EA024936B1 - Preparation for increasing sperm production in stud livestock and roosters and method for the use thereof - Google Patents
Preparation for increasing sperm production in stud livestock and roosters and method for the use thereof Download PDFInfo
- Publication number
- EA024936B1 EA024936B1 EA201400370A EA201400370A EA024936B1 EA 024936 B1 EA024936 B1 EA 024936B1 EA 201400370 A EA201400370 A EA 201400370A EA 201400370 A EA201400370 A EA 201400370A EA 024936 B1 EA024936 B1 EA 024936B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- sperm
- roosters
- amino acid
- drug
- somatostatin
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/31—Somatostatins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
Abstract
Description
Область примененияApplication area
Изобретение относится к ветеринарии, а конкретно к препарату для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способу его применения. Изобретение предназначено для повышения репродуктивной способности производителей сельскохозяйственных животных и петухов с целью их более эффективного использования за счет повышения объем эякулята при значительном снижении брака спермы по биологическим показателям (подвижность сперматозоидов, количество живых сперматозоидов и их морфологическая полноценность), что в итоге повышает рентабельность искусственного осеменения животных.The invention relates to veterinary medicine, and in particular to a preparation for increasing sperm production in producers of farm animals and roosters and a method for its use. The invention is intended to increase the reproductive ability of producers of farm animals and roosters with a view to their more efficient use by increasing the volume of ejaculate with a significant decrease in sperm marriage by biological indicators (sperm motility, number of living sperm and their morphological usefulness), which ultimately increases the profitability of artificial insemination animals.
Известный уровеньKnown level
Современная ветеринарная наука решает проблему повышения репродуктивных способностей производителей сельскохозяйственных животных и птицы, применяя биологически активные препараты витамины, макромикроэлементы, растительные препараты, а также используя физиологические методы дозированный прямой контакт самцов-производителей с половозрелыми самками животных в состоянии охоты.Modern veterinary science solves the problem of increasing the reproductive abilities of producers of farm animals and poultry by using biologically active preparations of vitamins, microelements, herbal preparations, and also using physiological methods, dosed direct contact of male producers with sexually mature female animals in a hunting state.
Химические препараты дорогостоящие и не всегда гарантируют положительный эффект. Из данных литературы известен стимулирующий и адаптогенный эффект экстрактов родиолы розовой. При скармливании хрякам-производителям в течение 60 дней препарата из высушенных корней родиолы розовой авторы (А.Г. Нарижный, А.Ч. Джамалдинов, Ветеринария, № 10, 2003) обнаружили повышение объема эякулята на 7,9-13,8%, с сохранением на контрольном уровне концентрации сперматозоидов. По окончании подкормки биологические показатели спермы возвращались к первоначальному уровню.Chemicals are expensive and do not always guarantee a positive effect. From the literature data, the stimulating and adaptogenic effect of Rhodiola rosea extracts is known. When feeding to the boar-producers for 60 days a preparation from the dried roots of Rhodiola rosea, the authors (A.G. Narizhny, A.Ch. Dzhamaldinov, Veterinary science, No. 10, 2003) found an increase in the volume of ejaculate by 7.9-13.8%, while maintaining at a control level the concentration of sperm. At the end of feeding, the biological indicators of sperm returned to their original level.
Стимулирующим эффектом на спермопродукцию быков-производителей оказывает препарат на основе инактивированной биомассы галобактерий На1оЪас)егшт На1оЫит. содержащий аминокислоты, липиды, водо- и жирорастворимые витамины (Г.В. Ескин, Н.А. Комбарова, Р.А. Корнилин, Проблемы биологии продуктивных животных № 4, 2011). При скармливании быкам-производителям препарата на основе галобактерий (Баксин-вет) авторы отмечали сокращение количества выбракованных эякулятов, улучшение качества нативного семени, повышение выживаемости криоконсервированной спермы после оттаивания в течение 5 ч вне организма при температуре 37°С. Эффект сохранялся в течение 30 суток после окончания скармливания препарата, в последующем показатели спермопродукции возвращались на уровень предварительного периода.A stimulating effect on the sperm production of bulls is provided by the preparation based on the inactivated biomass of halobacteria Na1Obac) ex Na1oBit. containing amino acids, lipids, water- and fat-soluble vitamins (G.V. Eskin, N.A. Kombarova, R.A. Kornilin, Problems of the biology of productive animals No. 4, 2011). When feeding the halobacterium-based drug (Baksin-vet) to the bulls-producers, the authors noted a decrease in the number of rejected ejaculates, an improvement in the quality of the native seed, and an increase in the survival of cryopreserved sperm after thawing for 5 hours outside the body at a temperature of 37 ° C. The effect persisted for 30 days after the end of feeding the drug; subsequently, the sperm production indices returned to the level of the preliminary period.
В исследованиях С. Околышева, Н. Карпова, Р. Корнилина показано стимулирующее влияние препарата Баксин-вет на продуктивные характеристики хряков-производителей. Ежедневное применение хрякам-производителям препарата Баксин-вет в течение трех недель в дозе 5 и 10 мг на 1 кг живой массы при содержании хряков даже на хозяйственном рационе приводило к увеличению объема эякулята и количества сперматозоидов в сперме (С. Околышев, Н. Карпова, Р. Корнилин. Влияние препарата Баксин-вет на спермопродукцию хряков и многоплодие свиноматок в условиях интенсивного производства свинины, Свиноводство, № 2, 2009).The studies of S. Okolyshev, N. Karpov, R. Kornilin showed the stimulating effect of the drug Baksin-vet on the productive characteristics of boars-producers. The daily use of Baksin-vet to boars-producers of the drug for three weeks at a dose of 5 and 10 mg per 1 kg of live weight when boars are kept even on an economic diet led to an increase in ejaculate volume and sperm count in sperm (S. Okolyshev, N. Karpova, R. Kornilin, Effect of Baksin-vet preparation on sperm production of boars and multiple sows in conditions of intensive pork production, Pig Production, No. 2, 2009).
В работе З.П. Комовой Повышение воспроизводительной функции хряков с использованием биологически активных веществ (диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук, ВНИИЖ, Дубровицы, 2001 г.) показано, что подкормка хряков-производителей биологически активными препаратами СГОЛ и Стимульгин оказывает положительное влияние на проявление рефлексов совокупления и эрекции у производителей, повышает объем эякулята и содержание спермиев в эякуляте.In the work of Z.P. Komova Increasing the reproductive function of boars using biologically active substances (the dissertation for the degree of candidate of biological sciences, All-Russian Research Institute of Scientific Research, Dubrovitsy, 2001), it was shown that feeding boars-producers with biologically active preparations SGOL and Stimulgin has a positive effect on the manifestation of copulation and erection reflexes manufacturers, increases the volume of ejaculate and the content of sperm in the ejaculate.
В исследованиях С.А. Холева установлено положительное влияние селеносодержащего препарата Деполен для коррекции воспроизводительной функции быков-производителей (Применение селеносодержащего препарата Деполен для коррекции воспроизводительной функции быков производителей, Воронеж, 2000).In studies S.A. Holeva established a positive effect of the selenium-containing drug Depolen for correcting the reproductive function of bulls-producers (The use of selenium-containing drug Depolen for correcting the reproductive function of bulls-producers, Voronezh, 2000).
В исследованиях, представленных в международной заявке \УО 03/064619 (\УО 03/064619 А2, МПК А61К 38/00, 2006), повышение сперматогенеза обеспечивается за счет активации фактора УЕСР, индуцирующего увеличение васкуляризации ткани половых желез.In the studies presented in the international application \ UO 03/064619 (\ UO 03/064619 A2, IPC A61K 38/00, 2006), an increase in spermatogenesis is provided due to activation of the UESR factor, which induces an increase in vascularization of the gonadal tissue.
Иной метод увеличение спермопродукции производителей сельскохозяйственных животных и птицы основан на повышении концентрации в организме эндогенного соматотропина за счет индукции синтеза аутосоматостатиновых антител. Это приводит к снижению концентрации эндогенного соматостатина и повышению содержания соматотропина, что, в свою очередь, оказывает стимулирующее влияние на рост и пролиферацию клеток половых желез животных.Another method of increasing sperm production of producers of farm animals and poultry is based on increasing the concentration of endogenous growth hormone in the body due to the induction of the synthesis of autosomatostatin antibodies. This leads to a decrease in the concentration of endogenous somatostatin and an increase in the somatotropin content, which, in turn, has a stimulating effect on the growth and proliferation of animal sex gland cells.
Соматостатин - биологически активный тетрадекапептид, вырабатывающийся в гипоталамусе и желудочно-кишечном тракте животных. Впервые биологическая активность вещества, впоследствии определенная как соматостатиновая, была обнаружена в 1968 году Крюликом. В последующем, из гипоталамуса животных было выделено вещество, представляющее собой низкомолекулярный пептид, обладающий способностью регулировать концентрацию гормона роста в организме животных.Somatostatin is a biologically active tetradeapeptide produced in the hypothalamus and gastrointestinal tract of animals. For the first time, the biological activity of a substance, subsequently defined as somatostatin, was discovered in 1968 by Kryulik. Subsequently, a substance was selected from the hypothalamus of animals, which is a low molecular weight peptide with the ability to regulate the concentration of growth hormone in animals.
Соматостатин-14 оказывает сильное ингибирующее действие на ряд гормонов (соматотропин, тиреотропный гормон (ТТГ), инсулин, глюкагон, гастрин, пепсин), инициирует угнетение секреции желудочных ферментов, поджелудочной железы, тонкого отдела кишечника, замедление моторики желудочно-кишечного тракта и эвакуации его содержимого.Somatostatin-14 has a strong inhibitory effect on a number of hormones (somatotropin, thyroid stimulating hormone (TSH), insulin, glucagon, gastrin, pepsin), initiates inhibition of secretion of gastric enzymes, pancreas, small intestine, slows down the motility of the gastrointestinal tract and its evacuation content.
- 1 024936- 1,024,936
Изучение аминокислотного состава соматостатина у различных представителей животного царства показало достаточную степень гомологии пептидов, синтезируемых живыми организмами, находящимися на различных ступенях эволюционного развития. Аминокислотная последовательность соматостатина-14 идентична у живых организмов - от рыб до млекопитающих.The study of the amino acid composition of somatostatin in various representatives of the animal kingdom showed a sufficient degree of homology of peptides synthesized by living organisms at various stages of evolutionary development. The amino acid sequence of somatostatin-14 is identical in living organisms - from fish to mammals.
Широкий спектр физиологического действия соматостатина-14 и отсутствие, в отличие от гормона роста, видовой специфичности для млекопитающих явились основанием для изучения возможности его использования с целью оптимизации выращивания и откорма, повышения молочной продуктивности животных.A wide range of physiological effects of somatostatin-14 and the absence, in contrast to growth hormone, of species specificity for mammals were the basis for studying the possibility of its use in order to optimize the cultivation and feeding, increase the milk production of animals.
В США, Канаде, Великобритании более тридцати лет назад были выполнены отдельные работы по активной иммунизации животных (крупный рогатый скот, овцы, свиньи) против соматостатина-14 (8реп8ег е1 а1.). Авторы исследований отмечают, что по динамике увеличения массы тела в одинаковых условиях содержания иммунизированные животные превосходили контрольных особей на 20-30%, при этом в крови обнаруживалось повышенное содержание эндогенного соматотропного гормона. В процессе исследований было обнаружено сокращение сроков откорма, повышение надоев молока и, как следствие этого, снижение непроизводительных расходов на единицу получаемой животноводческой продукции. В дальнейшем были проведены эксперименты с разными видами животных. Изучали влияние пассивной и активной иммунизации на уровень гормонов, динамику увеличения массы тела животных и другие параметры. Введение антисоматостатиновой сыворотки крысам приводило к повышению концентрации эндогенного гормона роста, пассивная антисоматостатиновая иммунизация овец обусловливала увеличение времени нахождения пищи в желудочно-кишечном тракте, повышение активности желудочных ферментов. Активная иммунизация животных белками, полученными в результате химического связывания синтетического соматостатина с белками-носителями, приводила к повышению уровней концентрации гормона роста, инсулинового ростового фактора, гастрина и других функционально связанных с соматостатином биологически активных соединений. Результатом активной антисоматостатиновой иммунизации являлось увеличение массы тела животных на 8-17%.More than thirty years ago, in the USA, Canada, and Great Britain, separate works were carried out on the active immunization of animals (cattle, sheep, pigs) against somatostatin-14 (8rep8 e1 a1.). The authors of the studies note that according to the dynamics of the increase in body weight under the same conditions, the immunized animals exceeded the control individuals by 20-30%, while an increased content of endogenous growth hormone was found in the blood. In the process of research, a reduction in the timing of fattening, an increase in milk yield and, as a consequence of this, a reduction in unproductive costs per unit of livestock production was found. Later experiments were conducted with different species of animals. We studied the effect of passive and active immunization on the level of hormones, the dynamics of the increase in body weight of animals and other parameters. The administration of antisomatostatin serum to rats led to an increase in the concentration of endogenous growth hormone, passive antisomatostatin immunization of sheep caused an increase in the residence time of the food in the gastrointestinal tract, and an increase in the activity of gastric enzymes. Active immunization of animals with proteins obtained by chemically binding synthetic somatostatin to carrier proteins led to an increase in the levels of growth hormone, insulin growth factor, gastrin and other biologically active compounds functionally associated with somatostatin. The result of active antisomatostatin immunization was an increase in body weight of animals by 8-17%.
Метод соматостатиновой иммунокоррекции лишен многих недостатков, возникающих при использовании анаболических гормонов или рекомбинантного соматотропина. Механизм действия основан на временном связывании эндогенного соматостатина-14 специфическими антителами и возрастании концентрации эндогенного соматотропного гормона в физиологических пределах. Однако широкое применение метода активной иммунизации животных против эндогенного соматостатина-14 длительное время было невозможно, вследствие его высокой стоимости, поскольку основным путем получения пептида являлся химический синтез, что экономически не позволяло реализовать данный подход на практике. Поскольку небольшие размеры соматостатина-14 не позволяют его прямой микробный синтез с помощью технологии рекомбинантной ДНК, описано несколько способов его синтеза в форме химерных белков с последующим выделением целевого продукта, не давших удовлетворительных результатов. Основным недостатком упомянутых методов является крайне низкая иммуногенность полученных препаратов в отношении соматостатина, обусловленная его маскированием в молекуле химерного белка, вследствие чего данные методы получения химерных белков не нашли широкого практического использования (Пакта К. е1 а1., 1977, Ехргеккюп ίη Е.соН οί а сНеписаПу 5утНе51/еб депе οί когтопе ютаЮЧаОп, §тепсе, 1986, 1056-1063; Шишкина А.А. и др. Синтез фрагмента генов соматостатина. Химия природных соединений, 1988, № 6, с. 614-615).The somatostatin immunocorrection method is devoid of many of the disadvantages that arise when using anabolic hormones or recombinant somatotropin. The mechanism of action is based on the temporary binding of endogenous somatostatin-14 to specific antibodies and an increase in the concentration of endogenous somatotropic hormone within physiological limits. However, widespread use of the method of active immunization of animals against endogenous somatostatin-14 for a long time was impossible, due to its high cost, since the main way to obtain the peptide was chemical synthesis, which economically did not allow to implement this approach in practice. Since the small size of somatostatin-14 does not allow its direct microbial synthesis using recombinant DNA technology, several methods for its synthesis in the form of chimeric proteins with the subsequent isolation of the target product that did not give satisfactory results are described. The main disadvantage of the mentioned methods is the extremely low immunogenicity of the preparations obtained with respect to somatostatin, due to its masking in the chimeric protein molecule, as a result of which these methods for the preparation of chimeric proteins have not found wide practical use (Pact K. e1 a1., 1977, Exrgekkup ίη E.coN οί and with NepisuPu 5utNe51 / ebde ίί the claw of the utility, Utepa, §tepse, 1986, 1056-1063; Shishkina A.A. et al. Synthesis of a somatostatin gene fragment. Chemistry of Natural Compounds, 1988, No. 6, pp. 614-615).
Известен способ конструирования химерных соматостатинсодержащих белков с применением аминокислотного спейсера, содержащего аргинин и пролин, обусловливающего локализацию соматостатина на поверхности белка-носителя и, тем самым, высокую иммуногенность препарата (КИ 2031121 С1, МПК Ο12Ν 15/12, 1995). Конструкция состоит из водонерастворимого белка-носителя (фрагмента бактериальной хлорамфениколацетилтрансферазы без 10 С-концевых аминокислот), тетрамерного спейсера и С-концевого соматостатина-14. Молекулярный вес химерного белка составляет 28 кДа. Данный химерный белок экспрессируется штаммом кишечной палочки В-6519, трансформированным плазмидой рС(8р)4 8. Штамм депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) под номером В-6519. Химерный белок с экспонированным соматостатином представляет собой водонерастворимую ферментативно неактивную хлорамфениколацетилтрансферазу без 10 С-концевых аминокислотных остатков, к которой через спейсерную последовательность присоединена аминокислотная последовательность соматостатина-14. Метод антисоматостатиновой иммунизации животных с использованием указанного химерного соматостатинсодержащего белка используется в промышленном животноводстве (КИ 2034457 С1, МПК А01К 67/02,1995).A known method of constructing chimeric somatostatin-containing proteins using an amino acid spacer containing arginine and proline, which determines the localization of somatostatin on the surface of the carrier protein and, therefore, the high immunogenicity of the drug (KI 2031121 C1, IPC Ν12Ο 15/12, 1995). The design consists of a water-insoluble carrier protein (a fragment of a bacterial chloramphenicolacetyltransferase without 10 C-terminal amino acids), a tetrameric spacer and a C-terminal somatostatin-14. The molecular weight of the chimeric protein is 28 kDa. This chimeric protein is expressed by E. coli strain B-6519, transformed with plasmid pC (8p) 4 8. The strain is deposited in the All-Russian collection of industrial microorganisms (VKPM) under the number B-6519. A chimeric protein with exposed somatostatin is a water-insoluble enzymatically inactive chloramphenicol acetyl transferase without 10 C-terminal amino acid residues, to which the somatostatin-14 amino acid sequence is attached via a spacer sequence. The method of anti-somatostatin immunization of animals using the indicated chimeric somatostatin-containing protein is used in industrial animal husbandry (KI 2034457 C1, IPC A01K 67 / 02.1995).
Известно, когда для приготовления готовой лекарственной формы препарата для повышения продуктивности сельскохозяйственных животных, содержащего эффективное количество химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтранссферазой без 10 Стерминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (8р)п, где п=1, 2, 4, 8 и последовательностью соматостатина-14 с последовательностью аминокислот АССЕХУКТЕТБС использовали в качестве адъюванта неполный адъювант Фрейнда (КИ 2034457 С1, МПК А01К 67/02, 1995). Однако высокая реактогенность адъюванта, наличие болезненных ощущений у животных при его введении привели к необхо- 2 024936 димости поиска других адъювантных систем.It is known when preparing a finished dosage form of a preparation for increasing the productivity of farm animals containing an effective amount of a chimeric protein with a water-insoluble enzymatically inactive chloramphenicolacetyl transferase without 10 terminal amino acids, an amino acid spacer (8p) p, where n = 1, 2, 4, 8 and somatostatin sequence -14 with the amino acid sequence ASSEKHUKTETBS used Freund's incomplete adjuvant as adjuvant (KI 2034457 C1, IPC A01K 67/02, 1995). However, the high reactogenicity of the adjuvant, the presence of painful sensations in animals upon its administration, led to the need for the search for other adjuvant systems.
Известно использование препарата, содержащего эффективное количество химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтранссферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (δρ)η, где п=1, 2, 4, 8 и последовательностью соматостатина14 с последовательностью аминокислот АССР^КТРТЗС в липосомальной форме (КИ 2337708 С1, МПК А61К 39/385, 2006) в данном случае неприемлемо вследствие незначительной концентрации действующего вещества в удельном объеме (<1·10-3 г/мл). Для животного массой тела более 500 кг потребовалось бы введение около двадцати миллилитров препарата, что является на практике весьма проблематичным обстоятельством.It is known to use a preparation containing an effective amount of a chimeric protein with a water-insoluble enzymatically inactive chloramphenicolacetyltransferase without 10 C-terminal amino acids, an amino acid spacer (δρ) η, where n = 1, 2, 4, 8 and somatostatin14 with the amino acid sequence ASSR ^ KTRTZS in liposome form (KI 2337708 C1, IPC A61K 39/385, 2006) in this case is unacceptable due to the low concentration of the active substance in the specific volume (<1 · 10 -3 g / ml). For an animal weighing more than 500 kg, the introduction of about twenty milliliters of the drug would be required, which in practice is a very problematic circumstance.
Сущность изобретенияSUMMARY OF THE INVENTION
Задача изобретения заключается в использовании химерного соматостатинсодержащего белка для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов в виде препарата для инъекций с низкой реактогенностью адъюванта, позволяющего осуществлять инъекции без болезненных ощущений производителям сельскохозяйственных животных и петухам.The objective of the invention is to use a chimeric somatostatin-containing protein to increase sperm production in producers of farm animals and cocks in the form of an injectable preparation with a low reactivity of the adjuvant, allowing injections without painful sensations to farm animals and cocks.
Решение этой задачи обеспечивает препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтранссферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (δρ)η, где п=1, 2, 4, 8, и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот АССРХУКТРТЗС в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска.The solution to this problem is provided by a drug for increasing sperm production in producers of farm animals and roosters in the form of a suspension of a chimeric protein with a water-insoluble enzymatically inactive chloramphenicol acetyl transferase without 10 C-terminal amino acids, amino acid spacer (δρ) η, where n = 1, 2, 4, 8, and somatostatin-14 with the amino acid sequence ASSRHUKTRTRZS in refined vegetable oil with the addition of beeswax.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения препарат содержит химерный белок с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтранссферазой без 10 Стерминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (δρ)η, где п= 1,2,4,8 и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот АССРХУКТРТЗС из расчета 250-1000 мг указанного химерного белка на 100 мл рафинированного растительного масла, включающего 0,9-1,1 мас.% пчелиного воска.In a preferred embodiment of the invention, the preparation contains a chimeric protein with a water-insoluble enzymatically inactive chloramphenicol acetyl transferase without 10 terminal amino acids, an amino acid spacer (δρ) η, where n = 1,2,4,8 and somatostatin-14 with an amino acid sequence of ASCPAHKTRTRZS from the calculation of 250-1000 mg the specified chimeric protein per 100 ml of refined vegetable oil, including 0.9-1.1 wt.% beeswax.
Использование в качестве адъюванта для такого рода препарата растительного масла, полностью метаболизирующегося в организме животного, позволяет в значительной степени снизить уровень реактогенности адъюванта и создает необходимые условия для постепенного поступления действующего вещества в организм животного (депо препарата). Могут использоваться подсолнечное, хлопковое и арахисовое масла. Механизм действия препарата основан на временном блокировании активности эндогенного соматостатина сельскохозяйственных животных и петухов, повышении концентрации соматотропного гормона и усилении активности сперматогенеза. Наличие пчелиного воска в конечной прописи препарата обосновано необходимостью достижения равномерности распределения химерного белка в объеме масла, снижения скорости седиментации химерного белка, что особенно важно при проведении инъекций животным с помощью шприцев-автоматов.The use of vegetable oil, which is completely metabolized in the animal’s body, as an adjuvant for this kind of preparation, can significantly reduce the reactogenicity of the adjuvant and creates the necessary conditions for the gradual release of the active substance into the animal’s body (drug depot). Can be used sunflower, cottonseed and peanut butter. The mechanism of action of the drug is based on a temporary blocking of the activity of endogenous somatostatin of farm animals and cocks, an increase in the concentration of growth hormone and an increase in the activity of spermatogenesis. The presence of beeswax in the final formulation of the drug is justified by the need to achieve uniform distribution of the chimeric protein in the oil volume, to reduce the sedimentation rate of the chimeric protein, which is especially important when injecting animals with automatic syringes.
Способ повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов предусматривает двукратную подкожную инъекцию с интервалом в 14 суток препарата в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтранссферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (δρ)η, где п=1, 2, 4, 8, и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот АССРХУКТРТЗС в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска петухам или сельскохозяйственным животным по достижении физиологической зрелости из расчета 50-200 мкг белка на 1 кг живой массы тела.A method for increasing sperm production in producers of farm animals and roosters involves a double subcutaneous injection with an interval of 14 days of the preparation in the form of a suspension of a chimeric protein with a water-insoluble enzymatically inactive chloramphenicolacetyltransferase without 10 C-terminal amino acids, amino acid spacer (δρ) η, where n = 1, 2, 4, 8, and somatostatin-14 with the amino acid sequence ASSRHUKTRTRZS in refined vegetable oil with the addition of beeswax to roosters or farm animals on reaching physiological maturity at the rate of 50-200 g of protein per 1 kg of live weight.
В предпочтительном варианте осуществления используют препарат в зиде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтранссферазой без 10 Стерминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (δρ)η, где η=1, 2, 4, 8, и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот АССРХУКТРТЗС в количестве из расчета 250-1000мг указанного химерного белка на 100 мл рафинированного растительного масла, включающего 0,9-1,1 мас.% пчелиного воска.In a preferred embodiment, a preparation is used in the zide of a suspension of a chimeric protein with a water-insoluble enzymatically inactive chloramphenicolacetyl transferase without 10 terminal amino acids, an amino acid spacer (δρ) η, where η = 1, 2, 4, 8, and somatostatin-14 with an amino acid sequence of ASCPXUKTRKTZS calculation of 250-1000 mg of the indicated chimeric protein per 100 ml of refined vegetable oil, including 0.9-1.1 wt.% beeswax.
Осуществление изобретения и эффективность препаратаThe implementation of the invention and the effectiveness of the drug
Возможность осуществления изобретения поясняется примером получения препарата для повышения сперматогенеза у производителей сельскохозяйственных животных и петухов.The possibility of carrying out the invention is illustrated by an example of a preparation for increasing spermatogenesis in producers of farm animals and cocks.
Полученный и очищенный от примесей препарат белка растворяют в буфере 0,2 М трис-НС1 рН 8,0, содержащем 6 М гуанидинхлорид и 2 М МЭДТА. Добавляют 50-кратный молярный избыток рмеркаптоэтанола в расчете на количество δ-δ групп химерного белка и раствор быстро разбавляют 10кратным объемом буфера без гуанидинхлорида. Образовавшийся преципитат гибридного белка отделяют центрифугированием в течение 15 мин при 12000 д и температуре 4°С и лиофильно высушивают для последующего хранения или приготовления масляной суспензии.The protein preparation obtained and purified from impurities is dissolved in a buffer of 0.2 M Tris-HC1 pH 8.0, containing 6 M guanidine chloride and 2 M MEDTA. A 50-fold molar excess of mercaptoethanol is added, based on the number of δ-δ groups of the chimeric protein, and the solution is quickly diluted with 10 times the volume of buffer without guanidine chloride. The resulting hybrid protein precipitate is separated by centrifugation for 15 min at 12000 d and a temperature of 4 ° C and freeze-dried for subsequent storage or preparation of an oil suspension.
Для приготовления готовой формы препарата используют рафинированное растительное масло и пчелиный воск. В растительное масло добавляют пчелиный воск из расчета 0,9%. Масло нагревают до температуры 45-50°С, перемешивая, достигают полного растворения воска. Затем масло с воском охлаждают до температуры 35-37°С и добавляют навеску сухого белка из расчета 250 мг на 100 мл адъюванта. Суспензию гомогенизируют в течение 1-2 мин и передают на разливочное оборудование. Готовую эмульсию препарата расфасовывают в тару (флаконы стеклянные и шприцы одноразовые). При инойTo prepare the finished form of the drug, refined vegetable oil and beeswax are used. Beeswax is added to vegetable oil at the rate of 0.9%. The oil is heated to a temperature of 45-50 ° C, stirring, achieve complete dissolution of the wax. Then the oil with wax is cooled to a temperature of 35-37 ° C and a portion of dry protein is added at the rate of 250 mg per 100 ml of adjuvant. The suspension is homogenized for 1-2 minutes and transferred to the filling equipment. The finished emulsion of the drug is packaged in containers (glass bottles and disposable syringes). With a different
- 3 024936 концентрации компонентов препарат приготавливается аналогично. Предпочтительными являются следующие содержания компонентов на 100 мл рафинированного растительного масла: 250 мг химерного белка - 0,9 мас.% пчелиного воска; 500 мг химерного белка - 1,0 мас.% пчелиного воска; 1000 мг химерного белка - 1,1 мас.% пчелиного воска.- 3 024936 concentrations of the components of the drug is prepared in the same way. Preferred are the following component contents per 100 ml of refined vegetable oil: 250 mg of chimeric protein — 0.9% by weight of beeswax; 500 mg of chimeric protein - 1.0 wt.% Beeswax; 1000 mg of chimeric protein - 1.1 wt.% Beeswax.
Эффективность применения препарата для повышения сперматогенеза у производителей сельскохозяйственных животных и петухов, находящихся в стадии физиологической зрелости, иллюстрируется следующими примерами.The effectiveness of the drug to increase spermatogenesis in producers of farm animals and roosters at the stage of physiological maturity is illustrated by the following examples.
В условиях промышленного свиноводческого комплекса хрякам-производителям крупной белой породы и породы дюрок был введен препарата двукратно с интервалом 14 суток из расчета 50-200 мкг рекомбинантного белка на 1 кг живой массы тела.Under the conditions of an industrial pig-breeding complex, boars producing large white and Duroc breeds were injected twice with an interval of 14 days at the rate of 50-200 μg of recombinant protein per 1 kg of live body weight.
У хряков-производителей до и после применения препарата установленным порядком осуществляли взятие спермы и определяли объём эякулята, концентрацию сперматозоидов в эякуляте и количество спермодоз. Показатели спермопродукции хряков при применении препарата в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в табл. 1.In boars-producers, before and after the use of the preparation, semen was taken in accordance with the established procedure and the volume of ejaculate, the concentration of sperm in the ejaculate and the number of sperm doses were determined. The indicators of sperm production of boars when using the drug at a dose of 50 μg per 1 kg of live body weight are given in table. one.
Таблица 1Table 1
Препарат оказал положительное влияние на спермопродукцию хряков.The drug had a positive effect on sperm production of boars.
После первой инъекции препарата животным крупной белой породы объём эякулята хряков увеличился на 5,8-13,8%, через 30 -60 дней после второй инъекции объем эякулята вырос на 23,6-25,4%, так же повысилась концентрация сперматозоидов в эякуляте на 12,1-14,1%, что повлияло на увеличение количества полученных спермодоз на 38,3-42,6%. Близкие показатели спермопродукции были обнаружены при применении препарата и у хряков породы дюрок.After the first injection of the drug to large white breed animals, the boar ejaculate volume increased by 5.8-13.8%, 30-60 days after the second injection, the ejaculate volume increased by 23.6-25.4%, the concentration of sperm in the ejaculate also increased by 12.1-14.1%, which affected the increase in the number of sperm doses received by 38.3-42.6%. Close indicators of sperm production were found with the use of the drug and in boars of the Duroc breed.
Показатели спермопродукции хряков при применении препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в табл. 2.The indicators of sperm production of boars when using the drug at a dose of 100 μg per 1 kg of live body weight are given in table. 2.
- 4 024936- 4,049,936
Таблица 2table 2
Препарат в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела также оказал положительное влияние на спермопродукцию хряков. Через 30-60 дней после второй инъекции препарата объём эякулята хряков увеличился на 18,9-16,6%, так же повысилась концентрация сперматозоидов в эякуляте на 12,2-13,8%, что повлияло на увеличение количества полученных спермодоз на 34,8-38,6%. Близкие показатели спермопродукции при применении препарата были обнаружены и у хряков породы дюрок.The drug at a dose of 100 μg per 1 kg of live body weight also had a positive effect on sperm production of boars. 30-60 days after the second injection of the drug, the volume of boar ejaculate increased by 18.9-16.6%, the concentration of sperm in the ejaculate increased by 12.2-13.8%, which influenced the increase in the number of received sperm doses by 34, 8-38.6%. Close indicators of sperm production when using the drug were also found in boars of the Duroc breed.
Показатели спермопродукции хряков при применении препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в табл. 3.The indicators of sperm production of boars when using the drug at a dose of 200 μg per 1 kg of live body weight are given in table. 3.
Препарат в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела также оказал положительное влияние на спермопродукцию хряков. Через 30-60 дней после второй инъекции препарата объём эякулята хряков увеличился на 16,5-15,9%, так же повысилась концентрация сперматозоидов в эякуляте на 11,1-12,9%, что повлияло на увеличение количества полученных спермодоз на 29,1-37,1%. Близкие показатели спермопродукции при применении препарата были обнаружены и у хряков породы дюрок.The drug at a dose of 200 μg per 1 kg of live body weight also had a positive effect on sperm production of boars. 30-60 days after the second injection of the drug, the boar ejaculate volume increased by 16.5-15.9%, the concentration of sperm in the ejaculate also increased by 11.1-12.9%, which influenced the increase in the number of received sperm doses by 29, 1-37.1%. Close indicators of sperm production when using the drug were also found in boars of the Duroc breed.
- 5 024936- 5,049,936
Таблица 3Table 3
Изучение влияния препарата на спермопродукцию быков производителей проводили в организациях по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. Масляную суспензию препарата животным вводили подкожно в дозе 50-200 мкг белка на 1 кг массы тела двукратно с интервалом 14 суток между инъекциями.The study of the effect of the drug on sperm production of bulls of producers was carried out in organizations for artificial insemination of farm animals. An oil suspension of the drug was administered to animals subcutaneously at a dose of 50-200 μg of protein per 1 kg of body weight twice with an interval of 14 days between injections.
У быков-производителей до и после применения препарата установленным порядком осуществляли взятие спермы и определяли объём эякулята, концентрацию сперматозоидов в эякуляте, количество полученных спермодоз и процент брака спермы по биологическим показателям качества спермы (количество сперматозоидов с прямолинейно-поступательным движением, выживаемость).Before and after application of the preparation, semen was taken from the manufacturing bulls and the volume of ejaculate, the concentration of sperm in the ejaculate, the number of received sperm doses and the percentage of sperm rejected by biological indicators of sperm quality (number of sperm with rectilinear movement, survival) were determined.
Показатели спермопродукции быков-производителей при применении препарата в дозах 50, 100 и 200 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в табл. 4-6.Sperm production indices of bulls when using the drug in doses of 50, 100 and 200 μg per 1 kg of live body weight are given in table. 4-6.
Результаты экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у быковпроизводителей в результате применения препарата.The experimental results indicate stimulation of sperm production in bulls as a result of the use of the drug.
Так, объем эякулята, взятый у быков голштинской породы через 90 суток после первой инъекции препарата в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы тела (табл. 4), увеличился на 28,7%, у производителей айрширской породы этот показатель возрос на 22,2%.Thus, the volume of ejaculate taken from Holstein bulls 90 days after the first injection of the drug at a dose of 50 μg per 1 kg of live body weight (Table 4) increased by 28.7%, this indicator increased by 22 for producers of Ayrshire breeds. 2%
В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (активность сперматозоидов, их выживаемость через 5 ч).During the controlled period, the qualitative indicators of the taken sperm improved (sperm activity, their survival after 5 hours).
Итогом применения препарата на быках-производителях в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы тела является увеличение количества полученных спермодоз на 23,4-34,7% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.The result of the use of the drug on manufacturing bulls at a dose of 50 μg per 1 kg of live body weight is an increase in the number of sperm doses received by 23.4-34.7% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
Анализ показателей спермопродукции быков-производителей после применения препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела (табл. 5) свидетельствует о положительном влиянии препарата на контролируемые показатели. Так, объем эякулята, взятый у быков голштинской породы через 90 суток после первой инъекции препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела, увеличился на 27,8%, у производителей айрширской породы этот показатель возрос на 20,7%.Analysis of the sperm production indices of the bulls after the use of the drug in a dose of 100 μg per 1 kg of live body weight (Table 5) indicates a positive effect of the drug on the controlled indices. So, the volume of ejaculate taken from Holstein bulls 90 days after the first injection of the drug at a dose of 100 μg per 1 kg of live body weight increased by 27.8%, this indicator increased by 20.7% in Ayrshire breed producers.
- 6 024936- 6,049,936
Таблица 4Table 4
В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (активность сперматозоидов, их выживаемость через 5 ч).During the controlled period, the qualitative indicators of the taken sperm improved (sperm activity, their survival after 5 hours).
Итогом применения на быках-производителях препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела является увеличение количества полученных спермодоз на 22,1-34,5% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.The result of the use of the drug in bulls at a dose of 100 μg per 1 kg of live body weight is an increase in the number of sperm doses received by 22.1-34.5% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
Анализ показателей спермопродукции быков-производителей после применения препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела (табл. 6) свидетельствует о положительном влиянии препарата на контролируемые показатели. Так, объем эякулята, взятый у быков голштинской породы через 90 суток после первой инъекции препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела, увеличился на 24,5%, у производителей айрширской породы этот показатель возрос на 19,6%.An analysis of the sperm production indices of bulls after the use of the drug at a dose of 200 μg per 1 kg of live body weight (Table 6) indicates a positive effect of the drug on the controlled indices. So, the volume of ejaculate taken from Holstein bulls 90 days after the first injection of the drug at a dose of 200 μg per 1 kg of live body weight increased by 24.5%, this indicator increased by 19.6% in Ayrshire breed producers.
- 7 024936- 7,049,336
Таблица 5Table 5
В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (активность сперматозоидов, их выживаемость через 5 ч).During the controlled period, the qualitative indicators of the taken sperm improved (sperm activity, their survival after 5 hours).
Итогом применения на быках-производителях препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела является увеличение количества полученных спермодоз на 20,5-34,6% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.The result of the use of a preparation at a dose of 200 μg per 1 kg of body weight on bulls-producers is an increase in the number of sperm doses received by 20.5-34.6% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
- 8 024936- 8,049,336
Таблица 6Table 6
Аналогичные эксперименты были проведены на баранах вятской (нолинской) породы.Similar experiments were carried out on sheep of the Vyatka (Nolinsk) breed.
Масляную суспензию препарата животным вводили подкожно в дозе 50-200 мкг белка на 1 кг массы тела двукратно с интервалом 14 суток между инъекциями (табл. 7-9).An oil suspension of the drug was administered to animals subcutaneously at a dose of 50-200 μg of protein per 1 kg of body weight twice with an interval of 14 days between injections (Table 7-9).
У баранов-производителей до и после применения препарата установленным порядком осуществляли взятие спермы и определяли объём эякулята, концентрацию сперматозоидов в эякуляте и количество полученных спермодоз.Before and after application of the preparation, semen were taken from rams-producers and the volume of ejaculate, the concentration of sperm in the ejaculate and the number of received sperm doses were determined.
Показатели спермопродукции баранов-производителей при применении препарата в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы показаны в табл. 7.Indicators of sperm production of ram-producers when using the drug at a dose of 50 μg per 1 kg of live weight are shown in table. 7.
- 9 024936- 9,049,336
Таблица 7Table 7
Результаты представленных в табл. 7 экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у баранов-производителей в результате применения препарата. Так, объем эякулята, взятый у баранов через 90 суток после первой инъекции, увеличился на 18,0%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (подвижность, выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на баранах-производителях является увеличение количества полученных спермодоз от одного животного на 28,1% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.The results presented in table. 7 experiments indicate stimulation of sperm production in ram-producers as a result of the use of the drug. So, the volume of ejaculate taken from rams 90 days after the first injection increased by 18.0%. During the controlled period, the qualitative indicators of the taken sperm (motility, sperm survival) improved. The result of the use of the drug in sheep-producers is an increase in the number of sperm doses received from one animal by 28.1% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
В табл. 8 приведены показатели спермопрдукции баранов-производителей при применении препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела.In the table. Figure 8 shows the indicators of sperm production of ram-producers when using the drug at a dose of 100 μg per 1 kg of live body weight.
Таблица 8Table 8
Результаты представленных в табл. 8 экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у баранов-производителей в результате применения препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела. Так, объем эякулята, взятый у баранов через 90 суток после первой инъекции, увеличился на 13,3%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (подвижность, выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на баранах-производителях является увеличение через 90 дней после первой инъекции препарата количества полученных спермодоз от одного животного на 26,6% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.The results presented in table. 8 experiments indicate stimulation of sperm production in rams as a result of the use of the drug at a dose of 100 μg per 1 kg of live body weight. So, the volume of ejaculate taken from rams 90 days after the first injection increased by 13.3%. During the controlled period, the qualitative indicators of the taken sperm (motility, sperm survival) improved. The result of the use of the drug in sheep-producers is an increase in 90 days after the first injection of the drug the number of received sperm doses from one animal by 26.6% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
В табл. 9 приведены показатели спермопродукции баранов-производителей при применении препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела.In the table. Figure 9 shows the sperm production of ram-producers when using the drug at a dose of 200 μg per 1 kg of live body weight.
- 10 024936- 10,049,936
Таблица 9Table 9
Результаты представленных в табл. 9 экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у баранов-производителей в результате применения препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела. Так, объем эякулята, взятый у баранов через 90 суток после первой инъекции, увеличился на 12,1%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (подвижность, выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на баранах-производителях является увеличение через 90 дней после первой инъекции препарата количества полученных спермодоз от одного животного на 25,8% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.The results presented in table. Nine experiments indicate stimulation of sperm production in rams as a result of the use of the drug at a dose of 100 μg per 1 kg of live body weight. So, the volume of ejaculate taken from rams 90 days after the first injection increased by 12.1%. During the controlled period, the qualitative indicators of the taken sperm (motility, sperm survival) improved. The result of the use of the drug in producing sheep is an increase in 90 days after the first injection of the drug, the number of sperm doses received from one animal by 25.8% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
Изучение влияния препарата на продуктивные качества петухов-производителей (двухлинейный гибрид плимутрок и корниш) проводили на птицеводческих предприятиях.A study of the effect of the drug on the productive qualities of roosters (two-line hybrid Plymouthrock and Cornish) was carried out at poultry enterprises.
Суспензию препарата птице вводили подкожно в дозе 50-200 мкг белка на 1 кг массы тела двукратно с интервалом 14 суток между инъекциями.The suspension of the drug was administered to the birds subcutaneously at a dose of 50-200 μg of protein per 1 kg of body weight twice with an interval of 14 days between injections.
У петухов-производителей до и после применения препарата установленным порядком осуществляли взятие образцов спермы и определяли объём эякулята, концентрацию сперматозоидов в эякуляте и количество полученных спермодоз.Sperm samples were taken from the roosters before and after application of the preparation in the established manner and the volume of ejaculate, the concentration of sperm in the ejaculate and the number of sperm doses received were determined.
Показатели спермопродукции у петухов при применении препарата в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в табл. 10.Indicators of sperm production in roosters when using the drug at a dose of 50 μg per 1 kg of live body weight are given in table. 10.
Таблица 10Table 10
Результаты экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у петуховпроизводителей в результате применения препарата. Так, объем эякулята, взятый у петухов через 90 су- 11 024936 ток после первой инъекции, увеличился на 42,3%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на петухах-производителях является увеличение количества полученных спермодоз на 41,6% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.The experimental results indicate stimulation of sperm production in roosters as a result of the use of the drug. So, the volume of ejaculate taken from the roosters 90 days after the first injection increased by 42.3%. During the controlled period, the qualitative indicators of sperm taken (sperm survival) improved. The result of the use of the drug on male roosters is an increase in the number of sperm doses received by 41.6% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
Показатели спермопродукции у петухов при применении препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в табл. 11.The indicators of sperm production in roosters when using the drug at a dose of 100 μg per 1 kg of body weight are given in table. eleven.
Таблица 11Table 11
Результаты экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у петуховпроизводителей в результате применения препарата. Так, объем эякулята, взятый у петухов через 90 суток после первой инъекции, увеличился на 44,9%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на петухах-производителях является увеличение количества полученных спермодоз на 33,3% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.The experimental results indicate stimulation of sperm production in roosters as a result of the use of the drug. So, the volume of ejaculate taken from roosters 90 days after the first injection increased by 44.9%. During the controlled period, the qualitative indicators of sperm taken (sperm survival) improved. The result of using the drug on male roosters is an increase in the number of sperm doses received by 33.3% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
Показатели спермопродукции у петухов при применении препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в табл. 12.The indicators of sperm production in roosters when using the drug at a dose of 200 μg per 1 kg of live body weight are given in table. 12.
- 12 024936- 12,049,936
Таблица 12Table 12
Результаты экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у петуховпроизводителей в результате применения препарата. Так, объем эякулята, взятый у петухов через 90 суток после первой инъекции, увеличился на 35,3%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на петухах-производителях является увеличение количества полученных спермодоз на 25,0% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.The experimental results indicate stimulation of sperm production in roosters as a result of the use of the drug. So, the volume of ejaculate taken from roosters 90 days after the first injection increased by 35.3%. During the controlled period, the qualitative indicators of sperm taken (sperm survival) improved. The result of the use of the drug on male roosters is an increase in the number of sperm doses received by 25.0% and a decrease in the percentage of sperm rejects according to biological indicators.
Claims (4)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012123606/10A RU2493873C1 (en) | 2012-06-07 | 2012-06-07 | Injection preparation for higher sperm production in farm breeders and cocks, and method for using it |
| PCT/RU2012/000912 WO2013184024A1 (en) | 2012-06-07 | 2012-11-08 | Preparation for increasing sperm production in stud livestock and roosters and method for the use thereof |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201400370A1 EA201400370A1 (en) | 2014-06-30 |
| EA024936B1 true EA024936B1 (en) | 2016-11-30 |
Family
ID=49253935
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA201400370A EA024936B1 (en) | 2012-06-07 | 2012-11-08 | Preparation for increasing sperm production in stud livestock and roosters and method for the use thereof |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EA (1) | EA024936B1 (en) |
| RU (1) | RU2493873C1 (en) |
| WO (1) | WO2013184024A1 (en) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2561467C1 (en) * | 2014-04-24 | 2015-08-27 | Сергей Михайлович Юдин | Method of production of preparation to increase meat and milk productivity of farm animals (versions) and preparation produced by method |
| RU2615019C1 (en) * | 2016-02-25 | 2017-04-03 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Государственный аграрный университет Северного Зауралья" (ФГБОУ ВО ГАУ Северного Зауралья) | Method for increasing potency and sperm quality of male-producers |
| RU2629871C1 (en) * | 2016-03-22 | 2017-09-04 | Сергей Михайлович Юдин | Preparation for folliculogenesis stimulation and method for its application |
| RU2722849C1 (en) | 2019-12-25 | 2020-06-04 | Владимир Глебович Лунин | Recombinant protein gbd-sstad-sstad, a method for production and use thereof |
| CN112293411B (en) * | 2020-11-27 | 2021-09-28 | 大连海洋大学 | Low-temperature preservation liquid and preservation method for sperms of echinococcus intermedius |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2034457C1 (en) * | 1993-06-22 | 1995-05-10 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Ветек" | Method of agriculture animal productivity increase, preparation for its realization |
| RU2192281C2 (en) * | 1996-10-11 | 2002-11-10 | Бристол-Маерс Сквибб Компани | Methods and compositions for immunomodulation |
-
2012
- 2012-06-07 RU RU2012123606/10A patent/RU2493873C1/en active IP Right Revival
- 2012-11-08 EA EA201400370A patent/EA024936B1/en not_active IP Right Cessation
- 2012-11-08 WO PCT/RU2012/000912 patent/WO2013184024A1/en active Application Filing
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2034457C1 (en) * | 1993-06-22 | 1995-05-10 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Ветек" | Method of agriculture animal productivity increase, preparation for its realization |
| RU2192281C2 (en) * | 1996-10-11 | 2002-11-10 | Бристол-Маерс Сквибб Компани | Methods and compositions for immunomodulation |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Технология лекарственных форм, М., "Медицина", 1991, том 1, с. 42 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EA201400370A1 (en) | 2014-06-30 |
| WO2013184024A1 (en) | 2013-12-12 |
| RU2493873C1 (en) | 2013-09-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1127352C (en) | CCK antibodies used to improve feed efficiency | |
| Kucharska-Gaca et al. | Feeding–Technology of the Future–A Review | |
| EA024936B1 (en) | Preparation for increasing sperm production in stud livestock and roosters and method for the use thereof | |
| JP2000512130A (en) | Methods for regulating the activity of hormones or their receptors, peptides, antibodies, vaccines and uses thereof | |
| CN1275918A (en) | Method and food product for increasing muscle protein and reducing fat in animals | |
| NO326525B1 (en) | Composition for intestinal delivery and use thereof for the manufacture of medicaments for the treatment of intestinal infections. | |
| JPH01157916A (en) | Method for increasing milk secretion of mammals and/or increasing bidy weight of newborn at birthday and promoting growth after birth | |
| Silverman et al. | Histotrophic (parasitic) stages of Haemonchus contortus | |
| JPH01268644A (en) | Pharmaceutical composition containing antigenic substance | |
| JPH03503530A (en) | Human tumor therapeutic drug and its manufacturing method | |
| RU2033178C1 (en) | Method for stimulation of animal mammary gland parenchymatous tissue growth | |
| RU2526571C1 (en) | Injection drug for increasing human sperm production and method for use thereof | |
| CN102307898A (en) | Method for producing comprehensive anti-surface antibody wherein the antigen used is a microorganism fixed by a protein crosslinking and fixation reagent | |
| KR20060101554A (en) | Immunogenic lhrh compositions and methods relating thereto | |
| RU2416430C1 (en) | Agent for pig hepatosis prevention | |
| KAMIYOSHI et al. | Augmentative effect of FSH on LH-induced ovulation in the hen | |
| Mohammadzadeh et al. | Applications of recombinant proteins in aquaculture | |
| RU2704270C1 (en) | Method for estrus synchronization in recipient cows when preparing for embryo transplantation | |
| RU2614115C1 (en) | Recombinant somatostatin-containing protein, method for production, injecting drug to increase meat and dairy efficiency of agricultural animals, and method for drug application | |
| RU2629871C1 (en) | Preparation for folliculogenesis stimulation and method for its application | |
| RU2617042C2 (en) | Method of induction of superovulation in cows-donors embryones with prolongation of activity of hypophysical gonadotropins | |
| CN86105840A (en) | A kind of method that obtains to be suitable for nature or artificial fertilization's property product from mammal | |
| Li | Prolactin | |
| RU2722849C1 (en) | Recombinant protein gbd-sstad-sstad, a method for production and use thereof | |
| JPH01230531A (en) | Growth promotion of poultry |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM KG TJ TM |
|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AZ BY KZ RU |