EA036374B1 - Способ лечения анальной инконтиненции - Google Patents
Способ лечения анальной инконтиненции Download PDFInfo
- Publication number
- EA036374B1 EA036374B1 EA201700014A EA201700014A EA036374B1 EA 036374 B1 EA036374 B1 EA 036374B1 EA 201700014 A EA201700014 A EA 201700014A EA 201700014 A EA201700014 A EA 201700014A EA 036374 B1 EA036374 B1 EA 036374B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- cells
- treatment
- anal incontinence
- concentration
- volume
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0662—Stem cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Virology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, в частности к проктологии, клеточной трансплантологии, и может быть использовано при лечении анальной инконтиненции. Задачей заявляемого способа является обеспечение возможности восстановительного лечения анальной инконтиненции в амбулаторных условиях. Поставленную задачу решает способ лечения анальной инконтиненции, включающий инъекционное введение клеточного трансплантата в виде аутологичной культуры мезенхимальных стволовых клеток, полученных из жировой ткани путем монослойного культивирования, который вводят однократно интрасфинктерно на 3, 6, 9 и 12 ч по условному лимбу прямой кишки в объеме до 2 мл в концентрации 1106 клеток/мл в виде суспензии в физиологическом растворе хлорида натрия и однократно ретроректально в объеме до 2 мл в концентрации 1106 клеток/мл в виде суспензии в физиологическом растворе хлорида натрия, содержащем 10% аутологичной сыворотки.
Description
Изобретение относится к медицине, в частности к проктологии, клеточной трансплантологии, и может быть использовано при лечении анальной инконтиненции.
Анальная инконтиненция является достаточно распространенным заболеванием у людей в различных возрастных группах. Нарушение удерживающей функции замыкательного аппарата прямой кишки и связанные с ней расстройства у детей и взрослого населения встречаются в 1-8% случаев, при этом с возрастом частота встречаемости инконтиненции значимо возрастает. Применяемые методы консервативного лечения анальной инконтиненции (лекарственные препараты-регуляторы стула, диеты, упражнения по укреплению мышц таза и ануса, биофидбек-терапия, психотерапевтическое воздействие и др.) малоэффективны и трудоемки. Хирургические методы коррекции изменений тазового дна и сфинктерного аппарата прямой кишки, формирование искусственного ануса и использование механических запирательных устройств эффективны не у всех пациентов, в ряде случаев эти вмешательства нефизиологичны, достаточно травматичны, могут вызывать ряд серьезных осложнений. Это обусловливает актуальность поиска новых методов лечения анальной инконтиненции с использованием клеточной терапии для восстановления структуры и функции сфинктерного и связочного аппарата прямой кишки.
Известен способ лечения энкопреза (анальная инконтиненция) [1], заключающийся в инъекции жировой ткани, взятой у самого пациента, в область его промежности для изменения анатомии замыкательного аппарата прямой кишки. При этом введение жировой ткани осуществляют на расстоянии 1,5-2 см от заднего прохода на 6 ч в ретроанальное пространство между стенкой прямой кишки и копчиком пациента, при этом количество вводимой жировой ткани выбирают из расчета 2,0-2,5 мл на кг веса больного, но не более 100 мл. Инъекцию жировой ткани осуществляют после кожного разреза длиной до 0,3 см на промежности пациента канюлей для липофилинга или проколом на промежности пациента иглой.
Недостатком способа является рассасывание введенного жира через несколько месяцев (а иногда и в более ранние сроки), что требует повторения процедуры.
Известен способ восстановления функции запирательного аппарата прямой кишки (лечения анальной инконтиненции) [2] путем введения биологического трансплантата в параанальную область. При этом в качестве трансплантата используют клеточную массу аутологичного костномозгового пунктата, которую неоднократно вводят в виде инъекций в мягкие ткани параанальной области вокруг прямой кишки. После каждого введения воздействуют на зоны введения двуполярным симметричным флюктуирующим током (причем один электрод располагают на поясничном отделе позвоночника, а второй - в области ануса, силу тока постепенно повышают до 5-10 мА до появления видимого сокращения мышц, курс состоит из 10 ежедневных процедур).
К недостаткам способа относятся 1) высокая инвазивность процедуры взятия костного мозга для получения трансплантата (клеточной массы) с необходимостью общей анестезии, повышающей риск развития осложнений после наркоза; 2) гетерогенность трансплантируемой клеточной массы костного мозга, содержащей помимо мультипотентных стволовых клеток, обладающих регенеративным потенциалом, большую примесь балластных клеток (в частности, эритроцитов, которые гемолизируются в месте инъекции и способствуют образованию соединительной, а не мышечной ткани); 3) необходимость неоднократного введения клеточной массы с перерывами в несколько дней и дополнительной активации регенеративного (дифференцировочного) потенциала стволовых клеток костного мозга путем электростимуляции анальной области курсом в 10 дней, что, в свою очередь, ухудшает качество жизни пациента и значимо увеличивает сроки лечения в стационаре.
Источника информации, близкого к заявляемому, не обнаружено.
Задачей заявляемого способа является обеспечение возможности восстановительного лечения анальной инконтиненции в амбулаторных условиях.
Поставленную задачу решает способ лечения анальной инконтиненции, включающий инъекционное введение клеточного трансплантата в виде аутологичной культуры мезенхимальных стволовых клеток, полученных из жировой ткани путем монослойного их культивирования, который вводят однократно интрасфинктерно на 3, 6, 9 и 12 ч по условному лимбу прямой кишки в объеме до 2 мл в концентрации 1 х 106 клеток/мл в виде суспензии в физиологическом растворе хлорида натрия и однократно ретроректально в объеме до 2 мл в концентрации 1х 106 клеток/мл в виде суспензии в физиологическом растворе хлорида натрия, содержащем 10% аутологичной сыворотки.
Механизм действия клеточного трансплантата связан с мультипотентным потенциалом мезенхимальных стволовых клеток, способных дифференцироваться в гладкомышечные клетки и клетки поперечно-полосатой мышечной ткани, а также с выраженной секреторной активностью клеток, паракринно стимулирующих аутологичные клетки поврежденной ткани в месте инъекции. Аутологичная сыворотка, содержащая белковые факторы, факторы роста, поддерживает высокую пролиферативную активность трансплантируемых стволовых клеток и способна стимулировать процесс укрепления соединительнотканных структур связочного аппарата прямой кишки за счет активации фиброгенеза.
Аутологичную сыворотку пациента получают из венозной периферической крови в день забора жировой ткани (40 мл) и в день трансплантации (10 мл). Венозную кровь из локтевой вены переносят в стерильную пробирку и инкубируют в термостате 30 мин. После этого с помощью пастеровской пипетки
- 1 036374 отслаивают сгусток от стенки пробирки и помещают его в камеру холодильника на 30 мин. Отстоявшуюся сыворотку крови отбирают в стерильную пробирку для дальнейшего использование при получении клеточного трансплантата или разведении клеточной суспензии.
Мезенхимальные стволовые клетки получают из подкожной клетчатки околопупочной области, забор материала (в объеме до 5 мл) осуществляется под местной анестезией. Извлеченную жировую ткань промывают в фосфатном буферном растворе и инкубируют с 0,075%-ным раствором коллагеназы I типа в течение 45 мин при 37°С. Полученную суспензию клеток дважды цетрифугируют при 1500 об/мин в фосфатном буферном растворе, содержащем 5% фетальной бычьей сыворотки. Мононуклеарные клетки культивируют в среде DMEM, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки, 50 ед./мл бензилпенициллина-натрия, 50 мкг/мл стрептомицина сульфата и 100 мкг/мл неомицина сульфата и 2 мМ глутамина в культуральных чашках диаметром 60 мм в концентрации 1-5*105 клеток на см2. Замену среды производят каждые четвертые сутки до формирования монослоя клеток на поверхности чашки (7-12 дней). Пересев на 1 пассаж осуществляют в ходе 5-10-минутной обработки монослоя 0,25%-ным раствором трипсина-ЭДТА. Клетки культивируют в среде DMEM, содержащей 10% аутологичной сыворотки, 50 ед./мл бензилпенициллина-натрия, 50 мкг/мл стрептомицина сульфата и 100 мкг/мл неомицина сульфата и 2 мМ глутамина до момента получения необходимой биомассы клеток. На этапе культивирования при замене среды отбирают клеточный супернатант для оценки стерильности культуры. Микробиологический контроль проводят путем посева по 1000 мкл культурального супернатанта от клеток в пробирки со средой Сабуро, тиогликолевой средой и питательным бульоном. Посевы на тиогликолевую среду и питательный бульон инкубируют при 30-35°С, а посевы на среду Сабуро - при температуре 20-25°С в течение 14 суток. При отсутствии роста микроорганизмов культура считается прошедшей контроль стерильности.
Подготовка клеточного трансплантата включает 1) взятие 10 мл венозной периферической крови у пациента в день трансплантации и выделение аутологичной сыворотки; 2) снятие мезенхимальных стволовых клеток 1 пассажа с поверхности культурального пластика 0,25%-ным раствором трипсина-ЭДТА; 3) однократное центрифугирование при 1500 об/мин в фосфатном буферном растворе, содержащем 5% фетальной бычьей сыворотки, и двукратная отмывка клеток в физиологическом растворе хлорида натрия при 1500 об/мин; 4) разделение клеток на 2 образца с разведением одного в концентрации 1х 106 клеток/мл в физиологическом растворе общим объемом до 8 мл и другого - в концентрации 1 х 106 клеток/мл объемом до 2 мл физиологического раствора, содержащего 10% аутологичной сыворотки; 5) отбор клеточной взвеси (5х 104) из образцов для оценки жизнеспособности клеток с использованием 0,2%-го раствора красителя трипанового синего и подсчетом числа жизнеспособных (неокрашенных) клеток в камере Горяева.
Внутритканевую инъекцию клеточного трансплантата осуществляют в амбулаторных условиях под местной анестезией 1%-ным раствором лидокаина, при этом клеточный трансплантат вводят однократно интрасфинктерно на 3, 6, 9 и 12 ч по условному лимбу прямой кишки в объеме до 2 мл в концентрации 1х106 клеток/мл в виде суспензии в физиологическом растворе и однократно ретроректально в объеме до 2 мл в концентрации 1х106 клеток/мл в виде суспензии в физиологическом растворе, содержащем 10% аутологичной сыворотки.
Пример.
Пациент Н., 1952 года рождения, госпитализирован в учреждение здравоохранения 11-я городская клиническая больница г. Минска 19.10.2015 г. с диагнозом: хронический парапроктит (свищевая форма), транссфинктерный свищ прямой кишки (состояние после хирургического лечения с использованием лигатурного метода), анальная инконтиненция II степени. После подписания информированного согласия произведен забор подкожной клетчатки околопупочной области под местной анестезией в объеме 5 мл и 40 мл венозной периферической крови для получения клеточного трансплантата и аутологичной сыворотки пациента соответственно. Необходимая биомасса мезенхимальных стволовых клеток 1 пассажа получена на 13-е сутки культивирования. В ходе культивирования проведен микробиологический контроль и оценка стерильности культуры. Рост микроорганизмов во всех средах отсутствовал.
Предтрансплантационная подготовка клеточного трансплантата включала 1) взятие 10 мл венозной периферической крови у пациента в день трансплантации и выделение аутологичной сыворотки; 2) снятие мезенхимальных стволовых клеток 1 пассажа с поверхности культурального пластика 0,25%-ным раствором трипсина-ЭДТА; 3) однократное центрифугирование при 1500 об/мин в фосфатном буферном растворе, содержащем 5% фетальной бычьей, и двукратная отмывка клеток в физиологическом растворе при 1500 об/мин; 4) разделение клеток на 2 образца с разведением одного в концентрации 1х106 клеток/мл в физиологическом растворе общим объемом до 8 мл и другого - в концентрации 1 х 106 клеток/мл объемом до 2 мл физиологического раствора, содержащего 10% аутологичной сыворотки; 5) оценку жизнеспособности клеток с использованием 0,2%-го раствора красителя трипанового синего и подсчет числа жизнеспособных (неокрашенных) клеток в камере Горяева. Жизнеспособность клеток обоих образцов составляла 95%.
С целью восстановления сократительной активности мышечной ткани сфинктерного аппарата, а
- 2 036374 также структуры и функции связочного аппарата прямой кишки у пациента со смешанной формой анальной инконтиненции сложного генеза проведено инъекционное введение клеточного трансплантата в виде аутологичной культуры мезенхимальных стволовых клеток, полученных из жировой ткани путем монослойного культивирования, однократно интрасфинктерно на 3, 6, 9 и 12 ч по условному лимбу прямой кишки в объеме до 2 мл в концентрации 1х 106 клеток/мл в виде суспензии в физиологическом растворе поваренной соли и однократно ретроректально в объеме до 2 мл в концентрации 1 х 106 клеток/мл в виде суспензии в физиологическом растворе хлорида натрия, содержащем 10% аутологичной сыворотки.
Определение нарушений континентного статуса в периоды до лечения и после него проводили при помощи четырех стандартизированных методик оценки в соответствии со шкалой Revised Faecal Incontinence Scale (RFIS) - анонимного опросника Wexner Constipation Score (возможная сумма баллов 020), предназначенного для выявления нарушений удержания твердых, жидких каловых масс и каломазания; опросника Colorectal Anal Distress Scale (CRADS), предназначенного для выявления нарушения удержания газов (сумма баллов от 0 до 7); визуальных аналоговых шкал (Visual Analogue Scales) оценки анальной инконтиненции VASFI (Fecal Incontinence) и качества жизни VASQL (Quality of Life) (суммы баллов от 1 до 10) - перед лечением, а также в срок 4 месяца после трансплантации.
Через 4 месяца после применения способа пациент отметил заметное улучшение удерживающей функции прямой кишки (в отношении жидких и плотных каловых масс, а также газов и каломазания) с хорошей социальной адаптацией в обществе. При этом по шкале Wexner constipation score удерживающая функция прямой кишки выросла с 2,75 до 4,0 баллов (на 31%), по шкале Colorectal Anal Distress Scale - с 2 до 5 баллов (на 60%), по шкале VASFI (Faecal incontinence) - с 8 до 10 баллов (на 20%), по шкале VASQL (Quality of Life) - с 8 до 9 баллов (на 11%).
Таким образом, заявляемый способ позволил достичь хорошего результата лечения с полной заменой стационарного лечение на амбулаторное, сократить общие сроки лечения смешанной формы анальной инконтиненции.
Источники информации:
1. Патент № 2539188, RU, МПК А61В 17/00, опубликован 20.01.2015.
2. Патент № 2405573, RU, МПК А61М 5/00, А61К 35/28, А61Р 1/00, A61N 1/18, опубликован 10.12.2010.
Claims (1)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСпособ лечения анальной инконтиненции, включающий инъекционное введение клеточного трансплантата в виде аутологичной культуры мезенхимальных стволовых клеток, полученных из жировой ткани путем монослойного культивирования, который вводят однократно интрасфинктерно на 3, 6, 9 и 12 ч по условному лимбу прямой кишки в объеме до 2 мл в концентрации 1х 106 клеток/мл в виде суспензии в физиологическом растворе хлорида натрия и однократно ретроректально в объеме до 2 мл в концентрации 1х106 клеток/мл в виде суспензии в физиологическом растворе хлорида натрия, содержащем 10% аутологичной сыворотки.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EA201700014A EA036374B1 (ru) | 2016-11-17 | 2016-11-17 | Способ лечения анальной инконтиненции |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EA201700014A EA036374B1 (ru) | 2016-11-17 | 2016-11-17 | Способ лечения анальной инконтиненции |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201700014A1 EA201700014A1 (ru) | 2018-05-31 |
| EA036374B1 true EA036374B1 (ru) | 2020-10-30 |
Family
ID=62217542
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA201700014A EA036374B1 (ru) | 2016-11-17 | 2016-11-17 | Способ лечения анальной инконтиненции |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| EA (1) | EA036374B1 (ru) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007114740A2 (fr) * | 2006-04-04 | 2007-10-11 | Trans-Technologies Ltd | Transplant biologique destiné à la thérapie cellulaire à base de cellules souches mésenchymateuses, obtenues à partir de la moelle osseuse |
| RU2539188C1 (ru) * | 2013-06-25 | 2015-01-20 | Краевое государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования "ИНСТИТУТ ПОВЫШЕНИЯ КВАЛИФИКАЦИИ СПЕЦИАЛИСТОВ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ" (КГБОУ ДПО ИПКСЗ) | Способ лечения энкопреза |
-
2016
- 2016-11-17 EA EA201700014A patent/EA036374B1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007114740A2 (fr) * | 2006-04-04 | 2007-10-11 | Trans-Technologies Ltd | Transplant biologique destiné à la thérapie cellulaire à base de cellules souches mésenchymateuses, obtenues à partir de la moelle osseuse |
| EP2009096A2 (de) * | 2006-04-04 | 2008-12-31 | Trans-Technologies Ltd. | Biotransplantat für die zelltherapie auf der grundlage mesenchymaler knochenmark-stammzellen |
| RU2539188C1 (ru) * | 2013-06-25 | 2015-01-20 | Краевое государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования "ИНСТИТУТ ПОВЫШЕНИЯ КВАЛИФИКАЦИИ СПЕЦИАЛИСТОВ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ" (КГБОУ ДПО ИПКСЗ) | Способ лечения энкопреза |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| PARK Eun Jung et al. Treatment of faecal incontinence using allogenic-adipose-derived mesenchym stem cells: a study protocol for a pilot randomised controlled trial. BMJ Open, 2016; 6:e01045 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EA201700014A1 (ru) | 2018-05-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2394593C2 (ru) | Имплантируемая нейроэндопротезная система, способ ее получения и способ проведения реконструктивной нейрохирургической операции | |
| RU2323252C1 (ru) | Способ культивирования мезенхимальных стволовых клеток человека ex vivo | |
| CN103717226A (zh) | 使用人脐带组织来源细胞和水凝胶治疗椎间盘退变 | |
| de Souza Lucena et al. | Experimental considerations concerning the use of stem cells and tissue engineering for facial nerve regeneration: a systematic review | |
| JP2008534529A (ja) | 自家造血幹細胞の調製物、その製造方法、低温保存方法、および中枢神経系の外傷性疾患の治療のための使用 | |
| CN108348555A (zh) | 细胞扩增方法和治疗组合物 | |
| CN105833277A (zh) | 治疗类风湿性关节炎的干细胞制剂及其制备方法和应用 | |
| CN108865986A (zh) | 用于修复关节软骨损伤/缺损的间充质干细胞制剂及其制备方法和应用 | |
| US20220154142A1 (en) | Production of schwann cells | |
| EA036374B1 (ru) | Способ лечения анальной инконтиненции | |
| Lohani et al. | The Study to Assess the Effectiveness of Structured Teaching Programme on Menstrual Blood Stem Cells Banking among Nursing Student at Selected College of Nursing, Uttrakhand | |
| RU2671560C1 (ru) | Способ замедления прогрессирования цирроза печени у реципиентов в листе ожидания трансплантации печени | |
| CN106924815A (zh) | 用于整形充填的自体外周血干细胞和自体脂肪组合物 | |
| CN108392624A (zh) | 活性促进肽以及间充质干细胞在治疗类风湿性关节炎中的应用 | |
| RU2798554C2 (ru) | Биомедицинский клеточный продукт для лечения онкологических, нейродегенеративных, аутоимунных заболеваний и травм головного и спинного мозга | |
| Arbra et al. | Microdissection of primary renal tissue segments and incorporation with novel scaffold-free construct technology | |
| Olushanu | Repair of Spinal Cord Injuries by Transplanting Olfactory Mucosal Ensheathing Cells | |
| RU2316246C1 (ru) | Способ эндоскопической коррекции пузырно-мочеточникового рефлюкса | |
| CN114404449A (zh) | 脐带间充质干细胞作为制备修复急性脊髓损伤药物的应用 | |
| KR20160144780A (ko) | 편도 유래 중간엽 줄기세포로부터 건 세포의 분화방법 | |
| US20150290360A1 (en) | Method of preparing an implantable neuroendoprosthetic system | |
| CN109758476A (zh) | 马脂肪间充质干细胞在制备治疗马损伤的药物中的应用 | |
| CN111088230A (zh) | 促进离体肿瘤组织微血管生长的孵育液及其制备方法 | |
| RU2410426C2 (ru) | Способ выращивания ретикулярных клеток человека | |
| Shenaq et al. | LOP29: THE OSTEOGENIC CHARACTERISTICS OF IMMORTALIZED CALVARIAL CELL |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU |