EA044535B1 - METHOD FOR OBTAINING IMMUNOGLOBULIN G AGAINST COVID-19 - Google Patents
METHOD FOR OBTAINING IMMUNOGLOBULIN G AGAINST COVID-19 Download PDFInfo
- Publication number
- EA044535B1 EA044535B1 EA202290695 EA044535B1 EA 044535 B1 EA044535 B1 EA 044535B1 EA 202290695 EA202290695 EA 202290695 EA 044535 B1 EA044535 B1 EA 044535B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- immunoglobulin
- plasma
- solution
- cov
- sars
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 34
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 title claims description 13
- 208000025721 COVID-19 Diseases 0.000 title claims description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 37
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 37
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 33
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 21
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 16
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 claims description 14
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 13
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 12
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 12
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 11
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 7
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 7
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 6
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000010530 Virus Neutralization Effects 0.000 claims description 5
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 claims description 5
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 claims description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 4
- 241001678559 COVID-19 virus Species 0.000 claims description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 claims 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 46
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 15
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 9
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 8
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 7
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 208000001528 Coronaviridae Infections Diseases 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 4
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 4
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 4
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 3
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 3
- STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N tributyl phosphate Chemical compound CCCCOP(=O)(OCCCC)OCCCC STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 208000035049 Blood-Borne Infections Diseases 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 201000003176 Severe Acute Respiratory Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 2
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- BYKRNSHANADUFY-UHFFFAOYSA-M sodium octanoate Chemical compound [Na+].CCCCCCCC([O-])=O BYKRNSHANADUFY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- 238000007445 Chromatographic isolation Methods 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 102100031673 Corneodesmosin Human genes 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 241000699673 Mesocricetus auratus Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940096437 Protein S Drugs 0.000 description 1
- 206010037423 Pulmonary oedema Diseases 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 238000009175 antibody therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000010836 blood and blood product Substances 0.000 description 1
- 229940019700 blood coagulation factors Drugs 0.000 description 1
- 229940125691 blood product Drugs 0.000 description 1
- 230000007248 cellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000013504 emergency use authorization Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 229940099472 immunoglobulin a Drugs 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 244000309711 non-enveloped viruses Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 238000002616 plasmapheresis Methods 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 208000005333 pulmonary edema Diseases 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 238000010187 selection method Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- -1 sulfopropyl cation Chemical class 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- NLVRHQFXQFSBQK-XWGVYQGASA-N tert-butyl N-[1-[(2S)-1-[[(2S)-4-(benzylamino)-3,4-dioxo-1-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]butan-2-yl]amino]-3-cyclopropyl-1-oxopropan-2-yl]-2-oxopyridin-3-yl]carbamate Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)NC(C([C@H](C[C@H]1C(NCC1)=O)NC([C@H](CC1CC1)N1C(C(=CC=C1)NC(OC(C)(C)C)=O)=O)=O)=O)=O NLVRHQFXQFSBQK-XWGVYQGASA-N 0.000 description 1
- 230000002885 thrombogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
Description
Область техникиField of technology
Изобретение относится к медицине, а именно к способам получения иммуноглобулина G противThe invention relates to medicine, namely to methods for producing immunoglobulin G against
COVID-19, и может быть использовано при производстве лекарственных препаратов для лечения и профилактики COVID-19.COVID-19, and can be used in the production of medicines for the treatment and prevention of COVID-19.
Уровень техникиState of the art
Коронавирусная инфекция (COVID-19) - это острое вирусное заболевание с преимущественным поражением верхних дыхательных путей, вызванное коронавирусом острого тяжелого респираторного синдрома 2 типа (SARS-CoV-2). Текущая эпидемическая ситуация требует эффективных и специфических лекарств для профилактики и лечения коронавирусной инфекции.Coronavirus infection (COVID-19) is an acute viral disease primarily affecting the upper respiratory tract caused by acute severe respiratory syndrome coronavirus type 2 (SARS-CoV-2). The current epidemic situation requires effective and specific drugs for the prevention and treatment of coronavirus infection.
Одним из первых решений систем здравоохранения во всем мире было использование плазмы, содержащей антитела к SARS-CoV-2, для лечения заболевания. Указанный метод лечения использовался при многих вспышках инфекционных заболеваний в прошлом, начиная со времен испанского гриппа. Результаты нескольких исследований подтверждают положительный эффект использования плазмы, содержащей антитела к SARS-CoV-2, для лечения пациентов с COVID-19 на различных стадиях заболевания. В то же время использование плазмы крови человека всегда сопряжено с риском посттрансфузионных осложнений различного характера, в том числе заражением гемотрансмиссивными инфекциями, повышенным риском тромбообразования, риском развития неконтролируемой продукции цитокинов, факторов свертывания крови и других молекул, которые могут ухудшить состояние пациентовреципиентов.One of the first decisions made by healthcare systems around the world was to use plasma containing antibodies to SARS-CoV-2 to treat the disease. This treatment has been used in many infectious disease outbreaks in the past, dating back to the Spanish Flu. The results of several studies confirm the beneficial effect of using plasma containing antibodies to SARS-CoV-2 to treat patients with COVID-19 at various stages of the disease. At the same time, the use of human blood plasma is always associated with the risk of post-transfusion complications of various types, including infection with blood-borne infections, an increased risk of thrombosis, and the risk of developing uncontrolled production of cytokines, blood coagulation factors and other molecules that can worsen the condition of recipient patients.
Терапия антителами может быть мощным инструментом, помогающим в лечении больных COVID19. Однако требуются более безопасные методы пассивной иммунизации, чем переливание плазмы, содержащей антитела к SARS-CoV-2. Существуют несколько препаратов на основе моноклональных антител, нейтрализующих SARS-CoV-2 (nAbs), которые получили разрешение для экстренного использования при коронавирусной инфекции. При этом, наряду со многими преимуществами моноклональных антител, в случае наличия мутации вируса в области значимых эпитопов S-белка SARS-CoV-2, к которым обычно и разрабатываются nAbs, такие препараты теряют эффективность, вплоть до полного отсутствия. В качестве альтернативы для лечения COVID-19 можно использовать поликлональные иммуноглобулины, полученные из плазмы доноров, содержащей нейтрализующие SARS-CoV-2 антитела. Гипериммунные иммуноглобулины неоднократно показали свою эффективность против многочисленных бактериальных и вирусных инфекций в прошлом.Antibody therapy could be a powerful tool to help treat COVID19 patients. However, safer methods of passive immunization are required than transfusion of plasma containing antibodies to SARS-CoV-2. There are several drugs based on monoclonal antibodies that neutralize SARS-CoV-2 (nAbs) that have received emergency use authorization for coronavirus infection. At the same time, along with the many advantages of monoclonal antibodies, if there is a mutation of the virus in the region of significant epitopes of the S-protein of SARS-CoV-2, for which nAbs are usually developed, such drugs lose effectiveness, even to the point of being completely ineffective. As an alternative, polyclonal immunoglobulins obtained from donor plasma containing SARS-CoV-2 neutralizing antibodies can be used to treat COVID-19. Hyperimmune immunoglobulins have repeatedly shown their effectiveness against numerous bacterial and viral infections in the past.
Способы производства препаратов крови, включая фракционирование плазмы, последующие этапы очистки продукта и специализированные процедуры, направленные на инактивацию или удаление вирусов, обеспечивают большую безопасность пациентов при использовании препаратов иммуноглобулинов по сравнению с использованием необработанной плазмы для переливания. Кроме того, использование иммуноглобулина, полученного из плазмы большого числа доноров, обеспечивает широкую специфичность иммуноглобулинов в отношении различных изолятов вирусов и гарантирует их нейтрализующую активность. Следовательно, гипериммунный иммуноглобулин G (IgG) против SARS-CoV-2, полученный из большого пула плазмы, может быть эффективным против различных изолятов SARS-CoV-2 у пациентов с COVID-19 при отсутствии риска нежелательных явлений, возможных при переливании плазмы.Blood product manufacturing methods, including plasma fractionation, subsequent product purification steps, and specialized procedures to inactivate or remove viruses, provide greater patient safety when using immunoglobulin products compared to using unprocessed plasma for transfusion. In addition, the use of immunoglobulin obtained from the plasma of a large number of donors ensures broad specificity of immunoglobulins against various virus isolates and guarantees their neutralizing activity. Therefore, anti-SARS-CoV-2 hyperimmune immunoglobulin G (IgG) derived from a large pool of plasma may be effective against various isolates of SARS-CoV-2 in patients with COVID-19 without the risk of adverse events possible with plasma transfusion.
Известны следующие способы получения иммуноглобулина G из плазмы крови.The following methods are known for obtaining immunoglobulin G from blood plasma.
Известен способ получения иммуноглобулина, раскрытый в патенте РФ на изобретение № 2372939 (опубл. 17.12.2007). Известный способ включает очистку раствора иммуноглобулина, выделенного спиртовым фракционированием по методу Кона, обработку сольвент-детергентной смесью, в качестве которой используют 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, содержащий 1 мас.% три-нбутилфосфата и 1 мас.% полисорбата 80 при перемешивании, с последующим разбавлением 0,05 М ацетатным буферным раствором при рН 5,5, содержащим 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л, после чего иммуноглобулин иммобилизируют на сульфопропилкатионитном сорбенте и осуществляют промывание в две стадии с помощью колоночной хроматографии с последующей элюцией, причем на первой стадии промывания используют 0,05 М ацетатный буферный раствор при рН 5,5, содержащий 1 мас.% октаноата натрия, 0,15 М хлорида натрия и пропиленгликоль в концентрации 0,2 г/л.There is a known method for producing immunoglobulin, disclosed in the Russian Federation patent for invention No. 2372939 (published on December 17, 2007). The known method involves purification of an immunoglobulin solution isolated by alcohol fractionation using the Cohn method, treatment with a solvent-detergent mixture, which uses a 0.05 M acetate buffer solution at pH 5.5, containing 1 wt.% tri-nbutyl phosphate and 1 wt.% polysorbate 80 with stirring, followed by dilution with a 0.05 M acetate buffer solution at pH 5.5 containing 1 wt.% sodium octanoate, 0.15 M sodium chloride and propylene glycol at a concentration of 0.2 g/l, after which the immunoglobulin is immobilized on a sulfopropyl cation exchanger sorbent and washing is carried out in two stages using column chromatography followed by elution, and in the first stage of washing a 0.05 M acetate buffer solution is used at pH 5.5, containing 1 wt.% sodium octanoate, 0.15 M sodium chloride and propylene glycol at a concentration of 0.2 g/l.
Известен способ очистки иммуноглобулина, раскрытый в патенте РФ на изобретение № 2332247 (опубл. 01.06.2007). Известный способ включает ее растворение в буферном растворе, вирусную сольвент-детергентную инактивацию и хроматографическую очистку, осуществляемую путем пропускания раствора через систему из трех последовательно соединенных колонок, заполненных анионитом, гидрофобным сорбентом и катионитом, соответственно, с промывкой системы колонок, элюированием иммуноглобулина с катионита буферным раствором, и направлением на регенерацию анионита и гидрофобного сорбента.There is a known method for purifying immunoglobulin, disclosed in the Russian Federation patent for invention No. 2332247 (published on June 1, 2007). The known method includes its dissolution in a buffer solution, viral solvent-detergent inactivation and chromatographic purification, carried out by passing the solution through a system of three series-connected columns filled with an anion exchanger, a hydrophobic sorbent and a cation exchanger, respectively, with washing the column system, elution of the immunoglobulin from the cation exchanger with a buffer solution, and direction for regeneration of anion exchanger and hydrophobic sorbent.
Известен способ хроматографического выделения иммуноглобулина, раскрытый в патенте РФ на изобретение № 2467783 (опубл. 27.11.2012) - прототип. Известный способ включает растворение в буферном растворе белковой фракции плазмы крови, в качестве которой используют осадок А спиртового фракционирования плазмы крови по Кону. Производят предварительную очистку полученного раствораThere is a known method for the chromatographic isolation of immunoglobulin, disclosed in the Russian Federation patent for invention No. 2467783 (published on November 27, 2012) - prototype. The known method involves dissolving the protein fraction of blood plasma in a buffer solution, for which precipitate A of the alcohol fractionation of blood plasma according to Cohn is used. Preliminary purification of the resulting solution is carried out
- 1 044535 в двух последовательно соединенных колонках, заполненных гидрофобным сорбентом и анионитом, соответственно, с последующим пропусканием через упомянутые две колонки буферного раствора. После сбора предварительно очищенной жидкой фракции, содержащей иммуноглобулин, ее направляют на вирусную сольвент-детергентную инактивацию, а затем на хроматографическую очистку, осуществляемую в системе из трех последовательно соединенных колонок, заполненных анионитом, гидрофобным сорбентом и катионитом, соответственно. Проводят элюирование иммуноглобулина с колонки, заполненной катионитом, а колонки с анионитом и гидрофобным сорбентом направляют на регенерацию.- 1 044535 in two columns connected in series, filled with a hydrophobic sorbent and an anion exchanger, respectively, followed by passing a buffer solution through the two columns. After collecting the pre-purified liquid fraction containing immunoglobulin, it is sent for viral solvent-detergent inactivation, and then for chromatographic purification, carried out in a system of three series-connected columns filled with an anion exchanger, a hydrophobic sorbent and a cation exchanger, respectively. The immunoglobulin is eluted from a column filled with a cation exchanger, and columns with an anion exchanger and a hydrophobic sorbent are sent for regeneration.
Общими недостатками известных аналогов являются сравнительно невысокая чистота полученного препарата иммуноглобулина G, а также отсутствие специализированных технологических стадий и режимов производства иммуноглобулина, связанных с использованием в качестве сырья плазмы крови, содержащей антитела к вирусу SARS-CoV-2.The general disadvantages of the known analogues are the relatively low purity of the resulting immunoglobulin G preparation, as well as the lack of specialized technological stages and regimes for the production of immunoglobulin associated with the use of blood plasma containing antibodies to the SARS-CoV-2 virus as a raw material.
Раскрытие сущности изобретенияDisclosure of the invention
Техническая задача, положенная в основу настоящего изобретения, заключается в создании эффективного технологического процесса производства высокоочищенного вирусбезопасного иммуноглобулина G против COVID-19.The technical problem underlying the present invention is to create an effective technological process for the production of highly purified virus-safe immunoglobulin G against COVID-19.
Технический результат заключается в получении иммуноглобулина G против COVID-19.The technical result consists in obtaining immunoglobulin G against COVID-19.
В качестве изобретения заявлен способ получения иммуноглобулина G против COVID-19, включающий отбор плазмы доноров, спиртовое фракционирование плазмы с получением осадка II+III по Кону, растворение полученного осадка II+III в буферном растворе, вирусную сольвент-детергентную инактивацию и хроматографическую очистку. В отличие от прототипа в качестве плазмы доноров используют плазму, содержащую антитела к вирусу SARS-CoV-2, с коэффициентом позитивности более 2, установленным с использованием метода твердофазного иммуноферментного анализа при помощи тестсистем, для которых коэффициент корреляции между результатами определения содержания антител методом ИФА с активностью, установленной в реакции вируснейтрализации, составляет не менее 0,9, причем раствор элюата после хроматографической очистки подвергают противовирусной фильтрации, концентрированию, диафильтрации и финальному концентрированию, после чего полученный раствор иммуноглобулина подвергают стерилизующей фильтрации и выдерживают при рН 4,0-4,5 и температуре 37±1°C в течение 24-48 ч.The invention claims a method for producing immunoglobulin G against COVID-19, including selection of donor plasma, alcohol fractionation of plasma to obtain precipitate II+III according to Cohn, dissolution of the resulting precipitate II+III in a buffer solution, viral solvent-detergent inactivation and chromatographic purification. In contrast to the prototype, plasma containing antibodies to the SARS-CoV-2 virus is used as donor plasma, with a positivity coefficient of more than 2, established using the enzyme-linked immunosorbent assay method using test systems for which the correlation coefficient between the results of determining the antibody content by ELISA with the activity established in the virus neutralization reaction is at least 0.9, and the eluate solution after chromatographic purification is subjected to antiviral filtration, concentration, diafiltration and final concentration, after which the resulting immunoglobulin solution is subjected to sterilizing filtration and maintained at pH 4.0-4.5 and temperature 37±1°C for 24-48 hours.
Настоящее изобретение проиллюстрировано таблицей, в которой представлены показатели специфической активности иммуноглобулина против COVID-19 в отношении различных штаммов SARS-CoV-2.The present invention is illustrated by a table showing the specific activity of immunoglobulin against COVID-19 against various strains of SARS-CoV-2.
В настоящее время согласно временным методическим рекомендациям Профилактика, диагностика и лечение новой коронавирусной инфекции (COVID-19) для прямого переливания используют плазму, содержащую нейтрализующие SARS-CoV-2 антитела в концентрации, оцененной в реакции вируснейтрализации (РВН) с титром не менее 1/160.Currently, according to temporary guidelines for the Prevention, Diagnosis and Treatment of a New Coronavirus Infection (COVID-19), plasma containing SARS-CoV-2 neutralizing antibodies in a concentration assessed in a virus neutralization reaction (VNR) with a titer of at least 1/ is used for direct transfusion. 160.
Для определения содержания нейтрализующих SARS CoV-2 антител в образцах плазмы человека используется классический метод определения титра вируснейтрализующих антител (ВНА) - реакция вируснейтрализации (РВН). Применительно к SARS-CoV-2 (Патоген II группы) использование РВН является достаточно трудоемким и сложным методом, требующим наличия специальной лаборатории, обладающей соответствующей лицензией и позволяющей работать с патогенами II группы и, конкретно, с коронавирусами. Это не позволяет применять метод определения титра ВНА массово.To determine the content of SARS CoV-2 neutralizing antibodies in human plasma samples, a classic method is used to determine the titer of virus neutralizing antibodies (VNA) - the virus neutralization reaction (VRN). In relation to SARS-CoV-2 (Group II Pathogen), the use of RVN is a rather labor-intensive and complex method, requiring a special laboratory that has the appropriate license and allows working with Group II pathogens and, specifically, coronaviruses. This does not allow the method of determining the BNA titer to be used en masse.
Преимущество использования предлагаемого способа получения иммуноглобулина против COVID19 заключается в том, что трудоемкий, дорогостоящий и длительный по исполнению метод РВН заменен на более простой и рутинный аналитический метод - твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА), который позволяет проводить тестирование большого количества образцов плазмы в короткое время лабораториям любых организаций, занятых заготовкой плазмы, что существенно упрощает процедуру отбора плазмы и расширяет сырьевую базу, поскольку при производстве препарата иммуноглобулина человека используют крупные пулы, состоящие из более чем 1000 образцов плазмы человека.The advantage of using the proposed method for obtaining immunoglobulin against COVID19 is that the labor-intensive, expensive and time-consuming RVN method is replaced by a simpler and more routine analytical method - enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), which allows laboratories to test a large number of plasma samples in a short time any organizations involved in plasma procurement, which significantly simplifies the plasma selection procedure and expands the raw material base, since large pools consisting of more than 1000 human plasma samples are used in the production of human immunoglobulin.
В результате исследования образцов методом ИФА в плазме крови установлены пороговые значения количества антител к SARS-CoV-2: коэффициент позитивности (КП) не менее 2,0 или титр не менее 20 АКЕ/мл (за 1 единицу АКЕ (антиковидная единица) образца принята величина, обратная его титру вирус нейтрализующих антител (ВНА)), которые соответствуют ВНА в РВН 1/20.As a result of the study of samples using the ELISA method, threshold values for the amount of antibodies to SARS-CoV-2 were established in the blood plasma: a positivity rate (PF) of at least 2.0 or a titer of at least 20 AKE/ml (1 AKE unit (anti-Covid unit) of the sample is accepted the reciprocal of its titer of virus neutralizing antibodies (VNA)), which correspond to VNA in RVN 1/20.
При использовании иммуноглобулинов для внутривенного введения при терапии COVID-19 исключаются риски, связанные с переливанием плазмы, такие как заражение гемотрансмиссивными инфекциями, реакции, связанные с несовместимостью донорской крови и крови реципиента (АВОнесовместимая трансфузия), анафилактические реакции, сердечная недостаточность и отек легких, вызванные большим объемом перелитой плазмы и т.д. Помимо этого в плазме не контролируется содержание иммуноглобулина А, цитокинов, факторов свертывания крови и других молекул, которые могут ухудшить состояние пациента-реципиента.When using immunoglobulins for intravenous administration in the treatment of COVID-19, the risks associated with plasma transfusion, such as infection with blood-borne infections, reactions associated with incompatibility of donor blood and recipient blood (ABO-incompatible transfusion), anaphylactic reactions, heart failure and pulmonary edema caused by large volume of transfused plasma, etc. In addition, the plasma content of immunoglobulin A, cytokines, blood clotting factors and other molecules that can worsen the condition of the recipient patient is not controlled.
Преимущества использования предлагаемого способа получения иммуноглобулина против COVID19 заключаются также в обеспечении вирусной безопасности готового препарата путем включения в производственный процесс нескольких ортогональных стадий, направленных на инактивацию и/или удаление вирусов (обработка смесью сольвент/детергента, противовирусная фильтрация, выдерживание приThe advantages of using the proposed method for producing immunoglobulin against COVID19 also lie in ensuring the viral safety of the finished drug by including in the production process several orthogonal stages aimed at inactivating and/or removing viruses (treatment with a solvent/detergent mixture, antiviral filtration, exposure to
- 2 044535 низких значениях рН), кроме того стадии спиртового фракционирования и хроматографической очистки также вносят вклад в инактивацию и/или удаление вирусов, в результате чего достигается снижение вирусной нагрузки на более 10 log для оболочечных и более 5 log для безоболочечных вирусов (при требовании ВОЗ - не менее 4 log). Плазма для переливания обрабатывается только патогенредуцирующими агентами и облучением ультрафиолетовым светом.- 2 044535 low pH values), in addition, alcohol fractionation and chromatographic purification steps also contribute to the inactivation and/or removal of viruses, resulting in a reduction in viral load of more than 10 log for enveloped and more than 5 log for non-enveloped viruses (if required WHO - at least 4 log). Plasma for transfusion is treated only with pathogen-reducing agents and ultraviolet light irradiation.
Преимуществом использования предлагаемого способа получения иммуноглобулина против COVID-19 является также то, что в процессе производства иммуноглобулина происходит концентрирование антител в 6-22 раза по сравнению с исходной плазмой, поэтому возможно использовать сырье с титром РВН 1/20, которое не используется для прямого переливания, что существенно расширяет сырьевую базу.The advantage of using the proposed method for producing immunoglobulin against COVID-19 is also that during the production of immunoglobulin, antibodies are concentrated 6-22 times compared to the original plasma, so it is possible to use raw materials with a titer of RVN 1/20, which is not used for direct transfusion , which significantly expands the raw material base.
Преимущества использования концентрированного иммуноглобулина для лечения COVID-19 заключается в высоком и точном содержании nAb и, что более важно, в их разнообразии. Высококонцентрированный иммуноглобулин может обеспечивать более широкий диапазон противовирусной активности по сравнению с плазмой за счет взаимодействия с различными эпитопами коронавируса и активации различных клеточных механизмов, а нейтрализующие антитела против всех циркулирующих штаммов вирусов всегда присутствуют в конечном продукте (табл. 1).The advantage of using concentrated immunoglobulin for the treatment of COVID-19 is the high and precise content of nAbs and, more importantly, their diversity. Highly concentrated immunoglobulin can provide a wider range of antiviral activity compared to plasma due to interaction with various coronavirus epitopes and activation of various cellular mechanisms, and neutralizing antibodies against all circulating viral strains are always present in the final product (Table 1).
Результаты проведенных испытаний препарата показали, что иммуноглобулин против COVID-19, полученный согласно заявляемому способу, безопасен, не обладает тромбогенным действием, содержит в 1 мл специфических антител к SARS-CoV-2 минимум в 8 раз больше по сравнению с исходной плазмой и защищает животных от летальной инфекции, вызванной SARS-CoV-2, у сирийских хомяков с индуцированным иммунодефицитом при заражении вирусом в дозе 101 TCID50 на животное: 40-дневная выживаемость животных в группе препарата КОВИД-глобулин при введении за 24 ч до заражения составила 66,6%, при введении через 2 ч после заражения - 100%, при введении через 48 ч после заражения - 87,5%. Кроме того, иммуноглобулин против COVID-19, полученный из пула плазмы, включающего более 1000 донаций, эффективен против различных циркулирующих штаммов SARS-CoV-2.The results of tests of the drug showed that the immunoglobulin against COVID-19, obtained according to the claimed method, is safe, does not have a thrombogenic effect, contains at least 8 times more specific antibodies to SARS-CoV-2 in 1 ml compared to the original plasma and protects animals from a lethal infection caused by SARS-CoV-2 in Syrian hamsters with induced immunodeficiency when infected with the virus at a dose of 101 TCID 50 per animal: the 40-day survival of animals in the COVID-globulin group when administered 24 hours before infection was 66.6 %, when administered 2 hours after infection - 100%, when administered 48 hours after infection - 87.5%. In addition, COVID-19 immune globulin, obtained from a plasma pool of more than 1,000 donations, is effective against various circulating strains of SARS-CoV-2.
Описание осуществления изобретенияDescription of the invention
Пример 1.Example 1.
Заготовку, хранение и транспортировку антиковидной плазмы осуществляют в соответствии с требованиями, установленными постановлением Правительства Российской Федерации от 22 июня 2019 г. № 797 Об утверждении Правил заготовки, хранения, транспортировки и клинического использования донорской крови и ее компонентов и о признании утратившими силу некоторых актов Правительства Российской Федерации, приказом Министерства здравоохранения Российской Федерации от 28.10.2020 № 183н 1166н Об утверждении порядка прохождения донорами медицинского обследования и перечня медицинских противопоказаний (временных и постоянных) для сдачи крови и (или) ее компонентов и сроков отвода, которому подлежит лицо при наличии временных медицинских показаний, от донорства крови и (или) ее компонентов.The procurement, storage and transportation of anti-Covid plasma is carried out in accordance with the requirements established by Decree of the Government of the Russian Federation of June 22, 2019 No. 797 On approval of the Rules for the procurement, storage, transportation and clinical use of donor blood and its components and on the invalidation of certain acts of the Government of the Russian Federation, by order of the Ministry of Health of the Russian Federation dated October 28, 2020 No. 183n 1166n On approval of the procedure for donors to undergo a medical examination and the list of medical contraindications (temporary and permanent) for donating blood and (or) its components and the timing of withdrawal to which a person is subject if there are temporary medical indications, from donation of blood and (or) its components.
Отбор осуществляют методом плазмафереза и (или) методом центрифугирования из единицы крови.Selection is carried out by plasmapheresis and (or) centrifugation from a unit of blood.
Помимо установленных обязательных требований отбор доноров осуществляют по результатам предварительного исследования на наличие IgG к SARS-CoV-2, с помощью иммуноферментных (иммунохемилюминесцентных) тест-систем, зарегистрированных в установленном порядке и разрешенных к использованию на территории Российской Федерации, для которых экспериментально установлена корреляция (коэффициент корреляции более 0,9) между результатами определения содержания антител в плазме с вируснейтрализующей активностью, определенной в реакции вируснейтрализации.In addition to the established mandatory requirements, the selection of donors is carried out based on the results of a preliminary study for the presence of IgG to SARS-CoV-2, using immunoenzyme (immunochemiluminescent) test systems registered in the prescribed manner and approved for use in the Russian Federation, for which a correlation has been experimentally established ( correlation coefficient of more than 0.9) between the results of determining the content of antibodies in plasma with virus neutralizing activity determined in the virus neutralization reaction.
В качестве сырья для получения иммуноглобулина против COVID-19 используют плазму доноров, содержащую антитела к вирусу SARS-CoV-2 с коэффициентом позитивности (КП) не менее 2 (титром не менее 20 АКЕ/мл), установленным методом ИФА.As a raw material for the production of immunoglobulin against COVID-19, donor plasma containing antibodies to the SARS-CoV-2 virus with a positivity coefficient (PF) of at least 2 (titer of at least 20 AKE/ml), established by the ELISA method, is used.
350 л антиковидной плазмы загружают в реактор и проводят фракционирование плазмы крови по Кону до осадка II+III, после чего получают 18,0 кг осадка II+III. Полученный осадок II+III растворяют в натрий-ацетатном буферном растворе. Затем раствор подвергают вирусной сольвент-детергентной инактивации в присутствии смеси вирусинактивирующих агентов (сольвент-детергента), в качестве которых используют Твин-80 и трибутилфосфат. Вирусинактивированный раствор направляют на хроматографическую очистку, в процессе которой раствор пропускают через три последовательно соединенные хроматографические колонны, заполненные соответственно гидрофобным, анионообменным и катионообменным сорбентом.350 liters of anti-Covid plasma are loaded into the reactor and the blood plasma is fractionated according to Cohn to sediment II+III, after which 18.0 kg of sediment II+III is obtained. The resulting precipitate II+III is dissolved in sodium acetate buffer solution. Then the solution is subjected to viral solvent-detergent inactivation in the presence of a mixture of virus-inactivating agents (solvent detergent), which are Tween-80 and tributyl phosphate. The virus-activated solution is sent for chromatographic purification, during which the solution is passed through three sequentially connected chromatographic columns filled, respectively, with a hydrophobic, anion-exchange and cation-exchange sorbent.
После хроматографической очистки раствор подвергают противовирусной фильтрации через систему из последовательно соединенных фильтров с задерживающим рейтингом 0,2 мкм и 20 нм. Затем проводят концентрирование и перевод в буфер готовой лекарственной формы препарата иммуноглобулина путем диафильтрации с использованием мембран тангенциальной фильтрации с пределом отсечения 30 кДа и финальное концентрирование до содержания белка 80-120 г/л. Полученный раствор подвергают стерилизующей фильтрации и проводят дополнительную инактивацию вирусов путем выдерживания раствора при низком значении рН (4,0-4,5) и температуре 37±1°C в течение 24-48 ч.After chromatographic purification, the solution is subjected to antiviral filtration through a system of series-connected filters with a retention rating of 0.2 μm and 20 nm. Then the finished dosage form of the immunoglobulin preparation is concentrated and transferred into a buffer by diafiltration using tangential filtration membranes with a cut-off limit of 30 kDa and final concentration to a protein content of 80-120 g/l. The resulting solution is subjected to sterilizing filtration and additional inactivation of viruses is carried out by keeping the solution at a low pH value (4.0-4.5) and a temperature of 37±1°C for 24-48 hours.
- 3 044535- 3 044535
В результате осуществления способа получают препарат иммуноглобулина против COVID-19 для внутривенного введения с содержанием белка 10,0%, содержанием антител к SARS-CoV-2 не менее 160As a result of the method, an immunoglobulin preparation against COVID-19 is obtained for intravenous administration with a protein content of 10.0% and an antibody content to SARS-CoV-2 of at least 160
АКЕ/мл (или 1072 BAU/мл (binding antibody units, единицы связывающих антител)), установленным методом ИФА.AKE/ml (or 1072 BAU/ml (binding antibody units)) determined by ELISA.
Пример 2.Example 2.
Заготовку, хранение и транспортировку антиковидной плазмы и отбор доноров осуществляют как в примере 1.The procurement, storage and transportation of anti-Covid plasma and the selection of donors are carried out as in example 1.
В качестве сырья для получения иммуноглобулина против COVID-19 используют плазму доноров, содержащую антитела к вирусу SARS-CoV-2 с КП не менее 4 (титром не менее 40 АКЕ/мл), установленным методом ИФА.As a raw material for the production of immunoglobulin against COVID-19, donor plasma containing antibodies to the SARS-CoV-2 virus with a CP of at least 4 (titer of at least 40 AKE/ml), established by the ELISA method, is used.
350 л антиковидной плазмы загружают в реактор и проводят фракционирование плазмы крови по Кону до осадка II+III, после чего получают 18,0 кг осадка II+III. Полученный осадок II+III растворяют в натрий-ацетатном буферном растворе. Затем раствор подвергают вирусной сольвент-детергентной инактивации в присутствии смеси вирусинактивирующих агентов (сольвент-детергента), в качестве которых используют твин-80 и трибутилфосфат. Вирусинактивированный раствор направляют на хроматографическую очистку, в процессе которой раствор пропускают через три последовательно соединенные хроматографические колонны, заполненные соответственно гидрофобным, анионообменным и катионообменным сорбентом.350 liters of anti-Covid plasma are loaded into the reactor and the blood plasma is fractionated according to Cohn to sediment II+III, after which 18.0 kg of sediment II+III is obtained. The resulting precipitate II+III is dissolved in sodium acetate buffer solution. Then the solution is subjected to viral solvent-detergent inactivation in the presence of a mixture of virus-inactivating agents (solvent detergent), which are Tween-80 and tributyl phosphate. The virus-activated solution is sent for chromatographic purification, during which the solution is passed through three sequentially connected chromatographic columns filled, respectively, with a hydrophobic, anion-exchange and cation-exchange sorbent.
После хроматографической очистки раствор подвергают противовирусной фильтрации через систему из последовательно соединенных фильтров с задерживающим рейтингом 0,2 мкм и 20 нм. Затем проводят концентрирование и перевод в буфер готовой лекарственной формы препарата иммуноглобулина путем диафильтрации с использованием мембран тангенциальной фильтрации с пределом отсечения 30 кДа и финальное концентрирование до содержания белка 80-120 г/л. Полученный раствор подвергают стерилизующей фильтрации и проводят дополнительную инактивацию вирусов путем выдерживания раствора при низком значении рН (4,0-4,5) и температуре 37±1°C в течение 24-48 ч.After chromatographic purification, the solution is subjected to antiviral filtration through a system of series-connected filters with a retention rating of 0.2 μm and 20 nm. Then the finished dosage form of the immunoglobulin preparation is concentrated and transferred into a buffer by diafiltration using tangential filtration membranes with a cut-off limit of 30 kDa and final concentration to a protein content of 80-120 g/l. The resulting solution is subjected to sterilizing filtration and additional inactivation of viruses is carried out by keeping the solution at a low pH value (4.0-4.5) and a temperature of 37±1°C for 24-48 hours.
В результате осуществления способа получают препарат иммуноглобулина против COVID-19 для внутривенного введения с содержанием белка 10,0%, содержанием антител к SARS-CoV-2 не менее 320 АКЕ/мл (или 2144 BAU/мл), установленным методом ИФА.As a result of the method, an immunoglobulin preparation against COVID-19 is obtained for intravenous administration with a protein content of 10.0%, an antibody content to SARS-CoV-2 of at least 320 AKE/ml (or 2144 BAU/ml), established by the ELISA method.
Пример 3.Example 3.
Заготовку, хранение и транспортировку антиковидной плазмы и отбор доноров осуществляют как в примере 1.The procurement, storage and transportation of anti-Covid plasma and the selection of donors are carried out as in example 1.
В качестве сырья для получения иммуноглобулина против COVID-19 используют плазму доноров, содержащую антитела к вирусу SARS-CoV-2 с КП не менее 8 (титром не менее 80 АКЕ/мл), установленным методом ИФА.As a raw material for the production of immunoglobulin against COVID-19, donor plasma containing antibodies to the SARS-CoV-2 virus with a CP of at least 8 (titer of at least 80 AKE/ml), established by the ELISA method, is used.
350 л антиковидной плазмы загружают в реактор и проводят фракционирование плазмы крови по Кону до осадка II+III, после чего получают 18,0 кг осадка II+III. Полученный осадок II+III растворяют в натрий-ацетатном буферном растворе. Затем раствор подвергают вирусной сольвент-детергентной инактивации в присутствии смеси вирусинактивирующих агентов (сольвент-детергента), в качестве которых используют Твин-80 и трибутилфосфат. Вирусинактивированный раствор направляют на хроматографическую очистку, в процессе которой раствор пропускают через три последовательно соединенные хроматографические колонны, заполненные соответственно гидрофобным, анионообменным и катионообменным сорбентом.350 liters of anti-Covid plasma are loaded into the reactor and the blood plasma is fractionated according to Cohn to sediment II+III, after which 18.0 kg of sediment II+III is obtained. The resulting precipitate II+III is dissolved in sodium acetate buffer solution. Then the solution is subjected to viral solvent-detergent inactivation in the presence of a mixture of virus-inactivating agents (solvent detergent), which are Tween-80 and tributyl phosphate. The virus-activated solution is sent for chromatographic purification, during which the solution is passed through three sequentially connected chromatographic columns filled, respectively, with a hydrophobic, anion-exchange and cation-exchange sorbent.
После хроматографической очистки раствор подвергают противовирусной фильтрации через систему из последовательно соединенных фильтров с задерживающим рейтингом 0,2 мкм и 20 нм. Затем проводят концентрирование и перевод в буфер готовой лекарственной формы препарата иммуноглобулина путем диафильтрации с использованием мембран тангенциальной фильтрации с пределом отсечения 30 кДа и финальное концентрирование до содержания белка 80-120 г/л. Полученный раствор подвергают стерилизующей фильтрации и проводят дополнительную инактивацию вирусов путем выдерживания раствора при низком значении рН (4,0-4,5) и температуре 37±1°C в течение 24-48 ч.After chromatographic purification, the solution is subjected to antiviral filtration through a system of series-connected filters with a retention rating of 0.2 μm and 20 nm. Then the finished dosage form of the immunoglobulin preparation is concentrated and transferred into a buffer by diafiltration using tangential filtration membranes with a cut-off limit of 30 kDa and final concentration to a protein content of 80-120 g/l. The resulting solution is subjected to sterilizing filtration and additional inactivation of viruses is carried out by keeping the solution at a low pH value (4.0-4.5) and a temperature of 37±1°C for 24-48 hours.
В результате осуществления способа получают препарат иммуноглобулина против COVID-19 для внутривенного введения с содержанием белка 10,0%, содержанием антител к SARS-CoV-2 не менее 640 АКЕ/мл (или 4288 BAU/мл), установленным методом ИФА.As a result of the method, an immunoglobulin preparation against COVID-19 is obtained for intravenous administration with a protein content of 10.0%, an antibody content to SARS-CoV-2 of at least 640 AKE/ml (or 4288 BAU/ml), established by the ELISA method.
--
Claims (4)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA044535B1 true EA044535B1 (en) | 2023-08-31 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| León et al. | Pathogenic mechanisms underlying adverse reactions induced by intravenous administration of snake antivenoms | |
| Vandeberg et al. | Production of anti‐SARS‐CoV‐2 hyperimmune globulin from convalescent plasma | |
| SK18662000A3 (en) | Process for producing immunoglobulins for intravenous administration and other immunoglobulin products | |
| Dixit et al. | Benefits of using heterologous polyclonal antibodies and potential applications to new and undertreated infectious pathogens | |
| EP2560691A2 (en) | Process for preparing an immunoglobulin composition | |
| Berger | A history of immune globulin therapy, from the Harvard crash program to monoclonal antibodies | |
| JP7073333B2 (en) | Process for preparing an immunoglobulin composition | |
| EP0234405B1 (en) | Use of an immunoglobulin-containing composition in the prophylaxis and therapy of AIDS of human | |
| EA044535B1 (en) | METHOD FOR OBTAINING IMMUNOGLOBULIN G AGAINST COVID-19 | |
| KR20110114555A (en) | Systems and methods for obtaining immunoglobulin from blood | |
| US20240024459A1 (en) | Method for producing an antigen corresponding to the inactivated sars-cov-2 virus, antigen corresponding to the inactivated sars-cov-2 virus, antigenic composition, kits, and uses thereof | |
| Lasocka et al. | Passive immunization in the combat against infectious diseases (COVID-19 included) | |
| Cheng et al. | Process steps for the fractionation of immunoglobulin (Ig) G depleted of IgA, isoagglutinins, and devoid of in vitro thrombogenicity | |
| RU2470664C2 (en) | Method for producing immunoglobulin for intravenous introduction of immunoglobulin m enriched preparation, and preparation prepared by such method | |
| WO2021244910A1 (en) | Hyperimmune igg and/or igm compositions and method for preparing thereof and method for obtaining hyperimmune human plasma from a donor | |
| Hofmann et al. | Protection of mice against tick-borne encephalitis by different classes of immunoglobulins | |
| RU2257916C1 (en) | Liquid preparation containing immunoglobulin efficient against marburg fever from horse blood serum (horse immunoglobulin marburg) | |
| RU2348429C2 (en) | Human antianthrax intravenous immunoglobulin | |
| JPH01135725A (en) | Production of anti-ph unstable alpha interferon antibody | |
| WO2022101666A1 (en) | Modular manufacturing unit, and components and methods for manufacturing infectious disease therapeutics using same | |
| WO2021239790A1 (en) | Method for the treatment of virus infection with ivig and convalescent plasma | |
| RU2342952C1 (en) | Preparation containing antibody against bolivian haemorragic fever from whey of blood of horses, solution for intramuscular introduction | |
| RU2561596C2 (en) | Method for producing virus-inactivated immunoglobulin solutions low in residual caprylic acid | |
| RU2264826C1 (en) | Method for obtaining antithymocytic globulin for intravenous injection | |
| RU2381037C1 (en) | Serum immunobiological preparation for emergency anthrax prevention and treatment |