EA016540B1 - Pharmaceutical composition for treating tuberculosis, method for preparing thereof and method for treating thereof - Google Patents
Pharmaceutical composition for treating tuberculosis, method for preparing thereof and method for treating thereof Download PDFInfo
- Publication number
- EA016540B1 EA016540B1 EA200802431A EA200802431A EA016540B1 EA 016540 B1 EA016540 B1 EA 016540B1 EA 200802431 A EA200802431 A EA 200802431A EA 200802431 A EA200802431 A EA 200802431A EA 016540 B1 EA016540 B1 EA 016540B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- lipid
- pharmaceutical composition
- tuberculosis
- rifabutin
- polymer
- Prior art date
Links
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины и фармации, конкретно к фармацевтической композиции для лечения туберкулеза на основе липидно-полимерных наночастиц, содержащих терапевтически эффективное количество антибиотика (представляющего собой рифабутин или рифампицин), и липиднополимерную матрицу, пригодной для перорального введения нуждающемуся в этом пациенту, к способу получения такой фармацевтической композиции, а также к способу лечения туберкулеза, включающему пероральное введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по изобретению в определенном терапевтическом режиме.The invention relates to the field of medicine and pharmacy, specifically to pharmaceutical compositions for the treatment of tuberculosis based on lipid-polymer nanoparticles containing a therapeutically effective amount of an antibiotic (representing rifabutin or rifampicin), and a lipid-polymer matrix suitable for oral administration to a patient in need, to method of obtaining such a pharmaceutical composition, as well as to a method for treating tuberculosis, comprising orally administering to a patient in need thereof therapeutically an effective amount of the pharmaceutical composition of the invention in a particular therapeutic regimen.
В связи с распространением туберкулеза в мире, вызванным появлением лекарственнорезистентных штаммов и распространением заболеваний иммунной системы, в том числе СПИДа, необходимо создание новых противотуберкулезных лекарственных средств. По оценкам ВОЗ в период до 2020 года количество вновь инфицированных туберкулезом достигнет 1 миллиарда, 200 миллионов человек заболеют и 35 миллионов умрут от туберкулеза, если не будут найдены новые более эффективные средства лечения.In connection with the spread of tuberculosis in the world, caused by the emergence of drug-resistant strains and the spread of diseases of the immune system, including AIDS, it is necessary to create new anti-tuberculosis drugs. WHO estimates that by 2020 the number of newly infected with tuberculosis will reach 1 billion, 200 million people will become ill and 35 million will die from tuberculosis if no new, more effective treatment is found.
В связи со сказанным, наряду с исследованием новых антимикобактериальных средств, особенно, новых антибиотиков, одним из наиболее перспективных направлений является создание новых лекарственных форм известных антибиотиков, позволяющих направленно создать высокую концентрацию активного начала в пораженных органах и осуществить эффективную защиту пораженных органов.In connection with the above, along with the study of new antimycobacterial agents, especially new antibiotics, one of the most promising areas is the creation of new dosage forms of known antibiotics, which allow to create a high concentration of active principle in the affected organs and to effectively protect the affected organs.
Одним из наиболее перспективных решений данной задачи является создание наносомальных форм наиболее популярных в лечении туберкулеза антибиотиков (рифабутина и рифампицина), на основе липидно-полимерной матрицы, представляющей собой композицию биоразлагаемого полимера и липида.One of the most promising solutions to this problem is the creation of nanosomal forms of antibiotics most commonly used in the treatment of tuberculosis (rifabutin and rifampicin), based on a lipid-polymer matrix, which is a composition of a biodegradable polymer and lipid.
Рифабутин (1',4-дидегидро-1-дезокси-1,4-дигидро-5'-(2-метилпропил)-1-оксорифамицин XIV) - полусинтетический антибиотик широкого спектра действия, противотуберкулезное лекарственное средство I ряда.Rifabutin (1 ', 4-didehydro-1-deoxy-1,4-dihydro-5' - (2-methylpropyl) -1-oxorifamicin XIV) is a semi-synthetic broad-spectrum antibiotic, a first-line anti-TB drug.
Рифабутин эффективен в отношении внутриклеточно и внеклеточно расположенных микроорганизмов. Селективно подавляет ДНК-зависимую РНК-полимеразу бактерий. Оказывает бактерицидное действие. Высокоактивен в отношении внутриклеточных паразитов, в частности, в отношении микроорганизмов рода МусоЬас!егшт (МусоЬас!егшт 1иЬегси1о818, МусоЬас!егшт аушт, в том числе расположенных внутриклеточно) и других атипичных микобактерий. От 1/3 до 1/2 штаммов МусоЬас1епит 1цЬегси1о818, резистентных к рифампицину, чувствительны к рифабутину, что указывает на неполную перекрестную резистентность между этими антибиотиками. Активен также в отношении многих грамположительных микроорганизмов. При монотерапии быстро развивается устойчивость.Rifabutin is effective against intracellular and extracellularly located microorganisms. Selectively inhibits the DNA-dependent RNA polymerase of bacteria. It has a bactericidal effect. It is highly active against intracellular parasites, in particular, against microorganisms of the Musoba genus. Ergam (Musobas arthritis Ieliovi818, Musobas ergus auschas, including those located intracellularly) and other atypical mycobacteria. Between 1/3 and 1/2 of rifampicin-resistant Musobas1epit 1tshéls1-818 resistant strains are susceptible to rifabutin, which indicates incomplete cross-resistance between these antibiotics. It is also active against many gram-positive microorganisms. When monotherapy is rapidly developing resistance.
Показан при хроническом полирезистентном туберкулезе легких, вызванном рифампицинрезистентными штаммами МусоЬас!егшт 1иЬегси1о818 (в составе комбинированной терапии), инфекциях, вызванных МусоЬас1ег1ит 1иЬегси1о818, МусоЬас!егшт аушт, МусоЬас!егшт хепор1 и другими атипичными бактериями, а также при заболеваниях, опосредованных Не1юоЬас1ег ру1оп (в особенности, штаммами, устойчивыми к кларитромицину).Revealed by a multidisciplinary trait. in particular, strains resistant to clarithromycin).
Быстро и полностью всасывается в желудочно-кишечном тракте, Ттах составляет 2-4 ч, Т1/2 - 35-40 часов; хорошо приникает в органы и ткани (наиболее высокая концентрация создается в легких); подвергается биотрансформации в печени, выделяется с мочой и желчью.Quickly and completely absorbed in the gastrointestinal tract, T max is 2-4 hours, T 1/2 - 35-40 hours; it penetrates well into organs and tissues (the highest concentration is created in the lungs); biotransformation in the liver, excreted in urine and bile.
Рифампицин - полусинтетический антибиотик широкого спектра действия, противотуберкулезное лекарственное средство I ряда. В низких концентрациях оказывает бактерицидное действие на МусоЬас1егшт 1иЬегси1о818, Вгисе11а крр., СЫатуФа 1гас1ютаО5. Ьедюие11а риеиторЫ1а, Клске(181а 1урЫ, МусоЬас1егшт 1ергае; в высоких концентрациях - на некоторые грамотрицательные микроорганизмы. Характеризуется высокой активностью в отношении §1арйу1ососси8 крр. (в том числе, пенициллиназообразующих и многих штаммов метициллиноустойчивых), §1гер1ососси8 крр., С1о81пбшт крр., ВасШиз аиНгааз; грамотрицательных коков: менингококков, гонококков. На грамположительные бактерии действует в высоких концентрациях. Активен в отношении внутриклеточно и внеклеточно расположенных микроорганизмов. Подавляет ДНК-зависимую РНК-полимеразу микроорганизмов. При монотерапии препаратом относительно быстро отмечается селекция резистентных к рифампицину бактерий. Перекрестная резистентность с другими антибиотиками (за исключением остальных рифамицинов) не развивается.Rifampicin is a semi-synthetic broad-spectrum antibiotic, an anti-TB drug of the first series. In low concentrations, it has a bactericidal effect on Musobacter plexus Immunus, 1818, Crete 11a crr., SyatuFa 1ascultuO5. Belyuyoria, Klsko VasShiz aiNgaaz; Gram-negative cocks: meningococci, gonococci. Gram-positive bacteria act in high concentrations. It is active against intracellular and extracellularly located microorganisms. Suppresses DNA-dependent imuyu RNA-polymerase of microorganisms. In monotherapy relatively quickly marked selection for rifampicin resistant bacteria. Cross-resistance with other antibiotics (except other rifamycins) does not develop.
Показан при любых формах туберкулеза (в составе комбинированной терапии).It is indicated for all forms of tuberculosis (as part of combination therapy).
При лепре используется в комбинации с дапсоном (мультибациллярные типы заболевания). Другие показания: инфекционные заболевания, вызванные чувствительными микроорганизмами (в случаях резистентности к другим антибиотикам и в составе комбинированной противомикробной терапии; после исключения диагноза туберкулеза и лепры); бруцеллез - в составе комбинированной терапии с антибиотиком группы тетрациклинов (доксициклином); менингококковый менингит (профилактика у лиц, находившихся в тесном контакте с заболевшими менингококковым менингитом; у бациллоносителей №188епа теп1п§111015).When leprosy is used in combination with dapsone (multibacillary types of the disease). Other indications: infectious diseases caused by susceptible microorganisms (in cases of resistance to other antibiotics and in combination antimicrobial therapy; after excluding the diagnosis of tuberculosis and leprosy); brucellosis - as part of a combination therapy with an antibiotic of the tetracycline group (doxycycline); meningococcal meningitis (prophylaxis in persons who were in close contact with the diseased meningococcal meningitis; in bacilli carriers No. 188epa tepl1p§111015).
В международной публикации XVО 03058469 раскрывается система доставки малорастворимых (или практически нерастворимых) лекарств на основе наночастиц, состоящих из ядра (сердцевины), образуемого биоразлагаемым гидрофобным полимером, и внешнего непрерывного или прерывистого амфифильного слоя, образуемого одним или несколькими стабилизирующими липидами, и способ получе- 1 016540 ния такой системы доставки. В качестве активного начала данная система, предпочтительно, содержит антинеопластический агент, выбранный из производных этопозида, производных камптотецина, алкилирующих соединений, противоопухолевых антибиотиков и других. Данная система доставки не рассматривается авторами изобретения как возможный кандидат для доставки противотуберкулезных лекарственных препаратов и, таким образом, не может служить ближайшим аналогом заявляемого изобретения.International Publication XVO 03058469 discloses a system for delivering poorly soluble (or practically insoluble) drugs based on nanoparticles consisting of a core (core) formed by a biodegradable hydrophobic polymer and an external continuous or intermittent amphiphilic layer formed by one or more stabilizing lipids, and 1,015,540 of such a delivery system. As an active principle, this system preferably contains an antineoplastic agent selected from etoposide derivatives, camptothecin derivatives, alkylating compounds, anti-tumor antibiotics, and others. This delivery system is not considered by the inventors as a possible candidate for the delivery of anti-tuberculosis drugs and, therefore, cannot serve as the closest analogue of the claimed invention.
Также ранее были изучены нанокапсулы, содержащие липидное ядро в сочетании с покрытием из биоразлагаемого полимера (АЬбеГоуайеб V с1 а1. ΙηνοδΙίβαΙίοη оГ иапосарзи1ез δίαόίΐίζαΐίοη Ьу атогрйоиз ехс1р1еи15 бигшд Гп^с-бгуиищ аиб з1огаде. -Еигореаи 1оигиа1 оГ Рйагтасеибсз аиб Вюрйагтасеибсз, 2006, №63, том 2, страницы 87-94); показано, что, хотя данная технология и обеспечивает высокую загрузку наночастиц лекарственным средством, однако их последующая лиофилизация крайне затруднена в связи с очень малой толщиной полимерного слоя, что ограничивает возможности применения такой технологии.Also the nano-optics , volume 2, pages 87-94); It is shown that, although this technology provides a high loading of nanoparticles with a drug, however, their subsequent lyophilization is extremely difficult due to the very small thickness of the polymer layer, which limits the possibilities of using this technology.
В работе ХУогщ Н.Ь. е1 а1. А иете ро1утег-11р1б йуЬпб иапорагИс1е зуз!ет тсгеазез су1о1охкйу оГ бохогиЫсш адашз! тиШбгид-гез1з1ап1 йитаи Ьгеаз! саисег се11з. - Рйагтасеийса1 Везеагсй, 2006, том 23, №7 было показано повышение эффективности и загрузки наносомального носителя лекарственным веществом (противоопухолевым антибиотиком доксорубицином), при использовании в качестве наносомального носителя полярных полимеров в комплексе полимеризованным полярным маслом (маслом сои). Тем не менее, использование в данной публикации наночастиц в практике ограничивается технической сложностью осуществления полимеризации и непостоянной биологической активностью и скоростью биодеградации липидов.In the work HUogshch N. l. e1 a1. And you are a rote-11r1b yuypb iporagIste zuz! Em tsegeaze s1o1ohkyyu oG bohogi Essa adashz! tishbgid-gez1z1ap1 yitai lgeaz! saiseg se11z. - Ryagtaseiis1 Vezeegsy, 2006, vol. 23, No. 7 showed an increase in the efficiency and loading of the nanosomal carrier with a medicinal substance (the antitumor antibiotic doxorubicin), when polar polymers are used as a nanosomal carrier in the complex with polymerized polar oil (soybean oil). However, the use of nanoparticles in this publication in practice is limited by the technical complexity of the polymerization and the variable biological activity and the rate of lipid biodegradation.
В международной публикации XVО 0003660 описывается фармацевтическая композиция, содержащая биоразлагаемые микросферы, содержащие матрикс, состоящий по меньшей мере из одного липида и по меньшей мере одного биоразлагаемого полимера, и физиологически активное начало, способное к выделению из данных микросфер, выбранное из антиангинального средства, антиаритмического средства, антиастматического средства, антибиотика, антидиабетического средства, антигрибкового средства, антигистаминного средства, средства для лечения артериальной гипертензии, антипаразитарного средства, антинеопластического агента, противовирусного средства, сердечного гликозида, гербицида, гормона, иммуномодулятора, моноклонального антитела, нейротрансмиттера, нуклеиновой кислоты, белка, рентгеноконтрастного вещества, радионуклида, седативного средства, аналгезирующего средства, стероида, транквилизатора, вакцины, вазоконстриктора, анестетика, пептида или их сочетания.International publication XVO 0003660 describes a pharmaceutical composition containing biodegradable microspheres, containing a matrix consisting of at least one lipid and at least one biodegradable polymer, and a physiologically active principle capable of isolation from these microspheres, selected from an antianginal agent, an antiarrhythmic agent , anti-asthma, antibiotic, anti-diabetic, anti-fungal, antihistamine, agents for the treatment of arterial hyper suspensions, antiparasitans, antineoplastic agent, antiviral agents, cardiac glycosides, herbicides, hormones, immunomodulators, monoclonal antibodies, neurotransmitters, neurotransmitters, neurotransmitters, radionuclides , peptide or combinations thereof.
Однако νθ 0003660 не относится непосредственно к лечению туберкулеза; более того, в качестве примера композиции, содержащей антибиотик, в νθ 0003660 приводятся лишь составы с амикацином, который, в отличие от рифабутина и рифампицина, является высокогидрофильным веществом, то есть его не требуется включать в липидсодержащую композицию; в то же время никаких составов с рифабутином или рифампицином в νθ 0003660 не было представлено.However, νθ 0003660 does not directly relate to the treatment of tuberculosis; Moreover, as an example of a composition containing an antibiotic, νθ 0003660 lists only compositions with amikacin, which, unlike rifabutin and rifampicin, is a highly hydrophilic substance, that is, it is not required to be included in the lipid-containing composition; at the same time, no compositions with rifabutin or rifampicin were represented in νθ 0003660.
Задачи настоящего изобретенияThe objectives of the present invention
Основной задачей настоящего изобретения, таким образом, является разработка наносомальной фармацевтической композиции для лечения туберкулеза рифабутина или рифампицина, обладающей усиленной противотуберкулезной активностью, за счет направленного создания области высокой концентрации лекарственного средства в пораженных органах, и позволяющей снизить лекарственную нагрузку на пациента, за счет применения данной композиции в более низкой дозе и с большими временными интервалами между отдельными введениями.The main objective of the present invention, therefore, is to develop a nanosomal pharmaceutical composition for treating tuberculosis rifabutin or rifampicin, which has enhanced anti-tuberculosis activity, due to the directional creation of a high concentration of the drug in the affected organs, and allowing to reduce the drug burden on the patient, through the use of this compositions in a lower dose and with large time intervals between separate administrations.
Сущность изобретенияSummary of Invention
В рамках настоящего изобретения неожиданно было обнаруженно, что наносомальные формы рифабутина и рифампицина, выполненные на основе разработанной в рамках настоящего изобретения оригинальной липидно-полимерной матрицы, представляющей собой композицию биоразлагаемого полимера (предпочтительно сополимера молочной и гликолевой кислоты при содержании гликолевой кислоты в указанных сополимерах до 50 мол.%, имеющего молекулярную массу от 2 до 500 кДа) и липида (предпочтительно лабрафила), при количественном соотношении антибиотик : липид : биоразлагаемый полимер, находящемся в интервале от 10:1:10 до 10:5:10, обладают значительно более высокой антимикобактериальной активностью, что позволяет существенно снизить лекарственную нагрузку на пациента (достаточным оказывается введение фармацевтической композиции 3 раза в неделю, на протяжении 4 недель).In the framework of the present invention, it was unexpectedly found that nanosomal forms of rifabutin and rifampicin, made on the basis of the original lipid-polymer matrix developed in the framework of the present invention, which is a composition of a biodegradable polymer (preferably a copolymer of lactic and glycolic acid with a glycolic acid content of up to 50 in these copolymers mol.%, having a molecular weight of from 2 to 500 kDa) and a lipid (preferably labrafil), with a quantitative ratio of antibiotic: lipid: b The decomposable polymer, which is in the range from 10: 1: 10 to 10: 5: 10, has a significantly higher antimycobacterial activity, which can significantly reduce the patient's drug load (the introduction of the pharmaceutical composition 3 times a week is sufficient, for 4 weeks) .
Биоразлагаемый полимер в рамках настоящего изобретения выбирают из сополимеров молочной и гликолевой кислоты при содержании гликолевой кислоты в указанных сополимерах до 50 мол.%, имеющий молекулярную массу от 2 до 500 кДа (в частности, может быть использован сополимер молочной и гликолевой кислоты марки Везотег 502Н); предпочтительный липид может быть выбран из липоевой кислоты и трансэтерифицированных этоксилированных растительных масел, коммерчески доступных под торговым названием ЬаЬгаГй (лабрафил) (см.: Н.Р. Р1е1бег, Ьех1кои бег НйГзз1оГГе Гиг Рйа^таζ^е, КозтеОк ииб аидге^еибе СеЫе1е, Ебйю Саи1ог, Ό-7960 Аи1еибогГ, издание 3-е, исправленное и дополненное (1989), страница 707).The biodegradable polymer in the framework of the present invention is chosen from copolymers of lactic and glycolic acid with a content of glycolic acid in these copolymers of up to 50 mol.%, Having a molecular weight of from 2 to 500 kDa (in particular, a copolymer of lactic and glycolic acid of the brand Vezoteg 502H) can be used ; the preferred lipid may be selected from lipoic acid and transesterified ethoxylated vegetable oils commercially available under the trade name si said (labrafil) (see: N. p. Ebyu Sai1og, Ό-7960 Ai1eibogG, 3rd edition, revised and amended (1989), page 707).
Поскольку рифабутин и рифампицин являются высоко гепатотоксичными соединениями, то в качеSince rifabutin and rifampicin are highly hepatotoxic compounds,
- 2 016540 стве липида использование липоевой кислоты, известной своими гепатопротекторными свойствами, является даже более предпочтительным, так как в этом случае дополнительно обеспечивается профилактика токсического поражения печени.- In lipid lipids, the use of lipoic acid, known for its hepatoprotective properties, is even more preferable, since in this case prevention of toxic liver damage is additionally provided.
Заявляемая фармацевтическая композиция может при необходимости дополнительно содержать полимерный стабилизатор (например, такой как поливиниловый спирт); также указанная композиция может дополнительно содержать наполнитель, выбранный из группы, включающей глюкозу, лактозу, маннит, трегалозу, хлорид натрия и цитрат натрия.The claimed pharmaceutical composition may, if necessary, additionally contain a polymer stabilizer (for example, such as polyvinyl alcohol); also, said composition may additionally contain a filler selected from the group including glucose, lactose, mannitol, trehalose, sodium chloride and sodium citrate.
Наносомальная композиция рифабутина или рифампицина, в соответствии с настоящим изобретением, представляет собой лиофилизат, а при добавлении воды или физиологического раствора - устойчивую суспензию с размером частиц не более 0,8 мкм, и предназначена для перорального введения нуждающемуся в этом пациенту. Композиция в соответствии с изобретением и способ лечения могут быть применены в способе лечения туберкулеза легких, по схеме с уменьшенным числом введений лекарственного средства и с удлиненными интервалами между введениями лекарственного средства (в наиболее предпочтительном воплощении изобретения, включающей пероральное введение нуждающемуся в этом пациенту лекарственного средства три раза в неделю, на протяжении 4 недель).The nanosomal composition of rifabutin or rifampicin, in accordance with the present invention, is a lyophilisate, and when water or saline is added, it is a stable suspension with a particle size of not more than 0.8 μm, and is intended for oral administration to a patient in need. The composition in accordance with the invention and the method of treatment can be applied in a method for treating pulmonary tuberculosis, according to a scheme with a reduced number of drug injections and with extended intervals between drug injections (in the most preferred embodiment of the invention, including oral administration to the patient in need of drug three times a week for 4 weeks).
Таким образом, в соответствии с настоящим изобретением предлагается пероральная фармацевтическая композиция для лечения туберкулеза на основе липиднополимерных наночастиц, содержащих терапевтически эффективное количество антибиотика, выбранного из рифабутина или рифампицина, диспергированное в липидно-полимерной матрице, предназначенная для перорального введения нуждающемуся в этом пациенту и отличающаяся тем, что в качестве липидно-полимерной матрицы содержит композицию биоразлагаемого полимера, представляющего собой сополимер молочной и гликолевой кислоты при содержании гликолевой кислоты в указанном сополимере до 50 мол.%, имеющий молекулярную массу от 2 до 500 кДа, и липида, выбранного из трансэтерифицированного этоксилированного растительного масла и липоевой кислоты при количественном соотношении (антибиотик : липид : биоразлагаемый полимер) от 10:1:10 до 10:5:10. Предлагаются также способ получения указанной фармацевтической композиции, отличающийся тем, чтоThus, in accordance with the present invention, an oral pharmaceutical composition for treating tuberculosis based on lipid-polymer nanoparticles containing a therapeutically effective amount of an antibiotic selected from rifabutin or rifampicin, dispersed in a lipid-polymer matrix, intended for oral administration to a patient in need and different in that that as a lipid-polymer matrix contains a composition of biodegradable polymer, which is a copoly p lactic and glycolic acid with a content of glycolic acid in the specified copolymer up to 50 mol.%, having a molecular weight of from 2 to 500 kDa, and a lipid selected from transesterified ethoxylated vegetable oil and lipoic acid in a proportional ratio (antibiotic: lipid: biodegradable polymer) from 10: 1: 10 to 10: 5: 10. A method for the preparation of said pharmaceutical composition is also proposed, characterized in that
а) биоразлагаемый полимер, представляющий собой сополимер молочной и гликолевой кислоты при содержании гликолевой кислоты в указанном сополимере до 50 мол.%, имеющий молекулярную массу от 2 до 500 кДа, липид, выбранный из трансэтерифицированного этоксилированного растительного масла и липоевой кислоты, и антибиотик, выбранный из рифабутина или рифампицина, растворяют в хлористом метилене;a) a biodegradable polymer, which is a copolymer of lactic and glycolic acid with a content of glycolic acid in the specified copolymer up to 50 mol.%, having a molecular weight of from 2 to 500 kDa, a lipid selected from transesterified ethoxylated vegetable oil and lipoic acid, and the antibiotic selected from rifabutin or rifampicin, dissolved in methylene chloride;
б) полученный раствор диспергируют с образованием эмульсии;b) the resulting solution is dispersed to form an emulsion;
в) гомогенизируют полученную эмульсию;c) homogenize the resulting emulsion;
г) удаляют органический растворитель с получением суспензии наночастиц;d) removing the organic solvent to form a nanoparticle suspension;
д) фильтруют полученную суспензию наночастиц;e) filter the resulting nanoparticle suspension;
е) замораживают;e) freeze;
ж) лиофильно высушивают; и способ лечения туберкулеза, отличающйся тем, чтоg) freeze dried; and method of treating tuberculosis, characterized in that
а) биоразлагаемый полимер, представляющий собой сополимер молочной и гликолевой кислоты при содержании гликолевой кислоты в указанном сополимере до 50 мол.%, имеющий молекулярную массу от 2 до 500 кДа, липид, выбранный из трансэтерифицированного этоксилированного растительного масла и липоевой кислоты, и антибиотик, выбранный из рифабутина или рифампицина, растворяют в хлористом метилене;a) a biodegradable polymer, which is a copolymer of lactic and glycolic acid with a content of glycolic acid in the specified copolymer up to 50 mol.%, having a molecular weight of from 2 to 500 kDa, a lipid selected from transesterified ethoxylated vegetable oil and lipoic acid, and the antibiotic selected from rifabutin or rifampicin, dissolved in methylene chloride;
б) полученный раствор диспергируют с образованием эмульсии;b) the resulting solution is dispersed to form an emulsion;
в) гомогенизируют полученную эмульсию;c) homogenize the resulting emulsion;
г) удаляют органический растворитель с получением суспензии наночастиц;d) removing the organic solvent to form a nanoparticle suspension;
д) фильтруют полученную суспензию наночастиц;e) filter the resulting nanoparticle suspension;
е) замораживают;e) freeze;
ж) лиофильно высушивают.g) freeze dried.
Приведенные ниже примеры, относящиеся к получению наносомальных форм рифабутина и рифампиина в соответствии с изобретением, и к подтверждению их неожиданно высокой антитуберкулезной активности, не ограничивают объем притязаний, а приводятся лишь для иллюстрации настоящего изобретения.The following examples relating to the production of nanosomal forms of rifabutin and rifampyin in accordance with the invention, and to confirming their unexpectedly high antituberculosis activity, do not limit the scope of the claims, but are given only to illustrate the present invention.
Пример 1. Получение липидсодержащих полимерных наночастиц рифабутина или рифампицина с лабрафилом.Example 1. Obtaining lipid-containing polymer nanoparticles of rifabutin or rifampicin with labrafil.
Сополимер молочной и гликолевой кислоты (Кекотег КС 502Н, РЬСА КС 502НХ 250 мг, лабрафил (ЬаЬгай1 М 1944 С8) 25 мг (для образцов №586 и №589) или 125 мг (для образца №614), и лекарственное вещество (рифабутин или рифампицин) 250 мг, растворяли в 5 мл хлористого метилена в течение 1 ч при перемешивании на магнитной мешалке. Полученный раствор диспергировали в 25 мл водной фазы, содержащей 1% поливинилового спирта (ПВС), используя и11га-Тштах Т-25 (1КА), в течение 2 мин при 23600 об/мин. Гомогенизацию полученной эмульсии осуществляли на аппарате АРВ Саи1ш СтЬН при давлении 600 Ьаг троекратным воздействием. Органический растворитель удаляли из микроэмульсииA copolymer of lactic and glycolic acid (Kokoteg KS 502N, PBCA KS 502HX 250 mg, labrafil (Labay1 M 1944 C8) 25 mg (for samples No. 566 and No. 569) or 125 mg (for sample No. 614), and medicinal substance (rifabutin or rifampicin) 250 mg, dissolved in 5 ml of methylene chloride for 1 h with stirring on a magnetic stirrer. The resulting solution was dispersed in 25 ml of the aqueous phase containing 1% polyvinyl alcohol (PVA) using 11ha-Tshtah T-25 (1KA), for 2 min at 23600 rpm Homogenization of the resulting emulsion was carried out on an apparatus SARSH StjH ARV at a pressure of 600 arg triple exposure. The organic solvent was removed from microemulsions
- 3 016540 отгонкой на роторном испарителе (ВИСН1 К-200). Образующуюся суспенизию наночастиц фильтровали через стеклянный фильтр (пор 160), добавляли маннит (0-0,5-1-2,5-5 %), разливали по флаконам (1 мл), замораживали (при -35°С) и лиофильно высушивали. Образцы с 5 % содержанием маннита анализировали на содержание ЛВ (общее и свободное) и размеры наночастиц.- 3 016540 by distillation on a rotary evaporator (VISN1 K-200). The resulting suspension of the nanoparticles was filtered through a glass filter (pore 160), mannitol (0-0.5-1-2.5-5%) was added, poured into vials (1 ml), frozen (at -35 ° C) and freeze dried . Samples with 5% mannitol content were analyzed for drug content (total and free) and nanoparticle size.
Характеристики полученных в соответствии с примером 1 образцов наночастиц (№586 и №614 - составы с рифампицином, №589 - состав с рифабутином) представлены в табл. 1.Characteristics obtained in accordance with example 1 of nanoparticles samples (No. 586 and No. 614 - compositions with rifampicin, No. 589 - composition with rifabutin) are presented in table. one.
Таблица 1. Характеристики образцов липидно-полимерных наночастиц, содержащих рифабутин или рифампицинTable 1. Characteristics of samples of lipid-polymer nanoparticles containing rifabutin or rifampicin
* - в качестве ЛВ использовался рифампицин;* - rifampicin was used as a drug;
** - в качестве ЛВ использовался рифабутин;** - rifabutin was used as a drug;
*** - во всех представленных составах трансэтерифицированное этоксилированное растительное масло (ЬаЬгай1 М 1944)может быть успешно заменено липоевой кислотой.*** - in all of the compositions presented, the transesterified ethoxylated vegetable oil (Lambay M 1944) can be successfully replaced with lipoic acid.
Пример 2. Исследование эффективности наносомальных лекарственных форм рифабутина по изобретению (состав №589) на модели экспериментального туберкулеза (мышиная модель).Example 2. The study of the effectiveness of nanosomal dosage forms of rifabutin according to the invention (composition No. 589) on the model of experimental tuberculosis (mouse model).
Для изучения эффективности различных лекарственных наноформ рифабутина на модели острой туберкулезной инфекции мышей использовали ускоренный или быстрый метод скрининга. Метод является альтернативным способом проверки новых противотуберкулезных агентов. Длительность терапии составляет 3 дня, в противоположность классической модели для тестирования противотуберкулезных препаратов, где длительность терапии составляет 4 недели. Быстрый метод является, по сути, адаптацией метода тестирования новых антибиотиков впервые используемого на модели Не11соЬас1ег ру1огу. Для оценки адекватности быстрого метода предварительно было проведено несколько исследований противотуберкулезных препаратов по классической 4-х недельной схеме с последующим сравнением с 2-х дневным режимом терапии теми же антибиотиками. Метод быстрого тестирования был разработан с целью ускорить процесс скрининга новых противотуберкулезных агентов на мышиных моделях.To study the efficacy of various drug nanoforms of rifabutin on a model of acute tuberculosis infection in mice, an accelerated or rapid screening method was used. The method is an alternative way to test new anti-TB agents. The duration of therapy is 3 days, in contrast to the classical model for testing anti-tuberculosis drugs, where the duration of therapy is 4 weeks. The fast method is, in fact, an adaptation of the method of testing new antibiotics used for the first time on the He11 Cobacler model. To assess the adequacy of the fast method, several preliminary studies of anti-tuberculosis drugs were conducted using the classical 4-week regimen with subsequent comparison with the 2-day regimen of therapy with the same antibiotics. The rapid testing method was developed to speed up the screening process for new anti-tuberculosis agents in mouse models.
Материалы и методы исследованияMaterials and research methods
Экспериментальные животные: линейные мыши Ва1Ь/с, самки, возраст 7-8 недель, вес 20-22 г. В каждой экспериментальной группе 10 животных.Experimental animals: linear mice Ba1b / s, females, age 7-8 weeks, weight 20-22 g. In each experimental group 10 animals.
Образцы органов для высева: легкие (Л) и селезенка (С) мышей.Samples of organs for seeding: lungs (L) and spleen (C) mice.
Заражение: в/в введение в боковую хвостовую вену, дозой 5х106 КОЕ МусоЬас1егшш 1иЬегси1о818 Η37Κν. Штаммы МусоЬас1егшш 1иЬегси1о818 Η37Κν берутся из стокового набора, который хранится при -70°С.Infection: i.v. injection into the lateral tail vein with a dose of 5x10 6 CFU Musobasculaus ligamentai818 Η37Κν. The strains of Muscovi luminae818 Η37Κν are taken from the stock set, which is stored at -70 ° C.
Рифабутин (традиционная пероральная и наносомальная форма) готовились не более чем за час до начала терапии ежедневно, в соответствии с паспортными рекомендациями. Субстанцию рифабутина (контроль по антибиотику), наносомальные формы вводили перорально.Rifabutin (traditional oral and nanosomal form) was prepared no more than an hour before the start of therapy daily, in accordance with passport recommendations. Rifabutin substance (antibiotic control), nanosomal forms were administered orally.
В эксперименте №3 субстанцию рифабутина готовили для внутривенного введения. Для этого к субстанции добавляли 100мкл 90%об. этилового спирта (С2Н5ОН), растворяли длительным пипетированием и нагреванием до физиологической температуры (37°С) и доводили до окончательного объема, рассчитанного для внутривенного введения 10 мышам, т.е. до 2,5 мл (0,5 мл запас).In experiment No. 3, rifabutin substance was prepared for intravenous administration. For this, 100 μl of 90% vol. Was added to the substance. ethanol (C 2 H 5 OH), was dissolved by long pipetting and heating to physiological temperature (37 ° C) and brought to final volume, calculated for intravenous administration to 10 mice, i.e. up to 2.5 ml (0.5 ml stock).
Лечение антибиотиками: Трехкратное ежедневное пероральное введение на четвертый день после заражения, в объеме 0,2 мл и дозе 1 мг и 400 мкг/мышь или 50 и 20мг/кг соответственно по активному компоненту.Antibiotic treatment: Three times daily oral administration on the fourth day after infection, in a volume of 0.2 ml and a dose of 1 mg and 400 µg / mouse, or 50 and 20 mg / kg, respectively, on the active ingredient.
Эвтаназия животных и высев органов на КОЕ: на следующий день после окончания лечения. Разведения гомогенатов органов высевались на Мидлбрук 7Н11 агар. Для высева были использованы -1 и - 2 разведения в группах с антибиотиками и контрольных легких и -2 и -3 для селезенок контрольной группы мышей. Подсчет КОЕ проводился через 21 день после посева, для каждого значения КОЕ вычисляли десятичный логарифм.Euthanasia of animals and organ seeding on CFU: one day after the end of treatment. Breeding organ homogenates were seeded on Middlebrook 7H11 agar. For seeding, -1 and - 2 dilutions were used in the antibiotic and control lung groups and -2 and -3 for the spleens of the control group of mice. The CFU counting was carried out 21 days after sowing, for each CFU value the decimal logarithm was calculated.
По итогам эксперимента вводилась доза рифабутина 1 мг/мышь при пероральном введении. Результаты см. на фиг. 1, значения 1од10 каждого значения КОЕ - в табл. 2.According to the results of the experiment, a dose of rifabutin of 1 mg / mouse was administered by oral administration. The results are shown in FIG. 1, the values of 11010 each value of CFU - in Table. 2
- 4 016540- 4 016540
Таблица 2. Десятичные логарифмы числа КОЕ в легких и селезенке животных при введении различных лекарственных форм рифабутинаTable 2. Decimal logarithms of the number of CFU in the lungs and spleen of animals with the introduction of various dosage forms of rifabutin
Из представленных данных, учитывая, что на фиг. 1 и в табл. 2 приводятся десятичные логарифмы значений КОЕ, можно видеть, что, в сравнении с контролем по антибиотику, нанососмальная форма рифабутина по изобретению (образец №589) обладала более выраженной антитуберкулезной активностью.From the data presented, given that in FIG. 1 and in table. 2 shows the decimal logarithms of the CFU values; it can be seen that, in comparison with the antibiotic control, the nososmal form of rifabutin according to the invention (sample No. 589) had a more pronounced antituberculosis activity.
Пример 3. Исследование эффективности наносомальных лекарственных форм рифампицина по изобретению (составы №№586 и 614) на модели экспериментального туберкулеза (мышиная модель).Example 3. The study of the effectiveness of nanosomal dosage forms of rifampicin according to the invention (compositions No. 586 and 614) on the model of experimental tuberculosis (mouse model).
Материалы и методы исследования: аналогично примеру 2. Образцы органов для высева: легкие (Л) и селезенка (С) мышей. Туберкулезную инфекцию лечили рифампицином при пероральном способе введения. Данные по эффективности лечения представлены в табл. 3.Materials and methods of research: similar to example 2. Samples of organs for seeding: lungs (L) and spleen (C) mice. Tuberculosis infection was treated with rifampicin by the oral route of administration. Data on the effectiveness of treatment are presented in Table. 3
Таблица 3. Десятичные логарифмы числа КОЕ в легких и селезенке животных при введении различных лекарственных форм рифампицина.Table 3. The decimal logarithms of the number of CFU in the lungs and spleen of animals with the introduction of various dosage forms of rifampicin.
Представленные данные позволяют говорить о том, что в случае применения наносомальных форм рифампицина (особенно это показывают данные, полученные при исследовании образца №586) по классической 4-х недельной схеме введения терапевтический эффект будет значительно более выраженным, особенно в случае использования фармакодинамических преимуществ наночастиц, т.е. при использовании больших промежутков между введениями во время процесса лечения.The data presented suggest that in the case of the application of nanosomal forms of rifampicin (especially shown by the data obtained in the study of sample No. 586) according to the classical 4-week regimen of administration, the therapeutic effect will be much more pronounced, especially in the case of using the pharmacodynamic advantages of nanoparticles, those. when using large intervals between injections during the treatment process.
Таким образом, наносомальная фармацевтическая композиция рифабутина или рифампицина по изобретению, полученная вышеописанным способом, содержащая липидно-полимерную матрицу, также заявляемую в рамках настоящего изобретения, обладает значительно более выраженной противотуберкулезной активностью, что позволяет использовать препарат в меньших дозах и со значительно меньшей кратностью, что и составляет неожиданный технический результат настоящего изобретения.Thus, the nanosomal pharmaceutical composition of rifabutin or rifampicin according to the invention, obtained by the above method, containing a lipid-polymer matrix, also claimed in the framework of the present invention, has a much more pronounced anti-tuberculosis activity, which allows the preparation to be used in smaller doses and with a significantly lower frequency that and constitutes an unexpected technical result of the present invention.
Claims (8)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EA200802431A EA016540B1 (en) | 2008-12-30 | 2008-12-30 | Pharmaceutical composition for treating tuberculosis, method for preparing thereof and method for treating thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EA200802431A EA016540B1 (en) | 2008-12-30 | 2008-12-30 | Pharmaceutical composition for treating tuberculosis, method for preparing thereof and method for treating thereof |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA200802431A2 EA200802431A2 (en) | 2009-04-28 |
| EA200802431A3 EA200802431A3 (en) | 2010-04-30 |
| EA016540B1 true EA016540B1 (en) | 2012-05-30 |
Family
ID=40852090
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA200802431A EA016540B1 (en) | 2008-12-30 | 2008-12-30 | Pharmaceutical composition for treating tuberculosis, method for preparing thereof and method for treating thereof |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| EA (1) | EA016540B1 (en) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA023080B1 (en) * | 2012-12-24 | 2016-04-29 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Технология Лекарств" | Process for preparation of inhalational liposomal form of rifabutin |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000003660A1 (en) * | 1998-07-17 | 2000-01-27 | Skyepharma, Inc. | Biodegradable compositions for the controlled release of encapsulated substances |
| EA008107B1 (en) * | 2002-08-27 | 2007-04-27 | Хироси Терада | Remedy |
| RU2337711C1 (en) * | 2007-04-04 | 2008-11-10 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Производственный Комплекс "Наносистема" | Agent for bacterial infections treatment |
-
2008
- 2008-12-30 EA EA200802431A patent/EA016540B1/en active IP Right Revival
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000003660A1 (en) * | 1998-07-17 | 2000-01-27 | Skyepharma, Inc. | Biodegradable compositions for the controlled release of encapsulated substances |
| EA008107B1 (en) * | 2002-08-27 | 2007-04-27 | Хироси Терада | Remedy |
| RU2337711C1 (en) * | 2007-04-04 | 2008-11-10 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Производственный Комплекс "Наносистема" | Agent for bacterial infections treatment |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EA200802431A2 (en) | 2009-04-28 |
| EA200802431A3 (en) | 2010-04-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Walvekar et al. | Combination drug therapy via nanocarriers against infectious diseases | |
| DE60035669T2 (en) | NEW CODES IN A HYDROGEL-ISOLATED COCHLEATE FORMULATIONS, METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF AND THEIR USE FOR THE ADMINISTRATION OF BIOLOGICALLY ACTIVE MOLECULES | |
| JP5681693B2 (en) | Transmucosal administration of pharmaceutical compositions for treating and preventing disorders in animals | |
| CN103405405A (en) | Compositions and methods of delivery of pharmacological agents | |
| CN108136217B (en) | Preparation for treating bladder cancer | |
| CN103357016B (en) | Pharmaceutical composition for treating drug-resistant tuberculosis | |
| DE60111352T2 (en) | Podophyllotoxin COMPOSITIONS | |
| US20060257493A1 (en) | Nanoparticulate delivery systems for treating multi-drug resistance | |
| Burton et al. | Efficacy of liposomal gentamicin against Rhodococcus equi in a mouse infection model and colocalization with R. equi in equine alveolar macrophages | |
| Kia et al. | Innovative therapeutic approaches based on nanotechnology for the treatment and management of tuberculosis | |
| DE60025494T2 (en) | EPOTHILONE COMPOSITIONS | |
| Jain et al. | Novel Nanotechnology based delivery systems for chemotherapy and prophylaxis of tuberculosis | |
| EA016540B1 (en) | Pharmaceutical composition for treating tuberculosis, method for preparing thereof and method for treating thereof | |
| RU2337711C1 (en) | Agent for bacterial infections treatment | |
| EA013569B1 (en) | Pharmaceutical composition of rifabutin for treating tuberculosis and other diseases mediated by helicobacter pylori, method of production thereof and method for treatment thereof | |
| Vora et al. | Recent patents and advances on anti-tuberculosis drug delivery and formulations | |
| KR20190069725A (en) | Drug Delivery Platform Using Blood-brain Barrier Opening W/O/W Type Triolein Emulsion | |
| EA021117B1 (en) | Method for producing a water-soluble pharmaceutical composition of an antibiotic from the group consisting of rifamycins, and pharmaceutical composition for treating tuberculosis and diseases associated with helicobacter pylori | |
| Rathi et al. | Treatment of Tuberculosis in Nano Era: Recent Avenues | |
| Minhas et al. | Nano-technological developments in tuberculosis management: an update | |
| Cheraghipour et al. | Recent Advances in Therapeutic Strategies against Hydatid Cysts using Nanomaterials: A Systematic Review | |
| EA013570B1 (en) | Pharmaceutical composition for treating tuberculosis and diseases mediated by helicobacter pylori based on solid lipid nanoparticles and a method for the treatment of tuberculosis | |
| CN1925874B (en) | Compositions and methods of delivery of pharmacological agents | |
| RU2418585C1 (en) | Rifampicin-based medication with prolonged action for treatment of resistent forms of tuberculosis | |
| US20240082294A1 (en) | Cancer treatment regimen using anti-parasitic compounds and gut microbiome modulating agents |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM KG MD TJ TM |
|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AZ BY KZ |
|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): RU |
|
| NF4A | Restoration of lapsed right to a eurasian patent |
Designated state(s): RU |
|
| PC4A | Registration of transfer of a eurasian patent by assignment |