EA013430B1

EA013430B1 - Тестостероновые гели, включающие пропиленгликоль в качестве усилителя проницаемости

Info

Publication number: EA013430B1
Application number: EA200700580A
Authority: EA
Inventors: Доминик Сален-Друэн
Original assignee: Лаборатуар Безен Энтернасьональ
Priority date: 2004-09-09
Filing date: 2005-09-07
Publication date: 2010-04-30
Also published as: EA200700580A1; BRPI0515040B1; BRPI0515040A; JP2008512425A; MX2007002814A; IL181583A0; NZ553446A; HK1099887A1

Abstract

Настоящее изобретение имеет отношение к фармацевтическим композициям и гелям, содержащим тестостерон, и к способам их применения.

Description

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям и гелям, содержащим тестостерон, и способам их применения.

Уровень техники

Тестостерон у мужчин.

Тестостерон, главный циркулирующий андроген у мужчин, синтезируется из холестерина. Приблизительно 500 миллионов клеток Лейдига в семенниках секретируют более чем 95% от 6-7 мг тестостерона, продуцируемого ежедневно. Два гормона, продуцируемые гипофизом, лютеинизирующий гормон (ЬТН) и фолликулостимулирующий гормон (Е8Н), необходимы для развития и поддержания функции семенников и для негативно регулируемого образования тестостерона. Циркулирующий тестостерон метаболизируется в различные 17-кетостероиды двумя различными путями. Тестостерон может быть метаболизирован в дигидротестостерон (ИНТ) ферментом 5-альфа-редуктазой или в эстрадиол (Е2) ферментным комплексом ароматазой. Около 90% циркулирующего в крови тестостерона связано белком. У мужчин приблизительно 40% связывания приходится на высокоаффинный глобулин, связывающий половые гормоны (8НВС). Оставшиеся 60% слабо связаны с альбумином. Итак, существует множество данных по определению тестостерона, предоставленных клиническими лабораториями.

В таблице Медицинского центра Университета Калифорнии в Лос-Анжелесе (иСЬА-НагЬог Меб1еа1 Сеп1ег), приведенной ниже, суммированы концентрации гормонов у нормальных взрослых мужчин.

Уровень гормонов у нормальных мужчин

Тестостерон (общий)

Свободный тестостерон

ЭНТ

Соотношение ϋΗΤ/Τ ϋΗΤ + Τ

8НВС

Г8Н

ЬН

Е2

Диапазон нормальных концентраций гормонов от 298 до 1043 нг/дл от 3,5 до 17,9 нг/дл от 31 до 193 нг/дл от 0,052 до 0,33 от 372 до 1349 нг/дл от 10,8 до 46,6 нмоль/л от 1,0 до 6,9 мМЕд/мл от 1,0 до 8,1 мМЕд/мл от 17,1 до 46,1 пг/мл

По данным литературных источников существует значительное различие в периоде полужизни тестостерона, колеблющемся от 10 до 100 мин. Исследователи, однако, соглашаются в том, что циркулирующий тестостерон у нормального молодого мужчины различается в течение суток. Максимальный уровень приходится на период от 6:00 до 8:00 утра и затем снижается в течение дня. Характерные профили для максимального уровня тестостерона составляют 720 нг/дл и для минимального уровня - 430 нг/дл. Однако физиологическое значение этого суточного цикла, если он существует, не известно.

Тестостерон у женщин.

Экскреция андрогенных стероидов в мочу взрослых женщин была продемонстрирована более 50 лет тому назад. С этого времени физиологи и клиницисты исследовали источники и биологические функции тестостерона и других эндогенных андрогенных гормонов у женщин. В настоящее время известно, что андрогены у женщин секретируются как яичниками, так и надпочечниками. Вклад каждого из этих источников составляет приблизительно 50% (прямо или при участии предшественников) примерно в 300 мкг тестостерона, ежедневно продуцируемого у здоровых женщин репродуктивного возраста («циклирующие женщины»). Несмотря на то что неблагоприятные эффекты избыточной продукции андрогенов, обнаруженные при синдроме поликистозных яичников и некоторых опухолях, продуцирующих андрогены, были хорошо установлены, нормальные физиологические эффекты андрогенов у женщин значительно менее понятны. Как предполагают на основании исследований на животных, физиологии мужчин и симптомы у женщин с недостаточной продукцией андрогенов, основные физиологические эффекты андрогенов у нормальных женщин включают, но не ограничиваются, анаболические эффекты на мышцы, кожу, волосы и кости; стимулирующие эффекты на эритропоэз; модулирующее влияние на иммунитет и физиологические эффекты на настроение, здоровье и половую функцию.

Кроме того, эндогенные андрогены важны для развития лобковых волос и считается, что они модулируют действие эстрогенов и прогестинов на целый ряд репродуктивных тканей-мишеней. Считается, что андрогены играют важную роль в модулировании секреторной функции слезной железы.

50% циркулирующего тестостерона образуется в результате прямой секреции яичников в текальных клетках под контролем лютеинизирующего гормона. Другая половина является результатом перифери ческого превращения надпочечных андрогенных предшественников дегидроэпиандростерона, андростендиона и дегидроэпиандростеронсульфата. Тестостерон также может превращаться в дигидротесто

- 1 013430 стерон или эстрадиол. Таким образом, тестостерон одновременно является гормоном и прегормоном.

Около 98% циркулирующего в крови тестостерона связано белком. У женщин приблизительно 66% связывания приходится на высокоаффинный глобулин, связывающий половые гормоны (8НБО). Оставшиеся 34% слабо связаны с альбумином. Итак, существует множество данных по определению тестостерона, предоставленных клиническими лабораториями. Расположение стероидов, наиболее прочно связанных с высокоаффинным глобулином, связывающим половые гормоны, в соответствии с их сродством таково: дигидротестостерон>тестостерон>андростендион>эстрадиол>эстрон. Высокоаффинный глобулин, связывающий половые гормоны, слабо связывает дигидротестостерон, но не дигидротестостеронсульфат. Таблица, приведенная ниже, демонстрирует уровень гормонов у нормальных женщин до периода менопаузы.

Уровни гормонов у нормальных женщин до периода менопаузы

Гормон	Среднее +/- 8Б	Средний	Диапазон
Тестостерон (нмоль/л)	1,2+/-0,69	уровень 0,98	0,4-2,7
Свободный тестостерон (пмоль/л)	12,80+/-5,59	12,53	4,1-24,2
% свободного тестостерона от общего	1,4+/-1,1	1,1	0,4-6,3
тестостерона Лютеинизирующий гормон (МЕд/л)	7,2+/-3,3	6,7	3,0-18,7
Фолликулостимулирующий гормон	4,7+/-3,6	4,2	1,5-21,4
(МЕд/л) Высокоаффинный глобулин,	66,1+/-22,7	71,0	17,8-114,0
связывающий половые гормоны (нмоль/л)

По сравнению с состояниями недостаточности по другим гормонам тестостероновая недостаточность у женщин практически игнорировалась как клиническое проявление. Тем не менее, существуют хорошо определяемые популяции субъектов, у которых продукция андрогенов отчетливо недостаточна и у которых описана ассоциированная с этим симптоматика. Эти популяции включают, например, молодых женщин с удаленными яичниками/маткой, женщин в периоде постменопаузы, подвергающихся заместительной терапии эстрогенами, женщин, принимающих оральные контрацептивы, женщин с дисфункцией надпочечников, женщин с супрессией надпочечников, вызванной кортикостероидами, и женщин, позитивных на вирус СПИДа.

Так как было показано, что повышение концентраций тестостерона изменяет половую активность или либидо, исследователи изучали способы доставки тестостерона мужчинам, а также женщинам. Эти способы включают внутримышечные инъекции, восполнение с помощью пероральных препаратов, шариковые имплантаты и трансдермальные пластыри.

Эти способы доставки тестостерона, однако, имеют один или несколько недостатков. Например, подкожные шариковые имплантаты и инъекции сложных эфиров болезненны и требуют хирургических процедур и/или посещений врача. Более того, терапия имплантатами гипогонадных мужчин включает риск выталкивания (8,5%), кровотечения (2,3%) или инфекции (0,6%). Многие из этих методов, такие как применение пероральных/сублингвальных/буккальных препаратов, страдают от нежелательного фармакокинетического профиля, создаваемого сверхфизиологическими концентрациями тестостерона, которые затем возвращаются к базовому уровню. Трансдермальные пластыри обеспечивают менее чем оптимальные фармакокинетические характеристики, стесняют многих субъектов и ассоциируются со значительным раздражением кожи. Кроме того, пластыри не обеспечивают гибкого дозирования, могут быть визуально непривлекательными и могут иметь тенденцию сваливаться, в особенности во время интенсивных физических упражнений. Пероральное введение создает неподходящий уровень тестостерона и непредсказуемое среди различных субъектов поглощение препаратов. Более того, так как печень метаболизирует препарат, существует риск гепатотоксичности, не говоря уже о пресистемном метаболизме.

Недавно был одобрен однопроцентный тестостероновый гель для применения у мужчин, который обеспечивает гибкое дозирование с минимальным раздражением кожи. Этот гель доступен в Соединенных Штатах Америки под торговой маркой АпбгоОе1® (Сытей РйагтасеийсаС, 1пс., БеегйеМ, III., А 8о1уауРНагтасеийса18, 1пс.Со., Мапейе, ОА 30062).

- 2 013430

Состав ЛпбгоСе1®

Состав ΑηάτοΟεΙ®	Количество (масса/масса) на 100 г геля
Тестостерон	1,0 г
СагЬоро1980	0,90 г
Изопропилмиристат	0,50 г
Ο,ΙΝΝηΟΗ	4,72 г
Этанол (95% объем/объем)	72,5 г*
Очищенная вода (дз!)	100 г

Соответствует 67 г абсолютного этанола.

Настоящее изобретение обеспечивает фармацевтические композиции и гели, содержащие тестостерон, и способы их применения. Более подробно, настоящее изобретение обеспечивает водноспиртовые/спиртовые фармацевтические композиции и гели, содержащие тестостерон, пригодные для местного и трансдермального нанесения, указанные композиции содержат пропиленгликоль. Помимо того что достигается очень эффективная доставка тестостерона, композиции изобретения эстетически привлекательны. Было показано, что пропиленгликоль является очень мощным усилителем проницаемости в композиции изобретения, который применялся как один единственный усилитель проницаемости или совместно с дополнительным (дополнительными) усилителем (усилителями) проницаемости, например совместно с изопропилмиристатом.

Настоящее изобретение имеет отношение к фармацевтической композиции, включающей тестостерон, по меньшей мере один С₂-С₆-спирт, по меньшей мере один загуститель, по меньшей мере один усилитель проницаемости и воду.

Указанную фармацевтическую композицию можно приготовить в различных формах, например в виде геля, раствора, крема, лосьона, распыляемого раствора, мази, аэрозоля. Предпочтительно указанная фармацевтическая композиция является гелем.

Термин «тестостерон», используемый здесь, относится не только к тестостерону самому по себе, но также к его энантиомерам, изомерам, таутомерам, солям, хелатам, сложным спиртам, амидам, производным и пролекарственным формам и их предшественникам, например ΌΗΤ (дигидростерону), 17-метилтестостерону, 3-циклопентильному эфиру 17[альфа]-метилтестостерон-енола, тестостерона энантату, тестостерона ципионату, тестостерона ундеканоату, тестостерона циклодекстрину, тестостерона бициклату. В соответствии с настоящим изобретением тестостерон может быть природного происхождения или результатом полусинтетических или синтетических процессов.

С₂-С₆-спирты известны в этой области техники. Такие спирты включают этанол, пропанол, изопропанол (пропан-2-ол), н-пропанол (пропан-1-ол), бутанол, бутан-1-ол, бутан-2-ол, трет-бутанол, пентанолы, гексанолы. Предпочтительным является этанол, так как он значительно содействует трансдермальному переносу тестостерона, благодаря его быстрому испарению при контакте с кожей.

Загустители известны в этой области техники. Термин «загустители» обычно относится к соединению, возможно полимерной природы, имеющему способность превращаться в гель при контакте со специфическим растворителем, например водой. Загустители делают возможным увеличивать вязкость фармацевтических композиций в соответствии с настоящим изобретением, но могут также действовать как солюбилизирующие агенты. Примеры загустителей включают анионные полимеры, такие как полимеры на основе акриловой кислоты (включая полимеры полиакриловой кислоты, например СЛКВОРОБ® (В.Р.Оообпей 8рее1а11у Ро1утегз апб СНетюаН Όίνίδίοπ о£ С1еуе1апф ОЫо), производные целлюлозы, полоксамеры и полоксамины, или более точно, карбомеры или полимеры на основе акриловой кислоты, например СагЬоро1® 980 или 940, 981 или 941, 1382 или 1382, 5984, 2984, 934 или 934Р (СагЬоро1® - это обычно полимеры акриловой кислоты, поперечно сшитые с аллилсахарозой или аллилпентаэритритолом), Рети1еп ТК1® или ТК2® (ϋΐΐ^ζ, 8уп1йа1еп СК, е!е.); производные целлюлозы, такие как этилцеллюлозы, гидроксипропилцеллюлозы, гидроксиэтилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМС), карбоксиметилцеллюлозы (СМС) и т.д.; полоксамеры или сополимеры полиэтиленполипропилена, такие как Би1го1® марки 68 или 127, полоксамины и другие загустители, такие как хитозан, декстран, пектины и натуральные камеди. Все эти загустители, сами по себе или в виде смеси, можно применять в фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением. Указанные выше загустители можно выбирать, принимая во внимание рН композиции в соответствии с настоящим изобретением и желаемой вязкостью.

В контексте настоящего изобретения предпочтительными являются гидроксипропилцеллюлоза, СагЬоро1® 980 и Би1го1®.

- 3 013430

Усилители проницаемости также известны в этой области техники. «Усилитель проницаемости» это обычно вещество, для которого известно, что оно усиливает доставку лекарственного средства или активной составной части через кожу. Эти соединения также можно отнести к ускорителям проницаемости, активирующим добавкам и промоторам поглощения. Этот класс веществ включает соединения с разнообразными механизмами действия, включая механизмы, функция которых состоит в улучшении растворимости и диффузии лекарственного средства, и механизмы, которые улучшают трансдермальное поглощение путем изменения способности рогового слоя кожи удерживать влагу, смягчая кожу, улучшая проницаемость кожи, действуя как помощники проницаемости или соединения, разрыхляющие волосяные фолликулы, или временно изменяя состояние кожи, например пограничный слой.

Если специально не оговорено, проценты (%) относятся к массовым количествам вещества по отношению к общей массе композиций.

В соответствии с одним аспектом указанная фармацевтическая композиция включает от 0,5 до 5,0% (мас./мас.), предпочтительно от 0,5 до 2,5% (мас./мас.), более предпочтительно от 0,6 до 2,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,7 до 1,5% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,75 до 1,25% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,8 до 1,2% (мас./мас.) и еще более предпочтительно от 0,9 до 1,1% (мас./мас.), наиболее предпочтительно около 1% (мас./мас.) тестостерона.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения указанная фармацевтическая композиция включает от 0,5 до 5,0% (мас./мас.), предпочтительно от 0,5 до 2,5% (мас./мас.), более предпочтительно от 0,75 до 2,25% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,9 до 2,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 1,0 до 1,8% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 1,25 до 1,75% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 1,3 до 1,6% (мас./мас.), наиболее предпочтительно около 1,5% (мас./мас.) тестостерона.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения указанная фармацевтическая композиция включает от 40,0 до 75,0% (мас./мас.), предпочтительно от 40,0 до 70,0% (мас./мас.), более предпочтительно от 45,0 до 65,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 50,0 до 60,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 52,0 до 58,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 53,0 до 57,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 54,0 до 56,0% (мас./мас.), наиболее предпочтительно около 56,0% (мас./мас.) по меньшей мере одного С₂-С₆-спирта.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения указанная фармацевтическая композиция включает от 0,1 до 5,0% (мас./мас.), предпочтительно от 0,15 до 4,5% (мас./мас.), более предпочтительно от 0,2 до 4,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,25 до 3,5% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,3 до 3,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,4 до 2,5% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,5 до 2,0% (мас./мас.), наиболее предпочтительно приблизительно от 0,5 до 1,0% (мас./мас.) по меньшей мере одного загустителя.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения указанный загуститель выбирают из группы, состоящей из полимеров на основе акриловой кислоты, включая целлюлозные полимеры, включая эфиры целлюлозы и производные (производные целлюлозы, такие как этилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза (НРМС), карбоксиметилцеллюлоза (СМС) и т.д.); карбомеры, такие как полимеры СагЬоро1®, например СагЬоро1®980 или 940, 981 или 941, 1382 или 1382, 5984, 2984, 934 или 934Р, Рети1еп ТК1® или ТК2®, ийгсх. 8уп1йа1еи СК и т.д.; полоксамины, полоксамеры или сополимеры полиэтилен-полипропилена, такие как Ьи1го1® марки 68 или 127, полоксамины и другие загустители, такие как хитозан, декстран, пектины и натуральные камеди и их смеси.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения указанная фармацевтическая композиция включает от 0,1 до 5,0% (мас./мас.), предпочтительно от 0,15 до 4,5% (мас./мас.), более предпочтительно от 0,2 до 4,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,3 до 3,5% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,4 до 3,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,5 до 2,5% (мас./мас.), более предпочтительно от 0,5 до 2,0% (мас./мас.) пропиленгликоля. Преимущественно в соответствии с настоящим изобретением для содержания тестостерона и композиций изобретения было обнаружено, что пропиленгликоль является очень эффективным и совместимым усилителем проницаемости. Кроме того, применение пропиленгликоля в соответствии с настоящим изобретением приводит к фармацевтическим композициям, имеющим очень привлекательный вид. Фармацевтические композиции изобретения очень прозрачны, визуально привлекательны и имеют очень приятную текстуру, которая улучшает применение композиций пациентом. Кроме того, фармацевтические композиции изобретения требуют пониженные концентрации спирта. Более того, композиции изобретения очень стабильны, и доказано, что пропиленгликоль совместим со стандартными нейтрализующими средствами, например триэтаноламином. Композиции в соответствии с изобретением могут включать несколько усилителей проницаемости.

В соответствии с настоящим изобретением указанная композиция, необязательно, дополнительно включает воду.

- 4 013430

Указанная фармацевтическая композиция подходит для контролируемой трансдермальной доставки тестостерона. Таким образом, указанная фармацевтическая композиция может приниматься самим пациентом и не требует присутствия врача во время приема. Также введение не требует хирургических процедур или инъекций.

Преимущественно в соответствии с настоящим изобретением пропиленгликоль действует как очень эффективный усилитель проницаемости для тестостерона, в частности в сочетании дозировки тестостерона и загустителя (загустителей) настоящей композиции.

В другом аспекте фармацевтическая композиция настоящего изобретения дополнительно включает основание. Выгодно, что указанное основание является фармацевтически приемлемым, основание предпочтительно выбирают из группы, состоящей из триэтаноламина, гидроокиси натрия, гидроокиси аммония, гидроокиси калия, аргинина, аминометилпропанола или трометамина и их смесей. Если рН указанной фармацевтической композиции не оптимизирован для трансдермального введения, например если указанный загуститель включает, по меньшей мере, полимер на основе акриловой кислоты, указанное основание содействует нейтрализации указанной фармацевтической композиции, для местного применения на коже человека. Кроме того, указанное основание (нейтрализующее вещество) способствует оптимальному набуханию полимерных цепей во время нейтрализации зарядов и образования солей полимеров. В особенности, если указанный загуститель включает полимер на основе акриловой кислоты, указанное основание предпочтительно включает триэтаноламин. Оно также способствует достижению оптимальной вязкости в фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением. Специалисты в этой области техники знают, как выбирать подходящее количество указанного основания в композиции, в особенности относительно природы указанного загустителя и содержания спирта в композиции, чтобы достичь желаемого окончательного значения рН в композиции. Например, в присутствии карбомеров и/или, если высоко содержание спирта, в качестве основания можно применять трометамин и/или ΝαΟΗ в количествах, выбранных таким образом, чтобы достичь желаемого окончательного значения рН в композиции. Альтернативно, в одном из воплощений фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением включает от 0,1 до 5,0% (мас./мас.), предпочтительно от 0,15 до 4,5% (мас./мас.), более предпочтительно от 0,2 до 4,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,25 до 3,5% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,3 до 3,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,4 до 2,5% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,5 до 2,0% (мас./мас.), наиболее предпочтительно от 0,5 до 1,0% (мас./мас.) триэтаноламина.

Предпочтительно, чтобы значение рН фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением было бы между 2 и 9, предпочтительно между 3 и 8, еще более предпочтительно между 3 и 7. Указанная фармацевтическая композиция по настоящему изобретению дополнительно включает изопропилмиристат. В соответствии с настоящим изобретением неожиданно было показано, что добавление изопропилмиристата приводит к значительному улучшению результатов, если применять его совместно с пропиленгликолем в качестве дополнительного усилителя проницаемости. Предпочтительно указанная фармацевтическая композиция включает от 0,05 до 5,0% (мас./мас.), более предпочтительно от 0,1 до 4,0% (мас./мас.), более предпочтительно от 0,15 до 3,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,25 до 2,5% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,25 до 2,0% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,25 до 1,5% (мас./мас.), еще более предпочтительно от 0,25 до 1,0% (мас./мас.), наиболее предпочтительно от 0,5 до 0,75% (мас./мас.) изопропилмиристата.

Таким образом, в одном из воплощений настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую:

от 0,5 до 5,0% (мас./мас.) тестостерона;

от 40,0 до 75,0% (мас./мас.) по меньшей мере одного С₂-С₆-спирта;

от 0,1 до 5,0% (мас./мас.) по меньшей мере одного загустителя;

от 0,1 до 5,0% (мас./мас.) пропиленгликоля;

от 0,1 до 4,0% (мас./мас.) изопропилмиристата; необязательно, воду.

В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую: от 0,75 до 1,25% (мас./мас.) тестостерона;

от 50,0 до 70,0% (мас./мас.) по меньшей мере одного С₂-С₆-спирта;

от 0,1 до 4,0% (мас./мас.) по меньшей мере одного загустителя;

от 0,2 до 4,0% (мас./мас.) пропиленгликоля;

от 0,15 до 2,0% (мас./мас.) изопропилмиристата; необязательно, воду.

В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую: от 0,8 до 1,2% (мас./мас.) тестостерона;

от 0,1 до 3,0% (мас./мас.) по меньшей мере одного загустителя;

от 0,3 до 3,0% (мас./мас.) пропиленгликоля;

от 0,35 до 1,5% (мас./мас.) изопропилмиристата;

- 5 013430 необязательно, воду.

В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую: от 0,9 до 1,1% (мас./мас.) тестостерона;

от 0,1 до 2,5% (мас./мас.) по меньшей мере одного загустителя;

от 0,4 до 2,5% (мас./мас.) пропиленгликоля;

от 0,4 до 1,0% (мас./мас.) изопропилмиристата;

необязательно, воду.

В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую: около 1,0% (мас./мас.) тестостерона;

от 50,0 до 70,0% (мас./мас.) до меньшей мере одного С₂-С₆-спирта;

от 0,4 до 2,5% (мас./мас.) пропиленгликоля;

около 0,5% (мас./мас.) изопропилмиристата;

необязательно, воду.

В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую: от 1,0 до 2,0% (мас./мас.) тестостерона;

от 50,0 до 75,0% (мас./мас.) по меньшей мере одного С₂-С₆-спирта;

от 0,1 до 5,0% (мас./мас.) пропиленгликоля;

от 0,1 до 4,0% (мас./мас.) изопропилмиристата;

необязательно, воду.

В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую: от 1,25 до 1,75% (мас./мас.) тестостерона;

от 0,2 до 4,0% (мас./мас.) пропиленгликоля;

от 0,15 до 2,0% (мас./мас.) изопропилмиристата;

необязательно, воду.

В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую: от 1,4 до 1,6% (мас./мас.) тестостерона;

от 0,3 до 3,0% (мас./мас.) пропиленгликоля;

от 0,35 до 1,5% (мас./мас.) изопропилмиристата;

необязательно, воду.

В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую: около 1,5% (мас./мас.) тестостерона;

от 0,4 до 2,5% (мас./мас.) пропиленгликоля;

от 0,4 до 1,0% (мас./мас.) изопропилмиристата;

необязательно, воду.

Кроме того, указанная фармацевтическая композиция может включать обычные фармацевтические добавки, включающие соль (соли), смягчающее средство (средства), стабилизатор (стабилизаторы), противомикробный препарат (препараты), ароматизатор (ароматизаторы) и/или газ-вытеснитель (газывытеснители). Указанная фармацевтическая композиция может также включать, по меньшей мере, дополнительный активный ингредиент, например другой гормон.

Изобретение также обеспечивает гель, полезный для трансдермальной или чрескожной доставки, включающий указанную фармацевтическую композицию в соответствии с настоящим изобретением. Таким образом, изобретение также нацелено на водно-спиртовой гель, содержащий тестостерон.

В соответствии с другим воплощением настоящее изобретение обеспечивает дозированную упаковку, единичную дозированную упаковку и упаковку, содержащую указанную фармацевтическую композицию или указанный водно-спиртовой гель, рассчитанную на несколько приемов. Предпочтительно такое кондиционирование указанной фармацевтической композиции обеспечивает пациенту более легкое применение. Таким образом, эти формы упаковки могут отражать схему применения, например ежедневное или еженедельное применение.

В соответствии с другим воплощением обеспечивается дозатор, например устройство с ручным насосом или клапаном, содержащий указанную фармацевтическую композицию или указанный водноспиртовой гель. Такие дозаторы позволяют осуществлять гибкий прием дозировок, зависящий от количества наносимой композиции.

- 6 013430

В соответствии с другим воплощением указанные упаковки или дозаторы могут сопровождаться уведомляющими инструкциями по их применению.

Фармацевтические композиции, гели, упаковки и контейнеры настоящего изобретения полезны при лечении тестостероновой недостаточности и при лечении и/или предупреждении состояний и/или расстройств, связанных с тестостероновой недостаточностью.

Термины «лечить» или «лечение», используемые здесь, относятся к любому лечению состояния, расстройства или заболевания млекопитающих, ассоциированных с депрессивным расстройством, и включают, но не ограничиваются перечисленными, предупреждение состояния, расстройства или заболевания, происходящего у субъекта, который может быть предрасположен к состоянию, расстройству или заболеванию, но который пока еще не был диагносцирован как пациент, имеющий состояние, расстройство или заболевание; подавление состояния, расстройства или заболевания, например задержку развития состояния, расстройства или заболевания; облегчение состояния, расстройства или заболевания, например стимулирование регрессии состояния, расстройства или заболевания; или облегчение состояния, вызванного заболеванием или расстройством, например, путем прекращения симптомов заболевания или расстройства.

Термины «предупреждать» или «предупреждение» в отношении состояния, расстройства или заболевания означают отсутствие развития состояния, расстройства или заболевания, если они еще не происходили, или отсутствие дальнейшего развития состояния, расстройства или заболевания, если такое развитие состояния, расстройства или заболевания уже произошло.

Используемый здесь термин «тестостероновая недостаточность» относится к пониженным уровням тестостерона в сыворотке крови у субъекта по сравнению со средним уровнем у здорового субъекта того же возраста. Например, нормальные женщины репродуктивного периода продуцируют приблизительно 300 мкг тестостерона в сутки. Уровень их суммарного сывороточного тестостерона обычно колеблется от приблизительно 20 до приблизительно 80 нг/дл, составляя среднее значение около 40 нг/дл. У здоровых молодых женщин, например, средний уровень свободного тестостерона обычно составляет около 3,6 пг/мл. Однако некоторые факторы могут влиять как на общий уровень сывороточного тестостерона, так и на уровень свободного тестостерона в сыворотке. Например, у регулярно овулирующих женщин есть небольшое, но значимое повышение уровня тестостерона в плазме во время средней трети менструального цикла. Однако средний уровень тестостерона (1,2 нмоль/л или 33 нг/дл) и средний уровень свободного тестостерона (12,8 пмоль/л или 3,6 пг/мл) во время лютеальной и фолликулярной фаз значимо не отличаются. Кроме того, продукция тестостерона постоянно падает после 30 лет, поэтому уровень сывороточного тестостерона у 60-летней женщины составляет только 50% от уровня сывороточного тестостерона у 30-летней женщины. Хотя процент свободного тестостерона обычно не меняется с возрастом, наблюдали абсолютное падение свободного тестостерона. Это падение не происходит внезапно в период менопаузы, а наступает постепенно и непрерывно как результат возрастного снижения продукции андрогенов как надпочечниками, так и яичниками. Таким образом, женщины начинают испытывать симптомы, ассоциированные с менопаузой в период, непосредственно предшествующий менопаузе. Падение тестостерона с последующей менопаузой происходит из-за комбинации нарушений в яичниках, снижения почечной секреции и периферического превращения. Кроме того, например, после удаления яичников концентрации тестостерона снижаются приблизительно на 50%. Диагноз тестостероновой недостаточности известен обычному терапевту, практикующему в соответствующей области медицины.

Фармацевтические композиции и гели настоящего изобретения также полезны для лечения множества физиологических и психологических параметров и/или состояний, ассоциированных с тестостероновой недостаточностью у мужчины или женщины. Например, фармацевтические композиции и гели настоящего изобретения полезны для повышения либидо и улучшения сексуальной эффективности и/или лечения сексуальной дисфункции; нормализации гипогонадизма;

повышения минеральной плотности костей и соответствующих маркеров, повышения массы тела истощенных людей и снижения массы тела у ожиревших людей, улучшения мышечной массы и эффективности;

нормализации уровня глюкозы; улучшения симптомов диабетической ретинопатии, а также снижения потребности в инсулине у диабетических больных;

лечения, предупреждения или ослабления приступа катаракты; лечения, предупреждения или снижения проявлений сердечно-сосудистого заболевания, включая нормализацию гипертонии; и лечения ожирения;

нормализации уровня холестерина; нормализации аномальных кардиограмм у субъектов и лечения, предупреждения и уменьшения вазомоторных симптомов;

предупреждения изнуряющего синдрома вирусного иммунодефицита человека;

предупреждения остеопороза, остеопении, вагинальной сухости и утоньшения стенки влагалища; облегчения симптомов менопаузы и приливов; лечения предменструального синдрома;

лечения, предупреждения и ослабления приступа болезни Альцгеймера, деменции;

улучшения когнитивной способности, улучшения настроения и самооценки; лечения и/или профи

- 7 013430 лактики депрессивных расстройств; лечения, предупреждения или ослабления когнитивной дисфункции; лечения аутоиммунных заболеваний.

Настоящие фармацевтические композиции и гели можно также применять в «комбинированной терапии» совместно с другим гормоном, или стероидом, или фармацевтическим средством, которое повышает у субъекта уровень тестостерона, или совместно с эстрогенным гормоном, или другим фармацевтическим средством, таким как, например, антидепрессантное средство.

Изобретение также имеет отношение к способу получения фармацевтической композиции, например в форме геля или раствора, в соответствии с настоящим изобретением.

В одном из аспектов указанный способ включает стадию растворения тестостерона в растворе по меньшей мере одного С₂-С₆-спирта и по меньшей мере одного усилителя проницаемости (например, пропиленгликоля и/или изопропилмиристата) с перемешиванием.

В другом аспекте указанный способ включает стадию добавления воды к полученной смеси с перемешиванием.

Если желательно получить гель, к смеси при перемешивании добавляют по меньшей мере один загуститель, такой как СагЬоро1®.

Необязательно, к смеси при перемешивании добавляют основание/нейтрализующее средство, такое как триэтаноламин.

В другом аспекте изобретение имеет отношение к способу получения фармацевтической композиции или геля в соответствии с изобретением, включающему следующие стадии:

получение смеси, содержащей по меньшей мере один С₂-С₆-спирт, по меньшей мере один усилитель проницаемости (например, пропиленгликоль и/или изопропилмиристат) и тестостерон;

необязательно, добавление воды и перемешивание;

необязательно, добавление к смеси загустителя и перемешивание;

необязательно, добавление основания и опять перемешивание.

В другом аспекте изобретение также имеет отношение к применению геля или раствора в соответствии с настоящим изобретением для получения медицинского препарата для трансдермального применения при лечении физиологического состояния, связанного с андрогеновой/тестостероновой недостаточностью.

В другом аспекте настоящее изобретение имеет отношение к способу лечения.

В одном из воплощений указанный способ включает стадию введения тестостерона субъекту, нуждающемуся в нем.

В соответствии с одним из аспектов фармацевтическую композицию или гель настоящего изобретения накладывают на здоровую кожу, например на плечо или внешнюю часть руки, бедра или ноги.

Чтобы измерить и определить количество тестостерона, необходимое для доставки субъекту, нуждающемуся в нем, можно измерять концентрации сывороточного тестостерона, используя стандартные методики измерения.

На основании этого квалифицированный персонал будет знать, как определить количество принимаемой композиции в зависимости от точной дозировки тестостерона в указанной фармацевтической композиции.

Вообще, обычная дневная доза фармацевтической композиции в форме геля или раствора в соответствии с изобретением составляет от 2,5 до 5 г композиции в сутки.

Преимущества изобретения станут очевидными из следующих примеров, которые представлены ниже как иллюстрации, но не основание для ограничения изобретения.

Специалистам в этой области техники будет понятно, что настоящее изобретение может включать любое количество предпочтительных деталей, описанных выше.

Все цитирования, указанные в тексте, включены в описание путем отсылки во всей своей полноте.

Другие воплощения настоящего изобретения, не присутствующие здесь, которые очевидны специалистам в этой области техники, таким образом, также составляют объем и сущность настоящего изобретения. Если специально не оговорено, при практическом осуществлении настоящего изобретения могут применяться традиционные фармакологические и фармацевтические методики, которые находятся на вооружении в этой области техники.

- 8 013430

Примеры

Пример 1.

Исследования по чрескожной доставке тестостерона в составе гелевых композиций проводили на коже животных и людей, используя меченый (¹⁴С)-тестостерон и жидкостное сцинтилляционное титрование. Эти исследования позволили определить кинетические параметры (высвобождаемое количество через 24 ч и поток). Были исследованы два аспекта:

физико-химические исследования (растворимость тестостерона и вязкость геля);

чрескожная доставка (влияние концентрации тестостерона, природы загустителя, присутствия усилителей проницаемости).

Материалы и методы

1. Материалы.

Реактивы.

Тестостерон (РЬиКА);

¹⁴С-тестостерон (АтегзЬат).

Загустители.

СагЬоро1®934Р (СагЬ. 934Р) (Ро1ур1а8йс);

СагЬоро1®980 (СагЪ. 980) (Ьо! 4419, ЬаЪогаШпез Везшз Всоуезсо);

К1исе1®.

Нейтрализующие вещества.

Триэтаноламин (1о! 4343, ЬаЪогаШпез Везшз Всоуезсо).

Усилители проницаемости.

Тгап8си1апо1 (ОайеГоззе);

олеиновая кислота (ОА) (Рго1аЪо); пропиленгликоль (РО) (ОайеГоззе);

дипеларгонат пропиленгликоля (РОЭР) (ОайеГоззе).

Модель кожи животных.

Самец безволосой крысы, 5 недель.

Модель кожи человека.

Кусочки биопсии после абдоминальной пластики, белая женщина 35 лет.

2. Получение гелей, содержащих меченый тестостерон.

Загуститель (полимер) подвергали набуханию в течение ночи в необходимом количестве воды. Меченый и немеченый тестостерон растворяли в этаноле, по возможности вместе с усилителем проницаемости. Водную и спиртовую фазы смешивали, затем нейтрализовали с помощью триэтаноламина. Смешивание проводили с помощью шпателя до полной гомогенности. Для чрескожной доставки проводили оценку 17 композиций. Композиции приведены в табл. 1 (в массовых % по отношению к общей массе композиции). Композиции 13 и 14 соответствуют негелевым растворам.

Таблица 1

№	Тестостерон	Загуститель	95% этанол	Триэтаноламин	РО	ОА	Изопропилмиристат
11	1	1% СагЬ. 934 Р	58	1,35	0	0	0
12	0,5	1% СагЬ. 934 Р	58	1,35	0	0	0
13	0,5	0	58	0	0	0	0
14	0,75	0	58	0	0	0	0
15	2,5	1% СагЬ. 934 Р	58	1,35	0	0	0
16	2,5	1% СагЬ. 934 Р	58	1,35	5	0	0
17	2,5	2% К1исе1	58	1,35	0	0	0
18	2,5	2% К1исе1	58	1,35	5	0	0
19	2,5	1% СагЬ. 934 Р	58	1,35	0	0	5
20	2,5	0,5% СагЬ. 980	58	1,35	0	0	0
21	1	0,5% СагЬ. 980	58	0,6	0	0	0
22	1	0,5% СагЬ. 980	58	0,6	2	0	0
23	1	1% СагЬ. 980	58	1,35	2	0	0
24	1	1% СагЬ. 934 Р	58	1,35	2	0	0
25	1	1% СагЪ. 934 Р	58	1,35	2	2	0
26	1	0,5% СагЬ. 980	58	0,5	1	0	0
27	1	0,5% СагЬ. 980	58	0,5	1	0	0,5

(СагЬ. = СагЬоро1®).

- 9 013430

3. Протокол кинетики кожной проницаемости.

3.1. Ячейка для исследования кожной проницаемости.

Применяли ячейки статического потока, включающие два неодинаковых отделения (фиг. 1).

Верхнее цилиндрическое (сечение: 2,54 см²) донорское отделение 1 позволяет наносить композицию (в виде раствора или в виде формы для местного нанесения) на кожу 2. Это верхнее отделение 1 соединено с нижним отделением 4 с помощью металлического кольца.

Нижнее улавливающее отделение 4 (средний объем 10 мл) имеет также отверстие 2,54 см². Боковой канал 5, снабженный иглой и катетерной системой, позволяет осуществлять отбор образцов. Гомогенизирование среды в этом нижнем отделении осуществляют с помощью магнитной мешалки 3 (фиг. 1).

3.2. Биологическая мембрана.

Кожа животных.

Образцы биопсии кожи самца безволосых крыс (ЮР8-крысы, 5 недель) получали с вентральной поверхности живота. Жировые ткани, локализованные с внутренней стороны, удаляли и кожу разрезали для получения образцов площадью более 2,54 см². Каждый образец насаживали на нижнее отделение, направляя внешнюю поверхность кожи вверх.

Кожа человека.

Эксперименты проводили на образцах, полученных после абдоминальной пластической операции на вентральной поверхности живота у белой женщины 35 лет. Образцы использовали сразу после их получения и нарезали на дерматоме толщиной около 250 мкм.

3.3. Протокол исследования.

Два отделения 1 и 4 ячейки для исследования кожной проницаемости соединены с помощью фрагмента кожи 2. Улавливающее отделение 4 заполнено точно измеренным объемом 0,5%-ного раствора альбумина. Ячейку затем помещают на 15 ч в термостатируемую баню при 37°С, расположенную на перемешивающей платформе, до наступления равновесия между кожей и улавливающей средой.

Кинетическое измерение начинают после нанесения композиции на кожу 2. Наносят около 20 мг на 2,54 см² кожи. Спустя 24 ч из улавливающего отделения 4 через равномерные промежутки времени извлекали по 2 мл образца и сразу же вносили по 2 мл свежего раствора альбумина, чтобы поддерживать объем постоянным. Для каждой композиции использовали 5 ячеек для исследования проницаемости. После хранения на холоде образцы титровали с помощью жидкостной сцинтилляции.

4. Титрование С-тестостерона.

Образцы разделяют на две фракции по 1 мл, к каждой из которых добавляют 4 мл сцинтилляционной жидкости (Р1со Г1иог 40®), время измерения составляет 5 мин.

Образцы затем титруют с помощью жидкостной сцинтилляции, используя β-спектрофотометр (Весктап). В процессе сцинтилляции тушение приводит к сниженной чувствительности детектирования, которая точно оценивается по установленной калибровочной кривой, называемой кривой тушения. Для каждого образца измерение, зависящее от тушения, рассчитывают, используя внешний стандарт, и определяют истинную радиоактивность.

Результаты

1. Растворимость тестостерона.

Известное количество растворителя (2 мл) перемешивают при 37°С в закрытой колбе Эрленмейера. Постепенно добавляют фракции, начиная с известного количества тестостерона. Оставшееся количество тестостерона взвешивают, чтобы определить количество тестостерона в колбе Эрленмейера (по разнице).

С помощью инкрементного метода определяют растворимость тестостерона при 37°С в водноэтанольных смесях и в присутствии различных усилителей проницаемости, таких как пропиленгликоль (РО), олеиновая кислота (ОА), дипеларгонат пропиленгликоля (РОЭР), Тгап§си1о1.

Таблица 2

Растворимость тестостерона в различных носителях

Растворитель	РО (100%)	РО/ОА (50/50)	ОА (100%)	ΡΟϋΡ (100%)	Тгапзси1о1 (100%)
Растворимость (мг/мл)	86	79	66	18	140

- 10 013430

Растворимость тестостерона также оценивают как функцию содержания этанола.

Таблица 3

95%-ный этанол (мас./мас.)	Растворимость тестостерона
мг/мл	г/г
42/58	14	0,015
53/47	20	0,023
56/44	24	0,027
63/37	30	0,035
74/26	52	0,061
84/16	120	0,146
86/14	160	0,195
100/0	340	0,420

См. графики на фиг. 2.

2. Вязкость гелей.

Реологические свойства гелей характеризовали с помощью реометра контролируемого напряжения Сат-Меб, измерительные параметры: плоскость/плоскость, диаметр 2 см, зазор 1 мм, температура 20°С.

Реограммы изображали в виде потока с последующим определенным циклом сдвига:

восходящая фаза: повышение напряжения от 0 до 300 Н/м² в течение 2 мин;

плато: постоянное напряжение 300 Н/м² в течение 1 мин;

нисходящая фаза: понижение напряжения с 300 Н/м² до 0 в течение 2 мин.

Все гели характеризовались ослаблением сдвига (псевдопластичность), без какого-либо гистерезис ного цикла.

Проводили два реологических исследования: влияние содержания этанола на вязкость геля СагЬоро1®934; влияние содержания полимера на вязкость геля СагЬоро1®980. 2.1. Вязкость водно-спиртового геля СагЬоро1®934Р.

Влияние содержания этанола на водно-спиртовые гели СагЬоро1® исследуют с помощью изменения содержания 95%-ного этанола от 50 до 70%.

Таблица 4

Этанол (мас.%)	Вязкость (Па)	Максимальный градиент скорости (сек'¹)
50	15,00	22,5
55	6,500	50
60	2,375	140
65	0,800	400

При содержании этанола, превышающем 55%, вязкость становится меньше, с сильными вариациями в зависимости от содержания этанола. Вязкость повышается при 50%-ном этаноле.

2.2. Вязкость геля СагЬоро1® 980.

Влияние содержания полимера на водно-спиртовые гели при 40%-ном этаноле изучали, меняя содержание СагЬоро1®980 от 0,3 до 0,7%.

Вязкость измеряли на плато при напряжении 300 Н/м² в течение 1 мин.

Таблица 5

СагЬоро1®980 (%)	Вязкость (Па)	Максимальный градиент скорости (сек'¹)
0,3	0,125	1400
0,4	0,610	500
0,5	3,50	90
0,6	6,10	50
0,7	12	30

3. Кожная проницаемость тестостероновых композиций на коже крыс.

Кожную проницаемость композиций, представленных в табл. 1, оценивали т у1уо на коже крыс. Композицию 25 оценить невозможно из-за гетерогенности (разделения фаз). Результаты высвобожденного через 24 ч количества тестостерона и скорости высвобождения через 24 ч представлены в табл. 6.

- 11 013430

Таблица 6

Номер композиции	Тестостерон (%)	Высвобожденное количество (24 часа) (мкг/см²)	Скорость высвобождения (24 часа) (%)
11	1	28,1	35
12	0,5	11,6	29
13	0,5	24,4	61
14	0,75	36,7	61
15	2,5 .	16,2	8
16	2,5	30,9	15
17	2,5	10,5	5
18	2,5	36,9	18
19	2,5	44,5	22
20	2,5	18,5	9
/^4		ЛЛ 4 Л-
21	1	21,0	2/
22	1	33,5	42
23	1	34,4	43
24	1	36,9	46
25	1	-	-
26	1	30,0	37,5
27 .	1	62,0	77

Композиции 11-27: 8 мг/см² депонируют.

4. Проницаемость тестостерона на коже человека.

Композиции 26 и 27 оценивали на коже человека, совместно с композицией 15 в качестве контроля. Результаты детализированы ниже.

Композиция 26.

Средние значения параметров проницаемости для 5 ячеек

Время (час)	Количество Ц (мкг)
2	0
4	1,9
6	3,5
9	5,6
12	7,4
24	15,3

Количество/площадь Ц/8 (мкг/см²)	Стандартное отклонение Ц/8 (п-5)
0	0
0,75	0,4
1,4	0,6
2,2	0,6
2,9	0,8
6,01	1,6

Усредненный кинетический график представлен на фиг. 3. Средний поток: 0,26 мкг/см²-ч.

Композиция 27.

Время (час)	Количество Ц (мкг)
2	0
4	3
6	5,6
9	8,6
12	11,7
24	22,1

Количество/площадь Ц/8 (мкг/см²)	Стандартное отклонение Ц/8 (п=5)
0	0
1,2	0,9
22,2	1,1
3,4	1,2
4,6	1,4
8,7	2,5

Усредненный кинетический график представлен на фиг. 4. Средний поток: 0,39 мкг/см²-ч.

- 12 013430

Композиция 15 (сравнение).

Время (час)	Количество (мкг)	Количество/площадь ()/8 (мкг/см²)	Стандартное отклонение ()/8 (п=5)
' 2	0	0	0
л т	1,1	А К м_?“ги	Л Ί
6	2,2	0,85	0,5
9	6,6	1,3	0,6
12	4,3	1,7	0,7
24	9,1	3,6	1,2

Усредненный кинетический график представлен на фиг. 5.

Средний поток: 0,15 мкг/см²-ч.

Пример 2.

Материалы и методы.

1. Материалы.

[1,2,6,7-³Н]-тестостерон (Атегзйат ЬаЬогаШпез): =295, раствор 1 мКи/мл (37 МБк/мл) в этаноле; специфическая активность 99 Ки/моль (3,66 ТБк/моль), т.е. 336 мКи/мг (1о1 18).

Абсолютный этанол Саг1о ЕгЪа Ιοί Υ4Ν051154Ν

Материалы, контролируемые ЬаЬогаШпез Везтз

СагЬоро1®980

Ιοί 92010.4420

СагЬоро1®934

Ιοί /3898

Тестостерон

Ιοί 92039/4461

Изопропилмиристат

Триэтаноламин (ТЕА)

Пропиленгликоль (РСг)

10191169/5781

Ιοί 9304020/5721

Композиции для нанесения на кожу (масса на 100 г общей композиции)

Композиция	Тестостеро н	Загуститель	Абсолютный этанол	Нейтрализующее средство	Пропилен- ,гликоль	Изопропилмиристат
1 (конт.)	2,5	СагЬ.934: 1,0	57	ТЕА: 1,35	-	-
η	1 1	пол. л /с \/αιυ.Ήον. ν,υ	ио	'ТГГ Λ . л аг\ л ±2/Ζ-γ. υ,υυ	л с о_?и	-
3	1	СагЬ.980: 0,8	58	ТЕА: 0,80	0,5	-
4	1	СагЬ.980: 0,9	67	ЫаОН (0,1 М): 4,725		0,5
5	1	СагЬ.980: 0,5	67	ТЕА: 0,50	-	0,5

Композиции получают следующим образом.

Композиция 1.

г радиоактивного геля получают следующим образом:

100 мкл (100 мкКи) раствора радиоактивного тестостерона (³Н) высушивают и ресуспендируют с помощью

595 мг раствора, содержащего 2,5 тестостерона в 57 г абсолютного этанола;

391.5 мг основного геля, полученного путем набухания 1 г СагЬоро1®934 в 38,15 г воды; после окончательного набухания и перед применением клейкое вещество гомогенизируют несколько секунд с помощью дезинтегратора и1!га Тигах;

13.5 мг ТЕА.

Концентрация радиоактивности композиции: 100 мкКи/г геля, т.е. 0,8 мкКи и 200 мкг тестостерона для нанесения 8 мг (около 10 мкл) на ячейку площадью 1,77 см².

Композиция 2.

г радиоактивного геля получают в соответствии со следующим протоколом:

100 мкл (100 мКи) раствора радиоактивного тестостерона (³Н) высушивают и ресуспендируют с помощью

595 мг раствора, содержащего 1 тестостерона и 0,5 г ΡΘ в 58 г абсолютного этанола;

393 мг основного геля, полученного путем набухания 0,6 г СагЬоро1®980 в 38,7 г воды; после окончательного набухания и перед применением клейкое вещество гомогенизируют несколько секунд с по

- 13 013430 мощью дезинтегратора ИИга Тигах;

мг ТЕА, разведенного пополам водой.

Концентрация радиоактивности композиции: 100 мкКи/г геля, т.е. 0,8 мкКи и 80 мкг тестостерона для нанесения 8 мг (около 10 мкл) на ячейку.

Композиция 3.

595 мг раствора, содержащего 1 тестостерона и 0,5 г РС в 58 г абсолютного этанола;

398 мг основного геля, полученного путем набухания 0,8 г СагЬоро1®980 в 38,1 г воды; после окончательного набухания и перед применением клейкое вещество гомогенизируют несколько секунд с помощью дезинтегратора ИИга Тигах;

мг ТЕА, разведенного пополам водой.

Композиция 4.

685 мг раствора, содержащего 1 тестостерона и 0,5 г изопропилмиристата в 67 г абсолютного этанола;

267,75 мг основного геля, полученного путем набухания 0,9 г СагЬоро1®980 в 25,875 г воды; после окончательного набухания и перед применением клейкое вещество гомогенизируют несколько секунд с помощью дезинтегратора ИИга Тигах;

47,25 мг №-1ОН (0,1 М).

Композиция 5.

305 мг основного геля, полученного путем набухания 0,5 г СагЬоро1®980 в 30 г воды; после окончательного набухания и перед применением клейкое вещество гомогенизируют несколько секунд с помощью дезинтегратора ИИга Тигах;

мг ТЕА, разведенного пополам водой.

2. Методы.

Кожная абсорбция ίη νίίΐΌ.

Принцип.

Трансдермальное поглощение ίη νίίΐΌ изучают количественно на образцах биопсии человека, полученных с вентральной поверхности живота и нарезанных с помощью дерматома, помещенных в статическую диффузионную ячейку (ячейка Франца), которая делает возможным контакт дермы со средой для переживания ткани (рецепторная среда), в которой создают дозированное поглощение через кожу.

Ячейка.

Биопсию кожи помещают горизонтально между двумя частями ячейки, разграничивая, таким образом, два отделения:

1) эпидермальное отделение включает в себя стеклянный цилиндр, имеющий строго определенную поверхность 1,77 см², помещенный на верхнюю часть кожи;

2) кожное отделение, примыкающее к нижней стороне покрова, включает в себя резервуар с фиксированным объемом, имеющим боковой канал для отбора проб.

Два элемента соединены между собой с помощью зажима.

Нижнее отделение (кожное) заполняют с помощью среды для переживания ткани, составленной из раствора хлорида натрия в концентрации 9 г/л, дополненной бычьим сывороточным альбумином в концентрации 15 г/л.

В каждой временной точке из бокового канала полностью отбирают среду для переживания ткани и заменяют ее на свежую среду.

Нижняя часть ячейки термостатируется при 37°С. Гомогенность температуры и содержания в рецепторной среде поддерживается с помощью перемешивания (магнитная мешалка).

- 14 013430

Верхняя часть (эпидермальное отделение) открыта в направлении внешней стороны, экспонируя, таким образом, эпидермальную поверхность воздуха в лаборатории.

Получение образцов биопсии кожи с вентральной поверхности живота человека, нарезанных с помощью дерматома.

Это образцы кожи человека с вентральной поверхности живота, полученные в результате пластической операции от белокожих доноров. Кожу перед использованием хранят при -20°С. Примыкающий подкожный жир удаляют с помощью скальпеля и кожу нарезают толщиной около 0,5 мм с помощью дерматома. Для каждого анализа различные образцы кожи равномерно распределяют между партиями.

Основной протокол.

Ячейки Франца обычно устанавливают за день до нанесения исследуемой композиции. Эпидермальное отделение контактирует с атмосферой лаборатории, кожное отделение термостатируют при 37°С, и кожа контактирует с физиологической сывороткой, содержащей альбумин, примерно 17 ч. В этих условиях кожа хорошо гидратирована.

С помощью микропипетки на всю поверхность эпидермиса, ограниченную стеклянным цилиндром, наносят 10 мкл раствора (около 8 мкл, около 8 мкКи). В определенные моменты времени через 2, 4, 6, 8 и 24 ч через боковой канал отбирают образцы жидкости, содержащейся в кожном отделении. В каждый момент времени среду для переживания ткани полностью отбирают и заменяют свежей жидкостью.

В конце анализа обработанную поверхность кожи промывают 200 мкл различных растворителей в соответствии со следующим протоколом:

1- е промывание: Се1ау1оп®/Вода (1/9, мас./мас.);

2- е промывание: вода;

3- е промывание: Се1ау1оп®/вода (1/9, мас./мас.);

4- е промывание: вода;

5- е промывание: вода;

Поверхность нанесения затем вытирают с помощью Ο-Ιίρ®.

Затем эпидермис и дерму механически разделяют с помощью скальпеля и растворяют в 1 и 3 мл 8о1иепе® (Раскагб) соответственно.

Измерение радиоактивности.

Детекцию проводили с помощью жидкостной сцинтилляции, используя счетчик частиц Раскаг6-1псагЬ 4530.

Получение радиоактивных образцов.

Среду для переживания ткани, отобранную из нижнего отделения диффузионных ячеек, помещали непосредственно в 15 мл сцинтилляционной жидкости (Рюойиог 40К, Раскагб) и измеряли радиоактивность.

Промывные жидкости и Ο-Ιίρδ® помещали во флакон, содержащий около 30 мл 95-градусного этанола, и точно взвешивали. После инкубации в течение ночи при 4°С определяли радиоактивность точно взвешенных аликвот из этого разведения и затем ту же процедуру проводили со средами для переживания ткани.

Эпидермис и дерму необходимо вначале растворить в сильных органических основаниях. Их растворяют в течение 24 ч при 37°С в 8о1иепе 350® Раскагб (1 мл на 100 мг ткани), к которым добавляют 15 мл сцинтилляционной жидкости (Нюшс Ииог 30®, Раскагб) и проводят измерение.

Измерение радиоактивности.

С помощью метода внешней калибровки корректируют нормировку измерения, а также обращают внимание на тушение, чтобы получить счет распадов в минуту (брт) для истинной активности каждого образца. Для каждого образца вычитают фон в срт. Для каждой сцинтилляционной жидкости устанавливают специфичную кривую тушения.

Результаты выражают в массе или процентах вещества, обнаруженного в образцах, по отношению к введенному количеству, которые определяют с помощью нормировки разведенных подходящим образом калибраторов.

Трансдермальное поглощение.

Интенсивность трансдермального поглощения оценивали с помощью вычисления поглощения в процентах (%) нанесенного количества (Οί) как функции от времени % = (Ο1/ςί)χ100, где 01 - количество, поглощенное в момент времени 1.

Средний поток и поглощенное количество в каждый интервал времени также определяли и выражали соответственно в нг/см²/И и в нг.

Усредненные результаты соответствуют 6-8 экспериментальным определениям и сопровождены значениями стандартного отклонения (86).

Сравнение усредненных результатов проводили с помощью дисперсионного анализа.

- 15 013430

3. Результаты.

Концентрации, выраженные в процентах, представляют собой массу соединения на 100 г общей массы композиции.

Проницаемость тестостерона ΐπ υϊϊγο в ячейках Франца (накопленные значения).

Усредненные значения +/-86 как функция от времени

Композиция	Значения	Среда для переживания ткани в ячейке
		2 ч	4ч	6 ч	8ч	24 ч
1 п=6	% времени	0,23%	0,42%	0,54%	0,63%	0,97%
+/-86	0,08%	0,12%	0,13%	0,15%	0,24%

количество (нг)	501	902	1184	1378	2113
+/-86	169	254	278	322	518

2 п=8	% времени	0,40%	0,77%	1,03%	1,23%@	1,98%@
+/-86	0,18%	0,29%	0,36%	0,41%	0,59%

количество (нг)	351	666	892	1067	1721
+/-86	159	256	317	360	508

3 п-8	% времени	0,35%	0,72%	0,97%	1,17%	1,94%@
+/-86	0,21%	0,34%	0,41%	0,47%	0,59%

количество (нг)	313	639	868	1047	1735
+/-86	188	302	370	418	530

4 п=7	% времени	0,52%	0,94%@	1,21 %@	1,40%@	2,17%*
+/-86 '	0,15%	0,27%	0,34%	0,38%	0,58%

количество (нг)	462	834	1071	1243	1927
+/-86	133	237	301	341	514

5 п-7	% времени	0,56%	1,04%@	1,33%@	1,53%@	2,47%*
+/-86	0,49%	0,71%	0,78%	0,81%	0,99%

количество (нг)	484	899	1153	1324	2138
+/-86	424	615	673	707	861

@: разница по сравнению с контролем (дисперсионный анализ, тест Фишера, статистическая значимость р<5%).

*: разница по сравнению с контролем (дисперсионный анализ ΑΝΟνΑ, тест Фишера и Шеффе, статистическая значимость р<5%).

- 16 013430

Откорректированные количества (накопленные значения).

Композиция	Значения	Количества за 24 часа
		Е	ϋ	Е+1)	С+ϋ		Т
1 п=6	%	36,35%	0,98%	37,33%	1,95%	47,03%	85,33%
+/-8ά	8,15%	0,55%			9,69%

количество (иг)	79072	2131	81203	4244	102306	185622
+/-8ά	18516	1193			21075

2 п=8	%	44,35% @	1,55%	45,91%	3,53%	36,06%	83,95%
+/-84	8,44%	1,42%			5,23%

количество (иг)	38513	1349	39862	3069	31301	72844
+/-84	7325	1235			4539

3 п=8	%	40,56%	1,91%	42,47%	3,85%	41,47%	85,88%
+/-84	4,98%	1,02%			6,93%

количество (нг)	36200	1701	37900	3436	37015	76650
+/-84	4443	916			6189

4 п=7	%	44,56%	2,10%	46,66%	4,27%	31,77%	80,60%
• +/- 84	5,37%	0,65%			4,99%

количество (нг)	39506	1865	41371	3792	28164	71462
+/-84	4763	577			4419

5 п=7	%	29,27%°	2,97%*	32,24%	5,44%	46,58%	81,29%
+/-84	7,35%	1,18%			8,18%

количество (нг)	25393	2580	27973	4718	40397	70508
+/-84	6374	1022			7096

Е: эпидермис; Ώ: дерма; С: ячейка; промывки; Т: сумма.

°: разница с композицией 2, 3 и 4 (дисперсионный анализ, тест Фишера, р<5%).

- 17 013430

Проницаемость тестостерона ίπ νίΐΐΌ в ячейках Франца (ненакопленные значения). Усредненные значения +/-8Й как функция от времени

Компо -зиция	Значения	Среда для переживания ткани в ячейке
		2ч	4 ч	6 ч	8 ч	24 ч
1 п=6	%	0,23%	0,18%	0,13%	0,09%	0,34%
+/-8(1	0,08%	0,05%	0,04%	0,03%	0,12%

количество (нг)	501	401	281	194	735
+/- 8ά	169	101	91	59	256

поток (нг/см²/Ь)	141,60	111,34	79,41	54,88	29,95
+/-81	47,71	28,65	25,78	16,53	9,03

2 п=8	%	0,40%	0,36%@	0,26%@	0,20%*	0,75%*
+/-8(1	0,18%	0,13%	0,09%	0,07%	0,22%

количество (нг)	351	315	226	174	654
+/- 8ά	159	113	82	63	194

поток (нг/см²/Ь)	99,14	88,97	63,98	49,24	23,10
+/- 8ά	45,03	31,91	23,13	17,74	6,86

3 п=8	%	0,35%	0,36%@	0,26%@	0,20%*	0,77%*
+/-8(1	0,21%	0,15%	0,09%	0,07%	0,21%

количество (нг)	313	325	229	179	688
+/- 8ά	188	136	84	61	184

поток (нг/см²/Ь)	88,45	91,94	64,82	50,68	24,29
+/-8(1	53.09	38,33	23,86	17,25	6,49

4 п=7	%	0,52%	0,42%@	0,27%@	0,19%@	0,77%*
.+/-81	0,15%	0,15%	0,09%	0,06%	0,21%

количество (нг)	462	372	237	172	684
+/-81	133	132	81	50	185

поток (нг/см²/Ь)	130,51	105,15	67,00	48,49	24,16
+/-81	37,61	37,22	22,82	14,26	6,53

5 п=7	%	0,5б%@	0,48%*	0,29%*	0,20%(о}	0,94%*
+/-81	0,49%	0,23%	0,08%	0,05%	0,20%

количество (нг)	484	415	254	171	814
+/-81	424	198	73	46	177

поток (нг/см /Ь)	136,86	117,14	71,74	48,22	28,53
+/-81	116,80	55,98	20,67	13,04	6,26

- 18 013430

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Фармацевтическая композиция, включающая от 0,5 до 5,0% (мас./мас.) тестостерона;

от 40,0 до 75,0% (мас./мас.) по меньшей мере одного С₂-С₆-спирта;

от 0,1 до 5,0% (мас./мас.) по меньшей мере одного загустителя;

от 0,1 до 5,0% (мас./мас.) пропиленгликоля;

от 0,05 до 5,0% (мас./мас.) изопропилмиристата.
2. Фармацевтическая композиция, дополнительно включающая воду.
3. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой указанный С₂-С₆-спирт выбран из группы, состоящей из этанола, пропан-1-ола и пропан-2-ола и их смеси.
4. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-3, в которой указанный загуститель выбран из группы, состоящей из полимеров на основе акриловой кислоты, карбоксиметилцеллюлоз, гидроксипропилцеллюлоз, гидроксиэтилцеллюлоз, целлюлозных полимеров и их смеси.
5. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-4, в которой указанный загуститель включает по меньшей мере один загуститель, выбранный из группы, состоящей из карбомеров, например СагЬоро1® 980, СагЬоро1® 934Р, СагЬоро1® 1342, СагЬоро1® 1382, и их смесей.
6. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-5, дополнительно включающая основание, предпочтительно выбранное из группы, состоящей из триэтаноламина, гидроокиси натрия, гидроокиси аммония, гидроокиси калия, аргинина, аминометилпропанола, трометамина и их смесей.
7. Гель, полезный для трансдермальной доставки, включающий фармацевтическую композицию по любому из пп.1-6.
8. Дозированная упаковка, которая содержит фармацевтическую композицию по любому из пп.1-6 или гель по п.7.
9. Дозированная упаковка по п.8, которая представляет собой единичную дозированную упаковку или упаковку, рассчитанную на несколько приемов.
10. Дозатор с насосом, содержащий фармацевтическую композицию по любому из пп.1-6 или гель по п.7.
11. Дозатор по п.10, в котором насос является ручным насосом.
12. Способ получения фармацевтической композиции по любому из пп.1-6 или геля по п.7, включающий следующие стадии:

получение смеси, содержащей по меньшей мере один С2-С6-спирт, пропиленгликоль, изопропилмиристат и тестостерон;

добавление в смесь загустителя и перемешивание.
13. Способ по п.12, дополнительно включающий стадию добавления в смесь воды и повторное перемешивание.
14. Способ по п.12, дополнительно включающий стадию добавления в смесь основания и повторное перемешивание.