EA040469B1 - 1,2,3',5'-TETRAHYDRO-2'H-SPIRO[INDOL-3,1'-PYRROLO[3,4-C]PYRRROLE]-2,3'-DIONE COMPOUNDS AS THERAPEUTIC AGENTS THAT ACTIVATE TP53 - Google Patents

1,2,3',5'-TETRAHYDRO-2'H-SPIRO[INDOL-3,1'-PYRROLO[3,4-C]PYRRROLE]-2,3'-DIONE COMPOUNDS AS THERAPEUTIC AGENTS THAT ACTIVATE TP53 Download PDF

Info

Publication number
EA040469B1
EA040469B1 EA202091718 EA040469B1 EA 040469 B1 EA040469 B1 EA 040469B1 EA 202091718 EA202091718 EA 202091718 EA 040469 B1 EA040469 B1 EA 040469B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
chloro
pyrrole
pyrrolo
spiro
dione
Prior art date
Application number
EA202091718
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Марцин Федер
Мария Мазур
Ивона Калиновская
Йоанна Ящевская-Адамчак
Войцех Левандовски
Якуб Витковский
Сабина Елен
Катажина Вос-Латоси
Original Assignee
Адамед Фарма С.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Адамед Фарма С.А. filed Critical Адамед Фарма С.А.
Publication of EA040469B1 publication Critical patent/EA040469B1/en

Links

Description

Область техники, к которой относится изобретениеThe field of technology to which the invention belongs

Настоящее изобретение относится к новым 1,2,3',5'-тетрагидро-2Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4с]пиррол]-2,3'-дионовым соединениям и данным соединениям для применения в качестве лекарственного средства, в особенности для лечения заболеваний, при которых нарушены p53-Mdm2 белок-белковые взаимодействия и/или которые чувствительны к ингибированию p53-Mdm2 взаимодействий, включая пролиферативные заболевания, такие как рак. Кроме того, настоящее изобретение предоставляет фармацевтические композиции, содержащие вышеупомянутые соединения.The present invention relates to novel 1,2,3',5'-tetrahydro-2H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4c]pyrrole]-2,3'-dione compounds and these compounds for use in as a medicine, especially for the treatment of diseases in which p53-Mdm2 protein-protein interactions are impaired and/or which are susceptible to inhibition of p53-Mdm2 interactions, including proliferative diseases such as cancer. In addition, the present invention provides pharmaceutical compositions containing the above compounds.

Уровень техники р53 представляет собой транскрипционный фактор, который отвечает на клеточный стресс, регулируя транскрипцию многочисленных генов, которые определяют судьбу клеток. В стрессовых условиях р53 может вызвать остановку клеточного цикла и процессы восстановления ДНК или программы гибели клеток, такие как апоптоз или старение. Выбор между данными реакциями зависит от типа и интенсивности стрессовых сигналов. В клетках человека активность р53 строго контролируется его негативным регулятором - белком под названием Mdm2. Mdm2 образует плотный комплекс с транс-активационным доменом р53, блокируя его способность регулировать гены-мишени и оказывать антипролиферативное действие. Кроме того, Mdm2 способствует ядерному экспорту и быстрой деградации р53 с помощью убиквитин-протеасомной системы.Background Art p53 is a transcription factor that responds to cellular stress by regulating the transcription of numerous genes that determine cell fate. Under stressful conditions, p53 can induce cell cycle arrest and DNA repair processes or cell death programs such as apoptosis or senescence. The choice between these reactions depends on the type and intensity of stress signals. In human cells, p53 activity is tightly controlled by its negative regulator, a protein called Mdm2. Mdm2 forms a tight complex with the trans-activation domain of p53, blocking its ability to regulate target genes and exert antiproliferative effects. In addition, Mdm2 promotes nuclear export and rapid degradation of p53 via the ubiquitin-proteasome system.

Играя важную роль в клеточном ответе на стресс, р53 служит основным препятствием для онкогенеза. Пациенты с синдромом Ли-Фраумени, которые наследуют мутированный р53, очень восприимчивы к раку. Мыши с поврежденным геном р53 выглядят нормальными, но к 6-месячному возрасту склонны к самопроизвольному развитию различных новообразований. Эта значительная роль р53 в подавлении опухоли приводит к тому, что его функция отключается практически во всех раковых опухолях человека, или посредством мутации гена р53, или посредством аберрантной экспрессии белков, действующих в качестве его негативных регуляторов, таких как Mdm2.Playing an important role in the cellular response to stress, p53 is the main obstacle to oncogenesis. Patients with Li-Fraumeni syndrome who inherit mutated p53 are highly susceptible to cancer. Mice with a damaged p53 gene appear normal, but by 6 months of age are prone to spontaneous development of various neoplasms. This significant role of p53 in tumor suppression results in its function being turned off in virtually all human cancers, either through mutation of the p53 gene or through aberrant expression of proteins that act as its negative regulators, such as Mdm2.

Об амплификации гена Mdm2 сообщается в более чем 10% из 8000 различных видов рака человека, включая саркомы, опухоли легких и желудка, в которых ген р53 не поврежден. Несколько других опухолей приобретают однонуклеотидный полиморфизм в промоторе Mdm2, что приводит к 2-3-кратному увеличению экспрессии Mdm2, что коррелирует с ускоренным образованием опухоли. Данные изменения воспринимаются как основные механизмы ингибирования функции р53 при раковых заболеваниях, сохраняющих р53 дикого типа.Mdm2 gene amplification has been reported in more than 10% of 8000 different human cancers, including sarcomas, lung and gastric tumors, in which the p53 gene is intact. Several other tumors acquire a single nucleotide polymorphism in the Mdm2 promoter, resulting in a 2-3-fold increase in Mdm2 expression, which correlates with accelerated tumor formation. These changes are perceived as the main mechanisms of inhibition of p53 function in cancers that retain wild-type p53.

Функциональные генетические исследования на мышах показали, что восстановление инактивированного р53 достаточно, чтобы вызвать быструю регрессию нескольких различных типов опухолей. Используя данный подход, нацеливание на взаимодействие p53-Mdm2 малыми молекулами для высвобождения и реактивации р53 стало перспективной терапевтической стратегией для лечения раковых заболеваний человека, которые являются р53 дикого типа. В последние годы было зарегистрировано несколько групп низкомолекулярных непептидных ингибиторов взаимодействия р53-Mdm2, включая нутлины, пиперазин-4-фенильные производные, халконы, сульфонамиды, бензодиазепиндионы, спирооксиндолы. Ингибиторы MDM2 дают как общие, так и различные клеточные ответы в нормальных и опухолевых клетках, что согласуется с предыдущими результатами генетических исследований. В нормальных клетках активация р53 ингибиторами MDM2 вызывает остановку клеточного цикла, но не гибель клетки. В опухолевых клетках активация р53 ингибиторами вызывает не только остановку клеточного цикла, но и гибель клеток. Данный профиль обеспечивает перспективы высокой селективности и низкой токсичности потенциальной терапии. Тем не менее, ни один из этих антагонистов Mdm2 не доказал свою эффективность в клинических испытаниях на людях. Таким образом, все еще существует потребность в новых соединениях с повышенной активностью, благоприятной фармакокинетикой и профилем токсичности.Functional genetic studies in mice have shown that recovery of inactivated p53 is sufficient to induce rapid regression of several different types of tumors. Using this approach, targeting the p53-Mdm2 small molecule interaction to release and reactivate p53 has emerged as a promising therapeutic strategy for the treatment of human cancers that are wild-type p53. In recent years, several groups of low molecular weight non-peptide inhibitors of the p53-Mdm2 interaction have been registered, including nutlins, piperazine-4-phenyl derivatives, chalcones, sulfonamides, benzodiazepindiones, and spirooxindoles. MDM2 inhibitors produce both general and distinct cellular responses in normal and tumor cells, consistent with previous results from genetic studies. In normal cells, activation of p53 by MDM2 inhibitors causes cell cycle arrest but not cell death. In tumor cells, p53 activation by inhibitors causes not only cell cycle arrest, but also cell death. This profile provides the promise of high selectivity and low toxicity potential therapy. However, none of these Mdm2 antagonists have been proven effective in human clinical trials. Thus, there is still a need for new compounds with improved activity, favorable pharmacokinetics and toxicity profile.

Предыдущая заявка авторов изобретения WO 2015/189799 раскрывает соединения, содержащие 1,1',2,5'-тетрагидроспиро[индол-3,2'-пиррол]-2,5'-дионовую систему, которые проявляют высокую и специфическую противоопухолевую активность в исследованиях in vitro. Однако дальнейшие исследования показали, что их эффективность in vivo является умеренной и наиболее эффективные соединения демонстрируют недопустимо высокий клиренс в микросомах человека, что исключает их клиническую эффективность.The previous application of the inventors WO 2015/189799 discloses compounds containing 1,1',2,5'-tetrahydrospiro[indole-3,2'-pyrrole]-2,5'-dione system, which exhibit high and specific antitumor activity in in vitro studies. However, further studies have shown that their in vivo efficacy is moderate, and the most potent compounds exhibit unacceptably high clearance in human microsomes, precluding their clinical efficacy.

Следовательно, все еще существует потребность в соединениях с превосходной активностью in vitro, обладающих улучшенной фармакокинетикой и, таким образом, демонстрирующих выраженную противораковую эффективность как у мышей на моделях in vivo, так и в будущих клинических испытаниях.Therefore, there is still a need for compounds with excellent in vitro activity, having improved pharmacokinetics and thus exhibiting significant anti-cancer efficacy both in mouse in vivo models and in future clinical trials.

Настоящее изобретение решает проблему, предоставляя новые соединения, содержащие 1,2,3',5'тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дионовую систему.The present invention solves the problem by providing new compounds containing 1,2,3',5'tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'- dione system.

Сущность изобретенияThe essence of the invention

В первом аспекте настоящее изобретение предоставляет соединение, имеющее следующую структуруIn a first aspect, the present invention provides a compound having the following structure

- 1 040469- 1 040469

в которойwherein

R1 представляет собой мета-галогенфенил, который необязательно дополнительно замещен однимдвумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, -ОН, -NH2, -NO2, -CN, -С16-алкила, -О-(С16-алкил), -S-(С16-алкил), -С(О)О-(С16-алкил), -NH(С16-алкил) и -N(C1-C6алкил)2;R 1 is meta-halophenyl which is optionally further substituted with one or two substituents independently selected from the group consisting of halo, -OH, -NH2, -NO2, -CN, -C 1 -C 6 -alkyl, -O-(C 1 -C 6 -alkyl), -S-(C 1 -C 6 -alkyl), -C(O)O-(C 1 -C 6 -alkyl), -NH(C 1 -C 6 -alkyl) and -N(C 1 -C 6 alkyl) 2 ;

R2 и R3 представляют собой независимо Н или галоген;R 2 and R 3 are independently H or halogen;

R4 представляет собой -С16-алкил;R 4 represents -C 1 -C 6 -alkyl;

R7 представляет собой -ОСН3;R 7 is -OCH 3 ;

R5, R6, R8, R9 представляют собой независимо Н, галоген, -ОСН3, -NH(CH3) или -N(CH3)2.R 5 , R 6 , R 8 , R 9 are independently H, halogen, -OCH 3 , -NH(CH 3 ) or -N(CH 3 )2.

Z представляет собой C-R8 или N, Y представляет собой C-R9 или N при условии, что Z не представляет собой C-R8 и Y не представляет собой C-R9 одновременно.Z is CR 8 or N, Y is CR 9 or N, provided that Z is not CR 8 and Y is not CR 9 at the same time.

Предпочтительно в формуле (I) R1 представляет собой мета-галогенфенил, который необязательно дополнительно замещен одним-двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, -C1-С6-алкила, -О-(С1-С6-алкил), -NH(C1-С6-алкил) и -N(С1-С6-алкил)2. Более предпочтительно в определении R1-заместителя в формуле (I) С1-С6-алкил представляет собой С13-алкил.Preferably, in formula (I), R 1 is meta-halophenyl which is optionally further substituted with one to two substituents independently selected from the group consisting of halo, -C1-C6-alkyl, -O-(C1-C6-alkyl), -NH(C1-C6-alkyl) and -N(C1-C6-alkyl)2. More preferably, in the definition of R 1 substituent in formula (I), C 1 -C 6 alkyl is C 1 -C 3 alkyl.

Еще более предпочтительно в формуле (I) R1 представляет собой мета-галогенфенил, который необязательно дополнительно замещен одним-двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, -СН3, -ОСН3, -NH(CH3) и - N(CH3)2. Еще более предпочтительно R1 представляет собой мета-галогенфенил, который необязательно дополнительно замещен одним-двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, -СН3 и -ОСН3. Наиболее предпочтительно R1 представляет собой мета-галогенфенил, который необязательно дополнительно замещен одним-двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена.Even more preferably, in formula (I), R 1 is meta-halophenyl which is optionally further substituted with one to two substituents independently selected from the group consisting of halogen, -CH3, -OCH3, -NH(CH3) and -N(CH3 )2. Even more preferably, R 1 is meta-halophenyl which is optionally further substituted with one or two substituents independently selected from the group consisting of halo, -CH3 and -OCH3 . Most preferably, R 1 is meta-halophenyl which is optionally further substituted with one to two substituents independently selected from the group consisting of halo.

Предпочтительно в формуле (I) R2 представляет собой Н и R3 представляет собой Cl.Preferably in formula (I), R 2 is H and R 3 is Cl.

Предпочтительно в формуле (I) R4 представляет собой изопропил или изобутил.Preferably in formula (I), R 4 is isopropyl or isobutyl.

Предпочтительно в формуле (I) Z и Y оба представляют собой N. Более предпочтительно в таком варианте осуществления R5 и R6 оба представляют собой -ОСН3.Preferably, in formula (I), Z and Y are both N. More preferably, in such an embodiment, R 5 and R 6 are both —OCH 3 .

Предпочтительно в формуле (I) Z представляет собой C-R8 и Y представляет собой N. Более предпочтительно в таком варианте осуществления R8 представляет собой Н, и по меньшей мере один из R5 и R6 представляет собой -ОСН3 и второй выбран из Н, -N(CH3)2 и -ОСН3.Preferably, in formula (I), Z is CR 8 and Y is N. More preferably, in such an embodiment, R 8 is H and at least one of R 5 and R 6 is -OCH3 and the second is selected from H, -N(CH3)2 and -OCH3.

В качестве определенного соединения изобретения можно упомянуть одну из следующих групп:As a specific compound of the invention, one of the following groups can be mentioned:

(1) (38)-6-хлор-2'-(3-хлорфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2- ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (2) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'- (пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (3) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-метилфенил)-6'-(пропан-2-ил)-5'-(2,4,6- 2 040469 триметоксипиримидин-5-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4с]пиррол]-2,3'-дион (4) (38)-6-хлор-2'-(3-хлор-4-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (5) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-6'-(пропан-2-ил)-5'-(2,4,6|триметоксипиримидин-5-ил)-1,2,3\5<тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4с]пиррол]-2,3'-дион (5) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-[6-(диметиламино)-4-метоксипиридин-3ил]-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'дион (6) (38)-6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (7) (38)-6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-6'-(пропан-2ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (8) (38)-6-хлор-2%5-хлор-2-фторфенил)-5'-(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-6'- (пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (9) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2,4-дифторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (10) (38)-6'-(бутан-2-ил)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(2,4- диметоксипиримидин-5-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4с]пиррол]-2,3'-дион(1) (38)-6-chloro-2'-(3-chlorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan-2-yl)-1,2, 3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione (2) (38)-6-chloro-2' -(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'- (propan-2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2 'H-spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione (3) (38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-methylphenyl )-6'-(propan-2-yl)-5'-(2,4,6- 2 040469 trimethoxypyrimidin-5-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[ indole-3,1'-pyrrolo[3,4c]pyrrole]-2,3'-dione (4) (38)-6-chloro-2'-(3-chloro-4-fluorophenyl)-5'-( 2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'(propan-2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indol-3,G-pyrrolo[3,4 -s]pyrrole]-2,3'-dione (5) (38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-6'-(propan-2-yl)-5'- (2,4,6|trimethoxypyrimidin-5-yl)-1,2,3\5<tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4c]pyrrole]-2,3'- dione (5) (38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-[6-(dimethylamino)-4-methoxypyridin-3yl]-6'-(propan-2- yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'dione (6) ( 38)-6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan2-yl)-1,2,3',5 '-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione (7) (38)-6-chloro-2'-(3, 4-difluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyridin-3-yl)-6'-(propan-2yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3 ,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione (8) (38)-6-chloro-2%5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(4,6 -dimethoxypyridin-3-yl)-6'-(propan-2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indol-3,G-pyrrolo[3,4-c ]pyrrole]-2,3'-dione (9) (38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2,4-difluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl) -6'(propan-2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3' -dione (10) (38)-6'-(butan-2-yl)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl )-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4c]pyrrole]-2,3'-dione

В качестве более определенного соединения изобретения можно упомянуть одну из следующих групп:As a more specific compound of the invention, one of the following groups can be mentioned:

(1) (ЗХ)-6-хлор-2'-(3-хлорфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-пропан-2ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Я-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (2) (ЗХ)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'- (пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Я-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (3) (ЗХ)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-метилфенил)-6'-(пропан-2-ил)-5'-(2,4,6- триметоксипиримидин-5-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Я-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4с]пиррол]-2,3'-дион (4) (ЗХ)-6-хлор-2'-(3-хлор-4-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'- (пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Я-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (5) (ЗХ)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-6'-(пропан-2-ил)-5'-(2,4,6- триметоксипиримидин-5-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Я-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4с]пиррол]-2,3'-дион (7) (30)-6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Я-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (10) (ЗХ)-6-хлор-2'-(5-хлор-2,4-дифторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Я-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (11) (ЗХ)-6'-(бутан-2-ил)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(2,4- диметоксипиримидин-5-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Я-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4с]пиррол]-2,3'-дион(1) (3X)-6-chloro-2'-(3-chlorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-propan-2yl)-1,2,3', 5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione (2) (3X)-6-chloro-2'-(5 -chloro-2-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'- (propan-2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'R- spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione (3) (3X)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-methylphenyl)-6 '-(propan-2-yl)-5'-(2,4,6-trimethoxypyrimidin-5-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2R-spiro[indole-3,r-pyrrolo [3,4с]pyrrole]-2,3'-dione (4) (3X)-6-chloro-2'-(3-chloro-4-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidine-5- yl)-6'- (propan-2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]- 2,3'-dione (5) (3X)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-6'-(propan-2-yl)-5'-(2,4,6 - trimethoxypyrimidin-5-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2H-spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4c]pyrrole]-2,3'-dione (7) (30 )-6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan2-yl)-1,2,3',5' -tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione (10) (3X)-6-chloro-2'-(5-chloro -2,4-difluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'(propan-2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'R-spiro [indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione (11) (3X)-6'-(butan-2-yl)-6-chloro-2'-( 5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3 ,4s]pyrrole]-2,3'-dione

Альтернативно, в качестве более определенного соединения изобретения можно упомянуть одну из следующих групп:Alternatively, as a more specific compound of the invention, one of the following groups can be mentioned:

- 3 040469 (6) (36)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-[6-(диметиламино)-4-метоксипиридин-3ил]-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Я-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'дион (8) (36)-6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-6'-(пропан-2ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Я-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (9) (35)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(4,6-диметоксипир ид ин-3-ил)-6'(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Я-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион- 3 040469 (6) (36)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-[6-(dimethylamino)-4-methoxypyridin-3yl]-6'-(propane- 2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'dione (8) (36 )-6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyridin-3-yl)-6'-(propan-2yl)-1,2,3',5' -tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione (9) (35)-6-chloro-2'-(5-chloro -2-fluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyr ide in-3-yl)-6'(propan-2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'R-spiro [indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione

Наиболее предпочтительным соединением изобретения является соединение, представленное следующей структуройThe most preferred compound of the invention is the compound represented by the following structure

которое представляет собой (3S)-6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-6'(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.which is (3S)-6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyridin-3-yl)-6'(propan-2-yl)-1,2 ,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

Вторым наиболее предпочтительным соединением изобретения является соединение, представленное следующей структуройThe second most preferred compound of the invention is the compound represented by the following structure

которое представляет собой (3S)-6-хлор-2'-(3-хлорфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'(пропан-2-ил)-1,2,3,5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,Г-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.which is (3S)-6-chloro-2'-(3-chlorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'(propan-2-yl)-1,2,3 ,5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

Другой аспект изобретения относится к соединению формулы (I) для применения в качестве лекарственного препарата.Another aspect of the invention relates to a compound of formula (I) for use as a drug.

Предпочтительно лекарственный препарат является пригодным для профилактики и/или лечения заболеваний, выбранных из группы, состоящей из рака, иммунных заболеваний, воспалительных состояний, аллергических заболеваний кожи, связанных с чрезмерной пролиферацией, ослепляющего заболевания и вирусных инфекций.Preferably, the drug is suitable for the prevention and/or treatment of diseases selected from the group consisting of cancer, immune diseases, inflammatory conditions, allergic skin diseases associated with excessive proliferation, blinding disease and viral infections.

Следующий аспект изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей в качестве активного ингредиента соединение формулы (I) в комбинации по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым эксципиентом.Another aspect of the invention relates to a pharmaceutical composition containing, as an active ingredient, a compound of formula (I) in combination with at least one pharmaceutically acceptable excipient.

Последний аспект изобретения относится к способу лечения и/или профилактики заболеваний, выбранных из группы, состоящей из рака, иммунных заболеваний, воспалительных состояний, аллергических заболеваний кожи, связанных с чрезмерной пролиферацией, ослепляющего заболевания и вирусных инфекций, включающему введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или фармацевтической композиции, как определено выше.The last aspect of the invention relates to a method for the treatment and/or prevention of diseases selected from the group consisting of cancer, immune diseases, inflammatory conditions, allergic diseases of the skin associated with excessive proliferation, blinding disease and viral infections, comprising administering a therapeutically effective amount of a compound of the formula ( I) or a pharmaceutical composition as defined above.

Краткое описание чертежейBrief description of the drawings

На фиг. 1 показана эффективность in vivo для соединения 107 из международной публикации WO 2015/189799 в качестве эталонного соединения на мышиной модели остеосаркомы человека (SJSA-1). Клетки SJSA-1 инокулировали подкожно (п/к) в количестве 3х106/мышь; исследуемое соединение вводили перорально (п/о) по схеме q1dx 14; 7 мышей в группе.In FIG. 1 shows the in vivo efficacy of compound 107 from WO 2015/189799 as a reference compound in a mouse model of human osteosarcoma (SJSA-1). SJSA-1 cells were inoculated subcutaneously (sc) at 3x10 6 /mouse; the test compound was administered orally (po) according to the scheme q1dx 14; 7 mice per group.

На фиг. 2 показана эффективность in vivo для соединения 7, 8 и 11 настоящего изобретения на мышиной модели остеосаркомы человека (SJSA-1). Клетки SJSA-1 инокулировали подкожно (п/к) в количестве 3х106/мышь; исследуемые соединения вводили перорально (п/о) по схеме q1dx 14; 8 мышей в группе.In FIG. 2 shows the in vivo efficacy of compound 7, 8 and 11 of the present invention in a mouse model of human osteosarcoma (SJSA-1). SJSA-1 cells were inoculated subcutaneously (sc) at 3x10 6 /mouse; the studied compounds were administered orally (p/o) according to the q1dx 14 scheme; 8 mice per group.

Подробное описание изобретенияDetailed description of the invention

Когда соединения изобретения могут существовать в одной или более таутомерных формах, все такие формы, хотя это явно не указано в вышеприведенной формуле, входят в объем настоящего изобретения. Соответственно соединения могут присутствовать в виде смеси таутомеров или в виде отдельного таутомера.Where the compounds of the invention may exist in one or more tautomeric forms, all such forms, although not expressly indicated in the above formula, are within the scope of the present invention. Accordingly, the compounds may be present as a mixture of tautomers or as a single tautomer.

Термины, используемые в настоящем изобретении, имеют следующие значения. Другие термины,The terms used in the present invention have the following meanings. Other terms

- 4 040469 не определенные ниже, имеют значения, как понятно специалисту в данной области техники.- 4 040469 not defined below, have meanings as understood by a person skilled in the art.

Термин С1-С6-алкил представляет собой насыщенный углеводород с прямой или разветвленной цепью, содержащий от 1 до 6 атомов углерода. Примеры C16-алкила представляют собой метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, втор-бутил, н-пентил и н-гексил. Более предпочтительно C1С6-алкил представляет собой C14-алкил, C13-алкил или С1-С2-алкил. Обозначение С1-С4-алкил, CrQалкил, C12-алкил представляет собой насыщенный углеводород с прямой или разветвленной цепью, содержащий от 1 до 4, 3 или 2 атома углерода соответственно. Наиболее предпочтительно C16-алкил представляет собой C1-алкил, который представляет собой метильную группу (сокращенно Me).The term C1- C6 alkyl is a straight or branched saturated hydrocarbon containing from 1 to 6 carbon atoms. Examples of C 1 -C 6 alkyl are methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, tert-butyl, sec-butyl, n-pentyl and n-hexyl. More preferably C 1 C 6 alkyl is C 1 -C 4 alkyl, C 1 -C 3 alkyl or C 1 -C 2 alkyl. Designation C1-C 4 -alkyl, CrQ alkyl, C 1 -C 2 -alkyl represents a saturated hydrocarbon with a straight or branched chain containing from 1 to 4, 3 or 2 carbon atoms, respectively. Most preferably C 1 -C 6 alkyl is C 1 alkyl which is a methyl group (abbreviated as Me).

Термин галоген выбран из F, Cl, Br и I. Предпочтительно галоген выбран из F и Cl.The term halogen is selected from F, Cl, Br and I. Preferably halogen is selected from F and Cl.

Термин м-галогенфенил, который присутствует в определении группы R1, означает фенильную группу, которая замещена галогеном, как определено выше в мета-положении относительно точки присоединения фенильной группы к атому азота пирроло[3,4-с]пиррольной кольцевой системы.The term m-halophenyl, which is present in the definition of the R 1 group, means a phenyl group which is substituted by halogen as defined above in the meta position relative to the point of attachment of the phenyl group to the nitrogen atom of the pyrrolo[3,4-c]pyrrole ring system.

Выражение Z представляет собой C-R8 или N, Y представляет собой C-R9 или N при условии, что Z не представляет собой C-R8 и Y не представляет собой C-R9 одновременно означает, что в соединении изобретения Z представляет собой C-R8 и Y представляет собой N, или Z представляет собой N и Y представляет собой C-R9, или Z представляет собой N и Y представляет собой N.The expression Z is CR 8 or N, Y is CR 9 or N, provided that Z is not CR 8 and Y is not CR 9 simultaneously means that in the compound of the invention Z is CR 8 and Y is N , or Z is N and Y is CR 9 , or Z is N and Y is N.

Поскольку соединения изобретения могут быть кислотными или основными, они могут образовывать подходящие кислотно-аддитивные соли с основанием или кислотой соответственно.Since the compounds of the invention may be acidic or basic, they may form suitable acid addition salts with base or acid, respectively.

Фармацевтически приемлемая кислотно-аддитивная соль относится к тем солям, которые сохраняют биологическую эффективность свободных оснований и которые не являются биологически нежелательными. Кислотно-аддитивные соли могут быть образованы с неорганическими (минеральными) кислотами или органическими кислотами. В качестве примеров кислот можно упомянуть хлористоводородную, бромистоводородную, иодистоводородную, фосфорную, серную, азотную, угольную, янтарную, малеиновую, муравьиную, уксусную, пропионовую, фумаровую, лимонную, винную, молочную, бензойную, салициловую, глутаминовую, аспарагиновую, п-толуолсульфоновую, бензолсульфоновую, метансульфоновую, этансульфоновую, нафталинсульфоновую, такую как 2-нафталинсульфоновая, памовую, ксинафоевую, гексановую кислоту.A pharmaceutically acceptable acid addition salt refers to those salts which retain the biological effectiveness of the free bases and which are not biologically undesirable. Acid addition salts can be formed with inorganic (mineral) acids or organic acids. As examples of acids, mention may be made of hydrochloric, hydrobromic, hydroiodic, phosphoric, sulfuric, nitric, carbonic, succinic, maleic, formic, acetic, propionic, fumaric, citric, tartaric, lactic, benzoic, salicylic, glutamic, aspartic, p-toluenesulfonic, benzenesulfonic, methanesulfonic, ethanesulfonic, naphthalenesulfonic, such as 2-naphthalenesulfonic, pamic, xinafoic, hexanoic acid.

Кислотно-аддитивная соль может быть получена простым способом путем взаимодействия соединения формулы (I) с подходящей неорганической или органической кислотой в количестве, по существу эквимолярном соединению формулы (I), необязательно в подходящем растворителе, таком как органический растворитель для образования соли, которая обычно выделяется, например, путем кристаллизации и фильтрования. Например, свободные основания соединений могут быть превращены в соответствующие гидрохлоридные соли путем обработки раствора соединения, например, в метаноле стехиометрическим количеством хлористоводородной кислоты или хлороводорода в метаноле, этаноле или диэтиловом эфире с последующим испарением растворителей.The acid addition salt can be prepared in a simple manner by reacting a compound of formula (I) with a suitable inorganic or organic acid in an amount substantially equimolar to a compound of formula (I), optionally in a suitable solvent such as an organic solvent to form a salt which is usually isolated , for example, by crystallization and filtration. For example, the free bases of the compounds can be converted to the corresponding hydrochloride salts by treating a solution of the compound, eg in methanol, with a stoichiometric amount of hydrochloric acid or hydrogen chloride in methanol, ethanol or diethyl ether, followed by evaporation of the solvents.

Подобным образом фармацевтически приемлемые основно-аддитивные соли включают соли, полученные из неорганических оснований, таких как натрий, калий, литий, аммоний, кальций, магний, железо, цинк, медь, марганец, алюминий и подобные. Соли, полученные из фармацевтически приемлемых нетоксичных органических оснований, включают соли первичных, вторичных и третичных аминов, включая встречающиеся в природе замещенные амины, циклические амины и основные ионообменные смолы, такие как изопропиламин, триметиламин, диэтиламин, триэтиламин, трипропиламин, и этаноламин, и триэтаноламин.Similarly, pharmaceutically acceptable base addition salts include salts derived from inorganic bases such as sodium, potassium, lithium, ammonium, calcium, magnesium, iron, zinc, copper, manganese, aluminum, and the like. Salts derived from pharmaceutically acceptable, non-toxic organic bases include salts of primary, secondary, and tertiary amines, including naturally occurring substituted amines, cyclic amines, and basic ion exchange resins such as isopropylamine, trimethylamine, diethylamine, triethylamine, tripropylamine, and ethanolamine, and triethanolamine .

Соединения формулы (I) могут быть получены с использованием следующих способов.The compounds of formula (I) can be obtained using the following methods.

Соединения на основе 1',2,5'-тетрагидроспиро[индол-3,2'-пирроло]-2,5'-диона, конденсированного с пиррольным кольцом (соединения формулы (I)), могут быть получены в соответствии со следующей схемой реакции 1.Compounds based on 1',2,5'-tetrahydrospiro[indole-3,2'-pyrrolo]-2,5'-dione fused to a pyrrole ring (compounds of formula (I)) can be prepared according to the following scheme reactions 1.

- 5 040469- 5 040469

Схема реакции 1.Reaction scheme 1.

Сначала метилкетон С-1 обрабатывали изатином С-2 в присутствии основания, обычно диэтиламина (ДЭА) или бис(триметилсилил)амида лития (LiHMDS).First, methyl ketone C-1 was treated with isatin C-2 in the presence of a base, usually diethylamine (DEA) or lithium bis(trimethylsilyl)amide (LiHMDS).

Полученный альдол С-3 впоследствии дегидратировали в кислых условиях, используя обычно конц. хлористоводородную кислоту (12 М), обеспечивая ненасыщенное соединение С-4.The resulting C-3 aldol was subsequently dehydrated under acidic conditions, usually using conc. hydrochloric acid (12 M), providing unsaturated compound C-4.

Параллельно амид С-6 получали сочетанием амина С-5 с проп-2-иновой кислотой, предпочтительно с использованием реагентов сочетания, обычно карбодиимидных реагентов, таких как дициклогексилкарбодиимид (ДЦК) или (3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида гидрохлорид (EDC-HCl).In parallel, amide C-6 was prepared by coupling amine C-5 with prop-2-ic acid, preferably using coupling reagents, usually carbodiimide reagents such as dicyclohexylcarbodiimide (DCC) or (3-dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimide hydrochloride (EDC- HCl).

Гидроаминирование алкина С-6 с амином С-7 и последующее взаимодействие с еноном С-4 приводит к замещенному пирролу С-8. Данную реакцию в одном сосуде можно проводить обычно в уксусной кислоте при микроволновом облучении.Hydroamination of alkyne С-6 with amine С-7 and subsequent interaction with enone С-4 leads to substituted pyrrole С-8. This one-pot reaction can usually be carried out in acetic acid under microwave irradiation.

Интермедиат С-8 может быть окислен до производного 3-гидрокси-2-оксиндола в присутствии избытка основания, обычно трет-бутоксида натрия, подходящего триалкилфосфита, обычно триметил или триэтилфосфита и атмосферного кислорода.Intermediate C-8 can be oxidized to the 3-hydroxy-2-oxindole derivative in the presence of an excess of a base, usually sodium tert-butoxide, a suitable trialkyl phosphite, usually trimethyl or triethyl phosphite, and atmospheric oxygen.

Такие полученные соединения С-9 были циклизованы в кислой среде, обычно в трифторуксусной кислоте, предоставляя желательные рацемические конденсированные спироциклические оксиндолы.Such resulting C-9 compounds were cyclized in an acidic medium, typically in trifluoroacetic acid, to provide the desired racemic fused spirocyclic oxindoles.

Наконец, желаемый S-энантиомер был отделен с использованием условий хиральной ВЭЖХ.Finally, the desired S-enantiomer was separated using chiral HPLC conditions.

Более подробная информация о получении 1,1',2,5'-тетрагидроспиро[индоло-3,2'-пирроло]-2,5'дионового ядра была описана в нашей предыдущей патентной заявке WO 2015/189799 А1.More detailed information on the preparation of the 1,1',2,5'-tetrahydrospiro[indolo-3,2'-pyrrolo]-2,5'dione core has been described in our previous patent application WO 2015/189799 A1.

Соответствующие кетоны С-1, изатины С-2 и амины являются коммерчески доступными или могут быть получены с использованием следующих способов.The corresponding C-1 ketones, C-2 isatins and amines are commercially available or can be prepared using the following methods.

Схема 2 иллюстрирует один типичный способ получения 5-амино-2,4-диметоксипиримидина (С7А) посредством нуклеофильного замещения хлора в положениях 2 и 4 в 2,4-дихлор-5-нитропиримидине (С-7А1) метоксигруппой и последующее восстановление нитрогруппы в 2,4-диметокси-5нитропиримидине (С-7А2).Scheme 2 illustrates one typical method for the preparation of 5-amino-2,4-dimethoxypyrimidine (C7A) by nucleophilic substitution of the chlorine at positions 2 and 4 in 2,4-dichloro-5-nitropyrimidine (C-7A1) with a methoxy group and subsequent reduction of the nitro group at 2 ,4-dimethoxy-5nitropyrimidine (C-7A2).

- 6 040469- 6 040469

Схема реакции 2.Reaction scheme 2.

Схема 3 иллюстрирует типичный способ получения 3-амино-4,6-диметоксипиридина (С-7В) посредством нуклеофильного замещения хлора в положениях 2 и 4 в 2,4-дихлор-5-нитропиридине (С-7В1) метоксигруппой с последующим восстановлением нитрогруппы в 2,4-диметокси-5-нитропиридине (С-7В2).Scheme 3 illustrates a typical method for the preparation of 3-amino-4,6-dimethoxypyridine (C-7B) by nucleophilic substitution of chlorine at positions 2 and 4 in 2,4-dichloro-5-nitropyridine (C-7B1) with a methoxy group followed by reduction of the nitro group at 2,4-dimethoxy-5-nitropyridine (C-7B2).

Схема реакции 3.Reaction scheme 3.

Схема 4 иллюстрирует типичный способ получения 5-амино-4-метокси-2-(диметиламино)пиридина (С-7С) посредством нуклеофильного замещения хлора в положении 2 в 2-хлор-4-метокси-5нитропиридине (С-7С1) метоксигруппой и последующее восстановление нитрогруппы в 4-метокси-2(диметиламино)-5 -нитропиридине (С-7 С2).Scheme 4 illustrates a typical method for the preparation of 5-amino-4-methoxy-2-(dimethylamino)pyridine (C-7C) by nucleophilic substitution of the chlorine at position 2 in 2-chloro-4-methoxy-5nitropyridine (C-7C1) with a methoxy group and subsequent reduction of the nitro group in 4-methoxy-2(dimethylamino)-5-nitropyridine (C-7 C2).

Схема реакции 4.Reaction scheme 4.

NONO

Ме2МН(водн.)Me 2 MN (aq.)

МеОН/ТГФMeOH/THF

CICI

NONO

МеОН/ТГФMeOH/THF

N.N.

Н2, Pd/CH 2 , Pd/C

NH-NH-

N.N.

С-7С1S-7S1

С-7С2S-7S2

С-7СS-7S

Схема 5 иллюстрирует типичный способ получения 5-амино-2,4,6-триметоксипиримидина (C-7D) посредством нитрования 2-хлор-4,6-диметоксипиримидина (C-7D1) в положении 5 после нуклеофильного замещения хлора в положении 2 в 2-хлор-4,6-диметокси-5-нитропиримидине (C-7D2) метоксигруппой. Последней стадией было восстановление нитрогруппы в 2,4,6-триметокси-5-нитропиримидине (C-7D3).Scheme 5 illustrates a typical preparation of 5-amino-2,4,6-trimethoxypyrimidine (C-7D) via nitration of 2-chloro-4,6-dimethoxypyrimidine (C-7D1) at position 5 after nucleophilic substitution of chlorine at position 2 to 2 -chloro-4,6-dimethoxy-5-nitropyrimidine (C-7D2) methoxy group. The last step was the reduction of the nitro group in 2,4,6-trimethoxy-5-nitropyrimidine (C-7D3).

Схема реакции 5.Reaction scheme 5.

Как упоминалось выше, соединения изобретения предназначены для применения в качестве лекарственного средства, которое является пригодным для профилактики и/или лечения заболеваний, выбранных из группы, состоящей из рака, иммунных заболеваний, воспалительных состояний, аллергических заболеваний кожи, связанных с чрезмерной пролиферацией, ослепляющим заболеванием и вирусными инфекциями.As mentioned above, the compounds of the invention are intended for use as a medicament which is useful in the prevention and/or treatment of diseases selected from the group consisting of cancer, immune diseases, inflammatory conditions, allergic skin diseases associated with excessive proliferation, blinding disease and viral infections.

В частности, соединения в соответствии с изобретением являются пригодными для профилактики и/или лечения заболеваний, связанных с нарушением регуляции клеточного цикла и апоптозом, то есть иммунных заболеваний, таких как, например, аутоиммунные заболевания и состояния, связанные с отторжением трансплантата ткани/органа, таких как ревматоидный артрит, реакция трансплантат против хозяина, системная красная волчанка, синдром Шегрена, рассеянный склероз, тиреоидит Хашимото, полимиозит; хронические воспалительные состояния представляют собой астму, остеоартроз, атеросклероз, болезнь Крона; воспалительные или аллергические состояния кожи представляют собой псориаз, контактный дерматит, атопический дерматит, очаговую алопецию, мультиформную эритему, герпетиформный дерматит, склеродермию, витилиго, гиперчувствительный ангиит, крапивницу, буллезныйIn particular, the compounds according to the invention are suitable for the prevention and/or treatment of diseases associated with cell cycle dysregulation and apoptosis, i.e. immune diseases such as, for example, autoimmune diseases and conditions associated with tissue/organ transplant rejection, such as rheumatoid arthritis, graft versus host disease, systemic lupus erythematosus, Sjögren's syndrome, multiple sclerosis, Hashimoto's thyroiditis, polymyositis; chronic inflammatory conditions are asthma, osteoarthritis, atherosclerosis, Crohn's disease; inflammatory or allergic skin conditions are psoriasis, contact dermatitis, atopic dermatitis, alopecia areata, erythema multiforme, dermatitis herpetiformis, scleroderma, vitiligo, hypersensitivity angiitis, urticaria, bullous

- 7 040469 пемфигоид, пемфигус, приобретенный буллезный эпидермолиз; гиперпролиферативное расстройство представляет собой синдром Ли-Фраумени; рак или опухолевые заболевания представляют собой доброкачественные или злокачественные опухоли, саркомы, такие как рабдомиосаркома, рак костей, например, остеосаркомы, карциному головного мозга, например, опухоль головного мозга мягких тканей, почек, печени, надпочечников, мочевого пузыря, молочной железы, желудка, желудочные опухоли, яичников, толстой кишки, прямой кишки, простаты, поджелудочной железы, легкого, влагалища или щитовидной железы, глиобластомы, множественную миелому, рак желудочно-кишечного тракта, в частности карциному толстой кишки или колоректальную аденому, опухоль шеи и головы, меланому, гиперплазию предстательной железы, неоплазию, неоплазию эпителиального характера, карциному молочной железы, лейкоз, такой как В- или Т-клеточные лимфомы, истинную полицитемию, тромбоцитемию, адренокортикальную карциному, включая метастазирование в другие органы, соответственно; пролиферативную витреоретинопатию, вирусные инфекции представляют собой герпес, папиллому, ВИЧ, гепатит.- 7 040469 pemphigoid, pemphigus, epidermolysis bullosa acquired; the hyperproliferative disorder is Li-Fraumeni syndrome; cancer or neoplastic diseases are benign or malignant tumors, sarcomas such as rhabdomyosarcoma, bone cancer such as osteosarcomas, brain carcinoma such as soft tissue brain tumor, kidney, liver, adrenal, bladder, breast, stomach, gastric tumors, ovarian, colon, rectum, prostate, pancreas, lung, vagina or thyroid gland, glioblastoma, multiple myeloma, cancer of the gastrointestinal tract, in particular colon carcinoma or colorectal adenoma, tumor of the neck and head, melanoma, prostatic hyperplasia, neoplasia, epithelial neoplasia, breast carcinoma, leukemia such as B- or T-cell lymphomas, polycythemia vera, thrombocythemia, adrenocortical carcinoma, including metastasis to other organs, respectively; proliferative vitreoretinopathy, viral infections are herpes, papilloma, HIV, hepatitis.

При лечении вышеупомянутых заболеваний соединения изобретения можно вводить в виде химического соединения, но обычно их используют в форме фармацевтических композиций, содержащих соединение в соответствии с изобретением или его фармацевтически приемлемую соль, как определено выше, в качестве активного ингредиента в комбинации с фармацевтически приемлемыми носителями и эксципиентами.In the treatment of the aforementioned diseases, the compounds of the invention may be administered in the form of a chemical compound, but they are usually used in the form of pharmaceutical compositions containing a compound according to the invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof, as defined above, as an active ingredient in combination with pharmaceutically acceptable carriers and excipients. .

При лечении вышеупомянутых заболеваний фармацевтические композиции изобретения могут быть введены любым путем, предпочтительно перорально или парентерально, и они будут иметь форму препарата, предназначенного для применения в медицине в зависимости от предполагаемого пути введения.In the treatment of the aforementioned diseases, the pharmaceutical compositions of the invention may be administered by any route, preferably orally or parenterally, and will be in the form of a preparation intended for use in medicine, depending on the intended route of administration.

Твердые препараты могут принимать форму, например, таблеток или капсул, приготовленных стандартными способами с фармацевтически приемлемыми неактивными ингредиентами, такими как связующие агенты (например, предварительно желатинизированный кукурузный крахмал, поливинилпирролидон или гидроксипропилметилцеллюлоза); наполнители (например, лактоза, сахароза, карбоксиметилцеллюлоза, микрокристаллическая целлюлоза или гидрофосфат кальция); скользящие вещества (например, стеарат магния, тальк или диоксид кремния); дезинтегранты (например, кросповидон, картофельный крахмал или натрия крахмала гликолят); смачивающие агенты (например, лаурилсульфат натрия). Таблетки могут быть покрыты в соответствии со способами, хорошо известными в данной области техники, стандартными оболочками, оболочками для замедленного/контролируемого высвобождения или энтеросолюбильными оболочками. Жидкие препараты для перорального введения могут принимать форму, например, растворов, сиропов или суспензий или могут быть представлены в виде сухого продукта для разведения водой или другим подходящим носителем перед применением. Такие жидкие препараты могут быть получены стандартными способами с фармацевтически приемлемыми неактивными ингредиентами, такими как суспендирующие агенты (например, сироп сорбита, производные целлюлозы или гидрогенизированные пищевые жиры); эмульгирующие агенты (например, лецитин или акация); неводные носители (например, миндальное масло, масляные сложные эфиры, этиловый спирт или фракционированные растительные масла); и консерванты (например, метил п- или пропилгидроксибензоат или сорбиновая кислота). Препараты также могут содержать подходящие буферы, ароматизаторы, красители и подсластители.Solid preparations may take the form of, for example, tablets or capsules prepared by standard methods with pharmaceutically acceptable inactive ingredients such as binders (eg, pregelatinized cornstarch, polyvinylpyrrolidone, or hydroxypropyl methylcellulose); fillers (eg lactose, sucrose, carboxymethyl cellulose, microcrystalline cellulose or calcium hydrogen phosphate); lubricants (eg magnesium stearate, talc or silicon dioxide); disintegrants (eg crospovidone, potato starch or sodium starch glycolate); wetting agents (eg sodium lauryl sulfate). Tablets may be coated according to methods well known in the art, standard coatings, sustained/controlled release coatings, or enteric coatings. Liquid preparations for oral administration may take the form of, for example, solutions, syrups or suspensions, or may be presented as a dry product for reconstitution with water or other suitable vehicle before use. Such liquid preparations can be prepared by standard methods with pharmaceutically acceptable inactive ingredients such as suspending agents (eg sorbitol syrup, cellulose derivatives or hydrogenated edible fats); emulsifying agents (eg lecithin or acacia); non-aqueous vehicles (eg, almond oil, oily esters, ethyl alcohol, or fractionated vegetable oils); and preservatives (eg, methyl p- or propylhydroxybenzoate or sorbic acid). The formulations may also contain suitable buffers, flavors, colors and sweeteners.

Препараты для перорального введения могут быть подходящим образом составлены способами, известными специалисту в данной области техники, для получения контролируемого высвобождения активного соединения.Formulations for oral administration may be suitably formulated by methods known to those skilled in the art to obtain controlled release of the active compound.

Парентеральное введение включает введение посредством внутримышечной и внутривенной инъекции и инфузии (инфузия) внутривенно. Составы для парентерального введения могут быть в стандартной лекарственной форме, например в ампулах или в контейнерах для многодозового введения с добавлением консерванта. Композиции могут принимать формы суспензий, растворов или эмульсий в масляных или водных носителях и могут содержать составляющие агенты, такие как суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие агенты.Parenteral administration includes administration by intramuscular and intravenous injection and infusion (infusion) intravenously. Formulations for parenteral administration may be in unit dosage form, for example in ampoules or in multi-dose containers, with an added preservative. The compositions may take the form of suspensions, solutions or emulsions in oily or aqueous vehicles and may contain formulatory agents such as suspending, stabilizing and/or dispersing agents.

Альтернативно активный ингредиент может быть в форме порошка для восстановления подходящим носителем, например стерильной апирогенной водой.Alternatively, the active ingredient may be in the form of a powder for reconstitution with a suitable vehicle, eg sterile, pyrogen-free water.

Способ лечения с использованием соединений данного изобретения будет включать введение терапевтически эффективного количества соединения изобретения, предпочтительно в форме фармацевтической композиции объекту, нуждающемуся в таком лечении.A method of treatment using the compounds of this invention will comprise administering a therapeutically effective amount of a compound of the invention, preferably in the form of a pharmaceutical composition, to a subject in need of such treatment.

Предлагаемая доза соединений настоящего изобретения составляет от приблизительно 0,1 до приблизительно 1000 мг в день, в разовой или разделенных дозах. Специалист поймет, что выбор дозы, необходимой для достижения желаемого биологического эффекта, будет зависеть от ряда факторов, например от определенного соединения, применения, способа введения, возраста и состояния пациента, и точная дозировка будет в конечном итоге определяться по усмотрению лечащего врача.A suggested dosage of the compounds of the present invention is from about 0.1 to about 1000 mg per day, in single or divided doses. The skilled artisan will appreciate that the selection of the dose required to achieve the desired biological effect will depend on a number of factors, such as the particular compound, application, route of administration, age and condition of the patient, and the exact dosage will ultimately be at the discretion of the attending physician.

ПримерыExamples

Следующие примеры не предназначены для ограничения изобретения, а просто служат иллюстрацией настоящего изобретения.The following examples are not intended to limit the invention, but simply serve to illustrate the present invention.

- 8 040469- 8 040469

Сокращения. AcOEt Abbreviations. AcOEt этилацетат ethyl acetate АсОН ASON уксусная кислота acetic acid уш.с br.s уширенный синглет wide singlet СаС12 CaCl 2 хлорид кальция calcium chloride СНС13 SNS1 3 хлороформ chloroform д d дублет doublet дд ддд dd dd дублет дублетов дублет дублетов дублетов doublet of doublets doublet of doublets of doublets ДК DC дублет квартетов doublet of quartets ДЭА DEA Α,Α'-диэтиламин Α,Α'-diethylamine ДЦК DCC Α,Α'-дициклогексилкарбодиимид Α,Α'-dicyclohexylcarbodiimide дхм dhm дихлорметан dichloromethane EDCHC1 EDCHC1 N-(3 -диметиламинопропил)-А-этилкарбодиимида гидрохлорид N-(3-dimethylaminopropyl)-A-ethylcarbodiimide hydrochloride EtOH EtOH этанол ethanol экв. equiv. эквиваленты equivalents ESI ESI ионизация электрораспылением electrospray ionization ч h час(ы) watch) НС1 HC1 хлорид водорода hydrogen chloride ВЭЖХ HPLC высокоэффективная жидкостная хроматография high performance liquid chromatography л l литр liter LiHMDS LiHMDS бис(триметилсилил)амид лития lithium bis(trimethylsilyl)amide м m мультиплет multiplet МеОН Meon метанол methanol MgSO4 MgSO4 сульфат магния magnesium sulfate мл ml миллилитр(ы) milliliter(s) MsOH MSOH метансульфоновая кислота methanesulfonic acid MW MW микроволновой microwave NaHCO3 NaHCO3 бикарбонат натрия bicarbonate of soda NaOH NaOH гидроксид натрия sodium hydroxide Na2SO4 Na2SO4 _ сульфат натрия sodium sulfate ЯМР NMR ядерный магнитный резонанс nuclear magnetic resonance НФ ВЭЖХ NF HPLC нормально-фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография normal-phase high-efficiency liquid chromatography -ОМе -OMe метоксигруппа methoxy group -OEt -OEt этоксигруппа ethoxy group ч.д.а. analytical grade чистый для анализа clean for analysis ptsa-h2optsa-h 2o п-толуолсульфоновой кислоты моногидрат p-toluenesulfonic acid monohydrate кв sq. квартет quartet ОФ-ВЭЖХ RP-HPLC обращенно-фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография reverse phase high efficiency liquid chromatography с With синглет singlet сеп sep септет septet

-9040469-9040469

СФХ SFH сверхкритическая флюидная хроматография supercritical fluid chromatography SQDMS SQDMS масс-спектрометр с одиночным квадрупольным детектором mass spectrometer with a single quadrupole detector т T триплет triplet ТФУК TFA трифторуксусная кислота trifluoroacetic acid ТФУА TFUA трифторуксусный ангидрид trifluoroacetic anhydride ТГФ THF тетрагидрофуран tetrahydrofuran тех those тонкослойная хроматография thin layer chromatography УЭЖХМС UEZHHMS ультраэффективная жидкостная хроматография с ultra performance liquid chromatography with спектрометрией spectrometry МкЛ MKL микролитр microliter

массТСХ проводили с силикагелем 60 F254 на алюминиевой фольге (Sigma-Aldrich, Merck) с использованием соответствующих систем растворителей. Визуализацию обычно осуществляли с помощью УФизлучения (254 нм).mass TLC was performed with silica gel 60 F254 on aluminum foil (Sigma-Aldrich, Merck) using appropriate solvent systems. Visualization was usually carried out using UV radiation (254 nm).

Метод УФЖХ-МС.UVLC-MS method.

Анализы УЭЖХМС проводили на жидкостном хроматографе УФЖХ, оборудованном детектором ФДМ и детектором SQD MS, работающем в режиме ESI(+) или ESI(-) с использованием колонки C18, 2,1 ммх100 мм, 1,7 мкм (AQUITY UPLC ВЕН или эквивалент). ВЭЖХ или ЖХ/МС степени чистоты метанол, ВЭЖХ степени чистоты воду, ВЭЖХ или ЖХ/МС степени чистоты муравьиную кислоту, ч.д.а. степени чистоты 25%-ный раствор аммиака и их смесь использовали в качестве подвижной фазы. Рабочие условия были следующими: поток подвижной фазы 0,45 мл/мин, длина волны 210-400 нм, объем вводимой пробы 1 мкл, температура колонки 60°С, температура автодозатора 5°С. Анализ проводили 5,5 мин+1,5 мин на задержку следующей инъекции.UPLCMS analyzes were performed on a UVLC liquid chromatograph equipped with an FDM detector and an SQD MS detector operating in ESI(+) or ESI(-) mode using a C18, 2.1 mm x 100 mm, 1.7 µm column (AQUITY UPLC VEN or equivalent) . HPLC or LC/MS purity methanol, HPLC purity water, HPLC or LC/MS purity formic acid, analytical grade purity 25% ammonia solution and their mixture was used as the mobile phase. Operating conditions were as follows: mobile phase flow 0.45 ml/min, wavelength 210-400 nm, injection volume 1 μl, column temperature 60°C, autosampler temperature 5°C. The analysis was carried out 5.5 min + 1.5 min to delay the next injection.

Градиентное элюирование с линейным ходом:Linear Gradient Elution:

Время [мин] Time [min] % А % A % В % IN Градиентная кривая gradient curve θ,ο θ,ο 80,0 80.0 20,0 20.0 - - 4,0 4.0 0,1 0.1 99,9 99.9 линейная (6) linear (6) 5,5 5.5 80,0 80.0 20,0 20.0 прямая (11) straight (11)

Растворы готовили следующим образом.Solutions were prepared as follows.

Получение подвижной фазы А1 - основной градиент: 25 мкл муравьиной кислоты и 250 мкл 25% раствора аммиака добавляли к 250 мл воды. Ультразвуковая баня с применением дегазации в течение 10 мин.Preparation of mobile phase A1 - basic gradient: 25 μl of formic acid and 250 μl of 25% ammonia solution were added to 250 ml of water. Ultrasonic bath with degassing for 10 min.

Получение подвижной фазы А2 - кислотный градиент: 50 мкл муравьиной кислоты добавляли к 250 мл воды. Ультразвуковая баня с применением дегазации в течение 10 мин.Preparation of mobile phase A2 - acid gradient: 50 μl of formic acid was added to 250 ml of water. Ultrasonic bath with degassing for 10 min.

Подвижная фаза В: суперградиент метанол.Mobile phase B: methanol supergradient.

Методики синтеза.Methods of synthesis.

Интермедиат С-4А: 6-хлор-3 -(3 -метил-2-оксобутилиден)-1 Н-индол-2-он.Intermediate C-4A: 6-chloro-3-(3-methyl-2-oxobutylidene)-1 H-indol-2-one.

В 5 л реакционный сосуд загружали альдол С-3А (1015 г, 3,79 моль, 1 экв.) и добавляли EtOH (2,85 л). Суспензию нагревали до 55°С и одной порцией добавляли 12 М HCl (202 мл, 2,42 моль, 0,64 экв.). Затем нагревание продолжали до температуры кипения этанола. Было обнаружено, что требуется больше EtOH (500 мл) вследствие быстрого осаждения продукта С-4А. Через 1 ч анализ УЭЖХМС показал 98% площади пика продукта. Нагревание прекращали и начинали охлаждение реакционной смеси. Когда температура реакционной смеси достигала 50°С, всю смесь переносили в химический стакан и охлаждали до 0-5°С. Твердый остаток отфильтровывали и промывали 1,3 л холодного EtOH. Твердый продукт высушивали в лабораторной сушилке (40°С) в течение 3 ч и затем высушивали на воздухе в течение ночи. В результате соединение С-4А получали в виде оранжевого твердого вещества (692 г, выход 73%, чистота 98,1% в соответствии с анализом УЭЖХМС).A 5 L reaction vessel was charged with C-3A aldol (1015 g, 3.79 mol, 1 eq) and EtOH (2.85 L) was added. The suspension was heated to 55° C. and 12 M HCl (202 ml, 2.42 mol, 0.64 eq.) was added in one portion. Then heating was continued until the boiling point of ethanol. It was found that more EtOH (500 ml) was required due to the rapid precipitation of the C-4A product. After 1 h, UELCMS analysis showed 98% of the peak area of the product. The heating was stopped and the cooling of the reaction mixture started. When the temperature of the reaction mixture reached 50°C, the entire mixture was transferred to a beaker and cooled to 0-5°C. The solid was filtered off and washed with 1.3 L of cold EtOH. The solid product was dried in a laboratory dryer (40° C.) for 3 h and then air dried overnight. As a result, compound C-4A was obtained as an orange solid (692 g, 73% yield, 98.1% purity according to UELCMS analysis).

Интермедиат С-3А: 6-хлор-3-гидроkси-3-(3-метил-2-оксобутил)-2,3-дигидро-1H-индол-2-он.Intermediate C-3A: 6-chloro-3-hydroxy-3-(3-methyl-2-oxobutyl)-2,3-dihydro-1H-indol-2-one.

- 10 040469- 10 040469

В 15 л реакционный сосуд загружали 6-хлоризатин (1000 г, 5,5 моль, 1 экв.) и EtOH (7 л) и затем добавляли одной порцией 3-метилбутанон (2,94 л, 27,5 моль, 5 экв.). Реакционную смесь нагревали до 40°С и добавляли одной порцией ДЭА (250 мл, 2,41 моль, 0,44 экв.). Затем нагревание продолжали до температуры кипения этанола. Через 1 ч анализ УЭЖХМС показал 71% продукта в реакционной смеси. Нагревание продолжали в течение дополнительного 1 ч, и после этого времени анализ УЭЖХМС показал 93% продукта. Реакционную смесь охлаждали до 50°С, затем всю смесь переносили в круглодонную колбу и все жидкие ингредиенты удаляли. Остаток суспендировали в ДХМ (3,4 л) и нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч. После этого времени нагревание прекращали и добавляли одной порцией н-гексан (2 л). Содержимое колбы охлаждали до приблизительно 5°С и перемешивали в течение 1,5 ч при этой температуре. Полученную смесь отфильтровывали и такое полученное твердое вещество промывали 500 мл смеси ДХМ/н-гексан (1:1) с последующей сушкой на воздухе в течение ночи. В результате ожидаемый альдольный продукт С-3А получали в виде серого твердого вещества (965 г, чистота 98,5% в соответствии с анализом УЭЖХМС). Смесь растворителей после фильтрования сокращали под вакуумом до приблизительно 1,5 л, добавляли н-гексан (700 мл) и полученную суспензию перемешивали в течение 0,5 ч при комнатной температуре. Другое фильтрование с последующим двойным промыванием смесью ДХМ/н-гексан (150 мл, 1:1 для каждого промывания) и сушка на воздухе предоставляла вторую часть альдольного продукта С-3А (50 г, чистота 99,1%). Общий выход альдола С-3А составил 69% (1015 г, чистота 98,5% в соответствии с анализом УЭЖХМС).A 15 L reaction vessel was charged with 6-chloroisatin (1000 g, 5.5 mol, 1 eq) and EtOH (7 L) and then 3-methylbutanone (2.94 L, 27.5 mol, 5 eq) was added in one portion. ). The reaction mixture was heated to 40° C. and DEA (250 ml, 2.41 mol, 0.44 eq.) was added in one portion. Then heating was continued until the boiling point of ethanol. After 1 hour, UELCMS showed 71% product in the reaction mixture. Heating was continued for an additional 1 hour, and after this time the analysis UPLCMS showed 93% of the product. The reaction mixture was cooled to 50°C, then the entire mixture was transferred to a round bottom flask and all liquid ingredients were removed. The residue was suspended in DCM (3.4 L) and heated under reflux for 1 hour. After this time, heating was stopped and n-hexane (2 L) was added in one portion. The contents of the flask were cooled to approximately 5°C and stirred for 1.5 h at this temperature. The resulting mixture was filtered, and this resulting solid was washed with 500 ml of a DCM/n-hexane (1:1) mixture, followed by air drying overnight. As a result, the expected aldol product C-3A was obtained as a gray solid (965 g, 98.5% purity according to UELCMS analysis). The solvent mixture after filtration was reduced under vacuum to approximately 1.5 L, n-hexane (700 ml) was added and the resulting suspension was stirred for 0.5 h at room temperature. Another filtration followed by double washing with DCM/n-hexane (150 ml, 1:1 for each wash) and air drying provided a second portion of C-3A aldol product (50 g, 99.1% pure). The overall yield of C-3A aldol was 69% (1015 g, 98.5% purity according to UELCMS analysis).

Интермедиат С-4В: 6-хлор-3 -(3 -метил-2-оксопентилиден)-2,3-дигидро-1 Н-индол-2-он.Intermediate C-4B: 6-chloro-3-(3-methyl-2-oxopentylidene)-2,3-dihydro-1 H-indol-2-one.

НH

В 250 мл реакционную колбу загружали альдол С-3В (11 г, 39 ммоль, 1 экв.) и добавляли одной порцией EtOH (32 мл). Суспензию нагревали до 55°С и добавляли одной порцией 12 М HCl (1,63 мл, 19,5 ммоль, 0,5 экв.). Затем нагревание продолжали до температуры кипения этанола. Через 1 ч анализ УЭЖХМС показал 98% продукта. Реакционную смесь охлаждали до 0-5°С и перемешивали в течение 0,5 ч. Твердый остаток отфильтровывали и промывали небольшой порцией холодного EtOH. Твердый продукт высушивали на воздухе в течение ночи. В результате соединение С-4В получали в виде оранжевого твердого вещества (5 г, выход 49%, чистота 99% в соответствии с анализом УЭЖХМС).A 250 ml reaction flask was charged with C-3B aldol (11 g, 39 mmol, 1 eq.) and EtOH (32 ml) was added in one portion. The suspension was heated to 55° C. and 12 M HCl (1.63 ml, 19.5 mmol, 0.5 eq.) was added in one portion. Then heating was continued until the boiling point of ethanol. After 1 hour, UELCMS showed 98% product. The reaction mixture was cooled to 0-5°C and stirred for 0.5 h. The solid residue was filtered off and washed with a small portion of cold EtOH. The solid product was air dried overnight. As a result, compound C-4B was obtained as an orange solid (5 g, 49% yield, 99% purity according to UELCMS analysis).

Интермедиат С-3В: 6-хлор-3 -гидрокси-3 -(3 -метил-2-оксопентил)-2,3-дигидро-1 Н-индол-2-он.Intermediate C-3B: 6-chloro-3-hydroxy-3-(3-methyl-2-oxopentyl)-2,3-dihydro-1 H-indol-2-one.

ОABOUT

В круглодонной колбе (250 мл) 6-хлоризатин (15 г, 83 ммоль, 1 экв.) суспендировали в EtOH (70 мл) и затем добавляли одной порцией 3-метилпент-2-он (51,3 мл, 415 ммоль, 5 экв.). Реакционную смесь нагревали до 40°С и добавляли одной порцией ДЭА (4,34 мл, 42 моль, 0,5 экв.). Затем нагревание продолжали до температуры кипения этанола. Через 1 ч анализ УЭЖХМС показал 60% продукта. Нагревание продолжали в течение дополнительных 2 ч, и после этого времени анализ УЭЖХМС показал 99% продукта. После охлаждения до комнатной температуры все жидкие ингредиенты удаляли под вакуумом. Остаток суспендировали в AcOEt (50 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После этого времени содержимое колбы охлаждали до приблизительно 5°С и перемешивали в течение 1,5 ч при данной температуре. Полученную смесь отфильтровывали и такое полученное твердое вещество промывали небольшим количеством холодного EtOH с последующей сушкой на воздухе в течение ночи. В результате ожидаемый альдольный продукт С-3В получали в виде светло-коричневого твердого вещества (5,1 г, чистота 98,5% в соответствии с анализом УЭЖХМС). После фильтрования остаток предварительно адсорбировали на силикагеле и очищали с помощью флэш-хроматографии (от 30 до 60% AcOEt в н-гексане). После хроматографии вторую часть продукта С-3В получали в виде светло-коричневого твердого вещества (5,9 г) с чистотой 97% (в соответствии с анализом УЭЖХМС). Общий выход альдола С-3В составил 47% (11 г, чистота 98% в соответствии с анализом УЭЖХМС).In a round bottom flask (250 ml) 6-chloroisatin (15 g, 83 mmol, 1 eq.) was suspended in EtOH (70 ml) and then 3-methylpent-2-one (51.3 ml, 415 mmol, 5 equiv.). The reaction mixture was heated to 40° C. and DEA (4.34 ml, 42 mol, 0.5 eq.) was added in one portion. Then heating was continued until the boiling point of ethanol. After 1 hour, UELCMS showed 60% product. Heating was continued for an additional 2 hours, and after this time analysis UPLCMS showed 99% of the product. After cooling to room temperature, all liquid ingredients were removed under vacuum. The residue was suspended in AcOEt (50 ml) and stirred at room temperature for 1 hour. After this time, the contents of the flask were cooled to approximately 5°C and stirred for 1.5 hours at this temperature. The resulting mixture was filtered, and this resulting solid was washed with a small amount of cold EtOH, followed by air drying overnight. As a result, the expected aldol product C-3B was obtained as a light brown solid (5.1 g, 98.5% purity by UELCMS analysis). After filtration, the residue was pre-adsorbed on silica gel and purified by flash chromatography (30 to 60% AcOEt in n-hexane). After chromatography, the second part of the product C-3B was obtained as a light brown solid (5.9 g) with a purity of 97% (according to the analysis of UPLCMS). The overall yield of C-3B aldol was 47% (11 g, 98% purity according to UELCMS analysis).

Интермедиат С-6А: N-(3-хлорфенил)проп-2-инамид.Intermediate С-6А: N-(3-chlorophenyl)prop-2-inamide.

- 11 040469- 11 040469

В 2 л двугорлой круглодонной колбе, снабженной механической мешалкой 3-хлоранилин (75 г, 590 ммоль, 1 экв.) растворяли в 500 мл ДХМ (ВЭЖХ степени чистоты). Затем добавляли по каплям проп-2-иновую кислоту (53,5 г, 760 ммоль, 1,3 экв.), растворенную в 100 мл ДХМ (появлялась соль амина). На следующей стадии EDC-HCl (145 г, 760 ммоль, 1,3 экв.) добавляли несколькими порциями (во время добавления реакционную колбу охлаждали на ледяной бане, чтобы избежать дефлегмации ДХМ). После полного добавления EDC-HCl реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре и затем смесь медленно переносили в химический стакан, содержащий 500 мл воды и 250 г льда. Перемешивание продолжали при 0-5°С в течение приблизительно 15 мин и затем белый осадок отфильтровывали, промывали 100 мл холодной воды и высушивали на воздухе. В результате ожидаемый амид С-6А получали в виде белого твердого вещества (102 г, выход 96,6%, чистота 96,3% в соответствии с анализом УЭЖХМС).In a 2 L two-necked round bottom flask equipped with a mechanical stirrer, 3-chloroaniline (75 g, 590 mmol, 1 eq.) was dissolved in 500 ml DCM (HPLC grade). Prop-2-ic acid (53.5 g, 760 mmol, 1.3 eq.) dissolved in 100 ml DCM was then added dropwise (amine salt appeared). In the next step, EDC-HCl (145 g, 760 mmol, 1.3 eq.) was added in several portions (the reaction flask was cooled in an ice bath during the addition to avoid refluxing with DCM). After complete addition of EDC-HCl, the reaction mixture was stirred for 2 h at room temperature and then the mixture was slowly transferred into a beaker containing 500 ml of water and 250 g of ice. Stirring was continued at 0-5° C. for approximately 15 minutes and then the white precipitate was filtered off, washed with 100 ml of cold water and air dried. As a result, the expected amide C-6A was obtained as a white solid (102 g, 96.6% yield, 96.3% purity according to UELCMS analysis).

Интермедиат С-6В: N-(5-хлор-2-фторфенил)проп-2-инамид.Intermediate C-6B: N-(5-chloro-2-fluorophenyl)prop-2-inamide.

CI ά кCI ά to

FF

Проп-2-иновую кислоту (15,16 г, 216,4 ммоль, 1,05 экв.) добавляли одной порцией к перемешиваемому раствору 5-хлор-2-фторанилина (30 г, 206,1 ммоль, 1 экв.) в толуоле (400 мл), который охлаждали на ледяной/водяной бане. Смесь перемешивали в течение 15 мин, затем порциями добавляли ДЦК (44,65 г, 216,4 ммоль, 1,05 экв.), поддерживая температуру ниже 10°С. Перемешивание продолжали при 5°С в течение 2 ч, затем твердый DCU собирали фильтрованием и промывали толуолом (150 мл) и окончательно смесью AcOEt/н-гексан (150 мл, 1:9). Фильтрат концентрировали до объема приблизительно 100 мл и перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре. Полученный осадок собирали фильтрованием, промывали смесью толуол/н-гексан (20 мл, 1:1), н-гексаном (20 мл) и высушивали на воздухе в течение 16 ч с получением 15,29 г целевого продукта в виде белого твердого вещества. Фильтрат помещали в холодильник на 3 ч и полученный осадок собирали фильтрованием, промывали смесью толуол/нгексан (20 мл, 1:1), н-гексаном (20 мл) и высушивали на воздухе в течение 16 ч с получением 13,29 г амида С-6В. Фильтрат концентрировали до объема приблизительно 20 мл и затем при перемешивании медленно добавляли гексан (400 мл). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 30 мин и горячий раствор отфильтровывали, концентрировали до приблизительно 100 мл и помещали в холодильник на 18 ч. Полученный осадок собирали фильтрованием, промывали н-гексаном (2x20 мл) и высушивали на воздухе в течение 16 ч с получением дополнительно 7,19 г амида С-6В. Общий выход продукта С-В6 составил 88% (35,77 г).Prop-2-ic acid (15.16 g, 216.4 mmol, 1.05 eq.) was added in one portion to a stirred solution of 5-chloro-2-fluoroaniline (30 g, 206.1 mmol, 1 eq.) in toluene (400 ml) which was cooled in an ice/water bath. The mixture was stirred for 15 minutes, then DCC (44.65 g, 216.4 mmol, 1.05 eq.) was added portionwise while maintaining the temperature below 10°C. Stirring was continued at 5°C for 2 h, then the solid DCU was collected by filtration and washed with toluene (150 ml) and finally with AcOEt/n-hexane (150 ml, 1:9). The filtrate was concentrated to a volume of approximately 100 ml and stirred for 15 minutes at room temperature. The resulting precipitate was collected by filtration, washed with toluene/n-hexane (20 ml, 1:1), n-hexane (20 ml) and air-dried for 16 hours to give 15.29 g of the title product as a white solid. The filtrate was placed in a refrigerator for 3 hours and the resulting precipitate was collected by filtration, washed with toluene/nhexane (20 ml, 1:1), n-hexane (20 ml) and air-dried for 16 hours to give 13.29 g of amide C -6V. The filtrate was concentrated to a volume of approximately 20 ml and then hexane (400 ml) was added slowly with stirring. The mixture was heated at reflux for 30 min and the hot solution was filtered, concentrated to approximately 100 ml and placed in a refrigerator for 18 h. The resulting precipitate was collected by filtration, washed with n-hexane (2x20 ml) and air dried for 16 h to obtain an additional 7.19 g of C-6B amide. The overall yield of product C-B6 was 88% (35.77 g).

Интермедиат С-6С: N-(5-хлор-2-метилфенил)проп-2-инамид.C-6C intermediate: N-(5-chloro-2-methylphenyl)prop-2-inamide.

CI rS ?CI rs?

В 2 л двугорлой круглодонной колбе, снабженной механической мешалкой 5-хлор-2-метиланилин (75 г, 530 ммоль, 1 экв.) растворяли в 1000 мл ДХМ (ВЭЖХ степени чистоты). Затем по каплям добавляли проп-2-иновую кислоту (49 г, 690 ммоль, 1,3 экв.), растворенную в 100 мл ДХМ (ВЭЖХ степени чистоты) (появлялась соль амина). На следующей стадии EDC-HCl добавляли несколькими порциями (во время добавления реакционную колбу охлаждали на ледяной бане, чтобы избежать дефлегмации ДХМ). После полного добавления EDC-HCl реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Всю смесь переносили в химический стакан, содержащий 750 мл воды и 250 г льда. Перемешивание продолжали при 0-5°С в течение приблизительно 15 мин и затем белый осадок отфильтровывали, промывали 100 мл холодной воды и высушивали на воздухе. В результате ожидаемый амид С-6С получали в виде белого твердого вещества (81 г, выход 80%, чистота 99,1% в соответствии с анализом УЭЖХМС).In a 2 L two-necked round bottom flask equipped with a mechanical stirrer, 5-chloro-2-methylaniline (75 g, 530 mmol, 1 eq.) was dissolved in 1000 ml DCM (HPLC grade). Prop-2-ic acid (49 g, 690 mmol, 1.3 eq.) dissolved in 100 ml DCM (HPLC grade) was then added dropwise (amine salt appeared). In the next step, EDC-HCl was added in several portions (during the addition, the reaction flask was cooled in an ice bath to avoid refluxing with DCM). After complete addition of EDC-HCl, the reaction mixture was stirred for 1 h at room temperature. The entire mixture was transferred to a beaker containing 750 ml of water and 250 g of ice. Stirring was continued at 0-5° C. for approximately 15 minutes and then the white precipitate was filtered off, washed with 100 ml of cold water and air dried. As a result, the expected C-6C amide was obtained as a white solid (81 g, 80% yield, 99.1% purity by UELCMS analysis).

Интермедиат C-6D: N-(3-хлор-4-фторфенил)проп-2-инамид.Intermediate C-6D: N-(3-chloro-4-fluorophenyl)prop-2-inamide.

- 12 040469- 12 040469

В 1 л двугорлую круглодонную колбу, снабженную магнитной мешалкой и термометром, добавляли 3-хлор-4-фторанилин (14,8 г, 100 ммоль, 1 экв.) с последующим добавлением ДХМ (200 мл, ВЭЖХ степени чистоты) и проп-2-иновой кислоты (9,1 г, 130 ммоль, 1,3 экв.). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли EDC-HCl (25,2 г, 130 ммоль, 1,3 экв.) несколькими порциями. Реакция является экзотермической, и следует избегать превышения +5°С во время добавления. После полного добавления EDC-HCl смесь перемешивали в течение 1 ч при 5°С. После этого времени ледяную баню удаляли и к реакционной смеси добавляли 200 мл холодной воды. Реакционную смесь перемешивали в течение приблизительно 0,5 ч, полученный осадок отфильтровывали и промывали 100 мл холодной воды. Полученное таким образом твердое вещество повторно растворяли в хлороформе и раствор промывали водой, высушивали над Na2SO4 и растворитель испаряли досуха. Полученный продукт высушивали под вакуумом. В результате ожидаемый амид C-6D получали в виде светло-желтого твердого вещества (19,2 г, выход 98%, чистота 98% в соответствии с анализом УЭЖХМС).To a 1 L two-necked round bottom flask equipped with a magnetic stirrer and thermometer was added 3-chloro-4-fluoroaniline (14.8 g, 100 mmol, 1 eq.) followed by DCM (200 ml, HPLC grade) and prop-2 -ic acid (9.1 g, 130 mmol, 1.3 eq.). The reaction mixture was cooled to 0° C. and EDC-HCl (25.2 g, 130 mmol, 1.3 eq.) was added in several portions. The reaction is exothermic and exceeding +5°C during the addition should be avoided. After complete addition of EDC-HCl, the mixture was stirred for 1 h at 5°C. After this time, the ice bath was removed and 200 ml of cold water was added to the reaction mixture. The reaction mixture was stirred for about 0.5 h, the resulting precipitate was filtered off and washed with 100 ml of cold water. The solid thus obtained was redissolved in chloroform and the solution was washed with water, dried over Na 2 SO 4 and the solvent was evaporated to dryness. The resulting product was dried under vacuum. As a result, the expected amide C-6D was obtained as a light yellow solid (19.2 g, 98% yield, 98% purity according to UPLCMS analysis).

Интермедиат С-6Е: N-(3,4-дифторфенил)проп-2-иминамид.Intermediate C-6E: N-(3,4-difluorophenyl)prop-2-iminamide.

В 1 л двугорлую круглодонную колбу, снабженную магнитной мешалкой и термометром, добавляли 3,4-дифторанилин (12,9 г, 9,9 мл, 100 ммоль, 1 экв.) с последующим добавлением ДХМ (300 мл, ВЭЖХ степени чистоты) и проп-2-иновой кислоты (9,1 г, 130 ммоль, 1,3 экв.). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли EDC-HCl (24,9 г, 130 ммоль, 1,3 экв.) несколькими порциями. Реакция является экзотермической, и следует избегать превышения +5°С во время добавления. После полного добавления EDC-HCl смесь перемешивали в течение 1 ч при 5°С. После этого времени ледяную баню удаляли и к реакционной смеси добавляли 300 мл холодной воды. Реакционную смесь перемешивали в течение приблизительно 0,5 ч, полученный осадок отфильтровывали и промывали 100 мл холодной воды. Полученное таким образом твердое вещество повторно растворяли в AcOEt и раствор промывали водой, высушивали над Na2SO4 и растворитель испаряли досуха. Затем продукт промывали 10 мл холодного ДХМ и высушивали под вакуумом. В результате ожидаемый амид С-6Е получали в виде белого с сероватым или желтоватым оттенком твердого вещества (17,3 г, выход 96%, чистота 100% в соответствии с анализом УЭЖХМС).3,4-difluoroaniline (12.9 g, 9.9 ml, 100 mmol, 1 eq.) was added to a 1 L two-necked round bottom flask equipped with a magnetic stirrer and thermometer, followed by DCM (300 ml, HPLC grade) and prop-2-ic acid (9.1 g, 130 mmol, 1.3 eq.). The reaction mixture was cooled to 0° C. and EDC-HCl (24.9 g, 130 mmol, 1.3 eq.) was added in several portions. The reaction is exothermic and exceeding +5°C during the addition should be avoided. After complete addition of EDC-HCl, the mixture was stirred for 1 h at 5°C. After this time, the ice bath was removed and 300 ml of cold water was added to the reaction mixture. The reaction mixture was stirred for about 0.5 h, the resulting precipitate was filtered off and washed with 100 ml of cold water. The solid thus obtained was redissolved in AcOEt and the solution was washed with water, dried over Na 2 SO 4 and the solvent was evaporated to dryness. The product was then washed with 10 ml of cold DCM and dried under vacuum. As a result, the expected amide C-6E was obtained as a white with a grayish or yellowish tinge of a solid (17.3 g, yield 96%, purity 100% according to UPLCMS analysis).

Интермедиат C-6F: N-(5-хлор-2,4-дифторфенил)проп-2-инамид.Intermediate C-6F: N-(5-chloro-2,4-difluorophenyl)prop-2-ynamide.

В 500 мл двугорлой круглодонной колбе, снабженной магнитной мешалкой, 5-хлор-2,4дифторанилин (10 г, 61 ммоль, 1 экв.) растворяли в ДХМ (150 мл, ВЭЖХ степени чистоты). Затем по каплям добавляли проп-2-иновую кислоту (5,5 г, 78 ммоль, 1,3 экв.) (появлялась соль амина). Затем добавляли несколько порций EDC-HCl (14 г, 78 ммоль, 1,3 экв.). (Во время добавления реакционную колбу охлаждали на ледяной бане для поддержания комнатной температуры.) После полного добавления EDC-HCl реакционную смесь перемешивали в течение еще 1 ч при комнатной температуре. После этого времени добавляли 150 мл воды и смесь переносили в делительную воронку. Фазы разделяли. Водную фазу дважды экстрагировали ДХМ (2x100 мл). Органические фракции объединяли, промывали солевым раствором, высушивали над MgSO4 и концентрировали до приблизительно 50 мл под вакуумом с получением густой суспензии. Твердые вещества отфильтровывали и высушивали с получением 8 г кремовых кристаллов. Фильтрат концентрировали и затем очищали с помощью флэш-хроматографии (нгексан/AcOEt; 8:1 —>5:1) с получением дополнительных 4,4 г амида C-6F. В результате ожидаемый амид C-6F получали в виде кремового твердого вещества (12,4 г, выход 94%, чистота 100% в соответствии с анализом УЭЖХМС).In a 500 ml two-neck round bottom flask equipped with a magnetic stirrer, 5-chloro-2,4-difluoroaniline (10 g, 61 mmol, 1 eq.) was dissolved in DCM (150 ml, HPLC grade). Prop-2-ic acid (5.5 g, 78 mmol, 1.3 eq.) was then added dropwise (amine salt appeared). Then several portions of EDC-HCl (14 g, 78 mmol, 1.3 eq.) were added. (During the addition, the reaction flask was cooled in an ice bath to maintain room temperature.) After complete addition of EDC-HCl, the reaction mixture was stirred for another 1 h at room temperature. After this time, 150 ml of water was added and the mixture was transferred to a separating funnel. The phases were separated. The aqueous phase was extracted twice with DCM (2x100 ml). The organic fractions were combined, washed with brine, dried over MgSO 4 and concentrated to approximately 50 ml under vacuum to obtain a thick suspension. The solids were filtered off and dried to give 8 g of creamy crystals. The filtrate was concentrated and then purified by flash chromatography (nhexane/AcOEt; 8:1->5:1) to give an additional 4.4 g of amide C-6F. As a result, the expected amide C-6F was obtained as an off-white solid (12.4 g, 94% yield, 100% purity according to UELCMS analysis).

Интермедиат С-7А: 5-амино-2,4-диметоксипиримидин.Intermediate C-7A: 5-amino-2,4-dimethoxypyrimidine.

В стеклянный реактор QianCap (1850 мл), снабженный магнитной мешалкой, добавляли С-7А2 (100 г, 540 ммоль) с последующим добавлением ТГФ (800 мл). Затем 10% палладий на угле (2 г) добавляли одной порцией и реактор соединяли с источником водорода. Давление водорода устанавливали на уровнеTo a QianCap glass reactor (1850 ml) equipped with a magnetic stirrer was added C-7A2 (100 g, 540 mmol) followed by THF (800 ml). Then 10% palladium on carbon (2 g) was added in one portion and the reactor was connected to a source of hydrogen. The hydrogen pressure was set at the level

- 13 040469 бар и реакционную смесь тщательно перемешивали в течение 16 ч при непрерывном потоке водорода. После этого времени анализ УЭЖХМС показал полное превращение исходного материала. Реакционную смесь отфильтровывали через слой целита и фильтрат концентрировали под вакуумом до приблизительно 150-200 мл. Затем по каплям добавляли н-гексан (500 мл) и суспензию перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Осадок отфильтровывали, дважды промывали н-гексаном (2x50 мл) и высушивали под вакуумом. В результате получали амин С-7А в виде желтого/зеленого твердого вещества (77,94 г, выход 93%, чистота 99% в соответствии с анализом УЭЖХМС).- 13 040469 bar and the reaction mixture was thoroughly stirred for 16 h with a continuous flow of hydrogen. After this time, UELCMS analysis showed complete conversion of the starting material. The reaction mixture was filtered through a pad of celite and the filtrate was concentrated in vacuo to about 150-200 ml. Then n-hexane (500 ml) was added dropwise and the suspension was stirred for 2 hours at room temperature. The precipitate was filtered off, washed twice with n-hexane (2x50 ml) and dried under vacuum. This gave amine C-7A as a yellow/green solid (77.94 g, 93% yield, 99% purity by UPLCMS analysis).

Интермедиат С-7А2: 2,4-диметокси-5-нитропиримидин.Intermediate C-7A2: 2,4-dimethoxy-5-nitropyrimidine.

NO2 fl I Ν^ΝNO 2 fl I N^N

В 2 л трехгорлую круглодонную колбу, содержащую термометр, конденсатор воды, соединение с источником инертного газа (аргона) и механическую мешалку, добавляли метанол (1 л, ВЭЖХ степени чистоты) и в атмосфере аргона небольшие кусочки натрия (65 г, 2,83 моль, 2,2 экв.) медленно добавляли в течение приблизительно 1 ч при хорошем перемешивании (реакция является экзотермической, но реакционную смесь не охлаждали; обычно добавляли другой кусочек натрия, когда первый израсходовали). После растворения всей порции натрия реакционную смесь охлаждали до -5°С и осторожно добавляли (приблизительно 40 мин) свежеприготовленную суспензию С-7А1 (250 г, 1,29 моль, 1 экв.) в метаноле (500 мл, ВЭЖХ степени чистоты) небольшими порциями при тщательном перемешивании. (Внимание: реакция является очень экзотермической), следует избегать превышения +10°С во время добавления. Кроме того, в ходе реакции образовывалось много твердого продукта. После добавления всего количества суспензии субстрата реакционную смесь выдерживали при 0-5°С в течение приблизительно 0,5 ч и затем ее оставляли нагреваться до комнатной температуры (обычно это занимало приблизительно 2 ч). После этого времени анализ УЭЖХМС показал полное расходование субстрата. Затем реакционную смесь охлаждали до приблизительно 5°С, твердый продукт отфильтровывали и промывали небольшим количеством (100 мл) холодного метанола. Неочищенный продукт помещали в химический стакан с водой (1 л) и тщательно суспендировали механической мешалкой (приблизительно 10 мин тщательного перемешивания). Затем суспензию отфильтровывали и полученное твердое вещество промывали водой (500 мл), нгексаном (200 мл) и сушили на воздухе в течение ночи. В результате получали 211,5 г соединения С-7А2 в виде светло-желтого твердого вещества (выход 88%, чистота 99% в соответствии с анализом УЭЖХМС).To a 2 L three-necked round-bottom flask containing a thermometer, a water condenser, a connection to an inert gas (argon) source and a mechanical stirrer, was added methanol (1 L, HPLC grade) and small pieces of sodium (65 g, 2.83 mol) under argon. , 2.2 eq.) was added slowly over about 1 hour with good stirring (the reaction is exothermic, but the reaction mixture was not cooled; another piece of sodium was usually added when the first one was used up). After dissolving the entire portion of sodium, the reaction mixture was cooled to -5°C and a freshly prepared suspension of C-7A1 (250 g, 1.29 mol, 1 eq.) in methanol (500 ml, HPLC grade) was carefully added (approximately 40 min.) portions with thorough mixing. (Caution: the reaction is very exothermic), avoid exceeding +10°C during the addition. In addition, a lot of solid product was formed during the reaction. After all of the substrate slurry had been added, the reaction mixture was held at 0-5° C. for about 0.5 h and then allowed to warm to room temperature (usually this took about 2 h). After this time, UELCMS analysis showed complete consumption of the substrate. Then the reaction mixture was cooled to approximately 5°C, the solid product was filtered off and washed with a small amount (100 ml) of cold methanol. The crude product was placed in a beaker with water (1 L) and thoroughly suspended with a mechanical stirrer (approximately 10 minutes of thorough mixing). The suspension was then filtered and the resulting solid was washed with water (500 ml), nhexane (200 ml) and air dried overnight. This yielded 211.5 g of C-7A2 as a light yellow solid (yield 88%, purity 99% according to UELCMS analysis).

Интермедиат С-7В: 5-амино-2,4-диметоксипиридин.Intermediate C-7B: 5-amino-2,4-dimethoxypyridine.

NH? % хоNH ? % x o

В стеклянный реактор QianCap (1850 мл), снабженный магнитной мешалкой, добавляли С-7В2 (40 г, 217 ммоль) с последующим добавлением ТГФ (500 мл). Затем 10% палладий на угле (1,5 г) добавляли одной порцией и реактор соединяли с источником водорода. Давление водорода устанавливали на уровне 2 бар и реакционную смесь тщательно перемешивали в течение 7 ч при непрерывном потоке водорода. После этого времени анализ УЭЖХМС показал полное превращение исходного материала. Реакционную смесь отфильтровывали через слой целита и фильтрат концентрировали под вакуумом. В результате получали амин С-7В в виде коричневого твердого вещества (33 г, выход 99%).To a QianCap glass reactor (1850 mL) equipped with a magnetic stirrer was added C-7B2 (40 g, 217 mmol) followed by THF (500 mL). Then 10% palladium on carbon (1.5 g) was added in one portion and the reactor was connected to a source of hydrogen. The hydrogen pressure was set at 2 bar and the reaction mixture was thoroughly stirred for 7 hours with a continuous flow of hydrogen. After this time, UELCMS analysis showed complete conversion of the starting material. The reaction mixture was filtered through a pad of celite and the filtrate was concentrated in vacuo. This gave the amine C-7B as a brown solid (33 g, 99% yield).

Интермедиат С-7В2: 2,4-диметокси-5-нитропиридин.Intermediate С-7В2: 2,4-dimethoxy-5-nitropyridine.

NO2 %NO 2 %

В 2 л трехгорлую круглодонную колбу, содержащую термометр, конденсатор воды, соединение с источником инертного газа (аргона) и механическую мешалку, добавляли метанол (900 мл, ВЭЖХ степени чистоты) и в атмосфере аргона небольшие кусочки натрия (26,7 г, 1,16 моль, 2,1 экв.) медленно добавляли в течение приблизительно 1 ч при тщательном перемешивании (внимание: реакция является экзотермической, но реакционную смесь не охлаждали; обычно добавляли другой кусочек натрия, когда первый израсходовали). После растворения всей порции натрия реакционную смесь охлаждали до -5°С и осторожно добавляли (приблизительно 30 мин) свежеприготовленную суспензию соединения С-7В1 (106,25 г, 0,55 моль, 1 экв.) в метаноле (100 мл, ВЭЖХ степени чистоты) небольшими порциями приTo a 2 L three-necked round-bottom flask containing a thermometer, a water condenser, a connection to an inert gas (argon) source, and a mechanical stirrer, was added methanol (900 ml, HPLC grade) and, under argon, small pieces of sodium (26.7 g, 1. 16 mol, 2.1 eq.) was slowly added over about 1 hour with thorough stirring (note: the reaction is exothermic, but the reaction mixture was not cooled; another piece of sodium was usually added when the first one was used up). After dissolving the entire portion of sodium, the reaction mixture was cooled to -5°C and a freshly prepared suspension of compound C-7B1 (106.25 g, 0.55 mol, 1 eq.) in methanol (100 ml, HPLC grade purity) in small portions at

- 14 040469 тщательном перемешивании (внимание: реакция является сильно экзотермической, следует избегать превышения +10°С во время добавления). После добавления всего количества суспензии субстрата С7B1 реакционную смесь выдерживали при 0-5°С в течение приблизительно 40 мин, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали при 40°С в течение 3,5 ч. После этого времени анализ УЭЖХМС показал полное расходование субстрата. Затем реакционную смесь охлаждали до температуры ниже 10°С, твердый продукт отфильтровывали, промывали небольшим количеством (50 мл) холодного метанола, воды (100 мл), н-гексана (100 мл) и высушивали на воздухе в течение ночи. В результате получали 99,3 г соединения С-7В2 в виде светло-желтого твердого вещества (выход 98%, чистота 97% в соответствии с анализом УЭЖХМС).- 14 040469 thorough mixing (note: the reaction is highly exothermic, avoid exceeding +10°C during the addition). After all of the C7B1 substrate slurry had been added, the reaction mixture was kept at 0-5°C for approximately 40 minutes, then warmed to room temperature and stirred at 40°C for 3.5 hours. After this time, UPLCMS analysis indicated complete consumption of the substrate. Then the reaction mixture was cooled to a temperature below 10°C, the solid product was filtered off, washed with a small amount (50 ml) of cold methanol, water (100 ml), n-hexane (100 ml) and dried in air overnight. This yielded 99.3 g of C-7B2 as a light yellow solid (yield 98%, purity 97% according to UELCMS analysis).

Интермедиат С-7С: 5-амино-4-метокси-2-(диметиламино)пиридин.Intermediate С-7С: 5-amino-4-methoxy-2-(dimethylamino)pyridine.

NH? NH ?

А'A'

В стеклянный реактор QianCap (500 мл), снабженный магнитной мешалкой, добавляли С-7С2 (4,5 г, 22,8 моль) с последующим добавлением ТГФ (70 мл) и метанола (70 мл). Затем одной порцией добавляли 10% палладий на угле (0,48 г), реактор соединяли с источником водорода. Давление водорода устанавливали на уровне 2 бар и реакционную смесь тщательно перемешивали в течение 17 ч при непрерывном потоке водорода при комнатной температуре. После этого времени анализ УЭЖХМС показал полное превращение исходного материала. Реакционную смесь отфильтровывали через слой целита и фильтрат концентрировали под вакуумом досуха. В результате получали амин С-7С в виде темного твердого вещества (3,9 г; выход 96%; чистота 95% в соответствии с анализом УЭЖХМС).To a QianCap glass reactor (500 ml) equipped with a magnetic stirrer was added C-7C2 (4.5 g, 22.8 mol) followed by THF (70 ml) and methanol (70 ml). Then 10% palladium on carbon (0.48 g) was added in one portion, the reactor was connected to a source of hydrogen. The hydrogen pressure was set at 2 bar and the reaction mixture was thoroughly stirred for 17 hours with a continuous flow of hydrogen at room temperature. After this time, UELCMS analysis showed complete conversion of the starting material. The reaction mixture was filtered through a pad of celite and the filtrate was concentrated to dryness in vacuo. This gave the C-7C amine as a dark solid (3.9 g; 96% yield; 95% purity by UELCMS analysis).

Интермедиат С-7С2: 4-метокси-2-(диметиламино)-5-нитропиридин.Intermediate С-7С2: 4-methoxy-2-(dimethylamino)-5-nitropyridine.

NO2 NO 2

А'A'

В 0,5 л трехгорлую круглодонную колбу, содержащую термометр, водный конденсатор и капельную воронку, загружали С-7С1 (10 г, 50,4 ммоль, 1 экв.), ТГФ (50 мл) и метанол (200 мл). Всю смесь перемешивали при 22°С в течение 10 мин и затем по каплям добавляли диметиламин (13,7 мл, 60% раствор в воде). Через 1 ч бледно-желтое твердое вещество начало выпадать в осадок. Добавляли следующую порцию диметиламина (2 мл, 60% раствор в воде) и реакцию продолжали в течение еще 24 ч. После этого времени реакционную смесь концентрировали под вакуумом и неочищенный материал суспендировали в метаноле (70 мл) и воде (140 мл). После интенсивного перемешивания в течение 1 ч при 0°С бледножелтое твердое вещество отфильтровывали, промывали небольшим количеством раствора метанол-вода и высушивали под вакуумом. В результате соединение С-7С2 получали в виде бледно-желтого твердого вещества (10 г; выход 100%; чистота 99% в соответствии с анализом УЭЖХМС).A 0.5 L three-necked round bottom flask containing a thermometer, a water condenser and an addition funnel was charged with C-7Cl (10 g, 50.4 mmol, 1 eq.), THF (50 ml) and methanol (200 ml). The whole mixture was stirred at 22° C. for 10 minutes and then dimethylamine (13.7 ml, 60% solution in water) was added dropwise. After 1 hour a pale yellow solid began to precipitate. A further portion of dimethylamine (2 ml, 60% solution in water) was added and the reaction was continued for another 24 hours. After this time, the reaction mixture was concentrated under vacuum and the crude material was suspended in methanol (70 ml) and water (140 ml). After vigorous stirring for 1 hour at 0° C., the pale yellow solid was filtered off, washed with a small amount of methanol-water solution and dried under vacuum. As a result, compound C-7C2 was obtained as a pale yellow solid (10 g; 100% yield; 99% purity according to UELCMS analysis).

Интермедиат C-7D: 5-амино-2,4,6-триметоксипиримидин.Intermediate C-7D: 5-amino-2,4,6-trimethoxypyrimidine.

। NH2 т т। NH 2 t t

NiyNNiyN

В стеклянный реактор QianCap (1850 мл), снабженный магнитной мешалкой, добавляли C-7D3 (46 г, 231 ммоль) с последующим добавлением МеОН (750 мл). Затем одной порцией добавляли 10% палладий на угле (2,5 г) и реактор соединяли с источником водорода. Давление водорода устанавливали на уровне 2 бар и реакционную смесь тщательно перемешивали в течение 24 ч при непрерывном потоке водорода. После этого времени анализ ТСХ показал полное превращение исходного материала. Реакционную смесь отфильтровывали через слой целита и фильтрат концентрировали под вакуумом досуха. В результате амин C-7D получали в виде бежевого твердого вещества (38,3 г, выход 97%, чистота 99% в соответствии с анализом УЭЖХМС).To a QianCap glass reactor (1850 ml) equipped with a magnetic stirrer was added C-7D3 (46 g, 231 mmol) followed by MeOH (750 ml). Then 10% palladium on carbon (2.5 g) was added in one portion and the reactor was connected to a source of hydrogen. The hydrogen pressure was set at 2 bar and the reaction mixture was thoroughly stirred for 24 hours with a continuous flow of hydrogen. After this time, TLC analysis showed complete conversion of the starting material. The reaction mixture was filtered through a pad of celite and the filtrate was concentrated to dryness in vacuo. As a result, amine C-7D was obtained as a beige solid (38.3 g, 97% yield, 99% purity according to UELCMS analysis).

Интермедиат C-7D3: 2,4,6-триметокси-5-нитропиримидин.Intermediate C-7D3: 2,4,6-trimethoxy-5-nitropyrimidine.

I У°2I V°2

ОABOUT

Т it N^NT it N^N

- 15 040469- 15 040469

Метанол (1000 мл) добавляли в 2 л круглодонную колбу, содержащую термометр и магнитную мешалку, и все это охлаждали до 0°С на бане вода/лед. Затем добавляли гидрид натрия (13 г, 327 ммоль, 1,2 экв., 60% в минеральном масле) небольшими порциями в течение 30 мин (внимание: реакция является экзотермической). После 30 мин перемешивания субстрат C-7D2 (60 г, 272 ммоль, 1 экв.) добавляли несколькими порциями. Реакция является сильно экзотермической, и во время добавления реакционную колбу охлаждали на бане вода/лед. Во время реакции наблюдали образование твердого желтого продукта. Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры (1 ч), и после этого времени анализ ТСХ (ДХМ в качестве элюента) показал полное превращение исходного материала. В реакционную смесь добавляли 1 л воды и метанол испаряли. Осадок отфильтровывали, промывали 200 мл н-гексана и высушивали на воздухе. В результате соединение C-7D3 получали в виде желтого твердого вещества (46,5 г, выход 79%, чистота 100% в соответствии с анализом УЭЖХМС).Methanol (1000 ml) was added to a 2 L round bottom flask containing a thermometer and a magnetic stirrer, and the whole was cooled to 0° C. in a water/ice bath. Sodium hydride (13 g, 327 mmol, 1.2 eq., 60% in mineral oil) was then added in small portions over 30 minutes (caution: the reaction is exothermic). After 30 minutes of stirring, substrate C-7D2 (60 g, 272 mmol, 1 eq.) was added in several portions. The reaction is highly exothermic and the reaction flask was cooled in a water/ice bath during the addition. During the reaction, the formation of a solid yellow product was observed. The reaction mixture was allowed to warm to room temperature (1 h) and after this time TLC analysis (DCM as eluent) showed complete conversion of the starting material. 1 L of water was added to the reaction mixture and the methanol was evaporated. The precipitate was filtered off, washed with 200 ml of n-hexane, and dried in air. As a result, compound C-7D3 was obtained as a yellow solid (46.5 g, 79% yield, 100% purity according to UELCMS analysis).

Интермедиат C-7D2: 2-хлор-4,6-диметокси-5-нитропиримидин.Intermediate C-7D2: 2-chloro-4,6-dimethoxy-5-nitropyrimidine.

I ?°2I?°2

IO О.IO O.

г ¥ Ν^Ν Clg ¥ N^N Cl

В 0,5 л двухгорлую круглодонную колбу, содержащую термометр и снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение C-7D1 (50 г, 286 ммоль, 1 экв.) с последующим добавлением ТФУА (80 мл, 572 ммоль, 2 экв.)/ДХМ смесь (1:1). Затем смесь охлаждали на бане солевой раствор-лед до -5°С. Концентрированную дымящую азотную кислоту (14,3 мл, 343 ммоль, 1,2 экв.) добавляли по каплям к тщательно перемешиваемой смеси (внимание: реакция является сильно экзотермической) при такой температуре, чтобы не превышать +40°С. В ходе реакции образовывалось много твердого продукта. После добавления всего количества азотной кислоты реакционную смесь оставляли до достижения комнатной температуры. После этого времени анализ ТСХ показал полное расходование субстрата (аликвота, которую гасили водой и экстрагировали ДХМ; планшет элюировали ДХМ). Полученный густой белый осадок выливали на лед и перемешивание продолжали в течение 10 мин. Водный раствор экстрагировали ДХМ (3x100 мл).Compound C-7D1 (50 g, 286 mmol, 1 eq.) was added to a 0.5 L two-necked round-bottom flask containing a thermometer and equipped with a magnetic stirrer followed by TFAA (80 ml, 572 mmol, 2 eq.)/DCM mixture (1:1). The mixture was then cooled in a brine-ice bath to -5°C. Concentrated fuming nitric acid (14.3 ml, 343 mmol, 1.2 eq.) was added dropwise to the thoroughly stirred mixture (note: the reaction is highly exothermic) at such a temperature not to exceed +40°C. During the reaction, a lot of solid product was formed. After adding the entire amount of nitric acid, the reaction mixture was left to reach room temperature. After this time, TLC analysis showed complete consumption of the substrate (an aliquot which was quenched with water and extracted with DCM; the plate was eluted with DCM). The resulting thick white precipitate was poured onto ice and stirring was continued for 10 minutes. The aqueous solution was extracted with DCM (3x100 ml).

Объединенные органические слои затем промывали насыщенным водным раствором NaHCO3 до тех пор, пока промывные растворы не оставались при рН 7. Раствор высушивали над MgSO4 и растворитель удаляли под вакуумом с получением желто-белого кристаллического соединения C-7D2 (61 г, выход 97%, чистота 99% в соответствии с анализом УЭЖХМС).The combined organic layers were then washed with saturated aqueous NaHCO 3 until the washings remained at pH 7. The solution was dried over MgSO 4 and the solvent was removed under vacuum to give a yellow-white crystalline compound C-7D2 (61 g, 97% yield , purity 99% according to UELCMS analysis).

Соединение (1), С1: (3S)-6-хлор-2'-(3-хлорфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-c]пиррол]-2,3'-дион.Compound (1), C1: (3S)-6-chloro-2'-(3-chlorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan-2yl)-1, 2,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

CICI

НH

Указанное в заголовке соединение получали после разделения с помощью препаративной хиральной СФХ (способ А) или хиральной ОФ-ВЭЖХ (способ R) рацемического соединения С-10.С1; >99% э.и.; tr: 7,77 мин (способ R'); 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО^) δ 11,18 (с, 1H), 8,55-8,42 (м, 1H), 7,37 (с, 1H), 7,36-7,27 (м, 2Н), 7,14 (с, 1H), 7,08 (дд, J=8,1, 1,9 Гц, 1H), 6,98 (д, J= 7,8 Гц, 1H), 6,93 (д, J= 1,9 Гц, 1H), 3,98 (с, 3Н), 3,94 (уш.с, 3Н), 2,43 (сеп, J= 7,0 Гц, 1H), 0,86 (д, J= 7,0 Гц, 3Н), 0,43 (д, J= 7,0 Гц, 3Н); 13С ЯМР (126 МГц, ДМСО-d6) δ 175,42, 166,58, 164,87, 164,85, 157,89, 144,17, 138,80, 135,26, 134,00, 133,38, 130,76, 127,52, 127,42, 127,30, 126,96, 126,02, 123,70, 123,04, 120,65, 118,41, 116,45, 111,18, 70,20, 55,52, 54,85, 25,47, 21,41, 21,25.The title compound was obtained after resolution by preparative chiral SFC (method A) or chiral RP-HPLC (method R) of racemic compound C-10.C1; >99% e.i.; tr: 7.77 min (method R'); 1 H NMR (500 MHz, DMSO^) δ 11.18 (s, 1H), 8.55-8.42 (m, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.36-7.27 ( m, 2H), 7.14 (s, 1H), 7.08 (dd, J=8.1, 1.9 Hz, 1H), 6.98 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 6.93 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.94 (br.s, 3H), 2.43 (sep, J= 7.0 Hz, 1H ), 0.86 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 0.43 (d, J= 7.0 Hz, 3H); 13 C NMR (126 MHz, DMSO-d6) δ 175.42, 166.58, 164.87, 164.85, 157.89, 144.17, 138.80, 135.26, 134.00, 133, 38, 130.76, 127.52, 127.42, 127.30, 126.96, 126.02, 123.70, 123.04, 120.65, 118.41, 116.45, 111.18, 70.20, 55.52, 54.85, 25.47, 21.41, 21.25.

Соединение С-10.С1: 6-хлор-2'-(3-хлорфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2-ил)1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.Compound C-10.C1: 6-chloro-2'-(3-chlorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan-2-yl)1,2,3 ',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

ClCl

мл ТФУК помещали в 100 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой. Затем добавляли несколькими порциями интермедиат С-9.С1 (17,8 г, 30,6 ммоль) и реакционную смесь энергично перемеml of TFA was placed in a 100 ml flask equipped with a magnetic stirrer. Then intermediate С-9.С1 (17.8 g, 30.6 mmol) was added in several portions and the reaction mixture was vigorously stirred.

- 16 040469 шивали в течение 3 ч при 40°С. После этого времени анализ УЭЖХМС показал 89% пика продукта с некоторыми незначительными пиками от примесей. Большую часть кислоты затем испаряли и остаток растворяли в ДХМ (100 мл). Добавляли 100 мл воды и смесь обрабатывали 3 М NaOH до рН 8. Фазы разделяли и водную фазу экстрагировали ДХМ (2x100 мл). Объединенные органические фазы промывали солевым раствором (30 мл), высушивали над MgSO4 и испаряли досуха с получением 18 г бежевого твердого соединения С-10.С1 с чистотой 90%. Неочищенный продукт С-10.С1 растворяли в 50 мл метанола (ВЭЖХ степени чистоты). Затем по каплям добавляли 25% раствор метоксида натрия (10 мл) в течение 10 мин и смесь перемешивали при комнатной температуре. Через 24 ч анализ УЭЖХМС показал 97% ожидаемого продукта С-10.С1. Смесь концентрировали до половины объема, медленно переносили в перемешиваемую смесь льда (100 г) и затем подкисляли 3 М HCl до нейтрального рН. Осадок отфильтровывали, промывали 50 мл воды и высушивали под вакуумом с получением соединения С-10.С1 в виде бежево-оранжевого твердого вещества (14,5 г, выход 84%, чистота 98% в соответствии с анализом УЭЖХМС).- 16 040469 were sewn for 3 hours at 40°C. After this time UPLCMS analysis showed 89% of the product peak with some minor peaks from impurities. Most of the acid was then evaporated and the residue was dissolved in DCM (100 ml). Added 100 ml of water and the mixture was treated with 3 M NaOH to pH 8. The phases were separated and the aqueous phase was extracted with DCM (2x100 ml). The combined organic phases were washed with brine (30 ml), dried over MgSO 4 and evaporated to dryness to give 18 g of a beige solid compound C-10.C1 with a purity of 90%. The crude product C-10.C1 was dissolved in 50 ml of methanol (HPLC grade). Then, 25% sodium methoxide solution (10 ml) was added dropwise over 10 minutes and the mixture was stirred at room temperature. After 24 hours, UELCMS showed 97% of the expected product C-10.C1. The mixture was concentrated to half volume, slowly transferred to a stirred mixture of ice (100 g) and then acidified with 3 M HCl to neutral pH. The precipitate was filtered off, washed with 50 ml of water and dried under vacuum to give compound C-10.C1 as a beige-orange solid (14.5 g, 84% yield, 98% purity according to UELCMS analysis).

Альтернативная методика для получения С-10.С1: 12,0 г (19 ммоль) интермедиата С-9.С1 растворяли в 50 мл ледяной АсОН. Добавляли MsOH (1 экв.) и смесь перемешивали при 40°С. Через 16 ч смесь переносили в химический стакан, содержащий 100 г льда и 100 мл 25% аммиака. Твердый продукт отфильтровали, промывали 50 мл воды и высушивали на воздухе. Очистка с помощью флэшхроматографии (ДХМ/МеОН, 100:0^ 98:2) приводила к 9,6 г бежево-оранжевого твердого вещества с чистотой 94% (в соответствии с анализом УЭЖХМС). Выход 78%.Alternative procedure for the preparation of C-10.C1: 12.0 g (19 mmol) of intermediate C-9.C1 was dissolved in 50 ml of ice-cold AcOH. MsOH (1 eq) was added and the mixture was stirred at 40°C. After 16 hours, the mixture was transferred to a beaker containing 100 g of ice and 100 ml of 25% ammonia. The solid product was filtered off, washed with 50 ml of water and dried in air. Purification by flash chromatography (DCM/MeOH, 100:0^98:2) gave 9.6 g of a beige-orange solid with a purity of 94% (according to UELCMS analysis). Yield 78%.

Соединение С-9.С1: 4-(6-хлор-3-гидроkси-2-оkсо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил)-N-(3-хлорфенuл)-1(2,4-диметоксипиримидин-5 -ил)-5-(пропан-2-ил)-1 Н-пиррол-3 -карбоксамид.Compound С-9.С1: 4-(6-Chloro-3-hydroxy-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3-yl)-N-(3-chlorophenyl)-1(2,4 -dimethoxypyrimidin-5-yl)-5-(propan-2-yl)-1 H-pyrrol-3-carboxamide.

НОBUT

ОABOUT

В 500 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-8.С1 (15 г, 26,6 ммоль, 1 экв.) и ТГФ (200 мл) с последующим добавлением триэтилфосфита (6,81 мл, 39,8 ммоль, 1,5 экв.). Затем несколькими порциями добавляли трет-бутоксид натрия (5,11 г, 53,2 ммоль, 2 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре в атмосфере воздуха (колба была снабжена трубкой с CaCl2). После этого времени анализ УЭЖХМС показал 82% целевого продукта и 10% основной примеси. Реакционную смесь медленно переносили в охлажденную (0-5°С) смесь воды (150 мл) и 12 М HCl (5 мл). После добавления AcOEt (100 мл) всю смесь переносили в делительную воронку. Слои разделяли и водную фазу еще раз экстрагировали AcOEt (100 мл). Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, высушивали над MgSO4 и растворитель удаляли под вакуумом. Неочищенные продукты очищали с помощью флэш-хроматографии (CHCl3/МеОН 100:0^98:2). В результате получали 5,86 г С-9.С1 с чистотой 93,7%. Выход 38%.Compound C-8.C1 (15 g, 26.6 mmol, 1 eq.) and THF (200 ml) were added to a 500 ml flask equipped with a magnetic stirrer, followed by triethyl phosphite (6.81 ml, 39.8 mmol, 1.5 eq.). Sodium tert-butoxide (5.11 g, 53.2 mmol, 2 eq.) was then added in several portions. The reaction mixture was stirred for 3 hours at room temperature under air (the flask was fitted with a CaCl 2 tube). After this time, UELCMS analysis showed 82% of the desired product and 10% of the main impurity. The reaction mixture was slowly transferred into a chilled (0-5°C) mixture of water (150 ml) and 12 M HCl (5 ml). After addition of AcOEt (100 ml), the entire mixture was transferred to a separating funnel. The layers were separated and the aqueous phase was re-extracted with AcOEt (100 ml). The combined organic phases were washed with saline, dried over MgSO 4 and the solvent was removed under vacuum. The crude products were purified by flash chromatography (CHCl 3 /MeOH 100:0^98:2). This gave 5.86 g of C-9.C1 with a purity of 93.7%. Yield 38%.

Соединение С-8.С1: 4-(6-хлор-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил)-N-(3-хлорфенил)-1-(2,4-диметоксипиримидин-5 -ил)-5-(пропан-2-ил)- Ш-пиррол-3 -карбоксамид.Compound С-8.С1: 4-(6-Chloro-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3-yl)-N-(3-chlorophenyl)-1-(2,4-dimethoxypyrimidine- 5-yl)-5-(propan-2-yl)-III-pyrrole-3-carboxamide.

В 500 мл круглодонной колбе, снабженной магнитной мешалкой, соединения С-4А (21 г, 117 ммоль, 1 экв ), С-6А (29,25 г, 117 ммоль, 1 экв ) и С-7А (20 г, 130 ммоль, 1,1 экв ) суспендировали в 90% водном АсОН и колбу плотно закрывали пластиковой пробкой Смесь нагревали до 70°С и перемешивали при данной температуре в течение 24 ч. После этого времени анализ УЭЖХМС показал 60% ожидаемого продукта Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и испаряли досуха. Реакцию повторяли и остаток из двух партий объединяли, и очищали в соответствии со следующей методикой.In a 500 ml round bottom flask equipped with a magnetic stirrer, compounds C-4A (21 g, 117 mmol, 1 eq), C-6A (29.25 g, 117 mmol, 1 eq) and C-7A (20 g, 130 mmol , 1.1 eq) was suspended in 90% aqueous AcOH and the flask was tightly closed with a plastic stopper. The mixture was heated to 70°C and stirred at this temperature for 24 h. After this time, UPLCMS showed 60% of the expected product. The reaction mixture was cooled to room temperature and evaporated to dryness. The reaction was repeated and the remainder of the two batches were combined and purified according to the following procedure.

Твердый остаток предварительно адсорбировали на силикагеле и очищали с помощью флэшхроматографии (от 30% до 50% AcOEt в н-гексане). Все фракции, которые содержали продукт, концентрировали до 500 мл и оставляли при комнатной температуре. Через 24 ч розовое твердое вещество от- 17 040469 фильтровывали, промывали 50 мл н-гексана и высушивали на воздухе (40,8 г, чистота 96,5% в соответствии с анализом УЭЖХМС). Фильтрат испаряли досуха с получением дополнительных 6,6 г продукта С-8The solid residue was pre-adsorbed on silica gel and purified by flash chromatography (30% to 50% AcOEt in n-hexane). All fractions that contained product were concentrated to 500 ml and left at room temperature. After 24 hours, the pink solid from 17 040469 was filtered, washed with 50 ml of n-hexane and air dried (40.8 g, 96.5% purity according to UPLCMS analysis). The filtrate was evaporated to dryness to give an additional 6.6 g of product C-8

С1 с чистотой 50%. Выход 33%.C1 with a purity of 50%. Yield 33%.

Соединение (2), С2: (3S)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенuл)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.Compound (2), C2: (3S)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'(propan-2- yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

Указанное в заголовке соединение получали после разделения с помощью препаративной хиральной СФХ (способ В) или хиральной ОФ-ВЭЖХ (способ N) рацемического соединения С-10 С2, >99%, э.и., tr 9,31 мин (способ N'), 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-de) δ 11,23 (уш с, 1H), 8,50 (уш с, 1H), 7,45 (ддд, J= 8,9, 4,1, 2,7 Гц, 1H), 7,39 (с, 1H), 7,32 (т, J= 9,1 Гц, 1H), 7,21-7,13 (м, 1H), 7,08 (дд, J= 8,1, 1,9 Гц, 1H), 7,05 (дд, J= 6,3, 2,7 Гц, 1H), 6,90 (д, J= 1,9 Гц, 1H), 3,98 (с, 3Н), 3,94 (уш с, 3Н), 2,48-2,39 (м, 1H), 0,85 (д, J= 7,0 Гц, 3Н), 0,44 (д J= 7,0 Гц, 3Н), 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6) δ 175,51, 166,44, 164,70, 164,24, 158,75, 157,96, 156,74, 144,03, 135,39, 134,14, 130,82, 130,75, 129,58, 128,33, 127,30, 125,99, 125,66, 125,54, 123,64, 123,04, 119,63, 118,75, 118,68, 118,57, 116,25, 111,12, 70,04, 55,67, 55,01, 49,04, 25,34, 22,00, 21,50-20,80.The title compound was obtained after resolution by preparative chiral SFC (method B) or chiral RP-HPLC (method N) of racemic compound C-10 C2, >99%, ae, t r 9.31 min (method N '), 1H NMR (500 MHz, DMSO-de) δ 11.23 (br s, 1H), 8.50 (br s, 1H), 7.45 (ddd, J= 8.9, 4.1, 2.7 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.32 (t, J= 9.1 Hz, 1H), 7.21-7.13 (m, 1H), 7.08 ( dd, J= 8.1, 1.9 Hz, 1H), 7.05 (dd, J= 6.3, 2.7 Hz, 1H), 6.90 (d, J= 1.9 Hz, 1H ), 3.98 (s, 3H), 3.94 (br s, 3H), 2.48-2.39 (m, 1H), 0.85 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 0.44 (d J= 7.0 Hz, 3H), 13 C NMR (125 MHz, DMSO-d 6 ) δ 175.51, 166.44, 164.70, 164.24, 158.75, 157, 96, 156.74, 144.03, 135.39, 134.14, 130.82, 130.75, 129.58, 128.33, 127.30, 125.99, 125.66, 125.54, 123.64, 123.04, 119.63, 118.75, 118.68, 118.57, 116.25, 111.12, 70.04, 55.67, 55.01, 49.04, 25, 34, 22.00, 21.50-20.80.

Соединение С-10.С2: 6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-c]пиррол]-2,3'-дион.Compound C-10.C2: 6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan-2yl)-1, 2,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

В 100 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-9.С2 (2,86 г, 4,76 ммоль) и колбу охлаждали на ледяной бане. Затем добавляли ТФУК (25 мл) (приблизительно 2 мл/мин). Охлаждающую баню убирали и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. После этого времени анализ УЭЖХМС показал 72% площади пика продукта. Затем смесь выливали в лед (приблизительно 100 г) и разбавляли ДХМ (50 мл). Фазы разделяли и водную фазу трижды экстрагировали ДХМ. Объединенные органические фазы промывали водой и солевым раствором и растворитель удаляли под вакуумом. Неочищенную смесь предварительно адсорбировали на силикагеле и очищали с помощью флэш-хроматографии (AcOEt/гексан 40%а60%). Коричневое твердое вещество, полученное после хроматографии (1,51 г), перемешивали в 60% AcOEt в н-гексане (10 мл) в течение 0,5 ч и затем отфильтровывали, промывали 60% AcOEt в н-гексане и высушивали на воздухе. В результате соединение С-10.С2 получали в виде светло-коричневого твердого вещества (1,35 г, выход 46%) с чистотой 96% в соответствии с анализом УЭЖХМС.Compound C-9.C2 (2.86 g, 4.76 mmol) was added to a 100 ml flask equipped with a magnetic stirrer and the flask was cooled in an ice bath. TFA (25 ml) was then added (approximately 2 ml/min). The cooling bath was removed and the reaction mixture was stirred for 2 hours at room temperature. After this time, UELCMS analysis showed 72% of the peak area of the product. The mixture was then poured into ice (approximately 100 g) and diluted with DCM (50 ml). The phases were separated and the aqueous phase was extracted three times with DCM. The combined organic phases were washed with water and brine and the solvent was removed in vacuo. The crude mixture was pre-adsorbed on silica gel and purified by flash chromatography (AcOEt/hexane 40%-60%). The brown solid obtained after chromatography (1.51 g) was stirred in 60% AcOEt in n-hexane (10 ml) for 0.5 h and then filtered, washed with 60% AcOEt in n-hexane and air dried. As a result, the compound C-10.C2 was obtained as a light brown solid (1.35 g, 46% yield) with a purity of 96% according to the analysis of UPLCMS.

Соединение С-9.С2: N-(5-хлор-2-фторфенил)-4-(6-хлор-3-гидрокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3uл)-1-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-5-(пропан-2-uл)-1H-пиррол-3-карбоксамид.Compound C-9.C2: N-(5-chloro-2-fluorophenyl)-4-(6-chloro-3-hydroxy-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole-3ul)-1-( 2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-5-(propan-2-ul)-1H-pyrrole-3-carboxamide.

CICI

В 500 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-8.С2 (5 г, 8,6 ммоль, 1 экв.) и ТГФ (80 мл) с последующим добавлением триметилфосфита (2 мл, 17,2 ммоль, 2 экв.). Затем реакционную смесь охлаждали на ледяной бане и одной порцией добавляли трет-пентоксид натрия (3,79 г, 34,4 ммоль, 4 экв.). Охлаждающую баню убирали и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре (колба была снабжена трубкой с CaCl2). После этого времени анализ УЭЖХМС показал 91% площади пика продукта. Приблизительно 90% растворителя удаляли и такую полученную смесь разбавляли 100 мл воды. Полученную суспензию подкисляли 3 М HCl до рН~5 и разбавляли 100 мл ДХМ. Фазы разделяли и водную фазу трижды экстрагировали ДХМ. Объединенные органические фазы промывали водой, солевым раствором, высушивали над Na2SO4 и растворитель удаляли под вакуумом. Неочищенный продукт С-9.С2 получали в виде красно-коричневого твердого вещества/пены (чистотаCompound C-8.C2 (5 g, 8.6 mmol, 1 eq.) and THF (80 ml) were added to a 500 ml flask equipped with a magnetic stirrer, followed by the addition of trimethyl phosphite (2 ml, 17.2 mmol, 2 eq. .). The reaction mixture was then cooled in an ice bath and sodium tert-pentoxide (3.79 g, 34.4 mmol, 4 eq.) was added in one portion. The cooling bath was removed and the reaction mixture was stirred for 1 h at room temperature (the flask was equipped with a CaCl 2 tube). After this time, UELCMS analysis showed 91% of the peak area of the product. Approximately 90% of the solvent was removed and this resulting mixture was diluted with 100 ml of water. The resulting suspension was acidified with 3 M HCl to pH~5 and diluted with 100 ml DCM. The phases were separated and the aqueous phase was extracted three times with DCM. The combined organic phases were washed with water, brine, dried over Na 2 SO 4 and the solvent was removed under vacuum. The crude product C-9.C2 was obtained as a red-brown solid/foam (purity

- 18 040469- 18 040469

72% в соответствии с анализом УЭЖХМС) и использовали в следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки.72% according to UELCMS analysis) and used in the next step without any further purification.

Соединение С-8.С2: N-(5-хлор-2-фторфенил)-4-(6-хлор-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3 -ил)-1-(2,4диметоксипиримидин-5-ил)-5-(пропан-2-ил)-1H-пиррол-3-карбоксамид.Compound C-8.C2: N-(5-chloro-2-fluorophenyl)-4-(6-chloro-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3-yl)-1-(2, 4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-5-(propan-2-yl)-1H-pyrrol-3-carboxamide.

В 500 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединения С-4А (12,48 г, 50 ммоль, 1 экв.), С-7А (7,76 г, 50 ммоль, 1 экв.) и С-6В (9,88 г, 50 ммоль, 1 экв.) с последующим добавлением ледяной АсОН (125 мл) и колбу плотно закрывали пластиковой пробкой. Смесь нагревали до 90°С (температура нагревательной бани) и перемешивали при данной температуре в течение 16 ч. После этого времени анализ УЭЖХМС показал почти полное расходование исходных материалов (что составляет 40% площади пика продукта). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и АсОН испаряли досуха. Остаток предварительно адсорбировали на силикагеле и очищали с помощью флэшхроматографии (от 30 до 60% AcOEt в н-гексане). После удаления растворителей продукт С-8.С2 получали в виде темно-красного твердого вещества/пены (8,7 г, выход 30%) с чистотой 84% в соответствии с анализом УЭЖХМС.Compounds C-4A (12.48 g, 50 mmol, 1 eq.), C-7A (7.76 g, 50 mmol, 1 eq.) and C-6B (9 .88 g, 50 mmol, 1 eq.) followed by the addition of ice-cold AcOH (125 ml) and the flask was tightly closed with a plastic stopper. The mixture was heated to 90° C. (heating bath temperature) and stirred at this temperature for 16 hours. After this time, UPLCMS analysis showed almost complete consumption of the starting materials (corresponding to 40% of the peak area of the product). The reaction mixture was cooled to room temperature and AcOH was evaporated to dryness. The residue was pre-adsorbed on silica gel and purified by flash chromatography (30 to 60% AcOEt in n-hexane). After removal of the solvents, the product C-8.C2 was obtained as a dark red solid/foam (8.7 g, 30% yield) with a purity of 84% according to UPLCMS analysis.

Соединение (3), С3: (3S)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-метилфенил)-6'-(пропан-2-ил)-5'-(триметоксипиримидин5-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спuро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.Compound (3), C3: (3S)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-methylphenyl)-6'-(propan-2-yl)-5'-(trimethoxypyrimidin5-yl)-1, 2,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

Указанное в заголовке соединение получали после разделения с помощью препаративной хиральной СФХ (способ С) или хиральной ОФ-ВЭЖХ (способ Т) рацемического соединения С-10.С3; >99% э.и.; tr: 16,7 мин (способ Т'). 1H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d6) смесь ротамеров: δ 11,31 (уш.с, 1H), 10,90 (уш.с, 1H), 7,35 (д, J= 8,1 Гц, 1H), 7,33-7,18 (м, 4H), 7,02 (дд, J= 8,1, 2,0 Гц, 1H), 6,91 (д, J= 1,9 Гц, 1H), 6,86 (д, J= 1,9 Гц, 1H), 6,44 (д, J= 2,2 Гц, 1H), 3,97 (д, J= 1,4 Гц, 3Н), 3,93 (д, J= 4,3 Гц, 3Н), 3,90 (д, J= 2,4 Гц, 3Н), 2,38-2,32 (м, 1H), 2,24 (с, 1H), 2,07 (с, 2H), 0,80 (дд, J= 13,5, 7,0 Гц, 3Н), 0,41 (дд, J= 10,0, 7,0 Гц, 3Н); 13C ЯМР (151 МГц, ДМСО^) смесь ротамеров: δ 176,16, 174,19, 167,19, 167,05, 166,99, 166,89, 163,67, 163,37, 162,67, 143,81, 137,44, 136,75, 136,68, 136,17, 134,82, 134,74, 133,24, 133,19, 132,37, 132,31, 129,95, 129,22, 128,11, 127,96, 127,92, 127,45, 127,11, 127,05, 125,63, 122,64, 122,44, 122,19, 119,53, 119,28, 117,89, 110,67, 110,59, 99,16, 70,13, 69,70, 55,04, 54,78, 54,74, 54,71, 40,41, 40,03, 39,89, 24,99, 24,97, 21,84, 21,06, 21,02, 20,85, 20,78, 17,97, 17,82.The title compound was obtained after resolution by preparative chiral SFC (method C) or chiral RP-HPLC (method T) of racemic compound C-10.C3; >99% e.i.; t r : 16.7 min (method T'). 1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ) rotamer mixture: δ 11.31 (br.s, 1H), 10.90 (br.s, 1H), 7.35 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.33-7.18 (m, 4H), 7.02 (dd, J= 8.1, 2.0 Hz, 1H), 6.91 (d, J= 1.9 Hz, 1H ), 6.86 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 6.44 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 3.97 (d, J= 1.4 Hz, 3H), 3.93 (d, J= 4.3 Hz, 3H), 3.90 (d, J= 2.4 Hz, 3H), 2.38-2.32 (m, 1H), 2.24 (s , 1H), 2.07 (s, 2H), 0.80 (dd, J= 13.5, 7.0 Hz, 3H), 0.41 (dd, J= 10.0, 7.0 Hz, 3H); 13 C NMR (151 MHz, DMSO^) rotamer mixture: δ 176.16, 174.19, 167.19, 167.05, 166.99, 166.89, 163.67, 163.37, 162.67, 143.81, 137.44, 136.75, 136.68, 136.17, 134.82, 134.74, 133.24, 133.19, 132.37, 132.31, 129.95, 129, 22, 128.11, 127.96, 127.92, 127.45, 127.11, 127.05, 125.63, 122.64, 122.44, 122.19, 119.53, 119.28, 117.89, 110.67, 110.59, 99.16, 70.13, 69.70, 55.04, 54.78, 54.74, 54.71, 40.41, 40.03, 39, 89, 24.99, 24.97, 21.84, 21.06, 21.02, 20.85, 20.78, 17.97, 17.82.

Соединение С-10.С3: 6-хлор-2'-(5-хлор-2-метилфенил)-6'-(пропан-2-ил)-5'-(триметоксипиримидин5-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.Compound C-10.C3: 6-chloro-2'-(5-chloro-2-methylphenyl)-6'-(propan-2-yl)-5'-(trimethoxypyrimidin5-yl)-1,2,3' ,5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

В 25 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, при комнатной температуре добавляли соединение С-9.С3 (6,7 г, 1,19 ммоль) и АсОН (10 мл). Затем добавляли MsOH (0,077 мл, 1,19 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при 80°С. Через 1 ч анализ УЭЖХМС показал 93% площади пика продукта. АсОН испаряли и остаток растворяли в AcOEt, промывали насыщенным NaHCO3, солевым раствором и высушивали над MgSO4. Смесь концентрировали до приблизительно 5 мл AcOEt и суспензию отфильтровывали. Собранное твердое вещество промывали 5 мл AcOEt и высушивали под вакуумом. Целевой продукт С-10.С3 получали в виде белого твердого вещества (0,31 г, выход 43%, чистотаCompound C-9.C3 (6.7 g, 1.19 mmol) and AcOH (10 ml) were added to a 25 ml flask equipped with a magnetic stirrer at room temperature. Then MsOH (0.077 ml, 1.19 mmol) was added and the reaction mixture was stirred for 3 h at 80°C. After 1 hour, UELCMS analysis showed 93% of the peak area of the product. AcOH was evaporated and the residue was dissolved in AcOEt, washed with saturated NaHCO 3 , brine and dried over MgSO 4 . The mixture was concentrated to approximately 5 ml AcOEt and the suspension was filtered. The collected solid was washed with 5 ml of AcOEt and dried under vacuum. Target product C-10.C3 was obtained as a white solid (0.31 g, 43% yield, purity

98% в соответствии с анализом УЭЖХМС).98% according to UELCMS analysis).

Соединение С-9.С3: N-(5-хлор-2-метилфенил)-4-(6-хлор-3-гидрокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол- 19 040469Compound С-9.С3: N-(5-chloro-2-methylphenyl)-4-(6-chloro-3-hydroxy-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole- 19 040469

3-ил)-5-(пропан-2-ил)-1 -(триметоксипиримидин-5-ил)-1 Н-пиррол-3 -карбоксамид.3-yl)-5-(propan-2-yl)-1-(trimethoxypyrimidin-5-yl)-1 H-pyrrol-3-carboxamide.

В 50 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-8.С3 (0,8 г, 1,3 ммоль, экв.) и ТГФ (15 мл). Затем реакционную смесь охлаждали на ледяной бане до 0°С и добавляли триэтилфосфит (0,45 мл, 2,6 ммоль, 2 экв.). Через 10 мин при 0°С добавляли несколькими порциями третпентоксид натрия (0,6 г, 5,2 ммоль, 4 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (колба была снабжена трубкой с CaCl2) и контролировали с помощью ТСХ (5% МеОН в CHCl3). Через 24 ч смесь выливали на лед и реакционную смесь подкисляли 1 М HCl до рН 5. После добавления AcOEt (50 мл) смесь переносили в делительную воронку. Слои разделяли и водную фазу снова экстрагировали AcOEt (25 мл). Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, высушивали над Na2SO4 и растворитель удаляли под вакуумом. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, используя 1% МеОН в CHCl3 в качестве элюента. Целевой продукт С-9.С3 получали в виде розового твердого вещества (0,8 г, выход 90%, чистота 93% в соответствии с анализом УЭЖХМС).Compound C-8.C3 (0.8 g, 1.3 mmol, eq.) and THF (15 ml) were added to a 50 ml flask equipped with a magnetic stirrer. The reaction mixture was then cooled in an ice bath to 0° C. and triethyl phosphite (0.45 ml, 2.6 mmol, 2 eq.) was added. After 10 min at 0° C., sodium tertpentoxide (0.6 g, 5.2 mmol, 4 eq.) was added in several portions. The reaction mixture was stirred at room temperature (the flask was fitted with a CaCl 2 tube) and monitored by TLC (5% MeOH in CHCl 3 ). After 24 h the mixture was poured onto ice and the reaction mixture was acidified with 1 M HCl to pH 5. After the addition of AcOEt (50 ml) the mixture was transferred to a separating funnel. The layers were separated and the aqueous phase was re-extracted with AcOEt (25 ml). The combined organic phases were washed with saline, dried over Na 2 SO 4 and the solvent was removed under vacuum. The residue was purified by column chromatography using 1% MeOH in CHCl 3 as eluent. Target product C-9.C3 was obtained as a pink solid (0.8 g, 90% yield, 93% purity by UELCMS analysis).

Соединение С-8.С3: N-(5-хлор-2-метилфенил)-4-(6-хлор-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил)-5-(пропан2-ил)-1 -(триметоксипиримидин-5 -ил)-1 Н-пиррол-3 -карбоксамид.Compound С-8.С3: N-(5-chloro-2-methylphenyl)-4-(6-chloro-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3-yl)-5-(propan2- yl)-1-(trimethoxypyrimidin-5-yl)-1 H-pyrrole-3-carboxamide.

нn

В 25 мл круглодонную колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединения С-4А (0,67 г, 2,7 ммоль, 1 экв.), C-7D (0,5 г, 2,7 ммоль, 1 экв.) и С-6С (0,52 г, 2,7 ммоль, 1 экв.) с последующим добавлением ледяной АсОН (10 мл) и колбу плотно закрывали пластиковой пробкой. Смесь нагревали до 90°С и перемешивали при данной температуре в течение ночи. После этого времени анализ УЭЖХМС показал почти полное расходование исходных материалов (что составляет 45% площади пика продукта). АсОН затем испаряли под вакуумом. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (н-гексан/AcOEt, 4:1^1:1) с получением ожидаемого продукта С-8.С3 в виде красного твердого вещества (0,8 г, выход 40%, чистота 82% в соответствии с анализом УЭЖХМС).To a 25 ml round bottom flask equipped with a magnetic stirrer were added compounds C-4A (0.67 g, 2.7 mmol, 1 eq.), C-7D (0.5 g, 2.7 mmol, 1 eq.) and C-6C (0.52 g, 2.7 mmol, 1 eq.) followed by the addition of ice-cold AcOH (10 ml) and the flask was tightly closed with a plastic stopper. The mixture was heated to 90°C and stirred at this temperature overnight. After this time, UELCMS analysis showed almost complete consumption of the starting materials (which is 45% of the peak area of the product). AcOH was then evaporated under vacuum. The residue was purified by flash chromatography (n-hexane/AcOEt, 4:1^1:1) to give the expected product C-8.C3 as a red solid (0.8 g, 40% yield, 82% purity in according to the analysis of UELCMS).

Соединение (4), С4: (3S)-6-хлор-2'-(3-хлор-4-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-c]пиррол]-2,3'-дион.Compound (4), C4: (3S)-6-chloro-2'-(3-chloro-4-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan2-yl )-1,2,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

Указанное в заголовке соединение получали после разделения с помощью препаративной хиральной СФХ (способ D) или хиральной ОФ-ВЭЖХ (способ K) рацемического соединения С-10.С4; >99% э.и.; tr: 3,79 мин (способ K'). 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8,47 (уш.с, 1H), 8,23 (с, 1H), 7,24-7,19 (м, 1H), 7,18-7,12 (м, 1H), 7,12-7,06 (м, 1H) 7,05-6,96 (м, 2Н), 6,96-6,86 (м, 2Н), 4,07 (с, 3Н), 3,99 (с, 3Н), 2,49-2,38 (м, 1H), 0,90 (д, J= 7,0 Гц, 3Н), 0,52 (д, J= 7,0 Гц, 3Н); 13С ЯМР (125 МГц, CDCl3) δ 175,2, 166,5, 165,6, 164,9, 158,5, 157,0, 156,5, 142,0, 136,4, 134,3, 132,6, 132,5, 131,0, 128,6, 128,5, 126,5, 126,2, 123,8, 122,8, 121,4, 121,3 120,7, 117,8, 117,0, 116,8, 116,2, 111,6, 70,1, 55,6, 54,7, 25,6, 21,2, 1,9.The title compound was obtained after resolution by preparative chiral SFC (method D) or chiral RP-HPLC (method K) of racemic compound C-10.C4; >99% e.i.; tr: 3.79 min (method K'). 1 H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.47 (br. s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.24-7.19 (m, 1H), 7.18-7.12 (m, 1H), 7.12-7.06 (m, 1H) 7.05-6.96 (m, 2H), 6.96-6.86 (m, 2H), 4.07 (s, 3H), 3.99 (s, 3H), 2.49-2.38 (m, 1H), 0.90 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 0.52 (d, J= 7 .0 Hz, 3H); 13 C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 175.2, 166.5, 165.6, 164.9, 158.5, 157.0, 156.5, 142.0, 136.4, 134.3, 132.6, 132.5, 131.0, 128.6, 128.5, 126.5, 126.2, 123.8, 122.8, 121.4, 121.3 120.7, 117.8 , 117.0, 116.8, 116.2, 111.6, 70.1, 55.6, 54.7, 25.6, 21.2, 1.9.

Соединение С-10.С4: 6-хлор-2'-(3-хлор-4-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2uл)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-c]пиррол]-2,3'-дион.Compound C-10.C4: 6-chloro-2'-(3-chloro-4-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan-2ul)-1, 2,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

- 20 040469- 20 040469

В 250 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-9.С4 (10,34 ммоль) и ТФУК (70 мл) при комнатной температуре (ТФУК добавляли приблизительно 5 мл/мин). Затем реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при 40°С и контролировали с помощью ТСХ. После этого времени анализ УЭЖХМС показал 71% площади пика продукта. Смесь охлаждали до комнатной температуры и испаряли досуха. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (10%50% AcOEt/н-гексан). После удаления растворителей продукт С-10.С4 получали в виде светлокоричневого твердого вещества/пены (5,44 г, выход 80% после двух стадий, исходя из С-8.С4) с чистотой 88% в соответствии с анализом УЭЖХМС.Compound C-9.C4 (10.34 mmol) and TFA (70 ml) were added to a 250 ml flask equipped with a magnetic stirrer at room temperature (TFA was added at approximately 5 ml/min). The reaction mixture was then stirred for 3 hours at 40° C. and monitored by TLC. After this time, UELCMS analysis showed 71% of the peak area of the product. The mixture was cooled to room temperature and evaporated to dryness. The crude product was purified by column chromatography (10% 50% AcOEt/n-hexane). After removal of the solvents, the product C-10.C4 was obtained as a light brown solid/foam (5.44 g, 80% yield after two steps based on C-8.C4) with a purity of 88% according to UPLCMS analysis.

Соединение С-9.С4: 4-(6-хлор-3-гидрокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил)-N-(3-хлор-4-фторфенил)1-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-5-(пропан-2-ил)-1H-пиррол-3-кαрбоксамид.Compound С-9.С4: 4-(6-chloro-3-hydroxy-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3-yl)-N-(3-chloro-4-fluorophenyl)1- (2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-5-(propan-2-yl)-1H-pyrrol-3-carboxamide.

В 500 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-8.С4 (6,04 г, 10,34 ммоль, 1 экв.) и ТГФ (140 мл). Затем реакционную смесь охлаждали на ледяной бане до 0°С и одной порцией добавляли триметилфосфит (1,83 мл, 15,51 ммоль, 1,5 экв.), трет-пептоксид натрия (2,28 г, 20,68 ммоль, 2 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при данной температуре (колба была снабжена трубкой с CaCl2) и контролировали с помощью ТСХ. После этого времени анализ УЭЖХМС показал 87% площади пика целевого продукта. Затем к смеси добавляли холодную воду (50 мл) и реакционную смесь подкисляли 5% HCl до рН~5. Реакционную смесь перемешивали в течение приблизительно 0,5 ч при комнатной температуре и полученный осадок отфильтровывали, промывали 100 мл холодной воды. Полученное таким образом твердое вещество повторно растворяли в AcOEt, промывали водой, высушивали над Na2SO4 и растворитель испаряли. Неочищенный продукт С-9.С4 получали в виде коричневого твердого вещества (чистота 85% в соответствии с анализом УЭЖХМС) и использовали в следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки.Compound C-8.C4 (6.04 g, 10.34 mmol, 1 eq.) and THF (140 ml) were added to a 500 ml flask equipped with a magnetic stirrer. The reaction mixture was then cooled in an ice bath to 0°C and trimethyl phosphite (1.83 ml, 15.51 mmol, 1.5 eq.), sodium tert-peptoxide (2.28 g, 20.68 mmol, 2 equiv.). The reaction mixture was stirred for 4 h at this temperature (the flask was equipped with a tube with CaCl 2 ) and monitored by TLC. After this time, UELCMS analysis showed 87% of the peak area of the desired product. Then cold water (50 ml) was added to the mixture and the reaction mixture was acidified with 5% HCl to pH~5. The reaction mixture was stirred for approximately 0.5 h at room temperature and the resulting precipitate was filtered off, washed with 100 ml of cold water. The solid thus obtained was redissolved in AcOEt, washed with water, dried over Na 2 SO 4 and the solvent was evaporated. The crude product C-9.C4 was obtained as a brown solid (purity 85% according to UPLCMS analysis) and was used in the next step without any further purification.

Соединение С-8.С4: 4-(6-хлор-2-оксо-2,3-дигидро-1 Н-индол-3 -ил)-N-(3 -хлор-4-фторфенил)-1-(2,4диметоксипиримидин-5-ил)-5-(пропан-2-ил)-1H-пиррол-3-карбоксамид.Compound C-8.C4: 4-(6-chloro-2-oxo-2,3-dihydro-1 H-indol-3 -yl)-N-(3-chloro-4-fluorophenyl)-1-(2 ,4dimethoxypyrimidin-5-yl)-5-(propan-2-yl)-1H-pyrrole-3-carboxamide.

В 250 мл микроволновый реактор, снабженный магнитной мешалкой, добавляли соединения С-4А (12,48 г, 50 ммоль, 1 экв ), С-7А (8,5 г, 55 ммоль, 1,1 экв ) и C-6D (9,9 г, 50 ммоль, 1 экв.) с последующим добавлением ледяной АсОН и MB реактор плотно закрывали Смесь нагревали до 90°С (300 Вт) и перемешивали в течение 5 ч при данной температуре После этого времени анализ УЭЖХМС показал почти полное расходование исходных материалов (что составляет 40% площади пика продукта) Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и АсОН испаряли досуха Остаток предварительно адсорбировали на силикагеле и очищали с помощью колоночной хроматографии (10% ацетон/ДХМ) После удаления растворителей продукт С-8 С4 получали в виде темно-коричневого твердого вещества/пены (6,96 г, выход 20,7%) с чистотой 87% в соответствии с анализом УЭЖХМС.Compounds C-4A (12.48 g, 50 mmol, 1 eq), C-7A (8.5 g, 55 mmol, 1.1 eq) and C-6D ( 9.9 g, 50 mmol, 1 eq.) followed by the addition of ice-cold AcOH and the MB reactor was tightly capped. The mixture was heated to 90°C (300 W) and stirred for 5 h at this temperature. After this time, analysis by UPLCMS showed almost complete consumption starting materials (representing 40% of the peak area of the product) The reaction mixture was cooled to room temperature and AcOH evaporated to dryness The residue was pre-adsorbed on silica gel and purified using column chromatography (10% acetone/DCM) After removal of solvents, the product C-8 C4 was obtained as dark brown solid/foam (6.96 g, 20.7% yield) 87% pure by UPLCMS analysis.

Соединение (5), С5 (3S)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-6'-(пропан-2-ил)-5'-(триметоксипиримидин-5ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-c]пиррол]-2,3'-дион.Compound (5), C5 (3S)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-6'-(propan-2-yl)-5'-(trimethoxypyrimidin-5yl)-1,2 ,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

- 21 040469- 21 040469

Указанное в заголовке соединение получали после разделения с помощью препаративной хиральной СФХ (способ Е) или хиральной ОФ-ВЭЖХ (способ L) рацемического соединения С-10 С5, >99% э.и., tr 7,18 мин (способ L'), 1H ЯМР (600 МГц, ДМСОЛ) δ 11,20 (с, 1H), 7,44 (ддд, J= 8,9, 4,1, 2,7 Гц, 1H), 7,31 (т, J= 9,1 Гц, 1H), 7,25 (с, 1H), 7,15 (дд, J= 8,1, 1,7 Гц, 1H), 7,08 (дд, J= 8,1, 1,9 Гц, 1H), 7,05 (дд, J= 6,3, 2,7 Гц, 1H), 6,89 (д, J= 1,9 Гц, 1H), 3,97 (с, 3Н), 3,93 (с, 3Н), 3,89 (с, 3Н), 2,40-2,31 (м, 1H), 0,82 (д, J= 7,1 Гц, 3Н), 0,41 (д, J= 7,0 Гц, 3Н), 13С ЯМР (151 МГц, ДМСО^) δ 175,64, 167,54, 167,40, 164,33, 163,18, 158,6, 156,93, 144,05, 135,29, 133,95, 130,69, 129,61, 128,30, 127,19, 126,20, 125,74, 125,65, 123,01, 119,35, 118,69, 118,55, 111,07, 99,55, 70,08, 55,50, 55,20, 49,02, 25,42, 21,46, 21,26.The title compound was obtained after resolution by preparative chiral SFC (method E) or chiral RP-HPLC (method L) of racemic compound C-10 C5, >99% ee, t r 7.18 min (method L' ), 1 H NMR (600 MHz, DMSOL) δ 11.20 (s, 1H), 7.44 (ddd, J= 8.9, 4.1, 2.7 Hz, 1H), 7.31 (t , J= 9.1 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.15 (dd, J= 8.1, 1.7 Hz, 1H), 7.08 (dd, J= 8, 1, 1.9 Hz, 1H), 7.05 (dd, J= 6.3, 2.7 Hz, 1H), 6.89 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 3.97 ( s, 3H), 3.93 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 2.40-2.31 (m, 1H), 0.82 (d, J = 7.1 Hz, 3H ), 0.41 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 13 C NMR (151 MHz, DMSO^) δ 175.64, 167.54, 167.40, 164.33, 163.18, 158 .6, 156.93, 144.05, 135.29, 133.95, 130.69, 129.61, 128.30, 127.19, 126.20, 125.74, 125.65, 123.01 , 119.35, 118.69, 118.55, 111.07, 99.55, 70.08, 55.50, 55.20, 49.02, 25.42, 21.46, 21.26.

Соединение С-10.С5 6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-6'-(пропан-2-ил)-5'-(триметоксипиримидин-5ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро [индол-3,1 '-пирроло[3,4-с]пиррол] -2,3 '-дион.Compound С-10.С5 6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-6'-(propan-2-yl)-5'-(trimethoxypyrimidin-5yl)-1,2,3', 5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

В 100 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, при комнатной температуре добавляли соединение С-9 С5 (6,7 г, 10,6 ммоль) и ТФУК (15 мл) Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре После этого времени анализ УЭЖХМС показал 85% площади пика продукта. Реакционную смесь выливали на лед и дважды экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Объединенные органические фазы промывали водой (30 мл), высушивали над Na2SO4 и испаряли досуха. AcOEt (50 мл) добавляли к остатку и наблюдали образование розоватого осадка. Твердое вещество отфильтровывали, промывали несколькими порциями холодного AcOEt и высушивали на воздухе. Целевой продукт С-10.С5 получали в виде бледно-розового твердого вещества (5,17 г, выход 80%, чистота 99% в соответствии с анализом УЭЖХМС).Compound C-9 C5 (6.7 g, 10.6 mmol) and TFA (15 ml) were added to a 100 ml flask equipped with a magnetic stirrer at room temperature. The reaction mixture was stirred for 3 hours at room temperature. showed 85% of the peak area of the product. The reaction mixture was poured onto ice and extracted twice with DCM (2x30 ml). The combined organic phases were washed with water (30 ml), dried over Na 2 SO 4 and evaporated to dryness. AcOEt (50 ml) was added to the residue and a pinkish precipitate formed. The solid was filtered off, washed with several portions of cold AcOEt and dried in air. Target product C-10.C5 was obtained as a pale pink solid (5.17 g, 80% yield, 99% purity by UPLCMS analysis).

Соединение С-9.С5: N-(5-хлор-2-фторфенил)-4-(6-хлор-3-гидрокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3ил)-5-(пропан-2-ил)-1 -(триметоксипиримидин-5 -ил)-1 Н-пиррол-3 -карбоксамид.Compound C-9.C5: N-(5-chloro-2-fluorophenyl)-4-(6-chloro-3-hydroxy-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3yl)-5-( propan-2-yl)-1-(trimethoxypyrimidin-5-yl)-1 H-pyrrol-3-carboxamide.

НH

В 500 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-8.С5 (5 г, 8,14 ммоль, 1 экв.) и ТГФ (150 мл). Затем реакционную смесь охлаждали на ледяной бане до 0°С и добавляли триметилфосфит (1,92 мл, 16,3 ммоль, 2 экв.). Через 10 мин при 0°С добавляли несколькими порциями третпептоксид натрия (3,6 г, 32,6 ммоль, 4 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (колба была снабжена трубкой с CaCl2) и контролировали с помощью ТСХ (40% AcOEt в н-гексане). Затем смесь выливали на лед и реакционную смесь подкисляли 0,5 М водным раствором HCl до рН 5. После добавления ДХМ (100 мл) смесь переносили в делительную воронку. Слои разделяли и водную фазу снова экстрагировали ДХМ (100 мл). Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, высушивали над Na2SO4 и растворитель удаляли под вакуумом. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (30%-50% AcOEt/н-гексан). Целевой продукт С-9.С5 получали в виде коричневатого твердого вещества (2,41 г, выход 47%, чистота 96% в соответствии с анализом УЭЖХМС).Compound C-8.C5 (5 g, 8.14 mmol, 1 eq.) and THF (150 ml) were added to a 500 ml flask equipped with a magnetic stirrer. The reaction mixture was then cooled in an ice bath to 0° C. and trimethyl phosphite (1.92 ml, 16.3 mmol, 2 eq.) was added. After 10 minutes at 0° C., sodium tertpeptoxide (3.6 g, 32.6 mmol, 4 eq.) was added in several portions. The reaction mixture was stirred at room temperature (the flask was fitted with a CaCl 2 tube) and monitored by TLC (40% AcOEt in n-hexane). The mixture was then poured onto ice and the reaction mixture was acidified with 0.5 M aqueous HCl to pH 5. After addition of DCM (100 ml), the mixture was transferred to a separating funnel. The layers were separated and the aqueous phase was re-extracted with DCM (100 ml). The combined organic phases were washed with saline, dried over Na 2 SO 4 and the solvent was removed under vacuum. The residue was purified by column chromatography (30%-50% AcOEt/n-hexane). Target product C-9.C5 was obtained as a brownish solid (2.41 g, 47% yield, 96% purity by UELCMS analysis).

Соединение С-8.С5: N-(5-хлор-2-фторфенил)-4-(6-хлор-2-оксо-2,3 -дигидро-1 Н-индол-3-ил)-5-(пропан2-ил)-1 -(триметоксипиримидин-5 -ил)-1 Н-пиррол-3 -карбоксамид.Compound C-8.C5: N-(5-chloro-2-fluorophenyl)-4-(6-chloro-2-oxo-2,3-dihydro-1 H-indol-3-yl)-5-(propane2 -yl)-1-(trimethoxypyrimidin-5 -yl)-1 H-pyrrol-3-carboxamide.

- 22 040469- 22 040469

В 150 мл круглодонную колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединения С-4А (6,3 г, 25,3 ммоль, 1 экв.), С-6В (4,7 г, 130 ммоль, 1 экв.) и C-7D (5 г, 117 ммоль, 1 экв.) с последующим добавлением АсОН (40 мл) и колбу плотно закрывали пластиковой пробкой. Смесь нагревали до 80°С и перемешивали при данной температуре в течение ночи. После этого времени анализ УЭЖХМС показал почти полное расходование исходных материалов (что составляет 66% площади пика продукта). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и красное твердое вещество продукта С-8 С5 отфильтровывали, промывали АсОН и высушивали на воздухе (10 г, выход 64%, чистота 82% в соответствии с анализом УЭЖХМС).Compounds C-4A (6.3 g, 25.3 mmol, 1 eq.), C-6B (4.7 g, 130 mmol, 1 eq.) and C- 7D (5 g, 117 mmol, 1 eq.) followed by the addition of AcOH (40 ml) and the flask was tightly closed with a plastic stopper. The mixture was heated to 80°C and stirred at this temperature overnight. After this time, UELCMS analysis showed almost complete consumption of starting materials (which is 66% of the peak area of the product). The reaction mixture was cooled to room temperature and the red solid product C-8 C5 was filtered off, washed with AcOH and air dried (10 g, 64% yield, 82% purity according to UPLCMS analysis).

Соединение (6), С6 (3S)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-[6-(диметиламино)-4-метоксипиридин-3ил]-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро [индол-3,1 '-пирроло [3,4-с]пиррол] -2,3'-дион.Compound (6), С6 (3S)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-[6-(dimethylamino)-4-methoxypyridin-3yl]-6'-(propane- 2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indol-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

Указанное в заголовке соединение получали после разделения с помощью препаративной хиральной НФ-ВЭЖХ (способ F) или хиральной ОФ-ВЭЖХ (способ J) рацемического соединения С-10 С6, >99% э.и., tr 14,66 мин (способ J'), 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-de) δ 11,20 (уш с, 1H), 7,91 (д, J= 22,0 Гц, 1H) 7,43 (ддд, J= 8,9, 4,1, 2,7 Гц, 1H), 7,30 (т, J= 9,1 Гц, 1H), 7,23 (с, 1H), 7,16 (дд, J= 8,0, 2,1 Гц, 1H), 7,107,03 (м, 2Н), 6,89 (д, J= 1,9 Гц, 1H), 6,25 (д, J= 5,6 Гц, 1H), 3,82 (д, J= 20,8 Гц, 3Н), 3,09 (с, 6Н), 2,47-2,37 (м, 1H), 0,83 (дд, J= 12,2, 7,0 Гц, 3Н), 0,41 (т, J= 7,0 Гц, 3Н), 13С ЯМР (126 МГц, ДМСО^) δ 175,77, 175,72, 164,50, 162,08, 161,95, 161,08, 158,79, 156,79, 147,23, 144,06, 135,26, 134,43, 134,39, 130,67, 130,60, 129,61, 128,30, 127,36, 127,20, 126,29, 126,23, 125,85, 125,75, 123,20, 122,99, 122,94, 118,84, 118,71, 118,64, 118,53, 115,45, 111,06, 88,48, 70,09, 56,06, 56,03, 38,38, 25,38, 22,01,21,63,21,27,21,04.The title compound was obtained after resolution by preparative chiral NP-HPLC (method F) or chiral RP-HPLC (method J) of racemic compound C-10 C6, >99% ee, tr 14.66 min (method J '), 1 H NMR (500 MHz, DMSO-de) δ 11.20 (br s, 1H), 7.91 (d, J= 22.0 Hz, 1H) 7.43 (ddd, J= 8, 9, 4.1, 2.7 Hz, 1H), 7.30 (t, J= 9.1 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.16 (dd, J= 8.0 , 2.1 Hz, 1H), 7.107.03 (m, 2H), 6.89 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 6.25 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 3.82 (d, J= 20.8 Hz, 3H), 3.09 (s, 6H), 2.47-2.37 (m, 1H), 0.83 (dd, J= 12.2, 7.0 Hz, 3H), 0.41 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 13 C NMR (126 MHz, DMSO^) δ 175.77, 175.72, 164.50, 162.08 161.95 161.08 158.79 156.79 147.23 144.06 135.26 134.43 134.39 130.67 130.60 129.61 128 .30, 127.36, 127.20, 126.29, 126.23, 125.85, 125.75, 123.20, 122.99, 122.94, 118.84, 118.71, 118.64 , 118.53, 115.45, 111.06, 88.48, 70.09, 56.06, 56.03, 38.38, 25.38, 22.01,21.63,21,27.21 .04.

Соединение С-10.С6 6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-[6-(диметиламино)-4-метоксипиридин-3ил] -6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро [индол-3,1 '-пирроло [3,4-с]пиррол] -2,3'-дион.Compound С-10.С6 6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-[6-(dimethylamino)-4-methoxypyridin-3yl]-6'-(propan-2-yl) -1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

В 100 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-9 С6 (2,96 г, 4,8 ммоль) и ТФУК (30 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при 40°С. После этого времени анализ УЭЖХМС показал 97% целевого продукта С-10 С6. Реакционную смесь испаряли досуха. К остатку добавляли 20 мл метанола и насыщенный NaHCO3 (200 мл). Суспензию нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Осадок отфильтровывали и вымачивали в метаноле (20 мл). Твердое вещество собирали фильтрованием, промывали небольшим количеством метанола и высушивали под вакуумом с получением целевого продукта С-10 С6 в виде белого с желтоватым или сероватым оттенком твердого вещества (2,3 г, выход 83%, чистота >99% в соответствии с анализом УЭЖХМС).Compound C-9 C6 (2.96 g, 4.8 mmol) and TFA (30 ml) were added to a 100 ml flask equipped with a magnetic stirrer. The reaction mixture was stirred for 1 hour at 40°C. After this time, UELCMS analysis showed 97% of the desired C-10 C6 product. The reaction mixture was evaporated to dryness. To the residue was added 20 ml of methanol and saturated NaHCO 3 (200 ml). The suspension was heated under reflux for 2 h and then cooled to room temperature. The precipitate was filtered off and soaked in methanol (20 ml). The solid was collected by filtration, washed with a small amount of methanol and dried under vacuum to give the desired product C-10 C6 as a white to yellowish or grayish solid (2.3 g, 83% yield, >99% purity according to UPLCMS analysis ).

Соединение С-9.С6: N-(5-хлор-2-фторфенил)-4-(6-хлор-3-гидрокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3ил)-1 -[6-(диметиламино)-4-метоксипиридин-3 -ил] -5 -(пропан-2-ил)-1 Н-пиррол-3 -карбоксамид.Compound C-9.C6: N-(5-chloro-2-fluorophenyl)-4-(6-chloro-3-hydroxy-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3yl)-1 -[ 6-(dimethylamino)-4-methoxypyridin-3-yl]-5-(propan-2-yl)-1 H-pyrrol-3-carboxamide.

- 23 040469- 23 040469

В 100 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-8.С6 (4 г, 6,7 ммоль, 1 экв.) и ТГФ (30 мл) с последующим добавлением триэтилфосфита (1,72 мл, 10,1 ммоль, 1,5 экв.). Затем смесь охлаждали до 3°С и добавляли несколькими порциями трет-пентоксид натрия (1,48 г, 13,4 ммоль, 2 экв.). После нагревания до комнатной температуры реакционную смесь перемешивали в течение 22 ч (колба была снабжена трубкой с CaCl2). После этого времени анализ УЭЖХМС показал 94% целевого продукта С9.С6. К смеси добавляли воду (200 мл) и 1 М HCl до достижения рН 8. Водную фазу экстрагировали AcOEt (3x150 мл). Органические фазы объединяли и высушивали над MgSO4. После концентрирования неочищенный материал дополнительно очищали с помощью хроматографии (10-30% изо-PrOH/н-гексан) с получением соединения С-9.С6 (3 г, выход 72%, чистота 94% в соответствии с анализом УЭЖХМС).Compound C-8.C6 (4 g, 6.7 mmol, 1 eq.) and THF (30 ml) were added to a 100 ml flask equipped with a magnetic stirrer, followed by triethyl phosphite (1.72 ml, 10.1 mmol, 1.5 eq.). The mixture was then cooled to 3° C. and sodium tert-pentoxide (1.48 g, 13.4 mmol, 2 eq.) was added in several portions. After warming to room temperature, the reaction mixture was stirred for 22 h (the flask was equipped with a CaCl 2 tube). After this time, UELCMS analysis showed 94% of the desired product C9.C6. Water (200 ml) and 1 M HCl were added to the mixture until pH 8 was reached. The aqueous phase was extracted with AcOEt (3x150 ml). The organic phases were combined and dried over MgSO 4 . After concentration, the crude material was further purified by chromatography (10-30% iso-PrOH/n-hexane) to give compound C-9.C6 (3 g, 72% yield, 94% purity according to UELCMS analysis).

Соединение С-8.С6: N-(5-хлор-2-фторфенил)-4-(6-хлор-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3 -ил)-1-[6(диметиламино)-4-метоксипиридин-3-ил]-5-(пропан-2-ил)-1H-пиррол-3-карбоксамид.Compound C-8.C6: N-(5-chloro-2-fluorophenyl)-4-(6-chloro-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3 -yl)-1-[6( dimethylamino)-4-methoxypyridin-3-yl]-5-(propan-2-yl)-1H-pyrrole-3-carboxamide.

НH

В круглодонной колбе под давлением (250 мл), снабженной магнитной мешалкой, соединения С-4А (5,37 г, 21,5 ммоль, 1 экв.), С-7С (3,6 г, 21,5 ммоль, 1 экв.), С-6В (4,25 г, 21,5 ммоль, 1 экв.) и PTSA-H2O (4,09 г, 21,5 ммоль, 1 экв.) суспендировали в воде (9 мл) и метаноле (36 мл). Колбу плотно закрывали, затем смесь нагревали до 60°С и перемешивали при данной температуре в течение 23 ч. После этого времени анализ УЭЖХМС показал 17% ожидаемого продукта С-8.С6. Затем добавляли дополнительную порцию соединения С-6В (1,06 г, 5,4 ммоль), смесь нагревали до 75°С и перемешивали при данной температуре в течение 42 ч. Образец собирали, и анализ УЭЖХМС показал 58% ожидаемого продукта С-8.С6. Реакционную смесь испаряли досуха. К остатку добавляли ДХМ (200 мл), 5% раствор NaHCO3 (150 мл) и смесь перемешивали в течение 20 мин. Водную фазу экстрагировали ДХМ (4x200 мл). Органические фазы объединяли и высушивали над MgSO4. После концентрирования неочищенный материал очищали с помощью колоночной хроматографии (20-50% AcOEt/н-гексан) с получением соединения С-8.С6 (4,1 г, выход 32%, чистота 90% в соответствии с анализом УЭЖХМС).In a pressurized round-bottom flask (250 ml) equipped with a magnetic stirrer, compounds C-4A (5.37 g, 21.5 mmol, 1 eq.), C-7C (3.6 g, 21.5 mmol, 1 eq. .), C-6B (4.25 g, 21.5 mmol, 1 eq.) and PTSA-H 2 O (4.09 g, 21.5 mmol, 1 eq.) were suspended in water (9 ml) and methanol (36 ml). The flask was tightly capped, then the mixture was heated to 60° C. and stirred at this temperature for 23 hours. After this time, UPLCMS analysis showed 17% of the expected product C-8.C6. Then an additional portion of compound C-6B (1.06 g, 5.4 mmol) was added, the mixture was heated to 75°C and stirred at this temperature for 42 hours. .C6. The reaction mixture was evaporated to dryness. DCM (200 ml), 5% NaHCO 3 solution (150 ml) was added to the residue and the mixture was stirred for 20 minutes. The aqueous phase was extracted with DCM (4x200 ml). The organic phases were combined and dried over MgSO4. After concentration, the crude material was purified by column chromatography (20-50% AcOEt/n-hexane) to give compound C-8.C6 (4.1 g, 32% yield, 90% purity according to UELCMS analysis).

Соединение (7), С7: (3S)-6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(nропан2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.Compound (7), C7: (3S)-6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(p-propan2-yl)- 1,2,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

Указанное в заголовке соединение получали после разделения с помощью препаративной хиральной СФХ (способ G) или хиральной ОФ-ВЭЖХ (способ О) рацемического соединения С-10.С7; >99% э.и.; tr: 5,61 мин (способ О'). 1H ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8,76 (уш.с, 1H), 8,23 (с, 1H), 7,23-7,18 (м, 1H), 7,11-7,06 (м, 1H), 7,06-6,98 (м, 2Н) 6,98-6,90 (м, 1H), 6,90-6,85 (м, 1H), 6,83-6,76 (м, 1H), 4,06 (с, 3Н), 3,99 (с, 3Н), 2,49-2,39 (м, 1H) 0,90 (д, J= 7,0 Гц, 3Н), 0,51 (д, J= 7,0 Гц, 3Н); 13С ЯМР (125 МГц, CDCl3) δ 175,3, 166,5, 165,7, 164,9, 157,0, 150,9, 149,0, 148,9, 148,8, 142,2, 136,4, 134,3, 132,3, 126,5, 126,2, 124,9, 123,7, 122,9, 120,6, 118,1, 118,0, 117,8, 117,5, 117,4, 116,1, 111,7, 77,3, 77,0, 76,7, 70,2, 55,6, 54,7,25,6,21,3.The title compound was obtained after resolution by preparative chiral SFC (method G) or chiral RP-HPLC (method O) of racemic compound C-10.C7; >99% e.i.; tr: 5.61 min (method O'). 1 H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.76 (br. s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.23-7.18 (m, 1H), 7.11-7.06 (m, 1H), 7.06-6.98 (m, 2H) 6.98-6.90 (m, 1H), 6.90-6.85 (m, 1H), 6.83-6, 76 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.99 (s, 3H), 2.49-2.39 (m, 1H) 0.90 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.51 (d, J=7.0 Hz, 3H); 13 C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 175.3, 166.5, 165.7, 164.9, 157.0, 150.9, 149.0, 148.9, 148.8, 142.2, 136.4, 134.3, 132.3, 126.5, 126.2, 124.9, 123.7, 122.9, 120.6, 118.1, 118.0, 117.8, 117, 5, 117.4, 116.1, 111.7, 77.3, 77.0, 76.7, 70.2, 55.6, 54.7.25.6.21.3.

Соединение С-10.С7: 6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-c]пиррол]-2,3'-дион.Compound C-10.C7: 6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan-2yl)-1,2, 3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

- 24 040469- 24 040469

В 250 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-9.С7 (7,34 г, 15,57 ммоль) и ТФУК (80 мл) при комнатной температуре (ТФУК добавляли приблизительно 5 мл/мин). Затем реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при 40°С. После этого времени анализ УЭЖХМС показал 84% площади пика продукта. Смесь охлаждали до комнатной температуры и испаряли досуха. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (20%-50% AcOEt/н-гексан). После удаления растворителей продукт С-10.С7 получали в виде светло-коричневого твердого вещества/пены (4,45 г, 63% выход после двухстадийного синтеза) с чистотой 93% в соответствии с анализом УЭЖХМС.Compound C-9.C7 (7.34 g, 15.57 mmol) and TFA (80 ml) were added to a 250 ml flask equipped with a magnetic stirrer at room temperature (TFA was added approximately 5 ml/min). Then the reaction mixture was stirred for 3 h at 40°C. After this time, UELCMS analysis showed 84% of the peak area of the product. The mixture was cooled to room temperature and evaporated to dryness. The crude product was purified by flash column chromatography (20%-50% AcOEt/n-hexane). After removal of the solvents, product C-10.C7 was obtained as a light brown solid/foam (4.45 g, 63% yield after two-step synthesis) with a purity of 93% according to UPLCMS analysis.

Соединение С-9.С7: 4-(6-хлор-3-гвдроkсu-2-оkсо-2,3-дагвдро-1H-uндол-3-ил)-N-(3,4-дифторфенил)-1(2,4-диметоκсипиримидин-5-ил)-5-(пропан-2-uл)-1H-пиррол-3-κарбоκсамид.Compound С-9.С7: 4-(6-Chloro-3-hydroxu-2-oxo-2,3-dahydro-1H-undol-3-yl)-N-(3,4-difluorophenyl)-1(2 ,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-5-(propan-2-ul)-1H-pyrrole-3-carboxyamide.

В 500 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-8.С7 (7,14 г, 12,57 ммоль, 1 экв.) и ТГФ (140 мл). Затем реакционную смесь охлаждали на ледяной бане до 0°С и одной порцией добавляли триметилфосфит (2,25 мл, 18,86 ммоль, 1,5 экв.) с последующим добавлением третпентоксида натрия (2,77 г, 25,14 ммоль, 2 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч при 0°С (колба была снабжена трубкой с CaCl2). После этого времени анализ УЭЖХМС показал 88% площади пика продукта. Добавляли холодную воду (50 мл) и реакционную смесь подкисляли 5% HCl до рН~5. Реакционную смесь перемешивали в течение приблизительно 0,5 ч при комнатной температуре и полученный осадок отфильтровывали и промывали 100 мл холодной воды. Полученное таким образом твердое вещество повторно растворяли в AcOEt, промывали водой, высушивали над Na2SO4 и растворитель испаряли. Неочищенный продукт С-9.С7 получали в виде коричневого твердого вещества (чистота 83% в соответствии с анализом УЭЖХМС) и использовали в следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки.Compound C-8.C7 (7.14 g, 12.57 mmol, 1 eq.) and THF (140 ml) were added to a 500 ml flask equipped with a magnetic stirrer. The reaction mixture was then cooled in an ice bath to 0°C and trimethyl phosphite (2.25 mL, 18.86 mmol, 1.5 eq.) was added in one portion followed by sodium tert pentoxide (2.77 g, 25.14 mmol, 2 equiv.). The reaction mixture was stirred for 1.5 h at 0°C (the flask was equipped with a tube with CaCl 2 ). After this time, UELCMS analysis showed 88% of the peak area of the product. Cold water (50 ml) was added and the reaction mixture was acidified with 5% HCl to pH~5. The reaction mixture was stirred for approximately 0.5 h at room temperature and the resulting precipitate was filtered off and washed with 100 ml of cold water. The solid thus obtained was redissolved in AcOEt, washed with water, dried over Na 2 SO 4 and the solvent was evaporated. The crude product C-9.C7 was obtained as a brown solid (purity 83% according to UPLCMS analysis) and was used in the next step without any further purification.

Соединение С-8.С7: 4-(6-хлор-2-оксо-2,3 -дигидро-1H-индол-3-ил)-N-(3,4-дифторфенил)-1-(2,4диметоксипиримидин-5-ил)-5-(пропан-2-ил)-1 H-пиррол-3-карбоксамид.Compound С-8.С7: 4-(6-chloro-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3-yl)-N-(3,4-difluorophenyl)-1-(2,4dimethoxypyrimidine- 5-yl)-5-(propan-2-yl)-1 H-pyrrole-3-carboxamide.

В 250 мл герметичную пробирку, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединения С-4А (12,48 г, 50 ммоль, 1 экв.), С-7А (7,76 г, 50 ммоль, 1 экв.) и С-6Е (9,06 г, 50 ммоль, 1 экв.) с последующим добавлением АсОН (100 мл) и пробирку плотно закрывали пластиковой пробкой. Смесь нагревали до 80°С (температура нагревательной бани) и перемешивали при данной температуре в течение ночи. После этого времени анализ УЭЖХМС показал почти полное расходование исходных материалов (что составляет 40% площади пика продукта). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и АсОН испаряли досуха. Остаток предварительно адсорбировали на силикагеле и очищали с помощью хроматографии (50% AcOEt/н-гексан). После удаления растворителей продукт С-8.С7 получали в виде темнокоричневого твердого вещества/пены (7,63 г, выход 24,9%, чистота 84% в соответствии с анализом УЭЖХМС).Compounds C-4A (12.48 g, 50 mmol, 1 eq.), C-7A (7.76 g, 50 mmol, 1 eq.) and C-6E ( 9.06 g, 50 mmol, 1 eq.) followed by the addition of AcOH (100 ml) and the tube was tightly closed with a plastic stopper. The mixture was heated to 80° C. (heating bath temperature) and stirred at this temperature overnight. After this time, UELCMS analysis showed almost complete consumption of starting materials (which is 40% of the peak area of the product). The reaction mixture was cooled to room temperature and AcOH was evaporated to dryness. The residue was pre-adsorbed on silica gel and purified by chromatography (50% AcOEt/n-hexane). After removal of the solvents, product C-8.C7 was obtained as a dark brown solid/foam (7.63 g, 24.9% yield, 84% purity by UPLCMS analysis).

Соединение (8), С8: (3S)-6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-6'-(пропан-2uл)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.Compound (8), C8: (3S)-6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyridin-3-yl)-6'-(propan-2ul)- 1,2,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

- 25 040469- 25 040469

Указанное в заголовке соединение получали после разделения с помощью препаративной хиральной СФХ (способ Н) или хиральной ОФ-ВЭЖХ (способ N) рацемического соединения С-10.С8; >99% э.и.; tr: 6,2 мин (способ N'); 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 11,15 (уш.с, 1H), 8,07 (д, J= 34,9 Гц, 1H), 7,467,37 (м, 1H), 7,37-7,27 (м, 2Н), 7,15 (м, 1H), 7,08 (дд, J= 8,0, 1,9 Гц, 1H), 6,92 (м, J= 2,2 Гц, 1H), 6,85 (м, 1H), 6,64 (д, J= 4,0 Гц, 1H), 3,90 (с, 3Н), 3,83 (д, J= 23,6 Гц, 3Н), 2,37 (м, 1H), 0,85 (дд, J= 13,0, 7,0 Гц, 3Н), 0,41 (дд, J= 9,4, 6,9 Гц, 3Н); 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6) δ 175,18, 175,05, 165,31, 164,56, 162,80, 162,74, 149,75, 149,64, 147,79, 147,68, 147,33, 147,24, 145,92, 145,79, 143,48, 143,43, 134,62, 134,59, 133,42, 127,08, 126,18, 126,10, 122,71, 122,67, 122,58, 120,23, 119,41, 117,79, 117,70, 117,55, 117,23, 117,09, 110,62, 93,37, 93,29, 69,61, 56,21, 53,64, 24,90, 21,39, 21,08, 20,64, 20,50.The title compound was obtained after resolution by preparative chiral SFC (method H) or chiral RP-HPLC (method N) of racemic compound C-10.C8; >99% e.i.; tr: 6.2 min (method N'); 1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.15 (br. s, 1H), 8.07 (d, J = 34.9 Hz, 1H), 7.467.37 (m, 1H), 7, 37-7.27 (m, 2H), 7.15 (m, 1H), 7.08 (dd, J= 8.0, 1.9 Hz, 1H), 6.92 (m, J= 2, 2 Hz, 1H), 6.85 (m, 1H), 6.64 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.83 (d, J= 23, 6 Hz, 3H), 2.37 (m, 1H), 0.85 (dd, J= 13.0, 7.0 Hz, 3H), 0.41 (dd, J= 9.4, 6.9 Hz, 3H); 13 C NMR (125 MHz, DMSO-d6) δ 175.18, 175.05, 165.31, 164.56, 162.80, 162.74, 149.75, 149.64, 147.79, 147, 68, 147.33, 147.24, 145.92, 145.79, 143.48, 143.43, 134.62, 134.59, 133.42, 127.08, 126.18, 126.10, 122.71, 122.67, 122.58, 120.23, 119.41, 117.79, 117.70, 117.55, 117.23, 117.09, 110.62, 93.37, 93, 29, 69.61, 56.21, 53.64, 24.90, 21.39, 21.08, 20.64, 20.50.

Соединение С-10.С8: 6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-6'-(пропан-2ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'H-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.Compound C-10.C8: 6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyridin-3-yl)-6'-(propan-2yl)-1,2, 3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

В 100 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-9.С8 (2 г, 3,5 ммоль) и колбу охлаждали на ледяной бане. Затем медленно добавляли ТФУК (20 мл) (приблизительно 2 мл/мин). Охлаждающую баню убирали и реакционную смесь перемешивали 1 ч при комнатной температуре. После этого времени анализ УЭЖХМС показал 75% площади пика продукта. Реакционную смесь перемешивали еще 1 ч, смесь выливали в лед (приблизительно 50 г) и разбавляли ДХМ (50 мл). Фазы разделяли и водную фазу трижды экстрагировали ДХМ (3x50 мл). Объединенные органические фазы промывали водой, солевым раствором и растворитель удаляли под вакуумом. Остаток предварительно адсорбировали на силикагеле и очищали с помощью флэш-хроматографии (50% AcOEt в н-гексане). После удаления растворителей продукт С-1О.С8 получали в виде красно-коричневого твердого вещества/пены (815 мг, выход 41%) с чистотой 98% в соответствии с анализом УЭЖХМС. Вышеуказанную реакцию повторяли еще три раза, все полученные образцы (5,76 г) соединения С-10.С8 объединяли и перемешивали в 25 мл смеси AcOEt/н-гексан (1:5). Смесь нагревали до температуры кипения с обратным холодильником и добавляли AcOEt до тех пор, пока все оставшееся твердое вещество не растворилось. Затем по каплям добавляли 75 мл н-гексана и смесь перемешивали 16 ч при комнатной температуре. Твердое вещество отфильтровывали, промывали AcOEt/н-гексаном (1:10, 25 мл) и высушивали под высоким вакуумом. В результате конечный продукт С-10.С8 получали в виде светло-красного твердого вещества (4,77 г, чистота 98% в соответствии с анализом УЭЖХМС).Compound C-9.C8 (2 g, 3.5 mmol) was added to a 100 ml flask equipped with a magnetic stirrer and the flask was cooled in an ice bath. TFA (20 ml) was then slowly added (approximately 2 ml/min). The cooling bath was removed and the reaction mixture was stirred for 1 h at room temperature. After this time, UELCMS analysis showed 75% of the peak area of the product. The reaction mixture was stirred for an additional 1 hour, the mixture was poured onto ice (ca. 50 g) and diluted with DCM (50 ml). The phases were separated and the aqueous phase was extracted three times with DCM (3x50 ml). The combined organic phases were washed with water, brine and the solvent was removed in vacuo. The residue was pre-adsorbed on silica gel and purified by flash chromatography (50% AcOEt in n-hexane). After removal of the solvents, the product C-1O.C8 was obtained as a red-brown solid/foam (815 mg, 41% yield) with a purity of 98% according to UELCMS analysis. The above reaction was repeated three more times, all obtained samples (5.76 g) of compound C-10.C8 were combined and stirred in 25 ml of AcOEt/n-hexane (1:5). The mixture was heated to reflux and AcOEt was added until all remaining solid had dissolved. Then 75 ml of n-hexane was added dropwise and the mixture was stirred for 16 hours at room temperature. The solid was filtered off, washed with AcOEt/n-hexane (1:10, 25 ml) and dried under high vacuum. As a result, the final product C-10.C8 was obtained as a light red solid (4.77 g, 98% purity according to UELCMS analysis).

Соединение С-9.С8: 4-(6-хлор-3-гидрокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил)-N-(3,4-дифторфенил)-1(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-5-(nропан-2-ил)-1H-пиррол-3-карбоксамид.Compound С-9.С8: 4-(6-chloro-3-hydroxy-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3-yl)-N-(3,4-difluorophenyl)-1(4 ,6-dimethoxypyridin-3-yl)-5-(p-propan-2-yl)-1H-pyrrole-3-carboxamide.

В 100 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-8.С8 (2 г, 3,5 ммоль, 1 экв.) и ТГФ (35 мл) с последующим добавлением триметилфосфита (0,83 мл, 7 ммоль, 2 экв.). Затем реакционную смесь охлаждали на ледяной бане и одной порцией добавляли трет-пептоксид натрия (1,54 г, 14 ммоль, 4 экв.). Охлаждающую баню убирали и реакционную смесь перемешивали 1 ч при комнатной температуре (колба была снабжена трубкой с CaCl2). После этого времени анализ УЭЖХМС показалCompound C-8.C8 (2 g, 3.5 mmol, 1 eq.) and THF (35 ml) were added to a 100 ml flask equipped with a magnetic stirrer, followed by the addition of trimethyl phosphite (0.83 ml, 7 mmol, 2 eq. .). The reaction mixture was then cooled in an ice bath and sodium tert-peptoxide (1.54 g, 14 mmol, 4 eq.) was added in one portion. The cooling bath was removed and the reaction mixture was stirred for 1 h at room temperature (the flask was equipped with a CaCl 2 tube). After this time, UELCMS analysis showed

- 26 040469- 26 040469

80% площади пика продукта. После еще одного часа перемешивания приблизительно 90% растворителя удаляли и такую полученную смесь разбавляли 50 г льда. Полученную суспензию подкисляли 1 М HCl до рН~5 и дополнительно разбавляли 50 мл ДХМ. Фазы разделяли и водную фазу экстрагировали ДХМ (2x30 мл). Объединенные органические фазы промывали водой, солевым раствором, высушивали над Na2SO4 и растворитель удаляли под вакуумом. Неочищенный продукт С-9.С8 получали в виде красночерного твердого вещества/пены (чистота 70% в соответствии с анализом УЭЖХМС) и использовали в следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки (выход был превышен 100%).80% of the peak area of the product. After another hour of stirring, approximately 90% of the solvent was removed and this resulting mixture was diluted with 50 g of ice. The resulting suspension was acidified with 1 M HCl to pH~5 and further diluted with 50 ml DCM. The phases were separated and the aqueous phase was extracted with DCM (2x30 ml). The combined organic phases were washed with water, brine, dried over Na 2 SO 4 and the solvent was removed under vacuum. The crude product C-9.C8 was obtained as a red black solid/foam (purity 70% according to UPLCMS analysis) and was used in the next step without any further purification (yield exceeded 100%).

Соединение С-8.С8: 4-(6-хлор-2-оксо-2,3-дигидро-1 H-индол-3-ил)-N-(3,4-дифторфенил)-1-(4,6диметоксипиридин-3-ил)-5-(пропан-2-ил)-1H-пиррол-3-карбоксамид.Compound C-8.C8: 4-(6-chloro-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3-yl)-N-(3,4-difluorophenyl)-1-(4,6dimethoxypyridine -3-yl)-5-(propan-2-yl)-1H-pyrrole-3-carboxamide.

В 500 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединения С-4А (8,1 г, 32,4 ммоль, 1 экв.), С-7В (5 г, 32,4 ммоль, 1 экв.) и С-6Е (5,9 г, 32,4 ммоль, 1 экв.) с последующим добавлением АсОН (80 мл) и колбу плотно закрывали пластиковой пробкой. Смесь нагревали до 85°С (температура нагревательной бани) и перемешивали при данной температуре в течение 16 ч. После этого времени анализ УЭЖХМС показал почти полное расходование исходных материалов (что составляет 55% площади пика продукта). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и АсОН испаряли досуха. Остаток предварительно адсорбировали на силикагеле и очищали с помощью флэш-хроматографии (от 30% до 60% AcOEt в н-гексане). После удаления растворителей продукт С-8.С8 получали в виде светло-красного твердого вещества (8 г, выход 44%) с чистотой 87% в соответствии с анализом УЭЖХМС.Compounds C-4A (8.1 g, 32.4 mmol, 1 eq.), C-7B (5 g, 32.4 mmol, 1 eq.) and C-6E were added to a 500 ml flask equipped with a magnetic stirrer. (5.9 g, 32.4 mmol, 1 eq.) followed by the addition of AcOH (80 ml) and the flask was tightly closed with a plastic stopper. The mixture was heated to 85° C. (heating bath temperature) and stirred at this temperature for 16 hours. After this time, UPLCMS analysis showed almost complete consumption of the starting materials (corresponding to 55% of the peak area of the product). The reaction mixture was cooled to room temperature and AcOH was evaporated to dryness. The residue was pre-adsorbed on silica gel and purified by flash chromatography (30% to 60% AcOEt in n-hexane). After removal of the solvents, the product C-8.C8 was obtained as a light red solid (8 g, 44% yield) with a purity of 87% according to UPLCMS analysis.

Соединение (9), С9: (3S)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-6'-(пропан2-ил)-1,2,3',5'-теmрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.Compound (9), C9: (3S)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyridin-3-yl)-6'-(propan2-yl )-1,2,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

Указанное в заголовке соединение получали после разделения с помощью препаративной хиральной СФХ (способ I) или хиральной ОФ-ВЭЖХ (способ S) рацемического соединения С-10.С9; >99% э.и.; tr: 8,85 мин (способ S'). 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 11,23 (уш.с, 1H), 8,10 (д, J= 26,0 Гц, 1H), 7,44 (ддд, J= 8,9, 4,1, 2,7 Гц, 1H), 7,35-7,27 (м, 2Н), 7,17 (дд, J= 8,1, 1,8 Гц, 1H), 7,10-7,02 (м, 2Н), 6,90 (д, J= 1,9 Гц, 1H), 6,64 (д, J= 2,1 Гц, 1H), 3,90 (с, 3Н), 3,83 (д, J= 20,7 Гц, 3Н), 2,45-2,32 (м, 1H), 0,84 (дд, J= 9,4, 7,0 Гц, 3Н), 0,42 (дд, J= 7,1, 4,0 Гц, 3Н); 13С ЯМР (126 МГц, ДМСО-d6) δ 175,68, 165,85, 164,38, 163,36, 163,24, 158,77, 156,77, 146,44, 144,17, 135,31, 134,21, 130,70, 129,60, 128,33, 127,33, 126,18, 125,78, 125,66, 123,46, 122,92, 120,71, 119,27, 118,72, 118,54, 111,11, 93,90, 70,08, 56,78, 54,18, 25,42, 22,00, 21,64, 21,24, 21,04.The title compound was obtained after resolution by preparative chiral SFC (method I) or chiral RP-HPLC (method S) of racemic compound C-10.C9; >99% e.i.; t r : 8.85 min (method S'). 1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.23 (br. s, 1H), 8.10 (d, J= 26.0 Hz, 1H), 7.44 (ddd, J= 8.9 , 4.1, 2.7 Hz, 1H), 7.35-7.27 (m, 2H), 7.17 (dd, J= 8.1, 1.8 Hz, 1H), 7.10- 7.02 (m, 2H), 6.90 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 6.64 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.83 (d, J= 20.7 Hz, 3H), 2.45-2.32 (m, 1H), 0.84 (dd, J= 9.4, 7.0 Hz, 3H), 0 .42 (dd, J= 7.1, 4.0 Hz, 3H); 13 C NMR (126 MHz, DMSO-d6) δ 175.68, 165.85, 164.38, 163.36, 163.24, 158.77, 156.77, 146.44, 144.17, 135, 31, 134.21, 130.70, 129.60, 128.33, 127.33, 126.18, 125.78, 125.66, 123.46, 122.92, 120.71, 119.27, 118.72, 118.54, 111.11, 93.90, 70.08, 56.78, 54.18, 25.42, 22.00, 21.64, 21.24, 21.04.

Соединение С-10.С9: 6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-6'-(пропан-2ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.Compound C-10.C9: 6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyridin-3-yl)-6'-(propan-2yl)-1, 2,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

В 100 мл колбе, снабженной магнитной мешалкой, соединение С-9.С9 (5,8 г, 9,68 ммоль) растворяли в 30 мл безводного ДХМ и одной порцией добавляли 10 мл ТФУК. Реакционную смесь перемешивали 3 ч при комнатной температуре. После этого времени анализ УЭЖХМС показал 54% площади пика продукта. Реакционную смесь испаряли досуха. Остаток перемешивали в 30 мл AcOEt в течение 1 ч и бледно-серое твердое вещество осаждали из смеси. Твердое вещество отделяли фильтрованием и высушивали на воздухе. В результате получали продукт С-10.С9 (2,2 г, выход 34,1% после 2 стадий, исходя из С-8.С9,In a 100 ml flask equipped with a magnetic stirrer, compound C-9.C9 (5.8 g, 9.68 mmol) was dissolved in 30 ml anhydrous DCM and 10 ml TFA was added in one portion. The reaction mixture was stirred for 3 h at room temperature. After this time, UELCMS analysis showed 54% of the peak area of the product. The reaction mixture was evaporated to dryness. The residue was stirred in 30 ml AcOEt for 1 hour and a pale gray solid precipitated from the mixture. The solid was separated by filtration and dried in air. This gave the product C-10.C9 (2.2 g, 34.1% yield after 2 steps, based on C-8.C9,

- 27 040469 чистота 94% в соответствии с анализом УЭЖХМС).- 27 040469 purity 94% according to UELCMS analysis).

Соединение С-9.С9: N-(5-хлор-2-фторфенил)-4-(6-хлор-3-гидрокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3ил)-1 -(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-5 -(пропан-2-ил)-1 Н-пиррол-3 -карбоксамид.Compound C-9.C9: N-(5-chloro-2-fluorophenyl)-4-(6-chloro-3-hydroxy-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3yl)-1 -( 4,6-dimethoxypyridin-3-yl)-5-(propan-2-yl)-1 H-pyrrol-3-carboxamide.

В 100 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-8.С9 (6,08 г, 10,5 ммоль, 1 экв.) и ТГФ (62 мл) с последующим добавлением триметилфосфита (2,47 мл, 21 ммоль, 2 экв.). Затем реакционную смесь охлаждали на ледяной бане и одной порцией добавляли трет-пентоксид натрия (3,47 г, 31,5 ммоль, 3 экв.). Охлаждающую баню убирали и реакционную смесь перемешивали 1 ч при комнатной температуре (колба была снабжена трубкой с CaCl2). После этого времени анализ УЭЖХМС показал 94% площади пика продукта. Реакционную смесь охлаждали до приблизительно -10°С, затем выливали на лед и реакционную смесь подкисляли 0,5 М HCl до рН 5. Водную фазу экстрагировали AcOEt (3x100 мл), высушивали над Na2SO4 и растворитель испаряли под вакуумом. Неочищенный продукт С-9.С9 получали в виде красно-черного твердого вещества/пены (чистота 68% в соответствии с анализом УЭЖХМС) и использовали в следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки (выход был превышен 100%).Compound C-8.C9 (6.08 g, 10.5 mmol, 1 eq.) and THF (62 ml) were added to a 100 ml flask equipped with a magnetic stirrer, followed by the addition of trimethyl phosphite (2.47 ml, 21 mmol, 2 eq.). The reaction mixture was then cooled in an ice bath and sodium tert-pentoxide (3.47 g, 31.5 mmol, 3 eq.) was added in one portion. The cooling bath was removed and the reaction mixture was stirred for 1 h at room temperature (the flask was equipped with a CaCl 2 tube). After this time, UELCMS analysis showed 94% of the peak area of the product. The reaction mixture was cooled to approximately -10°C, then poured onto ice and the reaction mixture was acidified with 0.5 M HCl to pH 5. The aqueous phase was extracted with AcOEt (3x100 ml), dried over Na 2 SO 4 and the solvent was evaporated under vacuum. The crude product C-9.C9 was obtained as a red-black solid/foam (purity 68% according to UPLCMS analysis) and was used in the next step without any further purification (yield exceeded 100%).

Соединение С-8.С9: N-(5-хлор-2-фторфенил)-4-(6-хлор-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил)-1-(4,6диметоксипиридин-3-ил)-5-(пропан-2-ил)-1H-пиррол-3-карбоксамид.Compound C-8.C9: N-(5-chloro-2-fluorophenyl)-4-(6-chloro-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3-yl)-1-(4, 6dimethoxypyridin-3-yl)-5-(propan-2-yl)-1H-pyrrol-3-carboxamide.

В 100 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединения С-4А (7,79 г, 30 ммоль, 1 экв.), С-7В (4,68 г, 30 ммоль, 1 экв.) и С-6В (6 г, 30 ммоль, 1 экв.) с последующим добавлением АсОН (60 мл) и колбу плотно закрывали пластиковой пробкой. Смесь нагревали до 85°С (температура нагревательной бани) и перемешивали при данной температуре в течение 16 ч. После этого времени анализ УЭЖХМС показал почти полное расходование исходных материалов (что составляет 40% площади пика продукта). Реакционную смесь охлаждали до приблизительно 15°С и обильный красный твердый осадок отделяли фильтрованием от реакционной смеси. Фильтрат испаряли досуха. Остаток предварительно адсорбировали на силикагеле и очищали с помощью флэш-хроматографии (от 10% до 60% AcOEt в нгексане). После удаления растворителей продукт С-8.С9 получали в виде светло-красного твердого вещества (5,58 г, выход 31,5%) с чистотой 93% в соответствии с анализом УЭЖХМС.Compounds C-4A (7.79 g, 30 mmol, 1 eq.), C-7B (4.68 g, 30 mmol, 1 eq.) and C-6B (6 g, 30 mmol, 1 equiv.) followed by the addition of AcOH (60 ml) and the flask was tightly closed with a plastic stopper. The mixture was heated to 85° C. (heating bath temperature) and stirred at this temperature for 16 hours. After this time, UPLCMS analysis showed almost complete consumption of the starting materials (corresponding to 40% of the peak area of the product). The reaction mixture was cooled to approximately 15° C. and an abundant red solid precipitate was filtered off from the reaction mixture. The filtrate was evaporated to dryness. The residue was pre-adsorbed on silica gel and purified by flash chromatography (10% to 60% AcOEt in nhexane). After removal of the solvents, the product C-8.C9 was obtained as a light red solid (5.58 g, 31.5% yield) with a purity of 93% according to UPLCMS analysis.

Соединение (10), С10: (3 S)-6-хлор-2'-(5-хлор-2,4-дифторфенил)-5 '-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.Compound (10), C10: (3S)-6-chloro-2'-(5-chloro-2,4-difluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)6'-(propane -2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indol-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

Указанное в заголовке соединение получали после разделения с помощью препаративной хиральной ОФ-ВЭЖХ рацемического соединения С-10.С10 с использованием способа Р; >99% э.и.; tr: 9,96 мин (способ Р'); 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО^) δ 11,22 (уш.с, 1H), 8,50 (уш.с, 1H), 7,64 (т, J= 9,4 Гц, 1H), 7,40 (с, 1H), 7,20 (т, J= 7,5 Гц, 2Н), 7,10 (дд, J= 8,0, 2,0 Гц, 1H), 6,91 (д, J= 1,9 Гц, 1H), 3,98 (с, 3Н), 3,95 (с, 3Н), 2,47-2,41 (м, 1H), 0,85 (д, J= 7,0 Гц, 3Н), 0,44 (д, J= 6,9 Гц, 3Н); 13С ЯМР (126 МГц, ДМСО^) δ 175,36, 170,76, 166,43, 164,71, 164,35, 159,05, 158,96, 158,36, 158,26, 157,95, 157,03, 156,93, 156,36, 156,26, 144,01, 135,46, 134,20, 131,13, 127,41, 125,84, 123,55, 123,09, 121,72, 121,63, 119,46, 118,77, 116,23, 115,59, 115,44, 111,19, 107,31, 107,10, 106,90, 70,05, 60,19,55,66,55,01,25,34, 22,31-20,83.The title compound was obtained after preparative chiral RP-HPLC resolution of racemic C-10.C10 using method P; >99% e.i.; t r : 9.96 min (method P'); 1 H NMR (500 MHz, DMSO^) δ 11.22 (br. s, 1H), 8.50 (br. s, 1H), 7.64 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 7 .40 (s, 1H), 7.20 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 7.10 (dd, J= 8.0, 2.0 Hz, 1H), 6.91 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 2.47-2.41 (m, 1H), 0.85 (d, J= 7 .0 Hz, 3H), 0.44 (d, J= 6.9 Hz, 3H); 13 C NMR (126 MHz, DMSO^) δ 175.36, 170.76, 166.43, 164.71, 164.35, 159.05, 158.96, 158.36, 158.26, 157.95 157.03 156.93 156.36 156.26 144.01 135.46 134.20 131.13 127.41 125.84 123.55 123.09 121 .72, 121.63, 119.46, 118.77, 116.23, 115.59, 115.44, 111.19, 107.31, 107.10, 106.90, 70.05, 60.19 .55.66.55.01.25.34, 22.31-20.83.

- 28 040469- 28 040469

Соединение С-10.С10: 6-хлор-2'-(5-хлор-2,4-дифторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2H-спиро[индол-3,Γ-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.Compound C-10.C10: 6-chloro-2'-(5-chloro-2,4-difluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'(propan-2-yl) -1,2,3',5'-tetrahydro-2H-spiro[indole-3,Γ-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

АсОН (25 мл) помещали в 100 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой. Затем одной порцией добавляли С-9.С10 (2,3 г, 4 ммоль, 1 экв.). По каплям добавляли MsOH (0,25 мл, 4,85 ммоль, 1,2 экв.) и смесь перемешивали в течение 2 ч при 45°С. Большую часть АсОН испаряли и остаток растворяли в ДХМ (100 мл), затем добавляли 100 мл воды и смесь обрабатывали 3 М NaOH до достижения рН~8. Фазы разделяли и водную фазу экстрагировали ДХМ (2x100 мл). Объединенные органические фазы промывали солевым раствором (50 мл), высушивали над MgSO4 и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (CHCl3:МеОН; 100:0^98:2) с получением 1,7 г продукта С-10.С10 с чистотой 91% в соответствии с анализом УЭЖХМС.AcOH (25 ml) was placed in a 100 ml flask equipped with a magnetic stirrer. C-9.C10 (2.3 g, 4 mmol, 1 eq.) was then added in one portion. MsOH (0.25 ml, 4.85 mmol, 1.2 eq) was added dropwise and the mixture was stirred for 2 h at 45°C. Most of the AcOH was evaporated and the residue was dissolved in DCM (100 ml), then 100 ml of water was added and the mixture was treated with 3 M NaOH until a pH~8 was reached. The phases were separated and the aqueous phase was extracted with DCM (2x100 ml). The combined organic phases were washed with brine (50 ml), dried over MgSO 4 and concentrated. The residue was purified by flash chromatography (CHCl 3 :MeOH; 100:0^98:2) to give 1.7 g of product C-10.C10 with a purity of 91% according to UELCMS analysis.

Соединение С-9.С10: N-(5-хлор-2,4-дифторфенил)-4-(6-хлор-3-гидрокси-2-оксо-2,3-дигидро-1Hиндол-3-ил)-1-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-5-(пропан-2-ил)-1H-пиррол-3-карбоксамид.Compound С-9.С10: N-(5-chloro-2,4-difluorophenyl)-4-(6-chloro-3-hydroxy-2-oxo-2,3-dihydro-1Hindol-3-yl)-1 -(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-5-(propan-2-yl)-1H-pyrrole-3-carboxamide.

В 100 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-8.С10 (8,9 г, 14,8 ммоль, 1 экв.) и ТГФ (50 мл) с последующим добавлением триэтилфосфита (3,8 мл, 22,2 ммоль, 1,5 экв.). Раствор охлаждали до 0°С и затем добавляли несколькими порциями трет-бутоксид натрия (2,85 г, 29,6 ммоль, 2 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре (колба была снабжена трубкой с CaCl2). После этого времени анализ УЭЖХМС показал 82% целевого продукта. Реакционную смесь медленно выливали в охлажденную (0-5°С) смесь воды (150 мл) и 36% HCl (5 мл). После добавления этилацетата (100 мл) смесь переносили в делительную воронку. Слои разделяли и водную фазу еще раз экстрагировали AcOEt (100 мл). Объединенные органические фазы промывали солевым раствором, высушивали над MgSO4 и концентрировали под вакуумом. Масляный остаток предварительно адсорбировали на силикагеле и очищали с помощью флэш-хроматографии (ДХМ/МеОН 100:0^98:2). Выделяли две фракции продукта С-9.С10: 3 г с чистотой 85% и 3 г с чистотой 41% в соответствии с анализом УЭЖХМС. Выход: 50% (включая обе фракции).To a 100 ml flask equipped with a magnetic stirrer was added compound C-8.C10 (8.9 g, 14.8 mmol, 1 eq.) and THF (50 ml) followed by the addition of triethyl phosphite (3.8 ml, 22.2 mmol, 1.5 eq.). The solution was cooled to 0° C. and then sodium tert-butoxide (2.85 g, 29.6 mmol, 2 eq.) was added in several portions. The reaction mixture was stirred for 3 h at room temperature (the flask was equipped with a tube with CaCl 2 ). After this time, UELCMS analysis showed 82% of the desired product. The reaction mixture was slowly poured into a chilled (0-5°C) mixture of water (150 ml) and 36% HCl (5 ml). After adding ethyl acetate (100 ml) the mixture was transferred to a separating funnel. The layers were separated and the aqueous phase was re-extracted with AcOEt (100 ml). The combined organic phases were washed with brine, dried over MgSO4 and concentrated in vacuo. The oily residue was pre-adsorbed on silica gel and purified by flash chromatography (DCM/MeOH 100:0-98:2). Two fractions of the product C-9.C10 were isolated: 3 g with a purity of 85% and 3 g with a purity of 41% according to the analysis of UELCMS. Yield: 50% (including both fractions).

Соединение С-8.С10: N-(5-хлор-2,4-дифторфенил)-4-(6-хлор-2-оксо-2,3-дигидро-1 H-индол-З -ил)-1 (2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-5-(пропан-2-ил)-1H-пиррол-3-карбоксамид.Compound C-8.C10: N-(5-chloro-2,4-difluorophenyl)-4-(6-chloro-2-oxo-2,3-dihydro-1 H-indol-3 -yl)-1 ( 2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-5-(propan-2-yl)-1H-pyrrole-3-carboxamide.

В 250 мл круглодонной колбе, снабженной магнитной мешалкой, соединения С-4А (11,6 г, 47 ммоль, 1 экв.), С-7А (8,7 г, 56 ммоль, 1,2 экв.) и C-6F (10 г, 47 ммоль, 1 экв) суспендировали в 75 мл АсОН и колбу плотно закрывали пластиковой пробкой. Смесь нагревали до 70°С и перемешивали при данной температуре в течение 24 ч. После этого времени анализ УЭЖХМС показал 47% ожидаемого продукта. Реакционную смесь испаряли досуха. Твердый остаток предварительно адсорбировали на силикагеле и очищали с помощью флэш-хроматографии (от 20% до 50% AcOEt в н-гексане). Все фракции, которые содержали продукт, испаряли досуха с получением 6,6 г целевого продукта С-8.С1О с чистотой 83% в соответствии с анализом УЭЖХМС. Выход: 32%.In a 250 ml round bottom flask equipped with a magnetic stirrer, compounds C-4A (11.6 g, 47 mmol, 1 eq.), C-7A (8.7 g, 56 mmol, 1.2 eq.) and C-6F (10 g, 47 mmol, 1 eq) was suspended in 75 ml AcOH and the flask was tightly closed with a plastic stopper. The mixture was heated to 70° C. and stirred at this temperature for 24 hours. After this time, UELCMS analysis showed 47% of the expected product. The reaction mixture was evaporated to dryness. The solid residue was pre-adsorbed on silica gel and purified by flash chromatography (20% to 50% AcOEt in n-hexane). All fractions that contained product were evaporated to dryness to give 6.6 g of the desired product C-8.C10 with a purity of 83% according to UPLCMS analysis. Yield: 32%.

Соединение (11), C11: (3 S)-6'-(бутан-2-ил)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин5-ил)-1,2,3',5'-теmрагидро-2Ή-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.Compound (11), C11: (3S)-6'-(butan-2-yl)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidine5- yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

- 29 040469- 29 040469

Указанное в заголовке соединение (диастереомерная смесь) получали после разделения с помощью препаративной хиральной ВЭЖХ-ОФ рацемического соединения С-1О.С11 с использованием способа М; >99% э.и.; О 9,96 мин (способ М'); 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-di) δ 11,24 (с, 1H), 8,50 (уш.с, 1H), 7,44 (ддд, J= 8,9, 4,2, 2,7 Гц, 1H), 7,38 (с, 1H), 7,31 (т, J= 9,1 Гц, 1H), 7,23-7,14 (м, 1H), 7,03 (дд, J= 6,4, 2,7 Гц, 1H), 6,84 (ддд, J= 10,5, 8,4, 2,4 Гц, 1H), 6,72 (дд, J= 8,9, 2,4 Гц, 1H), 3,98 (с, 3Н), 3,95 (уш.с, 3Н), 3,09 (кв, J= 7,3 Гц, 2Н), 2,48-2,39 (м, 1H), 1,18 (т, J= 7,2 Гц, 3Н), 0,85 (д, J= 7,0 Гц, 2Н), 0,44 (д, J= 7,0 Гц, 3Н); 13СThe title compound (diastereomeric mixture) was obtained after preparative chiral HPLC-RP separation of racemic C-1O.C11 using method M; >99% e.i.; 0 9.96 min (method M'); 1H NMR (500 MHz, DMSO-di) δ 11.24 (s, 1H), 8.50 (br. s, 1H), 7.44 (ddd, J= 8.9, 4.2, 2.7 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 7.23-7.14 (m, 1H), 7.03 (dd, J = 6.4, 2.7 Hz, 1H), 6.84 (ddd, J= 10.5, 8.4, 2.4 Hz, 1H), 6.72 (dd, J= 8.9, 2 .4 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.95 (br.s, 3H), 3.09 (kv, J= 7.3 Hz, 2H), 2.48-2.39 (m, 1H), 1.18 (t, J= 7.2 Hz, 3H), 0.85 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 0.44 (d, J= 7.0 Hz , 3Н); 13 C

ЯМР (126 МГц, ДМСО-d6) δ 175,83, 166,45, 164,83, 164,70, 164,26, 162,87, 158,76, 157,95, 156,76, 144,36, 144,26, 134,08, 130,72, 130,66, 129,55, 128,30, 128,28, 127,61, 127,53, 125,73 125,61, 123,86, 122,88, 119,71, 118,70, 118,59, 118,52, 116,26, 109,68, 109,50, 99,43, 99,21, 70,02, 55,66, 55,01, 46,14, 25,33, 21,51, 11,45, 9,08.NMR (126 MHz, DMSO-d 6 ) δ 175.83, 166.45, 164.83, 164.70, 164.26, 162.87, 158.76, 157.95, 156.76, 144.36 , 144.26, 134.08, 130.72, 130.66, 129.55, 128.30, 128.28, 127.61, 127.53, 125.73 88, 119.71, 118.70, 118.59, 118.52, 116.26, 109.68, 109.50, 99.43, 99.21, 70.02, 55.66, 55.01, 46.14, 25.33, 21.51, 11.45, 9.08.

Соединение С-10.С11: 6'-(бутан-2-ил)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин5-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'H-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.Compound C-10.C11: 6'-(butan-2-yl)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin5-yl)-1, 2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione.

В 250 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-9.С11 (2,8 г, 4,56 ммоль) вместе с ДХМ (60 мл). Затем добавляли ТФУК (30 мл) (приблизительно 2 мл/мин). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. После этого времени анализ УЭЖХМС показал 65% площади пика ожидаемого продукта. Затем смесь выливали на лед (приблизительно 200 мл) и разбавляли ДХМ (100 мл). Фазы разделяли и водную фазу трижды экстрагировали ДХМ (3x50 мл). Объединенные органические фазы промывали водой, солевым раствором, высушивали над MgSO4 и концентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт С-10.С11 очищали с помощью колоночной хроматографии (от 10 до 40% ацетона в н-гексане). В результате получали 1,5 г коричневого твердого вещества С-10.С11. Данное твердое вещество перемешивали в AcOEt (5 мл), отделяли фильтрованием, промывали 20 мл AcOEt и высушивали на воздухе. В результате продукт С-10.С11 получали в виде белых твердых частиц (1,4 г, чистота 98% в соответствии с анализом УЭЖХМС).To a 250 ml flask equipped with a magnetic stirrer was added compound C-9.C11 (2.8 g, 4.56 mmol) along with DCM (60 ml). TFA (30 ml) was then added (approximately 2 ml/min). The reaction mixture was stirred for 2 hours at room temperature. After this time, UELCMS analysis showed 65% of the peak area of the expected product. The mixture was then poured onto ice (approximately 200 ml) and diluted with DCM (100 ml). The phases were separated and the aqueous phase was extracted three times with DCM (3x50 ml). The combined organic phases were washed with water, brine, dried over MgSO 4 and concentrated in vacuo. The crude product C-10.C11 was purified by column chromatography (10 to 40% acetone in n-hexane). This gave 1.5 g of a brown solid C-10.C11. This solid was stirred in AcOEt (5 ml), separated by filtration, washed with 20 ml AcOEt and air dried. As a result, the product C-10.C11 was obtained as white solids (1.4 g, 98% purity according to UELCMS analysis).

Соединение С-9.С11: 5 -(буган-2-ил)-№(5-хлор-2-фторфенил)-4-(6-хлор-3-гидрокси-2-оксо-2,3-дигидро1H-индол-3-ил)-1-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-1H-пиррол-3-карбоксамид.Compound С-9.С11: 5-(bugan-2-yl)-Ni(5-chloro-2-fluorophenyl)-4-(6-chloro-3-hydroxy-2-oxo-2,3-dihydro1H-indole -3-yl)-1-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-1H-pyrrol-3-carboxamide.

НH

В 250 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединение С-8.С11 (3 г, 5 ммоль, экв.) и ТГФ (80 мл) с последующим добавлением триметилфосфита (1,21 мл, 10 ммоль, 2 экв.). Затем реакционную смесь охлаждали на ледяной бане и добавляли небольшими порциями трет-пентоксид натрия (2,2 г, 20 ммоль, 4 экв.). Охлаждающую баню убирали и реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре (колба была снабжена трубкой с СаС12). После этого времени анализTo a 250 ml flask equipped with a magnetic stirrer was added compound C-8.C11 (3 g, 5 mmol, equiv.) and THF (80 ml) followed by the addition of trimethyl phosphite (1.21 ml, 10 mmol, 2 equiv.). The reaction mixture was then cooled in an ice bath and sodium tert-pentoxide (2.2 g, 20 mmol, 4 eq.) was added in small portions. The cooling bath was removed and the reaction mixture was stirred for 5 hours at room temperature (the flask was fitted with a CaCl 2 tube). After this time, the analysis

УЭЖХМС показал 71% двух (диастереомерных) пиков продукта С-9.С11. Реакционную смесь разбавляли 200 мл воды со льдом. Полученную суспензию подкисляли 3 М HCl до рН 5 и разбавляли 100 мл AcOEt. Фазы разделяли и водную фазу трижды экстрагировали AcOEt (3x50 мл). Объединенные органические фазы промывали водой, солевым раствором, высушивали над Na2SO4 и растворитель удаляли под вакуумом. Неочищенный продукт С-9.С11 получали в виде темно-красного масла (чистота 72% в соответствии с анализом УЭЖХМС) и использовали в следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки.UELCMS showed 71% of the two (diastereomeric) peaks of the C-9.C11 product. The reaction mixture was diluted with 200 ml of ice water. The resulting suspension was acidified with 3 M HCl to pH 5 and diluted with 100 ml AcOEt. The phases were separated and the aqueous phase was extracted three times with AcOEt (3x50 ml). The combined organic phases were washed with water, brine, dried over Na 2 SO 4 and the solvent was removed under vacuum. The crude product C-9.C11 was obtained as a dark red oil (purity 72% according to UPLCMS analysis) and was used in the next step without any further purification.

Соединение С-8.С11: 5-(бутан-2-ил)-N-(5-хлор-2-фторфенил)-4-(6-хлор-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол- 30 040469Compound С-8.С11: 5-(butan-2-yl)-N-(5-chloro-2-fluorophenyl)-4-(6-chloro-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indole- 30 040469

3-ил)-1-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-1H-пиррол-3-карбоксамид. Η3-yl)-1-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-1H-pyrrol-3-carboxamide. Η

В 250 мл колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли соединения С-4В (4,44 г, 16,8 ммоль, 1 экв.), С-7А (2,87 г, 18,5 ммоль, 1,1 экв.) и C-6F (3,32 г, 16,8 ммоль, 1 экв.) с последующим добавлением АсОН (30 мл) и колбу плотно закрывали пластиковой пробкой. Смесь нагревали до 90°С (температура нагревательной бани) и перемешивали при данной температуре в течение 16 ч. После этого времени анализ УЭЖХМС показал почти полное расходование исходных материалов (что составляет 50% площади пика продукта). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и испаряли досуха. Остаток предварительно адсорбировали на силикагеле и очищали с помощью флэш-хроматографии (от 30% до 60% AcOEt в н-гексане). После удаления растворителей продукт С-8.С11 получали в виде темнокрасного твердого вещества/пены (3,5 г, выход 35%) с чистотой 83% в соответствии с анализом УЭЖХМС.Compounds C-4B (4.44 g, 16.8 mmol, 1 eq.), C-7A (2.87 g, 18.5 mmol, 1.1 eq.) were added to a 250 ml flask equipped with a magnetic stirrer. and C-6F (3.32 g, 16.8 mmol, 1 eq.) followed by the addition of AcOH (30 ml) and the flask was tightly closed with a plastic stopper. The mixture was heated to 90° C. (heating bath temperature) and stirred at this temperature for 16 hours. After this time, UPLCMS analysis showed almost complete consumption of the starting materials (corresponding to 50% of the peak area of the product). The reaction mixture was cooled to room temperature and evaporated to dryness. The residue was pre-adsorbed on silica gel and purified by flash chromatography (30% to 60% AcOEt in n-hexane). After removal of the solvents, the product C-8.C11 was obtained as a dark red solid/foam (3.5 g, 35% yield) with a purity of 83% according to UPLCMS analysis.

Получение и анализ энантиомеровPreparation and analysis of enantiomers

Все энантиомеры разделяли на препаративной СФХ или ВЭЖХ с хиральными колонками.All enantiomers were separated on preparative SFC or HPLC with chiral columns.

Условия хиральной очистки - СФХ.Conditions for chiral purification - SFC.

Способ А: колонка: Lux Amylose-1 (21,2 ммх250 мм, 5 мкм), поток 50 мл/мин, изократическое элюирование МеОН:СО2, 25:75, детектирование: УФ 210 нм.Method A: column: Lux Amylose-1 (21.2 mm x 250 mm, 5 μm), flow 50 ml/min, isocratic elution with MeOH:CO 2 , 25:75, detection: UV 210 nm.

Способ В: колонка: Lux Cellulose-1 (21,2 ммх250 мм, 5 мкм), поток 50 мл/мин, изократическое элюирование МеОН:СО2, 25:75, детектирование: УФ 210 нм.Method B: column: Lux Cellulose-1 (21.2 mm x 250 mm, 5 μm), flow 50 ml/min, isocratic elution with MeOH:CO 2 , 25:75, detection: UV 210 nm.

Способ С: колонка: Lux Cellulose-4 (21,2 ммх250 мм, 5 мкм), поток 50 мл/мин, изократическое элюирование МеОН:СО2, 45:55, детектирование: УФ 215 нм.Method C: column: Lux Cellulose-4 (21.2 mm x 250 mm, 5 μm), flow 50 ml/min, isocratic elution with MeOH:CO 2 , 45:55, detection: UV 215 nm.

Способ D: колонка: Chiralpak IC (20 ммх250 мм, 5 мкм), поток 21 мл/мин, изократическое элюирование ЕЮН:СО2, 45:55, детектирование: УФ 210 нм.Method D: column: Chiralpak IC (20 mm x 250 mm, 5 μm), flow 21 ml/min, isocratic elution EHN:CO 2 , 45:55, detection: UV 210 nm.

Способ Е: колонка: Lux Cellulose-4 (21,2 ммх250 мм, 5 мкм), поток 50 мл/мин, изократическое элюирование МеОН:СО2, 40:60, детектирование: УФ 210 нм.Method E: column: Lux Cellulose-4 (21.2 mm x 250 mm, 5 μm), flow 50 ml/min, isocratic elution with MeOH:CO 2 , 40:60, detection: UV 210 nm.

Способ F: колонка: Chiralpak AS-H (20 ммх250 мм, 5 мкм), поток 50 мл/мин, изократическое элюирование МеОН:СО2, 25:75, детектирование: УФ 210 нм.Method F: column: Chiralpak AS-H (20 mm x 250 mm, 5 μm), flow 50 ml/min, isocratic elution with MeOH:CO 2 , 25:75, detection: UV 210 nm.

Способ G: колонка: Chiralpak IC (20 ммх250 мм, 5 мкм), поток 50 мл/мин, изократическое элюирование МеОН:СО2, 45:55, детектирование: УФ 210 нм.Method G: column: Chiralpak IC (20 mm x 250 mm, 5 μm), flow 50 ml/min, isocratic elution with MeOH:CO 2 , 45:55, detection: UV 210 nm.

Способ Н: колонка: Lux Cellulose-4 (30 ммх250 мм, 5 мкм), поток 50 мл/мин, изократическое элюирование МеОН:СО2, 40:60, детектирование: УФ 210 нм.Method H: column: Lux Cellulose-4 (30 mm x 250 mm, 5 μm), flow 50 ml/min, isocratic elution with MeOH:CO 2 , 40:60, detection: UV 210 nm.

Условия хиральной очистки - НФ-ВЭЖХ.Conditions for chiral purification - NF-HPLC.

Способ I: колонка: Chiralpak IC (20 ммх250 мм, 5 мкм), поток 21 мл/мин, изократическое элюирование МеОН, детектирование: УФ 220 нм.Method I: column: Chiralpak IC (20 mm x 250 mm, 5 μm), flow 21 ml/min, isocratic elution with MeOH, detection: UV 220 nm.

Условия хиральной очистки - ОФ-ВЭЖХ.Conditions for chiral purification - RP-HPLC.

Способ J: колонка: Lux Cellulose-2 (21 ммх150 мм, 5 мкм), поток: 30 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:MeOH:H2O, 50:20:30, детектирование: УФ 254 нм.Method J: column: Lux Cellulose-2 (21 mm x 150 mm, 5 μm), flow: 30 ml/min, isocratic elution, ACN:MeOH:H 2 O, 50:20:30, detection: UV 254 nm.

Способ K: колонка: Lux Cellulose-2 (21 ммх150 мм, 5 мкм), поток: 30 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O, 80:20, детектирование: УФ 254 нм.Method K: column: Lux Cellulose-2 (21 mm x 150 mm, 5 μm), flow: 30 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O, 80:20, detection: UV 254 nm.

Способ L: колонка: Lux Cellulose-2 (21 ммх150 мм, 5 мкм), поток: 30 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O, 65:35, детектирование: УФ 254 нм.Method L: column: Lux Cellulose-2 (21 mm x 150 mm, 5 μm), flow: 30 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O, 65:35, detection: UV 254 nm.

Способ М: колонка: Lux Cellulose-2 (21 ммх150 мм, 5 мкм), поток: 30 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O+HCO2NH4 (подвижная фаза А1), 90:10, детектирование: УФ 254 нм.Method M: column: Lux Cellulose-2 (21 mm x 150 mm, 5 μm), flow: 30 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O+HCO 2 NH 4 (mobile phase A1), 90:10, detection: UV 254 nm.

Способ N: колонка: Lux Cellulose-2 (21 ммх150 мм, 5 мкм), поток: 30 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O, 70:30, детектирование: УФ 254 нм.Method N: column: Lux Cellulose-2 (21 mm x 150 mm, 5 μm), flow: 30 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O, 70:30, detection: UV 254 nm.

Способ О: колонка: Lux Cellulose-2 (21 ммх150 мм, 5 мкм), поток: 30 мл/мин, градиентное элюирование, A=ACN, B=H2O, детектирование: УФ 254 нм.Method O: column: Lux Cellulose-2 (21 mm x 150 mm, 5 μm), flow: 30 ml/min, gradient elution, A=ACN, B=H 2 O, detection: UV 254 nm.

Время[мин] Time [min] % А % A %IN Градиентная кривая gradient curve 0,0 0.0 60 60 40 40 - - 1,0 1.0 60 60 40 40 линейная (6) linear (6) 5,0 5.0 90 90 10 10 линейная (6) linear (6) 10,0 10.0 60 60 40 40 прямая (11) straight (11)

- 31 040469- 31 040469

Способ Р: колонка: Lux Amylose-2 (21 ммх150 мм, 5 мкм), поток: 30 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O, 50:50, детектирование: УФ 254 нм.Method P: column: Lux Amylose-2 (21 mm x 150 mm, 5 μm), flow: 30 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O, 50:50, detection: UV 254 nm.

Способ R: колонка: Lux Amylose-2 (21 ммх250 мм, 5 мкм), поток: 30 мл/мин, градиентное элюирование ; A=ACN, B=H2O, детектирование: УФ, 254 нм. ___________________________________Method R: column: Lux Amylose-2 (21 mm x 250 mm, 5 µm), flow: 30 ml/min, gradient elution; A=ACN, B=H 2 O, detection: UV, 254 nm. ___________________________________

Время [мин] Time [min] % А % A %IN Градиентная кривая gradient curve 0,0 0.0 60 60 40 40 - - 1,0 1.0 60 60 40 40 линейная (6) linear (6) 7,0 7.0 90 90 10 10 линейная (6) linear (6) 12,0 12.0 60 60 40 40 прямая (И) straight (I)

Способ S: колонка: Lux Amylose-2 (21 ммх250 мм, 5 мкм), поток: 30 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O, 60:40, детектирование: УФ 254 нм.Method S: column: Lux Amylose-2 (21 mm x 250 mm, 5 μm), flow: 30 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O, 60:40, detection: UV 254 nm.

Способ Т: колонка: Lux Cellulose-4 (21 ммх150 мм, 5 мкм), поток: 30 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O, 60:40, детектирование: УФ 254 нм.Method T: column: Lux Cellulose-4 (21 mm x 150 mm, 5 μm), flow: 30 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O, 60:40, detection: UV 254 nm.

Условия анализа хиральной чистоты - СФХ.Conditions for the analysis of chiral purity - SFC.

Способ А': колонка: Lux Amylose-1 (4,6 ммх250 мм, 5 мкм), температура колонки: 40°С, поток: 4 мл/мин, изократическое элюирование, МеОН:СО2, 25:75, детектирование: УФ 211 нм и 254 нм.Method A': column: Lux Amylose-1 (4.6 mm x 250 mm, 5 μm), column temperature: 40°C, flow: 4 ml/min, isocratic elution, MeOH:CO 2 , 25:75, detection: UV 211 nm and 254 nm.

Способ В': колонка: Lux Cellulose-1 (4,6 ммх250 мм, 5 мкм), температура колонки: 40°С, поток: 4 мл/мин, изократическое элюирование, МеОН:СО2, 25:75, детектирование: УФ 211 и 254 нм.Method B': column: Lux Cellulose-1 (4.6 mm x 250 mm, 5 μm), column temperature: 40°C, flow: 4 ml/min, isocratic elution, MeOH:CO 2 , 25:75, detection: UV 211 and 254 nm.

Способ С: колонка: Lux Cellulose-4 (4,6 ммх250 мм, 5 мкм), температура колонки: 40°С, поток: 4 мл/мин, изократическое элюирование, МеОН:СО2, 50:50, детектирование: УФ 210-400 нм.Method C: column: Lux Cellulose-4 (4.6 mm x 250 mm, 5 μm), column temperature: 40°C, flow: 4 ml/min, isocratic elution, MeOH:CO 2 , 50:50, detection: UV 210 -400 nm.

Способ D': колонка: Chiralpak IC (4,6 ммх250 мм, 5 мкм), температура колонки: 40°С, поток: 4 мл/мин, изократическое элюирование, EtOH:СО2, 45:55, детектирование: УФ 210-400 нм.Method D': column: Chiralpak IC (4.6 mm x 250 mm, 5 μm), column temperature: 40°C, flow: 4 ml/min, isocratic elution, EtOH:CO 2 , 45:55, detection: UV 210- 400 nm.

Способ Е': колонка: Lux Cellulose-4 (4,6 ммх250 мм, 5 мкм), температура колонки: 40°С, поток: 4 мл/мин, изократическое элюирование, МеОН:СО2, 40:60, детектирование: УФ 210-400 нм.Method E': column: Lux Cellulose-4 (4.6 mm x 250 mm, 5 μm), column temperature: 40°C, flow: 4 ml/min, isocratic elution, MeOH:CO 2 , 40:60, detection: UV 210-400 nm.

Способ F': колонка: AMS (4,6 ммх250 мм, 5 мкм), температура колонки: 40°С, поток: 4 мл/мин, изократическое элюирование, МеОН:СО2, 30:70, детектирование: УФ 211 и 254 нм.Method F': column: AMS (4.6 mm x 250 mm, 5 μm), column temperature: 40°C, flow: 4 ml/min, isocratic elution, MeOH:CO 2 , 30:70, detection: UV 211 and 254 nm.

Способ G': колонка: Chiralpak IC (4,6 ммх250 мм, 5 мкм), температура колонки: 40°С, поток: 4 мл/мин, изократическое элюирование, МеОН:СО2, 40:60, детектирование: УФ 210-400 нм.Method G': column: Chiralpak IC (4.6 mm x 250 mm, 5 μm), column temperature: 40°C, flow: 4 ml/min, isocratic elution, MeOH:CO 2 , 40:60, detection: UV 210- 400 nm.

Способ Н': колонка: Lux Cellulose-4 (4,6 ммх250 мм, 5 мкм), температура колонки: 40°С, поток: 4 мл/мин, изократическое элюирование, МеОН:СО2, 40:60, детектирование: УФ 211 и 254 нм.Method H': column: Lux Cellulose-4 (4.6 mm x 250 mm, 5 μm), column temperature: 40°C, flow: 4 ml/min, isocratic elution, MeOH:CO 2 , 40:60, detection: UV 211 and 254 nm.

Анализ хиральной чистоты - НФ-ВЭЖХ.Analysis of chiral purity - NF-HPLC.

Способ I': колонка: Lux Cellulose-5 (4,6 ммх150 мм, 5 мкм), температура колонки: окружающая среда, поток: 1 мл/мин, изократическое элюирование, EtOH, детектирование: УФ 254 нмMethod I': column: Lux Cellulose-5 (4.6 mm x 150 mm, 5 µm), column temperature: ambient, flow: 1 ml/min, isocratic elution, EtOH, detection: UV 254 nm

Условия анализа хиральной чистоты - ОФ-ВЭЖХ.Conditions for analysis of chiral purity - RP-HPLC.

Способ J': колонка: Lux Cellulose-2 (4,6 ммх150 мм, 5 мкм), температура колонки: окружающая среда, поток: 1,23 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:MeOH:H2O, 50:20:30, детектирование: УФ 254 нм.Method J': column: Lux Cellulose-2 (4.6 mm x 150 mm, 5 µm), column temperature: ambient, flow: 1.23 ml/min, isocratic elution, ACN:MeOH:H 2 O, 50:20 :30, detection: UV 254 nm.

Способ K': колонка: Lux Cellulose-2 (4,6 ммх150 мм, 5 мкм), температура колонки: окружающая среда, поток: 1,23 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O, 80:20, детектирование: УФ 254 нм.Method K': column: Lux Cellulose-2 (4.6 mm x 150 mm, 5 µm), column temperature: ambient, flow: 1.23 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O, 80:20, detection : UV 254 nm.

Способ L': колонка: Lux Cellulose-2 (4,6 ммх150 мм, 5 мкм), температура колонки: окружающая среда, поток: 1,23 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O, 65:35, детектирование: УФ 254 нм.Method L': column: Lux Cellulose-2 (4.6 mm x 150 mm, 5 µm), column temperature: ambient, flow: 1.23 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O, 65:35, detection : UV 254 nm.

Способ М': колонка: Lux Cellulose-2 (4,6 ммх150 мм, 5 мкм), температура колонки: окружающая среда, поток: 1,23 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O+HCO2NH4 (подвижная фаза А1), 90:10 детектирование: УФ 254 нм.Method M': column: Lux Cellulose-2 (4.6 mm x 150 mm, 5 μm), column temperature: ambient, flow: 1.23 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O+HCO 2 NH 4 ( mobile phase A1), 90:10 detection: UV 254 nm.

Способ N': колонка: Lux Cellulose-2 (4,6 ммх150 мм, 5 мкм), температура колонки: окружающая среда, поток: 1,23 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O, 70:30, детектирование: УФ 254 нм.Method N': column: Lux Cellulose-2 (4.6 mm x 150 mm, 5 μm), column temperature: ambient, flow: 1.23 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O, 70:30, detection : UV 254 nm.

Способ О': колонка: Lux Cellulose-2 (4,6 ммх150 мм, 5 мкм), температура колонки: окружающая среда, поток: 1,23 мл/мин, градиентное элюирование, A=ACN, B=H2O, детектирование: УФ 254 нм.Method O': column: Lux Cellulose-2 (4.6 mm x 150 mm, 5 μm), column temperature: ambient, flow: 1.23 ml/min, gradient elution, A=ACN, B=H 2 O, detection : UV 254 nm.

Время[мин] Time [min] % А % A %IN Градиентная кривая gradient curve о,о oh oh 60 60 40 40 - - 1,0 1.0 60 60 40 40 линейная (6) linear (6) 5,0 5.0 90 90 10 10 линейная (6) linear (6) 10,0 10.0 60 60 40 40 прямая (И) straight (I)

Способ Р': колонка: Lux Amylose-2 (4,6 ммх150 мм, 5 мкм), температура колонки: окружающая среда, поток: 1,23 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O, 50:50, детектирование: УФ 254 нм.Method P': column: Lux Amylose-2 (4.6 mm x 150 mm, 5 µm), column temperature: ambient, flow: 1.23 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O, 50:50, detection : UV 254 nm.

Способ R': колонка: Lux Amylose-2 (4,6 ммх250 мм, 5 мкм), температура колонки: окружающаяMethod R': column: Lux Amylose-2 (4.6 mm x 250 mm, 5 µm), column temperature: ambient

- 32 040469 среда, поток: 1,23 мл/мин, градиентное элюирование; , A=ACN, B=H2O, детектирование: УФ 254 нм.- 32 040469 medium, flow: 1.23 ml/min, gradient elution; , A=ACN, B=H 2 O, detection: UV 254 nm.

Время[мин] Time [min] % А % A %IN Градиентная кривая gradient curve 0,0 0.0 60 60 40 40 - - 1,0 1.0 60 60 40 40 линейная (6) linear (6) 7,0 7.0 90 90 10 10 линейная (6) linear (6) 12,0 12.0 60 60 40 40 прямая (11) straight (11)

Способ S': колонка: Lux Amylose-2 (4,6 ммх250 мм, 5 мкм), температура колонки: окружающая среда, поток: 1,23 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O, 60:40, детектирование: УФ 254 нм.Method S': column: Lux Amylose-2 (4.6 mm x 250 mm, 5 µm), column temperature: ambient, flow: 1.23 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O, 60:40, detection : UV 254 nm.

Способ Т': колонка: Lux Cellulose-4 (4,6 ммх150 мм, 5 мкм), температура колонки: окружающая среда, поток: 1,23 мл/мин, изократическое элюирование, ACN:H2O, 60:40, детектирование: УФ 254 нм.Method T': column: Lux Cellulose-4 (4.6 mm x 150 mm, 5 μm), column temperature: ambient, flow: 1.23 ml/min, isocratic elution, ACN:H 2 O, 60:40, detection : UV 254 nm.

Следующие примеры были синтезированы в соответствии с описанными в настоящей заявке методиками или известными литературными способами с использованием соответствующих исходных материалов и способов, известных специалисту в данной области техники.The following examples were synthesized in accordance with the methods described in this application or known literary methods using appropriate starting materials and methods known to a person skilled in the art.

Таблица 1Table 1

Соед. No Comm. no Структура Structure Способ анализа хиральной чистоты Chiral purity analysis method Название Name Аналитические данные Analytical data 1 1 CI Zz н CI Zz n R’ R' (35)-6-хлор-2'-(3хлорфенил)-5'-(2,4диметоксипиримидин-5ил)-6'-(пропан-2-ил)1,2,3',5'-тетрагидро-2'Яспиро[индол-3, Гпирроло[3,4-с]пиррол]-2,3 '- ДИОН (35)-6-chloro-2'-(3chlorophenyl)-5'-(2,4dimethoxypyrimidin-5yl)-6'-(propan-2-yl)1,2,3',5'-tetrahydro-2' Jaspiro[indole-3, Gpyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'- DION анализ в кислотном градиенте: 98,08%, 564 [М+Н]+, время удерживания: 3,52 мин.; анализ в основном градиенте: 98,13%, 564 [М+Н]+, время удерживания: 3,52 мин.; хиральный анализ: 99,71%, время удерживания: 7,77 мин.acid gradient analysis: 98.08%, 564 [M+H] + , retention time: 3.52 minutes; main gradient analysis: 98.13%, 564 [M+H] + , retention time: 3.52 minutes; chiral analysis: 99.71%, retention time: 7.77 min. 2 2 о XX х ох нo XX x o x n N’ N' (ЗХ)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фт орфенил)-5'-(2,4-диметокси пиримидин-5-ил)-6'-(пропа н-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро -2'Я-спиро[индол-3,1 '-пирр оло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (3X)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-ph orphenyl)-5'-(2,4-dimethoxy pyrimidin-5-yl)-6'-(propa n-2-yl)- 1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrr olo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione анализ в кислотном градиенте: 99,43%, 582 [М+Н]+, время удерживания: 3,48 мин.; анализ в основном градиенте: 99,02%, 582 [М+Н]+, время удерживания: 3,48 мин.; хиральный анализ: 99,44%, время удерживания: 9,31 мин.acid gradient analysis: 99.43%, 582 [M+H] + , retention time: 3.48 minutes; main gradient analysis: 99.02%, 582 [M+H] + , retention time: 3.48 min; chiral analysis: 99.44%, retention time: 9.31 min.

- 33 040469- 33 040469

3 3 £Y ° / ii θ' H \ £Y ° / ii θ' H\ Τ’ Τ' (35)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-ме тилфенил)-6'-(пропан-2-ил) -5'-(2,4,6-триметоксипирим ид ин- 5 -ил)-1,2,3', 5' -тетраги дро-2'Я-спиро[индол-3, Г-п ирроло[3,4-с] пиррол] -2,3 '-д ион (35)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-methylphenyl)-6'-(propan-2-yl)-5'-(2,4,6-trimethoxypyrim id in-5-yl )-1,2,3',5'-tetragy dro-2'H-spiro[indole-3, Mr. irrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-d ion анализ в кислотном градиенте: 97,4%, 608 [М+Н]+, время удерживания: 3,71 мин.; анализ в основном градиенте: 97,4%, 608 [М+Н]+, время удерживания: 3,71 мин.; хиральный анализ: 99,7%, время удерживания: 16,70 мин.acid gradient analysis: 97.4%, 608 [M+H] + , retention time: 3.71 minutes; main gradient analysis: 97.4%, 608 [M+H] + , retention time: 3.71 minutes; chiral analysis: 99.7%, retention time: 16.70 min. 4 4 О ABOUT К’ TO' (35)-6-хлор-2'-(3-хлор-4-фт орфенил)-5'-(2,4-диметокси пиримидин-5-ил)-6'-(пропа н-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро -2Я-спиро[индол-3,1 '-пирр оло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (35)-6-chloro-2'-(3-chloro-4-ph orphenyl)-5'-(2,4-dimethoxy pyrimidin-5-yl)-6'-(propa n-2-yl)- 1,2,3',5'-tetrahydro-2H-spiro[indole-3,1'-pyrr olo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione анализ в кислотном градиенте: 98,96%, 582 [М+Н]+, время удерживания: 3,58 мин.; анализ в основном градиенте: 99,08%, 582 [М+Н]+, время удерживания: 3,57 мин.; хиральный анализ: 99,97%, время удерживания: 3,79 мин.acid gradient analysis: 98.96%, 582 [M+H] + , retention time: 3.58 minutes; main gradient analysis: 99.08%, 582 [M+H] + , retention time: 3.57 minutes; chiral analysis: 99.97%, retention time: 3.79 min. 5 5 ГГ о z ciAA ji o z H °\GG o z ciAA ji o z H °\ L’ L' (35)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фт орфенил)-6'-(пропан-2-ил)5'-(2,4,6-триметоксипирим ид ин- 5 -ил)-1,2,3', 5' -тетраги дро-2'Я-спиро[индол-3, Г-п ирроло[3,4-с] пиррол] -2,3 '-д ион (35)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-ph-orphenyl)-6'-(propan-2-yl)5'-(2,4,6-trimethoxypyrimide in-5-yl) -1,2,3',5'-tetragy dro-2'H-spiro[indole-3, Mr. irrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-d ion анализ в кислотном градиенте: 99,89%, 612 [М+Н]+, время удерживания: 3,65 мин.; анализ в основном градиенте: 99,95%, 612 [М+Н]+, время удерживания: 3,65 мин.; хиральный анализ: 99,74%, времяacid gradient analysis: 99.89%, 612 [M+H] + , retention time: 3.65 minutes; main gradient analysis: 99.95%, 612 [M+H] + , retention time: 3.65 min; chiral analysis: 99.74%, time удерживания: 7,18 мин. retention: 7.18 min. 6 6 H H J’ J' (35)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фт орфенил)-5'-[6-(диметилам ино)-4-метоксипир идин-3 ил]-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3', 5'-тетрагидро-2Я-спиро[ин дол-3,1 '-пирроло[3,4-с]пир рол]-2,3'-дион (35)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-ph-orphenyl)-5'-[6-(dimethylamino)-4-methoxypyridin-3yl]-6'-(propan-2- yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2H-spiro[indol-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione анализ в кислотном градиенте: 99,88%, 594 [М+Н]+, время удерживания: 3,94 мин.; анализ в основном градиенте: 99,89%, 594 [М+Н]+, время удерживания: 3,58 мин.; хиральный анализ: 100%, время удерживания: 14,66 мин.acid gradient analysis: 99.88%, 594 [M+H] + , retention time: 3.94 minutes; main gradient analysis: 99.89%, 594 [M+H] + , retention time: 3.58 min; chiral analysis: 100%, retention time: 14.66 min. 7 7 O- x rA oAJ °=\ Ml z 1 оO- x rA oAJ °=\ Ml z 1 o 0’ 0' (35)-6-хлор-2'-(3,4-дифторф енил)-5'-(2,4-диметоксипир имидин-5-ил)-6'-(пропан-2ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2Я -спиро[индол-3,1 '-пирроло[ 3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (35)-6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyr imidin-5-yl)-6'-(propan-2yl)-1,2,3 ',5'-tetrahydro-2H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione анализ в кислотном градиенте: 98,89%, 566 [М+Н]+, время удерживания: 3,48 мин.; анализ в основном градиенте: 98,79%, 566 [М+Н]+, время удерживания: 3,47 мин.; хиральный анализ: 100%, время удерживания: 5,61 мин.acid gradient analysis: 98.89%, 566 [M+H] + , retention time: 3.48 minutes; main gradient analysis: 98.79%, 566 [M+H] + , retention time: 3.47 minutes; chiral analysis: 100%, retention time: 5.61 min. 8 8 O^ Πγΰ w о O^ Πγΰ w o Ν’ N' (35)-6-хлор-2'-(3,4-дифторф енил)-5'-(4,6-диметоксипир идин-3 -ил)-6'-(пропан-2-ил )-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Я-сп иро[индол-3,Г-пирроло[3,4 -с]пиррол]-2,3'-дион (35)-6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyridin-3-yl)-6'-(propan-2-yl)-1,2 ,3',5'-tetrahydro-2'H-sp iro[indole-3,G-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione анализ в кислотном градиенте: 99,75%, 565 [М+Н]+, время удерживания: 3,57 мин. анализ в основном градиенте: 99,77%, 565 [М+Н]+, время удерживания: 3,57 мин.acid gradient analysis: 99.75%, 565 [M+H] + , retention time: 3.57 min. main gradient analysis: 99.77%, 565 [M+H] + , retention time: 3.57 min.

- 34 040469- 34 040469

хиральный анализ: 100%, время удерживания: 6,20 мин. chiral analysis: 100%, retention time: 6.20 min. 9 9 о , А н O , A n S’ S' (ЗХ)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фт орфенил)-5'-(4,6-диметокси пиридин-3-ил)-6'-(пропан-2 -ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2' Я-спиро[индол-3,1 '-пиррол о[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (3X)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-ph-orphenyl)-5'-(4,6-dimethoxy-pyridin-3-yl)-6'-(propan-2-yl)-1 ,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrole o[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione анализ в кислотном градиенте: 99,68%, 581 [М+Н]+, время удерживания: 3,60 мин. анализ в основном градиенте: 99,63%, 581 [М+Н]+, время удерживания: 3,59 мин. хиральный анализ: 100%, время удерживания: 8,85 мин.acid gradient analysis: 99.68%, 581 [M+H] + , retention time: 3.60 min. main gradient analysis: 99.63%, 581 [M+H] + , retention time: 3.59 min. chiral analysis: 100%, retention time: 8.85 min. 10 10 Yr о Η Yr about Η P’ P' (ЗХ)-6-хлор-2'-(5-хлор-2,4-д ифторфенил)-5'-(2,4-димет оксипиримидин-5-ил)-6'-(п ропан-2- ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Я -спиро[индол-3,1 '-пирроло[ 3,4-с]пиррол]-2,3'-дион (3X)-6-chloro-2'-(5-chloro-2,4-d ifluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(p-propan-2- yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione анализ в кислотном градиенте: 97,97%, 600 [М+Н]+, время удерживания: 3,59 мин. анализ в основном градиенте: 97,47%, 600 [М+Н]+, время удерживания: 3,59 мин. хиральный анализ: 100%, время удерживания: 9,96 мин.acid gradient analysis: 97.97%, 600 [M+H] + , retention time: 3.59 min. main gradient analysis: 97.47%, 600 [M+H] + , retention time: 3.59 min. chiral analysis: 100%, retention time: 9.96 min. И AND Q /л ли II Ί o4 Q /l whether II Ί o 4 M’ M' (ЗХ)-6'-(бутан-2-ил)-6-хлор2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'(2,4-диметоксипиримидин5-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро2'Я-спиро[индол-3, Г- (3X)-6'-(butan-2-yl)-6-chloro2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'(2,4-dimethoxypyrimidin5-yl)-1,2,3',5 '-tetrahydro2'H-spiro[indole-3, G- анализ в кислотном градиенте: 97,73%, 596 [М+Н]+, время удерживания: 3,62 мин. анализ в основном градиенте: 99,54%, 596 [М+Н]+, время удерживания: 3,62acid gradient analysis: 97.73%, 596 [M+H] + , retention time: 3.62 min. main gradient analysis: 99.54%, 596 [M+H] + , retention time: 3.62 пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3 '- ДИОН pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'- DION мин. хиральный анализ: 100%, время удерживания: 9,96 мин. min. chiral analysis: 100%, retention time: 9.96 min.

Биологические примеры.biological examples.

Биологический пример 1. Флуоресцентный поляризационный анализ.Biological example 1. Fluorescent polarization analysis.

Ингибирование взаимодействия p53-Mdm2 измеряли с использованием анализа связывания флуоресцентной поляризации (ФП). ФП измеряет вращательное движение молекул в гомогенной суспензии. Для этого анализа N-концевой домен белка Mdm2 (аминокислоты 1-111) объединяют с флуоресцеинмеченым (FAM) пептидом, полученным из трансактивационного домена р53 (последовательность: 5FAM-TSFAEYWNLLSP). При возбуждении флуоресцентного лиганда линейно поляризованным светом пептид излучает перпендикулярно поляризованный свет. Если пептид связан с Mdm2, вращение будет замедляться и перпендикулярный компонент будет пропорционально уменьшаться. В противоположность этому нарушение комплекса пептид-Mdm2 вследствие связывания ингибитора с сайтом связывания р53 Mdm2 приводит к высвобождению пептида и уменьшению поляризации излучаемого света.Inhibition of the p53-Mdm2 interaction was measured using a fluorescent polarization (FP) binding assay. FP measures the rotational motion of molecules in a homogeneous suspension. For this assay, the N-terminal domain of the Mdm2 protein (amino acids 1-111) is combined with a fluorescein-labeled (FAM) peptide derived from the p53 transactivation domain (sequence: 5FAM-TSFAEYWNLLSP). When a fluorescent ligand is excited by linearly polarized light, the peptide emits perpendicularly polarized light. If the peptide is bound to Mdm2, the rotation will slow down and the perpendicular component will proportionally decrease. In contrast, disruption of the peptide-Mdm2 complex due to inhibitor binding to the p53 Mdm2 binding site results in the release of the peptide and a decrease in the polarization of the emitted light.

Эксперименты по флуоресцентной поляризации были прочитаны на ридере Biotek Cytation 5 с 470 нм возбуждения и 520 нм эмиссионными фильтрами для флуоресцеина. Флуоресцентную поляризацию измеряли в черных 96-луночных планшетах (Corning, CLS3991) при комнатной температуре. Чистоту Mdm2 контролировали при >95%. Реакционный буфер оптимизировали путем добавления 5 мМ DTT и 0,1% цвиттер-ионного детергента CHAPS для уменьшения эффекта неспецифических взаимодействий.Fluorescent polarization experiments were read on a Biotek Cytation 5 reader with 470 nm excitation and 520 nm emission filters for fluorescein. Fluorescent polarization was measured in black 96-well plates (Corning, CLS3991) at room temperature. The purity of Mdm2 was controlled at >95%. The reaction buffer was optimized by adding 5 mM DTT and 0.1% zwitterionic detergent CHAPS to reduce the effect of non-specific interactions.

Исследование проводили путем объединения последовательного разбавления соединений, разбавленных диметилсульфоксидом (ДМСО, 5% конечная концентрация) с 75 нМ Mdm2 в реакционном буфере (ФСБ, 0,1% CHAPS, 5 мМ DTT (дитиотреитол)). После 15 минут инкубации при комнатной температуре добавляли 10 нМ FAM-меченый пептид. Окончательное считывание проводили после 90 минут инкубации. Дозозависимые кривые связывания и значения IC50 рассчитывали с использованием GraphPad Prism5 и затем преобразовывали в значения Ki с использованием уравнения Кенакина (табл. 2).The assay was performed by combining serial dilutions of compounds diluted in dimethyl sulfoxide (DMSO, 5% final concentration) with 75 nM Mdm2 in reaction buffer (PBS, 0.1% CHAPS, 5 mM DTT (dithiothreitol)). After 15 minutes of incubation at room temperature, 10 nM FAM-labeled peptide was added. The final reading was performed after 90 minutes of incubation. Dose-dependent binding curves and IC50 values were calculated using GraphPad Prism5 and then converted to Ki values using the Kenakin equation (Table 2).

- 35 040469- 35 040469

Таблица 2table 2

Соединение Compound Ki (нМ) p53-Mdm2 Ki (nM) p53-Mdm2 1 1 1,8 1.8 2 2 1,7 1.7 3 3 2,4 2.4 4 4 1,7 1.7 5 5 2,2 2.2 6 6 1,7 1.7 7 7 1,9 1.9 8 8 1,9 1.9 9 9 2,0 2.0 10 10 2,0 2.0 И AND 2,5 2.5

Проверка измеренных значений Ki показывает, что все раскрытые соединения являются эффективными (Ki в диапазоне 1,7-2,5 нМ) ингибиторами взаимодействий Mdm2-p53.Examination of measured Ki values indicates that all of the disclosed compounds are effective (Ki in the range of 1.7-2.5 nM) inhibitors of Mdm2-p53 interactions.

Биологический пример 2. Анализ жизнеспособности клеток.Biological example 2 Cell viability assay.

Влияние изобретенных ингибиторов p53-Mdm2 на жизнеспособность клеток оценивали с использованием МТТ-анализа. Это колориметрический анализ, который измеряет превращение тетразолиевого кольца растворимого желтого красителя (МТТ) в нерастворимый пурпурный формазан. Данный процесс катализируется исключительно в митохондриальных дегидрогеназах живых клеток. Мертвые клетки не вызывают данного изменения. Чтобы измерить специфическую цитотоксичность ингибиторов Mdm2р53, проводили МТТ-анализ с клеточной линией остеосаркомы SJSA-1, которая демонстрирует амплификацию гена MDM2 и р53 дикого типа.The effect of the invented p53-Mdm2 inhibitors on cell viability was evaluated using the MTT assay. This is a colorimetric assay that measures the conversion of the tetrazolium ring of a soluble yellow dye (MTT) to insoluble purple formazan. This process is catalyzed exclusively in mitochondrial dehydrogenases of living cells. Dead cells do not cause this change. To measure the specific cytotoxicity of Mdm2p53 inhibitors, an MTT assay was performed with the SJSA-1 osteosarcoma cell line, which demonstrates amplification of the wild-type MDM2 and p53 gene.

Клетки высевали на 96-луночные планшеты и затем обрабатывали последовательными разведениями исследуемых соединений. После 72 ч инкубации МТТ добавляли до конечной концентрации 0,5 мг/мл. Клетки дополнительно инкубировали в течение следующих 4 ч. Затем раствор сливали и оставшиеся кристаллы формазана растворяли в 100 мкл ДМСО. Считывание поглощения проводили при 570 нм, показывая относительную жизнеспособность клеток между клетками, обработанными оцениваемыми соединениями, и контролем ДМСО Все эксперименты МТТ независимо повторяли 2-5 раз. Дозозависимые кривые связывания и значения IC50 рассчитывали с использованием GraphPad Prism 5. Представленные значения IC50 представляют собой среднее значение всех проведенных экспериментов (табл. 3).Cells were seeded in 96-well plates and then treated with serial dilutions of test compounds. After 72 hours of incubation, MTT was added to a final concentration of 0.5 mg/ml. The cells were additionally incubated for a further 4 hours. The solution was then decanted and the remaining formazan crystals were dissolved in 100 μl of DMSO. Absorbance readings were taken at 570 nm showing relative cell viability between cells treated with compounds of interest and DMSO control. All MTT experiments were independently repeated 2-5 times. Dose-dependent binding curves and IC50 values were calculated using GraphPad Prism 5. The IC50 values presented are the average of all experiments performed (Table 3).

Таблица 3Table 3

Соединение Compound IC50 (мкМ) SJSA-1 IC50 (µM) SJSA-1 1 1 0,18 0.18 2 2 0,16 0.16 3 3 0,07 0.07 4 4 0,32 0.32 5 5 0,18 0.18 6 6 0,03 0.03 7 7 0,22 0.22 8 8 0,15 0.15 9 9 0,12 0.12 10 10 0,40 0.40 И AND 0,05 0.05

Биологический пример 3. Измерение собственного клиренса с использованием микросом in vitro.Biological example 3 Measurement of intrinsic clearance using microsomes in vitro.

Метаболическую стабильность соединений изобретения оценивали путем измерения собственного клиренса в микросомах мыши и человека in vitro.The metabolic stability of the compounds of the invention was evaluated by measuring intrinsic clearance in mouse and human microsomes in vitro.

мМ исходные растворы маркеров и исследуемых соединений получали в ДМСО. Их разводили в 100 раз в МеСЕЕДМСО 91:9, чтобы получить 100 мкМ исходный раствор для анализа. 10 мМ НАДФНmM stock solutions of markers and test compounds were prepared in DMSO. They were diluted 100-fold in MeCEEDMS0 91:9 to give a 100 μM assay stock solution. 10 mM NADPH

-36040469 готовили в 0,1 М фосфатном буфере (рН 7,4). Микросомы оттаивали на водяной бане при 37°С и их разбавляли до конечной концентрации для анализа 0,5 мг/мл.-36040469 was prepared in 0.1 M phosphate buffer (pH 7.4). The microsomes were thawed in a water bath at 37° C. and diluted to a final assay concentration of 0.5 mg/mL.

100 мкМ исходные растворы для анализа добавляли для получения конечной концентрации 1 мкМ в пробирках для инкубации, содержащих буфер и НАДФН (конечная концентрация для анализа составляет 1 мМ). Пробирки для инкубации и микросомы предварительно нагревали при 37°С в течение 3 мин. Микросомы затем добавляли в пробирки для инкубации, которые хранили при 37°С и встряхивали с использованием орбитального шейкера в течение всего анализа. Образцы отбирали в 6 предварительно определенных временных моментах вплоть до 1 ч и переносили в подготовленные гашенные пробирки, содержащие соответствующий растворитель с внутренним стандартом.100 μM assay stock solutions were added to give a final concentration of 1 μM in incubation tubes containing buffer and NADPH (final assay concentration is 1 mM). Incubation tubes and microsomes were preheated at 37°C for 3 min. The microsomes were then added to incubation tubes, which were stored at 37° C. and shaken using an orbital shaker throughout the assay. Samples were taken at 6 predetermined time points up to 1 hour and transferred to prepared quenched tubes containing the appropriate solvent with an internal standard.

Гашенные образцы тщательно перемешивают и белок осаждают при -20°С в течение минимум 12 ч. Образцы затем центрифугировали при 4°С. Супернатанты переносили в свежий 96-луночный планшет, совместимый с автодозатором. Планшет герметизировали с помощью предварительно разрезанного силиконового коврика и анализировали с помощью ЖХ-МС/МС.The quenched samples are mixed thoroughly and the protein is precipitated at -20°C for a minimum of 12 hours. The samples are then centrifuged at 4°C. The supernatants were transferred to a fresh 96-well autosampler compatible plate. The plate was sealed with a pre-cut silicone mat and analyzed by LC-MS/MS.

Соединение Compound мышиный МС клир, собств. [мкл/мин/мг] mouse MC clear, own. [µl/min/mg] человеческий МС клир, собств. [мкл/мин/мг] human MC clear, own. [µl/min/mg] WO2015/189799-107 WO2015/189799-107 9,5 9.5 49,7 49.7 1 1 8,8 8.8 <3,0 <3.0 2 2 <4,0 <4.0 <3,0 <3.0 3 3 <3,0 <3.0 <3,0 <3.0 4 4 <3,0 <3.0 <3,0 <3.0 5 5 <3,0 <3.0 <3,0 <3.0 6 6 33,6 33.6 19,8 19.8 7 7 6,6 6.6 <3 <3 8 8 12,8 12.8 <3 <3 9 9 н.д. n.a. н.д. n.a. 10 10 <3 <3 <3,2 <3.2 И AND н.д. n.a. н.д. n.a.

По сравнению с соединениями, описанными в WO 2015/189799, все раскрытые в настоящее время соединения проявляют низкий собственный клиренс как в микросомах человека, так и мыши. Единственным исключением является соединение 6. Однако немного меньшая стабильность данного соединения компенсируется выраженной эффективностью in vitro (SJSA-1 IC50=0,03 мкМ).Compared to the compounds described in WO 2015/189799, all currently disclosed compounds exhibit low intrinsic clearance in both human and mouse microsomes. Compound 6 is the only exception. However, the slightly lower stability of this compound is offset by a marked in vitro potency (SJSA-1 IC50=0.03 μM).

Биологический пример 4. Эффективность in vivo на модели ксенотрансплантата SJSA-1 на мышах.Biological Example 4 In vivo efficacy in the SJSA-1 xenograft mouse model.

Эксперимент проводили на мышах-самках из штамма Crl: CD-1-Foxnlnu. Мышам инокулировали подкожно в правый бок клеточную линию рака SJSA-1 в количестве 3x106 клеток, суспендированных в 100 мкл матрицы HBSS:Matrigel в соотношении 3:1 на мышь. На 17-й день после инокуляции мышей разделили на группы так, чтобы в каждой группе средний объем опухоли был одинаковым и составлял в среднем приблизительно 200 мм3. Были отобраны экспериментальные группы, каждая из которых состояла из 8 мышей: контрольный NaCl 0,9% и соединения. Соединения 1-11 растворяли в 56,60% ПЭГ 400, 9,43% Кремофор RH40, 9,43% ЕТОН, 18,87% Лабрафил M1944CS, 5,67% ДМСО. Для соединения 107 из WO 2015/189799 использовали группу из 7 мышей, и его растворяли в 15% ПЭГ400, 10% Кремофор EL, 75% Н2О.The experiment was carried out on female mice from the strain Crl: CD-1-Foxnlnu. Mice were inoculated subcutaneously in the right flank with the SJSA-1 cancer cell line at 3x106 cells suspended in 100 μl of HBSS:Matrigel matrix at a ratio of 3:1 per mouse. On the 17th day after inoculation, mice were divided into groups so that in each group the average tumor volume was the same and averaged approximately 200 mm 3 . Experimental groups were selected, each of which consisted of 8 mice: control NaCl 0.9% and compounds. Compounds 1-11 were dissolved in 56.60% PEG 400, 9.43% Cremophor RH40, 9.43% ETOH, 18.87% Labrafil M1944CS, 5.67% DMSO. Compound 107 of WO 2015/189799 used a group of 7 mice and was dissolved in 15% PEG400, 10% Cremophor EL, 75% H2O.

Мышам, использованным в эксперименте, вводили перорально (п/о) соединения или 0,9% NaCl по схеме qldx14 (14 доз ежедневно). В течение эксперимента мышей взвешивали перед каждым введением дважды/трижды в неделю. Благополучие животных контролировали ежедневно. Никакой существенной разницы в массе тела или благополучии не наблюдали между экспериментальными группами во время и в конце исследования.Mice used in the experiment were administered orally (po) compounds or 0.9% NaCl qldx14 (14 doses daily). During the experiment, mice were weighed before each administration twice/thrice a week. Animal welfare was monitored daily. No significant difference in body weight or well-being was observed between the experimental groups during and at the end of the study.

Изменение объема опухоли контролировали дважды/трижды в неделю, начиная с первого дня введения. Объем опухоли рассчитывали исходя из ее длины и ширины, измеренных с помощью электронных штангенциркулей:The change in tumor volume was monitored twice/thrice a week, starting from the first day of administration. Tumor volume was calculated based on its length and width measured using electronic calipers:

V [мм3]=d2xD/2 в которой d - ширина, D - длина.V [mm 3 ]=d 2 xD/2 in which d is the width, D is the length.

Объем опухоли в группах измеряли до 101 дня после инокуляции (72 дня после последнего введения). Результаты эксперимента выражали в виде средних значений ингибирования роста опухоли (TGI)±SEM (табл. 4). Ингибирование роста опухоли рассчитывали с использованием следующей формулы:The tumor volume in the groups was measured up to 101 days after inoculation (72 days after the last injection). Experimental results were expressed as mean tumor growth inhibition (TGI)±SEM values (Table 4). Tumor growth inhibition was calculated using the following formula:

TGI [%]=[100-(Т/Сх100)] в которой С - средний размер опухоли в контрольной группе, Т - средний размер опухоли в обработанной группе. Все расчеты и графики выполняли с использованием программного обеспечения GraphPad Prism 5.TGI [%]=[100-(T/Cx100)] where C is the average tumor size in the control group, T is the average tumor size in the treated group. All calculations and plots were performed using GraphPad Prism 5 software.

--

Claims (14)

Таблица 4Table 4 Соединение TGI п/о 12,5 мг/кг (7 доз) [%] ± SEM TGI п/о 12,5 мг/кг (12 доз) [%] ± SEMCompound TGI po 12.5 mg/kg (7 doses) [%] ± SEM TGI po 12.5 mg/kg (12 doses) [%] ± SEM Стандарт: Соединение 107 из WO2015/189799 49,8 17,3 60,1 13,4Standard: Compound 107 from WO2015/189799 49.8 17.3 60.1 13.4 1 94,97 1,09 99,53 0,301 94.97 1.09 99.53 0.30 2 94,36 1,23 98,91 0,442 94.36 1.23 98.91 0.44 3 94,22 1,25 99,57 0,293 94.22 1.25 99.57 0.29 4 94,89 1,57 99,47 0,344 94.89 1.57 99.47 0.34 5 85,78 5,59 95,99 2,295 85.78 5.59 95.99 2.29 6 92,03 1,88 99,09 0,466 92.03 1.88 99.09 0.46 7 95,00 1,29 99,97 0,017 95.00 1.29 99.97 0.01 8 96,39 1,57 99,71 0,278 96.39 1.57 99.71 0.27 9 89,46 2,72 97,73 0,929 89.46 2.72 97.73 0.92 10 93,48 1,44 98,79 0,5010 93.48 1.44 98.79 0.50 И 93,74 1,35 99,69 0,28AND 93.74 1.35 99.69 0.28 Результаты данного эксперимента суммированы в табл. 4 и на фиг. 1 и 2. Как можно видеть, улучшенная метаболическая стабильность раскрытых в настоящее время соединений приводит к исключительной эффективности in vivo. Значения ингибирования роста опухоли, наблюдаемые для соединений 111, значительно выше, чем для лучшего соединения, раскрытого в WO 2015/189799, как после 7 (разница 36,0-46,6%), так и 12 (разница 35,9-39,9%) доз вещества. Кроме того, как можно видеть на фиг. 1, лечение ксенотрансплантата SJSA-1 14 дозами по 12,5 мг/кг п/о WO 2015/189799 только замедляет рост опухоли. Тот же протокол лечения, но с соединениями 7, 8 и 11 приводил к полному удалению опухолей. Более того, ни одно из поражений не показало возобновление роста во время последующего наблюдения до 101 дня.The results of this experiment are summarized in table. 4 and in FIG. 1 and 2. As can be seen, the improved metabolic stability of the currently disclosed compounds results in exceptional in vivo efficacy. The tumor growth inhibition values observed for compounds 111 are significantly higher than for the best compound disclosed in WO 2015/189799 after both 7 (difference 36.0-46.6%) and 12 (difference 35.9-39 .9%) doses of the substance. Moreover, as can be seen in FIG. 1, treatment of SJSA-1 xenograft with 14 doses of 12.5 mg/kg p/o WO 2015/189799 only slows tumor growth. The same treatment protocol but with compounds 7, 8 and 11 resulted in complete tumor resection. Moreover, none of the lesions showed regrowth during follow-up until day 101. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯCLAIM 1. Соединение, имеющее следующую структуру1. A compound having the following structure в которойwherein R1 представляет собой мета-галогенфенил, который необязательно дополнительно замещен однимдвумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена и -С1-С6-алкила,R 1 is meta-halophenyl which is optionally further substituted with one or two substituents independently selected from the group consisting of halo and -C1- C6 alkyl, R2 и R3 представляют собой независимо Н или галоген;R 2 and R 3 are independently H or halogen; R4 представляет собой -С1-С6-алкил;R 4 represents -C1-C 6 -alkyl; R7 представляет собой -ОСН3;R 7 is -OCH 3 ; Z представляет собой C-R8 или N, Y представляет собой C-R9 или N при условии, что Z не представляет собой C-R8 и Y не представляет собой C-R9 одновременно,Z is CR 8 or N, Y is CR 9 or N, provided that Z is not CR 8 and Y is not CR 9 at the same time, R5, R6 представляют собой независимо Н, -ОСН3 или -N(CH3)2,R 5 , R 6 are independently H, -OCH 3 or -N(CH 3 ) 2 , R8, R9 представляют собой независимо Н.R 8 , R 9 are independently H. 2. Соединение по п.1, в котором R1 представляет собой мета-галогенфенил, который необязательно дополнительно замещен одним-двумя заместителями, выбранными из галогена.2. The compound of claim 1 wherein R 1 is meta-halophenyl which is optionally further substituted with one to two substituents selected from halo. 3. Соединение по п.1, в котором R1 представляет собой мета-галогенфенил, который необязательно дополнительно замещен одним заместителем, выбранным из -СН3.3. The compound of claim 1 wherein R 1 is meta-halophenyl which is optionally further substituted with one substituent selected from -CH 3 . 4. Соединение по любому из пп.1-3, в котором R2 представляет собой Н и R3 представляет собой Cl.4. A compound according to any one of claims 1 to 3, wherein R 2 is H and R 3 is Cl. 5. Соединение по любому из пп.1-4, в котором R4 представляет собой изопропил или изобутил.5. A compound according to any one of claims 1 to 4, wherein R 4 is isopropyl or isobutyl. 6. Соединение по любому из пп.1-5, в котором Z и Y оба представляют собой N.6. A compound according to any one of claims 1 to 5, wherein Z and Y are both N. 7. Соединение по любому из пп.1-5, в котором Z представляет собой C-R8 и Y представляет собой N.7. A compound according to any one of claims 1-5, wherein Z is CR 8 and Y is N. 8. Соединение по п.6, в котором R5 и R6 оба представляют собой ОМе.8. A compound according to claim 6 wherein R 5 and R 6 are both OMe. 9. Соединение по п.7, в котором R8 представляет собой Н, по меньшей мере один из R5 и R6 представляет собой ОМе и второй выбран из Н, -N(Me)2 и ОМе.9. A compound according to claim 7, wherein R 8 is H, at least one of R 5 and R 6 is OMe, and the second is selected from H, -N(Me) 2 and OMe. 10. Соединение по п.2, выбранное из (1) (3S)-6-хлор-2'-(3-хлорфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-теIрагиgро2'Н-спиро[индол-3,1 '-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-диона,10. The compound according to claim 2 selected from (1) (3S)-6-chloro-2'-(3-chlorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propane -2-yl)-1,2,3',5'-teIrahygro2'H-spiro[indol-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione, - 38 040469 (2) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'тетрагидро-2Н-спиро [индол-3,1 '-пирроло[3,4-с] пиррол] -2,3 '-диона, (3) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-метилфенил)-6'-(пропан-2-ил)-5'-(2,4,6-триметоксипиримидин-5-ил)-1,2,3',5'тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-диона, (4) (38)-6-хлор-2'-(3-хлор-4-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-диона, (5) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-6'-(пропан-2-ил)-5'-(2,4,6-триметоксипиримидин-5-ил)-1,2,3',5'тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-диона, (6) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-[6-(диметиламино)-4-метоксипиридин-3-ил]-6'-(пропан2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-диона, (7) (38)-6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'- тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-диона, (8) (38)-6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2 'Н-спиро [индол-3,1 '-пирроло [3,4-с]пиррол] -2,3'-диона, (9) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-диона, (10) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2,4-дифторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2-ил)-- 38 040469 (2) (38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan-2- yl)-1,2,3',5'tetrahydro-2H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione, (3) (38)- 6-chloro-2'-(5-chloro-2-methylphenyl)-6'-(propan-2-yl)-5'-(2,4,6-trimethoxypyrimidin-5-yl)-1,2,3 ',5'tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione, (4) (38)-6-chloro-2' -(3-chloro-4-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan-2-yl)-1,2,3',5'tetrahydro-2' H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione, (5) (38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2- fluorophenyl)-6'-(propan-2-yl)-5'-(2,4,6-trimethoxypyrimidin-5-yl)-1,2,3',5'tetrahydro-2'H-spiro[indol- 3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione, (6) (38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'- [6-(dimethylamino)-4-methoxypyridin-3-yl]-6'-(propan2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indol-3,1'- pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione, (7) (38)-6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidine- 5-yl)-6'-(propan-2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4 -c]pyrrole]-2,3'-dione, (8) (38)-6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyridin-3-yl)- 6'-(propan-2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2.3 '-dione, (9) (38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyridin-3-yl)-6'-(propan-2 -yl)-1,2,3',5'tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione, (10) ( 38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2,4-difluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan-2-yl)- 1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-диона, (11) (38)-6'-(бутан-2-ил)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-1,2,3',5'тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-диона.1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione, (11) (38)- 6'-(butan-2-yl)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-1,2,3', 5'tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione. 11. Соединение по п.6, выбранное из (1) (38)-6-хлор-2'-(3-хлорфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро2'Н-спиро[индол-3,1 '-пирроло [3,4-с] пиррол] -2,3 '-диона, (2) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'тетрагидро-2Ή-спиро [индол-3,1 '-пирроло[3,4-с] пиррол] -2,3 '-диона, (3) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-метилфенил)-6'-(пропан-2-ил)-5'-(2,4,6-триметоксипиримидин-5-ил)-1,2,3',5'тетрагидро-2 'H-спиро [индол-3,1 '-пирроло [3,4-с] пиррол] -2,3 '-диона, (4) (38)-6-хлор-2'-(3-хлор-4-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'теΊрагидро-2Ή-спиро [индол-3,1 '-пирроло[3,4-с] пиррол] -2,3 '-диона, (5) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-6'-(пропан-2-ил)-5'-(2,4,6-триметоксипиримидин-5-ил)-1,2,3',5'тетрагидро-2 'H-спиро [индол-3,1 '-пирроло [3,4-с] пиррол] -2,3 '-диона, (7) (38)-6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-диона, (10) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2,4-дифторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'-(пропан-2-ил)-11. The compound according to claim 6 selected from (1) (38)-6-chloro-2'-(3-chlorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-propan- 2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione, (2) ( 38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan-2-yl)-1,2, 3',5'tetrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione, (3) (38)-6-chloro-2'- (5-chloro-2-methylphenyl)-6'-(propan-2-yl)-5'-(2,4,6-trimethoxypyrimidin-5-yl)-1,2,3',5'tetrahydro-2 'H-spiro [indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole] -2,3'-dione, (4) (38)-6-chloro-2'-(3-chloro-4 -fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan-2-yl)-1,2,3',5'teΊrahydro-2Ή-spiro[indole-3,1 '-pyrrolo[3,4-c]pyrrole] -2,3'-dione, (5) (38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-6'-(propane- 2-yl)-5'-(2,4,6-trimethoxypyrimidin-5-yl)-1,2,3',5'tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo [3, 4-c]pyrrole]-2,3'-dione, (7) (38)-6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl) -6'-(propan-2-yl)-1,2,3',5'tetrahydro-2'H-sp iro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione, (10) (38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2,4- difluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'-(propan-2-yl)- 1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-диона, (11) (38)-6'-(бутан-2-ил)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-1,2,3',5'тетрагидро-2'Н-спиро [индол-3,1 '-пирроло[3,4-с] пиррол] -2,3 '-диона.1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione, (11) (38)- 6'-(butan-2-yl)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-1,2,3', 5'tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione. 12. Соединение по п.7, выбранное из (6) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-[6-(диметиламино)-4-метоксипиридин-3-ил]-6'-(пропан2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-диона, (8) (38)-6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2 'Н-спиро [индол-3,1 '-пирроло [3,4-с]пиррол] -2,3'-диона, (9) (38)-6-хлор-2'-(5-хлор-2-фторфенил)-5'-(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-6'-(пропан-2-ил)-1,2,3',5'тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-диона.12. The compound according to claim 7 selected from (6) (38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-[6-(dimethylamino)-4-methoxypyridine-3- yl]-6'-(propan2-yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2, 3'-dione, (8) (38)-6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyridin-3-yl)-6'-(propan-2- yl)-1,2,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione, (9) ( 38)-6-chloro-2'-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyridin-3-yl)-6'-(propan-2-yl)-1,2, 3',5'tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione. 13. Соединение формулы13. Compound Formula которое представляет собой (38)-6-хлор-2'-(3,4-дифторфенил)-5'-(4,6-диметоксипиридин-3-ил)-6'(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.which is (38)-6-chloro-2'-(3,4-difluorophenyl)-5'-(4,6-dimethoxypyridin-3-yl)-6'(propan-2-yl)-1,2 ,3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione. 14. Соединение формулы о14. Compound of formula o н которое представляет собой (38)-6-хлор-2'-(3-хлорфенил)-5'-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-6'(пропан-2-ил)-1,2,3',5'-тетрагидро-2'Н-спиро[индол-3,1'-пирроло[3,4-с]пиррол]-2,3'-дион.n which is (38)-6-chloro-2'-(3-chlorophenyl)-5'-(2,4-dimethoxypyrimidin-5-yl)-6'(propan-2-yl)-1,2, 3',5'-tetrahydro-2'H-spiro[indole-3,1'-pyrrolo[3,4-c]pyrrole]-2,3'-dione. --
EA202091718 2018-01-16 2019-01-09 1,2,3',5'-TETRAHYDRO-2'H-SPIRO[INDOL-3,1'-PYRROLO[3,4-C]PYRRROLE]-2,3'-DIONE COMPOUNDS AS THERAPEUTIC AGENTS THAT ACTIVATE TP53 EA040469B1 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP18461506.0 2018-01-16

Publications (1)

Publication Number Publication Date
EA040469B1 true EA040469B1 (en) 2022-06-07

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2018222073B2 (en) O-aminoheteroaryl alkynyl-containing compound, preparation method therefor, and use thereof
JP5452811B2 (en) Compounds for inhibiting mitotic progression
HUE029275T2 (en) Phthalazinone ketone derivative, preparation method thereof, and pharmaceutical use thereof
WO2017092635A1 (en) Protein kinase inhibitor, preparation method and medical use thereof
EP3154982B1 (en) Compounds comprising 1,1&#39;,2,5&#39;-tetrahydrospiro[indole-3,2&#39;-pyrrole]-2,5&#39;-dione system as inhibitors p53-mdm2 protein-protein interaction
TWI845819B (en) Compounds used as kinase inhibitors and their applications
WO2014135028A1 (en) Pyridopyrimidine or pyrimidopyrimidine compound, preparation method, pharmaceutical composition and use thereof
CN115322158B (en) As KRASG12CSubstituted quinazoline compounds of protein inhibitor
CN104557913B (en) Pyridopyrimidine compounds as well as preparation method and application thereof
WO2020001351A1 (en) Egfr inhibitor, method for preparing the same, and uses thereof
WO2021249319A1 (en) Tricyclic compound, pharmaceutical composition, and use thereof
CN113087671A (en) Cyano-substituted pyridine and cyano-substituted pyrimidine compounds, and preparation methods and applications thereof
WO2022194265A1 (en) Quinazoline-based compound, composition, and application of quinazoline-based compound
TW202317098A (en) Polymorphs of egfr inhibitor
CN118475579A (en) Heterobifunctional molecules as TEAD inhibitors
AU2019209114B2 (en) 1,2,3&#39;,5&#39;-tetrahydro-2&#39;H-spiro(indole-3,1&#39;-pyrrolo(3,4-c)pyrrole)-2,3&#39;-dione compounds as therapeutic agents activating TP53
EA040469B1 (en) 1,2,3&#39;,5&#39;-TETRAHYDRO-2&#39;H-SPIRO[INDOL-3,1&#39;-PYRROLO[3,4-C]PYRRROLE]-2,3&#39;-DIONE COMPOUNDS AS THERAPEUTIC AGENTS THAT ACTIVATE TP53
CN114555597A (en) Isocitrate Dehydrogenase (IDH) inhibitors
CN106146525A (en) Three and ring class anaplastic lymphoma kinase inhibitor
WO2023169453A1 (en) Heteroaromatic ring-containing alkynyl compound, and preparation method therefor and use thereof
CA3100095C (en) Indoline-1-carboxamide compound, preparation method therefor and medical use thereof
KR20220088712A (en) Salts of compounds and crystalline forms thereof
CN104557955B (en) Tricyclic compound as PI3K/mTOR inhibitor as well as preparation method and application of tricyclic compound
CN118619877A (en) Oxalyl diamine derivatives and uses thereof
CN117800989A (en) Compound containing exocyclic double bond and polysubstituted methyl ether structure and application thereof