EA015277B1 - 28-norbrassinolide bovine serum albumin conjugate as immunogen - Google Patents
28-norbrassinolide bovine serum albumin conjugate as immunogen Download PDFInfo
- Publication number
- EA015277B1 EA015277B1 EA200801323A EA200801323A EA015277B1 EA 015277 B1 EA015277 B1 EA 015277B1 EA 200801323 A EA200801323 A EA 200801323A EA 200801323 A EA200801323 A EA 200801323A EA 015277 B1 EA015277 B1 EA 015277B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- conjugate
- norbrassinolide
- serum albumin
- bovine serum
- immunogen
- Prior art date
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области иммунохимического анализа фитогормонов брассиностероидов, а именно к конъюгату 28-норбрассинолида с бычьим сывороточным альбумином формулы 1The invention relates to the field of immunochemical analysis of phytohormones of brassinosteroids, namely, a conjugate of 28-norbrassinolide with bovine serum albumin of the formula 1
где БСА - бычий сывороточный альбумин, который может быть использован в качестве иммуногена для получения антител, специфичных к 7-окса-6-оксобрассиностероидам.where BSA is bovine serum albumin, which can be used as an immunogen to produce antibodies specific for 7-oxa-6-oxobrassinosteroids.
Брассиностероиды (БС) - природные низкомолекулярные биорегуляторы, которые являются гормонами растений [1, 2]. Они присутствуют во всех растительных объектах и обладают ростмодулирующим и адаптогенным действием. Содержание брассиностероидов в растениях очень низко - менее 10-5%. В очень малых концентрациях они проявляют и свое биологическое действие. Установлено, например, что при обработке различных сельскохозяйственных культур в дозах 5-20 мг на гектар посевов наблюдается заметный ростстимулирующий и адаптогенный эффект, приводящий к увеличению урожая, повышению качества продукции и устойчивости растений к неблагоприятным условиям и болезням [3-8]. Эти свойства брассиностероидов делают их привлекательными в качестве основы для агропрепаратов. Одним из наиболее известных в настоящее время является препарат эпин, действующим веществом которого стал фитогормон 24-эпибрассинолид.Brassinosteroids (BS) are natural low molecular weight bioregulators that are plant hormones [1, 2]. They are present in all plant objects and have growth modulating and adaptogenic effects. The content of brassinosteroids in plants is very low - less than 10 -5 %. In very small concentrations, they also exhibit their biological effect. It has been established, for example, that when processing various crops in doses of 5-20 mg per hectare of crops, a noticeable growth-stimulating and adaptogenic effect is observed, leading to an increase in yield, an increase in the quality of products and plant resistance to adverse conditions and diseases [3-8]. These properties of brassinosteroids make them attractive as a basis for agricultural products. One of the most famous is the epin drug, the active ingredient of which is the phytohormone 24-epibrassinolide.
Наибольшую активность проявляют брассиностероиды, имеющие в своей структуре 7-окса-6-оксогруппировку (так называемые брассиностероидные лактоны) [1]. Низкое содержание БС в природных объектах и исчезающе малые дозы, вызывающие их эффект, делают необходимым разработку методов анализа брассиностероидов, в частности брассиностероидных лактонов. Все вышеизложенное ставит на повестку дня разработку методов анализа брассиностероидов, которые должны обладать высокой чувствительностью, избирательностью, простотой в исполнении и быть доступными. Развитие в последнее время методов, основанных на использовании антител, в частности иммуноферментного анализа, требует наличия иммуногена. Брассиностероиды сами по себе не обладают иммуногенностью, поэтому для получения иммунного ответа у животных они должны быть использованы для иммунизации в виде конъюгатов с белками (через соответствующие гаптены).The most active are the brassinosteroids, which have 7-oxa-6-oxo grouping in their structure (the so-called brassinosteroid lactones) [1]. The low BS content in natural objects and the vanishingly low doses that cause their effect make it necessary to develop methods for the analysis of brassinosteroids, in particular brassinosteroid lactones. All of the above puts on the agenda the development of methods for the analysis of brassinosteroids, which should have high sensitivity, selectivity, ease of execution and be accessible. Recent development of methods based on the use of antibodies, in particular enzyme immunoassay, requires the presence of an immunogen. Brassinosteroids themselves do not possess immunogenicity, therefore, to obtain an immune response in animals, they should be used for immunization in the form of conjugates with proteins (via the corresponding haptens).
Известен конъюгат брассинолида с БСА формулыKnown conjugate of brassinolide with BSA of the formula
в котором связь брассиностероида с белком осуществляется через 3-гидроксигруппу [9]. К недостаткам данного конъюгата следует отнести, прежде всего, связывание 3-гидроксигруппы, которая относится к группам, ответственным за биологическую активность брассиностероидов, что может сказаться отрицательно на специфичности вырабатываемых животными антител.in which the connection of the brassinosteroid with the protein is via a 3-hydroxy group [9]. The disadvantages of this conjugate include, first of all, the binding of a 3-hydroxy group, which refers to the groups responsible for the biological activity of brassinosteroids, which may adversely affect the specificity of antibodies produced by animals.
Известны также конъюгаты БСА с кастастероном (формула 3) и 24-эпикастастероном (формула 4)BSA conjugates with castasterone (formula 3) and 24-epicastasterone (formula 4) are also known.
которые предложены авторами для радиоиммуноанализа брассиностероидов [10] и иммуноферментного анализа 24В-метилбрассиностероидов [11, 12]. Конъюгат 3 был получен на основе 248-метилбрассиностероида - кастастерона, но не позволил получить антитела, специфичные даже к этой группе брассиностероидов. Использование конъюгата 4 позволило получить высокоспецифичные антитела только к группе 24В-метилбрассиностероидов, которые, однако, оказались нечувствительными к различиям в строении цикла В стероидной молекулы.which were proposed by the authors for radioimmunoassay of brassinosteroids [10] and enzyme-linked immunosorbent assay 24B-methylbrassinosteroids [11, 12]. Conjugate 3 was obtained on the basis of 248-methylbrassinosteroid - castasterone, but did not allow to obtain antibodies specific even to this group of brassinosteroids. The use of conjugate 4 made it possible to obtain highly specific antibodies only to the group of 24B methylbrassinosteroids, which, however, were insensitive to differences in the structure of cycle B of the steroid molecule.
В научной и патентной литературе отсутствуют упоминания о конъюгатах брассиностероидов, коIn the scientific and patent literature there is no mention of conjugates of brassinosteroids,
- 1 015277 торые были получены и могли бы быть использованы для получения антител, специфичных к 7-окса-6оксобрассиностероидам (брассинолиду, 24-эпибрассинолиду, 28-гомобрассинолиду, 28-норбрассинолиду).- 1 015277 which were obtained and could be used to obtain antibodies specific for 7-oxa-6-oxobrassinosteroids (brassinolide, 24-epibrassinolide, 28-homobrassinolide, 28-norbrassinolide).
Целью изобретения является конъюгат 28-норбрассинолида и бычьего сывороточного альбумина, позволяющий получить высокоспецифические антитела к 7-окса-6-оксобрассиностероидам.The aim of the invention is the conjugate of 28-norbrassinolide and bovine serum albumin, which allows to obtain highly specific antibodies to 7-oxa-6-oxobrassinosteroids.
Поставленная цель достигается заявляемым соединением 1, которое получают взаимодействием Νоксисукцинимидного эфира (22В,23В)-2а,3а,22,23-тетрагидрокси-26-(гемисукцинат)-В-гомо-7-окса-5ахолестан-6-она (гаптена) с бычьим сывороточным альбумином в диоксановом растворе (рН 8,5), очисткой путем диализа и лиофилизацией конъюгата.The goal is achieved by the claimed compound 1, which is obtained by the interaction of oxysuccinimide ether (22B, 23B) -2a, 3a, 22,23-tetrahydroxy-26- (hemisuccinate) -B-homo-7-oxa-5-cholestan-6-one (hapten) with bovine serum albumin in dioxane solution (pH 8.5), purification by dialysis and lyophilization of the conjugate.
Сущность изобретения подтверждается примерами конкретного выполнения.The invention is confirmed by examples of specific performance.
Пример 1.Example 1
Растворяют 30 мг (55,7 ммоль) (22В,23В)-2а,3а,22,23-тетрагидрокси-26-(гемисукцинат)-В-гомо-7окса-5а-холестан-6-она (1) в 6 мл абс. диоксана, добавляют 8 мг сухого Ν-оксисукцинимида (69,6 ммоль) и прикапывают при 1 = 8-10°С 13 мг (63,1 ммоль) дициклогексил карбодиимида в 4 мл абс. диоксана. Перемешивают 0,5 ч при 1=10°С и 6 ч при комнатной температуре. Контролируют ход реакции методом ТСХ в системе этилацетат:метанол=9:1 (Вг - (1)=0,05; Вг - (конъюгата)=0,67). Выпавшую в осадок дициклогексилмочевину отфильтровывают и раствор диоксана добавляют к раствору БСА в 0,1М №1НС0з. рН 8,35, содержащему 60 мг белка в 10 мл буфера. Выдерживают 20 ч при комнатной температуре и избыток активированного эфира и диоксан удаляют диализом против 0,005М раствора №С1. Полученный конъюгат (1-БСА) лиофилизуют и хранят в замороженном виде при -18°С.30 mg (55.7 mmol) (22B, 23B) -2a, 3a, 22,23-tetrahydroxy-26- (hemisuccinate) -B-homo-7oxa-5a-cholestan-6-one (1) are dissolved in 6 ml. abs. dioxane, add 8 mg of dry Ν-oxisuccinimide (69.6 mmol) and drop it at 1 = 8-10 ° С 13 mg (63.1 mmol) of dicyclohexyl carbodiimide in 4 ml of abs. dioxane. Stirred for 0.5 hours at 1 = 10 ° C and 6 hours at room temperature. The progress of the reaction is monitored by TLC in the ethyl acetate system: methanol = 9: 1 (Br - (1) = 0.05; Br - (conjugate) = 0.67). The precipitated dicyclohexylurea is filtered off and the dioxane solution is added to a solution of BSA in 0.1 M No. 1HCO.sub.3. pH 8.35 containing 60 mg of protein in 10 ml of buffer. They stand it for 20 hours at room temperature and the excess of activated ether and dioxane are removed by dialysis against a 0.005M solution No. C1. The resulting conjugate (1-BSA) was lyophilized and stored frozen at -18 ° C.
Полученный конъюгат используют для получения антител, специфичных к 7-окса-6оксобрассиностероидам, что подтверждается примером конкретного выполнения.The resulting conjugate is used to obtain antibodies specific for 7-oxa-6-oxobrassinosteroids, which is confirmed by an example of a specific implementation.
Пример 2.Example 2
Группу из шести кроликов иммунизируют конъюгатом 28-норбрассинолид-БСА с плотностью посадки 25 молекул стероида на 1 молекулу белка. Каждому кролику вводят подкожно в 10-15 точек спины по 1 мг конъюгата, предварительно растворенного в 0,5 мл фосфатно-буферного раствора поваренной соли (рН 7,4) и эмульгированного в равном объеме полного адъюванта Фрейнда. Интервалы между инъекциями составляли 4 недели. Иммунизацию продолжают в течение 6 месяцев, осуществляя периодический отбор проб крови из ушной вены животных. Полученные образцы сыворотки тестируют на наличие связывающей способности в отношении 24-норбрассинолида и определяют их титры и значения констант ассоциации (Ка). Титр определяют как рабочее разведение антисыворотки, обеспечивающее максимальную чувствительность тест-системы при таком связывании конъюгата, которое позволяет построить калибровочный график в диапазоне 2,5-0,2 ОЕ.A group of six rabbits is immunized with a 28-norbrassinolide-BSA conjugate with a density of 25 steroid molecules per protein molecule. Each rabbit is injected subcutaneously at 10-15 points of the back with 1 mg of conjugate, previously dissolved in 0.5 ml of phosphate-buffered saline (pH 7.4) and emulsified in an equal volume of Freund's complete adjuvant. The intervals between injections were 4 weeks. Immunization is continued for 6 months, performing periodic sampling of blood from the ear vein of animals. The obtained serum samples are tested for binding ability with respect to 24-norbrassinolide and their titers and values of association constants (K a ) are determined. The titer is defined as the working dilution of the antiserum, providing maximum sensitivity of the test system with such conjugate binding, which allows you to build a calibration graph in the range of 2.5-0.2 OE.
Характеристики антисывороток, полученных при иммунизации животных конъюгатом 28-норбрассинолида с БСАCharacteristics of antisera obtained by immunization of animals with a conjugate of 28-norbrassinolide with BSA
Таким образом, определение оптимального титра антисыворотки для применения в ИФА показало, что ее разбавление в 1000000 (А1) или 1200000 (А2) раз позволяет обеспечить хорошие условия определения 28-норбрассинолида.Thus, the determination of the optimal titer of antiserum for use in ELISA showed that its dilution of 1,000,000 (A1) or 1,200,000 (A2) times provides good conditions for the determination of 28-norbrassinolide.
Специфичность. Определялась как перекрестная реакция антител, полученных к 28нобрассинолиду, с другими брассиностероидами и стероидами различных классов. Результаты приведены на схеме (в скобках - связывание по отношению к 28-норбрассинолиду, %).Specificity. It was defined as a cross-reaction of antibodies obtained to 28nobrassinolide with other brassinosteroids and steroids of various classes. The results are shown in the diagram (in parentheses - binding in relation to 28-norbrassinolide,%).
- 2 015277- 2 015277
СхемаScheme
Кросс-реактивность антисыворотки А2 с различными стероидамиCross-reactivity of antisera A2 with various steroids
Из схемы видно, что полученные антитела позволяют определять 7-окса-6-оксобрассиностероиды (брассиностероидные лактоны 5-11) с высокой степенью специфичности.It can be seen from the diagram that the antibodies obtained allow the determination of 7-oxa-6-oxobrassinosteroids (brassinosteroid lactones 5-11) with a high degree of specificity.
Заявляемый конъюгат получается с высоким выходом, стабильностью, высокой степенью посадки гаптена на белок, обеспечивает необходимую иммуногенность и позволяет получать антитела, специфичные к 7-окса-6-оксобрассиностероидам.The inventive conjugate is obtained with high yield, stability, a high degree of hapten landing on the protein, provides the necessary immunogenicity and allows you to get antibodies specific for 7-oxa-6-oxobrassinosteroids.
ЛитератураLiterature
1. Хрипач В.А., Лахвич Ф.А., Жабинский В.Н. Брассиностероиды. Минск. Навука ί тэхнЧка, 1993, 288 с.1. Khripach V.A., Lakhvich F.A., Zhabinsky V.N. Brassinosteroids. Minsk. Navuka ί tehnchka, 1993, 288 p.
2. Кйпрасй ν.Α., Ζ1ι;ώίη51<ίί ν.Ν., йе СгооЧ Ае. ВгакДпокЧегоЧйк - Α Νον С1а§8 ой Р1апЧ Ногтопек. 8ап ЭЧедо: Асай. Ргекк. 1999, 456 р.2. Kyprasy ν.Α., Ζ1ι; ώίη51 <ίί ν.Ν., ye SogoCh Ae. VgakDpokhGoCHyyk - Α Νον C1a§8 th P1apCh Nogtopek. 8AP ECHEDO: Asai. Rhekk. 1999, 456 p.
3. Патент РБ № 2806 от 23.11.1995. Средство для снижения накопления радионуклидов растениями и способ его применения./Хрипач В. А., Жабинский В.Н., Литвиновская Р.П., Завадская М.И., Деева В.П., Веденеев А.Н.//Оф. Бюл. Белгоспат., 2000, № 2 (26), с. 159.3. Patent of the Republic of Belarus No. 2806 of 11.23.1995. Means for reducing the accumulation of radionuclides by plants and the method of its application./ Khripach V.A., Zhabinsky V.N., Litvinovskaya R.P., Zavadskaya M.I., Deeva V.P., Vedeneev A.N.//Of . Bull. Belgospat., 2000, No. 2 (26), p. 159.
4. Патент РБ № 3488 от 4.07.1996. Способ повышения питательной ценности картофеля./Хрипач4. Patent of the Republic of Belarus No. 3488 dated July 4, 1996. A way to increase the nutritional value of potatoes. / Hrypach
В.А., Жабинский В.Н., Литвиновская Р.П., Завадская М.И., Савельева Е.А., Карась И.И. (Беларусь), ВаV.A., Zhabinsky V.N., Litvinovskaya R.P., Zavadskaya M.I., Savelyeva E.A., Karas I.I. (Belarus), Va
- 3 015277 куленко В.В. (Россия).//Оф. Бюл. Белгоспат., 2000, № 3 (27), с. 74.- 3 015277 V. Kulenko (Russia) .// Of. Bull. Belgospat., 2000, No. 3 (27), p. 74.
5. Патент РБ № 3400 от 4.07.1996. Способ защиты картофеля от фитофтороза./Хрипач В. А., Жабинский В.Н., Литвиновская Р.П., Завадская М.И., Савельева Е.А., Карась И.И., Кильчевский А.В., Титова5. Patent of the Republic of Belarus No. 3400 dated July 4, 1996. A method of protecting potatoes from late blight. / Khripach V.A., Zhabinsky V.N., Litvinovskaya R.P., Zavadskaya M.I., Savelyeva E.A., Karas I.I., Kilchevsky A.V., Titova
С.Н.//Оф. Бюл. Белгоспат., 2000, № 2(25), с. 75.S.N.//Of. Bull. Belgospat., 2000, No. 2 (25), p. 75.
6. Патент РБ 5168. Хрипач В. А., Литвиновская Р.П., Жабинский В.П., Завадская М.И., Волынец А.П., Прохорчик Р.А., Пшеничная Л.А., Манжелесова Н.Е., Морозик Г.В.//Оф. Бюл. НЦИС РБ, 2003 2(37). с. 95.6. Patent RB 5168. Khripach V. A., Litvinovskaya R. P., Zhabinsky V. P., Zavadskaya M. I., Volynets A. P., Prokhorchik R. A., Pshenichnaya L. A., Manzhelesova N. .E., Morozik G.V. // Of. Bull. NCIS RB, 2003 2 (37). from. 95.
7. Патент РБ 5212. Способ повышения урожайности льна и улучшения качества льноволокна./Воскресенская Л.Г., Хрипач В.А., Жабинский В.Н., Завадская М.И., Литвиновская Р.П.//Оф. Бюл. НЦИС РБ, 2003 2(37), с. 93.7. Patent RB 5212. A way to increase the yield of flax and improve the quality of flax fiber. / Voskresenskaya L.G., Khripach V.A., Zhabinsky V.N., Zavadskaya M.I., Litvinovskaya R.P. // Of. Bull. NCIS RB, 2003 2 (37), p. 93.
8. Патент РБ 5698. Способ размножения оздоровленного семенного материала картофеля./Бобрик А.О., Хрипач В. А., Жабинский В.Н., Завадская М.И., Литвиновская Р.П.//Оф. Бюл. НЦИС РБ, 2003 4(39).8. Patent RB 5698. The method of propagation of healthy seed material of potatoes. / Bobrik A.O., Khripach V.A., Zhabinsky V.N., Zavadskaya M.I., Litvinovskaya R.P. // Of. Bull. NCIS RB, 2003 4 (39).
9. Саг1 Ό. 8сЫадпйаи£ег, Ктсйагб N. Айеса аиб А11еп Т. РЫШрк. Мопос1опа1 аийЬоб1е8 адашй Ьгакыпойспоб а пе\\' р1ап! дго\\Й1 геди1айпд сошроипб. Р1ап1 Рйуыок (8ирр1.) - 1988. - Уо1. 86. - Р. 113.9. Cag1 Ό. 8sYadpayai £ er, Ktsyagb N. Ayesaib A11ep T. RYShrk. Moposlop1 aybob1e8 adash bgakypusp a ne \\ 'p1ap! dgo \\ Y1 gediaypd soshroipb. R1ap1 Ryuyok (8irr1.) - 1988. - Uo1. 86.- R. 113.
10. Уоко1а Т., АапаЬе 8., Ощпо Υ., ΥатадисЫ I., ТакайакЫ N. // 1 Р1ап1 Сго\\Й1 Рещб. - 1990. - Уо1. 9. Р.151.10. Uok1a T., Aapai 8., Oscpo Υ., Katadis I., Takayaki N. // 1 P1ap1 Sgo \\ Y1 Reshchb. - 1990. - Yo1. 9. R.151.
11. Патент РБ № 9770 (С2 С071 41/00). Конъюгат 24-эпикастастерона с бычьим сывороточным альбумином в качестве иммуногена. Хрипач В.А., Свиридов О.В., Литвиновская Р.П., Прядко А.Г., Драч СВ., Матвеенцев В.Д., Демченко Н.И.//Оф. Бюл. изобрет. НЦИС, 2007, № 5, с. 95.11. Patent of the Republic of Belarus No. 9770 (C2 C071 41/00). A 24-epicastasterone conjugate with bovine serum albumin as an immunogen. Khripach V.A., Sviridov O.V., Litvinovskaya R.P., Pryadko A.G., Drach SV., Matveentsev V.D., Demchenko N.I. // Of. Bull. invented. NCIS, 2007, No. 5, p. 95.
12. Хрипач В.А., Свиридов О.В., Прядко А.Г., Литвиновская Р.П., Драч С.В., Матвеенцев В.Д., Новик Т.В., Михайлопуло К.И., Жабинский В.Н., Завадская М.И., Аверькова М.А., Драченова О. А., Чащина Н.М. Иммуноферментный анализ (24Е)-брассиностероидов.//Биоорг. Химия. - 2007 - Т. 33, № 3, с.371378.12. Khripach V.A., Sviridov O.V., Pryadko A.G., Litvinovskaya R.P., Drach S.V., Matveentsev V.D., Novik T.V., Mikhaylopulo K.I., Zhabinsky V.N., Zavadskaya M.I., Averkova M.A., Drachenova O.A., Chashchina N.M. Enzyme-linked immunosorbent assay (24E) -brassinosteroids.// Bioorg. Chemistry. - 2007 - T. 33, No. 3, p. 371378.
13. Антончик А.В., Жабинский В.Н., Хрипач В.А. II Международная конференция Химия, структура и функция биомолекул, Минск, 2006, РР6.13. Antonchik A.V., Zhabinsky V.N., Khripach V.A. II International Conference Chemistry, structure and function of biomolecules, Minsk, 2006, PP6.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EA200801323A EA015277B1 (en) | 2008-04-22 | 2008-04-22 | 28-norbrassinolide bovine serum albumin conjugate as immunogen |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EA200801323A EA015277B1 (en) | 2008-04-22 | 2008-04-22 | 28-norbrassinolide bovine serum albumin conjugate as immunogen |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA200801323A1 EA200801323A1 (en) | 2009-10-30 |
| EA015277B1 true EA015277B1 (en) | 2011-06-30 |
Family
ID=41353755
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA200801323A EA015277B1 (en) | 2008-04-22 | 2008-04-22 | 28-norbrassinolide bovine serum albumin conjugate as immunogen |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| EA (1) | EA015277B1 (en) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102802617B (en) | 2009-12-18 | 2016-05-11 | 埃克索多斯生命科学有限合伙公司 | For the method and composition of stable liquid pharmaceutical formulation |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4591650A (en) * | 1983-02-17 | 1986-05-27 | Schering Aktiengesellschaft | Hexanor-brassinolid-22-ethers |
| SU1433005A1 (en) * | 1987-02-13 | 1991-12-30 | Институт биоорганической химии АН БССР | 2 ,3 ,22s,23s-tetraoxy-24s-ethylcholest-4-ene-on displaying pthytogrowth stimulating activity |
| RU2114116C1 (en) * | 1993-06-01 | 1998-06-27 | Тама Биокемикал Ко., Лтд. | Brassinosteroidal derivatives and plant growth regulating agent |
| WO2006023073A1 (en) * | 2004-07-23 | 2006-03-02 | Drebsk Comptech, Inc. | Medical uses of 24-epibrassinolide |
-
2008
- 2008-04-22 EA EA200801323A patent/EA015277B1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4591650A (en) * | 1983-02-17 | 1986-05-27 | Schering Aktiengesellschaft | Hexanor-brassinolid-22-ethers |
| SU1433005A1 (en) * | 1987-02-13 | 1991-12-30 | Институт биоорганической химии АН БССР | 2 ,3 ,22s,23s-tetraoxy-24s-ethylcholest-4-ene-on displaying pthytogrowth stimulating activity |
| RU2114116C1 (en) * | 1993-06-01 | 1998-06-27 | Тама Биокемикал Ко., Лтд. | Brassinosteroidal derivatives and plant growth regulating agent |
| WO2006023073A1 (en) * | 2004-07-23 | 2006-03-02 | Drebsk Comptech, Inc. | Medical uses of 24-epibrassinolide |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EA200801323A1 (en) | 2009-10-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Gonen et al. | Atheroprotective immunization with malondialdehyde-modified LDL is hapten specific and dependent on advanced MDA adducts: implications for development of an atheroprotective vaccine1 [S] | |
| CN110845444B (en) | Dimethomorph hapten, artificial antigen and antibody, and preparation method and application thereof | |
| CN111333570B (en) | Haloxyfop hapten, artificial antigen and antibody as well as preparation method and application thereof | |
| CN110642793A (en) | Azoxystrobin hapten, artificial antigen and antibody, and preparation method and application thereof | |
| CN106866568A (en) | Furaxone metabolite AOZ derivatizations haptens, the preparation method and applications of artificial antigen | |
| CN111269262A (en) | Profenofos hapten, artificial antigen and antibody, and preparation method and application thereof | |
| CN109206332A (en) | A kind of preparation method and application of flumetralim haptens and antigen | |
| CN110627726A (en) | Prochloraz hapten, artificial antigen and antibody, and preparation method and application thereof | |
| CN108178777B (en) | Tylosin hapten, artificial antigen and antibody as well as preparation methods and applications thereof | |
| CN113264834A (en) | Abienol hapten, artificial antigen and antibody as well as preparation method and application thereof | |
| EA015277B1 (en) | 28-norbrassinolide bovine serum albumin conjugate as immunogen | |
| CN109438424B (en) | Ribavirin hapten and artificial antigen as well as preparation method and application thereof | |
| Homan et al. | Monoclonal antibodies directed against the sexual binding site of Chlamydomonas eugametos gametes. | |
| CN111961002A (en) | Pyraclostrobin hapten, artificial antigen and antibody as well as preparation method and application thereof | |
| JP5495000B2 (en) | Antigen derivative, monoclonal antibody prepared using said antigen derivative, and method for preparing antigen derivative | |
| CN111943881B (en) | Chlorfenapyr hapten, artificial antigen and antibody as well as preparation methods and applications thereof | |
| CN111825562B (en) | Chlordan hapten, artificial antigen and antibody, and preparation method and application thereof | |
| EA014349B1 (en) | Castasterone bovine serum albumin conjugate as immunogen | |
| JP2007106696A (en) | Anti-quercetin monoclonal antibody, cell producing the same, method for detection of quercetin and detection reagent thereof | |
| CN112462071B (en) | Special enzyme-linked immunoassay kit for ribavirin | |
| CN115521920B (en) | Testosterone propionate monoclonal antibody hybridoma cell strain and application thereof | |
| CN111060690B (en) | Time-resolved fluoroimmunoassay kit for detecting olaquindox and application thereof | |
| CN115637258B (en) | Clobetasol propionate artificial antigen, monoclonal antibody, hybridoma cell strain and application thereof | |
| CN114214288B (en) | Zearalenone monoclonal antibody hybridoma cell strain and application thereof | |
| JP2018203666A (en) | Antigens for isolating anti-cortisol antibodies and antibody producing methods |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ KZ KG MD TJ TM |
|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): BY RU |