EA045097B1 - Химерный антигенный рецептор для bcma на основе однодоменного антитела и его применение - Google Patents
Химерный антигенный рецептор для bcma на основе однодоменного антитела и его применение Download PDFInfo
- Publication number
- EA045097B1 EA045097B1 EA202190607 EA045097B1 EA 045097 B1 EA045097 B1 EA 045097B1 EA 202190607 EA202190607 EA 202190607 EA 045097 B1 EA045097 B1 EA 045097B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- bcma
- cells
- car
- domain
- amino acid
- Prior art date
Links
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 title claims description 102
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 title claims description 102
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 title claims description 25
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 title description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 title description 2
- BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-n-[3-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-(dimethylamino)phenyl]-1-n,1-n-dimethylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C1=C(C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(N(C)C)=CC=C1NC(C=1)=CC=C(N(C)C)C=1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 claims description 93
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 58
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 44
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 33
- 230000004068 intracellular signaling Effects 0.000 claims description 24
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 22
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 22
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 21
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 claims description 18
- 102100036856 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Human genes 0.000 claims description 14
- -1 CD3e Proteins 0.000 claims description 13
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 claims description 13
- 102100022153 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Human genes 0.000 claims description 13
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 11
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 claims description 10
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 claims description 10
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 claims description 10
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 claims description 9
- 101000889276 Homo sapiens Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Proteins 0.000 claims description 9
- 101001137987 Homo sapiens Lymphocyte activation gene 3 protein Proteins 0.000 claims description 8
- 102000017578 LAG3 Human genes 0.000 claims description 8
- 102100024216 Programmed cell death 1 ligand 1 Human genes 0.000 claims description 8
- 102100024213 Programmed cell death 1 ligand 2 Human genes 0.000 claims description 8
- 102100029215 Signaling lymphocytic activation molecule Human genes 0.000 claims description 8
- 102100028785 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Human genes 0.000 claims description 8
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 claims description 6
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 claims description 6
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 claims description 5
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 claims description 5
- 102100037904 CD9 antigen Human genes 0.000 claims description 5
- 102100026122 High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Human genes 0.000 claims description 5
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 claims description 5
- 101000738354 Homo sapiens CD9 antigen Proteins 0.000 claims description 5
- 101000913074 Homo sapiens High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Proteins 0.000 claims description 5
- 101000777628 Homo sapiens Leukocyte antigen CD37 Proteins 0.000 claims description 5
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 claims description 5
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 claims description 5
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 claims description 5
- 101001117317 Homo sapiens Programmed cell death 1 ligand 1 Proteins 0.000 claims description 5
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 claims description 5
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 claims description 5
- 102100031586 Leukocyte antigen CD37 Human genes 0.000 claims description 5
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 claims description 5
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 claims description 5
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 claims description 5
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 claims description 5
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 claims description 5
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 claims description 5
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 4
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 102100035793 CD83 antigen Human genes 0.000 claims description 4
- 102100024965 Caspase recruitment domain-containing protein 11 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100029360 Hematopoietic cell signal transducer Human genes 0.000 claims description 4
- 101000946856 Homo sapiens CD83 antigen Proteins 0.000 claims description 4
- 101000761179 Homo sapiens Caspase recruitment domain-containing protein 11 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000990188 Homo sapiens Hematopoietic cell signal transducer Proteins 0.000 claims description 4
- 101000599852 Homo sapiens Intercellular adhesion molecule 1 Proteins 0.000 claims description 4
- 101001047640 Homo sapiens Linker for activation of T-cells family member 1 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000702132 Homo sapiens Protein spinster homolog 1 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000914496 Homo sapiens T-cell antigen CD7 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000934346 Homo sapiens T-cell surface antigen CD2 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 claims description 4
- 102100037877 Intercellular adhesion molecule 1 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100024032 Linker for activation of T-cells family member 1 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100034709 Lymphocyte cytosolic protein 2 Human genes 0.000 claims description 4
- 101710195102 Lymphocyte cytosolic protein 2 Proteins 0.000 claims description 4
- 108010061593 Member 14 Tumor Necrosis Factor Receptors Proteins 0.000 claims description 4
- 101100407308 Mus musculus Pdcd1lg2 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 108700030875 Programmed Cell Death 1 Ligand 2 Proteins 0.000 claims description 4
- 108010074687 Signaling Lymphocytic Activation Molecule Family Member 1 Proteins 0.000 claims description 4
- 102100027208 T-cell antigen CD7 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100025237 T-cell surface antigen CD2 Human genes 0.000 claims description 4
- 101710165473 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Proteins 0.000 claims description 4
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 claims description 4
- 101001038499 Yarrowia lipolytica (strain CLIB 122 / E 150) Lysine acetyltransferase Proteins 0.000 claims description 4
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 claims description 3
- 101001109503 Homo sapiens NKG2-C type II integral membrane protein Proteins 0.000 claims description 3
- 102100022683 NKG2-C type II integral membrane protein Human genes 0.000 claims description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 97
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 35
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 34
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 34
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 31
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 31
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 31
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 29
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 24
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 23
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 19
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 19
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 17
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 17
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 17
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 14
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 14
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 14
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 14
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 13
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 12
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 11
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 10
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 10
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 9
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 9
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 8
- 102100037906 T-cell surface glycoprotein CD3 zeta chain Human genes 0.000 description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 8
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 8
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 101000738335 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD3 zeta chain Proteins 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 7
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 7
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 6
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 6
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 6
- 241001416177 Vicugna pacos Species 0.000 description 6
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 201000003444 follicular lymphoma Diseases 0.000 description 6
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 6
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 5
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 5
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 5
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 5
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 5
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 5
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 5
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000005134 plasmacytoid dendritic cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 4
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 4
- 101000934341 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD5 Proteins 0.000 description 4
- 108700039609 IRW peptide Proteins 0.000 description 4
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 4
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- 102100025244 T-cell surface glycoprotein CD5 Human genes 0.000 description 4
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 4
- 208000033559 Waldenström macroglobulinemia Diseases 0.000 description 4
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 201000009277 hairy cell leukemia Diseases 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- KIUYPHAMDKDICO-WHFBIAKZSA-N Ala-Asp-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O KIUYPHAMDKDICO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- VJVQKGYHIZPSNS-FXQIFTODSA-N Ala-Ser-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N VJVQKGYHIZPSNS-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 3
- XMHFCUKJRCQXGI-CIUDSAMLSA-N Asn-Pro-Gln Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O XMHFCUKJRCQXGI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- 208000036170 B-Cell Marginal Zone Lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 208000025324 B-cell acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 3
- 208000032568 B-cell prolymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 3
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 3
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 3
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 3
- 206010061850 Extranodal marginal zone B-cell lymphoma (MALT type) Diseases 0.000 description 3
- KBKGRMNVKPSQIF-XDTLVQLUSA-N Glu-Ala-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KBKGRMNVKPSQIF-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 3
- XMPXVJIDADUOQB-RCOVLWMOSA-N Gly-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)CNC(=O)C[NH3+] XMPXVJIDADUOQB-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 3
- VAXIVIPMCTYSHI-YUMQZZPRSA-N Gly-His-Asp Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)CN VAXIVIPMCTYSHI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- CQMFNTVQVLQRLT-JHEQGTHGSA-N Gly-Thr-Gln Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O CQMFNTVQVLQRLT-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 3
- 101000946860 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Proteins 0.000 description 3
- 101000801255 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 17 Proteins 0.000 description 3
- 101000818543 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase ZAP-70 Proteins 0.000 description 3
- 206010020631 Hypergammaglobulinaemia benign monoclonal Diseases 0.000 description 3
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 3
- 201000003791 MALT lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 208000025205 Mantle-Cell Lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 3
- 206010053869 POEMS syndrome Diseases 0.000 description 3
- 208000007452 Plasmacytoma Diseases 0.000 description 3
- 208000035416 Prolymphocytic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 3
- 208000029052 T-cell acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 3
- 102100035794 T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Human genes 0.000 description 3
- 108700012920 TNF Proteins 0.000 description 3
- 108010023649 Tripartite Motif Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000011408 Tripartite Motif Proteins Human genes 0.000 description 3
- GAYLGYUVTDMLKC-UWJYBYFXSA-N Tyr-Asp-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 GAYLGYUVTDMLKC-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 3
- 102100021125 Tyrosine-protein kinase ZAP-70 Human genes 0.000 description 3
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 3
- 210000003969 blast cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 108010006664 gamma-glutamyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 3
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010050475 glycyl-leucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 3
- 102000046935 human TNFRSF17 Human genes 0.000 description 3
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000001589 lymphoproliferative effect Effects 0.000 description 3
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 3
- 201000005328 monoclonal gammopathy of uncertain significance Diseases 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 208000007525 plasmablastic lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 208000022256 primary systemic amyloidosis Diseases 0.000 description 3
- 108010020755 prolyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 3
- 108010087846 prolyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- MAZZQZWCCYJQGZ-GUBZILKMSA-N Ala-Pro-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O MAZZQZWCCYJQGZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- SAHQGRZIQVEJPF-JXUBOQSCSA-N Ala-Thr-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN SAHQGRZIQVEJPF-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 2
- XPSGESXVBSQZPL-SRVKXCTJSA-N Arg-Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O XPSGESXVBSQZPL-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- IASNWHAGGYTEKX-IUCAKERBSA-N Arg-Arg-Gly Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(O)=O IASNWHAGGYTEKX-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- XMGVWQWEWWULNS-BPUTZDHNSA-N Arg-Trp-Ser Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N XMGVWQWEWWULNS-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 2
- WOZDCBHUGJVJPL-AVGNSLFASA-N Arg-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N WOZDCBHUGJVJPL-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- JREOBWLIZLXRIS-GUBZILKMSA-N Asn-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JREOBWLIZLXRIS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- WSGVTKZFVJSJOG-RCOVLWMOSA-N Asp-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O WSGVTKZFVJSJOG-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 2
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- MKMKILWCRQLDFJ-DCAQKATOSA-N Cys-Lys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O MKMKILWCRQLDFJ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 108010090461 DFG peptide Proteins 0.000 description 2
- 241000713730 Equine infectious anemia virus Species 0.000 description 2
- 241000713800 Feline immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- TWHDOEYLXXQYOZ-FXQIFTODSA-N Gln-Asn-Gln Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N TWHDOEYLXXQYOZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N Gln-Pro-Gly Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- LRPXYSGPOBVBEH-IUCAKERBSA-N Glu-Gly-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LRPXYSGPOBVBEH-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N Glu-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 2
- UPOJUWHGMDJUQZ-IUCAKERBSA-N Gly-Arg-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O UPOJUWHGMDJUQZ-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- DTPOVRRYXPJJAZ-FJXKBIBVSA-N Gly-Arg-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCN=C(N)N DTPOVRRYXPJJAZ-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 2
- QCTLGOYODITHPQ-WHFBIAKZSA-N Gly-Cys-Ser Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QCTLGOYODITHPQ-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- SWQALSGKVLYKDT-UHFFFAOYSA-N Gly-Ile-Ala Natural products NCC(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(C)C(O)=O SWQALSGKVLYKDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PAWIVEIWWYGBAM-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Ala Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PAWIVEIWWYGBAM-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- AFWYPMDMDYCKMD-KBPBESRZSA-N Gly-Leu-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 AFWYPMDMDYCKMD-KBPBESRZSA-N 0.000 description 2
- BIAKMWKJMQLZOJ-ZKWXMUAHSA-N His-Ala-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)Cc1cnc[nH]1)C(O)=O BIAKMWKJMQLZOJ-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- REXAUQBGSGDEJY-IGISWZIWSA-N Ile-Tyr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O)N REXAUQBGSGDEJY-IGISWZIWSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 2
- IBMVEYRWAWIOTN-UHFFFAOYSA-N L-Leucyl-L-Arginyl-L-Proline Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCCC1C(O)=O IBMVEYRWAWIOTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N L-alanine-L-arginine Natural products CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000031671 Large B-Cell Diffuse Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 2
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 2
- VQPPIMUZCZCOIL-GUBZILKMSA-N Leu-Gln-Ala Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VQPPIMUZCZCOIL-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N Leu-Gln-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- MPSBSKHOWJQHBS-IHRRRGAJSA-N Leu-His-Met Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N MPSBSKHOWJQHBS-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- LMVOVCYVZBBWQB-SRVKXCTJSA-N Lys-Asp-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN LMVOVCYVZBBWQB-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N Lys-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- ZAJNRWKGHWGPDQ-SDDRHHMPSA-N Met-Arg-Pro Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N ZAJNRWKGHWGPDQ-SDDRHHMPSA-N 0.000 description 2
- WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N N-L-alanyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)C)C(O)=O)=CNC2=C1 WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MJAYDXWQQUOURZ-JYJNAYRXSA-N Phe-Lys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MJAYDXWQQUOURZ-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- SZYBZVANEAOIPE-UBHSHLNASA-N Phe-Met-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SZYBZVANEAOIPE-UBHSHLNASA-N 0.000 description 2
- QARPMYDMYVLFMW-KKUMJFAQSA-N Phe-Pro-Glu Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 QARPMYDMYVLFMW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- IAOZOFPONWDXNT-IXOXFDKPSA-N Phe-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IAOZOFPONWDXNT-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 2
- LCRSGSIRKLXZMZ-BPNCWPANSA-N Pro-Ala-Tyr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O LCRSGSIRKLXZMZ-BPNCWPANSA-N 0.000 description 2
- LSIWVWRUTKPXDS-DCAQKATOSA-N Pro-Gln-Arg Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O LSIWVWRUTKPXDS-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- PTLOFJZJADCNCD-DCAQKATOSA-N Pro-Glu-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 PTLOFJZJADCNCD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- XFFIGWGYMUFCCQ-ULQDDVLXSA-N Pro-His-Tyr Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1[NH2+]CCC1)CC1=CN=CN1 XFFIGWGYMUFCCQ-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- BRGQQXQKPUCUJQ-KBIXCLLPSA-N Ser-Glu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O BRGQQXQKPUCUJQ-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 2
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 241000713311 Simian immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 2
- TWLMXDWFVNEFFK-FJXKBIBVSA-N Thr-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O TWLMXDWFVNEFFK-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 2
- XVHAUVJXBFGUPC-RPTUDFQQSA-N Thr-Tyr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O XVHAUVJXBFGUPC-RPTUDFQQSA-N 0.000 description 2
- VZBWRZGNEPBRDE-HZUKXOBISA-N Trp-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)N VZBWRZGNEPBRDE-HZUKXOBISA-N 0.000 description 2
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 2
- PEVVXUGSAKEPEN-AVGNSLFASA-N Tyr-Asn-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O PEVVXUGSAKEPEN-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N Val-Ser-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 2
- 108010044940 alanylglutamine Proteins 0.000 description 2
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 108010029539 arginyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 108010059459 arginyl-threonyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 description 2
- 101150058049 car gene Proteins 0.000 description 2
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 206010012818 diffuse large B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 2
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 108010026364 glycyl-glycyl-leucine Proteins 0.000 description 2
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 2
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 2
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 2
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 108010057821 leucylproline Proteins 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 2
- 201000007924 marginal zone B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 208000021937 marginal zone lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 108010005942 methionylglycine Proteins 0.000 description 2
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 208000025113 myeloid leukemia Diseases 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 2
- 208000017805 post-transplant lymphoproliferative disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 108010090894 prolylleucine Proteins 0.000 description 2
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 2
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- 108010000998 wheylin-2 peptide Proteins 0.000 description 2
- HBZBAMXERPYTFS-SECBINFHSA-N (4S)-2-(6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,2-f][1,3]benzothiazol-2-yl)-4,5-dihydro-1,3-thiazole-4-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(=N1)c1nc2cc3CCNc3cc2s1 HBZBAMXERPYTFS-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002008 AIDS-Related Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N Ala-Ala-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- NHCPCLJZRSIDHS-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O NHCPCLJZRSIDHS-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- WJRXVTCKASUIFF-FXQIFTODSA-N Ala-Cys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WJRXVTCKASUIFF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- DAEFQZCYZKRTLR-ZLUOBGJFSA-N Ala-Cys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O DAEFQZCYZKRTLR-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- CZPAHAKGPDUIPJ-CIUDSAMLSA-N Ala-Gln-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O CZPAHAKGPDUIPJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- OBVSBEYOMDWLRJ-BFHQHQDPSA-N Ala-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N OBVSBEYOMDWLRJ-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 1
- AJBVYEYZVYPFCF-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AJBVYEYZVYPFCF-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- CHFFHQUVXHEGBY-GARJFASQSA-N Ala-Lys-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N CHFFHQUVXHEGBY-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- YYAVDNKUWLAFCV-ACZMJKKPSA-N Ala-Ser-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YYAVDNKUWLAFCV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- ZDILXFDENZVOTL-BPNCWPANSA-N Ala-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZDILXFDENZVOTL-BPNCWPANSA-N 0.000 description 1
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N Arg-Ala-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- HJVGMOYJDDXLMI-AVGNSLFASA-N Arg-Arg-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N HJVGMOYJDDXLMI-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- PQWTZSNVWSOFFK-FXQIFTODSA-N Arg-Asp-Asn Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N)CN=C(N)N PQWTZSNVWSOFFK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- MFAMTAVAFBPXDC-LPEHRKFASA-N Arg-Asp-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O MFAMTAVAFBPXDC-LPEHRKFASA-N 0.000 description 1
- ZEAYJGRKRUBDOB-GARJFASQSA-N Arg-Gln-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O ZEAYJGRKRUBDOB-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- RFXXUWGNVRJTNQ-QXEWZRGKSA-N Arg-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N RFXXUWGNVRJTNQ-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- PHHRSPBBQUFULD-UWVGGRQHSA-N Arg-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N PHHRSPBBQUFULD-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- COXMUHNBYCVVRG-DCAQKATOSA-N Arg-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O COXMUHNBYCVVRG-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- BTJVOUQWFXABOI-IHRRRGAJSA-N Arg-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N BTJVOUQWFXABOI-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- XSPKAHFVDKRGRL-DCAQKATOSA-N Arg-Pro-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XSPKAHFVDKRGRL-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VUGWHBXPMAHEGZ-SRVKXCTJSA-N Arg-Pro-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VUGWHBXPMAHEGZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- KXOPYFNQLVUOAQ-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KXOPYFNQLVUOAQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- SLKLLQWZQHXYSV-CIUDSAMLSA-N Asn-Ala-Lys Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O SLKLLQWZQHXYSV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- WIDVAWAQBRAKTI-YUMQZZPRSA-N Asn-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O WIDVAWAQBRAKTI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- BCADFFUQHIMQAA-KKHAAJSZSA-N Asn-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O BCADFFUQHIMQAA-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 1
- BIVYLQMZPHDUIH-WHFBIAKZSA-N Asp-Gly-Cys Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)C(=O)O BIVYLQMZPHDUIH-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- SNDBKTFJWVEVPO-WHFBIAKZSA-N Asp-Gly-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SNDBKTFJWVEVPO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- QJHOOKBAHRJPPX-QWRGUYRKSA-N Asp-Phe-Gly Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=CC=C1 QJHOOKBAHRJPPX-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- JSHWXQIZOCVWIA-ZKWXMUAHSA-N Asp-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JSHWXQIZOCVWIA-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N Asp-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- GIKOVDMXBAFXDF-NHCYSSNCSA-N Asp-Val-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O GIKOVDMXBAFXDF-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- 102000016605 B-Cell Activating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010028006 B-Cell Activating Factor Proteins 0.000 description 1
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101100315624 Caenorhabditis elegans tyr-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100025466 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 3 Human genes 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- TVYMKYUSZSVOAG-ZLUOBGJFSA-N Cys-Ala-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O TVYMKYUSZSVOAG-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- PRXCTTWKGJAPMT-ZLUOBGJFSA-N Cys-Ala-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PRXCTTWKGJAPMT-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- QLCPDGRAEJSYQM-LPEHRKFASA-N Cys-Arg-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CS)N)C(=O)O QLCPDGRAEJSYQM-LPEHRKFASA-N 0.000 description 1
- KABHAOSDMIYXTR-GUBZILKMSA-N Cys-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N KABHAOSDMIYXTR-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 239000004097 EU approved flavor enhancer Substances 0.000 description 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 description 1
- KVYVOGYEMPEXBT-GUBZILKMSA-N Gln-Ala-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O KVYVOGYEMPEXBT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SHERTACNJPYHAR-ACZMJKKPSA-N Gln-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O SHERTACNJPYHAR-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- NVEASDQHBRZPSU-BQBZGAKWSA-N Gln-Gln-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O NVEASDQHBRZPSU-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- SNLOOPZHAQDMJG-CIUDSAMLSA-N Gln-Glu-Glu Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SNLOOPZHAQDMJG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- FGYPOQPQTUNESW-IUCAKERBSA-N Gln-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N FGYPOQPQTUNESW-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- ARPVSMCNIDAQBO-YUMQZZPRSA-N Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ARPVSMCNIDAQBO-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- TWIAMTNJOMRDAK-GUBZILKMSA-N Gln-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O TWIAMTNJOMRDAK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MSHXWFKYXJTLEZ-CIUDSAMLSA-N Gln-Met-Asn Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N MSHXWFKYXJTLEZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- MQJDLNRXBOELJW-KKUMJFAQSA-N Gln-Pro-Phe Chemical compound N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(O)=O MQJDLNRXBOELJW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- WLRYGVYQFXRJDA-DCAQKATOSA-N Gln-Pro-Pro Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 WLRYGVYQFXRJDA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- STHSGOZLFLFGSS-SUSMZKCASA-N Gln-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O STHSGOZLFLFGSS-SUSMZKCASA-N 0.000 description 1
- WOMUDRVDJMHTCV-DCAQKATOSA-N Glu-Arg-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WOMUDRVDJMHTCV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- NKLRYVLERDYDBI-FXQIFTODSA-N Glu-Glu-Asp Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NKLRYVLERDYDBI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- BUZMZDDKFCSKOT-CIUDSAMLSA-N Glu-Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O BUZMZDDKFCSKOT-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SJPMNHCEWPTRBR-BQBZGAKWSA-N Glu-Glu-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O SJPMNHCEWPTRBR-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- BUAKRRKDHSSIKK-IHRRRGAJSA-N Glu-Glu-Tyr Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 BUAKRRKDHSSIKK-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- OAGVHWYIBZMWLA-YFKPBYRVSA-N Glu-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O OAGVHWYIBZMWLA-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- DNPCBMNFQVTHMA-DCAQKATOSA-N Glu-Leu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O DNPCBMNFQVTHMA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- HBMRTXJZQDVRFT-DZKIICNBSA-N Glu-Tyr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HBMRTXJZQDVRFT-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- JRDYDYXZKFNNRQ-XPUUQOCRSA-N Gly-Ala-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN JRDYDYXZKFNNRQ-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- CLODWIOAKCSBAN-BQBZGAKWSA-N Gly-Arg-Asp Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O CLODWIOAKCSBAN-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- KFMBRBPXHVMDFN-UWVGGRQHSA-N Gly-Arg-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCNC(N)=N KFMBRBPXHVMDFN-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- KRRMJKMGWWXWDW-STQMWFEESA-N Gly-Arg-Phe Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KRRMJKMGWWXWDW-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- XXGQRGQPGFYECI-WDSKDSINSA-N Gly-Cys-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O XXGQRGQPGFYECI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- BULIVUZUDBHKKZ-WDSKDSINSA-N Gly-Gln-Asn Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BULIVUZUDBHKKZ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- CCQOOWAONKGYKQ-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)CN CCQOOWAONKGYKQ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QITBQGJOXQYMOA-ZETCQYMHSA-N Gly-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN QITBQGJOXQYMOA-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- SWQALSGKVLYKDT-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ile-Ala Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SWQALSGKVLYKDT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- SXJHOPPTOJACOA-QXEWZRGKSA-N Gly-Ile-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N SXJHOPPTOJACOA-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N Gly-Leu-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N Gly-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)NCC(O)=O PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- ZWRDOVYMQAAISL-UWVGGRQHSA-N Gly-Met-Lys Chemical compound CSCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN ZWRDOVYMQAAISL-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- FKYQEVBRZSFAMJ-QWRGUYRKSA-N Gly-Ser-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FKYQEVBRZSFAMJ-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- YGHSQRJSHKYUJY-SCZZXKLOSA-N Gly-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN YGHSQRJSHKYUJY-SCZZXKLOSA-N 0.000 description 1
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- DLTCGJZBNFOWFL-LKTVYLICSA-N His-Tyr-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N DLTCGJZBNFOWFL-LKTVYLICSA-N 0.000 description 1
- 101100112778 Homo sapiens CD247 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000914337 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000998953 Homo sapiens Immunoglobulin heavy variable 1-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000946843 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Proteins 0.000 description 1
- LWWILHPVAKKLQS-QXEWZRGKSA-N Ile-Gly-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N LWWILHPVAKKLQS-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- LRAUKBMYHHNADU-DKIMLUQUSA-N Ile-Phe-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)CC)CC1=CC=CC=C1 LRAUKBMYHHNADU-DKIMLUQUSA-N 0.000 description 1
- JHNJNTMTZHEDLJ-NAKRPEOUSA-N Ile-Ser-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O JHNJNTMTZHEDLJ-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- JTBFQNHKNRZJDS-SYWGBEHUSA-N Ile-Trp-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N JTBFQNHKNRZJDS-SYWGBEHUSA-N 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 1
- 102100036887 Immunoglobulin heavy variable 1-2 Human genes 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000416 LDH assay Toxicity 0.000 description 1
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 1
- WNGVUZWBXZKQES-YUMQZZPRSA-N Leu-Ala-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O WNGVUZWBXZKQES-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- JKGHDYGZRDWHGA-SRVKXCTJSA-N Leu-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JKGHDYGZRDWHGA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- JQSXWJXBASFONF-KKUMJFAQSA-N Leu-Asp-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O JQSXWJXBASFONF-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- LLBQJYDYOLIQAI-JYJNAYRXSA-N Leu-Glu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O LLBQJYDYOLIQAI-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- DPURXCQCHSQPAN-AVGNSLFASA-N Leu-Pro-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 DPURXCQCHSQPAN-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- PPGBXYKMUMHFBF-KATARQTJSA-N Leu-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PPGBXYKMUMHFBF-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- WUHBLPVELFTPQK-KKUMJFAQSA-N Leu-Tyr-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O WUHBLPVELFTPQK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- ARNIBBOXIAWUOP-MGHWNKPDSA-N Leu-Tyr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O ARNIBBOXIAWUOP-MGHWNKPDSA-N 0.000 description 1
- 239000012097 Lipofectamine 2000 Substances 0.000 description 1
- CLBGMWIYPYAZPR-AVGNSLFASA-N Lys-Arg-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O CLBGMWIYPYAZPR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- GAOJCVKPIGHTGO-UWVGGRQHSA-N Lys-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O GAOJCVKPIGHTGO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- QUCDKEKDPYISNX-HJGDQZAQSA-N Lys-Asn-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QUCDKEKDPYISNX-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- KWUKZRFFKPLUPE-HJGDQZAQSA-N Lys-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O KWUKZRFFKPLUPE-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- LCMWVZLBCUVDAZ-IUCAKERBSA-N Lys-Gly-Glu Chemical compound [NH3+]CCCC[C@H]([NH3+])C(=O)NCC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CCC([O-])=O LCMWVZLBCUVDAZ-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN GQFDWEDHOQRNLC-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- URGPVYGVWLIRGT-DCAQKATOSA-N Lys-Met-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O URGPVYGVWLIRGT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- QCZYYEFXOBKCNQ-STQMWFEESA-N Lys-Phe Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 QCZYYEFXOBKCNQ-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- SVSQSPICRKBMSZ-SRVKXCTJSA-N Lys-Pro-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O SVSQSPICRKBMSZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 206010061269 Malignant peritoneal neoplasm Diseases 0.000 description 1
- PWPBGAJJYJJVPI-PJODQICGSA-N Met-Ala-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(O)=O)=CNC2=C1 PWPBGAJJYJJVPI-PJODQICGSA-N 0.000 description 1
- YLLWCSDBVGZLOW-CIUDSAMLSA-N Met-Gln-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O YLLWCSDBVGZLOW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- 101100226902 Mus musculus Fcrlb gene Proteins 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- MDHZEOMXGNBSIL-DLOVCJGASA-N Phe-Ala-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N MDHZEOMXGNBSIL-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- XWBJLKDCHJVKAK-KKUMJFAQSA-N Phe-Arg-Gln Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N XWBJLKDCHJVKAK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- BIYWZVCPZIFGPY-QWRGUYRKSA-N Phe-Gly-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BIYWZVCPZIFGPY-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N Phe-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N 0.000 description 1
- 208000002151 Pleural effusion Diseases 0.000 description 1
- 208000009052 Precursor T-Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- CGBYDGAJHSOGFQ-LPEHRKFASA-N Pro-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2 CGBYDGAJHSOGFQ-LPEHRKFASA-N 0.000 description 1
- HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N Pro-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- LHALYDBUDCWMDY-CIUDSAMLSA-N Pro-Glu-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1)C(O)=O LHALYDBUDCWMDY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- FRKBNXCFJBPJOL-GUBZILKMSA-N Pro-Glu-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O FRKBNXCFJBPJOL-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N Pro-Pro-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- RCYUBVHMVUHEBM-RCWTZXSCSA-N Pro-Pro-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O RCYUBVHMVUHEBM-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- GZNYIXWOIUFLGO-ZJDVBMNYSA-N Pro-Thr-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GZNYIXWOIUFLGO-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 1
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 229940079156 Proteasome inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 208000004337 Salivary Gland Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010061934 Salivary gland cancer Diseases 0.000 description 1
- QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- QVOGDCQNGLBNCR-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QVOGDCQNGLBNCR-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- BNFVPSRLHHPQKS-WHFBIAKZSA-N Ser-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O BNFVPSRLHHPQKS-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- OLIJLNWFEQEFDM-SRVKXCTJSA-N Ser-Asp-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 OLIJLNWFEQEFDM-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- BLPYXIXXCFVIIF-FXQIFTODSA-N Ser-Cys-Arg Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CO)N)CN=C(N)N BLPYXIXXCFVIIF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- BQWCDDAISCPDQV-XHNCKOQMSA-N Ser-Gln-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O BQWCDDAISCPDQV-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 1
- AEGUWTFAQQWVLC-BQBZGAKWSA-N Ser-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O AEGUWTFAQQWVLC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- IXZHZUGGKLRHJD-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O IXZHZUGGKLRHJD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- CUXJENOFJXOSOZ-BIIVOSGPSA-N Ser-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O CUXJENOFJXOSOZ-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 1
- FHXGMDRKJHKLKW-QWRGUYRKSA-N Ser-Tyr-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FHXGMDRKJHKLKW-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- LGIMRDKGABDMBN-DCAQKATOSA-N Ser-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N LGIMRDKGABDMBN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010042135 Stomatitis necrotising Diseases 0.000 description 1
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 description 1
- 210000000662 T-lymphocyte subset Anatomy 0.000 description 1
- CAJFZCICSVBOJK-SHGPDSBTSA-N Thr-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O CAJFZCICSVBOJK-SHGPDSBTSA-N 0.000 description 1
- XSLXHSYIVPGEER-KZVJFYERSA-N Thr-Ala-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XSLXHSYIVPGEER-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- LYGKYFKSZTUXGZ-ZDLURKLDSA-N Thr-Cys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O LYGKYFKSZTUXGZ-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- XOWKUMFHEZLKLT-CIQUZCHMSA-N Thr-Ile-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XOWKUMFHEZLKLT-CIQUZCHMSA-N 0.000 description 1
- FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N Thr-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 1
- ABWNZPOIUJMNKT-IXOXFDKPSA-N Thr-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ABWNZPOIUJMNKT-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 1
- WTMPKZWHRCMMMT-KZVJFYERSA-N Thr-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WTMPKZWHRCMMMT-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- MFMGPEKYBXFIRF-SUSMZKCASA-N Thr-Thr-Gln Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MFMGPEKYBXFIRF-SUSMZKCASA-N 0.000 description 1
- COYHRQWNJDJCNA-NUJDXYNKSA-N Thr-Thr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O COYHRQWNJDJCNA-NUJDXYNKSA-N 0.000 description 1
- BPGDJSUFQKWUBK-KJEVXHAQSA-N Thr-Val-Tyr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 BPGDJSUFQKWUBK-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- SLOYNOMYOAOUCX-BVSLBCMMSA-N Trp-Phe-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SLOYNOMYOAOUCX-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 1
- RNDWCRUOGGQDKN-UBHSHLNASA-N Trp-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RNDWCRUOGGQDKN-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 108091005966 Type III transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- BURPTJBFWIOHEY-UWJYBYFXSA-N Tyr-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 BURPTJBFWIOHEY-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- RYSNTWVRSLCAJZ-RYUDHWBXSA-N Tyr-Gln-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 RYSNTWVRSLCAJZ-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- JWGXUKHIKXZWNG-RYUDHWBXSA-N Tyr-Gly-Gln Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N)O JWGXUKHIKXZWNG-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- UPODKYBYUBTWSV-BZSNNMDCSA-N Tyr-Phe-Cys Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 UPODKYBYUBTWSV-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- NWEGIYMHTZXVBP-JSGCOSHPSA-N Tyr-Val-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O NWEGIYMHTZXVBP-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- VFOHXOLPLACADK-GVXVVHGQSA-N Val-Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](C(C)C)N VFOHXOLPLACADK-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- NYTKXWLZSNRILS-IFFSRLJSSA-N Val-Gln-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O NYTKXWLZSNRILS-IFFSRLJSSA-N 0.000 description 1
- HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N Val-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- JXWGBRRVTRAZQA-ULQDDVLXSA-N Val-Tyr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N JXWGBRRVTRAZQA-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- PGBMPFKFKXYROZ-UFYCRDLUSA-N Val-Tyr-Phe Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=CC=C2)C(=O)O)N PGBMPFKFKXYROZ-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 206010047741 Vulval cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000004354 Vulvar Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 108010076324 alanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010041407 alanylaspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010005233 alanylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 1
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 210000001106 artificial yeast chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 description 1
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010021331 carfilzomib Proteins 0.000 description 1
- 229960002438 carfilzomib Drugs 0.000 description 1
- BLMPQMFVWMYDKT-NZTKNTHTSA-N carfilzomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)[C@]1(C)OC1)NC(=O)CN1CCOCC1)CC1=CC=CC=C1 BLMPQMFVWMYDKT-NZTKNTHTSA-N 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000003145 cytotoxic factor Substances 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000019264 food flavour enhancer Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000010749 gastric carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 1
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010079547 glutamylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 108010027668 glycyl-alanyl-valine Proteins 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000002843 lactate dehydrogenase assay Methods 0.000 description 1
- GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N lenalidomide Chemical compound C1C=2C(N)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004942 lenalidomide Drugs 0.000 description 1
- 108010073472 leucyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000005243 lung squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010038320 lysylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003519 mature b lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 201000008585 noma Diseases 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 201000002524 peritoneal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 101150086745 pre gene Proteins 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003207 proteasome inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000026267 regulation of growth Effects 0.000 description 1
- 208000015347 renal cell adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 201000006845 reticulosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000029922 reticulum cell sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 108010009962 valyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 229940099039 velcade Drugs 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 201000005102 vulva cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Description
Область техники
Изобретение относится к области клеточной иммунотерапии, в частности, к BCMAспецифическому химерному антигенному рецептору на основе однодоменного антитела и его применению.
Уровень техники
Множественная миелома (ММ) представляет собой гематологическое новообразование, развивающееся в костном мозге и характеризующееся накоплением клональных плазматических клеток. Схемы лечения в основном направлены на апоптоз плазматических клеток и/или снижение активности остеокластов (например, химиотерапия, талидомид, леналидомид, дифосфат и/или ингибитор протеасом, такой как бортезомиб (VELCADE®) или карфилзомиб). В настоящее время множественная миелома остается неизлечимым заболеванием. Выживаемость пациентов в течение более пяти лет после постановки диагноза составляет примерно 45%. У многих пациентов возникает рецидив заболевания после прекращения лечения, и 5-летняя выживаемость пациентов после рецидива составляет менее 20%.
В последние годы иммунотерапия T-клетками с химерными антигенными рецепторами (CART) стала одним из наиболее перспективных методов иммунотерапии опухолей. Химерный антигенный рецептор состоит из одного опухоль-ассоциированного антигенсвязывающего домена, трансмембранного домена, костимулирующего домена и внутриклеточного сигнального домена. При CART-клеточной терапии обычно экспрессируется слитый белок из минимального связывающего фрагмента антитела для распознавания опухоль-ассоциированного антигена (вариабельный одноцепочечный фрагмент или scFv) и последовательности активации T-клеток на поверхности T-клеток посредством технологии генной трансдукции. T-клетки, экспрессирующие молекулы CAR, связываются с опухолевыми антигенами антигензависимым, но не ограниченным MHC образом, специфически индуцируя гибель опухолевых клеток.
Эффективность CART-клеточной терапии зависит от таких свойств, как специфичность антител, распознающих опухоль-ассоциированные антигены, аффинность связывания антигена и т.п. В настоящее время конструирование внутриклеточного сигнального домена CART-клеток достигло успехов, и усилия сконцентрировались и стали ключевыми в конструировании антигенсвязывающего домена в разработке новой CART технологии. Фрагмент с минимальным и единственным функциональным доменом антитела, способный полноценно связываться с антигеном, в антителе из тяжелых цепей альпака (HCAb), а именно вариабельная область антитела из тяжелых цепей, не содержащая легкой цепи (также известная как VHH), имеет простую структуру и молекулярную массу, составляющую примерно 1/10 от молекулярной массы обычного антитела. Его можно эффективно экспрессировать и очистить в экспрессионной системе in vitro (например, в E.coli, дрожжах, эукариотических клетках и растениях). Он обладает высокой специфичностью, высокой аффинностью, низкой иммуногенностью, хорошей инфильтрацией и имеет возможность контактировать с относительно скрытыми мишенями, с которыми вряд ли могут связаться обычные антитела при лечении опухолей. Основываясь на этих преимуществах, одна из тенденций развития CART-клеточной терапии заключается в использовании однодоменных антител в качестве антигенсвязывающей области CAR для модификации CAR.
В отношении злокачественных B-клеточных новообразований очень важным биомаркером Bклеток является BCMA (антиген созревания B-клеток). Его РНК почти всегда находят в клетках множественной миеломы, и белок также обнаруживается на поверхности злокачественных плазматических клеток у пациентов с множественной миеломой. BCMA представляет собой трансмембранный белок типа III, состоящий из 185 аминокислотных остатков, и который относится к суперсемейству рецепторов TNF, и его лиганд принадлежит к суперсемейству TNF, такому как фактор, активирующий B-лимфоцитов (BAFF), лиганд, индуцирующий пролиферацию (APRIL). BCMA может активировать пролиферацию и выживание B-клеток, связываясь с его лигандами. BCMA высоко экспрессируется на поверхности плазматических клеток и клеток множественной миеломы, но не экспрессируется в гемопоэтических стволовых клетках или других клетках нормальной ткани. Следовательно, BCMA можно использовать в качестве идеальной мишени для таргетной терапии MM.
Сущность изобретения
В настоящей заявке сконструировано специфическое однодоменное антитело в качестве антигенсвязывающей области CAR для применения в модификациях CAR и CART-клеточной терапии с использованием средств генной инженерии, и обеспечивается специфический химерный антигенный рецептор (CAR) на основе однодоменного антитела, который включает домен связывания мишени, трансмембранный домен, один или более костимулирующих доменов и внутриклеточный сигнальный домен, где внеклеточный домен представляет собой фрагмент связывания антигена, который может связываться с человеческим BCMA (антигеном созревания B-клеток).
В одном аспекте настоящая заявка относится к химерному антигенному рецептору (CAR), включающему: BCMA-связывающий домен, трансмембранный домен, один или более костимулирующих доменов и внутриклеточный сигнальный домен; где BCMA-связывающий домен включает определяющий комплементарность участок тяжелой цепи 1 (HCDR1), определяющий комплементарность участок тяжелой цепи 2 (HCDR2), и определяющий комплементарность участок тяжелой цепи 3 (HCDR3), где аминокислотная последовательность HCDR1 приведена в SEQ ID NO: 1, аминокислотная последовательность
- 1 045097
HCDR2 приведена в SEQ ID NO: 2, и аминокислотная последовательность HCDR3 приведена в SEQ ID
NO: 3.
В некоторых вариантах осуществления BCMA-связывающий домен представляет собой однодоменное антитело.
В некоторых вариантах осуществления BCMA-связывающий домен включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4, или ее функциональный вариант.
В некоторых вариантах осуществления трансмембранный домен включает полипептид, полученный из белка, выбранного из группы, состоящей из α-, β- или ζ-цепи T-клеточного рецептора, CD28, CD3e, CD45, CD4, CD5, CD8a, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137 и CD154.
В некоторых вариантах осуществления трансмембранный домен содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 5, или ее функциональный вариант.
В некоторых вариантах осуществления BCMA-связывающий домен связан с трансмембранным доменом через шарнирную область.
В некоторых вариантах осуществления шарнирная область содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 6, или ее функциональный вариант.
В некоторых вариантах осуществления один или более костимулирующих доменов происходят из костимулирующей молекулы, выбранной из группы, состоящей из CARD11, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CD54 (ICAM), CD83, CD134 (OX40), CD137 (4-1BB), CD150 (SLAMF1), CD152 (CTLA4), CD223 (LAG3), CD270 (HVEM), CD273 (PD-L2), CD274 (PD-L1), CD278 (ICOS), DAP10, LAT, NKG2C, SLP76, TRIM и ZAP70.
В некоторых вариантах осуществления костимулирующий домен содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 7, или ее функциональный вариант.
В некоторых вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит сигнальный домен CD3Z.
В некоторых вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 8, или ее функциональный вариант.
В некоторых вариантах осуществления CAR дополнительно содержит лидерную последовательность, и лидерная последовательность включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 9, или ее функциональный вариант.
В некоторых вариантах осуществления CAR содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 10-11, или ее функциональный вариант.
В еще одном аспекте настоящая заявка относится к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR.
В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты содержит последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 12-13, или ее функциональный вариант.
В еще одном аспекте настоящая заявка относится к вектору, содержащему молекулу нуклеиновой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления вектор выбран из ДНК-векторов, РНК-векторов, плазмид, лентивирусных векторов, аденовирусных векторов и ретровирусных векторов.
В некоторых вариантах осуществления вектор дополнительно содержит промотор EF1, где промотор EF1 содержит последовательность, представленную в SEQ ID NO: 14.
В еще одном аспекте настоящая заявка относится к иммунной эффекторной клетке, содержащей CAR, молекулу нуклеиновой кислоты или вектор.
В некоторых вариантах осуществления иммунная эффекторная клетка выбрана из T-лимфоцитов и естественных клеток-киллеров (NK).
В еще одном аспекте настоящая заявка относится к способу получения иммунной эффекторной клетки, включающему введение вектора в иммунную эффекторную клетку.
В некоторых вариантах осуществления в способе иммунная эффекторная клетка выбрана из Tлимфоцитов и естественных клеток-киллеров (NK).
В еще одном аспекте настоящая заявка относится к композиции, содержащей иммунную эффекторную клетку.
В еще одном аспекте настоящая заявка относится к применению CAR, молекулы нуклеиновой кислоты, вектора или эффекторной иммунной клетки в производстве лекарственного средства для лечения заболевания или нарушения, связанного с экспрессией BCMA.
В еще одном аспекте настоящая заявка относится к CAR, молекуле нуклеиновой кислоте, вектору или иммунной эффекторной клетке для лечения заболевания или нарушения, связанного с экспрессией BCMA.
В еще одном аспекте настоящая заявка относится к способу лечения заболевания или нарушения, связанного с экспрессией BCMA, включающего стадию введения субъекту CAR, молекулы нуклеиновой кислоты, вектора или иммунной эффекторной клетки.
В некоторых вариантах осуществления заболевание или нарушение, связанное с экспрессией
- 2 045097
BCMA, представляет собой рак или злокачественную опухоль. В некоторых вариантах осуществления заболевание или нарушение, связанное с экспрессией BCMA, выбрано из группы, состоящей из Bклеточного острого лимф областного лейкоза, T-клеточного острого лимф областного лейкоза, острого лимф областного лейкоза, хронического миелоидного лейкоза, хронического лимфоцитарного лейкоза, B-клеточного пролимфоцитарного лейкоза, бластноклеточной плазмацитоидной дендритно-клеточной цитомы, лимфомы Беркитта, диффузной B-крупноклеточной лимфомы, фолликулярной лимфомы, волосатоклеточного лейкоза, мелкоклеточной или крупноклеточной фолликулярной лимфомы, злокачественного лимфопролиферативного состояния, MALT-лимфомы, мантийноклеточной лимфомы, лимфомы маргинальной зоны, множественной миеломы, миелодисплазии и миелодиспластического синдрома, неходжкинской лимфомы, плазмобластной лимфомы, плазмоцитоидной дендритно-клеточной цитомы, макроглобулинемии Вальденстрема, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы, рака легких, миеломы, MGUS, плазмоцитомы, системного амилоидоза, вызванного аномальными легкими цепями, образующими амилоидные отложения, и синдрома POEMS.
Инновации и положительные эффекты настоящей заявки.
Автор изобретения сконструировал однодоменное антитело, содержащее специфическую аминокислотную последовательность, с использованием средств генной инженерии, и сконструировал химерный антигенный рецептор (CAR), используя однодоменное антитело в качестве связывающего домена (BCMA-связывающего домена). В ходе исследований было установлено, что иммунные клетки (например, CART-клетки), содержащие химерный антигенный рецептор, обладают высокой способностью к киллингу и специфичностью по отношению к ассоциированным опухолям. В частности, CAR эффективно трансфектирует T-лимфоциты здорового человека in vitro и оказывает сильный киллинговый эффект на BCMA-положительных клетках-мишенях; и в экспериментах in vivo он также демонстрирует сильный киллинговый эффект: воспроизведена мышиная модель первичной миеломы для обнаружения с использованием клеток MM.1S, трансфектированных люциферазой, и через 3 суток после введения большая часть флуоресценции исчезает, что указывает на то, что клетки CART обладают высоким терапевтическим действием in vivo.
Более того, иммунные клетки, содержащие химерный антигенный рецептор по настоящей заявке, демонстрируют отличное нацеливание in vitro. Они обладают очень высокой способностью к киллинговому эффекту на клетках, которые являются положительными на экспрессию BCMA, и по существу не обладают киллинговым эффектом на клетках, которые не экспрессируют BCMA. Кроме того, они также демонстрируют отличное нацеливание на опухоль в экспериментах in vivo.
Краткое описание фигур
На фиг. 1 приведены результаты проточной цитометрии экспрессии химерного антигенного рецептора в иммунных клетках, содержащих химерный антигенный рецептор по настоящей заявке.
На фиг. 2 приведены результаты проточной цитометрии уровня экспрессии BCMA на поверхности клеток множественной миеломы MM.1S (левая панель) и клеток миелоидного лейкоза K562 (правая панель).
На фиг. 3A-3B приведены результаты оценки киллинга клеток-мишеней после совместной инкубации опухолевых клеток и иммунных клеток, содержащих химерный антигенный рецептор по настоящей заявке.
На фиг. 4A-4B приведены результаты определения уровня цитокинов в супернатанте методом ELISA после совместной инкубации опухолевых клеток и иммунных клеток, содержащих химерный антигенный рецептор по настоящей заявке.
На фиг. 5 приведены результаты оценки обработки мышей, несущих опухоли, иммунными клетками, содержащими химерный антигенный рецептор по настоящей заявке.
На фиг. 6 приведены результаты оценки обработки мышей, несущих опухоли, иммунными клетками, содержащими химерный антигенный рецептор по настоящей заявке.
Подробное описание изобретения
Автор изобретения сконструировал специфическое однодоменное антитело в качестве антигенсвязывающей области CAR для модификации CAR и CART-клеточной терапии средствами генной инженерии и обеспечил специфический химерный антигенный рецептор (CAR) на основе однодоменного антитела, включающий внеклеточный домен, трансмембранный домен и внутриклеточный домен, где внеклеточный домен представляет собой антигенсвязывающий фрагмент, который может связываться с человеческим BCMA (антигеном созревания B-клеток), выбранный из однодоменного антитела альпака (sdAb, наноантитело).
В рамках настоящей заявки, термин CDR обычно относится к определяющему комплементарность участку, который в основном ответственен за связывание с эпитопами антигенов. CDR тяжелой цепи обычно называются HCDR1, HCDR2 и HCDR3, которые последовательно нумеруются от N-конца. В рамках настоящей заявки, CDR можно определить или идентифицировать обычными методами, например, в соответствии с методом, описанным в публикации Kabat et al. (Wu T.T. and Kabat E.A., J. Exp. Med., 132 (2): 211-50, (1970); Borden P. and Kabat E.A., PNAS, 84: 2440-2443 (1987), или методом, описанным в публикации Chothia et al. (Chothia C. and Lesk A.M., J. Mol.Biol., 196 (4): 901-917(1987)).
- 3 045097
В рамках настоящей заявки, термин однодоменное антитело (sdAb) обычно относится к фрагменту антитела, состоящему из вариабельной области тяжелой цепи антитела (область VH) или вариабельной области легкой цепи антитела (область VL) (Holt L. et al., Trends in Biotechnology, 21 (11): 484-490), которое также известно как нанотело. Однодоменное антитело имеет молекулярную массу всего примерно 12-15 кДа. Первое однодоменное антитело, также известное как сегмент VHH, было получено генной инженерией из антитела из тяжелых цепей альпака. В настоящей заявке однодоменное антитело может представлять собой однодоменное антитело альпака. Например, сегмент VHH может относиться к известной минимальной антигенсвязывающей единице антитела из тяжелых цепей (Koch-Nolte et al., FASEB J., 21: 3490-3498 (2007)).
В рамках настоящей заявки, термин трансмембранный домен можно использовать взаимозаменяемо с трансмембранной областью (сокращенно, TM), и он относится к части CAR, которая сливает внеклеточный связывающий домен с внутриклеточным сигнальным доменом и заякоривает CAR к плазматической мембране иммунных эффекторных клеток. Трансмембранный домен можно получить из встречающихся в природе белков или получить синтезом, полусинтезом или рекомбинацией. Домен TM может включать, по меньшей мере, трансмембранный домен следующих белков: α-, β- или ζ-цепи Tклеточного рецептора, CD3ε, CD3Z, CD4, CD5, CD8a, CD9, CD16, CD22, CD27, CD28, CD33, CD37, CD45, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137, CD152, CD154 и PD1. В рамках настоящей заявки, трансмембранный домен может включать полипептид, полученный из белка, выбранного из α-, β- или ζ-цепи Tклеточного рецептора, CD28, CD3e, CD45, CD4, CD5, CD8a, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137 и CD154.
В рамках настоящей заявки, термин внутриклеточный сигнальный домен обычно является частью CAR, который участвует в трансдукции информации об эффективном связывании анти-BCMA CAR с полипептидом BCMA человека во внутреннюю часть иммунных эффекторных клеток, для запуска функции эффекторных клеток, например активации, продукции цитокинов, пролиферации и цитотоксической активности, включая высвобождение цитотоксических факторов к CAR-связывающим клеткаммишеням, или другие клеточные ответы, индуцированные связыванием антигенов с внеклеточным доменом CAR. В рамках настоящей заявки, внутриклеточный сигнальный домен может включать сигнальный домен CD3ε.
В рамках настоящей заявки, термин BCMA обычно относится к зрелому клеточному антигену, который относится к члену супер семейства рецепторов фактора некроза опухоли (см. Thompson et al., J. Exp. Medicine, 192 (1): 129-135, 2000). BCMA может связываться с факторами, активирующими B-клетки (BAFF) и лигандами, индуцирующими пролиферацию (APRIL) (см. Kalled et al., Immunological Reviews, 204: 43-54, 2005). Сообщалось, что в незлокачественных клетках BCMA в основном экспрессируются в субпопуляции плазматических клеток и зрелых B-клетках (см. Laabi et al., EMBO J., 77 (1): 3897-3904, 1992; Laabi et al., Nucleic Acids Res., 22 (7): 1147-1154, 1994; Kalled et al., 2005; O'Connor et al., J. Exp. Medicine, 199 (1): 91-97, 2004; и Ng et al., J. Immunol., 73 (2): 807-817, 2004). РНК BCMA обычно обнаруживают в клетках множественной миеломы и других лимфомах, и некоторые исследователи обнаружили белок BCMA на поверхности плазматических клеток у пациентов с множественной миеломой (см. Novak et al., Blood, 103 (2): 689-694, 2004; Neri et al., Clinical Cancer Research, 73 (19): 5903-5909, 2007; Bellucci et al., Blood, 105 (10): 3945-3950, 2005; и Moreaux et al., Blood, 703 (8): 3148-3157, 2004). Таким образом, BCMA можно использовать в качестве потенциальной терапевтической мишени для лечения злокачественных опухолей (например, множественной миеломы).
В рамках настоящей заявки, термин BCMA-связывающий домен обычно относится к гуманизированному анти-BCMA антителу, которое может специфически связываться с полипептидом BCMA, экспрессированным на B-клетках, или его антигенсвязывающему фрагменту. В рамках настоящей заявки, связывающий домен может происходить из природных источников, синтетических источников, полусинтетических источников или рекомбинантных источников. В рамках настоящей заявки, внеклеточный связывающий домен может включать анти-BCMA антитело или его антигенсвязывающий фрагмент. Из них антитело может представлять собой полипептид, включающий, по меньшей мере, вариабельную область легкой цепи или тяжелой цепи иммуноглобулина, который специфически распознает и связывается с эпитопом антигена (например, BCMA), таким как содержащие антигенную детерминанту пептиды, липиды, полисахариды или нуклеиновые кислоты (например, те, которые распознаются иммунными клетками).
В рамках настоящей заявки, термин костимулирующий домен обычно относится к внутриклеточному сигнальному домену костимулирующей молекулы. Например, костимулирующая молекула может представлять собой молекулу клеточной поверхности, отличную от рецептора антигена или Fcрецептора, которая может обеспечивать второй сигнал, необходимый для эффективной активации и функций T-лимфоцитов. Например, костимулирующий домен может быть выбран из группы, состоящей из CARD11, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CD54 (ICAM), CD83, CD134 (OX40), CD137 (4-1BB), CD150 (SLAMF1), CD152 (CTLA4), CD223 (LAG3), CD270 (HVEM), CD273 (PD-L2), CD274 (PD-L1), CD278 (ICOS), DAP10, LAT, NKD2C SLP76, TRIM и ZAP70.
- 4 045097
В рамках настоящей заявки, термин шарнирная область обычно относится к домену в химерном антигенном рецепторе, который располагает связывающий домен от поверхности эффекторных клеток, чтобы он играл надлежащую роль в клетка/клеточном контакте, связывании антигена и активации. В рамках настоящей заявки, шарнирная область может располагаться между связывающим доменом и трансмембранным доменом. Шарнирная область может происходить из природных источников, синтетических источников, полусинтетических источников или рекомбинантных источников. Шарнирная область может содержать аминокислотную последовательность встречающейся в природе шарнирной области иммуноглобулина или искусственно модифицированной (включая делецированную, замененную или вставленную) шарнирной области иммуноглобулина.
В рамках настоящей заявки, термин лидерная последовательность обычно относится к последовательности, расположенной перед кодирующей областью структурного гена, которая может транскрибироваться, но не может транслироваться. В настоящей заявке лидерная последовательность может начинаться от 5'-конца до первого кода гена, кодирующего химерный антигенный рецептор. В рамках настоящей заявки, лидерная последовательность включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 9, или ее функциональный вариант.
В рамках настоящей заявки, термин функциональный вариант обычно относится к аминокислотной последовательности, имеющей по существу такие же функции с ней (например, обладающей свойствами химерного антигенного рецептора) и имеющей, по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или, по меньшей мере 100%) идентичность последовательности. В некоторых вариантах осуществления вариант аминокислотной последовательности представляет собой аминокислотную последовательность, имеющую по существу такие же функции с ней (например, обладающую свойствами химерного антигенного рецептора), и включающую одно или более (например, 1-2, 1-3, 1-4, 1-5, 1-6, 1-7, 1-8, 1-9, 1-10 или более) из замен, делеций или добавлений аминокислот на основе аминокислотной последовательности.
В рамках настоящей заявки, термин лентивирусный вектор обычно относится к вектору генной терапии, разработанному на основе вируса. В рамках настоящей заявки, вирус может представлять собой вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), вирус иммунодефицита обезьян (SIV), вирус инфекционной анемии лошадей (EIA) или вирус иммунодефицита кошек (FIV). Лентивирусный вектор обладает способностью инфицировать как митотические клетки, так и немитотические клетки, может эффективно инфицировать почти все клетки млекопитающих, включая нейроны, гепатоциты, кардиомиоциты, опухолевые клетки, эндотелиальные клетки, стволовые клетки и т.п., и имеет высокую эффективность инфицирования.
В рамках настоящей заявки, термин промотор EF1 обычно относится к промотору, который может постоянно поддерживать транскрипцию регулируемого гена-мишени на определенном уровне. В рамках настоящей заявки, промотор EF1 может содержать последовательность, представленную в SEQ ID NO: 14. В рамках настоящей заявки, уровень экспрессии химерного антигенного рецептора, регулируемый промотором EF1, может подвергнуться повышающей или понижащей регуляции не более чем на 5%, не более чем на 4%, не более чем на 3%, не более чем на 2%, не более чем на 1%, не более чем 0,5%, не более чем 0,1%, не более чем 0,01% или менее. В рамках настоящей заявки, промотор EF1 может располагаться выше нуклеиновой кислоты, кодирующей химерный антигенный рецептор.
В рамках настоящей заявки, термин T-лимфоциты обычно относится к клеткам, которые включают тимоциты, незрелые T-лимфоциты, зрелые T-лимфоциты, T-лимфоциты в состоянии покоя или активированные T-лимфоциты. T-клетки могут представлять собой хелперные Т (Th)-клетки, такие как хелперные T1 (Th1) клетки или хелперные T2 (Th2) клетки. T-клетки могут быть хелперными T-клетками (HTL; CD4+T-клетки), CD4 T-клетками, цитотоксическими T-клетками (CTL; CD8+T-клетки), CD4+CD8+T-клетками или CD4’CD8’T-клетками. Альтернативно, T-лимфоциты могут включать нативные T-клетки и T-клетки памяти.
В рамках настоящей заявки, термин естественные клетки-киллеры обычно относится к субпопуляции лейкоцитов, которые являются компонентом врожденной иммунной системы. NK-клетки играют важную роль в отторжении у хозяина опухолей и инфицированных вирусом клеток. NK-клетки обладают цитотоксичностью и индуцируют апоптоз. NK-клетки можно использовать для подавления вирусной инфекции и продукции антигенспецифических цитотоксических T-клеток посредством адаптивного иммунного ответа, тем самым элиминируя инфекцию.
В рамках настоящей заявки, термин опухоль обычно относится к новому аномальному разрастанию, которое развивается в результате клональной аномальной пролиферации определенной клетки в локальной ткани, которая теряет нормальную регуляцию роста на уровне гена под действием различных канцерогенных факторов. Ее также называют новообразованием, потому что такое новообразование в основном представляет собой массивные узелковые образования. В рамках настоящей заявки, рак может включать плоскоклеточную карциному, рак легкого (включая мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, аденокарциному легкого и плоскоклеточный рак легкого), перитонеальную карци
- 5 045097 ному, гепатоцеллюлярную карциному, карциному желудка или рак желудка (включая рак желудочнокишечного тракта), рак поджелудочной железы, глиобластому, рак шейки матки, рак яичника, рак печени, рак мочевого пузыря, рак печени, рак молочной железы, рак толстой кишки, колоректальный рак, рак эндометрия или матки, рак слюнной железы, рак почки или почечноклеточный рак, рак печени, рак предстательной железы, рак вульвы, рак щитовидной железы, рак печени, рак головы и шеи, Bклеточную лимфому (включая низкодифференцированную/фолликулярную NHL; мелкоклеточную лимфоцитарную (SL) NHL; промежуточную/фолликулярную NHL, диффузную NHL с промежуточной дифференцировкой клеток; иммунобластную NHL высокой степени злокачественности; лимфобластную NHL высокой степени злокачественности; NHL из мелких клеток с нерасщепленными ядрами высокой степени злокачественности, лимфому, ассоциированную со СПИДом, макроглобулинемию Вальденстрема, хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), острый лимфоцитарный лейкоз (ALL), волосатоклеточный лейкоз, хронический миелобластоз и посттрансплантационное лимфопролиферативное заболевание (PTLD). В рамках настоящей заявки, рак может включать рак или злокачественные опухоли, связанные с экспрессией BCMA. Например, рак может быть выбран из группы, состоящей из B-клеточного острого лимф областного лейкоза, T-клеточного острого лимф областного лейкоза, острого лимф областного лейкоза, хронического миелоидного лейкоза, хронического лимфоцитарного лейкоза, B-клеточного пролимфоцитарного лейкоза, бластноклеточной плазмацитоидной дендритно-клеточной цитомы, лимфомы Беркитта, диффузной B-крупноклеточной лимфомы, фолликулярной лимфомы, волосатоклеточного лейкоза, мелкоклеточной или крупноклеточной фолликулярной лимфомы, злокачественного лимфопролиферативного состояния, MALT-лимфомы, мантийноклеточной лимфомы, лимфомы маргинальной зоны, множественной миеломы, миелодисплазии и миелодиспластического синдрома, неходжкинской лимфомы, плазмобластной лимфомы, плазмоцитоидной дендритно-клеточной цитомы, макроглобулинемии Вальденстрема, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы, рака легких, миеломы, MGUS, плазмоцитомы, системного амилоидоза, вызванного аномальными легкими цепями, образующими амилоидные отложения, и синдрома POEMS.
В рамках настоящей заявки, обеспечивается химерный антигенный рецептор (CAR), содержащий BCMA-связывающий домен, трансмембранный домен, один или более костимулирующих доменов и внутриклеточный сигнальный домен; где BCMA-связывающий домен включает определяющий комплементарность участок тяжелой цепи 1 (HCDR1), определяющий комплементарность участок тяжелой цепи 2 (HCDR2), и определяющий комплементарность участок тяжелой цепи 3 (HCDR3), где аминокислотная последовательность HCDR1 приведена в SEQ ID NO: 1, аминокислотная последовательность HCDR2 приведена в SEQ ID NO: 2, и аминокислотная последовательность HCDR3 приведена в SEQ ID NO: 3.
В рамках настоящей заявки, BCMA-связывающий домен может связываться или ассоциироваться с BCMA с Ka (т.е. константой равновесия ассоциации связывающего взаимодействия при 1/М), больше или равной примерно 105 М-1 (например, выше или равной примерно 105 М-1, выше или равной примерно 106 М-1, выше или равной примерно 107 М-1, выше или равной примерно 108 М-1, выше или равной примерно 109 М-1, выше или равной примерно 1010 М-1, выше или равной примерно 1011 М-1, выше или равной примерно 1012 М-1, выше или равной примерно 1013 М-1 или выше), или с константой равновесия диссоциации Kd ниже или равной примерно 10-5 М (например, ниже или равной примерно 10-5 М, ниже или равной примерно 10-6 М, ниже или равной примерно 10-7 М, ниже или равной примерно 10-8 М, ниже или равной примерно 10-9 М, ниже или равной примерно 10-10 М, ниже или равной примерно 10-11 М, ниже или равной примерно 10-12 М, ниже или равной примерно 10-13 М или ниже).
В рамках настоящей заявки, аффинность между BCMA-связывающим доменом и BCMA можно определить обычными методами, используемыми в данной области, например, конкурентным ELISA (твердофазный иммуноферментный анализ), или ассоциацией связывания или анализом замещения с использованием меченых лигандов, или с использованием поверхностного плазмонного резонанса (такого как Biacore T100, который можно получить от Biacore, Inc., Piscataway, NJ) или технологии оптических биосенсоров.
В рамках настоящей заявки, BCMA-связывающий домен может представлять собой однодоменное антитело. BCMA-связывающий домен, подходящий для конструирования химерного антигенного рецептора по настоящей заявке, включает, не ограничиваясь этим, аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4, или ее функциональный вариант. Из них функциональный вариант выбран из группы, состоящей из белков или полипептидов, образованных заменой, делецией или добавлением одной или более аминокислот в BCMA-связывающем домене; и белков или полипептидов, имеющих 90% или более (например, по меньшей мере, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98%, примерно 99% или больше) гомологию последовательности с BCMA-связывающим доменом.
В настоящей заявке трансмембранный домен может включать полипептид, полученный из белка, выбранного из группы, состоящей из α-, β- или ζ-цепи T-клеточного рецептора, CD28, CD3Z, CD45, CD4, CD5, CD8a, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137 и CD154. В рамках настоящей заявки, трансмембранный домен может происходить из трансмембранного домена CD8a. В
- 6 045097 рамках настоящей заявки, трансмембранный домен может содержать аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 5, или ее функциональный вариант. Из них функциональный вариант выбран из группы, состоящей из белков или полипептидов, образованных заменой, делецией или добавлением одной или более аминокислот в трансмембранном домене; и белков или полипептидов, имеющих 90% или более (например, по меньшей мере, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98%, примерно 99% или больше) гомологию последовательности с трансмембранным доменом.
В рамках настоящей заявки, BCMA-связывающий домен может быть связан с трансмембранным доменом через шарнирную область. В рамках настоящей заявки, CAR может содержать одну или более шарнирных областей между BCMA-связывающим доменом и трансмембранным доменом. Шарнирная область может содержать определенные мутации или замены аминокислот, например, такие, в которых остаток пролина мутирован или заменен другим аминокислотным остатком (например, остатком серина). В рамках настоящей заявки, шарнирная область может содержать аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 6, или ее функциональный вариант. Из них функциональный вариант выбран из группы, состоящей из белков или полипептидов, образованных заменой, делецией или добавлением одной или более аминокислот шарнирной области; и белков или полипептидов, имеющих 90% или более (например, по меньшей мере, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98%, примерно 99% или больше) гомологию последовательности с шарнирной областью.
В рамках настоящей заявки, костимулирующий домен может функционировать антигеннезависимым (например, BCMA-независимым) образом, для обеспечения вторичного или костимулирующего сигнала. В рамках настоящей заявки, CAR может содержать один или более костимулирующих доменов. Множество костимулирующих доменов может повышать эффективность и способность к размножению иммунных клеток (например, T-клеток и NK-клеток), экспрессирующих CAR. Например, костимулирующий домен может быть связан с С-концом трансмембранного домена. В рамках настоящей заявки, один или более костимулирующих доменов могут происходить из костимулирующей молекулы, выбранной из CARD11, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CD54 (ICAM), CD83, CD134 (OX40), CD137 (41BB), CD150 (SLAMF1), CD152 (CTLA4), CD223 (LAG3), CD270 (HVEM), CD273 (PD-L2), CD274 (PDL1), CD278 (iCoS), DAP10, LAT, NKG2C, SLP76, TRIM и ZAP70. В рамках настоящей заявки, костимулирующий домен может происходить из CD137. В рамках настоящей заявки, костимулирующий домен может содержать аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 7, или ее функциональный вариант. Из них функциональный вариант выбран из группы, состоящей из белков или полипептидов, образованных заменой, делецией или добавлением одной или более аминокислот в костимулирующем домене; и белков или полипептидов, имеющих 90% или более (например, по меньшей мере, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98%, примерно 99% или больше) гомологию последовательности с костимулирующим доменом.
В рамках настоящей заявки, внутриклеточный сигнальный домен может преимущественно активироваться TCR (например, комплексом TCR/CD3) антигензависимым образом. В рамках настоящей заявки, внутриклеточный сигнальный домен может происходить из TCRZ, FcRy, FcRe, CD3y, CD3δ, CD3ε, CD3Z, CD22, CD79a, CD79b и CD66d. В рамках настоящей заявки, внутриклеточный сигнальный домен может включать сигнальный домен CD3Z. Например, внутриклеточный сигнальный домен содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 8, или ее функциональный вариант. Из них функциональный вариант выбран из группы, состоящей из белков или полипептидов, образованных заменой, делецией или добавлением одной или более аминокислот во внутриклеточном сигнальном домене; и белков или полипептидов, имеющих 90% или более (например, по меньшей мере, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98%, примерно 99% или больше) гомологию последовательности с внутриклеточным сигнальным доменом.
В рамках настоящей заявки, CAR может дополнительно включать лидерную последовательность. Например, лидерная последовательность может содержать аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 9, или ее функциональный вариант. Из них функциональный вариант выбран из группы, состоящей из белков или полипептидов, образованных заменой, делецией или добавлением одной или более аминокислот в лидерной последовательности; и белков или полипептидов, имеющих 90% или более (например, по меньшей мере, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98%, примерно 99% или больше) гомологию последовательности с лидерной последовательностью.
В рамках настоящей заявки, CAR может содержать линкер между соответствующими доменами. Например, линкер включается для достижения правильного расстояния и конфигурации между соответствующими доменами. Например, линкер может связывать трансмембранный домен с внутриклеточным сигнальным доменом. В рамках настоящей заявки, линкер может содержать следующие аминокислотные
- 7 045097 последовательности: GGG, (GGGGS) n и GGRRGGGS.
В CAR по настоящей заявке трансмембранный домен может происходить из CD8a, костимулирующий домен может происходить из CD137, и внутриклеточный сигнальный домен может происходить из CD3Z.
В рамках настоящей заявки, CAR может содержать BCMA-связывающий домен, включающий HCDR1, имеющий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1, HCDR2, имеющий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2, и HCDR3, имеющий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 3, трансмембранный домен, имеющий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 5, шарнирную область, имеющую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 6, костимулирующий домен, имеющий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 7, внутриклеточный сигнальный домен, имеющий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 8, и лидерную последовательность, имеющую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 9.
В рамках настоящей заявки, CAR может содержать BCMA-связывающий домен, включающий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4, трансмембранный домен, включающий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 5, шарнирную область, включающую аминокислотная последовательность, представленную в SEQ ID NO: 6, костимулирующий домен, включающий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 7, внутриклеточный сигнальный домен, включающий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 8, и лидерную последовательность, включающая аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 9.
В рамках настоящей заявки, CAR содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 10-11, или ее функциональный вариант. Из них функциональный вариант выбран из группы, состоящей из белков или полипептидов, образованных заменой, делецией или добавлением одной или более аминокислот в CAR; и белков или полипептидов, имеющих 90% или более (например, по меньшей мере, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98%, примерно 99% или больше) гомологию последовательности с CAR.
Настоящая заявка относится к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, которая может кодировать CAR.
В рамках настоящей заявки, молекула нуклеиновой кислоты может содержать последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в SEQ ID NO: 12-13, или ее функциональный вариант. Например, функциональный вариант может включать полинуклеотид, имеющий, по меньшей мере, примерно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% идентичность последовательности с последовательностью из SEQ ID NO: 12-13 или вариантом, при условии, что она все еще может кодировать CAR.
Настоящая заявка относится к вектору, который может содержать молекулу нуклеиновой кислоты.
В рамках настоящей заявки, вектор может включать одно или более из ориджина репликации, селективного бокса, промотора, энхансера, сигнала инициации трансляции (последовательность ШайнаДальгарно или последовательность Козака), интрона, последовательности полиаденилирования, 5'- и 3'нетранслируемой области. Например, вектор может содержать промотор EF1, и промотор EF1 может содержать последовательность, представленную в SEQ ID NO: 14. В рамках настоящей заявки, вектор может быть выбран из плазмид, фагов, искусственных хромосом (например, дрожжевой искусственной хромосомы, YAC) и вируса животных. Например, вектор может быть выбран из ДНК-векторов, РНКвекторов, плазмид, лентивирусных векторов, аденовирусных векторов и ретровирусных векторов.
Настоящая заявка относится к иммунной эффекторной клетке, которая может содержать CAR, молекулу нуклеиновой кислоты или вектор.
В рамках настоящей заявки, иммунная эффекторная клетка может быть выбрана из T-лимфоцитов и естественных клеток-киллеров (NK).
Настоящая заявка относится к способу получения эффекторной иммунной клетки, включающему введение вектора в эффекторную иммунную клетку. Например, CAR вводится и экспрессируется в иммунных клетках для перенацеливания CAR специфически на антиген-мишень (например, BCMA). В настоящей заявке иммунная эффекторная клетка может быть выбрана из T-лимфоцитов и естественных клеток-киллеров (NK). В рамках настоящей заявки, способ может включать стадию получения иммунных эффекторных клеток от субъекта. Например, T-лимфоциты можно получить из мононуклеарных клеток периферической крови, костного мозга, ткани лимфатических узлов, пуповинной крови, ткани тимуса, ткани из очага инфекции, асцита, плеврального выпота, ткани селезенки и опухоли. Кроме того, способ может дополнительно включать стадию селекции определенной клеточной субпопуляции из иммунной эффекторной клетки. Например, определенная субпопуляция T-клеток может быть выбрана в соответствии со специфической экспрессией CD3, CD28, CD4, CD8, CD45RA и CD45RO.
Настоящая заявка относится к композиции, которая может содержать эффекторную иммунную
- 8 045097 клетку.
В рамках настоящей заявки, композиция может содержать фармацевтически приемлемые носители. Фармацевтически приемлемые носители могут быть выбраны из группы, состоящей из эксципиентов, скользящих веществ, подсластителей, разбавителей, консервантов, красок/красителей, усилителей вкуса, поверхностно-активных веществ, смачивающих агентов, диспергаторов, суспендирующих агентов, стабилизаторов, изотонических агентов, растворителей, поверхностно-активных веществ и эмульгаторов.
В рамках настоящей заявки, композиция может дополнительно включать дополнительные активные ингредиенты, такие как одно или более из цитокинов, факторов роста, гормонов, низкомолекулярных химических активных ингредиентов, пролекарств и антител.
В рамках настоящей заявки, количество иммунных эффекторных клеток в композиции может представлять собой эффективное количество. Эффективное количество может представлять собой минимальное количество, при котором можно достичь положительного или желаемого профилактического или терапевтического эффекта. Например, эффективное количество может зависеть от тяжести заболевания, возраста, массы тела, пола или других факторов субъекта.
Настоящая заявка относится к применению CAR, молекулы нуклеиновой кислоты, вектора или эффекторной иммунной клетки в производстве лекарственного средства для лечения заболевания или нарушения, связанного с экспрессией BCMA.
Настоящая заявка относится к CAR, молекуле нуклеиновой кислоты, вектору или иммунной эффекторной клетке для лечения заболевания или нарушения, связанного с экспрессией BCMA.
Настоящая заявка относится к способу лечения заболевания или нарушения, связанного с экспрессией BCMA, включая стадию введения субъекту CAR, молекулы нуклеиновой кислоты, вектора или иммунной эффекторной клетки.
В рамках настоящей заявки, заболевание или нарушение, связанное с экспрессией BCMA, представляет собой рак или злокачественную опухоль. В настоящей заявке заболевание или нарушение, связанное с экспрессией BCMA, выбрано из группы, состоящей из B-клеточного острого лимф областного лейкоза, T-клеточного острого лимфобластного лейкоза, острого лимфобластного лейкоза, хронического миелоидного лейкоза, хронического лимфоцитарного лейкоза, B-клеточного пролимфоцитарного лейкоза, бластноклеточной плазмацитоидной дендритно-клеточной цитомы, лимфомы Беркитта, диффузной Bкрупноклеточной лимфомы, фолликулярной лимфомы, волосатоклеточного лейкоза, мелкоклеточной или крупноклеточной фолликулярной лимфомы, злокачественного лимфопролиферативного состояния, MALT-лимфомы, мантийноклеточной лимфомы, лимфомы маргинальной зоны, множественной миеломы, миелодисплазии и миелодиспластического синдрома, неходжкинской лимфомы, плазмобластной лимфомы, плазмоцитоидной дендритно-клеточной цитомы, макроглобулинемии Вальденстрема, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы, рака легких, миеломы, MGUS, плазмоцитомы, системного амилоидоза, вызванного аномальными легкими цепями, образующими амилоидные отложения, и синдрома POEMS.
В рамках настоящей заявки, способ введения лекарственного средства может включать аэрозольную ингаляцию, инъекцию, прием внутрь, инфузию, имплантацию или трансплантацию. Например, инъекция может включать внутрисосудистые, внутривенные, внутримышечные, внутриартериальные, интратекальные, внутрисуставные, интраорбитальные, интратуморальные, внутрисердечные, внутрикожные, внутрибрюшинные, транстрахеальные, подкожные, субэпидермальные, внутрисуставные, субкапсулярные, субарахноидальные, интраспинальные и внутримышечные инъекции, или прямую инъекцию в опухоль или лимфатический узел.
Далее настоящая заявка дополнительно иллюстрируется подробными примерами. Следует понимать, что следующие примеры предназначены только для иллюстрации настоящей заявки и не ограничивают содержание изобретения.
Примеры.
Пример 1. Получение гена VHH однодоменного анти-BCMA антитела.
1) Создание библиотеки однодоменных анти-BCMA антител.
Здоровых взрослых альпаков иммунизировали многократными подкожными инъекциями в шею и спину антигеном BCMA, полученным из Beijing Yiqiao Shenzhou Ltd. При иммунизации антиген и равный объем адъюванта Фрейнда смешивали для 4-6 иммунизации. Следили за всасыванием введенной массы в местах инъекций и наблюдали для подтверждения правильности иммунизации. Интервал между иммунизациями составлял 7-15 суток. После четвертой иммунизации отбирали образцы крови для определения иммунного титра к антигену. Когда титр достигал более 10000 (метод ELISA), то отбирали образец крови (примерно 100 мл) для выделения лимфоцитов для экстракции РНК, которую обратно транскрибировали в кДНК. Фрагмент вариабельной области VHH антитела из тяжелых цепей альпака дважды амплифицировали с помощью ПЦР. Фрагмент VHH был сконструирован в библиотеке фагового дисплея, и продукт фрагмента гена, несущего однодоменное антитело, трансформировали в компетентные клетки, с получением иммунной библиотеки однодоменных антител.
2) Скрининг однодоменного анти-BCMA антитела.
Молекулы однодоменных антител экспонировали на поверхности фага с помощью технологии фа
- 9 045097 гового дисплея, и затем скринировали для получения антигенспецифических однодоменных антител. С помощью фагового твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) антиген разбавляли 100 мМ NaHCO3 (pH 8,0) до конечной концентрации 100 мкг/мл, и 100 мкл покрывали 96-луночный планшет, выдерживали в течение ночи при 4°C. После промывания PBS и покрытия 1% обезжиренным молоком фаги добавляли для инкубации в течение 1-2 ч. Затем элюировали антигенспецифические фаги и инфицировали клетки TG1, которые помещали и культивировали в культуральный планшет со средой LB, содержащей ампициллин. С помощью нескольких раундов скрининга постепенно достигалось концентрирование. Для определения ELISA было отобрано большое количество положительных клонов, и положительные клоны секвенировали. По данным выравнивания последовательностей идентифицировали уникальные клоны и разделяли на каркасную область (FR) и определяющий комплементарность участок (CDR).
Клоны с правильными результатами секвенирования инокулировали в 5 мл среды LB, содержащей ампициллин, и культивировали в течение ночи при 37°C на шейкере. 1 мл бактериального раствора инокулировали в 300 мл среды LB и культивировали при 37°C на шейкере до OD600 нм=0,6-0,9. Добавляли 1М IPTG и культивировали в течение ночи при 28°C на шейкере. Бактерии собирали центрифугированием. Сырой экстракт антитела получали осмотическим методом. Однодоменное антитело метили ProteinL и очищали с помощью аффинной хроматографии с выходом более 10 мг/л. Аффинность антитела определяли с помощью технологии SPR для дальнейшего скрининга однодоменных антител с высокой специфичностью. Согласно вышеуказанному варианту осуществления в целом было получено 6 однодоменных анти-ВСМА антител, и было выбрано однодоменное антитело с более высокой аффинностью.
Из них одно однодоменное анти-ВСМА антитело было названо ВСМА sdAb I. Посредством секвенирования было установлено, что аминокислотные последовательности HCDR1-3 ВСМА sdAb I представляют таковые, последовательно представленные в SEQ ID NO: 1-3.
Пример 2. Конструирование вектора гена химерного антигенного рецептора.
Два генных сегмента синтезировали в Taihe Biotechnology Co., Ltd. Один из них представляет собой нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 15, которая находится в ВСМА sdAb I, полученном в примере 1; и другая представляет собой сконструированный структурный ген CAR поколения 2 (шарнирная область CD8a, трансмембранный домен+костимулирующий домен 4-1BB+внутриклеточный сигнальный домен CD3Z, и нуклеотидная последовательность, кодирующая структурный ген CAR поколения 2, содержащий эти домены, представляет последовательность, показанную в SEQ ID NO: 16). После получения синтетического гена проводили молекулярное клонирование для конструирования ВСМАспецифического CAR. Продукты ПЦР с последовательностями SEQ ID NO: 15 и SEQ ID NO: 16 получали с помощью ПЦР. ПЦР с перекрывающимися праймерами использовали для получения гена ВСМА CAR, связыванием двух фрагментов (его нуклеотидная последовательность представлена в SEQ ID NO: 12). Лентивирусный вектор Pre и ген ВСМА CAR ферментативно расщепляли, связывали и трансформировали. Собирали клоны и экстрагировали плазмиды. Проводили секвенирование для подтверждения правильной последовательности лентивирусного вектора Pre-Lenti-EF1-BCMA.
1) SEQ ID NO: 15:
atggccttaccagtgaccgccttgctcctgccgctggccttgctgctccacgccgccaggccggaagtccaactccaggcttcc ggtggcggtctggcacagcctggagggtccctgcggctctcctgcgcagcaagtggcaggactttcagtacctactttatggcctggttcag acagccacctggcaaaggcctcgaatacgtcggagggattaggtggtctgacggtgtccctcactacgctgacagtgtgaagggtcggttc accattagcagagacaacgctaagaatacagtgtacctgcaaatgaactcactgagagctgaggatactgctgtgtacttctgcgcatctcgc ggaatcgctgacgggtcagactttggctcctatggacagggcacccaggtgactgtgagttcc
2) SEQ ID NO: 16:
ccagcgaagcccaccacgacgccagcgccgcgaccaccaacaccggcgcccaccatcgcgtcgcagcccctgtccctgcg cccagaggcgtgccggccagcggcggggggcgcagtgcacacgagggggctggacttcgcctgtgatatctacatctgggcgcccttg gccgggacttgtggggtccttctcctgtcactggttatcaccctttactgcaaacggggcagaaagaaactcctgtatatattcaaacaaccatt tatgagaccagtacaaactactcaagaggaagatggctgtagctgccgatttccagaagaagaagaaggaggatgtgaactgagagtgaa gttcagcaggagcgcagacgcccccgcgtaccagcagggccagaaccagctctataacgagctcaatctaggacgaagagaggagtac gatgttttggacaagagacgtggccgggaccctgagatggggggaaagccgcagagaaggaagaaccctcaggaaggcctgtacaatg aactgcagaaagataagatggcggaggcctacagtgagattgggatgaaaggcgagcgccggaggggcaaggggcacgatggccttt accagggtctcagtacagccaccaaggacacctacgacgcccttcacatgcaggccctgccccctcgctaa
Пример 3. Получение лентивируса ВСМА-специфического химерного антигенного рецептора.
За сутки до упаковки вируса клетки 293T (полученные в ATCC) переваривали трипсином и инокулировали на 10 см чашку из расчета 1x10' клеток/чашку. После трансфекции клеток в дополнение к плазмиде Pre-Lenti-EF1-BCMA, полученной в примере 2, каждую плазмиду необходимо было котрансфектировать с упаковочными плазмидами psPAX2, pMD2.0G. Из них использовали 5 мкг Pre-Lenti-EFlBCMA, 3,75 мкг плазмиды psPAX2 и 1,25 мкг плазмиды pMD2.0G. После трансфекции смесь трех вышеуказанных плазмид добавляли в 500 мкл среды MEM. В отдельную микроцентрифужную пробирку на 25
- 10 045097 мкл добавляли реагент Lipofectamine 2000 (липосома) в 500 мкл среды MEM. Затем разбавленный реагент для трансфекции добавляли по каплям над разбавленной плазмидой, хорошо перемешивали, центрифугировали и выдерживали при комнатной температуре в течение 20 мин. Наконец, смесь плазмиды и реагента для трансфекции добавляли на культуральную чашку диаметром 10 см, осторожно встряхивали 10 раз, хорошо перемешивали и помещали в термостат. Через 3 суток трансфекции вирус собирали. 10 мл вирусосодержащего супернатанта культуры переносили в центрифужную пробирку емкостью 50 мл и центрифугировали при 4°C при 1250 об/мин в течение 5 мин для удаления мертвых клеток 293Т. Затем вирусосодержащего супернатант фильтровали, концентрировали, упаковывали и хранили при -80°C для использования.
Пример 4. Получение T-клеток, модифицированных ВСМА-специфическим химерным антигенным рецептором.
1) Получение T-лимфоцитов.
В стерильных условиях у добровольцев отбирали 10 мл венозной крови. В центрифужную пробирку емкостью 50 мл добавляли 10 мл изолятов человеческих лимфоцитов (Dakewei Bioengineering Co., Ltd.). Кровь медленно вносили с помощью электрического пистолета-дозатора в центрифужную пробирку, по стенке. Центрифужную пробирку помещали в центрифугу и центрифугировали при 700 g при 22°C в течение 25 мин. После окончания центрифугирования РВМС находятся в белом мембранном слое между верхним слоем плазмы и отделившимся раствором. Белый мембранный слой, как можно полнее, отсасывали в другую центрифужную пробирку с помощью пипетки Пастера (добавляя 30 мл среды 1640). В данном случае нужно быть осторожными, чтобы не отсосать отделившийся раствор. Центрифугировали при 250 g, 22°C, в течение 10 мин. Верхнюю жидкость отбрасывали. Клетки ресуспендировали в 3 мл среды 1640 и подсчитывали для выделения T-клеток.
1х107 клеток помещали в микроцентрифужную пробирку и центрифугировали при 250 g при 22°C в течение 10 мин. Верхнюю жидкость отбрасывали, клеточные осадки ресуспендировали в 80 мкл буфера для разделения магнитными шариками и добавляли 20 мкл CD3MicroBeads (Meitianni). Смесь помещали при 4°C в холодильник на 1 ч для обеспечения достаточного связывания. Через 1 ч в микроцентрифужную пробирку добавляли 1 мл буфера для разделения магнитными шариками и центрифугировали при 250 g при 4°C в течение 10 мин. В течение этого периода готовили колонку для фильтрования, помещали на магнит и промывали 500 мкл буфера (буфер стекал вниз под действием силы тяжести). После центрифугирования супернатант удаляли, и клетки ресуспендировали в 500 мкл буфера. Добавляли колонку, и буфер стекал вниз под действием силы тяжести. После вытекания клеточной суспензии колонку промывали четыре раза 500 мкл буфера. Колонку удаляли с магнита, и T-клетки промывали 1 мл буфера в микроцентрифужной пробирке на 1,5 мл. Клетки центрифугировали при 250 g при 4°C в течение 10 мин. Клетки ресуспендировали в среде Х-vivo 15, содержащей IL2 (Lonza), и инокулировали из расчета 2x106 T-клеток/лунку (в 6-луночном планшете) после подсчета.
2) Инфицирование T-клеток лентивирусом.
После культивирования в течение ночи для инфицирования в течение ночи добавляли раствор вируса Pre-Lenti-EF1-BCMA с MOI=2, полученный в примере 3. На сутки 2 добавляли 1 мл свежей среды. На сутки 3 T-клетки были достаточно активированы и быстро пролиферировали. В это время T-клетки переносили в культуральную колбу емкостью 25 см. На сутки 5 после инфицирования эффективность экспрессии молекул BCMA CAR на поверхности T-клеток определяли с помощью биомеченного белка BCMA Fc для получения BCMA-специфических CART-клеток. Экспрессию CAR на поверхности клеточной мембраны определяли проточной цитометрией. Результаты анализа проточной цитометрией экспрессии молекул BCMA CAR на поверхности клеток BCMA CART приведены на фиг. 1. Результаты на фиг. 1 показывают, что эффективность экспрессии CAR в клетках BCMA CART, полученных в примере 4, составляет более 50%.
Пр имер 5. Оценка функции T-клеток, модифицированных BCMA-специфическим химерным антигенным рецептором.
1) Оценка функции in vitro.
Клетки множественной миеломы MM.1S и клетки миелоидного лейкоза K562 (полученные из ATCC) анализировали проточной цитометрией. Результаты приведены на фиг. 2. Результаты на фиг. 2 показывают, что молекулы BCMA эффективно экспрессируются в клетках MM. 1S, но не экспрессируются в клетках K562.
Опыты по оценке киллинга клеток in vitro проводили с помощью набора для детектирования LDH (Promega). Клетки BCMA CART, полученные в примере 4, и клетки-мишени (такие как клетки MM.1S или клетки K562), использованные с четырьмя градиентами в соответствии с числовым соотношением (то есть множественностью инфекции), а именно 0,5:1, 1:1, 2:1 и 4:1. Из них клетки-мишени составляли 3x104 клеток/лунку, и системы во всех остальных лунках дополняли до 200 мкл средой X-VIVO/средой 1640. 96-луночный планшет инкубировали при 37°C, 5% CO2 в термостате. Через 17 ч в лунку с максимальным высвобождением добавляли 20 мкл лизата. При тщательном перемешивании клетки полностью разрушались. 96-луночный планшет инкубировали в CO2 инкубаторе в течение 2 ч. Через 2 ч отмечали
- 11 045097 лунку с максимальным высвобождением. После того, как все клетки-мишени лизировались, 50 мкл супернатанта отбирали из каждой лунки и переносили в 96-луночный планшет с плоским дном, и затем в каждую лунку добавляли 50 мкл раствора субстрата и проявляли в темноте в течение 30 мин. Через 30 мин в лунках наблюдали изменение цвета, где лунки с максимальным высвобождением MM. 1S и лунки, содержащая клетки BCMA CART, имели относительно темные цвета. Измерения проводили с помощью ридера для ферментов при длине волны 490 нм. Результаты определения способности к киллингу получали с использованием набора для определения LDH.
Результаты приведены на фиг. 3, киллинговый эффект для клеток K562 показан на фиг. 3A; и киллинговый эффект для клеток MM.1S показан на фиг. 3B. Результаты на фиг. 3 показывают, что BCMAспецифические CART-клетки, полученные в примере 4, могут специфически индуцировать гибель BCMA-положительных клеток с высокой киллинговой активностью, например, выше 40%. В то же время эти BCMA-специфические CART-клетки не оказывают киллингового эффекта на BCMA-отрицательных клетках.
Опухолевые клетки MM.1S и клетки BCMA CART, полученные в примере 4, совместно инкубировали и детектировали методом ELISA на содержание IFN-γ и TNFa в супернатанте. Результаты приведены на фиг. 4, где содержание IFN-γ показано на фиг. 4A, и содержание TNFa показано на фиг. 4B. Результаты на фиг. 4 показывают, что различная множественность инфекции может повышать уровни экспрессии цитокинов IFN-γ и TNFa, оказывая киллинговый эффект на опухоли. Это доказывает специфический характер киллингового эффекта BCMA CART-клеток с другой точки зрения.
2) Эксперименты на животных.
Клетки линии множественной миеломы человека MM. 1S трансфектировали для экспрессии репортерного гена люциферазы с получением MM.1S-luc. Среду 1640, содержащую 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS), обычной инкубировали в атмосфере 5% CO2 в термостате при 37°C. Клетки линии MM.1S-luc вводили из расчета 1,5x106 клеток/200 мкл PBS в хвостовую вену мышей (50 мышей, половина самцов и половина самок) в течение 17 суток. Затем всех животных визуализировали. Мыши, однородно несущие опухоли, входили в опытную группу и их произвольно разделяли на 5 групп (половина самцов и половина самок, по 8 мышей в каждой группе), то есть группу с внеклеточной жидкостью, контрольную группу T, а также группы с BCMA CART в низкой, средней и высокой дозе. Из них, группе с внеклеточной жидкости вводили внеклеточную жидкость в хвостовую вену, контрольной группе T вводили контрольные T-клетки в хвостовую вену, и группе с BCMA CART в низкой, средней и высокой дозе вводили в хвостовую вену клетки BCMA CART, полученные в примере 4.
Через 3 суток мышей анестезировали и внутрибрюшинно вводили субстрат люциферазы. Опухолевую нагрузку в контрольных группах (группа с внеклеточной жидкостью и контрольная группа T) и группах обработки BCMA CART определяли с помощью системы визуализации для мелких животных in vivo. Результаты на сутки 3 и 7 после лечения показаны на фиг. 5 и 6 соответственно.
Результаты на фиг. 5 показывают, что при визуализации опухолевые клетки практически отсутствуют в группах обработки BCMA CART в высокой и средней дозах, в то время как опухолевая нагрузка в контрольных группах высокая, тем самым указывая, что BCMA CART может эффективно элиминировать BCMA-положительные опухолевые клетки. После того, как клетки BCMA CART вводили обратно в вену, то интенсивность сигнала флуоресценции у мышей на сутки 3 начала снижаться по сравнению с группой с внеклеточной жидкостью и контрольной группой T, указывая на то, что опухолевая нагрузка снижалась. По данным фиг. 6 следует, что интенсивность сигнала флуоресценции у мышей на сутки 7 практически не определялась. Можно видеть, что BCMA CART также демонстрирует сильный терапевтический эффект на заболевания, связанные с экспрессией BCMA в эксперименте на животных in vivo.
Специалисты в данной области техники должны понимать, что, несмотря на то, что здесь было показано и подробно описано много примерных вариантов осуществления настоящей заявки, тем не менее, многие другие вариации или модификации в соответствии с принципами настоящей заявки можно непосредственно определить или получить из раскрытия настоящей заявки, не отступая от сущности или объема настоящей заявки. Таким образом, объем настоящей заявки следует понимать и рассматривать как охватывающий все другие варианты или модификации.
Список последовательностей <110> SHENZHEN PREGENE BIOPHARMA CO. LTD.
<12 0> ХИМЕРНЫЙ АНТИГЕННЫЙ РЕЦЕПТОР ДЛЯ BCMA НА ОСНОВЕ ОДНОДОМЕННОГО АНТИТЕЛА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ <130> 0087-PA-003EA <160> 16
- 12 045097 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 5 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>
< 223> аминокислотная последовательность HCDR1 BCMA-связывающего домена < 400>1
Thr Tyr Phe Met Ala <210>2 <211>18 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> аминокислотная последовательность HCDR2 BCMA-связывающего домена <400>2
Gly Gly Ile Arg Trp Ser Asp Gly Val Pro His Tyr Ala Asp Ser Val 1 5 1015
Lys Gly <210>3 <211>14 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> аминокислотная последовательность HCDR3 BCMA-связывающего домена <400>3
Cys Ala Ser Arg Gly Ile Ala Asp Gly Ser Asp Phe Gly Ser <210>4 <211>120 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>
< 223> аминокислотная последовательность BCMA-связывающего домена < 400>4
Glu Val Gln Leu Gln Ala Ser Gly Gly 15
Gly Leu Ala Gln Pro Gly Gly
15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser 2025
Gly Arg Thr Phe Ser Thr Tyr
- 13 045097
Phe Met Ala Trp Phe 35
Arg Gln Pro Pro Gly 40
Lys Gly Leu Glu Tyr Val 45
Gly Gly Ile Arg Trp 50
Ser Asp Gly Val Pro 55
His Tyr Ala Asp Ser Val 60
Lys Gly Arg Phe Thr 65
Ile Ser Arg Asp Asn 70
Ala Lys Asn Thr Val Tyr 75 80
Leu Gln Met Asn Ser
Leu Arg Ala Glu Asp 90
Thr Ala Val Tyr Phe Cys 95
Ala Ser Arg Gly Ile
100
Ala Asp Gly Ser Asp
105
Phe Gly Ser Tyr Gly Gln
110
Gly Thr Gln Val Thr 115
Val Ser Ser
120 < 210> 5 < 211> 21 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>
< 223> аминокислотная последовательность трансмембранного домена < 400>5
Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu
5 1015
Ser Leu Val Ile Thr < 210>6 < 211>49 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>
< 223> аминокислотная последовательность шарнирной области < 400> 6
Pro 1
Ala
Lys
Pro
Thr 5
Thr
Thr
Pro
Ala
Pro 10
Arg
Pro
Pro
Thr
Pro 15
Ala
Pro
Thr
Ile
Ala 20
Ser
Gln
Pro
Leu
Ser 25
Leu
Arg
Pro
Glu
Ala 30
Cys
Arg
Pro
Ala
Ala
Gly
Gly
Ala
Val
His
Thr
Arg
Gly
Leu
Asp
Phe
Ala
Cys
- 14 045097
Asp < 210> 7 < 211> 42 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>
< 223> аминокислотная последовательность костимулирующего домена <400> 7
Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr 1 5
Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met
Arg Pro Val
Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe 20 2530
Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu
3540 <210>8 <211>114 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> аминокислотная последовательность внутриклеточного сигнального домена <400> 8
Leu Arg Val 1
Lys Phe 5
Ser Arg Ser Ala Asp Ala
Gly Gln Asn
Gln Leu 20
Tyr Asn Glu Leu Asn Leu 25
Tyr Asp Val
Leu Asp
Lys Arg Arg Gly Arg Asp 40
Pro Ala Tyr Gln Gln 15
Gly Arg Arg Glu Glu 30
Pro Glu Met Gly Gly 45
Lys Pro Gln Arg Arg Lys Asn Pro Gln
55
Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu 60
Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr 65 70
Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly
80
Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp 85
Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser 90 95
- 15 045097
Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro
100
105
110
Pro Arg <210> 9 <211> 21 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>
< 223> аминокислотная последовательность лидерной последовательности <400>9
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
5 1015
His Ala Ala Arg Pro <210>10 <211>369 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>
< 223> аминокислотная последовательность полного CAR (включая лидерную последовательность) < 400>10
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
5 1015
His Ala Ala Arg Pro Glu Val Gln Leu Gln Ala Ser Gly Gly Gly Leu 20 2530
Ala Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg 35 4045
Thr Phe Ser Thr Tyr Phe Met Ala Trp Phe Arg Gln Pro Pro Gly Lys 50 5560
Gly Leu Glu Tyr Val Gly Gly Ile Arg Trp Ser Asp Gly Val Pro His 65 70 7580
Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala 85 9095
Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
100 105110
- 16 045097
Ala Val Tyr Phe Cys 115
Ala Ser Arg Gly Ile 120
Ala Asp Gly Ser Asp 125
Gly Ser Tyr Gly Gln 130
Gly Thr Gln Val Thr
135
Val Ser Ser Pro Ala
140
Pro Thr Thr Thr Pro 145
Ala Pro Arg Pro Pro 150
Thr Pro Ala Pro Thr 155
Ala Ser Gln Pro Leu
165
Ser Leu Arg Pro Glu
170
Ala Cys Arg Pro Ala
175
Gly Gly Ala Val His
180
Thr Arg Gly Leu Asp
185
Phe Ala Cys Asp Ile
190
Ile Trp Ala Pro Leu
195
Ala Gly Thr Cys Gly
200
Val Leu Leu Leu Ser
205
Val Ile Thr Leu Tyr
210
Cys Lys Arg Gly Arg
215
Lys Lys Leu Leu Tyr
220
Phe Lys Gln Pro Phe 225
Met Arg Pro Val Gln 230
Thr Thr Gln Glu Glu 235
Gly Cys Ser Cys Arg
245
Phe Pro Glu Glu Glu
250
Glu Gly Gly Cys Glu
255
Arg Val Lys Phe Ser
260
Arg Ser Ala Asp Ala
265
Pro Ala Tyr Gln Gln
270
Gln Asn Gln Leu Tyr
275
Asn Glu Leu Asn Leu
280
Gly Arg Arg Glu Glu
285
Asp Val Leu Asp Lys 290
Arg Arg Gly Arg Asp
295
Pro Glu Met Gly Gly 300
Pro Gln Arg Arg Lys 305
Asn Pro Gln Glu Gly 310
Leu Tyr Asn Glu Leu 315
Lys Asp Lys Met Ala
325
Glu Ala Tyr Ser Glu
330
Ile Gly Met Lys Gly
335
Arg Arg Arg Gly Lys
340
Gly His Asp Gly Leu
345
Tyr Gln Gly Leu Ser
350
Phe
Lys
Ile 160
Ala
Tyr
Leu
Ile
Asp 240
Leu
Gly
Tyr
Lys
Gln 320
Glu
Thr
Pro
Ala Thr Lys Asp Thr
Tyr Asp Ala Leu His
Met Gln Ala Leu Pro
- 17 045097
355
Arg
360
365 <210> 11 <211> 348 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> аминокислотная последовательность полного CAR (не включая лидерную последовательность) <400>11
Glu Val Gln Leu Gln Ala Ser Gly Gly Gly Leu Ala Gln Pro Gly Gly
5 1015
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Thr Tyr 20 2530
Phe Met Ala Trp Phe Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Val 35 4045
Gly Gly Ile Arg Trp Ser Asp Gly Val Pro His Tyr Ala Asp Ser Val 50 5560
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr 65 70 7580
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 9095
Ala Ser Arg Gly Ile Ala Asp Gly Ser Asp Phe Gly Ser Tyr Gly Gln
100 105110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro
115 120125
Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu
130 135140
Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His
145 150 155160
Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu
165 170175
Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr
- 18 045097
Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe
205
180
185
190
Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu
195 200
Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln
210 215
Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg
220
Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly
225 230
Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser
235 240
Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr
245
Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr
250 255
Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg
260
Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys
265 270
Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met
275 280
Gly Gly Lys Pro Gln Arg Arg Lys
285
Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn
290 295
Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala 300
Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met
305 310
Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys
315 320
Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly
325
Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr
330 335
Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala 340
Leu Pro Pro Arg 345 <210> 12 <211> 1110 < 212> ДНК < 213> Искусственная последовательность <220>
< 223> последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая CAR (включая дерную последовательность) < 400> 12 atggccttac cagtgaccgc cttgctcctg ccgctggcct tgctgctcca cgccgccagg ccggaagtcc aactccaggc ttccggtggc ggtctggcac agcctggagg gtccctgcgg ctctcctgcg cagcaagtgg caggactttc agtacctact ttatggcctg gttcagacag ccacctggca aaggcctcga atacgtcgga gggattaggt ggtctgacgg tgtccctcac tacgctgaca gtgtgaaggg tcggttcacc attagcagag acaacgctaa gaatacagtg ли60
120
180
240
300
- 19 045097 tacctgcaaa ggaatcgctg tccccagcga gcgtcgcagc cacacgaggg tgtggggtcc ctcctgtata ggctgtagct agcaggagcg aatctaggac atggggggaa aaagataaga aaggggcacg cttcacatgc <210> 13 <211> 1047 < 212> ДНК < 213> Искусственная последовательность <220>
< 223> последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая CAR (не лидерную оследовательность) < 400> 13 gaagtccaac tcctgcgcag cctggcaaag gctgacagtg ctgcaaatga atcgctgacg ccagcgaagc tcgcagcccc acgagggggc ggggtccttc ctgtatatat tgtagctgcc tgaactcact acgggtcaga agcccaccac ccctgtccct ggctggactt ttctcctgtc tattcaaaca gccgatttcc cagacgcccc gaagagagga agccgcagag tggcggaggc atggccttta aggccctgcc tccaggcttc caagtggcag gcctcgaata tgaagggtcg actcactgag ggtcagactt ccaccacgac tgtccctgcg tggacttcgc tcctgtcact tcaaacaacc gatttccaga gagagctgag ctttggctcc gacgccagcg gcgcccagag cgcctgtgat actggttatc accatttatg agaagaagaa cgcgtaccag gtacgatgtt aaggaagaac ctacagtgag ccagggtctc ccctcgctaa cggtggcggt gactttcagt cgtcggaggg gttcaccatt agctgaggat tggctcctat gccagcgccg cccagaggcg ctgtgatatc ggttatcacc atttatgaga agaagaagaa gatactgctg tatggacagg ccgcgaccac gcgtgccggc atctacatct accctttact agaccagtac gaaggaggat cagggccaga ttggacaaga cctcaggaag attgggatga agtacagcca ctggcacagc acctacttta attaggtggt agcagagaca actgctgtgt ggacagggca cgaccaccaa tgccggccag tacatctggg ctttactgca ccagtacaaa ggaggatgtg tgtacttctg gcacccaggt caacaccggc cagcggcggg gggcgccctt gcaaacgggg aaactactca gtgaactgag accagctcta gacgtggccg gcctgtacaa aaggcgagcg ccaaggacac ctggagggtc tggcctggtt ctgacggtgt acgctaagaa acttctgcgc cccaggtgac caccggcgcc cggcgggggg cgcccttggc aacggggcag ctactcaaga aactgagagt cgcatctcgc gactgtgagt gcccaccatc gggcgcagtg ggccgggact cagaaagaaa agaggaagat agtgaagttc taacgagctc ggaccctgag tgaactgcag ccggaggggc ctacgacgcc
360
420
480
540
600
660
720
780
840
900
960
1020
1080
1110 cctgcggctc cagacagcca ccctcactac tacagtgtac atctcgcgga tgtgagttcc caccatcgcg cgcagtgcac cgggacttgt aaagaaactc ggaagatggc gaagttcagc включая
120
180
240
300
360
420
480
540
600
660
720
- 20 045097 aggagcgcag ctaggacgaa gggggaaagc gataagatgg gggcacgatg cacatgcagg acgcccccgc gagaggagta cgcagagaag cggaggccta gcctttacca ccctgccccc gtaccagcag cgatgttttg gaagaaccct cagtgagatt gggtctcagt tcgctaa ggccagaacc gacaagagac caggaaggcc gggatgaaag acagccacca agctctataa gtggccggga tgtacaatga gcgagcgccg aggacaccta cgagctcaat ccctgagatg actgcagaaa gaggggcaag cgacgccctt
780
840
900
960
1020
1047 <210> 14 <211> 553 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> последовательность нуклеиновой кислоты промотора EF1 <400> 14 aaggatctgc gatcgctccg gtgcccgtca gtgggcagag cgcacatcgc ccacagtccc cgagaagttg gggggagggg tcggcaattg aacgggtgcc tagagaaggt ggcgcggggt aaactgggaa agtgatgtcg tgtactggct ccgccttttt cccgagggtg ggggagaacc gtatataagt gcagtagtcg ccgtgaacgt tctttttcgc aacgggtttg ccgccagaac acagctgaag cttcgagggg ctcgcatctc tccttcacgc gcccgccgcc ctacctgagg ccgccatcca cgccggttga gtcgcgttct gccgcctccc gcctgtggtg cctcctgaac tgcgtccgcc gtctaggtaa gtttaaagct caggtcgaga ccgggccttt gtccggcgct cccttggagc ctacctagac tcagccggct ctccacgctt tgcctgaccc tgcttgctca actctacgtc tttgtttcgt tttctgttct gcgccgttac agatccaagc tgtgaccggc gcctacgcta gac
120
180
240
300
360
420
480
540
553 <210> 15 <211> 423 < 212> ДНК < 213> Искусственная последовательность <220>
< 223> последовательность нуклеиновой кислоты BCMA sdAb I <400> 15 atggccttac ccggaagtcc ctctcctgcg ccacctggca tacgctgaca tacctgcaaa cagtgaccgc aactccaggc cagcaagtgg aaggcctcga gtgtgaaggg tgaactcact cttgctcctg ttccggtggc caggactttc atacgtcgga tcggttcacc gagagctgag ccgctggcct ggtctggcac agtacctact gggattaggt attagcagag gatactgctg tgctgctcca agcctggagg ttatggcctg ggtctgacgg acaacgctaa tgtacttctg cgccgccagg gtccctgcgg gttcagacag tgtccctcac gaatacagtg cgcatctcgc
120
180
240
300
360
-
Claims (7)
- ggaatcgctg acgggtcaga ctttggctcc tatggacagg gcacccaggt gactgtgagt420 tcc423 <210> 16 < 211> 687 < 212> ДНК < 213> Искусственная последовательность <220>< 223> ген структуры CAR второго поколения < 400>16 ccagcgaagc ccaccacgac gccagcgccg cgaccaccaa caccggcgcc caccatcgcg60 tcgcagcccc tgtccctgcg cccagaggcg tgccggccag cggcgggggg cgcagtgcac120 acgagggggc tggacttcgc ctgtgatatc tacatctggg cgcccttggc cgggacttgt180 ggggtccttc tcctgtcact ggttatcacc ctttactgca aacggggcag aaagaaactc240 ctgtatatat tcaaacaacc atttatgaga ccagtacaaa ctactcaaga ggaagatggc300 tgtagctgcc gatttccaga agaagaagaa ggaggatgtg aactgagagt gaagttcagc360 aggagcgcag acgcccccgc gtaccagcag ggccagaacc agctctataa cgagctcaat420 ctaggacgaa gagaggagta cgatgttttg gacaagagac gtggccggga ccctgagatg480 gggggaaagc cgcagagaag gaagaaccct caggaaggcc tgtacaatga actgcagaaa540 gataagatgg cggaggccta cagtgagatt gggatgaaag gcgagcgccg gaggggcaag600 gggcacgatg gcctttacca gggtctcagt acagccacca aggacaccta cgacgccctt660 cacatgcagg ccctgccccc tcgctaa687ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Химерный антигенный рецептор (CAR), где указанный CAR включает: BCMA (антиген созревания B-клеток)-связывающий домен, трансмембранный домен, один или более костимулирующих доменов и внутриклеточный сигнальный домен; где BCMA-связывающий домен включает определяющий комплементарность участок тяжелой цепи 1 (HCDR1), определяющий комплементарность участок тяжелой цепи 2 (HCDR2), и определяющий комплементарность участок тяжелой цепи 3 (HCDR3), где аминокислотная последовательность HCDR1 приведена в SEQ ID NO: 1, аминокислотная последовательность HCDR2 приведена в SEQ ID NO: 2 и аминокислотная последовательность HCDR3 приведена в SEQ ID NO: 3, где BCMA-связывающий домен представляет собой однодоменное антитело.
- 2. CAR по п.1, где BCMA-связывающий домен включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4, или ее функциональный вариант.
- 3. CAR по любому из пп.1, 2, где трансмембранный домен включает полипептид, происходящий из белка, выбранного из группы, состоящей из α-, β- или ζ-цепи T-клеточного рецептора, CD28, CD3e, CD45, CD4, CD5, CD8a, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137 и CD154.
- 4. CAR по любому из пп.1-3, где указанный трансмембранный домен содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 5, или ее функциональный вариант.
- 5. CAR по любому из пп.1-4, где BCMA-связывающий домен связан с трансмембранным доменом через шарнирную область.
- 6. CAR по п.5, где указанная шарнирная область содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 6, или ее функциональный вариант.
- 7. CAR по любому из пп.1-6, где один или более костимулирующих доменов происходят из костимулирующей молекулы, выбранной из группы, состоящей из CARD11, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CD54 (ICAM), CD83, CD134 (OX40), CD137 (4-1BB), CD150 (SLAMF1), CD152 (CTLA4), CD223 (LAG3), CD270 (HVEM), CD273 (PD-L2), CD274 (PD-L1), CD278 (ICOS), DAP10, LAT, NKG2C, SLP76,-
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810972053.8 | 2018-08-24 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA045097B1 true EA045097B1 (ru) | 2023-10-27 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CA3109320C (en) | Bcma chimeric antigen receptor based on single domain antibody and use thereof | |
JP7402933B2 (ja) | 導入遺伝子の遺伝子タグおよびその使用方法 | |
JP7174522B2 (ja) | Fc受容体様5を標的とするキメラ抗原受容体およびその使用 | |
US20190375815A1 (en) | Treatment of cancer using chimeric t cell receptor proteins having multiple specificities | |
CN110709425A (zh) | 一种结合bcma的嵌合抗原受体(car)及其应用 | |
CN110662771A (zh) | 一种结合bcma的嵌合抗原受体(car)及其应用 | |
US20220356247A1 (en) | ROR1 specific chimeric antigen receptors and their therapeutic applications | |
CN114667294B (zh) | 特异性结合b细胞成熟抗原的抗体及其用途 | |
CN110914295A (zh) | 抗人乳头瘤病毒(hpv)抗原结合蛋白及其使用方法 | |
CN111848809A (zh) | 靶向Claudin18.2的CAR分子、其修饰的免疫细胞及用途 | |
KR102316091B1 (ko) | Bcma를 표적으로 하는 키메라 항원 수용체 및 이의 용도 | |
US20230242638A1 (en) | Chimeric antigen receptor targeting cldn18.2 and use thereof | |
WO2020135559A1 (en) | Cd30-binding moieties, chimeric antigen receptors, and uses thereof | |
WO2022116952A1 (zh) | 靶向cd70的抗原结合蛋白及其应用 | |
EA045097B1 (ru) | Химерный антигенный рецептор для bcma на основе однодоменного антитела и его применение | |
CN115466331B (zh) | 靶向bcma的嵌合抗原受体及其应用 | |
US11802159B2 (en) | Humanized anti-GDNF family alpha-receptor 4 (GRF-alpha-4) antibodies and chimeric antigen receptors (CARs) | |
WO2024103251A1 (zh) | 抗afp/hla02 tcr样抗体及其用途 | |
CN116410332A (zh) | 抗间皮素纳米抗体嵌合抗原受体及其应用 | |
EA044060B1 (ru) | Антигенсвязывающие белки против вируса папилломы человека (hpv) и способы их применения |