EA044990B1 - COMBINATION OF MCL-1 INHIBITOR AND STANDARD DRUG FOR TREATMENT OF HEMATOLOGICAL MALIGNANCES, ITS APPLICATION AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING IT - Google Patents
COMBINATION OF MCL-1 INHIBITOR AND STANDARD DRUG FOR TREATMENT OF HEMATOLOGICAL MALIGNANCES, ITS APPLICATION AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING IT Download PDFInfo
- Publication number
- EA044990B1 EA044990B1 EA202090082 EA044990B1 EA 044990 B1 EA044990 B1 EA 044990B1 EA 202090082 EA202090082 EA 202090082 EA 044990 B1 EA044990 B1 EA 044990B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- mcl
- phenyl
- pyrimidin
- inhibitor
- treatment
- Prior art date
Links
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims description 76
- 102100026539 Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Human genes 0.000 title claims description 74
- 101001056180 Homo sapiens Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Proteins 0.000 title claims description 72
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 55
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 34
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims description 29
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title description 10
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 title 1
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 claims description 68
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 65
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 claims description 61
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 60
- XAUDJQYHKZQPEU-KVQBGUIXSA-N 5-aza-2'-deoxycytidine Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 XAUDJQYHKZQPEU-KVQBGUIXSA-N 0.000 claims description 56
- 229960003603 decitabine Drugs 0.000 claims description 56
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 claims description 53
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 claims description 51
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical group C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 claims description 46
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 46
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 claims description 46
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 41
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 34
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 claims description 31
- 125000004527 pyrimidin-4-yl group Chemical group N1=CN=C(C=C1)* 0.000 claims description 30
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 claims description 29
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 29
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- DUWWHGPELOTTOE-UHFFFAOYSA-N n-(5-chloro-2,4-dimethoxyphenyl)-3-oxobutanamide Chemical compound COC1=CC(OC)=C(NC(=O)CC(C)=O)C=C1Cl DUWWHGPELOTTOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 claims description 27
- NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 5-azacytidine Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 24
- 229960002756 azacitidine Drugs 0.000 claims description 24
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 21
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 claims description 19
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 claims description 17
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 claims description 17
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 claims description 17
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 15
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 15
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 claims description 15
- 229940075628 hypomethylating agent Drugs 0.000 claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 14
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 13
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 claims description 11
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims description 9
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 8
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 claims description 8
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 claims description 8
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 210000003969 blast cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 claims description 7
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 claims description 7
- 230000000861 pro-apoptotic effect Effects 0.000 claims description 7
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 claims description 7
- 206010066476 Haematological malignancy Diseases 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 5
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 5
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 4
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 claims description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims description 4
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 claims description 2
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 claims description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 claims description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 claims description 2
- 239000001294 propane Substances 0.000 claims description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 claims 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 claims 1
- 210000001562 sternum Anatomy 0.000 claims 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 13
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 8
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 8
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 7
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 7
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 4-isocyanato-4'-methyldiphenylmethane Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CC1=CC=C(N=C=O)C=C1 UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 4
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 4
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 4
- 229940000425 combination drug Drugs 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 4
- -1 5-fluorofuran-2-yl Chemical group 0.000 description 3
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000797612 Arabidopsis thaliana Protein MEI2-like 3 Proteins 0.000 description 3
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 3
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 description 3
- 101100220044 Homo sapiens CD34 gene Proteins 0.000 description 3
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 3
- 101000857682 Homo sapiens Runt-related transcription factor 2 Proteins 0.000 description 3
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 3
- 206010052178 Lymphocytic lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 102100025368 Runt-related transcription factor 2 Human genes 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 3
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 2
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 2
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 208000025205 Mantle-Cell Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 241000282320 Panthera leo Species 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 2
- 208000007660 Residual Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUWXKKAWLCENJA-WGWHJZDNSA-N [(2r,3s,5r)-5-(2-amino-6-oxo-3h-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methyl [(2r,3s,5r)-5-(4-amino-2-oxo-1,3,5-triazin-1-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=C(C(N=C(N)N3)=O)N=C2)O)C1 GUWXKKAWLCENJA-WGWHJZDNSA-N 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000010293 colony formation assay Methods 0.000 description 2
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 2
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 2
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 2
- 229950001546 guadecitabine Drugs 0.000 description 2
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 101150094281 mcl1 gene Proteins 0.000 description 2
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 2
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 238000011255 standard chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 239000006190 sub-lingual tablet Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001255 4-fluorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1F 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 239000012664 BCL-2-inhibitor Substances 0.000 description 1
- 102000051485 Bcl-2 family Human genes 0.000 description 1
- 108700038897 Bcl-2 family Proteins 0.000 description 1
- 229940123711 Bcl2 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 208000031671 Large B-Cell Diffuse Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 206010033661 Pancytopenia Diseases 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 108010090931 Proto-Oncogene Proteins c-bcl-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000013535 Proto-Oncogene Proteins c-bcl-2 Human genes 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- SNAAJJQQZSMGQD-UHFFFAOYSA-N aluminum magnesium Chemical compound [Mg].[Al] SNAAJJQQZSMGQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 201000000053 blastoma Diseases 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000004611 cancer cell death Effects 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000006721 cell death pathway Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000009643 clonogenic assay Methods 0.000 description 1
- 231100000096 clonogenic assay Toxicity 0.000 description 1
- 230000003021 clonogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000002559 cytogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 239000012649 demethylating agent Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000007847 digital PCR Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 230000000431 effect on proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 201000008184 embryoma Diseases 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000012997 ficoll-paque Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 201000003444 follicular lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 231100000226 haematotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000012487 in-house method Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011368 intensive chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000034727 intrinsic apoptotic signaling pathway Effects 0.000 description 1
- 230000009916 joint effect Effects 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000009115 maintenance therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000006667 mitochondrial pathway Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- JLYAXFNOILIKPP-KXQOOQHDSA-N navitoclax Chemical compound C([C@@H](NC1=CC=C(C=C1S(=O)(=O)C(F)(F)F)S(=O)(=O)NC(=O)C1=CC=C(C=C1)N1CCN(CC1)CC1=C(CCC(C1)(C)C)C=1C=CC(Cl)=CC=1)CSC=1C=CC=CC=1)CN1CCOCC1 JLYAXFNOILIKPP-KXQOOQHDSA-N 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009038 pharmacological inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000001686 pro-survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000003762 quantitative reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000011301 standard therapy Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 239000011885 synergistic combination Substances 0.000 description 1
- 230000009044 synergistic interaction Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 230000004222 uncontrolled growth Effects 0.000 description 1
- 229960001183 venetoclax Drugs 0.000 description 1
- LQBVNQSMGBZMKD-UHFFFAOYSA-N venetoclax Chemical compound C=1C=C(Cl)C=CC=1C=1CC(C)(C)CCC=1CN(CC1)CCN1C(C=C1OC=2C=C3C=CNC3=NC=2)=CC=C1C(=O)NS(=O)(=O)C(C=C1[N+]([O-])=O)=CC=C1NCC1CCOCC1 LQBVNQSMGBZMKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Description
Область техники, к которой относится изобретениеField of technology to which the invention relates
Настоящее изобретение относится к комбинация ингибитора Mcl-1 со вторым противораковым агентом, где второй противораковый агент выбран из антрациклинов (таких как идарубицин), цитарабина (также известный как цитозин арабинозид или ara-С) и гипометилирующих агентов (таких как децитабин, азацитидин). Настоящее изобретение относится к комбинации ингибитора Mcl-1 со вторым противораковым агентом, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, цитарабина, децитабина, азацитидина. Также изобретение относится к применению указанной комбинации для лечения злокачественного новообразования, в частности гематологического злокачественного новообразования, и более предпочтительно острой миелоидной лейкемии (AML), миелодиспластических синдромов, острой лимфоцитарной лейкемии (ALL) и лимфомы. Также обеспечиваются фармацевтические препараты, подходящие для введения таких комбинаций.The present invention relates to a combination of an Mcl-1 inhibitor with a second anti-cancer agent, wherein the second anti-cancer agent is selected from anthracyclines (such as idarubicin), cytarabine (also known as cytosine arabinoside or ara-C) and hypomethylating agents (such as decitabine, azacitidine). The present invention relates to a combination of an Mcl-1 inhibitor with a second anti-cancer agent, wherein the second anti-cancer agent is selected from idarubicin, cytarabine, decitabine, azacitidine. The invention also relates to the use of said combination for the treatment of malignancy, in particular hematological malignancy, and more preferably acute myeloid leukemia (AML), myelodysplastic syndromes, acute lymphocytic leukemia (ALL) and lymphoma. Pharmaceutical preparations suitable for administering such combinations are also provided.
Наличие множества приобретенных мутаций в нескольких клонах в каждом случае AML делает концепцию успешного избирательного нацеливания особенно сложной. Данное изобретение предлагает концепцию, согласно которой злокачественные новообразования с разнообразными и многоклональными молекулярными композициями можно успешно лечить комбинацией ингибитора Mcl-1 и цитотоксического препарата, способного эффективно активировать клеточный апоптоз разнородным образом, что приводит к общей гибели раковых клеток, кроме того, что достигается при использовании ингибитора Mcl-1 или стандартной медицинской химиотерапии (SOC) раздельно. Этот подход может привести к повышению частоты ремиссии и увеличению клиренса минимального остаточного заболевания в условиях индукционной химиотерапии, и это может привести к снижению частоты рецидивов заболевания и, как пример, к более высоким показателям общего излечения при AML. AML предлагается в качестве модельного примера благодаря способности количественно измерять изменения клональной композиции поочередно с лечением с использованием цифровых PCR и RT-qPCR.The presence of multiple acquired mutations across multiple clones in each AML case makes the concept of successful selective targeting particularly challenging. This invention proposes the concept that malignancies with diverse and multilineage molecular compositions can be successfully treated with a combination of an Mcl-1 inhibitor and a cytotoxic drug capable of effectively activating cellular apoptosis in a heterogeneous manner, resulting in overall cancer cell death beyond that achieved by using Mcl-1 inhibitor or standard medical chemotherapy (SOC) separately. This approach may result in increased remission rates and increased clearance of minimal residual disease in the setting of induction chemotherapy, and this may lead to decreased disease relapse rates and, as an example, higher overall cure rates in AML. AML is proposed as a model example due to its ability to quantify changes in clonal composition alternately with treatment using digital PCR and RT-qPCR.
Ингибиторы Mcl-1 в сочетании с низкодозовой химиотерапией SOC могут повысить направленность лейкозных стволовых клеток и клеток-предшественников за счет снижения апоптотического порога. Этот подход может быть использован в условиях пост-ремиссии в качестве поддерживающей терапии для устранения остаточных стволовых клеток AML и клонов предлейкозных стволовых клеток, состоящих из различных молекулярных и цитогенетических аномалий. Принцип демонстрации эрадикации лейкозных и предлейкозных предшественников будет продемонстрирован путем снижения уровней клональных минимальных остаточных заболеваний или предлейкозных клонов, измеренных в дифференцированных мононуклеарных клетках в пост-ремиссионных условиях после воздействия ингибитора Mcl-1 в комбинации с SOC химиотерапией.Mcl-1 inhibitors in combination with low-dose SOC chemotherapy may enhance the targeting of leukemia stem and progenitor cells by lowering the apoptotic threshold. This approach can be used in post-remission settings as maintenance therapy to eliminate residual AML stem cells and pre-leukemic stem cell clones consisting of various molecular and cytogenetic abnormalities. The principle of demonstrating eradication of leukemic and pre-leukemic precursors will be demonstrated by reducing the levels of clonal minimal residual disease or pre-leukemic clones measured in differentiated mononuclear cells in post-remission conditions after exposure to an Mcl-1 inhibitor in combination with SOC chemotherapy.
Предпосылки создания изобретенияPrerequisites for creating the invention
Апоптоз представляет собой строго регулируемый путь гибели клеток, который инициируется различными цитотоксическим стимулами, включая онкогенный стресс и химиотерапевтические средства. Было показано, что уклонение от апоптоза является отличительным признаком злокачественного новообразования и что эффективность многих химиотерапевтических средств зависит от активации внутреннего митохондриального пути. Три разные подгруппы белков Bcl-2 семейства контролируют внутренний апоптотический путь: (I) проапоптотические ВН3 (Bcl-2 гомология 3)-только белки; (II) способствующие выживанию представители, такие как сам Bcl-2, Bcl-xl, Bcl-w, Mcl-1 и Bcl-2a1; и (III) проапоптотические эффекторные белки ВАХ и BAK (Czabotar и др., Nature Reviews Molecular cell biology 2014, 15, 49-63). Сверхэкспрессия анти-апоптотических представителей Bcl-2 семейства наблюдается при многих злокачественных новообразованиях, в особенности при злокачественных заболеваниях системы крови, таких как лимфома из клеток зоны мантии (MCL), фолликулярная лимфома/диффузная крупноклеточная Вклеточная лимфома (FL/DLCL) и множественная миелома (Adams и Cory, Oncogene 2007, 26, 1324-1337). Фармакологическое ингибирование анти-апоптотических белков Bcl-2, Bcl-xl, Bcl-w и Mcl-1 с помощью разработанных недавно ВН3-миметических лекарственных средств, таких как АВТ-199 (вкнктоклакс), АВТ-263 (навитоклакс) и S63845, является терапевтической стратегией для индуцирования апоптоза и вызывает регрессию опухоли при злокачественном новообразовании (Zhang et al., Drug Resist. Updat. 2007, 10, 207-217; Kotschy et al., Nature 2016, 538, 477-482). Тем не менее, проводятся наблюдения относительно механизмов резистентности к ВН3 миметикам (Choudhary et al., Cell Death и Disease 2015, 6, e1593) и применение комбинационной терапии могло бы улучшить эффективность и задержать или даже отменить развитие устойчивости.Apoptosis is a highly regulated cell death pathway that is initiated by various cytotoxic stimuli, including oncogenic stress and chemotherapeutic agents. It has been shown that evasion of apoptosis is a hallmark of malignancy and that the effectiveness of many chemotherapeutic agents depends on activation of the intrinsic mitochondrial pathway. Three different subgroups of Bcl-2 family proteins control the intrinsic apoptotic pathway: (I) proapoptotic BH3 (Bcl-2 homology 3)-only proteins; (ii) pro-survival members such as Bcl-2 itself, Bcl-xl, Bcl-w, Mcl-1 and Bcl-2a1; and (III) the proapoptotic effector proteins BAX and BAK (Czabotar et al., Nature Reviews Molecular cell biology 2014, 15, 49-63). Overexpression of anti-apoptotic members of the Bcl-2 family is observed in many malignancies, particularly in hematologic malignancies such as mantle cell lymphoma (MCL), follicular lymphoma/diffuse large cell lymphoma (FL/DLCL), and multiple myeloma ( Adams and Cory, Oncogene 2007, 26, 1324-1337). Pharmacological inhibition of the anti-apoptotic proteins Bcl-2, Bcl-xl, Bcl-w and Mcl-1 using recently developed BH3-mimetic drugs such as ABT-199 (vnkntoclax), ABT-263 (navitoclax) and S63845 is a therapeutic strategy to induce apoptosis and causes tumor regression in malignancies (Zhang et al., Drug Resist. Update. 2007, 10, 207-217; Kotschy et al., Nature 2016, 538, 477-482). However, observations are being made regarding the mechanisms of resistance to BH3 mimetics (Choudhary et al., Cell Death and Disease 2015, 6, e1593) and the use of combination therapy could improve efficacy and delay or even reverse the development of resistance.
Острая миелоидная лейкемия (AML) представляет собой стремительно развивающееся смертельное злокачественное заболевание крови, возникающее при клоновой трансформации гемопоэтических стволовых клеток, что приводит к параличу нормального функционирования костного мозга и смерти вследствие осложнений от абсолютной панцитопении. AML отвечает за 25% всех лейкозов у взрослых, и самый большой коэффициент заболеваемости наблюдается в Соединенных Штатах Америки, Австралии и Европе (WHO. GLOBOCAN 2012. Estimated cancer incidence, mortality and prevalence worldwide in 2012. International Agency for Research on Cancer). Во всем мире, ежегодно диагностируется приблизительно 88 тыс. новых случаев. AML продолжает сохранять наиболее низкий коэффициент выживаемости из всех лейкозов, с предполагаемым 5-летним выживанием только 24%.Acute myeloid leukemia (AML) is a rapidly developing, fatal hematologic malignancy that arises from clonal transformation of hematopoietic stem cells, resulting in paralysis of normal bone marrow function and death due to complications from absolute pancytopenia. AML is responsible for 25% of all leukemias in adults, and the highest incidence rates are observed in the United States of America, Australia and Europe (WHO. GLOBOCAN 2012. Estimated cancer incidence, mortality and prevalence worldwide in 2012. International Agency for Research on Cancer). Worldwide, approximately 88 thousand new cases are diagnosed annually. AML continues to maintain the lowest survival rate of all leukemias, with an estimated 5-year survival of only 24%.
- 1 044990- 1 044990
Современные способы лечения AML включают введение цитарабина отдельно или в комбинации с антрациклином, таким как даунорубицин или идарубицин. Низкие дозы цитарабина для лечения и деметилирующие агенты, такие как азацитидин и децитабин, также рекомендуются в качестве вариантов низкой интенсивности для пациентов, не имеющих права на интенсивную химиотерапию (Dohner et al., DOI 10.1182/blood-2016-08-733196). Несмотря на то, что стандартная терапия AML (цитарабин в комбинации с антрациклинами) была задумана более 4 десятилетий назад, внедрение успешных целевых методов лечения этого заболевания остается нерешенной целью. Концепция целевой терапии при AML была затруднена осознанием того, что это заболевание развивается в виде мультиклональной иерархии с быстрым ростом лейкозных субклонов как основной причины устойчивости к лекарственным средствам и рецидива заболевания (Ding et al., Nature 2012, 481, 506-510). Недавние клинические исследования продемонстрировали эффективность ингибиторов Bcl-2 в лечении AML (Konopleva et al., American Society of Hematology 2014, 118).Current treatments for AML include administering cytarabine alone or in combination with an anthracycline such as daunorubicin or idarubicin. Low-dose treatment cytarabine and demethylating agents such as azacitidine and decitabine are also recommended as low-intensity options for patients not eligible for intensive chemotherapy (Dohner et al., DOI 10.1182/blood-2016-08-733196). Although standard therapy for AML (cytarabine in combination with anthracyclines) was conceived more than 4 decades ago, the implementation of successful targeted treatments for this disease remains an unmet goal. The concept of targeted therapy in AML has been complicated by the realization that the disease develops in a multiclonal hierarchy, with rapid growth of leukemic subclones as a major cause of drug resistance and disease relapse (Ding et al., Nature 2012, 481, 506-510). Recent clinical studies have demonstrated the effectiveness of Bcl-2 inhibitors in the treatment of AML (Konopleva et al., American Society of Hematology 2014, 118).
Остается необходимость в новом лечении и терапии гематологического злокачественного новообразования, в частности AML, миелодиспластических синдромов, ALL и лимфомы, и более предпочтительно, в лечении AML. Настоящее изобретение обеспечивает новую комбинацию ингибитора Mcl-1 и второго противоракового агента, где второй противораковый агент выбран из антрациклинов, цитарабина и гипометилирующих агентов, более предпочтительно идарубицина, даунорубицина, митоксантрона, цитарабина, децитабина, азацитидина и гвадецитабина, и более предпочтительно идарубицина, даунорубицина, цитарабина, децитабина и азацитидина. Результаты показывают, что ингибитор Mcl-1 в комбинации со вторым противораковым агентом, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, цитарабина и децитабина, синергетически взаимодействует с клеточными линиями AML (фиг. 1; табл. 3, 4 и 5). Нами также показано, что комбинация ингибитора Mcl-1 со вторым противораковым агентом, где второй противораковый агент выбран из идарубицина или децитабина, проявляет синергетическую проапоптотическую активность в первичных образцах AML человека (фиг. 2 и 6; табл. 6). Нами также показано, что подмножество первичных образцов AML было чувствительным к комбинации ингибитора Mcl1 с цитарабином, тогда как нормальные человеческие клетки-предшественники CD34 + были устойчивы к той же дозе (фиг. 3). Нами также показано, что ингибитор Mcl-1 в сочетании с децитабином хорошо переносился без потери веса в течение лечения и, тем не менее, приводит к усилению активности против AML у человека на модели ксенотрансплантата, полученной от пациента in vivo (фиг. 4, 5 и 6). В завершение, нами показано, что комбинация ингибитора Mcl-1 с цитарабином может быть полезна для лечения пациентов с ALL (табл. 7).There remains a need for new treatments and therapies for hematologic malignancies, particularly AML, myelodysplastic syndromes, ALL and lymphoma, and more preferably, a treatment for AML. The present invention provides a novel combination of an Mcl-1 inhibitor and a second anticancer agent, wherein the second anticancer agent is selected from anthracyclines, cytarabine and hypomethylating agents, more preferably idarubicin, daunorubicin, mitoxantrone, cytarabine, decitabine, azacitidine and guadecitabine, and more preferably idarubicin, daunorubicin, cytarabine, decitabine and azacitidine. The results show that the Mcl-1 inhibitor in combination with a second anticancer agent, where the second anticancer agent is selected from idarubicin, cytarabine and decitabine, interacts synergistically with AML cell lines (Fig. 1; Tables 3, 4 and 5). We have also shown that the combination of an Mcl-1 inhibitor with a second anticancer agent, where the second anticancer agent is selected from idarubicin or decitabine, exhibits synergistic proapoptotic activity in primary human AML samples (Figs. 2 and 6; Table 6). We also showed that a subset of primary AML samples was sensitive to the combination of Mcl1 inhibitor with cytarabine, whereas normal human CD34 + progenitor cells were resistant to the same dose (Fig. 3). We also showed that the Mcl-1 inhibitor in combination with decitabine was well tolerated without weight loss during treatment and yet resulted in enhanced anti-AML activity in humans in an in vivo patient-derived xenograft model (Figs. 4, 5 and 6). In conclusion, we have shown that the combination of an Mcl-1 inhibitor with cytarabine may be useful for the treatment of patients with ALL (Table 7).
Краткое описание изобретенияBrief description of the invention
Настоящее изобретение относится к фармацевтической комбинации, которая содержит:The present invention relates to a pharmaceutical combination which contains:
(а) ингибитор Mcl-1, который представляет собой (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту или (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или их энантиомеры, диастереоизомеры, атропоизомеры или их соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, и (б) второй противораковый агент, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, цитарабина и гипометилирующих агентов, выбранных из децитабина и азацитидина, в синергетически эффективных количествах, для одновременного, последовательного или раздельного введения.(a) Mcl-1 inhibitor, which is (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4methylpiperazin-1-yl)ethoxy]phenyl }-6-(5-fluorofuran-2-yl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[1(2,2,2-trifluoroethyl)-1H- pyrazol-5-yl]methoxy}phenyl)propanoic acid or (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro2-methyl-4-[2-(4-methylpiperazin-1-yl)ethoxy ]phenyl}-6-(4-fluorophenyl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4yl]oxy}-3-(2-{[2-(2-methoxyphenyl)pyrimidin-4-yl]methoxy}phenyl) propanoic acid, or enantiomers, diastereoisomers, atropoisomers, or addition salts thereof with a pharmaceutically acceptable acid or base, and (b) a second anticancer agent, wherein the second anticancer agent is selected from idarubicin, cytarabine, and hypomethylating agents selected from decitabine and azacitidine, in a synergistic manner effective amounts, for simultaneous, sequential or separate administration.
Указанные соединения (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1ил)этокси]фенил}-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1-(2,2,2-трифторэтил)1H-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановαя кислота и (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановая кислота, их синтез, их применение для лечения злокачественного новообразования и их фармацевические составы описаны в WO 2015/097123, WO 2016/207216, WO 2016/207217, WO 2016/207225, WO 2016/207226, и WO 2017/125224, содержание которых включены посредством ссылки.These compounds (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4-methylpiperazin-1yl)ethoxy]phenyl}-6-(5-fluorofuran- 2-yl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[1-(2,2,2-trifluoroethyl)1H-pyrazol-5-yl]methoxy}phenyl )propanoic acid and (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4methylpiperazin-1-yl)ethoxy]phenyl}-6-(4- fluorophenyl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[2-(2methoxyphenyl)pyrimidin-4-yl]methoxy}phenyl)propanoic acid, their synthesis, their use for cancer treatments and their pharmaceutical compositions are described in WO 2015/097123, WO 2016/207216, WO 2016/207217, WO 2016/207225, WO 2016/207226, and WO 2017/125224, the contents of which are incorporated by reference.
В первом варианте осуществления, изобретение обеспечивает комбинацию, которая содержит:In a first embodiment, the invention provides a combination that contains:
(а) соединение 1: (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или её фармацевтически приемлемую кислоту, и (б) второй противораковый агент, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, цитарабина и гипометилирующих агентов, выбранных из децитабина и азацитидина, для одновременного, последовательного или раздельного введения.(a) compound 1: (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4-methylpiperazin-1-yl)ethoxy]phenyl}-6 (4-fluorophenyl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[2-(2-methoxyphenyl)pyrimidin-4yl]methoxy}phenyl)propanoic acid, or pharmaceutical thereof an acceptable acid; and (b) a second anticancer agent, wherein the second anticancer agent is selected from idarubicin, cytarabine, and hypomethylating agents selected from decitabine and azacitidine, for simultaneous, sequential, or separate administration.
В качестве альтернативы, изобретение обеспечивает комбинацию, которая содержит:Alternatively, the invention provides a combination that contains:
(а) соединение 2: (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-5-(a) compound 2: (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4-methylpiperazin-1-yl)ethoxy]phenyl}-6 (5-fluorofuran-2-yl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[1-(2,2,2-trifluoroethyl)-1H-pyrazole-5 -
- 2 044990 ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или её фармацевтически приемлемую кислоту, и (б) второй противораковый агент, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, цитарабина и гипометилирующих агентов, выбранных из децитабина и азацитидина, для одновременного, последовательного или раздельного введения.- 2 044990 yl]methoxy}phenyl)propanoic acid, or a pharmaceutically acceptable acid thereof, and (b) a second anticancer agent, where the second anticancer agent is selected from idarubicin, cytarabine and hypomethylating agents selected from decitabine and azacitidine, for simultaneous, sequential or separate administration.
В другом варианте осуществления, изобретение обеспечивает комбинацию, как описано выше, для применения для лечения злокачественного новообразования, более предпочтительно, лечения гематологического злокачественного новообразования. Лечение AML, миелодиспластических синдромов, острой лимфоцитарной лейкемии и лимфомы является особенно предпочтительным. Более предпочтительным является лечение AML.In another embodiment, the invention provides a combination as described above for use in the treatment of a malignancy, more preferably the treatment of a hematological malignancy. Treatment of AML, myelodysplastic syndromes, acute lymphocytic leukemia and lymphoma is particularly preferred. Treatment for AML is preferred.
В другом варианте осуществления, изобретение обеспечивает применение комбинации, как описано выше, для приготовления лекарственного средства для лечения злокачественного новообразования, более предпочтительно, лечения гематологического злокачественного новообразования, ещё более предпочтительно лечения AML, миелодиспластических синдромов, острой лимфоцитарной лейкемии и лимфомы.In another embodiment, the invention provides the use of a combination as described above for the preparation of a medicament for the treatment of a malignancy, more preferably the treatment of a hematological malignancy, even more preferably the treatment of AML, myelodysplastic syndromes, acute lymphocytic leukemia and lymphoma.
В другом варианте осуществления, изобретение обеспечивает лекарственное средство, которое содержит, отдельно или вместе, (а) ингибитор Mcl-1, который представляет собой (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту или (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, и (б) второй противораковый агент, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, цитарабина и гипометилирующих агентов, выбранных из децитабина и азацитидина, для одновременного, последовательного или раздельного введения, и где ингибитор Mcl-1 и второй противораковый агент обеспечивают в эффективных количествах для лечения злокачественного новообразования.In another embodiment, the invention provides a medicament that contains, alone or together, (a) an Mcl-1 inhibitor, which is (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2- methyl 4-[2-(4methylpiperazin-1-yl)ethoxy]phenyl}-6-(5-fluorofuran-2-yl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-( 2-{[1(2,2,2-trifluoroethyl)-1H-pyrazol-5-yl]methoxy}phenyl)propanoic acid or (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro2- methyl 4-[2-(4-methylpiperazin-1-yl)ethoxy]phenyl}-6-(4-fluorophenyl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4yl]oxy}-3-(2-{[ 2-(2-methoxyphenyl)pyrimidin-4-yl]methoxy}phenyl)propanoic acid, and (b) a second anticancer agent, wherein the second anticancer agent is selected from idarubicin, cytarabine, and hypomethylating agents selected from decitabine and azacitidine, to simultaneously, sequential or separate administration, and wherein the Mcl-1 inhibitor and the second anticancer agent are provided in effective amounts for the treatment of cancer.
В другом варианте осуществления, изобретение обеспечивает способ лечения злокачественного новообразования, который включает совместное введение терапевтически эффективного количества:In another embodiment, the invention provides a method of treating cancer, which includes co-administration of a therapeutically effective amount of:
(а) ингибитора Mcl-1, который представляет собой (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту или (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, и (б) второго противоракового агента, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, цитарабина и гипометилирующих агентов, выбранных из децитабина и азацитидина, субъекту, нуждающемуся в этом.(a) an Mcl-1 inhibitor, which is (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4methylpiperazin-1-yl)ethoxy]phenyl }-6-(5-fluorofuran-2-yl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[1(2,2,2-trifluoroethyl)-1H- pyrazol-5-yl]methoxy}phenyl)propanoic acid or (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro2-methyl-4-[2-(4-methylpiperazin-1-yl)ethoxy ]phenyl}-6-(4-fluorophenyl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4yl]oxy}-3-(2-{[2-(2-methoxyphenyl)pyrimidin-4-yl]methoxy}phenyl) propanoic acid, and (b) a second anti-cancer agent, where the second anti-cancer agent is selected from idarubicin, cytarabine and hypomethylating agents selected from decitabine and azacitidine, to a subject in need thereof.
В другом варианте осуществления, ингибитор Mcl-1 представляет собой (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту (соединение 1).In another embodiment, the Mcl-1 inhibitor is (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2methyl-4-[2-(4-methylpiperazin-1-yl)ethoxy]phenyl }-6-(4-fluorophenyl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy}3-(2-{[2-(2-methoxyphenyl)pyrimidin-4-yl]methoxy}phenyl)propane acid (compound 1).
В другом варианте осуществления, ингибитор Mcl-1 представляет собой (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3-d]пиримидин-4ил]окси}-3-(2-{[1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту (соединение 2).In another embodiment, the Mcl-1 inhibitor is (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2methyl-4-[2-(4-methylpiperazin-1-yl)ethoxy]phenyl }-6-(5-fluorofuran-2-yl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4yl]oxy}-3-(2-{[1-(2,2,2-trifluoroethyl)-1H-pyrazole -5-yl]methoxy}phenyl)propanoic acid (compound 2).
Краткое описание фигурBrief description of the figures
На фиг. 1 проиллюстрированы в качестве примера эффект ингибирования роста клеток и синергичные матрицы комбинации для ингибирования роста клеток (слева) и ингибирования избытка Loewe (справа), обеспечиваемые соединением 2 (ингибитор Mcl-1) в комбинации с идарубицинои на клеточной линии AML OCI-AML3 в двух независимых экспериментах. Значения в матрице эффекта находятся в диапазоне от 0 (нет ингибирования) до 100 (полное ингибирование). Значения в матрице синергизма представляют собой степень ингибирования роста, превышающую теоретическую аддитивность, рассчитанную на основании активности отдельных средств соединения 2 и идарубицина в тестируемых концентрациях.In fig. 1 illustrates as an example the cell growth inhibitory effect and synergistic combination matrices for cell growth inhibition (left) and Loewe excess inhibition (right) provided by Compound 2 (Mcl-1 inhibitor) in combination with idarubicin on the AML cell line OCI-AML3 in two independent experiments. Values in the effect matrix range from 0 (no inhibition) to 100 (complete inhibition). The values in the synergy matrix represent the degree of growth inhibition greater than the theoretical additivity calculated based on the individual activity of compound 2 and idarubicin at the concentrations tested.
На фиг. 2 проиллюстрировано, что комбинация ингибитора Mcl-1 с идарубицином обладает синергетической активностью при AML. Ряд первичных образцов AML от пациентов с различными цитогенетическими и молекулярными характеристиками инкубировали в течение 48 ч с одним соединением 2 или идарубицином отдельно или в комбинации и с определенным поражающим эффектом LC50. Это показало существенный синергизм этой комбинации в большой пропорции первичных образцов AML.In fig. 2 illustrates that the combination of an Mcl-1 inhibitor with idarubicin has synergistic activity in AML. A series of primary AML samples from patients with different cytogenetic and molecular characteristics were incubated for 48 hours with compound 2 alone or idarubicin alone or in combination and with a defined LC 50 killing effect. This showed significant synergism of this combination in a large proportion of primary AML samples.
На фиг. 3 проиллюстрировано сравнение активности первичных образцов AML относительно здоровых CD34 + донорских клеток для цитарабина, соединения 2 (ингибитор Mcl-1) и соединения 2 в комбинации с цитарабином. Показана жизнеспособность первичных клеток AML и нормальных CD34 + клеток (серая линия), нормализованных к контролю носителя после воздействия цитарабина, показаны соединения 2 и соединение 2 в комбинации с цитарабином (в нМ).In fig. 3 illustrates a comparison of the activity of primary AML samples relative to healthy CD34 + donor cells for cytarabine, compound 2 (Mcl-1 inhibitor) and compound 2 in combination with cytarabine. Shown is the viability of primary AML cells and normal CD34+ cells (gray line) normalized to vehicle control after exposure to cytarabine, showing Compound 2 and Compound 2 in combination with cytarabine (in nM).
На фиг. 4 проиллюстрировано поддержание нормальной массы тела в течение терапии. МышейIn fig. Figure 4 illustrates the maintenance of normal body weight during therapy. Mice
- 3 044990- 3 044990
NSG лечили децитабином 0,4 мг/кг или 0,8 мг/кг внутрибрюшинно или децитабином 0,4 мг/кг или 0,8 мг/кг в комбинации с соединением 2 (ингибитор Mcl-1) 25 мг/кг (в/в) в течение 1 недели.NSG was treated with decitabine 0.4 mg/kg or 0.8 mg/kg intraperitoneally or decitabine 0.4 mg/kg or 0.8 mg/kg in combination with compound 2 (Mcl-1 inhibitor) 25 mg/kg (i.v.) c) within 1 week.
На фиг. 5 проиллюстрирована гематологическая токсичность у мышей NSG в течение терапии. Мышей NSG лечили децитабином 0,4 мг/кг или 0,8 мг/кг с помощью интраперитонеальной инъекции или децитабином 0,4 мг/кг или 0,8 мг/кг в комбинации с соединением 2 (ингибитор Mcl-1) 25 мг/кг (в/в) в течение 1 недели и количество лейкоцитов (WBC), тромбоцитов, гемоглобина (Hb), количество эритроцитов (RBC) определяют с помощью анализатора крови Хемавета.In fig. Figure 5 illustrates hematologic toxicity in NSG mice during therapy. NSG mice were treated with decitabine 0.4 mg/kg or 0.8 mg/kg via intraperitoneal injection or decitabine 0.4 mg/kg or 0.8 mg/kg in combination with compound 2 (Mcl-1 inhibitor) 25 mg/ kg (i.v.) for 1 week and white blood cell count (WBC), platelet count, hemoglobin (Hb), red blood cell count (RBC) are determined using a Hemaveta blood analyzer.
На фиг. 6 проиллюстрирована превосходная эффективность децитабина в комбинации с соединением 2 (ингибитор Mcl-1) по сравнению с одним из агентов, взятым отдельно. Мышам NRG-SG3 трансплантировали 10 первичных клеток AML (AML54). Приживление было подтверждено через 6 недель путем обнаружения hCD45 в периферической крови. Затем группам мышей давали а) носитель, б) Соединение 2 (ингибитор Mcl-1) 25 мг/кг в/в (2 дня) в) децитабин 0,4 мг/кг/д с помощью интраперитонеальной инъекции (5 дней) или г) комбинацию соединение 2 + децитабин. Мышей умерщвляли на 8-й день после этого и определяли тяжесть лейкемии по проточной цитометрии покрасневшей бедренной кости, показывающей процент человеческих CD45 + клеток, после указанной процедуры.In fig. 6 illustrates the superior efficacy of decitabine in combination with Compound 2 (Mcl-1 inhibitor) compared to either agent alone. NRG-SG3 mice were transplanted with 10 primary AML cells (AML54). Engraftment was confirmed after 6 weeks by detection of hCD45 in peripheral blood. Groups of mice were then given a) vehicle, b) Compound 2 (Mcl-1 inhibitor) 25 mg/kg IV (2 days) c) decitabine 0.4 mg/kg/day by intraperitoneal injection (5 days) or d ) combination of compound 2 + decitabine. Mice were sacrificed on day 8 thereafter, and leukemia severity was determined by flow cytometry of the erythematous femur showing the percentage of human CD45 + cells following this procedure.
Подробное описание изобретенияDetailed Description of the Invention
Поэтому изобретение обеспечивает в варианте осуществления Е1, фармацевтическую комбинацию, которая содержит:The invention therefore provides, in embodiment E1, a pharmaceutical combination which contains:
(а ) ингибитор Mcl-1, который представляет собой (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту или (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или их энантиомеры, диастереоизомеры, атропоизомеры или их соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, и (б) второй противораковый агент, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, цитарабина и гипометилирующих агентов, выбранных из децитабина и азацитидина, в синергетически эффективных количествах, для одновременного, последовательного или раздельного введения.(a) Mcl-1 inhibitor, which is (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4methylpiperazin-1-yl)ethoxy]phenyl }-6-(5-fluorofuran-2-yl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[1(2,2,2-trifluoroethyl)-1H- pyrazol-5-yl]methoxy}phenyl)propanoic acid or (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro2-methyl-4-[2-(4-methylpiperazin-1-yl)ethoxy ]phenyl}-6-(4-fluorophenyl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4yl]oxy}-3-(2-{[2-(2-methoxyphenyl)pyrimidin-4-yl]methoxy}phenyl) propanoic acid, or enantiomers, diastereoisomers, atropoisomers, or addition salts thereof with a pharmaceutically acceptable acid or base, and (b) a second anticancer agent, wherein the second anticancer agent is selected from idarubicin, cytarabine, and hypomethylating agents selected from decitabine and azacitidine, in a synergistic manner effective amounts, for simultaneous, sequential or separate administration.
Дополнительные перечисленные варианты осуществления (Е) изобретения описаны в данном изобретении. Следует понимать, что признаки, указанные в каждом из вариантов осуществления, могут быть объединены с другими указанными признаками для обеспечения дополнительных вариантов осуществления настоящего изобретения.Additional enumerated embodiments (E) of the invention are described herein. It should be understood that the features specified in each of the embodiments may be combined with other specified features to provide additional embodiments of the present invention.
Е2. Комбинация в соответствии с Е1, где второй противораковый агент представляет собой идарубицин.E2. The combination according to E1, wherein the second anticancer agent is idarubicin.
Е3. Комбинация в соответствии с Е1, где второй противораковый агент представляет собой цитарабин.E3. The combination according to E1, wherein the second anticancer agent is cytarabine.
Е4. Комбинация в соответствии с Е1, где второй противораковый агент представляет собой децитабин.E4. The combination according to E1, wherein the second anticancer agent is decitabine.
Е5. Комбинация в соответствии с Е1, где второй противораковый агент представляет собой азацитидин.E5. The combination according to E1, wherein the second anticancer agent is azacitidine.
Е6. Комбинация в соответствии с любым из Е1 - Е5, где ингибитор Mcl-1 представляет собой (2R)2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту.E6. The combination according to any of E1 to E5, wherein the Mcl-1 inhibitor is (2R)2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4-methylpiperazine- 1-yl)ethoxy]phenyl}-6-(5-fluorofuran-2-yl)thieno[2,3d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[1-(2,2,2 -trifluoroethyl)-1H-pyrazol-5-yl]methoxy}phenyl)propanoic acid.
Е7. Комбинация в соответствии с любым из Е1 - Е5, где ингибитор Mcl-1 представляет собой (2R)2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту.E7. The combination according to any of E1 to E5, wherein the Mcl-1 inhibitor is (2R)2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4-methylpiperazine- 1-yl)ethoxy]phenyl}-6-(4-fluorophenyl)thieno[2,3d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[2-(2-methoxyphenyl)pyrimidin-4-yl ]methoxy}phenyl)propanoic acid.
Е8. Комбинация в соответствии с Е1, которая содержит:E8. Combination in accordance with E1, which contains:
(а) ингибитор Mcl-1, выбранный из (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1ил)этокси]фенил}-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1-(2,2,2-трифторэтил)1H-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановой кислоты или (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси} фенил)пропановаой кислоты, и (б) второй противораковый агент, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, цитарабина, децитабина и азацитидина, для одновременного, последовательного или раздельного введения.(a) an Mcl-1 inhibitor selected from (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4-methylpiperazin-1yl)ethoxy]phenyl} -6-(5-fluorofuran-2-yl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[1-(2,2,2-trifluoroethyl)1H-pyrazole -5-yl]methoxy}phenyl)propanoic acid or (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4methylpiperazin-1-yl)ethoxy] phenyl}-6-(4-fluorophenyl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[2-(2methoxyphenyl)pyrimidin-4-yl]methoxy}phenyl)propanoic acid, and (b) a second anticancer agent, where the second anticancer agent is selected from idarubicin, cytarabine, decitabine and azacitidine, for simultaneous, sequential or separate administration.
Е9. Комбинация в соответствии с Е7 или Е8, где доза (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил) тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановой кислоты в течение комбинированного лечения составляет от 25 мг до 1500 мг.E9. Combination in accordance with E7 or E8, where the dose is (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4methylpiperazin-1-yl)ethoxy]phenyl} -6-(4-fluorophenyl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[2-(2methoxyphenyl)pyrimidin-4-yl]methoxy}phenyl)propanoic acid in The course of combined treatment ranges from 25 mg to 1500 mg.
Е10. Комбинация в соответствии с Е7, Е8 или Е9, где (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2-E10. Combination according to E7, E8 or E9, where (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4methylpiperazin-1-yl)ethoxy]phenyl }-6-(4-fluorophenyl)thieno[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[2-(2-
- 4 044990 метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту вводят в течение комбинированного лечения один раз в неделю.- 4 044990 methoxyphenyl)pyrimidin-4-yl]methoxy}phenyl)propanoic acid is administered during combination treatment once a week.
Е11. Комбинация в соответствии с любым из Е1 - Е10, где ингибитор Mcl-1 вводят перорально.E11. A combination according to any of E1 to E10, wherein the Mcl-1 inhibitor is administered orally.
Е12. Комбинация в соответствии с любым из Е1 - Е10, где ингибитор Mcl-1 вводят внутривенно.E12. A combination according to any of E1 to E10, wherein the Mcl-1 inhibitor is administered intravenously.
Е13. Комбинация в соответствии с любым из Е1 - Е12, для применения для лечения злокачественного новообразования.E13. A combination according to any of E1 to E12, for use in the treatment of malignancy.
Е14. Комбинация в соответствии с Е13, где злокачественное новообразование представляет собой острую миелоидную лейкемию.E14. Combination according to E13, where the malignancy is acute myeloid leukemia.
Е15. Комбинация в соответствии с Е13, где злокачественное новообразование представляет собой острую лимфоцитарную лейкемию.E15. Combination in accordance with E13, where the malignancy is acute lymphocytic leukemia.
Е16. Комбинация для применения в соответствии с любым из Е13 - Е15, где ингибитор Mcl-1 и второй противораковый агент обеспечивают в количествах, которые совместно являются терапевтически эффективными для лечения злокачественного новообразования.E16. A combination for use according to any of E13 to E15, wherein the Mcl-1 inhibitor and the second anticancer agent are provided in amounts that together are therapeutically effective for treating the cancer.
Е17. Комбинация для применения в соответствии с Е16, где ингибитор Mcl-1 и второй противораковый агент обеспечивают в количествах, которые являются синергетически эффективными для лечения злокачественного новообразования.E17. A combination for use in accordance with E16, wherein the Mcl-1 inhibitor and the second anticancer agent are provided in amounts that are synergistically effective for the treatment of cancer.
Е18. Комбинация для применения в соответствии с Е17, где Mcl-1 ингибитор и второй противораковый агент обеспечивают в синергетически эффективных количествах, которые позволяют уменьшить дозу, необходимую для каждого соединения при лечении злокачественного новообразования, обеспечивая эффективное лечение злокачественного новообразования, с последующим уменьшением побочных эффектов.E18. A combination for use in accordance with E17, wherein the Mcl-1 inhibitor and the second anticancer agent are provided in synergistically effective amounts that reduce the dose required for each compound in the treatment of a cancer, providing effective treatment of the cancer, with a consequent reduction in side effects.
Е19. Комбинация в соответствии с любым из Е1 - Е12, для применения для лечения острой миелоидной лейкемии у пациентов, которые достигают ремиссии.E19. A combination according to any of E1 to E12, for use in the treatment of acute myeloid leukemia in patients who achieve remission.
Е20. Комбинация в соответствии с любым из Е1 - Е19, которая дополнительно содержит один или несколько наполнителей.E20. A combination according to any of E1 to E19, which further contains one or more fillers.
Е21. Комбинация в соответствии с Е1, которая дополнительно содержит третий противораковый агент.E21. The combination according to E1, which further contains a third anti-cancer agent.
Е22. Комбинация в соответствии с Е21, где второй противораковый агент представляет собой цитарабин, и третий противораковый агент представляет собой идарубицин.E22. The combination according to E21, wherein the second anticancer agent is cytarabine and the third anticancer agent is idarubicin.
Е23. Применение комбинации в соответствии с любым из Е1 - Е22, для приготовления лекарственного средства для лечения злокачественного новообразования.E23. Use of a combination according to any of E1 to E22 for the preparation of a medicament for the treatment of malignant neoplasm.
Е24. Применение в соответствии с Е23, где злокачественное новообразование представляет собой острую миелоидную лейкемию.E24. Use in accordance with E23, where the malignancy is acute myeloid leukemia.
Е25. Применение в соответствии с Е23, где злокачественное новообразование представляет собой острую лимфоцитарную лейкемию.E25. Use in accordance with E23, where the malignancy is acute lymphocytic leukemia.
Е26. Лекарственное средство, которое содержит, отдельно или вместе, (а) ингибитор Mcl-1, как определено в Е1, и (б) второй противораковый агент, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, цитарабина и гипометилирующих агентов, выбранных из децитабина и азацитидина, для одновременного, последовательного или раздельного введения, и где ингибитор Mcl-1 и второй противораковый агент обеспечивают в эффективных количествах для лечения злокачественного новообразования.E26. A drug that contains, alone or together, (a) an Mcl-1 inhibitor as defined in E1, and (b) a second anticancer agent, wherein the second anticancer agent is selected from idarubicin, cytarabine and hypomethylating agents selected from decitabine and azacitidine, for simultaneous, sequential or separate administration, and wherein the Mcl-1 inhibitor and the second anticancer agent are provided in effective amounts for the treatment of cancer.
Е27. Лекарственное средство, которое содержит, отдельно или вместе, (а) ингибитор Mcl-1, как определено в Е1, и (б) второй противораковый агент, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, цитарабина и гипометилирующих агентов, выбранных из децитабина и азацитидина, для одновременного, последовательного или раздельного введения, и где ингибитор Mcl-1 и второй противораковый агент обеспечивают в эффективных количествах для лечения злокачественного новообразования.E27. A drug that contains, alone or together, (a) an Mcl-1 inhibitor as defined in E1, and (b) a second anticancer agent, wherein the second anticancer agent is selected from idarubicin, cytarabine and hypomethylating agents selected from decitabine and azacitidine, for simultaneous, sequential or separate administration, and wherein the Mcl-1 inhibitor and the second anticancer agent are provided in effective amounts for the treatment of cancer.
Е28. Лекарственное средство в соответствии с Е26 или Е27, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, даунорубицина, цитарабина, децитабина и азацитидина.E28. A medicinal product according to E26 or E27, wherein the second anticancer agent is selected from idarubicin, daunorubicin, cytarabine, decitabine and azacitidine.
Е29. Способ лечения злокачественного новообразования, который включает совместное введение терапевтически эффективного количества:E29. A method of treating a malignant neoplasm, which includes co-administration of a therapeutically effective amount of:
(а) ингибитора Mcl-1, как определено в Е1, и (б) второго противоракового агента, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, цитарабина и гипометилирующих агентов, выбранных из децитабина и азацитидина, субъекту, нуждающемуся в этом.(a) an Mcl-1 inhibitor as defined in E1; and (b) a second anti-cancer agent, wherein the second anti-cancer agent is selected from idarubicin, cytarabine and hypomethylating agents selected from decitabine and azacitidine, to a subject in need thereof.
Е30. Способ лечения злокачественного новообразования, который включает совместное введение терапевтически эффективного количества:E30. A method of treating a malignant neoplasm, which includes co-administration of a therapeutically effective amount of:
(а) ингибитора Mcl-1 как определено в Е1, и (б) второго противоракового агента, где второй противораковый агент выбран из идарубицина, цитарабина и гипометилирующих агентов, выбранных из децитабина и азацитидина, субъекту, нуждающемуся в этом.(a) an Mcl-1 inhibitor as defined in E1, and (b) a second anti-cancer agent, wherein the second anti-cancer agent is selected from idarubicin, cytarabine and hypomethylating agents selected from decitabine and azacitidine, to a subject in need thereof.
Е31. Способ в соответствии с Е29 или Е30, где второй противораковый агент выбран из идарубици-E31. Method according to E29 or E30, wherein the second anticancer agent is selected from idarubic-
- 5 044990 на, цитарабина, децитабина и азацитидина.- 5 044990 on, cytarabine, decitabine and azacitidine.
Е32. Способ в соответствии с Е29 или Е30, где ингибитор Mcl-1 формулы (I) представляет собой (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту.E32. Method according to E29 or E30, wherein the Mcl-1 inhibitor of formula (I) is (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-chloro-2-methyl-4-[2-(4 -methylpiperazin-1-yl)ethoxy]phenyl}-6-(4-fluorophenyl)thieno[2,3d]pyrimidin-4-yl]oxy}-3-(2-{[2-(2-methoxyphenyl)pyrimidin- 4-yl]methoxy}phenyl)propanoic acid.
Комбинация относится либо к комбинации с фиксированной дозой в одной отдельно взятой дозированной форме (например, капсуле, таблетке или саше), комбинации с нефиксированной дозой, или набору для комбинированного введения, где соединение согласно настоящему изобретению и один или несколько компонентов из комбинации (например, другое лекарственное средство, как объясняется ниже, также обозначается в виде терапевтического средств или соагента) могут вводиться независимо в одно и то же время или раздельно в течение временных интервалов, в особенности, если эти временные интервалы предоставляют возможность для компонентов комбинации проявлять совместный, например, синергетический эффект.Combination refers to either a fixed-dose combination in one single dosage form (e.g., capsule, tablet or sachet), a non-fixed-dose combination, or a combination administration kit, wherein a compound of the present invention and one or more components of the combination (e.g. other drug, as explained below, is also designated as a therapeutic agent or co-agent) may be administered independently at the same time or separately over time intervals, particularly if these time intervals provide an opportunity for the components of the combination to exhibit joint action, e.g. synergistic effect.
Термины совместное введение или комбинированное введение или тому подобные, как используется в настоящем изобретении, охватывают введение выбранного компонента комбинации отдельно взятому субъекту, который в этом нуждается (например, пациенту), и включают схемы лечения, при которых агенты не обязательно вводятся одним и тем же путем введения или в одно и то же время.The terms co-administration or combination administration or the like, as used in the present invention, cover the administration of a selected component of the combination to a single subject in need thereof (eg, a patient), and include treatment regimens in which the agents are not necessarily administered by the same by administration or at the same time.
Термин комбинация с фиксированной дозой обозначает, что активные компоненты, например, соединение формулы (I) и один или несколько компонентов комбинации, оба вводятся пациенту одновременно в форме единого целого или дозировки.The term fixed-dose combination means that the active components, eg, a compound of formula (I) and one or more components of the combination, are both administered to the patient simultaneously in unit or dosage form.
Термин комбинация с нефиксированной дозой обозначает, что активные компоненты, например, соединение согласно настоящему изобретению и один или несколько компонентов комбинации, оба вводятся пациенту в виде раздельных составляющих либо одновременно или последовательно, без специфических временных ограничений, где такое введение обеспечивает терапевтически эффективные уровни двух соединений в организме пациента. Последнее также применяется для коктейльной терапии, например, введение трех или более активных компонентов.The term non-fixed dose combination means that the active components, for example, a compound of the present invention and one or more components of the combination, are both administered to a patient as separate components, either simultaneously or sequentially, without specific time restrictions, where such administration provides therapeutically effective levels of the two compounds in the patient's body. The latter is also used for cocktail therapy, for example, the administration of three or more active components.
Термин 'злокачественное новообразование' означает класс заболевания, при котором группа клеток демонстрирует неконтролируемый рост. Типы злокачественных новообразований включают гематологические злокачественные новообразования, включая острую миелоидную лейкемию, миелодиспластические синдромы, острую лимфоцитарную лейкемию и лимфому. Типы злокачественных новообразований также включают солидные опухоли, включая карциному, саркому или бластому.The term 'malignancy' refers to a class of disease in which a group of cells exhibit uncontrolled growth. Types of malignancies include hematologic malignancies including acute myeloid leukemia, myelodysplastic syndromes, acute lymphocytic leukemia, and lymphoma. Types of malignancies also include solid tumors, including carcinoma, sarcoma, or blastoma.
Термин совместно терапевтически эффективны обозначает, что терапевтические средства могут вводиться раздельно (в хронологически установленном порядке, в особенности специфически к последовательности образом) в такие временные интервалы, что они могут предпочтительно, у теплокровного животного, в особенности у человека, лечить, все еще проявляя (предпочтительно синергетическое) взаимодействие (совместный терапевтический эффект). В любом случае, это может быть установлено, в частности, путем определения последующих уровней в крови, свидетельствующих о том, что оба соединения присутствуют в крове человека, подвергаемого лечению, по меньшей мере на протяжении определенных временных интервалов.The term co-therapeutically effective means that the therapeutic agents can be administered separately (in a chronological order, especially in a sequence-specific manner) at such time intervals that they can preferentially treat a warm-blooded animal, especially a human, while still exhibiting ( preferably synergistic) interaction (joint therapeutic effect). In any case, this can be determined, in particular, by determining subsequent blood levels indicating that both compounds are present in the blood of the person being treated, at least over certain time intervals.
Термин стандартный лекарственный препарат или стандартная химиотерапия означает идарубицин, даунорубицин, митоксантрон, цитарабин, децитабин, гвадецитабин или азацитидин. В частности, стандартный лекарственный препарат или стандартная химиотерапия предполагает идарубицин, даунорубицин, цитарабин, децитабин или азацитидин.The term standard drug or standard chemotherapy means idarubicin, daunorubicin, mitoxantrone, cytarabine, decitabine, guadecitabine or azacitidine. Specifically, the standard drug or standard chemotherapy involves idarubicin, daunorubicin, cytarabine, decitabine, or azacitidine.
Синергетически эффективны или синергизм обозначает, что терапевтический эффект, наблюдаемые после введения двух или более агентов является больше, чем сумма терапевтических эффектов, наблюдаемых после введения каждого отдельно взятого средства.Synergistically effective or synergism means that the therapeutic effect observed after administration of two or more agents is greater than the sum of the therapeutic effects observed after administration of each individual agent.
Как используется в настоящем изобретении, термин лечить, лечение или терапия любого заболевания или нарушения относится в одном варианте осуществления, к ослаблению заболевания или нарушения (то есть, облечение или остановка или уменьшение развития заболевания или по меньшей мере одного из его клинических симптомов). В другом варианте осуществления лечить, лечение или терапия относится к ослаблению или облегчению по меньшей мере одного физического параметра, включая те, которые могут не ощущаться пациентом. В еще другом варианте осуществления, лечить, лечение или терапия относится к модуляции заболевания или нарушения, либо физически, (например, стабилизация различимого симптома), физиологически, (например, стабилизация физического параметра), или обоих.As used herein, the term treat, cure, or therapy for any disease or disorder refers, in one embodiment, to alleviating the disease or disorder (ie, relieving or stopping or reducing the progression of the disease or at least one of its clinical symptoms). In another embodiment, treat, treatment, or therapy refers to the attenuation or alleviation of at least one physical parameter, including those that may not be felt by the patient. In yet another embodiment, treat, treatment, or therapy refers to modulating a disease or disorder, either physically (eg, stabilization of a discernible symptom), physiologically (eg, stabilization of a physical parameter), or both.
Как используется в настоящем изобретении, субъект нуждается в лечении, если такой субъект будет получать преимущества биологически, медицински или качества жизни от такого лечения.As used in the present invention, a subject needs treatment if such subject will benefit biologically, medically, or quality of life from such treatment.
Термин ремиссия относится к уменьшению или исчезновению признаков и симптомов злокачественного новообразования.The term remission refers to the reduction or disappearance of the signs and symptoms of a cancer.
В другом аспекте, обеспечивается способ сенсибилизации человека, который (I) рефракторный к по меньшей мере одному химиотерапевтическому лечению, или (II) имеет рецидив после лечения с применением химиотерапии, или в обоих случаях (I) и (II), где способ включает введение ингибитора Mcl-1In another aspect, provided is a method of sensitizing a human who (I) is refractory to at least one chemotherapy treatment, or (II) has relapsed after treatment with chemotherapy, or both (I) and (II), wherein the method includes administering Mcl-1 inhibitor
- 6 044990 формулы (I) в комбинации со вторым противораковым агентом, как описано выше, пациенту. Пациент, который сенсибилизируется, представляет собой пациента, который отвечает на лечение, включающее введение ингибитора Mcl-1 формулы (I) в комбинации со вторым противораковым агентом, как описано выше, или у которого не развилась резистентность к такому лечению.- 6 044990 of formula (I) in combination with a second anticancer agent, as described above, to a patient. A patient who is sensitized is a patient who responds to treatment comprising administration of an Mcl-1 inhibitor of formula (I) in combination with a second anticancer agent as described above, or who has not developed resistance to such treatment.
Лекарственное средство обозначает фармацевтическую композицию, или комбинацию нескольких фармацевтических композиций, которые содержат один или несколько активных компонентов в присутствии одного или нескольких наполнителей.Drug means a pharmaceutical composition, or a combination of several pharmaceutical compositions, which contain one or more active ingredients in the presence of one or more excipients.
'AML' означает острую миелоидную лейкемию.'AML' stands for acute myeloid leukemia.
'ALL' означает острую лимфоцитарную лейкемию.'ALL' means acute lymphocytic leukemia.
В фармацевтических композициях в соответствии с изобретением, пропорция активных компонентов по весу (вес активных компонентов по отношению к общему весу композиции) составляет 5-50%.In the pharmaceutical compositions according to the invention, the proportion of active ingredients by weight (weight of active ingredients in relation to the total weight of the composition) is 5-50%.
В качестве фармацевтических композиций в соответствии с изобретением, более специфически используют те, которые являются подходящими для введения пероральным, парентеральным и в особенности внутривенным, через-или транс-кожным, назальным, ректальным, подъязычным, глазным или респираторным путем, более специфически таблетки, драже, подъязычные таблетки, твердые желатиновые капсулы, таблетки для медленного растворения под языком, капсулы, пастилки, инъецируемые препараты, аэрозоли, глазные капли или капли в нос, суппозитории, кремы, мази, кожные гели и др.More specifically used as pharmaceutical compositions according to the invention are those which are suitable for administration by the oral, parenteral and in particular intravenous, trans- or transdermal, nasal, rectal, sublingual, ocular or respiratory routes, more specifically tablets, dragees , sublingual tablets, hard gelatin capsules, sublingual tablets, capsules, lozenges, injectables, aerosols, eye or nasal drops, suppositories, creams, ointments, skin gels, etc.
Фармацевтические композиции в соответствии с изобретением могут содержать один или несколько наполнителей или носителей, выбранных из разбавителей, смазывающих веществ, связующих, дезинтеграторов, стабилизаторов, консервантов, абсорбентов, красителей, подсластителей, ароматизаторов и др.Pharmaceutical compositions in accordance with the invention may contain one or more excipients or carriers selected from diluents, lubricants, binders, disintegrants, stabilizers, preservatives, absorbents, coloring agents, sweeteners, flavoring agents, etc.
В качестве неограничивающего примера можно указать:By way of non-limiting example:
в качестве разбавителей: лактоза, декстроза, сахароза, маннит, сорбит, целлюлоза, глицерин, в качестве смазывающих веществ: диоксид кремния, тальк, стеариновая кислота и ее магниевая и кальциевая соли, полиэтиленгликоль, в качестве связующих: алюмосиликат магния, крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлоза, натрий карбоксиметилцеллюлоза и поливинилпирролидон, в качестве дезинтеграторов: агар, альгиновая кислота и ее натриевая соль, шипучие смеси.as diluents: lactose, dextrose, sucrose, mannitol, sorbitol, cellulose, glycerin, as lubricants: silicon dioxide, talc, stearic acid and its magnesium and calcium salts, polyethylene glycol, as binders: magnesium aluminum silicate, starch, gelatin, tragacanth, methylcellulose, sodium carboxymethylcellulose and polyvinylpyrrolidone, as disintegrators: agar, alginic acid and its sodium salt, effervescent mixtures.
Соединения комбинации могут вводиться одновременно или последовательно. Путь введения предпочтительно представляет собой внутривенную инфузию или инъекцию, и соответствующие фармацевтические композиции могут предоставлять возможность немедленного или отстроченного высвобождения активных компонентов. Соединения комбинации, кроме того, могут вводиться в форме двух раздельных фармацевтических композиций, каждая из которых содержит один из активных компонентов, или в форме единственной фармацевтической композиции, в которой активные компоненты представлены в смеси.The combination compounds may be administered simultaneously or sequentially. The route of administration is preferably intravenous infusion or injection, and appropriate pharmaceutical compositions may allow immediate or delayed release of the active components. The combination compounds may further be administered in the form of two separate pharmaceutical compositions, each containing one of the active ingredients, or in the form of a single pharmaceutical composition in which the active ingredients are present in a mixture.
Применяемые схемы дозирования изменяются в зависимости от пола, возраста и веса пациента, пути введения, природы злокачественного новообразования и любых сопутствующих лечений и находится в диапазоне от 25 мг до 1500 мг Mcl-1 ингибитора в неделю, более предпочтительно от 50 мг до 1400 мг в неделю. Доза второго противоракового агента, как описано выше, будет такой же, как используется при его самостоятельном введении.Dosage regimens used vary depending on the sex, age and weight of the patient, route of administration, the nature of the malignancy and any concomitant treatments and range from 25 mg to 1500 mg of Mcl-1 inhibitor per week, more preferably from 50 mg to 1400 mg per week. week. The dose of the second anticancer agent, as described above, will be the same as that used for self-administration.
Фармакологические данные.Pharmacological data.
Пример 1. Влияние на пролиферацию in vitro комбинации ингибитора Mcl-1 с идарубицином, цитарабином и децитабином на клеточных линиях острой миелоидной лейкемии (AML).Example 1. Effect on in vitro proliferation of a combination of an Mcl-1 inhibitor with idarubicin, cytarabine and decitabine in acute myeloid leukemia (AML) cell lines.
Вещества и методы.Substances and methods.
Клеточные линии получали и поддерживали в основной среде, дополненной фетальной бычьей сывороткой, как указано в табл. 1. Дополнительно, все питательные среды содержали пенициллин (100 МЕ/мл), стрептомицин (100 мкг/мл) и L-глутамин (2 мМ).Cell lines were obtained and maintained in basal medium supplemented with fetal bovine serum as indicated in Table. 1. Additionally, all culture media contained penicillin (100 IU/ml), streptomycin (100 μg/ml) and L-glutamine (2 mM).
Клеточные линии культивировали при 37°С в увлажненной атмосфере, содержащей 5% СО2, и распространяли в Т-150 колбах. Во всех случаях, клетки размораживали из замороженных стоков, пропускали через > 1 пассаж, используя подходящие разведения, подсчитывали и оценивали их жизнеспособность, используя CASY счетчик клеток перед высеванием 150 мкл/лунку при плотностях, указанных в табл. 1, в 96-луночные планшеты. Все клеточные линии определяли как не содержащие микоплазматических загрязнений с помощью собственных методов. Маточные растворы соединений готовили при концентрации 5 мМ в ДМСО и хранили при -20°С.Cell lines were cultured at 37°C in a humidified atmosphere containing 5% CO 2 and distributed in T-150 flasks. In all cases, cells were thawed from frozen stock, passed through >1 passage using appropriate dilutions, and counted and viability assessed using a CASY cell counter before plating at 150 μl/well at the densities indicated in Table 1. 1, in 96-well plates. All cell lines were determined to be free of mycoplasma contamination using in-house methods. Stock solutions of compounds were prepared at a concentration of 5 mM in DMSO and stored at -20°C.
Чтобы проанализировать активность соединений как отдельных агентов, клетки высевали и обрабатывали девятью 2-кратными серийными разведениями каждого соединения, раздаваемого индивидуально непосредственно в планшеты для анализа клеток. Влияние соединений на жизнеспособность клеток оценивали после 3 дней инкубации при 37°С/5% СО2 путем количественного определения уровней АТФ в клетках с использованием CellTiterGlo при концентрации реагента 75 мкл/лунку. Все эксперименты были выполнены в трех экземплярах. Люминесценцию количественно определяли на многофункциональном планшет-ридере. Значения IC50 для одного агента рассчитывали с использованием стандартного подбора четырехпараметрической кривой. Значение IC50 определяется как концентрация соединения, приTo analyze the activity of the compounds as single agents, cells were seeded and treated with nine 2-fold serial dilutions of each compound dispensed individually directly into cell assay plates. The effect of compounds on cell viability was assessed after 3 days of incubation at 37°C/5% CO 2 by quantitating ATP levels in cells using CellTiterGlo at a reagent concentration of 75 μl/well. All experiments were performed in triplicate. Luminescence was quantified on a multifunctional plate reader. Single-agent IC50 values were calculated using standard four-parameter curve fitting. The IC 50 value is defined as the concentration of the compound at
- 7 044990 которой сигнал CTG уменьшается до 50% от измеренного для контроля носителя (ДМСО) (табл. 2).- 7 044990 in which the CTG signal is reduced to 50% of that measured for the control vehicle (DMSO) (Table 2).
Для анализа активности соединений в комбинации с цитарабином (табл. 3), идарубицином (табл. 4) и децитабином (табл. 5), клетки высевали и обрабатывали семи или восьми 3,16-кратными серийными разведениями для каждого диспергированого соединения, либо индивидуально, либо во всех возможных перестановках в шахматном порядке, непосредственно в планшетах для анализа клеток, как указано на фиг. 1. Влияния отдельно взятых агентов, а также их комбинаций в шахматном порядке, на жизнеспособность клеток оценивали после инкубирования в течение 3 дней при 37°С/5 % СО2 путем количественного определения клеточных уровней АТФ, используя CellTiterGlo в количестве 75 мкл реагента/лунку. Осуществляли по меньшей мере два независимых эксперимента, каждый из них осуществляли в двух повторах. Люминесценцию количественно определяли на многоцелевом планшет-ридере.To analyze the activity of compounds in combination with cytarabine (Table 3), idarubicin (Table 4) and decitabine (Table 5), cells were seeded and treated with seven or eight 3.16-fold serial dilutions of each dispersed compound, or individually, or in all possible staggered permutations, directly in cell assay plates, as indicated in FIG. 1. The effects of individual agents, as well as staggered combinations of agents, on cell viability were assessed after incubation for 3 days at 37°C/5% CO 2 by quantifying cellular ATP levels using CellTiterGlo at 75 µl reagent/well . At least two independent experiments were carried out, each of them carried out in duplicate. Luminescence was quantified using a multi-plate reader.
Оценивали потенциальные синергетические взаимодействия между комбинациями соединений, используя 2D матрицу избытка ингибирования в соответствии с моделью аддитивности Loewe и представляли в виде Оценки синергизма (Lehar et al., Nature Biotechnology 2009, 27(7), 659-66). Все расчеты осуществляли, используя программное обеспечение Clalice™ Bioinformatics, доступное на вебсайте Horizon.Potential synergistic interactions between combinations of compounds were assessed using a 2D excess inhibition matrix according to the Loewe additivity model and presented as a Synergy Score (Lehar et al., Nature Biotechnology 2009, 27(7), 659-66). All calculations were performed using Clalice™ Bioinformatics software available on the Horizon website.
Время удвоения, указанное в табл. 1, представляет собой среднее значение времени удвоения, полученное в различных пассажах (в Т-150 колбах), проведенных из размороженных клеток при их высевании в 96-луночные планшеты.The doubling time indicated in the table. 1 represents the average doubling time obtained in various passages (in T-150 flasks) carried out from thawed cells when seeded in 96-well plates.
Оценка синергизма.Evaluation of synergy.
SS ~ 0 ^ аддитивный.SS ~ 0^ additive.
SS > 1 ^ слабый синергизм.SS > 1 ^ weak synergy.
SS >2 ^ синергизм.SS >2 ^ synergism.
Таблица 1Table 1
Условия идентификации и анализов для 13 клеточных линий AML, используемых в комбинированных экспериментахIdentification and assay conditions for 13 AML cell lines used in combination experiments
- 8 044990- 8 044990
Таблица 2table 2
Указаны значения IC50 для отдельно взятого соединения 1, соединения 2, цитарабина, идарубицина и децитабина в 13 клеточных линиях AML.Individual IC50 values for compound 1, compound 2, cytarabine, idarubicin, and decitabine in 13 AML cell lines are reported.
Таблица 3Table 3
Указаны оценки синергизма для ингибитора Mcl-1 в комбинации с цитарабином в указанных клеточных линиях AML. Взаимодействия считаются синергетическими, если наблюдается оценка > 2,0. Указаны исходные концентрации соединений, среднее значение максимального ингибирования и стандартное отклонение (со) в оценках синергизма.Synergy estimates for Mcl-1 inhibitor in combination with cytarabine in the indicated AML cell lines are indicated. Interactions are considered synergistic if a score > 2.0 is observed. Initial compound concentrations, mean maximum inhibition, and standard deviation (SD) of synergy estimates are reported.
- 9 044990- 9 044990
Таблица 4Table 4
Указаны оценки синергизма для ингибитора Мс1-1 в комбинации с идарубицином в указанных клеточных линиях AML. Взаимодействия считаются синергетическими, если наблюдается оценка > 2,0. Указаны исходные концентрации соединений, среднее значение максимального ингибирования и стандартное отклонение (со) в оценках синергизма.Synergy estimates for Mc1-1 inhibitor in combination with idarubicin in the indicated AML cell lines are indicated. Interactions are considered synergistic if a score > 2.0 is observed. Initial compound concentrations, mean maximum inhibition, and standard deviation (SD) of synergy estimates are reported.
Таблица 5Table 5
Указаны оценки синергизма для ингибитора Мс1-1 в комбинации с децитабином в указанных клеточных линиях AML. Взаимодействия считаются синергетическими, если наблюдается оценка > 2,0. Указаны исходные концентрации соединений, среднее значение максимального ингибирования и стандартное отклонение (со) в оценках синергизма.Synergy estimates for Mc1-1 inhibitor in combination with decitabine in the indicated AML cell lines are indicated. Interactions are considered synergistic if a score > 2.0 is observed. Initial compound concentrations, mean maximum inhibition, and standard deviation (SD) of synergy estimates are reported.
Результаты.Results.
Влияние на пролиферацию комбинации ингибиторов Мс1-1 данного изобретения с цитарабином, идарубицином и децитабином оценивали на панели 13 клеточных линий AML. Ингибиторы Мс1-1 как отдельные агенты сильно ингибировали рост большинства из 13 протестированных линий AML (значения 1С5о от 1 нМ до 2,2 мкМ - табл. 2). В комбинации со стандартными лекарственными средствами цитарабином, идарубицином и децитабином наблюдалось синергетическое ингибирование роста (то естьThe effect on proliferation of a combination of Mc1-1 inhibitors of this invention with cytarabine, idarubicin and decitabine was assessed in a panel of 13 AML cell lines. Mc1-1 inhibitors as individual agents strongly inhibited the growth of most of the 13 AML lines tested ( IC5o values from 1 nM to 2.2 µM - Table 2). When combined with the standard drugs cytarabine, idarubicin, and decitabine, synergistic growth inhibition was observed (i.e.
- 10044990 оценка синергизма - выше 2 (Lehar et al, 2009)) для большинства протестированных клеточных линий (табл. 3, 4 и 5). Эти данные указывают на то, что комбинация ингибиторов Mcl-1 с стандартными лекарственными препаратами для медицинской помощи для лечения гематологического злокачественного новообразования может быть полезной для лечения пациентов с AML.- 10044990 synergy score - above 2 (Lehar et al, 2009)) for most cell lines tested (Tables 3, 4 and 5). These data indicate that the combination of Mcl-1 inhibitors with standard of care drugs for the treatment of hematologic malignancy may be beneficial for the treatment of patients with AML.
Пример 2. Синергетическая проапоптотическая активность комбинации ингибиторов Mcl-1 с идарубицином в первичных образцах AML человека.Example 2. Synergistic proapoptotic activity of a combination of Mcl-1 inhibitors with idarubicin in primary human AML samples.
Вещества и метод. Пациент с клетками AML.Substances and method. Patient with AML cells.
Образцы костного мозга от пациентов с AML были собраны после информированного согласия в соответствии с руководящими принципами, утвержденными Комитетом по этике научных исследований при больнице Альфреда.Bone marrow samples from AML patients were collected after informed consent in accordance with guidelines approved by the Alfred Hospital Research Ethics Committee.
Мононуклеарные клетки выделяли центрифугированием в градиенте плотности Ficoll-Hypaque (GE Healthcare, Австралия) и лизис эритроцитов проводили с использованием 0,156 М NH4Cl, 0,017 М TrisHCl, при рН 7,2, как описано ранее (Rijal et al., Blood 2015, 125, 2815-2824). Клетки затем повторно суспендировали в забуференном фосфатом соляном растворе, содержащем 2% фетальной бычьей сыворотки (FBS; Sigma, Австралия). Затем мононуклеарные клетки суспендировали в среде RPMI-1640 (GIBCO, Австралия), содержащей пенициллин и стрептомицин (GIBCO) и инактивированную теплом фетальную бычью сыворотку 15% (Sigma). Клетки промывали в фосфатно-соляном буфере (PBS), содержащем 2% FBS, перед использованием.Mononuclear cells were isolated by Ficoll-Hypaque density gradient centrifugation (GE Healthcare, Australia) and erythrocyte lysis was performed using 0.156 M NH 4 Cl, 0.017 M TrisHCl, pH 7.2, as previously described (Rijal et al., Blood 2015, 125, 2815-2824). Cells were then resuspended in phosphate buffered saline containing 2% fetal bovine serum (FBS; Sigma, Australia). Mononuclear cells were then suspended in RPMI-1640 medium (GIBCO, Australia) containing penicillin and streptomycin (GIBCO) and heat-inactivated fetal bovine serum 15% (Sigma). Cells were washed in phosphate-buffered saline (PBS) containing 2% FBS before use.
Анализ жизнеспособности клеток.Cell viability assay.
Свежеочищенные мононуклеарные клетки из образцов пациентов с AML доводили до концентрации 2,5х105/мл, и отбирали аликвоту клеток объемом 100 мкл на лунку в 96-луночные планшеты (Sigma). Клетки затем обрабатывали идарубицином и соединением 2 в рамках 5 log-концентраций в диапазоне от 1 нМ до 10 мкМ в течение 48 ч. Для анализов комбинаций препараты добавляли в соотношении 1:1, получая концентрации от 1 нМ до 10 мкМ, и клетки инкубировали при 37°С и 5% СО2. Клетки затем окрашивали с помощью красителя Sytox blue nucleic acid stain (Invitrogen, Австралия) и флуоресценцию измеряли с помощью проточного цитометрического анализа с использованием LSR-II Fortessa (Becton Dickinson, Австралия). Для сбора данных использовали программное обеспечение FACSDiva, а программное обеспечение FlowJo использвали для анализа. Бластные клетки стробировали с использованием свойств прямого и бокового рассеяния. Параметры жизнеспособных клеток, которые не включали Sytox blue, определяли при 6 концентрациях для каждого препарата и 50% летальной концентрации (LC50, в мкМ).Freshly purified mononuclear cells from AML patient samples were adjusted to a concentration of 2.5 × 105/ml, and cells were aliquoted at 100 μl per well into 96-well plates (Sigma). Cells were then treated with idarubicin and compound 2 at 5 log concentrations ranging from 1 nM to 10 μM for 48 h. For combination assays, drugs were added in a 1:1 ratio to give concentrations ranging from 1 nM to 10 μM, and cells were incubated at 37°C and 5% CO 2 . Cells were then stained with Sytox blue nucleic acid stain (Invitrogen, Australia) and fluorescence was measured by flow cytometric analysis using an LSR-II Fortessa (Becton Dickinson, Australia). FACSDiva software was used for data collection and FlowJo software was used for analysis. Blast cells were gated using forward and side scatter properties. Viable cell parameters that did not include Sytox blue were determined at 6 concentrations for each drug and 50% lethal concentration ( LC50 , in µM).
- 11 044990- 11 044990
Таблица 6Table 6
Синергетическая проапоптотическая активность в первичных образцах AML человекаSynergistic proapoptotic activity in primary human AML samples
Результаты.Results.
Влияние на выживаемость комбинации ингибиторов Mcl-1 согласно изобретению с идарубицином оценивали в нескольких первичных образцах AML человека (фиг. 2; табл. 6). Даже если несколько образцов являются чувствительными к ингибиторам Mcl-1 и стандартным лекарственным препаратам для лечения AML в качестве монотерапии, большее количество образцов, где монотерапия неэффективна или слабоэффективна, являются синергетически чувствительными к комбинации ингибиторов Mcl-1 со стандартными лекарственными препаратами для лечения гематологического злокачественного новообразования, демонстрируя, что комбинация может быть полезна для лечения пациентов с AML.The effect on survival of the combination of Mcl-1 inhibitors according to the invention with idarubicin was assessed in several primary human AML samples (Fig. 2; Table 6). Even if a few samples are sensitive to Mcl-1 inhibitors and standard drugs for the treatment of AML as monotherapy, a larger number of samples where monotherapy is ineffective or weakly effective are synergistically sensitive to the combination of Mcl-1 inhibitors with standard drugs for the treatment of hematological malignancy , demonstrating that the combination may be useful for treating patients with AML.
Пример 3. Лейкозные бластные клетки показывали большую чувствительность к ингибиторам Mcl1 в комбинации с цитарабином, чем кроветворные клетки-предшественники CD34 +.Example 3 Leukemia blast cells showed greater sensitivity to Mcl1 inhibitors in combination with cytarabine than CD34+ hematopoietic progenitor cells.
Вещества и метод. Анализы колониеобразования.Substances and method. Colony formation assays.
Анализы колониеобразования проводили на свежеочищенных и замороженных мононуклеарных фракциях от пациентов с AML.Colony formation assays were performed on freshly purified and frozen mononuclear fractions from AML patients.
Первичные клетки культивировали в двух экземплярах в 35 мм сосудах (Griener-bio, Германия) от 1x104 до 1x105. Клетки высевали в 0,6% агара (Difco, Австралия): AIMDM 2x (IMDM порошок-Invitrogen, дополненный NaHCO3, декстраном, Pen/Strep, В-меркаптоэтанолом и аспарагином): фетальная бычья сыворотка (Sigma) в соотношении 2:1:1. Для оптимальных условий роста все сосуды содержали GM-CSF (100 нг на сосуд), IL-3 (100 нг на сосуд R & D Systems, США), SCF (100 нг/сосуд системы R & D) и ЕРО (4 ед./сосуд). Рост происходил в течение 2-3 недель в присутствии и отсутствии препарата при 37°С и 5% СО2 в инкубаторе с высокой влажностью. После инкубации планшеты фиксировали с помощью 2,5% глутаральдегида в соляном растворе и оценивали, используя GelCount от Oxford Optronix (Абингдон, Великобритания).Primary cells were cultured in duplicate in 35 mm vessels (Griener-bio, Germany) from 1x104 to 1x105. Cells were plated in 0.6% agar (Difco, Australia): AIMDM 2x (IMDM powder-Invitrogen, supplemented with NaHCO 3 , dextran, Pen/Strep, B-mercaptoethanol and asparagine): fetal bovine serum (Sigma) in a ratio of 2:1 :1. For optimal growth conditions, all vessels contained GM-CSF (100 ng per vessel), IL-3 (100 ng per vessel R&D Systems, USA), SCF (100 ng/vessel R&D Systems) and EPO (4 units). /vessel). Growth occurred over 2-3 weeks in the presence and absence of the drug at 37°C and 5% CO 2 in a high humidity incubator. After incubation, plates were fixed with 2.5% glutaraldehyde in saline and scored using GelCount from Oxford Optronix (Abingdon, UK).
Результаты.Results.
В клоногенных анализах подмножество первичных образцов AML и нормальных клетокпредшественников CD34+ человека были устойчивы к 100 нМ соединения 2. В отличие от этого, стандартные лекарственные препараты, такие как цитарабин 10 нМ, были токсичными для клоногенного роста как лейкемических, так и нормальных клеток-предшественников. В конце концов, подмножество первичных образцов AML было чувствительным к 10 нМ соединения 2 + цитарабина, тогда как на нормаль- 12 044990 ные клетки-предшественники CD34 + человека эта доза имела меньшее воздействие (фиг. 3).In clonogenic assays, a subset of primary samples of AML and normal human CD34+ progenitor cells were resistant to 100 nM compound 2. In contrast, standard drugs such as cytarabine 10 nM were toxic to clonogenic growth of both leukemic and normal progenitor cells. Finally, a subset of primary AML samples was sensitive to 10 nM compound 2+ cytarabine, whereas normal human CD34+ progenitor cells were less affected by this dose (Figure 3).
Пример 4. Ингибитор Mcl-1 в комбинации с децитабином является хорошо переносимым in vivo.Example 4 An Mcl-1 inhibitor in combination with decitabine is well tolerated in vivo.
Для определения переносимости соединения 2 в комбинации с децитабином мышам NSG вводили: а) децитабин 0,4 мг/кг или 0,8 мг/кг с помощью интраперитонеальной инъекции, или б) децитабин 0,4 мг/кг или 0,8 мг/кг в комбинации с соединением 2 25 мг/кг (в/в), в течение 1 недели и количество лейкоцитов (WBC), тромбоцитов, гемоглобина (Hb), количество эритроцитов (RBC) определяли с помощью анализатора крови Hemavet.To determine the tolerability of compound 2 in combination with decitabine, NSG mice were administered: a) decitabine 0.4 mg/kg or 0.8 mg/kg by intraperitoneal injection, or b) decitabine 0.4 mg/kg or 0.8 mg/ kg in combination with compound 2 25 mg/kg (iv), for 1 week and white blood cell count (WBC), platelet count, hemoglobin (Hb), red blood cell count (RBC) were determined using a Hemavet blood analyzer.
Соединение 2 в сочетании с децитабином является хорошо переносимым (фиг. 5) и мыши не теряли вес в течение лечения (фиг. 4).Compound 2 in combination with decitabine was well tolerated (Figure 5) and mice did not lose weight during treatment (Figure 4).
Взятые в целом, примеры 2, 3 и 4 показывают, что комбинация ингибиторов Mcl-1 и стандартного лекарственного препарата для лечения гематологического злокачественного новообразования является новым подходом к лечению, в частности, AML, без необходимости в дополнительной химиотерапии и с приемлемым терапевтическим окном безопасности.Taken as a whole, Examples 2, 3 and 4 demonstrate that the combination of Mcl-1 inhibitors and a standard drug for the treatment of hematological malignancy is a new approach to the treatment, particularly of AML, without the need for additional chemotherapy and with an acceptable therapeutic window of safety.
Пример 5. Ингибитор Mcl-1 в сочетании с децитабином синергетически ингибирует PDX AML in vivo.Example 5 Mcl-1 inhibitor in combination with decitabine synergistically inhibits PDX AML in vivo.
Вещества и метод.Substances and method.
Лейкозные бластные клетки костного мозга из образца AML54 пациента с AML внутривенно инъецировали мышам NOD-IL2Rycnull (NRG) (The Jackson Laboratory, Bar Harbor, США) для размножения. Мыши NRG-SG3 подвергали мониторингу на развитие лейкемии с помощью проточного цитометрического анализа периферической крови в отношении CD45-позитивных (hCD45 +) клеток человека. Для создания мышиных моделей первичной AML у пациентов мышей NRG-SG3 инъецировали 1х106 лейкозными бластными клетками посредством инъекции в хвостовую вену, и животных наблюдали на предмет прогрессирования лейкемии с использованием проточного цитометрического анализа периферической крови в отношении hCD45 + клеток. Количество клеток hCD45 + в костном мозге от бедренных костей у умерщвленных животных использовали для определения степени инфильтрации лейкемии. Клетки костного мозга извлекали путем промывки бедренных костей в PBS с добавлением 2% эмбриональной бычьей сыворотки. Чтобы определить действие на AML, группы мышам вводили контрольный носитель, децитабин (0,4 мг/кг) ежедневно в течение 5 дней, интраперитонеально, дважды в неделю внутривенно инъекцией соединения 2 (ингибитор Mcl-1, 25 мг/кг) или децитабина в комбинации с соединением 2. Эффективность препарата определяли с помощью проточного цитометрического анализа клеток hCD45 + в костном мозге, выделенном из бедренных костей мышей в носителе.Leukemia bone marrow blast cells from AML patient sample AML54 were intravenously injected into NOD-IL2Rycnull (NRG) mice (The Jackson Laboratory, Bar Harbor, USA) for expansion. NRG-SG3 mice were monitored for leukemia development using peripheral blood flow cytometric analysis of human CD45-positive (hCD45+) cells. To establish murine models of primary AML in patients, NRG-SG3 mice were injected with 1x10 6 leukemia blast cells via tail vein injection, and the animals were monitored for leukemia progression using peripheral blood flow cytometric analysis of hCD45+ cells. The number of hCD45 + cells in bone marrow from femurs of sacrificed animals was used to determine the extent of leukemia infiltration. Bone marrow cells were recovered by washing the femurs in PBS supplemented with 2% fetal bovine serum. To determine the effect on AML, groups of mice were treated with vehicle control, decitabine (0.4 mg/kg) daily for 5 days, intraperitoneally, twice weekly intravenous injection of compound 2 (Mcl-1 inhibitor, 25 mg/kg) or decitabine i.v. combination with compound 2. Drug efficacy was determined by flow cytometric analysis of hCD45+ cells in bone marrow isolated from the femurs of vehicle mice.
Результаты.Results.
Как показано на фиг. 6, наблюдалось значительное снижение количества клеток AML человека у мышей, которым вводили децитабин в комбинации с соединением 2, причем клетки hCD45 + составляли менее 9% лейкоцитов костного мозга. Эти результаты показывают, что комбинация ингибитора Mcl-1 и стандартного лекарственного препарата для лечения гематологического злокачественного новообразования эффективно убивает объемные бластные клетки AML человека в PDX-модели AML54.As shown in FIG. 6, there was a significant reduction in the number of human AML cells in mice treated with decitabine in combination with compound 2, with hCD45 + cells accounting for less than 9% of bone marrow leukocytes. These results demonstrate that the combination of an Mcl-1 inhibitor and a standard drug for the treatment of hematologic malignancy effectively kills human AML bulk blast cells in the PDX model of AML54.
Пример 6. Синергетическая проапоптотическая активность комбинации ингибиторов Mcl-1 со стандартными лекарственными препаратами для медицинской помощи в первичных образцах ALL человека.Example 6: Synergistic proapoptotic activity of a combination of Mcl-1 inhibitors with standard of care drugs in primary human ALL samples.
Вещества и метод: первичные образцы ALL пациента.Substances and Method: Primary ALL patient samples.
Образцы костного мозга или периферической крови пациентов с ALL были собраны после информированного согласия в соответствии с руководящими принципами, утвержденными Комитетом по этике научных исследований в больнице Альфреда. Мононуклеарные клетки выделяли центрифугированием в градиенте плотности Ficoll-Paque (GE Healthcare, Australia) с последующим уменьшением эритроцитов в лизисном буфере хлорида аммония (NH4Cl) при 37°С в течение 10 мин. Затем клетки повторно суспендировали в забуференном фосфатом соляном растворе, содержащем 2% фетальной бычьей сыворотки (Sigma, Австралия). Затем мононуклеарные клетки суспендировали в среде RPMI-1640 (GIBCO, Австралия), содержащей пенициллин и стрептомицин (GIBCO) и инактивированную теплом фетальную бычью сыворотку 15% (Sigma).Bone marrow or peripheral blood samples from patients with ALL were collected after informed consent in accordance with guidelines approved by the Alfred Hospital Research Ethics Committee. Mononuclear cells were isolated by Ficoll-Paque density gradient centrifugation (GE Healthcare, Australia) followed by reduction of red blood cells in ammonium chloride ( NH4Cl ) lysis buffer at 37°C for 10 min. The cells were then resuspended in phosphate buffered saline containing 2% fetal bovine serum (Sigma, Australia). Mononuclear cells were then suspended in RPMI-1640 medium (GIBCO, Australia) containing penicillin and streptomycin (GIBCO) and heat-inactivated fetal bovine serum 15% (Sigma).
Анализ жизнеспособности клеток.Cell viability assay.
Свежеочищенные мононуклеарные клетки из образцов пациентов с ALL доводили до концентрации 2,5х105/мл, и отбирали аликвоту клеток объемом 100 мкл на лунку в 96-луночные планшеты (Sigma). Клетки затем обрабатывали указанными лекарственными средствами в рамках 6 log-концентраций в диапазоне от 1 нМ до 10 мкМ в течение 48 часов. Для анализов комбинаций препараты добавляли в соотношении 1:1, получая концентрации от 1 нМ до 10 мкМ, и клетки инкубировали при 37°С и 5% СО2. Клетки затем окрашивали с помощью красителя Sytox blue nucleic acid stain (Invitrogen, Австралия) и флуоресценцию измеряли с помощью проточного цитометрического анализа с использованием LSR-II Fortessa (Becton Dickinson, Австралия). Для сбора данных использовали программное обеспечение FACSDiva, а программное обеспечение FlowJo использвали для анализа. Бластные клетки стробировали с использованием свойств прямого и бокового рассеяния. Параметры жизнеспособных клеток, которые не включали Sytox blue, определяли при 6 концентрациях для каждого препарата и 50% летальной кон-Freshly purified mononuclear cells from ALL patient samples were adjusted to a concentration of 2.5 x 105/ml, and cells were aliquoted at 100 μl per well into 96-well plates (Sigma). Cells were then treated with the indicated drugs at 6 log concentrations ranging from 1 nM to 10 μM for 48 hours. For combination assays, drugs were added in a 1:1 ratio, resulting in concentrations ranging from 1 nM to 10 μM, and cells were incubated at 37°C and 5% CO 2 . Cells were then stained with Sytox blue nucleic acid stain (Invitrogen, Australia) and fluorescence was measured by flow cytometric analysis using an LSR-II Fortessa (Becton Dickinson, Australia). FACSDiva software was used for data collection and FlowJo software was used for analysis. Blast cells were gated using forward and side scatter properties. Viable cell parameters that did not include Sytox blue were determined at 6 concentrations for each drug and 50% lethal concentration.
Claims (21)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/523,389 | 2017-06-22 | ||
| EP17189550.1 | 2017-09-06 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA044990B1 true EA044990B1 (en) | 2023-10-19 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2018015526A1 (en) | Combination of a bcl-2 inhibitor and a mcl-1 inhibitor, uses and pharmaceutical compositions thereof | |
| RU2746705C2 (en) | Combination of bcl-2 inhibitor and mcl-1 inhibitor, use and pharmaceutical compositions thereof | |
| Wu et al. | Histone deacetylase inhibitors suppress the growth of human osteosarcomas in vitro and in vivo | |
| JP7186731B2 (en) | Combinations of MCL-1 inhibitors with standard therapeutic treatments for hematologic cancers, their uses and pharmaceutical compositions | |
| JP6462582B2 (en) | Methods and compositions for the treatment of cancer | |
| RU2763544C2 (en) | Combination of mcl-1 inhibitor and taxane compound, their applications and pharmaceutical compositions | |
| RU2792057C2 (en) | Combination of an mcl-1 inhibitor and a standard drug for the treatment of hematological malignancies, its use and pharmaceutical compositions containing it | |
| CA3119395A1 (en) | Combination of a mcl-1 inhibitor and midostaurin, uses and pharmaceutical compositions thereof | |
| EA044990B1 (en) | COMBINATION OF MCL-1 INHIBITOR AND STANDARD DRUG FOR TREATMENT OF HEMATOLOGICAL MALIGNANCES, ITS APPLICATION AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING IT | |
| EP3892267A1 (en) | Combinatory treatment for lymphoma | |
| OA19591A (en) | Combination of a Mcl-1 inhibitor and a standard of care treatment for hematologic cancers, uses and pharmaceutical compositions thereof. | |
| RU2818453C2 (en) | Combination of mcl-1 inhibitor and midostaurin, its applications and pharmaceutical compositions | |
| TWI849001B (en) | Combination of a mcl-1 inhibitor and midostaurin, uses and pharmaceutical compositions thereof | |
| EA044971B1 (en) | COMBINATION OF MCL-1 INHIBITOR AND MIDOSTAURIN, ITS APPLICATIONS AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS | |
| Al-Odat | Potent and Selective Small Molecule Mcl-1 Inhibitor Demonstrates Anti-Myeloma Activity and Overcomes Chemotherapy Resistance | |
| EA039621B1 (en) | Combination of a bcl-2 inhibitor and a mcl1 inhibitor, uses and pharmaceutical compositions thereof | |
| IL300145A (en) | Combination of a bcl-2 inhibitor and a hypomethylating agent for treating cancers, uses and pharmaceutical compositions thereof | |
| EA040162B1 (en) | COMBINATION OF MCL-1 INHIBITOR AND TAXANE COMPOUND, THEIR APPLICATIONS AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS | |
| CN112118840A (en) | Pharmaceutical composition for preventing or treating solid cancer or leukemia comprising 1, 2-naphthoquinone derivative compound |