EA043609B1 - ТРИЦИКЛИЧЕСКИЕ ЕНОНЫ - ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРИМИДИНА ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ RORγ И ДРУГИХ ПРИМЕНЕНИЙ - Google Patents

ТРИЦИКЛИЧЕСКИЕ ЕНОНЫ - ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРИМИДИНА ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ RORγ И ДРУГИХ ПРИМЕНЕНИЙ Download PDF

Info

Publication number
EA043609B1
EA043609B1 EA201991387 EA043609B1 EA 043609 B1 EA043609 B1 EA 043609B1 EA 201991387 EA201991387 EA 201991387 EA 043609 B1 EA043609 B1 EA 043609B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
substituted
cycloalkyl
alkyl
heteroaryl
aryl
Prior art date
Application number
EA201991387
Other languages
English (en)
Inventor
Синь Цзян
Кристофер Ф. Бендер
Мелеэн Висник
Марта Р. Хотема
Закари С. Шелдон
Читасэ Ли
Брэдли Вилльям Капрат
Гари Болтон
Брайан Корнберг
Original Assignee
Рита Фармасьютикалз, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Рита Фармасьютикалз, Инк. filed Critical Рита Фармасьютикалз, Инк.
Publication of EA043609B1 publication Critical patent/EA043609B1/ru

Links

Description

Уровень техники Область изобретения
Настоящее изобретение относится в целом к областям биологии и медицины. Более конкретно, оно относится к соединениям, композициям и способам лечения и профилактики заболеваний, таких как заболевания, связанные с RAR-связанным орфанным рецептором γ (RORy) и избыточной выработкой IL17.
Предшествующий уровень техники
Воспалительные заболевания, в частности аутоиммунные заболевания, такие как ревматоидный артрит, остеоартрит, псориаз и рассеянный склероз, часто имеют серьезные и долгосрочные нежелательные воздействия на физическое самочувствие и качество жизни пациента. У многих пациентов эти заболевания вызывают значительную недееспособность, а в некоторых случаях (например, волчанка и рассеянный склероз) они могут быть опасными для жизни. Последние достижения в возможных способах лечения, такие как разработка терапевтических антител к фактору некроза опухоли (TNF), улучшили результаты и повысили качество жизни для многих пациентов. Тем не менее, значительное количество пациентов не достигает достаточного облегчения симптомов при применении таких способов лечения или не может их переносить. Даже у пациентов, показывающих ответ на терапию, могут наблюдаться значительны побочные эффекты, которые могут быть опасны для жизни из-за подавления иммунитета или других осложнений.
Недавние исследования хронического воспаления и аутоиммунитета выявили важную роль субпопуляции Т-лимфоцитов, известных как клетки Th17. Эти клетки вырабатывают воспалительный цитокин интерлейкин 17 (IL-17). Сообщалось о чрезмерном уровне IL-17 при различных аутоиммунных заболеваниях, включая рассеянный склероз, ревматоидный артрит, псориаз, воспалительное заболевания кишечника, витилиго, синдром Шегрена и анкилозирующий спондилит (Miossec and Kolls, 2012; Yang et al., 2014; Gaffen et al., 2014). Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что IL-17 также играет значительную роль в патологии васкулита, атеросклероза и воспалительных заболеваний легких, таких как муковисцидоз и хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ). IL-17 также участвует в патофизиологии эпилепсии и нейродегенеративных заболеваний, включая болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и БАС. Повышенные уровни клеток IL-17 или Th17 были зарегистрированы у пациентов с психиатрическими и психоневрологическими состояниями, включая шизофрению, обсессивно-компульсивное расстройство, биполярное расстройство, посттравматическое стрессовое расстройство, большую депрессию и аутизм. Повышение уровня IL-17 было связано с другими состояниями, включая нарушение регуляции воспалительной передачи сигналов, включая ожирение, резистентность к инсулину и ожирение печени.
Хотя Th17-клетки не являются единственным источником IL-17, сообщалось, что эти клетки являются основным источником данного цитокина в тканях, получающих повреждения от аутоиммунного заболевания, такого как суставы с артритом. Сообщалось, что повышенные уровни IL-17 способствуют деградации ткани, например, путем стимуляции выработки матричных металлопротеиназ (источника повреждения соединительной ткани и хряща) и увеличения экспрессии рецепторного активатора лиганда NF-кВ (RANKL), который стимулирует активность остеокластов и способствует повреждению костей.
Несоответствующая активность клеток Th17, включая повышение выработки IL-17, также участвует в патологиях, связанных с некоторыми вирусными и паразитарными инфекциями. Например, IL17 был вовлечен в развитие тяжелого нейровоспаления, связанного с инфекцией Toxoplasma gondii, и был связан с повышенной тяжестью поражений, связанных с инфекцией Leishmania. В этих и других случаях IL-17, по-видимому, играет роль в сохранении инфекции, стимулировании чрезмерного воспалительного ответа и ингибировании клиренса инфекционного агента (Waite and Skokos, 2011). Соответственно, способы лечения, которые предотвращают или ингибируют избыточную выработку IL-17 или иным образом снижают циркулирующие уровни IL-17, будут иметь значительный потенциал при широком спектре заболеваний или расстройств, в том числе содержащих воспалительные и аутоиммунные компоненты.
Дифференцировка клеток Th17 и выработка ими IL-17 в значительной степени регулируются RARсвязанным орфанным рецептором RORyt, членом семейства ядерных гормональных рецепторов. Экспрессия RORyt является общей для всех типов клеток Th17 и играет значительную роль в их дифференцировке и активности. RORy также регулирует выработку IL-17 в клетках других типов, включая гаммадельта-Т-клетки, врожденные лимфоидные клетки и клетки-индукторы лимфоидной ткани (Bronner et al., 2016). Было показано, что ингибирование активности RORyt приводит к снижению экспрессии IL-17. Таким образом, идентификация и синтез низкомолекулярных ингибиторов RORyt представляет большой интерес.
- 1 043609
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к новым соединениям, включая производные пиримидинилтрициклического енона, с противовоспалительными и/или антиоксидантными свойствами, их фармацевтическим композициям и способам их применения, включая ингибирование ядерного рецептора RORy, предотвращение и лечение заболевания или расстройства, связанного с IL-17 и/или излишней выработкой IL-17.
В некоторых аспектах настоящее изобретение предоставляет соединения формулы
где связь между атомами углерода 1 и 2 представляет собой одинарную связь, эпоксидированную двойную связь или двойную связь;
связь между атомами углерода 4 и 5 представляет собой одинарную связь или двойную связь;
а равно 0, 1 или 2;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино, алкиламино(с<8), диалкиламинO(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород или алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкандиил(c<8)-циклоалкил(c<12) или замещенный вариант этой группы;
R2' отсутствует или представляет собой водород, алкиЛ(C<12), циклоалкил(с<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант этих групп;
при условии, что, когда связь между атомами углерода 4 и 5 представляет собой двойную связь, R2' отсутствует;
R3 представляет собой алкиЛ(C<12), ариЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп;
R4 представляет собой амино, циклоалкил(с<18), замещенный циклоалкил(с<18), ариЛ(C<18), замещенный арил(с<18), гетероарил(с<18), замещенный гетероарил(C<18), гетероциклоалкил(C<18), замещенный гетероциклоалкиЛ(C<18), амидO(C<18), замещенный амидO(C<18) или где n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-Х2- (CH2)P-R4';
где Х2 представляет собой арендииЛ(C<12), замещенный арендииЛ(C<12), гетероциклоалкандииЛ(C<12), замещенный гетероциклоалкандиил(C<12), гетероарендиил(C<12) или замещенный гетероарендиил(C<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4' представляет собой алкил(C<8), циклоалкил(C<8), арил(C<8), гетероарил(C<8), гетероциклоалкил(C<8), ацил(C<8), амидO(C<8), алкокси(C<8), ацилокси(C<8), -С(О)-алкокси(C<8), -С(О)-алкиламинO(C<8), -С(О)диалкиламино(с<8), алкилсульфонил(с<8), арилсульфониЛ(C<8), алкоксисульфониЛ(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(O)2C6H4CH3, изопропокси или алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), циклоалкоксИ(C<12), ариЛ(C<12), аралкиЛ(C<12), гетероариЛ(C<12), гетероциклоалкиЛ(C<12), ациЛ(C<12), ацилоксИ(C<12), алкиламинO(C<12), диалкиламинO(C<12), алкилсульфониламинO(C<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-OYi-Ai/ где Y1 представляет собой алкандиил(с<8) или замещенный алкандиил^^;
A1 представляет собой циклоалкил(с<8) или замещенный циклоалкил(с<8); или
-Y2-C (0)NRc-A2;
где Y2 представляет собой арендииЛ(C<8) или замещенный арендииЛ(C<8);
Rc представляет собой водород, алкиЛ(C<6) или замещенный алкиЛ(C<6);
А2 представляет собой аралкиЛ(C<12) или замещенный аралкиЛ(C<12);
при условии, что, когда атомы углерода 4 и 5 соединены двойной связью, R2' и атом водорода у атома углерода 5 отсутствуют;
где термин замещенный при использовании для модификации любой группы означает, что один
- 2 043609 или более атомов водорода на этой группе были независимо заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2,
-CO2H, -C(O)H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2,
-C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -OC(O)CH3, -NHC(O)CH3, -S(O)2CH3, -S(O)2OH или -S(O)2NH2;
где термин арил относится к одновалентной ароматической группе с ароматическим атомом углерода в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода образует часть одной или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет шесть кольцевых атомов, все из которых представляют собой углерод, и при этом группа не состоит из атомов, кроме углерода и водорода;
термин арендиил относится к двухвалентной ароматической группе с двумя ароматическими атомами углерода в качестве точек присоединения, при этом указанные атомы углерода образуют часть одной или нескольких шестичленных ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет шесть кольцевых атомов, все из которых представляют собой углерод, и где двухвалентная группа не состоит из атомов, кроме углерода и водорода;
термин гетероарил относится к одновалентной ароматической группе с ароматическим атомом углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота образует часть одной или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая кольцевая структура имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по меньшей мере один из кольцевых атомов ароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и где гетероарильная группа не состоит ни из каких атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы;
термин гетероарендиил относится к двухвалентной ароматической группе с двумя ароматическими атомами углерода, двумя ароматическими атомами азота или одним ароматическим атомом углерода и одним ароматическим атомом азота в качестве двух точек присоединения, причем указанные атомы образуют часть одного или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по крайней мере один из кольцевых атомов ароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и двухвалентная группа не содержит атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы;
термин гетероаралкил относится к одновалентной группе -алкандиил-гетероарил, в которой каждый из терминов алкандиил и гетероарил используется в соответствии с определениями, приведенными выше;
термин гетероциклоалкил относится к одновалентной неароматической группе с атомом углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота образует часть одной или нескольких неароматических кольцевых структур, причем каждая кольцевая структура имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и где гетероциклоалкильная группа не содержит атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы; и термин гетероциклоалкандиил относится к двухвалентной циклической группе с двумя атомами углерода, двумя атомами азота или одним атомом углерода и одним атомом азота в качестве двух точек присоединения, причем указанные атомы образуют часть одной или нескольких кольцевых структур, где по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и где двухвалентная группа не содержит атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы; или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых аспектах настоящее изобретение предоставляет соединения формулы где связь между атомами углерода 1 и 2 представляет собой одинарную связь, эпоксидированную двойную связь или двойную связь;
связь между атомами углерода 4 и 5 представляет собой одинарную связь или двойную связь;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино, алкиламинO(C<8), диалкиламинO(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород или алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкандииЛ(С<8)-циклоалкиЛ(C<12) или замещенный вариант этой группы;
- 3 043609
R2' отсутствует или представляет собой водород, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант последних четырех групп;
при условии, что, когда связь между атомами углерода 4 и 5 представляет собой двойную связь, R2' отсутствует;
R3 представляет собой алкиЛ(C<12), ариЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп;
R4 представляет собой амино, циклоалкиЛ(C<18), замещенный циклоалкиЛ(C<18), ариЛ(C<18), гетероариЛ(C<18), замещенный гетероариЛ(C<18), гетероциклоалкиЛ(C<18), замещенный гетероциклоалкиЛ(С<18), амидO(C<18), замещенный амидO(C<18) или где n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-Х2- (CH2)p-R4';
где Х2 представляет собой арендииЛ(С<12), замещенный арендииЛ(С<12), гетероциклоалкандииЛ(С<12), замещенный гетероциклоалкандииЛ(С<12), гетероарендииЛ(С<12) или замещенный гетероарендииЛ(С<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4”’ представляет собой алкиЛ(С<8), циклоалкиЛ(С<8), ариЛ(С<8), гетероариЛ(С<8), гетероциклоалкиЛ(С<8), ациЛ(C<8), амидO(C<8), алкокси(С<8), ацилокси(С<8), -С(О)-алкокси(С<8), -С(О)-алкиламино(С<8), -С(О)диалкиламинO(C<8), алкилсульфониЛ(С<8), арилсульфониЛ(С<8), алкоксисульфониЛ(С<12) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(O)2C6H4CH3, изопропокси, алкиЛ(С<12), циклоалкиЛ(С<12), циклоалкоксИ(C<12), ариЛ(C<12), аралкиЛ(C<12), гетероариЛ(C<12), гетероциклоалкиЛ(C<12), ациЛ(С<12), ацилоксИ(С<12), алкиламинO(C<12), диалкиламинO(C<12), алкилсульфониламинO(C<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-ΟΥι-Αι; где Y1 представляет собой алкандииЛ(C<8) или замещенный алкандииЛ(C<8);
А1 представляет собой циклоалкил^^ или замещенный циклоалкиЛ(C<8); или
-Y2-C (O)NRC-A2;
где Y2 представляет собой арендииЛ(C<8) или замещенный арендииЛ(C<8);
Rc представляет собой водород, алкиЛ(C<6) или замещенный алкиЛ(C<6);
А2 представляет собой аралкиЛ(C<12) или замещенный аралкиЛ(C<12);
при условии, что, когда атомы углерода 4 и 5 соединены двойной связью, R2' и атом водорода у атома углерода 5 отсутствуют; или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых аспектах настоящее изобретение предоставляет соединения формулы
где связь между атомами углерода 1 и 2 представляет собой одинарную связь, эпоксидированную двойную связь или двойную связь;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино, алкиламинO(C<8), диалкиламинO(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород или алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкандииЛ(C<8)-циклоалкиЛ(C<12) или замещенный вариант этой группы;
R2' представляет собой водород, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант последних трёх групп;
R3 представляет собой алкиЛ(C<12), ариЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп;
R4 представляет собой амино, циклоалкиЛ(C<18), замещенный циклоалкиЛ(C<18), ариЛ(C<18), замещенный ариЛ(C<18), гетероариЛ(C<18), замещенный гетероариЛ(C<18), гетероциклоалкиЛ(C<18), замещенный гетероциклоалкиЛ(C<18), амидO(C<18), замещенный амидO(C<18) или где n равно 0, 1 или 2; и
- 4 043609
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-Х2- (CH2)p-R4';
где Х2 представляет собой арендииЛ(C<12), замещенный арендииЛ(C<12), гетероциклоалкандиил(с<12), замещенный гетероциклоалкандииЛ(C<12), гетероарендииЛ(C<12) или замещенный гетероарендииЛ(C<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4''' представляет собой алкиЛ(C<8), циклоαлкиЛ(C<8), ариЛ(C<8), гетероариЛ(C<8), гетероциклоалкиЛ(C<8), ациЛ(C<8), амидO(C<8), алкоксИ(C<8), ацилоксИ(C<8), -С(О)-алкоксИ(C<8), -С(О)-алкиламинO(C<8), -С(О)диалкиламинO(C<8), алкилсульфонил(с<8), арилсульфониЛ(C<8), алкоксисульфониЛ(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(O)2C6H4CH3, изопропокси, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), циклоалкоксИ(C<12), ариЛ(C<12), арαлкиЛ(C<12), гетероариЛ(C<12), гетероциклоалкил(с<12), ациЛ(C<12), ацилокcU(C<12), αлкиламинO(C<12), диалкиламинO(C<12), алкилсульфониламинO(C<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-0Υ!-Αι; где Y 1 представляет собой алкαндииЛ(C<8) или замещенный алкандииЛ(C<8);
A1 представляет собой циклоалкиЛ(C<8) или замещенный циклоалкиЛ(C<8); или
-Y2-C (0)NRc-A2;
где Y2 представляет собой арендииЛ(C<8) или замещенный арендииЛ(C<8);
Rc представляет собой водород, алкил(C<6) или замещенный алкил(C<6);
А2 представляет собой аралкиЛ(C<12) или замещенный аралкиЛ(C<12); или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых аспектах настоящее изобретение предоставляет соединения формулы
где связь между атомами углерода 1 двойную связь или двойную связь;
и 2 представляет собой одинарную связь, эпоксидированную
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино или алкиламинO(C<8), диалкиламинO(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород или алкиЛ(C<12), циклоалкил (C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкандиил(с<8)-циклоалкил(с<12) или замещенный вариант этой группы;
R3 представляет собой алкиЛ(C<12), ариЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп;
R4 представляет собой амино, циклоαлкил(C<18), замещенный циклоалкил(C<18), арил(C<18), замещенный ариЛ(C<18), гетероарил (C<18), замещенный гетероариЛ(C<18), гетероциклоалкиЛ(C<18), замещенный гетероциклоалкиЛ(C<18), амидO(C<18), замещенный амидO(C<18) или
Ж .
где n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-х2-(сн2) p-R/;
где Х2 представляет собой арендииЛ(C<12), замещенный арендииЛ(C<12), гетероциклоалкандиил(с<12), замещенный гетероциклоалкандииЛ(C<12), гетероарендииЛ(C<12) или замещенный гетероарендиил^^;
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4''' представляет собой алкиЛ(C<8), циклоαлкиЛ(C<8), ариЛ(C<8), гетероариЛ(C<8), гетероциклоалкиЛ(C<8), ациЛ(C<8), амидO(C<8) алкоксИ(C<8), ацилоксИ(C<8), -С(О)-αлкоксИ(C<8), -С(О)-алкиламинO(C<8), -С(О)диалкиламино (C<8), алкилсульфонил(с<8), арилсульфониЛ(C<8), алкоксисульфониЛ(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(O)2C6H4CH3, изопропокси, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), циклоалкокси(C<12), ариЛ(C<12), аралкиЛ(C<12), гетероариЛ(C<12), гетероциклоалкил(с<12), ациЛ(C<12), ацилоксИ(С<12), алкиламинO(C<12), диалкиламинO(C<12), алкилсульфониламинO(C<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-0Υι-Αι;
- 5 043609 где Y 1 представляет собой алкандииЛ(С<8) или замещенный алкандииЛ(С<8);
A1 представляет собой циклоалкиЛ(С<8) или замещенный циклоалкиЛ(С<8); или
- Y2-C (О) NRC-A2;
где Y2 представляет собой арендиил(С<8) или замещенный арендиил(С<8);
Rc представляет собой водород, алкиЛ(С<6) или замещенный алкиЛ(С<6);
А2 представляет собой аралкил(С<12) или замещенный аралкил(С<12); или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых аспектах настоящее изобретение предоставляет соединения формулы
где связь между атомами углерода 1 и 2 представляет собой одинарную связь, эпоксидированную двойную связь или двойную связь;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино или алкиламино(С<8), диалкиламино(С<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород или алкиЛ(С<12), циклоалкиЛ(С<12), алкениЛ(С<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкандииЛ(С<8)-циклоалкиЛ(С<12) или замещенный вариант этой группы;
R4 представляет собой амино, циклоалкиЛ(С<18), замещенный циклоалкиЛ(С<18), ариЛ(С<18), замещенный ариЛ(С<18), гетероарил (С<18), замещенный гетероариЛ(С<18), гетероциклоалкиЛ(С<18), замещенный гетероциклоалкиЛ(С<18), амидо(С<18), замещенный амидо(С<18) или где n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
- Х2- (CH2)p-R4';
где Х2 представляет собой арендииЛ(С<12), замещенный арендииЛ(С<12), гетероциклоалкандииЛ(С<12), замещенный гетероциклоалкандиил(С<12), гетероарендиил(С<12) или замещенный гетероарендиил(С<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4”' представляет собой алкиЛ(С<8), циклоалкиЛ(С<8), ариЛ(С<8), гетероариЛ(С<8), гетероциклоалкиЛ(С<8), ациЛ(C<8), амидO(C<8), алкокси(С<8), ацилоксИ(C<8), -С(О)-алкокси(С<8), -С(О)-алкиламино(С<8), -С(О)диалкиламинO(C<8), алкилсульфониЛ(C<8), арилсульфониЛ(C<8), алкоксисульфониЛ(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(Q)2C6H4CH3, изопропокси, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(С<12), циклоалкоксИ(C<12), ариЛ(С<12), аралкиЛ(С<12), гетероариЛ(С<12), гетероциклоалкиЛ(С<12), ациЛ(С<12), ацилокси(С<12), алкиламино(С<12), диалкиламино(С<12), алкилсульфониламино(С<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-ΟΥι-Αι; где Y 1 представляет собой алкандииЛ(С<8) или замещенный алкандииЛ(С<8);
A1 представляет собой циклоалкиЛ(С<8) или замещенный циклоалкиЛ(С<8); или
- Y2-C (О) nrc-a2;
где Y2 представляет собой арендииЛ(С<8) или замещенный арендииЛ(С<8);
Rc представляет собой водород, алкил(С<6) или замещенный алкил(С<6);
А2 представляет собой аралкиЛ(С<12) или замещенный аралкиЛ(С<12);
или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых аспектах настоящее изобретение предоставляет соединения формулы
- 6 043609
где R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино или алкиламинощ<8), диалкиламинощ<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород или алкиЛ(C<12), циклоалкил (C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкандииЛ(C<8)-циклоалкиЛ(C<12) или замещенный вариант этой группы;
R4 представляет собой амино, циклоалкиЛ(C<18), замещенный циклоалкиЛ(C<18), ариЛ(C<18), замещенный арил(C<18), гетероарил(C<18), замещенный гетероарил(C<18), гетероциклоалкил(C<18), замещенный гетероциклоалкиЛ(C<18), амидO(C<18), замещенный амидO(C<18) или где n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-Х2- (CH2)p-R4';
где Х2 представляет собой арендииЛ(C<12), замещенный арендииЛ(C<12), гетероциклоалкандииЛ(C<12), замещенный гетероциклоалкандииЛ(C<12), гетероарендииЛ(C<12) или замещенный гетероарендииЛ(C<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4''' представляет собой алкиЛ(C<8), циклоалкиЛ(C<8), ариЛ(C<8), гетероариЛ(C<8), гетероциклоалкиЛ(C<8), ациЛ(C<8), амидO(C<8), алкоксИ(C<8), ацилоксИ(C<8), -С(О)-алкоксИ(C<8), -С(О)-алкиламинO(C<8), -С(О)диалкиламинO(C<8), алкилсульфониЛ(C<8), арилсульфониЛ(C<8), алкоксисульфониЛ(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(O)2C6H4CH3, изопропокси, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), циклоалкоксИ(C<12), ариЛ(C<12), аралкиЛ(C<12), гетероариЛ(C<12), гетероциклоалкиЛ(C<12), ациЛ(C<12), ацилоксИ(С<12), алкиламинO(C<12), диалкиламинO(C<12), алкилсульфониламинO(C<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-ΟΥχ-Αχ;
где Y1 представляет собой алкандииЛ(C<8) или замещенный алкандииЛ(C<8);
А1 представляет собой циклоалкилщ^ или замещенный циклоалкиЛ(C<8); или
-Y2-C (О) NRC-A2;
где Y2 представляет собой арендииЛ(C<8) или замещенный арендииЛ(C<8);
Rc представляет собой водород, алкил^) или замещенный алкиЛ(C<6); или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых аспектах настоящее изобретение предоставляет соединения формулы
где R2 представляет собой водород или алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкандииЛ(C<8)-циклоалкиЛ(C<12) или замещенный вариант этой группы;
R4 представляет собой амино, циклоалкил(C<18), замещенный циклоалкил(C<18), αриЛ(C<18), замещенный арил(C<18), гетероарил(C<18), замещенный гетероарил(C<18), гетероциклоалкил(C<18), замещенный гетероциклоалкиЛ(C<18), αмидO(C<18), замещенный амидO(C<18) или
- 7 043609
где n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-x2-(ch2)p-r4';
где Х2 представляет собой арендииЛ(C<12), замещенный арендииЛ(C<12), гетероциклоалкандииЛ(C<12), замещенный гетероциклоалкандииЛ(C<12), гетероарендииЛ(C<12) или замещенный гетероарендииЛ(C<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4''' представляет собой αлкиЛ(C<8), циклоалкил(С<8), ариЛ(C<8), гетероарил(С<8), гетероциклоалкил(С<8), ацил(C<8), амидO(C<8), αлкокси(C<8), ацилокси(С<8), -С(О)-алкокси(С<8), -С(О)-алкиламинO(C<8), -С(О)диалкиламинO(C<8), алкилсульфонил(с<8), арилсульфониЛ(C<8), αлкоксисульфониЛ(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(O)2C6H4CH3, изопропокси, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), циклоалкокси(C<12), арил(С<12), аралкил(С<12), гетероарил(С<12), гетероциклоалкил(С<12), ацил(С<12), ацилокси(С<12), алкиламино(С<12), диалкиламино(С<12), алкилсульфониламино(С<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-ΟΥι-Α2;
где Y 1 представляет собой алкандиил(С<8) или замещенный алкандиил(С<8);
A1 представляет собой циклоалкил(С<8) или замещенный циклоалкил(С<8); или
-y2-c (о) nrc-a2;
где Y2 представляет собой арендиил(С<8) или замещенный арендиил(С<8);
Rc представляет собой водород, алкил(С<6) или замещенный алкил(С<6);
А2 представляет собой аралкил(С<12) или замещенный аралкил(С<12);
или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых аспектах настоящее изобретение предоставляет соединения формулы
где R2 представляет собой водород, алкил(С<12) или замещенный алкил(С<12);
R4 представляет собой гетероарил(С<18) или замещенный гетероарил(С<18);
R5 представляет собой арил(С<12) или замещенный арил(С<12);
или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых аспектах настоящее изобретение предоставляет соединения формулы
где R2 представляет собой алкил(С<12) или замещенный алкил(С<12),
HetAr представляет собой гетероарил(С<18) или замещенный гетероарил(С<18); а также
Ar представляет собой ариЛ(C<12) или замещенный ариЛ(C<12);
или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых аспектах настоящее изобретение предоставляет соединения формулы
- 8 043609
где R4 представляет собой гетероарил^^) или замещенный гетероарил^^;
R5 представляет собой ариЛ(C<12) или замещенный ариЛ(C<12); или его фармацевтически приемлемая соль.
В других аспектах настоящее изобретение предоставляет соединения формулы
где связь между атомами углерода 1 и 2 представляет собой одинарную связь, эпоксидированную двойную связь или двойную связь;
связь между атомами углерода 4 и 5 представляет собой одинарную связь или двойную связь;
а равно 0, 1 или 2;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино или алкиламинO(C<8), диалкиламинO(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), αлкениЛ(C<12) или замещенный вариант последних трёх групп, или -алкандииЛ(C<8), -циклоалкиЛ(C<12) или замещенный вариант этой группы;
R2' отсутствует или представляет собой водород, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант последних трёх групп, при условии, что, когда связь между атомами углерода 4 и 5 представляет собой двойную связь, R2' отсутствует;
R3 представляет собой алкиЛ(C<12), ариЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп;
R4 представляет собой циклоалкиЛ(C<18), замещенный циклоалкиЛ(C<18), гетероариЛ(C<18), замещенный гетероариЛ(C<18), гетероциклоалкиЛ(C<18), замещенный гетероциклоалкиЛ(C<18) или где n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-X2-(CH2)p-RX;
где Х2 представляет собой арендииЛ(C<12), замещенный арендииЛ(C<12), гетероциклоалкилдииЛ(C<12), замещенный гетероциклоалкилдииЛ(C<12), гетероарендииЛ(C<12) или замещенный гетероарендииЛ(C<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4''' представляет собой алкиЛ(C<8), циклоалкиЛ(C<8), ариЛ(C<8), гетероариЛ(C<8), гетероциклоалкиЛ(C<8), ациЛ(C<8), алкоксИ(C<8), ацилоксИ(C<8), -С(О)-алкоксИ(C<8), -С(O)-алкиламинO(C<8), -С(О)-диалкиламинO(C<8), алкилсульфониЛ(C<8), арилсульфониЛ(C<8), алкоксисульфониЛ(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R5 представляет собой циклоалкоксИ(C<12), ариЛ(C<12), гетероариЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или
-OYi-Ai;
где Y 1 представляет собой алкαндииЛ(C<8) или замещенный aлкандииЛ(C<8);
А1 представляет собой циклоалкиЛ(C<8) или замещенный циклоалкил^^;
при условии, что, когда атомы углерода 4 и 5 соединены двойной связью, R2' и атом водорода у атома углерода 5 отсутствуют;
где термин замещенный при использовании для модификации любой группы означает, что один
- 9 043609 или более атомов водорода на этой группе были независимо заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2,
-CO2H, -C(O)H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -ОСН2СН3, -С(О)СНз, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2,
-C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -ОС(О)СНз, -NHC(O)CH3, -S(O)2CH3, -S(O)2OH или -S(O)2NH2;
где термин арил относится к одновалентной ароматической группе с ароматическим атомом углерода в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода образует часть одной или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет шесть кольцевых атомов, все из которых представляют собой углерод, и при этом группа не состоит из атомов, кроме углерода и водорода;
термин арендиил относится к двухвалентной ароматической группе с двумя ароматическими атомами углерода в качестве точек присоединения, при этом указанные атомы углерода образуют часть одной или нескольких шестичленных ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет шесть кольцевых атомов, все из которых представляют собой углерод, и где двухвалентная группа не состоит из атомов, кроме углерода и водорода;
термин гетероарил относится к одновалентной ароматической группе с ароматическим атомом углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота образует часть одной или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая кольцевая структура имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по меньшей мере один из кольцевых атомов ароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и где гетероарильная группа не состоит ни из каких атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы;
термин гетероарендиил относится к двухвалентной ароматической группе с двумя ароматическими атомами углерода, двумя ароматическими атомами азота или одним ароматическим атомом углерода и одним ароматическим атомом азота в качестве двух точек присоединения, причем указанные атомы образуют часть одного или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по крайней мере один из кольцевых атомов ароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и двухвалентная группа не содержит атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы;
термин гетероаралкил относится к одновалентной группе -алкандиил-гетероарил, в которой каждый из терминов алкандиил и гетероарил используется в соответствии с определениями, приведенными выше; термин гетероциклоалкил относится к одновалентной неароматической группе с атомом углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота образует часть одной или нескольких неароматических кольцевых структур, причем каждая кольцевая структура имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и где гетероциклоалкильная группа не содержит атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы; и термин гетероциклоалкандиил относится к двухвалентной циклической группе с двумя атомами углерода, двумя атомами азота или одним атомом углерода и одним атомом азота в качестве двух точек присоединения, причем указанные атомы образуют часть одной или нескольких кольцевых структур, где по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и где двухвалентная группа не содержит атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы;
или его фармацевтически приемлемая соль.
В некоторых вариантах осуществления связь между атомами углерода 1 и 2 является двойной.
В некоторых вариантах осуществления связь между атомами углерода 4 и 5 является одинарной.
В некоторых вариантах осуществления а равен 1 или 2.
В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой циано.
В некоторых вариантах осуществления R2 представляет собой алкиЛ(C<12) или замещенный алкил(С<12).
В некоторых вариантах осуществления R2 представляет собой метил, этил, пропил или 3гидроксипропил.
В некоторых вариантах осуществления R2' представляет собой водород, алкил(C<12) или замещенный алкил(C<12).
В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой алкиЛ(C<12) или замещенный алкил(С<12).
В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой метил.
В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой гетероарил^^) или замещенный гетероарил(c<18).
В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой гетероарильнуЮ(C<12) или замещенную гетероарильнуЮ(C<12) группу, причем по меньшей мере один из гетероатомов в ароматическом кольце представляет собой атом азота.
- 10 043609
В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой гетероариЛ(C<18).
В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой 3-пиридинил, 4-пиридинил, 4-(2циклопропил) пиридинил, 5-(2-циклопропил)пиридинил, 4-(2-морфолино)пиридинил, 4-(2фенил)пиридинил, 3-(5-метил)пиридинил, 3-(6-метил)пиридинил, 4-(2-метил)пиридинил, 4-(3метил)пиридинил, 3-пиразоло[1,5-а]пиридинил, 3-(N-метил)пирроло[2,3-b]пиридинил, 5-изохинолинил, 2-изохинолинил, 1-изохинолинил, 4-(3-фенил)пиридинил, 5-(2-фенил)пиридинил, 3-(5-метил)пиридинил, 4-(3-метил)пиридинил, 4-(3,5-диметил)изоксазолил, 4-(2-метил)пиридинил, 4-(3-метил)пиридинил, 3-(4метил)пиридинил, 4-(6-метил)пиримидинил, 6-(4-метил)пиримидинил, 4-пиридазинил, 2-хиназолинил, 4хиназолинил, 2-хинолинил, 3-хинолинил, 4-хинолинил, 5-хинолинил, 6-хинолинил, 8-хинолинил, 4изохинолинил, 3-(8-метил)хинолинил, 3-(1-метил)хинолинил, 4-(2-метил)хинолинил, 4-(2изопропил)хинолинил, 4-(6-метил)хинолинил, 4-(7-метил)хинолинил, 4-(8-метил)хинолинил, 2-(Nметил)индолил, 5-(2,4-диметил)тиазолил или 5-(3-метил)оксадиазолил.
В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой замещенный гетероариЛ(C<18).
В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой 4-(2-трифторметил)пиридинил, 4-(3фтор)пиридинил, 4-(2-метокси)пиридинил, 4-(2-гидроксиметил)пиридинил, 4-(2ацетиламино)пиридинил, 4-(2-фторметил)пиридинил, 4-(2-ацетамидилэтил)пиридинил, 4-(2фторметил)хинолинил, 4-(2-ацетоксиметил)хинолинил, 4-(2-формил)хинолинил, 4-(6-фтор)хинолинил, 4(7-фтор)хинолинил, 4-(8-фтор)хинолинил, 4-(6,8-дифтор)хинолинил, 4-(6-фтор-2-метил)хинолинил или 4-(8-фтор-2-метил)хинолинил.
В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой ариЛ(C<12) или замещенный ариЛ(C<12).
В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой
-Х2-(СН2)Р- R4';
где Х2 представляет собой арендииЛ(C<12), замещенный арендииЛ(C<12), гетероциклоалкандииЛ(C<12), замещенный гетероциkлоалкандиил(C<12), геmероарендиил(C<12) или замещенный гетероарендиил(C<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4' представляет собой алкиЛ(C<8), циклоалкиЛ(C<8), ариЛ(C<8), гетероариЛ(C<8), гетероциклоалкиЛ(C<8), ацил(C<8), амидO(C<8), алкокси(C<8), ацилокси(C<8), -С(О)-алкокси(C<8), -С(О)-алкиламинO(C<8), -С(О)диалкиламинO(C<8), алкилсульфониЛ(C<8), арилсульфониЛ(C<8), алкоксисульфониЛ(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп.
В некоторых вариантах осуществления Х2 представляет собой гетероарендииЛ(C<12) или замещенный гетероарендииЛ(C<12).
В некоторых вариантах осуществления R4''' представляет собой циклоалкил(c<8) или замещенный циклоалкиЛ(C<8).
В некоторых вариантах осуществления R4''' представляет собой циклоалкиЛ(C<8).
В некоторых вариантах осуществления R4''' представляет собой циклопропил.
В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой ариЛ(C<12) или замещенный ариЛ(C<12).
В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой арил(C<12).
В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой фенил, 4-метилфенил, 3изопропилфенил, 4-изопропилфенил, 1,3-бифенил или 1,4-бифенил.
В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой замещенный ариЛ(C<12).
В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой замещенный арил(c<12), где один или более атомов водорода арила(C<12) независимо замещены -F.
В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой 2-фторфенил, 3-фторфенил, 4фторфенил, 2,4-дифторфенил, 4-гидроксиметилфенил, 3-трифторметилфенил, 4-трифторметилфенил, 4метоксифенил, 4-хлорфенил или 3,4-дихлорфенил.
В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой циклоалкоксИ(C<12) или замещенный циkлоалkOkси(C<12).
В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой циклобутилокси, циклопентилокси или циклогексилокси.
В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой гетероариЛ(C<12) или замещенный гетероарил(c<12).
В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой изопропокси.
В некоторых вариантах осуществления соединение далее определено как
- 11 043609
- 12 043609
- 13 043609
- 14 043609
- 15 043609
- 16 043609
- 17 043609
о
или его фармацевтически приемлемая соль. Соединение формулы:
или его фармацевтически приемлемая соль.
В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содер жащим:
(A) соединение, описанное в данном документе; а также (B) вспомогательное вещество, где фармацевтическая композиция составлена в виде лекарственного средства.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции составлены для введения: перорально, интрадипозально, внутриартериально, интраартикулярно, внутричерепно, внутрикожно, внутрилезионно, внутримышечно, интраназально, внутриглазно, внутрибрюшинно, внутриплеврально, интрапростатически, интраректально, интратекально, интратрахеально, интратуморально, интраумбилически, интравагинально, внутривенно, интравезикулярно, интравитреально, липосомально, локально, на слизистую оболочку, парентерально, ректально, субконъюнктивально, подкожно, сублингвально, местно, трансбуккально, трансдермально, вагинально, в кремах, в липидных композициях, через катетер, посредством промывания, посредством непрерывной инфузии, посредством инфузии, посредством ингаляции, посредством инъекции, посредством местной доставки или посредством локальной перфузии. В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции составлены для перорального применения. В других вариантах осуществления фармацевтические композиции составлены для введения посредст- 18 043609 вом инъекции. В других вариантах осуществления фармацевтические композиции составлены для внутриартериального введения, внутримышечного введения, внутрибрюшинного введения или внутривенного введения. В других вариантах осуществления фармацевтические композиции составлены для местного введения, такого как местное введение в кожу или в глаз. В других вариантах осуществления фармацевтические композиции составляют в виде единичной дозы.
В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения, описанного в данном документе, для получения лекарственного средства для лечения заболевания или расстройства, где заболевание или расстройство представляет собой аутоиммунное заболевание, отторжение органа, астму, онкологическое заболевание, неврологическое расстройство, психическое расстройство, психоневрологическое расстройство, синдром хронической боли, воспалительные процессы, поражение сетчатки или сердечно-сосудистое заболевание. В некоторых вариантах осуществления заболевание или расстройство представляет собой аутоиммунное заболевание, отторжение органа, астму, онкологическое заболевание, неврологическое расстройство, психическое расстройство, психоневрологическое расстройство, синдром хронической боли, воспалительные процессы, поражение сетчатки или сердечнососудистое заболевание. В некоторых вариантах осуществления заболевание или расстройство связано с повышенной выработкой цитокина IL-17. В некоторых вариантах осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой псориаз, рассеянный склероз, склеродермию, ревматоидный артрит, волчанку, псориатический артрит, анкилозирующий спондилит, синдром Шегрена, витилиго, увеит, сухой глазной синдром, системный склероз, диабет типа 1, миастению гравис и воспалительное заболевания кишечника. В некоторых вариантах осуществления заболевание или расстройство связано с воспалением.
Описание иллюстративных вариантов осуществления.
Здесь раскрыты новые соединения и композиции, которые могут быть использованы для ингибирования активности ядерного рецептора RORy и/или IL-17 и, таким образом, полезны при лечении широкого спектра различных показаний, таких как аутоиммунное заболевание, метаболические заболевания, онкологические заболевания и инфекции. В некоторых вариантах осуществления эти соединения могут быть использованы для модуляции экспрессии одного или нескольких нижестоящих соединений, таких как интерлейкин-17 (IL-17), предотвращения или ингибирования избыточной выработки IL-17, снижения уровней IL-17 в кровотоке и/или предотвращения или лечения широкого спектра заболеваний или нарушений, в том числе с воспалительными и аутоиммунными компонентами.
Соединения и способы синтеза.
Соединения по настоящему изобретению (также называемые соединениями по настоящему изобретению) показаны, например, выше, в разделе Сущность изобретения, и в формуле изобретения ниже. Они могут быть изготовлены с использованием способов синтеза, описанных в разделе Примеры. Эти способы могут быть дополнительно модифицированы и оптимизированы с использованием принципов и технологий органической химии, применяемых специалистом в данной области. Такие принципы и методы представлены, например, в Smith, March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, (2013), включенной в настоящее описание посредством ссылки. Кроме того, способы синтеза могут быть дополнительно модифицированы и оптимизированы для препаративного, пилотного или крупномасштабного производства, как производства отдельных партий, так и непрерывного, с использованием принципов и технологий химии процесса, применяемых специалистом в данной области. Такие принципы и методы представлены, например, в Anderson, Practical Process Research & Development - A Guide for Organic Chemists (2012), включенной в данный документ посредством ссылки.
Все соединения по настоящему изобретению могут быть пригодны для профилактики и лечения одного или нескольких заболеваний или расстройств, обсуждаемых здесь или иным образом.
В некоторых вариантах осуществления одно или несколько соединений, охарактеризованных или приведенных в качестве примеров в данном документе в качестве промежуточного соединения, метаболита и/или пролекарства, могут, тем не менее, также быть полезными для профилактики и лечения одного или нескольких заболеваний или нарушений. Как таковые, если прямо не указано иное, все соединения по настоящему изобретению считаются активными соединениями и терапевтическими соединениями, которые предполагаются для использования в качестве активных фармацевтических ингредиентов (API). Фактическая пригодность для употребления человеком или в ветеринарной сфере обычно определяется с использованием комбинации протоколов клинических испытаний и регулирующих процедур, например, регламентированных Управлением по контролю за продуктами и лекарствами (FDA). В Соединенных Штатах FDA отвечает за защиту общественного здоровья, обеспечивая безопасность, эффективность, качество и безопасность лекарств, вакцин и других биологических продуктов, используемых в медицине или ветеринарии, а также медицинских устройств.
В некоторых вариантах осуществления изобретения соединения по настоящему изобретению имеют то преимущество, что они могут быть более эффективными, менее токсичными, более активными, более сильнодействующими, вызывающими меньше побочных эффектов, могут легче всасываться и/или иметь лучший фармакокинетический профиль (например, более высокую пероральную биодоступность и/или более низкий клиренс) или иметь другие полезные фармакологические, физические или химические свойства по сравнению с соединениями, известными на данном уровне техники, для использования
- 19 043609 по указанным в данном документе показаниям или иным образом.
Соединения по настоящему изобретению могут содержать один или несколько асимметрично замещенных атомов углерода или азота и могут быть выделены в оптически активной или рацемической форме. Таким образом, подразумеваются все хиральные, диастереомерные, рацемические формы, эпимерные формы и все геометрические изомерные формы химической формулы, если специально не указана конкретная стереохимия или изомерная форма. Соединения могут встречаться в виде рацематов и рацемических смесей, отдельных энантиомеров, диастереомерных смесей и отдельных диастереомеров. В некоторых вариантах осуществления получают один диастереомер. Хиральные центры соединений по настоящему изобретению могут иметь S- или R-конфигурацию. В некоторых вариантах осуществления настоящие соединения могут содержать два или более атомов, которые имеют определенную стереохимическую ориентацию.
В одном аспекте соединения по настоящему изобретению содержат по меньшей мере один стереогенный центр у атомов углерода 4, 5 и 10. В некоторых вариантах осуществления атом углерода 10 находится в S-конфигурации. В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению содержат стереогенный центр у атома углерода 5 при условии, что атом углерода 5 не является частью двойной связи. В некоторых вариантах осуществления атом углерода 5 находится в Rконфигурации. В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению содержат стереогенный центр у атома углерода 4 при условии, что атом углерода 4 не является частью двойной связи. В некоторых из этих вариантов осуществления атом углерода 4 находится в R-конфигурации.
Не ограничиваясь какой-либо теорией, в некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, проявляющие определенную стереохимическую ориентацию у атомов углерода 4, 5 и/или 10, демонстрируют сохраняющееся ингибирование hIL17 и при этом демонстрируют пониженную активацию NRF2 в сравнении с соединениями с другой стереохимической ориентацией при атомах углерода 4, 5 и/или 10. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, проявляющим более низкую IC50 ингибирования hIL17 в соответствии с измерениями путем определения необходимой для ингибирования концентрации с использованием флуоресцентно меченных антител к IL17, например, как описано в примере 2, по сравнению с двукратной активацией NRF2. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, проявляющим увеличение ингибирования hIL17 по сравнению с двукратным значением активации NRF2 при измерении двукратной активации NRF2 путем определения требования к концентрации для двукратного увеличения активности GST ARE-люциферазного репортера в клетках AREc32 относительно таковой у клеток, обработанных ДМСО, например, как описано в примере 2.
Химические формулы, используемые для представления соединений по настоящему изобретению, обычно показывают только один из возможных нескольких разных таутомеров. Например, известно, что многие типы кетоновых групп существуют в равновесии с соответствующими енольными группами. Аналогично, многие типы иминных групп существуют в равновесии с енаминовыми группами. Независимо от того, какой таутомер изображен для данного соединения, и независимо от того, какое из них является наиболее распространенным, подразумеваются все таутомеры данной химической формулы.
Кроме того, предполагается, что атомы, составляющие соединения по настоящему изобретению, включают все изотопные формы таких атомов. Используемые здесь изотопы включают те атомы, которые имеют одинаковый атомный номер, но разные массовые значения. В качестве общего примера и без ограничения изотопы водорода включают тритий и дейтерий, а изотопы углерода включают 13С и 14С.
Соединения по настоящему изобретению также могут существовать в форме пролекарства. Поскольку известно, что пролекарства усиливают множество желательных качеств фармацевтических препаратов (например, растворимость, биодоступность, производство и т.д.), Соединения, вовлеченные в некоторые способы по изобретению, при желании могут быть доставлены в форме пролекарства. Таким образом, изобретение рассматривает пролекарства соединений по настоящему изобретению, а также способы доставки пролекарств. Пролекарства соединений, вовлеченных в изобретение, могут быть получены путем модификации функциональных групп, присутствующих в соединении, таким образом, что модификации расщепляются либо в рутинной манипуляции, либо in vivo до исходного соединения. Соответственно, пролекарства включают, например, соединения, описанные в данном документе, в которых гидрокси, амино или карбоксигруппа связаны с любой группой, которая при введении субъекту пролекарства расщепляется с образованием гидрокси, амино или карбоновой кислоты соответственно,
Следует признать, что конкретный анион или катион, образующий часть любой солевой формы соединения, представленного в настоящем документе, не является критическим, если соль в целом является фармакологически приемлемой. Дополнительные примеры фармацевтически приемлемых солей и способы их приготовления и применения представлены в Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use (2002), который включен в настоящий документ посредством ссылки.
Понятно, что многие органические соединения могут образовывать комплексы с растворителями, в которых они вступают в реакцию или из которых они осаждаются или кристаллизуются. Такие комплексы известны как сольваты. Когда растворителем является вода, комплекс известен как гидрат. Также следует понимать, что многие органические соединения могут существовать в более чем одной твердой
- 20 043609 форме, включая кристаллические и аморфные формы. Все твердые формы соединений, представленных в настоящем документе, включая любые их сольваты, входят в объем настоящего изобретения.
Заболевания, связанные с воспалительным цитокином IL-17.
Различные сообщения указывают на то, что воспалительный цитокин IL-17 участвует в патогенезе многих аутоиммунных заболеваний, включая ревматоидный артрит, псориаз и псориатический артрит, воспалительное заболевания кишечника (включая, помимо прочего, болезнь Крона), рассеянный склероз, аутоиммунный нефрит, аутоиммунный увеит, диабет типа 1 и анкилозирующий спондилит. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для лечения или профилактики одного или нескольких из этих заболеваний или расстройств. Тип Тлимфоцитов, известный как клетки Th17, является основным источником IL-17. Семейство IL-17 состоит из нескольких членов. Первый идентифицированный член, IL-17A, обычно называют IL-17. IL-17 состоит из двух мономеров, связанных дисульфидными связями с образованием гомодимера (Miossec and Kolls, 2012). Помимо IL-17A, другим основным членом семьи является IL-17F. Некоторые данные свидетельствуют о том, что IL-17F и IL-17A, хотя они имеют много общих эффектов, могут иметь разные эффекты в определенных условиях, таких как воспаление легких. Цитокины IL-17 связываются с рецепторами IL-17 (IL-17R), расположенными в мембране клеток определенных типов. Хотя существует несколько подтипов рецептора IL-17, комплекс IL-17RA/IL-17RC необходим для активности IL-17A и IL17F. IL-17RA обладает необычным свойством передачи сигналов через путь, который включает в себя адаптерный белок (АСТ1), а не путь Янус-киназы/сигнального трансдуктора и активатора транскрипции (JAK/STAT), используемый большинством рецепторов интерлейкина. Связывание IL-17A с IL-17RA активирует путь провоспалительного ядерного фактора-каппа В (NF-кВ) и провоспалительные элементы пути митоген-активируемой протеинкиназы (MAPK), такие как JUN N-терминальная киназа (JNK), р38 и внеклеточная сигнальная киназа (ERK). Активность IL-17 стимулирует секрецию IL-6 и IL-8 из мезенхимальных клеток и приводит к лихорадке наряду с накоплением нейтрофилов в крови и тканях. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут использоваться для ингибирования секреции IL-6 и IL-8 из мезенхимальных клеток. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для предотвращения или ингибирования лихорадки у пациента. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для предотвращения накопления нейтрофилов в крови или ткани пациента.
Помимо своего вклада в острое воспаление, IL-17 также способствует хроническому воспалению (Miossec and Kolls, 2012). В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для предотвращения или лечения хронического воспаления. IL-17 стимулирует выработку матриксных металлопротеиназ (ММР), которые, помимо прочего, могут разрушать хрящ в суставах. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для предотвращения или лечения деградации хряща пациента. IL-17 также увеличивает экспрессию лиганда рецептора-активатора NF-кВ (RANKL) в остеобластах, что приводит к дифференцировке и активации остеокластов и деградации кости. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для предотвращения или лечения деградации кости пациента. В зависимости от клетки-мишени, которая подвергается воздействию, IL-17 может стимулировать выработку IL-6, IL-8, IL-1, фактора некроза опухоли (TNF), ММР, оксида азота или нескольких других вовлеченных белков. в воспалительных состояниях (например, тканевого фактора, CCL20, G-CSF и GM-CSF). В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для ингибирования выработки IL-6, IL-8, IL-1, фактора некроза опухоли (TNF), ММР, оксида азота или нескольких других белков, которые вовлечены в воспалительные состояния (например, тканевого фактора, CCL20, G-CSF и GM-CSF).
Хотя IL-17 играет роль в иммунном ответе на вторжение патогенов, чрезмерная активность IL-17 была вовлечена в патологии, связанные с чрезмерным иммунным ответом на инфекцию. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для предотвращения или лечения чрезмерного иммунного ответа на инфекцию. Например, IL-17 был вовлечен в тяжелое нейровоспаление, связанное с инфекцией Toxoplasma gondii, и был связан с повышенной тяжестью поражений, связанных с инфекцией Leishmania. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для лечения или предотвращения нейровоспаления, например нейровоспаления, связанного с инфекцией Toxoplasma gondii. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для лечения или профилактики поражений, связанных с инфекцией Leishmania. В этих и других случаях IL-17, по-видимому, играет роль в сохранении инфекции, стимулировании чрезмерного воспалительного ответа и ингибировании клиренса инфекционного агента (Waite and Skokos, 2012). В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для предотвращения чрезмерного воспалительного ответа и/или ускорения клиренса инфекционного агента.
- 21 043609
Препараты, нацеленные на IL-17, прошли клинические испытания для широкого спектра воспалительных состояний, включая псориаз, ревматоидный артрит, анкилозирующий спондилит, увеит, болезнь Бехчета, псориатический артрит, болезнь Крона, ревматическая полимиалгия, синдром сухого глаза, рассеянный склероз, реакцию трансплантат против хозяина и астму. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для лечения или профилактики одного или нескольких из этих заболеваний или расстройств. Доклинические данные также указывают на то, что IL-17 вовлечен в патологию диабета 1 типа, и количество клеток Th17 повышено у пациентов с дебютом во взрослом возрасте расстройства Стилла, другого аутоиммунного заболевания. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для лечения диабета типа 1. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для лечения или предотвращения дебюта во взрослом возрасте расстройства Стилла.
Активность клеток Th17 участвует в развитии реакции трансплантат против хозяина после трансплантации аллогенных стволовых клеток (например, костного мозга) (Fujiwara, et al., 2014). В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для лечения или профилактики реакции трансплантат против хозяина, например, после трансплантации аллогенных стволовых клеток (например, костного мозга). Учитывая большое количество фактических данных на сегодняшний день, вполне вероятно, что методы лечения, снижающие экспрессию IL17 или иным образом снижающие его уровни в кровотоке или тканях-мишенях (например, моноклональные антитела к IL17), могут найти широкое применение при лечении аутоиммунных заболеваний и других воспалительных состояний. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для снижения экспрессии IL-17 или его уровней в кровотоке или тканях-мишенях (например, моноклональные антитела к IL17). В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для лечения аутоиммунных заболеваний или других воспалительных состояний.
Об избыточной выработке IL-17 или повышенном количестве клеток Th17 сообщалось в исследованиях на пациентах или на животных моделях большого числа состояний, включая аутоиммунные заболевания, неврологические расстройства, сердечно-сосудистые заболевания, онкологические заболевания, психические и психоневрологические расстройства, острые и хронические воспалительные состояния, хронические болевые синдромы, отторжение органа или реакцию трансплантат против хозяина, или астму и другие аллергические состояния. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для лечения или профилактики одного или нескольких из этих заболеваний или расстройств.
Дифференцировка клеток Th17 и выработка ими IL-17 в значительной степени регулируются RARсвязанным орфанным рецептором RORyt, членом семейства ядерных гормональных рецепторов. Экспрессия RORyt является общей для всех типов клеток Th17. RORy также регулирует выработку IL-17 в клетках других типов, включая γδ-Т-клетки, врожденные лимфоидные клетки и клетки-индукторы лимфоидной ткани (Bronner et al., 2016). Ингибирование активности RORyt приводит к снижению экспрессии IL-17. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для ингибирования активности RORyt.
Предлагаемые в данном документе соединения и композиции могут быть использованы для подавления выработки IL-17 в культурах человеческих Т-клеток, которые подвергаются воздействию смеси цитокинов, о которых известно, что они вызывают дифференцировку в клетки Th17. В некоторых вариантах осуществления также показана способность действовать в качестве обратных агонистов RORyt. He желая быть связанными какой-либо теорией, полагают, что, например, RORyt-независимые механизмы, по-видимому, способствуют подавлению выработки IL-17. Таким образом, предлагаемые в данном документе соединения и композиции могут быть использованы для ингибирования дифференцировки Тклеток в клетки Th17, а также для ингибирования выработки IL-17 зрелыми клетками Th17. В некоторых из этих вариантов осуществления конечным результатом является снижение уровней IL-17. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем документе, могут вводиться пациенту для подавления выработки IL-17 в одной или нескольких тканях или органах пациента.
Фармацевтические составы и пути введения.
В целях введения пациенту, нуждающемуся в таком лечении, фармацевтические препараты (также называемые фармацевтическими препаратами, фармацевтическими композициями, фармацевтическими продуктами, лекарственными продуктами, лекарствами, лекарственными средствами или лекарственными препаратами) содержат терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению в составе с одним или несколькими вспомогательными веществами и/или носителями лекарственных средств, подходящими для указанного пути введения. В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению составляют способом, подходящим для лечения людей и/или ветеринарных пациентов. В некоторых вариантах осуществления состав включает смешивание или объединение одного или нескольких соединений по настоящему изобретению с одним или несколькими из сле
- 22 043609 дующих вспомогательных веществ: лактозы, сахарозы, порошка крахмала, сложных эфиров целлюлозы алкановых кислот, сложных алкиловых эфиров целлюлозы, талька, стеариновой кислоты, стеарата магния, оксида магния, натриевых и кальциевых солей фосфорной и серной кислот, желатина, гуммиарабика, альгината натрия, поливинилпирролидона и/или поливинилового спирта. В некоторых вариантах осуществления, например, для перорального введения, фармацевтическая композиция может быть таблетирована или инкапсулирована. В некоторых вариантах осуществления соединения могут быть растворены или суспендированы в воде, полиэтиленгликоле, пропиленгликоле, этаноле, кукурузном масле, хлопковом масле, арахисовом масле, кунжутном масле, бензиловом спирте, хлориде натрия и/или различных буферах. Фармацевтические составы могут быть подвергнуты обычным фармацевтическим операциям, таким как стерилизация, и/или могут содержать носители лекарственных средств и/или вспомогательные вещества, такие как консерванты, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы, инкапсулирующие агенты, такие как липиды, дендримеры, полимеры, белки, такие как альбумин, или нуклеиновые кислоты, и буферы и т.д.
Фармацевтические препараты могут вводиться различными способами, например, перорально или путем инъекции (например, подкожно, внутривенно, внутрибрюшинно и т.д.). В зависимости от пути введения соединение по настоящему изобретению может быть покрыто материалом для защиты соединения от воздействия кислот и других естественных условий, которые могут инактивировать соединение. Для введения активного компонента посредством способов введения, отличных от парентерального, может быть необходимо покрытие соединения или совместное введение соединения с материалом, предотвращающим его инактивацию. Например, активное соединение можно вводить пациенту в подходящем носителе, например, липосомах или разбавителе. Фармацевтически приемлемые разбавители включают солевой раствор и водные буферные растворы. Липосомы включают эмульсии CGF вода-в-масле-в-воде, а также обычные липосомы.
Соединения по настоящему изобретению также можно вводить парентерально, внутрибрюшинно, внутриспинально или внутрицеребрально. Дисперсии могут быть приготовлены в глицерине, жидких полиэтиленгликолях и их смесях, и в маслах. В обычных условиях хранения и использования эти препараты могут содержать консервант для предотвращения роста микроорганизмов.
Фармацевтические композиции, подходящие для применения в виде инъекций, включают стерильные водные растворы (в случае водорастворимости) или дисперсии и стерильные порошки для приготовления стерильных инъекционных растворов или дисперсий для немедленного приема. Носитель может представлять собой растворитель или дисперсионную среду, содержащую, например, воду, этанол, полиол (такой как глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль и т.д.), их подходящие смеси и растительные масла. Надлежащую текучесть можно поддерживать, например, путем применения материалов для покрытия, таких как лецитин, путем поддержания необходимого размера частиц в случае дисперсий и путем применения поверхностно-активных веществ. Предупреждение действия микроорганизмов можно выполнять посредством различных антибактериальных и противогрибковых средств, например, парабенов, хлорбутанола, фенола, аскорбиновой кислоты, тимеросала и т.п. Во многих случаях в композицию предпочтительно включать изотонические вещества, например, сахара, хлорид натрия или полиспирты, такие как маннит и сорбит. Длительное всасывание инъекционных композиций можно обеспечить путем включения в композицию вещества, которое замедляет всасывание, например, моностеарата алюминия или желатина.
Соединения по настоящему изобретению можно вводить перорально, например, с инертным разбавителем или усваиваемым пищевым носителем. Соединения и другие ингредиенты также могут быть заключены в желатиновую капсулу с твердой или мягкой оболочкой, спрессованы в таблетки или включены непосредственно в рацион субъекта. Для перорального терапевтического введения соединение по настоящему изобретению можно соединять с одним или более вспомогательными веществами и применять в форме проглатываемых таблеток, буккальных таблеток, пастилок, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, вафель, аэрозольных аэрозолей и тому подобного. Процент терапевтического соединения в композициях и препаратах, конечно, может варьироваться. Количество терапевтического соединения в таких фармацевтических составах таково, что будет получена подходящая дозировка.
Терапевтическое соединение может также вводиться местно на кожу, в глаз, ухо или на слизистые оболочки. Местное введение терапевтического соединения может включать составы соединений в виде раствора для местного применения, лосьона, крема, мази, геля, пены, трансдермального пластыря или настойки. В случае состава терапевтическое соединения для местного применения, соединение может быть объединено с одним или несколькими агентами, которые увеличивают проницаемость соединения через ткань, на которую оно наносится. В других вариантах осуществления предполагается, что местное введение вводят в глаз. Такое введение может быть нанесено на поверхность роговицы, конъюнктивы или склеры. Не желая быть связанными какой-либо теорией, полагают, что введение на поверхность глаза позволяет терапевтическому соединению достигать задней части глаза. Местное офтальмологическое введение может быть составлено в виде раствора, суспензии, мази, геля или эмульсии. Наконец, местное введение может также включать нанесение на слизистые оболочки, такие как внутренняя часть рта. Такое введение может осуществляться непосредственно в конкретное место внутри слизистой оболочки,
- 23 043609 такое как зуб, рана или язва. Альтернативно, если желательна местная доставка в легкие, терапевтическое соединение можно вводить путем ингаляции в виде сухого порошка или аэрозоля.
В некоторых вариантах осуществления может быть выгодным изготовление парентеральных композиций в единичной дозированной форме для удобства введения и единообразия дозировки. В контексте данного документа единичная дозированная форма относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных дозировок для подлежащих лечению субъектов; каждая единица содержит предопределенное количество терапевтического соединения, рассчитанное так, чтобы оказывать необходимое терапевтическое действие, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. В некоторых вариантах осуществления спецификации для единичных дозированных форм согласно изобретению обусловлены и напрямую зависят от (a) уникальных характеристик терапевтического соединения и конкретного достигаемого терапевтического действия, и (b) ограничений, свойственных области техники составления соединений, например, терапевтического соединения для лечения выбранного состояния у пациента. В некоторых вариантах осуществления изобретения активные соединения вводят в терапевтически эффективной дозе, достаточной для лечения состояния, связанного с состоянием у пациента. Например, эффективность соединения может быть оценена на системе животных моделей, которая может предсказать эффективность лечения заболевания у человека или другого животного.
В некоторых вариантах осуществления диапазон эффективных доз для терапевтического соединения может быть экстраполирован на основе эффективных доз, определенных в исследованиях на животных для множества различных животных. Как правило, эквивалентная доза для человека (HED) в мг/кг может быть рассчитана в соответствии со следующей формулой (см., например, Reagan-Shaw et al., FASEB J., 22 (3): 659-661, 2008, включенный в данный документ в качестве ссылки):
HED (мг/кг) = доза для животных (мг/кг) х (Km животного/Km человека)
Использование коэффициентов Km в конверсии приводит к более точным значениям HED, которые основаны на площади поверхности тела (BSA), а не только на массе тела. Значения Km для людей и различных животных хорошо известны. Например, Km для человека массой в среднем 60 кг (с BSA 1,6 м2) составляет 37, тогда как у ребенка с массой тела 20 кг (BSA 0,8 м2) Km будет составлять 25. Km для некоторых соответствующих животных моделей также хорошо известны, включая: Km мышей равный 3 (с учетом веса 0,02 кг и BSA 0,007); Km хомяк равный 5 (с учетом веса 0,08 кг и BSA 0,02); Km крыса равный 6 (с учетом веса 0,15 кг и BSA 0,025) и Km обезьяны равный 12 (с учетом веса 3 кг и BSA 0,24).
Точные количества терапевтической композиции зависят от суждения практикующего врача и являются индивидуальными для каждого человека. Тем не менее, рассчитанная доза HED может быть использована как общая рекомендация. Другие факторы, влияющие на дозу, включают физическое и клиническое состояние пациента, путь введения, предполагаемую цель лечения и эффективность, стабильность и токсичность конкретного терапевтического состава.
Фактическое дозированное количество соединения по настоящему раскрытию или композиции, включающей соединение по настоящему раскрытию, вводимое субъекту, может определяться физическими и физиологическими факторами, такими как тип подвергаемого лечению животного, возраст, пол, масса тела, тяжесть состояния, тип заболевания, которое лечат, предыдущие или параллельные терапевтические вмешательства, идиопатия субъекта и способ введения. Эти факторы могут быть определены квалифицированным специалистом. Практикующий врач, ответственный за введение, обычно определяет концентрацию активных ингредиентов в композиции и соответствующие дозы для каждого отдельного субъекта. Дозировка может корректироваться лечащим врачом в случае наличия каких-либо осложнений.
В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество обычно будет варьироваться от около 0,001 до около 1000 мг/кг, от около 0,01 до около 750 мг/кг, от около 100 до около 500 мг/кг. от около 1 мг/кг до около 250 мг/кг, от около 10 мг/кг до около 150 мг/кг в одной или нескольких дозах, вводимых ежедневно в течение одного или нескольких дней (в зависимости от курса введения и факторов, которые обсуждались выше). Другие подходящие диапазоны доз включают от 1 до 10 000 мг в день, от 100 до 10 000 мг в день, от 500 до 10 000 мг в день и от 500 до 1000 мг в день. В некоторых конкретных вариантах осуществления количество составляет менее 10 000 мг в день в диапазоне от 750 мг до 9000 мг в день.
В некоторых вариантах осуществления количество активного соединения в фармацевтической композиции составляет от около 2 до около 75 мас.%. В некоторых из этих вариантов осуществления количество составляет от около 25 до около 60 мас.%.
Рассматриваются однократные или множественные дозы агентов. Желаемые интервалы времени для доставки нескольких доз могут быть определены специалистом в данной области с использованием стандартных экспериментов. Например, субъектам могут вводиться две дозы ежедневно с интервалом приблизительно 12 ч. В некоторых вариантах реализации вещество вводят один раз в сутки.
Агент(ы) можно вводить по обычному графику. При использовании в данном документе термин стандартный график относится к заранее определенному назначенному периоду времени. Стандартный график может охватывать периоды времени, которые идентичны или различаются по длине, при условии, что график определен заранее. Например, стандартный график может включать прием дважды в
- 24 043609 день, каждый день, каждые два дня, каждые три дня, каждые четыре дня, каждые пять дней, каждые шесть дней, еженедельно, ежемесячно или в любое установленное количество дней или недель между ними. В качестве альтернативы, заранее установленный стандартный график может включать в себя введение два раза в день в течение первой недели, а затем ежедневно в течение нескольких месяцев и т.д. В других вариантах осуществления изобретения предусмотрено, что агенты можно принимать перорально и что время приема может зависеть или не зависеть от приема пищи. Так, например, средство можно принимать каждое утро и/или каждый вечер, независимо от того, когда субъект ел или будет есть.
Комбинированная терапия.
Помимо использования в качестве монотерапии, соединения по настоящему изобретению могут также найти применение в комбинированной терапии. Эффективная комбинированная терапия может быть достигнута с помощью одной композиции или фармакологического состава, который включает оба вещества, или с двумя различными композициями или составами, вводимыми одновременно, где одна композиция включает соединение по данному изобретению, а другая включает вторые вещества. Альтернативно, терапия может предшествовать или следовать за лечением другим агентом с интервалами, варьирующимися от минут до месяцев.
Неограничивающие примеры такой комбинированной терапии включают комбинацию одного или нескольких соединений по изобретению с другим противовоспалительным средством, химиотерапевтическим средством, лучевой терапией, антидепрессантом, антипсихотическим средством, противосудорожным средством, стабилизатором настроения, антиинфекционным средством, антигипертензивным средством, средством для снижения уровня холестерина или другим модулятор липидов крови, средством для содействия снижению веса, антитромботическим средством, средством для лечения или профилактики сердечно-сосудистых событий, таких как инфаркт или инсульт миокарда, противодиабетическим средством, средством для уменьшения отторжения трансплантата или реакции трансплантат против хозяина, средством против артрита, обезболивающим средством, средством против астмы или другим средством для лечения респираторных заболеваний или средством для лечения или профилактики кожных заболеваний. Соединения по изобретению можно комбинировать со средствами, предназначенными для улучшения иммунного ответа пациента на онкологическое заболевание, включая (но не ограничиваясь ими) противораковые вакцины. См. Lu et al. (2011), который включен в настоящий документ посредством ссылки.
Определения
При использовании в контексте химической группы: Водород означает -Н; гидрокси означает -ОН; оксо означает =O; карбонил означает -C(=O)-; карбокси означает -C(=O)OH (также обозначаемый как -СООН или -СО2Н); галоген означает независимо -F, -Cl, -Br или -I; амино означает -NH2; гидроксиамино означает -NHOH; нитро означает -NO2; имино означает =NH; циано означает -CN; изоцианат означает -N=C=O; азидо означает -N3; в одновалентном контексте фосфат означает -OP(O)(OH)2 или его депротонированную форму; в двухвалентном контексте фосфат означает -OP(O)(OH)O- или его депротонированную форму; меркапто означает -SH; и тио означает =S; сульфонил означает -S(O)2- и сульфинил означает -S(O)-.
В контексте химических формул символ - означает одинарную связь, = означает двойную связь, а =’ означает тройную связь. Символ — представляет собой необязательную связь, которая, если присутствует, является одинарной или двойной. Символ ____ представляет собой одинарную связь или двойную связь. Таким образом, формула охватывает, например, нятно, что ни один такой кольцевой атом не образует части более чем одной двойной связи. Кроме того, следует отметить, что символ ковалентной связи - при соединении одного или двух стереогенных атомов не указывает какой-либо предпочтительной стереохимии. Вместо этого он охватывает все стереоизомеры, а также их смеси. Символ ллл в случае, когда он нарисован перпендикулярно связи, пересекая ее (например, НСНз для метила), указывает точку присоединения группы. Следует отметить, что точка присоединения обычно идентифицируется таким образом только для больших групп, чтобы помочь читателю однозначно идентифицировать точку присоединения. Символ -W означает одинарную связь, в которой группа, прикрепленная к толстому концу клина, находится вне страницы. Символ ήιιιΙ означает одинарную связь, в которой группа, прикрепленная к толстому концу клина, находится на странице. Символ алл означает одинарную связь, в которой геометрия вокруг двойной связи (например, Е или Z) не определена. Таким образом, подразумеваются оба варианта, а также их комбинации. Любая неопределенная валентность на атоме структуры, показанная в данной заявке, неявно представляет атом водорода, связанный с этим атомом. Жирная точка на атоме углерода указывает на то, что водород, присоединенный к этому углероду, ориентирован вне плоскости бумаги.
В случаях, когда переменная изображается в виде плавающей группы в кольцевой системе, например, группа R в формуле:
- 25 043609
переменная может заменить любой атом водорода, присоединенный к любому из атомов кольца, включая изображенный, подразумеваемый или явно определенный водород, при условии, что образуется стабильная структура. В случаях, когда переменная изображается в виде плавающей группы в конденсированной кольцевой системе, например, группа R в формуле:
тогда переменная может заменить любой водород, присоединенный к любому из кольцевых атомов любого из конденсированных колец, если не указано иное. Заменяемые атомы водорода включают изображенные атомы водорода (например, водород, присоединенный к азоту в приведенной выше формуле), подразумеваемые атомы водорода (например, водород приведенной выше формулы, который не показан, но понимается как присутствующий), четко определенные атомы водорода и необязательные атомы водорода, чьи присутствие зависит от идентичности кольцевого атома (например, водорода, присоединенного к группе X, когда X равен -СН-), при условии образования стабильной структуры. В представленном примере R может находиться либо в 5-членном, либо в 6-членном кольце конденсированной кольцевой системы. В приведенной выше формуле подстрочная буква у, следующая сразу за буквой R, заключенная в скобки, представляет собой числовую переменную. Если не указано иное, эта переменная может быть 0, 1, 2 или любым целым числом больше 2, ограниченным только максимальным числом замещаемых атомов водорода в кольце или кольцевой системе.
Для химических групп и классов соединений число атомов углерода в группе или классе указано ниже: Cn определяет точное число (n) атомов углерода в группе/классе. C<n определяет максимальное количество (n) атомов углерода, которое может быть в группе/классе, с минимальным числом, настолько малым, насколько это возможно для рассматриваемой группы/класса.
Например, подразумевается, что минимальное количество атомов углерода в группах алкиЛ(C<8), алкандииЛ(C<8), гетероариЛ(C<8), ациЛ(C<8) и гетероциклоалкиЛ(C<8) - один, минимальное количество атомов углерода в группах алкениЛ(C<8), алкендииЛ(C<8) и алкиниЛ(C<8) - два, минимальное количество атомов углерода в группах циклоалкил^) и циклоалкандииЛ(C<8) -три, а минимальное количество атомов углерода в группах ариЛ(C<8) и аренедииЛ(C<8) - шесть. Cn-n' определяет как минимальное (n), так и максимальное количество (n') атомов углерода в группе. Таким образом, алкиЛ(C210), обозначает только алкильные группы, которые содержат от 2 до 10 атомов углерода. Данные индикаторы числа атомов углерода могут предшествовать химическими группами или классами, которые они модифицируют, или могут следовать за ними, и могут заключаться или не заключаться в круглые скобки без каких-либо изменений в значении. Таким образом, термины С5 олефин, С5-олефин, олефиH(C5) и олефинС5 являются синонимами. Когда любая из химических групп или классов соединений, определенных в данном документе, модифицируется термином замещенный, любой атом углерода во фрагменте, замещающем атом водорода, не учитывается в подсчете. Таким образом, метоксигексил, который имеет в общей сложности семь атомов углерода, является примером замещенного алкила(C1.6). Если не указано иное, любая химическая группа или класс соединений, перечисленные в наборе формулы изобретения без ограничения числа атомов углерода, имеют предел числа атомов углерода, меньший или равный двенадцати.
Термин насыщенный при использовании для модификации соединения или химической группы, означает, что соединение или химическая группа не имеет двойных углерод-углеродных и тройных углерод-углеродных связей, за исключением случаев, указанных ниже. При использовании термина для модификации атома, он означает, что атом не является частью какой-либо двойной или тройной связи. В случае замещенных версий насыщенных групп может присутствовать одна или несколько двойных связей углерод-кислород или двойная связь углерод-азот. И когда такая связь присутствует, то не исключаются двойные связи углерод-углерод, которые могут возникать как часть кето-енольной таутомерии или имин/енаминной таутомерии. При использовании термина насыщенный для модификации раствора вещества, он означает, что это вещество больше не может раствориться в этом растворе.
Термин алифатический означает, что соединение или химическая группа, модифицированная таким образом, представляет собой ациклическое или циклическое, но неароматическое соединение или группу. В алифатических соединениях/группах атомы углерода могут быть объединены в прямые цепи, разветвленные цепи или неароматические кольца (алициклические). Алифатические соединения/группы могут быть насыщенными, то есть, соединенными одинарными углерод-углеродными связями (алканы/алкил), или ненасыщенными, с одной или несколькими углерод-углеродными двойными связями (алкены/алкенил) или с одной или несколькими углерод-углеродными тройными связями (алкины/алкинил).
Термин ароматический означает, что соединение или химическая группа, модифицированная таким образом, имеет плоское ненасыщенное кольцо атомов с 4n+2 электронами в полностью сопряженной
- 26 043609 циклической п-системе.
Термин алкил при использовании без модификатора замещенный относится к одновалентной насыщенной алифатической группе с атомом углерода в качестве точки присоединения, линейной или разветвленной ациклической структурой и не содержащей атомов, кроме углерода и водорода. Группы -СН3 (Me), -СН2СН3 (Et), -CH2CH2CH3 (nPr или пропил), -СН(СН3)2 (iPr, Er или изопропил), -СН2СН2СН2СН3 (nBu), -СН(СН3)СН2СН3 (втор-бутил), -СН2СН(СН3)2 (изобутил), -С(СН3)3 (трет-бутил, t-бутил, tBu или tBu) и -СН2С(СН3)3 (неопентил) являются неограничивающими примерами алкильных групп. Термин алкандиил при использовании без замещенного модификатора относится к двухвалентной насыщенной алифатической группе, с одним или двумя насыщенными атомами углерода в качестве точки (точек) присоединения, линейной или разветвленной ациклической структурой, без двойных или тройных связей углерод-углерод и не содержащей атомов кроме углерода и водорода. Группы -СН2(метилен), -СН2СН2-, -СН2С(СН3)2СН2-, и -СН2СН2СН2- являются неограничивающими примерами алкандиильных групп. Термин алкилиден при использовании без модификатора замещенный относится к двухвалентной группе =CRR', в которой R и R' независимо представляют собой водород или алкил. Неограничивающие примеры алкилиденовых групп включают: =СН2, =СН(СН2СН3) и =С(СН3)2. Алкан относится к классу соединений, имеющих формулу H-R, где R представляет собой алкил в соответствии с определением данного термина выше. Когда любой из этих терминов используется с замещенным модификатором, один или несколько атомов водорода были независимо заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -C(O)H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(О)СН3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -ОС(О)СНз, -NHC(O)CH3, -S(O)2CH3, -S(O)2OH или -S(O)2NH2. Следующие группы являются неограничивающими примерами замещенных алкильных групп: -СН2ОН, -CH2Cl, -CF3, -CH2CN, -СН2С(О)ОН, -СН2С(О)ОСН3, -CH2C(O)NH2, -СН2С(О)СН3, -Сн2ОСНз, -СН2ОС(О)СНз, -CH2NH2, -CH2N(CH3)2 и -CH2CH2Cl. Термин галогеналкил представляет собой подмножество замещенного алкила, в котором замещение атома водорода ограничено галогеном (т.е. -F, -Cl, -Br или -I), так что отсутствуют любые другие атомы кроме углерода, водорода и галогена. Группа -CH2Cl является неограничивающим примером галогеналкила. Термин фторалкил представляет собой подмножество замещенного алкила, в котором замена атома водорода ограничена фтором, так что отсутствуют любые другие атомы кроме углерода, водорода и фтора. Группы -CH2F, -CF3 и -CH2CF3 являются неограничивающими примерами фторалкильных групп.
Термин циклоалкил при использовании без модификатора замещенный относится к одновалентной насыщенной алифатической группе с атомом углерода в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода образует часть одной или нескольких неароматических кольцевых структур, без углерод-углеродных двойных или тройных связи, и не содержащей атомов кроме углерода и водорода. Неограничивающие примеры включают в себя: -СН(СН2)2 (циклопропил), циклобутил, циклопентил или циклогексил (Су). Используемый в данном документе термин не исключает присутствия одной или нескольких алкильных групп (допускается ограничение числа атомов углерода), связанных с атомом углерода неароматической кольцевой структуры. Термин циклоалкандиил при использовании без модификатора замещенный относится к двухвалентной насыщенной алифатической группе с двумя атомами углерода в качестве точек присоединения, без углерод-углеродных двойных или тройных связей и не содержащей атомов кроме углерода и водорода. Группа является неограничивающим примером циклоалкандиильной группы. Циклолкан относится к классу соединений, имеющих формулу H-R, где R представляет собой циклоалкил в соответствии с определением данного термина выше. Когда любой из этих терминов используется с замещенным модификатором, один или несколько атомов водорода были независимо заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -С(О)Н, -СО2СН3, -CN, -SH, -ОСНз, -ОСН2СН3, -С(О)СНз, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -ОС(О)СН3, -NHC(O)CH3, -S(O)2CH3, -S(O)2OH или -S(O)2NH2.
Термин алкенил при использовании без модификатора замещенный относится к одновалентной ненасыщенной алифатической группе с атомом углерода в качестве точки присоединения, линейной или разветвленной, ациклической структурой, по меньшей мере одной неароматической углерод-углеродной двойной связью, без углерода -углеродных тройных связей, и не содержащей атомов кроме углерода и водорода. Неограничивающие примеры включают в себя: -СН=СН2 (винил), -СН=СНСН3, -СН=СНСН2СН3, -СН2СН=СН2 (аллил), -СН2СН=СНСН3 и -СН=СНСН=СН2. Термин алкендиил при использовании без модификатора замещенный относится к двухвалентной ненасыщенной алифатической группе с двумя атомами углерода в качестве точек присоединения, линейной или разветвленной, линейной или разветвленной ациклической структурой, по меньшей мере одной неароматической углерод-углеродной двойной связью, без углерод-углеродных тройных связей, и не содержащей атомов кроме углерода и водорода. Группы -СН=СН-, -СН=С(СН3)СН2-, -СН=СНСН2- и -СН2СН=СНСН2- являются неограничивающими примерами алкендиильных групп. Отмечено, что, хотя алкендиильная группа является алифатической, однажды соединенная на обоих концах, эта группа не исключается из формирования части ароматической структуры. Термины алкен и олефин являются синонимами и относятся к классу соединений, имеющих формулу H-R, где R представляет собой алкенил в соответствии с опреде
- 27 043609 лением данного термина выше. Аналогично, термины концевой алкен и α-олефин являются синонимами и относятся к алкену, имеющему только одну углерод-углеродную двойную связь, причем эта связь является частью винильной группы на конце молекулы. Когда любой из этих терминов используется с замещенным модификатором, один или несколько атомов водорода были независимо заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -ΝΗ2, -NO2, -СО2Н, -С(О)Н, -СО2СН3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(О)СНз, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -0(0^2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -ОС(О)СНз, -NHC(O)CH3, -S(O)2CH3, -S(O)2OH или -S(O)2NH2. Группы -CH=CHF, -CH=CHCl и -СН=СНВг являются неограничивающими примерами замещенных алкенильных групп.
Термин алкинил при использовании без модификатора замещенный относится к одновалентной ненасыщенной алифатической группе с атомом углерода в качестве точки присоединения, линейной или разветвленной ациклической структурой, по меньшей мере одной углерод-углеродной тройной связью и не содержащей атомов кроме углерода и водорода. Используемый в данном документе термин алкинил не исключает наличия одной или нескольких неароматических углерод-углеродных двойных связей. Группы -С=СН, -С=ССНз и -СН2С=ССНз являются неограничивающими примерами алкинильных групп. Алкин относится к классу соединений, имеющих формулу Η-R, где R представляет собой алкинил. Когда любой из этих терминов используется с замещенным модификатором, один или несколько атомов водорода были независимо заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -ΝΗ2, -NO2, -СО2Н, -С(О)Н, -СО2СН3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(О)СНз, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -С(О)^СНз)2, -ОС(О)СНз, -NHC(O)CH3, -SO2CH3, -S(O)2OH или -S(O)2NH2.
Термин арил при использовании без модификатора замещенный относится к одновалентной ненасыщенной ароматической группе с атомом ароматического углерода в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода образует часть одной или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет шесть атомов кольца, каждый из которых являются углеродом, и группа не содержит атомов кроме углерода и водорода. Если присутствует более одного кольца, кольца могут быть конденсированы или не конденсированы. Неконденсированные кольца связаны ковалентной связью. Используемый в данном документе термин арил не исключает присутствия одной или нескольких алкильных групп (допускается ограничение числа атомов углерода), присоединенных к первому ароматическому кольцу или любому дополнительному присутствующему ароматическому кольцу. Неограничивающие примеры арильных групп включают фенил (Ph), метилфенил, (диметил)фенил, -С6Н4СН2СНз (этилфенил), нафтил и одновалентную группу, производную от бифенила (например, 4-фенилфенил). Термин арендиил при использовании без модификатора замещенный относится к двухвалентной ароматической группе с двумя атомами ароматического углерода в качестве точек присоединения, причем указанные атомы углерода образуют часть одной или нескольких шестичленных структур ароматического кольца, каждая из которых имеет шесть атомов кольца, каждый из которых является углеродом, и где двухвалентная группа не содержит атомов кроме углерода и водорода. Используемый в данном документе термин арендиил не исключает присутствия одной или нескольких алкильных, арильных и/или аралкильных групп (допускается ограничение числа атомов углерода), присоединенных к первому ароматическому кольцу или любому дополнительному присутствующему ароматическому кольцу. Если присутствует более одного кольца, кольца могут быть конденсированы или не конденсированы. Неконденсированные кольца связаны ковалентной связью. Неограничивающие примеры арендиильных групп включают:
Арен относится к классу соединений, имеющих формулу H-R, где R представляет собой арил в соответствии с определением данного термина выше. Бензол и толуол являются неограничивающими примерами аренов. Когда любой из этих терминов используется с замещенным модификатором, один или несколько атомов водорода были независимо заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -ΝΗ2, -NO2, -СО2Н, -С(О)Н, -СО2СН3, -CN, -SH, -ОСНз, -ОСН2СН3, -С(О)СНз, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -С(О)^СНз)2, -ОС(О)СНз, -NHC(O)CH3, -SO2CH3, -S(O)2OH или -S(O)2NH2.
Термин аралкил при использовании без модификатора замещенный относится к одновалентной группе -алкандиил-арил, в которой термины алкандиил и арил используются каждый в соответствии с определениями, приведенными выше.
Неограничивающими примерами являются: фенилметил (бензил, Bn) и 2-фенилэтил. Когда термин аралкил используется с замещенным модификатором, один или несколько атомов водорода из алкандиильной и/или арильной группы независимо были заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -ΝΗ2, -NO2, -CO2H, -C(O)H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСНз, -ОСН2СНз, -С(О)СНз, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -ОС(О)СНз, -NHC(O)CH3, -SO2CH3, -S(O)2OH или -S(O)2NH2. Неограничивающими примерами замещенных аралкилов являются: (З-хлорфенил)метил и 2-хлор-2-фенил-этил-1-ил.
Термин гетероарил при использовании без модификатора замещенный относится к одновалентной ароматической группе с атомом ароматического углерода или атомом азота в качестве точки присое
- 28 043609 динения, причем указанный атом углерода или атом азота образуют часть одной или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая кольцевая структура имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по меньшей мере один из кольцевых атомов ароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу, и где гетероарильная группа не содержит атомов кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы. Если присутствует более одного кольца, кольца конденсируются; однако термин гетероарил не исключает присутствия одной или нескольких алкильных, циклоалкильных, гетероциклоалкильных, арильных и/или аралкильных групп (допускается ограничение числа атомов углерода), связанных с одним или несколькими атомами кольца. Неограничивающие примеры гетероарильных групп включают в себя фуранил, имидазолил, индолил, индазолил (Im), изоксазолил, метилпиридинил, оксазолил, фенилпиридинил, пиридинил (пиридил), пирролил, пиримидинил, пиразинил, хинолил, хиназолил, хиноксалинил, триазинил, тетразолил, тиазолил, тиенил и триазолил. Термин гетероарендиил при использовании без модификатора замещенный относится к двухвалентной ароматической группе с двумя атомами ароматического углерода, двумя атомами ароматического азота или одним атомом ароматического углерода и одним атомом ароматического азота в качестве двух точек присоединения, указанные атомы образуют часть одной или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая из которых содержит от трех до восьми кольцевых атомов, где по меньшей мере один из кольцевых атомов ароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу и где двухвалентная группа не содержит атомов кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы. Если присутствует более одного кольца, кольца конденсируются; однако термин гетероарендиил не исключает присутствия одной или нескольких алкильных или арильных групп (допускается ограничение числа атомов углерода), присоединенных к одному или нескольким атомам кольца. Неограничивающие примеры гетероарендиильных групп включают:
Термин N-гетероарил относится к гетероарильной группе с атомом азота в качестве точки присоединения. Гетероарен относится к классу соединений, имеющих формулу H-R, где R представляет собой гетероарил. Пиридин и хинолин являются неограничивающими примерами гетероаренов. Когда эти термины используются с замещенным модификатором, один или несколько атомов водорода либо в гетероарильном кольце, либо в любых присоединенных к ним алкильных, циклоалкильных, гетероциклоалкильных, арильных и/или аралкильных группах независимо заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2,
-NO2, -СО2Н, -С(О)Н, -СО2СН3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(О)СНз, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -ОС(О)СНз, -NHC(O)CH3, -S(O)2CH3, -S(O)2OH или -SO2NH2.
Термин гетероциклоалкил при использовании без модификатора замещенный относится к одновалентной неароматической группе с атомом углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота образуют часть одной или нескольких неароматических кольцевых структур, каждая кольцевая структура имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу и где гетероциклоалкильная группа не содержит атомов кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы. Если присутствует более одного кольца, кольца конденсированы. Используемый в данном документе термин не исключает присутствия одной или нескольких алкильных или циклоалкильных групп (допускается ограничение числа атомов углерода), связанных с одним или несколькими атомами кольца. Также этот термин не исключает наличия одной или нескольких двойных связей в кольце или кольцевой системе при условии, что полученная группа остается неароматической. Неограничивающие примеры гетероциклоалкильных групп включают азиридинил, азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, тиоморфолинил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофуранил, тетрагидропиранил, пиранил, оксиранил и оксетанил. Термин гетероциклоалкандиил при использовании без модификатора замещенный относится к двухвалентной циклической группе с двумя атомами углерода, двумя атомами азота или одним атомом углерода и одним атомом азота в качестве двух точек присоединения, причем указанные атомы образуют часть одной или более кольцевых структур, где по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматических кольцевых структур представляет собой азот, кислород или серу, и где двухвалентная группа не содержит атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы. Если присутствует более одного кольца, кольца конденсированы. Используемый в данном документе термин гетероциклоалкандиил не исключает присутствия одной или нескольких алкильных групп (допускается ограничение числа атомов углерода), связанных с одним или несколькими атомами кольца. Также этот термин не исключает наличия одной или нескольких двойных связей в кольце или кольцевой системе при условии, что полученная группа остается неароматической. Неограничивающие примеры гетероциклоалкандиильных групп включают:
- 29 043609
Термин N-гетероциклоалкил относится к гетероциклоалкильной группе с атомом азота в качестве точки присоединения. N-пирролидинил является примером такой группы. Когда эти термины используются с замещенным модификатором, один или несколько атомов водорода либо в гетероциклоалкильном кольце, либо в любых присоединенных к нему алкильных и/или циклоалкильных группах независимо были заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -СО2Н, -С(О)Н, -СО2СНз, -CN, -SH, -ОСНз, -ОСН2СН3, -С(О)СНз, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -С (O)N(CH3)2, -OC(O)CH3, -NHC(O)CH3, -S(O)2CH3, -S(O)2OH и -S (O)2NH2.
Термин ацил при использовании без модификатора замещенный относится к группе -C(O)R, в которой R представляет собой водород, алкил, циклоалкил или арил, в соответствии с определениями данных терминов выше. Группы -СНО, -С(О)СН3 (ацетил, Ас), -С(О)СН2СН3, -С(О)СН(СН3)2, -С(О)СН(СН2)2, -С(О)С6Н5 и -C(O)C6H4CH3 являются неограничивающими примерами ацильных групп. Тиоацил определяется аналогичным образом, за исключением того, что атом кислорода группы -C(O)R был заменен атомом серы, -C(S)R. Термин альдегид соответствует алкильной группе в соответствии с определением выше, присоединенной к группе -СНО-. Когда любой из этих терминов используется с замещенным модификатором, один или несколько атомов водорода (включая атом водорода, непосредственно присоединенный к атому углерода карбонильной или тиокарбонильной группы, если таковые имеются) были независимо заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -C(O)H, -СО2СН3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(О)СНз, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -ОС(О)СНз, -NHC(O)CH3, -S(O)2CH3, -S(O)2OH и -S(O)2NH2. Группы, -C(O)CH2CF3, -CO2H (карбоксил), -СО2СНз (метилкарбоксил), -СО2СН2СНз, -C(O)NH2 (карбамоил) и -CON(CH3)2 являются неограничивающими примерами замещенных ацильных групп.
Термин алкокси при использовании без модификатора замещенный относится к группе -OR, в которой R представляет собой алкил в соответствии с определением данного термина выше. Неограничивающие примеры включают в себя: -ОСНз (метокси), -ОСН2СНз (этокси), -ОСН2СН2СНз, -ОСН(СНз)2 (изопропокси) или -ОС(СНз)з (трет-бутокси). Термины циклоалкокси, алкенилокси, алкинилокси, арилокси, аралкокси, гетероарилокси, гетероциклоалкокси и ацилокси при использовании без модификатора замещенный относятся к группам, определенным как -OR, где R представляет собой циклоалкил, алкенил, алкинил, арил, аралкил, гетероарил, гетероциклоалкил и ацил соответственно. Термины алкилтио и ацилтио при использовании без модификатора замещенный относятся к группе -SR, в которой R представляет собой алкил и ацил соответственно. Термин спирт соответствует алкану в соответствии с определением выше, где по меньшей мере один из атомов водорода заменен гидроксигруппой. Термин эфир соответствует алкану в соответствии с определением выше, где по меньшей мере один из атомов водорода замещен алкоксигруппой. Когда любой из этих терминов используется с замещенным модификатором, один или несколько атомов водорода были независимо заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -СО2Н, -С(О)Н, -СО2СН3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(О)СН3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -С(О)Ц(СНз)2, -ОС(О)СНз, -NHC(O)CH3, -S(O)2CH3, -S(O)2OH или -S(O)2NH2.
Термин алкиламино при использовании без модификатора замещенный относится к группе NHR, в которой R представляет собой алкил в соответствии с определением данного термина выше.
Неограничивающие примеры включают в себя: -NHCH3 и -NHCH2CH3. Термин диалкиламино при использовании без модификатора замещенный относится к группе -NRR', в которой R и R' могут быть одинаковыми или разными алкильными группами.
Неограничивающие примеры диалкиламиногрупп включают: -N(CH3)2 и -N(CH3)(CH2CH3). Термины циклоалкиламино, алкениламино, алкиниламино, ариламино, аралкиламино, гетероариламино, гетероциклоалкиламино и алкоксиамино при использовании без модификатора замещенный относятся к группам, определенным как -NHR, где R представляет собой циклоалкил, алкенил, алкинил, арил, аралкил, гетероарил, гетероциклоалкил и алкокси соответственно. Неограничивающим примером ариламиногруппы является -NHC6H5. Термин амидо (ациламино) при использовании без модификатора замещенный относится к группе -NHR, где R представляет собой ацил в соответствии с определением данного термина выше. Неограничивающим примером амидогруппы является -NHC(O)CH3. При использовании любого из данных терминов с модификатором замещенный один или несколько атомов водорода, прикрепленных к атому углерода, были независимо заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -C(O)H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСНз, -ОСН2СНз, -С(О)СНз, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -ОС(О)СНз, -NHC(O)CH3, -S(O)2CH3, -S(O)2OH или -S(O)2NH2. Группы -NHC(O)OCH3 и -NHC(O)NHCH3 являются неограничивающими примерами замещенных амидогрупп.
Использование слова в единственном числе при применении в сочетании с термином содержащий в пунктах формулы изобретения и/или в спецификациях может означать один, но оно также соответствует значению один или более, по меньшей мере один и один или более одного.
Во всей данной заявке термин примерно используется для указания того, что значение включает внутреннюю вариацию ошибки для устройства, способа, используемого для определения значения, или вариацию, которая существует среди субъектов исследования.
- 30 043609
Активный ингредиент (AI) (также называемый активным соединением, активным веществом, активным агентом, фармацевтическим агентом, веществом, агентом, биологически активной молекулой или терапевтическим соединением) является ингредиентом в фармацевтическом препарате или пестициде, который является биологически активным. Подобные термины активный фармацевтический ингредиент (API) и объемный активный компонент также используются в медицине, а термин активное вещество может использоваться для пестицидных составов.
Термины содержать, иметь и включать являются неограничивающими глаголами-связками. Любые формы или времена одного или нескольких из этих глаголов, такие как содержит, содержащий, имеет, имеющий, включает и включающий, также являются неограничивающими. Например, любой способ, который содержит, имеет или включает одну или несколько стадий, не ограничивается наличием только этих одной или нескольких стадий, а также охватывает другие не включенные в список этапы.
Термин эффективный при использовании данного термина в описании и/или формуле изобретения, означает адекватный для достижения желаемого, ожидаемого или предполагаемого результата. Эффективное количество, терапевтически эффективное количество или фармацевтически эффективное количество при использовании в контексте лечения пациента или субъекта соединением означает такое количество соединения, которое при введении субъекту или пациенту для лечения или профилактики заболевания представляет собой количество, достаточное для осуществления такого лечения или профилактики заболевания.
Вспомогательное вещество представляет собой фармацевтически приемлемое вещество, объединенное в состав вместе с активными ингредиентами лекарственного средства, фармацевтической композиции, состава или системы доставки лекарственного средства. Вспомогательные вещества могут быть использованы, например, для стабилизации композиции, для увеличения объема композиции (такие вещества часто называют наполнителями, объемообразующими препаратами или разбавителями при использовании в данных целях) или для улучшения терапевтического эффекта активного ингредиента в конечной дозированной форме, например, облегчение всасывания лекарственного средства, снижение вязкости или повышение растворимости. Вспомогательные вещества включают фармацевтически приемлемые версии антиадгезивов, связующих веществ, покрытий, красителей, дезинтегрантов, ароматизаторов, глидантов, смазок, консервантов, сорбентов, подсластителей и носителей. Основное вспомогательное вещество, которое служит средой для доставки активного ингредиента, обычно называют носителем.
Вспомогательные вещества могут также использоваться в процессе производства, например, для облегчения обращения с активным веществом, например, путем улучшения текучести порошка или предотвращения прилипания, в дополнение к способствованию стабильности in vitro, такой как предотвращение денатурации или агрегации в течение ожидаемого срока годности. Пригодность вспомогательного вещества обычно будет варьироваться в зависимости от пути введения, дозированной формы, активного ингредиента, а также других факторов.
Термин гидрат при использовании в качестве модификатора соединения означает, что соединение имеет менее одной (например, полугидрат), одну (например, моногидрат) или более одной (например, дигидрат) молекулы воды, связанной с каждой молекулой соединения, например, в твердой форме соединения.
Используемый в данном документе термин IC50 относится к ингибирующей дозе, которая составляет 50% от максимального полученного ответа. Данная количественная мера показывает, сколько конкретного лекарства или другого вещества (ингибитора) необходимо для половинного ингибирования данного биологического, биохимического или химического процесса (или компонент процесса, то есть фермента, клетки, клеточного рецептора или микроорганизма).
Изомер первого соединения представляет собой отдельное соединение, в котором каждая молекула содержит те же составляющие атомы, что и первое соединение, но при этом конфигурация таких атомов в трех измерениях отличается.
Используемый в данном документе термин пациент или субъект относится к живому организму млекопитающего, такому как человек, обезьяна, корова, овца, коза, собака, кошка, мышь, крыса, морская свинка или их трансгенные виды. В определенных вариантах осуществления пациентом или субъектом является примат. Неограничивающими примерами пациентов-людей являются взрослые, подростки, младенцы и плоды.
В общем при использовании в данном документе фармацевтически приемлемый используется в данном документе для обозначения таких соединений, материалов, композиций и/или лекарственных форм, которые в рамках рационального медицинского решения, являются подходящими для применения в контакте с тканями, органами и/или телесными жидкостями людей и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или других проблем или осложнений и соразмерно разумному соотношению пользы/риска.
Фармацевтически приемлемые соли означают соли соединений по настоящему изобретению, которые являются фармацевтически приемлемыми в соответствии с определением выше, и которые обла
- 31 043609 дают желаемой фармакологической активностью. Такие соли включают соли присоединения кислот, образованные с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и тому подобное; или с органическими кислотами, такими как 1,2-этандисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, 2нафталинсульфокислота, 3-фенилпропионовая кислота, 4,4'-метиленбис(3-гидрокси-2-ен-1 -карбоновая кислота), 4-метилбицикло[2.2.2]окт-2-ен-1-карбоновая кислота, уксусная кислота, алифатические моно- и дикарбоновые кислоты, алифатические серные кислоты, ароматические серные кислоты, бензолсульфоновая кислота, бензойная кислота, камфорсульфоновая кислота, угольная кислота, коричная кислота, лимонная кислота, циклопентанепропионовая кислота, этансульфоновая кислота, фумаровая кислота, глюкогепт, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гликолевая кислота, гептановая кислота, гексановая кислота, гидроксинафтойная кислота, молочная кислота, лаурилсульфурная кислота, малеиновая кислота, яблочная кислота, малоновая кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, муконовая кислота, о-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, щавелевая кислота, п-хлорбензолсульфокислота, фенилзамещенные алкановые кислоты, пропионовая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, пировиноградная кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, янтарная кислота, винная кислота, третбутилуксусная кислота, триметилуксусная кислота и тому подобное. Фармацевтически приемлемые соли также включают соли присоединения оснований, которые могут образовываться, когда присутствующие кислотные протоны способны реагировать с неорганическими или органическими основаниями. Приемлемые неорганические основания включают гидроксид натрия, карбонат натрия, гидроксид калия, гидроксид алюминия и гидроксид кальция. Приемлемые органические основания включают этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, N-метилглюкамин и тому подобное. Следует признать, что конкретный анион или катион, образующий часть любой соли по данному изобретению, не является критичным, если соль в целом является фармакологически приемлемой. Дополнительные примеры фармацевтически приемлемых солей и способы их приготовления и применения представлены в Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use (P.H. Stahl & C.G. Wermuth eds., Verlag Helvetica Chimica Acta, 2002).
Фармацевтически приемлемый носитель, носитель лекарственного средства или просто носитель представляет собой фармацевтически приемлемое вещество, составленное вместе с лекарственным средством с активным ингредиентом, которое вовлечено в перенос, доставку и/или транспортировку химического агента. Носитель лекарственного средства можно использовать для улучшения доставки и эффективности лекарств, включая, например, технологию контролируемого высвобождения для модуляции биодоступности лекарств, снижения метаболизма лекарств и/или снижения токсичности лекарств. Некоторые носители лекарственных средств могут повысить эффективность доставки лекарств к конкретным целевым участкам. Примеры носителей включают: липосомы, микросферы (например, сделанные из сополимера молочной и гликолевой кислот), альбуминовые микросферы, синтетические полимеры, нановолокна, комплексы белок-ДНК, белковые конъюгаты, эритроциты, виросомы и дендримеры.
Фармацевтическое лекарственное средство (также называемое фармацевтическим средством, фармацевтическим препаратом, фармацевтической композицией, фармацевтическим составом, фармацевтическим продуктом, лекарственным средством, лекарством, лекарственным препаратом или просто препаратом) представляет собой соединение или композицию, используемую для диагностики, излечения, лечения или предотвращения болезни. Активный ингредиент (AI) (в соответствии с определением выше) представляет собой компонент в фармацевтическом препарате или пестициде, который является биологически активным. Подобные термины активный фармацевтический ингредиент (API) и объемный активный компонент также используются в медицине, а термин активное вещество может использоваться для пестицидных составов. Некоторые лекарства и пестицидные продукты могут содержать более одного активного ингредиента. В отличие от активных ингредиентов, неактивные ингредиенты в фармацевтических контекстах обычно называют вспомогательными веществами (в соответствии с определением выше).
Предотвращение или профилактика включает в себя: (1) ингибирование возникновения заболевания у субъекта или пациента, который может быть подвержен риску заболевания и/или предрасположен к нему, но еще не испытывает или не демонстрирует частично либо полностью патологию или симптоматику заболевания, и/или (2) замедление появления патологии или симптоматики заболевания у субъекта или пациента, который может быть подвержен риску заболевания и/или предрасположен к нему, но еще не испытывает или не демонстрирует частично либо полностью патологию или симптоматику заболевания.
Пролекарство означает соединение, которое превращается метаболически in vivo в ингибитор по настоящему изобретению. Само пролекарство может также обладать или не обладать активностью в отношении данного целевого белка. Например, соединение, содержащее гидроксигруппу, можно вводить в виде сложного эфира, который превращается гидролизом in vivo в гидроксисоединение. Подходящие сложные эфиры, которые могут превращаться in vivo в гидроксисоединения, включают ацетаты, цитраты, лактаты, фосфаты, тартраты, малонаты, оксалаты, салицилаты, пропионаты, сукцинаты, фумараты, малеаты, метилен-бис-в-гидроксинафтоат, гентизаты, изетионаты, ди-п-толуолтартраты, метансульфона- 32 043609 ты, этансульфонаты, бензолсульфонаты, п-толуолсульфонаты, циклогексилсульфаматы, хинаты, сложные эфиры аминокислот и тому подобное. Аналогично, соединение, содержащее аминогруппу, можно вводить в виде амида, который превращается гидролизом in vivo в соединение амина.
Стереоизомер или оптический изомер представляет собой изомер данного соединения, в котором такие же атомы связаны с другими такими же атомами, но где конфигурация этих атомов в трех измерениях отличается. Энантиомеры представляют собой стереоизомеры данного соединения, которые являются зеркальным отображением друг друга, как левая и правая руки. Диастереомеры представляют собой стереоизомеры данного соединения, которые не являются энантиомерами. Хиральные молекулы содержат хиральный центр, также называемый стереоцентром или стереогенным центром, который представляет собой любую точку, хотя и не обязательно атом, в несущей группы молекуле, расположенную таким образом, так что взаимозамена любых двух групп приводит к стереоизомеру. В органических соединениях хиральный центр обычно представляет собой атом углерода, фосфора или серы, хотя другие органические и неорганические соединения также могут быть стереоцентрами. Молекула может иметь несколько стереоцентров и, соответственно, много стереоизомеров. В соединениях, стереоизомерия которых обусловлена тетраэдрическими стереогенными центрами (например, тетраэдрическим углеродом), общее количество гипотетически возможных стереоизомеров не будет превышать 2n, где n равно числу тетраэдрических стереоцентров. Молекулы с симметрией часто имеют меньше максимально возможного количества стереоизомеров. Смесь энантиомеров с соотношением 50:50 называется рацемической смесью. Альтернативно, смесь энантиомеров может быть энантиомерно обогащена, так что один энантиомер присутствует в количестве, превышающем 50%. Как правило, энантиомеры и/или диастереомеры могут быть отделены друг от друга или разделены с использованием методик, известных в данной области.
Предполагается, что для любого стереоцентра или оси хиральности, стереохимия которых не была определена, такой стереоцентр или ось хиральности может присутствовать в форме R, форме S или в виде смеси форм R и S, включая рацемический и нерацемические смеси. При использовании в данном описании фраза по существу свободная от других стереоизомеров означает, что композиция содержит <15%, более предпочтительно <10%, еще более предпочтительно <5%, или наиболее предпочтительно <1% других стереоизомеров.
Лечение или процесс лечения включает (1) ингибирование заболевания у субъекта или пациента, испытывающего или проявляющего патологию или симптоматику заболевания (например, прекращение дальнейшего развития патологии и/или симптоматики), (2) ослабление заболевания у субъекта или пациента, который испытывает или демонстрирует патологию или симптоматику заболевания (например, обращение патологии и/или симптоматики) и/или (3) способствование любому измеримому уменьшению заболевания или симптомов у субъекта или пациента, который испытывает или демонстрирует патологию или симптоматику заболевания.
Термин единичная доза относится к составу соединения или композиции, особенности которого в том, что состав изготавливается способом, подходящим для изготовления одной терапевтически эффективной дозы активного ингредиента пациенту за одно введение. Такие составы с единичной дозой, которые могут быть использованы, включают, но не ограничиваются ими, одну таблетку, капсулу или другие составы для перорального введения или один флакон с жидкостью для шприца или другие составы для инъекций.
Список прочих сокращений, используемых в данном документе, прилагается далее. NO, оксид азота; iNOS, индуцибельная синтаза оксида азота; СОХ-2, циклооксигеназа-2; FBS, фетальная бычья сыворотка; IFNy или IFN-γ, интерферон-γ; TNFa или TNF-α, фактор некроза опухоли-α; Π.-1β, интерлейкин1 β; IL17 или IL-17, интерлейкин 17; RORy, связанный с рецептором ретиноевой кислоты орфанный рецептор γ; НО-1, индуцибельная гемоксигеназа; Me, метил; Bn, бензил; Et, этил; Pr, пропил; iPr, изопропил; Bu, бутил; i-Bu, изобутил; tBu или But, трет-бутил; Ph, фенил; Ас, ацетил; Bz, бензоил; Ts, тозил; Boc, трет-бутилоксикарбонил; колич., количественный; водн., водный; мас./мас., массовое соотношение; °C, градус Цельсия; N, нормальный или нормальность; ч, часы; атм, атмосферы; к.т., комнатная температура; ТСХ, тонкослойная хроматография; ДМСО, диметилсульфоксид; EtOAc, этилацетат; ДМФ, N,Nдиметилформамид; ДМА, диметилацетамид; MeCN, ацетонитрил; МТВЕ, метил-трет-бутиловый эфир; Et2O, диэтиловый эфир; ТГФ, тетрагидрофуран; МеОН, метанол, EtOH, этанол; iPrOH, изопропанол; НМРА, гексаметилфосфорамид; DME, диметоксиэтан; Pd/C, палладий на угле; Pd2(dba)3, трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0); Pd(dppf)Cl2, [1,1 '-бис(дифенилфосфино)ферроцен] дихлорпалладий(П); Ас2О, уксусный ангидрид; Tf2O, трифторметансульфоновый ангидрид; MsCl, метансульфонилхлорид; TFA, трифторуксусная кислота; TFAA, трифторуксусный ангидрид; TsOH или пTsOH, п-толуолсульфоновая кислота; Ру, пиридин; Et3N, триэтиламин; LDA, диизопропиламид лития; DIPEA, диизопропилэтиламин; LHMDS, бис(триметилсилил)амид лития; DMAP, диметиламинопиридин; NMP, N-метил-2-пирролидон; мХЛБК или м-ХЛБК, м-хлорпероксибензойная кислота; MOMCl, метоксиметилхлорид; TBSCl, трет-бутилдиметилсилилхлорид; SEMCl, 2-(триметилсилил)этоксиметилхлорид; TBAF, тетра-н-бутиламмонийфторид; PDC, дихромат пиридиния; DMP, периодинан Десса-Мартина; IBX, 2-иодоксибензойная кислота; Т3Р®, пропилфосфоновый ангидрид; DPPA, дифенилфосфорилазид;
- 33 043609
Ph3P или PPh3, трифенилфосфин; HATU, 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5Ь]пиридиний-3-оксид гексафторфосфат; NMO, N-метилморфолин-N-оксид; Xphos, 2дициклогексилфосфино-2',4',6'-трииозопропилбифенил; Ксантфос, 4,5-бис(дифенилфосфино)-9,9диметилксантен; PPTS, пиридиний-п-толуолсульфонат; DDQ, 2,3-дихлор-5,6-дициано-1,4-бензохинон; DAST, трифторид диэтиламиносеры; TMSCHN2, триметилсилилдиазометан; 9-BBN, 9борабицикло[3.3.1]нонан; DBDMH, 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин.
Вышеприведенные определения заменяют любое противоречащее определение в любой ссылке, которая включена в настоящее описание посредством ссылки. Однако тот факт, что определенные термины определены, не следует рассматривать как свидетельство того, что любой неопределенный термин является неопределенным. Скорее, предполагается, что все используемые термины описывают изобретение в терминах, позволяющих специалисту в данной области оценить объем и практическое применение настоящего изобретения.
Примеры
Следующие примеры включены для демонстрации предпочтительных вариантов осуществления изобретения.
Специалистам в данной области техники должно быть понятно, что методики, раскрытые в следующих примерах, представляют собой методики, открытые изобретателем, которые хорошо функционируют при практическом осуществлении данного изобретения, и, таким образом, могут рассматриваться как составляющие предпочтительные способы для его практического применения. Однако специалистам в данной области техники в свете настоящего раскрытия должно быть понятно, что в конкретных раскрытых вариантах осуществления может быть выполнено множество изменений, и все же может быть получен тот же или аналогичный результат без отклонения от сущности и объема изобретения.
Пример 1. Синтез и характеристика.
i. Синтез
Схема 1
Реагенты и условия: а) этилвинилкетон, Et3N, MeCN, к.т.; b) i) (R)-фенилаланин, (1S)-(+)камфорсульфоновая кислота, MeCN, 50-60°C; ii) кристаллизация; с) NaBH4, EtOH, -5°C; d) Н2, 5% Pd/BaSO4, EtOAc, 20°C; е) водн. 3N HCl, EtOH, 20°C; f) этиленгликоль, PPTS, толуол, обратный холодильник, -Н2О; g) Na2WO4-2H2O, Na2HPO4-12H2O, водн. 30% Н2О2, ДМА, 90°C; h) СО(ОМе)2, NaH, ТГФ, к.т. - 80°C; i) тиомочевина, KOBut, EtOH, обратный холодильник; j) ClCH2CO2H, Н2О, конц. HCl, 75100°C; k) РОС1з, DIPEA, 90°C; l) NaOMe, MeOH, 50°C.
- 34 043609
Схема 2
Реагенты и условия: а) бороновая кислота или сложный эфир бороновой кислоты, Ph3P, K3PO4, Pd(OAc)2, DME, ДМФ; b) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; ii) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 55°C; c) NaOMe, MeOH, 55°C; или K2CO3, MeOH, к.т.; е) DDQ, бензол, обратный холодильник.
Схема 3
Реагенты и условия: а) пиридин-3-бороновая кислота, Ph3P, K3PO4, Pd(OAc)2, DME, ДМФ, микроволновый излучатель, 100°C; b) i) LHMDS, PhSeCl, ТГФ, -78°C; ii) 30% водн. Н2О2, EtOAc, ТГФ, к.т.; с) I2, пиридин, 80°C; d) Zn(CN)2, Pd(PPh3)4, ДМФ, 80°C.
Схема 4
Реагенты и условия: а) 4-пиридинамин, Cs2CO3, ксантфос, Pd2(dba)3, 1,4-диоксан, 100°C; b) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 55°C; с) NaOMe, MeOH, 55°C; d) DDQ, бензол, 85°C.
- 35 043609
Схема 5
Реагенты и условия: a) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HC1, EtOH, H2O, 55°C; b) хинолин-4-бороновая кислота, Ph3P, K3PO4, Pd(OAc)2, DME, ДМФ, микроволновый излучатель, 110°C; с) NaOMe, MeOH, 55°C; d) DDQ, бензол, 85°C.
Схема 6
Реагенты и условия: a) K+BF3'(CH2)2NHBoc, Cs2CO3, Pd(dppf)Cl2, толуол, Н2О, 100°C; b) i) HCO2Et,
NaOMe, MeOH, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, N^OH-HCl, EtOH, H2O, 55°C; c) NaOMe, MeOH, 55°C; d) DDQ, толуол, 90°C; e) TFA, ТГФ, к.т.
Схема 7
Реагенты и условия: а) 4-амидинопиридина гидрохлорид, K2CO3, EtOH, к.т.; b) POCl3, толуол,
- 36 043609
100°C; с) PhB(OH)2, Na2CO3, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, Н2О, микроволновый излучатель, 100°C; d) i)
HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HC1, EtOH, Н2О, 55°C; е) NaOMe, MeOH, 55°C; f)
i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C; g) гидрид(диметилфосфиновая кислотаkP)[водород(диметилфосфинито-kP)]платина(II), EtOH, H2O, обратный холодильник.
Схема 8
Реагенты и условия: а) водн. 3N HCl, ТГФ, МеОН, к.т.; b) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; с) NH2OH-HC1, AcOH, EtOH, 60°C - к.т.; d) NaOMe, МеОН, к.т.; е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C; f) TsCl, пиридин, DMAP, CH2Cl2, к.т.
Схема 9
Реагенты и условия: a) PhCHO, NaOMe, ТГФ, к.т.; b) тиомочевина, KOBut, EtOH, обратный холодильник; с) RB(OH)2, тиофен-2-карбоксилат меди(I), Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, 100°C; d) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; е) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; f) NH2OH-HC1, EtOH, 50°C; g) NaOMe, МеОН, ТГФ, к.т.; h) i) Br2, ДМФ/СН2С12, 0°C; ii) пиридин, 50°C.
Схема 10
Реагенты и условия: a) Tf2O, Et3N CH2CI2, 0°C; b) 4-СН2ОН-PhB(OH)2, K2CO3, Pd(dppf)Ch, 1,4диоксан, 90°C.
- 37 043609
Схема 11
Реагенты и условия: a) RC(NH)NH2, KOBut, EtOH, обратный холодильник; b) MnO2, CH2C12, к.т.; с) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; е) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C; f) NaOMe, МеОН, ТГФ, к.т.; g) i) Br2, ДМФ, CH2Cl2, 0°C; ii) пиридин, 50°C.
Схема 12
Реагенты и условия: a) Tf2O, Et3N, CH2Cl2, 0°C; b) 4-CF3-PhB(OH)2, K3PO4, Pd(PPh3)4, DME, 90°C; с) водн. 3N HCl, MeOH, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; e) NH2OH-HCl, EtOH, 60°C - к.т.; f) NaOMe, MeOH, к.т.; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
- 38 043609
Схема 13
Реагенты и условия: а) POCl3, толуол, 100°C; b) водн. 3N HCl, МеОН, ТГФ, к.т.; с) RB(OH)2, K3PO4, Pd(PPh3)4, растворитель, 90°C; d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; е) NH2OH-HCl, EtOH, 60°C - к.т.; f) NaOMe, МеОН, к.т.; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 14
Реагенты и условия: a) PhB(OH)2, K2CO3, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, 90°C; b) хинолин-4-илбороновая кислота, K2CO3, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, ДМФ, 100°C; с) HCO2EL NaOMe, MeOH, к.т.; d) N^OH-HCl, EtOH, 50°C; е) NaOMe, MeOH, ТГФ, к.т.; f) i) Br2, ДМФ, CH2CL 0°C; ii) пиридин, 50°C.
Схема 15
Реагенты и условия: а) 2-метоксипиридин-4-бороновая кислота, K2CO3, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан,
- 39 043609
ДМФ, 100°C; b) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; с) N^OH-HCl, EtOH, 50°C; d) NaOMe, MeOH, ТГФ, к.т.; е)
i) Br2, ДМФ, CH2Cl2, 0°C; ii) пиридин, 50°C.
Схема 16
Реагенты и условия: a) MgBr2-OEt2, DIPEA, PhCOCl, CH2C12, к.т.; b) гуанидина карбонат, NaOMe, EtOH, обратный холодильник; с) водн. 1N HCl, МеОН, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; е) NH2OH-HCl, EtOH, Н2О, к.т.; f) NaOMe, MeOH, ТГФ, к.т.; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 65°C; h) циклогексанкарбонилхлорид, пиридин, CH2Cl2, к.т.
Схема 17
Реагенты и условия: a) MgBr2-OEt2, DIPEA, PhCH2COCl, CH2Cl2, к.т.; b) амидинопиридина гидрохлорид, K2CO3, EtOH, к.т.; с) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; е) N^OH-HCl, EtOH, 60°C - к.т.; f) NaOMe, MeOH, к.т.; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
- 40 043609
Схема 18
Реагенты и условия: а) 2-фторбензальдегид, KF/Al2O3, EtOH, к.т.; b) i) 4-хинолинкарбоксимидамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; или ii) DDQ, CH2Cl2, к.т.; с) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; d) i) HCO2Et, NaOMe, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NHzOH-HCl, EtOH, 55°C; е) NaOMe, МеОН, 55°C; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 19
Реагенты и условия: a) i) Br2, ДМФ, CH2Cl2, 0°C; ii) пиридин, 50°C.
Схема 20
Реагенты и условия: а) хинолин-4-карбоксимидамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, к.т.; b) POCl3, толуол, микроволновый излучатель, 100°C; с) RB(OH)2, Pd(dppf)Cl2, K2CO3, 1,4-диоксан, 90°C; d) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; е) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; f) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C; g) NaOMe, MeOH, ТГФ, к.т.; h) i) Br2, ДМФ, CH2Cl2, 0°C; ii) пиридин, 50°C.
- 41 043609
Схема 21
Реагенты и условия: а) 2-пропанол, NaH, ТГФ, к.т.; b) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; с) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C; е) NaOMe, MeOH, ТГФ, к.т.; f) i) Br2, ДМФ, CH2Cl2, 0°C; ii) пиридин, 50°C.
Реагенты и условия: а)
Схема 22
4,4,5,5-тетраметил-2-(проп-1-ен-2-ил)-1,3,2-диоксаборолан, Pd(dppf)Cl2,
K2CO3, 1,4-диоксан, 90°C; b) Н2, 10% Pd/C, ТГФ, к.т.; с) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; е) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C; f) NaOMe, МеОН, ТГФ, к.т.; g) i) Br2, ДМФ, CH2Cl2, 0°C; ii) пиридин, 50°C.
Схема 23
- 42 043609
Реагенты и условия: а) 2-метилпиридин-4-бороновая кислота, Pd(dppf)Cl2, K2CO3, 1,4-диоксан,
ДМФ, 90°C; b) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; с) NH2OH-HCl, EtOH, 60°C - к.т.; d) NaOMe, MeOH, к.т.; е) i)
DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 24
Реагенты и условия: а) сложный пинаколовый эфир N-Boc-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-бороновой кислоты, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, 90°C; b) 10% Pd/C, Н2, EtOAc, к.т.; с) HCO^t, NaOMe, МеОН, к.т.; d) NH2OH-HCl, EtOH, 60°C - к.т.; е) NaOMe, МеОН, к.т.; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C; g) HCl, 1,4-диоксан, CH2Cl2, к.т.; h) NaOAc, Ac2O, к.т.
Схема 25
Реагенты и условия: а) трет-бутил 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6дигидропиридин-1(2Н)-карбоксилат, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, 90°C; b) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; с) NH2OH-HCl, EtOH, 60°C - к.т.; d) NaOMe, MeOH, к.т.; е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C; f) HCl, 1,4-диоксан, CH2Cl2, к.т.; g) NaOAc, Ac2O, к.т.
- 43 043609
Схема 26
Реагенты и условия: а) 4-фторбензальдегид, KF/Al2O3, 2-PrOH, 60°C - к.т.; b) i) 2-метил-4пиридинкарбоксимидамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; с) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, 0°C до к.т.; е) NH2OH-HCl, AcOH, EtOH, 60°C - к.т.; f) K2CO3, МеОН, к.т.; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 27
Реагенты и условия: а) 2-метил-4-пиридинкарбоксимидамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, к.т.; b) i) POC13, толуол, микроволновый излучатель, 100°C; ii) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; с) 2-F-PhB(ОН)2, K2CO3, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, микроволновый излучатель, 100°C; d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; е) NH2OH-HCl, АсОН, EtOH, 60°C - к.т.; f) NaOMe, МеОН, к.т.; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
- 44 043609
Схема 28
Реагенты и условия: а) 2,4-дифторбензальдегид, KF/Al2O3, 2-PrOH, 60°C - к.т.; b) i) 4хинолинкарбоксимидамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; с) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, 0°C до к.т.; е) N^OH-HCl, AcOH, EtOH, 60°C - к.т.; f) K2CO3, МеОН, к.т.; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 29
Реагенты и условия: a) i) 2-хлорпиридин-4-карбоксимидамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, микроволновый излучатель, 120°C; ii) DDQ, CH2Cl2, к.т.; b) циклопропилбороновая кислота, K3PO4, Pd(OAc)2, трициклогексилфосфин, толуол, Н2О, микроволновый излучатель, 130°C; с) водн. 3N HCl, ТГФ, МеОН, к.т.; d) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, N^OH-HCl, EtOH, 55°C; е) NaOMe, МеОН, 55°C; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
- 45 043609
Схема 30
Реагенты и условия: а) тиомочевина, t-BuOK, EtOH, микроволновый излучатель, 120°C; b) DDQ, CH2Cl2, к.т.; с) NaBH4, MeI, EtOH, ТГФ, 0°C - к.т.; d) бороновая кислота или сложный эфир бороновой кислоты, тиофен-2-карбоксилат меди(I), Pd(PPh3)4, ТГФ, 100°C; е) водн. 3N HCl, ТГФ, МеОН, к.т.; f) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; g) NaOMe, МеОН, к.т. или 55°C; h) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 31
Реагенты и условия: а) бис(пинаколято)дибор, KOAc, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, 125°C.
Схема 32
Реагенты и условия: а) 157, меди(1) тиофен-2-карбоксилат, Pd(PPh3)4, ТГФ, 100°C; b) водн. 3N HCl, ТГФ, МеОН, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NHiOH-HCl, EtOH, 55°C; d) K2CO3, МеОН, к.т.; е) DDQ, бензол, 85°C.
- 46 043609
Схема 33
Реагенты и условия: а) морфолин, t-BuONa, Xphos, Pd2(dba)3, толуол, микроволновый излучатель, 100°C; b) водн. 3N HCl, ТГФ, МеОН, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; d) NaOMe, MeOH, 55°C; е) DDQ, бензол, обратный холодильник.
Схема 34
Реагенты и условия: a) PhB(OH)2, K2CO3, Pd(PPh3)4, толуол, EtOH, Н2О, микроволновый излучатель, 100°C; b) водн. 3N HCl, ТГФ, МеОН, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; d) NaOMe, MeOH, 55°C; e) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 35
Реагенты и условия: a) i) амидина гидрохлорид, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; b) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; с) HCO2Et, NaOMe, к.т.; d) NH2OH-HCl, AcOH, EtOH, нагрев; е) K2CO3, МеОН, к.т.; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
- 47 043609
Схема 36
Реагенты и условия: a) i) 6,7-дигидро-5H-циклопента[b]пиридин-4-карбоксимидамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, микроволновый излучатель, 120°C; ii) DDQ, CH2Cl2, к.т.; b) водн. 3N HCl, ТГФ, МеОН, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; d) K2CO3, MeOH, к.т.; е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 37
Реагенты и условия: a) 2-F-PhB(ОН)2, Na2CO3, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, Н2О, 100°C; b) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, ТГФ, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, N^OH-HCl, EtOH, 55°C; с) K2CO3, МеОН, к.т.; d) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 38
Реагенты и условия: a) TBAF-3H2O, MeCN, к.т.; b) бис(пинаколято)дибор, KOAc, Pd(dppf)Cl2, 1,4диоксан, 130°C.
Схема 39
Реагенты и условия: а) бис(пинаколято)дибор, KOAc, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, 125°C.
- 48 043609
Схема 40
Реагенты и условия: а) бороновая кислота или сложный эфир бороновой кислоты, Na2CO3, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, Н2О, микроволновый излучатель, нагрев; b) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; с) NaOMe, MeOH, 55°C; d) DDQ, бензол, обратный холодильник.
Схема 41
Реагенты и условия: а) изохинолин-5-бороновая кислота, Na2CO3, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, Н2О, микроволновый излучатель, 110°C; b) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, ТГФ, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, N^OH-HCl, EtOH, 55°C; с) K2CO3, МеОН, к.т.; d) DDQ, бензол, 85°C.
Схема 42
Реагенты и условия: а) бороновая кислота или сложный эфир бороновой кислоты, Na2CO3, Pd(dppf)Cl2, 1,4-диоксан, Н2О, микроволновый излучатель, 110°C; b) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; с) NaOMe, МеОН, 55°C; d) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
- 49 043609
Схема 43
Реагенты и условия: а) 1-метилпиперазин, NMP, 100°C; b) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, ТГФ, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; с) K2CO3, МеОН, к.т.; d) DDQ, бензол, 85°C.
Схема 44
Реагенты и условия: a) i) N-амидиноморфолина гидробромид, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; b) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; с) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; d) N^OH-HCl, HOAc, EtOH, 60°C - к.т.; е) K2CO3, МеОН, к.т.; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, ДМФ, 60°C.
Схема 45
Реагенты и условия: а) циклопропилбороновая кислота, K3PO4, Pd(OAc)2, трициклогексилфосфин, толуол, H2O, микроволновый излучатель, 130°C; b) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; с) NaOMe, MeOH, 55°C; d) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
- 50 043609
Схема 46
Реагенты и условия: a) i) POCl3, толуол, микроволновый излучатель, 100°C; ii) этиленгликоль,
TsOH-H2O, бензол, обратный холодильник, -Н2О; b) циклобутанол, NaH, ТГФ, 60°C; с) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; е) N^OH-HCl, АсОН, EtOH, 50°C; f) K2CO3, MeOH, к.т.; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 47
Реагенты и условия: а) циклобутанметанол, NaH, ТГФ, к.т. до 50°C; b) водн. 3N HCl, ТГФ, МеОН, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, ТГФ, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NHaOH-HCl, EtOH, 55°C; d) K2CO3, МеОН, к.т.; е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 48
Реагенты и условия: a) ROH, NaH, ТГФ, к.т. до 50°C; b) водн. 3N HCl, ТГФ, МеОН, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, ТГФ, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; d) NaOMe, МеОН, 55°C;
- 51 043609
е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 49
Реагенты и условия: a) MeSO2NH2, NaH, ДМФ, 80°C; b) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; с) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; d) NH2OH-HCl, EtOH, AcOH, 50°C; е) K2CO3, МеОН, к.т.; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 50
аТЮО ЬТ101
Реагенты и условия: а) бороновая кислота или сложный эфир бороновой кислоты, Pd(dppf)Cl2, Na2CO3, 1,4-диоксан, H2O, 110°C, микроволновый излучатель; b) водн. 3N HCl, МеОН, ТГФ, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; ii) водн. 6N HCl, N^OH-HCl, EtOH, 55°C; d) NaOMe, МеОН, 55°C; е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
- 52 043609
Схема 51
Реагенты и условия: а) бороновая кислота, Pd(dppf)Cl2, Na2CO3, 1,4-диоксан, H2O, 110°C, микроволновый излучатель; b) водн. 3N HCl, МеОН, ТГФ, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; ii) водн. 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; d) NaOMe, MeOH, 55°C; е) DDQ, бензол, обратный холодильник.
Схема 52
Реагенты и условия:
а) сложный пинаколовый эфир 5-метил-2-фуранбороновой кислоты,
Pd(dppf)Cl2, Na2CO3, 110°C, микроволновый излучатель; b) водн. 3N HCl, МеОН, ТГФ, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; ii) водн. 6N HCl, N^OH-HCl, EtOH, 55°C; d) NaOMe, МеОН, 55°C; е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 53
Реагенты и условия: a) Zn(CN)2, Pd(PPh3)4, ДМА, 120°C; b) водн. H2SO4, 100°C; с) i) HCO2Et, Na- 53 043609
OMe, МеОН, ТГФ, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; d) i) (COCl)2, ДМФ, CH2C12, 0°C к.т.; ii) ацетамидоксим, Et3N, CH2C12, 0°C - к.т.; е) толуол, обратный холодильник, Н2О; f) K2CO3, МеОН,
к.т.; g) DDQ, бензол, 85°C.
Схема 54
Реагенты и условия: a) NH2OH-HCl, NaHCO3, EtOH, обратный холодильник до к.т.; b) Ас2О, АсОН, к.т. до 100°C; с) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; d) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, ТГФ, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; е) K2CO3, МеОН; f) DDQ, бензол, 85°C.
Схема 55
Реагенты и условия: а) 2-(три-n-бутилстаннил)тиазол, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, обратный холодильник; b) водн. 3N HCl, МеОН, ТГФ, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, 0°C - к.т.; ii) водн. 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; d) K2CO3, МеОН, к.т.; е) DDQ, бензол, обратный холодильник.
- 54 043609
Схема 56
Реагенты и условия: а) 2-метил-4-хинолинкарбоксимидамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, 40°C; b) i) POC13, толуол, микроволновый излучатель, 100°C; ii) этиленгликоль, TsOH-H2O, бензол, обратный холодильник, -Н2О; с) RB(OH)2, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, 90°C; d) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; е) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; f) N^OH-HCl, EtOH, 60°C - к.т.; g) K2CO3, МеОН, к.т.; h) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 57
Реагенты и условия: a) ROH, NaH, ТГФ, 60°C; b) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; с) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; d) NH2OH-HCl, АсОН, EtOH, нагрев; е) K2CO3, МеОН, к.т.; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; или Br2, CH2Cl2, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
- 55 043609
Схема 58
Реагенты и условия: а) хиназолин-4-карбоксимидамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, 40°C; b) i) POCl3, толуол, микроволновый излучатель, 100°C; ii) этиленгликоль, TsOH-H2O, бензол, обратный холодильник, -Н2О; с) циклобутанол, NaH, ТГФ, 60°C; d) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; е) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; f) NH2OH-HCl, AcOH, EtOH, 50°C; g) K2CO3, MeOH, к.т.; h) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 59
Реагенты и условия: a) RB(OH)2, K2CO3, Pd(dppf)2Cl2, 1,4-диоксан, 90°C; b) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; с) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; d) N^OH-HCl, AcOH, EtOH, 50°C; е) K2CO3, МеОН, к.т.; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
- 56 043609
Схема 60
Реагенты и условия: a) SeO2, 1,4-диоксан, 100°C; b) NaBH4, EtOH, к.т.; с) DAST, CH2Cl2, 0°C; d) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; е) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; f) NH2OH-HCl, HOAc, EtOH, 60°C - к.т.; g) K2CO3, МеОН, к.т.; h) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, ДМФ, 60°C.
Схема 61
Реагенты и условия: а) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; b) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; с) NH2OH-HCl, HOAc, EtOH, 60°C до к.т.; d) K2CO3, МеОН, к.т.; е) DDQ, бензол, 80°C; f) NaOAc, Ac2O, к.т.
Схема 62
Реагенты и условия: а) 3,4-дигидро-2Н-пиран, PPTS, CH2Cl2, к.т.; b) i) t-BuOK, бензол, к.т. -60°C; ii)
MeI, 0°C - к.т.; с) PPTS, EtOH, обратный холодильник; d) этиленгликоль, п-TsOH, бензол, обратный хо- 57 043609 лодильник, Н2О; е) i) H2, Pd(OH)2 на С, МеОН, к.т.; ii) этиленгликоль, п-TsOH, бензол, обратный холодильник, H2O; f) PDC, MgSO4, CH2Cl2, к.т.
Схема 63
Реагенты и условия: а) 2-фторбензальдегид, KF/Al2O3, EtOH, к.т.; b) i) RC(NH)NH2-HCl, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; с) водн. HCl, МеОН, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, к.т.; е) N^OH-HCl, AcOH, EtOH, 60°C - к.т.; f) K2CO3, МеОН, к.т.; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 64
Реагенты и условия: a) SeO2, 1,4-диоксан, 100°C; b) NaBH4, EtOH, к.т.; с) DAST, CH2Cl2, 0°C; d) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; е) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; f) N^OH-HCl, HOAc, EtOH, 60°C - к.т.; g) K2CO3, МеОН, к.т.; h) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, ДМФ, 60°C.
- 58 043609
Схема 65
Реагенты и условия: а) 8-фтор-4-хинолинкарбоксимидамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, 40°C; b) i) POCl3, толуол, микроволновый излучатель, 100°C; ii) этиленгликоль, TsOH-H2O, бензол, обратный холодильник, -Н2О; с) NaH, циклопентанол, ТГФ; d) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; е) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.;
f) NH2OH-HCl, AcOH, EtOH, 50°C; g) K2CO3, MeOH, к.т.; h) i) Br2, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 66
Реагенты и условия: a) SeO2, 1,4-диоксан, 100°C; b) NaBH4, EtOH, к.т.; с) DAST, CH2«2, 0°C; d) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; е) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; f) NH2OH-HCl, HOAc, EtOH, 60°C - к.т.; g) K2CO3, МеОН, к.т.; h) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, ДМФ, 60°C.
- 59 043609
Схема 67
Реагенты и условия: a) MeMgBr, ТГФ, 0°C - к.т.; b) MnO2, CH2C12, к.т.; с) Me(Ph3P)Br, t-BuOK, ТГФ, 0°C - к.т.; d) Н2, Pd/C, MeOH, EtOAc, к.т.; е) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; f) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C к.т.; g) NH2OH-HCl, HOAc, EtOH, 60°C - к.т.; h) K2CO3, MeOH, к.т. -50°C; i) 1) DBDMH, ДМФ, 0°C; 2) пиридин, 60°C.
Схема 68
Реагенты и условия: a) IBX, DMSO, 65°C; b) KH, аллилбромид, ТГФ, 0°C; с) Н2, 10% Pd/C, MeOH, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C до к.т.; е) NH2OH-HCl, HOAc, EtOH, 60°C; f) K2CO3, MeOH, к.т. до 50°C; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
- 60 043609
Схема 69
Реагенты и условия: a) HCO2Et, NaOMe, 0°C до к.т.; b) PhNHCH3, MgSO4, n-TsOH-H2O, CH2C12, к.т.; с) t-BuOK, MeI, ТГФ, 0°C; d) NH2OH-HCl, водн. 1N HCl, EtOH, 55°C; е) NaOMe, MeOH, 55°C; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 70
Реагенты и условия: a) HCO2Et, NaOMe, 0°C до к.т.; b) PhNHCH3, бензол, обратный холодильник, Н2О, к.т.; с) t-BuOK, EtI, ТГФ, 0°C; d) NH2OH-HCl, водн. 1N HCl, EtOH, 55°C; е) NaOMe, МеОН, 55°C; f i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
- 61 043609
Схема 71
Реагенты и условия: а) N-метил анилин, молекулярное сито, CH2Cl2, к.т.; b) t-BuOK, MeI, ТГФ, 0°C; с) NH2OH-HCl, EtOH, водн. 1N HCl, 50°C; d) K2CO3, МеОН, к.т.; е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 72
Реагенты и условия: а) водн. 30% Н2О2, MeCN, к.т.
Схема 73
Реагенты и условия: а) водн. 30% Н2О2, MeCN, к.т.
Схема 74
Реагенты и условия: а) водн. 30% Н2О2, MeCN, к.т.
- 62 043609
Схема 75
Реагенты и условия: а) водн. 30% Н2О2, MeCN, к.т.
Схема 76
Реагенты и условия: а) водн. 30% Н2О2, MeCN, к.т.
Схема 77
Реагенты и условия: a) i) LHMDS, PhSeCl, ТГФ, -78°C; ii) 30% водн. Н2О2, EtOAc, ТГФ, к.т.; b) LDA, ТГФ, -78°C до 0°C; НМРА, CNCO2Me, ТГФ, -78°C.
Схема 78
Реагенты и условия: a) t-BuOK, аллилбромид, ТГФ, 0°C; b) NH2OH-HCl, водн. 1N HCl, EtOH, 55°C; с) i) 9-BBN, ТГФ, к.т.; ii) Н2О, водн. 3N NaOH, 30% Н2О2, 0°C до к.т.; d) NaOMe, MeOH, 55°C; е) DDQ, бензол, обратный холодильник.
- 63 043609
Схема 79
Реагенты и условия: а) K2CO3, МеОН, к.т.; b) 10% Pd/C, Н2, EtOAc, к.т.; с) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 80
Реагенты и условия: а) пирролидин, обратный холодильник; b) водн. 3N HCl, ТГФ, МеОН, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; ii) N^OH-HCl, водн. 6N HCl, EtOH, 55°C; d) NaOMe, МеОН, 55°C; е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 81
Реагенты и условия: а) 1-ацетилпиперазин, NMP, 100°C; b) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, ТГФ, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, N^OH-HCl, EtOH, 55°C; с) NaOMe, МеОН, 55°C; d) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, ДМФ, 55°C.
- 64 043609
Схема 82
Реагенты и условия: a) i) 6-хлорпиридин-3-карбоксимидамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, микроволновый излучатель, 120°C; ii) DDQ, CH2Cl2, к.т.; b) циклопропилбороновая кислота, K3PO4, Pd(OAc)2, трициклогексилфосфин, толуол, Н2О, микроволновый излучатель, 130°C; с) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; d) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; е) NaOMe, МеОН, 55°C; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 83
Реагенты и условия: a) PhB(OH)2, K2CO3, Pd(PPh3)4, толуол, EtOH, H2O, микроволновый излучатель, 110°C; b) водн. 3N HCl, ТГФ, МеОН, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; d) NaOMe, MeOH, 55°C; е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
- 65 043609
Схема 84
Реагенты и условия: а) винилтрифторборат калия, K3PO4, Pd2(dba)3, трициклогексилфосфин, 1,4диоксан, H2O, микроволновый излучатель, 140°C; b) водн. 3N HCl, МеОН, ТГФ, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, 0°C до к.т.; ii) 6N HCl, N^OH-HCl, EtOH, 55°C; d) MeSO2Na, AcOH, EtOH, 60°C; е) K2CO3, МеОН, к.т.; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 85
Реагенты и условия: а) 2-метил-4-пиридинкарбоксимидамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, 80°C; b)
- 66 043609 м-СРВА, CH2Cl2, к.т.; с) Ас2О, 80°C; d) K2CO3, МеОН, к.т.; е) MsCl, Et3N, DMAP, CH2Cl2, 0°C; f) MeSO2Na, ДМФ, к.т.; g) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; h) HCO2Et, NaOMe, МеОН, 0°C до к.т.; i) NH2OH-HCl,
AcOH, EtOH, 60°C; j) K2CO3, МеОН, к.т.; k) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 86
Реагенты и условия: а) MnO2, CH2Cl2, к.т.; b) MePPh3Br, t-BuOK, ТГФ, 0°C - к.т.; с) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, 0°C до к.т.; е) N^OH-HCl, AcOH, EtOH, 60°C; f MeSO2Na, AcOH, EtOH, 60°C; g) K2CO3, МеОН, к.т.; h) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 87
Реагенты и условия: а) этиленгликоль, п-TsOH·Н2О, к.т.; b) Li/NH3 (l), ТГФ, Н2О, -78°C; аллилбромид, -78°C; с) i) NaBH4, EtOH, 0°C; ii) водн. 3N HCl, к.т.
Схема 88
Реагенты и условия: а) 2-фторбензальдегид,
KF/Al2O3, EtOH, к.т.; b) i) 2-циклопропил-4- 67 043609 карбоксимидамид пиридина гидрохлорид, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; с) перйодинан Десса-Мартина, CH2Cl2, к.т.; d) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C - к.т.; ii) NH2OH-HCl, EtOH,
H2O, 55°C; е) NaOMe, MeOH, 55°C; f) DDQ, толуол, 85°C.
Схема 89
Реагенты и условия: а) Н2, 10% Pd/C, EtOAc, к.т.; b) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 90
Реагенты и условия: a) i) этилвинилкетон, Et3N, MeCN, 75°C; ii) D-фенилаланин, PPTS, DMSO, 45°C; b) i) NaBH4, EtOH, 0°C; ii) кристаллизация; с) i) H2, 10% Pd/C, пиридин, ТГФ, к.т.; ii) водн. 3N HCl, EtOH, к.т.; d) этиленгликоль, H-TsOH-H2O, толуол, обратный холодильник, -Н2О; е) Na2WO4·2Н2О, Na2HPO4·12Н2О, водн. 30% Н2О2, ДМА, 90°C; f) 2-фторбензальдегид, KFMI2O3, EtOH, ТГФ, к.т.; g) i) амидина гидрохлорид, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) DDQ, CH2Cl2, к.т.; h) водн. 3N HCl, МеОН, ТГФ, к.т.; i) 1) HCO2Et, NaOMe, МеОН, 0°C - к.т.; 2) водн. 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 55°C; j) NaOMe, МеОН, 55°C; k) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
- 68 043609
Схема 91
188с 416 417
Реагенты и условия: a) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; b) N-метиланилин, n-TsOH-H2O, MgSO4, CH2C12, к.т.; с) t-BuOK, MeI, ТГФ, 0°C; d) NH2OH-HCl, водн. 1N HCl, EtOH, 55°C; е) NaOMe, MeOH, 55°C; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 92
Реагенты и условия: а) метил(трифенилфосфоранилиден)ацетат, бензол, 80°C; b) Н2, 10% Pd/C, EtOAc, к.т.; с) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; е) N^OH-HCl, AcOH, EtOH, 60°C; f) K2CO3, МеОН, к.т.; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C; h) водн. 1N HCl, EtOH, 50°C; i) Me2NH-HCl, HATU, DIPEA, CH2Cl2, 0°C до к.т.
- 69 043609
Схема 93
Реагенты и условия: a) EtSO2Na, AcOH, EtOH, 60°C; b) K2CO3, МеОН, к.т.; с) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 94
Реагенты и условия: а) м-ХЛБК, CH2Cl2, к.т.; b) i) TFAA, CH2Cl2, к.т.; ii) насыщ. водн. NaHCO3, EtOAc, к.т.; с) MsCl, Et3N, DMAP, CH2Cl2, 0°C; d) EtSO2Na, ДМФ, к.т.; е) K2CO3, МеОН, к.т.; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 95
Реагенты и условия: a) NaBH4, EtOH, 0°C; b) Li/NH (l), t-BuOH, ТГФ, -78°C; c) H2, 10% Pd/C,
- 70 043609
EtOAc, 1 атм., к.т.; d) этиленгликоль, n-TsOH-H2O, бензол, обратный холодильник, -Н2О; е) PDC, MgSO4,
CH2C12, к.т.; f) 2-F-PhCHO, KF/Al2O3, EtOH, к.т.; g) i) амидина гидрохлорид, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; h) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; i) i) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; ii)
NHOH-HCl, EtOH, водн. 12N HCl, 50°C; j) K2CO3, МеОН, к.т.; k) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин,
60°C.
Схема 96
Реагенты и условия: a) t-BuOK, аллилбромид, ТГФ, 0°C; b) NH2OH-HCl, водн. 1N HCl, EtOH, 55°C; с) i) i-Bu3Al, CH2I2, CH2Cl2, к.т.; ii) NMO, OSO4, ацетон, Н2О, 0°C до к.т.; d) NaOMe, МеОН, 55°C; е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
Схема 97
Реагенты и условия: a) i) амидина гидрохлорид, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; b) перйодинан Десса-Мартина, CH2Cl2, к.т.; с) Н2, 10% Pd/C, EtOAc, к.т.; d) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C - к.т.; ii) водн. 6N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; е) NaOMe, MeOH, 55°C; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
- 71 043609
Схема 98
аТ160 ЬТ161
сТ162 dT163
Реагенты и условия: а) арилбороновая кислота, Pd(dppf)Cl2, K2CO3, 1,4-диоксан, 90°C; b) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, к.т.; ii) водн. 12N HCl, NH2OH-HCl, EtOH, 55°C; d) K2CO3, MeOH, к.т.; е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C, 2 ч; ii) пиридин, 60°C.
Схема 99
458 460 461 462
463 464 465 466
Реагенты и условия: а) 459, бензойная кислота, к.т.; b) NaBH4, EtOH, 0°C; с) Li/NH3 (l), t-BuOH, ТГФ, -78°C; d) H2, 10% Pd/C, EtOAc, 1 атм., к.т.; е) этиленгликоль, п-TsOH·Н2О, бензол, обратный холодильник, -Н2О; f PDC, MgSO4, CH2Cl2, к.т.; g) 2-F-PhCHO, KF/Al2O3, i-PrOH, к.т.; h) i) 4хинолинкарбоксимидамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; i) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т. до 50°C; j) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; ii) N^OH-HCl, EtOH, водн. 6N HCl, 55°C; k) K2CO3, MeOH, к.т.; l) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
- 72 043609
Схема 100
Реагенты и условия: a) i) амидин HCl, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; b) водн. HCl, ТГФ, к.т. до 50°C; с) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C до к.т.; ii) водн. HCl, H2NOH-HCl, EtOH, 55°C; d) K2CO3, MeOH, к.т.; е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 101
Реагенты и условия: a) t-BuOK, 3-хлор-2-метилпропен, ТГФ, 0°C до к.т.; b) H2NOH-HCl, водн. HCl, EtOH, 60°C до к.т.; с) K2CO3, МеОН, к.т.; d) DDQ, толуол, к.т.
Схема 102
Реагенты и условия: a) i) 2-циклопропилизоникотинамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; b) водн. 3N HCl, ТГФ, к.т.; с) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; ii) NH2OH-HCl, EtOH, водн. 12N HCl, 50°C; d) K2CO3, MeOH, к.т.; е) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
- 73 043609
Схема 103
Реагенты и условия: a) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; b) N-метиланилин, 3 А молекулярные сита, пTsOH, CH2Cl2, к.т.; с) i) LDA, циклогексан, ТГФ, 0°C; ii) аллилбромид, 0°C; d) NH2OH-HCl, 1N водн. HCl, EtOH, 55°C; e) K2CO3, MeOH, к.т.; f) 10% Pd/C, H2 (1 атм.), EtOAc, к.т.; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 104
Реагенты и условия: a) i) LDA, циклогексан, ТГФ, 0°C; ii) MeI, 0°C; b) NH2OH-HCl, EtOH, 1N водн. HCl, 55°C; с) K2CO3, МеОН, к.т.; d) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
- 74 043609
Схема 105
Реагенты и условия: а) 2^-бензальдегид, KF/Al2O3, EtOH, к.т.; b) i) амидин HCl, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; с) водн. HCl, ТГФ, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; е)
NH2OH-HCl, 12N водн. HCl, EtOH, 55°C; f) K2CO3, МеОН, к.т.; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 106
Реагенты и условия: а) Н2 (1 атм.), 5% Pd/C, 95% водн. EtOH, к.т.; b) 2-этил-2-метил-1,3-диоксолан, п-TsOH, этиленгликоль, 15°C; с) 2-F-бензальдегид, KF/Al2O3, EtOH, к.т.; d) i) амидин HCl, K2CO3, EtOH, обратный холодильник; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; е) водн. HCl, ТГФ, к.т.; f) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; g) NH2OH-HCl, 12N водн. HCl, EtOH, 55°C; h) K2CO3, МеОН, к.т.; i) 1) DBDMH, ДМФ, 0°C; 2) пиридин, 60°C.
- 75 043609
Схема 107
509 510 R = Нили Me 511
512 513
Реагенты и условия: а) MnO2, CH2C12, к.т.; b) метил (трифенилфосфоранилиден)ацетат, бензол, к.т.; с) Н2 (1 атм.), 10% Pd/C, EtOAc, к.т.; d) 3N водн. HCl, ТГФ, к.т.; е) HCO2Et, NaOEt, EtOH, к.т.; f) NH2OH-HCl, AcOH, EtOH, 60°C до к.т.; g) NH4Cl, AlMe3, толуол, 0°C до к.т.; h) K2CO3, МеОН, к.т.; i) 1) DBDMH, ДМФ, 0°C; 2) пиридин, 60°C.
Схема 108
517 518 519
Реагенты и условия: a) KCN, 18-краун-6, MeCN, 50°C; b) Н2 (1 атм.), никель Ренея W2, МеОН, к.т.; с) NaOAc, Ac2O, к.т.; d) 3N водн. HCl, ТГФ, к.т.; е) N,N-диметилформамида диметилацетал, 100°C; f) NH2OH-HCl, AcOH, EtOH, 60°C до к.т.; g) K2CO3, МеОН, к.т.; h) 1) DBDMH, ДМФ, 0°C; 2) пиридин,
- 76 043609
60°C.
Схема 109
Реагенты и условия: a) i) 3-бромизоникотинамида гидрохлорид, K2CO3, EtOH, к.т. до 80°C; ii) MnO2, CH2Cl2, к.т.; b) PhB(OH)2, K3PO4, Pd(PPh3)4, 1,4-диоксан, ДМФ, 100°C; с) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; d) HCO2Et, NaOMe, MeOH, к.т.; е) N^OH-HCl, AcOH, EtOH, 60°C до к.т.; f) K2CO3, МеОН, к.т.; g) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
Схема 110
Реагенты и условия: а) кальция циклопропилтрифторборат, K3PO4, Pd(OAc)2, RuPhos, толуол, вода, 100°C; b) водн. 3N HCl, МеОН, к.т.; с) HCO2Et, NaOMe, МеОН, к.т.; d) NH2OH-HCl, AcOH, EtOH, 60°C до к.т.; е) K2CO3, МеОН, к.т.; f) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 60°C.
- 77 043609
Схема 111
Реагенты и условия: a) t-BuOK, EtI, ТГФ, 0°C; b) NH2OH-HC1, 1N водн. HCl, EtOH, 60°C; с) K2CO3, МеОН, к.т.; d) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, ДМФ, 55°C.
Схема 112
Реагенты и условия: а) этиленгликоль, n-TsOH-H2O, 15°C; b) Li, NH3 (жид.), H2O, ТГФ, -78°C до 30°C; с) LiA1H4, Et20, -78°C; d) PhCOCl, пиридин, CH2C12, 15°C; е) 3N водн. HCl, EtOH, 20°C; f) этилдиазоацетат, BF3-OEt2, Et20, 0°C до 25°C; g) Lil, Н2О, 2,4,6-коллидин, 150°C; h) 2 М водн. NaOH, EtOH, 15°C; i) MOMC1, (i-Pr)2EtN, CH2C12, к.т.; j) PhCHO, t-Bu0K, t-BuOH, обратный холодильник; k) 2метилизоникотинамид гидрохлорид, t-BuOK, 1,4-диоксан, 200°C, микроволновый излучатель; 1) 12N водн. HCl, ТГФ, Н2О, к.т.; m) периодинан Десса-Мартина, CH2C12, к.т.; n) i) HCO2Et, NaOMe, MeOH, 0°C до к.т.; ii) 12N водн. HCl, NH2OH-HC1, EtOH, 55°C; о) NaOMe, MeOH, 55°C; р) i) DBDMH, ДМФ, 0°C; ii) пиридин, 55°C.
- 78 043609
Реагенты и условия: а) гидрид(диметилфосфиновая кислота-кР)[водород бис(диметилфосфинитокР)]платина(11), EtOH, H2O, обратный холодильник.
Схема 114
Схема 113
Реагенты и условия: а) гидрид(диметилфосфиновая кислота-kP)[водород бис(диметилфосфинитоkP)]платина(И), EtOH, H2O, обратный холодильник.
ii. Характеристики.
I. Общая информация.
Если не указано иное, коммерческие реагенты использовали в том виде, в котором они были получены, и все реакции проводили в атмосфере азота. Если не указано иное, карбоксимидамиды получали из соответствующих нитрилов или сложных эфиров карбоновых кислот с использованием описанной в литературе процедуры (Garigipati, 1990). Все растворители были класса ВЭЖХ или ACS. Спектры ядерного магнитного резонанса (ЯМР) регистрировали на спектрометре Varian Inova-400 при рабочих частотах 400 МГц (1Н ЯМР) или 100 МГц (13С ЯМР). Химические сдвиги (δ) приведены в м.д. относительно остаточного растворителя (обычно хлороформа δ 7,26 м.д. для 1H ЯМР) и констант связи (J) в Гц. Кратность отмечается следующими обозначениями: с для синглета, д для дублета, т для триплета, к для квадруплета и м для мультиплета. Масс-спектры регистрировали на масс-спектрометре Waters Micromass ZQ или Agilent 6120.
II. Характеристика соединения.
Соединение 2. Соединение 1 (750,00 г, 5,95 моль) растворяли в MeCN (8 л). Этилвинилкетон (625,15 г, 7,43 моль) и уинолонемин (962,57 г, 9,51 моль) добавляли по каплям при 10°C. Смесь перемешивали в течение примерно 4 ч, в течение которых температуру поддерживали ниже 25°C. ТСХ (силикагель, петролейный эфир/EtOAc=3/1) показывает, что исходный материал полностью израсходован. MeCN удаляли на роторном испарителе, а остаток разбавляли этилацетатом (8 л). Смесь промывали водн. насыщ. KH2PO4 (8 л) и солевым раствором (5 л). Органический экстракт сушили над Na2SO4 и фильтровали. Осадок на фильтре промывали MeCN (1 л). Объединенный фильтрат концентрировали, получая соединение 2 (1,20 кг, выход 96%) в виде желтой маслянистой жидкости. m/z=211,1 (M+1).
Соединение 3. Суспензию соединения 2 (425,00 г, 2,02 моль), R-фенилаланина (267,11 г, 1,62 моль), (1S)-(+)-камфорсульфоновой кислоты (281,72 г, 1,21 моль) в MeCN (2,1 л) нагревали при 50°C в течение 24 ч, затем при 60°C в течение 48 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и распределяли между EtOAc (3 л) и водн. насыщ. NaHCO3 (3 л). Органический экстракт промывали солевым раствором (3 л), осушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток фильтровали через слой силикагеля и элюировали с петролейным эфиром/EtOAc от 8/1 до 6/1. Фильтрат концентрировали, получая необработанное соединение 3 (388 г, количественный выход).
Необработанное соединение 3 (1,55 кг, 8,06 моль) растворяли в МТВЕ (1,55 л). Смесь охлаждали до 0°C и затравляли очищенным соединением 3. Смесь хранили при 0°C в течение 2 ч, затем охлаждали до 10°C и выдерживали при одинаковой температуре в течение 24 ч. Осадки собирали фильтрованием и промывали холодным МТВЕ (300 мл), получая соединение 3 (792 г, выход 51%) в виде белого твердого вещества. m/z=193,1 (М+1).
Соединение 4. Соединение 3 (200,00 г, 1,04 моль) растворяли в EtOH (2,80 л) и охлаждали до -5°C (внутренняя температура). Боргидрид натрия (11,02 г, 291,30 ммоль) добавляли порциями в течение 30 мин. Смесь перемешивали в течение 2 ч, в течение которых температуру внутренней реакции поддерживали ниже 0°C. ТСХ (силикагель, петролейный эфир/EtOAc=1/1) показала, что исходный материал полностью израсходован. Уксусную кислоту (96 мл, 1,68 моль) добавляли по каплям. После перемешивания в течение 30 мин реакционную смесь концентрировали на роторном испарителе. Добавляли EtOAc (1,5 л) и смесь охлаждали до 0°C. Водн. NaOH [полученный из NaOH (80 г, 2 моль) и ледяную воду (1 л)] добавляли для доведения рН до ~ 8. Водный слой экстрагировали с EtOAc (500 мл х 3). Объединенные ор- 79 043609 ганические экстракты промывали водой (1 л), сушили над Na2SO4, фильтровали через слой силикагеля и концентрировали in vacuo с получением соединения 4 (204,20 г, количественный выход) в виде вязкой бесцветной маслянистой жидкости, которую использовали на следующем этапе без дальнейшей очистки.
m/z=195,1 (М+1).
Соединение 5. К раствору соединения 4 (204,20 г, < 1,04 моль) в EtOAc (2,00 л) добавляли 5% палладий на сульфате бария (25,00 г). Смесь перемешивали в атмосфере водорода (15 фунтов на кв. дюйм) при 20°C в течение 96 ч. Катализатор отфильтровывали и промывали EtOAc (500 мл). Объединенный фильтрат и промывку концентрировали, получая соединение 5 (207 г, количественный выход) в виде маслянистой жидкости, которую использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Соединение 6. Раствор соединения 5 (207,00 г, <1,04 моль) в EtOH (2,00 л) обрабатывали водн. 3N HCl (738,4 мл, 2,22 моль) при 20°C. Смесь перемешивали в течение 2 ч и концентрировали. Раствор разбавляли EtOAc (2,5 л) и промывали соляным раствором (2x1 л). Органический экстракт концентрировали и остаток фильтровали через слой силикагеля (элюируя со смесью петролейного эфира/EtOAc от 10/1 до 8/1), получая неочищенный продукт в виде светло-желтого твердого вещества (203,25 г). Твердое вещество растворяли в МТВЕ (1,22 л) при 40°C и добавляли н-пентан (1,22 мл). Раствор охлаждали до комнатной температуры, затравляли очищенным соединением 6 и выдерживали при -20°C в течение 16 ч. Осадки собирали фильтрованием, промывали холодной (-20°C) смесью МТВЕ и н-пентана (1/1, 100 мл) и сушили в вакууме с получением соединения 6 (98 г, выход 48%) в виде белого твердого вещества. m/z=197,2 (М+1).
Соединение 7. К раствору соединения 6 (118,00 г, 601,15 ммоль) в толуоле (2,60 л) последовательно добавляли п-толуолсульфонат пиридиния (15,11 г, 60,13 ммоль) и этиленгликоль (373,13 г, 6,01 моль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником с ловушкой Дина-Старка в течение 3 ч. ТСХ (силикагель, петролейный эфир/EtOAc=3/1) показала, что реакция завершилась. Смесь охлаждали до комнатной температуры и промывали водой (2x1 л). Водные смывки экстрагировали толуолом (2x1 л). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 7 (158,00 г, количественный выход) в виде стеклообразного твердого вещества, которое использовали на следующем этапе без дальнейшей очистки. m/z=241,1 (M+1).
Соединение 8. Додекагидрат двухосновного фосфата натрия (18,5 г, 51,66 ммоль) и уинолон вольфрамата натрия (4,26 г, 12,90 ммоль) растворяли в водн. 30% Н2О2 (175,49 г, 1,55 моль) с получением желтого раствора. Раствор добавляли по каплям к раствору соединения 7 (311,00 г, 1,29 моль) в N,Nдиметилацетамиде (2,60 л) при 60°C в течение 15 мин. Смесь нагревали при 90°C в течение 3 ч. ТСХ (силикагель, петролейный эфир/EtOAc=3:1) показала, что реакция завершилась. Смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли EtOAc (5 л). Смесь промывали водн. 10% Na2SO3 (2,5 л) и водой (4x2 л) последовательно. Водные смывки экстрагировали EtOAc (2x1 л). Объединенные органические слои промывали водой (2x1 л), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в гептане (880 мл) при 40°C. Раствор охлаждали при 4°C в течение 1 ч, затравляли очищенным соединением 8 и затем выдерживали при -20°C в течение 20 ч. Осадки собирали фильтрованием, промывали холодными (-20°C) гептанами (300 мл) и сушили in vacuo, получая соединение 8 (198,2 г, выход 64%) в виде белого твердого вещества. m/z=239,2 (M+1).
Соединение 9. К перемешиваемому раствору соединения 8 (10 г, 42,0 ммоль) в ТГФ (63 мл) добавляли диметилкарбонат (35,3 мл, 419,3 ммоль) и гидрид натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 5,1 г, 127,5 ммоль) последовательно при комнатной температуре в атмосфере азота. После добавления смесь нагревали до 80°C в течение 16 ч и охлаждали до 0°C. Реакцию гасили добавлением по каплям водн. насыщ. KH2PO4, и смесь экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-10% ацетоном в гексанах), получая соединение 9 (11,1 г, выход 89%) в виде белого твердого вещества. m/z=291 (M+1).
Соединение 10. Соединение 9 (5,47 г, 18,47 ммоль) растворяли в EtOH (65 мл). Добавляли тиомочевину (14 г, 183,9 ммоль) и трет-бутоксид калия (2,1 г, 18,71 ммоль). После нагревания с обратным холодильником в течение 16 ч реакционную смесь концентрировали, смешивали с водой (50 мл) и нейтрализовали водн. 3N HCl. Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали под вакуумом, получая соединение 10 (5,95 г, количественный выход) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=323 (M+1).
Соединение 11. Соединение 10 (5,95 г, 18,47 ммоль) в хлоруксусной кислоте (17,5 г, 185,2 ммоль) нагревали при 75°C в течение 1 ч. Добавляли воду (15 мл) и смесь нагревали при 100°C в течение 4 ч. Добавляли водн. конц. HCl (1,5 мл, 18 ммоль). Смесь нагревали при 100°C в течение еще 16 ч, охлаждали и разбавляли ледяной водой (50 мл). Осадок собирали фильтрованием и сушили в вакууме, получая соединение 11 (4,8 г, выход 99%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=263 (М+1).
Соединение 12. Соединение 11 (4,8 г, 18,30 ммоль) растворяли в POCl3 (25 мл). Добавляли N,Nдиизопропилэтиламин (2,6 г, 20,12 ммоль). Смесь нагревали при 90°C в течение 16 ч, охлаждали и выливали на лед. Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали под вакуумом, получая
- 80 043609 соединение 12 (2,3 г, выход 42%) в виде коричневого твердого вещества. m/z=299 (M+1).
Соединение 13. К раствору соединения 12 (100 мг, 0,33 ммоль) в МеОН (3,3 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 0,10 мл, 0,43 ммоль). Смесь перемешивали при 50°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Водн. 1N HCl (0,5 мл, 0,5 ммоль) добавляли и смесь концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc и водой, и органический экстракт промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали хроматографией (силикагель, элюирование 0-20% EtOAc в гексанах) с получением соединения 13 (82 мг, выход 83%) в виде белого твердого вещества. m/z=295 (М+1).
Соединение 14а. Смесь соединения 13 (150 мг, 0,509 ммоль), 2-метоксипиридин-4-бороновой кислоты (111 мг, 0,726 ммоль), трифенилфосфина (50,8 мг, 0,194 ммоль), фосфата калия (324 мг, 1,528 ммоль) в 1,2-диметоксиэтане (2,1 мл) и ДМФ (4,2 мл) продували N2 в течение 30 мин. Добавляли ацетат палладия (II) (22,9 мг, 0,102 ммоль) и продувание азотом продолжали в течение еще 10 мин. Реакционную смесь нагревали при 95°C в течение 2 ч, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 14а (136 мг, выход 73%) в виде белого твердого вещества. m/z=368 (M+1).
Соединение 15а. К перемешиваемому раствору соединения 14а (130 мг, 0,354 ммоль) в этилформиате (3 мл, 37,3 ммоль) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,81 мл, 3,51 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и распределяли между водн. KH2PO4 и EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Осадок растворяли в EtOH (3 мл) и воде (0,3 мл) и обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (32 мг, 0,46 ммоль). Смесь нагревали в течение ночи при 55°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Смесь распределяли между водой и EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 15а (95 мг, выход 68%) в виде белого твердого вещества. m/z=393 (M+1).
Соединение 16а. К раствору соединения 15а (86,9 мг, 0,221 ммоль) в МеОН (2 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,3 мл, 1,30 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 3 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток разделяли между водн. KH2PO4 и EtOAc, и органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 16а (58 мг, выход 67%) в виде твердого вещества. m/z=393 (M+1).
Т2. К раствору соединения 16а (56 мг, 0,143 ммоль) в бензоле (14 мл) добавляли DDQ (42 мг, 0,186 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение Т2 (28 мг, выход 50%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,94 (с, 1Н), 8,32 (м, 1Н), 7,89 (м, 1Н), 7,77 (м, 1Н), 4,11 (с, 3H), 4,03 (с, 3H), 2,89 (дд, J=6,7, 18,7 Гц, 1Н), 2,62 (м, 2Н), 2,15 (м, 2Н), 1,78 (м, 1Н), 1,46 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=391 (M+1).
Соединение 14b. Смесь соединения 13 (150 мг, 0,509 ммоль), сложного эфира пинакола 2метилпиридин-4-бороновой кислоты (168 мг, 0,767 ммоль), трифенилфосфина (50,8 мг, 0,194 ммоль), фосфата калия (324 мг, 1,53 ммоль) в 1,2-диметоксиэтане (2,1 мл) и ДМФ (4,2 мл) продували азотом в течение 30 мин. Добавляли ацетат палладия(П) (22,9 мг, 0,102 ммоль) и продувание азотом продолжали в течение еще 10 мин. Реакционную смесь нагревали при 95°C в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 14b (140 мг, выход 78%) в виде белого твердого вещества. m/z=352 (M+1).
Соединение 15b. К перемешиваемому раствору соединения 14b (130 мг, 0,370 ммоль) в этилформиате (3 мл, 37,3 ммоль) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,85 мл, 3,68 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и распределяли между водн. KH2PO4 и EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Осадок растворяли в EtOH (4 мл) и воде (0,4 мл) и обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (33,5 мг, 0,482 ммоль). Смесь нагревали в течение ночи при 55°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Смесь распределяли между водой и EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 15b (98 мг, выход 70%) в виде белого твердого вещества. m/z=377 (M+1).
Соединение 16b. К раствору соединения 15b (90 мг, 0,239 ммоль) в МеОН (2 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,33 мл, 1,43 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 3 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток разделяли между водн. KH2PO4 и EtOAc, и органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 16b (66 мг, выход 73%) в виде бледно-желтого твердого вещества. m/z=311 (M+1).
Соединение T3. К раствору соединения 16b (60 мг, 0,159 ммоль) в бензоле (14 мл) прибавили DDQ (47 мг, 0,207 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали флэш- 81 043609 хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение T3 (22 мг, 37% выход) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,96 (с, 1Н), 8,66 (д, J=5,2 Гц, 1Н),
8,14 (с, 1Н), 8,10 (д, J=5,1 Гц, 1Н), 4,13 (с, 3H), 2,89 (дд, J=6,7, 18,8 Гц, 1Н), 2,71 (с, 3H), 2,61 (м, 2Н), 2,16 (м, 2Н), 1,77 (м, 1Н), 1,47 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=375 (M+1).
Соединение 14с. Соединение 13 (50 мг, 0,17 ммоль), 3-пиколин-4-бороновую кислоту (35 мг, 0,26 ммоль), трифенилфосфин (17 мг, 0,065 ммоль), фосфат калия (108 мг, 0,51 ммоль) и ацетат палладия (7,6 мг, 0,034 ммоль) в 1,2-диметоксиэтане (1,4 мл) и ДМФ (0,7 мл) в микроволновом флаконе продували азотом в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 100°C в течение 5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой силикагеля и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 14с (58 мг, выход 97%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=352 (M+1).
Соединение 15с. К перемешиваемому раствору соединения 14с (80 мг, 0,23 ммоль) в этилформиате (0,55 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,78 мл, 3,38 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,57 мл, 3,42 ммоль), EtOH (2,3 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (24 мг, 0,35 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 4 ч. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водн. насыщ. NaHCO3. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 15с (63 мг, выход 74%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=377 (M+1).
Соединение 16с. Соединение 15с (55 мг, 0,15 ммоль) растворяли в МеОН (1,5 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 50 мкл, 0,22 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до к.т. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водн. 10% KH2PO4. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% ацетона в гексанах), получая соединение 16с (48 мг, выход 87%) в виде белого твердого вещества. m/z=377 (M+1).
Т4. Соединение 16с (38 мг, 0,10 ммоль) растворяли в толуоле (2 мл) и бензоле (1 мл). Добавляли DDQ (25 мг, 0,11 ммоль). Смесь нагревали при 85°C в течение 1 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водн. насыщ. NaHCO3. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 035% ацетона в гексанах), получая соединение Т4 (22 мг, выход 58%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,84 (с, 1Н), 8,60 (м, 2Н), 7,91 (д, J=5,0 Гц, 1Н), 4,08 (с, 3H), 2,90 (дд, J=6,0, 18,8 Гц, 1Н), 2,67 (с, 3H), 2,65 (м, 2Н), 2,16 (м, 2Н), 1,78 (м, 1Н), 1,47 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=375 (M+1).
Соединение 14d. Соединение 13 (150 мг, 0,51 ммоль), пиридин-4-бороновую кислота (93 мг, 0,76 ммоль), трифенилфосфин (51 мг, 0,19 ммоль), фосфат калия (324 мг, 1,52 ммоль) и ацетат палладия (22 мг, 0,10 ммоль) в 1,2-диметоксиэтане (2,1 мл) и ДМФ (1,1 мл) в микроволновом флаконе продували азотом в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 100°C в течение 5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой силикагеля и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 14d (155 мг, выход 90%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=338 (M+1).
Соединение 15d. К перемешиваемому раствору соединения 14d (90 мг, 0,27 ммоль) в этилформиате (0,64 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,93 мл, 4,03 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,67 мл, 4,02 ммоль), EtOH (2,5 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (28 мг, 0,40 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 3 ч. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водн. насыщ. NaHCO3. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 15d (63 мг, выход 65%). m/z=363 (M+1).
Соединение 16d. Соединение 15d (63 мг, 0,17 ммоль) растворяли в МеОН (1,7 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 60 мкл, 0,26 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до к.т. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водн. 10% KH2PO4. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% ацетона в гексанах), получая соединение 16d (68 мг, количественный выход) в виде белого твердого вещества. m/z=363 (M+1).
Т5. Соединение 16d (60 мг, 0,17 ммоль) растворяли в бензоле (3,3 мл). Добавляли DDQ (41 мг, 0,18 ммоль). Смесь нагревали при 85°C в течение 40 мин и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водн. насыщ. NaHCO3. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и
- 82 043609 концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% ацетона в гексанах), получая соединение Т5 (30 мг, выход 50%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400
МГц, CDCl3) δ 8,96 (с, 1Н), 8,79 (м, 2Н), 8,30 (м, 2Н), 4,14 (с, 3H), 2,90 (дд, J=5,9, 19,1 Гц, 1Н), 2,63 (м,
2Н), 2,15 (м, 2Н), 1,77 (дк, J=6,8, 13,5 Гц, 1Н), 1,47 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=361 (M+1).
Соединение 14е. Соединение 13 (50 мг, 0,17 ммоль), 2-фторпиридин-4-бороновую кислоту (36 мг, 0,26 ммоль), трифенилфосфин (17 мг, 0,065 ммоль), фосфат калия (108 мг, 0,51 ммоль) и ацетат палладия (8 мг 0,036 ммоль) взвешивали во флаконе и хранили в вакууме. Добавляли 1,2-диметоксиэтан (0,73 мл) и ДМФ (0,37 мл) (продутые азотом в течение 5 мин). Флакон заполняли азотом и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 100°C в течение 100 мин. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой силикагеля и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-20% EtOAc в гексанах), получая соединение 14е (58 мг, выход 96%) в виде белого твердого вещества. m/z=356 (M+1).
Соединение 15е. К перемешиваемому раствору соединения 14е (53 мг, 0,15 ммоль) в этилформиате (0,36 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,52 мл, 2,25 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,37 мл, 2,22 ммоль), EtOH (1,5 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (16 мг, 0,23 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 16 ч. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водн. насыщ. NaHCO3. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-5% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение 15е (37 мг, выход 65%) в виде белого твердого вещества. m/z=381 (М+1).
Соединение 16е. Соединение 15е (37 мг, 0,097 ммоль) растворяли в МеОН (2 мл). Добавляли карбонат калия (68 мг, 0,49 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли EtOAc и водн. 1N HCl (1 мл). Смесь экстрагировали EtOAc. Органические экстракты промывали водой, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-5% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение 16е (32 мг, выход 86%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=381 (М+1).
Т6. Соединение 16е (27 мг, 0,071 ммоль) растворяли в бензоле (1,5 мл). Добавляли DDQ (18 мг, 0,079 ммоль). Смесь нагревали при 85°C в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-15% ацетоном в гексане), получая соединение Т6 (8 мг, 30% выход) в виде желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,91 (с, 1Н), 8,38 (д, J=5,2 Гц, 1Н), 8,21 (тд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,93 (с, 1Н), 4,14 (с, 3H), 2,91 (дд, J=6,2, 18,9 Гц, 1Н), 2,64 (м, 2Н), 2,16 (м, 2Н), 1,79 (м, 1Н), 1,47 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=379 (М+1).
Соединение 17. Соединение 13 (100 мг, 0,34 ммоль), пиридин-3-бороновую кислоту (62 мг, 0,50 ммоль), трифенилфосфин (34 мг, 0,13 ммоль), фосфат калия (216 мг, 1,02 ммоль) и ацетат палладия (15 мг, 0,067 ммоль) в 1,2-диметоксиэтане (1,4 мл) и ДМФ (0,7 мл) в микроволновом флаконе продували азотом в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 100°C в течение 5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой силикагеля и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией, получая соединение 17 (106 мг, выход 92%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=338 (М+1).
Соединение 18. К раствору соединения 17 (95 мг, 0,28 ммоль) в ТГФ (1,4 мл) добавляли раствор бис(триметилсилил)амида лития (1 M в ТГФ, 0,42 мл, 0,42 ммоль) при -78°C. После перемешивания смеси при -78°C в течение 10 мин добавляли фенилселенилхлорид (82 мг, 0,43 ммоль) в ТГФ (1,4 мл). Смесь перемешивали при -78°C в течение дополнительных 1,5 ч. Добавляли водн. насыщ. NH4Cl. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией с получением частично очищенного продукта. Полученный остаток растворяли в EtOAc (4 мл) и ТГФ (1,2 мл). Перекись водорода (30 мас.% раствор в воде, 0,14 мл, 1,37 ммоль) добавляли при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Добавляли водн. 10% Na2SO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органические экстракты промывали водой, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией с получением соединения 18 (46 мг, выход 48%) в виде белого твердого вещества. m/z=336 (M+1).
Соединение 19. Раствор соединения 18 (36 мг, 0,11 ммоль) и иода (27 мг, 0, 11 ммоль) в пиридине (0,5 мл) нагревали при 80°C в течение 16 ч и охлаждали до к.т. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водн. 10% Na2SO3, водн. 1N HCl и водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 19 (23 мг, выход 46%) в виде желтого твердого вещества. m/z=462 (M+1).
Т7. Смесь соединения 19 (21 мг, 0,046 ммоль), цианида цинка (17 мг, 0,14 ммоль) в ДМФ (0,5 мл) продували азотом в течение 2 мин. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (6 мг, 0,005 ммоль). Продувку азотом продолжали в течение еще 2 мин. Реакционную смесь нагревали до 80°C в ат- 83 043609 мосфере азота в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 030% ацетона в гексане, с получением соединения Т7 (2,1 мг, выход 13%) в виде пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,66 (д, J=2,0 Гц, 1Н), 8,96 (с, 1Н), 8,72 (м, 2Н), 7,44 (м, 1Н), 4,12 (с, 3H), 2,88 (дд, J=6,0, 18,8 Гц, 1Н), 2,62 (м, 2Н), 2,15 (м, 2Н), 1,77 (м, 1Н), 1,47 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=361 (M+1).
Соединение 20. Соединение 13 (60 мг, 0,20 ммоль), 4-пиридинамин (38 мг, 0,40 ммоль), карбонат цезия (100 мг, 0,31 ммоль), ксантфос (8 мг, 0,014 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (4 мг, 0,004 ммоль) взвешивали во флаконе. Флакон был запечатан и содержался под вакуумом. Добавляли 1,4диоксан (1 мл, продували азотом в течение 10 мин). Флакон наполняли азотом, нагревали при 100°C в течение 16 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли ацетон. Смесь фильтровали через слой силикагеля и элюировали ацетоном. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-100% ацетона в гексанах), получая соединение 20 (70 мг, выход 97%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=353 (M+1).
Соединение 21. К перемешиваемому раствору соединения 20 (60 мг, 0,17 ммоль) в этилформиате (0,41 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,58 мл, 2,51 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,42 мл, 2,52 ммоль), EtOH (2 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (18 мг, 0,26 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение дополнительных 2,5 ч. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-70% ацетона в гексане), получая соединение 21 (52 мг, выход 81%). m/z=378 (М+1).
Соединение 22. Соединение 21 (45 мг, 0,12 ммоль) растворяли в МеОН (1,2 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 42 мкл, 0,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до к.т. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водн. 10% NaH2PO4. Водную смывку экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали, получая соединение 22 в виде светло-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. m/z=378 (M+1).
Т8. Соединение 22 (все вышеуказанное) растворяли в бензоле (2,4 мл). Добавляли DDQ (30 мг, 0,13 ммоль). Смесь нагревали при 85°C в течение 40 мин и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2 и водн. насыщ. NaHCO3 и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Смесь экстрагировали с помощью CH2Cl2. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% ацетона в CH2Cl2), получая частично очищенный продукт, который снова очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-20% МеОН в CH2Cl2), получая соединение Т8 (11 мг, 25% выход из соединения 21) в виде желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,74 (с, 1Н), 8,49 (м, 2Н), 7,58 (м, 2Н), 7,15 (уш. с. 1Н), 4,04 (с, 3H), 2,77 (ддд, J=1,2, 7,3, 17,8 Гц, 1Н), 2,54 (м, 2Н), 2,10 (м, 2Н), 1,73 (м, 1Н), 1,44 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=376,2 (M+1).
Соединение 23. К перемешиваемому раствору соединения 13 (117 мг, 0,40 ммоль) в этилформиате (0,96 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,92 мл, 3,98 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,67 мл, 4,02 ммоль), EtOH (4 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (42 мг, 0,60 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 2 ч. Растворитель удаляли. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-20% EtOAc в гексанах), получая соединение 23 (93 мг, выход 73%). m/z=320 (M+1).
Соединение 25. Соединение 23 (50 мг, 0,16 ммоль), уинолон-4-бороновую кислоту (45 мг, 0,26 ммоль), трифенилфосфин (17 мг, 0,065 ммоль), фосфат калия (108 мг, 0,51 ммоль) и ацетат палладия (7,6 мг, 0,034) ммоль взвешивали во флаконе и хранили в вакууме. Добавляли 1,2-диметоксиэтан (0,7 мл) и ДМФ (0,35 мл) (продутые азотом в течение 5 мин). Флакон заполняли азотом и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 110°C в течение 5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой силикагеля и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая частично очищенный продукт, который снова очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-10% ацетоном в CH2Cl2), чтобы получить смесь соединений 24 и 25 (15 мг, выход 23%) в виде стеклообразного твердого вещества. Смесь растворяли в МеОН (0,72 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 13 мкл, 0,056 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1,5 ч и охлаждали до к.т. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водн. 10% KH2PO4. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали с получением соединения 25. m/z=413 (М+1).
- 84 043609
Т9. Соединение 25 (все вышеуказанное) растворяли в бензоле (0,7 мл). Добавляли DDQ (9 мг, 0,040 ммоль). Смесь нагревали при 85°C в течение 20 мин и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водн. насыщ. NaHCO3. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-10% ацетоном в CH2Cl2), получая соединение Т9 (6 мг, выход 40%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,08 (д, J=4,8 Гц, 1Н), 8,88 (с, 1Н), 8,77 (дд, J=0,8, 8,8 Гц, 1Н), 8,21 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 8,00 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,77 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,63 (ддд, J=1,3, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 4,12 (с, 3H), 2,95 (дд, J=6,0, 18,8 Гц, 1Н), 2,71 (м, 1Н), 2,60 (м, 1Н), 2,18 (м, 2Н), 1,81 (м, 1Н), 1,51 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=411 (M+1).
Соединение 26. Соединение 13 (100 мг, 0,34 ммоль), карбонат цезия (333 мг, 1,02 ммоль), третбутил-N-[2-(трифторборадуил)этил] карбамат калия (85 мг, 0,34 ммоль) и [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (14 мг, 0,019 ммоль) взвешивали во флаконе. Флакон содержали под вакуумом. Добавляли толуол (3 мл) и воду (0,5 мл) (оба растворителя продували азотом в течение 5 мин). Флакон наполняли азотом, нагревали при 100°C в течение 16 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 26 (105 мг, 77% выход). m/z=404 (M+1).
Соединения 27 и 28. К перемешиваемому раствору соединения 26 (105 мг, 0,26 ммоль) в этилформиате (0,63 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,90 мл, 3,90 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,65 мл, 3,90 ммоль), EtOH (2,6 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (28 мг, 0,40 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение дополнительных 2 ч. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 27 (28 мг, выход 25%) и соединение 28 (42 мг, выход 45%) в виде белого пенистого твердого вещества. Соединение 27 m/z=429 (M+1). Соединение 28 m/z=357 (M+1).
Соединение 29. Соединение 27 (28 мг, 0,065 ммоль) растворяли в МеОН (0,65 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 23 мкл, 0,10 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1,5 ч и охлаждали до к.т. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водн. 10% NaH2PO4. Водную смывку экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали, получая соединение 29, которое использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки. m/z=429 (M+1).
Т10. Соединение 29 (все вышеуказанное) растворяли в толуоле (0,65 мл). Добавляли DDQ (17 мг, 0,075 ммоль). Смесь нагревали при 90°C в течение 50 мин и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2 и водн. насыщ. NaHCO3 и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Смесь экстрагировали с помощью CH2Cl2. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-15% ацетона в гексанах), получая соединение Т10 (19 мг, выход 68% из соединения 27) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,82 (с, 1Н), 5,17 (уш. с. 1Н), 3,99 (с, 3H), 3,61 (м, 2Н), 3,03 (т, J=6,5 Гц, 2Н), 2,79 (дд, J=6,7, 18,4 Гц, 1Н), 2,54 (м, 2Н), 2,09 (м, 2Н), 1,71 (м, 1Н), 1,44 (с, 9Н), 1,39 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=427 (M+1).
Соединение 30. Соединение 28 (40 мг, 0,11 ммоль) растворяли в МеОН (1,1 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 39 мкл, 0,17 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1,5 ч и охлаждали до к.т. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водн. 10% NaH2PO4. Водную смывку экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали, получая соединение 30, которое использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки. m/z=357 (M+1).
Т11. Соединение 30 (все вышеуказанное) растворяли в толуоле (1,1 мл). Добавляли DDQ (28 мг, 0,12 ммоль). Смесь нагревали при 90°C в течение 40 мин и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2 и водн. насыщ. NaHCO3 и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Смесь экстрагировали с помощью CH2Cl2. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% ацетона в гексанах), получая соединение Т11 (20 мг, 50% выход из соединения 28) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. Т11 представляет собой смесь формамидных таутомеров в соотношении 3:1. 1HЯМР (400 МГц, CDCl3) δ [8,80 (с), 8,79 (с), 3:1, 1Н], [8,19 (уш. с), 8,09 (д, J=12,1 Гц), 3:1, 1Н], [6,15 (уш. с), 6,00 (шир.с), 3:1, 1Н], 3,99 (с, 3H), 3,80 (м, 2Н), 3,08 (т, J=6,4 Гц, 2Н), 2,80 (дд, J=6,7, 18,4 Гц, 1Н), 2,55 (м, 2Н), 2,09 (м, 2Н), 1,71 (м, 1Н), 1,39 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=355 (M+1).
Т12. К раствору соединения Т10 (9 мг, 0,021 ммоль) в CH2Cl2 (0,2 мл) добавляли ТФК (50 мкл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и концентрировали. Остаток растворяли в CH2Cl2, обрабатывали Et3N (2 капли) и очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0- 85 043609
20% МеОН в CH2Cl2), получая соединение Т12 (10 мг, количественный выход) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,76 (с, 1Н), 8,17 (уш. с. 2Н), 3,95 (с, 3H), 3,49 (м,
2Н), 3,22 (т, J=5,9 Гц, 2Н), 2,78 (дд, J=6,5, 18,4 Гц, 1Н), 2,54 (м, 2Н), 2,07 (м, 2Н), 1,69 (м, 1Н), 1,37 (с, 3H),
1,27 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=327 (M+1).
Соединение 31. К смеси 4-амидинопиридина гидрохлорида (318 мг, 2,02 ммоль) в EtOH (1 мл) добавляли карбонат калия (560 мг, 4,06 ммоль) и раствор соединения 9 (500 мг, 1,69 ммоль) в EtOH (4 мл) последовательно. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч и концентрировали. Добавляли EtOAc (20 мл) и воду (2 мл). Смесь перемешивали при 65°C в течение 10 мин и охлаждали до комнатной температуры. Водн. 10% NaH2PO4 (10 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 5 мин. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-20% МеОН в CH2Cl2), получая соединение 31 (400 мг, выход 65%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=368 (M+1).
Соединение 32. К раствору соединения 31 (938 мг, 2,56 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли оксихлорид фосфора(V) (2,36 мл, 25,6 ммоль) при комнатной температуре. Смесь нагревали при 100°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3 для доведения рН до 7. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% ацетона в гексанах), получая соединение 32 (618 мг, выход 71%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=342 (M+1).
Соединение 33. Смесь соединения 32 (618 мг, 1,81 ммоль), фенилбороновой кислоты (331 мг, 2,71 ммоль), карбоната натрия (575 мг, 5,42 ммоль) в 1,4-диоксане (14 мл) и воды (5 мл) продували азотом в течение 5 мин. Добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (265 мг, 0,36 ммоль). Смесь продували азотом в течение еще 5 мин, нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 100°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc и воду. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 33 (640 мг, выход 92%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=384 (M+1).
Соединение 34. К перемешиваемому раствору соединения 33 (3,01 г, 7,87 ммоль) в этилформиате (19 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 27 мл, 116,9 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (20 мл, 120 ммоль), EtOH (79 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (830 мг, 11,9 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 4 ч и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 34 (2,62 г, выход 82%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=409 (M+1).
Т13. Соединение 34 (2,617 г, 6,41 ммоль) растворяли в МеОН (32 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 2,3 мл, 9,96 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до к.т. Добавляли МТВЕ и водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% ацетона в гексанах), получая соединение Т13 (2,363 г, выход 90%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,76 (м, 2Н), 8,34 (м, 2Н), 7,60 (м, 2Н), 7,51 (м, 3H), 3,92 (дд, J=5,7, 13,8 Гц, 1Н), 3,59 (дд, J=5,7, 13,7 Гц, 1Н), 2,95 (м, 2Н), 2,60 (кв, J=6,5, 12,9 Гц, 1Н), 2,28 (т, J=13,8 Гц, 1Н), 2,05 (м, 1Н), 1,90 (дт, J=2,7, 12,4 Гц, 1Н), 1,69 (м, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,20 (д, J=6,4 Гц, 3H); m/z=409 (M+1).
Т14 и Т15. Соединение Т13 (2,363 г, 5,79 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (14 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (828 мг, 2,90 ммоль) в ДМФ (14 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (1,4 мл, 17,3 ммоль). Реакцию нагревали при 55°C в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водой, водн. 10% Na2SO3 и водн. 10% NaH2PO4. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом на роторном испарителе. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% ацетона в гексанах), получая соединение Т14 (1,515 г, выход 64%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCU) δ 9,02 (с, 1Н), 8,80 (м, 2Н), 8,37 (м, 2Н), 7,60 (м, 2Н), 7,53 (м, 3H), 2,99 (м, 2Н), 2,62 (м, 1Н), 2,27 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,15 (тдд, J=2,7, 6,0, 13,8 Гц, 1Н), 1,78 (м, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=407 (M+1).
Из колонки фракции, содержащие соединение Т15, объединяли и концентрировали. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (С18, элюирование MeCN 0-80% в воде), получая соединение Т15 (7 мг, выход 0,3%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,79 (м, 2Н), 8,38 (м, 2Н), 7,62 (м, 2Н), 7,53 (м, 3H), 5,32 (с, 1Н), 2,94 (м, 2Н), 2,29 (м, 2Н), 1,99 (м, 1Н), 1,61 (тдд,
- 86 043609
J=6,2, 12,3, 18,6 Гц, 1Н), 1,39 (с, 3H), 1,34 (д, J=7,0 Гц, 3H); m/z=423 (M+1).
Т16. Раствор соединения Т14 (100 мг, 0,25 ммоль) и гидридо(диметилфосфиновой кислотыkP)[водород-бис(диметилфосфинито-kP)]платины(И) (10 мг, 0,023 ммоль) в водн. 90% EtOH/вода (2,75 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч. Смесь концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, 0-50% ацетона в CH2Cl2), получая соединение Т16 (46 мг, выход 44%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,51 (с, 1Н), 8,77 (м, 2Н), 8,49 (уш. с. 1Н), 8,42 (м, 2Н), 7,60 (м, 2Н), 7,52 (м, 3H), 5,69 (уш. с. 1Н), 2,96 (м, 2Н), 2,64 (м, 1Н), 2,24 (дт, J=2,7, 12,7 Гц, 1Н), 2,10 (м, 1Н), 1,77 (ддт, J=7,0, 10,6, 13,4 Гц, 1Н), 1,52 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=425 (М+1).
Соединение 35 Раствор соединения 31 (2,16 г, 5,89 ммоль) и водн. 3N HCl (20 мл, 60 ммоль) в МеОН (10 мл) и ТГФ (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Образец концентрировали, охлаждали, подщелачивали водным 10% NH4OH (50 мл), затем экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 35 (1,80 г, выход 95%) в виде светло-желтого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии без очистки. m/z=324 (М+1).
Соединение 36. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 35 (1,67 г, 5,16 ммоль) и этилформиата (21 мл, 260 ммоль) в ТГФ (25 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в метаноле, 4,8 мл). (25,6 ммоль). После перемешивания в течение 16 ч раствор концентрировали, затем распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (100 мл) и CHCl3 (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 36 (2,09 г) в виде оранжево-желтого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=352 (М+1).
Соединение 37. Смесь в атмосфере азота соединения 36 (все из последней стадии), уксусной кислоты (3 мл, 52,4 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (540 мг, 7,77 ммоль) в EtOH (25 мл) нагревали при 60°C в течение 2 ч, затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор концентрировали, охлаждали, осторожно подщелачивали водн. насыщ. NaHCO3 (100 мл) и экстрагировали CHCl3 (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали хроматографией (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3), получая соединение 37 (1,29 г, 72% от соединения 35) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=349 (М+1).
Соединение 38. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 37 (1,29 г, 3,69 ммоль) в метаноле (37 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в метаноле, 3,5 мл, 18,7 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (100 мл) и CHCl3 (100 мл). Водную фазу реэкстрагировали 20% МеОН в CHCl3 (100 мл). Объединенный органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 38 (1,03 г, выход 0%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=349 (M+1).
Т17. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 38 (1,03 г, 2,95 ммоль) в ДМФ (10 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (420 мг, 1,47 ммоль) в ДМФ (3 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (2,4 мл, 29,7 ммоль). Ледяную баню убирали. Образец нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и 20% МеОН в CHCl3 (50 мл). Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение Т17 (1,19 г, количественный выход) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 13,33 (уш. с. 1Н), 8,87 (м, 2Н), 8,80 (с, 1Н), 8,18 (м, 2Н), 2,92 (м, 1Н), 2,62 (м, 2Н), 2,20 (м, 1Н), 2,12 (дт, J=2,6, 12,7 Гц, 1Н), 1,76 (кдд, J=6,6, 12,9, 19,5 Гц, 1Н), 1,48 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=347 (M+1).
Т18. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения Т17 (1,19 г, <2,95 ммоль), пиридина (0,84 мл, 10,38 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (50 мг) в CH2Cl2 (30 мл) добавляли по каплям раствор п-толуолсульфонилхлорида (980 мг, 5,14 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл). После перемешивания в течение 2 дней образец концентрировали, затем распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 100% EtOAc, затем 5% МеОН в EtOAc), получая соединение Т18 (341 мг, выход 23%) и восстанавливали соединение Т17 (507 мг, выход 49%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. Т18 1H ЯМР (400 МГц, CDQ3) δ 8,84 (с, 1Н), 8,77 (м, 2Н), 8,01 (м, 4Н), 7,43 (м, 2Н), 3,07 (ддд, J=1,1, 6,8, 18,9 Гц, 1Н), 2,84 (ддд, J=7,6, 11,2, 18,9 Гц, 1Н), 2,59 (м, 1Н), 2,51 (с, 3H), 2,16 (м, 2Н), 1,80 (м, 1Н), 1,48 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=501 (M+1).
Соединение 39. Соединение 8 (2,5 г, 10,5 ммоль) растворяли в ТГФ (100 мл). Добавляли бензальдегид (1,15 г, 10,8 ммоль) и метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 7,5 г, 41,7 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экс- 87 043609 трагировали этилацетатом. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 39 (3,4 г, количественный выход) в виде маслянистой жидкости. m/z=327 (M+1).
Соединение 40. Соединение 39 (3,4 г, 10,4 ммоль) растворяли в EtOH (50 мл). Добавляли тиомочевину (6,3 г, 82,8 ммоль) и трет-бутоксид калия (1,18 г, 10,5 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Добавляли воду (50 мл). Смесь нейтрализовали водн. 3N HCl. Осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали под вакуумом, получая соединение 40 (3,8 г, выход 94%) в виде грязно- белого твердого вещества. m/z=385 (M+1).
Соединение 41а. Соединение 40 (800 мг, 2,08 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (10 мл). Добавляли тиофен-2-карбоксилат меди(Т) (1,2 г, 6,29 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий (120 мг, 0,10 ммоль) и фенилбороновую кислоту (380 мг, 3,11 ммоль). Смесь продували азотом в течение 10 мин, перемешивали при 100°C в течение 16 ч и охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-20% EtOAc в гексанах), получая соединение 41а (250 мг, выход 28%) в виде маслянистой жидкости. m/z=427 (M+1).
Соединение 42а. Соединение 41а (250 мг, 0,59 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл) и добавляли водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 42а (220 мг, выход 98%) в виде пенистого твердого вещества. m/z=383 (M+1).
Соединение 43а. Соединение 42а (220 мг, 0,57 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186,6 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 420 мг, 2,3 ммоль). После того как реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, ее нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 43а (240 мг, количественный выход) в виде пенистого твердого вещества. m/z=411 (M+1).
Соединение 44а. Соединение 43а (240 мг, 0,57 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (82 мг, 1,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 44а (220 мг, выход 92%) в виде пенистого твердого вещества. m/z=408 (M+1).
Соединение 45а. Соединение 44а (220 мг, 0,54 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 390 мг, 2,2 ммоль). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение ночи ее нейтрализовали водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 45а (220 мг, количественный выход) в виде пенистого твердого вещества. m/z=408 (M+1).
Т19. Соединение 45а (220 мг, 0,54 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли бром (95 мг, 0,59 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Реакцию оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали при 50°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение Т19 (90 мг, выход 41%) в виде пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (с, 1Н), 8,54 (м, 2Н), 7,61 (м, 2Н), 7,51 (м, 6Н), 2,95 (м, 2Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,13 (м, 1Н), 1,77 (дд, J=7,0, 10,6, 13,3 Гц, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=406 (M+1).
Соединение 41b. Соединение 40 (800 мг, 2,08 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (10 мл). Добавляли тиофен-2-карбоксилат меди(I) (1,2 г, 6,29 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий (120 мг, 0,10 ммоль) и 4-(трифторметил)фенилбороновую кислоту (590 мг, 3,11 ммоль). Смесь продували азотом в течение 10 мин, перемешивали при 100°C в течение 16 ч и охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, 0-20% EtOAc в гексанах), получая соединение 41b (290 мг, выход 28%) в виде белого твердого вещества. m/z=495 (M+1).
Соединение 42b. Соединение 41b (290 мг, 0,58 ммоль) растворяли в ТГФ (4 мл) и добавляли водн. 3N HCl (2 мл, 6,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 42b (265 мг, количественный выход) в виде пенистого твердого вещества. m/z=451 (M+1).
Соединение 43b. Соединение 42b (265 мг, 0,58 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186,6 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 425 мг, 2,4 ммоль). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение ночи ее нейтрализовали водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 43b (280 мг, количественный выход) в виде пенистого твердого вещества. m/z=479 (M+1).
Соединение 44b. Соединение 43b (280 мг, 0,58 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (82 мг, 1,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при
- 88 043609
50°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc, после чего промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 44b (270 мг, выход 97%) в виде пенистого твердого вещества. m/z=476 (M+1).
Соединение 45b. Соединение 44b (270 мг, 0,57 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 400 мг, 2,2 ммоль). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение ночи ее нейтрализовали водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 45b (270 мг, количественный выход) в виде пенистого твердого вещества. m/z=476 (M+1).
Т20. Соединение 45b (270 мг, 0,57 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли бром (100 мг, 0,63 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль), реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали при 50°C в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение Т20 (105 мг, выход 39%) в виде пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCh) δ 9,04 (с, 1Н), 8,65 (д, J=7,9 Гц, 2Н), 7,76 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 7,61 (м, 2Н), 7,53 (м, 3H), 2,98 (м, 2Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,27 (дт, J=2,6, 12,7 Гц, 1Н), 2,15 (м, 1Н), 1,79 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=474 (M+1).
Соединение 46. К перемешиваемому раствору при 0°C в атмосфере азота Т17 (1,39 г, 4,01 ммоль) и уинолонамина (2,8 мл, 20,1 ммоль) в CH2Cl2 (80 мл) по каплям добавляли раствор трифторметансульфонового ангидрида в CH2Cl2 (1,0 М, 6 мл, 6,0 ммоль). Образец перемешивали при 0°C в течение 2,5 ч, затем концентрировали, затем распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (100 мл) и EtOAc (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 46 (905 мг, выход 47%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=479 (M+1).
Т21. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 46 (195 мг, 0,408 ммоль), 4(гидроксиметил)фенилбороновой кислоты (124 мг, 0,82 ммоль) и карбоната калия (170 мг, 1,23 ммоль) в 1,4-диоксане (8 мл). Добавляли дихлорид 1,1'-[бис(дифенилфосфино)-ферроцен]палладия(П) (30 мг, 0,041 ммоль) и смесь снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение 48 ч. Темный образец охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 100% EtOAc), получая частично очищенный продукт, который снова очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3), получая соединение Т21 (20 мг, 11% выход) в виде оранжевого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,02 (с, 1Н), 8,80 (м, 2Н), 8,37 (м, 2Н), 7,62 (м, 2Н), 7,54 (м, 2Н), 4,82 (с, 2Н), 3,00 (м, 2Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,1 Гц, 1Н), 2,26 (м, 1Н), 2,15 (м, 1Н), 1,78 (ддт, J=7,1, 10,5, 13,3 Гц, 1Н), 1,43 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=437 (М+1).
Соединение 47а. Соединение 39 (370 мг, 1,13 ммоль) растворяли в EtOH (10 мл). Добавляли ацетат формамидина (240 мг, 2,30 ммоль) и трет-бутоксид калия (380 мг, 3,39 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток смешивали с водой (20 мл) и нейтрализовали водн. 3N HCl. Осадок собирали фильтрацией, промывали водой и сушили в вакууме, получая соединение 47а (305 мг, выход 76%) в виде твердого вещества. m/z=353 (М+1).
Соединение 48а. Соединение 47а (305 мг, 0,87 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (10 мл). Добавляли оксид марганца(IV) (88%, 400 мг, 4,05 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и фильтровали. Фильтрат концентрировали, получая соединение 48а (260 мг, выход 86%) в виде твердого вещества. m/z=351 (М+1).
Соединение 49а. Соединение 48а (400 мг, 1,14 ммоль) растворяли в ТГФ (4 мл) и добавляли 3N HCl (2 мл, 6,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 49а (350 мг, количественный выход) в виде пенистого твердого вещества. m/z=307 (М+1).
Соединение 50а. Соединение 49а (350 мг, 1,14 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186,6 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 800 мг, 4,44 ммоль). После того как смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, ее нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 50а (380 мг, выход 99%) в виде пенистого твердого вещества. m/z=335 (М+1).
Соединение 51а. Соединение 50а (380 мг, 1,14 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (140 мг, 2,01 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение
- 89 043609
51а (340 мг, выход 90%) в виде пенистого твердого вещества. m/z=332 (M+1).
Соединение 52а. Соединение 51а (340 мг, 1,03 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 800 мг, 4,44 ммоль). После того, как реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, ее нейтрализовали водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 52а (340 мг, количественный выход) в виде пенистого твердого вещества. m/z=332 (M+1).
Т22. Соединение 52а (340 мг, 1,03 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли бром (180 мг, 1,13 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Реакцию оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали при 50°C в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т22 (150 мг, выход 44%) в виде пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,12 (с, 1Н), 8,91 (с, 1Н), 7,49 (м, 5Н), 2,93 (м, 2Н), 2,59 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,21 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,10 (м, 1Н), 1,74 (м, 1Н), 1,48 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=330 (M+1).
Соединение 47b. Соединение 39 (780 мг, 2,39 ммоль) растворяли в EtOH (10 мл). Добавляли хлорид циклогексанкарбоксимидамида (650 мг, 4,00 ммоль) и трет-бутоксид калия (560 мг, 4,99 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток смешивали с водой (20 мл), нейтрализовали водн. 3N HCl и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 47b (1,05 г, количественный выход) в виде маслянистой жидкости. m/z=435 (М+1).
Соединение 48b. Соединение 47b (1,05 г, 2,42 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (20 мл). Добавляли оксид марганца(IV) (88%, 600 мг, 6,07 ммоль). Раствор перемешивали в течение 3 суток при комнатной температуре и фильтровали. Фильтрат концентрировали, получая соединение 48b (900 мг, 86% выход) в виде твердого вещества. m/z=433 (M+1).
Соединение 49b. Соединение 48b (900 мг, 2,08 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл) и добавляли водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 49b (700 мг, выход 86%) в виде пенистого твердого вещества. m/z=389 (M+1).
Соединение 50b. Соединение 49b (700 мг, 1,8 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 187,5 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 1300 мг, 7,2 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая пенистое соединение 50b (745 мг, количественный выход). m/z=417 (M+1).
Соединение 51b. Соединение 50b (745 мг, 1,80 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (245 мг, 3,52 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 51b (650 мг, выход 88%) в виде пенистого твердого вещества. m/z=414 (M+1).
Соединение 52b. Соединение 51b (650 мг, 1,57 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 1100 мг, 6,11 ммоль). После того, как реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, ее нейтрализовали водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, после чего сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 52b (350 мг, выход 54%) в виде пенистого твердого вещества. m/z=414 (M+1).
Т23. Соединение 52b (350 мг, 0,84 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли бром (150 мг, 0,94 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Реакцию оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали при 50°C в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение Т23 (150 мг, выход 43%) в виде пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,96 (с, 1Н), 7,47 (м, 5Н), 2,88 (м, 3H), 2,58 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,19 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,05 (м, 3H), 1,87 (м, 2Н), 1,73 (м, 4Н), 1,46 (с, 3H), 1,39 (м, 3H), 1,29 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=412 (M+1).
Соединение 53. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 31 (1,00 г, 2,72 ммоль) и уинолонамина (1,9 мл, 13,6 ммоль) в CH2Cl2 (27 мл) по каплям добавляли раствор трифторметансульфонового ангидрида в CH2Cl2 (1,0 М, 4 мл, 4,0 ммоль). Образец перемешивали при 0°C в течение 45 мин и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (100 мл) и EtOAc (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в
- 90 043609 гексанах), получая соединение 53 (322 мг, выход 24%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества.
m/z=500 (M+1).
Соединение 54. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 53 (257 мг, 0,514 ммоль), 4-(трифторметил) фенилбороновой кислоты (147 мг, 0,114 ммоль) и фосфата калия (330 мг, 1,55 ммоль) в DME (10 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (59 мг, 0,051 ммоль) и смесь снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение 16 ч. Темный образец охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 54 (106 мг, выход 41%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Соединение 55. Раствор соединения 54 (106 мг, 0,214 ммоль) и водн. 3N HCl (0,7 мл, 2,1 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Образец концентрировали, охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH (25 мл), затем экстрагировали CHCl3 (2x25 мл). Объединенный органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 55 (95 мг, выход 98%) в виде желтоватокоричневого пенистого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии без очистки. m/z=452 (M+1).
Соединение 56. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 55 (95 мг, 0,21 ммоль) в этилформиате (2,0 мл, 24,8 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,20 мл, 1,07 ммоль). Через 16 ч раствор концентрировали и затем распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (10 мл) и CHCl3 (10 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (10 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 56 (112 мг) в виде желтой маслянистой жидкости, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=480 (M+1).
Соединение 57. Смесь в атмосфере азота соединения 56 (все из последней стадии) и гидрохлорида гидроксиламина (37 мг, 0,53 ммоль) в EtOH (2 мл) нагревали при 60°C в течение 2 ч, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор концентрировали, охлаждали, осторожно подщелачивали водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл) и экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 57 (98 мг, выход 98% из соединения 55) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=477 (M+1).
Соединение 58. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 57 (98 мг, 0,206 ммоль) в МеОН (5 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в метаноле, 0,20 мл, 1,10 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 58 (46 мг, выход 47%) в виде желтой маслянистой жидкости. m/z=477 (M+1).
Т24. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 58 (42 мг, 0,088 ммоль) в ДМФ (3 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (13 мг, 0,045 ммоль) в ДМФ (1 мл). После того как смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,10 мл, 1,24 ммоль). Ледяную баню убирали. Образец нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т24 (14 мг, выход 33%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,01 (с, 1Н), 8,81 (д, J=5,2 Гц, 2Н), 8,35 (м, 2Н), 7,80 (д, J=7,7 Гц, 2Н), 7,73 (д, J=7,7 Гц, 2Н), 2,96 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,27 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,17 (м, 1Н), 1,80 (м, 1Н), 1,56 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=475 (M+1).
Соединение 60. В герметизируемом флаконе суспензию соединения 31 (1,31 г, 3,56 ммоль) и оксихлорида фосфора(V) (3,3 мл, 35,4 ммоль) в толуоле (7 мл) продували азотом. Флакон герметично закрывали и нагревали до 100°C в течение 1 ч. Раствор охлаждали и медленно выливали в перемешиваемую суспензию NaHCO3 (15 г, 178 ммоль) в воде (100 мл). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин, а затем экстрагировали EtOAc (2x100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (200 мл), осушили над MgSO4, фильтровали, концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 100% EtOAc), получая смесь соединений 59 и 60 (714 мг) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=386 (59, М+1) и 342 (60, М+1).
Раствор вышеуказанной смеси соединений 59 и 60 (714 мг) и водн. 3N HCl (5,5 мл, 16,5 ммоль) в МеОН (10 мл) и ТГФ (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Образец концентрировали, охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH до рН ~ 9-10, а затем
- 91 043609 экстрагировали CHCl3 (2x50 мл). Объединенный органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 60 (616 мг, 50% выход из соединения 31) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=342 (М+1).
Соединение 61а. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 60 (243 мг, 0,711 ммоль), 3-пиридинилбороновой кислоты (130 мг, 1,06 ммоль) и фосфата калия (450 мг, 2,12 ммоль) в 1,4диоксане (7 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (82 мг, 0,071 ммоль) и смесь снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение 48 ч. Темный образец охлаждали, концентрировали и затем распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 5% МеОН в EtOAc), получая соединение 61а (257 мг, выход 94%) в виде темно-желтой маслянистой жидкости. m/z=385 (M+1).
Соединение 62а. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 61а (257 мг, 0,668 ммоль) в этилформиате (4,5 мл, 55,9 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,63 мл, 3,36 ммоль). Через 16 ч раствор концентрировали и затем распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 62а (276 мг, количественный выход) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=413 (М+1).
Соединение 63а. Смесь в атмосфере азота соединения 62а (276 мг, 0,668 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (230 мг, 3,31 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали при 60°C в течение 2 ч, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор концентрировали, охлаждали и осторожно подщелачивали водн. насыщ. NaHCO3 (100 мл). Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колонки и хроматографии (силикагель, элюирование 100% EtOAc), получая соединение 63а (134 мг, выход 49%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=410 (M+1).
Соединение 64а. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 63а (134 мг, 0,327 ммоль) в метаноле (5 мл) и ТГФ (5 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,31 мл, 1,65 ммоль), Образец перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 64а (198 мг) в виде желтой маслянистой жидкости, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=410 (М+1).
Т25. К перемешиваемому раствору при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 64а (все из последней стадии) в ДМФ (7 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (47 мг, 0,164 ммоль) в ДМФ (3 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,26 мл, 3,21 ммоль). Ледяную баню убирали. Образец нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3), получая соединение Т25 (68 мг, выход 51% из соединения 63а) в виде грязно-белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCU) δ 9,00 (с, 1Н), 8,90 (дд, J=0,9, 2,3 Гц, 1Н), 8,82 (м, 2Н), 8,77 (дд, J=1,7, 4,9 Гц, 1Н), 8,36 (м, 2Н), 7,98 (ддд, J=1,7, 2,3, 7,9 Гц, 1Н), 7,49 (ддд, J=0,9, 4,9, 7,9 Гц, 1Н), 3,02 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,28 (дт, J=2,7, 12,7 Гц, 1Н), 2,18 (ддд, J=2,8, 6,1, 12,0 Гц, 1Н), 1,82 (дд, J=7,0, 10,3, 13,5 Гц, 1Н), 1,56 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=408 (M+1).
Соединение 61b. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 60 (327 мг, 0,956 ммоль), 3-(трифторметил)фенилбороновой кислоты (360 мг, 1,90 ммоль) и фосфата калия (610 мг, 2,87 ммоль) в DME (6 мл) и ДМФ (3 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (110 мг, 0,095 ммоль) и смесь снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение 48 ч. Темный образец охлаждали, концентрировали и затем распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах), получая соединение 61b (556 мг) в виде темно-желтой маслянистой жидкости. m/z=452 (M+1).
Соединение 62b. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 61b (все с последней стадии) в этилформиате (10 мл, 123 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,90 мл, 4,80 ммоль). Через 16 ч раствор концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 62b (567 мг) в виде желто-оранжевого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции
- 92 043609 без очистки. m/z=480 (M+1).
Соединение 63b. Смесь в атмосфере азота соединения 62b (все из последней стадии) и гидрохлорида гидроксиламина (170 мг, 2,45 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали при 60°C в течение 2 ч, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор концентрировали, охлаждали, осторожно подщелачивали водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл). Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 63b (512 мг) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=477 (M+1).
Соединение 64b. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 63b (все с последней стадии) в МеОН (25 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в метаноле, 0,90 мл, 4,80 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 64b (468 мг) в виде желто-оранжевого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=477 (M+1).
Т26. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 64b (все из последней стадии) в ДМФ (6 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (137 мг, 0,479 ммоль) в ДМФ (3 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,77 мл, 9,52 ммоль). Ледяную баню убирали. Образец нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах), получая частично очищенный продукт, который снова очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т26 (26 мг, 6% выход из соединения 60) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,01 (с, 1Н), 8,81 (м, 2Н), 8,36 (м, 2Н), 7,87 (м, 1Н), 7,80 (м, 2Н), 7,68 (т, J=7,8 Гц, 1Н), 2,95 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,28 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,18 (м, 1Н), 1,80 (ддт, J=6,8, 10,8, 13,4 Гц, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=475 (M+1).
Соединение 61с. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 60 (200 мг, 0,585 ммоль), 4-метилфенилбороновой кислоты (160 мг, 1,17 ммоль) и фосфата калия (370 мг, 1,74 ммоль) в 1,4-диоксане (6 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (68 мг, 0,059 ммоль) и смесь снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение 16 ч. Темный образец охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 61с (273 мг) в виде светло-желтой маслянистой жидкости. m/z=398 (M+1).
Соединение 62с. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 61с (все с последней стадии) в этилформиате (10 мл, 123 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в метаноле, 0,65 мл, 3,46 ммоль). Через 16 ч раствор концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 62с (269 мг) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=426 (M+1).
Соединение 63с. Смесь в атмосфере азота соединения 62с (все из последней стадии) и гидрохлорида гидроксиламина (100 мг, 1,44 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали при 60°C в течение 2 ч, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор концентрировали, охлаждали и осторожно подщелачивали с помощью насыщ. NaHCO3 (50 мл). Смесь экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 63с (257 мг) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=423 (M+1).
Соединение 64с. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 63с (все с последней стадии) в МеОН (20 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,57 мл, 3,04 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 64с (209 мг, выход 84% из соединения 60) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=423 (M+1).
Т27. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 64с (209 мг, 0,495 ммоль) в ДМФ (6 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (71 мг, 0,248 ммоль) в ДМФ (3 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,40 мл, 4,96 ммоль). Ледяную баню убирали. Образец нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промы
- 93 043609 вали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т27 (84 мг, 40% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,02 (с, 1Н), 8,79 (м, 2Н), 8,37 (м, 2Н), 7,52 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 7,33 (д, J=7,9 Гц, 2Н), 3,00 (м, 2Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,46 (с, 3H), 2,26 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,15 (ддд, J=3,2, 6,3, 14,0 Гц, 1Н), 1,77 (ддт, J=7,3, 10,3, 13,3 Гц, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=421 (M+1).
Соединение 61d. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 60 (200 мг, 0,585 ммоль), 4-хлорфенилбороновой кислоты (180 мг, 1,15 ммоль) и фосфата калия (370 мг, 1,74 ммоль) в 1,4диоксане (6 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (68 мг, 0,059 ммоль) и смесь снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение 16 ч. Темный образец охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 61d (224 мг, выход 92%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=418 (M+1).
Соединение 62d. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 61d (224 мг, 0,536 ммоль) в этилформиате (10 мл, 123 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,50 мл, 2,66 ммоль). Через 16 ч раствор концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 62d (288 мг) в виде желтой маслянистой жидкости, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=446 (M+1).
Соединение 63d. Смесь в атмосфере азота соединения 62d (все из последней стадии) и гидрохлорида гидроксиламина (100 мг, 1,44 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали при 60°C в течение 2 ч, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор концентрировали, охлаждали и осторожно подщелачивали водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл). Смесь экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 63d (235 мг, выход 99% из соединения 61d) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=443 (M+1).
Соединение 64d. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 63d (235 мг, 0,530 ммоль) в МеОН (20 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,50 мл, 2,66 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах), получая соединение 64d (130 мг, выход 55%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=443 (M+1).
Т28. К перемешиваемому раствору при 0°C в атмосфере азота соединения 64d (130 мг, 0,293 ммоль) в ДМФ (6 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (42 мг, 0,146 ммоль) в ДМФ (3 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,25 мл, 3,09 ммоль). Ледяную баню убирали. Образец нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) и затем промывали Et2O с получением соединения Т28 (40 мг, выход 31%) в виде грязно-белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,00 (с, 1Н), 8,81 (м, 2Н), 8,35 (м, 2Н), 7,57 (м, 2Н), 7,51 (м, 2Н), 2,99 (м, 2Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,16 (тдд, J=2,7, 6,0, 14,0 Гц, 1Н), 1,79 (ддт, J=7,1, 10,4, 13,3 Гц, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=441 (M+1).
Соединение 61е. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 60 (200 мг, 0,585 ммоль), 4-пиридинилбороновой кислоты (140 мг, 1,14 ммоль) и фосфата калия (370 мг, 1,74 ммоль) в 1,4диоксане (6 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (68 мг, 0,059 ммоль) и смесь снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение 16 ч. Темный образец охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-5% МеОН в EtOAc), получая соединение 61е (90 мг, выход 40%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=385 (M+1).
Соединение 62е. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 61е (90 мг, 0,234 ммоль) в этилформиате (10 мл, 123 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,22 мл, 1,17 ммоль). Через 16 ч раствор концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 62е (102 мг) в
- 94 043609 виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=413 (M+1).
Соединение 63е. Смесь в атмосфере азота соединения 62е (все из последней стадии) и гидрохлорида гидроксиламина (41 мг, 0,59 ммоль) в EtOH (25 мл) нагревали при 60°C в течение 2 ч, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор концентрировали, охлаждали и осторожно подщелачивали водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл). Смесь экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 63е (72 мг, выход 75% из соединения 61е) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки., m/z=410 (M+1).
Соединение 64е. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 63е (72 мг, 0,176 ммоль) в МеОН (20 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,17 мл, 0,91 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 64е (58 мг, выход 80%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=410 (M+1).
Т29. К перемешиваемому раствору при 0°C в атмосфере азота соединения 64е (58 мг, 0,142 ммоль) в ДМФ (5 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (20 мг, 0,070 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,11 мл, 1,36 ммоль). Ледяную баню убирали. Образец нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3), получая соединение Т29 (13 мг, выход 22%) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,99 (с, 1Н), 8,82 (м, 4Н), 8,35 (м, 2Н), 7,51 (м, 2Н), 2,97 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,8, 13,4 Гц, 1Н), 2,27 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,19 (м, 1Н), 1,82 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=408 (M+1).
Соединение 61f. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 60 (200 мг, 0,585 ммоль), 4-метоксифенилбороновой кислоты (180 мг, 1,18 ммоль) и фосфата калия (370 мг, 1,74 ммоль) в 1,4-диоксане (6 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (68 мг, 0,059 ммоль) и смесь снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение 16 ч. Темный образец охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование от 50 до 75% EtOAc в гексанах), получая соединение 61f (249 мг) в виде светло-желтой маслянистой жидкости. m/z=414 (M+1).
Соединение 62f. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 61f (все с последней стадии) в этилформиате (10 мл, 123 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,56 мл, 2,98 ммоль). Через 16 ч раствор концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 62f (253 мг, выход 98% из соединения 60) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=442 (M+1).
Соединение 63f Смесь в атмосфере азота соединения 62f (253 мг, 0,573 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (100 мг, 1,44 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали при 60°C в течение 2 ч, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор концентрировали, охлаждали и осторожно подщелачивали водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл). Смесь экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 63f (268 мг) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=439 (M+1).
Соединение 64f. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 63f (все с последней стадии) в МеОН (20 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в метаноле, 0,57 мл, 3,04 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали.
Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 64f (158 мг, выход 62% из соединения 62f) в виде светло-желтой маслянистой жидкости. m/z=439 (M+1).
T30. К перемешиваемому раствору при 0°C в атмосфере азота соединения 64f (158 мг, 0,360 ммоль) в ДМФ (5 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (52 мг, 0,182 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,30 мл, 3,71 ммоль). Ледяную баню убирали. Образец нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрирова- 95 043609 ли. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение T30 (54 мг, выход 34%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,02 (с, 1Н), 8,80 (м, 2Н), 8,37 (м, 2Н), 7,63 (м, 2Н), 7,04 (м, 2Н), 3,90 (с, 3H), 3,04 (м, 2Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,27 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,16 (м, 1Н), 1,79 (м, 1Н), 1,53 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=437 (M+1).
Соединение 61g. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 60 (200 мг, 0,585 ммоль), 3,4-дихлорфенилбороновой кислоты (130 мг, 0,68 ммоль) и фосфата калия (370 мг, 1,74 ммоль) в 1,4-диоксане (6 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (68 мг, 0,059 ммоль) и смесь снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение 16 ч. Темный образец охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 61g (206 мг, выход 78%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=452 (M+1).
Соединение 62g. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 61g (206 мг, 0,455 ммоль) в этилформиате (10 мл, 123 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,43 мл, 2,29 ммоль). Через 16 ч раствор концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 62g (234 мг) в виде желтой маслянистой жидкости, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=480 (M+1).
Соединение 63g. Смесь в атмосфере азота соединения 62g (все из последней стадии) и гидрохлорида гидроксиламина (85 мг, 1,22 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали при 60°C в течение 2 ч, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор концентрировали, охлаждали и осторожно подщелачивали водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 63g (200 мг, выход 92% из соединения 61g) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=477 (M+1).
Соединение 64g. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 63 г (200 мг, 0,419 ммоль) в МеОН (10 мл) и ТГФ (10 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,39 мл, 2,08 ммоль), Образец перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 64g (128 мг, выход 64%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=477 (M+1).
Т31. К перемешиваемому раствору при 0°C в атмосфере азота соединения 64g (128 мг, 0,268 ммоль) в ДМФ (5 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (38 мг, 0,133 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,22 мл, 2,72 ммоль). Ледяную баню убирали. Образец нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), осушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т31 (74 мг, выход 58%) в виде светло-желтого твердого вещества. % ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,99 (с, 1Н), 8,82 (м, 2Н), 8,35 (м, 2Н), 7,72 (д, J=2,0 Гц, 1Н), 7,61 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 7,46 (дд, J=2,1, 8,3 Гц, 1Н), 2,97 (м, 2Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,23 (м, 2Н), 1,80 (ддт, J=7,2, 10,4, 13,3 Гц, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=475 (M+1).
Соединения 65 и 66. Соединение 12 (1120 мг, 3,75 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (20 мл). Добавляли карбонат калия (770 мг, 5,58 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий (II) (270 мг, 0,37 ммоль) и фенилбороновую кислоту (456 мг, 3,73 ммоль). После продувки азотом в течение 10 мин смесь нагревали при 90°C в течение 16 ч, охлаждали и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 65 (830 мг, выход 65%) и соединение 66 (220 мг, выход 17%) в виде пенистого твердого вещества. Соединение 65 m/z=341 (M+1). Соединение 66 m/z=341 (М+1).
Соединение 67. Соединение 65 (830 мг, 2,43 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане/ДМФ (3:1, 10 мл). Добавляли карбонат калия (550 мг, 3,99 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (190 мг, 0,26 ммоль) и хинолин-4-илбороновую кислоту (450 мг, 2,60 ммоль). После продувки азотом в течение 10 мин смесь нагревали при 100°C в течение 16 ч, охлаждали и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш- 96 043609 хроматографией (силикагель, 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 67 (160 мг, 15% выход) в виде пенистого твердого вещества. m/z=434 (M+1).
Соединение 68. К перемешиваемой смеси соединения 67 (160 мг, 0,37 ммоль) в этилформиате (15 мл, 186,5 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 300 мг, 1,67 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в течение ночи смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 68 (170 мг, количественный выход) в виде пенистого твердого вещества. m/z=462 (M+1).
Соединение 69. Соединение 68 (170 мг, 0,37 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (55 мг, 0,79 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 69 (165 мг, выход 98%) в виде пенистого твердого вещества. m/z=459 (M+1).
Соединение 70. Соединение 69 (165 мг, 0,36 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 300 мг, 1,67 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 70 (165 мг, количественный выход) в виде пенистого твердого вещества. m/z=459 (M+1).
Т32. Соединение 70 (165 мг, 0,36 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли бром (62 мг, 0,39 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Реакцию оставляли нагреваться до комнатной температуры и нагревали при 50°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т32 (45 мг, выход 27%) в виде пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,95 (с, 1Н), 8,74 (дд, J=1,4, 8,7 Гц, 1Н), 8,22 (дд, J=0,8, 8,8 Гц, 1Н), 8,03 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,63 (м, 3H), 7,53 (м, 3H), 3,05 (м, 2Н), 2,64 (тд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,32 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,19 (тдд, J=2,9, 6,1, 12,2 Гц, 1Н), 1,84 (м, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=457 (M+1).
Соединение 71. Соединение 65 (450 мг, 1,32 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане/ДМФ (3:1, 10 мл). Добавляли карбонат калия (550 мг, 3,99 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (100 мг, 0,14 ммоль) и 2-метоксипиридин-4бороновую кислоту (400 мг, 2,62 ммоль). После продувки азотом в течение 10 мин смесь нагревали при 100°C в течение 16 ч, охлаждали и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 71 (510 мг, выход 93%) в виде пенистого твердого вещества. m/z=414 (М+1).
Соединение 72. К перемешиваемой смеси соединения 71 (510 мг, 1,23 ммоль) в этилформиате (15 мл, 186,5 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 900 мг, 5,00 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в течение ночи смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 72 (545 мг, количественный выход) в виде пенистого твердого вещества. m/z=442 (M+1).
Соединение 73. Соединение 72 (545 мг, 1,23 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (175 мг, 2,52 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 73 (540 мг, выход 99%) в виде пенистого твердого вещества. m/z=439 (M+1).
Соединение 74. Соединение 73 (540 мг, 1,23 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 900 мг, 5,00 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 74 (410 мг, выход 76%) в виде пенистого твердого вещества. m/z=439 (M+1).
T33. Соединение 74 (410 мг, 0,93 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли бром (165 мг, 1,03 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Реакцию оставляли нагреваться до комнатной температуры и нагревали при 50°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение T33 (150 мг, 37% выход) в виде пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,00 (с, 1Н), 8,33 (дд, J=0,7, 5,4 Гц, 1Н), 7,95 (дд, J=1,4, 5,4 Гц, 1Н), 7,85 (дд, J=0,7, 1,5 Гц, 1Н), 7,60 (м, 2Н), 7,52 (м, 3H), 4,02 (с, 3H), 2,99 (м, 2Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,14 (тдд, J=2,7, 6,2, 13,9 Гц, 1Н), 1,77 (ддт, J=7,0, 10,6, 13,4 Гц, 1Н), 1,53 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=437 (M+1).
Соединение 75. Соединение 8 (5,04 г, 21,2 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (200 мл) и добавляли диэтилэфират бромида магния (13,08 г, 50,6 ммоль) с последующим добавлением N,N-диизопропилэтиламина (10,8 мл, 62,0 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 30 мин и добавляли
- 97 043609 бензоилхлорид (3,3 мл, 28,4 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем промывали водн. насыщ. KH2PO4 (100 мл), водн. насыщ. NaHCO3 (100 мл) и солевым раствором.
Органическую фазу сушили над MgSO4, концентрировали и сушили под вакуумом. Неочищенный продукт растирали с гексаном, и твердое вещество собирали фильтрованием и сушили, получая соединение (6,91 г, выход 95%) в виде желто-коричневого твердого вещества. m/z=343 (M+1).
Соединение 76. Соединение 75 (1,907 г, 5,57 ммоль) и карбонат гуанидина (1,20 г, 13,32 ммоль) смешивали в EtOH (50 мл) и добавляли метоксид натрия (5,4 М раствор в МеОН, 2,2 мл, 11,88 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи, затем охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (200 мл) и водн. насыщ. NaHCO3 (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), осушили над MgSO4 и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение 76 (744 мг, выход 37%) в виде светло-желтой пены. m/z=366 (M+1).
Соединение 77. Соединение 76 (681 мг, 1,86 ммоль) растворяли в МеОН (20 мл) и водн. Добавляли 1N HCl (6 мл). Раствор перемешивали в течение ночи и затем концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (200 мл) и водн. насыщ. NaHCO3. Органический экстракт промывали солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 77 в виде прозрачного стекла, которое непосредственно использовали на следующей стадии. m/z=322 (M+1).
Соединения 78 и 79. Соединение 77 (все с последней стадии) растворяли в этилформиате (20 мл) и добавляли метоксид натрия (5,4 М раствор в МеОН, 1 мл, 5,4 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем распределяли между EtOAc (150 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (40 мл). Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая смесь соединения 78 и соединения 79 (0,63 г) в виде воскообразного стекла. m/z=350 (M+1, соединение 78), 378 (М+1, соединение 79).
Соединение 80. Соединение 78 и соединение 79 (0,62 г) смешивали с гидрохлоридом гидроксиламина (0,376 г, 5,41 ммоль) в EtOH (40 мл) и воде (2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (200 мл) и водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл).
Органический слой отделяли, промывали рассолом (30 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 80 (0,485 г, выход 75% из соединения 76) в виде пены. m/z=347 (M+1).
Соединение 81. Соединение 80 (0,485 г, 1,40 ммоль) смешивали в ТГФ (30 мл) и МеОН (1 мл). Добавляли метоксид натрия (5,4 М раствор в МеОН, 1 мл, 5,4 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем распределяли между EtOAc (200 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (100 мл). Органический слой отделяли, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая соединение 81 (0,498 г, количественный выход).
Т34. Соединение 81 (0,49 г, 1,41 ммоль) растворяли в ДМФ (4 мл) и охлаждали на ледяной бане. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,227 г, 0,79 ммоль) и раствор перемешивали 1 ч при 0°C. Добавляли пиридин (1 мл, 12,4 ммоль) и раствор нагревали при 65°C в течение 3 ч, а затем концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (200 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический слой промывали водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл), солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая неочищенный Т34 (152 мг), который снова очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 10% EtOAc в CH2Cl2). с получением соединения Т34 (18,8 мг, выход 4%) в виде желтой пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,85 (с, 1Н), 7,46 (м, 5Н), 4,99 (уш. с. 2Н), 2,70 (м, 2Н), 2,53 (тд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,14 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,02 (м, 1Н), 1,67 (м, 1Н), 1,44 (с, 3H), 1,28 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=345 (M+1).
Т35. Смесь Т34 (48 мг, 0,14 ммоль), пиридина (0,1 мл, 1,24 ммоль) и циклогексанкарбонилхлорида (48 мг, 0,33 ммоль) в CH2Cl2 (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и добавляли EtOAc. Нерастворимый материал отфильтровывали и фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 5% EtOAc в CH2Cl2), получая неочищенный Т35, который растворяли в EtOAc и промывали водн. насыщ. NaHCO3 и солевым раствором. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток дважды очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 5% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение Т35 (14,8 мг, выход 23%) в виде желтой пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,85 (с, 1Н), 7,92 (уш. с. 1Н), 7,49 (м, 5Н), 2,86 (м, 2Н), 2,56 (тд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,19 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,13-1,25 (м, 13Н), 1,49 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=455 (M+1).
Соединение 82. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 8 (2,50 г, 10,49 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (5,5 мл, 31,6 ммоль) в CH2Cl2 (52 мл) добавляли одной порцией диэтилэфирата бромида магния (6,8 г, 26,3 ммоль). Суспензию перемешивали в течение 30 мин, затем по каплям добавляли раствор фенилацетилхлорида (1,5 мл, 11,3 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи и концентрировали. Остаток смешивали с водн. насыщ. KH2PO4 (100 мл) и EtOAc (100 мл) и фильтровали через
- 98 043609 слой Celite® для удаления нерастворимого материала. Слои фильтрата были разделены. Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая сырое соединение 82 (4,15 г, количественный выход), которое использовали непосредственно на следующей стадии без очистки. m/z=357 (M+1).
Соединение 83. Смесь соединения 82 (2,08 г, предположительно 5,25 ммоль), 4амидинопиридингидрохлорида (1,00 г, 6,34 ммоль) и карбоната калия (1,74 г, 12,59 ммоль) в EtOH (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 5 дней. Образец концентрировали и остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (100 мл) и EtOAc (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением неочищенного соединения 83 (1,92 г, выход 83% из соединения 8) в виде желтой маслянистой жидкости, которое использовали непосредственно на следующей стадии без очистки. m/z=442 (M+1).
Соединение 84. Раствор соединения 83 (1,92 г, 4,34 ммоль) и водн. 3N HCl (14,5 мл, 43,5 ммоль) в МеОН (50 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Образец концентрировали, охлаждали и подщелачивали водн. 10% раствором NH4OH (50 мл). Смесь экстрагировали CHCl3 (2x25 мл). Объединенный органический экстракт промывали солевым раствором (10 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 84 (69 мг, выход 4%) в виде желтой маслянистой жидкости. m/z=398 (M+1).
Соединение 85. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 84 (69 мг, 0,17 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,16 мл, 0,85 ммоль). Через 16 ч раствор концентрировали и остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 85 (73 мг, количественный выход) в виде желтой маслянистой жидкости, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=426 (M+1).
Соединение 86. Смесь в атмосфере азота соединения 85 (73 мг, 0,17 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (30 мг, 0,43 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали при 60°C в течение 2 ч, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали, охлаждали, осторожно подщелачивали водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 86 (67 мг, 93%) в виде желтой маслянистой жидкости, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=423 (M+1).
Соединение 87. К перемешиваемому раствору при комнатной температуре в атмосфере азота соединения 86 (67 мг, 0,16 ммоль) в МеОН (10 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,15 мл, 0,80 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 87 (62 мг, 92%) в виде желтого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=423 (M+1).
Т36. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 87 (62 мг, 0,15 ммоль) в ДМФ (5 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (21 мг, 0,073 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,12 мл, 1,49 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т36 (13 мг, 21%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,96 (с, 1Н), 8,81 (м, 2Н), 8,35 (м, 2Н), 7,28 (м, 5Н), 4,20 (с, 2Н), 2,99 (дд, J=5,2, 16,0 Гц, 1Н), 2,76 (ддд, J=7,4, 11,1, 18,3 Гц, 1Н), 2,58 (кд, 6,8, 13,3 Гц, 1Н), 2,13 (м, 2Н), 1,79 (дк, J=6,6, 13,1 Гц, 1Н), 1,47 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=421 (М+1).
Соединение 88. Соединение 8 (10 г, 42,0 ммоль) растворяли в EtOH (150 мл). Добавляли 2фторбензальдегид (4,9 мл, 46,2 ммоль) и фторид калия на оксиде алюминия (5,5 ммоль/г, 11,5 г, 63,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли CH2Cl2 и фильтровали. Фильтрат концентрировали, смешивали с гексанами. Продукт осаждали, фильтровали и сушили в вакууме, получая грязно-белое твердое соединение 88 (10,8 г, выход 74%). m/z=345 (М+1).
Соединение 89 (MnO2). Соединение 88 (4,4 г, 12,8 ммоль) растворяли в EtOH (100 мл). Добавляли 4хинолинкарбоксимидамида гидрохлорид (4 г, 19,3 ммоль) и K2CO3 (5,35 г, 38,7 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали и
- 99 043609 смешивали с водой (50 мл), нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (25 мл). Добавляли оксид марганца(IV) (88%, 10 г, 101,2 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 89 (6,1 г, выход 96%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=496 (М+1).
Соединение 89 (DDQ). Соединение 88 (1,10 г, 3,19 ммоль), 4-хинолинкарбоксимидамида гидрохлорид (1,00 г, 4,82 ммоль) и K2CO3 (1,33 г, 9,62 ммоль) в EtOH (25 мл) нагревали с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали, нейтрализовали водн. 10% NaH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали, получая неочищенный продукт в виде темно-зеленого пенистого твердого вещества. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (21 мл). Добавляли DDQ (796 мг, 3,51 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь перемешивали в течение 5 мин и фильтровали через слой Celite®. Фильтрат экстрагировали CH2Cl2. Органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 89 (1,43 г, выход 90%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Соединение 90. Соединение 89 (6,1 г, 12,3 ммоль) растворяли в ТГФ (50 мл). Водн. 3N HCl (25 мл, 75 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После концентрирования остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 90 (5,4 г, выход 97%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=452 (М+1).
Соединение 91. Соединение 90 (1,828 г, 4,0 ммоль) растворяли в этилформиате (9,8 мл, 121,9 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 9,4 мл, 41,1 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. HCl (6N, 7,5 мл, 45,0 ммоль). рН реакционной смеси составляет ~ 2 (бумажные полоски для определения рН). Последовательно добавляли EtOH (40 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (425 мг, 6,1 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали. Добавляли EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл). Органический экстракт отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc (20 мл). Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 91 (1,660 г, выход 86%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=477 (M+1).
Соединение 92 (Т186). Соединение 91 (1,656 г, 3,5 ммоль) растворяли в МеОН (35 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,2 мл, 5,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1,5 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°C и нейтрализовали добавлением водн. 10% NaH2PO4 (9,4 мл). МеОН удаляли выпариванием. Добавляли EtOAc (50 мл) и воду (25 мл). Органический экстракт отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc (20 мл). Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 080% EtOAc в гексанах), получая соединение 92 (Т186) (1,570 г, выход 95%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=477 (M+1); смесь изомеров; 1H ЯМР основного изомера (400 МГц, CDCl3) δ 9,05 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,75 (м, 1Н), 8,20 (м, 1Н), 8,00 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,76 (м, 1Н), 7,62 (м, 1Н), 7,49 (м, 2Н), 7,32 (м, 1Н), 7,22 (м, 1Н), 3,90 (дд, J=13,8, 5,7 Гц, 1Н), 3,53 (дд, J=13,6, 5,7 Гц, 1Н), 2,85 (м, 2Н), 2,59 (м, 1Н), 2,32 (т, J=13,7 Гц, 1Н), 2,07 (м, 1Н), 1,95 (тд, J=12,4, 2,6 Гц, 1Н), 1,75 (м, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,21 (д, J=6,4 Гц, 3H).
Т37 (способ А). Соединение 92 (1,364 г, 2,8 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (7 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (409 мг, 1,4 ммоль) в ДМФ (7 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (0,70 мл, 8,7 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2 (50 мл). Смесь промывали водой (4x40 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом (30 мл). Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-80% EtOAc в гексанах), получая соединение Т37 (1,190 г, выход 88%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,95 (с, 1Н), 8,71 (дд, J=1,4, 8,5 Гц, 1Н), 8,22 (шир.д, J=8,4 Гц, 1Н), 8,02 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=1,4, 6,9, 8,4 Гц, 1Н), 7,64 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,22 (м, 1Н), 2,89 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,17 (м, 1Н), 1,85 (ддд, J=10,3, 15,5, 18,3 Гц, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=475 (M+1).
Т37 и Т38 (способ В). Соединение 92 (5,2 г, 10,91 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (10 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли бром (1,92 г, 12,03 ммоль) в CH2Cl2 (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и добавляли пиридин (5 мл, 61,96 ммоль). Реакцию нагревали при 50°C в течение 4 ч и концентрировали. Остаток смешивали с водн. NaHCO3 (30 мл) и EtOAc (10 мл) и перемешивали в течение 1 ч. Осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и промывали водой. Твердое
- 100 043609 вещество растворяли в CH2C12, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт смешивали с EtOAc (60 мл) и нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Смесь охлаждали; осажденное твердое вещество собирали фильтрацией; и сушили в вакууме, получая соединение Т37 (3,1 г, выход 60%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=475 (M+1). Фильтрат трижды очищали флэш-хроматографией раза (силикагель, 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т38 (35 мг, выход 0,7%) в виде пены. Т38 1H ЯМР (400 МГц, CDCI3) δ 9,09 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,70 (дд, J=0,8, 8,4 Гц, 1Н), 8,65 (с, 1Н), 8,23 (шир.д, J=8,8 Гц, 1Н), 8,02 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,79 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,65 (ддд, J=1,3, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 7,53 (м, 2Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 3,19 (ддд, J=3,1, 5,0, 13,8 Гц, 1Н), 2,98 (м, 2Н), 2,70 (м, 1Н), 2,08 (с, 3H), 1,89 (с, 3H); m/z=473 (M+1).
Соединение 93. Соединение 9 (860 мг, 2,90 ммоль) растворяли в EtOH (10 мл). Добавляли гидрохлорид хинолин-4-карбоксимидамида (1 г, 4,81 ммоль) и карбонат калия (800 мг, 5,80). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней и концентрировали. Остаток смешивали с водой (20 мл) и EtOAc (100 мл), нагревали при 65°C в течение 30 мин и охлаждали до комнатной температуры. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 93 (360 мг, 30% выход) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=418 (M+1).
Соединения 94 и 95. Соединение 93 (345 мг, 0,83 ммоль) растворяли в толуоле (2 мл). Добавляли оксихлорид фосфора(V) (1,3 г, 8,48 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® Initiator™ при 100°C в течение 30 мин, охлаждали и выливали в лед. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водн. NaHCO3, сушили над MgSO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая смесь соединения 94 и соединения 95 (300 мг) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=436 (соединение 94, М+1) и 392 (соединение 95, М+1).
Соединение 96а и 97а. Смесь соединения 94 и соединения 95 (300 мг) растворяли в 1,4-диоксане (6 мл). Добавляли карбонат калия (290 мг, 2,10 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(11) (55 мг, 0,075 ммоль) и 3-фторфенилбороновую кислоту (190 мг, 1,36 ммоль).
После продувки азотом в течение 10 мин смесь нагревали при 90°C в течение 16 ч, охлаждали и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая смесь соединения 96а и 97а (300 мг) в виде пены. m/z=496 (соединение 96а, М+1) и 452 (соединение 97а, М+1).
Соединение 97а. Смесь соединения 96а и 97а (300 мг) растворяли в ТГФ (6 мл) и добавляли водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 97а (270 мг, 72% выход из соединения 93) в виде пены. m/z=452 (М+1).
Соединение 98а. Соединение 97а (270 мг, 0,60 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186,5 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 250 мг, 1,39 ммоль). После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 98а (290 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=480 (М+1).
Соединение 99а. Соединение 98а (290 мг, 0,60 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (100 мг, 1,44 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 99а (290 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=477 (М+1).
Соединение 100а. Соединение 99а (290 мг, 0,60 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 250 мг, 1,39 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 100а (290 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=477 (М+1).
Т39. Соединение 100а (290 мг, 0,60 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли бром (110 мг, 0,69 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакцию перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Реакцию оставляли нагреваться до комнатной температуры, перемешивали при 50°C в течение 16 ч и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т39 (80 мг, выход 28%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl·,) δ 9,09 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,93 (с, 1Н), 8,71 (дд, J=1,4, 8,7 Гц, 1Н), 8,23 (дд, J=1,5, 8,8 Гц, 1Н), 8,02 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,64 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,51 (дт, J=5,7, 8,0 Гц, 1Н), 7,41 (тд, J=1,3, 7,7 Гц, 1Н), 7,35 (ддд, J=1,5, 2,6, 9,4 Гц, 1Н), 7,22 (дд, J=1,0, 2,6, 8,3 Гц, 1Н) 3,04 (м, 2Н), 2,65 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,21 (тдд, J=2,9, 6,0, 14,0
- 101 043609
Гц, 1Н), 1,85 (м, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=475 (M+1).
Соединение 96b и 97b. Смесь соединения 94 и соединения 95 (300 мг) растворяли в 1,4-диоксане (6 мл). Добавляли карбонат калия (290 мг, 2,10 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (55 мг, 0,075 ммоль) и 4-фторфенилбороновую кислоту (190 мг, 1,36 ммоль). После продувки азотом в течение 10 мин смесь нагревали при 90°C в течение 16 ч, охлаждали и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, 0-30% EtOAc в гексане) с получением смеси соединений 96b и 97b (340 мг) в виде пены. m/z=496 (соединение 96b, M+1) и 452 (соединение 97b, M+1).
Соединение 97b. Смесь соединения 96b и 97b (340 мг) растворяли в ТГФ (6 мл) и добавляли водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 97b (310 мг, 83% выход из соединения 93) в виде пены. m/z=452 (M+1).
Соединение 98b. Соединение 97b (310 мг, 0,69 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186,5 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 400 мг, 2,22 ммоль). После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 98b (330 мг, количественный выход). m/z=480 (М+1).
Соединение 99b. Соединение 98b (330 мг, 0,69 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (100 мг, 1,44 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 99b (330 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=477 (М+1).
Соединение 100b. Соединение 99b (330 мг, 0,69 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 400 мг, 2,22 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 100b (330 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=477 (М+1).
Т40. Соединение 100b (330 мг, 0,69 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли бром (110 мг, 0,69 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл) и реакцию перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль) и реакции давали нагреться до комнатной температуры, перемешивали при 50°C в течение 16 ч и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение Т40 (55 мг, 17% выход) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,94 (с, 1Н), 8,71 (дд, J=1,3, 8,6 Гц, 1Н), 8,23 (д, J=0,8, 8,4 Гц, 1Н), 8,02 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,65 (м, 3H), 7,23 (м, 2Н), 3,05 (м, 2Н), 2,65 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,21 (тдд, J=3,2, 6,3, 14,1 Гц, 1Н), 1,84 (ддт, J=7,3, 10,4, 13,4 Гц, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,36 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=475 (М+1).
Соединения 101 и 102. Смесь соединения 94 и соединения 95 (300 мг) растворяли в ТГФ (4 мл). Добавляли раствор гидрида натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 115 мг, 2,88 ммоль) и 2-пропанол (1 г, 16,6 ммоль) в ТГФ (5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая смесь соединений 101 и 102 (300 мг). m/z=460 (соединение 101, М+1) и 416 (соединение 102, М+1).
Соединение 102. Смесь соединения 101 и 102 (300 мг) растворяли в ТГФ (6 мл) и добавляли водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 102 (270 мг, 78% выход из соединения 93) в виде пены. m/z=416 (М+1).
Соединение 103. Соединение 102 (270 мг, 0,65 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186,5 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 250 мг, 1,39 ммоль). После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 103 (290 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=444 (М+1).
Соединение 104. Соединение 103 (290 мг, 0,65 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (100 мг, 1,44 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 104 (290 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=441 (М+1).
Соединение 105. Соединение 104 (290 мг, 0,65 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 250 мг, 1,39 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали
- 102 043609
EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 105 (260 мг, выход 91%) в виде пены. m/z=441 (М+1).
Т41. Соединение 105 (260 мг, 0,59 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли бром (110 мг, 0,69 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл) и реакцию перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Реакцию оставляли нагреваться до комнатной температуры, перемешивали при 50°C в течение 16 ч и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т41 (25 мг, 10% выход) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,07 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,39 (с, 1Н), 8,76 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 8,22 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 7,96 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,77 (т, J=7,2 Гц, 1Н), 7,62 (т, J=7,6 Гц, 1Н), 5,53 (септет, J=6,2 Гц, 1Н), 2,92 (дд, J=6,7, 18,8 Гц, 1Н), 2,66 (м, 2Н), 2,20 (м, 2Н), 1,82 (м, 1Н), 1,52 (с, 3H), 1,44 (д, J=6,3 Гц, 3H), 1,42 (д, J=6,3 Гц, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=439 (M+1).
Соединения 106 и 107. Смесь соединения 94 и соединения 95 (410 мг, ~ 0,94 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (6 мл). Карбонат калия (400 мг, 2,99 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (70 мг, 0,095 ммоль) и 4,4,5,5-тетраметил-2-(проп-1ен-2-ил)-1,3,2-диоксаборолан (320 мг, 1,90 ммоль). После продувки азотом в течение 10 мин смесь нагревали при 90°C в течение 16 ч, охлаждали и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая смесь соединений 106 и 107 (410 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=442 (соединение 106, М+1) и 398 (соединение 107, М+1).
Соединения 108 и 109. Смесь соединений 106 и 107 (410 мг, ~ 0,93 ммоль) и 10% палладия на угле (35 мг) в ТГФ (15 мл) гидрировали при атмосферном давлении в течение 16 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь отфильтровали через слой Celite®. Фильтрат концентрировали, получая смесь соединения 108 и 109 (410 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=444 (соединение 108, М+1) и 400 (соединение 109, М+1).
Соединение 109. Смесь соединения 108 и 109 (410 мг, ~ 0,93 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл) и добавляли водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 109 (270 мг, выход 72%) в виде пены. m/z=400 (М+1).
Соединение 110. Соединение 109 (270 мг, 0,67 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186,5 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 400 мг, 2,22 ммоль). После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 110 (290 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=428 (M+1).
Соединение 111. Соединение 110 (290 мг, 0,67 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (100 мг, 1,44 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 111 (275 мг, выход 95%) в виде пены. m/z=425 (М+1).
Соединение 112. Соединение 111 (275 мг, 0,65 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 400 мг, 2,22 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 112 (250 мг, выход 91%) в виде пены. m/z=425 (M+1).
Т42. Соединение 112 (250 мг, 0,59 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли бром (105 мг, 0,66 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Реакцию оставляли нагреваться до комнатной температуры, перемешивали при 50°C в течение 16 ч и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т42 (45 мг, выход 18%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,10 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,94 (с, 1Н), 8,83 (д, J=1,4, 8,8 Гц, 1Н), 8,22 (дд, J=1,2, 8,6 Гц, 1Н), 8,05 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,63 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,2 Гц, 1Н), 3,32 (септет, J=6,7 Гц, 1Н), 3,11 (дд, J=6,7, 18,2 Гц, 1Н), 2,94 (ддд, J=7,4, 11,1, 18,2 Гц, 1Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,23 (м, 2Н), 1,89 (м, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,40 (д, J=6,6 Гц, 3H), 1,36 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,33 (д, J=6,6 Гц, 3H); m/z=423 (M+1).
Соединение 113. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 65 (175 мг, 0,513 ммоль), 2-метилпиридин-4-бороновой кислоты (105 мг, 0,767 ммоль) и карбоната калия (210 мг, 1,52 ммоль) в 1,4-диоксане (6 мл) и ДМФ (2 мл). Добавляли [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (38 мг, 0,052 ммоль) и смесь снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение 16 ч. Темную смесь охлаждали, разбавляли EtOAc (50 мл), перемешивали в течение 30 мин и фильтровали через слой Celite®. Фильтрат промывали водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и солевым раствором (50 мл). Органический экстракт сушили над MgSO4,
- 103 043609 фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование
50% EtOAc в гексанах), получая соединение 113 (154 мг, выход 75%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=398 (M+1).
Соединение 114. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 113 (154 мг, 0,387 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,36 мл, 1,92 ммоль). После перемешивания в течение 16 ч раствор концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 114 (162 мг, выход 98%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=426 (M+1).
Соединение 115. Смесь в атмосфере азота соединения 114 (162 мг, 0,381 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (67 мг, 0,964 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали при 60°C в течение 2 ч, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор концентрировали, охлаждали, осторожно подщелачивали водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 115 (156 мг, выход 97%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=423 (M+1).
Соединение 116. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 115 (156 мг, 0,369 ммоль) в МеОН (20 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,35 мл, 1,86 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 116 (104 мг, выход 67%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=423 (M+1).
Т43. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 116 (104 мг, 0,245 ммоль) в ДМФ (5 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (35 мг, 0,122 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,20 мл, 2,48 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т43 (28 мг, выход 27%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,03 (с, 1Н), 8,67 (д, J=5,2, 1Н), 8,22 (с, 1Н), 8,17 (д, J=5,2 Гц, 1Н), 7,60 (м, 2Н), 7,53 (м, 3H), 2,99 (м, 2Н), 2,70 (с, 3H), 2,63 (кд, J=6,8, 13,4 Гц, 1Н), 2,27 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,15 (м, 1Н), 1,79 (м, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=421 (M+1).
Соединение 117. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 65 (403 мг, 1,18 ммоль), пинаколового эфира N-Вос-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-бороновой кислоты (550 мг, 1,78 ммоль) и фосфата калия (750 мг, 3,53 ммоль) в 1,4-диоксане (12 мл). Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (140 мг, 0,12 ммоль) и смесь снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение ночи. Смесь охлаждали, разбавляли EtOAc (50 мл), перемешивали в течение 30 мин и фильтровали через слой Celite®. Фильтрат промывали водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и солевым раствором (50 мл). Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 5% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение 117 (724 мг) в виде желтого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. m/z=488 (M+1).
Соединение 118. Смесь соединения 117 (все с последней стадии) и 10% палладия на угле (70 мг) в EtOAc (25 мл) гидрировали (давление в баллоне) при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли дополнительное количество 10% палладия на угле (100 мг) и смесь гидрировали (давление в баллоне) при комнатной температуре еще в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах), получая соединение 118 (334 мг, выход 58% из соединения 65) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=490 (M+1).
Соединение 119. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 118 (334 мг, 0,68 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,64 мл, 3,41 ммоль). После перемешивания в течение 16 ч раствор концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 119 (356 мг, количественный выход) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=518 (M+1).
Соединение 120. Смесь в атмосфере азота соединения 119 (356 мг, 0,68 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (71 мг, 1,02 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали при 60°C в течение 2 ч и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор концентрировали, охлаждали, осторожно подщелачива- 104 043609 ли водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение
120 (305 мг, выход 87%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=515 (M+1).
Соединение 121. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 120 (305 мг, 0,59 ммоль) в МеОН (20 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,56 мл, 2,98 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 121 (273 мг, выход 89%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=515 (M+1).
Т44. К перемешиваемому раствору при 0°C в атмосфере азота соединения 121 (273 мг, 0,53 ммоль) в ДМФ (8 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (76 мг, 0,26 ммоль) в ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,43 мл, 5,32 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т44 (164 мг, выход 60%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,91 (с, 1Н), 7,48 (м, 5Н), 4,24 (уш. с. 2Н), 3,07 (тт, J=3,6, 11,6 Гц, 1Н), 2,89 (м, 4Н), 2,58 (м, 1Н), 2,19 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,07 (м, 3H), 1,88 (м, 2Н), 1,72 (м, 1Н), 1,49 (с, 9Н), 1,46 (с, 3H), 1,30 (д, J=7,2 Гц, 3H); m/z=457 (M-C4H7).
Т45. Раствор Т44 (140 мг, 0,27 ммоль) в CH2Cl2 (20 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота обрабатывали хлористым водородом (4N раствор в 1,4-диоксане, 0,70 мл, 2,8 ммоль). Смесь перемешивали в течение 4 ч и концентрировали до смолистого твердого вещества, которое растирали с Et2O, фильтровали и сушили в вакууме, получая соединение Т45 (101 мг, выход 83%) в виде грязно-белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,77 (уш. с. 1Н), 9,49 (уш. с. 1Н), 8,86 (с, 1Н), 7,47 (м, 5Н), 3,59 (м, 2Н), 3,19 (м, 3H), 2,89 (м, 2Н), 2,57 (м, 1Н), 2,44 (м, 4Н), 2,20 (уш. т, J=12,0 Гц, 1Н), 2,09 (м, 1Н), 1,72 (м, 1Н), 1,46 (с, 3H), 1,29 (д, J=6,4 Гц, 3H); m/z=413 (М+1).
Т46. Смесь Т45 (48 мг, 0,11 ммоль) и ацетата натрия (88 мг, 1,07 ммоль) в уксусном ангидриде (1 мл, 10,58 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 48 ч. Смесь концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 100% EtOAc), получая соединение Т46 (34 мг, выход 69%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. Т46 представляет собой смесь амидных изомеров 1:1. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ [8,90 (с), 8,88 (с), 1:1, 1Н], 7,48 (м, 5Н), 4,75 (уш. д, J=14,3 Гц, 1Н), 3,97 (уш. т, J=13,0 Гц, 1Н), 3,22 (м, 2Н), 2,82 (м, 3H), 2,58 (м, 1Н), [2,17 (с), 2,15 (с), 1:1, 3H], 1,94 (м, 7Н), 1,46 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=455 (M+1).
Соединение 122. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 65 (287 мг, 0,842 ммоль), трет-бутил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2Н)карбоксилата (260 мг, 0,841 ммоль) и фосфат калия (750 мг, 3,53 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл). Добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (62 мг, 0,085 ммоль) и смесь снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение ночи. Смесь охлаждали, разбавляли EtOAc (50 мл), перемешивали в течение 30 мин и затем фильтровали через слой Celite®. Фильтрат промывали водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и солевым раствором (50 мл). Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 10% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение 122 (220 мг, выход 54%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=488 (M+1).
Соединение 123. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 122 (220 мг, 0,451 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,42 мл, 2,24 ммоль). После перемешивания в течение 16 ч раствор концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 123 (250 мг) в виде желтой маслянистой жидкости, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=516 (M+1).
Соединение 124. Смесь в атмосфере азота соединения 123 (все из последней стадии) и гидрохлорида гидроксиламина (47 мг, 0,676 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали при 60°C в течение 2 ч и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор концентрировали, охлаждали, осторожно подщелачивали водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 124 (181 мг, 78% от соединения 122) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=513 (M+1).
Соединение 125. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору со- 105 043609 единения 124 (181 мг, 0,353 ммоль) в МеОН (20 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,33 мл, 1,76 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 125 (139 мг, выход 77%) в виде желтого пенистого твердого вещества, которое использовали в следующей реакции без очистки. m/z=513 (M+1).
Т47. К перемешиваемому раствору при 0°C в атмосфере азота соединения 125 (139 мг, 0,271 ммоль) в ДМФ (8 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (51 мг, 0,178 ммоль) в ДМФ (2 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,29 мл, 3,59 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах), получая соединение Т47 (55 мг, выход 40%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,90 (с, 1Н), 7,49 (м, 6Н), 4,54 (м, 1Н), 3,60 (м, 2Н), 2,92 (м, 2Н), 2,58 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,42 (м, 2Н), 2,20 (дт, J=2,6, 12,8 Гц, 1Н), 2,08 (м, 2Н), 1,72 (м, 1Н), 1,51 (с, 9Н), 1,46 (с, 3H), 1,30 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=511 (M+1).
Т48. Раствор Т47 (42 мг, 0,082 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота обрабатывали хлористым водородом (4N раствор в 1,4-диоксане, 0,40 мл, 1,60 ммоль). Смесь перемешивали в течение 16 ч и концентрировали до смолистого твердого вещества, которое растирали с Et2O, фильтровали и сушили в вакууме, получая соединение Т48 (37 мг, количественный выход) в виде грязнобелого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 10,21 (уш. с. 1Н), 10,13 (уш. с. 1Н), 8,84 (с, 1Н), 7,57 (м, 1Н), 7,48 (м, 5Н), 4,36 (м, 2Н), 3,41 (м, 2Н), 2,89 (м, 4Н), 2,59 (кд, J=6,6, 13,3 Гц, 1Н), 2,21 (т, J=12,6 Гц, 1Н), 2,07 (м, 1Н), 1,71 (м, 1Н), 1,46 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=411 (M+1).
Т49. Смесь Т48 (32 мг, 0,071 ммоль) и ацетата натрия (60 мг, 0,73 ммоль) в уксусном ангидриде (1 мл, 10,58 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 48 ч. Смесь концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 100% EtOAc) с получением соединения Т49 (11 мг, выход 34%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. Т49 представляет собой смесь амидных изомеров 1:1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ [8,91 (с), 8,88 (с), 1:1, 1Н], 7,50 (м, 6Н), [4,78 (дд, J=2,6, 18,6 Гц), 4,62 (дд, J=2,6, 18,6 Гц), 1:1, 1Н], 4,54 (м, 1Н), 3,79 (м, 1Н), 3,62 (м, 1Н), 2,91 (м, 2Н), 2,58 (м, 1Н), 2,46 (м, 2Н), [2,22 (с), 2,19 (с), 1: 1, 3H], 2,14 (м, 2Н), 1,73 (м, 1Н), 1,48 (с, 3H), [1,31 (д, J=6,7 Гц), 1,30 (д, J=6,7 Гц), 1:1, 3H]; m/z=453 (М+1).
Соединение 126. В сосуде под давлением смесь соединения 8 (5,00 г, 20,98 ммоль), 4фторбензальдегида (6,7 мл, 62,4 ммоль) и фторида калия на оксиде алюминия (5,5 ммоль/г, 7,6 г, 41,8 ммоль) в 2-пропаноле (42 мл) продували азотом и герметизировали. После нагрева при 60°C в течение 4 ч и перемешивания при комнатной температуре в течение ночи смесь фильтровали через слой Celite®. Фильтрат концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (100 мл) и EtOAc (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах), получая соединение 126 (6,28 г, выход 87%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=345 (М+1).
Соединение 127. Смесь соединения 126 (7,34 г, 21,31 ммоль), гидрохлорида 2-метил-4пиридинкарбоксимидамида (Bolli, et al., 2003) (5,50 г, 32,04 ммоль) и карбоната калия (7,4 г, 53,5 ммоль) в EtOH (43 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 48 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой Celite® и твердое вещество промывали EtOH (100 мл). Объединенный фильтрат и промывку концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (100 мл) и CHCl3 (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая необработанный дигидропиримидин (12,38 г) в виде ярко-желтого твердого вещества. m/z=462 (М+1).
Смесь неочищенного дигидропиримидина (12,38 г) и оксида марганца(IV) (88%, 9,26 г, 93,73 ммоль) в CH2Cl2 (100 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Смесь фильтровали через слой целита Celite®. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 20-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 127 (8,72 г, выход 89%) в виде смолистого светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=460 (M+1).
Соединение 128. Раствор соединения 127 (8,72 г, 18,98 ммоль) в МеОН (63 мл) обрабатывали водн. 3N раствором HCl (63 мл, 189 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи смесь концентрировали, охлаждали, подщелачивали концентрированным гидроксидом аммония до рН ~ 9-10 и затем экстрагировали CHCl3 (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 128 (8,57 г, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=416 (M+1).
Соединение 129. К перемешиваемому при 0°C (под сушильной трубкой) раствору соединения 128
- 106 043609 (все с последней стадии) в этилформиате (80 мл) по каплям добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 17,6 мл, 94,8 ммоль). После добавления ледяную баню удаляли и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученную оранжево-коричневую суспензию концентрировали и остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (150 мл) и EtOAc (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 129 (8,26 г, выход 98%) в виде оранжево-розового пенистого твердого вещества. m/z=444 (M+1).
Соединение 130. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 129 (8,26 г, 18,64 ммоль) и уксусной кислоты (10,7 мл, 186,9 ммоль) в EtOH (93 мл) добавляли гидрохлорид гидроксиламина (1,94 г, 27,92 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После концентрирования остаток распределяли между водн. 10% NH4OH (100 мл) и CHCl3 (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 130 (9,23 г, количественный выход) в виде коричневого пенистого твердого вещества. m/z=441 (M+1).
Соединение 131 (Т187). Смесь соединения 130 (все с последней стадии) и карбоната калия (5,5 г, 39,8 ммоль) в МеОН (79 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток распределяли между Et2O (50 мл) и водой (50 мл). Основный водный экстракт охлаждали, подкисляли водн. насыщ. KH2PO4 (150 мл), а затем экстрагировали EtOAc (2x100 мл). Объединенный органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 131 (Т187) (5,63 г, выход 68%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=441 (M+1); смесь изомеров; 1H ЯМР основного изомера (400 МГц, CDCl3) δ 8,64 (дд, J=5,2, 0,9 Гц, 1Н), 8,16 (с, 1Н), 8,12 (ддд, J=5,3, 1,7, 0,7 Гц, 1Н), 7,61 (м, 2Н), 7,20 (м, 2Н), 3,92 (дд, J=13,6, 5,6 Гц, 1Н), 3,59 (дд, J=13,6, 5,7 Гц, 1Н), 2,93 (м, 2Н), 2,68 (с, 3H), 2,60 (дк, J=12,8, 6,4 Гц, 1Н), 2,26 (т, J=13,7 Гц, 1Н), 2,07 (м, 1Н), 1,89 (тд, J=12,5, 2,6 Гц, 1Н), 1,68 (м, 1Н), 1,53 (с, 3H), 1,20 (д, J=6, 4 Гц, 3H).
Т50. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 131 (5,56 г, 12,62 ммоль) в дегазированном ДМФ (50 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (1,98 г, 6,92 ммоль) в дегазированном ДМФ (10 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (10,2 мл, 126,4 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (200 мл) и CHCl3 (200 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (200 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50-100% EtOAc в гексанах), получая частично очищенный продукт. Образец суспендировали в дегазированном EtOH (100 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем концентрировали досуха. Этот процесс был повторен дважды. В третий раз смесь концентрировали до 25 мл, охлаждали и фильтровали. Твердое вещество промывали холодным дегазированным EtOH и сушили в вакууме, получая соединение Т50 (3,25 г, выход 59%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,01 (с, 1Н), 8,68 (д, J=5,1 Гц, 1Н), 8,20 (с, 1Н), 8,15 (дд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,63 (м, 2Н), 7,22 (м, 2Н), 2,97 (м, 2Н), 2,71 (с, 3H), 2,63 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,16 (тдд, J=2,6, 5,8, 13,6 Гц, 1Н), 1,79 (м, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=439 (M+1).
Соединение 132. В герметизируемом флаконе смесь соединения 9 (2,61 г, 8,81 ммоль), 2-метил-4пиридинкарбоксимидамида гидрохлорида (1,80 г, 10,49 ммоль) и карбоната калия (2,9 г, 21,0 ммоль) в EtOH (9 мл) продували азотом, герметизировали и перемешивали при комнатной температуре в течение 5 дней. Смесь концентрировали. Остаток разбавляли EtOAc (150 мл) и водой (50 мл) и нагревали при 65°C до тех пор, пока все твердое вещество не окажется в растворе (15 мин). Слои разделяли. Органический экстракт промывали водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-5% МеОН в EtOAc), получая соединение 132 (2,00 г, выход 60%) в виде светложелтого твердого вещества. m/z=382 (M+1).
Соединение 133. В сосуде для микроволновой обработки смесь соединения 132 (1,00 г, 2,62 ммоль) и оксихлорида фосфора(V) (2,4 мл, 25,4 ммоль) в толуоле (10 мл) продували азотом. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 100°C в течение 1 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и затем осторожно выливали в перемешиваемый раствор NaHCO3 (11 г, 131 ммоль) в воде (100 мл). После перемешивания в течение 30 мин смесь экстрагировали EtOAc (2x100 мл). Объединенный органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая смесь кетона и кетала (1,14 г). Образец смешивали с водн. 3N HCl (8,7 мл, 26,1 ммоль) в МеОН (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали, охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH, а затем экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование
- 107 043609
75% EtOAc в гексанах), получая соединение 133 (0,81 г, выход 87%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=356 (М+1).
Соединение 134. В герметизируемом флаконе дегазировали азотом смесь соединения 133 (0,37 г, 1,04 ммоль), 2-фторфенилбороновой кислоты (0,22 г, 1,56 ммоль), фосфата калия (0,66 г, 3,11 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (0,12 г, 0,10 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл). Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение 16 ч. Смесь охлаждали и затем распределяли между водн. 1N раствором NaOH (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 134 (0,47 г, количественный выход) в виде светло-желтой маслянистой жидкости. m/z=416 (M+1).
Соединение 135. К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соединения 134 (все из последней стадии) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,97 мл, 5,17 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 135 (0,41 г, выход 89%) в виде желтой маслянистой жидкости. m/z=444 (M+1).
Соединение 136. К раствору соединения 135 (0,41 г, 0,92 ммоль) в EtOH (20 мл) добавляли уксусную кислоту (0,53 мл, 9,26 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (0,10 г, 1,44 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 136 (0,38 г, выход 93%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=441 (M+1).
Соединение 137. К раствору соединения 136 (0,34 г, 0,77 ммоль) в МеОН (20 мл) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,72 мл, 3,84 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 100% EtOAc), получая соединение 137 (0,24 г, выход 71%) в виде светложелтого пенистого твердого вещества. m/z=441 (M+1).
Т51. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 137 (0,24 г, 0,54 ммоль) в дегазированном ДМФ (8 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,077 г, 0,27 ммоль) в ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (0,44 мл, 5,44 ммоль).
Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т51 (0,13 г, выход 55%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,03 (с, 1Н), 8,67 (д, J=4,8 Гц, 1Н), 8,19 (уш. с, 1Н), 8,15 (дд, J=1,2, 4,2 Гц, 1Н), 7,52 (м, 1Н), 7,45 (дт, J=2,0, 7,6 Гц, 1Н), 7,35 (тт, J=1,2, 7,6, 1Н), 7,22 (шир. т, J=8,8 Гц, 1Н), 2,81 (м, 2Н), 2,70 (с, 3H), 2,62 (м, 1Н), 2,26 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,13 (м, 1Н), 1,82 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=439 (M+1).
Соединение 138. В сосуде под давлением смесь соединения 8 (2,50 г, 10,49 ммоль), 2,4дифторбензальдегида (1,72 мл, 15,72 ммоль) и фторида калия (40 мас.% на оксиде алюминия, 3,0 г, 20,65 ммоль) в 2-пропаноле (21 мл) продували азотом. Флакон запечатывали, нагревали до 60°C в течение 4 ч и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь фильтровали через слой Celite® и фильтрат концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. раствором KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растирали с гексаном (50 мл), фильтровали и сушили в вакууме, получая соединение 138 (1,93 г, выход 51%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=363 (M+1, 100%).
Соединение 139. Стадия 1. Смесь соединения 138 (2,22 г, 6,12 ммоль), 4-хинолинкарбоксимидамида гидрохлорида (1,91 г, 9,20 ммоль) и карбоната калия (2,5 г, 18,4 ммоль) в EtOH (61 мл) нагревали с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 48 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой Celite® и твердое вещество промывали EtOH (100 мл). Объединенный фильтрат и промывку концентрировали и остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая сырой дигидропиримидин (3,0 г) в виде ярко-желтого пенистого твердого вещества. m/z=516 (M+1).
Смесь неочищенного дигидропиримидина (3,0 г) и оксида марганца(IV) (88%, 3,0 г, 30,4 ммоль) в
- 108 043609
CH2C12 (60 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Смесь фильтровали через слой Celite® и фильтрат концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 139 (2,39 г, выход 76%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=514 (M+1).
Соединение 140. Раствор соединения 139 (2,39 г, 4,65 ммоль) в МеОН (47 мл) обрабатывали водн. 3N HCl (16 мл, 48 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи и концентрировали. Остаток охлаждали, подщелачивали концентрированным гидроксидом аммония до рН ~ 9-10 и затем экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 140 (2,38 г, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=470 (M+1).
Соединение 141. К перемешиваемому при 0°C (под сушильной трубкой) раствору соединения 140 (все с последней стадии) в этилформиате (20 мл) по каплям добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 2,6 мл, 13,9 ммоль). После добавления ледяную баню убирали. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 141 (2,69 г, количественный выход) в виде темно-желтой маслянистой жидкости. m/z=498 (M+1).
Соединение 142. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 141 (все из последней стадии) и уксусной кислоты (2,7 мл, 47,2 ммоль) в EtOH (46 мл) добавляли гидрохлорид гидроксиламина (0,49 г, 7,05 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток был аккуратно распределен между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 142 (2,21 г, выход 96%) в виде оранжево-темно-желтого пенистого твердого вещества. m/z=495 (M+1).
Соединение 143. Смесь соединения 142 (2,21 г, 4,47 ммоль) и карбоната калия (3,1 г, 22,4 ммоль) в МеОН (45 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 143 (1,54 г, выход 69%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=495 (M+1).
Т52. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 143 (1,54 г, 3,11 ммоль) в дегазированном ДМФ (10 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,49 г, 1,71 ммоль) в дегазированном ДМФ (2 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (2,5 мл, 31,0 ммоль). Ледяную баню убирали. Образец нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах) с получением частично очищенного продукта. Образец растворяли в CH2Cl2 (20 мл). Добавляли дегазированный EtOH (20 мл). Смесь концентрировали для удаления большей части CH2Cl2 и охлаждали. Осадок собирали фильтрованием и сушили в вакууме, получая соединение Т52 (0,73 г, выход 48%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,93 (с, 1Н), 8,68 (дд, J=0,8, 8,6 Гц, 1Н), 8,22 (дд, J=0,8, 8,6 Гц, 1Н), 8,01 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,64 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,49 (дт, J=6,3, 8,4 Гц, 1Н), 7,08 (м, 1Н), 7,00 (ддд, J=2,5, 8,7, 10,2 Гц, 1Н), 2,87 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,7 Гц, 1Н), 2,19 (м, 1Н), 1,87 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=493 (M+1).
Соединение 144. Соединение 88 (1,08 г, 3,14 ммоль), гидрохлорид 2-хлорпиридин-4карбоксимидамида (900 мг, 4,69 ммоль) и K2CO3 (1,30 г, 9,42 ммоль) в EtOH (15 мл) нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 120°C в течение 3 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли МТВЕ. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая продукт (914 мг, выход 61%) в виде желтого пенистого твердого вещества. Продукт (903 мг, 1,88 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (18 мл). Добавляли DDQ (510 мг, 2,25 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли МТВЕ и водн. насыщ. NaHCO3 и смесь перемешивали в течение 5 мин. Продукт экстрагировали МТВЕ. Объединенный органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3 и водой, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-20% EtOAc в гексанах), получая соединение 144 (832 г, выход 92%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=480 (M+1).
Соединение 145. Смесь соединения 144 (300 мг, 0,63 ммоль), циклопропилбороновой кислоты (90 мг, 1,05 ммоль), фосфата калия (660 мг, 3,11 ммоль), трициклогексилфосфина (54 мг, 0,19 ммоль), ацетата палладия (24 мг, 0,11 ммоль), толуола (4 мл) и воды (0,2 мл) во флаконе продували азотом в течение 5
- 109 043609 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 130°C в течение 4 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 030% EtOAc в гексанах), получая соединение 145 (254 мг, выход 84%) в виде белого твердого вещества. m/z=486 (M+1).
Соединение 146. Соединение 145 (306 мг, 0,63 ммоль) растворяли в ТГФ (2,1 мл) и МеОН (2,1 мл). Водн. 3N HCl (2,1 мл, 6,3 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После концентрирования остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 до рН ~8 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали, получая соединение 146 (296 мг) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=442 (M+1).
Соединение 147. Соединение 146 (все вышеуказанное) растворяли в этилформиате (1,6 мл) и охлаждали до 0°C.
Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 2,3 мл, 9,96 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,7 мл, 10,2 ммоль), EtOH (6,6 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (71 мг, 1,02 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение ночи и концентрировали. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Водную фазу обрабатывали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 147 (242 мг, выход 82% из соединения 145) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Соединение 148. Соединение 147 (240 мг, 0,52 ммоль) растворяли в МеОН (2,6 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,18 мл, 0,78 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 148 (224 мг, выход 93%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Т53. Соединение 148 (224 мг, 0,48 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (72 мг, 0,25 ммоль) в ДМФ (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1,5 ч. Добавляли пиридин (120 мкл, 1,49 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 2,5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водой, водн. насыщ. NaHCO3 и водн. 10% Na2SO3. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая частично очищенный продукт, который снова очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-25% ацетона в гексанах) с получением соединения Т53 (167 мг, выход 75%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,03 (с, 1Н), 8,61 (д, J=4,8 Гц, 1Н), 8,20 (дд, J=0,9, 1,7 Гц, 1Н), 8,07 (дд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,51 (м, 1Н), 7,45 (дт, J=2,0, 7,2 Гц, 1Н), 7,34 (шир. т, J=7,6 Гц, 1Н), 7,21 (шир. т, J=9,2 Гц, 1Н), 2,82 (м, 2Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,24 (м, 2Н), 2,12 (м, 1Н), 1,80 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,12 (м, 2Н), 1,04 (м, 2Н); m/z=465 (M+1).
Соединение 149. Смесь соединения 88 (3,50 г, 10,16 ммоль), тиомочевины (850 мг, 11,18 ммоль) и трет-бутоксида калия (1,15 г, 10,27 ммоль) в EtOH (14 мл) нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 120°C в течение 1 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли МТВЕ. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 149 (3,25 г, выход 79%) в виде белой пены. m/z=403 (M+1).
Соединение 150. К раствору соединения 149 (5,40 г, 13,42 ммоль) в CH2Cl2 (135 мл) добавляли DDQ (4,70 г, 20,70 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 мин смесь разбавляли МТВЕ и промывали водн. насыщ. NaHCO3. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 150 (3,90 г, выход 72%) в виде белой пены. m/z=799 (М+1).
Соединение 151. К раствору соединения 150 (3,90 г, 4,88 ммоль) в ТГФ (12 мл) и EtOH (48 мл) последовательно добавляли иодметан (3,04 мл, 48,85 ммоль) и боргидрид натрия (1,50 г, 39,65 ммоль) при 0°C. После перемешивания смеси при комнатной температуре в течение 1 ч добавляли дополнительное количество боргидрида натрия (0,50 г, 13,21 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 45 мин и затем распределяли между EtOAc и водн. 10% Na2SO3. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 151 (3,50 г, выход 86%) в виде белой пены. m/z=415 (M+1).
Соединение 152а. Смесь соединения 151 (414 мг, 1,00 ммоль), тиофен-2-карбоксилата меди(Т) (570 мг, 3,00 ммоль), 2-(трифторметил)пиридин-4-бороновой кислоты (381 мг, 2,00 ммоль) и ТГФ (10 мл) в
- 110 043609 сосуде под давлением продували азотом в течение 5 мин. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (58 мг, 0,05 ммоль) и продувание азотом продолжали в течение еще 2 мин. Бутылку герметично закрывали и нагревали до 100°C в течение 14 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водн. 1N NaOH и водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 152а (273 мг, выход 53%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=514 (M+1).
Соединение 153а. Соединение 152а (271 мг, 0,53 ммоль) растворяли в ТГФ (1,75 мл) и МеОН (1,75 мл). Водн. Добавляли 3N HCl (1,75 мл, 52,5 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После концентрации добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали, получая соединение 153а (248 мг, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=470 (M+1).
Соединение 154а. Соединение 153а (246 мг, 0,52 ммоль) растворяли в этилформиате (1,3 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,8 мл, 7,79 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,3 мл, 7,8 ммоль), EtOH (5,2 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (55 мг, 0,79 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение ночи и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 154а (140 мг, выход 54%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=495 (M+1).
Соединение 155а. Соединение 154а (137 мг, 0,28 ммоль) растворяли в МеОН (1,4 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 96 мкл, 0,42 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 155а (117 мг, выход 85%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=495 (M+1).
Т54. Соединение 155а (117 мг, 0,24 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,8 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (34 мг, 0,12 ммоль) в ДМФ (0,4 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (58 мкл, 0,72 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 2,5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-30% ацетона в гексанах), получая соединение Т54 (107 мг, выход 91%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,97 (с, 1Н), 8,92 (д, J=5,1 Гц, 1Н), 8,70 (дд, J=0,8, 1,2 Гц, 1Н), 8,57 (дд, J=1,5, 5,1 Гц, 1Н), 7,54 (м, 1Н), 7,45 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,36 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 2,85 (м, 2Н), 2,63 (тд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,27 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,16 (м, 1Н), 1,81 (дк, J=7,1, 13,1 Гц, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=493 (M+1).
Соединение 152b. Смесь соединения 151 (414,5 мг, 1,00 ммоль), тиофен-2-карбоксилата меди(I) (570 мг, 2,99 ммоль), 3-пиколин-4-бороновой кислоты (274 мг, 2,00 ммоль) и ТГФ (10 мл) в сосуде под давлением продували азот в течение 5 мин. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (58 мг, 0,05 ммоль) и продувание азотом продолжали в течение еще 2 мин. Бутылку герметично закрывали и нагревали до 100°C в течение 14 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водн. 1N NaOH и водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 152b (50 мг, выход 11%) в виде белой пены. m/z=460 (M+1). Исходное соединение 151 (340 мг, выход 82%) также восстанавливали после флэш-хроматографии.
Соединение 153b. К раствору соединения 152b (115 мг, 0,25 ммоль) в МеОН (0,8 мл) и ТГФ (0,8 мл) добавляли водн. 3N HCl (0,8 мл, 2,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 153b (100 мг, выход 96%) в виде белой пены. m/z=416 (M+1).
Соединение 154b. Соединение 153b (100 мг, 0,24 ммоль) растворяли в этилформиате (0,6 мл, 7,46 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,823 мл, 3,56 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,6 мл, 3,6 ммоль) для доведения рН реакционной смеси до ~ 2. Последовательно добавляли EtOH (4 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (27 мг, 0,39 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. NaHCO3. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток
- 111 043609 очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в гексанах), получая соединение 154b (54 мг, выход 51%) в виде белой пены. m/z=441 (M+1).
Соединение 155b. (T55) К раствору соединения 154b (54 мг, 0,12 ммоль) в МеОН (0,6 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,07 мл, 0,30 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч, охлаждали до 0°C, а затем нейтрализовали добавлением водн. 10% NaH2PO4. МеОН удаляли выпариванием. Остаток распределяли между EtOAc и водой. Органическую фазу отделяли, а водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 040% ацетона в гексанах), получая соединение 155b (24 мг, выход 44%) в виде бледно-желтой пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,57 (м, 2Н), 7,87 (м, 1Н), 7,47 (м, 2Н), 7,30 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,20 (м, 1Н), 3,89 (дд, J=5,7, 13,8 Гц, 1Н), 3,47 (дд, J=5,7, 13,7 Гц, 1Н), 2,80 (м, 2Н), 2,63 (с, 3H), 2,60 (м, 1Н), 2,26 (т, J=13,7 Гц, 1Н), 2,04 (м, 1Н), 1,91 (дт, J=2,7, 12,5 Гц, 1Н), 1,70 (дк, J=7,6, 13,1 Гц, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,20 (д, J=6,5 Гц, 3H); m/z=441 (M+1).
Т56. Соединение 155b (23 мг, 0,052 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (0,6 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (7,5 мг, 0,026 ммоль) в ДМФ (0,3 мл). После перемешивания реакционной смеси при 0°C в течение 1 ч добавляли пиридин (0,012 мл, 0,15 ммоль). Реакцию нагревали при 55°C в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2 (10 мл). Смесь промывали водой (4x10 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом (10 мл). Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% ацетона в гексанах), получая соединение Т56 (14 мг, выход 61%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,90 (с, 1Н), 8,60 (м, 2Н), 7,88 (д, J=5,1 Гц, 1Н), 7,50 (м, 1Н), 7,43 (дт, J=1,8, 7,4 Гц, 1Н), 7,32 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,21 (м, 1Н), 2,83 (м, 2Н), 2,65 (с, 3H), 2,61 (м, 1Н), 2,27 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,14 (м, 1Н), 1,81 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=439 (M+1).
Соединение 152с. Смесь соединения 151 (275 мг, 0,664 ммоль), гидрата 3-фторпиридин-4бороновой кислоты (214,4 мг, 1,349 ммоль), меди(I)-тиофен-2-карбоксилата (382,2 мг, 2,004 ммоля), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (39,3 мг, 0,034 ммоль) и ТГФ (5 мл) продували N2 в течение 3 мин. Пробирку герметично закрывали и нагревали до 100°C в течение 17 ч. Полученную смесь разбавляли EtOAc (10 мл), фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc (75 мл) и CH2Cl2 (25 мл). Объединенный элюент концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-85% EtOAc в гексанах), получая соединение 152с (237 мг, чистота 70%) в виде грязнобелого твердого вещества. m/z=464 (M+1).
Соединение 153с. Суспензию неочищенного соединения 152с (237 мг), водн. 3N HCl (4,8 мл, 14,4 ммоль), МеОН (4,8 мл) и ТГФ (2,4 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Смесь разбавляли насыщенным NaHCO3 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (200 мл, затем 25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (25 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-75% EtOAc в гексанах), получая соединение 153с (175 мг, выход 63% из 151) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=420 (М+1).
Соединение 154с. Раствор метоксида натрия (25 мас.% в МеОН, 1 мл, 4,37 ммоль) добавляли к раствору соединения 153с (175 мг, 0,417 ммоль) в этилформиате (4 мл, 49,73 ммоль) с температурой 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 15 мин, нагревали до комнатной температуры в течение дополнительных 1,5 ч. Смесь охлаждали до 0°C; подкисляли водн. 6N HCl (0,73 мл, 4,38 ммоль); добавляли гидрохлорид гидроксиламина (47,3 мг, 0,681 ммоль) и EtOH (10 мл) и реакционную смесь нагревали до 55°C в течение 20 ч. Смесь концентрировали до 4 мл; разбавляли EtOAc (100 мл); промывали водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл) и солевым раствором (25 мл); сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-75% EtOAc в гексанах), получая соединение 154с (168,5 мг, выход 91%) в виде твердого вещества белой пены. m/z=445 (M+1).
Соединение 155с. Раствор метоксида натрия (25% в МеОН, 0,13 мл, 0,57 ммоль) добавляли к смеси соединения 154с (168 мг, 0,378 ммоль) в МеОН (1,9 мл) комнатной температуры. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,25 ч, разбавляли водн. 10% NaH2PO4 (10 мл) и экстрагировали МТВЕ (75 мл) и EtOAc (25 мл). Объединенные органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, элюирование 0-75% EtOAc в гексанах), получая соединение 155с (150 мг, выход 89%) в виде твердого вещества белой пены. m/z=445 (M+1).
Т57. Раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (46,9 мг, 0,164 ммоль) в ДМФ (1,4 мл) добавляли к раствору соединения 155с (144,5 мг, 0,325 ммоль) в ДМФ (3,6 мл) при температуре 0°C. Через 1,5 ч добавляли пиридин (0,08 мл, 0,99 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 55°C в течение 2 ч. Смесь разбавляли EtOAc (100 мл); промывали водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл), водн. 10% Na2SO3 (10 мл) и солевым раствором (10 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали, концентрировали и подвер- 112 043609 гали азеотропной перегонке с толуолом. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение Т57 (98,2 мг, выход 68%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,95 (с, 1Н), 8,65 (д, J=2,9 Гц, 1Н), 8,56 (д, J=4,9 Гц, 1Н), 8,06 (дд, J=5,0, 6,6 Гц, 1Н), 7,51 (м, 1Н), 7,44 (дт, J=2,0, 7,6 Гц, 1Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,21 (ддд, J=1,0, 8,4, 9,6 Гц, 1Н), 2,84 (м, 2Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,13 (м, 1Н), 1,81 (м, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=443 (М+1).
Соединение 152d. Смесь соединения 151 (419,4 мг, 1,012 ммоль), (3-метил-5-пиридил)бороновой кислоты (281 мг, 2,052 ммоль), меди(I)-тиофен-2-карбоксилата (583 мг, 3,057 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (87,9 мг, 0,0761 ммоль) и ТГФ (10 мл) продували азотом в течение 3 мин. Пробирку герметично закрывали и нагревали до 100°C в течение 17 ч. После охлаждения до комнатной температуры полученную смесь фильтровали через слой Celite®, элюировали EtOAc (40 мл), CH2Cl2 (40 мл) и ацетоном (40 мл); и концентрировали. Полученный остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-75% EtOAc в гексанах), получая соединение 152d (131,3 мг, выход 28%) в виде белого твердого вещества. m/z=460 (M+1).
Соединение 153d. Суспензия соединения 152d (197,5 мг, 0,430), водн. 3N HCl (5 мл, 15 ммоль), МеОН (5 мл) и ТГФ (2,5 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Смесь разбавляли водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (200 мл, затем 25 мл). Объединенные органические фракции промывали солевым раствором (25 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 153d (165 мг, выход 92%) в виде белого твердого вещества. m/z=416 (M+1).
Соединение 154d. Раствор метоксида натрия (25 мас.% в МеОН, 0,91 мл, 3,98 ммоль) добавляли к раствору соединения 153d (165 мг, 0,395 ммоль) в этилформиате (6 мл, 74,60 ммоль) с температурой 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 15 мин, нагревали до комнатной температуры в течение дополнительных 2 ч. Смесь охлаждали до 0°C; подкисляли водн. 6N HCl (0,67 мл, 4,02 ммоль); добавляли гидрохлорид гидроксиламина (46,4 мг, 0,668 ммоль) и EtOH (10 мл) и реакционную смесь нагревали до 55°C в течение 3 ч. Смесь разбавляли водн. 10% NaH2PO4 (10 мл) и экстрагировали МТВЕ (75 мл) и EtOAc (25 мл). Объединенные органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах), получая соединение 154d (146,4 мг, выход 84%) в виде белого твердого вещества. m/z=441 (M+1).
Соединение 155d. Раствор метоксида натрия (25 мас.% в МеОН, 0,12 мл, 0,53 ммоль) добавляли к смеси соединения 154d (146 мг, 0,332 ммоль) в МеОН (1,7 мл) комнатной температуры. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч, разбавляли водн. 10% NaH2PO4 (25 мл) и экстрагировали МТВЕ (75 мл) и EtOAc (25 мл). Объединенные органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-80% EtOAc в гексанах), получая соединение 155d (85,9 мг, выход 59%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=441 (M+1).
Т58. Раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (27,9 мг, 0,0976 ммоль) в ДМФ (1,0 мл) добавляли к раствору соединения 155d (85,9 мг, 0,195 ммоль) в ДМФ (2,0 мл) температуры 0°C. Через 2 ч добавляли пиридин (0,05 мл, 0,62 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 55°C в течение 2 ч. Смесь разбавляли EtOAc (125 мл); промывали водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл), водн. 10% Na2SO3 (25 мл) и солевым раствором (25 мл); сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-80% EtOAc в гексанах), получая Т58 (64,7 мг, выход 76%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,49 (д, J=2,0 Гц, 1Н), 9,02 (с, 1Н), 8,56 (д, J=1,6 Гц, 1Н), 8,53 (м, 1Н), 7,51 (м, 1Н), 7,45 (дт, J=1,2, 7,6 Гц, 1Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,21 (ддд, J=1,0, 8,4, 9,5 Гц, 1Н), 2,80 (м, 2Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,47 (с, 3H), 2,26 (дт, J=2,7, 12,7 Гц, 1Н), 2,12 (м, 1Н), 1,79 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=439 (M+1).
Соединение 152е. Смесь соединения 151 (419,4 мг, 1,012 ммоль), 3-хинолинбороновой кислоты (343,6 мг, 1,986 ммоль), меди(I)-тиофен-2-карбоксилата (571,8 мг, 2,998 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (87,9 мг, 0,0761 ммоль) и ТГФ (10 мл) продували N2 в течение 2 мин. Пробирку герметично закрывали и нагревали до 100°C в течение 17 ч. После охлаждения до комнатной температуры полученную смесь фильтровали через слой Celite®; элюировали EtOAc (25 мл), CH2Cl2 (25 мл) и ацетоном (25 мл); и концентрировали. Полученный материал разбавляли EtOAc (150 мл) и промывали водн. насыщ. NaHCO3 (2x30 мл) и солевым раствором (25 мл); сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах), получая соединение 152е (204,4 мг, выход 41%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Соединение 153е. Суспензию соединения 152е (204,4 мг, 0,412 ммоль), водн. 3N HCl (5 мл, 15,0 ммоль), МеОН (5 мл) и ТГФ (2,5 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь разбавляли водн. насыщ. NaHCO3 (30 мл) и экстрагировали EtOAc (150 мл, затем 50 мл). Объединенные органические фракции промывали солевым раствором (25 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и кон- 113 043609 центрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60%
EtOAc в гексанах), получая соединение 153е (182,1 мг, выход 98%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=452 (M+1).
Соединение 154е. Раствор метоксида натрия (25 мас.% в МеОН, 0,92 мл, 4,02 ммоль) добавляли к раствору соединения 153е (182,1 мг, 0,401 ммоль) в этилформиате (6,1 мл, 75,84 ммоль) с температурой 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 5 мин, нагревали до комнатной температуры в течение дополнительных 1 ч. Смесь охлаждали до 0°C; подкисляли водн. 6N HCl (0,67 мл, 4,02 ммоль); добавляли гидрохлорид гидроксиламина (44,8 мг, 0,645 ммоль) и EtOH (10,2 мл) и реакционную смесь нагревали до 55°C в течение ночи. Смесь разбавляли водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (75 мл, затем 25 мл). Объединенные органические фракции промывали солевым раствором (25 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах), получая соединение 154е (163,2 мг, выход 85%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=477 (M+1).
Соединение 155е. Раствор метоксида натрия (25 мас.% в МеОН, 0,20 мл, 0,88 ммоль) добавляли к смеси соединения 154е (163 мг, 0,342 ммоль) в МеОН (6,8 мл) комнатной температуры. Смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч, разбавляли водн. 10% NaH2PO4 (30 мл) и экстрагировали МТВЕ (100 мл) и EtOAc (50 мл). Объединенные органические фракции сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-75% EtOAc в гексанах), получая соединение 155е (126,3 мг, выход 77%) в виде белого твердого вещества. m/z=477 (M+1).
Т59. Раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (14,8 мг, 0,0518 ммоль) в ДМФ (1,0 мл) добавляли к раствору соединения 155е (48,8 мг, 0,102 ммоль) в ДМФ (3,0 мл) температуры 0°C. Через 1 ч добавляли пиридин (0,04 мл, 0,50 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 55°C в течение 2 ч. Смесь разбавляли EtOAc (125 мл); промывали водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл), водн. 10% Na2SO3 (25 мл) и солевым раствором (25 мл); сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-75% EtOAc в гексанах), получая Т59 (34,3 мг, выход 71%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,99 (д, J=2,2 Гц, 1Н), 9,24 (д, J=1,6 Гц, 1Н), 9,09 (с, 1Н), 8,19 (д, J=8,5 Гц, 1H), 8,02 (дд, J=1,4, 8,2 Гц, 1H), 7,79 (ддд, J=1,5, 6,9, 8,4 Гц, 1Н), 7,62 (ддд, J=1,2, 6,9, 8,1 Гц, 1Н), 7,52 (м, 2H), 7,36 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 2,83 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,29 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,14 (м, 1Н), 1,82 (м, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=475,2 (M+1).
Соединение 152f. Смесь соединения 151 (418,5 мг, 1,010 ммоль), уинолон-6-бороновой кислоты (344,5 мг, 1,992 ммоль), меди(I)-тиофен-2-карбоксилата (574,7 мг, 3,014 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (86,9 мг, 0,0752 ммоль) и ТГФ (10 мл) продували азотом в течение 3 мин. Пробирку герметично закрывали и нагревали до 100°C в течение 21 ч. После охлаждения до комнатной температуры полученную смесь фильтровали через слой Celite®; элюировали EtOAc (40 мл), CH2Cl2 (40 мл) и ацетоном (40 мл); и концентрировали. Полученный материал разбавляли EtOAc (100 мл) и промывали водн. насыщ. NaHCO3 (2x25 мл); сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-80% EtOAc в гексанах), получая соединение 152f (155,6 мг, выход 31%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=496,2 (M+1).
Соединение 153f. Суспензия соединения 152f (156 мг, 0,314 ммоль), водн. 3N HCl (5 мл, 15,0 ммоль), МеОН (5 мл) и ТГФ (2,5 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь разбавляли EtOAc (100 мл); промывали водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл) и солевым раствором (25 мл); сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах), получая соединение 153f (134,4 мг, выход 95%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=452,2 (M+1).
Соединение 154f. Раствор метоксида натрия (25 мас.% в МеОН, 0,68 мл, 2,97 ммоль) добавляли к раствору соединения 153f (134,4 мг, 0,296 ммоль) в этилформиате (6,5 мл, 80,82 ммоль) температуры 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 5 мин, нагревали до комнатной температуры в течение дополнительных 2 ч. Смесь охлаждали до 0°C; подкисляли водн. 6N HCl (0,50 мл, 3,0 ммоль); добавляли гидрохлорид гидроксиламина (30,9 мг, 0,445 ммоль) и EtOH (7,5 мл) и реакционную смесь нагревали до 55°C в течение ночи. Смесь разбавляли водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и экстрагировали EtOAc (75 мл, затем 25 мл). Объединенные органические фракции промывали солевым раствором (25 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали с помощью флэшхроматографии (силикагель, элюирование 0-75% EtOAc в гексанах), получая соединение 154f (122 мг, выход 86%) в виде твердого вещества белой пены. m/z=477,2 (M+1).
Соединение 155f. Раствор метоксида натрия (25 мас.% в МеОН, 0,15 мл, 0,66 ммоль) добавляли к смеси соединения 154f (122 мг, 0,256 ммоль) в МеОН (5,1 мл) комнатной температуры. Смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч, разбавляли водн. 10% NaH2PO4 (50 мл) и экстрагировали МТВЕ (100 мл) и EtOAc (25 мл). Объединенные органические фракции промывали солевым раствором (25 мл), сушили
- 114 043609 над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-80% EtOAc в гексанах), получая соединение 155f (51,4 мг, выход 42%) в виде белого твердого вещества. m/z=477,2 (М+1).
Т60. Раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (15,8 мг, 0,0553 ммоль) в ДМФ (1,0 мл) добавляли к раствору соединения 155f (51,4 мг, 0,108 ммоль) в ДМФ (3,0 мл) температуры 0°C. Через 2 ч добавляли пиридин (0,05 мл, 0,62 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 55°C в течение 2 ч. Смесь разбавляли EtOAc (125 мл); промывали водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл), водн. 10% Na2SO3 (25 мл), водой (25 мл) и солевым раствором (25 мл); сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая Т60 (34,8 мг, выход 68%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. А ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,13 (с, 1Н), 9,01 (д, J=1,9 Гц, 1Н), 8,98 (дд, J=1,8, 4,3 Гц, 1Н), 8,87 (дд, J=2,0, 8,9 Гц, 1Н), 8,36 (м, 1Н), 8,23 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 7,50 (м, 3H), 7,35 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 2,82 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,29 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,13 (м, 1Н), 1,81 (м, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=475,2 (M+1).
Соединение 152g. Смесь соединения 151 (418,6 мг, 1,010 ммоль), N-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)уинолон-2-ил)ацетамида (524,6 мг, 2,001 ммоль), меди(I)-тиофен-2-карбоксилата (575,6 мг, 3,018 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (89,5 мг, 0,0774 ммоль) и ТГФ (10 мл) продували азотом в течение 3 мин. Пробирку герметично закрывали и нагревали до 100°C в течение 18 ч.
После охлаждения до комнатной температуры полученную смесь фильтровали через слой Celite®; элюировали EtOAc (25 мл), CH2Cl2 (25 мл) и ацетоном (25 мл); и концентрировали. Полученный материал разбавляли EtOAc (150 мл) и промывали водн. насыщ. NaHCO3 (2x35 мл); сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах), получая соединение 152g (74,9 мг, 15% выход) в виде стеклообразного твердого вещества. m/z=503,2 (M+1).
Соединение 153g. Суспензию соединения 152g (74,9 мг, 0,149 ммоль), водн. 3N HCl (2,4 мл, 7,2 ммоль), МеОН (2,4 мл) и ТГФ (1,2 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, концентрировали и загружали непосредственно на диоксид кремния и очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексане), получая соединение 153g (40,3 мг, выход 59%) в виде белого твердого вещества. m/z=459,2 (M+1).
Соединение 154g. Раствор метоксида натрия (25 мас.% в МеОН, 0,20 мл, 0,87 ммоль) добавляли к раствору соединения 153g (40,3 мг, 0,0879 ммоль) в этилформиате (4 мл, 49,73 ммоль) температуры 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 5 мин, нагревали до комнатной температуры в течение дополнительных 3 ч. Смесь охлаждали до 0°C; подкисляли водн. 6N HCl (0,15 мл, 0,90 ммоль); добавляли гидрохлорид гидроксиламина (9,4 мг, 0,135 ммоль) и EtOH (2,3 мл) и реакционную смесь нагревали до 55°C в течение ночи. Смесь разбавляли водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические фракции промывали солевым раствором (25 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 154g (32,7 мг, выход 77%) в виде белого твердого вещества. m/z=484,2 (M+1).
Соединение 155g. Раствор метоксида натрия (25 мас.% в МеОН, 0,04 мл, 0,18 ммоль) добавляли к смеси соединения 154g (32,7 мг, 0,0676 ммоль) в МеОН (1,4 мл) комнатной температуры. Смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч, разбавляли водн. 10% NaH2PO4 (10 мл) и экстрагировали МТВЕ (50 мл) и EtOAc (25 мл). Объединенные органические фракции промывали солевым раствором (10 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 155g (34,7 мг, количественный выход), которое использовали как есть в последующей реакции.
Т61. Раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (4,5 мг, 0,016 ммоль) в ДМФ (0,6 мл) добавляли к раствору соединения 155g (15,1 мг, 0,0312 ммоль) в ДМФ (1,0 мл) температуры 0°C. Через 2 ч добавляли пиридин (15 мкл, 0,19 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 55°C в течение 2 ч. Смесь разбавляли EtOAc (75 мл); промывали водн. насыщ. NaHCO3 (10 мл), водн. 10% Na2SO3 (10 мл) и солевым раствором (10 мл); сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая Т61 (9,1 мг, выход 61%) в виде белого твердого вещества. % ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,16 (уш. с, 1Н), 9,00 (с, 1Н), 8,42 (д, J=5,2 Гц, 1Н), 8,35 (уш. с, 1Н), 8,08 (дд, J=1,5, 5,2 Гц, 1Н), 7,48 (м, 2Н), 7,32 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,19 (ддд, J=1,0, 8,4, 9,6 Гц, 1Н), 2,82 (м, 2Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,25 (с, 3H), 2,25 (м, 1Н), 2,12 (м, 1Н), 1,80 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=482,2 (M+1).
Соединение 152h. Смесь соединения 151 (424,2 мг, 1,023 ммоль), 8-хинолинилбороновой кислоты (230,5 мг, 1,333 ммоль), меди(I)-тиофен-2-карбоксилαта (574 мг, 3,01 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (86,6 мг, 0,0749 ммоль) и ТГФ (10 мл) продували азотом в течение 5 мин. Пробирку герметично закрывали и нагревали до 100°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры полученную смесь фильтровали через слой Celite®, элюировали EtOAc (40 мл),
- 115 043609
CH2C12 (40 мл) и ацетоном (40 мл); и концентрировали. Полученный остаток разбавляли EtOAc (100 мл) и промывали водн. насыщ. NaHCO3 (2x25 мл); сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали.
Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 152h (75,5 мг, выход 15%) в виде белого твердого вещества. m/z=496,2 (M+1).
Соединение 153h. Суспензию соединения 152h (75,5 мг, 0,152 ммоль), водн. 3N HCl (2 мл, 6 ммоль), МеОН (2 мл) и ТГФ (1 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь разбавляли водн. насыщ. NaHCO3 (10 мл) и экстрагировали EtOAc (50 мл, затем 20 мл). Объединенные органические фракции промывали солевым раствором (10 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученное необработанное соединение 153 ч (66,6 мг) использовали без дальнейшей очистки.
Соединение 154h. Раствор метоксида натрия (25 мас.% в МеОН, 0,34 мл, 1,49 ммоль) добавляли к раствору соединения 153h (66,6 мг, < 0,147 ммоль) в этилформиате (2,2 мл, 27,35 ммоль) температуры 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 5 мин, нагревали до комнатной температуры в течение дополнительных 3 ч. Смесь охлаждали до 0°C; подкисляли водн. 6N HCl (0,25 мл, 1,5 ммоль); добавляли гидрохлорид гидроксиламина (18,3 мг, 0,263 ммоль) и EtOH (3,7 мл) и реакционную смесь нагревали до 55°C в течение ночи. Смесь разбавляли водн. 10% NaH2PO4 (10 мл) и экстрагировали МТВЕ (75 мл) и EtOAc (25 мл). Объединенные органические фракции сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 154h (57,2 мг, 79% выход из соединения 152h) в виде белого твердого вещества. m/z=477,2 (M+1).
Соединение 155h. Раствор метоксида натрия (25 мас.% в МеОН, 0,05 мл, 0,22 ммоль) добавляли к смеси соединения 154h (57,2 мг, 0,120 ммоль) в МеОН (2 мл) комнатной температуры. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, разбавляли EtOAc (100 мл), промывали водн. 10% NaH2PO4 (25 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 155h (48,3 мг, выход 84%) в виде стеклообразного твердого вещества. m/z=477,2 (M+1).
Т62. Раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (14,5 мг, 0,0507 ммоль) в ДМФ (1,0 мл) добавляли к раствору соединения 155h (48,3 мг, 0,101 ммоль) в ДМФ (3,0 мл) температуры 0°C. Через 1 ч добавляли пиридин (0,05 мл, 0,62 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 55°C в течение 3 ч. Смесь разбавляли EtOAc (100 мл); промывали водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл), водн. 10% Na2SO3 (25 мл) и солевым раствором (25 мл); сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая Т62 (31,5 мг, выход 65%) в виде желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 10,17 (дд, J=0,8, 1,2 Гц, 1Н), 8,98 (с, 1Н), 8,58 (д, J=5,7 Гц, 1Н), 8,30 (дд, J=1,2, 7,2 Гц, 1Н), 7,97 (д, J=8,0 Гц, 1Н), 7,84 (дд, J=7,2, 8,0 Гц, 1Н), 7,74 (дд, J=0,8, 5,5 Гц, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,32 (дт, J=1,1, 7,6 Гц, 1Н), 7,21 (м, 1Н), 2,88 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,8, 13,5 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,8, 12,9 Гц, 1Н), 2,16 (м, 1Н), 1,87 (м, 1Н), 1,62 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=475,2 (M+1).
Соединение 157. Смесь соединения 156 (500 мг, 2,56 ммоль), бис(пинаколато)диборона (712 мг, 2,80 ммоль), ацетата калия (626 мг, 6,38 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(П) (98 мг, 0,013 ммоль) и 1,4-диоксана (6 мл) во флаконе продували N2 в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали до 125°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc и водой. Органическую фазу фильтрата отделяли, промывали водн. насыщ. NaHCO3, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% ацетона в гексанах), получая соединение 157 (475 мг, выход 64%) в виде белого твердого вещества. m/z=206 (M-C6H9).
Соединение 158. Смесь соединения 151 (231 мг, 0,56 ммоль), тиофен-2-карбоксилата меди(Т) (320 мг, 1,68 ммоль), соединения 157 (200 мг, 0,70 ммоль) и ТГФ (5 мл) в сосуде под давлением продували N2 в течение 5 мин. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (32 мг, 0,028 ммоль). Продувание N2 продолжали в течение еще 2 мин. Бутылку герметично закрывали и нагревали при 100°C в течение 14 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водн. 1N NaOH и водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 158 (65 мг, выход 22%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=528 (M+1).
Соединение 159. Соединение 158 (64 мг, 0,12 ммоль) растворяли в МеОН (0,8 мл). Водн. Добавляли 3N HCl (0,4 мл, 1,2 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. После концентрации добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали, получая соединение 159 (60 мг, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=484 (M+1).
Соединение 160. Соединение 159 (57 мг, 0,12 ммоль) растворяли в этилформиате (0,28 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,41 мл, 1,77 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N
- 116 043609
HCl (0,3 мл, 1,8 ммоль), EtOH (1,2 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (13 мг, 0,18 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 6 ч и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали.
Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 160 (46 мг, выход 77%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=509 (M+1).
Соединение 161. Соединение 160 (46 мг, 0,090 ммоль) растворяли в МеОН (0,9 мл). Добавляли карбонат калия (38 мг, 0,28 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 050% EtOAc в гексанах), получая соединение 161 (39 мг, выход 85%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=509 (M+1).
Т63. Соединение 161 (39 мг, 0,077 ммоль) растворяли в бензоле (1 мл). Добавляли DDQ (20 мг, 0,088 ммоль). Смесь нагревали при 85°C в течение 1 ч и затем охлаждали до к.т. Добавляли CH2Cl2 и водн. насыщ. NaHCO3. Смесь перемешивали в течение 5 мин и экстрагировали CH2Cl2. Объединенный органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т63 (15 мг, выход 38%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,93 (с, 1Н), 8,38 (тд, J=1,1, 8,5 Гц, 1Н), 7,94 (с, 1Н), 7,47 (м, 4Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 2,90 (с, 3H), 2,88 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,17 (м, 1Н), 1,87 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=507 (M+1).
Соединение 162. Смесь соединения 144 (161 мг, 0,33 ммоль), морфолина (59 мкл, 0,68 ммоль), Xphos (19 мг, 0,040 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0) (12 мг, 0,013 ммоль), третбутоксида натрия (48 мг, 0,50 ммоль) и толуола (1 мл) во флаконе продували азотом в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 100°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 162 (125 мг, выход 70%) в виде светло-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=531 (M+1).
Соединение 163. Соединение 162 (439 мг, 0,83 ммоль) растворяли в ТГФ (2,8 мл) и МеОН (2,8 мл). Водн. Добавили 3N HCl (2,8 мл, 8,4 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После концентрации добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали, получая соединение 163 (387 мг, выход 96%) в виде светло-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=487 (M+1).
Соединение 164. Соединение 163 (385 мг, 0,79 ммоль) растворяли в этилформиате (1,9 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 2,7 мл, 11,7 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (2,0 мл, 12,0 ммоль), EtOH (11,9 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (84 мг, 1,21 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение ночи и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 164 (309 мг, выход 76%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=512 (M+1).
Соединение 165. Соединение 164 (306 мг, 0,60 ммоль) растворяли в МеОН (3 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,21 мл, 0,90 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 165 (273 мг, выход 89%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=512 (M+1).
Т64. Соединение 165 (128 мг, 0,25 ммоль) растворяли в бензоле (2,5 мл). Добавляли DDQ (60 мг, 0,26 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч и затем охлаждали до к.т. Добавляли CH2Cl2 и водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали CH2Cl2. Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-20% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение Т64 (98 мг, 77% выход) в виде желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,99 (с, 1Н), 8,37 (дд, J=0,7, 5,3 Гц, 1Н), 7,72 (дд, J=1,2, 5,2 Гц, 1Н), 7,69 (т, J=0,8 Гц, 1Н), 7,51 (м, 1Н), 7,44 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,21 (ддд, J=1,0, 8,3, 9,6 Гц, 1H), 3,86 (дд, J=4,0, 5,8 Гц, 4Н), 3,62 (дд, J=3,8, 6,0 Гц, 4Н), 2,80 (м, 2Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,25 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,11 (м, 1Н), 1,79 (дк, J=7,1, 12,9 Гц, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=510 (M+1).
Соединение 166. Смесь соединения 144 (166 мг, 0,35 ммоль), фенилбороновой кислоты (55 мг, 0,45 ммоль), карбоната калия (239 мг, 1,73 ммоль), толуола (2 мл), EtOH (1 мл) и воды (1 мл) во флаконе продували азотом в течение 5 мин. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (12 мг, 0,010 ммоль). Продувание азотом продолжали в течение еще 2 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в мик- 117 043609 роволновом синтезаторе Biotage® при 100°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над
Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-25%
EtOAc в гексанах), получая соединение 166 (180 мг, количественный выход) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=522 (M+1).
Соединение 167. Соединение 166 (210 мг, 0,40 ммоль) растворяли в ТГФ (1,4 мл) и МеОН (1,4 мл). Водн. Добавили 3N HCl (1,4 мл, 8,4 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После концентрации добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали, получая соединение 167 (189 мг, выход 98%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=478 (М+1).
Соединение 168. Соединение 167 (187 мг, 0,39 ммоль) растворяли в этилформиате (945 мкл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,4 мл, 6,06 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,98 мл, 5,88 ммоль), EtOH (4 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (42 мг, 0,60 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение ночи и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-25% EtOAc в гексанах), получая соединение 168 (132 мг, выход 67%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=503 (M+1).
Соединение 169. Соединение 168 (130 мг, 0,26 ммоль) растворяли в МеОН (1,3 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 90 мкл, 0,39 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 169 (112 мг, выход 86%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=503 (M+1).
Т65. Соединение 169 (82 мг, 0,16 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,4 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (23 мг, 0,080 ммоль) в ДМФ (0,4 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (40 мкл, 0,50 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-30% ацетона в гексанах), получая соединение Т65 (63 мг, выход 76%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,03 (с, 1Н), 8,88 (дд, J=0,8, 5,1 Гц, 1Н), 8,76 (дд, J=0,9, 1,5 Гц, 1Н), 8,30 (дд, J=1,6, 5,1 Гц, 1Н), 8,11 (м, 2Н), 7,50 (м, 5Н), 7,35 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 2,83 (м, 2Н), 2,63 (тд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,28 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,14 (м, 1Н), 1,81 (м, 1Н), 1,58 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=501 (M+1).
Соединение 170а. Смесь соединения 88 (1,30 г, 3,77 ммоль), 4-изохинолинкарбоксимидамида гидрохлорида (1,21 г, 5,81 ммоль) и карбоната калия (1,56 г, 11,28 ммоль) в EtOH (38 мл) нагревали с обратным холодильником в атмосфере азота в течение ночи. Смесь охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая дигидропиримидин. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (50 мл) и обрабатывали диоксидом марганца (88%, 1,63 г, 16,50 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 100% EtOAc), получая соединение 170а (0,70 г, выход 38%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=496 (M+1).
Соединение 171а. Раствор соединения 170а (0,70 г, 1,42 ммоль) и водн. 3N HCl (4,7 мл, 14,1 ммоль) в МеОН (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали, охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH, a затем экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 171а (0,63 г, выход 98%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=452 (M+1).
Соединение 172а. К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соединения 171а (0,63 г, 1,40 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,80 мл, 4,26 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172а (0,60 г, выход 88%) в виде светло-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=480 (M+1).
Соединение 173а. К раствору соединения 172а (0,60 г, 1,25 ммоль) в EtOH (25 мл) добавляли уксусную кислоту (0,70 мл, 12,23 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (0,13 г, 1,87 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органи- 118 043609 ческий экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 173а (0,57 г, выход 96%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=477 (М+1).
Соединение 174а. Смесь соединения 173а (0,57 г, 1,20 ммоль) и карбоната калия (0,83 г, 6,00 ммоль) в МеОН (12 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток был аккуратно распределен между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 174а (0,37 г, выход 65%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=477 (M+1).
Т66. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 174а (0,37 г, 0,78 ммоль) в дегазированном ДМФ (8 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,12 г, 0,42 ммоль) в ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (0,6 мл, 7,44 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 70% EtOAc в гексанах), получая соединение Т66 (0,13 г, 35% выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl·,) δ 9,36 (с, 1Н), 9,22 (с, 1Н), 8,98 (с, 1Н), 8,79 (ддд, J=0,8, 1,6, 8,8 Гц, 1Н), 8,08 (д, J=8,2 Гц, 1Н), 7,81 (ддд, J=1,4, 6,9, 8,6 Гц, 1Н), 7,68 (ддд, J=1,1, 6,9, 8,1 Гц, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 2,88 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,17 (м, 1Н) 1,86 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=475 (M+1).
Соединение 170b. Смесь соединения 88 (1,30 г, 3,77 ммоль), неочищенного пиразоло[1,5а]пиридин-3-карбоксимидамида гидрохлорида (<5,78 ммоль) и карбоната калия (1,56 г, 11,28 ммоль) в EtOH (38 мл) нагревали с обратным холодильником в атмосфере азота в течение ночи. Смесь охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая дигидропиримидин. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (50 мл) и обрабатывали диоксидом марганца (88%, 1,7 г, 17,2 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 170b (0,15 г, выход 8%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=485 (M+1).
Соединение 171b. Раствор соединения 170b (0,15 г, 0,31 ммоль) и водн. 3N HCl (1,0 мл, 3,0 ммоль) в МеОН (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали, охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH, a затем экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 171b (0,13 г, выход 96%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=441 (M+1).
Соединение 172b. К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соединения 171b (0,13 г, 0,30 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,28 мл, 1,49 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем распределяли между EtOAc (25 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172b (0,11 г, выход 80%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=469 (M+1).
Соединение 173b. К раствору соединения 172b (0,11 г, 0,23 ммоль) в EtOH (10 мл) добавляли уксусную кислоту (0,15 мл, 2,62 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (0,025 г, 0,36 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 173b (0,10 г, выход 91%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=466 (М+1).
Соединение 174b. Смесь соединения 173b (0,10 г, 0,21 ммоль) и карбоната калия (0,15 г, 1,08 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч. После фильтрации фильтрат концентрировали. Остаток был аккуратно распределен между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 70% EtOAc в гексанах), получая соединение 174b (0,073 г, выход 73%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=466 (M+1).
Т67. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 174b (0,073 г, 0,16 ммоль) в дегазированном ДМФ (5 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,025 г, 0,087 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (0,13 мл, 1,61 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентри- 119 043609 ровали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т67 (0,031 г, выход 42%) в виде желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,03 (с, 1Н), 8,79 (с, 1Н), 8,56 (тд, J=1,1, 6,9 Гц, 1Н), 8,50 (тд, J=1,3, 9,0 Гц, 1Н), 7,49 (м, 2Н), 7,35 (м, 2Н), 7,21 (ддд, J=1,0, 8,3, 9,5 Гц, 1Н), 6,92 (дт, J=1,4, 6,9 Гц, 1Н), 2,76 (м, 2Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,08 (м, 1Н), 1,77 (тдд, J=7,0, 13,0, 19,3 Гц, 1Н), 1,57 (с, 3H). 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=464 (M+1).
Соединение 170с. Смесь соединения 88 (1,50 г, 4,36 ммоль), гидрохлорида 8-метил-4хинолинкарбоксимидамида (1,21 г, 5,46 ммоль) и карбоната калия (1,81 г, 13,10 ммоль) в EtOH (30 мл) нагревали с обратным холодильником в атмосфере азота в течение ночи. Смесь охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая дигидропиримидин. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (100 мл), обрабатывали диоксидом марганца (88%, 2,0 г, 20,2 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После фильтрации фильтрат концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах), получая соединение 170с (1,49 г, выход 67%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=510 (M+1).
Соединение 171с. Раствор соединения 170с (1,49 г, 2,92 ммоль) и водн. 3N HCl (10 мл, 30 ммоль) в МеОН (30 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После концентрирования смесь охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH, а затем экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 171с (1,44 г, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=466 (M+1).
Соединение 172с. К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соединения 171с (все с последней стадии) в этилформиате (12 мл, 148 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 1,6 мл, 8,64 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172с (1,34 г, выход 92%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=494 (M+1).
Соединение 173с. К раствору соединения 172с (1,34 г, 2,71 ммоль) в EtOH (25 мл) добавляли уксусную кислоту (1,6 мл, 27,9 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (0,28 г, 4,03 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в атмосфере азота в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 173с (1,31 г, выход 98%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=491 (М+1).
Соединение 174с. Смесь соединения 173с (1,31 г, 2,67 ммоль) и карбоната калия (1,84 г, 13,31 ммоль) в МеОН (27 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч. После фильтрации фильтрат концентрировали. Остаток был аккуратно распределен между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 174с (0,94 г, выход 72%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=491 (M+1).
Т68. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 174с (0,94 г, 1,91 ммоль) в дегазированном ДМФ (10 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,30 г, 1,05 ммоль) в ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (1,5 мл, 18,5 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т68 (0,30 г, выход 32%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,11 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,94 (с, 1Н), 8,48 (м, 1Н), 7,97 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,63 (тд, J=1,3, 7,0 Гц, 1Н), 7,49 (м, 3H), 7,32 (дт, J=1,1, 7,6 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 2,89 (м, 2Н), 2,88 (с, 3H), 2,63 (тд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,17 (м, 1Н), 1,85 (м, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=489 (M+1).
Соединение 170d. Смесь соединения 1 (1,50 г, 4,36 ммоль), гидрохлорида 2-метил-4хинолинкарбоксимидамида (1,21 г, 5,46 ммоль) и карбоната калия (1,81 г, 13,10 ммоль) в EtOH (30 мл) нагревали с обратным холодильником в атмосфере азота в течение ночи. Смесь охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, по- 120 043609 лучая дигидропиримидин. Неочищенный продукт растворяли в CH2C12 (100 мл) и обрабатывали диоксидом марганца (88%, 2,0 г, 20,2 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 170d (1,44 г, выход 65%) в виде светложелтого пенистого твердого вещества. m/z=510 (M+1).
Соединение 171d. Раствор соединения 170d (1,44 г, 2,83 ммоль) и водн. 3N HCl (9,5 мл, 28,5 ммоль) в МеОН (28 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH, а затем экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 171d (1,41 г, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=466 (M+1).
Соединение 172d. К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соединения 171d (все из последней стадии) в этилформиате (12 мл, 148 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 1,6 мл, 8,64 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172d (1,34 г, выход 95%) в виде темно-желтого пенистого твердого вещества. m/z=494 (M+1).
Соединение 173d. К раствору соединения 172d (1,34 г, 2,71 ммоль) в EtOH (25 мл) добавляли уксусную кислоту (1,6 мл, 27,9 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (0,28 г, 4,03 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 173d (1,28 г, выход 96%) в виде оранжевого пенистого твердого вещества. m/z=491 (M+1).
Соединение 174d. Смесь соединения 173d (1,28 г, 2,62 ммоль) и карбоната калия (1,81 г, 13,10 ммоль) в МеОН (26 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток был аккуратно распределен между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 174d (0,80 г, выход 63%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=491 (M+1).
Т69. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 174d (0,80 г, 1,64 ммоль) в дегазированном ДМФ (8 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,26 г, 0,91 ммоль) в ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (1,3 мл, 16,1 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах), а затем кристаллизовали из EtOH, получая соединение Т69 (0,14 г, выход 18%) в виде грязно-белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,95 (с, 1Н), 8,57 (дд, J=1,4, 8,6 Гц, 1Н), 8,12 (ддд, J=0,8, 1,2, 8,4 Гц, 1Н), 7,86 (с, 1Н), 7,73 (ддд, J=1,5, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,52 (м, 3H), 7,33 (дт, J=1,0, 7,5 Гц, 1H), 7,23 (м, 1Н), 2,88 (м, 2Н), 2,85 (с, 3H), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,17 (м, 1Н), 1,86 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H) 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=489 (M+1).
Соединение 170е. Смесь соединения 88 (1,51 г, 4,38 ммоль), неочищенного гидрохлорида 2,4диметил-5-тиазолкарбоксимидамида (<6,58 ммоль) и карбоната калия (3,0 г, 21,7 ммоль) в EtOH (44 мл) нагревали с обратным холодильником в атмосфере азота в течение ночи, Смесь охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая дигидропиримидин. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (100 мл) и обрабатывали диоксидом марганца (88%, 2,0 г, 20,2 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах), получая соединение 170е (1,12 г, выход 53%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=480 (M+1).
Соединение 171е. Раствор соединения 170е (1,12 г, 2,33 ммоль) и водн. 3N HCl (8 мл, 24 ммоль) в МеОН (23 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH, а затем экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 171е (1,01 г, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=436 (M+1).
Соединение 172е. К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соединения 171е (1,01 г, 2,33 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 1,3 мл, 7,02 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем распределяли между EtOAc (50 мл) и
- 121 043609 водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172е (1,11 г, количественный выход) в виде темно-желтого пенистого твердого вещества. m/z=464 (M+1).
Соединение 173е. К раствору соединения 172е (все с последней стадии) в EtOH (25 мл) добавляли уксусную кислоту (1,4 мл, 24,4 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (0,25 г, 3,60 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 173е (1,08 г, количественный выход) в виде коричневого пенистого твердого вещества. m/z=461 (М+1).
Соединение 174е. Смесь соединения 173е (1,08 г, 2,33 ммоль) и карбоната калия (1,62 г, 11,72 ммоль) в МеОН (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток был аккуратно распределен между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 174е (0,72 г, выход 67%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=461 (M+1).
Т70. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 174е (0,72 г, 1,57 ммоль) в дегазированном ДМФ (8 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,25 г, 0,87 ммоль) в ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (1,3 мл, 16,1 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией повторно (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексане), получая соединение Т70 (0,21 г, выход 29%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCL3) δ 8,85 (с, 1Н), 7,49 (м, 1Н), 7,41 (дт, J=1,2, 7,6 Гц, 1Н), 7,30 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,19 (ддд, J=1,0, 8,4, 9,6 Гц, 1H), 2,86 (с, 3H), 2,75 (м, 2Н), 2,70 (с, 3H), 2,59 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,22 (дт, J=2,3, 12,8 Гц, 1Н), 2,09 (м, 1Н), 1,75 (дк, J=7,1, 13,0 Гц, 1Н), 1,50 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=459 (M+1).
Соединение 170f. Смесь соединения 88 (1,45 г, 4,21 ммоль), 5-метил-1,2,4-оксадиазол-3карбоксимидамида гидрохлорида (0,86 г, 5,29 ммоль) и карбоната калия (1,74 г, 12,59 ммоль) в EtOH (30 мл) нагревали с обратным холодильником в атмосфере азота в течение ночи. Смесь охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая дигидропиримидин. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (100 мл) и обрабатывали диоксидом марганца (88%, 2,0 г, 20,2 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и фильтровали. Фильтрат концентрировали и неочищенный продукт очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 170f (0,64 г, выход 34%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=451 (M+1).
Соединение 171f. Раствор соединения 170f (0,64 г, 1,42 ммоль) и водн. 3N HCl (5 мл, 15 ммоль) в МеОН (14 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH и затем экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 171f (0,62 г, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=407 (M+1).
Соединение 172f. К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соединения 171f (все с последней стадии) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,8 мл, 4,32 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172f (0,63 г, количественный выход) в виде ярко-желтого пенистого твердого вещества. m/z=435 (M+1).
Соединение 173f. К раствору соединения 172f (все с последней стадии) в EtOH (20 мл) добавляли уксусную кислоту (0,8 мл, 14,1 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (0,15 г, 2,16 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 173f (0,33 г, выход 55%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=432 (M+1).
Соединение 174f Смесь соединения 173f (0,33 г, 0,76 ммоль) и карбоната калия (0,32 г, 2,32 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток был аккуратно распределен между водн. насыщ.
- 122 043609
KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах и затем 5% МеОН в CHCl3), получая соединение 174f (0,080 г, выход 24%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=432 (M+1).
Т71. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 174f (0,080 г, 0,18 ммоль) в дегазированном ДМФ (2 мл) добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,029 г, 0,10 ммоль). После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (0,15 мл, 1,85 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах), получая соединение Т71 (0,045 г, выход 56%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,03 (с, 1Н), 7,47 (м, 2Н), 7,29 (дт, J=1,2, 7,7 Гц, 1Н), 7,17 (дд, J=8,5, 9,9 Гц, 1Н), 2,86 (м, 2Н), 2,75 (с, 3H), 2,61 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,26 (м, 1Н), 2,14 (м, 1Н), 1,83 (м, 1Н), 1,57 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=430 (M+1).
Соединение 170g. Соединение 88 (850 мг, 2,45 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли гидрохлорид 1-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-карбоксимидамида (2,1 г, 10 ммоль) и карбонат калия (2,8 г, 20,2 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Добавляли воду (50 мл). Смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая дигидропиримидин. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (20 мл) и обрабатывали диоксидом марганца (88%, 1,3 г, 13,3 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 035% EtOAc в гексанах), получая соединение 170g (1,05 г, выход 84%) в виде пены. m/z=499 (M+1).
Соединение 171g. Соединение 170g (1,05 г, 2,11 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл) и добавляли водн. 3N HCl (5 мл, 15 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 171g (0,95 г, выход 99%) в виде пены. m/z=455 (М+1).
Соединение 172g. Соединение 171g (0,95 г, 2,09 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 0,75 г, 4,17 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172g (0,96 г, выход 95%) в виде пены. m/z=483 (M+1).
Соединение 173g. Соединение 172g (0,96 г, 1,99 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (1,4 г, 20 ммоль) и уксусную кислоту (1,2 г, 20 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 173g (0,83 г, выход 87%) в виде пены. m/z=480 (M+1).
Соединение 174g. Соединение 173g (830 мг, 1,73 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли K2CO3 (1,2 г, 8,68 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 174g (410 мг, выход 49%) в виде пены. m/z=480 (M+1).
Т72. Соединение 174g (410 мг, 0,85 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (135 мг, 0,47 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 2 ч добавляли пиридин (3 мл, 37,2 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали до комнатной температуры и распределяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т72 (105 мг, выход 26%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,05 (с, 1Н), 8,78 (дд, J=1,7, 7,9 Гц, 1Н), 8,41 (дд, J=1,6, 4,7 Гц, 1Н), 8,25 (с, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,22 (м, 2Н), 4,00 (с, 3H), 2,75 (м, 2Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,08 (м, 1Н), 1,77 (м, 1Н), 1,57 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=478 (M+1).
Соединение 170h. Соединение 88 (1 г, 2,90 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли гидрохлорид 6-метилхинолин-4-карбоксимидамида (820 мг, 3,70 ммоль) и карбонат калия (1,1 г, 7,96 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Добавляли воду (50 мл). Смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая дигидропиримидин. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (20 мл) и обрабатывали диоксидом марганца (88%, 1,35 г, 13,66 ммоль). Раствор
- 123 043609 перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и фильтровали. Фильтрат концентрировали.
Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 170h (660 мг, выход 45%) в виде пены. m/z=510 (M+1).
Соединение 171h. Соединение 170h (660 мг, 1,30 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл) и добавляли водн. 3N HCl (5 мл, 15 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 171h (0,61 г, количественный выход) в виде пены. m/z=466 (M+1).
Соединение 172h. Соединение 171h (0,61 г, 1,30 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 0,47 г, 2,61 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172h (0,59 г, выход 92%) в виде пены. m/z=494 (M+1).
Соединение 173h. Соединение 172h (0,59 г, 1,20 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (0,83 г, 11,94 ммоль) и уксусную кислоту (0,72 г, 12 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 173h (0,57 г, выход 97%) в виде пены. m/z=491 (M+1).
Соединение 174h. Соединение 173h (570 мг, 1,16 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (0,8 г, 5,79 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 174h (400 мг, выход 70%) в виде пены. m/z=491 (M+1).
Т73. Соединение 174h (400 мг, 0,82 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (130 мг, 0,45 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 2 ч добавляли пиридин (3 мл, 37,2 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали до комнатной температуры и распределяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т73 (250 мг, выход 62%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl·,) δ 9,00 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,99 (с, 1Н), 8,49 (м, 1Н), 8,11 (д, J=8,6 Гц, 1Н), 7,97 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,61 (дд, J=2,0, 8,6 Гц, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,6 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 2,91 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,58 (с, 3H), 2,33 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,18 (м, 1Н), 1,86 (м, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=489 (M+1).
Соединение 170i. Соединение 88 (0,7 г, 2,03 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли 4хиназолинкарбоксимидамида гидрохлорид (1,6 г, 7,67 ммоль) и карбонат калия (2,1 г, 15,19 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Добавляли воду (50 мл). Смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая дигидропиримидин. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (20 мл) и обрабатывали диоксидом марганца (88%, 2,0 г, 20,24 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 170i (130 мг, выход 13%) в виде пены. m/z=497 (M+1).
Соединение 171i. Соединение 170i (130 мг, 0,26 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл) и добавляли водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 171i (120 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=453 (M+1).
Соединение 172i. Соединение 171i (0,12 г, 0,26 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 0,10 г, 0,56 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172i (0,12 г, выход 94%) в виде пены. m/z=481 (M+1).
Соединение 173i. Соединение 172i (0,12 г, 0,25 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (175 мг, 2,52 ммоль) и уксусную кислоту (150 мг, 2,50 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 173i (0,11 г, выход 92%) в виде пены. m/z=478 (M+1).
Соединение 174i. Соединение 173i (110 мг, 0,23 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (160 мг, 1,15 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали.
- 124 043609
Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 174i (60 мг, выход 55%) в виде пены. m/z=478 (M+1).
Т74. Соединение 174i (60 мг, 0,13 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (20 мг, 0,070 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 2 ч добавляли пиридин (1 мл, 12,4 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали до комнатной температуры и распределяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т74 (20 мг, выход 33%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,53 (с, 1Н), 8,91 (с, 1Н), 8,40 (ддд, J=0,8, 1,6, 8,3 Гц, 1Н), 8,18 (тд, J=0,8, 8,6 Гц, 1Н), 7,98 (ддд, J=1,4, 6,9, 8,5 Гц, 1Н), 7,72 (ддд, J=1,3, 6,9, 8,3 Гц, 1Н), 7,49 (м, 2Н), 7,31 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,21 (м, 1Н), 2,94 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,32 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,18 (тдд, J=3,0, 6,2, 13,8 Гц, 1Н), 1,87 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=476 (M+1).
Соединение 170j. Соединение 88 (0,65 г, 1,88 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). 1изохинолинкарбоксимидамида гидрохлорид (790 мг, 3,80 ммоль) и карбонат калия (1,2 г, 8,68 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Добавляли воду (50 мл). Смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4 и концентрировали, получая дигидропиримидин. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (20 мл) и обрабатывали диоксидом марганца (88%, 1,1 г, 11,14 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 170j (190 мг, 20% выход) в виде пены. m/z=496 (M+1).
Соединение 171j. Соединение 170j (190 мг, 0,38 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл) и добавляли водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, затем сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 171j (175 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=452 (M+1).
Соединение 172j. Соединение 171j (175 мг, 0,38 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 0,15 г, 0,83 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172j (0,18 г, выход 98%) в виде пены. m/z=480 (M+1).
Соединение 173j. Соединение 172j (0,18 г, 0,38 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (260 мг, 3,74 ммоль) и уксусную кислоту (225 мг, 3,75 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 173j (0,17 г, выход 94%) в виде пены. m/z=477 (M+1).
Соединение 174j. Соединение 173j (170 мг, 0,36 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (250 мг, 1,81 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 174j (110 мг, выход 65%) в виде пены. m/z=477 (M+1).
Т75. Соединение 174j (330 мг, 0,69 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (110 мг, 0,38 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 2 ч добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали до комнатной температуры и распределяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т75 (165 мг, выход 50%) в виде пены. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,96 (с, 1Н), 8,72 (д, J=5,6 Гц, 1Н), 8,30 (кд, J=1,0, 8,5 Гц, 1Н), 7,94 (тд, J=0,9, 8,3 Гц, 1Н), 7,81 (дд, J=0,9, 5,7 Гц, 1Н), 7,74 (ддд, J=1,2, 6,9, 8,2 Гц, 1Н), 7,64 (ддд, J=1,3, 6,9, 8,4 Гц, 1Н), 7,47 (м, 2Н), 7,28 (м, 1Н), 7,19 (ддд, J=1,0, 8,3, 9,5 Гц, 1Н), 2,91 (м, 2Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,32 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,16 (м, 1Н), 1,87 (м, 1Н), 1,58 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=475 (M+1).
Соединение 170k. Смесь соединения 88 (1,01 г, 2,95 ммоль), гидрохлорида 7-фтор-4хинолинкарбоксимидамида (1,0 г, 4,43 ммоль) и карбоната калия (1,22 г, 8,85 ммоль) в EtOH (25 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 44 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 и CH2Cl2. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая необработанный дигидропиримидин в виде желтого стекла. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (15 мл) и раствор обрабатывали диоксидом марганца (88%, 2,27 г, 23,01 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 22 ч, после чего фильтровали через Celite®. Фильтрат концентрирова- 125 043609 ли и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение 170k (1,16 г, выход 77%) в виде белого стекла. m/z=514 (M+1).
Соединение 171k. Раствор соединения 170k (1,13 г, 2,20 ммоль) в ТГФ (15 мл) обрабатывали водн. 3N HCl (7,3 мл, 21,9 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляли in vacuo, a остаток охлаждали до 0°C, осторожно нейтрализовывали с помощью водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой и солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 171k (1,03 г, количественный выход) в виде белого стекла. m/z=470 (M+1).
Соединение 172k. Раствор соединения 171k (1,03 г, 2,19 ммоль) в этилформиате (15 мл, 186 ммоль) охлаждали до 0°C и по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М раствор в МеОН, 2,04 мл, 11,02 ммоль). Холодную баню убирали и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172k (1,03 г, выход 94%) в виде грязно-белого стекла. m/z=498 (M+1).
Соединение 173k. Раствор соединения 172k (1,03 г, 2,07 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (1,19 мл, 20,7 ммоль) и EtOH (10 мл) обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (216 мг, 3,11 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при 60°C в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток осторожно распределяли между водн. 10% NH4OH и CH2Cl2. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 173k (942 мг, выход 92%) в виде бледно-желтого стекла. m/z=495 (M+1).
Соединение 174k. Смесь соединения 173k (942 мг, 1,90 ммоль) и карбоната калия (525 мг, 3,80 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 17 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между водой и Et2O. Водную фазу охлаждали на бане с ледяной водой и подкисляли водн. насыщ. KH2PO4. Подкисленную водную смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл), и объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 174k (646 мг, выход 69%) в виде белого стекла. m/z=495 (M+1).
Т76. Раствор соединения 174k (646 мг, 1,31 ммоль) в дегазированном ДМФ (10 мл) охлаждали до 0°C и по каплям обрабатывали раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (206 мг, 0,72 ммоль) в дегазированном ДМФ (3 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли безводный пиридин (1,06 мл, 13,13 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 60°C в атмосфере аргона в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т76 (401 мг, выход 62%) в виде светложелтого стекла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,93 (с, 1Н), 8,79 (дд, J=6,1, 9,4 Гц, 1Н), 8,02 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,84 (дд, J=2,7, 9,9 Гц, 1Н), 7,47 (м, 3H), 7,33 (дт, J=1,0, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 2,90 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,18 (м, 1Н), 1,87 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=493 (M+1).
Соединение 170l. Смесь соединения 88 (285 мг, 0,83 ммоль), гидрохлорида 8-фтор-4хинолинкарбоксимидамида (280 мг, 1,24 ммоль) и карбоната калия (343 мг, 2,48 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 66 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 и CH2Cl2. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая необработанный дигидропиримидин в виде желтого стекла. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (15 мл) и раствор обрабатывали диоксидом марганца (88%, 625 мг, 6,33 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 23 ч, после чего фильтровали через Celite®. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение 170l (316 мг, выход 74%) в виде белого стекла. m/z=514 (M+1).
Соединение 171l. Раствор соединения 170l (316 мг, 0,62 ммоль) в ТГФ (15 мл) обрабатывали водн. 3N HCl (2,05 мл, 6,15 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Растворитель удаляли in vacuo, a остаток охлаждали до 0°C, осторожно нейтрализовывали с помощью водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой и солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 171l (276 мг, выход 95%) в виде белого стекла. m/z=470 (M+1).
Соединение 172l. Раствор соединения 171l (477 мг, 1,02 ммоль) в этилформиате (15 мл, 186 ммоль) охлаждали до 0°C и по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М раствор в МеОН, 0,94 мл, 5,08 ммоль). Холодную баню убирали и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4.
- 126 043609
Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172l (495 мг, выход 98%) в виде желтого стекла. m/z=498 (M+1).
Соединение 173l. Раствор соединения 172l (490 мг, 0,99 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (0,57 мл, 9,85 ммоль) и EtOH (10 мл) обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (103 мг, 1,48 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при 60°C в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение 19 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток осторожно распределяли между водн. 10% NH4OH и CH2Cl2. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 173l (567 мг) в виде оранжевого стекла. m/z=495 (M+1).
Соединение 174l. Смесь соединения 173l (все с последней стадии) и карбоната калия (272 мг, 1,97 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 22 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между водой и Et2O. Водную фазу охлаждали на бане с ледяной водой и подкисляли водн. насыщ. KH2PO4. Подкисленную водную смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл), и объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией, элюируя 50% EtOAc в гексане), получая соединение 174l (300 мг, выход 62%) в виде прозрачного стекла. m/z=495 (М+1).
Т77. Раствор соединения 174l (300 мг, 0,606 ммоль) в дегазированном ДМФ (10 мл) охлаждали до 0°C и по каплям обрабатывали раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (95 мг, 0,332 ммоль) в дегазированном ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 30 мин добавляли безводный пиридин (0,49 мл, 6,07 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 60°C в атмосфере аргона в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т77 (210 мг, выход 70%) в виде прозрачного стекла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,14 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,92 (с, 1Н), 8,52 (тд, J=1,1, 8,6 Гц, 1Н), 8,11 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,52 (м, 4Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 2,91 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,18 (м, 1Н), 1,86 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=493 (M+1).
Соединение 170m. Смесь соединения 88 (1,06 г, 3,08 ммоль), гидрохлорида 6-метил-4пиримидинкарбоксимидамида (800 мг, 4,63 ммоль) и карбоната калия (1,28 г, 9,26 ммоль) в EtOH (40 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 96 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 и CH2Cl2. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая дигидропиримидин в виде желтого стекла. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (20 мл) и раствор обрабатывали диоксидом марганца (88%, 2,38 г, 24,10 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 22 ч, после чего фильтровали через Celite®. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 30-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 170m (518 мг, выход 36%) в виде стекла. m/z=461 (М+1).
Соединение 171m. Раствор соединения 170m (514 мг, 1,12 ммоль) в ТГФ (20 мл) обрабатывали водн. 3N HCl (3,73 мл, 11,19 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч и концентрировали. Остаток охлаждали до 0°C, осторожно нейтрализовывали с помощью водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование от 65 до 100% EtOAc в гексане), получая соединение 171m (264 мг, выход 57%) в виде прозрачного стекла. m/z=417 (М+1).
Соединение 172m. Раствор соединения 171m (264 мг, 0,633 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) охлаждали до 0°C и по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М раствор в МеОН, 0,59 мл, 3,19 ммоль). Холодную баню убирали и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172m (274 мг, выход 97%) в виде оранжевого стекла. m/z=445 (М+1).
Соединение 173m. Раствор соединения 172m (270 мг, 0, 607 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (0,36 мл, 6,30 ммоль) и EtOH (10 мл) обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (66 мг, 0,950 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при 60°C в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение 24 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток осторожно распределяли между водн. 10% NH4OH и CH2Cl2. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 173m (267 мг, количественный выход) в виде оранжевокоричневого стекла. m/z=442 (M+1).
Соединение 174m. Смесь соединения 173m (267 мг, 0,605 ммоль) и карбоната калия (167 мг, 1,21 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 16 ч.
- 127 043609
Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между водой и Et2O. Водную фазу охлаждали на бане с ледяной водой и подкисляли водн. насыщ. KH2PO4. Подкисленную водную смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 100% EtOAc), получая соединение 174m (126 мг, выход 47%) в виде желтого стекла. m/z=442 (M+1).
Т78. Раствор соединения 174m (126 мг, 0,285 ммоль) в дегазированном ДМФ (5 мл) охлаждали до 0°C и обрабатывали по каплям раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (45 мг, 0,156 ммоль) в дегазированном ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 30 мин добавляли безводный пиридин (0,23 мл, 2,85 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 60°C в атмосфере аргона в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 100% EtOAc), получая соединение Т78 в виде желтого стекла (83 мг, выход 66%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,34 (д, J=1,3 Гц, 1Н), 9,05 (с, 1Н), 8,33 (дд, J=0,8, 1,2 Гц, 1Н), 7,48 (м, 2Н), 7,31 (дт, J=1,0, 7,5 Гц, 1Н), 7,19 (ддд, J=1,0, 8,4, 9,5 Гц, 1Н), 2,85 (м, 2Н), 2,73 (с, 3H), 2,63 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,28 (дт, J=2,7, 12,7 Гц, 1Н), 2,13 (м, 1Н), 1,82 (м, 1Н), 1,57 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=440 (M+1).
Соединение 170n. Смесь соединения 88 (701 мг, 2,03 ммоль), 4-пиридазинкарбоксимидамида гидрохлорида (484 мг, 3,05 ммоль) и карбоната калия (842 мг, 6,09 ммоль) в EtOH (30 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 67 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 и EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая дигидропиримидин в виде темно-оранжевого стекла. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (20 мл) и раствор обрабатывали диоксидом марганца (88%, 1,56 г, 15,79 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 26 ч, после чего фильтровали через Celite®. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 100% EtOAc), получая соединение 170n в виде маслянистой жидкости, которая кристаллизовалось при стоянии (276 мг, выход 30%). m/z=447 (M+1).
Соединение 171n. Раствор соединения 170n (273 мг, 0, 611 ммоль) в ТГФ (20 мл) обрабатывали водн. 3N HCl (2,04 мл, 6,12 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч и концентрировали. Остаток охлаждали до 0°C, осторожно нейтрализовывали с помощью водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 171n (256 мг, количественный выход) в виде стекла. m/z=403 (M+1).
Соединение 172n. Раствор соединения 171n (245 мг, 0,609 ммоль) в этилформиате (8 мл, 99,5 ммоль) охлаждали до 0°C и по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М раствор в МеОН, 0,56 мл, 3,02 ммоль). Холодную баню убирали и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 172n (258 мг, выход 98%) в виде оранжевого стекла. m/z=431 (M+1).
Соединение 173n. Раствор соединения 172n (258 мг, 0,599 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (0,35 мл, 5,99 ммоль) и EtOH (5 мл) обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (62 мг, 0,892 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при 60°C в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение 21 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток осторожно распределяли между водн. 10% NH4OH и CH2Cl2. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 173n (236 мг, выход 92%) в виде оранжевого стекла. m/z=428 (M+1).
Соединение 174n. Смесь соединения 173n (236 мг, 0,552 ммоль) и карбоната калия (153 мг, 1,10 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 21 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между водой и Et2O. Водную фазу охлаждали на бане с ледяной водой и подкисляли водн. насыщ. KH2PO4. Подкисленную водную смесь экстрагировали EtOAc (2x30 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 100% EtOAc), получая соединение 174n (164 мг, выход 69%) в виде прозрачного стекла. m/z=428 (M+1).
Т79. Раствор соединения 174n (164 мг, 0,384 ммоль) в дегазированном ДМФ (5 мл) охлаждали до 0°C и по каплям обрабатывали раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (60 мг, 0,210 ммоль) в дегазированном ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 30 мин добавляли безводный пиридин (0,31 мл, 3,84 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 60°C в атмосфере аргона в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь рас
- 128 043609 пределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 80% EtOAc в гексанах), получая соединение Т79 (115 мг, выход 70%) в виде желтой маслянистой жидкости, которая кристаллизовалось при стоянии. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 10,19 (дд, J=1,3, 2,3 Гц, 1Н), 9,40 (дд, J=1,3, 5,3 Гц, 1Н), 8,96 (с, 1Н), 8,47 (дд, J=2,3, 5,3 Гц, 1Н), 7,55 (м, 1Н), 7,44 (дт, J=2,0, 7,4 Гц, 1Н), 7,35 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 2,84 (м, 2Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,27 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,15 (м, 1Н), 1,81 (дд, J=7,2, 10,5, 13,2 Гц, 1Н), 1,56 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=426 (M+1).
Соединение 175. Соединение 88 (172 мг, 0,50 ммоль), 6,7-дигидро-циклопента[b]пиридин-4карбоксимидамида гидрохлорид (176 мг, 0,82 ммоль) и K2CO3 (207 мг, 1,50 ммоль) в EtOH (2,5 мл) нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 120°C в течение 11 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-90% ацетона в гексанах), получая частично очищенный продукт (210 мг) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=488. Продукт (210 мг, 0,43 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (4 мл). Добавляли DDQ (107 мг, 0,47 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3 и смесь экстрагировали CH2Cl2. Объединенный органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в гексанах), получая соединение 175 (159 г, выход 66% из соединения 98) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=486 (M+1).
Соединение 176. Соединение 175 (157 мг, 0,32 ммоль) растворяли в ТГФ (1,1 мл) и МеОН (1,1 мл). Водн. Добавляли 3N HCl (1,1 мл, 3,3 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3 и смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над Na2SO4 и концентрировали, получая соединение 176 (146 мг) в виде светлокоричневого пенистого твердого вещества. m/z=442 (M+1).
Соединение 177. Соединение 176 (все вышеуказанное) растворяли в этилформиате (0,8 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,14 мл, 4,94 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,82 мл, 4,92 ммоль), EtOH (3,3 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (35 мг, 0,50 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 4 ч и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3 и смесь экстрагировали EtOAc. Органические экстракты промывали водой, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% ацетона в гексанах), получая соединение 177 (102 мг, 68% выход из соединения 175) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Соединение 178. Соединение 177 (100 мг, 0,21 ммоль) растворяли в МеОН (2,1 мл). Добавляли карбонат калия (89 мг, 0,64 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в гексанах), получая соединение 178 (100 мг, количественный выход) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Т80. Соединение 178 (100 мг, 0,21 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (1 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (31 мг, 0,11 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (52 мкл, 0,64 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водой.
Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 050% ацетоном в гексанах), получая соединение Т80 (56 мг, выход 56%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,94 (с, 1Н), 8,51 (тд, J=0,9, 5,3 Гц, 1Н), 8,00 (тд, J=0,8, 5,3 Гц, 1Н), 7,51 (м, 1Н), 7,45 (дт, J=2,0, 7,2 Гц, 1Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,21 (ддд, J=1,0, 8,3, 9,6 Гц, 1Н), 3,47 (т, J=7,5 Гц, 2Н), 3,12 (т, J=7,8 Гц, 2Н), 2,84 (м, 2Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,22 (м, 4Н), 1,80 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=465 (M+1).
Соединения 179 и 180. Смесь соединения 12 (1,203 г, 4,00 ммоль), 2-фторфенилбороновой кислоты (559 мг, 4,02 ммоль), карбоната натрия (1,28 г, 12,1 ммоль), 1,4-диоксана (15 мл) и воды (5 мл) в сосуде под давлением продували азотом в течение 5 мин. Добавляли [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (294 мг, 0,40 ммоль). Продувание азотом продолжали в течение еще 2 мин. Бутылку герметично закрывали и нагревали при 100°C в течение 1 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 179 (675 мг, выход 47%) в виде белого твердого вещества.
- 129 043609 m/z=359 (M+1). Из колонки также получают соединение 180 (135 мг, 8% выход) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=419 (M+1).
Соединение 181. Соединение 180 (135 мг, 0,32 ммоль) растворяли в этилформиате (0,78 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,1 мл, 4,76 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,79 мл, 4,74 ммоль), EtOH (3,2 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (34 мг, 0,49 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 16 ч и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 181 (71 мг, выход 50%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=444 (M+1).
Соединение 182. Соединение 181 (70 мг, 0,16 ммоль) растворяли в МеОН (1,6 мл). Добавляли карбонат калия (65 мг, 0,47 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли EtOAc и водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 182 (67 мг, выход 96%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=444 (M+1).
Т81. Соединение 182 (67 мг, 0,15 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,75 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (22 мг, 0,077 ммоль).
Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (37 мкл, 0,46 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% ацетоном в гексанах), получая соединение Т81 (18 мг, выход 27%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,01 (с, 1Н), 8,11 (дт, J=1,9, 7,8, 1Н), 7,47 (м, 3H), 7,24 (м, 4Н), 2,81 (м, 2Н), 2,61 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,11 (м, 1Н), 1,80 (м, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=442 (M+1).
Соединение 184. К раствору соединения 183 (290 мг, 1,41 ммоль) в MeCN (7 мл) добавляли тригидрат фторида тетрабутиламмония (887 мг, 2,82 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 2 ч реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в 1/1 СН2С12/толуол и очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-10% ацетона в гексанах), получая соединение 184 (72 мг, 35% выход) в виде бесцветной маслянистой жидкости.
Соединение 185. Смесь соединения 184 (70 мг, 0,48 ммоль), бис(пинаколато)диборона (244 мг, 0,96 ммоль), ацетата калия (141 мг, 1,44 ммоль). [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (18 мг, 0,025 ммоль) и 1,4-диоксан (1,5 мл) во флаконе продували азотом в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали до 130°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% ацетона в гексанах), получая частично очищенное соединение 185 (103 мг) в виде вязкой маслянистой жидкости, которую использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. m/z=156 (M-C6H9).
Соединение 187а. Смесь 4-хлор-6-фтор-2-метилхинолина (186а, 250 мг, 1,28 ммоль), бис(пинаколато)диборона (357 мг, 1,41 ммоль), ацетата калия (314 мг, 3,20 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(П) (47 мг, 0,064 ммоль) и 1,4-диоксана (3 мл) в пробирке продували азотом в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали до 125°C в течение 5 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc и воду. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водн. насыщ. NaHCO3. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-30% ацетона в гексанах), получая соединение 187а (140 мг, выход 38%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=206 (M-C6H9).
Соединение 187b. Смесь 4-хлор-6-фторхинолина (186b, 463 мг, 2,55 ммоль), бис(пинаколато)диборона (712 мг, 2,80 ммоль), ацетата калия (626 мг, 6,38 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(П) (98 мг, 0,13 ммоль) и 1,4-диоксана (6 мл) в пробирке продували N2 в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали до 125°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая частично очищенный продукт, который снова очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% ацетона в гексанах) с получением соединения 187b (131 мг, 19% выход) в виде белого твердого вещества.
Соединение 187с. Смесь 4-хлор-6,8-дифторхинолина (186с, 508 мг, 2,55 ммоль), бис(пинаколато)диборона (712 мг, 2,80 ммоль), ацетата калия (626 мг, 6,38 ммоль) [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (98 мг, 0,13 ммоль) и 1,4-диоксана (6 мл) в пробирке продували N2 в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали до 125°C в течение 2 ч. После
- 130 043609 охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 187с (442 мг, выход 60%) в виде белого твердого вещества.
Соединение 188а. Смесь соединения 179 (550 мг, 1,53 ммоль), 2-(гидроксиметил)пиридин-4бороновой кислоты (351 мг, 2,29 ммоль), карбоната натрия (487 мг, 4,59 ммоль), 1,4-диоксана (6 мл) и воды (2 мл) во флаконе продували азотом в течение 5 мин. Добавляли [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (112 мг, 0,15 ммоль). Продувание азотом продолжали в течение еще 2 мин. Флакон закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 110°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc и воду. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водой. Водную смывку экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в гексанах), получая соединение 188а (213 мг, выход 32%) в виде светло-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=432 (M+1).
Соединение 189а. Соединение 188а (211 мг, 0,49 ммоль) растворяли в этилформиате (1,2 мл) и охлаждали до 0°C.
Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,7 мл, 7,36 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,23 мл, 7,38 ммоль), EtOH (4,8 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (52 мг, 0,75 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 16 ч и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% ацетона в гексанах), получая соединение 189а (165 мг, выход 74%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=457 (М+1).
Соединение 190а. Соединение 189а (62 мг, 0,14 ммоль) растворяли в МеОН (1,4 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 47 мкл, 0,20 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% ацетона в гексанах), получая соединение 190а (56 мг, выход 90%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=457 (М+1).
Т82. Соединение 190а (55 мг, 0,12 ммоль) растворяли в бензоле (1,2 мл). Добавляли DDQ (30 мг, 0,13 ммоль). Смесь нагревали при 85°C в течение 30 мин и охлаждали до к.т. Добавляли CH2Cl2 и водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали CH2Cl2. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в гексанах), получая соединение Т82 (36 мг, выход 66%) в виде коричневого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,01 (с, 1Н), 8,74 (м, 1Н), 8,28 (м, 2Н), 7,52 (дддд, J=1,9, 5,3, 7,3, 8,4 Гц, 1Н), 7,45 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,22 (ддд, J=1,0, 8,4, 9,6 Гц, 1Н), 4,91 (с, 2Н), 3,81 (уш. с, 1Н), 2,83 (м, 2Н), 2,63 (м, 1Н), 2,26 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,13 (м, 1Н), 1,81 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=455 (М+1).
Соединение 188b. Смесь соединения 179 (100 мг, 0,28 ммоль), соединения 185 (частично очищенного, 100 мг), карбоната натрия (89 мг, 0,84 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(П) (20 мг, 0,027 ммоль), 1,4-диоксана (1 мл) и воды (0,3 мл) в пробирке продували азотом в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 120°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 188b (46 мг, выход 38%) в виде вязкой маслянистой жидкости. m/z=434 (M+1).
Соединение 189b. Соединение 188b (46 мг, 0,11 ммоль) растворяли в этилформиате (0,26 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,36 мл, 1,55 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,26 мл, 1,56 ммоль), EtOH (1 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (12 мг, 0,17 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение ночи и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 189b (30 мг, выход 62%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=459 (M+1).
Соединение 190b. Соединение 189b (28 мг, 0,061 ммоль) растворяли в МеОН (0,6 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 22 мкл, 0,095 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 190b (23 мг, выход 82%) в виде
- 131 043609 белого пенистого твердого вещества. m/z=459 (M+1).
Т83. Соединение 190b (23 мг, 0,050 ммоль) растворяли в бензоле (0,5 мл). Добавляли DDQ (12 мг, 0,053 ммоль). Смесь нагревали при 85°C в течение 30 мин и охлаждали до к.т. Добавляли CH2Cl2 и водн. насыщ. NaHCO3. Смесь перемешивали до получения фазового раствора и экстрагировали CH2Cl2. Объединенный органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% ацетона в гексанах), получая соединение Т83 (19 мг, выход 83%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,01 (с, 1Н), 8,77 (д, J=5,1 Гц, 1Н), 8,48 (с, 1Н), 8,32 (м, 1Н), 7,53 (дддд, J=1,9, 5,3, 7,2, 8,3 Гц, 1Н) 7,45 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,22 (ддд, J=1,0, 8,4, 9,6 Гц, 1Н), 5,61 (д, J=46,3 Гц, 2Н), 2,83 (м, 2Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,27 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,13 (м, 1Н), 1,81 (м, 1Н), 1,56 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=457 (M+1).
Соединение 188с. Смесь соединения 179 (150 мг, 0,42 ммоль), уинолон-5-бороновой кислоты (108 мг, 0,62 ммоль), карбоната натрия (133 мг, 1,25 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(П) (31 мг, 0,042 ммоль), 1,4-диоксана (1,5 мл) и воды (0,5 мл) во флаконе продували азотом в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 110°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Водную смывку экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 188с (192 мг, количественный выход) в виде белого твердого вещества. m/z=452 (M+1).
Соединение 189с. Соединение 188с (192 мг, 0,42 ммоль) растворяли в этилформиате (1,0 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,5 мл, 6,50 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и добавляли ТГФ (0,5 мл). Смесь перемешивали в течение 1 ч и добавляли дополнительное количество ТГФ (0,5 мл). Смесь перемешивали в течение дополнительных 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,08 мл, 6,48 ммоль), EtOH (4 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (45 мг, 0,65 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение ночи и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-35% ацетона в гексанах), получая соединение 189с (160 мг, выход 79%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=477 (M+1).
Соединение 190с. Соединение 189с (157 мг, 0,33 ммоль) растворяли в МеОН (3,3 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,12 мл, 0,52 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% ацетона в гексанах), получая соединение 190с (150 мг, выход 96%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=477 (M+1).
Т84. Соединение 190с (150 мг, 0,32 ммоль) растворяли в бензоле (3,2 мл). Добавляли DDQ (75 мг, 0,33 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч и затем охлаждали до к.т. Добавляли CH2Cl2 и водн. насыщ. NaHCO3. Смесь перемешивали в течение 10 мин и экстрагировали CH2Cl2. Объединенный органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% ацетона в гексанах), получая соединение Т84 (122 мг, выход 81%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,17 (ддд, J=0,9, 1,8, 8,7 Гц, 1Н), 8,98 (с, 1Н), 8,97 (дд, J=1,7, 4,4 Гц, 1Н), 8,31 (дд, J=1,3, 7,3 Гц, 1Н) 8,27 (тд, J=1,1, 8,5 Гц, 1Н), 7,86 (дд, J=7,3, 8,4 Гц, 1Н), 7,49 (м, 3H), 7,32 (дт, J=1,1, 7,6 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 2,87 (м, 2Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,5 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,17 (м, 1Н), 1,85 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=475 (M+1).
Соединение 188d. Смесь соединения 179 (157 мг, 0,437 ммоль), соединения 187а (138 мг, 0,481 ммоль), карбоната натрия (139 мг, 1,311 ммоль), 1,4-диоксана (1,5 мл) и воды (0,5 мл) продували азотом в течение 10 мин. Добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (36,2 мг, 0,050 ммоль) и продувание азотом продолжали в течение еще 10 мин. Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали до 110°C в микроволновом синтезаторе Biotage® в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 188d (220 мг, количественный выход) в виде белой пены. m/z=484,2 (M+1).
Соединение 189d. Соединение 188d (220 мг, <0,437 ммоль) растворяли в этилформиате (1,1 мл, 13,65 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 1,6 мл, 6,99 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли 6N HCl (1,1 мл, 6,6 ммоль), EtOH (4 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (47,4 мг, 0,682 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 16 ч и концентрировали. Остаток разбавляли водн. насыщ. NaHCO3, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюиро- 132 043609 вание 0-50% ацетона в гексанах), получая соединение 189d (170 мг, выход 76%) в виде желтой пены.
m/z=509,2 (M+1).
Соединение 190d. К раствору соединения 189d (170 мг, 0,334 ммоль) в МеОН (4 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,115 мл, 0,503 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч, охлаждали до 0°C и нейтрализовывали водн. 10% NaH2PO4 (4 мл). МеОН удаляли выпариванием. Остаток разбавляли водой, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-30% ацетона в гексанах), получая соединение 190d (130 мг, выход 76%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=509,2 (M+1).
Т85. Смесь соединения 190d (130 мг, 0,256 ммоль), DDQ (70,0 мг, 0,307 ммоль) и бензола (3 мл) перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в гексанах), получая соединение Т85 (50 мг, выход 39%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,93 (с, 1Н), 8,37 (дд, J=2,9, 10,9 Гц, 1Н), 8,11 (дд, J=5,6, 9,3 Гц, 1Н), 7,95 (с, 1Н), 7,50 (м, 3H), 7,34 (дт, J=1,0, 7,5 Гц, 1H), 7,25 (м, 1Н), 2,87 (м, 2Н), 2,85 (с, 3H), 2,65 (кд, J=6, 6, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,17 (м, 1Н), 1,86 (м, 1Н), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=507,2 (M+1).
Соединение 191. Смесь соединения 179 (150 мг, 0,42 ммоль), изохинолин-5-бороновой кислоты (108 мг, 0,62 ммоль), карбоната натрия (133 мг, 1,25 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(П) (31 мг, 0,042 ммоль), 1,4-диоксана (1,5 мл) и воды (0,5 мл) в пробирке продували азотом в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 110°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Водную смывку экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в гексанах), получая соединение 191 (89 мг, выход 47%) в виде коричневого пенистого твердого вещества. m/z=452 (M+1).
Соединение 192. Соединение 191 (87 мг, 0,19 ммоль) растворяли в этилформиате (0,46 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,67 мл, 2,90 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,48 мл, 2,88 ммоль), EtOH (2 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (20 мг, 0,29 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение ночи и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% ацетона в гексане), получая соединение 192 (75 мг, выход 82%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=477 (M+1).
Соединение 193. Соединение 192 (73 мг, 0,15 ммоль) растворяли в МеОН (1,5 мл). Добавляли карбонат калия (63 мг, 0,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. EtOAc и водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 060% ацетона в гексанах), получая соединение 193 (66 мг, выход 90%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=477 (M+1).
Т86. Соединение 193 (65 мг, 0,14 ммоль) растворяли в бензоле (1,4 мл). Добавляли DDQ (33 мг, 0,15 ммоль). Смесь нагревали при 85°C в течение 1 ч и затем охлаждали до к.т. Добавляли CH2Cl2 и водн. насыщ. NaHCO3. Смесь перемешивали в течение 10 мин и экстрагировали CH2Cl2. Объединенный органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в гексанах), получая соединение Т86 (37 мг, выход 57%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,34 (с, 1Н), 8,99 (с, 1Н), 8,67 (тд, J=0,9, 6,0 Гц, 1Н), 8,61 (д, J=6,1 Гц, 1Н), 8,51 (тд, J=0,9, 7,3 Гц, 1Н), 8,14 (дд, J=1,1, 8,3 Гц, 1H), 7,78 (дд, J=7,3, 8,1 Гц, 1Н), 7,51 (м, 2Н), 7,33 (тт, J=0,8, 7,6 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 2,87 (м, 2Н), 2,64 (м, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,17 (м, 1Н), 1,85 (м, 1Н), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=475 (M+1).
Соединение 194а. Смесь соединения 179 (258 мг, 0,72 ммоль), 3,5-диметилизоксазол-4-бороновой кислоты (152 мг, 1,08 ммоль), карбоната натрия (229 мг, 2,16 ммоль), 1,4-диоксана (2,7 мл) и воды (0,9 мл) во флаконе продували азотом в течение 5 мин. Добавляли [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (53 мг, 0,073 ммоль). Продувание азотом продолжали в течение еще 2 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 110°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 194а (279 мг, выход 92%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=420 (M+1).
Соединение 195а. Соединение 194а (277 мг, 0,66 ммоль) растворяли в этилформиате (1,6 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 2,3 мл, 9,96 ммоль). Смесь переме- 133 043609 шивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,7 мл, 10,2 ммоль), EtOH (6,6 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (70 мг, 1,01 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 4 ч и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 195а (250 мг, выход 85%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=445 (M+1).
Соединение 196а. Соединение 195а (247 мг, 0,56 ммоль) растворяли в МеОН (5,5 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,19 мл, 0,82 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 196а (217 мг, выход 88%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=445 (M+1).
Т87. Соединение 196а (217 мг, 0,49 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (1,2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (34 мг, 0,12 ммоль) в ДМФ (1,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1,5 ч. Добавляли пиридин (0,12 мл, 1,49 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-30% ацетона в гексанах), получая соединение Т87 (177 мг, выход 82%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,81 (с, 1Н), 7,50 (м, 1Н), 7,40 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,30 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,20 (ддд, J=1,0, 8,4, 9,7 Гц, 1Н), 2,79 (с, 3H), 2,78 (м, 2Н), 2,63 (с, 3H), 2,60 (м, 1Н), 2,24 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,10 (м, 1Н), 1,76 (дк, J=7,3, 13,1 Гц, 1Н), 1,52 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=443 (M+1).
Соединение 194b. Смесь соединения 179 (150 мг, 0,42 ммоль), 2-метилпиридин-5-бороновой кислоты (86 мг, 0,63 ммоль), карбоната натрия (133 мг, 1,25 ммоль), 1,4-диоксана (1,5 мл) и воды (0,5 мл) во флаконе продували азот в течение 5 мин. Добавляли [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (31 мг, 0,042 ммоль). Продувание азотом продолжали в течение еще 2 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 110°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 194b (132 мг, выход 76%) в виде розового пенистого твердого вещества. m/z=416 (M+1).
Соединение 195b. Соединение 194b (130 мг, 0,31 ммоль) растворяли в этилформиате (0,75 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,1 мл, 4,76 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,8 мл, 4,8 ммоль), EtOH (1,6 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (33 мг, 0,47 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 6 ч и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% ацетона в гексанах), получая соединение 195b (102 мг, выход 74%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=441 (M+1).
Соединение 196b. Соединение 195b (100 мг, 0,23 ммоль) растворяли в МеОН (2,2 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,1 мл, 0,43 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 196b. (96 мг, выход 96%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=441 (M+1).
Т88. Соединение 196b (96 мг, 0,22 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,55 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (31 мг, 0,11 ммоль) в ДМФ (0,55 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (53 мкл, 0,66 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-35% ацетона в гексанах), получая соединение Т88 (71 мг, выход 74%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,55 (д, J=2,3 Гц, 1Н), 9,01 (с, 1Н), 8,62 (дд, J=2,3, 8,1 Гц, 1Н), 7,50 (м, 1Н), 7,44 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,32 (дт, J=1,0, 7,5 Гц, 1H), 7,28 (д, J=8,1 Гц, 1Н), 7,20 (ддд, J=1,0, 8,4, 9,6 Гц, 1Н), 2,81 (м, 2Н), 2,66 (с, 3H), 2,61 (м, 1Н), 2,25 (дт, J=2,7, 12,7 Гц, 1Н), 2,11 (м, 1Н), 1,79 (м, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=439 (M+1).
Соединение 194с. Смесь соединения 179 (150 мг, 0,42 ммоль), соединения 187b (125 мг, 0,45
- 134 043609 ммоль), карбоната натрия (133 мг, 1,25 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(П) (15 мг, 0,021 ммоль), 1,4-диоксана (1,5 мл) и воды (0,5 мл) в пробирке продували N2 в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 110°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Водную смывку экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 194с (162 мг, выход 83%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=470 (M+1).
Соединение 195с. Соединение 194с (160 мг, 0,34 ммоль) растворяли в этилформиате (0,82 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,79 мл, 3,42 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,57 мл, 3,42 ммоль), EtOH (3,4 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (36 мг, 0,52 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение ночи и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 195с (133 мг, выход 79%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=495 (M+1).
Соединение 196с. Соединение 195с (131 мг, 0,27 ммоль) растворяли в МеОН (2,6 мл) и ТГФ (0,5 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 92 мкл, 0,40 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 196с (113 мг, выход 86%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=495 (M+1).
Т89. Соединение 196с (112 мг, 0,23 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,55 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (32 мг, 0,11 ммоль) в ДМФ (0,55 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (55 мкл, 0,68 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 2,5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т89 (73 мг, выход 65%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,06 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,94 (с, 1Н), 8,51 (дд, J=2,9, 11,0 Гц, 1Н), 8,22 (дд, J=5,7, 9,2 Гц, 1Н), 8,12 (д, J=4,6 Гц, 1Н), 7,52 (м, 3H), 7,34 (дт, J=1,1, 7,6 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 2,90 (м, 2Н), 2,65 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,18 (м, 1Н), 1,86 (м, 1Н), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=493 (М+1).
Соединение 194d. Смесь соединения 179 (150 мг, 0,42 ммоль), соединения 187с (182 мг, 0,63 ммоль), карбоната натрия (133 мг, 1,25 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(П) (15 мг, 0,021 ммоль), 1,4-диоксана (1,5 мл) и воды (0,5 мл) в пробирке продували N2 в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 110°C в течение 2 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Водную смывку экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая частично очищенное соединение 194d (225 мг, количественный выход) в виде белого пенистого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дальнейшего очистки. m/z=488 (М+1).
Соединение 195d. Соединение 194d (222 мг, 0,46 ммоль) растворяли в этилформиате (1,1 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,6 мл, 6,93 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,2 мл, 7,2 ммоль), EtOH (4,5 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (48 мг, 0,69 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение ночи и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 195d (130 мг, выход 56%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=513 (М+1).
Соединение 196d. Соединение 195d (128 мг, 0,25 ммоль) растворяли в МеОН (2,5 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 86 мкл, 0,37 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 196d (103 мг, выход 80%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=513 (M+1).
Т90. Соединение 196d (103 мг, 0,20 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,5 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (29 мг, 0,10 ммоль) в ДМФ (0,5 мл). Реакци
- 135 043609 онную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (49 мкл, 0,61 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 2,5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т90 (74 мг, выход 72%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,10 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,91 (с, 1Н), 8,38 (ддд, J=1,7, 2,7, 10,9 Гц, 1Н), 8,21 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,53 (м, 1Н), 7,47 (дт, J=1,8, 7,4 Гц, 1Н), 7,32 (м, 3H), 2,90 (м, 2Н), 2,65 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,18 (м, 1Н), 1,85 (м, 1Н), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=511 (M+1).
Соединение 197. К раствору соединения 179 (150 мг, 0,42 ммоль) в метилпирролидоне (0,6 мл) добавляли 1-метилпиперазин (200 мкл 1,80 ммоль). Смесь нагревали при 100°C в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 010% МеОН в CH2Cl2), получая соединение 197 (157 мг, выход 89%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=423 (M+1).
Соединение 198. Соединение 197 (210 мг, 0,50 ммоль) растворяли в этилформиате (1,2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,7 мл, 7,36 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч, при комнатной температуре в течение 4 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,25 мл, 7,50 ммоль), EtOH (5 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (53 мг, 0,76 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение ночи и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-15% МеОН в CH2Cl2), получая соединение 198 (192 мг, выход 86%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=448 (M+1).
Соединение 199. Соединение 198 (188 мг, 0,42 ммоль) растворяли в МеОН (4 мл). Добавляли карбонат калия (174 мг, 1,26 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-20% МеОН в CH2Cl2), получая соединение 199 (176 мг, выход 94%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=448 (M+1).
Т91. Соединение 199 (175 мг, 0,39 ммоль) растворяли в бензоле (4 мл). Добавляли DDQ (97 мг, 0,43 ммоль). Смесь нагревали при 85°C в течение 1 ч и затем охлаждали до к.т. Добавляли CH2Cl2 и водн. насыщ. NaHCO3. Смесь перемешивали в течение 10 мин и экстрагировали CH2Cl2. Объединенный органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в CH2Cl2), получая соединение Т91 (119 мг, выход 68%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,84 (с, 1Н), 7,41 (дддд, J=1,9, 5,2, 7,2, 8,2 Гц, 1Н), 7,33 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,24 (дт, J=1,2, 7,5 Гц, 1Н), 7,13 (ддд, J=1,1, 8,3, 9,6 Гц, 1Н), 3,87 (т, J=5,1 Гц, 4Н), 2,52 (м, 7Н), 2,36 (с, 3H), 2,13 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 1,99 (м, 1Н), 1,66 (м, 1Н), 1,44 (с, 3H), 1,27 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=446 (M+1).
Соединение 200. Смесь соединения 88 (900 мг, 2,61 ммоль), гидробромида N-амидиноморфолина (823 мг, 3,92 ммоль) и карбоната калия (1,08 г, 7,81 ммоль) в EtOH (50 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 70 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 и EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая дигидропиримидин в виде желтого стекла. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (20 мл) и раствор обрабатывали диоксидом марганца (88%, 2,01 г, 20,36 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 24 ч, после чего фильтровали через Celite®. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах), получая соединение 200 (749 мг, выход 63%) в виде прозрачной вязкой маслянистой жидкости. m/z=454 (M+1).
Соединение 201. Раствор соединения 200 (745 мг, 1,64 ммоль) в ТГФ (30 мл) обрабатывали водн. 3N HCl (5,47 мл, 16,4 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток охлаждали до 0°C, осторожно нейтрализовывали с помощью водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 201 (565 мг, выход 84%) в виде маслянистой жидкости. m/z=410 (M+1).
Соединение 202. Раствор соединения 201 (564 мг, 1,38 ммоль) в этилформиате (18 мл, 224 ммоль) охлаждали до 0°C и по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М раствор в МеОН, 1,28 мл, 6,91 ммоль). Холодную баню убирали и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 202 (604 мг, количественный выход) в виде оранжевой маслянистой жидко
- 136 043609 сти. m/z=438 (M+1).
Соединение 203. Раствор соединения 202 (604 мг, 1,38 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (0,80 мл, 13,8 ммоль) и EtOH (12 мл) обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (144 мг, 2,07 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при 60°C в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение 22 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток осторожно распределяли между водн. 10% NH4OH и EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 203 (541 мг, выход 90%) в виде светло-коричневого стекла. m/z=435 (M+1).
Соединение 204. Смесь соединения 203 (541 мг, 1,25 ммоль) и карбоната калия (346 мг, 2,50 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 21 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между водой и Et2O. Водную фазу охлаждали на бане с ледяной водой и подкисляли водн. насыщ. KH2PO4. Подкисленную водную смесь экстрагировали EtOAc (2x40 мл), и объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение 204 (383 мг, выход 71%) в виде прозрачного стекла. m/z=435 (M+1).
Т92. Раствор соединения 204 (327 мг, 0,752 ммоль) в безводном ДМФ (5 мл) охлаждали до 0°C и обрабатывали по каплям раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (118 мг, 0,413 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 30 мин добавляли безводный пиридин (0,61 мл, 7,56 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 60°C в атмосфере аргона в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах), получая частично очищенный продукт, который снова очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-3% EtOAc в CH2Cl2) с получением соединения Т92 (160 мг, выход 49%) в виде стекла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,82 (с, 1Н), 7,42 (ддд, J=1,9, 5,2, 7,2, 8,4 Гц, 1Н), 7,32 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 7,14 (ддд, J=1,0, 8,4, 9,6 Гц, 1Н), 3,82 (м, 8Н), 2,55 (м, 3H), 2,14 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,00 (м, 1Н), 1,67 (дк, J=7,4, 13,2 Гц, 1Н), 1,44 (с, 3H), 1,27 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=433 (M+1).
Соединение 205. Смесь соединения 95 (245 мг, 0,63 ммоль), циклопропилбороновой кислоты (90 мг, 1,05 ммоль), фосфата калия (660 мг, 3,11 ммоль), трициклогексилфосфина (54 мг, 0,19 ммоль), ацетата палладия (24 мг, 0,11 ммоль), толуола (4 мл) и воды (0,2 мл) в пробирке продували N2 в течение 3 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 130°C в течение 4 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% ацетона в гексанах), получая соединение 205 (123 мг, выход 49%) в виде белого твердого вещества. m/z=398 (M+1).
Соединение 206. Соединение 205 (121 мг, 0,30 ммоль) растворяли в этилформиате (0,73 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,05 мл, 4,55 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,76 мл, 4,56 ммоль), EtOH (3 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (43 мг, 0,62 ммоль). Смесь нагревали в течение ночи при 55°C (масляная баня) и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3 и смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% ацетона в гексанах), получая соединение 206 (72 мг, выход 56%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=423 (M+1).
Соединение 207. Соединение 206 (72 мг, 0,17 ммоль) растворяли в МеОН (1,7 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 60 мкл, 0,26 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в гексанах), получая соединение 207 (54 мг, выход 75%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=423 (M+1).
Т93. Соединение 207 (54 мг, 0,13 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,6 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (18 мг, 0,063 ммоль).
Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (31 мкл, 0,38 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% ацетоном в гексанах), получая соединение Т93 (35 мг, выход 65%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,06 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,91 (с, 1Н), 8,67 (дд, J=1,2, 8,8 Гц, 1Н), 8,20 (дд, J=0,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,94 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,76 (ддд, J=1,5, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,61 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 3,22 (ддд, J=1,2, 6,8, 17,9 Гц, 1Н), 3,03 (ддд, J=7,7, 11,2,
- 137 043609
18,3 Гц, 1Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,30 (м, 1Н), 2,22 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,15 (м, 1Н), 1,91 (ддт,
J=6,8, 11,4, 13,3 Гц, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,36 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,35 (м, 2Н), 1,17 (м, 2Н); m/z=421,2 (М+1).
Соединение 94. Соединение 93 (1 г, 2,40 ммоль) растворяли в толуоле (10 мл). Добавляли оксихлорид фосфора(V) (4 г, 26,09 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® Initiator™ при 100°C в течение 60 мин, охлаждали и выливали в лед. После выдерживания в течение 10 мин смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водн. NaHCO3, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт смешивали в бензоле (100 мл) и обрабатывали этиленгликолем (1 г, 16,11 ммоль) и моногидратом п-толуолсульфоновой кислоты (60 мг, 0,32 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч с ловушкой Дина-Старка, охлаждали до комнатной температуры и промывали водой. Органический раствор сушили над MgSO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 94 (550 мг, выход 53%) в виде твердого вещества светлого цвета. m/z=436 (М+1).
Соединение 208. Смесь соединения 94 (550 мг, 1,26 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл). Добавляли циклобутанол (200 мг, 2,77 ммоль) и NaH (60% дисперсия в минеральном масле, 120 мг, 3,00 ммоль). Реакцию перемешивали при 60°C в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 208 (500 мг, выход 84%) в виде белого твердого вещества. m/z=472 (М+1).
Соединение 209. Смесь соединения 208 (500 мг, 1,06 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл) и добавляли водн. 3N HCl (5 мл, 15,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 209 (450 мг, выход 99%) в виде белого твердого вещества. m/z=428 (М+1).
Соединение 210. Соединение 209 (450 мг, 1,05 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 200 мг, 1,11 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 ч реакционную смесь нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 210 (430 мг, выход 90%) в виде пены. m/z=456 (M+1).
Соединение 211. Соединение 210 (430 мг, 0,94 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (660 мг, 9,50 ммоль) и уксусную кислоту (550 мг, 9,15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 211 (425 мг, выход 99%) в виде пены. m/z=453 (M+1).
Соединение 212. Соединение 211 (425 мг, 0,94 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (650 мг, 4,70 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 212 (235 мг, выход 55%) в виде пены. m/z=453 (M+1).
Т94. Соединение 212 (235 мг, 0,52 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (82 мг, 0,29 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т94 (115 мг, выход 49%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,07 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,88 (с, 1Н), 8,76 (м, 1Н), 8,21 (м, 1Н), 7,95 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,77 (ддд, J=1,5, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,62 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 5,34 (м, 1Н), 2,96 (ддд, J=1,1, 6,8, 18,8 Гц, 1Н), 2,72 (ддд, J=7,6, 11,3, 18,9 Гц, 1Н), 2,61 (тд, J=6,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,56 (м, 2Н), 2,22 (м, 4Н), 1,80 (м, 3H) 1,51 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=451 (M+1).
Соединение 213. К суспензии гидрида натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 37 мг, 0,93 ммоль) в ТГФ (1 мл) добавляли циклобутанметанол (86 мкл, 0,91 ммоль) при комнатной температуре. Раствор соединения 94 (200 мг, 0,46 ммоль) в ТГФ (3,5 мл) добавляли при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, при 50°C в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 213 (203 мг, выход 91%).
Соединение 214. К перемешиваемому раствору соединения 213 (203 мг, 0,42 ммоль) в МеОН (1,5 мл) и ТГФ (1,5 мл) добавляли водн. 3N HCl (1,4 мл, 4,2 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили Na2SO4 и концентрировали, получая соединение 214 (193 мг, количественный выход) в виде белого твердого ве- 138 043609 щества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. m/z=442 (M+1).
Соединение 215. Соединение 214 (193 мг, <0,42 ммоль) в этилформиате (1,9 мл, 23,62 ммоль) охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 2,7 мл, 11,69 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и добавляли ТГФ (0,5 мл). После перемешивания в течение еще 1,5 ч добавляли дополнительное количество ТГФ (0,5 мл). Реакцию перемешивали в течение дополнительного 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (2,0 мл, 12 ммоль), EtOH (8 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (84 мг, 1,21 ммоль). Смесь нагревали в течение ночи при 55°C (масляная баня) и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3 и смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 215 (145 мг, выход 71%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Соединение 216. Соединение 215 (143 мг, 0,31 ммоль) растворяли в МеОН (3 мл). Добавляли карбонат калия (123 мг, 0,89 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 060% EtOAc в гексанах), получая соединение 216 (122 мг, выход 85%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Т95. Соединение 216 (121 мг, 0,26 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (1,3 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (37 мг, 0,13 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли пиридин (63 мкл, 0,78 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% ацетона в гексанах), получая соединение Т95 (87 мг, выход 72%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,08 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,88 (с, 1Н), 8,77 (ддд, J=0,6, 1,5, 8,6 Гц, 1Н), 8,22 (тд, J=1,0, 8,4 Гц, 1Н), 7,98 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=1,5, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,63 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 4,49 (м, 1Н), 4,45 (дд, J=6,5, 10,8 Гц, 1Н), 2,96 (ддд, J=1,0, 6,6, 18,7 Гц, 1H), 2,78 (м, 2Н), 2,61 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н) 2,17 (м, 4Н), 1,92 (м, 5Н), 1,52 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=465 (M+1).
Соединение 217а. К суспензии гидрида натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 37 мг, 0,93 ммоль) в ТГФ (1 мл) добавляли циклогексанол (0,097 мл, 0,92 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 10 мин и добавляли при 0°C к раствору соединения 94 (200 мг, 0,46 ммоль) в ТГФ (3,6 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, при 50°C в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 217а (208 мг, выход 90%) в виде белой пены.
Соединение 218а. К перемешиваемому раствору 217а (208 мг, 0,416 ммоль) в МеОН (1,5 мл) и ТГФ (1,5 мл) добавляли водн. 3N HCl (1,5 мл, 4,5 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 218а (200 мг, количественный выход) в виде белой пены. m/z=456,2 (M+1).
Соединение 219а. Соединение 218а (200 мг, <0,416 ммоль) растворяли в этилформиате (1,06 мл, 13,16 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,5 мл, 6,56 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,09 мл, 6,54 ммоль), EtOH (2 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (46 мг, 0,66 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3 и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 219а (88 мг, выход 44%) в виде бледно-желтой пены.
Соединение 220а. К раствору соединения 219а (88 мг, 0,18 ммоль) в МеОН (1 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,063 мл, 0,27 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч, охлаждали до 0°C и нейтрализовывали водн. 10% NaH2PO4 (3 мл). МеОН удаляли выпариванием. Остаток разбавляли водой, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 220а (42 мг, выход 48%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=481,2 (M+1).
Т96. Соединение 220а (42 мг, 0,087 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,5 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (12,5 мг, 0,043 ммоль) в ДМФ (0,5 мл). Реак
- 139 043609 ционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и добавляли пиридин (0,021 мл, 0,262 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2, и смесь промывали водой. Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение Т96 (20 мг, выход 48%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,08 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,89 (с, 1Н), 8,81 (м, 1Н), 8,21 (м, 1Н), 7,99 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,77 (ддд, J=1,4, 6,7, 8,4 Гц, 1Н), 7,62 (ддд, J=1,3, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 5,32 (тт, J=3,8, 8,4 Гц, 1Н), 2,94 (дд, J=6,7, 18,6 Гц, 1Н), 2,72 (ддд, J=7,5, 11,2, 18,8 Гц, 1Н), 2,61 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,19 (м, 2Н), 2,02 (м, 2Н), 1,83 (м, 3H), 1,55 (м, 6Н), 1,52 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=479,2 (М+1).
Соединение 217b. К суспензии гидрида натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 37 мг, 0,93 ммоль) в ТГФ (1 мл) добавляли циклопентанол (0,084 мл, 0,92 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 10 мин и добавляли при 0°C к раствору соединения 94 (200 мг, 0,46 ммоль) в ТГФ (3,6 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, при 50°C в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 217b (160 мг, выход 72%) в виде белой пены.
Соединение 218b. К перемешиваемому раствору 217b (160 мг, 0,329 ммоль) в МеОН (1,0 мл) и ТГФ (1,0 мл) добавляли водн. 3N HCl (1,1 мл, 3,3 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 218b (150 мг, количественный выход) в виде белой пены. m/z=442,2 (M+1).
Соединение 219b. Соединение 218b (150 мг, <0,329 ммоль) растворяли в этилформиате (0,82 мл, 10,2 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,2 мл, 5,24 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,85 мл, 5,10 ммоль), EtOH (2 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (35,4 мг, 0,51 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3 и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 219b (100 мг, выход 65%) в виде белой пены. m/z=467,2 (M+1).
Соединение 220b. К раствору соединения 219b (100 мг, 0,214 ммоль) в МеОН (2 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 0,074 мл, 0,323 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч, охлаждали до 0°C и нейтрализовывали водн. 10% NaH2PO4 (4 мл). МеОН удаляли выпариванием. Остаток разбавляли водой, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 220b (88 мг, выход 88%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=467,2 (M+1).
Т97. Соединение 220b (87 мг, 0,186 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (1,0 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (26,6 мг, 0,093 ммоль) в ДМФ (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и добавляли пиридин (0,045 мл, 0,56 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом (10 мл). Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение Т97 (55 мг, выход 64%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,07 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,89 (с, 1Н), 8,81 (ддд, J=0,6, 1,4, 8,6 Гц, 1Н), 8,21 (ддд, J=0,7, 1,4, 8,5 Гц, 1Н) 7,98 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,77 (ддд, J=1,5, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,62 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 5,63 (тт, J=2,7, 6,1 Гц, 1Н), 2,90 (дд, J=6,4, 18,8 Гц, 1Н), 2,66 (м, 2Н), 1,97 (м, 11Н), 1,52 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=465,2 (M+1).
Соединение 221а и 221b. Смесь соединения 94 (600 мг, 1,37 ммоль) растворяли в ДМФ (5 мл). Добавляли метансульфонамид (660 мг, 6,94 ммоль) и NaH (60% дисперсия в минеральном масле, 170 мг, 4,25 ммоль). Реакцию перемешивали при 80°C в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 221а (250 мг, 37% выход) и 221b (225 мг, 37% выход) в виде пенистого твердого вещества. m/z=495 (соединение 221а, М+1). m/z=445 (соединение 221b, M+1).
Соединение 222а. Соединение 221а (250 мг, 0,51 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл) и водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали.
- 140 043609
Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 222а (180 мг, выход 79%) в виде пены. m/z=451 (M+1).
Соединение 223а. Соединение 222а (180 мг, 0,40 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 150 мг, 0,83 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 ч реакционную смесь нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 223а (175 мг, выход 92%) в виде пены. m/z=479 (M+1).
Соединение 224а. Соединение 223а (175 мг, 0,37 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (255 мг, 3,67 ммоль) и уксусную кислоту (220 мг, 3,66 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 224а (130 мг, выход 75%) в виде пены. m/z=476 (M+1).
Соединение 225а. Соединение 224а (130 мг, 0,27 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (230 мг, 1,66 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 225а (110 мг, выход 85%) в виде пены. m/z=476 (M+1).
Т98. Соединение 225а (110 мг, 0,23 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (37 мг, 0,13 ммоль) в ДМФ (1 мл).
Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т98 (45 мг, выход 41%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,11 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,85 (м, 2Н), 8,23 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 8,00 (м, 1Н), 7,80 (дд, J=6,8, 8,6 Гц, 1Н), 7,68 (дд, J=6,9, 8,5 Гц, 1Н), 3,44 (уш. с, 3H), 2,83 (дд, J=6,7, 17,7 Гц, 1Н), 2,65 (м, 2Н), 2,28 (дд, J=7,6, 14,1 Гц, 1Н), 2,19 (т, J=12,9 Гц, 1Н), 1,88 (м, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,36 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=474 (M+1).
Соединение 222b. Соединение 221b (225 мг, 0,51 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл) и добавляли водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщенным NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 222b (205 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=401 (M+1).
Соединение 223b. Соединение 222b (205 мг, 0,51 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 210 мг, 1,17 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 ч реакционную смесь нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 223b (220 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=429 (M+1).
Соединение 224b. Соединение 223b (220 мг, 0,51 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (360 мг, 5,18 ммоль) и уксусную кислоту (310 мг, 5,16 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 224b (200 мг, выход 92%) в виде пены. m/z=426 (M+1).
Соединение 225b. Соединение 224b (200 мг, 0,47 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (390 мг, 2,82 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 225b (140 мг, выход 70%) в виде пены. m/z=426 (M+1).
Т99. Соединение 225b (140 мг, 0,33 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (52 мг, 0,18 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т99 (45 мг, выход 32%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCU) δ 9,06 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,87 (с, 1Н), 8,82 (м, 1Н), 8,20 (м, 1Н), 7,99 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,75 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,60 (ддд, J=1,3, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 3,16 (с, 6Н), 2,91 (м, 2Н), 2,61 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,22 (м, 2Н), 1,77 (м, 1Н), 1,51 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=424 (M+1).
Соединение 226а. Смесь соединения 94 (300 мг, 0,69 ммоль), 3,5-диметилизоксазол-4-бороновой кислоты (145,4 мг, 1,03 ммоль), карбоната натрия (219 мг, 2,06 ммоль), 1,4-диоксана (2,7 мл) и воды (0,9 мл) продували азотом в течение 10 мин. Добавляли [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (50 мг, 0,069 ммоль) и продувание азотом продол- 141 043609 жали в течение еще 10 мин. Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали до 110°C в микроволновом синтезаторе Biotage® в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 226а (290 мг, выход 85%) в виде белой пены. m/z=497,2 (M+1).
Соединение 227а. К смеси соединения 226а (290 мг, 0,584 ммоль) в МеОН (1,9 мл) и ТГФ (1,9 мл) добавляли водн. 3N HCl (1,9 мл, 5,7 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 2 ч смесь концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 227а (240 мг, выход 91%) в виде белого твердого вещества. m/z=453,2 (M+1).
Соединение 228а. Соединение 227а (240 мг, 0,530 ммоль) растворяли в этилформиате (1,3 мл, 16,2 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 1,8 мл, 7,87 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,3 мл, 7,8 ммоль), EtOH (2 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (55 мг, 0,79 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 16 ч и концентрировали. Остаток разбавляли водн. насыщ. NaHCO3, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 228а (220 мг, выход 87%) в виде белой пены. m/z=478,2 (М+1).
Соединение 229а. К раствору соединения 228а (220 мг, 0,46 ммоль) в МеОН (4 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,16 мл, 0,70 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1,5 ч, охлаждали до 0°C и нейтрализовывали водн. 10% NaH2PO4. МеОН удаляли выпариванием. Остаток разбавляли водой, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 229а (160 мг, выход 73%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=478,2 (M+1).
Т100. Соединение 229а (160 мг, 0,335 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (47,9 мг, 0,168 ммоль) в ДМФ (1,3 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и добавляли пиридин (0,081 мл, 1,0 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-70% ацетона в гексанах), получая соединение Т100 (20 мг, выход 13%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,11 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,91 (с, 1Н), 8,71 (м, 1Н), 8,26 (м, 1Н), 8,03 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,80 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 7,65 (ддд, J=1,3, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 2,82 (м, 2Н), 2,66 (кд, J=6,6, 13,3 Гц, 1Н), 2,42 (с, 3H), 2,29 (с, 3H), 2,27 (м, 2Н), 1,89 (м, 1Н), 1,48 (с, 3H), 1,36 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=476,2 (М+1).
Соединение 226b. Смесь соединения 94 (300 мг, 0,69 ммоль), 4-(бензил(метил) карбамоил)фенилбороновой кислоты (278 мг, 1,03 ммоль), карбоната натрия (219 мг, 2,06 ммоль), 1,4-диоксана (3,3 мл) и воды (1,1 мл) продували азотом в течение 10 мин. Добавляли [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (50 мг, 0,069 ммоль) и продувание азотом продолжали в течение еще 10 мин. Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали до 110°C в микроволновом синтезаторе Biotage® в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали, и остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 226b (416 мг, выход 97%) в виде светло-желтой пены. m/z=625,3 (М+1).
Соединение 227b. К раствору соединения 226b (416 мг, 0,665 ммоль) в МеОН (2,2 мл) и ТГФ (2,2 мл) добавляли водн. 3N HCl (2,2 мл, 6,6 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 2 ч смесь концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 227b (359 мг, выход 93%) в виде желтой пены. m/z=581,3 (М+1).
Соединение 228b. Соединение 227b (355 мг, 0,611 ммоль) растворяли в этилформиате (1,5 мл, 18,6 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 2,1 мл, 9,17 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,53 мл, 9,2 ммоль), EtOH (9 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (63,7 мг, 0,92 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 16 ч и концентрировали. Остаток разбавляли водн. насыщ. NaHCO3, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 060% EtOAc в гексанах), получая соединение 228b (183 мг, выход 49%) в виде белой пены. m/z=606,3 (М+1).
Соединение 229b. К раствору соединения 228b (183 мг, 0,302 ммоль) в МеОН (4 мл) добавляли ме- 142 043609 токсид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,105 мл, 0,458 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1,5 ч, охлаждали до 0°C и нейтрализовывали водн. 10% NaH2PO4. MeOH удаляли выпариванием. Остаток разбавляли водой, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 229b (140 мг, выход 76%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=606,2 (M+1).
Т101. Соединение 229b (140 мг, 0,231 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (33 мг, 0,115 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и добавляли пиридин (0,056 мл, 0,693 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом (10 мл). Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-20% ацетона в гексанах), получая соединение Т101 (110 мг, выход 79%) в виде светло-желтого твердого вещества. Т101 представляет собой смесь амидных изомеров 1:1. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl·,) δ 9,07 (м, 1Н), 8,93 (м, 1Н), 8,68 (м, 1Н), 8,22 (д, J=8,6 Гц, 1Н), 8,00 (м, 1Н), 7,77 (т, J=7,8 Гц, 1Н), 7,63 (м, 5Н), 7,36 (м, 4Н), 7,18 (д, J=7,0 Гц, 1Н), [4,79 (с), 4,56 (с), 1:1, 2Н], [3,07 (с), 2,91 (с), 1:1, 3H], 3,02 (м, 2Н), 2,64 (м, 1Н), 2,24 (м, 2Н), 1,84 (м, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=604,2 (M+1).
Соединение 230а. Смесь соединения 94 (250 мг, 0,573 ммоль), 2-фуранбороновой кислоты (96,3 мг, 0,86 ммоль), карбоната натрия (182 мг, 1,72 ммоль), 1,4-диоксан (3 мл) и воду (1 мл) продували азотом в течение 10 мин. Добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (42 мг, 0,057 ммоль) и продувание азотом продолжали в течение еще 10 мин. Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали до 110°C в микроволновом синтезаторе Biotage® в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование EtOAc 0-60% в гексанах), получая соединение 230а (226 мг, выход 84%) в виде белой пены. m/z=468,2 (M+1).
Соединение 231а. К раствору соединения 230а (226 мг, 0,483 ммоль) в МеОН (1,6 мл) и ТГФ (1,6 мл) добавляли водн. 3N HCl (1,6 мл, 4,8 ммоль) при комнатной температуре. Раствор перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 231а (190 мг, выход 93%) в виде желтой пены. m/z=424,2 (M+1).
Соединение 232а. Соединение 231а (190 мг, 0,449 ммоль) растворяли в этилформиате (1,1 мл, 13,7 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 1,5 мл, 6,56 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,1 мл, 6,6 ммоль), EtOH (б мл) и гидрохлорид гидроксиламина (46,8 мг, 0,67 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 16 ч и концентрировали. Остаток разбавляли водн. насыщ. NaHCO3, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 020% ацетона в гексанах), получая соединение 232а (171 мг, выход 85%) в виде белой пены. m/z=449,2 (M+1).
Соединение 233а. К раствору соединения 232а (171 мг, 0,381 ммоль) в МеОН (4 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,13 мл, 0,57 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1,5 ч, охлаждали до 0°C и нейтрализовывали водн. 10% NaH2PO4. МеОН удаляли выпариванием. Остаток разбавляли водой, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 233а (110 мг, выход 64%) в виде грязно-белой пены. m/z=449,2 (M+1).
Т102. Смесь соединения 233а (90 мг, 0,201 ммоль), DDQ (55 мг, 0,241 ммоль) и бензола (2 мл) перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение Т102 (67 мг, выход 75%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDC13) δ 9,10 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,94 (с, 1Н), 8,78 (м, 1Н), 8,23 (м, 1Н), 8,05 (д, J=4,5 Гц, 1H), 7,79 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 7,73 (тд, J=0,7, 1,6 Гц, 1Н), 7,64 (ддд, J=1,3, 6,8, 8,3 Гц, 1H), 7,45 (тд, J=0,8, 3,6 Гц, 1Н), 6,65 (ддд, J=0, 6, 1,8, 3,6 Гц, 1Н), 3,49 (дд, J=6,5, 18,9 Гц, 1Н), 3,28 (ддд, J=7,4, 11,2, 18,8 Гц, 1Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,5 Гц, 1Н), 2,28 (м, 2Н), 1,92 (дк, J=6,4, 13,1 Гц, 1Н), 1,58 (с, 3H), 1,37 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=447,1 (M+1).
Соединение 230b. Смесь соединения 94 (216 мг, 0,496 ммоль), 2-бензофуранбороновой кислоты (120,4 мг, 0,74 ммоль), карбоната натрия (158 мг, 1,49 ммоль), 1,4-диоксана (3 мл) и воды (1 мл) продували азотом в течение 10 мин. Добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(11) (36,2 мг, 0,049 ммоль) и продувание азотом продолжали в течение еще 10 мин. Реакционный сосуд герметично
- 143 043609 закрывали и нагревали до 110°C в микроволновом синтезаторе Biotage® в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 230b (230 мг, выход 90%) в виде белой пены. m/z=518,2 (M+1).
Соединение 231b. К раствору соединения 230b (230 мг, 0,444 моль) в МеОН (2 мл) и ТГФ (2 мл) добавляли водн. 3N HCl (2 мл, 6 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 231b (195 мг, выход 93%) в виде желтой пены. m/z=474,2 (M+1).
Соединение 232b. Соединение 231b (195 мг, 0,412 ммоль) растворяли в этилформиате (0,99 мл, 12,32 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 1,4 мл, 6,12 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,1 мл, 6,6 ммоль), EtOH (6 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (42,9 мг, 0,617 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 16 ч и концентрировали. Остаток разбавляли водн. насыщ. NaHCO3, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% ацетона в гексанах), получая соединение 232b (136 мг, выход 66%) в виде белой пены. m/z=499,2 (M+1).
Соединение 233b. К раствору соединения 232b (130 мг, 0,261 ммоль) в МеОН (4 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,089 мл, 0,39 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1,5 ч, охлаждали до 0°C и нейтрализовывали водн. 10% NaH2PO4. МеОН удаляли выпариванием. Остаток разбавляли водой, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 233b (93 мг, выход 71%) в виде грязно-белой пены. m/z=499,2 (M+1).
T103. Смесь соединения 233b (93 мг, 0,186 ммоль), DDQ (50,8 мг, 0,224 ммоль) и бензола (2 мл) перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в гексанах), получая соединение T103 (38 мг, выход 41%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCh) δ 9,13 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,95 (с, 1Н), 8,82 (м, 1Н), 8,26 (м, 1Н), 8,09 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,81 (м, 2Н), 7,73 (д, J=7,6 Гц, 1Н), 7,68 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,62 (д, J=8,3 Гц, 1Н), 7,45 (ддд, J=1,3, 7,1, 8,4 Гц, 1Н), 7,35 (т, J=7,6 Гц, 1Н), 3,68 (дд, J=6,5, 18,9 Гц, 1Н), 3,46 (ддд, J=7,7, 11,2, 18,9 Гц, 1Н), 2,67 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,32 (м, 2Н), 1,98 (м, 1Н), 1,61 (с, 3H), 1,40 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=497,2 (M+1).
Соединение 234. Смесь соединения 94 (250 мг, 0,57 ммоль), сложного пинаколового эфира 5-метил2-фуранбороновой кислоты (0,17 мл, 0,86 ммоль) и карбоната натрия (182 мг, 1,72 ммоль) продували азотом в течение 6 мин. Добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (42 мг, 0,057 ммоль) и смесь выдерживали в потоке азота в течение 1 мин. Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали до 110°C в микроволновом синтезаторе Biotage® в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали, и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 234 (345 мг) в виде белой пены. m/z=482,2 (M+1).
Соединение 235. К смеси соединения 234 (345 мг, <0.57 ммоль) в MeOH (2.2 мл) и ТГФ (2.2 мл) добавляли водн. 3 N HCl (2,2 мл, 66 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 3 ч смесь концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над NaSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 235 (207 мг, выход 82% из соединения 94). m/z=438,2 (M+1).
Соединение 236. Соединение 235 (206 мг, 0,47 ммоль) растворяли в этилформиате (1,6 мл, 19,8 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 1,6 мл, 7,05 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,2 мл, 7,2 ммоль), EtOH (3 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (49 мг, 0,71 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 3 ч и концентрировали. Остаток разбавляли водн. насыщ. NaHCO3, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-65% ацетона в гексанах), получая соединение 236 (107 мг, 49% выход). m/z=463,2 (M+1).
Соединение 237. К раствору соединения 236 (107 мг, 0,23 ммоль) в МеОН (3,3 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,08 мл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч, охлаждали до 0°C и нейтрализовывали водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-65% ацетона в гексанах), получая соединение 237 (76 мг, выход 71%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=463,2 (M+1).
- 144 043609
Т104. Соединение 237 (76 мг, 0,17 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (1,8 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (24,5 мг, 0,086 ммоль) в ДМФ (0,7 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1,5 ч и добавляли пиридин (0,041 мл, 0,51 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 2,5 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (100 мл). Смесь промывали водн. насыщ. NaHCO3 (10 мл), водн. 10% Na2SO3 (10 мл) и солевым раствором (10 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-65% ацетона в гексанах), получая соединение Т104 (42 мг, выход 56%) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,94 (с, 1Н), 8,81 (дд, J=1,4, 8,6 Гц, 1Н), 8,22 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 8,05 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,77 (ддд, J=1,5, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,63 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,36 (д, J=3,4 Гц, 1Н), 6,26 (м, 1Н), 3,45 (дд, J=6,2, 19,0 Гц, 1Н), 3,22 (ддд, J=7,7, 11,2, 18,7 Гц, 1Н), 2,62 (м, 1Н), 2,47 (с, 3H), 2,29 (м, 2Н), 1,92 (м, 1Н), 1,56 (с, 3H), 1,37 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=461,2 (M+1).
Соединение 238. Смесь соединения 94 (510 мг, 1,17 ммоль), цианида цинка (206 мг, 1,85 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (135 мг, 0,12 ммоль) взвешивали во флаконе. Флакон был запечатан и содержался под вакуумом. Добавляли N,N-диметилацетамид (продували N2 в течение 5 мин, 5 мл). Флакон наполняли аргоном, нагревали при 120°C в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 238 (433 мг, выход 87%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=427 (M+1).
Соединение 239. К суспензии соединения 238 (100 мг, 0,23 ммоль) в воде (1,25 мл) добавляли водн. H2SO4 (получают разбавлением концентрированной H2SO4 (1,25 мл, 22,5 ммоль) водой (0,63 мл) при комнатной температуре. Смесь нагревали в течение ночи при 100°C, охлаждали до комнатной температуры и выливали в лед (30 г). рН смеси доводили до ~ 8, используя водн. 1N NaOH и экстрагировали EtOAc. Водную фазу обрабатывали NaH2PO4 для доведения рН ~ 5 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали, получая соединение 239 (90 мг, выход 96%) в виде коричневого твердого вещества. m/z=402 (М+1).
Соединение 240. Соединение 239 (88 мг, 0,22 ммоль) в этилформиате (0,53 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,76 мл, 3,29 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и добавляли ТГФ (0,5 мл). Реакцию перемешивали в течение дополнительного 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,55 мл, 3,30 ммоль), EtOH (2,2 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (23 мг, 0,33 ммоль). Смесь нагревали в течение ночи при 55°C (масляная баня) и концентрировали. Добавляли CH2Cl2 и воду. Смесь несколько раз экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (С18, элюирование 0-50% MeCN в воде), получая соединение 240 (51 мг, выход 55%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=427 (М+1).
Соединение 241. К смеси соединения 240 (50 мг, 0,12 ммоль) в CH2Cl2 (1,2 мл) добавляли оксалилхлорид (24 мкл, 0,30 ммоль) и ДМФ (1 капля) последовательно при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч и концентрировали. Неочищенный хлорангидрид растворяли в CH2Cl2 (1,2 мл) и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли триэтиламин (65 мкл, 0,47 ммоль) и ацетамидоксим (13 мг, 0,18 ммоль). После того как реакцию перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 065% ацетона в гексанах), получая соединение 241 (25 мг, выход 44%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=483 (М+1).
Соединение 242. Соединение 241 (25 мг, 0,052 ммоль) в толуоле (5 мл) нагревали с обратным холодильником с ловушкой Дина-Старка в течение 4 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% ацетоном в гексане), получая соединение 242 (21 мг, выход 44%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=465 (М+1).
Соединение 243. Соединение 242 (20 мг, 0,043 ммоль) растворяли в МеОН (0,5 мл). Добавляли карбонат калия (18 мг, 0,13 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 050% ацетоном в гексанах), получая соединение 243 (15 мг, выход 75%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=465 (М+1).
Т105. Соединение 243 (15 мг, 0,032 ммоль) растворяли в бензоле (1 мл). Добавляли DDQ (8 мг, 0,035 ммоль). Смесь нагревали при 85°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2 и водн. насыщ. NaHCO3. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин и экстрагировали CH2Cl2. Объединенный органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0- 145 043609
50% ацетона в гексанах), получая соединение Т105 (11 мг, выход 73%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,13 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,90 (с, 1Н), 8,82 (м, 1Н), 8,25 (м, 1Н), 8,12 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,81 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,69 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 3,67 (дд, J=6,1, 19,7 Гц,
1Н), 3,38 (ддд, J=7,8, 11,1, 19,5 Гц, 1Н), 2,65 (м, 1Н), 2,58 (с, 3H), 2,31 (м, 2Н), 1,95 (м, 1Н), 1,61 (с, 3H),
1,38 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=463 (М+1).
Соединение 244. Смесь гидрохлорида гидроксиламина (66 мг, 0,94 ммоль) и NaHCO3 (79 мг, 0,94 ммоль) в EtOH (1 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли соединение 238 (200 мг, 0,47 ммоль) и EtOH (0,5 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Добавляли EtOAc и воду. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали, получая соединение 244 (198 мг, выход 92%) в виде белого твердого вещества. m/z=460 (М+1).
Соединение 246. К смеси соединения 244 (196 мг, 0,43 ммоль) в АсОН (1 мл) добавляли уксусный ангидрид (60 мкл, 0,64 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин, нагревали при 100°C в течение 16 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли толуол и смесь концентрировали досуха с получением смеси соединения 245 и 246. Смесь растворяли в МеОН (2,8 мл). Водн. Добавляли 3N HCl (1,4 мл, 4,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3 и смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 246 (159 мг, выход 85%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=440 (М+1).
Соединение 247. Соединение 246 (155 мг, 0,35 ммоль) в этилформиате (0,85 мл) охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,81 мл, 3,51 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,58 мл, 3,48 ммоль), EtOH (3,5 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (37 мг, 0,53 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 6 ч и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3 и смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 247 (67 мг, выход 41%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=465 (M+1).
Соединение 248. Соединение 247 (67 мг, 0,14 ммоль) растворяли в МеОН (1,4 мл). Добавляли карбонат калия (60 мг, 0,43 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0100% EtOAc в гексанах), получая соединение 248 (53 мг, выход 79%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=465 (M+1).
Т106. Соединение 248 (53 мг, 0,11 ммоль) растворяли в бензоле (1,1 мл). Добавляли DDQ (29 мг, 0,12 ммоль). Смесь нагревали при 85°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли CH2Cl2 и водн. насыщ. NaHCO3. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин и экстрагировали CH2Cl2. Объединенный органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0100% EtOAc в гексанах), получая частично очищенный продукт, который снова очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-10% МеОН в CH2Cl2) соединение Т106 (28 мг, выход 53%) в виде светло-желтого твердого вещества. % ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,10 (д, J=4,6 Гц, 1Н), 8,91 (с, 1Н), 8,69 (дд, J=1,3, 8,6 Гц, 1Н), 8,23 (м, 1Н), 8,04 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,79 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,5 Гц, 1Н), 7,66 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 3,51 (м, 1Н), 3,29 (ддд, J=7,6, 11,1, 19,2 Гц, 1Н), 2,75 (с, 3H), 2,65 (кв, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (м, 2Н), 1,92 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,37 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=463 (M+1).
Соединение 249. Смесь соединения 94 (250 мг, 0,573 ммоль) в 1,4-диоксане (3 мл) продували N2 в течение 10 мин. Последовательно добавляли 2-(три-н-бутилстаннил)тиазол (0,144 мл, 0,459 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (26,5 мг, 0,023 ммоль), и продувание азотом продолжали в течение еще 10 мин. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 8 ч, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разбавляли EtOAc и обрабатывали водн. 10% KF (10 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и фильтровали. Фильтрат промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в гексанах), получая соединение 249 (168 мг, выход 60%) в виде белой пены. m/z=485,2 (М+1).
Соединение 250. К раствору соединения 249 (168 мг, 0,346 ммоль) в МеОН (2 мл) и ТГФ (2 мл) добавляли водн. 3N HCl (2 мл, 6 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в гексанах), получая соединение 250 (112 мг, выход 73%) в виде желтого твердого вещества. m/z=441,1 (М+1).
Соединение 251. Соединение 250 (112 мг, 0,254 ммоль) растворяли в этилформиате (0,613 мл, 7,62
- 146 043609 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 0,872 мл, 3,81 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,64 мл, 3,84 ммоль), EtOH (4 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (27 мг, 0,389 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 16 ч и концентрировали. Остаток разбавляли водн. насыщ. NaHCO3, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 050% ацетона в гексанах), получая соединение 251 (50 мг, выход 42%) в виде желтой пены. m/z=466,1 (М+1).
Соединение 252. К раствору соединения 251 (50 мг, 0,107 ммоль) в МеОН (1 мл) добавляли карбонат калия (22,2 мг, 0,161 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, охлаждали до 0°C и нейтрализовывали добавлением водн. 10% NaH2PO4. MeOH удаляли выпариванием. Остаток разбавляли водой, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-40% ацетона в гексанах), получая соединение 252 (20 мг, выход 40%) в виде грязно-белой пены. m/z=466,1 (M+1).
Т107. Смесь соединения 252 (20 мг, 0,043 ммоль), DDQ (11,7 мг, 0,051 ммоль) и бензола (1 мл) перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение Т107 (5,4 мг, выход 27%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDQ3) δ 9,10 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 9,02 (с, 1Н), 8,93 (с, 1Н), 8,80 (дд, J=1,3, 8,8 Гц, 1Н), 8,55 (с, 1Н), 8,25 (м, 1Н), 8,08 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,81 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,67 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 3,33 (ддд, J=1,4, 6,9, 17,8 Гц, 1Н), 3,20 (ддд, J=7,5, 10,9, 18,0 Гц, 1Н), 2,67 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,41 (м, 1Н) 2,33 (дт, J=2,7, 12,7 Гц, 1Н), 2,01 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,39 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=464,1 (M+1).
Соединение 253. В герметизируемом флаконе продували азотом смесь соединения 9 (предположительно 16,78 ммоль), гидрохлорида 2-метил-4-хинолинкарбоксимидамида (3,90 г, 17,59 ммоль) и карбоната калия (4,86 г, 35,16 ммоль) в EtOH (17 мл). Флакон герметично закрывали и нагревали до 40°C в течение 2 дней. Смесь концентрировали и остаток разбавляли EtOAc (150 мл) и водой (50 мл) и нагревали при 65°C до тех пор, пока все твердое вещество не окажется в растворе (~ 1,5 ч). Слои разделяли и органический экстракт промывали водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали, концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3), получая соединение 253 (5,35 г, выход 74%) в виде оранжевого пенистого твердого вещества. m/z=432 (M+1).
Соединение 254. В сосуде для микроволновой обработки смесь соединения 253 (1,78 г, 4,12 ммоль) и оксихлорида фосфора(V) (3,8 мл, 40,7 ммоль) в толуоле (12 мл) продували азотом. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 100°C в течение 1 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и осторожно выливали в перемешиваемую суспензию NaHCO3 (17 г, 205 ммоль) в воде (100 мл). После перемешивания в течение 30 мин смесь экстрагировали EtOAc (200 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая смесь кеталя и кетона (1,70 г) в виде темно-желтого пенистого твердого вещества. Необработанный продукт растворяли в бензоле (50 мл) и обрабатывали этиленгликолем (2,3 мл, 41,2 ммоль) и моногидратом п-толуолсульфоновой кислоты (0,078 г, 0,41 ммоль). Смесь кипятили с ловушкой Дина-Старка в течение 4 ч, охлаждали и распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали, концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 254 (1,56 г, выход 84%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=450 (M+1).
Соединение 255а. В герметизируемом флаконе дегазировали азотом смесь соединения 254 (0,40 г, 0,89 ммоль), 3-фторфенилбороновой кислоты (0,19 г, 1,36 ммоль), фосфата калия (0,57 г, 2,68 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (0,10 г, 0,088 ммоль) в 1,4-диоксане (9 мл). Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь распределяли между водн. 1N NaOH (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали, концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 255а (0,40 г, выход 88%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=510 (M+1).
Соединение 256а. Раствор соединения 255а (0,40 г, 0,79 ммоль) и водн. 3N HCl (5 мл, 15 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH и экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 256а (0,32 г, выход 88%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=466 (M+1).
- 147 043609
Соединение 257а. К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соединения 256а (0,32 г, 0,68 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,37 мл, 2,05 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 257а (0,29 г, выход 85%) в виде желтооранжевого пенистого твердого вещества. m/z=494 (M+1).
Соединение 258а. К раствору соединения 257а (0,29 г, 0,59 ммоль) в EtOH (10 мл) добавляли уксусную кислоту (0,34 мл, 5,93 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (0,062 г, 0,89 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч, при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 258а (0,27 г, выход 94%) в виде желто-оранжевого пенистого твердого вещества. m/z=491 (M+1).
Соединение 259а. Раствор соединения 258а (0,27 г, 0,55 ммоль) в МеОН (6 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,38 г, 2,75 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали, концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 259а (0,18 г, выход 67%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=491 (M+1).
Т108. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 259а (0,18 г, 0,37 ммоль) в дегазированном ДМФ (5 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,057 г, 0,20 ммоль) в ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (0,30 мл, 3,72 ммоль). Ледяную баню убирали, и смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали, концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т108 (0,069 г, выход 39%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,93 (с, 1Н), 8,58 (дд, J=0,8, 8,4, 1Н), 8,13 (дд, J=0,4, 8,4 Гц, 1Н), 7,87 (с, 1Н), 7,74 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,57 (ддд, J=1,3, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 7,51 (дт, J=5,6, 8,0 Гц, 1Н), 7,40 (тд, J=1,2, 7,7 Гц, 1Н) 7,34 (ддд, J=1,6, 2,6, 9,3 Гц, 1Н), 7,22 (ддт, J=1,0, 2,6, 8,3 Гц, 1Н), 3,03 (м, 2Н), 2,86 (с, 3H), 2,65 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,21 (тдд, J=2,8, 5,8, 12,2 Гц, 1Н), 1,84 (ддт, J=7,4, 10,1, 13,5 Гц, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=489 (M+1).
Соединение 255b. В герметизируемом дегазировали азотом флаконе смесь соединения 254 (0,40 г, 0,89 ммоль), 4-фторфенилбороновой кислоты (0,19 г, 1,36 ммоль), фосфата калия (0,57 г, 2,69 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (0,10 г, 0,088 ммоль) в 1,4-диоксане (9 мл). Флакон герметично закрывали и нагревали до 90°C в течение 16 ч. Смесь охлаждали и распределяли между водн. 1N NaOH (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 255b (0,39 г, выход 86%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=510 (M+1).
Соединение 256b. Раствор соединения 255b (0,39 г, 0,77 ммоль) и водн. 3N HCl (2,6 мл, 7,8 ммоль) в МеОН (8 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH и экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 256b (0,35 г, выход 98%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=466 (M+1).
Соединение 257b. К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соединения 256b (0,35 г, 0,75 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,41 г, 2,28 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 257b (0,31 г, выход 83%) в виде оранжевого пенистого твердого вещества. m/z=494 (M+1).
Соединение 258b. Раствор соединения 257b (310 мг, 0,627 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (0,36 мл, 6,28 ммоль) и EtOH (10 мл) обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (65 мг, 0,935 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при 60°C в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение 24 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток осторожно распределяли между водн. 10% NH4OH и EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 258b (357 мг) в виде желтого стекла. m/z=491 (M+1).
Соединение 259b. Смесь соединения 258b (все с последней стадии) и карбоната калия (201 мг, 1,45 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между водой и Et2O. Водную фазу охлаж- 148 043609 дали на бане с ледяной водой и подкисляли водн. насыщ. KH2PO4. Подкисленную водную смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 259b (167 мг, 54% выход из соединения
257b) в виде белого стекла. m/z=491 (M+1).
Т109. Раствор соединения 259b (167 мг, 0,34 ммоль) в дегазированном ДМФ (5 мл) охлаждали до 0°C и обрабатывали по каплям раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (53 мг, 0,185 ммоль) в дегазированном ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 30 мин добавляли безводный пиридин (0,27 мл, 3,35 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 60°C в атмосфере аргона в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т109 (90 мг, выход 54%) в виде белого аморфного твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,93 (с, 1Н), 8,58 (дд, J=1,4, 8,6 Гц, 1Н), 8,13 (ддд, J=0,6, 1,3, 8,5 Гц, 1Н), 7,86 (с, 1Н), 7,74 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,65 (м, 2Н), 7,56 (ддд, J=1,3, 6,9, 8,4 Гц, 1Н), 7,22 (м, 2Н), 3,03 (м, 2Н), 2,86 (с, 3H), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,20 (тдд, J=2,8, 5,9, 13,7 Гц, 1Н), 1,84 (ддт, J=7,2, 10,2, 13,5 Гц, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=489 (M+1).
Соединение 260а. Гидрид натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 0,066 г, 1,65 ммоль) добавляли порциями к перемешиваемому раствору циклобутанола (0,12 г, 1,66 ммоль) в ТГФ (10 мл) при комнатной температуре в течение 10 мин. Смесь перемешивали в течение 1 ч и обрабатывали соединением 254 (0,50 г, 1,11 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в атмосфере азота в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и гасили водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Растворитель выпаривали in vacuo и остаток экстрагировали EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 260а (0,54 г, количественный выход) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=486 (M+1).
Соединение 261а. Раствор соединения 260а (0,54 г, предположительно 1,11 ммоль) и водн. 3N HCl (3,7 мл, 11,1 ммоль) в МеОН (11 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали, охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH и экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 261а (0,52 г) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=442 (M+1).
Соединение 262а. К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соединения 261а (все с последней стадии) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,61 мл, 3,39 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 262а (0,51 г, выход 98% из соединения 260а) в виде оранжевого пенистого твердого вещества. m/z=470 (M+1).
Соединение 263а. К раствору соединения 262а (0,51 г, 1,08 ммоль) в EtOH (10 мл) добавляли уксусную кислоту (0,62 мл, 10,83 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (0,12 г, 1,73 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в атмосфере N2 в течение 2 ч, при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 263а (0,47 г, выход 93%) в виде желто-оранжевого пенистого твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Соединение 264а. Раствор соединения 263а (0,47 г, 1,01 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали карбонатом калия (0,71 г, 5,14 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 264а (0,33 г, выход 70%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Т110. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 264а (0,33 г, 0,71 ммоль) в дегазированном ДМФ (5 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,11 г, 0,38 ммоль) в ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (0,57 мл, 7,06 ммоль). Ледяную баню убирали, и смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т110 (0,11 г, выход 33%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц,
- 149 043609
CDCl3) δ 8,89 (с, 1Н), 8,61 (дд, J=0,8, 8,8 Гц, 1Н), 8,12 (дд, J=0,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,79 (с, 1Н), 7,73 (ддд, J=1,5,
6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,54 (ддд, J=1,3, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 5,34 (м, 1Н), 2,95 (ддд, J=0,8, 6,8, 18,8 Гц, 1Н), 2,86 (с,
3H), 2,72 (ддд, J=7,6, 11,5, 18,8 Гц, 1Н), 2,60 (кд, J=6,9, 13,8 Гц, 1Н), 2,52 (м, 2Н), 2,22 (м, 4Н), 1,80 (м,
3H), 1,51 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=465 (М+1).
Соединение 260b. Соединение 254 (800 мг, 1,78 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл). Добавляли циклопентанол (600 мг, 6,97 ммоль) и гидрид натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 280 мг, 7,00 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 260b (850 мг, выход 95%) в виде пены. m/z=500 (М+1).
Соединение 261b. Смесь соединения 260b (850 мг, 1,70 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл) и водн. 3N HCl (5 мл, 15 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, затем сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 261b (775 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=456 (М+1).
Соединение 262b. Соединение 261b (775 мг, 1,70 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186,5 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 600 мг, 3,33 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 ч смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 262b (825 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=484 (М+1).
Соединение 263b. Соединение 262b (825 мг, 1,70 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (1,2 г, 17,26 ммоль) и АсОН (1 г, 16,65 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 263b (820 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=481 (М+1).
Соединение 264b. Соединение 263b (820 мг, 1,70 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (1,2 г, 8,68 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 264b (570 мг, выход 70%) в виде пены. m/z=481 (М+1).
T111. Соединение 264b (570 мг, 1,19 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли бром (210 мг, 1,31 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Ледяную баню убирали. Реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение T111 (75 мг, выход 13%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,90 (с, 1Н), 8,66 (дд, J=1,3, 8,7 Гц, 1Н), 8,12 (м, 1Н), 7,82 (с, 1Н), 7,72 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,3 Гц, 1Н) 7,54 (ддд, J=1,3, 6,7, 8,3 Гц, 1Н), 5,62 (тт, J=2,7, 6,1 Гц, 1Н), 2,90 (м, 1Н), 2,86 (с, 3H), 2,65 (м, 2Н), 2,18 (м, 2Н), 1,81 (м, 9Н), 1,51 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=479 (М+1).
Соединение 265. Соединение 9 (1,1 г, 3,71 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид хиназолин-4-карбоксимидамида (0,6 г, 2,88 ммоль) и карбонат калия (1 г, 7,24). Реакционную смесь перемешивали при 40°C в течение 2 дней, охлаждали и концентрировали. Остаток обрабатывали водой (20 мл) и EtOAc (100 мл) и нагревали при 65°C в течение 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 265 (1,05 г, выход 68%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=419 (M+1).
Соединение 266. Соединение 265 (1,05 г, 2,51 ммоль) растворяли в толуоле (8 мл). Добавляли оксихлорид фосфора(V) (4 г, 26,09 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® Initiator™ при 100°C в течение 60 мин, охлаждали и выливали в лед. После выдерживания в течение 10 мин смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водн. NaHCO3, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 035% EtOAc в гексанах), получая смесь кеталя и кетона (600 мг). Смесь смешивали в бензоле (100 мл) и обрабатывали этиленгликолем (1 г, 16,11 ммоль) и моногидратом п-толуолсульфоновой кислоты (60 мг, 0,32 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч с ловушкой Дина-Старка, охлаждали до комнатной температуры и промывали водой. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 266 (300 мг, выход 27%) в виде твердого вещества светлого цвета. m/z=437 (M+1).
Соединение 267. Соединение 266 (300 мг, 0,69 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл). Добавляли цикло- 150 043609 бутанол (75 мг, 1,04 ммоль) и NaH (60% дисперсия в минеральном масле, 45 мг, 1,13 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 267 (300 мг, выход 92%) в виде пены. m/z=473 (М+1).
Соединение 268. Смесь соединения 267 (300 мг, 0,63 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл) и водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 268 (220 мг, выход 81%) в виде белого твердого вещества. m/z=429 (М+1).
Соединение 269. Соединение 268 (200 мг, 0,47 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 170 мг, 0,94 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 269 (215 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=457 (М+1).
Соединение 270. Соединение 269 (215 мг, 0,47 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (335 мг, 4,82 ммоль) и уксусную кислоту (280 мг, 4,66 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 270 (210 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=454 (М+1).
Соединение 271. Соединение 270 (210 мг, 0,46 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (310 мг, 2,24 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 271 (70 мг, выход 33%) в виде пены. m/z=454 (M+1).
Т112. Соединение 271 (70 мг, 0,15 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (25 мг, 0,087 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т112 (45 мг, выход 65%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,50 (с, 1Н), 8,85 (с, 1Н), 8,30 (ддд, J=0,7, 1,5, 8,5 Гц, 1Н), 8,17 (тд, J=0,9, 8,6 Гц, 1Н), 7,97 (ддд, J=1,4, 6,9, 8,5 Гц, 1Н), 7,67 (ддд, J=1,2, 6,9, 8,3 Гц, 1Н), 5,37 (м, 1Н), 2,97 (ддд, J=0,9, 6,7, 19,0 Гц, 1Н), 2,74 (ддд, J=7,6, 11,3, 18,8 Гц, 1Н), 2,60 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,47 (м, 2Н), 2,20 (м, 4Н), 1,84 (м, 2Н), 1,65 (м, 1Н), 1,50 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=452 (M+1).
Соединение 272а. Соединение 266 (760 мг, 1,74 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (8 мл). Добавляли карбонат калия (725 мг, 5,24 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (200 мг, 0,27 ммоль) и 3-фторфенилбороновую кислоту (365 мг, 2,61 ммоль). Смесь продували азотом в течение 10 мин и перемешивали при 90°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 272а (510 мг, выход 59%) в виде пены. m/z=497 (M+1).
Соединение 273а. Соединение 272а (510 мг, 1,02 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл) и добавляли водн. 3N HCl (5 мл, 15,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 273а (460 мг, выход 99%) в виде пены. m/z=453 (М+1).
Соединение 274а. Соединение 273а (460 мг, 1,01 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 200 мг, 1,11 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 274а (490 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=481 (M+1).
Соединение 275а. Соединение 274а (490 мг, 1,01 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (710 мг, 10,22 ммоль) и уксусную кислоту (615 мг, 10,12 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 275а (440 мг, выход 91%) в виде пены. m/z=478 (M+1).
Соединение 276а. Соединение 275а (440 мг, 0,92 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (650 мг, 4,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Ос- 151 043609 таток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 276а (270 мг, выход 61%) в виде пены. m/z=478 (M+1).
Т113. Соединение 276а (270 мг, 0,57 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (90 мг, 0,31 ммоль) в ДМФ (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т113 (115 мг, выход 43%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,53 (с, 1Н), 8,89 (с, 1Н), 8,37 (ддд, J=0,6, 1,4, 8,5 Гц, 1Н), 8,19 (тд, J=0,9, 8,4 Гц, 1Н), 7,99 (ддд, J=1,4, 6,9, 8,4 Гц, 1Н), 7,72 (ддд, J=1,2, 6,9, 8,3 Гц, 1Н), 7,49 (дт, J=5,6, 8,0 Гц, 1Н), 7,39 (ддд, J=1,1, 1,6, 7,7 Гц, 1Н), 7,33 (ддд, J=1,5, 2,5, 9,2 Гц, 1Н), 7,20 (ддт, J=1,1, 2,6, 8,4 Гц, 1Н), 3,06 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,32 (дт, J=2,7, 12,7 Гц, 1Н), 2,22 (тдд, J=3,2, 5,9, 13,6 Гц, 1Н), 1,87 (м, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=476 (M+1).
Соединение 272b. Соединение 266 (780 мг, 1,79 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (8 мл). Добавляли карбонат калия (740 мг, 5,35 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (210 мг, 0,29 ммоль) и 4-фторфенилбороновую кислоту (375 мг, 2,68 ммоль). Смесь продували азотом в течение 10 мин и перемешивали при 90°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 272b (650 мг, выход 73%) в виде пены. m/z=497 (M+1).
Соединение 273b. Соединение 272b (650 мг, 1,31 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл) и добавляли водн. 3N HCl (5 мл, 15,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 273b (595 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=453 (M+1).
Соединение 274b. Соединение 273b (595 мг, 1,31 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл, 186 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 230 мг, 1,28 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 274b (620 мг, выход 98%) в виде пены. m/z=481 (M+1).
Соединение 275b. Соединение 274b (620 мг, 1,29 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (900 мг, 12,95 ммоль) и уксусную кислоту (780 мг, 12,98 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 275b (540 мг, выход 88%) в виде пены. m/z=478 (M+1).
Соединение 276b. Соединение 275b (540 мг, 1,13 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (650 мг, 4,70 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 276b (290 мг, выход 54%) в виде пены. m/z=478 (M+1).
Т114. Соединение 276b (290 мг, 0,61 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (96 мг, 0,34 ммоль) в ДМФ (1 мл) и смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т114 (125 мг, выход 43%) в виде пены. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,53 (с, 1Н), 8,89 (с, 1Н), 8,37 (ддд, J=0,6, 1,4, 8,5 Гц, 1Н), 8,19 (тд, J=0,9, 8,5 Гц, 1Н), 7,99 (ддд, J=1,4, 6,9, 8,5 Гц, 1Н), 7,71 (ддд, J=1,2, 6,9, 8,3 Гц, 1Н), 7,63 (м, 2Н), 7,20 (м, 2Н), 3,07 (м, 2Н), 2,64 (кв., J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,32 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,22 (тдд, J=3,1, 6,0, 13,8 Гц, 1Н), 1,86 (м, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=476 (M+1).
Соединение 277. Смесь соединения 170d (0,99 г, 1,94 ммоль) и диоксида селена (0,44 г, 3,96 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) нагревали при 100°C в атмосфере азота в течение 1 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через слой Celite®. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 277 (0,87 г, выход 85%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=524 (M+1).
Соединение 278. Раствор соединения 277 (0,46 г, 0,88 ммоль) в EtOH (10 мл) обрабатывали NaBH4 (0,033 г, 0,87 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 278 (0,45 г, выход 98%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=526 (M+1).
Соединение 279. К раствору соединения 278 (0,45 г, 0,86 ммоль) в CH2Cl2 (9 мл) температуры 0°C
- 152 043609 добавляли раствор трифторида(диэтиламино)серы (0,28 г, 1,74 ммоль) в CH2Cl2 (2 мл). Полученный синий раствор перемешивали при 0°C в течение 2 ч, затем распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 279 (0,27 г, выход 60%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=528 (M+1).
Соединение 280. Раствор соединения 279 (0,27 г, 0,51 ммоль) и водн. 3N HCl (1,7 мл, 5,1 ммоль) в МеОН (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали, охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH и экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 280 (0,25 г, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=484 (M+1).
Соединение 281. Раствор соединения 280 (0,25 г, 0,51 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) при комнатной температуре обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в метаноле, 0,30 мл, 1,60 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 281 (0,25 г, выход 95%) в виде оранжевого пенистого твердого вещества. m/z=512 (M+1).
Соединение 282. Раствор соединения 281 (0,25 г, 0,48 ммоль) и уксусной кислоты (0,28 мл, 4,89 ммоль) в EtOH (5 мл) обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (0,051 г, 0,73 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 282 (0,23 г, выход 92%) в виде оранжево-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=509 (M+1).
Соединение 283. Смесь соединения 282 (0,23 г, 0,45 ммоль) и карбоната калия (0,31 г, 2,24 ммоль) в МеОН (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали, и остаток осторожно распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 283 (0,14 г, выход 61%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=509 (M+1).
Т115. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 283 (0,14 г, 0,28 ммоль) в дегазированном ДМФ (5 мл) добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,043 г, 0,15 ммоль). После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (0,22 мл, 2,72 ммоль). Ледяную баню убирали и смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали и остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т115 (0,071 г, выход 51%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDQ3) δ 8,93 (с, 1Н), 8,64 (дд, J=0,8, 8,4 Гц, 1Н), 8,16 (м, 2Н), 7,79 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,5 Гц, 1Н), 7,64 (ддд, J=1,3, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 5,75 (д, J=46,9 Гц, 2Н), 2,90 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,32 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,18 (м, 1Н), 1,86 (м, 1Н), 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=507 (M+1).
Соединение 284. Раствор соединения 278 (0,815 г, 1,55 ммоль) и водн. 3N HCl (5,2 мл, 15,6 ммоль) в МеОН (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали; остаток осторожно распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 284 (0,69 г, выход 92%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=482 (M+1).
Соединение 285. К перемешиваемому при комнатной температуре раствору соединения 284 (0,69 г, 1,43 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,81 мл, 4,32 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 285 (0,707 г, выход 97%) в виде оранжевого пенистого твердого вещества. m/z=510 (M+1).
Соединение 286. Раствор соединения 285 (0,707 г, 1,39 ммоль) и уксусной кислоты (0,80 мл, 13,99 ммоль) в EtOH (25 мл) обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (0,14 г, 2,01 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч, после чего при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали, остаток распределяли между водн. насыщ. раствором NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование
- 153 043609
50% EtOAc в гексанах), получая соединение 286 (0,43 г, выход 61%) в виде оранжевого пенистого твердого вещества. m/z=507 (M+1).
Соединение 287. Смесь соединения 286 (0,43 г, 0,85 ммоль) и карбоната калия (0,62 г, 4,49 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Смесь концентрировали; остаток осторожно распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах), получая соединение 287 (0,30 г, выход 70%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=507 (M+1).
Т116. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 287 (0,30 г, 0,59 ммоль) в бензоле (10 мл) добавляли одной порцией DDQ (0,15 г, 0,66 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°C в течение 0,5 ч. Смесь охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. Na2CO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование от 25% до 75% EtOAc в гексанах), получая соединение Т116 (0,047 г, выход 16%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 10,31 (с, 1Н), 8,91 (с, 1Н), 8,73 (дд, J=1,3, 8,6 Гц, 1Н), 8,59 (с, 1Н), 8,37 (м, 1Н), 7,88 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,51 (м, 2Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 2,91 (м, 2Н), 2,65 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,32 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,19 (м, 1Н), 1,87 (м, 1Н) 1,61 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=503 (M+1).
Неочищенное соединение 288 (0,075 г) также получали в виде темно-желтого твердого вещества из колонки. Образец снова очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3), получая соединение 288 (0,028 г, 9% выход из соединения 287) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества, которое все еще оставалось неочищенным. m/z=505 (M+1).
Т117. Смесь соединения 288 (0,028 г, 0,055 ммоль) и ацетата натрия (50 мг, 0,61 ммоль) в уксусном ангидриде (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая Т117 (0,015 г, выход 50%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,93 (с, 1Н), 8,64 (дд, J=1,4, 8,7 Гц, 1Н), 8,19 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 8,05 (с, 1Н), 7,78 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,63 (ддд, J=1,3, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 5,48 (с, 2Н), 2,91 (м, 2Н), 2,65 (кд, J=6,7, 13,3 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,21 (с, 3H), 2,19 (м, 1Н), 1,87 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=547 (M+1).
Соединение 289. К перемешиваемому раствору соединения 4 (30,37 г, предположительно 145,2 ммоль) и п-толуолсульфоната пиридиния (3,60 г, 14,32 ммоль) в CH2Cl2 (400 мл) по каплям добавляли 3,4-дигидро-2H-пиран (14,6 мл, 160,0 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (400 мл) и водн. насыщ. NaHCO3 (400 мл). Органический экстракт промывали водн. насыщ. KH2PO4 (400 мл), солевым раствором (400 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах), получая соединение 289 (26,86 г, выход 66%) в виде вязкой бесцветной маслянистой жидкости. m/z=279 (M+1).
Соединение 290. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору соединения 289 (10,16 г, 36,49 ммоль) в бензоле (145 мл) порциями добавляли трет-бутоксид калия (4,09 г, 36,45 ммоль) в течение 30 мин. После добавления полученную темную суспензию нагревали при 60°C в течение 30 мин, охлаждали до 0°C и обрабатывали по каплям добавлением подметана (6,8 мл, 109,2 ммоль). Смеси давали медленно нагреться до комнатной температуры в течение ночи и гасили водн. насыщ. KH2PO4 (200 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (200 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 10% EtOAc в гексанах), получая соединение 290 (8,60 г, выход 80%) в виде вязкой светло-желтой маслянистой жидкости. m/z=293 (M+1).
Соединение 291. Раствор соединения 290 (10,63 г, 36,35 ммоль) и п-толуолсульфоната пиридиния (0,91 г, 3,62 ммоль) в EtOH (100 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере азота в течение ночи. Смесь охлаждали и концентрировали. Остаток разделяли между водн. 1N HCl (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3 и солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах), получая соединение 291 (6,32 г, выход 83%) в виде белого воскообразного твердого вещества. m/z=209 (M+1).
Соединение 292. Раствор соединения 291 (6,32 г, 30,34 ммоль), этиленгликоля (17 мл, 305 ммоль) и моногидрата п-толуолсульфоновой кислоты (0,58 г, 3,05 ммоль) в бензоле (100 мл) нагревали с обратным холодильником с ловушкой Дина-Старка в течение ночи. Смесь охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах), получая соединение 292 (7,68
- 154 043609 г, количественный выход) в виде желтого воскообразного твердого вещества. m/z=253 (M+1).
Соединение 293. Смесь соединения 292 (1,39 г, 5,51 ммоль) и 20 мас.% гидроксида палладия на угле (0,30 г) в МеОН (60 мл) гидрировали (1 атм) при комнатной температуре в течение 7 дней. Катализатор удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали, получая смесь кеталя и кетона (1,42 г). Смесь растворяли в бензоле (100 мл) и обрабатывали этиленгликолем (3,1 мл, 55,6 ммоль) и моногидратом птолуолсульфоновой кислоты (0,11 г, 0,58 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в ловушке Дина-Старка в течение 4 ч, затем охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали, концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах), получая соединение 293 (0,92 г, выход 66%) в виде смолистого белого твердого вещества. m/z=237 (M-OH).
Соединение 294. Соединение 293 (0,92 г, 3,62 ммоль) в CH2Cl2 (50 мл) обрабатывали MgSO4 (0,44 г, 3,66 ммоль) и дихроматом пиридиния (6,82 г, 18,13 ммоль). После перемешивания смеси при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч добавляли дополнительное количество дихромата пиридиния (3,41 г, 9,06 ммоль). Смесь перемешивали в течение второй ночи и концентрировали. Остаток разбавляли Et2O (50 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и фильтровали через слой Celite®. Фильтрат концентрировали, получая соединение 294 (0,81 г, выход 88%) в виде грязно-белого смолистого твердого вещества. m/z=253 (M+1).
Соединение 295. Раствор соединения 294 (0,61 г, 2,43 ммоль), 2-фторбензальдегида (0,33 г, 2,66 ммоль) и фторида калия (40 мас.% на оксиде алюминия, 0,53 г, 3,65 ммоль) в EtOH (8 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Смесь фильтровали через слой Celite® и фильтрат концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (100 мл) и EtOAc (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 5% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение 295 (0,59 г, выход 68%) в виде светло-желтого воскообразного твердого вещества. m/z=359 (M+1).
Соединение 296а. Смесь соединения 295 (0,59 г, 1,65 ммоль), 4-хинолинкарбоксимидамида гидрохлорида (0,51 г, 2,46 ммоль) и карбоната калия (0,68 г, 4,92 ммоль) в EtOH (16 мл) нагревали с обратным холодильником в атмосфере азота в течение ночи. Смесь охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая дигидропиримидин. Необработанный продукт растворяли в CH2Cl2 (50 мл) и обрабатывали диоксидом марганца (88%, 0,81 г, 8,20 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 296а (0,62 г, выход 74%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=510 (M+1).
Соединение 297а. Раствор соединения 296а (0,62 г, 1,22 ммоль) и водн. 3N HCl (2,0 мл, 6,0 ммоль) в МеОН (12 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH и экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 297а (0,60 г, количественный выход) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=466 (М+1).
Соединение 298а. Раствор соединения 297а (все с последней стадии) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в метаноле, 0,70 мл, 3,73 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. раствором KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 298а (0,58 г, выход 96%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=494 (М+1).
Соединение 299а. К раствору соединения 298а (0,58 г, 1,17 ммоль) в EtOH (12 мл) добавляли уксусную кислоту (0,70 мл, 12,23 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (0,13 г, 1,87 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч, при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 299а (0,56 г, выход 97%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=491 (М+1).
Соединение 300а. Смесь соединения 299а (0,56 г, 1,14 ммоль) и карбоната калия (0,79 г, 5,72 ммоль) в МеОН (11 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч. После фильтрации фильтрат концентрировали и остаток осторожно распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 300а (0,41 г, выход 73%) в виде светло-желтого пени
- 155 043609 стого твердого вещества. m/z=491 (М+1).
Т118. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 300а (0,41 г, 0,84 ммоль) в дегазированном ДМФ (5 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,13 г, 0,45 ммоль) в ДМФ (2 мл). После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (0,7 мл, 8,67 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т118 (0,22 г, выход 54%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,08 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,93 (с, 1Н), 8,69 (дд, J=0,8, 8,4 Гц, 1Н), 8,21 (дд, J=0,4, 8,4 Гц, 1Н), 8,01 (д, J=4,6 Гц, 1Н), 7,77 (ддд, J=1,2, 6,6, 7,9 Гц, 1Н), 7,63 (тдд, J=1,0, 6,8, 7,8 Гц, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,33 (дт, J=1,0, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 2,91 (дд, J=4,7, 8,6 Гц, 2Н), 2,39 (дд, J=2,9, 12,2 Гц, 1Н), 2,02 (м, 2Н), 1,65 (с, 3H), 1,34 (с, 3H), 1,28 (с, 3H); m/z=489 (М+1).
Соединение 296b. Смесь соединения 295 (0,54 г, 1,51 ммоль), гидрохлорида 2-метил-4хинолинкарбоксимидамида (0,42 г, 1,89 ммоль) и карбоната калия (0,63 г, 4,56 ммоль) в EtOH (5 мл) нагревали с обратным холодильником в атмосфере азота в течение ночи. Смесь охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая дигидропиримидин. Необработанный продукт растворяли в CH2Cl2 (50 мл) и обрабатывали диоксидом марганца (88%, 0,75 г, 7,59 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 296b (0,62 г, выход 78%) в виде светложелтого пенистого твердого вещества. m/z=524 (М+1).
Соединение 297b. Раствор соединения 296b (0,24 г, 0,45 ммоль) и водн. 3N HCl (1,5 мл, 4,5 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH и экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 297b (0,22 г, количественный выход) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=480 (М+1).
Соединение 298b. Раствор соединения 297b (0,22 г, 0,45 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в метаноле, 0,26 мл, 1,39 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 298b (0,20 г, выход 86%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=508 (М+1).
Соединение 299b. К раствору соединения 298b (0,20 г, 0,39 ммоль) в EtOH (40 мл) добавляли уксусную кислоту (0,23 мл, 4,02 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (0,042 г, 0,60 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч. при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 299b (0,18 г, выход 91%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=505 (М+1).
Соединение 300b. Смесь соединения 299b (0,18 г, 0,36 ммоль) и карбоната калия (0,24 г, 1,74 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч. После фильтрации фильтрат концентрировали. Остаток был аккуратно распределен между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 30-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 300b (0,088 г, выход 49%) в виде светложелтого пенистого твердого вещества. m/z=505 (М+1).
Т119. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 300b (0,088 г, 0,17 ммоль) в дегазированном ДМФ (5 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,027 г, 0,094 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (0,14 мл, 1,73 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 10% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение Т119 (0,031 г, выход 36%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,93 (с, 1Н), 8,57 (д, J=8,6 Гц, 1Н), 8,12 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 7,86 (с, 1Н), 7,73 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,51 (м, 3H), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,25 (м, 1Н), 2,90 (дд, J=4,6, 8,4 Гц, 2Н), 2,85 (с, 3H), 2,39 (дд, J=2,8, 12,1 Гц, 1Н), 2,03 (м, 2Н), 1,65 (с, 3H), 1,34 (с, 3H), 1,29 (с, 3H); m/z=503 (M+1).
Соединение 301. Смесь соединения 260b (0,90 г, 1,80 ммоль) и диоксида селена (0,40 г, 3,60 ммоль)
- 156 043609 в 1,4-диоксане (18 мл) нагревали при 100°C в атмосфере азота в течение 1 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через слой Celite®. Фильтрат концентрировали, получая соединение
301 (0,92 г, выход 99%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=514 (М+1).
Соединение 302. Раствор соединения 301 (0,92 г, 1,79 ммоль) в EtOH (18 мл) обрабатывали NaBH4 (0,068 г, 1,79 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в атмосфере азота в течение 1 ч смесь концентрировали и остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 302 (0,92 г, количественный выход) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=516 (M+1).
Соединение 303. К раствору соединения 302 (0,92 г, 1,78 ммоль) в CH2Cl2 (20 мл) добавляли раствор трифторида диэтиламиносеры (0,58 г, 3,60 ммоль) в CH2Cl2 (2 мл) при 0°C. Полученный синий раствор перемешивали при 0°C в течение 2 ч, а затем распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах), получая соединение 303 (0,47 г, выход 51%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=518 (M+1).
Соединение 304. Раствор соединения 303 (0,47 г, 0,91 ммоль) и водн. 3N HCl (1,5 мл, 4,5 ммоль) в МеОН (45 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH и экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 304 (0,43 г, количественный выход) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=474 (M+1).
Соединение 305. Раствор соединения 304 (0,43 г, 0,91 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,51 мл, 2,72 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 305 (0,47 г) в виде темно-желтой маслянистой жидкости. m/z=502 (M+1).
Соединение 306. Раствор соединения 305 (все из последней стадии) и уксусной кислоты (0,51 мл, 8,92 ммоль) в EtOH (25 мл) обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (0,10 г, 1,44 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 306 (0,40 г, выход 88%) в виде оранжево-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=499 (M+1).
Соединение 307. Смесь соединения 306 (0,40 г, 0,80 ммоль) и карбоната калия (0,56 г, 4,05 ммоль) в МеОН (8 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч. После фильтрации фильтрат концентрировали. Остаток был аккуратно распределен между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах) с получением соединения 307 (0,23 г, выход 58%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=499 (M+1).
Т120. К перемешиваемому раствору соединения 307 (0,23 г, 0,46 ммоль) в дегазированном ДМФ (5 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,071 г, 0,25 ммоль) в ДМФ (2 мл) при 0°C в атмосфере азота. После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (0,37 мл, 4,59 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах), получая соединение Т120 (0,12 г, выход 52%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,87 (с, 1Н), 8,74 (дд, J=0,8, 8,6 Гц, 1Н), 8,16 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 8,13 (д, J=1,1 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,62 (ддд, J=1,3, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 5,73 (д, J=46,8 Гц, 2Н), 5,63 (тт, J=2,7, 6,1 Гц, 1Н), 2,91 (дд, J=6,3, 18,9 Гц, 1Н), 2,66 (м, 2Н), 2,18 (м, 2Н), 2,03 (м, 2Н), 1,86 (м, 5Н), 1,68 (м, 2Н), 1,52 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=497 (M+1).
Соединение 308. Соединение 9 (1,25 г, 4,22 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид 8-фторхинолин-4-карбоксимидамида (0,95 г, 4,21 ммоль) и карбонат калия (1,2 г, 8,68 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 40°C в течение 2 дней, охлаждали и концентрировали. Остаток смешивали с водой (20 мл) и EtOAc (100 мл) и нагревали при 65°C в течение 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 308 (1,6 г, выход 87%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=436 (M+1).
- 157 043609
Соединение 309. К раствору соединения 308 (1,25 г, 2,87 ммоль) в толуоле (8 мл) добавляли оксихлорид фосфора(V) (4,4 г, 28,70 ммоль) при комнатной температуре. Смесь нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® Initiator™ при 100°C в течение 60 мин, охлаждали до комнатной температуры и выливали на лед. Смесь перемешивали в течение 30 мин и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водн. NaHCO3, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая смесь кеталя и кетона. Неочищенный продукт смешивали с бензолом (100 мл) и обрабатывали этиленгликолем (1,8 г, 29,00 ммоль) и моногидратом п-толуолсульфоновой кислоты (100 мг, 0,52 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч с ловушкой Дина-Старка, охлаждали до комнатной температуры и промывали водой. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 309 (950 мг, выход 73%) в виде твердого вещества светлого цвета. m/z=454 (M+1).
Соединение 310. Соединение 309 (950 мг, 2,09 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл). Добавляли циклопентанол (1 г, 11,61 ммоль) и гидрид натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 400 мг, 10 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 310 (420 мг, выход 40%) в виде твердого вещества светлого цвета. m/z=504 (M+1).
Соединение 311. Смесь соединения 310 (420 мг, 0,83 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл) и водн. 3N HCl (5 мл, 15 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 311 (385 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=460 (M+1).
Соединение 312. К смеси соединения 311 (385 мг, 0,83 ммоль) в этилформиате (15 мл, 186,5 ммоль) добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 160 мг, 0,89 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 312 (405 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=488 (M+1).
Соединение 313. Соединение 312 (405 мг, 0,83 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (570 мг, 8,20 ммоль) и АсОН (500 мг, 8,32 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 313 (350 мг, выход 87%) в виде пены. m/z=485 (M+1).
Соединение 314. Соединение 313 (350 мг, 0,72 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (500 мг, 3,62 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 314 (250 мг, выход 71%) в виде пены. m/z=485 (M+1).
Т121. Соединение 314 (250 мг, 0,51 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли бром (91 мг, 0,57 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и добавляли пиридин (2 мл, 24,8 ммоль). Ледяную баню убирали. Реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т121 (155 мг, выход 62%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,13 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,86 (с, 1Н), 8,61 (тд, J=1,1, 8,6 Гц, 1Н), 8,06 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,56 (ддд, J=5,3, 7,7, 8,6 Гц, 1Н), 7,47 (ддд, J=1,3, 7,7, 10,3 Гц, 1Н), 5,61 (тт, J=2,7, 6,1 Гц, 1Н), 2,91 (ддд, J=1,1, 6,8, 18,8 Гц, 1Н), 2,66 (м, 2Н), 2,18 (м, 2Н), 1,83 (м, 9Н), 1,51 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=483 (M+1).
Соединение 315. Смесь соединения 296b (0,36 г, 0,69 ммоль) и диоксида селена (0,15 г, 1,35 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) нагревали при 100°C в атмосфере азота в течение 15 мин. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через слой Celite®. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах), получая соединение 315 (0,32 г, выход 87%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=538 (M+1).
Соединение 316. Раствор соединения 315 (0,32 г, 0,60 ммоль) в EtOH (50 мл) обрабатывали NaBH4 (0,023 г, 0,61 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в атмосфере азота в течение 1 ч смесь охлаждали до 0°C, гасили насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 316 (0,28 г, выход 87%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=540 (M+1).
Соединение 317. К раствору соединения 316 (0,28 г, 0,52 ммоль) в CH2Cl2 (5 мл) добавляли раствор трифторида диэтиламиносеры (0,17 г, 1,05 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл) при 0°C. Полученный синий раствор
- 158 043609 перемешивали при 0°C в течение 2 ч и распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл).
Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах), получая соединение 317 (0,16 г, выход 57%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=542 (M+1).
Соединение 318. Раствор соединения 317 (0,16 г, 0,30 ммоль) и водн. 3N HCl (1 мл, 3 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток охлаждали, подщелачивали водн. 10% NH4OH и экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 318 (0,15 г, количественный выход) в виде желтой маслянистой жидкости. m/z=498 (M+1).
Соединение 319. Раствор соединения 318 (0,15 г, 0,30 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,16 мл, 0,86 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 2 ч смесь распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 319 (0,14 г, выход 88%) в виде оранжевого пенистого твердого вещества. m/z=526 (M+1).
Соединение 320. Раствор соединения 319 (0,14 г, 0,26 ммоль) и уксусной кислоты (0,15 мл, 2,62 ммоль) в EtOH (20 мл) обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (0,027 г, 0,39 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч. при комнатной температуре в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 320 (0,13 г, выход 93%) в виде оранжевого пенистого твердого вещества. m/z=523 (M+1).
Соединение 321. Смесь соединения 320 (0,13 г, 0,25 ммоль) и карбоната калия (0,17 г, 1,23 ммоль) в МеОН (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 16 ч. После фильтрации фильтрат концентрировали. Остаток был аккуратно распределен между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 321 (0,11 г, выход 85%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=523 (M+1).
Т122. К перемешиваемому раствору соединения 321 (0,11 г, 0,21 ммоль) в дегазированном ДМФ (5 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,034 г, 0,12 ммоль) в ДМФ (1 мл) при 0°C в атмосфере азота. После перемешивания смеси в течение 30 мин добавляли пиридин (0,17 мл, 2,11 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 25% EtOAc в гексанах), получая Т122 (0,057 г, выход 52%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,92 (с, 1Н), 8,63 (дд, J=0,8, 8,4 Гц, 1Н), 8,16 (м, 2Н), 7,79 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,64 (ддд, J=1,6, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 5,75 (д, J=46,8 Гц, 2Н), 2,92 (дд, J=4,7, 8,5 Гц, 2Н), 2,40 (дд, J=2,8, 12,1 Гц, 1Н), 2,01 (м, 2Н), 1,66 (с, 3H), 1,34 (с, 3H), 1,29 (с, 3H); m/z=521 (M+1).
Соединение 322. Раствор соединения 277 (530 мг, 1,01 ммоль) в безводном ТГФ (15 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота. Добавляли по каплям метилмагнийбромид (3,0 М раствор в Et2O, 0,67 мл, 2,01 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч и выливали в водн. насыщ. NH4Cl. Водную смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл) и объединенные органические экстракты сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 322 (432 мг, выход 79%) в виде желтого стекла. m/z=540 (M+1).
Соединение 323. Раствор соединения 322 (432 мг, 0,80 ммоль) в CH2Cl2 (20 мл) обрабатывали диоксидом марганца (88%, 395 мг, 4,00 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в атмосфере азота в течение 24 ч смесь фильтровали через слой Celite® и фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах), получая соединение 323 (388 мг, выход 90%) в виде прозрачной вязкой маслянистой жидкости. m/z=538 (M+1).
Соединение 324. К суспензии метилтрифенилфосфонийбромида (1,38 г, 3,86 ммоль) в безводном ТГФ (30 мл) в атмосфере азота порциями добавляли при перемешивании трет-бутоксид калия (434 мг, 3,87 ммоль) при 0°C. После завершения добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и снова охлаждали до 0°C. Раствор соединения 323 (520 мг, 0,967 ммоль) в безводном ТГФ (10 мл) добавляли по каплям и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 21 ч. Смесь разбавляли водой и экстрагировали EtOAc (2x60 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали
- 159 043609 флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 10% EtOAc в гексанах), получая соединение 324 (478 мг, выход 92%) в виде вязкой маслянистой жидкости. m/z=536 (M+1).
Соединение 325. Раствор соединения 324 (477 мг, 0,890 ммоль) в МеОН (15 мл) и EtOAc (15 мл) обрабатывали 10% Pd/C (50 мг) и реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода при 1 атм при комнатной температуре в течение 22 ч. Катализатор удаляли фильтрованием через слой Celite® и фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах), получая соединение 325 (333 мг, выход 70%) в виде белого стекла. m/z=538 (М+1).
Соединение 326. Раствор соединения 325 (403 мг, 0,749 ммоль) в ТГФ (25 мл) обрабатывали водн. 3N HCl (2,50 мл, 7,50 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель удаляли in vacuo, a остаток охлаждали до 0°C, осторожно нейтрализовывали с помощью водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 326 (370 мг, количественный выход) в виде прозрачной вязкой маслянистой жидкости. m/z=494 (M+1).
Соединение 327. Раствор соединения 326 (390 г, 0,790 ммоль) в этилформиате (12 мл, 149 ммоль) охлаждали до 0°C и по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М раствор в МеОН, 0,73 мл, 3,94 ммоль). Холодную баню убирали и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 327 (384 мг, выход 93%) в виде желтого стекла. m/z=522 (M+1).
Соединение 328. Раствор соединения 327 (382 мг, 0,732 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (0,43 мл, 7,52 ммоль) и EtOH (7 мл) обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (76 мг, 1,09 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при 60°C в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение 20 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток осторожно распределяли между водн. 10% NH4OH и EtOAc. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая бледно-желтое стекло (351 мг), которое растирали с МеОН, получая соединение 328 (237 мг, выход 62%) в виде светло-желтого кристаллического твердого вещества. m/z=519 (М+1).
Соединение 329. Суспензию соединения 328 (237 мг, 0,456 ммоль) и карбоната калия (187 мг, 1,35 ммоль) в МеОН (15 мл) перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 19 ч и нагревали при 50°C в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между водой и Et2O. Водную фазу охлаждали на бане с ледяной водой и нейтрализовали водн. насыщ. KH2PO4. Нейтрализованную водную смесь экстрагировали EtOAc (2x30 мл) и объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение 329 (176 мг, выход 74%) в виде белого стекла. m/z=519 (M+1).
Т123. Раствор соединения 329 (176 мг, 0,339 ммоль) в безводном ДМФ (4 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота и по каплям обрабатывали раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (53 мг, 0,185 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). После перемешивания при 0°C в течение 45 мин добавляли безводный пиридин (0,27 мл, 3,39 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение Т123 (126 мг, выход 72%) в виде грязно-белого стекла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCL3) δ 8,93 (с, 1Н), 8,51 (дд, J=1,3, 8,6 Гц, 1Н), 8,15 (дд, J=0,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,86 (с, 1Н), 7,72 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,52 (м, 3H), 7,33 (дт, J=1,1, 7,6 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 3,36 (гепт, J=7,0 Гц, 1Н), 2,89 (м, 2Н), 2,64 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,31 (дт, J=2,8, 12,8 Гц, 1Н), 2,18 (м, 1Н), 1,86 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,46 (д, J=6,9 Гц, 6Н), 1,34 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=517 (M+1).
Соединение 330. Раствор соединения 90 (605 мг, 1,34 ммоль) и 2-иодоксибензойной кислоты (1,50 г, 5,36 ммоль) в ДМСО (10 мл) нагревали при 65°C в атмосфере азота в течение 26 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (200 мл) и экстрагировали EtOAc (3x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 330 (437 мг, выход 73%) в виде прозрачного стекла. m/z=450 (M+1).
Соединение 331. К перемешиваемой суспензии гидрида калия (30% дисперсия в минеральном масле, 280 мг, 2,09 ммоль) в безводном ТГФ (10 мл) в атмосфере азота при 0°C добавляли по каплям раствор соединения 330 (316 мг, 0,703 ммоль) в безводном ТГФ (10 мл). После перемешивания смеси в течение 30 мин при 0°C добавляли аллилбромид (0,61 мл, 7,05 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение дополнительных 3 ч, гасили водн. насыщ. NH4Cl и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах), получая соединение 331 (152 мг, выход 44%) в виде светложелтого стекла. m/z=490 (M+1).
Соединение 332. Смесь соединения 331 (152 мг, 0,310 ммоль) и 10% палладия на угле (~ 50 мг) в
- 160 043609
МеОН (15 мл) перемешивали в атмосфере водорода при 1 атм при комнатной температуре в течение 24
ч. Катализатор отфильтровывали через слой Celite® и фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах), получая соединение 332 (116 мг, выход 76%) в виде прозрачного стекла. m/z=494 (M+1).
Соединение 333. Раствор соединения 332 (115 мг, 0,232 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124 ммоль) охлаждали до 0°C и по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М раствор в МеОН, 0,21 мл, 1,13 ммоль). Холодную баню убирали и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 333 (114 мг, выход 94%) в виде грязно-белого стекла, которое использовали на последующей стадии без дополнительной очистки. m/z=522 (M+1).
Соединение 334. Раствор соединения 333 (113 мг, 0,218 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (0,13 мл, 2,27 ммоль) и EtOH (10 мл) обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (23 мг, 0,331 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при 60°C в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение 24 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток осторожно распределяли между водн. 10% NH4OH и EtOAc. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 334 (101 мг, выход 90%) в виде стекла, которое использовали на последующей стадии без дополнительной очистки. m/z=519 (M+1).
Соединение 335. Смесь соединения 334 (100 мг, 0,192 ммоль) и карбоната калия (53 мг, 0,383 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 17 ч с последующим нагреванием при 50°C в течение 4 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между водой и Et2O. Водную фазу охлаждали на бане с ледяной водой, подкисляли водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение 335 (54 мг, выход 54%) в виде белого стекла. m/z=519 (M+1).
Т124. Раствор соединения 335 (53 мг, 0,102 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота и по каплям обрабатывали раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (16 мг, 0,056 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 30 мин добавляли безводный пиридин (0,082 мл, 1,02 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали.
Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение Т124 (41 мг, выход 78%) в виде грязно-белого стекла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (дд, J=0,9, 4,5 Гц, 1Н), 8,90 (с, 1Н), 8,70 (д, J=8,6 Гц, 1Н), 8,22 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 8,01 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=1,2, 7,0, 8,4 Гц, 1Н), 7,64 (дт, J=1,2, 7,5 Гц, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,33 (тт, J=1,0, 7,6 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 2,90 (т, J=6,6 Гц, 2Н), 2,61 (м, 1Н), 1,94 (м, 3H), 1,65 (с, 3H), 1,33 (м, 2Н), 1,26 (с, 3H), 1,08 (м, 1Н), 0,89 (т, J=7,1 Гц, 3H); m/z=517 (М+1).
Соединение 336. Соединение 146 (435 мг, 0,98 ммоль) растворяли в этилформиате (2,4 мл, 29,84 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 3,4 мл, 14,86 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч; разбавляли водой; доводили до рН ~ 7 с помощью водн. 1N HCl; и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 336 (460 мг, выход 99%) в виде розоватой пены, которое использовали на последующей стадии без дополнительной очистки. m/z=470,2 (M+1).
Соединение 337. К раствору соединения 336 (200 мг, 0,43 ммоль) и N-метиланилина (0,102 мл, 0,94 ммоль) в CH2Cl2 (2 мл) при комнатной температуре добавляли сульфат магния (205 мг, 1,70 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, обрабатывали моногидратом п-толуолсульфоновой кислоты (8,1 мг, 0,042 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение еще 48 ч. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали CH2Cl2. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение 337 (120 мг, выход 50%) в виде бледно-желтой пены. m/z=559,3 (M+1).
Соединение 338. К раствору трет-бутоксида калия (71,7 мг, 0,64 ммоль) в ТГФ (1 мл) в атмосфере аргона добавляли раствор соединения 337 (119 мг, 0,21 ммоль) в ТГФ (1 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 10 мин и обрабатывали иодметаном (0,04 мл, 0,64 ммоль). После перемешивания при 0°C в течение дополнительных 2 ч реакцию гасили добавлением водн. насыщ. NH4Cl (3 мл) и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-80% EtOAc в гексанах), получая соединение 338 (93 мг, выход 76%) в виде бледно-желтой пены. m/z=573,2 (M+1).
Соединение 339. К раствору соединения 338 (90 мг, 0,157 ммоль) в EtOH (1,6 мл) добавляли 1N
- 161 043609 водн. HCl (0,32 мл, 0,32 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (16,4 мг, 0,236 ммоль) последовательно при комнатной температуре. Смесь нагревали при 55°C в течение 3 ч и концентрировали. Остаток разбавляли водн. насыщ. NaHCO3 и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 339 (43 мг, выход 57%) в виде белой пены. m/z=481,2 (М+1).
Соединение 340. К раствору соединения 339 (40 мг, 0,083 ммоль) в МеОН (0,8 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,03 мл, 0,13 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч, охлаждали до 0°C, а затем нейтрализовали добавлением водн. 10% NaH2PO4. Смесь разбавляли водой и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 340 (38 мг, выход 95%) в виде прозрачной пленки, которую использовали на последующем этапе без дальнейшей очистки. m/z=481,2 (M+1).
Т125. Соединение 340 (38 мг, 0,079 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (0,5 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (11,3 мг, 0,040 ммоль) в ДМФ (0,3 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и добавляли пиридин (0,019 мл, 0,24 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 4 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом (10 мл). Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-30% ацетона в гексанах), получая соединение Т125 (24 мг, выход 63%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,01 (с, 1Н), 8,60 (дд, J=0,8, 5,2 Гц, 1Н), 8,19 (с, 1Н), 8,06 (дд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,52 (м, 1Н), 7,45 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,22 (ддд, J=1,0, 8,4, 9,5 Гц, 1Н), 2,84 (м, 2Н), 2,34 (дд, J=2,7, 12,3 Гц, 1Н), 2,21 (тт, J=4,9, 8,1 Гц, 1Н), 1,97 (м, 2Н), 1,60 (с, 3H), 1,32 (с, 3H), 1,27 (с, 3H), 1,12 (м, 2Н), 1,04 (м, 2Н); m/z=479,2 (M+1).
Соединение 341. К смеси соединения 90 (500 мг, 1,11 ммоль) и этилформиата (2,65 мл, 32,95 ммоль) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 2,55 мл, 11,14 ммоль) в атмосфере азота при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли водн. 6N HCl (1,86 мл, 11,10 ммоль) и EtOAc. Смесь промывали водн. 10% NaH2PO4. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 341 (550 мг, количественный выход) в виде светло-желтой пены, которую использовали на последующей стадии без дополнительной очистки. m/z=480,2 (M+1).
Соединение 342. Смесь соединения 341 (550 мг, <1,11 ммоль) и N-метил анилина (0,126 мл, 1,16 ммоль) в бензоле нагревали с обратным холодильником с ловушкой Дина-Старка в течение 16 ч. Растворитель удаляли перегонкой. Полученную неочищенную маслянистую жидкость нагревали до 110°C в течение еще 3 ч; охлаждали до комнатной температуры; и очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-80% EtOAc в гексанах), получая соединение 342 (315 мг, выход 50%) в виде желтой пены. m/z=569,2 (M+1).
Соединение 343. К раствору трет-бутоксида калия (62 мг, 0,55 ммоль) в ТГФ (0,9 мл) в атмосфере аргона добавляли раствор соединения 342 (105 мг, 0,18 ммоль) в ТГФ (1,3 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 10 мин и обрабатывали иодэтаном (0,045 мл, 0,56 ммоль). После перемешивания при 0°C в течение дополнительных 1 ч реакцию гасили добавлением водн. насыщ. NH4Cl и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая неочищенное соединение 343 (112 мг) в виде темно-зеленой пены, которую использовали на последующей стадии без дополнительной очистки. m/z=597,3 (М+1).
Соединение 344. К раствору соединения 343 (112 мг, <0,18 ммоль) в EtOH (1,8 мл) добавляли 1N водн. HCl (0,37 мл, 0,37 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (20 мг, 0,29 ммоль) последовательно при комнатной температуре. Смесь нагревали до 55°C в течение 18 ч; охлаждали до комнатной температуры; разбавляли водн. насыщ. NaHCO3 и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-85% EtOAc в гексанах), получая соединение 344 (20 мг, 22% выход из соединения 342) в виде коричневого стекла. m/z=505,2 (М+1).
Соединение 345. К раствору соединения 344 (20 мг, 0,040 ммоль) в МеОН (0,4 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 0,014 мл, 0,061 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1,5 ч, охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водн. 10% NaH2PO4 и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 345 (17,5 мг, выход 88%) в виде желтой пены, которую использовали на последующем этапе без дальнейшей очистки. m/z=505,2 (М+1).
Т126. Соединение 345 (17,5 мг, 0,035 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (0,2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (5 мг, 0,017 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и добавляли пиридин (0,009 мл, 0,11 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 3 ч; охлаждали до комнатной температуры; разбавленный CH2Cl2; и промывали водой. Орга
- 162 043609 нический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом (10 мл). Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-80% EtOAc в гексанах), получая соединение Т126 (10 мг, выход 57%) в виде желтой пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCI3) δ 9,09 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,90 (с, 1Н), 8,71 (дд, J=1,4, 8,6 Гц, 1Н), 8,22 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 8,01 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,64 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,51 (м, 2Н), 7,34 (т, J=7,6 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 2,90 (т, J=6,6 Гц, 2Н), 2,61 (дд, J=5,4, 9,5 Гц, 1Н), 2,00 (м, 3H), 1,65 (с, 3H), 1,61 (м, 1Н), 1,27 (с, 3H), 0,83 (т, J=7,4 Гц, 3H); m/z=503,2 (М+1).
Соединение 346. К смеси соединения 1721 (1 г, 2,01 ммоль) и молекулярного сита 3А (500 мг) в CH2C12 (10 мл) добавляли N-метиланилин (0,5 г, 4,67 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 дней при комнатной температуре и очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 346 (610 мг, выход 52%) в виде пены. m/z=587 (М+1).
Соединение 347. К раствору соединения 346 (610 мг, 1,04 ммоль) в ТГФ (15 мл) при 0°C добавляли t-BuOK (350 мг, 3,12 ммоль). Смесь перемешивали в течение 15 мин; обработанный иодметаном (450 мг, 3,17 ммоль); и перемешивали еще 3 ч. Реакционную смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая неочищенное соединение 347 (620 мг, количественный выход) в виде пены, которую использовали на следующей стадии без очистки. m/z=601 (M+1).
Соединение 348. Соединение 347 (620 мг, <1,04 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (120 мг, 1,73 ммоль) и добавляли водн. 1N HCl (2,1 мл, 2,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 4 ч, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая частично очищенное соединение 348 (130 мг, 25% выход) в виде пены. m/z=509 (M+1).
Соединение 349. К раствору соединения 348 (130 мг, 0,26 ммоль) в МеОН (10 мл) добавляли карбонат калия (180 мг, 1,30 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи; нейтрализовывали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая частично очищенное соединение 349 (100 мг, выход 77%) в виде пены. m/z=509 (M+1).
Т127 и Т128. Соединение 349 (100 мг, 0,20 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (30 мг, 0,10 ммоль) в ДМФ (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и добавляли пиридин (1 мл, 12,4 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т127 (30 мг, 30% выход) и Т128 (25 мг, 25% выход) в виде пенистого твердого вещества. Т127 1H ЯМР (400 МГц, CDC13) δ 9,14 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,91 (с, 1Н), 8,51 (д, J=8,6 Гц, 1Н), 8,10 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,51 (м, 4Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 2,91 (дд, J=4,7, 8,6 Гц, 2Н), 2,39 (дд, J=2,8, 12,2 Гц, 1Н), 2,03 (м, 2Н), 1,65 (с, 3H), 1,34 (с, 3H), 1,28 (с, 3H); m/z=507 (M+1). T128 1H ЯМР (400 МГц, CDC13) δ 9,15 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,63 (с, 1Н), 8,51 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 8,11 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,54 (м, 4Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 3,19 (ддд, J=3,2, 5,2, 13,8 Гц, 1Н), 3,00 (м, 2Н), 2,70 (дт, J=6,9, 12,7 Гц, 1Н), 2,08 (с, 3H), 1,89 (с, 3H); m/z=491 (M+1).
Т129. К раствору Т76 (100 мг, 0,203 ммоль) в MeCN (5 мл) при комнатной температуре добавляли одной порцией перекись водорода (30 мас.% раствор в воде, 0,14 мл, 1,37 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч и распределяли между EtOAc и водой. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах), получая соединение Т129 (82 мг, выход 79%) в виде белого стекла. 1H ЯМР (400 МГц, CDC13) δ 9,07 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,78 (дд, J=6,1, 9,4 Гц, 1Н), 8,01 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,83 (дд, J=2,7, 9,8 Гц, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,42 (ддд, J=2,7, 8,0, 9,4 Гц, 1Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 5,23 (с, 1Н), 2,87 (м, 2Н), 2,34 (м, 1Н), 2,25 (м, 1Н), 2,01 (м, 1Н), 1,68 (дк, J=6,2, 12,4 Гц, 1Н), 1,44 (с, 3H) 1,35 (д, J=6,9 Гц, 3H); m/z=509 (M+1).
Т130. К раствору Т53 (100 мг, 0,215 ммоль) в MeCN (5 мл) при комнатной температуре добавляли одной порцией перекись водорода (30 мас.% раствор в воде, 0,15 мл, 1,47 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч и распределяли между EtOAc и водой. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 20-40% EtOAc в гексанах), получая соединение Т130 (89 мг, выход 86%) в виде белого стекла. 1H ЯМР (400 МГц, CDC13) δ 8,59 (тд, J=0,8, 5,2 Гц, 1Н), 8,18 (с, 1Н), 8,06 (ддд, J=0,6, 1,7, 5,1 Гц, 1Н), 7,52 (м, 1Н), 7,46 (дт, J=1,8, 7,4 Гц, 1Н), 7,33 (тт, J=0,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,21 (т, J=9,2 Гц, 1Н), 5,33 (с, 1Н), 2,84 (ддд, J=6,9, 11,7, 18,4 Гц, 1Н), 2,72 (дд, J=5,8, 18,1 Гц, 1Н), 2,24 (м, 3H), 1,96 (дд, J=6,7, 13,7 Гц, 1Н), 1,64 (м, 1Н), 1,39. (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,12 (м, 2Н), 1,03 (м, 2Н); m/z=481 (M+1).
Т131. К раствору Т66 (156 мг, 0,329 ммоль) в MeCN (5 мл) при комнатной температуре добавляли
- 163 043609 перекись водорода (30 мас.% раствор в воде, 0,17 мл, 1,66 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т131 (96 мг, выход 59%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,35 (с, 1Н), 9,20 (с, 1Н), 8,78 (м, 1Н), 8,07 (д, J=8,1 Гц, 1Н), 7,80 (ддд, J=1,3, 6,9, 8,6 Гц, 1Н), 7,67 (ддд, J=1,1, 6,9, 8,1 Гц, 1Н), 7,51 (м, 2Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,6 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 5,28 (с, 1Н), 2,89 (ддд, J=6,8, 11,5, 18,3 Гц, 1Н), 2,79 (дд, J=5,9, 18,0 Гц, 1Н), 2,28 (м, 2Н), 2,00 (м, 1Н), 1,68 (дк, J=6,4, 12,7 Гц, 1Н), 1,45 (с, 3H), 1,35 (д, J=7,0 Гц, 3H); m/z=491 (M+1).
Т132. К раствору Т37 (100 мг, 0,210 ммоль) в MeCN (5 мл) при комнатной температуре добавляли перекись водорода (30 мас.% раствор в воде, 135 мг, 1,19 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и разбавляли водой. Смесь экстрагировали EtOAc (2x15 мл). Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т132 (25 мг, 24% выход) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,08 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,70 (дд, J=1,1, 8,1 Гц, 1Н), 8,21 (дд, J=0,4, 8,4 Гц, 1Н), 8,01 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,77 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,63 (ддд, J=1,3, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,51 (м, 2Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 5,25 (с, 1Н), 2,91 (ддд, J=7,1, 11,6, 18,4 Гц, 1Н), 2,80 (дд, J=6,0, 18,1 Гц, 1Н), 2,31 (м, 2Н), 2,02 (м, 1Н), 1,69 (м, 1Н), 1,44 (с, 3H), 1,35 (д, J=7,0 Гц, 3H); m/z=491 (M+1).
Т133. К раствору Т118 (95 мг, 0,194 ммоль) в MeCN (5 мл) при комнатной температуре добавляли перекись водорода (30 мас.% раствор в воде, 0,11 г, 0,97 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и распределяли между EtOAc (50 мл) и водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение с получением Т133 (74 мг, выход 76%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,07 (дд, J=1,3, 4,4 Гц, 1Н), 8,68 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 8,21 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 8,00 (дд, J=1,3, 4,5 Гц, 1Н), 7,77 (тдд, J=1,5, 6,9, 8,4 Гц, 1Н), 7,62 (тдд, J=1,4, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 7,51 (м, 2Н), 7,33 (тт, J=1,2, 7,3 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 5,24 (с, 1H), 2,85 (м, 2H), 2,59 (м, 1Н), 1,91 (м, 1Н), 1,78 (тд, J=6,3, 12,6 Гц,, 1Н), 1,47 (с, 3H), 1,29 (с, 3H), 1,21 (с, 3H); m/z=505 (M+1).
Т134. К раствору соединения 14d (238 мг, 0,71 ммоль) в ТГФ (3,5 мл) добавляли раствор бис(триметилсилил)амида лития (1 M в ТГФ, 1,1 мл, 1,1 ммоль) при -78°C. После перемешивания смеси при -78°C в течение 10 мин добавляли фенилселенилхлорид (202 мг, 1,05 ммоль) в ТГФ (3,5 мл). Смесь перемешивали при -78°C в течение дополнительных 1,5 ч. Добавляли водн. насыщ. NH4Cl. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией с получением частично очищенного продукта. Полученный остаток растворяли в EtOAc (10 мл) и ТГФ (3 мл). Перекись водорода (30 мас.% раствор в воде, 0,35 мл, 3,43 ммоль) добавляли при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Добавляли водн. 10% Na2SO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 050% EtOAc в гексанах), получая соединение Т134 (60 мг, выход 25%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,76 (м, 2Н), 8,33 (м, 2Н), 8,21 (д, J=10,1 Гц, 1Н), 6,07 (д, J=10,1 Гц, 1Н), 4,12 (с, 3H), 2,88 (ддд, J=1,1, 6,8, 16,8 Гц, 1Н), 2,65 (м, 1Н), 2,50 (м, 1Н), 2,12 (м, 2Н), 1,76 (м, 1Н), 1,40 (с, 3H), 1,28 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=336,2 (M+1).
Т135. К раствору соединения Т134 (59 мг, 0,18 ммоль) в ТГФ (1,2 мл) добавляли свежеприготовленный LDA (1 М раствор в ТГФ, 0,21 мл, 0,21 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч; охлаждали до -78°C; обрабатывали НМРА (30 мкл, 0,17 ммоль) и метилцианоформиатом (17 мкл, 0,21 ммоль); и перемешивали при -78°C в течение 1 ч. Реакцию гасили добавлением водн. насыщ. NH4Cl. Смесь перемешивали в течение 5 мин при комнатной температуре и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-20% ацетона в гексанах), получая соединение Т135 (20 мг, выход 29%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,77 (м, 2Н), 8,32 (м, 2Н), 8,28 (д, J=10,3 Гц, 1Н), 6,17 (д, J=10,3 Гц, 1Н), 4,12 (с, 3H), 3,73 (с, 3H), 3,02 (дд, J=2,2, 13,0 Гц, 1Н)), 2,87 (ддд, J=1,1, 6,9, 18,5 Гц, 1Н), 2,66 (ддд, J=7,8, 11,1, 18,8 Гц, 1Н), 2,00 (м, 1Н), 1,70 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,49 (с, 3H); m/z=394,1 (M+1).
Соединение 350. К раствору трет-бутоксида калия (240,9 мг, 2,14 ммоль) в ТГФ (3 мл) в атмосфере аргона добавляли раствор соединения 337 (400 мг, 0,72 ммоль) в ТГФ (4 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 10 мин и обрабатывали аллилбромидом (0,19 мл, 2,20 ммоль). После перемешивания при 0°C в течение дополнительных 2 ч реакцию гасили добавлением водн. насыщ. NH4Cl (10 мл) и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% ацетона в гексанах), получая соединение 350 (300 мг, выход 70%) в виде бледно-желтой пены. m/z=599,3 (М+1).
- 164 043609
Соединение 351. К раствору соединения 350 (300 мг, 0,50 ммоль) в EtOH (5,0 мл) добавляли водн. 1N HCl (1,0 мл, 1,0 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (52,2 мг, 0,75 ммоль) последовательно при комнатной температуре. Смесь нагревали при 55°C в течение 4 ч и концентрировали. Остаток разбавляли водн. насыщ. NaHCO3 и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 351 (160 мг, выход 63%) в виде белой пены. m/z=507,2 (М+1).
Соединение 352. К раствору соединения 351 (70 мг, 0,138 ммоль) в ТГФ (1,38 мл) добавляли 9-BBN (0,5 М раствор в ТГФ, 1,38 мл, 0,69 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли воду (70 мкл), водн. 3N NaOH (0,39 мл, 1,17 ммоль) и 30% водн. перекись водорода (0,39 мл, 3,82 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем разбавляли EtOAc. Смесь промывали водой и водн. 10% Na2SO3. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% ацетона в гексанах), получая соединение 352 (60 мг, выход 82%) в виде белой пены. m/z=525,2 (M+1).
Соединение 353. К раствору соединения 352 (65 мг, 0,124 ммоль) в МеОН (1,2 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 42 мкл, 0,186 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч, охлаждали до 0°C, а затем нейтрализовали добавлением водн. 10% NaH2PO4. Смесь разбавляли водой и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением соединения 353 (50 мг, выход 77%) в виде прозрачной пленки, которую использовали на последующем этапе без дальнейшей очистки. m/z=525,2 (M+1).
Т136. Смесь соединения 353 (50 мг, 0,095 ммоль), DDQ (23,8 мг, 0,105 ммоль) и бензола (0,95 мл) перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь разбавляли CH2Cl2 и промывали водой и водн. насыщ. NaHCO3. Объединенные водные смывки экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% ацетона в гексанах), получая соединение Т136 (19 мг, выход 38%) в виде белой пены. Т136 загрязнен 24% соответствующего 1,2-эпоксида. 1H ЯМР (40θ МГц, CDCl3) 8,99 (с, 1Н), 8,60 (д, J=5,2 Гц, 1Н), 8,19 (уш. с. 1Н), 8,06 (дд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,52 (м, 1Н), 7,45 (дт, J=1,6, 7,6 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=0,8, 7,6 Гц, 1Н), 7,22 (уш. т, J=9,2 Гц, 1Н), 3,60 (м, 2Н), 2,82 (м, 2Н), 2,54 (дд, J=3,2, 11,2 Гц, 1Н), 1,61 (с, 3H), 1,40-2,05 (м, 7Н), 1,28 (с, 3H), 1,11 (м, 2Н), 1,04 (м, 2Н); m/z=523,2 (M+1).
Соединение 354. К раствору соединения 351 (75 мг, 0,148 ммоль) в МеОН (1,6 мл) добавляли карбонат калия (33,4 мг, 0,242 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, охлаждали до 0°C и нейтрализовывали добавлением водн. 10% NaH2PO4. МеОН удаляли выпариванием. Остаток разбавляли водой, и смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-40% ацетона в гексанах), получая соединение 354 (60 мг, выход 80%) в виде грязно-белой пены. m/z=507,2 (M+1).
Соединение 355. К раствору соединения 354 (60 мг, 0,118 моль) в EtOAc (2,4 мл) добавляли 10% палладий на угле (20 мг). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода (1 атм) при комнатной температуре в течение 2 ч. Катализатор удаляли фильтрованием через слой Celite® и фильтрат концентрировали.
Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% ацетона в гексане), получая соединение 355 (40 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества. m/z=509,2 (М+1).
Т137. Раствор соединения 355 (40 мг, 0,079 ммоль) в безводном ДМФ (0,4 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота и по каплям обрабатывали раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (11,2 мг, 0,039 ммоль) в безводном ДМФ (0,4 мл). После перемешивания реакции при 0°C в течение 2 ч добавляли безводный пиридин (19 мкл, 0,236 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% ацетона в гексанах), получая соединение Т137 (18,9 мг, выход 47%) в виде грязно-белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 8,97 (с, 1Н), 8,60 (дд, J=1,2, 5,2 Гц, 1Н), 8,19 (дд, J=0,8, 1,6 Гц, 1Н), 8,06 (дд, J=2,0, 5,2 Гц, 1Н), 7,52 (м, 1Н), 7,45 (дт, J=1,6, 7,6 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=1,2, 7,6 Гц, 1Н), 7,22 (ддд, J=0,8, 8,0, 9,2 Гц, 1Н), 2,82 (м, 2Н), 2,54 (дд, J=4,0, 10,8 Гц, 1Н), 2,21 (м, 1Н), 1,90 (м, 3H), 1,59 (с, 3H), 1,54 (м, 1Н), 1,30 (м, 2Н), 1,25 (с, 3H), 1,22 (м, 2Н), 1,04 (м, 2Н), 0,87 (т, J=7,2 Гц, 3H); m/z=507,2 (М+1).
Соединение 356. Соединение 94 (216 мг, 0,50 ммоль) растворяли в пирролидине (0,319 мл, 3,88 ммоль). Реакцию перемешивали с обратным холодильником в течение 16 ч, охлаждали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-10% МеОН в CH2Cl2), получая соединение 356 (241 мг, количественный выход) в виде оранжевой маслянистой жидко
- 165 043609 сти. m/z=471 (М+1).
Соединение 357. Соединение 356 (241 мг, <0,50 ммоль) растворяли в ТГФ (2,3 мл) и МеОН (2,3 мл). Водн. 3N HCl (2,3 мл, 6,9 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 357 (141 мг, выход 66%) в виде желтого твердого вещества. m/z=427 (М+1).
Соединение 358. Соединение 357 (141 мг, 0,33 ммоль) растворяли в этилформиате (0,81 мл, 10,07 ммоль). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 1,14 мл, 4,97 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи к реакционной смеси добавляли EtOH (4,8 мл), водн. 6N HCl (0,83 мл, 4,98 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (35 мг, 0,50 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 6 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли EtOAc, нейтрализовали водн. насыщ. KHCO3 и затем экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт промывали солевым раствором и концентрировали. Неочищенный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в гексанах), получая соединение 358 (118 мг, выход 79%) в виде желтой пены. m/z=452 (М+1).
Соединение 359. Соединение 358 (118 мг, 0,26 ммоль) растворяли в МеОН (2,61 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 90 мкл, 0,39 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 ч реакционную смесь нейтрализовывали водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 359 (100 мг, выход 85%) в виде желтой пены. m/z=452 (М+1).
Т138. Соединение 359 (100 мг, 0,22 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2,45 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (32,3 мг, 0,11 ммоль) в ДМФ (0,95 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и добавляли пиридин (53 мкл, 0,66 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и промывали водн. насыщ. NaHCO3, водн. насыщ. Na2SO3 и солевым раствором. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-85% EtOAc в гексанах), получая соединение Т138 (54,4 мг, выход 55%) в виде твердого вещества с оранжевым оттенком. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,04 (д, J=4,8 Гц, 1Н), 8,90 (с, 1Н), 8,86 (дд, J=0,8, 8,8 Гц, 1Н), 8,18 (дд, J=1,2, 7,8 Гц, 1Н), 7,98 (д, J=4,8 Гц, 1Н), 7,74 (ддд, J=1,2, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,59 (ддд, J=1,2, 6,4, 8,0 Гц, 1Н), 3,83 (м, 2Н), 3,74 (м, 2Н), 3,07 (м, 2Н), 2,59 (дк, J=13,4, 6,7 Гц, 1Н), 2,18 (м, 2Н), 2,04 (м, 2Н), 1,91 (м, 2Н), 1,77 (м, 1Н), 1,51 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,8 Гц, 3H); m/z=450 (М+1).
Соединение 360. К раствору соединения 179 (150 мг, 0,42 ммоль) в метилпирролидоне (0,6 мл) добавляли 1-ацетилпиперазин (268 мг, 2,09 ммоль). Смесь нагревали при 100°C в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-80% EtOAc в гексанах), получая соединение 360 (183 мг, выход 97%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=451 (M+1).
Соединение 361. Соединение 360 (180 мг, 0,40 ммоль) растворяли в этилформиате (0,96 мл, 11,94 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,38 мл, 6,03 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,0 мл, 6,0 ммоль), EtOH (4 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (42 мг, 0,60 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение ночи и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 361 (151 мг, выход 79%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=476 (М+1).
Соединение 362. Соединение 361 (147 мг, 0,31 ммоль) растворяли в МеОН (3 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,11 мл, 0,48 ммоль) добавляли при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 362 (130 мг, выход 88%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=476 (M+1).
Т139. Соединение 362 (130 мг, 0,27 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,7 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (39 мг, 0,14 ммоль) в ДМФ (0,7 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (66 мкл, 0,82 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 4 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь четырехкратно промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом (10 мл). Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соедине- 166 043609 ние Т139 (75 мг, выход 58%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц,
CDCl3) δ 8,80 (с, 1Н), 7,43 (м, 1Н), 7,32 (дт, J=2,0, 6,8 Гц, 1Н), 7,25 (м, 1Н), 7,14 (уш. т, J=8,4 Гц, 1Н), 3,89 (м, 2Н), 3,84 (м, 2Н), 3,72 (м, 2Н), 3,58 (м, 2Н), 2,56 (м, 3H), 2,17 (с, 3H), 2,13 (м, 1Н), 2,00 (м, 1Н), 1,67 (м,
1Н), 1,45 (с, 3H), 1,27 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=474 (M+1).
Соединение 363. Соединение 88 (1,08 г, 3,14 ммоль), гидрохлорид 6-хлорпиридин-3карбоксимидамида (900 мг, 4,69 ммоль) и K2CO3 (1,30 г, 9,42 ммоль) в EtOH (15 мл) нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 120°C в течение 3 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Необработанный продукт растворяли в CH2Cl2 (31 мл) и обрабатывали DDQ (713 мг, 3,14 ммоль). После того как реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин; фильтровали через слой Celite®; и элюировали CH2Cl2. Органическую фазу фильтрата отделяли. Водную фазу экстрагировали CH2Cl2. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 05% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение 363 (902 г, выход 60%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=480 (M+1).
Соединение 364. Смесь соединения 363 (150 мг, 0,31 ммоль), циклопропилбороновой кислоты (45 мг, 0,52 ммоль), фосфата калия (330 мг, 1,56 ммоль), трициклогексилфосфина (27 мг, 0,096 ммоль), ацетата палладия (12 мг, 0,054 ммоль), толуола (2 мл) и воды (0,1 мл) во флаконе продували азотом в течение 5 мин. Флакон герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 130°C в течение 4 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 364 (135 мг, выход 89%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=486 (M+1).
Соединение 365. Соединение 364 (135 мг, 0,28 ммоль) в МеОН (1,8 мл) обрабатывали водн. 3N HCl (0,92 мл, 2,76 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 365 (123 мг, количественный выход) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=442 (M+1).
Соединение 366. Соединение 365 (123 мг, <0,28 ммоль) растворяли в этилформиате (0,67 мл, 8,33 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,63 мл, 2,75 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 15 мин смесь превращалась в полутвердое вещество. Добавляли этилформиат (0,67 мл, 8,33 ммоль). Смесь перемешивали в течение еще 45 мин при комнатной температуре и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,46 мл, 2,76 ммоль), EtOH (2,7 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (30 мг, 0,43 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 3 ч и концентрировали. Остаток разбавляли водн. насыщ. NaHCO3 и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 366 (113 мг, выход 87%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Соединение 367. Соединение 366 (110 мг, 0,24 ммоль) растворяли в МеОН (2,4 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,11 мл, 0,48 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Водн. 10% NaH2PO4. Смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 367 (103 мг, выход 94%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Т140. Соединение 367 (103 мг, 0,22 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,6 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5, 5-диметилгидантоин (32 мг, 0,11 ммоль) в ДМФ (0,5 мл). После перемешивания реакционной смеси при 0°C в течение 1 ч добавляли пиридин (54 мкл, 0,67 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 4 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 4 раза водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом (10 мл). Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение Т140 (81 мг, выход 79%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,53 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 9,00 (с, 1Н), 8,55 (дд, J=2,0, 8,0 Гц, 1Н), 7,50 (м, 1Н), 7,43 (тд, J=7,4, 1,8 Гц, 1Н), 7,31 (тд, J=7,5, 1,1 Гц, 1Н), 7,26 (м, 1Н), 7,19 (ддд, J=9,6, 8,3, 1,0 Гц, 1Н), 2,79 (м, 2Н), 2,60 (дк, J=13,4, 6,7 Гц, 1Н), 2,24 (тд, J=12,8, 2,7 Гц, 1Н), 2,12 (м, 2Н), 1,78 (м, 1Н), 1,53 (с, 3H), 1,31 (д J=6,7 Гц, 3H), 1,14 (м, 2Н), 1,07 (м, 2Н); m/z=465 (M+1).
Соединение 368. Смесь соединения 363 (166 мг, 0,35 ммоль), фенилбороновой кислоты (55 мг, 0,45 ммоль), карбоната калия (239 мг, 1,73 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (12 мг, 0,010 ммоль), толуола (2 мл), EtOH (1 мл) и воды (1 мл) в сосуде продували азотом в течение 5 мин. Флакон
- 167 043609 герметично закрывали и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 110°C в течение 1 ч. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 368 (148 мг, выход 82%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=522 (M+1).
Соединение 369. Соединение 368 (144 мг, 0,28 ммоль) растворяли в ТГФ (1,8 мл) и МеОН (1,8 мл). Водн. 3N HCl (0,92 мл, 2,76 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 369 (138 мг, количественный выход) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=478 (M+1).
Соединение 370. Соединение 369 (138 мг, <0,28 ммоль) растворяли в этилформиате (0,67 мл, 8,33 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,63 мл, 2,75 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,46 мл, 2,76 ммоль), EtOH (2,8 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (29 мг, 0,42 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 14 ч и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 040% EtOAc в гексанах), получая соединение 370 (115 мг, выход 82%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=503 (M+1).
Соединение 371. Соединение 370 (112 мг, 0,22 ммоль) растворяли в МеОН (2,2 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,10 мл, 0,44 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Водн. 10% NaH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 371 (101 мг, выход 90%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=503 (M+1).
Т141. Соединение 371 (100 мг, 0,20 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,5 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (28 мг, 0,098 ммоль) в ДМФ (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (48 мкл, 0,59 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 1,5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 4 раза водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом (10 мл). Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение Т141 (72 мг, выход 72%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,77 (дд, J=2,2, 0,8 Гц, 1Н), 9,04 (с, 1Н), 8,79 (дд, J=8,3, 2,2 Гц, 1Н), 8,11 (м, 2Н), 7,88 (дд, J=8,3, 0,9 Гц, 1Н), 7,50 (м, 5Н), 7,34 (тд, J=7,5, 1,1 Гц, 1Н), 7,22 (ддд, J=0,8, 8,4, 9,6 Гц, 1Н), 2,84 (м, 2Н), 2,61 (дк, J=13,4, 6,7 Гц, 1Н), 2,26 (тд, J=12,8, 2,8 Гц, 1Н), 2,12 (м, 1Н), 1,80 (м, 1Н), 1,56 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=501 (M+1).
Соединение 372. Смесь соединения 363 (382 мг, 0,80 ммоль), винилтрифторбората калия (214 мг, 1,60 ммоль), фосфата калия (296 мг, 1,40 ммоль), трициклогексилфосфина (11 мг, 0,039 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладия (15 мг, 0,016 ммоль) взвешивали во флаконе и помещали в вакуум. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (7,5 мл) и воду (1,5 мл). Смесь продували азотом в течение 2 мин и нагревали в микроволновом синтезаторе Biotage® при 140°C в течение 30 мин. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали, а остаток разбавляли толуолом и снова концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 372 (240 мг, выход 64%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=472 (M+1).
Соединение 373. Соединение 372 (300 мг, 0,64 ммоль) в МеОН (2,1 мл) и ТГФ (2,1 мл) обрабатывали водн. 3N HCl (2,1 мл, 6,3 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 373 (260 мг, выход 96%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=428 (M+1).
Соединение 374. Соединение 373 (257 мг, 0,60 ммоль) растворяли в этилформиате (1,5 мл, 18,64 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 1,4 мл, 6,12 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (1,02 мл, 6,12 ммоль), EtOH (6 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (63 мг, 0,91 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 3 ч и концентрировали. Остаток разбавляли водн. насыщ. NaHCO3 и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 040% EtOAc в гексанах), получая соединение 374 (49 мг, выход 18%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=453 (M+1).
Соединение 375. Смесь соединения 374 (46 мг, 0,10 ммоль), метансульфината натрия (52 мг, 0,51
- 168 043609 ммоль), EtOH (0,64 мл) и уксусной кислоты (58 мкл, 1,01 ммоль) нагревали при 60°C в атмосфере азота в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли толуолом и EtOAc и промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в гексанах), получая соединение 375 (48 мг, выход 89%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=533 (M+1).
Соединение 376. Соединение 375 (46 мг, 0,086 ммоль) растворяли в МеОН (0,86 мл). Добавляли карбонат калия (48 мг, 0,35 ммоль). После перемешивания смеси при комнатной температуре в течение ночи добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в гексанах), получая соединение 376 (31 мг, выход 67%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=533 (M+1).
Т142. Соединение 376 (30 мг, 0,056 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,15 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (8 мг, 0,028 ммоль) в ДМФ (0,15 мл). После перемешивания реакции при 0°C в течение 1 ч добавляли пиридин (14 мкл, 0,17 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C (масляная баня) в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали 4 раза водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом (10 мл). Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в гексанах), получая соединение Т142 (22 мг, выход 74%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,61 (дд, J=2,3, 0,8 Гц, 1Н), 8,99 (с, 1Н), 8,70 (дд, J=8,1, 2,2 Гц, 1Н), 7,51 (м, 1Н), 7,44 (тд, J=7,4, 1,9 Гц, 1Н), 7,38 (д, J=8,2 Гц, 1Н), 7,33 (тд, J=7,5, 1,1 Гц, 1Н), 7,21 (ддд, J=9,7, 8,3, 1,0 Гц, 1Н), 3,65 (м, 2Н), 3,44 (м, 2Н), 2,89 (с, 3H), 2,82 (м, 2Н), 2,61 (м, 1Н), 2,25 (тд, J=12,8, 2,8 Гц, 1Н), 2,11 (м., 1Н), 1,80 (м, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=531 (М+1).
Соединение 377. Смесь соединения 88 (6,34 г, 18,41 ммоль), 2-метил-4-пиридинкарбоксимидамида гидрохлорида (4,74 г, 27,62 ммоль) и карбоната калия (6,4 г, 46,3 ммоль) в EtOH (40 мл) нагревали при 80°C в атмосфере азота. Через 48 ч смесь фильтровали; фильтрат концентрировали; и остаток распределяли между водн. насыщ. раствором KH2PO4 (100 мл) и EtOAc (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (100 мл) и обрабатывали оксидом марганца(IV) (88%, 9,1 г, 92,1 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 377 (6,09 г, выход 72%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=460 (M+1).
Соединение 378. Раствор соединения 377 (1,70 г, 3,70 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота в CH2Cl2 (20 мл) обрабатывали порционным добавлением (в течение 10 мин) твердой 3хлорпероксибензойной кислоты (<77%, 0,91 г, <4,06 ммоль). После перемешивания в течение 1 ч раствор промывали водн. 1N NaOH (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 378 (1,88 г, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=476 (M+1).
Соединение 379. Смесь соединения 378 (1,88 г, <3,70 ммоль) в уксусном ангидриде (20 мл) нагревали при 80°C в атмосфере азота в течение ночи. Полученный темно-коричневый раствор охлаждали, концентрировали и очень осторожно распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (100 мл) и EtOAc (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 379 (1,08 г, выход 56%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=518 (M+1).
Соединение 380. Смесь соединения 379 (1,08 г, 2,09 ммоль) и карбоната калия (1,44 г, 10,42 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 1 ч. Смесь фильтровали через слой Celite®; фильтрат концентрировали; и остаток был осторожно распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 380 (0,91 г, выход 92%) в виде желтого твердого вещества. m/z=476 (M+1).
Соединение 381. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 380 (0,45 г, 0,95 ммоль), триэтиламина (0,17 мл, 1,22 ммоль) и каталитического количества 4диметиламинопиридина в CH2Cl2 (10 мл) по каплям добавляли раствор метансульфонилхлорида (0,13 г, 1,13 ммоль) в CH2Cl2 (2 мл). После перемешивания в течение 4 ч при 0°C, смесь промывали водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая неочищенное соединение 381 (0,47 г, выход 90%) в виде светло-желто-зеленого пенистого твердого вещества, которое сразу использовали в следующей реакции без очистки. m/z=554 (M+1).
Соединение 382. Раствор неочищенного соединения 381 (0,47 г, 0,85 ммоль) и метансульфината на- 169 043609 трия (0,12 г, 1,18 ммоль) в ДМФ (8 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Смесь распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (100 мл) и EtOAc (100 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (100 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 382 (0,23 г, выход 49%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=538 (M+1).
Соединение 383. Раствор соединения 382 (0,23 г, 0,43 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали водн. 3N HCl (1,4 мл, 4,2 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи смесь концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 383 (0,20 г, выход 95%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=494 (M+1).
Соединение 384. К перемешиваемому раствору при 0°C (под сушильной трубкой) соединения 383 (0,17 г, 0,34 ммоль) в этилформиате (10 мл) по каплям добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 0,19 г, 1,06 ммоль). После добавления ледяную баню убирали и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Полученную желтую суспензию распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая неочищенное соединение 384 (0,17 г) в виде яркожелтого пенистого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. m/z=522 (M+1).
Соединение 385. К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере азота раствору необработанного соединения 384 (0,17 г, <0,34 ммоль) и уксусной кислоты (0,20 мл, 3,49 ммоль) в EtOH (20 мл) и добавляли гидрохлорид гидроксиламина (36 мг, 0,52 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение 2 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток осторожно распределяли между водн. насыщ. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3), получая соединение 385 (77 мг, выход 43% из соединения 383) в виде желтой пенистой маслянистой жидкости. m/z=519 (M+1).
Соединение 386. Смесь соединения 385 (77 мг, 0,15 ммоль) и карбоната калия (0,10 г, 0,72 ммоль) в МеОН (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток распределяли между EtOAc (25 мл) водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 386 (60 мг, выход 78%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=519 (M+1).
Т143. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере азота раствору соединения 386 (60 мг, 0,12 ммоль) в дегазированном ДМФ (2 мл) добавляли одной порцией 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (18 мг, 0,063 ммоль). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,10 мл, 1,24 ммоль). Ледяную баню удаляли, смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах). Полученный продукт растворяли в EtOAc (5 мл) и промывали водой (2x5 мл).
Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали, концентрировали и сушили в вакууме, получая соединение Т143 (26 мг, выход 43%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl·,) δ 8,99 (с, 1Н), 8,79 (д, J=5,2 Гц, 1Н), 8,49 (уш. с. 1Н), 8,39 (дд, J=5,2, 1,6 Гц, 1Н), 7,53 (м, 1Н), 7,44 (тд, J=7,4, 1,9 Гц, 1Н), 7,34 (тд, J=7,5, 1,1 Гц, 1Н), 7,22 (ддд, J=9,7, 8,4, 1,1 Гц, 1Н), 4,56 (с, 2Н), 3,00 (с, 3H), 2,84 (м, 2Н), 2,63 (дк, J=13,4, 6,7 Гц, 1Н), 2,26 (тд, J=12,8, 2,7 Гц, 1Н), 2,13 (м, 1Н), 1,80 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=517 (M+1).
Соединение 387. Смесь соединения 380 (3,25 г, 6,83 ммоль) и оксида марганца(IV) (88%, 7,0 г, 70,85 ммоль) в CH2Cl2 (150 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 2 дней. Смесь фильтровали через слой Celite® и фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах) с получением соединения 387 (2,05 г, выход 63%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=474 (M+1).
Соединение 388. К суспензии метилтрифенилфосфонийбромида (765 мг, 2,14 ммоль) в безводном ТГФ (16 мл) при 0°C в атмосфере азота добавляли порциями при перемешивании трет-бутоксид калия (240 мг, 2,14 ммоль). После завершения добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч; охлаждали до 0°C; и обрабатывали по каплям раствором соединения 387 (254 мг, 0,536 ммоль) в безводном ТГФ (5,0 мл). После завершения добавления реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 19 ч; разбавляли водой; и экстрагировали EtOAc (2x60 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гекса
- 170 043609 нах), получая соединение 388 (201 мг, выход 79%) в виде белого стекла. m/z=472 (M+1).
Соединение 389. Раствор соединения 388 (195 мг, 0,413 ммоль) в ТГФ (15 мл) обрабатывали водн. 3,0N HCl (1,38 мл, 4,14 ммоль). После того как реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 23 ч, растворитель удаляли in vacuo. Остаток охлаждали до 0°C, осторожно нейтрализовывали с помощью водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 389 (178 мг, количественный выход) в виде желтого стекла. m/z=428 (M+1).
Соединение 390. Раствор соединения 389 (176 мг, 0,411 ммоль) в этилформиате (10 мл) охлаждали до 0°C и по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М раствор в МеОН, 0,38 мл, 2,05 ммоль). Холодную баню убирали и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 390 (168 мг, выход 90%) в виде грязно-белого стекла. m/z=456 (M+1).
Соединение 391. Раствор соединения 390 (168 мг, 0,368 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (0,22 мл, 3,85 ммоль) и EtOH (6 мл) обрабатывали гидрохлоридом гидроксиламина (38 мг, 0,546 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при 60°C в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение 19 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток осторожно распределяли между водн. 10% NH4OH и EtOAc. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 391 (153 мг, выход 92%) в виде оранжевого стекла. m/z=453 (M+1).
Соединение 392. Раствор соединения 391 (153 мг, 0,338 ммоль) в EtOH (10 мл) обрабатывали метансульфинатом натрия (345 мг, 3,38 ммоль) и ледяной уксусной кислотой (0,20 мл, 3,50 ммоль). После того как реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при 60°C в течение 4 ч, растворитель удаляли in vacuo. Остаток разделяли между водн. 10% NH4OH и EtOAc. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 60% EtOAc в гексанах), получая соединение 392 в виде грязно-белого стекла (66 мг, 37% выход). m/z=533 (M+1).
Соединение 393. Суспензию соединения 392 (63 мг, 0,118 ммоль) и карбоната калия (33 мг, 0,236 ммоль) в МеОН (5 мл) перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 23 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 393 (50 мг, выход 79%) в виде светло-желтого стекла. m/z=533 (M+1).
Т144. Раствор соединения 393 (50 мг, 0,093 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота и по каплям обрабатывали раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (14,6 мг, 0,051 ммоль) в безводном ДМФ (1 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли безводный пиридин (75 мкл, 0,93 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 80% EtOAc в гексанах), получая соединение Т144 (39 мг, выход 79%) в виде светло-желтого стекла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,00 (с, 1Н), 8,72 (д, J=5,2 Гц, 1Н), 8,28 (уш. с, 1Н), 8,24 (дд, J=5,2, 1,6 Гц, 1Н), 7,53 (м, 1Н), 7,45 (тд, J=7,4, 1,9 Гц, 1Н), 7,35 (тд, J=7,5, 1,1 Гц, 1Н), 7,22 (ддд, J=9,7, 8,4, 1,1 Гц, 1Н), 3,64 (м, 2Н), 3,48 (м, 2Н), 2,90 (с, 3H), 2,82 (м, 2Н), 2,62 (м, 1Н), 2,26 (тд, J=12,8, 2,8 Гц, 1Н), 2,13 (м, 1Н), 1,81 (м, 1Н), 1,56 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=531 (M+1).
Соединение 395. К смеси соединения 394 (2,00 г, 11,22 ммоль) в этиленгликоле (56 мл) добавляли моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (2,13 г, 11,20 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 35 мин и затем выливали в смесь NaHCO3 (5 г) и льда (100 г). После перемешивания при температуре окружающей среды в течение 20 мин смесь экстрагировали EtOAc (4x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 395 (2,12 г, выход 85%) в виде вязкой маслянистой жидкости. m/z=223,1 (M+1).
Соединение 396. Раствор соединения 395 (1,00 г, 4,50 ммоль) и воды (146 мкл, 8,11 ммоль) в тетрагидрофуране (15 мл) по каплям добавляли к перемешиваемому раствору лития (109 мг, 15,71 ммоль) в жидком аммиаке (50 мл) при -78°C в атмосфере азота. После добавления холодную баню убирали; смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 10 мин; и охлаждали до -78°C. Добавляли аллилбромид (3,9 мл, 45,07 ммоль). Смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч; холодную баню убирали; и аммиак выпаривали при температуре окружающей среды. Остаток распределяли между EtOAc и водн. 10% NaH2PO4. Органический экстракт отделяли, а водную фазу дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 396 (1,06 г, выход 89%) в виде вязкой маслянистой жидкости. m/z=265,1 (M+1).
- 171 043609
Соединения 397 и 398. Раствор соединения 396 (1,06 г, 4,01 ммоль) в EtOH (20 мл) обрабатывали NaBH4 (76 мг, 2,01 ммоль) при 0°C. После того как смесь перемешивали при температуре от 0°C в течение 1 ч, добавляли дополнительное количество NaBH4 (20 мг, 0,53 ммоль) и смесь перемешивали в течение еще 30 мин. Добавляли водн. 3N HCl (16,4 мл, 49,2 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 72 ч и концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 397 (402 мг, выход 45%) и соединение 398 (474 мг, выход 53%) в виде белого твердого вещества.
Соединение 399. Соединение 398 (471 мг, 2,11 ммоль) растворяли в EtOH (8,5 мл). Последовательно добавляли 2-фторбензальдегид (246 мкл, 2,33 ммоль) и фторид калия на оксиде алюминия (5,5 ммоль/г, 579 мг, 3,18 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч; фильтровали через слой Celite®; и элюировали EtOAc. Фильтрат промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 399 (560 мг, выход 80%) в виде вязкой маслянистой жидкости. m/z=329,1 (M+1).
Соединение 400. Соединение 399 (180 мг, 0,55 ммоль) растворяли в EtOH (5,5 мл). Добавляли 2циклопропил-4-карбоксимидамид пиридина гидрохлорид (163 мг, 0,82 ммоль) и K2CO3 (227 мг, 1,64 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc и водой. Органический экстракт отделяли, а водную фазу дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 080% ацетона в гексанах), получая продукт (180 мг) в виде желтого стекла. Соединение растворяли в CH2Cl2 (3,7 мл). Добавляли оксид марганца(IV) (88%, 286 мг, 2,89 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 400 (145 мг, выход 56%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=470,2 (M+1).
Соединение 401. К раствору соединения 400 (140 мг, 0,30 ммоль) в CH2Cl2 (3 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (190 мг, 0,45 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания реакции в течение 2 ч при комнатной температуре добавляли водн. 10% Na2SO3 и водн. насыщ. NaHCO3. Смесь трижды экстрагировали CH2Cl2. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 401 (125 мг, выход 89%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=468,2 (M+1).
Соединение 402. Соединение 401 (125 мг, 0,27 ммоль) растворяли в этилформиате (0,65 мл, 8,08 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,61 мл, 2,67 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,45 мл, 2,70 ммоль), EtOH (2,7 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (28 мг, 0,40 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 16 ч и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 402 (113 мг, выход 86%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=493,2 (M+1).
Соединение 403. Соединение 402 (111 мг, 0,23 ммоль) растворяли в МеОН (2,4 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 110 мкл, 0,48 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Добавляли водн. 10% NaH2PO4. Смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 403 (107 мг, выход 96%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=493,2 (M+1).
Т145. К раствору соединения 403 (23 мг, 0,047 ммоль) в толуоле (1 мл) добавляли DDQ (12 мг, 0,053 ммоль). Смесь нагревали до 85°C в течение 1 ч; охлаждали до комнатной температуры; и очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т145 (14 мг, выход 61%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,03 (с, 1Н), 8,60 (дд, J=0,8, 5,2 Гц, 1Н), 8,19 (дд, J=0,8, 1,6 Гц, 1Н), 8,06 (дд, J=1,6, 5,1 Гц, 1Н), 7,52 (ддт, J=1,9, 5,3, 7,9 Гц, 1Н), 7,45 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,22 (м, 1Н), 5,64 (м, 1Н), 5,12 (м, 2Н), 3,04 (м, 1Н), 2,77 (дд, J=4,3, 8,7 Гц, 2Н), 2,69 (тд, J=4,2, 13,1 Гц, 1Н), 2,48 (м, 2Н), 2,19 (м, 2Н), 1,78 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,12 (м, 2Н), 1,05 (м, 2Н); m/z=491,2 (M+1).
Соединение 404. Соединение 403 (85 мг, 0,17 ммоль) и 10% палладий на угле (20 мг) в EtOAc (5 мл) гидрировали (давление в баллоне) при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-45% EtOAc в гексанах), получая соединение 404 (68 мг, выход 80%) в виде
- 172 043609 белого пенистого твердого вещества. m/z=495,2 (M+1).
Т146. Соединение 404 (68 мг, 0,14 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (0,3 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (20 мг, 0,070 ммоль) в ДМФ (0,4 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 1 ч добавляли пиридин (34 мкл, 0,42 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь разбавляли EtOAc и трижды промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Неочищенный продукт очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая частично очищенный продукт, который снова очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% ацетоном в гексанах) с получением соединения Т146 (41 мг, выход 60%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,00 (с, 1Н), 8,60 (дд, J=0,8, 5,2 Гц, 1Н), 8,20 (дд, J=0,8, 1,6 Гц, 1Н), 8,07 (дд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,52 (дддд, J=1,9, 5,3, 7,2, 8,3 Гц, 1Н), 7,45 (дт, J=1,8, 7,4 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,21 (ддд, J=1,0, 8,3, 9,6 Гц, 1H), 2,81 (м, 2Н), 2,60 (ддд, J=3,2, 4,9, 13,1 Гц, 1Н), 2,46 (дт, J=2,5, 12,8 Гц, 1Н), 2,21 (тт, J=4,8, 8,1 Гц, 1Н), 2,09 (м, 2Н), 1,81 (м, 1Н), 1,69 (м, 1Н), 1,53 (с, 3H), 1,34 (м, 1Н), 1,20 (м, 1Н), 1,12 (м, 2Н), 1,04 (м, 2Н), 0,93 (т, J=7,2 Гц, 3H); m/z=493,2 (M+1).
Соединение 406. К раствору соединения 405 (6,52 г, 34,64 ммоль) в MeCN (60 мл) добавляли триэтиламин (9,64 мл, 69,29 ммоль) и этилвинилкетон (5,18 мл, 52,03 ммоль) при комнатной температуре. Смесь нагревали при 75°C в течение 22 ч и концентрировали. Остаток растворяли в MeCN (2x100 мл) и концентрировали. Неочищенный продукт сушили в вакууме и затем растворяли в ДМСО (20 мл). При комнатной температуре добавляли п-толуолсульфонат пиридиния (8,71 г, 34,66 ммоль) и D-фенилаланин (5,72 г, 34,63 ммоль). Смесь нагревали при 45°C в течение 74 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли МТВЕ (80 мл), водн. насыщ. NH4Cl (40 мл) и воду (40 мл). Смесь перемешивали в течение 5 мин. Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали МТВЕ (2x40 мл). Объединенные органические слои промывали водой (3x40 мл) сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 406 (6,13 г, выход 70%) в виде желтой маслянистой жидкости. m/z=255,1 (M+1).
Соединение 407. К раствору соединения 406 (4,255 г, 16,73 ммоль) добавляли NaBH4 (210 мг, 5,55 ммоль) при 0°C. После того как смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч, добавляли дополнительное количество NaBH4 (30 мг, 0,79 ммоль) и смесь перемешивали в течение еще 30 мин. 10% NaH2PO4. Смесь перемешивали в течение 5 мин и концентрировали. Остаток дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 407 (3,330 г, выход 78%, 79% ее) в виде белого твердого вещества. Соединение 407 растворяли в МТВЕ (30 мл) при 50°C и обрабатывали гексанами (30 мл). Смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выдерживали при 4°C в течение 16 ч. Осажденное твердое вещество собирали фильтрацией; промывали смесью гексаны/МТВЕ (2/1 по объему); и сушили в вакууме, получая соединение 407 (1,758 г, 41% выход, 99% ее) в виде белого твердого вещества. m/z=257,1 (M+1).
Соединение 408. Соединение 407 (1,003 мг, 3,92 ммоль), 10% палладий на угле (200 мг) в пиридине (2 мл) и ТГФ (8 мл) гидрировали (давление в баллоне) при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь фильтровали через слой Celite® и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом (2x50 мл). Неочищенный продукт растворяли в EtOH (8 мл). Водн. 3N HCl (3 мл, 9 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc и водой. Органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 408 (938 мг, выход 93%) в виде вязкой маслянистой жидкости. m/z=241,1 (M-17).
Соединение 409. Смесь соединения 408 (935 мг, 3,62 ммоль), этиленгликоля (1,01 мл, 18,11 ммоль), моногидрата п-толуолсульфоновой кислоты (69 мг, 0,36 ммоль) в толуоле (20 мл) нагревали с обратным холодильником в ловушке Дина-Старка в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь промывали водн. насыщ. NaHCO3 и водой. Водные смывки дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 409 (1,20 г) в виде вязкой маслянистой жидкости. m/z=285,2 (M-17).
Соединение 410. Двухосновный фосфат натрия (21 мг, 0,15 ммоль) и дигидрат вольфрамата натрия (12 мг, 0,036 ммоль) растворяли в водн. 30% Н2О2 (0,43 мл, 4,21 ммоль) с получением желтого раствора. Раствор добавляли по каплям к раствору соединения 409 (1,20 г, <3,62 ммоль) в N,N-диметилацетамиде (7 мл) при 60°C. Смесь нагревали при 90°C в течение 3 ч и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc. Смесь промывали водой. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая неочищенный продукт в виде белого твердого вещества. Неочищенный продукт перекристаллизовывали из МТВЕ/гексанов, получая соединение 410 (837 мг, 77% выход из соединения 408) в виде белого твердого вещества. Маточный раствор концентрировали и остаток очищали
- 173 043609 флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах) с получением 2-й порции соединения 410 (150 мг, выход 14% из соединения 408) как вязкое масло. m/z=301,1 (M+1).
Соединение 411. Соединение 410 (450 мг, 1,50 ммоль) растворяли в EtOH (6 мл). Последовательно добавляли 2-фторбензальдегид (190 мкл, 1,80 ммоль) и фторид калия на оксиде алюминия (5,5 ммоль/г, 409 мг, 2,25 ммоль). После перемешивания смеси при комнатной температуре в течение 1 ч добавляли ТГФ (1,5 мл). Смесь продолжали перемешивать еще 60 ч; разбавляли EtOAc; фильтровали через слой силикагеля; и элюировали EtOAc.
Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 040% EtOAc в гексанах), получая соединение 411 (480 мг, выход 79%) в виде белого твердого вещества. m/z=407,2 (M+1).
Соединение 412а. Соединение 411 (150 мг, 0,37 ммоль) растворяли в EtOH (3,7 мл). Добавляли гидрохлорид 2-циклопропил-4-карбоксимидамида пиридина (110 мг, 0,56 ммоль) и K2CO3 (153 мг, 1,11 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 18 ч; охлаждали до комнатной температуры; разбавляли EtOAc; и промывали водой. Органический экстракт отделяли, а водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенное соединение растворяли в CH2Cl2 (3,7 мл). Добавляли DDQ (84 мг, 0,37 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, разбавляли МТВЕ (30 мл) и водн. насыщ. NaHCO3 (30 мл); и перемешивали в течение 15 мин. Органическую фазу отделяли, промывали насыщ. водн. NaHCO3; сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 412а (40 мг, 20% выход) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=548,3 (M+1).
Соединение 413а. Раствор соединения 412а (39 мг, 0,071 ммоль) в МеОН (0,7 мл) и ТГФ (0,35 мл) обрабатывали водн. 3N раствором HCl (0,24 мл, 0,72 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи смесь распределяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт отделяли, а водную фазу дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 413а (35 мг, выход 97%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=504,3 (M+1).
Соединение 414а. Соединение 413а (35 мг, 0,069 ммоль) растворяли в этилформиате (0,17 мл, 2,11 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,16 мл, 0,70 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6N HCl (0,12 мл, 0,72 ммоль), EtOH (0,7 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (8 мг, 0,12 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 14 ч и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 414а (28 мг, выход 76%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=529,2 (M+1).
Соединение 415а. Соединение 414а (26 мг, 0,049 ммоль) растворяли в МеОН (0,5 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 24 мкл, 0,10 ммоль) добавляли при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Водн. 10% NaH2PO4 (10 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (2x15 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 415а (23 мг, выход 88%) в виде светложелтого пенистого твердого вещества. m/z=529,2 (M+1).
Т147. Соединение 415а (23 мг, 0,044 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (0,22 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (6,2 мг, 0,022 ммоль) в ДМФ (0,1 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 1 ч добавляли пиридин (11 мкл, 0,14 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 2,5 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь разбавляли EtOAc (20 мл) и промывали водой (3x10 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% ацетона в гексанах), получая соединение Т147 (18 мг, выход 78%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,07 (с, 1Н), 8,54 (дд, J=0,8, 5,2 Гц, 1Н), 8,11 (м, 1Н), 7,98 (дд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,55 (м, 2Н), 7,36 (м, 4Н), 7,26 (м, 1Н), 6,89 (м, 2Н), 2,93 (м, 2Н), 2,50 (дд, J=6,4, 12,9 Гц, 1Н), 2,43 (дт, J=2,5, 12,7 Гц, 1Н), 2,14 (тт, J=4,9, 8,2 Гц, 1Н), 1,93 (м, 1Н), 1,63 (м, 1Н), 1,19 (д, J=6,3 Гц, 3H), 1,07 (м, 2Н), 1,00 (м, 2Н); m/z=527,2 (M+1).
Соединение 412b. Соединение 411 (150 мг, 0,37 ммоль) растворяли в EtOH (3,7 мл). Добавляли 4хинолинкарбоксимидамида гидрохлорид (115 мг, 0,55 ммоль) и K2CO3 (153 мг, 1,11 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 18 ч; охлаждали до комнатной температуры; разбавляли EtOAc; и промывали водой. Органический экстракт отделяли, а водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенное соединение растворяли в CH2Cl2 (3,7 мл). Добавляли DDQ (84 мг, 0,37 ммоль). Смесь пе- 174 043609 ремешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, разбавляли МТВЕ (30 мл) и водн. насыщ.
NaHCO3 (30 мл); и перемешивали в течение 15 мин. Органическую фазу отделяли, промывали насыщ.
водн. NaHCO3; сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюировали 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 412b (71 мг,
35% выход). m/z=558,2 (M+1).
Соединение 413b. Раствор соединения 412b (69 мг, 0,12 ммоль) в МеОН (1,2 мл) и ТГФ (0,6 мл) обрабатывали водн. 3N раствором HCl (0,41 мл, 1,23 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи смесь распределяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Органический экстракт отделяли, а водную фазу дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюировали от 0 до 70% EtOAc в гексанах), получая соединение 413b (56 мг, выход 88%). m/z=514,2 (М+1).
Соединение 414b. Соединение 413b (56 мг, 0,11 ммоль) растворяли в этилформиате (0,26 мл, 3,23 ммоль) и охлаждали до 0°C. Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,25 мл, 1,09 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли водн. 6 N HCl (0,18 мл, 1,08 ммоль), EtOH (1,1 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (12 мг, 0,17 ммоль). Смесь нагревали до 55°C (масляная баня) в течение 14 ч и концентрировали. Добавляли водн. насыщ. NaHCO3. Смесь дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах), получая соединение 414b (41 мг, выход 70%) в виде светложелтого пенистого твердого вещества. m/z=539,2 (M+1).
Соединение 415b. Соединение 414b (41 мг, 0,076 ммоль) растворяли в МеОН (0,8 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 37 мкл, 0,16 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Водн. 10% NaH2PO4 (10 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (2x15 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-40% ацетона в гексанах), получая соединение 415b (27 мг, выход 66%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=539,2 (М+1).
Т148. Соединение 415b (27 мг, 0,050 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (0,25 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (7,2 мг, 0,025 ммоль) в ДМФ (0,1 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 1 ч добавляли пиридин (12 мкл, 0,15 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 2,5 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь разбавляли EtOAc (20 мл) и промывали водой (3x10 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-35% ацетона в гексанах), получая соединение Т148 (23 мг, выход 85%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,02 (д, J=4,8 Гц, 1Н), 8,97 (с, 1Н), 8,48 (дд, J=0,8, 8,4 Гц, 1Н), 8,16 (дд, J=0,8, 8,0 Гц, 1Н), 7,96 (д, J=4,8 Гц, 1Н), 7,71 (ддд, J=8,4, 6,9, 1,4 Гц, 1Н), 7,62-7,51 (м, 2Н), 7,48 (ддд, J=8,4, 6,9, 1,3 Гц, 1Н), 7,43-7,26 (м, 5Н), 6,97-6,89 (м, 2Н), 3,05-2,93 (м, 2Н), 2,58-2,43 (м, 2Н), 1,98 (м, 1Н), 1,68 (м, 1Н), 1,21 (д, J=6,0 Гц, 3H); m/z=537,2 (M+1).
Соединение 416. Соединение 188с (430 мг, 0,95 ммоль) растворяли в этилформиате (2,29 мл, 28,5 ммоль). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 3,27 мл, 14,28 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 4 ч реакционную смесь нейтрализовывали водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 416 (430 мг, выход 94%) в виде желтой пены. m/z=480,2 (M+1).
Соединение 417. Соединение 416 (430 мг, 0,90 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (4,5 мл). Добавляли MgSO4 (431,8 мг, 3,59 ммоль), моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (17,1 мг, 0,09 ммоль) и Nметиланилин (0,214 мл, 1,97 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч в атмосфере азота, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 417 (327 мг, выход 64%) в виде желтой пены. m/z=569,2 (М+1).
Соединение 418. К раствору трет-бутоксида калия (71 мг, 0,63 ммоль) в ТГФ (1 мл) в атмосфере аргона добавляли раствор соединения 416 (120 мг, 0,21 ммоль) в ТГФ (1 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 10 мин и обрабатывали иодистым метилом (39 мкл 0,63 ммоль). После перемешивания при 0°C в течение дополнительных 2 ч реакцию гасили добавлением водн. насыщ. NH4Cl (10 мл) и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 418 (71 мг, выход 58%) в виде бледно-желтой пены. m/z=583,3 (М+1).
Соединение 419. К раствору соединения 418 (70 мг, 0,12 ммоль) в EtOH (1,2 мл) добавляли водн. 1N HCl (0,24 мл, 0,24 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (12,5 мг, 0,18 ммоль) последовательно при комнатной температуре. Смесь нагревали при 55°C в течение 4 ч и концентрировали. Остаток разбавляли
- 175 043609 водн. насыщ. NaHCO3 и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 419 (44 мг, выход 74%) в виде белой пены.
m/z=491,2 (М+1).
Соединение 420. К раствору соединения 419 (44 мг, 0,090 ммоль) в МеОН (0,89 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% раствор в МеОН, 30,8 мкл, 0,134 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч, охлаждали до 0°C, а затем нейтрализовали добавлением водн. 10% NaH2PO4. Смесь разбавляли водой и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 420 (40 мг, выход 91%) в виде бледножелтого твердого вещества, которое использовали на последующей стадии без дополнительной очистки. m/z=491,2 (М+1).
Т149. Раствор соединения 420 (40 мг, 0,082 ммоль) в безводном ДМФ (0,5 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота и по каплям обрабатывали раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (11,6 мг, 0,041 ммоль) в безводном ДМФ (0,3 мл). После перемешивания при 0°C в течение 2 ч добавляли безводный пиридин (19,8 мкл, 0,25 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 040% ацетона в гексанах), получая частично чистый продукт, который снова очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в CH2Cl2) с получением Т149 (13,0 мг, выход 33%) в виде желтой пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,16 (м, 1Н), 8,97 (д, J=3,8 Гц, 1Н), 8,96 (с, 1Н), 8,30 (дд, J=1,3, 7,3 Гц, 1Н), 8,27 (м, 1Н), 7,86 (дд, J=7,3, 8,5 Гц, 1Н), 7,49 (м, 3H), 7,32 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 2,89 (м, 2Н), 2,39 (дд, J=2,9, 12,1 Гц, 1Н), 2,01 (м, 2Н), 1,65 (с, 3H), 1,33 (с, 3H), 1,28 (с, 3H); m/z=489,2 (М+1).
Соединение 421. Раствор соединения 387 (1,09 г, 2,30 ммоль) и метил(трифенилфосфоранилиден)ацетата (1,16 г, 3,47 ммоль) в бензоле (25 мл) нагревали при 80°C в атмосфере азота. Через 2 ч раствор охлаждали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 30% EtOAc в гексанах), получая соединение 421 (1,36 г) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=530 (М+1). Спектр 1H ЯМР показывает, что соединение 421 представляет собой (95:5) смесь (E:Z) изомеров.
Соединение 422. Раствор соединения 421 (1,36 г, <2,30 ммоль) в EtOAc (25 мл) обрабатывали 10% палладием на угле (0,5 г). Смесь гидрировали (давление в баллоне) при комнатной температуре в течение 16 ч. Катализатор удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали, получая соединение 422 (1,23 г, количественный выход из соединения 420) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=532 (М+1).
Соединение 423. Раствор соединения 422 (1,23 г, 2,31 ммоль) в МеОН (25 мл) обрабатывали водн. 3N HCl (4,0 мл, 12,0 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи смесь концентрировали. Добавляли насыщ. водн. раствор NaHCO3 (50 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 423 (1,00 г, выход 89%) в виде светложелтого пенистого твердого вещества. m/z=488 (M+1).
Соединение 424. К перемешиваемому раствору при 0°C (под сушильной трубкой) соединения 423 (1,00 г, 2,06 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124,33 ммоль) по каплям добавляли метоксид натрия (30 мас.% раствор в метаноле, 2,0 мл, 10,7 ммоль). После добавления ледяную баню убирали и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Полученную желтую суспензию распределяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 424 (1,10 г, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=530 (M+1).
Соединение 425. К перемешиваемому раствору соединения 424 (1,10 г, <2,06 ммоль) и уксусной кислоты (1,2 мл, 21,0 ммоль) в EtOH (20 мл) добавляли гидрохлорид гидроксиламина (0,22 г, 3,17 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 60°C в течение 2 ч и после при комнатной температуре в течение ночи. После концентрирования остаток осторожно распределяли между насыщ. водн. раствором NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 425 (1,06 г, выход 98%) в виде желтого пенистой маслянистой жидкости. m/z=527 (M+1).
Соединение 426. Смесь соединения 425 (1,06 г, 2,01 ммоль) и карбоната калия (1,44 г, 10,42 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. раствором KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 426 (1,04 г, количественный выход) в виде темно-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=499 (M+1).
- 176 043609
Т150. К перемешиваемому раствору соединения 426 (1,04 г, <2,01 ммоль) при 0°C в атмосфере азота в дегазированном ДМФ (10 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,33 г, 1,15 ммоль) в ДМФ (2 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (1,7 мл, 21,0 ммоль). Ледяную баню удаляли, смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3), получая соединение Т150 (0,61 г, выход 61%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,98 (с, 1Н), 8,67 (дд, J=0,8, 5,4 Гц, 1Н), 8,37 (дд, J=1,6, 5,4 Гц, 1Н), 8,34 (уш. с, 1Н), 7,54 (м, 1Н), 7,44 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,35 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,23 (ддд, J=1,2, 8,5, 9,6 Гц, 1Н), 3,33 (м, 2Н), 2,91 (м, 2Н), 2,86 (м, 2Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,5 Гц, 1Н), 2,27 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,14 (м, 1Н), 1,81 (м, 1Н), 1,56 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=497 (М+1).
Т151. Раствор соединения Т150 (77 мг, 0,16 ммоль) и водн. 1N HCl (0,23 мл, 0,23 ммоль) в EtOH (10 мл) нагревали при 50°C в атмосфере азота. Через 16 ч раствор охлаждали и концентрировали. Остаток был аккуратно распределен между водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т151 (28 мг, выход 34%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,01 (с, 1Н), 8,70 (дд, J=0,8, 5,5 Гц, 1Н), 8,22 (м, 1Н), 8,17 (дд, J=1,6, 5,1 Гц, 1Н), 7,52 (м, 1Н), 7,44 (дт, J=1,8, 7,4 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=1,0, 7,5 Гц, 1H), 7,21 (ддд, J=1,0, 8,3, 9,6 Гц, 1Н), 4,14 (кв, J=7,2 Гц, 2Н), 3,25 (т, J=7,5 Гц, 2Н), 2,87 (т, J=7,6 Гц, 2Н), 2,81 (м, 2Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,12 (дд, J=6,7, 13,8 Гц, 1Н), 1,79 (кд, J=7,0, 12,7 Гц, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,23 (т, J=7,2 Гц, 3H); m/z=547 (M+Na).
Т152. Раствор соединения Т150 (68 мг, 0,14 ммоль), гидрохлорида диметиламина (14 мг, 0,17 ммоль) и HATU (62 мг, 0,16 ммоль) в CH2Cl2 (5 мл) при 0°C в атмосфере азота обрабатывали добавлением по каплям раствора N,N-диизопропилэтиламина (54 мг, 0,42 ммоль) в CH2Cl2 (1 мл). Реакционной смеси давали медленно нагреться до комнатной температуры в течение ночи и затем концентрировали. Остаток разделяли между водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 2% МеОН в CHCl3), получая соединение Т152 (31 мг, выход 43%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,01 (с, 1Н), 8,69 (дд, J=0,8, 1,6 Гц, 1Н), 8,26 (дд, J=0,8, 1,6 Гц, 1Н), 8,15 (дд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,51 (м, 1Н), 7,45 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,21 (ддд, J=1,0, 8,4, 9,7 Гц, 1Н), 3,27 (т, J=7,5 Гц, 2Н), 3,04 (с, 3H), 2,94 (с, 3H), 2,86 (м, 4Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,12 (м, 1Н), 1,81 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=524 (M+1).
Соединение 427. Раствор соединения 391 (350 мг, 0,773 ммоль) в EtOH (25 мл) обрабатывали этилсульфинатом натрия (897 мг, 7,73 ммоль) и ледяной уксусной кислотой (0,45 мл, 7,86 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при 60°C в течение 6 ч и растворитель удаляли in vacuo. Остаток разделяли между водн. 10% NH4OH и EtOAc. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование EtOAc) с получением соединения 427 (123 мг, 29% выход) как оранжевое стекло. m/z=547 (M+1).
Соединение 428. Смесь соединения 427 (123 мг, 0,225 ммоль) и карбоната калия (62 мг, 0,450 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 26 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 428 (112 мг, выход 91%) в виде оранжевого стекла, которое использовали без дополнительной очистки.
Т153. Раствор соединения 428 (110 мг, 0,201 ммоль) в безводном ДМФ (4 мл), охлажденный до 0°C в атмосфере азота, по каплям обрабатывали раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (32 мг, 0,111 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли безводный пиридин (0,16 мл, 1,98 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 20% EtOAc в гексанах), получая неочищенное соединение Т153 (69 мг) в виде оранжевого стекла. Продукт растворяли в EtOAc и пять раз промывали водой для удаления остаточного 5,5-диметилгидантоина. Органическую фазу сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение Т153 (44 мг, 40% выход) в виде оранжевого стекла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,00 (с, 1Н), 8,72 (дд, J=0,8, 5,1 Гц, 1Н), 8,28 (м, 1Н), 8,24 (дд, J=1,6, 5,1 Гц, 1Н), 7,53 (м, 1Н), 7,45 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,35 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,22 (ддд, J=1,1, 8,4, 9,6 Гц, 1Н), 3,58 (м, 2Н), 3,46 (м, 2Н), 2,99 (кв, J=7,5 Гц, 2Н), 2,83 (м, 2Н),
- 177 043609
2,63 (кв, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=2,7, 12,8 Гц,, 1Н), 2,13 (м, 1Н), 1,81 (м, 1Н), 1,56 (с, 3H), 1,42 (т,
J=7,5 Гц, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=545 (M+1).
Соединение 429. К перемешиваемому раствору соединения 136 (0,61 г, 1,39 ммоль) в CH2Cl2 (15 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота порциями добавляли 3-хлорпероксибензойную кислоту (<77%, 0,34 г, 1,52 ммоль) в течение 10 мин. Через 1 ч раствор промывали водн. 1N раствором NaOH (25 мл) и солевым раствором (25 мл). Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 429 (0,61 г, выход 96%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества, которое использовали без дальнейшей очистки. m/z=457 (M+1).
Соединение 430. К раствору соединения 429 (0,61 г, 1,34 ммоль) в CH2Cl2 (20 мл) по каплям добавляли трифторуксусный ангидрид (1,0 мл, 7,2 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 16 ч раствор концентрировали. Остаток смешивали с насыщ. водн. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Смесь перемешивали в течение 1 ч. Органический слой отделяли; промывали солевым раствором (50 мл); сушили над MgSO4; фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование EtOAc), получая соединение 430 (0,34 г, выход 56%) в виде желто-оранжевого пенистого твердого вещества. m/z=457 (M+1, 100%).
Соединение 431. К перемешиваемому раствору соединения 430 (0,34 г, 0,74 ммоль), триэтиламина (0,13 мл, 0,93 ммоль) и каталитического количества 4-диметиламинопиридина в CH2Cl2 (10 мл) при 0°C в атмосфере азота по каплям добавляли раствор метансульфонилхлорида (0,10 г, 0,87 ммоль) в CH2Cl2 (2 мл). После перемешивания при 0°C 15 мин смесь промывали водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и солевым раствором (25 мл). Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 431 (0,32 г, выход 81%) в виде светло-желто-зеленого пенистого твердого вещества, которое немедленно использовали в следующей реакции. m/z=535 (M+1).
Соединение 432. Раствор соединения 431 (0,32 г, 0,60 ммоль) и этилсульфината натрия (77 мг, 0,66 ммоль) в ДМФ (6 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Смесь распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 432 (0,28 г, выход 88%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=533 (М+1).
Соединение 433. Смесь соединения 432 (0,28 г, 0,53 ммоль) и карбоната калия (0,37 г, 2,68 ммоль) в МеОН (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток распределяли между EtOAc (25 мл) водн. насыщ. раствором KH2PO4 (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 70% EtOAc в гексанах), получая соединение 433 (0,21 г, выход 75%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=533 (M+1).
Т154. К перемешиваемому раствору соединения 433 (0,21 г, 0,39 ммоль) в дегазированном ДМФ (5 мл) при 0°C в атмосфере азота по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (63 мг, 0,22 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли пиридин (0,33 мл, 4,08 ммоль). Ледяную баню убирали. Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали и концентрировали. Остаток распределяли между водн. насыщ. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 75% EtOAc в гексанах), получая частично очищенный продукт, который снова очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 2% МеОН в CHCl3), получая соединение Т154 (44 мг, 21% выход) в виде грязно-белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,99 (с, 1Н), 8,78 (дд, J=0,8, 5,2 Гц, 1Н), 8,49 (дд, J=0,9, 1,6 Гц, 1Н), 8,37 (дд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,53 (м, 1Н), 7,45 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,21 (м, 1Н), 4,53 (с, 2Н), 3,77 (к, J=7,4 Гц, 2Н), 2,84 (м, 2Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,13 (м, 1Н), 1,80 (кд, J=7,1, 12,9 Гц, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,45 (т, J=7,5 Гц, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=531 (M+1).
Соединение 434. Соединение 434 было синтезировано с использованием описанной процедуры (Bradshaw, et al., 2009). Соединение проверяли с помощью хиральной ВЭЖХ и оптическая чистота составляла 94% ее. m/z=205 (M+1).
Соединение 435. Раствор боргидрида натрия (16 мг, 0,42 ммоль) в EtOH (5 мл) добавляли к раствору соединения 434 (350 мг, 1,71 ммоль) в EtOH (10 мл) температуры 0°C. Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и гасили уксусной кислотой (210 мг, 3,50 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 435 (250 мг, выход 71%) в виде маслянистой жидкости. m/z=207 (M+1).
Соединение 436. Жидкий аммиак (50 мл) конденсировали в двухгорлой колбе при -78°C. Литиевую проволоку (250 мг, 36.02 ммоль) добавляли небольшими порциями. После растворения литиевой проволоки по каплям добавляли раствор соединения 435 (3,7 г, 17,94 ммоль) и трет-BuOH (1,33 г, 17,94 ммоль) в ТГФ (10 мл). После того как реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч, добавляли
- 178 043609 хлорид аммония (25 г) и аммиак выпаривали. Остаток разбавляли водой и смесь экстрагировали EtOAc (2x100 мл). Объединенные органические экстракты концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 436 (2,05 г, выход 55%) в виде маслянистой жидкости. m/z=209 (M+1).
Соединение 437. Смесь соединения 436 (2,8 г, 13,4 ммоль) и 10% палладия на угле (100 мг) в EtOAc (35 мл) гидрировали при атмосферном давлении в течение 2 ч при комнатной температуре. Катализатор удаляли фильтрованием через слой Celite®. Фильтрат концентрировали, получая соединение 437 (2,81 г, количественный выход) в виде маслянистой жидкости. m/z=211 (M+1).
Соединение 438. Раствор соединения 437 (2,81 г, 13,38 ммоль), этиленгликоля (8,2 г, 132,1 ммоль) и моногидрата п-толуолсульфоновой кислоты (300 мг, 1,57 ммоль) в бензоле (100 мл) нагревали с обратным холодильником с ловушкой Дина-Старка в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали, промывали водой и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 438 (3,4 г, количественный выход) в виде маслянистой жидкости. m/z=255 (M+1).
Соединение 439. К перемешиваемой смеси соединения 438 (3,4 г, 13,4 ммоль) и MgSO4 (1 г, 8,31 ммоль) в CH2Cl2 (150 мл) добавляли дихромат пиридиния (10,5 г, 27,9 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре; фильтровали через слой силикагеля; и элюировали CH2Cl2. Фильтрат концентрировали, получая соединение 439 (3,4 г, количественный выход) в виде маслянистой жидкости. m/z=253 (M+1).
Соединение 440. Соединение 439 (3,1 г, 12,28 ммоль) растворяли в EtOH (50 мл). Добавляли 2фторбензальдегид (1,7 г, 13,7 ммоль) и фторид калия на оксиде алюминия (40 мас.%, 3,8 г, 26,16 ммоль). После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре реакционную смесь разбавляли CH2Cl2 и фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 440 (3,6 г, выход 82%) в виде маслянистой жидкости. m/z=359 (M+1).
Соединение 441а. Соединение 440 (500 мг, 1,39 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли гидрохлорид 2-(фторметил)-4-карбоксимидамида пиридина (320 мг, 1,68 ммоль) и карбонат калия (425 мг, 3,1 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 4 дней; концентрировали; смешивали с водой (50 мл); нейтрализовывали водн. KH2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Необработанный продукт растворяли в CH2Cl2 (25 мл). Добавляли диоксид марганца (88%, 1 г, 10 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 441а (275 мг, выход 40%) в виде пены. m/z=492 (M+1).
Соединение 442а. Соединение 441а (275 мг, 0,56 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли водн. 3N HCl (3 мл, 9 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 442а (250 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=448 (M+1).
Соединение 443а. Соединение 442а (0,25 г, 0,56 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124,3 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 1,1 г, 6,1 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализовали водн. 12N HCl (0,6 мл, 7,2 ммоль). Добавляли EtOH (10 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (120 мг, 1,73 ммоль). Смесь нагревали до 50°C в течение ночи и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и смесь промывали водн. NaHCO3. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 443а (250 мг, выход 94%) в виде пены. m/z=473 (М+1).
Соединение 444а. Соединение 443а (250 мг, 0,53 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (365 мг, 2,65 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 444а (170 мг, выход 68%) в виде пены. m/z=473 (М+1).
Т155. Соединение 444а (170 мг, 0,36 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (60 мг, 0,21 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (3 мл, 37,18 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч; охлаждали до комнатной температуры; и затем распределяли между EtOAc и водн. NaHCO3. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т155 (60 мг, 35% выход) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,11 (с, 1Н), 8,77 (дд, J=0,9, 5,2 Гц, 1Н), 8,46 (м, 1Н), 8,31 (тд, J=1,0, 5,2 Гц, 1Н), 7,52 (дддд, J=1,9, 5,3, 7,2, 8,3 Гц, 1Н), 7,44
- 179 043609 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,22 (ддд, J=1,0, 8,3, 9,6 Гц, 1Н), 5,60 (д, J=46,9 Гц, 2Н),
2,85 (дд, J=5,0, 8,8 Гц, 2Н), 2,71 (м, 2Н), 2,58 (тт, J=4,3, 13,2 Гц, 1Н) 1,89 (м, 4Н), 1,50 (м, 2Н), 0,88 (т,
J=7,2 Гц, 3H); m/z=471 (М+1).
Соединение 441b. Соединение 440 (400 мг, 1,11 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли 4хинолинкарбоксимидамида гидрохлорид (300 мг, 1,44 ммоль) и карбонат калия (400 мг, 2,90 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 дней и концентрировали. Остаток смешивали с водой (50 мл). Смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Необработанный продукт растворяли в CH2Cl2 (25 мл). Добавляли диоксид марганца (88%, 1 г, 10 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 441b (350 мг, выход 62%) в виде пены. m/z=510 (М+1).
Соединение 442b. Соединение 441b (350 мг, 0,68 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли водн. 3N HCl (3 мл, 9 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 442b (310 г, выход 97%) в виде пены. m/z=466 (М+1).
Соединение 443b. Соединение 442b (0,31 г, 0,67 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124,3 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 1,28 г, 7,11 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализовали водн. 12N HCl (0,7 мл, 8,4 ммоль). Добавляли EtOH (10 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (150 мг, 2,16 ммоль). Смесь нагревали до 50°C в течение ночи и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и затем промывали водн. NaHCO3. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 443b (290 мг, выход 88%) в виде пены. m/z=491 (М+1).
Соединение 444b. Соединение 443b (290 мг, 0,59 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (410 мг, 2,95 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 444b (180 мг, выход 62%) в виде пены. m/z=491 (М+1).
Т156. Соединение 444b (180 мг, 0,36 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (60 мг, 0,21 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (3 мл, 37,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч; охлаждали до комнатной температуры; смешивали с водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т156 (90 мг, выход 50%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,10 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 9,08 (с, 1Н), 8,7 (ддд, J=0,7, 1,5, 8,5 Гц, 1Н), 8,22 (ддд, J=0,6, 1,4, 8,5 Гц, 1Н) 8,03 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,77 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,63 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,33 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 2,81 (м, 4Н), 2,62 (тдд, J=4,2, 8,7, 13,0 Гц, 1Н), 2,07 (м, 1Н), 1,92 (м, 3H), 1,49 (м, 2Н), 0,91 (т, J=7,2 Гц, 3H); m/z=489 (М+1).
Соединение 445. Соединение 342 (1,1298 г, 1,99 ммоль) растворяли в ТГФ (9,94 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли трет-бутоксид калия (0,669 г, 5,96 ммоль) в ТГФ (9,94 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин при 0°C. Затем добавляли аллилбромид (0,52 мл, 6,01 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в атмосфере аргона в течение 2 ч при 0°C. Реакционную смесь нейтрализовали водн. насыщ. NH4Cl и дважды экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-90% EtOAc в гексанах), получая соединение 445 (0,7978 г, выход 66%) в виде темно-оранжевой вязкой маслянистой жидкости. m/z=609,2 (M+1).
Соединение 446. Соединение 445 (0,7978 г, 1,31 ммоль) растворяли в EtOH (13,6 мл). Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (0,136 г, 1,96 ммоль) и водн. 1N HCl (2,7 мл, 2,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3,5 ч при 55°C; охлаждали; нейтрализовывали водн. насыщ. K2CO3; и дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-80% EtOAc в гексанах), получая соединение 446 (0,5582 г, выход 82%) в виде красновато-коричневой пены. m/z=517,2 (M+1).
Соединение 447. Соединение 446 (0,5582 г, 1,08 ммоль) растворяли в сухом CH2Cl2 (5,25 мл) и продували аргоном в течение 7 мин. Добавляли триизобутилалюминий (1 М в гексанах, 5,52 мл, 5,52 ммоль). После перемешивания смеси при комнатной температуре в течение 45 мин по каплям добавляли дииодметан (0,33 мл, 4,11 ммоль) и реакционный сосуд покрывали алюминиевой фольгой. После реакции перемешивали в течение 6 ч, водн. 8% NaOH (15 мл) добавляли при 0°C, и смесь перемешивали в течение
- 180 043609 еще 45 мин. Неочищенную смесь трижды экстрагировали CH2C12. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта, содержащего смесь соединений 446 и 447. Неочищенный продукт и N-оксид 4метилморфолина (0,34 г, 2,90 ммоль) растворяли в ацетоне (2,9 мл) и Н2О (0,97 мл). Раствор охлаждали до 0°C и добавляли тетроксид осмия (2,5 мас.% в трет-бутаноле, 97 мкл, 0,008 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в атмосфере азота в течение 16 ч и затем гасили добавлением водн. насыщ. Na2SO3. Смесь фильтровали и твердое вещество промывали ацетоном. Фильтрат экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-75% ацетона в гексанах), получая соединение 447 (36,4 мг, выход 6%) в виде желтой вязкой маслянистой жидкости. m/z=531 (M+1).
Соединение 448. Соединение 447 (36,4 мг, 0,069 ммоль) растворяли в МеОН (0,695 мл). В атмосфере азота добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 0,524 мл, 2,29 ммоль). После перемешивания при 55°C в течение 2,5 ч реакционную смесь нейтрализовали водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали Н2О и солевым раствором; сушили Na2SO4; фильтровали; и концентрировали, получая соединение 448 (34,4 мг, выход 95%) в виде желтого твердого вещества.
Т157. Соединение 448 (34,4 мг, 0,065 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (0,72 мл) и раствор охлаждали до 0°C в атмосфере азота. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (10 мг, 0,035 ммоль) в ДМФ (0,28 мл) и смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (16 мкл, 0,20 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 55°C в течение 2,5 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и промывали Н2О, водн. насыщ. NaHCO3, водн. насыщ. Na2SO3 и солевым раствором. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение Т157 (24,6 мг, выход 72%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,91 (с, 1Н), 8,72 (д, J=8,6 Гц, 1Н), 8,22 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 8,02 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,78 (т, J=7,7 Гц, 1Н), 7,64 (т, J=7,8 Гц, 1Н), 7,51 (м, 2Н), 7,34 (т, J=7,5 Гц, 1Н), 7,25 (м, 1Н), 2,96 (м, 2Н), 1,65 (с, 3H), 1,58 (м, 6Н), 1,25 (с, 3H), 0,87 (м, 2Н), 0,49 (м, 2Н); m/z=529,2 (M+1).
Соединение 449а. Соединение 399 (180 мг, 0,55 ммоль) растворяли в EtOH (5,5 мл). Добавляли 4хинолинкарбоксимидамида гидрохлорид (171 мг, 0,82 ммоль) и K2CO3 (227 мг, 1,64 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 40 ч и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (20 мл) и водой (20 мл). Органический слой отделяли, а водную фазу экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (5,5 мл). Добавляли оксид марганца(IV) (88%, 434 мг, 4,39 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 449а (143 мг, выход 54%) в виде розового пенистого твердого вещества. m/z=480,2 (M+1).
Соединение 450а. К раствору соединения 449а (141 мг, 0,29 ммоль) в CH2Cl2 (3 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (187 мг, 0,44 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания реакции в течение 2 ч при комнатной температуре добавляли водн. Добавляли 10% Na2SO3 (15 мл). Смесь перемешивали в течение 5 мин и экстрагировали МТВЕ (30 мл). Органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3 (2x15 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 450а (126 мг, выход 89%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=478,2 (M+1).
Соединение 451а. Соединение 450а (124 мг, 0,26 ммоль) и 10% палладий на угле (40 мг) в EtOAc (5 мл) гидрировали (давление в баллоне) при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Смесь фильтровали через слой силикагеля и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 451а (114 мг, выход 92%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=480,2 (M+1).
Соединение 452а. К смеси соединения 451а (62 мг, 0,13 ммоль) в этилформиате (0,31 мл, 3,85 ммоль) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 0,30 мл, 1,31 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч и снова охлаждали до 0°C. Водн. 6N HCl (0,22 мл, 1,32 ммоль), EtOH (1,3 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (14 мг, 0,20 ммоль). Смесь перемешивали при 55°C (масляная баня) в течение 2 ч и при комнатной температуре в течение 60 ч. После концентрирования остаток разбавляли EtOAc и промывали водн. насыщ. NaHCO3. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 452а (54 мг, выход 83%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=505,2 (M+1).
Соединение 453а. К смеси соединения 452а (52 мг, 0,10 ммоль) в МеОН (1 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 47 мкл, 0,21 ммоль) при комнатной температуре. Смесь нагревали при 55°C в течение 1 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Водн. 10% NaH2PO4 (15 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и
- 181 043609 концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 453а (48 мг, выход 92%) в виде белого пенистого твердого вещества.
m/z=505,2 (M+1).
Т158. К раствору соединения 453а (48 мг, 0,095 ммоль) в ДМФ (0,5 мл) добавляли раствор 1,3дибром-5,5-диметилгидантоина (14 мг, 0,049 ммоль) в ДМФ (0,2 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 1 ч добавляли пиридин (23 мкл, 0,29 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 1,5 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (25 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (3x15 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение Т158 (33 мг, выход 69%) в виде белого пенистого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,93 (с, 1Н), 8,70 (ддд, J=8,6, 1,5, 0,6 Гц, 1Н), 8,22 (ддд, J=8,5, 1,3, 0,6 Гц, 1Н), 8,01 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=8,4, 6,8, 1,4 Гц, 1Н), 7,64 (ддд, J=8,4, 6,8, 1,3 Гц, 1Н), 7,51 (м, 2Н), 7,33 (тд, J=7,6, 1,1 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 2,90 (м, 2Н), 2,62 (ддд, J=13,1, 4,8, 3,1 Гц, 1Н), 2,51 (тд, J=12,7, 2,5 Гц, 1Н), 2,12 (м, 2Н), 1,85 (м, 1Н), 1,71 (м, 1Н), 1,58 (с, 3H), 1,35 (м, 1Н), 1,25 (м, 1Н) 0,95 (т, J=7,2 Гц, 3H); m/z=503,2 (M+1).
Соединение 449b. Соединение 399 (180 мг, 0,55 ммоль) растворяли в EtOH (5,5 мл). Добавляли 5хинолинкарбоксимидамида гидрохлорид (171 мг, 0,82 ммоль) и K2CO3 (227 мг, 1,64 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 40 ч и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (20 мл) и водой (20 мл). Органический слой отделяли, а водную фазу экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (5,5 мл). Добавляли оксид марганца(IV) (88%, 434 мг, 4,39 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 449b (96 мг, выход 37%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=480,2 (M+1).
Соединение 450b. К раствору соединения 449b (94 мг, 0,20 ммоль) в CH2Cl2 (2 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (125 мг, 0,29 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания реакции в течение 2 ч при комнатной температуре добавляли водн. Добавляли 10% Na2SO3 (15 мл). Смесь перемешивали в течение 5 мин и экстрагировали МТВЕ (30 мл). Органический экстракт промывали водн. насыщ. NaHCO3 (2x15 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 450b (78 мг, выход 83%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=478,2 (M+1).
Соединение 451b. Соединение 450b (76 мг, 0,16 ммоль) и 10% палладий на угле (25 мг) в EtOAc (5 мл) гидрировали (давление в баллоне) при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Смесь фильтровали через слой силикагеля и элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэшхроматографией (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах), получая соединение 451b (60 мг, выход 79%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=480,2 (M+1).
Соединение 452b. К смеси соединения 451b (58 мг, 0,12 ммоль) в этилформиате (0,29 мл, 3,60 ммоль) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 0,28 мл, 1,22 ммоль) при 0°C. После перемешивания смеси в течение 5 мин при комнатной температуре добавляли количество этилформиата (0,29 мл, 3,60 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение дополнительных 1,5 ч и снова охлаждали до 0°C. Водн. 6N HCl (0,20 мл, 1,20 ммоль), EtOH (1,2 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (13 мг, 0,19 ммоль). Смесь перемешивали при 55°C (масляная баня) в течение 2 ч и при комнатной температуре в течение 60 ч. После концентрирования остаток разбавляли EtOAc и промывали водн. насыщ. NaHCO3. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 452b (57 мг, выход 93%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=505,2 (M+1).
Соединение 453b. К смеси соединения 452b (55 мг, 0,11 ммоль) в МеОН (1 мл) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в МеОН, 50% мкл, 0,22 ммоль) при комнатной температуре. Смесь нагревали при 55°C в течение 1 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Водн. 10% NaH2PO4 (15 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2x20 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 453b (52 мг, выход 95%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=505,2 (M+1).
Т159. К раствору соединения 453b (52 мг, 0,103 ммоль) в ДМФ (0,5 мл) добавляли раствор 1,3дибром-5,5-диметилгидантоина (15 мг, 0,052 ммоль) в ДМФ (0,2 мл). После перемешивания смеси при 0°C в течение 1 ч добавляли пиридин (25 мкл, 0,31 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 1,5 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (25 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (3x15 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение Т159 (31 мг, выход 60%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,17 (ддт, J=8,8, 1,6, 0,7 Гц, 1Н), 8,97 (дд, J=1,6, 4,4 Гц, 1Н), 8,96 (с, 1Н), 8,29 (м, 2Н), 7,86 (дд, J=3,2, 4,4 Гц, 1Н), 7,49 (м, 3H), 7,32 (тт, J=7,5, 0,8 Гц, 1Н), 7,22 (м, 1Н), 2,88 (м, 2Н), 2,62 (ддд, J=13,2, 4,9, 3,2 Гц, 1Н), 2,50 (тд, J=12,8, 2,5 Гц,
- 182 043609
1Н), 2,11 (м, 2Н), 1,85 (м, 1Н), 1,70 (м, 1Н), 1,58 (с, 3H) 1,36 (м, 1Н), 1,23 (м, 1Н), 0,94 (т, J=7,2 Гц, 3H);
m/z=503,2 (M+1).
Соединение 454а и 455а. Смесь соединения 94 и соединения 95 (300 мг, 0,69 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (6 мл). Добавляли карбонат калия (290 мг, 2,10 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (55 мг, 0,075 ммоль) и 3-изопропилфенилбороновую кислоту (225 мг, 1,37 ммоль). Реакционную смесь продували азотом в течение 10 мин, перемешивали при 90°C в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая смесь соединения 454а и 455а (270 мг, выход 79%) в виде пены. m/z=520 (454a, M+1) и 476 (455а, М+1).
Соединение 455а. Смесь соединения 454а и 455а (270 мг, 0,52 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл) и водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой; сушили MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 455а (250 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=476 (M+1).
Соединение 456а. Соединение 455а (0,25 г, 0,53 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124,3 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 1,1 г, 6,11 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализовали водн. 12N HCl (0,6 мл, 7,2 ммоль). Затем добавляли EtOH (10 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (120 мг, 1,72 ммоль). Смесь нагревали до 55°C в течение ночи. После концентрации остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 456а (270 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=501 (M+1).
Соединение 457а. Соединение 456а (270 мг, 0,54 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (400 мг, 2,89 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0% до 35% EtOAc в гексане) с получением соединения 457а (190 мг, выход 70%) в виде пены. m/z=501 (M+1).
Т160. Соединение 457а (190 мг, 0,38 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (60 мг, 0,21 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и добавляли пиридин (3 мл, 37,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая Т160 (105 мг, выход 55%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,96 (с, 1Н), 8,78 (ддд, J=8,6, 1,5, 0,7 Гц, 1Н), 8,22 (ддд, J=8,5, 1,3, 0,6 Гц, 1Н), 8,05 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=8,4, 6,8, 1,4 Гц, 1Н), 7,64 (ддд, J=8,4, 6,9, 1,4 Гц, 1Н), 7,45 (м, 3H), 7,37 (дтд, J=6,3, 1,8, 0,9 Гц, 1Н), 3,03 (м, 3H), 2,64 (дк, J=13,4, 6,7 Гц, 1Н), 2,32 (тд, J=12,8, 2,7 Гц, 1Н), 2,19 (ддд, J=14,2, 6,2, 3,3 Гц, 1Н), 1,83 (м, 1Н), 1,59 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,31 (д, J=6, 9 Гц, 3H), 1,31 (д, J=6,9 Гц, 3H); m/z=499 (M+1).
Соединение 454b и 455b. Смесь соединения 94 и соединения 95 (350 мг, 0,80 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (6 мл). Добавляли карбонат калия (345 мг, 2,50 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (75 мг, 0,10 ммоль) и 4-изопропилфенилбороновую кислоту (270 мг, 1,65 ммоль). Реакционную смесь продували азотом в течение 10 мин, перемешивали при 90°C в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая смесь соединения 454b и 455b (360 мг, выход 86%) в виде пены. m/z=520 (454b, M+1) и 476 (455b, M+1).
Соединение 455b. Смесь соединения 454b и 455b (360 мг, 0,69 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл) и водн. 3N HCl (3 мл, 9 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой; сушили MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 455b (330 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=476 (M+1).
Соединение 456b. Соединение 455b (0,33 г, 0,69 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124,3 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 1,3 г, 7,21 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре смесь нейтрализовали водн. 12N HCl (0,7 мл, 8,40 ммоль). Затем добавляли EtOH (10 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (120 мг, 1,73 ммоль). Смесь нагревали до 55°C в течение ночи и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 456b (350 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=501 (M+1).
Соединение 457b. Соединение 456b (350 мг, 0,70 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли
- 183 043609 карбонат калия (485 мг, 3,51 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали.
Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 457b (195 мг, выход 56%) в виде пены. m/z=501 (M+1).
Т161. Соединение 457b (105 мг, 0,21 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (3 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (35 мг, 0,12 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и добавляли пиридин (3 мл, 37,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т161 (50 мг, выход 48%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,08 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,95 (с, 1Н), 8,74 (ддд, J=8,6, 1,5, 0,6 Гц, 1Н), 8,22 (дд, J=0,8, 8,4 Гц, 1Н), 8,03 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,77 (ддд, J=8,4, 6,8, 1,4 Гц, 1Н), 7,64 (ддд, J=8,3, 6,8, 1,4 Гц, 1Н), 7,58 (м, 2Н), 7,37 (м, 2Н), 3,09 (м, 2Н), 2,99 (м, 1Н), 2,64 (дк, J=13,3, 6,7 Гц, 1Н), 2,31 (тд, J=12,8, 2,7 Гц, 1Н), 2,19 (м, 1Н), 1,84 (м, 1Н), 1,58 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,30 (д, J=6,9 Гц, 6Н); m/z=499 (M+1).
Соединение 454с и 455с. Смесь соединения 94 и соединения 95 (300 мг, 0,69 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (6 мл). Добавляли карбонат калия (290 мг, 2,10 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (55 мг, 0,075 ммоль) и 3-бифенилбороновую кислоту (275 мг, 1,39 ммоль). Реакционную смесь продували азотом в течение 10 мин, перемешивали при 90°C в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая смесь соединения 454с и 455с (280 мг, выход 73%) в виде пены. m/z=554 (454 с, М+1) и 510 (455 с, М+1).
Соединение 455с. Смесь соединения 454с и 455с (280 мг, 0,51 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл) и водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой; сушили MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 455с (265 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=510 (М+1).
Соединение 456с. Соединение 455с (250 мг, 0,49 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124,3 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в МеОН, 1 г, 5,55 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализовали водн. 12N HCl (0,55 мл, 6,60 ммоль). Затем добавляли EtOH (10 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (110 мг, 1,58 ммоль). Смесь нагревали до 55°C в течение ночи и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 456с (250 мг, выход 95%) в виде пены. m/z=535 (M+1).
Соединение 457с. Соединение 456с (250 мг, 0,47 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (325 мг, 2,35 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 457с (195 мг, выход 78%) в виде пены. m/z=535 (М+1).
Т162. Соединение 457с (195 мг, 0,36 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (60 мг, 0,21 ммоль) в ДМФ (1 мл).
Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и добавляли пиридин (3 мл, 37,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т162 (100 мг, выход 51%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,96 (с, 1Н), 8,77 (ддд, J=8,6, 1,5, 0,6 Гц, 1Н), 8,23 (ддд, J=8,4, 1,4, 0,6 Гц, 1Н) 8,06 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,83 (м, 1Н), 7,78 (ддд, J=8,4, 6,8, 1,4 Гц, 1Н), 7,74 (м, 1Н), 7,62 (м, 5Н), 7,47 (м, 2Н), 7,40 (м, 1Н), 3,10 (м, 2Н), 2,65 (дк, J=13,3, 6,7 Гц, 1Н), 2,33 (тд, J=12,8, 2,7 Гц, 1Н), 2,19 (м, 1Н), 1,85 (м, 1Н), 1,60 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H); m/z=533 (M+1).
Соединение 454d и 455d. Смесь соединения 94 и соединения 95 (350 мг, 0,80 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (6 мл). Добавляли карбонат калия (345 мг, 2,50 ммоль), [1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (75 мг, 0,10 ммоль) и 4-бифенилбороновую кислоту (325 мг, 1,64 ммоль). Реакционную смесь продували азотом в течение 10 мин, перемешивали при 90°C в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая смесь соединения 454d и 455d (290 мг, выход 65%) в виде пены. m/z=554 (454d, M+1) и 510
- 184 043609 (455d, M+1).
Соединение 455d. Смесь соединения 454d и 455d (290 мг, 0,52 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл) и водн. 3N HCl (3 мл, 9,0 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали водн. насыщ. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой; сушили MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 455d (275 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=510 (M+1).
Соединение 456d. Соединение 455d (275 мг, 0,54 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124,3 ммоль). Добавляли метоксид натрия (30 мас.% в метаноле, 1,1 г, 6,11 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализовали водн. 12N HCl (0,6 мл, 7,2 ммоль). Затем добавляли EtOH (10 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (120 мг, 1,73 ммоль). Смесь нагревали до 55°C в течение ночи и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексане), получая соединение 456d (260 мг, выход 90%) в виде пены. m/z=535 (M+1).
Соединение 457d. Соединение 456d (260 мг, 0,49 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли карбонат калия (350 мг, 2,53 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением водн. насыщ. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 457d (200 мг, выход 77%) в виде пены. m/z=535 (М+1).
Т163. Соединение 457d (200 мг, 0,37 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (60 мг, 0,21 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и добавляли пиридин (3 мл, 37,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч, охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т163 (125 мг, выход 63%) в виде пены. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,10 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,96 (с, 1Н), 8,76 (ддд, J=8,5, 1,5, 0,6 Гц, 1Н), 8,23 (ддд, J=8,5, 1,4, 0,6 Гц, 1Н) 8,05 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,76 (м, 5Н), 7,65 (м, 3H), 7,49 (м, 2Н), 7,42 (м, 1Н), 3,13 (м, 2Н), 2,65 (дт, J=13,4, 6,7 Гц, 1Н), 2,34 (тд, J=12,8, 2,7 Гц, 1Н), 2,22 (м, 1Н), 1,85 (м, 1Н), 1,61 (с, 3H), 1,36 (д J=6,7 Гц, 3H); m/z=533 (М+1).
Соединение 460. Соединение 460 было синтезировано из соединения 458 с использованием описанной процедуры (Bradshaw, et al., 2009). В круглодонную колбу на 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, загружали соединение 458 (7,50 г, 29,96 ммоль), катализатор 459 (802 мг, 1,50 ммоль) и бензойную кислоту (36 мг, 0,29 ммоль). Колбу закрывали и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 дней. Темно-коричневую смесь очищали флэш-хроматографией (силикагель 60, элюирование 30% EtOAc в гексанах), и полученный продукт перекристаллизовывали из гексанов, получая соединение 460 (3,97 г, выход 57%, 99% ее) в виде сероватого-белого твердого вещества. m/z=233 (М+1).
Соединение 461. К раствору соединения 460 (3,87 г, 16,65 ммоль) в EtOH (80 мл) при 0°C в атмосфере азота при интенсивном перемешивании добавляли боргидрид натрия (189 мг, 5,00 ммоль) порциями в течение приблизительно 30 мин. Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и гасили путем добавления по каплям ледяной уксусной кислоты (1,94 мл, 33,92 ммоль). Ледяную баню удаляли; реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч; и растворитель удаляли in vacuo. Остаток распределяли между EtOAc и водой. Органическую фазу осторожно промывали водн. насыщ. NaHCO3 и солевым раствором; сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 461 (4,00 г, количественный выход) в виде маслянистой жидкости. m/z=235 (М+1).
Соединение 462. Жидкий аммиак (20 мл) конденсировали в круглодонной колбе объемом 100 мл при -78°C. Литиевую проволоку (300 мг, 43,22 ммоль) добавляли порциями при перемешивании и весь металл растворяли в течение 30 мин. По каплям добавляли раствор соединения 461 (3,90 г, 16,64 ммоль) в ТГФ (10 мл) и трет-бутанол (1,23 г, 16,59 ммоль). Через 5 мин после завершения добавления реакционная смесь приобрела зеленый цвет, и для сохранения синего цвета добавили еще литиевую проволоку (143 мг, 20,60 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 30 мин и гасили порционным добавлением хлорида аммония (658 мг, 12,30 ммоль). Аммиаку давали испариться и остаток распределяли между EtOAc и водой. Органический экстракт отделяли, а водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 30-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 462 (2,27 г, выход 58%) в виде прозрачной маслянистой жидкости. m/z=237 (М+1).
Соединение 463. Смесь соединения 462 (333 мг, 1,41 ммоль) и 10% палладия на угле (25 мг) в EtOAc (10 мл) гидрировали в атмосфере водорода (1 атм) в течение 3 ч при комнатной температуре. Катализатор удаляли фильтрованием через слой Celite®. Фильтрат концентрировали, получая соединение
- 185 043609
463 (308 мг, выход 92%) в виде прозрачной вязкой маслянистой жидкости, которую использовали без дальнейшей очистки. m/z=239 (М+1).
Соединение 464. Раствор соединения 463 (308 мг, 1,29 ммоль), этиленгликоля (0,72 мл, 12,90 ммоль) и моногидрата п-толуолсульфоновой кислоты (25 мг, 0,13 ммоль) в бензоле (15 мл) нагревали с обратным холодильником с ловушкой Дина-Старка в течение 2 ч. Смесь охлаждали и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. насыщ. NaHCO3, водн. насыщ. KH2PO4 и солевым раствором. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 464 (364 мг, количественный выход) в виде желтой маслянистой жидкости, которую использовали без дополнительной очистки. m/z=283 (M+1).
Соединение 465. Раствор соединения 464 (367 мг, 1,29 ммоль) в дихлорметане (15 мл) в атмосфере азота обрабатывали сульфатом магния (155 мг, 1,29 ммоль) и дихроматом пиридиния (727 мг, 1,93 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч и концентрировали. Остаток растворяли в диэтиловом эфире и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь фильтровали через слой Celite® и фильтрат концентрировали, получая соединение 465 (327 мг, выход 90%) в виде желтой вязкой маслянистой жидкости, которую использовали без дальнейшей очистки. m/z=281 (M+1).
Соединение 466. Раствор соединения 465 (165 мг, 0,588 ммоль) в изопропаноле (10 мл) обрабатывали 2-фторбензальдегидом (0,19 мл, 1,80 ммоль) и фторидом калия на оксиде алюминия (40 мас.%, 171 мг, 1,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч; фильтровали через слой сульфата магния; и элюировали CH2Cl2. Фильтрат концентрировали.
Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-3% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение 466 (137 мг, выход 60%) в виде прозрачной маслянистой жидкости. m/z=387 (М+1).
Соединение 467. Раствор соединения 466 (134 мг, 0,346 ммоль), 4-хинолинкарбоксимидамида гидрохлорида (108 мг, 0,520 ммоль) и карбоната калия (143 мг, 1,03 ммоль) в EtOH (10 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 5 дней. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный дигидропиримидин растворяли в CH2Cl2 (10 мл) обрабатывали оксидом марганца(IV) (88%, 266 мг, 2,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего фильтровали через слой Celite®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 467 (131 мг, выход 70%) в виде прозрачного стекла. m/z=538 (M+1).
Соединение 468. Раствор соединения 467 (130 мг, 0,241 ммоль) в ТГФ (10 мл) обрабатывали водн. 3N HCl (0,80 мл, 2,40 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, нагревали при 50°C в течение 2 ч; и концентрировали. Остаток охлаждали до 0°C и осторожно обрабатывали водн. насыщ. NaHCO3 до нейтрализации. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой и солевым раствором, сушили Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 468 (104 мг, выход 87%) в виде прозрачного стекла, которое использовали на последующей стадии без дополнительной очистки. m/z=494 (M+1).
Соединение 469. Смесь соединения 468 (104 мг, 0,210 ммоль) в этилформиате (5,0 мл, 62,16 ммоль) по каплям обрабатывали метоксидом натрия (5,4 М раствор в МеОН, 0,39 мл, 2,10 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч; охлаждали до 0°C; и обрабатывали водн. 6N HCl (0,39 мл, 2,34 ммоль). Последовательно добавляли EtOH (15 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (22 мг, 0,317 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 5 ч и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. NaHCO3. Органический экстракт отделяли, а водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 469 (104 мг, выход 95%) в виде оранжевого стекла, которое использовали без дальнейшей очистки. m/z=519 (M+1).
Соединение 470. Смесь соединения 469 (100 мг, 0,193 ммоль) и карбоната калия (53 мг, 0,383 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 24 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение 470 (51 мг, выход 51%) в виде грязно-белого порошка. m/z=519 (M+1).
Т164. Раствор соединения 470 (50 мг, 0,096 ммоль) в безводном ДМФ (3,0 мл) обрабатывали по каплям раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (15 мг, 0,052 ммоль) в безводном ДМФ (1,0 мл) при 0°C в атмосфере азота. После перемешивания смеси при 0°C в течение 30 мин добавляли безводный пиридин (0,077 мл, 0,95 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч. После охлаждения реакционную смесь распределяли между EtOAc и водн. насыщ. KH2PO4. Органическую фазу отделяли, а водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экс- 186 043609 тракты промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т164 (30 мг, выход 60%), получая желтое стекло. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 9,04 (с, 1Н), 8,73 (ддд, J=8,6, 1,5, 0,7 Гц, 1Н), 8,22 (ддд, J=8,4, 1,4, 0,6 Гц, 1Н), 8,00 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=8,4, 6,8, 1,4 Гц, 1Н), 7,62 (ддд, J=8,3, 6,8, 1,3 Гц, 1Н), 7,51 (м, 2Н), 7,33 (тд, J=7,6, 1,1 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 2,78 (м, 5Н), 1,97 (м, 4Н), 1,44 (м, 2Н), 1,32 (м, 1Н) 0,88 (д, J=6,7 Гц, 3H), 0,84 (д, J=6,2 Гц, 3H); m/z=517 (M+1).
Соединение 471. Раствор соединения 466 (401 мг, 1,04 ммоль), гидрохлорида (2-фторметил)изоникотинамидина (293 мг, 1,54 ммоль) и карбоната калия (427 мг, 3,09 ммоль) в EtOH (25 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 4 дней. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу промывали насыщ. водн. NaCl; сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали. Неочищенный дигидропиримидин растворяли в CH2Cl2 (20 мл) обрабатывали оксидом марганца(IV) (88%, 793 мг, 8,03 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 24 ч. Реагент фильтровали через слой Celite® и фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение 471 (99 мг, выход 18%) в виде прозрачного стекла. m/z=520 (M+1).
Соединение 472. Раствор соединения 471 (168 мг, 0,323 ммоль) в ТГФ (20 мл) обрабатывали 3,0N водн. HCl (1,08 мл, 3,24 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 21 ч с последующим нагреванием при 50°C в течение 3 ч; а затем концентрировали. Остаток охлаждали до 0°C и осторожно обрабатывали насыщ. водн. NaHCO3 до нейтрализации. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой и насыщали водн. NaCl; сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 472 (162 мг, количественный выход) в виде желтого стекла. m/z=476 (M+1).
Соединение 473. Смесь соединения 472 (160 мг, 0,336 ммоль) в этилформиате (7,0 мл, 87,03 ммоль) при 0°C по каплям обрабатывали раствором метоксида натрия (5,4 М в метаноле, 0,62 мл, 3,35 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и охлаждали до 0°C. Смесь обрабатывали 6,0N водн. HCl (0,63 мл, 3,78 ммоль) для доведения до рН ~ 2. Последовательно добавляли EtOH (20 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (35 мг, 0,504 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 55°C в течение 4 ч и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc и насыщ. водн. NaHCO3. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои сушили над Na2SO4; фильтровали; и концентрировали, получая соединение 473 (154 мг, выход 92%) в виде оранжевого стекла. m/z=501 (M+1).
Соединение 474. Смесь соединения 473 (154 мг, 0,307 ммоль) и карбоната калия (85 мг, 0,614 ммоль) в МеОН (10 мл) перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 24 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток распределяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Органическую фазу промывали насыщ. водн. NaCl; сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 474 (58 мг, выход 38%) в виде желтого стекла. m/z=501 (M+1).
Т165. Раствор соединения 474 (58 мг, 0,115 ммоль) в безводном ДМФ (3,0 мл) охлаждали до 0°C в атмосфере азота. Раствор обрабатывали по каплям раствором 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (18 мг, 0,063 ммоль) в безводном ДМФ (1,0 мл). После перемешивания при 0°C в течение 30 мин добавляли безводный пиридин (0,093 мл, 1,15 ммоль). Холодную баню убирали, и реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч. После охлаждения реакционную смесь распределяли между EtOAc и насыщ. водн. KH2PO4. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические фазы промывали насыщ. водн. NaCl; сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение Т165 (24 мг, выход 42%) в виде желтого стекла. m/z=499 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (с, 1Н), 8,78 (д, J=5,2 Гц, 1Н), 8,47 (д, J=1,5 Гц, 1Н), 8,30 (дд, J=1,3, 5,0 Гц, 1Н), 7,53 (м, 1Н), 7,45 (дт, J=1,8, 7,4 Гц, 1Н), 7,35 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,21 (м, 1Н), 5,61 (д, J=46,8 Гц, 2Н), 2,74 (м, 5Н), 2,01 (м, 2Н), 1,84 (м, 2Н), 1,34 (м, 3H), 0,84 (д, J=6,2 Гц, 3H), 0,78 (д, J=6,1 Гц, 3H).
Соединение 475. К раствору соединения 342 (300 мг, 0,527 ммоль) в безводном ТГФ (3 мл) при 0°C в атмосфере азота по каплям добавляли раствор трет-бутоксида калия (177 мг, 1,58 ммоль) в безводном ТГФ (5 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 15 мин и по каплям добавляли 3-хлор-2метилпропен (0,52 мл, 5,31 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение дополнительных 2 ч, а затем оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение 2 ч. Реакцию гасили насыщ. водн. NH4Cl и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение 475 (140 мг, выход 43%) в виде желтого стекла. m/z=623 (M+1).
Соединение 476. Раствор соединения 475 (284 мг, 0,456 ммоль) в EtOH (8 мл) обрабатывали 1,0N водн. HCl (0,912 мл, 0,912 ммоль) и гидрохлоридом гидроксиламина (48 мг, 0,691 ммоль). Реакционную
- 187 043609 смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч и при комнатной температуре в течение 20 ч. Растворитель удаляли in vacuo и остаток распределяли между EtOAc и 10% водн. NH4OH. Органическую фазу промывали насыщ. водн. NaCl; сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 476 (192 мг, выход 79%) в виде желтого стекла. m/z=531 (M+1).
Соединение 477. Смесь соединения 476 (192 мг, 0,361 ммоль) и карбоната калия (100 мг, 0,723 ммоль) в МеОН (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 26 ч. Реакционную смесь концентрировали и остаток распределяли между водой и диэтиловым эфиром. Водную фазу охлаждали на бане с ледяной водой и нейтрализовали насыщ. водн. KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщ. водн. NaCl; сушили над Na2SO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 477 (101 мг, выход 53%) в виде белого стекла. m/z=531 (M+1).
Т166. Раствор соединения 477 (100 мг, 0,188 ммоль) в безводном толуоле (10 мл) обрабатывали DDQ (55 мг, 0,242 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение Т166 (53 мг, выход 53%) в виде стекла. m/z=529 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCI3) δ 9,09 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,93 (с, 1Н), 8,71 (ддд, J=0,7, 1,4, 8,5 Гц, 1Н), 8,22 (тд, J=0,9, 8,6 Гц, 1Н), 8,01 (д, J=4, 5 Гц, 1Н), 7,78 (ддд, J=1,4, 6,9, 8,4 Гц, 1Н), 7,64 (ддд, J=1,3, 6,9, 8,3 Гц, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 4,88 (с, 1Н), 4,75 (с, 1Н), 2,89 (д, J=13,9 Гц, 1Н), 2,83 (м, 2Н), 2,58 (дд, J=2,2, 12,0 Гц, 1Н), 2,40 (д, J=13,9 Гц, 1Н), 2,17 (с, 3H), 1,95 (м, 2Н), 1,66 (с, 3H), 1,28 (с, 3H).
Соединение 478. Соединение 440 (2,56 г, 7,14 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли 2циклопропилизоникотинимидамида гидрохлорид (1,6 г, 8,09 ммоль) и карбонат калия (2,5 г, 18,09 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 5 дней, после чего концентрировали. Остаток смешивали с водой (50 мл) и нейтрализовали водн. KH2PO4. Смесь экстрагировали CHCl3. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Необработанный продукт растворяли в CH2Cl2 (200 мл) и добавляли оксид марганца(IV) (88%, 3,5 г, 35,43 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 035% EtOAc в гексанах), получая соединение 478 (1,48 г, 41% выход) в виде пены. m/z=500 (M+1).
Соединение 479. Соединение 478 (1,48 г, 2,96 ммоль) растворяли в ТГФ (30 мл) и добавляли 3N водн. HCl (10 мл). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали 10% водн. NH4OH и экстрагировали CHCl3. Органический экстракт промывали водой; сушили MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 479 (1,36 г, количественный выход) в виде пены. m/z=456 (M+1).
Соединение 480. Соединение 479 (275 мг, 0,60 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124,33 ммоль). Добавляли раствор метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 1,2 г, 6,66 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре реакционную смесь обрабатывали 12N водн. HCl (0,6 мл, 7,20 ммоль), EtOH (10 мл) и гидрохлоридом гидроксиламина (120 мг, 1,7 ммоль) последовательно. Смесь нагревали до 50°C в течение ночи, после чего концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и затем промывали водн. NaHCO3. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 480 (260 мг, выход 90%) в виде пены. m/z=481 (M+1).
Соединение 481. Соединение 480 (260 мг, 0,54 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли K2CO3 (380 мг, 2,75 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 481 (165 мг, выход 63%) в виде пены. m/z=481 (M+1).
Т167. Соединение 481 (165 мг, 0,34 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (55 мг, 0,19 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (3 мл, 37,09 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч и охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь распределяли между водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т167 (60 мг, выход 37%) в виде желтой пены. m/z=479 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl·,) δ 9,14 (с, 1Н), 8,61 (д, J=5,2 Гц, 1Н), 8,18 (т, J=1,2 Гц, 1Н), 8,06 (дд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,52 (ддт, J=1,9, 5,2, 7,9 Гц, 1Н), 7,44 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=1,0, 7,5 Гц, 1H), 7,21 (ддд, J=1,0, 8,3, 9,6 Гц, 1Н), 2,84 (дд, J=5,0, 8,8 Гц, 2Н), 2,70 (м, 2Н), 2,57 (тт, J=4,2, 13,3 Гц, 1Н), 2,21 (тт, J=4,8, 8,1 Гц, 1Н), 1,89 (м, 5Н), 1,49 (м, 1Н), 1,12 (м, 2Н), 1,05 (м, 2Н), 0,88 (т, J=7,2 Гц, 3H).
Соединение 482. Соединение 479 (1,35 г, 2,97 ммоль) растворяли в этилформиате (20 мл, 248,65 ммоль). Добавляли раствор метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 5,3 г, 29,43 ммоль). После перемешива- 188 043609 ния при комнатной температуре в течение 4 ч реакционную смесь нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4; фильтровали; и концентрировали, получая соединение 482 (1,43 г, количественный выход) в виде пены. m/z=484 (M+1).
Соединение 483. К смеси соединения 482 (1 г, 2,07 ммоль) и молекулярных сит 3А (500 мг) в CH2C12 (15 мл) добавляли N-метиланилин (0,66 г, 6,16 ммоль) и моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (38 мг, 0,20 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 дней реакционную смесь очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 483 (0,93 г, выход 78%) в виде пены. m/z=573 (M+1).
Соединение 484. Соединение 483 (780 мг, 1,36 ммоль) растворяли в ТГФ (15 мл) при 0°C. Добавляли диизопропиламид лития (1,5 М в циклогексане, 1,1 мл, 1,65 ммоль). После перемешивания смеси в течение 1 ч по каплям добавляли аллилбромид (500 мг, 4,13 ммоль). Смесь перемешивали в течение дополнительных 3 ч, нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование от 0 до 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 484 (230 мг, выход 28%) в виде пены. m/z=613 (M+1).
Соединение 485. Соединение 484 (290 мг, 0,47 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (70 мг, 1,01 ммоль) и 1N водн. HCl (1 мл, 1,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и затем промывали водн. NaHCO3. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 485 (110 мг, выход 45%) в виде пены. m/z=521 (М+1).
Соединение 486. Соединение 485 (110 мг, 0,21 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли K2CO3 (150 мг, 1,09 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 486 (110 мг, количественный выход). m/z=521 (M+1).
Соединение 487. Соединение 486 (110 мг, 0,21 ммоль) гидрировали при атмосферном давлении в EtOAc (10 мл) над 10% палладием на угле (35 мг) в течение 16 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь отфильтровали через слой Celite®. Фильтрат концентрировали, получая соединение 487 (110 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=523 (M+1).
Т168. Соединение 487 (110 мг, 0,21 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (35 мг, 0,12 ммоль) в ДМФ (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (1 мл, 12,36 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т168 (55 мг, выход 50%) в виде светло-желтой пены. m/z=521 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDC13) δ 9,12 (с, 1Н), 8,61 (д, J=5,1 Гц, 1Н), 8,18 (т, J=1,1 Гц, 1Н), 8,05 (дд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,49 (м, 2Н), 7,34 (дт, J=1,0, 7,5 Гц, 1Н), 7,22 (м, 1Н), 2,84 (м, 2Н), 2,70 (ддд, J=3,3, 5,1, 13,0 Гц, 1Н), 2,40 (дт, J=3,5, 12,9 Гц, 1Н), 2,21 (ддд, J=4,8, 8,3, 13,1 Гц, 1Н), 2,05 (м, 1Н), 1,88 (м, 3H), 1,65 (м, 1Н), 1,19 (м, 9Н), 0,91 (т, J=7,3 Гц, 3H), 0,86 (т, J=1,3 Гц, 3H).
Соединение 488. К раствору соединения 483 (300 мг, 0,52 ммоль) в ТГФ (15 мл) при 0°C добавляли диизопропиламид лития (1,5 М в циклогексане, 0,42 мл, 0,63 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 ч и затем по каплям добавляли иодметан (250 мг, 1,76 ммоль). Смесь перемешивали в течение дополнительных 3 ч, нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование от 0 до 50% EtOAc в гексанах) с получением соединения 488 (280 мг, выход 91%) в виде пены. m/z=587 (M+1).
Соединение 489. Соединение 488 (280 мг, 0,48 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (70 мг, 1,01 ммоль) и 1N водн. HCl (1 мл, 1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и затем промывали водн. NaHCO3. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 489 (180 мг, выход 76%) в виде пены. m/z=495 (М+1).
Соединение 490. Соединение 489 (180 мг, 0,36 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли K2CO3 (250 мг, 1,81 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексане), получая соединение 490 (175 мг, вы- 189 043609 ход 97%). m/z=495 (М+1).
Т169. Соединение 490 (175 мг, 0,35 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (56 мг, 0,196 ммоль) в ДМФ (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (1 мл, 12,36 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч и концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексане), получая Т169 (140 мг, выход 80%) в виде светло-желтой пены. m/z=493 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,14 (с, 1Н), 8,61 (дд, J=0,7, 5,2 Гц, 1Н), 8,18 (с, 1Н), 8,06 (дд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,52 (м, 1Н), 7,45 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=1,0, 7,5 Гц, 1Н), 7,22 (ддд, J=1,0, 8,3, 9,6 Гц, 1Н), 2,84 (м, 2Н), 2,72 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,20 (м, 2Н), 2,09 (тдд, J=3,5, 7,3, 14,1 Гц, 1Н), 1,90 (м, 3H), 1,47 (м, 2Н), 1,30 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,09 (м, 4Н), 0,87 (т, J=7,3 Гц, 3H).
Соединение 491. синтезировали с использованием той же процедуры, которая описана для синтеза его энантиомера (WO 2012/083306А2).
Соединение 492. Соединение 491 (1 г, 4,46 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли 2фторбензальдегид (0,61 г, 4,92 ммоль) и KF/Al2O3 (40 мас.%, 1 г, 6,89 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре; разбавляли CH2Cl2; и фильтровали. Фильтрат концентрировали, а остаток смешивали с гексанами. Осажденный продукт собирали фильтрованием и сушили в вакууме, получая соединение 492 (1,4 г, выход 95%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=331 (М+1).
Соединение 493а. Соединение 492 (430 мг, 1,30 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли хинолин-4-карбоксимидамидную соль HCl (310 мг, 1,49 ммоль) и карбонат калия (400 мг, 2,89 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 дней, после чего концентрировали. Остаток смешивали с водой (50 мл), нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (20 мл). Добавляли оксид марганца(IV) (88%, 1,2 г, 12,15 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 493а (290 мг, выход 46%) в виде пены. m/z=482 (M+1).
Соединение 494а. Соединение 493а (290 мг, 0,60 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли 3N водн. HCl (3 мл). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали насыщ. водн. NaHCO3, и смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой; сушили MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 494а в виде (250 мг, выход 95%) пены. m/z=438 (М+1).
Соединение 495а. Соединение 494а (240 мг, 0,55 ммоль) растворяли в этилформиате (5 мл, 62,16 ммоль). Добавляли раствор метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 1 г, 5,55 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре; нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 495а (250 мг, выход 98%) в виде пены. m/z=466 (M+1).
Соединение 496а. Соединение 495а (250 мг, 0,54 ммоль) растворяли в EtOH. Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (100 мг, 1,44 ммоль) и 12N водн. HCl (2 капли). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 55°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и затем промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 496а (250 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=463 (M+1).
Соединение 497а. Соединение 496а (250 мг, 0,54 ммоль) растворяли в МеОН. Добавляли K2CO3 (0,4 г, 2,89 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 497а (210 мг, выход 84%) в виде пены. m/z=463 (M+1).
Т170. Соединение 497а (210 мг, 0,45 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (75 мг, 0,26 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (1 мл, 12,36 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч; охлаждали до комнатной температуры; и разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% ЕтОАс в гексанах), получая соединение Т170 (150 мг, выход 72%) в виде грязно-белой пены. m/z=461 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 8,78 (ддд, J=0,6, 1,4, 8,6 Гц, 1Н), 8,59 (с, 1Н), 8,22 (м, 1Н), 8,07 (д, J=4,4 Гц, 1Н), 7,80 (м, 2Н), 7,65 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,56 (дддд, J=1,8, 5,2, 7,2, 8,3 Гц, 1Н), 7,36 (дт, J=1,1, 7,6 Гц, 1Н), 7,28 (м, 1Н), 3,10 (ддд, J=3,5, 12,2, 15,8 Гц, 1Н), 2,96 (м, 2Н), 2,53 (дт, J=6,3, 12,8 Гц, 1Н), 1,56 (с, 3H), 1,36 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 493b. Соединение 492 (500 мг, 1,51 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли 2
- 190 043609 (фторметил)изоникотинимидамидную соль HCl (435 мг, 2,29 ммоль) и карбонат калия (550 мг, 3,98 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 4 дней, после чего концентрировали. Остаток смешивали с водой (50 мл), нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (20 мл). Добавляли оксид марганца(IV) (88%, 1,5 г, 15,18 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего фильтровали. Фильтрат концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 493b (260 мг, 37% выход) в виде пены. m/z=464 (M+1).
Соединение 494b. Соединение 493b (260 мг, 0,56 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл). Добавляли 3N водн. HCl (3 мл). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой; сушили MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 494b (240 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=420 (M+1).
Соединение 495b. Соединение 494b (240 мг, 0,56 ммоль) растворяли в этилформиате (5 мл, 62,16 ммоль). Добавляли раствор метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 1 г, 5,55 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре; нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 495b в виде (250 мг, количественный выход) пены. m/z=448 (M+1).
Соединение 496b. Соединение 495b (250 мг, 0,56 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (100 мг, 1,44 ммоль) и 12N водн. HCl (2 капли). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 55°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 496b (230 мг, выход 92%) в виде пены. m/z=445 (M+1).
Соединение 497b. Соединение 496b (230 мг, 0,52 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл). Добавляли K2CO3 (0,4 г, 2,89 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 497b (200 мг, выход 87%) в виде пены. m/z=445 (M+1).
Т171. Соединение 497b (190 мг, 0,43 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (68 мг, 0,24 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Добавляли пиридин (1 мл, 12,36 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч; после чего разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% ЕтОАс в гексанах), получая Т171 (103 мг, выход 54%) в виде белой пены. m/z=443 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,76 (д, J=5,1 Гц, 1Н), 8,62 (с, 1Н), 8,56 (д, J=1,5 Гц, 1Н), 8,37 (тд, J=1,0, 5,2 Гц, 1H), 7,84 (дт, J=1,8, 7,5 Гц, 1Н), 7,57 (дддд, J=1,8, 5,2, 7,2, 8,5 Гц, 1Н), 7,39 (дт, J=1,1, 7,6 Гц, 1Н), 7,25 (м, 1Н), 5,62 (д, J=46,8 Гц, 2Н), 3,04 (ддд, J=3,6, 12,2, 15,8 Гц, 1Н), 2,91 (м, 2Н), 2,45 (дт, J=6,3, 12,8 Гц, 1Н), 1,51 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 493с. Соединение 492 (500 мг, 1,51 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли 2метил-8-фторхинолин-4-карбоксимидамидную соль HCl (550 мг, 2,29 ммоль) и карбонат калия (550 мг, 3,98 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 5 дней, после чего концентрировали. Остаток смешивали с водой (50 мл), нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (20 мл). Добавляли оксид марганца(IV) (88%, 1,5 г, 15,18 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего фильтровали. Фильтрат концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 493с (560 мг, выход 72%) в виде пены. m/z=514 (М+1).
Соединение 494с. Соединение 493с (0,56 г, 1,09 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли 3N водн. HCl (3 мл). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали насыщенным водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой; сушили MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 494с (515 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=470 (М+1).
Соединение 495с. Соединение 494с (515 мг, 1,09 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124,32 ммоль). Добавляли раствор метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 2 г, 11,11 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре; нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 495с (545 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=498 (М+1).
Соединение 496с. Соединение 495с (545 мг, 1,09 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (0,16 г, 2,30 ммоль) и 12N водн. HCl (3 капли). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 55°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и затем промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильт- 191 043609 ровали и концентрировали, получая соединение 496с (0,53 г, выход 98%) в виде пены. m/z=495 (M+1).
Соединение 497с. Соединение 496с (530 мг, 1,07 ммоль) растворяли в МеОН (20 мл). Добавляли K2CO3 (0,75 г, 5,42 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи; нейтрализовывали добавлением насыщенного KH2PO4; и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 497с (360 мг, выход 68%) в виде пены. m/z=495 (M+1).
Т172. Соединение 497с (350 мг, 0,71 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (112 мг, 0,39 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания реакционной смеси при 0°C в течение 2 ч добавляли пиридин (1 мл, 12,36 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч; после чего разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т172 (170 мг, выход 49%) в виде грязно-белой пены. m/z=493 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,59 (с, 1Н), 8,49 (тд, J=1,2, 8,2 Гц, 1Н), 8,01 (с, 1Н), 7,80 (дт, J=1,8, 7,6 Гц, 1Н), 7,57 (дддд, J=1,8, 5,2, 7,2, 8,3 Гц, 1Н), 7,47 (м, 2Н), 7,37 (дт, J=1,1, 7,6 Гц, 1Н), 7,28 (м, 1Н), 3,09 (ддд, J=3,5, 12,2, 15,7 Гц, 1Н), 2,96 (м, 2Н), 2,91 (с, 3H), 2,53 (дт, J=6,5, 12,8 Гц, 1Н), 1,56 (с, 3H), 1,36 (д, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 493d. Соединение 492 (500 мг, 1,51 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли 5хинолинкарбоксимидамидную соль HCl (400 мг, 1,93 ммоль) и карбонат калия (550 мг, 3,98 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 5 дней, после чего концентрировали. Остаток смешивали с водой (50 мл), нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (20 мл). Добавляли оксид марганца(IV) (88%, 1,5 г, 15 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего фильтровали. Фильтрат концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 493d (500 мг, выход 69%) в виде пены. m/z=482 (M+1).
Соединение 494d. Соединение 493d (500 мг, 1,04 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли 3N водн. HCl (3 мл). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой; сушили MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 494d (455 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=438 (M+1).
Соединение 495d. Соединение 494d (455 мг, 1,04 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124,33 ммоль). Добавляли раствор метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 1,9 г, 10,55 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре; нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 495d (480 мг, выход 99%) в виде пены. m/z=466 (M+1).
Соединение 496d. Соединение 495d (480 мг, 1,03 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (145 мг, 2,09 ммоль) и 12N водн. HCl (3 капли). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 55°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 496d (0,47 г, выход 98%) в виде пены. m/z=463 (M+1).
Соединение 497d. Соединение 496d (470 мг, 1,02 ммоль) растворяли в МеОН (20 мл). Добавляли K2CO3 (700 мг, 5,07 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 497d (300 мг, выход 64%) в виде пены. m/z=463 (M+1).
Т173. Соединение 497d (300 мг, 0,65 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (105 мг, 0,37 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания реакционной смеси при 0°C в течение 2 ч добавляли пиридин (1 мл, 12,36 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч; после чего разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т173 (225 мг, выход 75%) в виде грязно-белой пены. m/z=461 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,26 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 8,98 (дд, J=1,7, 4,2 Гц, 1Н), 8,60 (с, 1Н), 8,38 (дд, J=1,2, 7,3 Гц, 1Н), 8,28 (дд, J=1,1, 8,5 Гц, 1Н), 7,86 (дд, J=7,3, 8,4 Гц, 1Н), 7,81 (дт, J=1,8, 7,6 Гц, 1Н), 7,56 (м, 1Н), 7,51 (дд, J=4,2, 8,8 Гц, 1Н), 7,36 (дт, J=1,1, 7,6 Гц, 1Н), 7,26 (м, 1Н), 3,08 (ддд, J=3,4, 12,2, 15,6 Гц, 1Н), 2,95 (м, 2Н), 2,52 (дт, J=6,5, 12,9 Гц, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,35 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 493е. Соединение 492 (500 мг, 1,51 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли 2(циклопропил)изоникотинимидамидную соль HCl (380 мг, 1,92 ммоль) и карбонат калия (550 мг, 3,98 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 5 дней, после чего концен
- 192 043609 трировали. Остаток смешивали с водой (50 мл), нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в CH2Cl2 (20 мл). Добавляли оксид марганца(IV) (88%, 1,5 г, 15,18 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего фильтровали. Фильтрат концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 493е (370 мг, выход 52%) в виде пены. m/z=472 (M+1).
Соединение 494е. Соединение 493е (370 мг, 0,78 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли 3N водн. HCl (3 мл). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего концентрировали. Остаток нейтрализовали насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали водой; сушили MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 494е (340 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=428 (M+1).
Соединение 495е. Соединение 494е (340 мг, 0,78 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124,33 ммоль). Добавляли раствор метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 1,5 г, 8,33 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре; нейтрализовывали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 495е (355 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=456 (M+1).
Соединение 496е. Соединение 495е (355 мг, 0,78 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (120 мг, 1,73 ммоль) и 12N водн. HCl (3 капли). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 55°C, охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и затем промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 496е (350 мг, выход 99%) в виде пены. m/z=453 (M+1).
Соединение 497е. Соединение 496е (350 мг, 0,77 ммоль) растворяли в МеОН (15 мл). Добавляли K2CO3 (600 мг, 4,34 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, нейтрализовали добавлением насыщ. водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая соединение 497е (320 мг, выход 91%) в виде пены. m/z=453 (M+1).
Т174. Соединение 497е (320 мг, 0,71 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (115 мг, 0,40 ммоль) в ДМФ (1 мл). После перемешивания реакционной смеси при 0°C в течение 2 ч добавляли пиридин (1 мл, 12,36 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч; после чего разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексане), получая соединение Т174 (140 мг, выход 44%) в виде светло-желтой пены. m/z=451 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,61 (м, 2Н), 8,25 (м, 1Н), 8,13 (дд, J=1,6, 5,1 Гц, 1Н), 7,84 (дт, J=1,9, 7,6 Гц, 1Н), 7,56 (м, 1Н), 7,38 (дт, J=1,1, 7,6 Гц, 1Н), 7,25 (м, 1Н), 3,03 (ддд, J=3,6, 12,2, 15,8 Гц, 1Н), 2,90 (м, 2Н), 2,45 (дт, J=6,3, 12,7 Гц, 1Н), 2,21 (тт, J=4,9, 8,1 Гц, 1Н), 1,50 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,8 Гц, 3H) 1,10 (м, 4Н).
Соединение 498. Смесь соединения 3 (1,00 г, 5,20 ммоль) и 5% Pd/C (100 мг) в 95% водн. EtOH гидрировали (водородный баллон) при комнатной температуре в течение 3-4 ч. Исходный материал был полностью израсходован. Смесь фильтровали через слой Celite®, и слой Celite® элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% EtOAc в гексанах), получая соединение 498 (521 мг, выход 52%) в виде белого твердого вещества. m/z=195,1 (M+1).
Соединение 499. К смеси соединения 498 (3,00 г, 15,44 ммоль) и этиленгликоля (2,22 г, 35,77 ммоль) 2-этил-2-метил-1,3-диоксолана (15 мл) добавляли моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (505 мг, 2,66 ммоль) при 15°C. Смесь перемешивали при 15°C в течение 2 ч, после чего концентрировали. Остаток разбавляли EtOAc (300 мл) и промывали 10% водн. NaHCO3 (100 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% EtOAc в петролейном эфире), получая соединение 499 (3,20 г, 13,43 ммоль, выход 87%) в виде белого твердого вещества. m/z=239,1 (М+1).
Соединение 500. Соединение 499 (2 г, 8,39 ммоль) растворяли в EtOH (35 мл). Добавляли 2фторбензальдегид (1,2 г, 9,67 ммоль) и KF/Al2O3 (40 мас.%, 2 г, 13,77 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре; разбавляли CH2Cl2; и фильтровали. Фильтрат концентрировали, а остаток смешивали с гексанами. Осажденное твердое вещество собирали фильтрованием и сушили in vacuo, получая соединение 500 (2,75 г, выход 95%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=345 (M+1).
Соединение 501. Соединение 500 (0,6 г, 1,74 ммоль) растворяли в EtOH (20 мл). Добавляли 4хинолинкарбоксимида гидрохлорид (455 мг, 2,2 ммоль) и карбонат калия (0,6 г, 4,34 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 дней. Реакционную смесь смешивали с водой (20 мл), нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над
- 193 043609
MgSO4 и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в CH2C12 (25 мл). Добавляли MnO2 (88%,
1,5 г, 15,18 ммоль). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 501 (0,45 г, выход 52%) в виде пены.
m/z=496 (M+1).
Соединение 502. Соединение 501 (0,45 г, 0,91 ммоль) растворяли в ТГФ (55 мл). Добавляли 3N водн. HCl (3 мл). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и концентрировали. Остаток нейтрализовали насыщ. водн. NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 502 (0,41 г, количественный выход) в виде пены. m/z=452 (M+1).
Соединение 503. Соединение 502 (0,41 г, 0,91 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл, 124,32 ммоль). Добавляли раствор метоксида натрия (30 мас.% в МеОН, 1,8 г, 10,00 ммоль). После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализовали водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 503 (435 мг, количественный выход) в виде пены. m/z=480 (M+1).
Соединение 504. Соединение 503 (435 мг, 0,91 ммоль) растворяли в EtOH (15 мл). Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (0,15 г, 2,16 ммоль) и 12N водн. HCl (2 капли). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 55°C. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали водн. NaHCO3. Органический экстракт сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 504 (0,3 г, выход 69%) в виде пены. m/z=477 (M+1).
Соединения 505 и 506. Соединение 504 (0,71 г, 1,49 ммоль) растворяли в МеОН (15 мл). Добавляли K2CO3 (1,03 г, 7,45 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакцию нейтрализовали добавлением насыщенного раствора водн. KH2PO4 и экстрагировали EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение 505 (0,43 г, выход 61%) и соединение 506 (0,1 г, выход 14%) в виде пенистых твердых веществ. m/z=477 (M+1).
Т175. Соединение 505 (0,43 г, 0,90 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (4 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (145 мг, 0,51 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Затем добавляли пиридин (1 мл, 12,36 ммоль) и смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т175 (195 мг, выход 45%) в виде желтой пены. m/z=475 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,07 (д, J=4,5, 1Н), 8,67 (дд, J=1,4, 8,6 Гц, 1Н), 8,21 (м, 2Н), 7,98 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,77 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,4 Гц, 1Н), 7,65 (ддд, J=1,4, 6,8, 8,7 Гц, 1Н), 7,52 (м, 2Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,6 Гц, 1Н), 7,23 (м, 1Н), 2,87 (ддд, J=6,1, 12,3, 18,4 Гц, 1Н), 2,69 (м, 1Н), 2,58 (кд, J=6, 6, 13,2 Гц, 1Н), 2,29 (тд, J=3,4, 12,9 Гц, 1Н), 2,15 (м, 2Н), 1,80 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,6 Гц, 3H).
Т176. Соединение 506 (0,1 г, 0,21 ммоль) растворяли в сухом ДМФ (2 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (35 мг, 0,12 ммоль) в ДМФ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч, после чего добавляли пиридин (1 мл, 12,36 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 ч; охлаждали до комнатной температуры; и разделяли между водн. NaHCO3 и EtOAc. Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-35% EtOAc в гексанах), получая соединение Т176 в виде (17 мг, 17% выход) в виде грязно-белой пены. m/z=475 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,09 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,75 (ддд, J=0,6, 1,5, 8,6 Гц, 1Н), 8,22 (м, 1Н), 8,03 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 7,78 (м, 2Н), 7,64 (ддд, J=1,3, 6,8, 8,3 Гц, 1Н), 7,54 (м, 2Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,24 (м, 1Н), 3,22 (м, 1Н), 2,91 (м, 1Н), 2,69 (ддд, J=2,4, 4,3, 17,5 Гц, 1Н), 2,44 (м, 1Н), 2,03 (м, 1Н), 2,02 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H), 1,26 (м, 1Н).
Соединение 507. Смесь соединения 380 (1,78 г, 3,74 ммоль) и оксида марганца(IV) (88%, 3,7 г, 37,45 ммоль) в CH2Cl2 (100 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Смесь фильтровали через слой Celite®. Фильтрат концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 507 (1,13 г, выход 63%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=474 (М+1).
Соединение 508. Раствор соединения 507 (1,13 г, 2,39 ммоль) и метил(трифенилфосфоранилиден)ацетата (1,20 г, 3,48 ммоль) в бензоле (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 508 (1,26 г, выход 99%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=530 (M+1).
Соединение 509. Смесь соединения 508 (1,26 г, 2,38 ммоль) и 10% палладия на угле (0,13 г) в EtOAc
- 194 043609 (50 мл) гидрировали (давление в баллоне) при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали, получая соединение 509 (1,17 г, выход 93%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=532 (M+1).
Соединение 510. Раствор соединения 509 (1,17 г, 2,20 ммоль) и 3N водн. HCl (7,3 мл, 21,9 ммоль) в ТГФ (50 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и доводили до рН ~ 6 добавлением насыщ. водн. NaHCO3 (30 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) последовательно. Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл); сушили над MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 510 (1,09 г) в виде желтого пенистого твердого вещества. Соединение 510 представляет собой смесь карбоновой кислоты (R=H) и сложного метилового эфира (R=Me) в соотношении 93/7. m/z=474 (R=H, M+1) и 488 (R=Me, M+1).
Соединение 511. Раствор соединения 510 (1,09 г, <2,20 ммоль) в этилформиате (20 мл, 248,65 ммоль) обрабатывали и этоксидом натрия (21 мас.% в EtOH, 4,1 мл, 10,98 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи и затем концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. раствором KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл); сушили над MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 511 (1,06 г, выход 96% от 509) в виде желто-коричневого твердого вещества m/z=502 (M+1).
Соединение 512. Раствор соединения 511 (1,06 г, 2,11 ммоль), уксусной кислоты (1,26 мл, 22,01 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (0,23 г, 3,31 ммоль) в EtOH (25 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток осторожно распределяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл); сушили над MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 512 (1,08 г, выход 97%) в виде коричневого пенистого твердого вещества. m/z=527 (M+1).
Соединение 513. К перемешиваемому раствору при 0°C в атмосфере N2 хлорида аммония (53 мг, 0,99 ммоль) в толуоле (2 мл) по каплям добавляли триметилалюминий (1,0 М в гептане, 1,0 мл, 1,0 ммоль). После добавления ледяную баню убирали и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Затем по каплям добавляли раствор соединения 512 (0,17 г, 0,32 ммоль) в толуоле (2 мл). Смесь перемешивали в течение 72 ч; охлаждали; и гасили добавлением по каплям МеОН (20 мл). Смесь концентрировали и остаток распределяли между насыщ. водн. солью Рошелля (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл); сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3), получая соединение 513 (86 мг, выход 54%) в виде желтой маслянистой жидкости. m/z=498 (M+1).
Соединение 514. Смесь соединения 513 (0,31 г, 0,62 ммоль) и карбоната калия (0,43 г, 3,11 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток осторожно распределяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл); сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3), получая соединение 514 (0,22 г, выход 71%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=498 (M+1).
Т177. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере N2 раствору соединения 514 (0,19 г, 0,38 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (54 мг, 0,19 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин. Добавляли пиридин (0,31 мл, 3,83 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток распределяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл); сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 10% МеОН в CHCl3), получая соединение Т177 (83 мг, выход 44%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=496 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,01 (с, 1Н), 8,69 (дд, J=0,8, 5,2 Гц, 1Н), 8,25 (т, J=1,1 Гц, 1Н), 8,20 (дд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,52 (дддд, J=1,9, 5,3, 7,2, 8,4 Гц, 1Н), 7,45 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,21 (ддд, J=1,0, 8,3, 9,7 Гц, 1Н), 6,39 (уш. с, 1Н), 5,37 (уш. с, 1Н), 3,28 (т, J=7,1 Гц, 2Н), 2,81 (м, 4Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=2,7, 12,7 Гц, 1Н), 2,12 (м, 1Н), 1,82 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 515. Раствор соединения 381 (1,28 г, предположительно 2,31 ммоль) в CH3CN (10 мл) обрабатывали 18-Краун-6 (0,90 г, 3,41 ммоль), а затем цианидом калия (0,19 г, 2,92 ммоль). Смесь нагревали при 50°C в атмосфере N2 в течение ночи; охлаждали; и затем распределяли между 1N водн. NaOH (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл); сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 515 (0,92 г, выход 82%) в виде оранжево-желтого твердого вещества. m/z=485 (М+1).
Соединение 516. Суспензию соединения 515 (0,92 г, 1,90 ммоль) в аммиаке (7 н. В МеОН, 50 мл)
- 195 043609 обрабатывали никелем Ренея W2 [1,5 г, промывание МеОН (50 мл)]. Смесь гидрировали (давление в баллоне) при комнатной температуре в течение 16 часов и фильтровали. Фильтрат концентрировали, получая соединение 516 (0,82 г, выход 88%) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества.
m/z=489 (М+1).
Соединение 517. Суспензию соединения 516 (0,82 г, 1,68 ммоль) и ацетата натрия (1,38 г, 16,82 ммоль) в уксусном ангидриде (10 мл, 105,78 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи, а затем концентрировали. Остаток осторожно распределяли между насыщ. водн. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл); сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 2,5% МеОН в CHCl3), получая соединение 517 (0,89 г, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=531 (М+1).
Соединение 518. Раствор соединения 517 (0,89 г, 1,68 ммоль) и 3 N водн. HCl (6 мл, 18 ммоль) в ТГФ (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали, охлаждали, осторожно подщелачивали насыщ. водн. NaHCO3 (50 мл) и экстрагировали EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл); сушили MgSO4; фильтровали; и концентрировали, получая соединение 518 (0,68 г, выход 83%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=487 (M+1).
Соединение 519. В герметизируемом флаконе раствор соединения 518 (0,68 г, 1,40 ммоль) в диметилацетале N,N-диметилформамида (10 мл, 75,28 ммоль) продували N2. Флакон герметично закрывали. Смесь нагревали до 100°C в течение 4 дней; охлаждали; и концентрировали, получая соединение 519 (0,96 г) в виде коричневого пенистого твердого вещества. m/z=542 (М+1).
Соединение 520. Раствор соединения 519 (0,96 г, <1,40 ммоль), уксусной кислоты (0,80 мл, 13,97 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (0,14 г, 2,01 ммоль) в EtOH (20 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а затем при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток осторожно распределяли между насыщ. водн. NaHCO3 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл); сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3), получая соединение 520 (0,42 г, 59% выход из 518) в виде темно-желтого пенистого твердого вещества. m/z=512 (M+1).
Соединение 521. Смесь соединения 520 (0,42 г, 0,82 ммоль) и карбоната калия (0,57 г, 4,12 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток осторожно распределяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл); сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3), получая соединение 521 (0,26 г, выход 62%) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=512 (M+1).
Т178. К перемешиваемому при 0°C в атмосфере N2 раствору соединения 521 (0,26 г, 0,51 ммоль) в дегазированном ДМФ (4 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (89 мг, 0,31 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин. Добавляли пиридин (0,42 мл, 5,19 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток распределяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл); сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 5% МеОН в CHCl3), получая частично очищенный продукт, который снова очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование MeOH/EtOAc/CH2Cl2 в соотношении 1/4/4), что дает соединение Т178 (53 мг, 20% выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=510 (М+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,01 (с, 1Н), 8,71 (дд, J=0,8, 5,1 Гц, 1Н), 8,22 (м, 2Н), 7,52 (м, 1Н), 7,44 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,34 (дт, J=1,0, 7,5 Гц, 1H), 7,22 (ддд, J=1,1, 8,3, 9,7 Гц, 1Н), 6,52 (шир.с, 1Н), 3,73 (q, J=6,1 Гц, 2Н), 3,13 (дд, J=5,5, 7,1 Гц, 2Н), 2,82 (м, 2Н), 2,63 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,26 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,13 (м, 1Н), 1,97 (с, 3H), 1,82 (м, 1Н), 1,55 (с, 3H), 1,33 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Соединение 522. В герметизируемом флаконе смесь 3-бромизоникотиминамида гидрохлорида (1,00 г, 4,23 ммоль), соединения 88 (1,75 г, 5,08 ммоль) и карбоната калия (1,75 г, 12,66 ммоль) в этаноле (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 2 ч. Флакон герметично закрывали. Смесь нагревали до 80°C в течение ночи, охлаждали и фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток распределяли между насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл); сушили MgSO4; фильтровали; и концентрировали, получая дигидропиримидин (2,48 г) в виде желтого пенистого твердого вещества. Смесь дигидропиримидина (2,48 г) и оксида марганца(IV) (88%, 2,1 г, 21,26 ммоль) в CH2Cl2 (50 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Смесь фильтровали через слой Celite® и фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 522 (1,35 г, выход 51%) в виде светло-желтого твердого вещества. m/z=524/526
- 196 043609 (M+1).
Соединение 523. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 522 (0,40 г, 0,76 ммоль), фенилбороновой кислоты (0,18 г, 1,48 ммоль), фосфата калия (0,48 г, 2,26 ммоль), 1,4-диоксана (6,4 мл) и ДМФ (1,6 мл). Смесь обрабатывали тетракис(трифенилфосфин) палладием(0) (88 мг, 0,076 ммоль) и снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 100°C в течение 16 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры; разбавляли EtOAc (50 мл); и промывали 1N водн. NaOH (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл) и насыщ. водн. NaCl (50 мл); сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 523 (0,48 г, количественный выход) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=522 (M+1).
Соединение 524. Раствор соединения 523 (0,48 г, <0,76 ммоль) и 3N водн. HCl (2,5 мл, 7,5 ммоль) в МеОН (50 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. NH4OH до рН 9 ~ 10. Смесь экстрагировали CHCl3 (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл); сушили над MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 524 (0,42 г, количественный выход) в виде грязнобелого пенистого твердого вещества. m/z=478 (M+1).
Соединение 525. Раствор соединения 524 (0,42 г, <0,76 ммоль) в этилформиате (20 мл, 248,65 ммоль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% в МеОН, 0,75 мл, 4,04 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (50 мл) и насыщ. водн. KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (50 мл); сушили над MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 525 (0,42 г, количественный выход) в виде желтого пенистого твердого вещества. m/z=506 (М+1).
Соединение 526. Раствор соединения 525 (0,42 г, <0,76 ммоль), уксусной кислоты (0,45 мл, 7,86 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (80 мг, 1,15 ммоль) в EtOH (20 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а затем при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток распределяли между насыщ. водн. NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл); сушили над MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 526 (0,39 г, количественный выход) в виде желтовато-коричневого пенистого твердого вещества. m/z=503 (M+1).
Соединение 527. Смесь соединения 526 (0,39 г, <0,76 ммоль) и карбоната калия (0,52 г, 3,76 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток осторожно распределяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл); сушили над MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 527 (0,38 г, количественный выход) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=503 (M+1).
Т179. К перемешиваемому раствору при 0°C в атмосфере N2 соединения 527 (0,38 г, 0,76 ммоль) в дегазированном ДМФ (5 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,11 г, 0,39 ммоль) в дегазированном ДМФ (2 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин. Добавляли пиридин (0,61 мл, 7,54 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток распределяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл); сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т179 (0,20 г, выход 53%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=501 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,75 (д, J=5,1 Гц, 1Н), 8,73 (м, 1Н), 7,96 (дд, J=0,7, 5,1 Гц, 1Н), 7,61 (с, 1Н) 7,46 (м, 4Н), 7,31 (м, 2Н), 7,21 (м, 3H), 2,81 (ддд, J=7,0 Гц, 11,2, 18,3 Гц, 1Н), 2,71 (дд, J=6,3, 18,2 Гц, 1Н), 2,45 (тд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,07 (м, 2Н), 1,67 (дк, J=6,7, 12,9 Гц, 1Н), 1,25 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,17 (с, 3H).
Соединение 528. В герметизируемом флаконе дегазировали смесь соединения 522 (0,40 г, 0,76 ммоль), циклопропилтрифторбората калия (0,34 г, 2,30 ммоль), фосфата калия (0,48 г, 2,26 ммоль), RuPhos (35 мг, 0,075 ммоль), толуола (6,4 мл) и воды (1,6 мл). Добавляли ацетат палладия(П) (8 мг, 0,036 ммоль). Смесь снова дегазировали. Флакон герметично закрывали и нагревали до 100°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли EtOAc (50 мл) и промывали насыщ. водн. раствором KH2PO4 (50 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. раствором NaCl (50 мл); сушили MgSO4; фильтровали; и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение 528 (0,18 г, выход 49%) в виде желтого твердого вещества. m/z=486 (M+1).
Соединение 529. Раствор соединения 528 (0,18 г, 0,37 ммоль) и 3N водн. HCl (1,25 мл, 3,75 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Смесь концентрировали. Остаток охлаждали и подщелачивали 10% водн. раствором NH4OH до рН 9 ~ 10. Смесь экстрагировали CHCl3 (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. Раствор NaCl (25 мл); сушили MgSO4; фильтровали; и концентрировали, получая соединение 529 (0,20 г, количественный выход) в
- 197 043609 виде светло-оранжевого пенистого твердого вещества. m/z=442 (M+1).
Соединение 530. Раствор соединения 529 (0,20 г, <0,37 ммоль) в этилформиате (10 мл, 124,33 ммоль) обрабатывали метоксидом натрия (30 мас.% раствор в МеОН, 0,35 мл, 1,89 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи и затем концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (25 мл) и насыщ. водн. раствором KH2PO4 (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. раствор NaCl (25 мл); сушили над MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 530 (0,17 г, выход 98%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=470 (M+1).
Соединение 531. Раствор соединения 530 (0,17 г, 0,36 ммоль), уксусной кислоты (0,21 мл, 3,67 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (39 мг, 0,56 ммоль) в EtOH (10 мл) перемешивали при 60°C в течение 2 ч, а затем при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток распределяли между насыщ. водн. раствором NaHCO3 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. раствор NaCl (25 мл); сушили над MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 531 (0,16 г, выход 95%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Соединение 532. Смесь соединения 531 (0,16 г, 0,34 ммоль) и карбоната калия (0,24 г, 1,74 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение ночи. Образец концентрировали и остаток распределяли между насыщ. водн. раствором KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. раствор NaCl (25 мл); сушили над MgSO4; фильтровали и концентрировали, получая соединение 532 (0,15 г, выход 94%) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. m/z=467 (M+1).
Т180. К перемешиваемому раствору при 0°C в атмосфере N2 соединения 532 (0,15 г, 0,32 ммоль) в дегазированном ДМФ (3 мл) по каплям добавляли раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (46 мг, 0,16 ммоль) в дегазированном ДМФ (1 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин. Добавляли пиридин (0,26 мл, 3,21 ммоль). Смесь нагревали при 60°C в течение 4 ч, после чего концентрировали. Остаток распределяли между насыщ. водн. KH2PO4 (25 мл) и EtOAc (25 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (25 мл); сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 50% EtOAc в гексанах), получая соединение Т180 (46 мг, выход 31%) в виде грязно-белого твердого вещества. m/z=465 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,91 (с, 1Н), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1Н), 8,47 (с, 1Н), 7,70 (д, J=5,0 Гц, 1Н), 7,50 (дддд, J=1,9, 5,3, 7,3, 8,4 Гц, 1Н), 7,41 (дт, J=1,9, 7,4 Гц, 1Н), 7,30 (дт, J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,20 (ддд, J=1,0, 8,4, 9,7 Гц, 1Н), 2,85 (м, 2Н), 2,62 (кд, J=6,7, 13,4 Гц, 1Н), 2,50 (тт, J=5,5, 8,6 Гц, 1Н), 2,28 (дт, J=2,7, 12,8 Гц, 1Н), 2,14 (м, 1Н), 1,83 (м, 1Н), 1,54 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H), 0,93 (м, 2Н), 0,73 (м, 2Н).
Соединение 533. К перемешиваемому раствору трет-бутоксида калия (72,3 мг, 0,644 ммоль) в ТГФ (0,7 мл) при 0°C в атмосфере аргона добавляли раствор соединения 337 (120 мг, 0,215 ммоль) в ТГФ (1,5 мл). После перемешивания реакционной смеси при 0°C в течение 10 мин добавляли йодистый этил (0,052 мл, 0,647 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч, после чего гасили насыщ. водн. NH4Cl. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-60% EtOAc в гексанах), получая соединение 533 (80 мг, выход 63%) в виде бледно-желтой пены. m/z=587,3 (M+1).
Соединение 534. К перемешиваемому раствору соединения 533 (80 мг, 0,136 ммоль) в EtOH (1,4 мл) добавляли 1N водн. раствор HCl (0,273 мл, 0,273 ммоль) и гидрохлорид гидроксиламина (14,2 мг, 0,204 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли насыщ. водн. раствором NaHCO3 (10 мл) и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-40% ацетона в гексанах), получая соединение 534 (25 мг, выход 37%) в виде бледно-желтой пены. m/z=495,2 (M+1).
Соединение 535. Смесь соединения 534 (25 мг, 0,051 ммоль) и карбонат калия (10,5 мг, 0,076 ммоль) в МеОН (0,5 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, а затем фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток разбавляли EtOAc (10 мл). Смесь промывали 1N водн. раствором HCl (10 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая неочищенное соединение 535 (23 мг, выход 92%) в виде светло-желтого пенистого твердого вещества. m/z=495,2 (M+1).
Т181. К перемешиваемому раствору соединения 535 (23 мг, 0,047 ммоль) при 0°C в атмосфере N2 в дегазированном ДМФ (0,7 мл) добавляли по каплям раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (6,7 мг, 0,023 ммоль) в ДМФ (0,7 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (0,011 мл, 0,136 ммоль). Смесь нагревали до 55°C в течение ночи; охлаждали до комнатной температуры; и распределяли между водой (10 мл) и EtOAc (10 мл). Органический экстракт промывали насыщ. водн. NaCl (10 мл); сушили Na2SO4; фильтровали; и концентрировали. Остаток очищали несколько раз с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 40% EtOAc в гексанах), получая соединение Т181
- 198 043609 (15 мг, выход 65%) в виде грязно-белого пенистого твердого вещества. m/z=493,2 (М+1); 1H ЯМР (400
МГц, CDCl3) δ 8,97 (с, 1Н), 8,60 (м, 1Н), 8,19 (м, 1Н), 8,06 (дд, J=1,6, 5,2 Гц, 1Н), 7,49 (м, 2Н), 7,34 (дт,
J=1,1, 7,5 Гц, 1Н), 7,22 (ддд, J=1,0, 8,3, 9,7 Гц, 1Н), 2,81 (м, 2Н), 2,55 (дд, J=4,4, 10,2 Гц, 1Н), 2,21 (тт,
J=4,6, 7,6 Гц, 1Н), 1,97 (м, 3H), 1,60 (с, 3H), 1,56 (м, 1Н), 1,25 (с, 3H), 1,12 (м, 2Н), 1,05 (м, 2Н), 0,80 (т,
J=7,4 Гц, 3H).
Соединение 536. К раствору соединения 3 (50 г, 260,08 ммоль) в этиленгликоле (200 мл, 3,59 моль) добавляли моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (15 г, 78,86 ммоль). Смесь перемешивали при 15°C в течение 40 ч. Смесь распределяли между EtOAc (800 мл) и 10% водн. NaHCO3 (100 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 6/1 петролейный эфир/EtOA), получая соединение 536 (41 г, выход 67%) в виде бесцветной маслянистой жидкости. m/z=237,2 (М+1).
Соединение 537. Жидкий аммиак (100 г, 5,87 моль) конденсировали в реакционной колбе при 78°C. Добавляли литиевую проволоку (2,50 г, 360,23 ммоль). Смесь перемешивали до получения темносинего раствора. Затем добавляли раствор соединения 536 (20,5 г, 86,75 ммоль) и воды (1,50 г, 83,26 ммоль) в ТГФ (100 мл). Реакционную смесь перемешивали при -30°C в течение 1 ч, а затем гасили добавлением водн. хлорид аммония. Смесь нагревали до 20°C, чтобы дать аммиаку испариться, и затем экстрагировали EtOAc (500 мл). Органический экстракт промывали водой (100 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 10/1 петролейный эфир/EtOA), получая соединение 537 (14 г, выход 68%) в виде бесцветной маслянистой жидкости. m/z=239 (М+1).
Соединение 538. К раствору соединения 537 (26 г, 109,10 ммоль) в Et2O (300 мл) добавляли литийалюминийгидрид (1,24 г, 32,67 ммоль) при -78°C. Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч, а затем гасили, осторожно добавляя 10% водн. NH4Cl (20 мл). Смесь разбавляли EtOAc (500 мл) и промывали водой (200 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4; фильтровали; и концентрировали, получая соединение 538 (смесь эпимеров 6/1, 23 г, выход 88%) в виде бесцветной маслянистой жидкости. m/z=223,2 (M-OH).
Соединение 539. К раствору соединения 538 (23 г, 95,70 ммоль) в CH2Cl2 (300 мл) добавляли бензоилхлорид (25,41 г, 180,77 ммоль) и пиридин (25 мл, 309,10 ммоль) при 15°C и перемешивали в течение 16 ч. Смесь разбавляли EtOAc (800 мл) и промывали водой (200 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование смесью 15/1 петролейный эфир/EtOAc), получая частично очищенное соединение 539 (38 г) в виде бесцветной маслянистой жидкости, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. m/z=345 (М+1).
Соединение 540. К раствору соединения 539 (38 г, <95,70 ммоль) в EtOH (200 мл) обрабатывали 3N водн. HCl (100 мл, 300 ммоль). После перемешивания при 20°C в течение 1 ч смесь разбавляли EtOAc (500 мл) и промывали водой (100 мл).
Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование смесью 15/1 петролейный эфир/EtOAc), получая смесь соединения 540 и 541 (30 г). Продукт растворяли в петролейном эфире (100 мл) при 40°C, охлаждали до 20°C и выдерживали в течение 1 ч. Осажденное твердое вещество собирали фильтрованием и сушили in vacuo до соединения 540 (19,2 г, 67% выход из 538) в виде белого твердого вещества. m/z=119 (M-OBz).
Соединение 542. К раствору соединения 540 (17,2 г, 57,26 ммоль) в Et2O (600 мл) добавляли диэтилэфират трифторида бора (49,45 г, 348,41 ммоль) и этилдиазоацетат (38,15 г, 334,35 ммоль) последовательно при 0°C в атмосфере N2. Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч; охлаждали до 0°C; и гасили 10% водн. NaHCO3 (100 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование смесью 30/1 петролейный эфир/EtOAc), получая частично очищенное соединение 542 (22 г), которое растирали со смесью петролейного эфира (100 мл) и EtOAc (3 мл) при 15°C в течение 1 ч. Твердое вещество собирали фильтрацией; промывали петролейным эфиром (10 мл); и сушили in vacuo, получая соединение 542 (13,4 г, выход 61%) в виде белого твердого вещества. Маточный раствор концентрировали при пониженном давлении. Остаток (6,5 г) растворяли в петролейном эфире (20 мл) и перемешивали при -30°C в течение 1 ч. Осажденное твердое вещество собирали фильтрованием и сушили in vacuo до 2го получения соединения 542 (1,7 г, выход 8%) в виде белого твердого вещества. m/z=387 (M+1).
Соединение 543. Смесь соединения 542 (10 г, 25,87 ммоль), иодида лития (15 г, 112,07 ммоль) и воды (5 г, 277,54 ммоль) в 2,4,6-коллидине (50 мл) перемешивали при 150°C в течение 2 ч в атмосфере N2. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли EtOAc (500 мл) и промывали водой (300 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование смесью петролейный эфир/EtOAc 20/1), получая соединение 543 (8,1 г, выход 97%) в виде желтого твердого вещества. m/z=193 (M-OBz).
Соединение 544. К раствору соединения 543 (8,1 г, 25,76 ммоль) в EtOH (200 мл) добавляли 2 М
- 199 043609 водн. NaOH (30 мл, 60 ммоль). Смесь перемешивали при 15°C в течение 16 ч, после чего концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc (500 мл). Органический экстракт промывали 1N водн. HCl (100 мл) и
10% водн. NaHCO3 (100 мл); сушили Na2SO4; фильтровали; и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование смесью 6/1 петролейный эфир/EtOAc), получая соединение 544 (4,8 г, выход 89%) в виде белого твердого вещества. m/z=193 (M-OH).
Соединение 545. К раствору соединения 544 (1,7 г, 8,08 ммоль) в CH2Cl2 (16 мл) в атмосфере N2 при комнатной температуре последовательно добавляли N,N-диизопропилэтиламин (4,22 мл, 24,23 ммоль) и метоксиметилхлорид (1,23 мл, 16,19 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 4 ч реакционную смесь обрабатывали 1N водн. раствор HCl (20 мл). Отделяли органическую фазу и дважды промывали 1N водн. HCl (2x20 мл). Объединенные водные смывки экстрагировали EtOAc (2x20 л). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4; фильтровали; и концентрировали, получая соединение 545 (2,0 г, выход 97%) в виде белого твердого вещества. m/z=193 (M-OMOM).
Соединение 546. К раствору соединения 545 (712 мг, 2,80 ммоль) в t-BuOH (5 мл) при комнатной температуре добавляли бензальдегид (512 мг, 5,04 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин и затем обрабатывали трет-бутоксидом калия (393 мг, 3,50 ммоль). Горлышко колбы промывали t-BuOH (2 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 20 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь разбавляли МТВЕ (40 мл) и промывали водой (3x20 мл). Объединенные водные смывки экстрагировали МТВЕ (20 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-30% EtOAc в гексанах), получая соединение 546 (290 мг, выход 30%) в виде желтого полутвердого вещества. m/z=343,2 (M+1).
Соединение 547а. Трет-бутоксид калия (138 мг, 1,23 ммоль) и гидрохлорид 2метилизонотинимидамида (105 мг, 0,61 ммоль) взвешивали в микроволновом флаконе. Добавляли соединение 546 (содержит 32 мол.% соединения 545, 140 мг, 0,30 ммоль) в 1,4-диоксане (2,8 мл). Смесь нагревали в микроволновой печи Biotage при 200°C в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь распределяли между EtOAc (40 мл) и водой (40 мл). Органический экстракт отделяли и промывали водой (20 мл). Объединенные водные смывки экстрагировали EtOAc (2x30 л). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 547а (65 мг, выход 47%) в виде белой пены. m/z=458,3 (M+1).
Соединение 548а. К раствору соединения 547а (132 мг, 0,29 ммоль) в ТГФ (1,3 мл) добавляли воду (0,4 мл) и 12N водн. HCl (0,15 мл, 1,80 ммоль) последовательно при комнатной температуре. После перемешивания смеси в течение 16 ч при комнатной температуре добавляли МТВЕ (40 мл) и 1N водн. NaOH (2 мл). Смесь промывали насыщ. водн. NaHCO3 (20 мл). Водную смывку экстрагировали EtOAc (3x15 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в гексанах), получая соединение 548а (103 мг, выход 86%) в виде белой пены. m/z=414,2 (M+1).
Соединение 549а. К раствору соединения 548а (100 мг, 0,24 ммоль) в CH2Cl2 (2,5 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (210 мг, 0,50 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания реакции в течение 7 ч при комнатной температуре добавляли водн. Добавляли 10% Na2SO3 (10 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 5 мин смесь экстрагировали CH2Cl2 (3x15 мл). Объединенные органические экстракты промывали водн. насыщ. NaHCO3 (15 мл); сушили над Na2SO4; фильтровали; и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-60% ацетона в гексанах), получая соединение 549а (96 мг, выход 96%) в виде белой пены. m/z=412,2 (M+1).
Соединение 550а. К перемешиваемому раствору соединения 549а (94 мг, 0,23 ммоль) в этилформиате (0,55 мл, 6,84 ммоль) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,52 мл, 2,27 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли 12N водн. HCl (0,21 мл, 2,52 ммоль), EtOH (1,8 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (24 мг, 0,35 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 5 ч и концентрировали. Добавляли насыщ. водн. NaHCO3 (10 мл). Смесь экстрагировали CH2Cl2 (3x20 мл). Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 550а (80 мг, выход 80%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=437,2 (M+1).
Соединение 551а. Соединение 550а (75 мг, 0,17 ммоль) растворяли в МеОН (1,7 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,080 мл, 0,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. МТВЕ (10 мл) и 10% водн. NaH2PO4 (10 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 551а (69 мг, выход 92%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=437,2 (M+1).
- 200 043609
Т182. Соединение 551а (68 мг, 0,16 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,38 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (23 мг, 0,080 ммоль) в ДМФ (0,4 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (0,038 мл, 0,47 ммоль). Реакцию нагревали при 55°C в течение 2,5 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (20 мл). Смесь промывали водой (3х 15 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаточный пиридин удаляли азеотропным испарением с толуолом на роторном испарителе. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах), получая соединение Т182 (58 мг, выход 85%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=435,2 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCI3) δ 8,67 (дд, J=5,2, 0,8 Гц, 1Н), 8,59 (с, 1Н), 8,16 (м, 1Н), 8,09 (ддд, J=5,2, 1,6, 0,7 Гц, 1Н), 7,65-7,57 (м, 2Н), 7,56-7,47 (м, 3H), 3,10 (м, 1Н), 2,98 (м, 1Н), 2,68 (с, 3H), 2,50 (дк, J=13,1, 6,6 Гц, 1Н), 2,36 (тд., J=11,9, 3,5 Гц, 1Н), 2,23 (м, 1Н), 1,97-1,81 (м, 2Н), 1,77 (с, 3H), 1,60 (м, 1Н), 1,29 (д, J=6,5 Гц, 3H).
Соединение 547b. Трет-бутоксид калия (157 мг, 1,40 ммоль) и гидрохлорид хинолин-5карбоксимидамида (146 мг, 0,70 ммоль) взвешивали в микроволновом флаконе. Добавляли соединение 546 (содержащее 42 мол.% соединения 545, 160 мг, 0,30 ммоль) в 1,4-диоксане (3,2 мл). Смесь нагревали в микроволновой печи Biotage при 200°C в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь распределяли между EtOAc (15 мл) и водой (15 мл). Органический экстракт отделяли и промывали водой (15 мл). Объединенные водные смывки экстрагировали EtOAc (2x10 л). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-50% EtOAc в гексанах), получая частично очищенное соединение 547b (чистота 90%, 45 мг, выход 27%) в виде белой пены. m/z=494.2 (M+1), которое использовали для следующей стадии без дополнительной очистки.
Соединение 548b. К раствору соединения 547b (чистота 90%, 106 мг, 0,19 ммоль) в ТГФ (1,1 мл) добавляли воду (0,2 мл) и 12N водн. HCl (0,19 мл, 2,28 ммоль) последовательно при комнатной температуре. После перемешивания смеси в течение 7 ч при комнатной температуре добавляли МТВЕ (20 мл) и 1N водн. NaOH (2,4 мл). Смесь разбавляли насыщ. водн. NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали CH2Cl2 (3x20 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая соединение 548b (73 мг, выход 84%) в виде белой пены. m/z=450,2 (M+1).
Соединение 549b. К раствору соединения 548b (73 мг, 0,16 ммоль) в CH2Cl2 (1,6 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (138 мг, 0,33 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания реакционной смеси в течение 5 ч при комнатной температуре добавляли дополнительное количество периодинана Десса-Мартина (69 мг, 0,16 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 2 ч и гасили 10% водн. Na2SO3 (10 мл) и 10% водн. NaHCO3 (10 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 5 мин смесь экстрагировали CH2Cl2 (3x20 мл). Объединенные органические экстракты сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах), получая соединение 549b (59 мг, выход 81%) в виде белой пены. m/z=448,2 (M+1).
Соединение 550b. К перемешиваемому раствору соединения 549b (57 мг, 0,13 ммоль) в этилформиате (0,31 мл, 3,85 ммоль) добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,29 мл, 1,27 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждали до 0°C. Последовательно добавляли 12N водн. HCl (0,12 мл, 1,44 ммоль), EtOH (1,2 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (14 мг, 0,20 ммоль). Смесь нагревали при 55°C в течение 5 ч и концентрировали. Остаток распределяли между EtOAc (20 мл) и насыщ. водн. NaHCO3 (20 мл). Водную фаз у отделяли и экстрагировали EtOAc (2x10 мл). Объединенный органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-70% EtOAc в гексанах), получая соединение 550b (49 мг, выход 81%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=473,2 (M+1).
Соединение 551b. Соединение 550b (48 мг, 0,10 ммоль) растворяли в МеОН (1,0 мл). Добавляли метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 0,047 мл, 0,21 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°C в течение 1 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь распределяли между CH2Cl2 (20 мл) и 10% водн. NaH2PO4 (10 мл). Водную фаз у отделяли и экстрагировали CH2Cl2 (2x20 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-80% EtOAc в гексанах), получая соединение 551b (39 мг, выход 81%) в виде белого пенистого твердого вещества. m/z=473,2 (M+1).
Т183. Соединение 551b (38 мг, 0,080 ммоль) растворяли в безводном ДМФ (0,2 мл) и раствор охлаждали до 0°C. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (11,5 мг, 0,040 ммоль) в ДМФ (0,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Добавляли пиридин (0,032 мл, 0,40 ммоль). Реакцию нагревали при 55°C в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (20 мл). Смесь промывали водой (3x20 мл). Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-80% EtOAc в гексанах), получая соединение Т183 (28 мг, выход 74%) в виде белого пенистого твердого вещества.
- 201 043609 m/z=471,2 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,33 (ддд, J=8,7, 1,7, 0,8 Гц, 1Н), 8,97 (дд, J=4,2, 1,7 Гц,
1Н), 8,62 (с, 1Н), 8,39 (дд, J=7,3, 1,3 Гц, 1Н), 8,25 (дт, J=8,4, 1,1 Гц, 1Н), 7,84 (дд, J=8,4, 7,3 Гц, 1Н), 7,667,58 (м, 2Н), 7,57-7,49 (м, 4Н), 3,14 (м, 1Н), 3,02 (м, 1Н), 2,51 (дк, J=12,8, 6,4 Гц, 1Н), 2,41 (тд, J=11,9, 3,4
Гц, 1Н), 2,28 (м, 1Н), 2,03-1,83 (м, 2Н), 1,80 (с, 3H), 1,66 (м, 1Н), 1,31 (д, J=6,4 Гц, 3H).
Т184. Смесь соединения Т50 (140 мг, 0,319 ммоль), гидридо(диметилфосфиновая кислотаkP)[водородбис(диметилфосфинито-kP)]платины(Π) (13,1 мг, 0,031 ммоль), EtOH (3 мл) и воды (3 мл) нагревали с доступом воздуха с обратным холодильником в течение 4 ч. Катализатор удаляли фильтрованием через слой Celite®. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах) до соединения Т184 (86 мг, выход 59%) в виде белого твердого вещества. m/z=457,1 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,48 (с, 1Н), 8,65 (дд, J=5,2, 0,9 Гц, 1Н), 8,50 (д, J=4,5 Гц, 1Н), 8,25-8,20 (м, 2Н), 7,65-7,58 (м, 2Н) 7,24-7,17 (м, 2Н), 5,72 (д, J=4,6 Гц, 1Н), 3,07-2,88 (м, 2Н), 2,68 (с, 3H), 2,66 (м, 1Н), 2,24 (тд, J=12,7, 2,6 Гц, 1Н), 2,10 (м, 1Н), 1,78 (м, 1Н), 1,51 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,7 Гц, 3H).
Т185. Смесь соединения 131 (91 мг, 0,207 ммоль), гидридо(диметилфосфиновая кислотаkP)[водородбис(диметилфосфинито-kP)]платины(Π) (8,5 мг, 0,020 ммоль), EtOH (2 мл) и воды (2 мл) нагревали с доступом воздуха с обратным холодильником в течение 4 ч. Катализатор удаляли фильтрованием через слой целита. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, элюирование 0-100% EtOAc в гексанах), получая частично очищенный продукт, который растирали с EtOAc при нагревании с обратным холодильником в течение 5 мин, а затем охлаждали до комнатной температуры. Твердое вещество собирали фильтрацией и сушили in vacuo, получая соединение Т185 (20 мг, 21% выход) в виде белого твердого вещества. m/z=459,2 (M+1); 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,63 (дд, J=5,2, 0,8 Гц, 1Н), 8,17 (м, 1Н), 8,13 (ддд, J=5,2, 1,6, 0,7 Гц, 1Н), 7,68-7,61 (м, 2Н), 7,24-7,16 (м, 2Н), 5,36 (шир.с, 3H), 3,04 (д, J=14,8 Гц, 1Н), 2,98-2,78 (м, 2Н), 2,67 (с, 3H), 2,37 (дд, J=14,4, 2,5 Гц,, 1Н), 2,30 (м, 1Н), 2,06 (м, 1Н), 1,68 (ддд, J=11,7, 10,7, 2,2 Гц, 1Н), 1,49 (кд, J=12,5, 5,4 Гц, 1Н), 1,32 (d, J=6,8 Гц, 3H), 1,29 (с, 3H).
Пример 2. Методы и материалы биологической активности.
А. Анализ репортерного гена люциферазы AREc32
Анализ репортерного гена люциферазы AREc32 позволяет количественно оценить эндогенную активность транскрипционного фактора Nrf2 в культивируемых клетках млекопитающих. Клетки AREc32 получены из клеток карциномы молочной железы человека MCF-7, которые были стабильно трансфицированы репортерной конструкцией, содержащей ген люциферазы светлячка, расположенный в последовательности после восьми копий последовательности крысиного GSTA2-элемента антиоксидантного ответа (ARE) (Wang et al., 2006; CXR Biosciences). Активный NRF2 связывается с последовательностями ARE и повышает экспрессию гена люциферазы светлячка. Для оценки NRF2-активирующего потенциала тестируемых соединений клетки AREc32 высевали в черные 96-луночные планшеты с плотностью 20000 клеток на лунку в трех повторностях в DMEM+10% FBS+0,8 мг/мл генетицина и инкубировали при 37°C с 5% СО2 в увлажненной атмосфере. На следующий день клетки обрабатывали ДМСО (носитель) или тестируемым соединением (диапазоны концентраций 0,4-200 нМ или 2-1000 нМ) в течение 19 ч. Активность люциферазы определяли с использованием анализа люциферазы ONE-Glo (Promega). Сигнал люминесценции измеряли на считывающем устройстве для микропланшетов BMG Pherastar. Среднее значение люминесценции в лунках, обработанных тестируемым соединением, было нормировано к значениям в лунках, обработанных ДМСО, и представлено в виде кратности индукции. Данные были проанализированы с использованием ПО GraphPad Prism версии 6.00 для Windows, GraphPad Software, Ла-Холья, Калифорния, США. Для подгонки данных была использована нелинейная регрессионная кривая с отношением log (агонист) к ответу с использованием модели с переменным наклоном. Максимальное пороговое значение (в случаях, когда это было применимо) было установлено как 50-кратное по сравнению с ДМСО. Значения EC2x были интерполированы на основе кривой. ЕС2х соответствует концентрации тестируемого соединения, необходимой для двукратного увеличения активности GST ARE-люциферазного репортера.
В. Анализ RORy и жизнеспособность клеток.
Система анализа RORy была приобретена у Indigo Biosciences. В данном анализе ядерных рецепторов используется линия клеток человека, разработанная для экспрессии высоких уровней гибридной формы ассоциированного с RAR орфанного рецептора гамма (RORy) человека. N-концевой ДНКсвязывающий домен (DBD) нативного рецептора RORy был заменен дрожжевым GAL4-DBD для получения гибридного ядерного рецептора GAL4-RORy. Репортерную клеточную линию трансфицируют плазмидой, которая кодирует ген люциферазы жука, под контролем расположенной перед сайтом транскрипции активирующей последовательности GAL4 (UAS). GAL4 связывается с UAS и увеличивает транскрипцию расположенных далее генов-мишеней. Гибрид GAL4-RORy является конститутивно активным; следовательно, основное применение этой системы анализа репортера заключается в скрининге тестируемых соединений для количественной оценки обратных агонистических активностей в отношении RORy человека. Для оценки обратной агонистической активности тестируемых соединений в отно
- 202 043609 шении RORy репортерные клетки высевали в белые 96-луночные планшеты в трех повторностях и обрабатывали ДМСО (носитель) или тестируемым соединением (диапазоны концентраций 0,4-200 нМ или 21000 нМ) при 37°C с 5% СО2 в увлажненной атмосфере в течение 23 ч. После данной этой инкубации в лунки добавляли люциферин и определяли активность люциферазы путем измерения сигнала люминесценции с использованием устройства для считывания микропланшетов BMG Pherastar. Жизнеспособность определяли с использованием мультиплексного анализа живых клеток (Indigo Biosciences). Значения из образцов тестируемого соединения были нормированы к значениям из образцов, обработанных ДМСО. Данные были проанализированы с использованием ПО GraphPad Prism версии 6.00 для Windows, GraphPad Software, Ла Холья, Калифорния, США. Нелинейный регрессионный анализ с отношением log (ингибитор) к нормированному ответу с использованием модели с переменным наклоном применяли для подгонки данных и определения значений IC50 ингибирования RORy и жизнеспособности клеток.
С. Высвобождение IL-17 из дифференцированных первичных Т-клеток человека и жизнеспособность клеток.
Первичные криоконсервированные CD4+Т-клетки человека (Lonza, донор № 0000402103) высевали в среду для роста лимфоцитов-3 (LGM-3, Lonza) в соответствии с рекомендациями производителя и оставляли для восстановления приблизительно на 3 ч при 37°C с 5% СО2 в увлажненной атмосфере. После стадии восстановления клетки собирали центрифугированием и повторно высевали в 96-луночные планшеты с плотностью ~ 140 000 клеток на лунку в среде LGM-3, которая содержала ДМСО (носитель) или тестируемое соединение (диапазоны концентрации 2-500 нМ или 4-1000 нМ). Для каждого условия засевали три лунки. В качестве носителя использовали ДМСО (конечная концентрация <0,1%). Сразу после посева CD4+Т-клетки активировали путем добавления активатора Dynabeads Human TActivator CD3/CD28 (Life Technologies; соотношение сфер к клеткам 1:2,5) и дифференцировали в клетки Th17 путем добавления смеси следующих цитокинов: трансформирующий фактор роста-β (TGFe, 5 нг/мл), IL6 (20 нг/мл), IL-23 (20 нг/мл) и IL-1e (10 нг/мл).
Недифференцированные контрольные клетки получали только цитокин IL-2 (50 нг/мл). Все человеческие рекомбинантные цитокины были приобретены у компании R&D Systems. После 46-часовой инкубации при 37°C с 5% СО2 в увлажненной атмосфере планшеты центрифугировали в течение 3 мин при 250xg, и половину супернатанта переносили на новый планшет для использования в анализе IL-17A (см. ниже). Жизнеспособность клеток оценивали в исходном планшете с использованием прямого анализа CyQuant (Life Technologies). Значения CyQuant из образцов тестируемого соединения были нормированы к значениям из образцов, обработанных ДМСО. Концентрацию IL-17A в супернатанте измеряли с использованием анализа гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF) (Cisbio Bioassays) в соответствии с протоколом производителя. Анализ проводили при комнатной температуре в 384луночных твердых планшетах белого цвета малого объема (Greiner Bio-One). Образцы и стандарты (серийно разведенный человеческий рекомбинантный IL-17A (диапазон концентрации 0-5000 пг/мл; биотесты Cisbio) инкубировали с конъюгатом антитела к IL17A человека в течение 16 ч и флуоресценцию измеряли с использованием устройства для считывания микропланшетов Pherastar FS (BMG Labtech) в режиме HTRF (возбуждение при 337 нм и излучение при 665 нм и 620 нм). Концентрации IL-17A были оценены в двух повторных аликвотах супернатанта из каждой лунки, что дало в общей сложности шесть показаний на условие теста. Было рассчитано отношение сигналов 665 нм/620 нм и концентрация IL-17A в каждом образце была определена путем интерполяции относительно стандартной кривой. Значения IL17A из образцов тестируемого соединения были нормированы к значениям из образцов, обработанных ДМСО. Данные были проанализированы с использованием ПО GraphPad Prism версии 6.00 для Windows, GraphPad Software, Ла Холья, Калифорния, США. Нелинейный регрессионный анализ с отношением log (ингибитор) к нормированному ответу с использованием модели с переменным наклоном применяли для подгонки данных и определения значений IC50 ингибирования IL-17A и жизнеспособности клеток.
- 203 043609
Активность соединения в анализах ингибирования hIL17, ингибирования RORy и акти вации NRF2
Номер соединения Соединение RORy ic50 (нМ) hIL17 1С50 (нМ) NRF2 ARE 2х (нМ)
Т1 ОМе _ N^N NC- Jk ОМе i н 603 н/д 487
Т2 ζ о о 1-4---¢.,, ч>ч о о ф ф 120 н/д 247
ТЗ £ 1 о о пЛ--4-Т о о Ζ 124 Н/д 232
Т4 Ζ о о т-4—ώ.,ι Ч+Р о о 1 <? 142 н/д 449
Т5 Z о о X о ф 178 Н/д 365
- 204 043609
Т6 Z о о чт-q О -п § а> 152 н/д 341
Т7 <υ О ζ=/ СИХ η Л--4-ΞΕ УХ О О Ζ 176 н/д 388
Т8 Cl С^Чн _ N^N №^Ч<ХХ., Ίτ ОМе i н 299 185 534
T9 ζ о о *л5 Т-Ч--ό',ι Ск y^z >=z лЛ s {J α> 114 67 510
Т1О o=( о z^. z=/ T \ / \ у—e-T УХ о о ζ н/д н/д н/д
- 205 043609
О и HN H
Til N^N >2000 н/д 2438
NC^ ξ Ϊ if Me
T H
nh2
T12 NCV N^N ξ ΐ if X^y^OMe н/д н/д н/д
I H
0
T13 NCY N^N 748 476 >2000
HO^ c
T14 N^N 71 84 281
NC^
X JTO
0
T15 NCj> γ 4Q 117 н/д 738
O<i 1 н
- 206 043609
T16 О О. У-z А_/ т _Лл м Т«4--(1 А®· 305 223 1000
T17 о А IIЛ--(-Т >А о о Z >2000 н/д 839
T18 Z о о —(S !)--(И о —1 σ> 100 н/д 381
T19 О А II)---(-Т ЛА о о Ζ 143 н/д 741
T20 Ζ о о Т-Н--(I \ /=\ \=Z J ω О 425 н/д 608
- 207 043609
T21 9 N^N 233 н/д 443
T22 z 0 о ---------(1111 м3 / z о 608 н/д 90
T23 9 _ N^N T T T Ύ J с/уТ4-/ i H 255 40 144
T24 co LL О Г/ X И у--( Т о О Z 399 н/д 171
T25 9 :<9о 278 н/д 449
T26 Z о о —<5 тД--(II о со 220 н/д 267
- 208 043609
T27 9 N^N эДо,. 145 н/д 181
T28 z о о —XX I·)--(уч яя (у о 190 н/д 141
T29 θ и·)--4-Т Уч о о Z 337 н/д 484
ТЗО CD О лХ Я 11)---4-Т >4 О О Z 165 н/д 136
Т31 Z о о —(X Т·)---К II >ч Ω Ω 228 н/д 186
- 209 043609
T32 О И Л—4-Т VT о о Z 54 68 272
ТЗЗ .N^OMe 7 _ N^N Т Т Т Ύ J сАД4/ i н 126 40 480
Т34 νη2 _ Ν^Ν τττ ι j i H 482 н/д 469
Т35 z о о тД--/II 4> i 287 н/д 575
Т36 XX €hA ιπΛ—4-τ о о Ζ 161 125 484
Т37 СО _ Ν^Ν NC^r?^oOO^^Cx Y Т Т X J i н 52 32 351
- 210 043609
T38 z о о -¾ W W 504 374 >2000
T39 со N^N ОО 87 63 427
T40 Z о о тД--6'И /Ч /Ц w W -п 67 63 273
T41 \ с Уч о о Z 69 64 528
T42 Z о о —УХ YfYO /z /Л \ W 88 165 513
- 211 043609
T43 z о о Т-4-¥ чх /=< о / \ I W ω 40 39 278
T44 9 _ Ν^Ν Т Т Т Ύ J οχ/ίχ хх 1 н 85 60 596
T45 сГ н2 9 _ Ν^Ν Т Т Т Ύ J ο^γίχχ χχ 1 н 723 1057 >2000
T4 6 Ζ о о т-4—4п \ /ГЛ /—\ Р yJ x z^ О 116 177 735
T47 Z о о —(X т-4—Сч \=z Xz /\ W γ 238 38 622
- 212 043609
T48 ^ + CI GNH2 N^N 171 225 460
T4 9 p z^ z=7 Шрл и 'ώ—4-T >4 о о z 121 181 491
T50 z о о / \ I w ω 49 40 256
T51 N CH3 N^N F , 50 47 364
T52 LL О /=/ II Λ--- >4 о о Z 50 35 272
- 213 043609
σ A
T53 NC^, = X ХД 69 33 380
СГ T H —F'
Q XF3
T54 N^N 89 31 483
NC/ ДуА
СГ T H F'
a
T55 NC n^n Y ϊ% 1117 590 >2000
HcA ri F' -V
Λ
T56 NC n^n У ύ 51 46 193
<A ri
τ
T57 N^N 113 77 419
NCXC ЛуА ΤΛ
cr ϊ η F'
- 214 043609
T58 z О о Йо 91 69 155
T59 z о о т«4--Ли нкь О 155 34 311
T60 2 N^N Y Υ Y Y J iн 195 н/д 380
T61 н Q 8 N^N F N:<O 112 60 461
T62 со N _ N^N TTY Y J ° jhl F 130 39 401
- 215 043609
T63 T64 Q 0 Q trtZK /—\ 7—V т ОО ОО Z Z 42 114 21 35 259 425
T65 .nJu 1\Г N F ζ/ςϊΫύ II 129 29 463
T66 _ F T T T Ύ J i H rD 64 39 190
T67 N^N F :j^t0 108 63 208
- 216 043609
T68 z О о % АЛ W 121 31 253
T69 z о о 1 /—\ / Ул z ?\ vJ* W 49 20 227
T70 z о о Qw -n \=z ω^\ w 153 61 391
T71 z о о ~O I «4--(i \=ZZ V^Z Ή 229 198 780
T72 ΛΑ О лл /Ζ=\ Хц~ II)--ό-Τ О О Ζ 135 н/д 374
- 217 043609
T73 A N^N F χίΤό 141 69 407
T74 О лл A |иу--4-T о о z 57 49 507
T75 _ N^N F Τ Τ Τ Ύ j i H 82 42 552
T76 OD N^N F /fA 82 35 315
T77 F Ax/N\ QJ _ N^N T T T 1 j °ПГА 82 31 264
- 218 043609
T78 iV _ N^N nc^^^AxJT^x T T T Ύ J I h 184 89 629
T79 N'% У N^N %tXo 77 143 109
T80 z о о T4--6l kX w 82 58 312
T81 z О о Х»Д--6'И о 247 н/д 705
T82 (Хон _ Ν^Ν Т Υ Т Ύ J i Η 169 н/д 480
- 219 043609
T83 У N^N F χΧό 72 35 484
T84 лл W пЛ—4-1 Уч о о Z 73 36 321
T85 Ж ЛА ЛА W жХ о о Z 88 38 307
T86 /л Q X in.)—4-т уу о о Ζ 112 33 276
T87 Ν-Ο АЛ _ Ν^Ν Т Т Т Ύ J i н 88 109 245
- 220 043609
T88 NC_ СГ ά N^N F i H 99 Н/Д 177
T89 лЧ (X \=/ z- 87 62 274
T90 NC_ СГ F /N. i J1 y^^^F N^N 90 37 301
T91 NC\^ γΤ4/ F^^T i H 6 N N^N 323 265 552
T92 NCX or . 7W„. γθ, Cf 164 97 491
NC^ СГ 1
- 221 043609
T93 ζ О о —(X Т-4--С hi чю <1 νΧ 67 101 283
T94 О ο+ϋ ιιιΛ—4-т W о О Z 52 58 321
T95 Z о О 7 ha * 5 ; 61 68 430
T96 Z о 0 ъ° 135 58 492
T97 СО _ N^N г-Д 7г ° i Н 80 35 330
- 222 043609
T98 z о о т-4—C'n ж °''о T >2000 >1000 >2000
T99 о д=НК и)--¢-1 Уч о о Z 194 189 508
T1OO Z о о т-4—¢..11 ч>я хк + о 212 178 865
T1O1 00 N^N 117 200 295
T102 Z о о _м т-4—¢..11 о 59 153 287
- 223 043609
- 224 043609
T108 z о о 1 /—\ / /\ w w 97 21 225
T109 z о о 1 /—\ / Г\ w w 80 18 251
T11O о X / II, A--4-T lb ο Ό z 82 37 317
Till OX YY ' nl—4-T о о z 60 19 317
T112 о X η Λ—4·π= УЧ* ο ο ζ 87 85 559
- 225 043609
T113 ΛΑ \=/ лЧ о о ζ 91 48 734
T114 ίΝΑ Ν^Ν φΑ, 89 46 484
T115 ζ ο ο 1 /—ν У W 58 14 260
T116 ο “Ά _ Ν^Ν Τ Τ Τ Ύ J i Η 97 65 303
T117 ζ Ο Ο ξ /4 \ / ° 1 /—\ ) <>^η )\ ο W 73 58 232
- 226 043609
T118 ζ О о Is 71 28 395
T119 ш _ N^N T t t j j ο4χφχ4 /\н 70 37 351
T120 o4 CC ( nA—4-т ш >4 о о Ζ 51 29 334
T121 Ζ о о —<Х Т-Ч--С! Ч^· Ъ а 73 36 390
T122 'ЧЧ _ Ν^Ν Т Т Т 1J /\н 60 31 402
- 227 043609
- 228 043609
T128 и—ЛХ W У о хо Z 238 н/д 1385
T129 /N. CQ Кг N Т Т Т 1J 1 н 394 н/д 697
T130 Z О О 3—0>О Т »7----ν1111 м АУ О 183 н/д 692
T131 Ζ о о 3—£>о Т»)--(ин ЯЯ УХ w W н/д н/д н/д
T132 СО л N^N νο^κξΛΙΙ^ Τ Τ Τ Ύ J i н 113 74 437
- 229 043609
T133 z О о /— тД--/ii Су „y\=z+y^ w 162 н/д 1199
T134 о о 2 cd 881 н/д 3137
T135 О о CD 2048 н/д >2000
T136 _ N^N Y Y Y Y J \ 'H OH 132 25 518
T137 <1 О 04 /—VT\ Уч^ о о z 114 9 274
- 230 043609
T138 О О ш)--4-Т О О Z 108 167 641
T139 о О /--к Z=\ 1 ώ—4-Т О О Z 162 104 222
T140 Z о о Т4--4II \ /гЛ /=Л W 179 26 451
T141 о т N^N 236 22 557
- 231 043609
CH3
o=s=o
X
T142 1 N^N 143 77 217
NC. PVn
СГ
s Ж сГ° I co
T143 Λ 210 94 538
NCX
Οχ .CH3 (K 0
T144 N^N 117 72 299
XVn
rP A
(%
T145 NC. -( V / z J 44 15 337
Cr LH II
- 232 043609
T146 С _ N^N X 1J IJ i н CH3 49 10 447
T147 z о о L—('О Mz % w 287 54 >2000
T148 z о о ССо НШ /\ W W 259 77 1758
T149 СО _ N^N NC^mOOm, Т Т Т Ύ J /\н 45 14 330
T150 Z О о мХО мумц О 0 О I >2000 н/д >2000
- 233 043609
T151 О ίΓ° _ N^N т т т Ύ j °г 100 54 1111
T152 т О £ Z-O °ч ла Ым и Л—4·τ >4 о о Ζ 81 46 323
T153 Оч (Х° _ Ν^Ν Т Т Т X J i н 102 52 282
T154 о τ о Μ ΛΑ ω\ \ / / so \=/ Ым hid—4-τ >4 о о Ζ 119 65 469
T155 ,Ν_____ ¢0 снз X С N^N н 100 71 267
- 234 043609
T156 CO СН3 Т С N^N ЖСо н 112 54 333
T157 Z О о ι·4—Он Эя W W 83 23 304
T158 ЛА О W СН<Л «Д—4-т о о Ζ 36 16 315
T159 СО _ Ν^Ν nc\<x¥A0Ax/ Т Т Т Т J 1 н сн3 32 22 337
T160 СО N^N СН3 X 95 22 418
- 235 043609
T161 CO τ О У- О ЛА V/ Ά и Л—4-т О О Z 134 н/д 158
T162 о Хл ла сии пД—4-т Уч о о Z 129 50 601
T163 Z о о —ЧЧ тД--А>1 /\ W W АЛ 179 н/д 312
T164 оэ Ν^Ν F χΛό Η 201 352 1059
T165 F :w\b Η 274 65 863
- 236 043609
T166 О АНО) о о Ζ 141 31 878
T167 0 X N^N F жА н 251 106 493
T168 хНАл Υπ\_ о о Ζ 156 32 1239
T169 А X N^N F :ιφχ 118 35 540
T170 съ _ №\^ ° ποθ 245 147 1222
- 237 043609
T171 ГУл \=/ F _ N=\ 4^0 263 120 1474
T172 _ N=\ ΝγΧ“ f °u 189 Н/Д 998
T173 ΛΑ—ν °nO 717 Н/Д >2000
T174 %% _ N=\ ° pQ 190 Н/Д >2000
T175 z о O .....УЧ I)--6' СУ yV=\ /=( w 484 329 >2000
T176 z о о _уч II)--6l /=v^ W XX 834 455 >2000
- 238 043609
T177 z о о I·)--(I 00 (А 0 z I 151 Н/Д 491
T178 z о о —(A I·)--(in 00 CA <ZI °4 113 130 444
T179 U-H^A <0 о о z 115 27 649
T180 .N. n N^N F 000 61 21 494
T181 0 _ N^N F NC^^^AAAAx, TTY Y J \ -H 158 Н/Д 518
- 239 043609
Т182 Z О о —О О / ω О 37 44 892
Т183 о пАлк о о Ζ 94 70 1868
Т184 ,N CH3 О N^N Чфтх 293 Н/Д 1832
Т185 N СН3 X О N^N χΤα, >2000 Н/Д >2000
Т186 CD N^N F τΧό 382 195 >2000
Т187 ,N CH3 N^N T T T ΪΊ F 277 Н/Д >2000
Все соединения, композиции и способы, раскрытые и заявленные в настоящем документе, могут быть изготовлены и выполнены без чрезмерных экспериментов в свете настоящего раскрытия. Хотя раскрытие может быть сосредоточено на нескольких вариантах осуществления или может быть описано в терминах предпочтительных вариантов осуществления, специалистам в данной области техники должно быть очевидно, что варианты и модификации могут применяться к соединениям, композициям и способам без отступления от сущности, объема и концепции изобретения. Предполагается, что все варианты и модификации, очевидные для специалистов в данной области техники, находятся в пределах сущности, объема и концепции изобретения, как определено в прилагаемой формуле изобретения.
- 240 043609
Ссылки
Следующие ссылки в той степени, в которой они предоставляют примерные процедурные или иные подробности, дополняющие изложенные в настоящем документе, специально включены в настоящий документ посредством ссылки.
Anderson, Practical Process Research & Development - Ά
Guide for Organic Chemists, 2nd ed., Academic Press, New York, 2012 .
Bolli, et al., Bioorg. & Med. Chem. Lett., 13:955-959, 2003.
Bradshaw, et al., Advanced Synthesis and Catalysts, 351:2482-2490, 2009.
Bronner, et al., Expert Opin. Ther. Pat., 2016, Published Online Ahead of Print
Fujiwara, et al., J. Immunol., 193(5):2565-73, 2014.
Gaffen, et al., Nature Reviews Immunology, 14(9):585-600, 2014 .
Garigipati, Tetrahedron Letters, 31(14):1969-1972, 1990.
Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use, Stahl and Wermuth Eds., Verlag Helvetica Chimica Acta, 2002.
Lu et al., J. Clin. Invest., 121(10):4015-29, 2011.
Miosse and Rolls, Nature Reviews, 11(10):763-776, 2012.
Reagan-Shaw et al., FASEB J., 22(3):659-661, 2008.
Smith, March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 7th Ed., Wiley, 2013.
Waite and Skokos, International Journal of Inflammation, 2012:1-10, 2011.
Yang, et al., Trends in Pharmacological Sciences, 35 (10) :493-500, 2014.
Zhang, et al., Acta Pharmacologica Sinica, 36:71-87, 2015.

Claims (50)

1. Соединение формулы
где связь между атомами углерода 1 и 2 представляет собой одинарную связь, эпоксидированную двойную связь или двойную связь;
связь между атомами углерода 4 и 5 представляет собой одинарную связь или двойную связь;
а равно 0, 1 или 2;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино, алкиламино^), диалкиламинO(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород или алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкандииЛ(C<8)-циклоалкиЛ(C<12) или замещенный вариант этой группы;
R2' отсутствует или представляет собой водород, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант этих групп;
при условии, что, когда связь между атомами углерода 4 и 5 представляет собой двойную связь, R2' отсутствует;
R3 представляет собой алкиЛ(C<12), ариЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп;
R4 представляет собой амино, циклоалкиЛ(C<18), замещенный циклоалкиЛ(C<18), ариЛ(C<18), замещенный ариЛ(C<18), гетероариЛ(C<18), замещенный гетероариЛ(C<18), гетероциклоалкиЛ(C<18), замещенный гетероциклоалкиЛ(C<18), амидO(C<18), замещенный амидO(C<18) или
- 241 043609
где n равно 0, 1 или 2; и
R4 представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-Х2- (CH2)p-R4';
где Х2 представляет собой арендиил(С<12), замещенный арендиил(С<12), гетероциклоалкандиил(С<12), замещенный гетероциклоалкандиил(С<12), гетероарендииЛ(C<12) или замещенный гетероарендииЛ(C<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4''' представляет собой алкил(С<8), циклоалкил(С<8), арил(С<8), гетероарил(С<8), гетероциклоалкил(С<8), ацил(с<8), амидо(с<8), алкокси(С<8), ацилокси(С<8), -С(О)-алкокси(С<8), -С(О)-алкиламино(С<8), -С(О)диалкиламино(с<8), алкилсульфонил(С<8), арилсульфонил(с<8), алкоксисульфонил(С<8) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(O)2C6H4CH3, изопропокси или алкил(С<12), циклоалкил(с<12), циклоалкокси(с<12), арил(С<12), аралкил(С<12), гетероарил(С<12), гетероциклоалкил(С<12), ацил(С<12), ацилокси(с<12), алкиламино(с<12), диалкиламино(С<12), алкилсульфониламино(С<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-OYi-Ai;
где Y 1 представляет собой алкандиил(С<8) или замещенный алкандиил(С<8);
A1 представляет собой циклоалкил(С<8) или замещенный циклоалкил(С<8); или
-Y2-C (О) NRc-A2;
где Y2 представляет собой арендиил(С<8) или замещенный арендиил(С<8);
Rc представляет собой водород, алкил(С<6) или замещенный алкил(С<6);
А2 представляет собой аралкил(С<12) или замещенный аралкил(С<12);
при условии, что, когда атомы углерода 4 и 5 соединены двойной связью, R2' и атом водорода у атома углерода 5 отсутствуют;
где термин замещенный при использовании для модификации любой группы означает, что один или более атомов водорода на этой группе были независимо заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -СО2Н, -С(О)Н, -СО2СН3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(О)СНз, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -ОС(О)СНз, -NHC(O)CH3, -S(O)2CH3, -S(O)2OH или -S(O)2NH2;
где термин арил относится к одновалентной ароматической группе с ароматическим атомом углерода в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода образует часть одной или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет шесть кольцевых атомов, все из которых представляют собой углерод, и при этом группа не состоит из атомов, кроме углерода и водорода;
термин арендиил относится к двухвалентной ароматической группе с двумя ароматическими атомами углерода в качестве точек присоединения, при этом указанные атомы углерода образуют часть одной или нескольких шестичленных ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет шесть кольцевых атомов, все из которых представляют собой углерод, и где двухвалентная группа не состоит из атомов, кроме углерода и водорода;
термин гетероарил относится к одновалентной ароматической группе с ароматическим атомом углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота образует часть одной или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая кольцевая структура имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по меньшей мере один из кольцевых атомов ароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и где гетероарильная группа не состоит ни из каких атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы;
термин гетероарендиил относится к двухвалентной ароматической группе с двумя ароматическими атомами углерода, двумя ароматическими атомами азота или одним ароматическим атомом углерода и одним ароматическим атомом азота в качестве двух точек присоединения, причем указанные атомы образуют часть одного или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по крайней мере один из кольцевых атомов ароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и двухвалентная группа не содержит атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы;
термин гетероаралкил относится к одновалентной группе -алкандиил-гетероарил, в которой каждый из терминов алкандиил и гетероарил используется в соответствии с определениями, приведенными выше;
термин гетероциклоалкил относится к одновалентной неароматической группе с атомом углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота об- 242 043609 разует часть одной или нескольких неароматических кольцевых структур, причем каждая кольцевая структура имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и где гетероциклоалкильная группа не содержит атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы; и термин гетероциклоалкандиил относится к двухвалентной циклической группе с двумя атомами углерода, двумя атомами азота или одним атомом углерода и одним атомом азота в качестве двух точек присоединения, причем указанные атомы образуют часть одной или нескольких кольцевых структур, где по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и где двухвалентная группа не содержит атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы;
или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1, далее определенное как
где связь между атомами углерода 1 и 2 представляет собой одинарную связь, эпоксидированную двойную связь или двойную связь;
связь между атомами углерода 4 и 5 представляет собой одинарную связь или двойную связь;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино, алкиламинO(C<8), диалкиламинO(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород или алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкандииЛ(C<8)-циклоалкиЛ(C<12) или замещенный вариант этой группы;
R2' отсутствует или представляет собой водород, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант последних четырех групп;
при условии, что, когда связь между атомами углерода 4 и 5 представляет собой двойную связь, R2' отсутствует;
R3 представляет собой алкиЛ(C<12), ариЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп;
R4 представляет собой амино, циклоалкиЛ(C<18), замещенный циклоалкиЛ(C<18), ариЛ(C<18), гетероаРиЛ(С<18), замещенный гетероариЛ(C<18), гетероциклоалкиЛ(C<18), замещенный гетероциклоалкиЛ(C<18), амиДО(С<18), замещенный амидO(C<18) или
где n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-х2- (СН2) P-R4 r;
где Х2 представляет собой арендииЛ(C<12), замещенный арендииЛ(C<12), гетероциклоалкандииЛ(C<12), замещенный гетероциклоалкандиил(C<12), гетероарендиил(C<12) или замещенный гетероарендиил(C<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4' представляет собой алкиЛ(C<8), циклоалкиЛ(C<8), ариЛ(C<8), гетероариЛ(C<8), гетероциклоалкиЛ(C<8), ациЛ(C<8), амидO(C<8), алкоксИ(C<8), ацилоксИ(C<8), -С(О)-алкоксИ(C<8), -С(О)-алкиламинO(C<8), -С(О)диалкиламинO(C<8), алкилсульфониЛ(C<8), арилсульфониЛ(C<8), алкоксисульфониЛ(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(O)2C6H4CH3, изопропокси, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), циклоалкоксИ(C<12), ариЛ(C<12), аралкиЛ(C<12), гетероариЛ(C<12), гетероциклоалкиЛ(C<12), ациЛ(C<12), ацилоксИ(С<12), алкиламинO(C<12), диалкиламинO(C<12), алкилсульфониламинO(C<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-ΟΥι-Αι; где Y1 представляет собой алкандииЛ(C<8) или замещенный алкандииЛ(C<8);
A1 представляет собой циклоалкил^) или замещенный циклоалкиЛ(C<8); или
-Y2-C (О) NRC-A2;
где Y2 представляет собой арендииЛ(C<8) или замещенный арендииЛ(C<8);
- 243 043609
Rc представляет собой водород, алкиЛ(С<6) или замещенный алкиЛ(С<6);
А2 представляет собой аралкиЛ(С<12) или замещенный аралкиЛ(С<12);
при условии, что, когда атомы углерода 4 и 5 соединены двойной связью, R2' и атом водорода у атома углерода 5 отсутствуют;
или его фармацевтически приемлемая соль.
3. Соединение по п.1 или 2, далее определенное как
где связь между атомами углерода 1 и 2 представляет собой одинарную связь, эпоксидированную двойную связь или двойную связь;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино, алкиламино(С<8), диалкиламинO(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород или алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(С<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкαндииЛ(C<8)-циклоалкиЛ(C<12) или замещенный вариант этой группы;
R2' представляет собой водород, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант последних трёх групп;
R3 представляет собой алкиЛ(C<12), ариЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп;
R4 представляет собой амино, циклоалкиЛ(C<18), замещенный циклоалкиЛ(C<18), αриЛ(C<18), замещенный aриЛ(C<18), гетероариЛ(C<18), замещенный гетероариЛ(С<18), гетероциклоалкиЛ(С<18), замещенный гетероциклоαлкиЛ(C<18), амидO(C<18), замещенный амидO(C<18) или
где n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-X2-(CH2)p-R4%· где Х2 представляет собой арендииЛ(C<12), замещенный арендииЛ(C<12), гетероциклоалкандииЛ(С<12), замещенный гетероциклоалкандиил(C<12), гетероαрендиил(C<12) или замещенный гетероарендиил(C<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4''' представляет собой алкиЛ(C<8), циклоαлкиЛ(C<8), ариЛ(С<8), гетероариЛ(C<8), гетероциклоалкиЛ(C<8), ациЛ(C<8), амидO(C<8), алкоксИ(С<8), ацилоксИ(С<8), -С(О)-алкоксИ(С<8), -С(О)-алкиламинO(C<8), -С(О)диалкиламинO(C<8), алкилсульфонил(с<8), арилсульфониЛ(C<8), алкоксисульфониЛ(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(O)2C6H4CH3, изопропокси, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(С<12), циклоαлкоксИ(C<12), ариЛ(C<12), аралкиЛ(C<12), гетероαриЛ(C<12), гетероциклоалкиЛ(C<12), ациЛ(C<12), ацилоксИ(С<12), алкиламинO(C<12), диалкиламинO(C<12), алкилсульфониламинO(C<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-ΟΥχ-Αχ;
где Y1 представляет собой алкандииЛ(С<8) или замещенный алкандииЛ(С<8);
A1 представляет собой циклоалкиЛ(С<8) или замещенный циклоалкиЛ(С<8); или
-Y2-C (О) NRc-A2;
где Y2 представляет собой арендииЛ(С<8) или замещенный арендииЛ(С<8);
Rc представляет собой водород, алкиЛ(С<6) или замещенный алкиЛ(С<6);
А2 представляет собой аралкиЛ(С<12) или замещенный аралкиЛ(С<12); или его фармацевтически приемлемая соль.
4. Соединение по любому из пп.1-3, далее определенное как
- 244 043609
где связь между атомами углерода 1 и 2 представляет собой одинарную связь, эпоксидированную двойную связь или двойную связь;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино или алкиламинO(C<8), диалкиламинO(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород или алкuЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкандииЛ(C<8)-циклоалкиЛ(C<12) или замещенный вариант этой группы;
R3 представляет собой алкиЛ(С<12), арuЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп;
R4 представляет собой амино, циклоалкиЛ(С<18), замещенный цuклоалкuЛ(C<18), ариЛ(C<18), замещенный ариЛ(C<18), гетероариЛ(C<18), замещенный гетероарuЛ(C<18), гетероциклоалкиЛ(С<18), замещенный гетероциклоалкиЛ(C<18), амидO(C<18), замещенный амидо(С<18) или
ОДгде n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-X2-(CH2)p-R4';
где Х2 представляет собой арендииЛ(C<12), замещенный арендиuЛ(C<12), гетероциклоалкандииЛ(C<12), замещенный гетероциклоалкандиил(С<12), гетероарендииЛ(C<12) или замещенный гетероарендииЛ(C<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4”' представляет собой алкuЛ(C<8), циклоαлкиЛ(C<8), ариЛ(C<8), гетероариЛ(C<8), гетероциклоалкиЛ(C<8), αциЛ(C<8), амидO(C<8), алкоксU(C<8), αцилоксИ(C<8), -С(О)-алкокси(С<8), -С(О)-алкиламинO(C<8), -С(О)диалкиламинO(C<8), алкилсульфониЛ(С<8), арилсульфониЛ(C<8), αлкоксuсульфониЛ(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(O)2C6H4CH3, изопропокси, алкиЛ(С<12), циклоалкиЛ(С<12), циклоалкоксИ(C<12), ариЛ(C<12), аралкиЛ(C<12), гетероариЛ(C<12), гетероцuклоалкиЛ(C<12), ациЛ(C<12), ацилоксИ(С<12), αлкиламинO(C<12), диалкилαминO(C<12), алкилсульфониламинO(C<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-0Υι-αι; где Y 1 представляет собой алкандииЛ(С<8) или замещенный алкандииЛ(С<8);
A1 представляет собой циклоалкиЛ(С<8) или замещенный циклоалкиЛ(С<8); или ”-Y2-C (О) NRc-A2; ” где Y2 представляет собой арендииЛ(С<8) или замещенный арендииЛ(С<8);
Rc представляет собой водород, алкиЛ(С<6) или замещенный алкиЛ(С<6);
А2 представляет собой аралкил(С<12) или замещенный аралкил(С<12); или его фармацевтически приемлемая соль.
5. Соединение по п.4, далее определенное как
где связь между атомами углерода 1 и 2 представляет собой одинарную связь, эпоксидированную двойную связь или двойную связь;
- 245 043609
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино или алкиламино(С<8), диалкиламинО(С<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород или алкил(C<12), циклоалкил(C<12), алкенил(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкандиил(C<8)-циклоалкил(C<12) или замещенный вариант этой группы;
R4 представляет собой амино, циклоалкиЛ(C<18), замещенный циклоалкиЛ(C<18), ариЛ(C<18), замещенный арил(C<18), гетероариЛ(C<18), замещенный гетероариЛ(C<18), гетероциклоалкил(C<18), замещенный гетероциклоалкиЛ(C<18), амидO(C<18), замещенный амидO(C<18) или
где n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-X2-(CH2)p-R4' где Х2 представляет собой арендииЛ(C<12), замещенный арендииЛ(C<12), гетероциклоалкандииЛ(C<12), замещенный гетероциклоалкандиил(C<12), гетероарендиил(C<12) или замещенный гетероарендиил(C<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4' представляет собой алкиЛ(C<8), циклоалкиЛ(C<8), ариЛ(C<8), гетероариЛ(C<8), гетероциклоалкиЛ(C<8), ацил(C<8), амидO(C<8), алкокси(C<8), ацилокси(C<8), -С(О)-алкокси(C<8), -С(О)-алкиламинO(C<8), -С(О)диалкиламинO(C<8), алкилсульфониЛ(C<8), арилсульфонил(C<8), алкоксисульфониЛ(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(O)2C6H4CH3, изопропокси, алкил(C<12), циклоалкил(C<12), циклоалкокси(C<12), арил(С<12), аралкил(С<12), гетероарил(С<12), гетероциклоалкил(С<12), ацил(С<12), ацилокси(С<12), алкиламино(С<12), диалкиламино(С<12), алкилсульфониламино(С<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-OYi-Ai;
где Y 1 представляет собой алкандиил(С<8) или замещенный алкандиил(С<8);
A1 представляет собой циклоалкил(С<8) или замещенный циклоалкил(С<8); или
-Y2-C (О) NRc-A2;
где Y2 представляет собой арендиил(С<8) или замещенный арендиил(С<8);
Rc представляет собой водород, алкил(С<6) или замещенный алкил(С<6);
А2 представляет собой аралкил(С<12) или замещенный аралкил(С<12); или его фармацевтически приемлемая соль.
6. Соединение по п.5, далее определенное как
где R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино или алкиламино(С<8), диалкиламино(С<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород или алкил(С<12), циклоалкил(С<12), алкенил(С<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкандиил(С<8)-циклоалкил(С<12) или замещенный вариант этой группы;
R4 представляет собой амино, циклоалкил(С<18), замещенный циклоалкил(С<18), арил(С<18), замещенный арил(С<18), гетероарил(С<18), замещенный гетероарил(С<18), гетероциклоалкил(С<18), замещенный гетероциклоалкил(С<18), амидо(С<18), замещенный амидо(С<18) или nR4
где n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-Х2- (CH2)p-R4';
где Х2 представляет собой арендиил(С<12), замещенный арендиил(С<12), гетероциклоалкандиил(С<12), замещенный гетероциклоалкандиил(С<12), гетероарендиил(С<12) или замещенный гетероарендиил(С<12);
- 246 043609 р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4''' представляет собой алкил(С<8), циклоалкил(С<8), арил(С<8), гетероарил(С<8), гетероциклоалкил(С<8), ацил(С<8), амидO(C<8), алкокси(С<8), ацилокси(С<8), -С(О)-алкокси(С<8), -С(О)-алкиламино(С<8), -С(О)диалкиламинO(C<8), алкилсульфониЛ(C<8), арилсульфониЛ(C<8), алкоксисульфониЛ(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(O)2C6H4CH3, изопропокси, алкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), циклоалкоксИ(C<12), арил(С<12), аралкил(С<12), гетероарил(С<12), гетероциклоалкил(С<12), ацил(С<12), ацилокси(С<12), алкиламино(С<12), диалкиламино(С<12), алкилсульфониламино(С<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-OYi-Ai;
где Y 1 представляет собой алкандиил(С<8) или замещенный алкандиил(С<8);
A1 представляет собой циклоалкил(С<8) или замещенный циклоалкил(С<8); или
-Y2-C (0)NRc-A2;
где Y2 представляет собой арендиил(С<8) или замещенный арендиил(С<8);
Rc представляет собой водород, алкил(С<6) или замещенный алкил(С<6); или его фармацевтически приемлемая соль.
7. Соединение по п.6, далее определенное как
где R2 представляет собой водород или алкил(С<12), циклоалкил(С<12), алкенил(С<12) или замещенный вариант любой из этих групп, или -алкандиил(С<8)-циклоалкил(С<12) или замещенный вариант этой группы;
R4 представляет собой амино, циклоалкил(С<18), замещенный циклоалкил(С<18), арил(С<18), замещенный арил(С<18), гетероарил(С<18), замещенный гетероарил(С<18), гетероциклоалкил(С<18), замещенный гетероциклоалкил(С<18), амидо(С<18), замещенный амидо(С<18) или где n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-Х2- (CH2)p-R4 r;
где Х2 представляет собой арендиил(С<12), замещенный арендиил(С<12), гетероциклоалкандиил(С<12), замещенный гетероциклоалкандиил(С<12), гетероарендиил(С<12) или замещенный гетероарендиил(С<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4''' представляет собой алкил(С<8), циклоалкил(С<8), арил(С<8), гетероарил(С<8), гетероциклоалкил(С<8), ацил(С<8), амидо(С<8), алкокси(С<8), ацилокси(С<8), -С(О)-алкокси(С<8), -С(О)-алкиламино(С<8), -С(О)диалкиламино (С<8), алкилсульфонил(С<8), арилсульфонил(С<8), алкоксисульфонил(С<8) или замещенный вариант любой из этих групп; и
R5 представляет собой амино, гидрокси, -OS(O)2C6H4CH3, изопропокси, алкил(С<12), циклоалкил(С<12), циклоалкокси(С<12), арил(С<12), аралкил(С<12), гетероарил(С<12), гетероциклоалкил(С<12), ацил(С<12), ацилокси(С<12), алкиламино(С<12), диалкиламино(С<12), алкилсульфониламино(С<12) или замещенный вариант любой из последних двенадцати групп, или
-OYi-Ai;
где Y1 представляет собой алкандиил(С<8) или замещенный алкандиил(С<8);
A1 представляет собой циклоалкил(С<8) или замещенный циклоалкил(С<8); или
-y2-c (o)nrc-a2;
где Y2 представляет собой арендиил(С<8) или замещенный арендиил(С<8);
Rc представляет собой водород, алкил(С<6) или замещенный алкил(С<6);
А2 представляет собой аралкил(С<12) или замещенный аралкил(С<12);
или его фармацевтически приемлемая соль.
- 247 043609
8. Соединение по п.7, далее определенное как
где R2 представляет собой водород, алкиЛ(C<12) или замещенный алкиЛ(C<12);
R4 представляет собой гетероарил(C<18) или замещенный гетероариЛ(C<18);
R5 представляет собой ариЛ(C<12) или замещенный ариЛ(C<12); или его фармацевтически приемлемая соль.
9. Соединение по п.7, далее определенное как
где R2 представляет собой алкиЛ(C<12) или замещенный алкиЛ(C<12);
HetAr представляет собой гетероариЛ(C<18) или замещенный гетероарил^^; а также Ar представляет собой ариЛ(C<12) или замещенный ариЛ(C<12);
или его фармацевтически приемлемая соль.
10. Соединение по п.8, далее определенное как
где R4 представляет собой гетероариЛ(С<18) или замещенный гетероариЛ(С<18);
R5 представляет собой ариЛ(C<12) или замещенный ариЛ(C<12);
или его фармацевтически приемлемая соль.
11. Соединение формулы
- 248 043609 где связь между атомами углерода 1 и 2 представляет собой одинарную связь, эпоксидированную двойную связь или двойную связь;
связь между атомами углерода 4 и 5 представляет собой одинарную связь или двойную связь;
а равно 0, 1 или 2;
R1 представляет собой циано или -C(O)Ra; где Ra представляет собой амино или алкил аминO(C<8), диалкиламинO(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R2 представляет собой водород, αлкиЛ(C<12), циклоалкиЛ(C<12), алкениЛ(C<12) или замещенный вариант последних трёх групп, или -aлкандиил(C<8)-циклоaлкил(C<12) или замещенный вариант этой группы;
R2' отсутствует или представляет собой водород, алкил(C<12), циклоaлкил(C<12), алкенил(C<12) или замещенный вариант последних трёх групп, при условии, что, когда связь между атомами углерода 4 и 5 представляет собой двойную связь, R2' отсутствует;
R3 представляет собой алкиЛ(C<12), ариЛ(C<12) или замещенный вариант любой из этих групп;
R4 представляет собой циkлоαлкиЛ(C<18), замещенный циkлоaлкиЛ(C<18), гетероариЛ(C<18), замещенный гетероариЛ(C<18), гетероциkлоαлкиЛ(C<18), замещенный гетероциклоaлкиЛ(C<18) или
где n равно 0, 1 или 2; и
R4'' представляет собой -Н, -ОН, -F, -Cl, -Br или -I; или
-Х2- (CH2)p-R4';
где Х2 представляет собой арендииЛ(C<12), замещенный арендииЛ(C<12), гетероциkлоαлкилдииЛ(C<12), замещенный гетероциклоaлкилдииЛ(C<12), гетероарендииЛ(C<12) или замещенный гетероарендиил(С<12);
р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4' представляет собой αлкил(C<8), циклоалкил(C<8), арил(C<8), гетероарил(C<8), гетероциkлоалкил(C<8), ацил(C<8), алкокси(C<8), ацилокси(C<8), -С(O)-αлкокси(C<8), -С(О)-алкиламинO(C<8), -С(O)-диαлкиламинO(C<8) αлкилсульфонил(C<8), арилсульфонил(C<8), αлкоксисульфонил(C<8) или замещенный вариант любой из этих групп;
R5 представляет собой цuклоалкоксu(C<12), ариЛ(C<l2), гетероариЛ(C<l2) или замещенный вариант любой из этих групп, или
-OYi-Ai;
где Y1 представляет собой алкандиил(C<8) или замещенный αлкандиил(C<8);
А1 представляет собой циклоαлкил(C<8) или замещенный циkлоалкил(C<8);
при условии, что, когда атомы углерода 4 и 5 соединены двойной связью, R2' и атом водорода у атома углерода 5 отсутствуют;
где термин замещенный при использовании для модификации любой группы означает, что один или более атомов водорода на этой группе были независимо заменены на -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -СО2Н, -С(О)Н, -СО2СН3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(О)СНз, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -ОС(О)СНз, -NHC(O)CH3, -SO2CH3, -S(O)2OH или -SO2NH2;
где термин арил относится к одновалентной ароматической группе с ароматическим атомом углерода в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода образует часть одной или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет шесть кольцевых атомов, все из которых представляют собой углерод, и при этом группа не состоит из атомов, кроме углерода и водорода;
термин арендиил относится к двухвалентной ароматической группе с двумя ароматическими атомами углерода в качестве точек присоединения, при этом указанные атомы углерода образуют часть одной или нескольких шестичленных ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет шесть кольцевых атомов, все из которых представляют собой углерод, и где двухвалентная группа не состоит из атомов, кроме углерода и водорода;
термин гетероарил относится к одновалентной ароматической группе с ароматическим атомом углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота образует часть одной или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая кольцевая структура имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по меньшей мере один из кольцевых атомов ароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и где гетероарильная группа не состоит ни из каких атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы;
термин гетероарендиил относится к двухвалентной ароматической группе с двумя ароматическими атомами углерода, двумя ароматическими атомами азота или одним ароматическим атомом углерода и одним ароматическим атомом азота в качестве двух точек присоединения, причем указанные атомы образуют часть одного или нескольких ароматических кольцевых структур, каждая из которых имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по крайней мере один из кольцевых атомов ароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и двухвалентная группа не со- 249 043609 держит атомов, кроме углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы;
термин гетероаралкил относится к одновалентной группе -алкандиил-гетероарил, в которой каждый из терминов алкандиил и гетероарил используется в соответствии с определениями, приведенными выше;
термин гетероциклоалкил относится к одновалентной неароматической группе с атомом углерода или атомом азота в качестве точки присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота образует часть одной или нескольких неароматических кольцевых структур, причем каждая кольцевая структура имеет от трех до восьми кольцевых атомов, где по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и где гетероциклоалкильная группа не содержит атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы; и термин гетероциклоалкандиил относится к двухвалентной циклической группе с двумя атомами углерода, двумя атомами азота или одним атомом углерода и одним атомом азота в качестве двух точек присоединения, причем указанные атомы образуют часть одной или нескольких кольцевых структур, где по меньшей мере один из кольцевых атомов неароматической кольцевой структуры (структур) представляет собой азот, кислород или серу, и где двухвалентная группа не содержит атомов, кроме углерода, водорода, азота, кислорода и серы;
или его фармацевтически приемлемая соль.
12. Соединение по любому из пп.1-5 и 11, где связь между атомами углерода 1 и 2 является двойной.
13. Соединение по любому из пп.1, 2, 11 и 12, где связь между атомами углерода 4 и 5 является одинарной.
14. Соединение по п.1 или 11, где а равен 1 или 2.
15. Соединение по любому из пп.1-6 и 11-14, где R1 представляет собой циано.
16. Соединение по любому из пп.1-9 и 11-15, где R2 представляет собой αлкиЛ(C<12) или замещенный алкил(c<12).
17. Соединение по п.16, где R2 представляет собой метил, этил, пропил или 3-гидроксипропил.
18. Соединение по любому из пп.1-3 и 11-17, где R2' представляет собой водород, алкиЛ(C<12) или замещенный алкиЛ(C<12).
19. Соединение по любому из пп.1-4 и 11-18, где R3 представляет собой алкиЛ(C<12) или замещенный алкил(c<12).
20. Соединение по п.19, где R3 представляет собой метил.
21. Соединение по любому из пп.1-7 и 10-20, где R4 представляет собой гетероариЛ(C<18) или замещенный гетероарил(C<18).
22. Соединение по п.21, где R4 представляет собой гетероарильнуЮ(C<12) или замещенную гетероаРильнуЮ(С<12) группу, причем по меньшей мере один из гетероатомов в ароматическом кольце представляет собой атом азота.
23. Соединение по любому из пп.1-21, где R4 представляет собой гетероариЛ(C<18).
24. Соединение по п.23, где R4 представляет собой 3-пиридинил, 4-пиридинил, 4-(2-циклопропил) пиридинил, 5-(2-циклопропил)пиридинил, 4-(2-морфолино)пиридинил, 4-(2-фенил)пиридинил, 3-(5метил)пиридинил, 3-(6-метил)пиридинил, 4-(2-метил)пиридинил, 4-(3-метил)пиридинил, 3-пиразоло[1,5а]пиридинил, 3-(N-метил)пирроло[2,3-b]пиридинил, 5-изохинолинил, 2-изохинолинил, 1-изохинолинил, 4-(3-фенил)пиридинил, 5-(2-фенил)пиридинил, 4-(3,5-диметил)изоксазолил, 3-(4-метил)пиридинил, 4-(6метил)пиримидинил, 6-(4-метил)пиримидинил, 4-пиридазинил, 2-хиназолинил, 4-хиназолинил, 2хинолинил, 3-хинолинил, 4-хинолинил, 5-хинолинил, 6-хинолинил, 8-хинолинил, 4-изохинолинил, 3-(8метил)хинолинил, 3-(1-метил)хинолинил, 4-(2-метил)хинолинил, 4-(2-изопропил)хинолинил, 4-(6метил)хинолинил, 4-(7-метил)хинолинил, 4-(8-метил)хинолинил, 2-(N-метил)индолил, 5-(2,4диметил)тиазолил или 5-(3-метил)оксадиазолил.
25. Соединение по любому из пп.1-22, где R4 представляет собой замещенный гетероариЛ(C<18).
26. Соединение по п.25, где R4 представляет собой 4-(2-трифторметил)пиридинил, 4-(3фтор)пиридинил, 4-(2-метокси)пиридинил, 4-(2-гидроксиметил)пиридинил, 4-(2- ацетиламино)пиридинил, 4-(2-фторметил)пиридинил, 4-(2-ацетамидилэтил)пиридинил, 4-(2фторметил)хинолинил, 4-(2-ацетоксиметил)хинолинил, 4-(2-формил)хинолинил, 4-(6-фтор)хинолинил, 4(7-фтор)хинолинил, 4-(8-фтор)хинолинил, 4-(6,8-дифтор)хинолинил, 4-(6-фтор-2-метил)хинолинил или 4-(8-фтор-2-метил)хинолинил.
27. Соединение по любому из пп.1-7 и 12-20, где R4 представляет собой арил(С<12) или замещенный арил(С<12).
28. Соединение по любому из пп.1-7 и 11-20, где R4 представляет собой
-х2- (CH2)p-R4';
где Х2 представляет собой арендииЛ(C<12), замещенный арендииЛ(C<12), гетероциклоалкандииЛ(C<12), замещенный гетероциклоалкандиил(C<12), гетероарендиил(C<12) или замещенный гетероарендиил(C<12);
- 250 043609 р равно 0, 1, 2, 3 или 4; и
R4’ представляет собой алкил(С<8), циклоалкил(С<8), арил(С<8), гетероарил(С<8), гетероциклоалкил(С<8), ациЛ(С<8), амидО(С<8), алкоксИ(C<8), ацилоксИ(C<8), -С(О)-алкоксИ(C<8), -С(О)-алкиламин0(С<8), -С(О)диалкиламинO(C<8), алкилсульфонил(С<8), арилсульфонил(С<8), алкоксисульфонил(С<8) или замещенный вариант любой из этих групп.
29. Соединение по п.28, где Х2 представляет собой гетероарендиил(С<12) или замещенный гетероарендиил(С<12).
30. Соединение по п.28, где R4' представляет собой циклоалкил(С<8) или замещенный циклоалкил(С<8).
31. Соединение по п.30, где R4'” представляет собой циклоалкил(С<8).
32. Соединение по п.31, где R4''' представляет собой циклопропил.
33. Соединение по любому из пп.1-8 и 10-32, где R5 представляет собой арил(С<12) или замещенный арил(С<12).
34. Соединение по п.33, где R5 представляет собой арил(С<12).
35. Соединение по п.34, где R5 представляет собой фенил, 4-метилфенил, 3-изопропилфенил, 4изопропилфенил, 1,3-бифенил или 1,4-бифенил.
36. Соединение по п.33, где R5 представляет собой замещенный арил(С<12).
37. Соединение по п.33 или 36, где R5 представляет собой замещенный арил(С<12), где один или более атомов водорода арила(С<12) независимо замещены -F.
38. Соединение по п.36, где R5 представляет собой 2-фторфенил, 3-фторфенил, 4-фторфенил, 2,4дифторфенил, 4-гидроксиметилфенил, 3-трифторметилфенил, 4-трифторметилфенил, 4-метоксифенил, 4хлорфенил или 3,4-дихлорфенил.
39. Соединение по любому из пп.1-7 и 11-32, где R5 представляет собой циклоалкокси(С<12) или замещенный циклоалкокси(С<12).
40. Соединение по п.39, где R5 представляет собой циклобутилокси, циклопентилокси или циклогексилокси.
41. Соединение по любому из пп.1-7 и 11-32, где R5 представляет собой гетероарил(С<12) или замещенный гетероарил(С<12).
42. Соединение по любому из пп.1-7 и 12-32, где R5 представляет собой изопропокси.
43. Соединение по любому из пп.1-42, в котором соединение далее определено как
- 251 043609
- 252 043609
- 253 043609
- 254 043609
- 255 043609
- 256 043609
или его фармацевтически приемлемая соль.
44. Соединение формулы
или его фармацевтически приемлемая соль.
45. Фармацевтическая композиция, содержащая:
(A) соединение по любому из пп.1-44; и
- 257 043609 (В) вспомогательное вещество;
где фармацевтическая композиция составлена в виде лекарственного средства.
46. Применение соединения по любому из пп.1-44 для получения лекарственного средства для лечения заболевания или расстройства, где заболевание или расстройство представляет собой аутоиммунное заболевание, отторжение органа, астму, онкологическое заболевание, неврологическое расстройство, психическое расстройство, психоневрологическое расстройство, синдром хронической боли, воспалительные процессы, поражение сетчатки или сердечно-сосудистое заболевание.
47. Применение композиции по п.45 для получения лекарственного средства для лечения заболевания или расстройства, где заболевание или расстройство представляет собой аутоиммунное заболевание, отторжение органа, астму, онкологическое заболевание, неврологическое расстройство, психическое расстройство, психоневрологическое расстройство, синдром хронической боли, воспалительные процессы, поражение сетчатки или сердечно-сосудистое заболевание.
48. Применение по п.46 или 47, где заболевание или расстройство связано с повышенной выработкой цитокина IL-17.
49. Применение по п.46 или 47, где аутоиммунное заболевание представляет собой псориаз, рассеянный склероз, склеродермию, ревматоидный артрит, волчанку, псориатический артрит, анкилозирующий спондилит, синдром Шегрена, витилиго, увеит, сухой глазной синдром, системный склероз, диабет типа 1, миастению гравис и воспалительное заболевания кишечника.
50. Применение по п.46 или 47, где заболевание или расстройство связано с воспалением.
EA201991387 2016-12-16 2017-12-16 ТРИЦИКЛИЧЕСКИЕ ЕНОНЫ - ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРИМИДИНА ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ RORγ И ДРУГИХ ПРИМЕНЕНИЙ EA043609B1 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US62/435,588 2016-12-16

Publications (1)

Publication Number Publication Date
EA043609B1 true EA043609B1 (ru) 2023-06-06

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7177059B2 (ja) ＲＯＲγの阻害および他の使用のためのピリミジン三環式エノン誘導体
JP7360434B2 (ja) Ｃｆｔｒ増強物質としてのピロロピリミジン
US10399989B2 (en) Pyrazolopyrimidine derivatives as BTK inhibitors for the treatment of cancer
US7317009B2 (en) Pyrrolopyridazine derivatives
US20210292281A1 (en) Pyrazole and imidazole compounds for inhibition of il-17 and rorgamma
EA043609B1 (ru) ТРИЦИКЛИЧЕСКИЕ ЕНОНЫ - ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРИМИДИНА ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ RORγ И ДРУГИХ ПРИМЕНЕНИЙ
AU2003294183B2 (en) Pyrrolopyridazine derivatives