DK159454B - N6-substituerede adenosiner samt farmaceutiske praeparater indeholdende saadanne - Google Patents

Description

DK 159454 B

/Γ N -[1,2,3,4-tetrahydroquinolyl-(3)]adenosiner med coronar og cirkulatorisk aktivitet er beskrevet i DE-pa-tent nr. 2.139.107.

Opfindelsen angår hidtil ukendte adenosinanalo-5 ger, som har nogle af de samme aktiviteter som adeno-sin, men som har væsentlig længere virkningstid. De om-

C

handlede N -chromanyl- og thiochromanyl-adenosiner afviger fra andre tidligere beskrevne adenosinanaloger ved at have et gunstigt forhold mellem affiniteter til Al- og 10 A2-receptorer og meget ønskelige virkninger på centralnervesystemet, såsom antipsykotisk aktivitet. Endvidere har disse adenosinforbindelser også antiinflammatorisk aktivitet.

g

De N -substituerede adenosiner ifølge opfindel- 15 sen er ejendommelige ved at have formlen I: 00

20 N

mXj

HO OH

25 I

hvori R^ har formlen:

” -%€C

NH eller *

II I III

35 2

DK 159454 B

hvori Y betegner O, S eller S02; X og X' hver især uafhængigt betegner hydrogen, lavere alkyl, lavere alkoxy eller halogen, eller sammen betegner en methylendioxy-gruppe; A og B hver især uafhængigt betegner hydrpgen 3 eller lavere alkyl; B' betegner hydrogen eller lavere alkyl; diastereomere heraf eller blandinger deraf, eller et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.

Opfindelsen angår også et farmaceutisk præparat omfattende en terapeutisk effektiv mængde af en for-10 bindelse med formlen I sammen med en farmaceutisk acceptabel bærer.

I forbindelserne med formlen I skal udtrykket "lavere alkyl" omfatte en ligekædet eller forgrenet alkylgruppe med fra 1-6 carbonatomer, såsom f.eks.

15 methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, sec-butyl, isobutyl, tert-butyl, amyl, isoamyl, neopentyl, hexyl og lignende.

Halogen omfatter specielt fluor, chlor eller brom.

20 Lavere alkoxy betegner O-alkyl med fra 1-6 carbonatomer som defineret ovenfor for "lavere alkyl".

Forbindelserne med formlen I er egnede både i form af frie baser og i form af syreadditionssalte.

Begge former omfattes af opfindelsen. I praksis svarer 25 anvendelse af saltformen til anvendelse af baseformen.

Egnede farmaceutisk acceptable salte omfattet.af opfindelsen er sådanne, som er afledt af uorganiske syrer, såsom saltsyre og svovlsyre, og organiske syrer, såsom ethansulfonsyre, benzensulfonsyre, p-toluensulfon-30 syre og lignende, til opnåelse af henholdsvis hydro- chloridet, sulfatet, ethansulfonatet, benzensulfonatet, p-toluensulfonatet og lignende.

Syreadditionssaltene af de basiske forbindelser fremstilles enten ved opløsning af den frie base i 35 vandig eller vandig alkoholisk opløsning eller andre egnede opløsningsmidler indeholdende den pågældende 3

DK 159454 B

syre og isolering af saltet ved inddampning af op- i løsningen, eller ved omsætning af den frie base og syre i et organisk opløsningsmiddel, i hvilket tilfælde saltet udskilles direkte eller kan opnås ved koncentra-5 tion af opløsningen.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan indeholde asymmetriske carbonatomer. Opfindelsen omfatter de individuelle diastereomere og blandinger deraf. De individuelle diastereomere kan fremstilles eller iso- 10 leres ved kendte fremgangsmåder.

Opfindelsen angår fortrinsvis en forbindelse med formlen I, hvori har formlen II; X, X', A og B betegner hydrogen, og Y er som ovenfor defineret.

g

Specielt omfatter opfindelsen N -[4-chromanyl]- 15 adenosin eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf.

Opfindelsen angår også fortrinsvis en forbindelse med formlen I, hvori har formlen III; X og X' betegner hydrogen; B' betegner hydrogen eller methyl, og Y er som ovenfor defineret.

20 Opfindelsen angår også fortrinsvis en forbindelse med formlen I, hvori R^ har formlen III; X og X' betegner hydrogen; B' betegner hydrogen eller methyl; og Y betegner oxygen.

Specielt omfattes forbindelserne ifølge opfindel- 25 sen med formlen I, hvori R. har formlen III: 6 6 N -[3-chromanyl]adenosin, N -[trans-2-methyl,3-chromanyl]- g adenosin og N-[cis-2-methyl,3-chromanyl]adenosin.

Forbindelserne med formlen I kan hensigtsmæssigt syntetiseres ved omsætning af et 6-halogenpurinribosid med formlen IV med en amin med formlen II eller III i et indifferent opløsningsmiddel, såsom alkohol, eller et aprotisk opløsningsmiddel, såsom dimethylformamid, mellem ca. 25 og ca. 130°C i fra 1-48 timer. Det er hensigtsmæssigt at tilsætte en base, såsom triethyl- O c amin eller calciumcarbonat, til neutralisering af det som biprodukt ved reaktionen dannede hydrogen- 4

DK 159454 B

halogenid,, men dette kan også opnås ved anvendelse af et ekstra ækvivalent af den tricycliske amin.

Det er også hensigtsmæssigt, men ikke nødvendigt, at beskytte ribofuranose-hydroxylgrupperne som acetat- eller 5 benzoatestere, hvilke beskyttelsesgrupper kan fjernes med ammoniumhydroxid eller natriummethoxid efter g syntesen af den N -substituerede adenosin. Reaktionen kan illustreres som følger;

Hal

10 twi—N

ΟΓΙ x'\^ v f ...... VY τ'5 • x-%JL/ —' is H0 HQ/ «2 ell er

-------- HO OH

” -oo;

III

25 hvori Hal betegner halogen, fortrinsvis chlor eller brom, og Y, X, X', A, B og B' har de ovenfor for formlen I angivne betydninger.

Amin-=udgangsmaterialerne fremstilles ved fra litteraturen kendte fremgangsmåder, f.eks. I. Nordin 30 et al, USA patent nr. 4.203.895, 20. maj 1980; I.

Lockhart, engelsk patent nr. 1.168.228, 22. oktober 1969; engelsk patentskrift nr. 1.151.474, 7. maj 1969; I. Lockhart, USA patent nr. 3.629.289, 21. dec.

1971; N. Sarda et al, Eur. J. Med. Chem., 11(3), 251-6 35 (197.6); I. Lockhart et al, J. Med. Chem., 15(8), 863-5 (1972) og I. Lockhart et al, J. Chem. Soc. Perkin Trans., 2,2, 227-32 (1973).

5

DK 159454 B

Forbindelserne med formlen I har vist sig at have forskellige affiniteter til adenosinreceptorer (af bekvemmelighed betegnet A.^- og A2-receptorer).

Disse forbindelser er aktive i dyreforsøg, som kan for-5 udsige neuroleptisk aktivitet til behandling af alvorlige psykoser, såsom skizofreni. En anden anvendelse af forbindelserne er til behandling af inflammation.

Endvidere er forbindelserne ifølge opfindelsen 10 egnede som antihypertensive midler til behandling af højt blodtryk.

Farmakologisk vurdering.

Adenosinreceptorbinding - A^ receptor af-15 finitet (RBAl).

Fremstilling af membraner.

Hele hjerner, undtagen lillehjerne og hjernestamme, fra han-Long Evans rotter (150-200 g) blev homogeniseret i 30 voluminer iskold 0,05 M tris-HCl-20 puffer pH 7,7, ved anvendelse af en Brinkman Polytron PT-10 (indstilling på 6 i 20 sekunder) og centrifugeret i 10 minutter ved 20.000 x g (Sorvall RC-2), 4°C. Supematanten blev borthældt, og det sammenpressede bundfald blev gensuspenderet og centrifugeret som ovenfor. Det 25 sammenpressede bundfald blev gensuspenderet i 20 ml tris-HCl- puffer indeholdende 2 internationale enheder/ ml adenosindeaminase (Sigma type III fra kalvetarm-slimhinde), inkuberet ved 37°C i 30 minutter og derefter ved 0°C i 10 minutter. Homogenisatet blev igen centri-3 o fugeret, og det herefter opnåede sammenpressede bundfald blev gensuspenderet i iskold 0,05 M tris-HCl-puffer pH 7,7, til en koncentration på 20 mg/ml af oprindeligt fugtigt væv, hvorefter det straks blev anvendt .

35 6

DK 159454 B

Forsøgsbetingelser.

Vævshomogenisat (10 mg/ml) blev inkuberet i 0,05 M tris-HCl-puffer, pH 7,7, indeholdende 1,0 nM 3 6 3 t HJ-N-cyclohexyladenosin ([ H]-CHA) med eller uden test-forbindelser in triplo i en time ved 25°C. In- 3 kubationsvoluminet var 2 ml. Ubundet [ H]-CHA blev fraskilt ved hurtig filtrering under reduceret tryk gennem Whatman-glasfiberfiltre (GF/B). Filtrene blev skyllet 3 gange med 5 ml iskold 0,05 M tris-HCl-puffer, 1Q pH 7,7. På filtret tilbageholdt radioaktivt mærket ligand blev målt ved væskescintillationsspektrofoto-metri efter rystning af filtrene i en time eller mere på mekanisk rysteapparat i 10 ml Beckman Ready-Solv HP scintillationscocktail.

15

Beregninger.

Ikke-specifik binding blev defineret som den binding, der forekom i nærværelse af enlmM theophyllin. Koncentrationen af testforbindelse, som hæmmede den 2q specifikke binding med 50% (IC5Q) blev bestemt ved tilpasning af ikke-lineær computerkurve. Scatchard-plot blev beregnet ved lineær regression af linien opnået ved afsætning af mængden af bundet radioaktivt mærket ligand (pmol gram væv) mod 1 2 3 4 5 6 35 tbundet radioaktivt mærket ligand } _ Da af 2 fri radioaktivt mærket ligand 3 bundet radioaktivt mærket ligand var en lille del af 4 den totale tilsatte mængde, blev fri radioaktivt 5 mærket ligand defineret som koncentrationen (nM) af 6 til inkubationsblandingen tilført radioaktivt mærket ligand. Hill-coefficienten blev beregnet ved lineær regression af linien opnået ved afsætning af logaritmen af bundet radioaktivt mærket ligand mod logaritmen af 7

DK 159454 B

rbundet radioaktivt mærket ligand , * JJ ‘ - j e B , - bundet radioaktivt mærket ligand maks.

Det maksimale antal bindingssteder ) blev be regnet fra Scatchard-plot.

5

Adenosinreceptorbinding - A2~receptor affinitet (RBA2) Vævspræparat.

Hjerner fra Spraque-Dawley-rotter af blandet 10 køn med en vægt på 200-500 g blev købt hos Pel-Freez (Rogers, Arkansas). Friske hjerner fra han-Long-Evans afskærmede rotter (Blue Spruce Farms, Altamont, NY) gav i det væsentlige identiske resultater. Hjerner blev optøet og derefter holdt på is, mens striata blev 15 dissekeret ud. Striata blev splittet i 10 voluminer iskold 50 mM tris-HCl (pH 7,7 ved 25°C, pH 8,26 ved 5°C) (tris) i 30 sekunder i en polytron PT-10 (Brinkmann) ved indstilling på 5. Suspensionen blev centrifugeret ved 50.000 x g i 10 minutter, super-20 natanten blev borthældt, og det sammenpressede bundfald blev gensuspenderet i 10 voluminer iskold tris som ovenfor, gencentrifugeret, gensuspenderet til en koncentration på 1 g/5 ml og lagret i plastikflasker ved -70°C (stabilitet i mindst 6 mdr.). Efter behov 25 blev væv optøet ved stuetemperatur, splittet i eii polytron og anbragt på is til anvendelsen.

Inkubationsbetingelser.

Alle inkubationer varede i 60 minutter ved 25°C 30 i 12x75 mm glasrør indeholdende 1 ml tris med 5 mg

(oprindelig vævsvægt) rotte striatal-membraner, 4 nM [^H]-N-ethyl-adenosin-5'-carboxamid ([^H]NECA), 50 nM

g N -cyclopentyladenosin (til eliminering, af A^-receptor- binding), 10 mM MgCl„, 0,1 enheder/ml adenosindeaminase ^ 6 35 og 1% dimethylsulfoxid. N -cyclopentyladenosin blev opløst til 10 mM i 0,02 N HC1 og fortyndet i tris. Stam- g opløsninger og fortyndinger af N -cyclopentyladenosin

DK 159454B

8 kunne lagres ved -20uC'“i flere måneder. Testfor-bindelser blev opløst til 10 mM i dimethylsulfoxid på forsøgsdagen og fortyndet i dimethylsulfoxid til 100 x den endelige inkubationskoncentration. Til kontrol-

T

5 inkubationer blev sat det samme volumen (10 μΐ) dimethylsulfoxid? den resulterende koncentration af dimethylsulfoxid havde ingen indvirkning på bindingen.

3 [ H]NECA blev fortyndet til 40 nM i tris. Membransuspensionen (5 mg/0,79 ml) indeholdt en tilstrækkelig 10 mængde MgC^ og adenosindeaminase til opnåelse af en slutkoncentration på henholdvis 10 mM og 0/1 enheder/ ml ved inkubation. For fest-forbindeiser med ICc -

bU

værdier mindre end 1 μΜ var rækkefølgen for til- £ sætninger: Testforbindelse (10 μΐ), N -cyclopentyl- 3 15 adenosin (100 μΐ)/ [ H]NECA (100 μΐ) og membraner (0/79 ml). For testforbindelser med IC5Q-værdier større end 1 μΜ og med begrænset vandopløselighed var rækkefølgen for tilsætninger (samme voluminer): Testfor- £ bindelse, membraner, N-cyclopentyladenosin og 3 20 t H]NECA. Efter alle tilsætninger blev stativet med rør vortexbehandlet, og rørene blev derefter inkuberet i 60 minutter ved 25°C i et ryste-vandbad.

Stativet med rør blev vortexbehandlet igen efter halvdelen af inkubationstiden.

25 Inkubationerne blev afsluttet med filtrering -gennem 2,4 cm GF/B-filtre under reduceret tryk. For hvert glas foregik filtrering på følgende måde:

Glassets indhold blev udhældt på filteret, der blev sat 4 ml iskold tris til glasset, og indholdet. blev 30 udhældt på filteret, hvorefter filteret blev vasket 2 gange med 4 ml iskold tris. Filtreringen var afsluttet i løbet af ca. 12 sekunder. Filtrene blev anbragt i scintillationsflasker, der blev tilsat 8 ml formula 947 scintillationsvæske, og flaskerne blev henstillet natten 35 over og rystet, hvorefter der blev talt i en væske-scintillationstæller ved 40% virkningsgrad.

9

DK 159454 B

Data analyse.

Ikke-specifik binding blev defineret som g binding i nærværelse af 100 μΜ N -cyclopentyladenosin, og specifik binding blev defineret som total binding 5 minus ikke-specifik binding. IC^q blev beregnet ved vægtet ikke-lineær mindste kvadraters kurvétilpasning til mas s evirkningsligningen.

D

Y = T- S«d+K

10 hvori Y er cpm bundet T er cpm total binding uden lægemiddel S er cpm specifik-binding uden lægemiddel D er koncentrationen af lægemiddel 15 og K er IC^ af lægemidlet.

Vægtningsfaktorer blev beregnet under antagelse af, at standardafvigelsen var proportional med den beregnede værdi af Y. Ikke-specifik binding blev be-20 handlet som en meget stor (uendelig) koncentration af lægemiddel ved computeranalysen.

IC^Q-værdier (nM) for adenosin A^- og receptoraffinitet er vist i tabellen.

10

DK 159454 B

Rec epto rb ind i ng

Eksempel RBA-1 (nM) RBA-2 (nM) 1 88 600 2 6/33 340 5 3 14/2 1360 4 20 610 5 17 210 6 4/9 1090 7 7,8 1840 10 8 45 - - 490 9 8,1 1240 10 27 942 11 32 360 12 188 1540 15 13 160 2940 14 4930 37900 15 56,2 86,5 16 622 1390 20

Antipsykotisk vurdering.

Forbindelserne ifølge opfindelsen er hidtil ukendte forbindelser, der er egnede som farmaceutiske midler til behandling af psykoser. Den antipsykotiske

O C

aktivitet af repræsentative forbindelser ifølge opfindelsen blev bestemt ved "Mouse Activity and Screen Test Procedure (MAST)" beskrevet nedenfor:

Dyr.

ΟΛ

Ni ufastede Swiss-Webster-hanmus med en vægt på 20-30 g opdeles ligeligt i 3 grupper til hver lægemiddeldosis, der skal afprøves. Dvs., der blev opnået data for hvert dosisniveau ved hjælp af tre adskilte grupper på hver 3 mus.

35 1 1

DK 159454 B

Lægemidler.

Minimalt tre dosisniveauer (10, 30 og 100 mg/kg) afprøves for hvert lægemiddel. Lægemidler administreres intraperitonealt en time før afprøvning. Alle doser 5 beregnes son grund-forbindelse, όg gives i voluminer på 10 ml/kg. Forbindelser opløses eller suspenderes i 0,2% methocel. Kontroldyr injiceres med methocel.

Afprøvning.

10 En afprøvning i to dele begyndes 1 time efter injektion. Først udføres netprøven (ST)(se Pharmac. Biochem.

Behav. 6, 351-353, 1977). I korte træk består denne afprøvning i anbringelse af mus på individuelle trådnet, som derefter drejes 180° ved begyndelsen af en 15 60 sekunders iagtagelsesperiode. Antallet af mus, som falder fra det drejede net, registreres.

Umiddelbart efter netprøven påbegyndes sidste fase af afprøvningen ved at anbringe hver gruppe på 3 mus i et actophotometer (Life Sciences, 22, 1067-1076, 20 1978). Actophotometeret består af et cylindrisk kammer, i hvis center er anbragt en anden cylinder, som indeholder belysning til 6 fotoceller anbragt på det omgivende kammer. Seks lysstråleafbrydelser svarer til en tælling. Bevægelsesaktiviteten registreres ved hjælp 25 af computer med intervaller på 10 minutter i 60 minutter.

Data.

De fra netafprøvningen opnåede data udtrykkes 30 som procent mus, der falder fra nettet. Data vedrørende bevægelsesaktivitet af lægemiddelbehandlede mus sammenlignes med aktiviteten af med bæremiddel behandlede dyr og udtrykkes som procentvis hæmning af spontan bevægelse. Alle procenter angivet for hæmning af be-35 vægelse (LI) er baseret på data opsamlet over en time.

Begge faser af afprøvning klassificeres: A=60-100%; C=31-59%; og N=0-30%. En samlet dosisvurdering opnås ved følgende kriterier: 12

DK 159454 B

Vurdering af be- Sarnrrenholåt Vurdering af fald ved vægelseshaarnning_med_netprøve = Dosisvurdering

A - N eller C A

5 A - A C

C N eller C C

_Alle andre kombinationer=_N___ LAD betegner den laveste dosis, ved hvilken 10 der opnås en vurdering A. Forbindelser, som udviser en samlet dosis-vurdering på A ved en dosis på 100 mg/kg eller mindre, anses for aktive. Ved anvendelse af denne fremgangsmåde.opnåedes en samlet dosisvurdering A for de i tabellen angivne forbindelser ved de an-15 givne doser. Forbindelserne er omtalt i eksemplerne.

Antipsykotisk vurdering

DK 159454B

13 Hæmning af be- Fald 5 Eksempel Dosis (ir.g/kg) vægelsesaktivitet ved _hos mus_netprøve 1 3 91 33 10 94 33 _30_97_22 10 2 1 34 11 3 60 0 10 96 11 30 98 56 100 99 100 15 3 1 25 0 3 58 0 10 89 22 _30_97_22 41 36 22 20 3 87 11 10 94 11 30 99 100 _100 98_88 25 5 1 -14 0 3 30 0 10 89 22 30 97 55 _100_99 44 30 6 1 45 0 3 77 0 10 98 77 30 98 99 _100_100_99 35

Antipsykotisk vurdering --------- 14

DK 159454 B

Hæmning af be- Fald 5 Eksempel Dosis (mg/kg) vægelsesaktivitet ve<^ _hos mus_netprøve 7 0.3 6 0 1.0 57 0 3.0 95 22 10 9.0 96 55 _30.0_93_100 8 1 52 ' 0 3 84 11 10 95 0 15 30 98 11 _100_99_33 9 1 11 0 3 34 0 10 77 22 20 30 96 44 _100_97_77 10 1 -8 0 ,3 33 0 25 10 85 11 30 91 22 _100_~_96_55 11 1 13 0 3 27 0 30 10 90 11 30 95 22 _100_99_67 13 10 50 0 30 82 0 35 100_88_22 14 10 8 0 30 13 0- _100_2_0

Antipsykotisk vurdering 15

DK 159454 B

5 Hæmning af be- Fald

Eksempel Dosis (ng/kg) vægelsesaktivitet ved _____hos mus _netprøve 15 3 88 11 10 95 22 Ί g _ 30____97__55 16 3 15 0 10 69 22 30 98 55 15

Fremgangsmåde.

Voksne han-Long-Evans rotter eller dødningehovedaber vænnes til at trykke på et håndtag for 20 at undgå et pinefuldt elektrisk stød i fødderne.

Hvis dyret ikke trykker på håndtaget, modtager det et stød hvert 10. sekund, indtil der trykkes på håndtaget. Stød kan afsluttes ved tryk. på håndtaget.

Derefter vil der ikke være noget stød, sålænge der 25 trykkes på håndtaget i det mindste én gang hver 20. sekund.

Hvert dyr tjener som sin egen kontrol; en gang om ugen anvendes et tidsrum til opnåelse af basisopførsel, og i et andet tidsrum senere på ugen anvendes 30 lægemiddel. Når undgåelses-mønstre er fastlagt, undersøges virkningerne af standard-forbindelser og ukendte forbindelser.

16

DK 159454 B

Vurdering af reaktion Alle tilfælde programmeres elektronisk, og reaktionen på disse tælléseller anvendefe som feed-back til programmet.

5 Antihypertensiv vurdering (AHP3)

Egnetheden af forbindelserne ifølge opfindelsen som antihypertensive midler kan påvises ved deres effektivitet i standard farmakologiske afprøvninger, f.eks. til at bevirke en væsentlig formindskelse af 10 det gennemsnitlige arterielle blodtryk hos vågne rotter. Denne test er beskrevet nedenfor.

Fremgangsmåde til direkte måling af aorta-blodtryk og hjertefrekvens hos vågne rotter.

Den kontinuerligemåling af blodtryk, som hid-15 rører fra pulsen (BP), hos ikke-fikserede vågne rotter, som ved kirurgisk indgreb var forsynet med polyethylenkanyler, blev foretaget ved hjælp af et computer-dataoptagelsessystem (CADCS). Grundelementerne ved metoden er anbringelse af kanyler og CADCS.

2 0 Fremgangsmåde.

Anbringelser af kanyler:

Rotter blev bedøvet med telazol (1:1 tiletamin-HC1 og zolazepam-HCl); 20-40 mg/kg IM, og den nedadforløbende aorta blev blotlagt ved e.t centralt 25 snit. Kanyler fremstillet af polyethylenslange-blev indsat i aorta via et punkturhul af mindre størrelse under renal-arterierne. Punkturhullet blev lavet med en 23 G engangsnål, mens en del af aorta var aflukket med klemmer over og under punkturstedet. Kanylerne, som 30 bestod af en PE100 (0,86 mm ID) krop og en PE50 (0,58 mm ID) spids, blev fastgjort til en trokar, indført gennem psoasmuskelen og subkutant ført op langs ryggens midtlinie og ført ud mellem ørerne. Kanylerne blev fastgjort til psoasmuskelen og mellem scalulae 35 (3-0 suturer). Det centrale snit blev lukket i to trin (muskelen først og derpå skindet) ved anvendelse af fortløbende suturer (4-0). Hver rotte blev derefter indgivet 30.000 enheder penicillin subkutant 17

DK 159454 B

(penicillin G-prokain steril suspension).

Rotterne blev forsynet med fjeder-seletøj med svirvel beregnet til at beskytte kanylerne og at give rotten forholdsvis bevægelsesfrihed. Seletøjet var 5 fremstillet af nylon fasthægtet til en metalplade, til hvilken der var knyttet fjedertråde (18-8 rustfrit stål) til messingsvirvler. Hver polyethylen-. kanyle var ført gennem en fjeder' og via en svirvel forbundet med en tryk-transducer (model P23Gb; 10 Statham Instruments; Hato Rey, Puerto Rico) og en infusionspumpe (Sage model 234-7; Orion Research,

Cambridge, MA) ved hjælp af en PElOO-slange. Under afprøvning modtog hver rotte en kontinuerlig langsom infusion af hepariniseret saltvandsopløsning (ca.

15 400 1 eller 40 enheder heparin pr. 24 timer) til mod virkning af klumpdannelse. Yderligere "udskylninger" af kanylerne med hepariniseret saltvand blev udført, når det af pulsen fremkaldte aorta-tryk (systolisk minus diastolisk) var mindre end 25 mm Hg.

20 CADCS.

Det af pulsen fremkaldte blodtryk og hjertefrekvensen hos hver af 32 rotter blev målt hvert minut ved hjælp af 2 mikrocomputere i laboratoriet, som kommunikerede direkte med en dataopsamlings-computer.

25 De opsamlede data blev først lagret på dataopsamlings-disken og derefter overført til et magnetbånd til analyse og rapport-udvikling på hoved-computeren. Hele systemet omfattede modulering af det primære signal fra tryktransduceren, frembringelse af det primære 30 datasæt af et-minuts-værdier for systolisk, diastolisk og gennemsnitligt blodtryk og hjertefrekvens ved hjælp af mikrocomputeren i laboratoriet og lagring, analyse og rapportfrembringelse ved hjælp af hoved-computeren.

Transducerne var forbundet med analog-signal 35 tilpassende moduler. Modulerne tilvejebragte en indstillet frembringelsesspænding til transducerne, nødvendig forstærkning til at passe til mikroprocessorerne og et aktivt filter med ringe passage til at kompensere 18

DK 159454 B

for forvrængningen i form af trykbølge frembragt af den fleksible, væskefyldte snævre kanyle. Forvrængningen var 22-26 Hz, og dette gav et pålideligt skøn med hensyn til både systolisk og diastolisk blodtryk.

5 Mikrocomputerne (en for hver af to grupper på 16 rotter) var forbundet til "input komponenterne" gennem modul-interface-enhederne, en analog-til-digital-omdanner for signalet i form af trykbølge og digitalindgangerne for dosis- og eventmarkør-kontakter.

10 Mikrocomputeren regulerede den sekventielle tilvejebringelse af data fra modul-interface-enhederne ved hjælp af en indre synkron klokkeslæt-tid-baseret generator. Ved anvendelse af den tidsbaserede generator som reference blev blodtryksværdier og markør-kontakt-15 status for hver af de 32 stationer optaget hvert 10 msek.. Mikrocomputeren behandlede hver af blodtryksværdierne efterhånden som de blev modtaget, til frembringelse af "løbende gennemsnits"-værdier for hjertefrekvens og gennemsnitlige systoliske og diastoliske 20 blodtryk.

Ved testning efter ovenfor beskrevne metode gav forbindelser fra de anførte eksempler nedenstående ændringer i MAP og hjertefrekvens. LAD betegner den lavest afprøvede dosis, ved hvilken der opnås >10% re-25 duktion i blodtryk 4 timer i trade.

19

DK 159454 B

MAP = gennemsnitligt arterielt tryk.

HR = hjertefrekvens.

Eksempel Dosis Time nr. rng/kg -j-3-5-η-ψ~ 1 10 MAP 20%+ 14%+ 12%+ 15%+ 10%+ _HR 21% t 14%+ 15%+ 15%+ 26% + 2 10 MAP 14%+ 20%+ 19%+ 16%+ 12%+ 10 HR 27%+ 34%+ 23%+ 11%+_1% + 3 10 MAP 29%+ 32%+ 47%+ 32%+ 33%+ _HR 35%+ 47%+ 54%+ 40%+ 36% + 4 10 MAP 38%+ 23%+ 21%+ 23%+ 20%+ _HR 33%+ 34%+ 22%+ 21%+ 13% + 15 5 10 MAP 18%+ 25%+ 24%+ 16%+ 12%+ _HR 3% +_4% + 0% 4% t_5% f 6 10 MAP 6%+ 11%+ 12%+ 9%+ 2% + _HR 19%+ 25%+ 18%+_4% + 14% + 7 10 MAP 49%+ 36%+ 29%+ 23%+ 21%+ 20 HR 61%+ 53%+ 35%+ 13%+ 17% + 8 10 MAP 33%+ 22%+ 28%+ 17%+ 17%+ _HR 17%+_4% +_7% +_4%i_6% + 9 10 MAP 10%+ 20%+ 17%+ 13%+ 3%+ HR 13%+ 3%+ 19%+ 0% 3% + 10 3 MAP 21%+ 17%+ 5%+ 5%+ 6%+ _HR 18%+ 16%+ 0% 10%+ 10%t 11 10 MAP 23%+ 25%+ 19%+ 8%+ 15%+ _HR 1%+ 0% 0% 17%+_8% + 13 10 MAP 27%+ 20%+ 17%+ 14%+ 5%+ 30 _HR 22%+ 16%+ 14%+_5%+_7% + 14 10 MAP 8% + 0% 5% + 5%+ 12% + HR 4% +_2%+_5% + _4% f_4% + 35 20

DK 159454 B

Antiinflammatorisk afprøvning.

Bestemmelse af en anden aktivitet foretages ved forsøg med carrageenan-lungehindebetændeIse. Carrageenan-lungehindebetændelse fremkaldes som tidligere beskrevet 5 af Garter, G.W., et al, i J. Pharm. Pharmacol 34:66-67, 1982. Carrageenan (310 yg/rott) injiceres intrapleuralt i 0,25 ml pyrogenfrit saltvand. Fire timer senere aflives rotterne, og der sættes 2 ml opløsning af phenolrødt (325 mg phenolrødt i en liter 0,05 M ^ phosphatpufret saltvand) til hver pleuralkavitet.

Indholdene i kaviteterne blandes og overføres til reagensglas. En portion· på 50 μΐ fjernes fra hvert reagensglas, og exudatceller tælles efter lysering af røde blodceller (med Zapoglobin; Coulter Electronics, 15

Hialeah FL) ved anvendelse af en Coulter model ZBI tæller. Den tilbageværende blanding af exudat og phenolrødt centrifugeres ved 750 x g i 15 minutter.

100 μΐ af supernatantvæsken fortyndes med 3,9 ml phosphatpuffer (0,072 M tribasisk natriumphosphat, 20

Na^PO^^^O i vand) og absorbansen måles ved 560 nm.

Exudatvolumen beregnes som følger: V 2 (A2 - A3)

V1 ' <A3 - V

25 hvor = ukendt volumen af exudat, = volumen af farvestof sat til kavitet (2 ml), A^ = absorbans af exudat (antaget af være nul), = absorbans af phenolrødt-opløsning, A^ = absorbans af exudat og phenolrødt-opløsning.

^ Hæmning af exudat eller dannelse heraf be regnes ved følgende ligninger: 21

DK 159454 B

% hæmning (exudat) = exudatvolumen (bærestof) - exudatvolumen (inhibitor) exudatvolumen (bærestof) % hæmning (celletælling) = 5 antal celler (bærestof) - antal celler (inhibitor) antal celler (bærestof) ID,-Q-værdier beregnes ved Probit-analyse.

Forbindelsen ifølge eksempel 1 blev administreret en time før carrageenan-injektion.

10 De biologiske data, som viser antiinflammatorisk aktivitet, er anført i følgende tabel.

Afprøvning med carrageenan- _lungehindebetændelse_ 15 Eksempel Dosis % hæmning nr._mg/kg_Exuda t_WBC_ 5 3 22,7 27,2 10 40,2 68,0 6 1 50,9 49,8 20 3 42,2 37,5 9 3 12,5 13,0 30 31,9 30,6 15 1 13,5 -10,7 _10_63,9_-16,9_ 25 Lægemiddel administreret IP.

Opfindelsen angår således også et farmaceutisk præparat til behandling af psykoser eller inflammationer omfattende en tilsvarende antipsykotisk eller antiinflam-30 matorisk effektiv mængde af en forbindelse med formlen I, som defineret ovenfor, sammen med en farmaceutisk acceptabel bærer.

Til fremstilling af farmaceutiske præparater ud fra forbindelserne ifølge opfindelsen kan indifferente 35 farmaceutisk acceptable bærere være enten faste eller 22

DK 159454 B

væskeformige. Faste præparater omfatter pulvere, tabletter, dispergerbare granulater, kapsler, cachetter og suppositorier. En fast bærerkan være et eller flere stoffer, som også kan virke som fortyndingsmidler, 5 smagsstoffer, opløselighedsfremmende midler, smøremidler, suspenderingsmidler, bindemidler eller tablet-disintegreringsmidler; den kan også være et indkapslingsmateriale. I pulvere er bæreren et findel t fast stof, der er blandet med findelt aktiv forbindelse.

10 I tabletten er den aktive forbindelse blandet med bærer , som har de nødvendige sammenbindende egenskaber, i egnede forhold og presset til den ønskede form og størrelse. Pulvere og tabletter indeholder fortrinsvis fra 5 eller 10 til ca. 70% aktiv bestanddel. Egnede 15 faste bærere er magnesiumcarbonat, magnesiumstearat, talkum, sukker, lactose, pectin, dextrin, stivelse, gelatine, tragant, methylcellulose, natriumcarboxy-methylcellulose, en lavtsmeltende voks, kakaosmør og lignende. Udtrykket "præparat" skal omfatte 20 formuleringen af aktiv forbindelse med indkapslingsmateriale som bærer til opnåelse af en kapsel, i hvilken den aktive bestanddel (med eller uden andre bærere) er omgivet af bærer, som således er i forbindelse med den. Ligeledes omfattes cachetter. Tabletter, pulvere, 25 cachetter og kapsler kan anvendes som fast doseringsformer egnet til oral administrering.

Til fremstilling af suppositorier smeltes først en lavtsmeltende voks, såsom en blanding af fedtsyre-glycerider eller kakaosmør, og den aktive bestanddel 30 dispergeres homogent deri, f.eks. ved omrøring.

Den smeltede homogene blanding udhældes derefter i forme af egnet størrelse og henstilles til afkøling, hvorved den størkner.

Væskeformige præparater omfatter opløsninger, 35 suspensioner og emulsioner. Som eksempler kan nævnes vand- eller vand-propylenglycol-opløsninger til parenteral injektion. Væskeformige præparater kan også 23

DK 159454 B

formuleres i opløsning i vandig polyethylenglycol-opløsning. Vandige opløsninger egnet til oral anvendelse kan fremstilles ved opløsning af den aktive bestanddel i vand og tilsætning af egnede farvestoffer, smags-5 stoffer, stabiliseringsmidler og fortykningsmidler efter ønske. Vandige suspensioner egnet til oral anvendelse kan fremstilles ved dispergering af findelt aktiv bestanddel i vand med viskost materiale, dvs. naturlige eller syntetiske gummier, harpikser, 10 methylcellulose, natriumcarboxymethylcellulose og andre velkendte suspenderingsmidler.

Opfindelsen omfatter også faste præparater, der er beregnet til kort før anvendelse at omdannes til væskeformige præparater til enten oral eller parente-15 ral administrering. Sådanne væskeformer omfatter opløsninger, suspensioner og emulsioner. Disse specielle faste præparater foreligger mest hensigtsmæssigt i enhedsdosisform og anvendes som sådanne til opnåelse af en enkelt væskeformig dosisenhed. Alternativt kan fore-20 ligge en så stor mængde fast stof, at der efter omdannelse til væskeform kan opnås flere individuelle væskedoser af afmåling af forudbestemte voluminer af det væskeformige præparat, f.eks. med en sprøjte, teske eller anden volumetrisk beholder. Når der på denne 25 måde fremstilles flere væskeformige doser, er det fore-trukkent af opbevare den ubrugte del af væskedoserne ved lav temperatur (dvs. under køling) for at forsinke en mulig nedbrydning. De faste præparater, der er beregnet til omdannelse til væskeform, kan foruden 30 aktivt stof indeholde smagstoffer, farvestoffer, stabiliseringsmidler, buffere, kunstige og naturlige sødestoffer, dispergeringsmidler, fortykningsmidler, opløselighedsfremmende midler og lignende. Den væske, som anvendes til fremstilling af det væskeformige 35 præparat, kan være vand, isotonisk vand, ethanol, glycerol, propylenglycol og lignende samt blandinger 24

DK 159454 B

deraf. Naturligvis vælges den væske som anvendes, under hensyn til administreringsvejen, f.eks. er væskeformige præparater indeholdende store mængder ethanol ikke egnede til parenteral anvendelse.

5 Det farmaceutiske præparat forekommer fortrins vis i enhedsdosisform. I en sådan form er præparatet opdelt i enhedsdoser indeholdende passende mængder aktiv bestanddel. Enhedsdosisformen kan være et indpakket præparat, hvor indpakningen indeholder adskilte 1q mængder præparat, f.eks. indpakkede tabletter, kapsler og pulvere i flasker eller ampuller. Enhedsdosisformen kan også være en kapsel, cachet eller tablet i sig selv, eller den kan være et passende antål af en hvilken som helst af disse indpakkede former.

15 Mængden af aktiv forbindelse i en enhedsdosis præparat kan være varieres eller indstilles fra 1 mg til 500 mg, fortrinsvis fra 5-100 mg, afhængigt af den specielle anvendelse og styrken af den aktive bestanddel. Præparaterne kan om ønsket også indeholde 20 andre hermed forenelige terapeutiske midler.

Ved terapeutisk anvendelse er dosisområdet for et pattedyr med en vægt på 70 kg fra 0,1 til 150 mg per kg legemsvægt per dag, fortrinsvis fra 1-50 mg per kg legemsvægt per dag.

Doserne kan imidlertid varieres afhængigt af patientens λ o krav, alvoren af den tilstand som behandles, og den forbindelse som anvendes. Bestemmelse af den passende dosis til en speciel situation foretages af en fagmand. Sædvanligvis startes behandlingen med doser, der er mindre end den optimale dosis af forbindelsen. Derefter forøges dosis langsomt, indtil den optimale effekt under omstændighederne opnås. Af bekvæmmeligheds-grunde kan den totale daglige dosis, om ønsket, opdeles og administreres i portioner i løbet af dagen.

__ Opfindelsen belyses nærmere ved hjælp af de o5 følgende eksempler.

25

DK 159454 B

Eksempel 1 g N -[4-Chromanyl]adenosin.

En blanding af 0,97 g 6-chlorpurinribosid, 0,7 g 4-chromanylamin-hydrochlorid og 0,94 g tri-5 ethylamin tilbagesvales i 30 ml ethanol under nitrogen i 20 timer. Opløsningsmidlet afdampes til tørhed.

Det tilbageværende faste stof behandles med koldt vand.

Den klare vandige opløsning fradekanteres, og resten opløses i ethanol. Flygtige stoffer afdampes under 10 vakuum. Dette gentages, hvorefter der opnås 0,9 g (66%) N^-[4-chromanylJadenosin med smeltepunkt 125-130°C (skum).

Analyse for ^9^21^5^5

Beregnet: C = 57,14, H = 5,29, N = 17,53 15 Fundet : C = 56,67, H = 5,14, N = 17,57

Eksempel 2 g N -[3-Thiochromanyl Jadenosin.

En blanding af 2,Og 6-chlorpurinribosid, 1,76 g 20 3-thiochromanylamin-hydrochlorid og 1,74 g triethyl-amin tilbagesvales i 50 ml ethanol under nitrogen i 20'timer. Ethanol afdampes til tørhed, og resten opløses i vand og ekstraheres med ethylacetat. Den organiske ekstrakt tørres over MgSO^/ og filtreres, 25 og opløsnigsmidlet afdampes til opnåelse af et fast stof. Dette renses ved flash-chromatografi på silica-gel ved anvendelse af 5% MeOH-chloroform som eluent.

Ved afdampning af opløsningsmidlet fra rene fraktioner opnås 2,16 g (74%) N^-(3-thiochromanyl)adenosin 30 med smeltepunkt 112-116°C.

Analyse for cigH2iN5°4S

Beregnet: C = 54,92, H = 5,09, N = 16,85, S = 7,71 Fundet : C = 54,75, H = 5,26, N = 16,50, S = 7,53

DK 159454 B

26

Eksempel 3 g N - [ 7-Methoxy-3-chromanyl] adenosin.

En blanding af 0,56 g 6-chlorpurinribosid, 0,5 g 7-methoxy-3-chromanylamin-hydrochlorid og 0,48 g 5 triethylaiain tilbagesvales i 25 ml ethanol under nitrogen i 20 timer. Opløsningsmidlet afdampes til tørhed, og resten behandles med koldt vand. Den klare vandige opløsning fradekanteres, og resten opløses i ethanol, hvorefter flygtige stoffer afdampes under 10 vakuum. Det rå faste stof renses ved flash-chroma-tografi på silicagel ved anvendelse af 5%nethanol-chloroform som eluent. Ved afdampning af opløsningsmiddel fra rene fraktioner efterfulgt af krystallisation fra CHCl-j-hexan opnås 0,35 g (42%) N^-[7-methoxy-3-15 chromanylJadenosin med smeltepunkt 205-207uC.

Analyse for C2()H23N506

Beregnet: C = 55,93, H = 5,39, N = 16,30 Fundet : C = 55,53, H = 5,10 N = 16,44 20 Eksempel 4 6 N -[3-Chromanyl]adenosin.

Titelforbindelsen fremstilles i det væsentlige som beskrevet i eksempel 3, idet 7-methoxy-3-chromany1-amin-hydrochlorid erstattes med 3-chromanylamin-25 hydrochlorid; smeltepunkt 109-112°C.

Analyse for ci9H2iN5°5

Beregnet: C = 57,14, H = 5,30, N = 17,53 Fundet : C = 56,52, H = 5,77, N = 17,36 30

Eksempel 5 g N -[8-Chlor-3-chromanyl]adenosin.

En blanding med 2,25 g 6-chlorpurinribosid, 1,99 g 8-chlor~3-chromanylamin-hydrochlorid og 1,98 g 35 triethylamin tilbagesvales i 55 ml ethanol under 27

DK 159454 B

nitrogen i 22 timer. Efter afkøling udkrystalliserer fast stof, som frafiltreres og genbehandles med kogende ethanol. Opnået fast stof frafiltreres og tørres til opnåelse af 1,68 g (50%) N^-[8-chlor-3-chromanyl]-5 adenosin med smeltepunkt 137-139°C.

Analyse for ci9H20N5O5C1

Beregnet: C = 52,59, H = 4,64, N = 16,14, Cl = 8,17

Fundet : C = 52,96, H = 5,07, N = 15,77, Cl = 8,33 10 Eksempel 6 g N -[6-Methoxy-3-chromanyl]adenosin.

Titelforbindelsen fremstilles i det væsentlige som beskrevet i eksempel 3, idet 7-methoxy-3-chromanyl-amin-hydrochlorid erstattes med 6-methoxy-3-chromanyl-15 amin-hydrochlorid; smeltepunkt 90-95°C.

Analyse for C20H23N5°6

Beregnet: C = 55,94, H = 5,40, N = 16,31

Fundet : C = 55,82, H = 5,45, N = 16,06 20 Eksempel 7 6 N -(cis-2-Methyl-3-chromanyl]adenosin.

Titelforbindelsen fremstilles i det væsentlige som beskrevet i eksempel 3, idet 7-methoxy-3-chromanyl-amin-hydrochlorid erstattes med cis-2-methyl-3-25 chromanylamin-hydrochlorid; smeltepunkt 90-92°C.

Analyse for C2oH23N5°5

Beregnet: C = 58,10, H = 5,61, N = 16,94

Fundet : C = 57,56, H = 5,76, N = 16,58 1

Eksempel 8 /Γ N -[trans-2-Methyl-3-chromanyl]adenosin.

Titelforbindelsen fremstilles i det væsentlige som beskrevet i eksmpel 1, idet 4-chromanylamin-

DK 159454B

28 hydrochlorid erstattes med trans-2-methyl-3--chromanyl-amin-hydrochlorid; smeltepunkt 85-88°C.

Analyse for C^H^N^-O^

Beregnet: C = 58,10, H = 5,61, N = 16,94 5 Fundet : C = 57,45, H = 5,15, N = 16,50

Eksempel 9 C.

N -[6,7-Diméthyl-3-chromanyl] adenosin.

Titelforbindelsen fremstilles i det væsentlige 10 som beskrevet i eksempel 1, idet 4-chromanylamin- hydrochlorid erstattes med 6,7-dimethyl-3-chromanyl-amin-hydrochlorid; smeltepunkt 170-172°C.

Eksempel 10 6 15 N - [7,8-Dimethyl-3-chromanyl ]adenosin.

Titelforbindelsen fremstilles i det væsentlige som beskrevet i eksempel 5, idet 8-chlor-3-chromanyl-amin-hydrochlorid erstattes med 7,8-dimethyl-3-chromanylamin-hydrochlorid; smeltepunkt 170-172°C.

20 Analyse for C2iH25N5°5

Beregnet: C = 59,00, H = 5,90, N = 16,38

Fundet : C = 58,71, H = 5,92, N = 16,25

Eksempel 11 25 N^-[2,7, 8-Trimethyl-3-chromanyl ]adenosin.

Titelforbindelsen fremstilles i det væsentlige som beskrevet i eksempel 1, idet 4-chromanylamin-hydrochlorid erstattes med 2,7,8-trimethyl-3-chromanyl-amin-hydrochlorid; smeltepunkt 109-113°C.

30 Analyse

Beregnet: C = 59,85, H - 6,16, N = 15,86

Fundet : C = 59,46, H = 6,23, N = 15,66

Eksempel 12 g 35 N - [8-Isopropyl-5-methyl-3-chiDomanyl.]adenosin.

Titelforbindelsen fremstilles i det væsentlige som beskrevet i eksempel 1, idet 4-chromanylamin-hydrochlorid ersattes med 8-isopropyl-5-methyl-3-

DK 159454 B

29 o chromanylamin-hydrochlorid; smeltepunkt 98-101 C.

Analyse for C23H29N5°5

Beregnet: C = 60,65, H = 6,42, N = 15,31

Fundet : C = 59,53, H = 6,57, N = 14,21 5

Eksempel 13 g N -[7-t-Butyl-3-chromanylJadenosin.

Titelforbindelsen fremstilles i det væsentlige scxn beskrevet i eksempel 1, idet 4-chromanylamin-hydro-10 chlorid erstattes med 7-t-butyl-3-chromanylamin; smeltepunkt 88-90°C.

Analyse for C23H29N5°5*0'4H20 Beregnet: C = 60,65, H = 6,42, N = 15,37

Fundet : C = 59,86, H = 6,61, N = 14,47 15

Eksempel 14 g N -[2,2-Dimethyl-5,7-dimethoxy-4-chromanyl]-adenosin.

Titelforbindelsen fremstilles i det væsentlige 20 som beskrevet i eksempel 1, idet 4-chromanylamin- hydrochlorid ersattes med 2,2-dimethyl-5,7-dimethoxy- 4-chromanylamin; smeltepunkt 111-113°C.

Analyse for C23H29N5°7

Beregnet: C = 56,67, H = 5,99, N = 14,36 25 Fundet : C = 56,34, H = 6,08, N = 14,37

Eksempel 15 g N -[4-ThiochromanylJadenosin.

Titelforbindelsen fremstilles i det væsentlige 30 som beskrevet i eksempel 3, idet 7-methoxy-3- chromanylamin-hydrochlorid ersattes med 4-thiochromanyl-hydrochlorid; smeltepunkt 105-107°C.

Analyse for ci9H21N5S04/ H2°

Beregnet: C = 53,3, H = 5,27, N = 16,35, S = 7,49 35 Fundet : C = 53,34, H = 5,05, N = 15,95, S = 7,42

DK 159454 B

30

Eksempel 16 r 6 N -[4-Benzothiopyran-l,l-dioxid.]adenosin.

Titelforbindelsen fremstilles i det væsentlige som beskrevet i eksempel 3, idet 7-methoxy-3-chromanyl- 5 amin-hydrochlorid ersattes med 4-benzothiopyran-l,1- dioxid-amin; smeltepunkt 125-127°C.

Analyse for Cn _HolN_S0,, 0,85 CH-OH 19 21 5 6 3

Beregnet: C = 50,22, H = 5,18, N = 14,75, S = 6,75 Fundet : C = 50,21, H = 5,24, N = 14,35, S = 6,89 10

Claims (7)

1. 2-1 DK 159454 B
2. 1. N -substitueret adenosin med formlen Λ 5 u3 ηοίΛ 10 HO OH I hvori R^ har formlen II eller III —^ΧΤ,·ι“ι —^XX« ^ II I III NH 20 hvori Y betegner O, S eller SO2; X og X' hver især uafhængigt betegner hydrogen, lavere alkyl, lavere alkoxy eller halogen, eller sammen betegner -O-Ct^-O-; A og B hver især uafhængigt betegner hydrogen eller lavere 25 alkyl; B' betegner hydrogen eller lavere alkyl; diaste-reomere heraf eller blandinger deraf, eller et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.
3. 2. Forbindelse ifølge krav 1, hvori har formlen II, kendetegnet ved, at X, X', A og B 30 betegner hydrogen.
4. 3. Forbindelse ifølge krav 2, kendeteg-net ved, at den er N -(4-chromanyl)adenosin.
5. 4. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R.j har formlen III, og at X og X’ betegner 35 hydrogen, og B' betegner hydrogen eller methyl. DK 159454 B , 5. Forbindelse ifølge krav 4, kendeteg net ved, at Y betegner oxygen.
6. 6. Forbindelse ifølge krav 5, kendeteg- 6. net ved, at den er N -(3-chromanyl)adenosin, N - g 5 (trans-2-methyl-3-chromanyl)adenosin eller N-(cis-2- methyl-3-chromanyl)adenosin.
7. 7. Farmaceutisk præparat, kendetegnet ved, at det omfatter en terapeutisk effektiv mængde af en forbindelse ifølge krav 1 sammen med en farmaceutisk 10 acceptabel bærer.