DK157714B - Fremgangsmaade til bestemmelse af hepatitis a antigen, hepatitis a antigen/antistof-radionuclid og diagnostisk proeveudstyr - Google Patents

Fremgangsmaade til bestemmelse af hepatitis a antigen, hepatitis a antigen/antistof-radionuclid og diagnostisk proeveudstyr Download PDF

Info

Publication number
DK157714B
DK157714B DK164780A DK164780A DK157714B DK 157714 B DK157714 B DK 157714B DK 164780 A DK164780 A DK 164780A DK 164780 A DK164780 A DK 164780A DK 157714 B DK157714 B DK 157714B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
hepatitis
antigen
antibody
adsorbed
radionuclide
Prior art date
Application number
DK164780A
Other languages
English (en)
Other versions
DK157714C (da
DK164780A (da
Inventor
William J Mcaleer
William M Hurni
William J Miller
Original Assignee
Merck & Co Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merck & Co Inc filed Critical Merck & Co Inc
Publication of DK164780A publication Critical patent/DK164780A/da
Publication of DK157714B publication Critical patent/DK157714B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK157714C publication Critical patent/DK157714C/da

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/576Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis
    • G01N33/5768Hepatitis A
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/807Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
    • Y10S436/81Tube, bottle, or dipstick
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/82Hepatitis associated antigens and antibodies

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

DK 157714B
i
Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til bestemmelse af hepatitis A antigen, samt et hepatitis A antigen/antistof-radionuclid og et diagnostisk prøveudstyr til brug ved udøvelse af opfindelsen. Fremgangs-5 måden er en yderst følsom radioimmun prøve for hepatitis A antigen.
Det er f.eks. fra DE offentliggørelsesskrift 2 262 413 kendt at udføre en prøve eller bestemmelse, som kan involvere overtrækning af prøverør eller -brønde med, 10 i tilfælde af en antigenprøve, det tilsvarende antistof.
Denne teknik er dog ikke beskrevet i forbindelse med hepatitis A virus, men kun hepatitis B virus, som adskiller sig meget fra førstnævnte virus.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved 15 det i krav l's kendetegnende del anførte.
Radionuclidet er ejendommeligt ved det i krav 2's kendetegnende del anførte, og det diagnostiske prøveudstyr er ejendommeligt ved det i krav 4's kendetegnende del anførte.
20 Fremgangsmåden, radionuclidet og det diagnostiske prøveudstyr er velegnet til brug ved RIA for hepatitis A antigen i et medium, kvalitativt såvel som kvantitativt.
Prøven er yderst følsom.
Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen adsorberes en op-25 løsning af hepatitis A antistof med kendt titer på en overflade, der er i stand til at adsorbere antistoffet. Overfladen kan f.eks. være findelte glasperler eller et plastmateriale, såsom polyethylen, polypropylen, polystyren eller polyvinylchlorid.
30 Adsorptionsbetingelserne kan varieres med hensyn til tid, temperatur og koncentration af antistoffet. Typiske
DK 157714 B
2 adsorptionsbetingelser anvender kontakt af overfladen i mindst 2 timer, foretrukkent fra ca. 8 til ca. 36 timer, ved fra over ca. 0°C til ca. 60°C med en opløsning af hepatitis A antistof med kendt titer. Efter adsorptionen 5 af antistoffet overtrækkes overfladen med et materiale, der kan adsorberes af pladser på overfladen, som ikke er optaget af antistof. Et sådant materiale er fortrinsvis et proteinmateriale, såsom serumalbumin, foretrukkent okseserumalbumin eller human serumalbumin. Over-10 trækningen kan også ske med et vilkårligt ikke-protein- materiale, som er i stand til at associere sig med perleoverfladen. Denne overtrækning kan udføres under samme betingelser som dem, der kan anvendes til adsorbering af antistoffet.
15 Den overtrukne overflade inkuberes derpå i nærværelse af den prøve, der skal prøves for hepatitis A antigen, under betingelser, hvor der kan dannes et kompleks af hepatitis A antigen og hepatitis A antistof. Denne inkubering tager typisk fra ca. 4 timer til ca. 48 timer 20 eller mere ved temperaturer på over ca. 0°C til ca. 45°C.
Efter kompleksdannelsen inkuberes det med radioaktivt mærket renset hepatitis A antistof under betingelser, hvor det radiaoaktivt mærkede rensede hepatitis A antistof kan knyttes til hepatitis A antigen-delen i 25 hepatitis A antigen/hepatitis A antistof-komplekset.
Denne inkubering kræver typisk fra ca. 30 minutter til ca. 8 timer ved en temperatur på fra ca. 25°C til ca. 60°C. Restradionuclidet måles derpå i en passende tæller.
30 Det efterfølgende eksempel forklarer fremgangsmåden nærmere.
DK 157714 B
3 EKSEMPEL 1
En mængde (ca.100) polystyrenperler med en diameter på ca. 0,64 cm anbringes i et 50 ml bæger. Hepatitis A antistof-posivit serum fortyndet 1:100 i fysiologisk 5 saltvand indeholdende 0,1% natriumazid (bakteriocid) tilsættes i en mængde tilstrækkelig til at dække perlerne. Et plastark udstrækkes over toppen af bægeret, som derpå inkuberes ved 5°C i 24 timer. Den overliggende væske afdekanteres, og perlerne anbringes i et 250 ml 10 bæ:ger, hvortil der sættes 100 ml saltvand/azid-opløs-ning (0,9% NaCl og 0,1% natriumazid i sterilt destilleret vand). Blandingen vaskes ved opslæmning i ca. 1 minut, hvorpå væsken afdekanteres. Denne opslæmningsvask gentages endnu tre gange. Efter den sidste vask 15 overføres perlerne i et 50 ml bæger, og 1% okseserum- albumin opløst i saltvand/azid-opløsning tilsættes i tilstrækkelig mængde til at dække perlerne. Bægeret får lov at henstå ved 5°C i 24 timer. Væsken afdekanteres, og perlerne anbringes i et 250 ml bæger og opslæm-20 ningsvaskes med saltvand/azid-opløsning fire gange som tidligere beskrevet. Denne vask efterfølges af vask to gange med destilleret vand. Perlerne anbringes derpå på et ark filtrerpapir og lufttørres i 4 timer ved stuetemperatur. Perlerne anbringes dernæst i en tilproppet 25 flaske og opbevares ved 20°G, indtil de skal anvendes.
Under anvendelse af en 1,0 ml pipette anbringes 1,0 ml prøve, der skal afprøves for hepatitis A antigen, i et 5 cm rør, der har en inderdiameter på 0,8 cm. En overtrukket perle tilsættes derpå, og røret bankes let til 30 neddykning af perlen i prøven. Røret lukkes og inkuberes ved stuetemperatur natten over under kontinuerlig omdrejning af røret. Efter inkubering vaskes perlen med 2-5 ml portioner destilleret vand. Til den vaskede, fugtige perle i et 5 cm x 0,8 cm rør pipetteres 1,0 ml \
DK 157714 B
4
Ipc radioaktivt mærket ( yI) hepatitis A antistof. Røret bankes let til neddykning af perlen. Røret dækkes og inkuberes 4 timer ved 37°C. Efter inkubering vaskes perlen flere gange med 2-5 ml portioner destilleret vand.
5 Perlen overføres derpå i et tællerør, og radiaktiviteten tælles i en gammatæller.

Claims (4)

1. Fremgangsmåde til bestemmelse af hepatitis A antigen i en prøve, kendetegnet ved, at man bringer en overflade, hvortil der er adsorberet 5 hepatitis A antistof, i kontakt med et proteinmateriale, der kan adsorberes til overfladen, bringer overfladen, hvortil der er adsorberet hepatitis A antistof og et proteinmateriale, i kontakt med en prøve indeholdende hepatitis A antigen, 10. inkuberer overfladen under betingelser, der er effektive til dannelse af et kompleks af hepatitis A antigen og hepatitis A antistof, inkuberer overfladen i nærværelse af et overskud af radioaktivt mærket hepatitis A antistof, og 15. måler det. resulterende radionuclid på overfladen,
2. Hepatitis A antigen/antistof-radionuclid, kendetegnet ved, at det omfatter en overflade, til hvilken der er adhæreret hepatitis A antistof, og i det mindste en del af antistoffet er komplekst bundet til hepatitis A 20 antigen, og i det mindste en del af hepatitis A antigenet er komplekst bundet til et radioaktivt mærket materiale.
3. Radionuclid ifølge krav 2, kendetegnet ved, at det radioaktivt mærkede materiale er hepatitis A antistof mærket med et radioaktivt atom. 25
4. Diagnostisk prøveudstyr i form af en blanding til brug ved bestemmelse hepatitis A antigen, kendetegnet ved, at det omfatter hepatitis A antigen og en overflade, hvortil der er adsorberet hepatitis A antistof og et proteinmateriale.
DK164780A 1979-04-20 1980-04-18 Fremgangsmaade til bestemmelse af hepatitis a antigen, hepatitis a antigen/antistof-radionuclid og diagnostisk proeveudstyr DK157714C (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US3171279 1979-04-20
US06/031,712 US4293538A (en) 1979-04-20 1979-04-20 Assay for hepatitis A antigen

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK164780A DK164780A (da) 1980-10-21
DK157714B true DK157714B (da) 1990-02-05
DK157714C DK157714C (da) 1990-07-16

Family

ID=21861000

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK164780A DK157714C (da) 1979-04-20 1980-04-18 Fremgangsmaade til bestemmelse af hepatitis a antigen, hepatitis a antigen/antistof-radionuclid og diagnostisk proeveudstyr

Country Status (8)

Country Link
US (1) US4293538A (da)
EP (1) EP0019504B1 (da)
JP (1) JPS55144548A (da)
AT (1) ATE14244T1 (da)
CA (1) CA1147260A (da)
DE (1) DE3070851D1 (da)
DK (1) DK157714C (da)
IE (1) IE50217B1 (da)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4495295A (en) * 1979-05-21 1985-01-22 New York Blood Center, Inc. Immunoassays using support-containing separate antigens and antibodies derived from an immune complex
US4399229A (en) * 1980-04-14 1983-08-16 Immutron, Inc. Rapid radioimmunoassay product and method of making and using same
US4716123A (en) * 1981-01-14 1987-12-29 Covalent Technology Corporation Solid phase biological diagnostic assay via visual observation as enhanced by Mie scattering
DE3273658D1 (en) * 1981-11-19 1986-11-13 New York Blood Center Inc Diagnostic reagent and use thereof
US4459359A (en) * 1981-11-19 1984-07-10 New York Blood Center, Inc. Sensitive immunoassays of antigens or antibodies sequestered within immune complexes

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3867517A (en) * 1971-12-21 1975-02-18 Abbott Lab Direct radioimmunoassay for antigens and their antibodies
US3904367A (en) * 1973-08-15 1975-09-09 Gen Electric Contrast enhancement for immunological film detection
CA1039649A (en) * 1973-08-30 1978-10-03 General Electric Company Method of forming multilayer immunologically complexed films
US4169138A (en) * 1974-05-29 1979-09-25 Pharmacia Diagnostics Ab Method for the detection of antibodies
US3979509A (en) * 1974-09-03 1976-09-07 General Electric Company Opaque layer method for detecting biological particles
US4041146A (en) * 1975-05-01 1977-08-09 General Electric Company Method for detection of biological particles
US4034072A (en) * 1975-07-21 1977-07-05 Corning Glass Works Serum hepatitis test
US4024235A (en) * 1975-07-21 1977-05-17 Corning Glass Works Detection and quantitation of viral antibodies
US4113712A (en) * 1976-03-08 1978-09-12 The Green Cross Corporation HBsAG Particle composed of single polypeptide subunits and the preparation procedure
US4189464A (en) * 1978-05-05 1980-02-19 Institute For Cancer Research Hepatitis B testing reagent and method

Also Published As

Publication number Publication date
EP0019504B1 (en) 1985-07-10
ATE14244T1 (de) 1985-07-15
IE800786L (en) 1980-10-20
US4293538A (en) 1981-10-06
EP0019504A1 (en) 1980-11-26
JPS55144548A (en) 1980-11-11
IE50217B1 (en) 1986-03-05
CA1147260A (en) 1983-05-31
DK157714C (da) 1990-07-16
DK164780A (da) 1980-10-21
DE3070851D1 (en) 1985-08-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4778767A (en) Solid phase immunoassay using immunoreagents immobilized on inert synthetic resin surfaces
KR890001592B1 (ko) HTLV-III 단백질의 분리, AIDS와 pre-AIDS 증상환자 혈청중의 HTLV-III에 대한 항체의 혈청학적 검출 및 HTLV-III과 이것의 단백질을 사용하는 면역 분석에 의한 HTLV-III감염의 검사
JP4783727B2 (ja) プリオンタンパク質結合物質と使用法
JPS60501179A (ja) ヒトt細胞白血病ウイルスの検出方法及び検出用物品
CA2122126A1 (en) Solid support and assembly for quantitative and qualitative characterization of antigens
CN105137096B (zh) 一种用于血型抗体检测的试剂盒及其应用
Cleveland et al. Immobilization of viral antigens on filter paper for a [125I] staphylococcal protein A immunoassay: a rapid and sensitive technique for detection of herpes simplex virus antigens and antiviral antibodies
US4575484A (en) Binding assay for the detection of mycobacteria
DK157714B (da) Fremgangsmaade til bestemmelse af hepatitis a antigen, hepatitis a antigen/antistof-radionuclid og diagnostisk proeveudstyr
Pan et al. New method of antibody detection by indirect immunoperoxidase plaque staining for serodiagnosis of African swine fever
Finn et al. Enzyme-linked immunosorbent assay for immunoglobulin G and M antibodies to Chlamydia trachomatis in human sera
Ziola et al. Determination of human immunoglobulin M rheumatoid factor by a solid-phase radioimmunoassay which uses human immunoglobulin G in antigen-antibody complexes
Reesink et al. Evaluation of a new haemagglutination technique for the demonstration of hepatitis-B antigen
Smith et al. Radioimmunoassay techniques for detecting naturally occurring viral antibody in human sera
Stamm et al. A cellulose acetate membrane precipitin (CAP) test for amoebiasis
Afshar et al. Dot-enzyme immunoassay for visual detection of antibodies to pseudorabies virus in swine serum
CA1106281A (en) Detection of antigen associated with hepatitis by "sandwich" method
EP0371049B1 (en) Method for the diagnosis of infections with detection of lipopolysaccharide antigens
Muller et al. Demonstration of specific 19S (IgM) antibodies in untreated and treated syphilis. Comparative studies of the 19S (IgM)-FTA test, the 19S (IgM)-TPHA test, and the solid phase haemadsorption assay.
Reiser et al. [14] Immunologic detection of specific proteins in cell extracts by fractionation in gels and transfer to paper
CN215005422U (zh) 一种清除血清或血浆中异嗜性抗体的采血管
Kumakura et al. Preparation by irradiation of a solid support for enzyme immunoassay
Ishiyama et al. Detection of HBs antigen with latex particles coated with human antibody prepared by affinity chromatography on concanavalin A-sepharose
Hopkins et al. Latex agglutination test for detection of Australia antigen (HB-Ag) among blood donors and patients
Lehmann et al. An evaluation of the use of sensitized latex particles for the detection of the hepatitis-associated antigen

Legal Events

Date Code Title Description
PBP Patent lapsed
PBP Patent lapsed