® EF | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0.5 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 |
| DDW | 37,5 | 37,5 | 37,5 | 37,5 | 39,5 | 39.5 | 38.1 | 38.1 | 38.1 | 38.1 |
| NMP | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 |
| Время (ч) | сред, | станд. отклон. | сред, | станд. отклон. | сред, | станд. отклон. | сред. | станд. отклон. | сред. | станд. отклон. |
| 0.5 | 21,76 | 3,91 | 17,64 | 4,24 | 10,51 | 2.38 | 6.96 | 1.72 | 10.03 | 2.29 |
| 1 | 26,14 | 5,38 | 22,02 | 5,75 | 13,35 | 2.50 | 9.40 | 1.66 | 12.35 | 2.29 |
| 2 | 30,91 | 5,40 | 27,45 | 6,10 | 18,28 | 2.67 | 13.72 | 1.52 | 16.42 | 2.23 |
| 4 | 39,71 | 5,53 | 35,80 | 6,28 | 27,11 | 2.88 | 21.74 | 1.27 | 24.02 | 2.07 |
| 6 | 47,61 | 5,43 | 43,25 | 6,05 | 35,31 | 3.04 | 29.12 | 1.23 | 31.11 | 2.11 |
| 24 | 86,47 | 5,00 | 77,75 | 3,87 | 76,36 | 3.09 | 70.49 | 1.89 | 68.40 | 3.21 |
| 48 | 99,9 | 1,38 | 90,8 | 1,07 | 95,68 | 2.37 | 91.77 | 2.11 | 84.41 | 1.38 |
| Реология | ||||||||||
| Min вязкость | NP | NP | 0,95 Паю | 0,75 Па с | 0,57 Па с | |||||
| Мах вязкость | NP | NP | 16,8 Паю | 12,9 Паю | NP | |||||
| Гелеобр.t°C | 16,7°С | 17,ГС | 21,5°С | 24,2 | NP |
Тестирование растворения проводили с использованием метода Лопасть над диском. Количество приблизительно в 1 г тестировали в 900 мл фосфатного буфера USP, рН 6,8, с добавлением 1% ЦТАБ (СТАВ). Реометрию проводили через 500 обратных секунд с зазором 500 мкм.
На основании полученных результатов можно видеть, что меньший размер частиц не оказывает отрицательного влияния на профили высвобождения, при очень высокой нагрузке возможно немного ускоряет высвобождение лекарственного средства, и что в инъекционном составе может быть получена сверхвысокая нагрузка флорфеникола.
Пример 7
Дополнительные композиции изготавливали с нагрузкой 47,5 мас.%. Использовали просеянный флорфеникол, как в примере 6. Составы и результаты обобщены в табл. 8 ниже.
________________________________________________________________Таблица 8
| Препа | рат 7.1 | Препарат 7.2 | Препарат 7.3 | Препарат 7.4 | ||||
| Масса (г) | % масса/ масса | Масса (г) | % масса/ масса | Масса (г) | % масса/ масса | Масса (г) | % масса/ масса | |
| Флорфеникол* | 57 | 47,5 | 57 | 47,5 | 57 | 47.5 | 57 | 47.5 |
| Полоксамер 407 | 10,2 | 8,5 | 10,2 | 8,5 | 10.2 | 8.5 | 10.8 | 9 |
| Klucel® EF | 0,12 | ОД | — | — | 0.12 | 0.1 | 0.12 | 0.1 |
| DDW | 46,68 | 38,9 | 46,8 | 39 | 40.68 | 33.9 | 46.08 | 38.4 |
| NMP | 6 | 5 | 6 | 5 | 12 | 10 | 6 | 5 |
| Время (ч) | сред. | станд. отклон. | сред. | станд. отклон. | сред. | станд. отклон. | сред. | станд. отклон. |
| 0.5 | 8,97 | 3,77 | 24,31 | 8,04 | 7.16 | 2.42 | 24.56 | 2.94 |
| 1 | 11,15 | 3,98 | 26,80 | 7,80 | 9.72 | 2.50 | 27.15 | 3.53 |
| 2 | 15,40 | 4,49 | 30,98 | 7,35 | 14.14 | 2.38 | 31.38 | 4.14 |
| 4 | 23,36 | 5,31 | 38,21 | 6,81 | 22.32 | 2.18 | 38.19 | 4.16 |
| 6 | 30,48 | 6,02 | 44,52 | 6,60 | 29.72 | 1.91 | 44.27 | 4.26 |
| 24 | 69,82 | 7,55 | 77,28 | 4,67 | 71.41 | 0.99 | 77.95 | 4.42 |
| 48 | 90,04 | 4,27 | 94,71 | 3,18 | 92.76 | 2.09 | 96.84 | 1.65 |
| Реология | ||||||||
| Min вязкость | 0,34 Па с | 0,34 Па с | 0,71 Па с | 0,38 Па· с | ||||
| Мах вязкость | 10,05 Па с | 9,95 Па· с | 7,9 Па· с | 12,7 Па с | ||||
| Гелеобр. t°C | 27,23°С | 29,86°С | 28,09°С | 27,23°С |
* просеянный флорфеникол.
На основании полученных результатов можно легко видеть, что композиции, содержащие 47,5 мас.% флорфеникола, могут быть изготовлены инъекционными, например, с хорошей вязкостью при температуре окружающей среды и подходящей температурой гелеобразования.
Кроме того, можно видеть, что даже при низком количестве гидроксипропилцеллюлозы (см., например, препарат 7.1 в сравнении с 6.7) профиль высвобождения остается стабильным с относительно низким значением RSD (хотя в действительности вариабельность немного выше для 7.1).
Совершенно неожиданно вариабельность без гидроксипропилцеллюлозы (препарат 7.2) все еще находилась в пределах фармацевтически приемлемого диапазона, хотя даже всего лишь 0,1% добавки целлюлозы значительно снижает вариабельность без отрицательного воздействия на профиль высвобождения. Более того, добавление большего количества сорастворителя (препарат 7.3 по сравнению с 7.1) еще больше улучшает вариабельность, и тем более по сравнению с препаратом 7.2 без добавки целлюлозы.
- 13 046700
Пример 8.
Для дополнительной демонстрации эффекта изобретения in vivo, было проведено другое фармакокинетическое исследование, чтобы продемонстрировать пролонгированные и эффективные уровни в плазме после однократного введения флорфеникола свиньям.
Всего 20 свиней получали параллельно либо 40 мг/кг однократно вводимых препаратов 6.6-6.8, либо 30 мг/кг Nuflor® (Merck Animal Health - 30% раствор флорфеникола в NMP), вводимого в соответствии с рекомендациями производителя. Кроме того, препарат (обозначенный в настоящем документе как 8.1), содержащий 40 мас.% флорфеникола, 12 мас.% полоксамера 407, 0,5 мас.% Klucel EF, 5 мас.% NMP и 42,5 мас.% воды, с температурой гелеобразования 21,7°C вводили в дозе 40 мг/кг. Профиль высвобождения препарата 8.1 при тех же условиях, что и в примере 7, показан в табл. 9 ниже.
Таблица 9
| Время (ч) | 0 | 0,5 | 1 | 2 | 4 | 6 | 24 | 48 |
| Среднее | 0 | 18,85 | 23,01 | 26,70 | 32,97 | 38,48 | 64,37 | 72,78 |
| RSD | 0 | 5,98 | 6,74 | 6,51 | 6,20 | 5,78 | 3,05 | 1,82 |
Образцы крови собирали в моменты времени 0, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 24, 36, 48, 50, 72, 84, 96, 120, 144 и 168 часов.
На фиг. 4 показан график зависимости концентраций флорфеникола в плазме крови от времени. На фиг. 4 показаны концентрации флорфеникола в плазме крови в каждой точке отбора пробы. Ромбы (♦) обозначают Nuflor, заштрихованные квадраты () -препарат 8.1, заштрихованные треугольники (▲) препарат 6.6 и Х-знаки (х) - препарат 6.7, а звездочки (*) - препарат 6.8, при этом С (нг/мл) указывает на концентрацию флорфеникола в плазме крови, и t (ч) указывает время, прошедшее с начала эксперимента, в часах.
На основании полученных результатов можно легко увидеть, что коммерчески доступный продукт быстро выводится из крови свиней, тогда как все препараты в соответствии с изобретением поддерживают уровни в плазме крови выше 1000 нг/мл в среднем в течение от 72 до 84 ч. Примечательно, что скорректированная на дозу AUC для терапий является сопоставимой между группами, что указывает на то, что биодоступность не снижалась у составов с контролируемым высвобождением. Пиковая концентрация в плазме, очевидно, была самой высокой у коммерческого продукта с немедленным высвобождением; однако препарат 6.7 показал значительно более высокую пиковую концентрацию, чем препарат 6.8, который отличался только размером частиц лекарственного средства.
Время, превышающее минимальную ингибирующую концентрацию Streptococcus suis, вирулентного патогена свиней (в настоящее время считается 2 мкг/мл), в тестируемых препаратах, представлено в табл. 10 ниже.
Таблица 10
| Выше MIC | Nuflor | Р8.1 | Р6.6 | Р6.7 | Р6.8 |
| Время (ч) | 7,44 | 18,5 | 27,8 | 34,2 | 14,8 |
Из результатов очевидно, что испытанные препараты в соответствии с изобретением показали превосходные результаты со значительным клиническим потенциалом для борьбы с S. suis.
Пример 9.
Для демонстрации способности композиций в соответствии с изобретением высвобождать другие антибиотики, были изготовлены составы, содержащие 30 мас.% амоксициллина. Препарат 9.1 содержал как сорастворитель, так и производное целлюлозы, по меньшей мере частично растворимое в органических растворителях (гидроксипропилцеллюлоза), препарат 9.2 - только гидроксипропилцеллюлозу и 9.3 ни одно из дополнительных вспомогательных веществ. Составы получали по методикам, описанным для флорфеникола.
Композиции набирали в шприц через иглу 16G, затем вводили путем инъекции, и показали обратное термическое поведение, например, превращались в гель при нагревании и снова становились жидкими при охлаждении. Данные профилей высвобождения обобщены в табл. 11 ниже.
Таблица 11
| Препарат 9.1 | Препарат 9.2 | Препарат 9.3 | ||||
| Масса (г) | % масса/ масса | Масса (г) | % масса/ масса | Масса (г) | % масса/ масса | |
| Амоксициллин | 6,0 | 30 | 6,0 | 30 | 6,0 | 30 |
| Полоксамер 407 | 2,4 | 12 | 2,4 | 12 | 2,4 | 12 |
| Klucel® EF | 0,15 | 0,75 | 0,15 | 0,75 | — | — |
- 14 046700
| DDW | 9,45 | 47,25 | 11,45 | 57,25 | 11,6 | 58 |
| NMP | 2,0 | 10 | — | — | — | — |
| станд. отклон. | сред, | станд. отклон. | сред, | станд. отклон. | сред, | станд. отклон. |
| 0.5 | 2,99 | 0,94 | 2,52 | 0,45 | 3,14 | 0,50 |
| 1 | 6,34 | 1,40 | 5,10 | 0,58 | 5,61 | 0,47 |
| 1.5 | 9,26 | 1,65 | 7,69 | 0,55 | 7,83 | 0,47 |
| 2 | 11,76 | 1,81 | 10,04 | 0,75 | 9,68 | 0,66 |
| 3 | 16,68 | 2,76 | 14,12 | 1,17 | 12,63 | 1,18 |
| 4 | 20,90 | 3,43 | 19,03 | 1,63 | 16,06 | 1,88 |
| 5 | 25,39 | 3,16 | 22,94 | 2,27 | 21,59 | 6,45 |
| 6 | 30,12 | 5,44 | 26,56 | 3,10 | 21,40 | 3,31 |
| 7 | 34,14 | 6,85 | 29,14 | 2,93 | 23,40 | 2,60 |
| 8 | 36,52 | 4,86 | 33,34 | 5,34 | 25,65 | 5,81 |
| 24 | 68,70 | 7,66 | 84,69 | 22,44 | 77,00 | 21,35 |
Легко видеть, что составы формировали гели, высвобождали лекарственное средство контролируемым образом с низкой вариабельностью, о чем свидетельствует низкое значение RSD в каждой точке, но без NMP или Klucel высвобождение лекарственного средства на более поздней стадии становилось более неустойчивым, что может указывать на формирование менее стабильного геля при отсутствии обоих вспомогательных веществ.
Пример 10.
Для дополнительной демонстрации способности композиций в соответствии с изобретением высвобождать другие антибиотики, изготавливали составы, содержащие 15 мас.% тилозина. Препарат 10.1 содержал как сорастворитель, так и производное целлюлозы, по меньшей мере частично растворимое в органических растворителях (гидроксипропилцеллюлозу), препарат 10.2 - только гидроксипропилцеллюлозу и 10.3 - ни одно из дополнительных вспомогательных веществ. Составы изготавливали по методикам, описанным для флорфеникола.
Композиции набирали в шприц через иглу 16G, затем вводили путем инъекции, и показали обратное термическое поведение, например, превращались в гель при нагревании и снова становились жидкими при охлаждении. Данные профилей высвобождения обобщены в табл. 12 ниже.
Таблица 12
| Препарат 9.1 | Препарат 9.2 | Препарат 9.3 | ||||
| Масса (г) | О/ /О масса/ масса | Масса (г) | О/ /О масса/ масса | Масса (г) | О/ /О масса/ масса | |
| Тилозин | з,о | 15 | з,о | 15 | з,о | 15 |
| Полоксамер 407 | 2,92 | 14,6 | 2,4 | 12 | 2,4 | 12 |
| Klucel® EF | 0,18 | 0,9 | 0,15 | 0,76 | — | — |
| DDW | 11,47 | 57,3 | 14,45 | 72,24 | 14,6 | 73 |
| NMP | 2,43 | 12,2 | — | — | — | — |
| Время (ч) | сред | sd | сред | sd | сред | sd |
| 0.5 | 11,40 | 1,80 | 5,48 | 0,09 | 4,83 | 1,65 |
| 1 | 20,95 | 1,16 | 9,33 | 0,99 | 8,24 | 2,96 |
| 1.5 | 35,71 | 1,47 | 12,51 | 1,56 | 11,26 | 4,24 |
| 2 | 37,27 | 1,54 | 15,63 | 1,75 | 14,35 | 5,54 |
| 3 | 46,75 | 1,72 | 21,51 | 2,09 | 20,05 | 7,60 |
| 4 | 52,50 | 1,28 | 25,64 | 2,04 | 25,18 | 9,34 |
| 5 | 57,97 | 1,95 | 31,04 | 1,60 | 30,63 | 11,46 |
| 6 | 61,14 | 1,07 | 36,23 | 2,67 | 36,67 | 13,35 |
| 7 | 70,25 | 3,08 | 40,72 | 4,02 | 41,42 | 14,09 |
| 8 | 72,71 | 3,49 | 45,10 | 6,39 | 46,19 | 15,39 |
| 24 | 94,05 | 3,02 | 97,94 | 1,60 | 96,85 | 2,08 |
Можно легко видеть, что составы формировали гели и высвобождали лекарственное средство контролируемым образом. Препарат 10.1 имел немного более высокое содержание полоксамера, чтобы компенсировать увеличенную с помощью NMP растворимость лекарственного средства. Профиль высвобождения 10.1 показал низкую вариабельность, подтверждаемую низким значением RSD в каждой точке, особенно в промежуточные моменты времени. Препарат 10.2 показал немного более высокую вариабельность, но без NMP и Klucel высвобождение лекарственного средства становилось более вариабельным.
Claims (11)
1. Фармацевтическая композиция, содержащая флорфеникол в концентрации от 25 мас.% до 50 мас.%, полоксамер, водный носитель и органический сорастворитель, выбранный из группы, состоящей из N-метилпирролидона, диметилсульфоксида и полиэтиленгликоля 400, причем указанная композиция представляет собой инъекционную композицию при комнатной температуре, при условии, что, когда концентрация указанного флорфеникола составляет менее 35 мас.%, композиция дополнительно содержит гидроксипропилцеллюлозу.
2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой концентрация указанного флорфеникола составляет более 35 мас.%, и при этом указанная композиция не содержит гидроксипропилцеллюлозу.
3. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой концентрация указанного флорфеникола составляет более 35 мас.%, и при этом указанная композиция дополнительно содержит гидроксипропилцеллюлозу.
4. Фармацевтическая композиция по любому из предшествующих пунктов, в которой указанный органический сорастворитель присутствует в количестве от около 5 мас.% до около 15 мас.%.
5. Фармацевтическая композиция по любому из предшествующих пунктов, в которой указанный органический сорастворитель представляет собой N-метилпирролидон.
6. Фармацевтическая композиция по любому из предшествующих пунктов, в которой указанный органический сорастворитель представляет собой N-метилпирролидон и композиция содержит гидроксипропилцеллюлозу, а указанный флорфеникол присутствует в концентрации от 25 мас.% до 50 мас.%.
7. Фармацевтическая композиция по любому из предшествующих пунктов, в которой указанный органический сорастворитель представляет собой N-метилпирролидон, и где концентрация указанного флорфеникола составляет от 35 мас.% до 50 мас.%.
8. Применение фармацевтической композиции по любому из предшествующих пунктов для лечения ветеринарной инфекции у животного, не являющегося человеком, путем введения указанному животному фармакологически эффективной дозы флорфеникола в указанной композиции.
9. Применение по п.8, где указанную композицию вводят один раз указанному животному, не являющемуся человеком, за курс лечения.
10. Применение по п.8 или 9, где указанное введение включает внутримышечную инъекцию или подкожную инъекцию.
11. Применение по любому из пп.8-10, где указанная инфекция вызвана патогеном свиней.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/727,574 | 2018-09-06 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA046700B1 true EA046700B1 (ru) | 2024-04-11 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5193308B2 (ja) | 迅速な放出の液体調合物、調製物およびその使用 | |
| JP4850390B2 (ja) | 薬理学的に活性な化合物の制御送達のための注射用組成物 | |
| JP7532341B2 (ja) | 注射可能な徐放性の抗生物質製剤 | |
| JP2003517886A (ja) | ドラッグデリバリーシステム用生分解性ブロック共重合体の液体組成物およびその製造方法 | |
| AU2007293068A1 (en) | Soft chewable, tablet, and long-acting injectable veterinary antibiotic formulations | |
| AU8436691A (en) | Pharmaceutical composition of florfenicol | |
| JP2009506101A (ja) | アナストロゾールを含む延長放出製剤 | |
| WO2010119455A2 (en) | An injectable sustained release pharmaceutical composition | |
| Montagnat et al. | Lessons learned in the development of sustained release penicillin drug delivery systems for the prophylactic treatment of rheumatic heart disease (RHD) | |
| US11173210B2 (en) | Temperature-responsive degradable hydrogels | |
| EA046700B1 (ru) | Инъекционный антибиотический состав с замедленным высвобождением | |
| EP1765293B1 (en) | Pharmaceutical compositions for drug delivery and methods of treating or preventing conditions using same | |
| US20220202773A1 (en) | Material and method for treating cancer | |
| WO2019084197A1 (en) | DEGRADABLE HYDROGELS SENSITIVE TO TEMPERATURE | |
| JP3470096B2 (ja) | ニルバジピン含有易溶性固形製剤およびその製造法 | |
| US12097260B2 (en) | Temperature-responsive degradable hydrogels | |
| WO2023222080A1 (en) | Pharmaceutical composition | |
| WO2016123482A2 (en) | Sustained-release oral dosage forms for low aqueous solubility compounds | |
| KR101774218B1 (ko) | 동물용 복합항생제 조성물 | |
| JP2003238391A (ja) | 局所投与型徐放性軟膏 | |
| CN101278910A (zh) | 一种含抗生素强力霉素的缓释注射剂及其应用 | |
| CN101278911A (zh) | 一种含抗生素沙氟沙星的缓释注射剂及其应用 | |
| JP3099321B2 (ja) | ドパミン誘導体含有坐剤 | |
| CN101301269A (zh) | 一种含磺苄西林的缓释剂及其应用 | |
| CN101278909A (zh) | 一种含抗生素达氟沙星的缓释注射剂及其应用 |